KR20060097772A - 펜세린 및 그 유사체의 제조방법 - Google Patents

Abstract

가수분해에 의해 피소스티그민 화합물로부터 에세롤린 화합물을 형성한 다음, 이소시아네이트와 함께 응축시킴으로써, 아세틸콜린 에스터라아제 억제제로 알려져 있는 펜세린 화합물을 제조하는 방법.

Description

펜세린 및 그 유사체의 제조방법{A process for producing phenserine and its analog}

펜세린 및 펜세린 유사체는 알츠하미어병의 치료에 유용한 아세틸콜린에스터라아제 억제제 및 항염증제로서 알려져 있다. 미국특허 5,306,825 및 미국특허 5,734,062를 참조하면 알 수 있다.

펜세린은 피소스티그민 살리실레이트와 같은 피소스티그민 염을 에세롤린으로 전환시킨 다음, 염기 pH에서 염기 촉매의 존재 하에 유기 용매 중에서 페닐 이소시아네이트와 같은 이소시아네이트와 반응시킴으로써 제조되었다. 이 방법은 피소스티그민염으로부터 펜세린 또는 그 유사체를 생성시키는데 있어서 수많은 반응단계를 연루한다는 사실 때문에 많은 단점을 갖는다. 그러한 단점으로 인해 펜세린이 상대적으로 낮은 순도 및 낮은 수율로 생성된다.

이러한 반응의 제1단계에서는, 피소스티그민염을 피소스티그민 유리 염기로 전환시키고, 그런 다음 그 유리 염기를 유기 용매 중에서 염기로 처리함으로써 가수분해하여 에세롤린을 생성시킨다. 미국특허 5,498,726에 개시된 바와 같이, 이러한 방법에 의해 생성된 에세롤린 염기는 이후에 펜세린으로 전환될 수 있도록 반 응 혼합물로부터 그것을 분리하는 수많은 단계를 연루하는 광범위한 작업을 필요로 한다. 또 다른 방법에서는 에세롤린 염기는 미국특허 5,306,825에 개시된 것과 같이 피소스티그민을 알콜 중에서 금속 알콕시드와 함께 반응시킴으로써, 미국특허 4,978,673, 유럽특허 0298,202에 개시된 바와 같이 수용해성 유기용매 중에서 피소스티그민을 수산화나트륨 수용액 또는 수산화칼륨 수용액으로 가수분해시킴으로써, 또는 에세롤린 퓨마레이트를 경유하여(Heterocycles 1987, 26:5쪽 1271-1275) 제조되었다. 이러한 방법들에서는, 미국특허 4,978,673 및 미국특허 5,498,726에 개시되어 있는 바와 같이, 조 반응 혼합물을 무기산 또는 유기산으로 중성화하는 것이 필수적이다. 또한, 미국특허 5,306,825 및 미국특허 5,498,726에 개시된 바와 같이, 반응 혼합물에 진공을 적용하거나 반응을 불활성 기체 하에서 수행함으로써 용액 중에서의 에세롤린 염기의 산화를 방지하는 것이 필수적이다. 이러한 방법들은 에세롤린 염기를 반응 혼합물로부터 분리하는 것이 필요하며, 그러한 과정에서 공기를 배제시키기 위한 엄격한 주의를 기울이지 않는다면 현저한 분해가 일어날 수 있다. 그러므로, 에세롤린을 펜세린으로 전환시키기 위해 피소스티그민염을 에세롤린으로 전환시키기 위한 용이한 방법을 제공하는 것이 오랜 바람이었다.

이러한 반응의 다음 단계에서는, 에세롤린을 이소시아네이트와 반응시켜서 펜세린 또는 그 유도체를 생성시킨다. 이러한 반응은 일반적으로 알칼리 금속 히드록시드와 같은 알칼리성 물질의 미량의 존재 하에서 에틸 에테르, 디이소프로필 에테르, 벤젠, 톨루엔, 또는 석유 에테르와 같은 수용성 유기용매의 존재 중에서 수행한다. 미국특허 4,978,673, 미국특허 5,306,828, 및 미국특허 5,498,726을 참 조하면 알 수 있다. 그 이외의 미국특허 5,705,657 및 5,726,323과 같은 미국특허에서는 펜세린의 형성을 위해 금속 시아네이트 또는 바이사이클릭 아미딘 촉매와 함께 4급 포스포늄염 및 4급 암모늄염를 사용하는 것이 개시되어 있다. 이러한 방법은 특히 펜세린 또는 그 유도체의 유리 및 정제와 관련하여 어려움이 있어 결함이 많다.

따라서, 본 발명은 펜세린 및 그 유사체의 대량 생산을 매우 효율적이고 경제적으로 할 수 있는 펜세린 및 그 유사체의 제조방법을 제공한다.

또한, 본 발명의 목적은 피소스티그민을 에세롤린으로 전환시키기 위한 용이한 방법을 제공하는 것을 포함한다.

발명의 요약

본 발명에 따르면, 하기 화학식 Ⅲ의 펜세린 및 펜세린 유사체는 하기 화학식 I의 피소스티그민 화합물 또는 그 염으로부터 화학식 Ⅱ의 에세롤린 화합물을 경유하고, 화학식 Ⅲ의 펜세린 화합물이 고수율로 그리고 매우 정제된 형태로 생성시키도록 하는 반응 조건, 용매, 및 처리 조건을 특별히 선택하여 하기 화학식 Ⅱ의 화합물을 화학식 Ⅳ의 이소시아네이트와 함께 반응시킴으로써 제조된다:

[화학식 Ⅲ]

상기 화학식 Ⅲ에서, R은 독립적으로 저급알킬이고;

R¹은 저급 알킬, 페닐, 페닐 저급 알킬, 시클로알킬, 또는 시클로알킬 저급 알킬이다;

[화학식 I]

상기 화학식 I에서, R은 상기한 바와 같다;

[화학식 Ⅱ]

상기 화학식 Ⅱ에서, R은 상기한 바와 같다;

[화학식 Ⅳ]

R¹-N=C=O

상기 화학식 Ⅳ에서, R¹은 상기한 바와 같다.

이 방법은 수많은 처리단계를 이용할 필요 없이 수행된다. 그러므로, 이러한 방법을 이용하면 펜세린 및 그 유사체의 대량 생산을 매우 효율적이고 경제적인 방법으로 이상적으로 적절하게 할 수 있다.

본 발명의 상세한 설명

본 발명의 방법은 다음 반응 도해에 따라 수행된다:

Ⅲ

*상기에서, R은 독립적으로 저급 알킬이고, R¹은 저급 알킬, 페닐, 페닐 저급 알킬, 시클로알킬, 또는 시클로알킬 저급 알킬이다;

본 발명에 방법에 따르면, 화학식 I의 피소스티그민 화합물 또는 그 염을 수성 반응 매질에서 알칼리 금속 히드록시드로 가수분해 함으로써, 화학식 I의 피소스티그민 화합물 또는 그 염이 반응하여 화학식 Ⅱ의 에세롤린 화합물을 형성시킨다. 그런 다음, 화학식 Ⅱ의 에세롤린 화합물을 수성 반응 매질로부터 순수한 형태로 분리한다.

그런 다음, 정제된 에세롤린을 수용성 유기 용매를 함유하는 무수 반응 매질에서 강력한 유기 염기로 처리한다. 그런 다음, 그 처리된 에세롤린 화합물을 상기 반응 매질로부터 분리하지 않고 화학식 Ⅳ의 이소시아네이트와 함께 반응시킨다. 이 반응은 상기 화학식 Ⅳ의 이소시아네이트 화합물을 상기 반응 매질 중에 있는 상기 에세롤린 화합물과 혼합하여 상기 화학식 Ⅲ의 펜세린 화합물을 형성시킴으로써 수행된다. 그 후, 그 반응액을 물을 부가하여 급냉시켜 화학식 Ⅲ의 펜세린 화합물이 용이하게 순수한 형태로 분리되도록 한다. 이러한 부가에서, 물을 상기 반응 혼합물에 부가하거나, 상기 반응 혼합물을 물에 부가할 수 있다. 일반적으로, 반응 혼합물을 물에 부가하는 것이 바람직하다.

이 방법은 화학식 Ⅲ의 임의의 이성질체, 즉 (+) 또는 (-) 거울상 이성질체뿐만 아니라 그 라세미체를 제조하는데 이용될 수 있다. 출발물질로 사용되는 화학식 I의 특정 거울상 이성질체에 따라, 화학식 Ⅱ 및 화학식 Ⅲ의 화합물이 화학 식 I의 화합물의 4급 키랄 센터와 동일한 입체 배향을 갖도록 제조될 것이다. 또한, 화학식 I의 화합물을 라세미체로서 이용하면 화학식 Ⅱ 및 화학식 Ⅲ의 화합물이 라세미체로서 생성될 수 있다.

본 발명의 반응의 제 1 단계인 단계 (a)에서, 화학식 I의 피소스티그민 화합물 또는 그 염은 화학식 Ⅱ의 에세롤린 화합물로 전환된다. 이 반응은 알칼리 금속 히드록시드의 존재 하에서 수행되는 가수분해 반응이다. 피소스티그민은 현저한 변화(deterioration)를 겪는 화합물이므로, 산 부가염의 형태로 이용된다. 이전의 방법에 따르면, 화학식 I의 피소스티그민염을 화학식 Ⅱ의 에세롤린 화합물로 가수분해할 때, 피소스티그민염을 우선 유리 염기로 전환시킨 후 가수분해한다.

본 발명에 따르면, 화학식 I의 피소스티그민염을 유리 염기로 전환시킬 필요 없이 단일 단계에서 가수분해 시킨다. 이것은 수성 매질 중에서 알칼리 금속 히드록시드로 가수분해를 수행함으로써 이루어진다. 이러한 반응을 수행할 때, 임의의 알칼리 금속 히드록시드가 이용될 수 있다. 원한다면, 수성 용액은 화학식 I의 화합물을 함유하거나, 보다 바람직하게는 염 형태의 이러한 화합물을 함유할 수 있다. 원한다면, 이러한 수성 용액은 또한 수불용성 유기 용매를 함유할 수 있다. 이러한 가수분해 반응에서 불활성인 임의의 종래의 수불용성 유기용매를 이용할 수 있다. 바람직한 용매 중에는, 알킬 에테르, t-부틸메틸 에테르, 및 디이소프로필 에테르와 같은 저급 알킬 에테르가 포함된다. 이러한 반응을 수행할 때, 온도 및 압력은 중요하지 않다. 단계 (a)의 반응은 실온에서 수행할 수 있다. 그러나, 이러한 반응을 수행할 때에는 일반적으로 20℃ 내지 50℃의 온도가 이용된다. 단계 a)를 수행할 때, 수용성 유기용매가 가수분해에서 사용되지 않는다는 것이 중요하다. 이러한 방법으로, 가수분해 반응 및 화학식 Ⅱ의 화합물의 회수는 임의의 수용성 유기 용매의 부존재 하에서 수행된다. 이러한 방법에 의해, 화학식 I의 화합물을 화학식 I의 유리 염기로 전환시킬 필요 없이, 화학식 I의 산 부가염을 화학식 Ⅱ의 에세롤린 화합물로 직접적으로 전환시킨다. 또한, 화학식 Ⅱ의 에세롤린 화합물은 반응 매질로부터 순수한 형태로 용이하게 분리될 수 있다.

상기 단계 (a)의 반응동안 물의 존재 및 수용성 유기 용매의 부존재는 화학식 Ⅱ의 에세롤린 염기가 그것이 용해될 수 있는 수성 매질 중에서 형성되도록 한다. 이러한 방법으로, 화학식 Ⅱ의 에세롤린 화합물은 수성 매질로부터 간단하고 직접적인 방법으로 고수율로 순수한 형태로 용이하게 회수될 수 있다. 화학식 Ⅱ의 에세롤린 염기의 순도는 90% 이상일 수 있으며, 많은 경우에서 98-99.9%의 순도를 가질 수 있다.

회수는 바람직하게는 임의의 염기성 pH 수준에서 이루어질 수 있지만, 일반적으로 본 발명에 따르면 에세롤린 염기의 손실을 최소화하는 pH 8.0 내지 9.5의 pH 범위에서 수행된다. 상기 반응 단계 (a)는 더 높은 pH에서 수행된다. 일반적으로, pH는 12 내지 14이다. 이러한 방법에서, 화학식 Ⅱ의 에세롤린 화합물이 용이하게 회수될 수 있도록, 그 화합물을 수성 반응 매질에서 용해된다. 수성 매질 중에서 화학식 Ⅱ의 화합물이 형성된 후에, 화학식 Ⅱ의 화합물이 순수한 형태로 추출될 수 있는 pH 8.0 내지 9.5로 조정할 수 있다. 이러한 목적을 달성시키는데 임의의 종래의 추출방법을 이용할 수 있다. 상기에서 언급한 바와 같이, pH를 8.0 내지 9.5로 조정하면 화학식 Ⅱ의 에세롤린 화합물의 임의의 손실을 최소화한다.

pH를 8.0 내지 9.5로 조정할 때, 본 발명자는 무기산을 이용하는 것보다는 알칼리 금속 바이설파이트의 부가를 통해서 우수한 결과가 이루어진다는 것을 발견하였다. 본 발명에 따르면, 무기산은 화학식 Ⅱ의 화합물의 수율에 해로운 효과를 준다고 밝혀졌다. 이러한 해로운 효과는 pH를 알칼리 금속 바이설파이트에 의해 8.0 내지 9.5로 낮출 때 근절된다.

용어 "약제학적으로 허용 가능한 염"은 산 부가염을 말한다. 표현 "약제학적으로 허용 가능한 산 부가염"은 화학식 I 및 화학식 Ⅲ의 화합물의 무독성 유기 또는 무기 산 부가염에 적용되며, 화학식 I의 화합물의 임의의 약제학적으로 허용 가능한 염, 바람직하게는 살리실레이트 염이 출발 물질로서 사용될 수 있다. 적절한 염을 형성하는 예시적인 무기산으로는 염산, 브롬산, 황산, 및 인산, 소듐 모노하이드로겐 오르쏘포스페이트와 같은 산 금속염, 및 황산수소칼륨이 있다. 적절한 염을 형성하는 예시적인 유기산으로는 모노-, 디-, 및 트리카르복실산이 있다. 예시적인 그러한 산으로는 예를 들어, 아세트산, 글리콜산, 락트산, 피루브산, 말론산, 숙신산, 글루타르산, 푸마르산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 아스코르브산, 말레산, 히드록시말레산, 벤조산, 히드로시벤조산(hydrocybenzoic acid), 페닐아세트산, 신남산, 살리실산, 2-페녹시벤조산, 그리고 p-톨루엔술폰산, 메탄술폰산, 및 2-히드록시에탄술폰산과 같은 술폰산이 있다. 그러한 염은 수화된 형태로 또는 실질적으로 무수물 형태로 존재할 수 있다.

본 발명의 방법의 다음 단계(단계 (b))에서는, 화학식 Ⅱ의 에세롤린 화합물 을 화학식 Ⅳ의 이소시아네이트와 함께 반응시킴으로써 화학식 Ⅲ의 펜세린 화합물로 변환시킨다. 이 반응은 화학식 Ⅱ의 에세롤린 화합물이 형성된 반응 매질로부터 화학식 Ⅱ의 화합물을 유리한 후에, 먼저 화학식 Ⅱ의 화합물을 불활성 비양성자성 수용성 유기 용매를 함유하는 무수 반응 매질에서 강력한 유기 염기로 처리함으로써 이루어진다. 불활성 비양성자성 수용성 유기 용매 중에서 화학식 Ⅱ의 화합물을 유기 염기로 처리함으로써, 화학식 Ⅱ의 화합물을 탈수소화(deprotonation) 하여 그 화합물을 반응성 형태로 생성시킨다. 이러한 방법에서, 히드록시기의 수소는 화학식 Ⅱ의 화합물로부터 제거되며, 화학식 Ⅱ의 화합물은 화학식 Ⅳ의 이소시아네이트와 반응할 준비가 된다. 화학식 Ⅱ의 화합물의 반응성 형태의 형성은 불활성 비양성자성 수용성 유기 용매를 이용하는 무수 배지에서 촉매량의 유기 염기로 이루어진다. 저급 알킬 리튬, 즉 N-부틸 리튬과 같은 임의의 종래의 강력한 유기 염기가 이용될 수 있다. 디메톡시에탄, 테트라하이드로퓨란 등과 같은 임의의 수용성 비양성자성 유기 용매가 이용될 수 있다. 용매는 이소시아네이트 자체를 포함하는 화학식 Ⅳ의 이소시아네이트가 이용되는 반응 배지뿐만 아니라 탈수소화 반응 배지에 불활성이어야 한다는 것을 기억해야 한다.

탈수소화 반응이 일어난 후의 이러한 반응의 다음 단계에서, 화학식 Ⅱ의 탈수소화 화합물은 화학식 Ⅳ의 이소시아네이트와 함께 반응시켜 화학식 Ⅲ의 화합물을 형성시킨다. 화학식 Ⅱ의 탈수소화 화합물을 함유하는 반응 생성물을 화학식 Ⅳ의 이소시아네이트에 부가하거나 화학식 Ⅳ의 이소시아네이트를 이 반응 혼합물에 부가함으로써, 화학식 Ⅳ의 이소시아네이트를 탈수소화가 일어난 반응 혼합물과 함께 혼합한다.

화학식 Ⅳ의 이소시아네이트로 단계 (b)의 반응을 수행할 때, 탈수소화 반응에 이용된 동일한 반응 매질을 이용할 수 있다. 탈수소화 및 이후에 화학식 Ⅳ의 이소시아네이트와의 축합 반응을 수행할 때, 온도 및 압력은 중요하지 않으며, 이 반응은 실온 및 대기압에서 수행될 수 있다. 반면에, 15℃ 내지 30℃의 온도가 일반적으로 이용된다. 화학식 Ⅳ의 이소시아네이트와 혼합한 후, 반응 혼합물을 물을 부가하여 급냉시킬 수 있다. 물의 부가 시, 화학식 Ⅲ의 화합물이 그 결과 반응 매질로부터 침전되어 그 화합물을 분리하고 정제하기 용이해 진다. 이러한 방법에서, 반응 혼합물을 물에 가하거나 또는 반대로 할 수 있다. 이러한 방법에서, 유리 염기 형태의 화학식 Ⅲ의 펜세린 화합물은 물 또는 물로의 부가를 통해서 어떠한 증류 또는 건조 단계 없이 반응 매질로부터의 침전에 의해 고체로서 분리될 수 있다. 이러한 방법에서, 펜세린 염기가 생성되어, 높은 정도의 순도로 고수율로 회수될 수 있다.

투여를 위해 펜세린을 염으로서 제조하는 것이 바람직하다면, 화학식 Ⅲ의 펜세린 화합물은 상기 언급된 산과 같은 약제학적으로 허용 가능한 산과의 반응과 같은 임의의 적절한 수단에 의해 펜세린 산 부가염으로 전환될 수 있다. 화학식 I의 펜세린 화합물의 투여에 바람직한 염은 펜세린 타르타레이트 또는 숙시네이트이다.

용어 "저급 알킬"은 메틸, 에틸, 프로필, 부틸, 이소부틸 등과 같이 1 개 내지 6 개의 탄수원자를 갖는 모든 저급 알킬기를 포함한다. 용어 "저급 알콕시드" 는 메톡시드, 에톡시드, 이소프로폭시드, 및 부틸옥시드와 같은 저급 알킬기의 알콕시드를 포함한다. 용어 "시클로알킬"은 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로헥실과 같은 3 개 내지 7 개의 탄소원자를 갖는 시클로알킬기를 포함한다.

본 발명을 다음 실시예에 의해 더욱 설명할 것이며, 이는 본 발명을 설명하기 위한 것일 뿐 본 발명을 제한하고자 하는 것이 아니다.

[실시예]

실시예 1: 에세롤린 염기 합성

아르곤 기체 하에서, 50% 수산화나트륨 용액(67.7 g, 0.8462 몰)을 탈기체화된 DI 수(300 mL) 중의 피소스티그민 살리실레이트(100 g, 0.2418 몰)의 슬러리에 적가하였다. 적가하는 동안, 온도를 45 내지 55℃로 유지하였다. 45℃에서 약 3 시간 후에, 황색 용액을 25 내지 30℃로 냉각시키고, t-부틸 메틸 에테르(300 mL)를 부가하였다. 소듐 메타 바이설파이트의 수용액(54 g, Na₂S₂O₅, 250 mL 물)으로 수상의 pH를 9.1로 맞췄다. 그 혼합물을 30 분간 교반하고, 그 상들을 정치하여 분리시켰다. 수상을 t-부틸 메틸 에테르(각각 300 mL)로 30분씩 2 번 추출하였다. 유기상을 합하고 20 중량% 염화나트륨 용액(각각 200 mL)으로 3 회 세척한 다음, 밤새 황산마그네슘(150 g)으로 건조시켰다. 그 슬러리를 셀라이트를 통해서 여과하고, 여과 케이크를 t-부틸 메틸 에테르로 세척하였다. 여액을 진공에서 20 내지 29에서 300 mL로 농축시키고, 잔사를 디에톡시메탄(각각 300 mL)과 함께 두 번 공비증류(co-distill) 하였다. 잔사를 디에톡시메탄(300 mL)로 희석하고 50℃로 가 열하였다. 그리하여 획득된 묽은 슬러리를 5℃로 냉각하고, 45 분간 교반한 다음, 약 300 mL로 농축하였다. 차가운 헵탄(300 mL)을 적가하고, 그 슬러리를 20 분간 교반하고 차가운 헵탄(125 mL)을 부가하여 증가시켰다. 약 2 시간동안 교반한 후에, 슬러리를 Buchner 깔대기를 통해 여과하였다. 수집된 고체를 차가운 헵탄(200 mL)으로 세척한 다음, 밤새 진공에서 건조하였다. 에세롤린 염기(35.6 g)를 백색의 고체로서 획득하였다(수율: 67.4%, 순도: 98.3%).

실시예 2: 펜세린 염기 합성

에세롤린 염기(50 g, 0.229 몰)를 무수 디메톡시에탄에 아르곤 기체 하에서 용해하였다. 촉매량의 헥산(6.4 mL, 16 mmol) 중의 2.5 M n-부틸리튬을 1 분 내에 부가하고, 그 용액을 10 분간 교반하였다. 온도를 20 내지 23℃로 유지하면서 페닐 이소시아네이트(27.269 g, 0.2286 mmol)을 32 분동안 부가하였다. 그 반응 용액을 실온에서 2 시간 20 분동안 교반한 다음, 부가 깔대기로 옮겼다. 그 반응 용액을 DI 수(630 mL) 및 디메톡시에탄(42 mL)의 혼합물에 격렬히 교반하면서 49 분에 걸쳐 부가하였다. 그리하여 획득된 슬러리를 30 분동안 교반한 다음, Buchner 깔대기(Whatman #3 여과지)를 통해 여과하였다. 고체 잔사를 DI 수(각각 100 mL)로 4회 헵탄(100 mL)로 1 회 세척한 다음, 9 시간동안 45℃ 및 > 29 인치의 진공에서 건조하였다. 펜세린 염기(74.4 g)을 적색의 고체로서 수득하였다(수율: 96.2%, 순도: 95.1%).

실시예 3: 펜세린 타르타레이트 합성

아르곤 기체 하에서, 무수 에탄올(126 mL) 및 DI수(3.1 mL)의 혼합물 중의 펜세린 염기(35 g, 0.1037 몰)의 슬러리에 무수 에탄올(131 mL) 및 DI수(3.3 mL)의 혼합물 중의 타르타르산 용액(17.2 g, 0.114 mmol)을 32 분에 걸쳐 부가하였다. 타르타르산 용액의 약 60 내지 75%를 부가한 후에, 그 반응 용액을 펜세린 타르타레이트(72 mg)으로 접종하였다. 그 반응 혼합물을 19 시간 15 분동안 실온에서 교반한 다음, 이소프로판올(490 mL) 및 물(12 mL)의 혼합물을 30 분에 걸쳐 부가하였다. 그 슬러리를 3.5 시간동안 교반한 다음, Buchner 깔대기를 통해 여과하였다(Whatman #3 여과지). 백색의 잔사를 이소프로판올(100 mL)로 두 번 세척한 다음, 19 시간동안 45℃ 및 29 인치(in)에서 건조하여, 펜세린 타르타레이트(38.62 g)을 백색의 고체로서 수득하였다(수율: 76%, 순도: 99.4%).

상기한 바와 같이, 본 발명이 제공하는 펜세린 및 그 유사체의 제조방법은 펜세린 및 그 유사체의 대량 생산을 매우 효율적이고 경제적으로 할 수 있다.

Claims (24)

1. 수용성 용매가 존재하지 않는 수성 반응 매질에서 하기 화학식 I의 화합물을 pH 12 내지 14에서 알칼리 금속 히드록시드로 처리함으로써 화학식 I의 화합물 또는 그 염을 가수분해하여 하기 에세롤린 화합물을 형성시키는 단계를 포함하는 하기 화학식 Ⅱ의 에세롤린 화합물을 제조하는 방법:

   [화학식 Ⅱ]

   

   상기 화학식 Ⅱ에서, R은 독립적으로 C_{1 -6} 알킬이다;

   [화학식 I]

   

   상기 화학식 I에서, R은 독립적으로 C_{1 -6} 알킬이다.
2. 제 1 항에 있어서, 상기 반응 매질은 불활성 수불용성 유기 용매를 함유하는 것을 특징으로 하는 방법.
3. 제 2 항에 있어서, 상기 R은 메틸인 것을 특징으로 하는 방법.
4. 제 3 항에 있어서, 상기 화학식 I의 화합물은 염인 것을 특징으로 하는 방법.
5. 제 4 항에 있어서, 상기 염은 살리실레이트 염인 것을 특징으로 하는 방법.
6. 제 5 항에 있어서, 상기 알칼리 금속 히드록시드는 수산화나트륨인 것을 특징으로 하는 방법.
7. 제 2 항에 있어서, 상기 수불용성 용매는 C_{2 -6} 알킬에테르인 것을 특징으로 하는 방법.
8. a) pH 12 내지 14에서 하기 화학식 I의 피소스티그민 화합물 또는 그염을 수용성 용매가 존재하지 않는 수성 반응 매질에서 알칼리 금속 히드록시드로 가수분해하여 상기 수성 반응 매질에서 하기 에세롤린 화합물을 형성시키는 단계; 및

   b) 상기 반응 매질을 pH 8 내지 9.5로 조정하고, 에세롤린 화합물을 상기 조 정된 반응 매질로부터 추출하는 단계를 포함하는, 하기 화학식 Ⅱ의 정제된 에세롤린 화합물을 제조하는 방법:

   [화학식 Ⅱ]

   

   상기 화학식 Ⅱ에서, R은 독립적으로 C_{1 -6} 알킬이다;

   [화학식 I]

   

   상기 화학식 I에서 R은 독립적으로 C_{1 -6} 알킬이다.
9. 제 8 항에 있어서, 상기 조정은 알칼리 금속 바이설파이트의(bisulfite) 부가에 의해 수행되는 것을 특징으로 하는 방법.
10. 제 9 항에 있어서, 수성 매질은 불활성 수불용성 유기 용매를 함유하는 것을 특징으로 하는 방법.
11. 제 10 항에 있어서, 상기 유기 용매는 C_{2 -6} 알킬 에테르인 것을 특징으로 하는 방법.
12. 제 11 항에 있어서, 피소스티그민 화합물은 산 부가염인 것을 특징으로 하는 방법.
13. 제 12 항에 있어서, 상기 염은 살리실레이트 염인 것을 특징으로 하는 방법.
14. a) 불활성 비양성자성 수용성 유기 용매를 함유하는 무수 반응매질에서 정제된 화학식 Ⅱ의 에세롤린 화합물을 유기 강염기로 처리하는 단계; 및

    b) 하기 펜세린 화합물을 형성시키기 위해 하기 화학식 Ⅳ의 이소시아네이트를 상기 반응 매질과 혼합함으로써 상기 처리된 에세롤린 화합물을 하기 화학식 Ⅳ의 이소시아네이트와 반응시키는 단계를 포함하는 화학식 Ⅲ의 펜세린 화합물을 제조하는 방법:

    [화학식 Ⅲ]

    

    상기 화학식 Ⅲ에서,

    R은 독립적으로 C_{1 -6} 알킬이고;

    R¹은 C_{3 -7} 시클로알킬, 페닐, 페닐 C_{1 -6} 알킬, 또는 C_{3 -7} 시클로알킬 C_{1 -6} 알킬이다;

    [화학식 Ⅱ]

    

    상기 화학식 Ⅱ에서, R은 독립적으로 C_{1 -6} 알킬이다;

    [화학식 Ⅳ]

    R¹-N=C=O

    상기 화학식 Ⅳ에서, R¹은 C_{3 -7} 시클로알킬, 페닐, 페닐 C_{1 -6} 알킬, 또는 C_{3 -7} 시클로알킬 C_{1 -6} 알킬이다.
15. 제 14 항에 있어서, 상기 수용성 용매는 디메톡시에탄인 것을 특징으로 하는 방법.
16. 제 15 항에 있어서, 상기 유기 강염기는 부틸 리튬인 것을 특징으로 하는 방법.
17. 제 15 항에 있어서, R은 메틸이고, 상기 이소시아네이트는 페닐이소시아네이트인 것을 특징으로 하는 방법.
18. 제 14 항에 있어서, 펜세린 화합물의 형성 후에 상기 반응 매질에 물을 부가하여 반응 매질에서 형성된 펜세린 화합물을 침전시키는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
19. a) 하기 화학식 I의 피소스티그민 화합물 또는 그 염을 수용성 용매가 존재하지 않는 수성 반응 매질 중에서 알콕시드 금속 히드록시드로 pH 12 내지 14에서 가수분해하여, 상기 수성 반응 매질에서 하기 화학식 Ⅱ의 에세롤린 화합물을 형성시키는 단계;

    b) 상기 에세롤린 화합물을 함유하는 상기 반응 매질을 pH 8 내지 9.5로 조정하고 상기 조정된 수성 반응 매질로부터 상기 에세롤린 화합물을 순수한 형태로 추출하는 단계;

    c) 불활성의 비양성자성 수용성 유기 용매를 함유하는 무수 반응 매질에서 상기 정제된 에세롤린 화합물을 유기 강염기로 처리하는 단계;

    d) 하기 화학식 Ⅳ의 이소시아네이트를 상기 무수 반응 매질과 함께 혼합함 으로써 상기 처리된 에세롤린 화합물을 하기 화학식 Ⅳ의 이소시아네이트와 함께 반응시켜 펜세린 화합물을 형성시키는 단계를 포함하는 하기 화학식 Ⅲ의 펜세린 화합물 또는 그 염을 제조하는 방법:

    [화학식 Ⅲ]

    

    상기 화학식 Ⅲ에서, R은 독립적으로 C_{1 -6} 알킬이고;

    R¹은 C_{3 -7} 시클로알킬, 페닐, 페닐 C_{1 -6} 알킬, 또는 C_{3 -7} 시클로알킬 C_{1 -6} 알킬이다;

    [화학식 I]

    

    상기 화학식 I에서, R은 독립적으로 C_{1 -6} 알킬이다;

    [화학식 Ⅱ]

    

    상기 화학식 Ⅱ에서, R은 상기한 바와같다;

    [화학식 Ⅳ]

    R¹-N=C=O

    상기 화학식 Ⅳ에서, R¹은 C_{3 -7} 시클로알킬, 페닐, 페닐 C_{1 -6} 알킬, 또는 C_{3 -7} 시클로알킬 C_{1 -6} 알킬이다.
20. 제 19 항에 있어서, 상기 유기 강염기는 n-부틸 리튬인 것을 특징으로 하는 방법.
21. 제 19 항에 있어서, 상기 수용성 용매는 디메톡시에탄인 것을 특징으로 하는 방법.
22. 제 21 항에 있어서, R은 메틸이고 이소시아네이트는 페닐이소시아네이트인 것을 특징으로 하는 방법.
23. 제 19 항에 있어서, 상기 펜세린 화합물의 형성 후에 물을 상기 무수 반응 매질에 부가하여 상기 펜세린 화합물을 침전시키는 단계를 더 포함하는 것을 특징으로 하는 방법.
24. 제 19 항에 있어서, 상기 조정은 알칼리 금속 바이설파이트의 부가로 수행되는 것을 특징으로 하는 방법.