KR20060022369A - Health functional foods to improve skin wrinkles and suppress skin wrinkles - Google Patents
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Abstract
본 발명은 섭취시 피부의 주름 개선 및 주름 생성 억제 효과를 나타내는 건강기능식품에 관한 것으로서, 본 발명에 따른 피부 주름 개선 및 주름 생성 억제용 건강기능식품은 소나무 추출물, 아스콜빈산, 비타민 E 및 감마리놀레산이 혼합된 복합체를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 한다. 본 발명에 따라 소나무 추출물, 아스콜빈산, 비타민 E 및 감마리놀레산을 동시에 함유하는 건강기능식품 조성물은 섭취시 콜라겐 분해 효소의 활성을 억제하여 콜라겐의 분해를 방지하며 또한 콜라겐 생합성을 촉진함으로써 피부의 주름 개선 효과 및 주름 생성 억제 효과를 나타낼 뿐만 아니라, 인체에 별다른 부작용도 없어 안전하다. The present invention relates to a health functional food exhibiting an effect of improving skin wrinkles and suppressing wrinkle formation upon ingestion, wherein the health functional food for improving skin wrinkles and inhibiting wrinkle formation is pine extract, ascorbic acid, vitamin E and gamma. It is characterized by containing a complex mixed with linoleic acid as an active ingredient. According to the present invention, a health functional food composition containing pine extract, ascorbic acid, vitamin E, and gamma linoleic acid at the same time inhibits collagen degrading enzyme activity when ingested to prevent collagen degradation and also promotes collagen biosynthesis to wrinkle skin. In addition to improving effects and suppressing wrinkle formation, there are no side effects on the human body and are safe.
건강기능식품, 소나무추출물, 아스콜빈산, 비타민 E, 감마리놀레산Dietary supplement, pine extract, ascorbic acid, vitamin E, gamma linoleic acid
Description
본 발명은 섭취시 피부 주름 개선 효과를 나타내는 건강기능식품 조성물에 관한 것이다. The present invention relates to a health functional food composition exhibiting a skin wrinkle improvement effect upon ingestion.
인간의 피부는 나이가 들어감에 따라 여러 가지 내적, 외적 요인에 의해 변화를 겪는다. 즉, 내적(내인성 노화 또는 자연노화)으로는 신진 대사를 조절하는 각종 호르몬의 분비가 감소하고, 면역 세포의 기능과 세포들의 활성이 저하되어 생체에 필요한 면역 단백질 및 생체 단백질들의 생합성이 줄어들게 되며, 외적(광노화)으로는 오존층 파괴로 인하여 태양 광선에 자외선의 함량이 증가하게 되고 환경 오염이 더욱 심화됨에 따라 자유 라디칼 및 유해 활성 산소 등이 증가함으로써, 피부의 주름이 증가될 뿐 아니라 기미, 주근깨, 검버섯이 증가하는 등 여러 가지 변화를 일으키게 된다. Human skin is changed by a number of internal and external factors as it ages. In other words, intrinsic (endogenous aging or natural aging) secretion of various hormones that regulate metabolism is reduced, the function of immune cells and the activity of cells is reduced, thereby reducing the biosynthesis of immune proteins and biological proteins necessary for the living body, Externally (photoaging) increases the amount of ultraviolet rays in the sun's rays due to the destruction of the ozone layer and increases the free radicals and harmful free radicals as the environmental pollution is intensified. There are many changes, including an increase in blotch.
일반적으로 피부 주름은 피부의 수분 함유량, 콜라겐의 함유량, 외부 환경에 대한 면역 작용 능력 등 여러 가지 요소들에 의해 생성되는 것으로 알려져 있으며, 상기 중 피부 주름 형성에 가장 큰 영향을 미치는 것은 콜라겐이다.In general, skin wrinkles are known to be produced by various factors such as skin moisture content, collagen content, ability to act on the external environment, and collagen is one of the biggest influences on skin wrinkle formation.
콜라겐은 피부의 유연성을 주는 섬유 조직으로서 진피 조직의 약 70%를 차지하는 주요 구성 요소이다. 콜라겐 섬유의 폴리펩타이드 사슬은 섬유아세포의 과립형질세망 내에서 양 끝에 확장펩타이드(telopeptide)를 가지고 있는 상태로 합성된 뒤, 3중 나선 구조로 조합된 프로콜라겐 형태로 세포 밖으로 분비된다. 이렇게 분비된 프로콜라겐은 특정 효소에 의해 확장펩타이드가 절단되어 트로포콜라겐이 생성되고 이들은 세포외 기질에서 서로 조합되어 콜라겐 섬유로 합성된다. Collagen is a fibrous tissue that gives skin flexibility and is a major component of about 70% of dermal tissue. Polypeptide chains of collagen fibers are synthesized in the fibroblast granular reticulum with the extended peptides (telopeptide) at both ends, and then secreted out of the cells in the form of procollagen combined into a triple helix structure. The secreted procollagen is digested with an extended peptide by a specific enzyme to produce tropocollagen, which is combined with each other in the extracellular matrix and synthesized into collagen fibers.
이러한 콜라겐 섬유의 합성은 피부 노화가 진행되면서 급격히 감소하며, 또한 외부 환경에 의해 콜라겐 섬유가 변형되면서 피부에 주름이 많이 생성되고 깊어지게 된다. 이러한 콜라겐의 분해에는 콜라겐 분해효소인 콜라게나아제(collagenase)가 관여한다.Synthesis of the collagen fibers is rapidly reduced as the skin ages, and as the collagen fibers are deformed by the external environment, a lot of wrinkles are generated and deepened in the skin. The collagen is involved in collagenase, which is a collagenase.
최근 피부 주름 생성 원인 및 개선 방법에 대하여 피부 생리학적 연구가 많이 행하여지고 있으며, 이러한 해결 방안으로 화장료와 같은 외용적 방법에 의한 피부 주름 개선법이 제시되고 있으나 식이 섭취에 의한 피부 주름 개선 효과를 나타내는 물질에 대한 연구는 거의 진행되지 않았다. Recently, many skin physiological studies have been conducted on the cause and improvement methods of skin wrinkles. As a solution for this, skin wrinkle improvement methods have been proposed by external methods such as cosmetics, but the substances exhibiting skin wrinkle improvement effects by dietary intake. Very little research has been conducted on.
예컨대, 피부 주름 및 색소 침착 개선을 위해 널리 사용되고 있는 레티놀은 화장료 조성물로 상업화하여 피부 주름 개선에 사용되고 있고, 콜라겐 합성에 필수적인 아스콜빈산을 함유하는 화장료 조성물이 주름 개선, 자외선 차단 및 피부 색소 침착 등에 효과적이라는 보고(미국특허 제 4,938,969호, 미국특허 제 4,772,591호, 유럽특허 제 0533667호 등)가 있다.For example, retinol, which is widely used to improve skin wrinkles and pigmentation, is commercialized as a cosmetic composition and is used to improve skin wrinkles.A cosmetic composition containing ascorbic acid, which is essential for collagen synthesis, is used for wrinkle improvement, sun protection, and skin pigmentation. There are reports of effectiveness (US Pat. No. 4,938,969, US Pat. No. 4,772,591, European Patent No. 0533667, etc.).
그러나, 상기의 피부 주름 개선의 유효 성분들은 대부분 화장료 조성물과 같 은 피부 외용적 처방으로 사용되어왔으며, 또한 화장료 조성물로 사용하였을 때 그 안전성과 안정성에 많은 문제점이 있으며, 효과 역시 충분치 않다는 단점이 있다. However, the active ingredients of the skin wrinkle improvement have been used in most external skin prescriptions, such as cosmetic compositions, and when used as a cosmetic composition, there are many problems in the safety and stability, and the effect is also insufficient. .
따라서, 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 상기 문제점을 해결하여, 콜라겐 분해 효소(콜라게나아제)의 활성을 억제하여 콜라겐의 분해를 방지하며 또한 콜라겐 생합성을 촉진함으로써 피부 주름 개선 효과를 나타낼 뿐만 아니라, 섭취시 인체에 안전한 피부 주름 개선용 건강기능식품 조성물을 제공하는데 있다. Therefore, the technical problem to be achieved by the present invention is to solve the above problems, to inhibit the activity of collagen degrading enzyme (collagenase) to prevent the degradation of collagen and also to improve the skin wrinkles by promoting collagen biosynthesis, To provide a health functional food composition for improving skin wrinkles safe to the human body when ingested.
상기와 같은 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 피부 주름 개선용 건강기능식품 조성물은 소나무 추출물, 아스콜빈산, 비타민 E 및 감마리놀레산이 혼합된 복합체를 유효성분으로 함유한다. In order to achieve the above object, the skin functional food composition for improving wrinkles of the present invention contains a complex of pine extract, ascorbic acid, vitamin E and gamma linoleic acid as an active ingredient.
주름 개선 활성은 특유의 작용기전이 있는데, 그 작용기전에 다양한 성분이 적절하게 작용함으로 그 효과의 차이가 뚜렷하게 나타날 수 있다. 그러므로 적절한 주름 개선 성분의 조합을 통한 상호 작용으로 인하여 그 효과가 상승하거나 또는 길항효과가 나타날 수 있다. 본 발명의 소나무 추출물, 아스콜빈산, 비타민 E 및 감마리놀레산은 인체에 안전한 물질로서 4가지 성분을 동시에 섭취 하였을 때, 조합을 통한 상호 작용으로 피부 주름 개선에 대한 상승효과가 뛰어나 강력한 주름 개선 효과를 나타낸다. Wrinkle improvement activity has a unique mechanism of action, the effect of the various components of the action mechanism can be clearly seen the difference in effect. Therefore, the effect may be enhanced or antagonistic due to the interaction through the combination of appropriate wrinkle improvement ingredients. Pine extract, ascorbic acid, vitamin E and gamma-linoleic acid of the present invention, when ingested four ingredients as a safe substance to the human body at the same time, has a synergistic effect on skin wrinkle improvement by the interaction through a combination, has a strong wrinkle improvement effect Indicates.
소나무 추출물은 콜라게나아제의 활성을 억제하여 피부 구성 단백질인 콜라겐의 분해를 막아줌으로써 피부의 탄력 저하를 억제하며, 또한 강한 항산화력을 가 지고 있어 아스콜빈산과 비타민 E를 재생성시켜 주는 기능을 가지고 있다. 아스콜빈산과 비타민 E는 강한 항산화력을 가지고 있으며 광노화의 원인인 자유라디칼과 유해 활성 산소를 제거함으로써 피부 노화에 따른 주름 생성을 억제하여 준다. 감마리놀레산은 피부에서 대사작용을 거쳐 13-HODEE(13-Hydroxyoctadecadienoic acid)로 전환되어 ceramides 등을 구성하며, 피부의 과증식을 억제하고 피부 건조를 방지함으로써 피부의 보습을 유지하며 따라서 피부의 주름을 개선하여 준다. Pine extract inhibits the activity of collagenase, prevents the breakdown of collagen, a skin protein, and reduces the elasticity of the skin. Also, it has strong antioxidant power and has the function of regenerating ascorbic acid and vitamin E. . Ascorbic acid and vitamin E have strong anti-oxidant properties and inhibit free wrinkles due to skin aging by removing free radicals and harmful free radicals that cause photoaging. Gamma-linoleic acid metabolizes the skin and converts it into 13-HODEE (13-Hydroxyoctadecadienoic acid) to form ceramides, etc. Give it.
본 발명의 피부 주름 개선용 건강기능식품 조성물에 함유되는 복합체는 복합체 100중량부에 대하여, 소나무 추출물 1 내지 45 중량부, 아스콜빈산 18 내지 75 중량부, 비타민 E 4 내지 35 중량부 및 감마리놀레산 2 내지 45 중량부의 비율로 혼합된 것을 사용하는 것이 바람직하다. The complex contained in the functional composition for improving skin wrinkles of the present invention is 1 to 45 parts by weight of pine extract, 18 to 75 parts by weight of ascorbic acid, 4 to 35 parts by weight of vitamin E and gamma-linoleic acid based on 100 parts by weight of the complex It is preferable to use those mixed in the proportion of 2 to 45 parts by weight.
이하, 본 발명에 따른 피부 주름 개선용 건강기능식품 조성물에 대하여 상세히 설명한다. Hereinafter, the health functional food composition for improving skin wrinkles according to the present invention will be described in detail.
본 발명의 피부 주름 개선용 건강기능식품 조성물에 있어서, 유효성분으로 작용하는 소나무 추출물, 아스콜빈산, 비타민 E 및 감마리놀레산에 대하여 간략히 설명하면 아래와 같다. In the health functional food composition for improving skin wrinkles of the present invention, the pine extract, ascorbic acid, vitamin E and gamma linoleic acid which act as an active ingredient will be briefly described as follows.
소나무 추출물은 소나무속(Pinus)에 속하는 소나무로부터 추출한 것으로써, 다양한 소나무 추출물 중 특히 프랑스산 해송 추출물인 피크노제놀(Pycnogenol)에 관해서는 다양한 논문들이 발표되어 있다. 피크노제놀의 효과로는 순환계 혈관 관련 개선 효과(Fitzpatrick 등, 1998), 항산화 효과(Chida 등, 1999; Cossins 등, 1998; Devarj 등, 2002), 피부 흑화 억제 및 염증 억제 효과(Saliou 등, 2001; Ni 등, 2002), 콜라겐 단백질 분해 억제 효과(Grimm 등, 2002) 등에 대하여 발표되어 있다. 소나무 추출물은 식품 원재료 상의 주원료로서, 주성분은 프로안토시아니딘을 비롯한 탄닌과 플라보노이드이며, 고래로부터 사용되어 온, 인체에 무해한 성분이다. 소나무 추출물은 예를 들어, 물 및/또는 에탄올 등의 용매에 냉침 또는 가온하여 유효성분을 추출하고 여과한 다음, 그 여과액을 감압농축하여 얻을 수 있다. Pine extract is extracted from the pine belonging to the genus Pinus, and various papers have been published regarding Pycnogenol, a French pine algae extract. Pycnogenol's effects include circulatory vascular-related improvement (Fitzpatrick et al., 1998), antioxidant effects (Chida et al., 1999; Cossins et al., 1998; Devarj et al., 2002), skin blackening and inflammation inhibition (Saliou et al., 2001; Ni). Et al., 2002) and collagen proteolytic inhibitory effects (Grimm et al., 2002). Pine extract is the main raw material on the food raw materials, the main components are tannins and flavonoids, including proanthocyanidins, and are harmless to humans have been used from whales. Pine extract can be obtained by, for example, cooling or warming in a solvent such as water and / or ethanol to extract the active ingredient, filtering the filtrate, and then concentrating the filtrate under reduced pressure.
또한, 아스콜빈산과 비타민 E는 그 항산화 효과가 매우 뛰어난 비타민으로서 인체에 대한 유해성이 전혀 없는 성분이다. 아스콜빈산과 비타민 E는 미백 소재로써도 알려져 있으며, 특히 아스콜빈산 및 그 유도체 등을 이용한 주름 개선 및 노화 방지 화장료 조성물을 제공하는 대한민국 공개 특허(KR 2004-0040557)도 있다.In addition, ascorbic acid and vitamin E are vitamins with excellent antioxidant effects and are not harmful to the human body. Ascorbic acid and vitamin E are also known as whitening materials, and there is also a Korean Patent Publication (KR 2004-0040557) which provides anti-aging cosmetic composition and wrinkle improvement using ascorbic acid and its derivatives.
감마리놀레산은 현행 건강기능식품법 상에서 콜레스테롤 개선과 혈행을 촉진하는 기능성을 가진 불포화 지방산으로 정의되어 있으며, 달맞이종자유, 보라지유, 호박씨유, 우엉씨(우방자)유 등에 다량 함유되어 있는 성분이다. 감마리놀레산은 피부의 표피에서 13-HODE(13-Hydroxyoctadecadienoic acid)로 전환된 후 인지질에 병합되어 피부의 과증식을 억제하고 또한 피부 보습 기능을 가질 수 있다는 논문(조윤희, 피부장벽학회, 2003)이 발표되어 있다.Gamma-linoleic acid is defined as an unsaturated fatty acid with functional properties that promote cholesterol improvement and blood circulation in the current dietary supplement, and is contained in large amounts in evening primrose oil, borage oil, pumpkin seed oil, and burdock oil. Gamma-linoleic acid is converted to 13-HODE (13-Hydroxyoctadecadienoic acid) in the epidermis of the skin and then incorporated in phospholipids to inhibit skin hyperproliferation and also have a skin moisturizing function It is.
본 발명자들은 주로 화장료 등과 같이 피부에 직접 도포하는 외용제로서 사용되어 왔던 아스콜빈산과 항산화 효과가 뛰어난 것으로 알려진 소나무 추출물, 비타민 E 및 감마리놀레산을 혼합하여 식이섭취한 결과, 그 주름 개선 효과가 뛰어날 뿐만 아니라 상호간의 강력한 상승효과를 나타낸다는 사실을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.The present inventors mainly consumed ascolic acid, which has been used as an external preparation applied directly to the skin, such as cosmetics, and pine extract, vitamin E and gamma linoleic acid, which are known to be excellent in antioxidant effects, as a result of dietary intake, as well as excellent wrinkle improvement effect. The present invention has been completed by discovering that each other exhibits a strong synergistic effect.
즉, 주름 개선 성분의 주름 개선 활성은 특유의 작용기전이 있는데, 이러한 주름 개선 성분은 상호 혼합으로 인하여 그 효과가 상승하거나 또는 길항효과가 나타날 수 있다. 소나무 추출물, 아스콜빈산, 비타민 E 및 감마리놀레산은 인체에 안전한 물질로서 4가지 성분을 동시에 섭취 하였을 때 피부 주름 개선에 대한 상승효과가 뛰어나 강력한 주름 개선 효과를 나타낸다.In other words, the wrinkle improving activity of the wrinkle improving component has a unique mechanism of action, the effect of these wrinkle improving components due to mutual mixing or may exhibit an antagonistic effect. Pine extract, ascorbic acid, vitamin E and gamma-linoleic acid are safe substances for humans, and when they are ingested at the same time, they have a strong synergistic effect on skin wrinkle improvement.
본 발명의 식이섭취용 조성물에 있어서, 전술한 4가지 피부 주름 개선 성분은 소나무 추출물 1 내지 45 중량부, 아스콜빈산 18 내지 75 중량부, 비타민 E 4 내지 35 중량부 및 감마리놀레산 2 내지 45 중량부의 비율로 혼합되는 것이 바람직하다. 각 성분의 권장 최소 사용량 이하의 양을 사용할 경우에는 상호간의 상승 효과에 의한 주름 개선 효과를 기대하기 어려우며, 한편 각 성분의 권장 최대 사용량 이상의 양을 사용할 경우에는 사용 함량 증가와 정비례하여 주름 개선 효과가 증가하는 것이 아니며, 또한 원료의 가격이 너무 비싸지기 때문에 상업적으로 적합하지 않다. In the composition for dietary intake of the present invention, the four skin wrinkle improvement ingredients described above are 1 to 45 parts by weight of pine extract, 18 to 75 parts by weight of ascorbic acid, 4 to 35 parts by weight of vitamin E and 2 to 45 parts by weight of gamma linoleic acid. It is preferable to mix in negative ratio. If the amount below the recommended minimum amount of each ingredient is used, it is difficult to expect wrinkle improvement by synergistic effect.If the amount above the recommended maximum amount of each ingredient is used, wrinkle improvement effect is directly proportional to the increase in the content used. It is not increasing and is not commercially suitable because the price of the raw material is too expensive.
본 발명의 피부 주름 개선용 건강기능식품 조성물은 공지의 제조방법에 따라 정제, 과립, 분말, 캅셀, 음료수와 같은 액상의 용액, 환 등의 제형으로 제조할 수 있는데, 본 발명에 따라 4가지 성분으로 이루어진 복합체의 함량은 제형에 따라 건강기능식품 조성물 총 중량을 기준으로 0.2 내지 100중량%로 조절할 수 있다. 여기서 소나무 추출물은 건조중량을 기준으로 한다. Health functional food composition for improving skin wrinkles of the present invention can be prepared in the form of tablets, granules, powders, capsules, liquid solutions such as beverages, pills, etc. according to a known manufacturing method, four components according to the present invention The content of the complex consisting of may be adjusted to 0.2 to 100% by weight based on the total weight of the health functional food composition depending on the formulation. Here pine extract is based on dry weight.
조성물 제조의 일례로써, 소나무추출물, 아스콜빈산, 비타민 E 및 감마리놀레산의 주성분에, 부형제로 일반적으로 사용되는 대두유, 밀납(황납), 레시틴 등을 혼합한 후 젤라틴 기제의 피막에 그 혼합물을 주입함으로써 통상의 연질캅셀을 제조할 수 있다. 또한, 상기의 여러 제형을 조성물을 제조하기 위하여 각 성분들은 동일한 효능을 가지는 유도체로 대체하여 사용될 수 있다. 일례로 아스콜빈산은 L-아스콜빈산나트륨, L-아스콜빈산스테아레이트, 아스콜빈산칼륨, 아스콜빈산칼슘, 아스콜빈산팔미테이트 등으로 대체하여 사용될 수 있다. As an example of preparation of the composition, a mixture of pine extract, ascorbic acid, vitamin E and gamma linoleic acid is mixed with soybean oil, beeswax, lecithin and the like, which are commonly used as excipients, and then the mixture is injected into a gelatinous coating. By this, a normal soft capsule can be produced. In addition, in order to prepare the composition of the above various formulations, each component may be used in place of a derivative having the same efficacy. For example, ascorbic acid may be used in place of sodium L-ascorbate, L-ascorbate stearate, potassium ascorbate, calcium ascorbate, palmitate ascorbate, and the like.
이하, 본 발명을 구체적으로 설명하기 위해 실험예 및 실시예를 들어 상세하게 설명하기로 한다. 그러나, 본 발명에 따른 실시예들은 여러 가지 다른 형태로 변형될 수 있으며, 본 발명의 범위가 아래에서 상술하는 실시예들에 한정되는 것으로 해석되어서는 안 된다. 본 발명의 실시예들은 당업계에서 평균적인 지식을 가진 자에게 본 발명을 보다 완전하게 설명하기 위해서 제공되어지는 것이다. Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to experimental examples and examples. However, embodiments according to the present invention can be modified in many different forms, the scope of the present invention should not be construed as limited to the embodiments described below. Embodiments of the present invention are provided to more completely explain the present invention to those skilled in the art.
[실험예 1] 소나무 추출물의 항산화력 비교 Experimental Example 1 Comparison of Antioxidant Activity of Pine Extracts
각종 소나무 추출물의 항산화력을 비교하기 위하여 다양한 소나무 추출물 중에서 국산 소나무추출물, 중국산 소나무 추출물 및 프랑스산 해송 추출물(상표명 피크노제놀)을 구입하였다. In order to compare the antioxidant power of various pine extracts, Korean pine extract, Chinese pine extract and French seaweed extract (trade name Pycnogenol) were purchased among various pine extracts.
항산화력은 DPPH(1,1-Diphenyl-2-picryl-hydrazyl)을 이용한 방법을 통하여 라디칼 소거효과를 측정하였다. Antioxidant activity was measured by the method using DPPH (1,1-Diphenyl-2-picryl-hydrazyl) radical scavenging effect.
DPPH 4mg을 메탄올 100ml에 녹여 DPPH 용액을 만들었다. 추출물 시료를 에탄올에 희석하여 적당한 농도로 만들었다. 시료 또는 대조군 1ml와 DPPH 용액 1ml을 잘 섞은 후 37℃에서 30분 정치한 후 516nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준품으로는 BHT(Butylated Hydroxytoluene)을 사용하였으며, 대조군으로는 에탄올을 사용 하였다. 4 mg of DPPH was dissolved in 100 ml of methanol to make a DPPH solution. The extract sample was diluted in ethanol to an appropriate concentration. After mixing 1 ml of the sample or the control and 1 ml of the DPPH solution, the mixture was allowed to stand at 37 ° C. for 30 minutes and the absorbance was measured at 516 nm. BHT (Butylated Hydroxytoluene) was used as a standard, and ethanol was used as a control.
DPPH 법에 의한 항산화력은 다음과 같은 식으로 구하였다. The antioxidant power by DPPH method was calculated as follows.
항산화력(%) = 100 -(시료의 흡광도/대조군의 흡광도) X 100 Antioxidant power (%) = 100-(absorbance of sample / absorbance of control) X 100
상기와 같이 흡광도를 측정하여 결정되어진 항산화력 실험 결과를 아래 표 1에 나타내었다.The results of the antioxidant test determined by measuring the absorbance as described above are shown in Table 1 below.
표 1에 나타난 바와 같이, DPPH법에 의한 라디칼 소거력을 통한 항산화력을 비교한 결과, 각종 소나무 추출물 모두 상당한 항산화력을 나타냈다. 특히 프랑스산 해송추출물인 피크노제놀의 항산화력이 우수하였으므로, 이후 시험에서 피크노제놀을 소나무추출물로 사용하였다. As shown in Table 1, as a result of comparing the antioxidant power through the radical scavenging power by the DPPH method, all pine extracts showed a significant antioxidant power. In particular, since the antioxidant power of Pycnogenol, a French seaweed extract, was excellent, Pycnogenol was used as a pine extract in subsequent tests.
[시험예] [Test Example]
소나무 추출물(피크노제놀), 아스콜빈산, 비타민E 및 감마리놀레산을 아래의 표 2에 기재된 함량비(단위:중량%)에 따라 총량이 100mg이 되도록 혼합한 후, 콜라겐 분해 효소인 콜라게나아제의 활성 억제 효과를 실험하였다. 또한 의약품에서 콜 라게나아제 활성 억제 성분으로 사용되는 독시사이클린과 그 효능을 비교하였다. 소나무추출물로는 피크노제놀을 사용하였으며, 감마리놀레산으로는 달맞이종자유(59% 감마리놀레산 함유)를 함량 환산하여 사용하였다. Pine extract (Pinogenol), ascorbic acid, vitamin E and gamma linoleic acid were mixed in a total amount of 100 mg according to the content ratio (unit: weight percent) described in Table 2 below, and then the collagenase enzyme collagenase activity Inhibitory effect was tested. In addition, the efficacy was compared with doxycycline, which is used as an inhibitor of collagenase activity in medicines. Pycnogenol was used as a pine extract, and as a gamma linoleic acid, evening primrose oil (containing 59% gamma linoleic acid) was used.
[실험예 2] 섬유아세포 콜라제나제(MMP-1)에 대한 억제효과Experimental Example 2 Inhibitory Effect on Fibroblast Collagenase (MMP-1)
포유동물의 섬유아세포 콜라제나제(MMP-1)에 대한 억제효과를 아래와 같은 방법으로 측정하였다.The inhibitory effect on fibroblast collagenase (MMP-1) in mammals was measured by the following method.
17개의 1.5ml 에펜도르프(Eppendorf) 튜브에 2%의 적색 콜라젠 기질인 아조콜(Azocoll)용액 100㎕를 각각 첨가한 후 한 개의 에펜도르프 튜브는 블랭크(Blank)로 사용하고, 효소의 표준 활성도 곡선을 작성하기 위하여 3개의 튜브에는 칼바이오캠로부터 구입한 콜라게나아제 효소 표준 용액을 각각 10, 100, 200ppm되게 첨가하였다. 나머지 13개의 튜브 각각에는 콜라게나아제 효소 표준 용액 100㎕와 시험예 1 내지 12 및 독시사이클린을 0.005%의 농도가 되도록 하여 각각 10㎕ 처리하였다. 완충용액(0.05M Tris-HCl, 1nM CaCl2, pH 7.8)을 총반응액이 500㎕ 되도록 첨가하여 37℃ 항온기에서 18시간 동안 반응시킨 후 에펜도르프 튜브를 10,000g에서 5분 동안 원심 분리시켜 분해되지 않은 콜라젠은 침전시켰다. 분해된 콜라젠을 함유하는 상등액을 취하여 540nm에서 흡광도를 측정하여 표준활성도 곡선을 작성하고 표준곡선으로부터 효소의 활성 농도를 환산하여 시험예 1 내지 12 및 독시사이클린과 대조군의 효소활성도를 비교평가하였다. 100 μl of Azocoll solution, 2% red collagen substrate, was added to 17 1.5 ml Eppendorf tubes, and one Eppendorf tube was used as a blank, and the standard activity curve of the enzyme was used. Three tubes were added to 10, 100 and 200 ppm of collagenase enzyme standard solutions purchased from Calbiocam, respectively. Each of the remaining 13 tubes was treated with 10 μl of collagenase enzyme standard solution, Test Examples 1 to 12 and doxycycline at a concentration of 0.005%. Buffer solution (0.05M Tris-HCl, 1nM CaCl2, pH 7.8) was added to make 500µl of total reaction solution and reacted for 18 hours at 37 ℃ thermostat, and then the Eppendorf tube was centrifuged at 10,000g for 5 minutes. Collagen was precipitated. A supernatant solution containing digested collagen was taken to measure absorbance at 540 nm to prepare a standard activity curve, and the enzyme activities of Test Examples 1 to 12 and doxycycline and control were compared by evaluating the activity concentration of enzyme from the standard curve.
콜라게나아제 효소 억제율은 아래와 같은 식으로 구하였다.Collagenase enzyme inhibition rate was calculated as follows.
효소 억제율(%) = 100 - (실험군 효소 활성도 / 대조군 효소 활성도 X 100)Enzyme inhibition rate (%) = 100-(Experiment enzyme activity / control enzyme activity X 100)
결과는 표 3과 같다.The results are shown in Table 3.
상기 표 3의 결과를 통하여 보면, 소나무추출물(피크노제놀), 아스콜빈산, 비타민E 및 감마리놀레산을 단독 혹은 2 내지 3종을 혼합하여 사용한 경우보다 4종 모두를 사용하였을 때 콜라게나아제 효소에 대한 강한 억제율을 나타내는 것을 알 수 있었다. 즉, 각 성분을 모두 사용하였을 경우 상호간의 상승 효과를 통하여 뛰 어난 효소 활성 억제율을 보임을 알 수 있었다. 또한 의약품인 독시사이클린보다도 매우 높은 효소 억제율을 보였다.Through the results in Table 3, pine extracts (Pinogenol), ascolic acid, vitamin E and gamma-linoleic acid for the collagenase enzyme when all four types were used than when used alone or in combination of two or three It turned out that it shows a strong suppression rate. In other words, when all the components were used, the synergistic effect between the two showed an excellent rate of enzyme activity inhibition. In addition, it showed much higher enzyme inhibition rate than doxycycline.
[실험예 3] 콜라겐 생합성 효과 Experimental Example 3 Collagen Biosynthesis Effect
소나무 추출물(피크노제놀), 아스콜빈산, 비타민E 및 감마리놀레산을 상기의 표 2에 기재된 함량비(단위:중량%)에 따라 총량이 100mg이 되도록 혼합한 후, 인간 유래 섬유아세포의 배양액 내에서의 콜라겐 생합성 효과를 실험하였다.Pine extract (Pinogenol), ascorbic acid, vitamin E and gamma linoleic acid were mixed in a total amount of 100 mg according to the content ratio (unit: weight%) described in Table 2 above, and then in the culture medium of human-derived fibroblasts Collagen biosynthesis effects were tested.
인간유래의 섬유아세포를 세포배양용 24웰 플레이트에 분주하고 10% FBS조건하에서 24시간 배양한 후 PBS로 2회 세척하였다. 1% FBS를 함유하는 배지에 시험군 1내지 13을 각각 0.005%가 되도록 첨가하여 24시간 배양한 후 배양을 종료하였다. 배양 종료후 위의 세포 및 배양액을 각각 1/2씩 나누어 한쪽 분획에만 콜라게나제를 처리한 후 TCA(trichloroacetic acid)로 단백질을 침전시켜 두 분획의 방사활성의 차이로부터 콜라겐 생합성 촉진효과를 측정하였으며, 시험군을 첨가하지 않은 대조군을 100%로 하여 그 결과를 표 4에 나타내었다.Human-derived fibroblasts were dispensed into 24-well plates for cell culture, incubated for 24 hours under 10% FBS, and washed twice with PBS. The cultures were terminated after 24 hours of incubation by adding 0.001% of Test Groups 1 to 13 to a medium containing 1% FBS. After the incubation, the cells and the culture medium were divided into half and treated with collagenase in only one fraction, followed by precipitating the protein with trichloroacetic acid (TCA) to measure collagen biosynthesis promoting effect from the difference in radioactivity of the two fractions. , The control group was not added to the test group to 100% the results are shown in Table 4.
콜라겐생성율(%) = 시험군의 콜라겐 생성량 / 대조군의 콜라겐 생성량 X 100Collagen production rate (%) = Collagen production amount of test group / Collagen production amount of control group X 100
표 4의 결과에서 볼 수 있듯이, 소나무추출물(피크노제놀), 아스콜빈산, 비타민E 및 감마리놀레산을 단독 혹은 2 내지 3종을 혼합하여 사용한 경우보다 4종 모두를 사용하였을 때 콜라겐 생합성율이 급증하는 것을 알 수 있으며, 이는 각 성분의 상호간의 상승 효과에 의한 것임을 알 수 있다. As can be seen from the results in Table 4, the collagen biosynthesis rate increased rapidly when all four species were used compared to the pine extract (Pinogenol), ascorbic acid, vitamin E and gamma-linoleic acid alone or in combination of two to three species. It can be seen that this is due to the synergistic effect of each component.
[실험예 4] 주름 형성 억제 효과Experimental Example 4 Wrinkle Formation Inhibitory Effect
소나무추출물(피크노제놀), 아스콜빈산, 비타민 E 및 감마리놀레산의 혼합 시료의 주름 형성 억제 효과를 확인하기 위하여 헤어리스 마우스를 이용하여 주름 형성 억제 실험을 하였다.In order to confirm the anti-wrinkle effect of the mixed samples of pine extract (Pinogenol), ascorbic acid, vitamin E and gamma linoleic acid, hairless mice were tested for anti-wrinkle formation.
6주령의 헤어리스 마우스를 10마리씩 시험군과 대조군으로 나누어 헤어리스 마우스에 태양광 자극기를 이용하여 2MED로 1주일에 3일 10주간 조사하여 주름을 형성시켰다. 식이는 일반 헤어리스 마우스 사료를 자유롭게 섭취하게 하였으며, 대조군 시료 및 시험군 시료는 죤대를 이용하여 자외선 조사일부터10 주간 강제 투여하였으며, 자외선 조사 당일에는 자외선 조사 30분 전에 강제 투여하였다. 주름 형 성 억제 정도의 판단은 먼저 시료 처리 부위를 육안과 사진촬영을 통해 육안판정하였고 판정기준은 시험군 시료 처리군을 대조군 시료 처리군(0점)과 비교하여 억제없음(0점), 약간의 억제(1점), 중등도의 억제(2점), 상당한 억제(3점)의 4단계로 동물수를 판정하여 표5에 나타내었다. 시험군 시료는 실험예1내지 2의 결과 및 건강기능식품법에서 허용하는 원료의 일일 섭취량을 바탕으로 하여 소나무추출물(피크노제놀), 아스콜빈산, 비타민 E 및 감마리놀레산을 각각 60mg/kg, 600mg/kg, 70mg/kg 및 240mg/kg 으로 배합 조제하였다. 대조군으로는 물을 사용하였다.Ten hairless mice of 6 weeks old were divided into test groups and control groups, and hairless mice were irradiated with 2MED for 3 days and 10 days a week using a solar stimulator to form wrinkles. The diet was freely fed the normal hairless mouse feed, and the control sample and the test group sample were forcibly administered for 10 weeks from the day of ultraviolet irradiation using the zonal band, 30 minutes before the ultraviolet irradiation on the day of ultraviolet irradiation. Determination of the degree of wrinkle formation inhibition was visually determined by visual inspection and photographing of the sample treatment area, and the criterion was no inhibition (0 point), slightly compared to the control group (0 point). The number of animals was determined in four stages: suppression (1 point), moderate suppression (2 points), and significant suppression (3 points). The test sample was 60 mg / kg and 600 mg / kg of pine extract (Pinogenol), ascorbic acid, vitamin E and gamma linoleic acid, respectively, based on the results of Experiments 1 and 2 and the daily intake of raw materials allowed by the dietary supplement. , 70 mg / kg and 240 mg / kg. Water was used as a control.
표5의 결과에서 알 수 있듯이 소나무추출물(피크노제놀), 아스콜빈산, 비타민 E 및 감마리놀레산을 섭취한 시험군에 의한 헤어리스 마우스에서의 주름생성 억제는 80% 이상에서 중등도 이상의 주름 생성 억제 효과를 보여 주름생성 억제에 탁월한 효과를 가지고 있음이 확인되었다.As can be seen from the results in Table 5, the inhibition of wrinkle formation in hairless mice by the test group ingested pine extract (picinogenol), ascorbic acid, vitamin E and gamma linoleic acid showed an effect of inhibiting moderate to moderate wrinkle formation at 80% or more. It was confirmed that it has an excellent effect on suppressing wrinkle formation.
[실험예 5] 주름 개선 효과Experimental Example 5 Wrinkle Improvement Effect
소나무추출물(피크노제놀), 아스콜빈산, 비타민 E 및 감마리놀레산의 혼합 시료의 주름 개선 효과를 확인하기 위하여 헤어리스 마우스를 이용하여 주름 개선 효과 실험을 하였다.In order to confirm the wrinkle improvement effect of the mixed samples of pine extract (Pinogenol), ascorbic acid, vitamin E and gamma linoleic acid, hairless mice were tested for wrinkle improvement effect.
6주령의 헤어리스 마우스를 10마리씩 시험군과 대조군으로 나누어 헤어리스 마우스에 태양광 자극기를 이용하여 2MED로 1주일에 3일 10주간 조사하여 주름을 형성시켰다. 식이는 일반 헤어리스 마우스 사료를 자유롭게 섭취하게 하였으며, 대조군 시료 및 시험군 시료는 죤대를 이용하여 6 주간 강제 투여하였다. 주름 개선 정도의 판단은 먼저 시료 처리 부위를 육안과 사진촬영을 통해 육안판정하였고 판정기준은 시험군 처리군 및 대조군을 시료 처리전과 비교하여 개선없음(0점), 약간의 개선(1점), 중등도의 개선(2점), 상당한 개선(3점)의 4단계로 동물수를 판정하여 표6에 나타내었다. 시험군 시료는 실험예1내지 2의 결과 및 건강기능식품법에서 허용하는 원료의 일일 섭취량을 바탕으로 하여 소나무추출물(피크노제놀), 아스콜빈산, 비타민 E 및 감마리놀레산을 각각 60mg/kg, 600mg/kg, 70mg/kg 및 240mg/kg 으로 배합 조제하였다. 대조군으로는 물을 사용하였다.Ten hairless mice of 6 weeks old were divided into test groups and control groups, and hairless mice were irradiated with 2MED for 3 days and 10 days a week using a solar stimulator to form wrinkles. The diet was freely fed normal hairless mouse feed, and control and test samples were forced to use for 6 weeks using the zonal. Judgment of the degree of wrinkle improvement was visually determined by visual inspection and photographing of the sample treatment area, and the criterion was no improvement (0 point), slight improvement (1 point), compared to the test group treatment group and the control group before the sample treatment. The number of animals was determined in four stages of moderate improvement (2 points) and significant improvement (3 points), and is shown in Table 6. The test sample was 60 mg / kg and 600 mg / kg of pine extract (Pinogenol), ascorbic acid, vitamin E and gamma linoleic acid, respectively, based on the results of Experiments 1 and 2 and the daily intake of raw materials allowed by the dietary supplement. , 70 mg / kg and 240 mg / kg. Water was used as a control.
표6의 결과에서 알 수 있듯이 소나무추출물(피크노제놀), 아스콜빈산, 비타민 E 및 감마리놀레산을 섭취한 시험군은 헤어리스 마우스의 광에 의해 생성된 주름에 대해 80% 이상에서 중등도 이상의 주름 개선 효과를 보이고 있음이 확인되었다.As can be seen from the results of Table 6, the test group ingested pine extract (Pinogenol), ascorbic acid, vitamin E and gamma-linoleic acid had an effect of improving moderate to moderate wrinkles at 80% or more for the wrinkles generated by the light of hairless mice. It was confirmed that.
[제조예 1] [Production Example 1]
이상의 소나무추출물, 아스콜빈산, 비타민 E 및 감마리놀레산을 주성분으로 하여 아래의 표 7과 같은 함량으로 연질 캡슐을 제조하였다. 소나무추출물은 프랑스산 해송 추출물인 피크노제놀을 사용하였으며, 비타민 E는 D-α-토코페롤이 70중량% 함유된 비타민 E 오일을 사용하였으며, 감마리놀레산은 감마리놀레산이 59중량% 함유된 달맞이꽃 종자유를 사용하였다.The above-mentioned pine extract, ascorbic acid, vitamin E and gamma-linoleic acid as a main component to prepare a soft capsule in the content shown in Table 7 below. The pine extract used Pycnogenol, a French pine algae extract, used vitamin E oil containing 70% by weight of D-α-tocopherol, and gamma-linoleic acid was used as evening primrose oil containing 59% by weight of gamma-linoleic acid. .
부형제로는 대두유, 밀납(황납) 및 레시틴을 사용하였다. Soybean oil, beeswax and lecithin were used as excipients.
표 7에서와 같이 혼합 내용물을 혼합하여 교반기에서 잘 섞이도록 한 후 연질 캅셀 기제에 주입하여 연질 캅셀을 제조하였다.As shown in Table 7, the mixed contents were mixed and mixed in a stirrer, and then injected into the soft capsule base to prepare a soft capsule.
상기의 제조예는 본 피부 주름 개선 및 주름 생성 억제용 건강 기능식품을 제조하기 위한 통상의 제조예로써 본 발명의 제형을 한정하는 것은 아니다.The preparation example is not a limitation of the formulation of the present invention as a conventional preparation for producing a health functional food for improving the skin wrinkles and inhibiting wrinkle formation.
전술한 바와 같이, 본 발명에 따라 소나무 추출물, 아스콜빈산, 비타민 E 및 감마리놀레산을 혼합한 건강기능식품 조성물은 강력한 주름 개선 상승 효과를 나타내므로, 피부 주름 개선 및 주름 생성 억제 효과를 나타내는 기능성 식품에 유용하게 이용될 수 있다.
As described above, the health functional food composition of pine extract, ascorbic acid, vitamin E and gamma linoleic acid according to the present invention has a strong wrinkle improvement synergistic effect, functional food showing the skin wrinkle improvement and wrinkle production inhibitory effect It can be usefully used.
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