KR20020021851A

KR20020021851A - 사이클린 의존 키나아제의 저해제로서 유용한3-히드록시크로멘-4-온 유도체

Info

Publication number: KR20020021851A
Application number: KR1020000054577A
Authority: KR
Inventors: 홍창용; 이진호; 박태식; 김종현; 최세현; 윤숙경; 정신우; 김동명; 김은경
Original assignee: 성재갑; 주식회사 엘지씨아이
Priority date: 2000-09-18
Filing date: 2000-09-18
Publication date: 2002-03-23
Anticipated expiration: 2020-09-18
Also published as: KR100392468B1

Abstract

본 발명은 사이클린 의존 키나아제(CDK)의 저해제로 유용한 하기 화학식 1, 2 또는 3의 3-히드록시크로멘-4-온 유도체, 그의 약제학적으로 허용되는 염, 수화물, 용매화물 및 이성체에 관한 것이다. 본 발명은 또한 화학식 1, 2 또는 3의 화합물을 제조하는 방법 및 약제학적으로 허용되는 담체와 함께 화학식 1, 2 또는 3의 화합물을 활성성분으로 함유함을 특징으로 하는 암, 염증, 혈관 협착증 및 혈관생성 등 세포 증식에 관련된 질병의 억제제 및 치료제에 관한 것이다.

[화학식 1]

[화학식 2]

[화학식 3]

상기식에서,

R1은 수소, 알킬, 아미노 알킬 또는 히드록시 알킬 그룹이며,

R2는 수소, 메틸, 트리플루오로메틸 또는 할로겐이며,

R3는 알킬, 아미노 알킬 또는 히드록시 알킬 그룹을 나타내고,

X는 할로겐을 나타낸다.

Description

사이클린 의존 키나아제의 저해제로서 유용한 3-히드록시크로멘-4-온 유도체{3-Hydroxychromene-4-on derivatives useful as cyclin dependendent kinase inhibitors}

본 발명은 사이클린 의존 키나아제(cyclin dependent kinase, 이하 CDK 라 한다)의 저해제로서 유용한 하기 화학식 1, 2 또는 3의 신규한 3-히드록시크로멘-4-온 유도체, 약제학적으로 허용되는 그의 염, 수화물, 용매화물 및 이성체, 그 제조방법 및 그를 유효성분으로 함유하는 항증식(antiproliferative) 효과가 뛰어난 항암제 조성물에 관한 것이다.

[화학식 1]

[화학식 2]

[화학식 3]

상기식에서,

R1은 수소, 알킬, 아미노 알킬 또는 히드록시 알킬 그룹이며,

R2는 수소, 메틸, 트리플루오로메틸 또는 할로겐이며,

X는 할로겐을 나타낸다.

세포분열 과정의 분자 수준에서의 본격적인 연구는 1980년대 후반 개구리 난자의 분열에 관한 연구, 효모의 여러 세포 성장이나 방사성 돌연변이의 특성분석, 그리고 종양 억제자인 Rb의 연구를 통하여 활발해지기 시작하였다. 90년대에 들어 더욱 자세히 밝혀지기 시작한 세포분열 조절의 기작에 따르면, 작은 세포성장 조절인자가 세포성장 조절기능을 통하여 세포의 성장, 분화, 발생, 노화, 및 고사 (apoptosis)를 중심적으로 조절 한다는 것이 밝혀졌다. 이러한 연구 결과들은 이미 여러 질병의 병적 현상들을 좀더 정확히 이해하는 데 큰 도움을 주게 되었다. 그 대표적인 예가 암(cancer)이다. 정상세포가 암세포로 변형되는 과정에서 세포성장 조절작용이 그 기능을 상실할 때가 많이 발견되었다. 암세포들의 분석에 따르면, 세포성장 조절인자의 활성이 정상세포들의 경우와 다른 경우가 많으며 특히 암 병리학에서 가장 문제시 되는 암의 침입(invasion) 및 전이(metastasis)와 깊은 상관 관계를 보여 주는 경우도 있다. 형질전환 동물을 이용하여 세포성장을 조절하는 요소들의 과량발현 (overexpression) 또는 녹-아웃 (knock-out) 을 유도한 실험 결과는 이들 실험동물에 암이 유발되는 것은 세포주기의 조절해제 (cell cycle deregulation)가 암을 생성하는 직접적인 요인이 됨을 보여 주었다.

세포성장 과정은 여타 모든 생물학적인 조절과 마찬가지로 정(正)조절 (positive regulation) 과 부(負)조절 (negative regulation) 을 받고 있다. 현재까지의 연구에 의하면 세포 성장 주기가 사이클린 의존 키나아제의 활성에 의해 주로 조절되는 것으로 밝혀 졌고, 많은 암세포나 발암 기전이 키나제 활성에 대한 정 또는 부 조절의 문제와 연관되어 있는 경우가 많이 발견되었다. 즉 균형잡힌 조절이 이루어지지 못하거나 적시의 조절 (timely regulation) 이 이루어지지 못하는 경우 암이 발생될 수 있다.

포유류의 대표적인 사이클린 의존 키나아제로는 세포주기의 G1-S 기에서 활성을 나타내는 CDK4 (cyclin dependent kinase 4)와 CDK2, 그리고 G2-M 기에서 활성이 있는 CDC2 (CDK1)등 3 가지를 들 수 있다. 이중 CDK4 와 CDK2 는 G1-S 세포주기 체크포인트 (check point)에 의해서 그 활성이 조절되며 CDC2 는 G2-M 체크포인트에 의해서 조절되는 것으로 알려져 있다. 여러 암 세포들에서 CDK4 와 CDK2 및, CDC2 (CDK1) 의 조절 기작이 비정상성을 보여주고 있으며, 실제로 형질전환 동물을 이용한 실험에서 인위적으로 유도된 이들 효소의 비정상성이 암을 유발시키는 것으로 확인되었다. 따라서, 이들 대표적인 사이클린 의존 키나아제 CDK4, CDK2 및 CDC2 (CDK1)가 항암제 개발의 유망한 표적이 되고 있다. 또한 이들 키나아제가 염증, 혈관 협착증 및 혈관생성 등 세포 증식에 관련된 질병의 억제제 및 치료제의 개발에도 표적이 되고 있다.

이들 CDKs와 암발병과의 관련성에 대해 지금까지 보고된 결과를 좀더 자세히 설명하면 다음과 같다.

CDK4 활성의 비정상적 조절과 암 유발과의 연관성은 여러 암 조직에서 관찰되고있다. 여러 종류의 암에서 CDK4의 활성을 억제하는 단백질을 생성시키는 p16, p15 유전자의 결실 또는 CDK4의 활성에 필수인 사이클린 D1 의 과발현이 확인되고 있는데 이는 CDK4 활성이 조절되지 않는 경우 암세포의 악성 표현형 (malignant phenotype) 이 나타날 수 있음을 시사하고 있다. 또한 p16 녹아웃 마우스에서 p53 녹아웃 마우스 만큼이나 암 발생율이 높다는 결과는 p16에 의한 CDK4의 기능 조절 상실이 암의 원인임을 시사한다. 이러한 실험적 증거들은 CDK4 활성의 조절해제가 암을 유도하는 분명한 원인임을 입증한다고 여겨지고, 한걸음 더 나아가 암세포의 표현형을 유지하게 하는 역할을 하고 있을 가능성을 보여 준다고 하겠다. 따라서 CDK4 의 저해제는 항암효과를 보일 가능성이 매우 높다.

한편, CDK2의 경우에, 일부 유방암에서 CDK2의 활성에 필수인 사이클린 E 의과다발현이 관찰되었고 이는 유방암의 전이와 깊은 연관이 있음이 잘 알려져 있다. 사이클린 E의 과다발현이 낮은 혈청 조건에서 세포의 고사를 저해하며, 고착 비의존성 성장 (anchorage independent growth)을 유발 하는 것으로 발표 되었다. MMTV 프로모터를 이용한 CDK2 과량발현 형질전환 동물에서 유방 상피세포의 이상증식 (hyperproliferation) 및 종양(neoplasia)이 관찰되었다. 이러한 사실은 CDK2 활성이 세포변형 과정 또는 그의 유지에 관여함을 강하게 시사하며, CDK2 의 저해제가 항암제로의 작용할 수 있음을 나타낸다고 할 수 있다.

그 이외에도 CDC2 (CDK1), CDK3, CDK5, CDK6, CDK7 등도 세포분열의 각 단계에서 중요한 역할을 하는 것으로 차츰 밝혀지고 있으며, 같은 사이클린 의존 키나아제 (CDKs)의 페밀리로 구분되고 있다. 또, 사이클린의 경우도 위에서 언급했던 사이클린 D1 이나 사이클린 E 이외에 사이클린 A, B, C, D2, D3, D4, F, 및 G 가 같은 페밀리에 속한다.

이렇게 축적된 연구결과들을 바탕으로 이들 사이클린 의존 키나아제 (CDKs)들을 효과적으로 억제하는 저해제가 항암제로서 유용하리라는 인식하에 이들 저해제의 재발이 최근에 와서 이루어지기 시작했다.

지금까지 개발된 CDKs 저해제로서 효과적인 화합물로는 하기 화학식 A의 플라보피리돌(Flavopiridol; 유럽특허 제0,241,003호(1987) 및 제0,366,061호(1990) 참조)을 들 수 있다.

[화학식 A]

다음으로 화학식 B의 퓨린 구조를 갖는 CDKs 저해제가 국제특허공개 제 WO 97/20842호에 개시된 바 있다.

[화학식 B]

또한, 화학식 C의 4 아미노피리미딘 구조를 갖는 CDKs 저해제가 최근에 국제특허공개 제 WO 98/33798 호에 개시된 바 있다.

[화학식 C]

그러나, 지금까지 개발된 CDK 저해제들은 아직까지 충분히 만족스러운 효과를 나타내지 못하였으며, 이에 본 발명자들은 이들 CDKs 효소들의 저해제, 특히 플라본 계열 화합물에 대한 집중적인 연구를 수행한 결과, 새로운 구조를 갖는 상기화학식 1, 2 또는 3의 화합물이 상기한 CDKs 효소들을 효과적으로 저해함을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명의 목적은 상기 화학식 1, 2 또는 3의 3-히드록시크로멘-4-온 유도체, 이 유도체의 제조방법 및 이 유도체를 활성성분으로 함유하는 암, 염증, 혈관 협착증 및 혈관생성 등 세포증식에 관련된 질병의 억제제 및 치료제 조성물을 제공하는 것이다. 여기서 CDKs 란 CDK2, CDK4 및 CDC2(CDK1), CDK3, CDK5, CDK6, CDK7 등을 모두 포함하며, 사이클린도 사이클린 D1 과 사이클린 E 및 사이클린 A, B, C, D2, D3, D4, F, G 를 모두 포함한다.

이하, 본 발명을 상세히 설명하면 다음과 같다.

본 발명은 CDKs 활성을 억제함으로써 암, 염증, 혈관 협착증 및 혈관생성 등 세포 증식에 관련된 질병의 억제 및 치료 효과를 나타내는 하기 화학식 1, 2 또는 3의 신규한 3-히드록시크로멘-4-온 유도체, 약제학적으로 허용되는 그의 염, 수화물, 용매화물 및 이성체 및 그 제조방법에 관한 것이다:

[화학식 1]

[화학식 2]

[화학식 3]

상기식에서,

R1은 수소, 알킬, 아미노 알킬 또는 히드록시 알킬 그룹이며,

R2는 수소, 메틸, 트리플루오로메틸 또는 할로겐이며,

X는 할로겐을 나타낸다.

화학식 1, 2 또는 3 화합물의 치환기에 대한 상기 설명에서 용어 "알킬" 은 메틸, 에틸, 이소프로필, 이소부틸, t-부틸 등과 같은 탄소수 1 내지 6개의 직쇄 또는 측쇄 포화탄화수소 래디칼을 의미한다. 또한 "할로겐"는 불소, 염소, 브롬, 요오드를 의미한다.

본 발명에 따른 화학식 1, 2 또는 3의 화합물은 그 구조내에 비대칭 탄소 중심을 가질 수 있으므로, 개개의 에난티오머 또는 부분입체이성체로 존재할 수 있고, 라세미체를 포함한 이들의 혼합물로도 존재할 수 있다. 따라서, 이러한 이성체 또는 이들의 혼합물 역시 본 발명의 범위에 포함된다.

본 발명의 대표적인 화합물에는 하기 나타내는 바의 화합물들이 포함된다.

1. 2-(3-클로로-4-히드록시페닐)-3-히드록시-6-메틸-8-(1-메틸-4-피페리디닐)-4H-크로멘-4-온.

2. 2-(3-클로로-4-히드록시페닐)-3-히드록시-6-메틸-8-(4-피리디닐)-4H-크로멘-4-온.

3. 4-[2-(3-클로로-4-히드록시페닐)-3-히드록시-6-메틸-4-옥소-4H-크로멘-8-일]-1-메틸피리디늄 브로마이드.

4. 2-(4-히드록시페닐)-3-히드록시-6-메틸-8-(1-메틸-4-피페리디닐)-4H-크로멘-4-온.

5. 3-히드록시-2-(4-히드록시-3-메틸페닐)-6-메틸-8-(1-메틸-4- 피페리디닐)-4H-크로멘-4-온.

6. 3-히드록시-2-(4-히드록시-3-트리플루오로메틸페닐)-6-메틸-8-(1-메틸-4-피페리디닐)-4H-크로멘-4-온.

7. 2-(3-클로로-4-히드록시페닐)-3-히드록시-8-[1-(2-히드록시에틸)-4-피페리디닐]-6-메틸-4H-크로멘-4-온.

8. 8-[1-(2-아미노에틸)-4-피페리디닐]-2-(3-클로로-4-히드록시페닐)-3-히드록시-6-메틸-4H-크로멘-4-온.

본 발명에 따른 화학식 1, 2 또는 3의 화합물은 또한 약제학적으로 허용되는염을 형성할 수도 있다. 이러한 약제학적으로 허용되는 염에는 약제학적으로 허용되는 음이온을 함유하는 무독성 산부가염을 형성하는 산, 예를 들면 염산, 황산, 질산, 인산, 브롬화수소산, 요오드화수소산 등과 같은 무기산, 타타르산, 포름산, 시트르산, 아세트산, 트리클로로아세트산 또는 트리플루오로아세트산, 글루콘산, 벤조산, 락트산, 푸마르산, 말레인산 등과 같은 유기 카본산, 메탄설폰산, 벤젠설폰산, p-톨루엔설폰산 또는 나프탈렌설폰산 등과 같은 설폰산 등에 의해 형성된 산부가염이 포함된다.

본 발명에 따른 화학식 1, 2 또는 3의 화합물은 화학식 4의 페닐에탄온을 화학식 5의 벤즈알데히드와 반응시켜 화학식 6의 프로펜온을 얻고, 이 화합물을 폐환반응시켜 화학식 7의 크로멘온을 얻고, 이 화합물에서 히드록시기를 보호하여 화학식 8의 크로멘온을 얻고, 이 화합물과 4-브로모피리딘을 반응시켜 화학식 9의 크로멘온을 얻은 다음, 탈보호하여 화학식 2의 화합물을 얻거나, 또는 화학식 9의 크로멘온을 할로게노알칸과 반응시켜 화학식 10의 화합물을 얻고, 탈보호하여 화학식 3의 화합물을 얻거나, 또는 화학식 10의 화합물을 환원시키고, 탈보호하여 화학식 1의 화합물을 얻을 수 있다:

[화학식 4]

[화학식 5]]

[화학식 6]

[화학식 7]

[화학식 8]

[화학식 9]

[화학식 10]

[화학식 11]

상기식에서,

R1, R2, R3 및 X는 상기에 정의한 바와 같으며,

R', R", 및 R'"는 각각 히드록시 보호기이다.

상기 합성 방법을 일예를 들어서 구체적으로 제시하면 다음 반응식 1, 2 및 3과 같다.

[반응식 1]

[반응식 2]

[반응식 3]

상기식에서,

R1, R2, R3, X, R', R", R'"는 상기에 정의한 바와 같다.

반응식 1에서, 화학식 4의 화합물을 화학식 5의 벤즈알데히드 그리고 3당량의 소듐 히드록시드를 80% 에탄올 수용액을 용매로 실온에서 24시간 반응시켜 화학식 6의 화합물을 얻을 수 있다. 이 화합물을 메탄올 용매에서 3당량의 10% 소듐 히드록시드 수용액과 3당량의 과산화수소로 실온에서 20시간 반응시켜 화학식 7의 화합물을 얻을 수 있다. 이 화합물을 2당량의 요오도메탄과 칼륨카보네이트와 N,N-디메틸포름아미드를 용매로 하여 실온에서 30분간 반응시켜 화학식 8의 화합물을 얻을 수 있다. 화학식 8의 화합물과 1.5당량의 비스피나콜라토디보론과 3당량의 초산칼륨 그리고 5몰% 디클로로비스트리페닐포스핀 팔라듐을 N,N-디메틸포름아미드 용매로 질소 환경에서 80℃ 내지 90℃로 가열하며 2시간 반응시킨다. 상온으로 냉각후 2당량의 4-브로모피리딘 염산염과 5몰% 디클로로비스트리페닐포스핀 팔라듐, 그리고 2몰 소듐카보네이트 수용액 5당량을 넣고 15시간 반응시키면, 화학식 9의 화합물이 얻어진다. 이 화합물을 2당량의 요오도메탄과 함께 아세톤 또는 아세토니트릴에서 5시간 가열 환류하면 화학식 10의 화합물이 얻어진다. 화학식 10의 화합물을 50% 메탄올/디클로로메탄에 녹이고 5몰% 플라티늄 옥사이드를 넣고 상온, 1기압 수소압하에서 24시간 반응시켜 화학식 11의 화합물을 얻을 수 있다. 이 화합물을 건조된 디클로로메탄에 넣고 3당량의 보론트리브로마이드를 가하여 상온에서 1시간 반응시켜 화학식 1의 화합물을 얻는다. 그리고 반응식 2에서, 화학식 9의 화합물을 건조된 디클로로메탄에 넣고 3당량의 보론트리브로마이드를 가하여 상온에서 1시간 반응시켜 화학식 2의 화합물을 얻는다. 또 반응식 3에서, 화학식 10의 화합물을 건조된 디클로로메탄에 넣고 3당량의 보론트리브로마이드를 가하여 상온에서 1시간 반응시켜 화학식 3의 화합물을 얻는다.

상기 반응이 완결된 후에 생성물은 통상적인 후처리 방법, 예를 들면 크로마토그라피, 재결정화 등의 방법에 의해 분리 및 정제할 수 있다.

그러나, 본 발명에 따른 화합물의 제조방법이 상기에 설명하는 것으로만 한정되는 것은 아니며, 본 명세서에서 기재되거나 선행문헌에 게시된 여러 가지 합성방법을 임의로 조합함으로써 용이하게 제조할 수 있고, 이러한 조합은 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자에게 범용화 된 통상의 기술이다.

본 발명에 따른 화학식 1, 2 또는 3의 화합물은 CDKs에 대한 우수한 저해활성으로 인하여 암, 염증, 혈관 협착증 및 혈관생성 등 세포 증식에 관련된 질병의 억제 및 치료제로서 유용하게 사용될 수 있다. 따라서, 본 발명은 약제학적으로 허용되는 담체와 함께 화학식 1, 2 또는 3의 화합물, 그의 약제학적으로 허용되는 염, 수화물, 용매화물 또는 이성체를 유효성분으로 함유함을 특징으로 하는 암, 염증, 혈관 협착증 및 혈관생성 등 세포 증식에 관련된 질병의 억제 및 치료제 조성물을 제공하는 것을 또다른 목적으로 한다.

본 발명의 화합물을 임상적인 목적으로 투여시에 단일용량 또는 분리용량으로 숙주에게 투여될 총 일일용량은 체중 1kg 당 1 내지 50mg의 범위가 바람직하나, 특정 환자에 대한 특이 용량 수준은 사용될 특정 화합물, 체중, 성, 건강상태, 식이, 투여시간, 투여방법, 배설률, 약제혼합 및 질환의 중증도에 따라 변화될 수 있다.

본 발명의 화합물은 목적하는 바에 따라 주사용 제제 및 경구용 제제로 투여할 수 있다.

주사용 제제, 예를들면 멸균 주사용 수성 또는 유성 현탁액은 공지된 기술에 따라 적합한 분산제, 습윤제 또는 현탁제를 사용하여 제조할 수 있다. 이때, 사용될 수 있는 용매에는 물, 링거액 및 등장성 NaCl 용액이 있으며, 멸균 고정 오일은 통상적으로 용매 또는 현탁 매질로서 사용한다. 모노-, 디-글리세라이드를 포함하여 어떠한 무자극성 고정오일도 이러한 목적으로 사용될 수 있으며, 올레산과 같은 지방산은 주사용 제제에 사용할 수 있다.

경구투여용 고체투여 형태는 캅셀제, 정제, 환제, 산제 및 입제가 가능하고, 특히 캅셀제와 정제가 유용하다. 정제 및 환제는 장피제로 제조하는 것이 바람직하다. 고체투여 형태는 본 발명에 따른 화학식 1, 2 또는 3의 활성 화합물을 슈크로오즈, 락토오즈, 전분 등과 같은 하나 이상의 불활성 희석제, 마그네슘 스테아레이트와 같은 윤활제, 붕해제 및 결합제 중에서 선택된 담체와 혼합시킴으로써 제조한다.

본 발명의 화합물을 임상적으로 투여하여 목적하는 항암효과를 얻고자 하는 경우에, 화학식 1, 2 또는 3의 활성 화합물은 공지의 항암제 중에서 선택된 1종 이상의 성분과 동시에 투여할 수 있다. 이러한 방식으로 본 발명의 화합물과 혼합하여 투여될 수 있는 항암제로는 5-플루오로우라실, 시스플라틴, 독소루비신, 택솔, 젬시타빈(Gemcitabine) 등을 들 수 있다.

그러나, 항암효과를 목적으로하는 본 발명에 따른 화합물 함유 제제는 상술된 것으로 제한되는 것은 아니며, 암의 치료 및 예방에 유용한 제제라면 어떠한 것도 포함될 수 있다.

본 발명은 하기 실시예 및 실험예에 의해 더욱 구체적으로 설명되나 본 발명의 범위가 이들에 의해 어떤 식으로든 제한되는 것은 아니다.

[제조예 1] (E)-1-(3-브로모-2-히드록시-5-메틸페닐)-3-(3-클로로-4-메톡시페닐)-2-프로펜-1-온의 합성

1-(3-브로모-2-히드록시-5-메틸페닐)-1-에탄온 10g(43.7mmol)과 3-클로로-4-메톡시벤즈알데히드 9.0g(1.2몰당량)을 80% 에탄올 수용액 150ml에 넣고 소듐 히드록시드 (NaOH) 5.2g (3.0몰당량)을 넣고 상온에서 17시간 교반하였다. 반응이 완결된 다음 2N 염산 수용액으로 중화하고 물 150ml로 희석하였다. 이때 노란색의 고체가 석출되고 물과 메탄올로 씻어주어 정제된 목적 화합물을 14.2g (수율 85%) 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm) : 7.88(1H, d), 7.78(1H, s), 7.68(1H, s), 7.63(1H, s), 7.54(2H, m), 6.87(1H, d), 3.98(3H, s), 2.37(3H, s).

Mass (m/e) = 381 [M⁺+1]⁺

[제조예 2] 8-브로모-2-(3-클로로-4-메톡시페닐)-3-히드록시-6-메틸-4H-크로멘-4-온의 합성.

제조예 1에서 합성한 화합물 14.2g (37.2mmol)을 메탄올 200ml에 넣고, 2몰 소듐 히드록시드 수용액 55.8ml(3당량)와 34% 과산화수소수 12.6ml(3당량)를 가하였다. 3시간을 상온에서 교반후 2몰 염산으로 중화하고 물 200ml로 희석한 후 여과하였다. 얻어진 고체를 물과 메탄올로 씻어주어 정제된 목적화합물을 9.17g (수율65.7%) 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm) : 8.43(1H, s), 8.30(1H, d), 7.96(1H, s), 7.77(1H, s), 7.10(1H, d), 6.96(1H, br s), 3.99(3H, s), 2.46(3H, s).

Mass (m/e) = 395[M⁺+1]⁺

[제조예 3] 8-브로모-2-(3-클로로-4-메톡시페닐)-3-메톡시-6-메틸-4H- 크로멘-4-온의 합성

제조예 2에서 합성한 화합물 9.17g(24.4mmol)을 요오도메탄 5.2g(1.5당량)와 칼륨 카보네이트 4.4g (1.3몰당량)과 함께 100ml 아세톤에서 5시간 동안 가열 환류 하였다. 반응이 완결된 다음 상온으로 냉각후 여과하였다. 얻어진 고체를 물과 아세톤으로 씻어주어 정제된 목적화합물을 8.0g (수율79.8%) 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm) : 8.33(1H,s), 8.22(1H,d), 7.97(1H,s), 7.73(1H,s), 7.08(1H,d), 3.99 (3H,s), 3.92(3H,s), 2.45(3H,s).

Mass (m/e) = 409[M⁺+1]⁺

[제조예 4] 2-(3-클로로-4-메톡시페닐)-3-메톡시-6-메틸-8-(4-피리디닐)-4H-크로멘-4-온의 합성.

제조예 3에서 합성한 화합물 3.0g (7.32mmol)을, 1.5당량의 비스피나콜레이토디보론 2.8g, 5mol% 디클로로비스트리페닐포스핀팔라듐과 3당량의 칼륨아세테이트 2.15g을 디메틸포름아미드 20ml 용매에 녹이고, 질소가스하에서 80℃에서 2시간반응시켰다. 상온으로 냉각후, 4-브로모피리딘 염산염 2당량과 5mol% 디클로로비스트리페닐포스핀팔라듐 그리고 2M 소듐카보나이트 용액 5당량(18.3ml)을 넣고, 질소가스 속에서 80℃에서 15시간 교반하였다. 용액을 여과하고 디메틸포름아미드와 10% 메탄올/메틸렌클로라이드로 씻었다. 여과액을 농축하고 물 30ml로 처리한 후, 생성된 옅은 노란색 고체를 여과하였다. 여과된 고체를 물과 아세톤으로 씻고 건조하여 목적화합물 2.1g(수율 70%)을 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm) : 8.78(2H, d), 8.12(1H, s), 8.06(1H, s), 7.91(1H, d), 7.55(3H, m), 6.97 (1H, d), 3.96 (3H, s), 3.94(3H, s), 2.52(3H, s).

Mass (m/e) = 408 [M⁺+1]⁺

[제조예 5] 4-[2-(3-클로로-4-메톡시페닐)-3-메톡시-6-메틸-4-옥소-4H-크로멘-8-일]-1-메틸피리디늄요오드의 합성.

제조예 4에서 얻은 화합물 2.1g(51.5mmol)을 2당량의 요오도메탄과 함께 30ml 아세토니트릴 용매에서 3시간 환류하였다. 용액을 농축하고 메탄올로 처리한 후, 여과하였고 메탄올 용매로 씻어서 목적 화합물 2.44g(수율 86%)을 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm) : 9.15(2H, d), 8.57(2H, d), 8.13(1H, s),7.97(2H, m), 7.88(1H, d), 7.31(1H, d), 4.41(3H, s), 3.95(3H, s), 3.85(3H, s), 2.54(3H, s).

Mass (m/e) = 423[M⁺]

[제조예 6] 2-(3-클로로-4-메톡시페닐)-3-메톡시-6-메틸-8-(1-메틸-4-피페리디닐)-4H-크로멘-4-온의 합성.

제조예 5에서 얻은 화합물2.44g( 4.43mmol)을 1기압의 수소에서, 5mol% Pt2O, 50% 메탄올/디클로로메탄 용매 속에서 48시간 반응시겼다. 셀라이트 패드를 통해 여과한 후, 농축하여 요오드화산염 형태로 목적화합물 2.3g(수율 93%)을 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm) : 8.09(1H, d), 7.95(2H, s), 7.44(1H, s), 7.10(1H, d), 4.00(3H, s), 3.93(3H, s), 3.77(2H, m), 3.57(1H, m), 3.03(2H, m), 2.85(3H, s), 2.74(2H, m), 2.46(3H, s), 2.23(2H, m).

Mass (m/e) = 428[M⁺+1]⁺

[실시예 1] 2-(3-클로로-4-히드록시페닐)-3-히드록시-6-메틸-8-(1-메틸-4-피페리디닐)-4H-크로멘-4-온의 합성.

제조예 6에서 얻은 화합물 2.3g(4.13mmol)을 50ml 디클로로메탄에 녹이고, 5당량의 보론트리브로마이드를 넣고 실온에서 10시간 반응시켰다. 남아있는 보론트리브로마이드를 메탄올로 분해시킨 후, 감압농축하여 생성된 고체를 10% 메탄올/디클로로메탄로 씻어서 노란색의 목적화합물을 브롬산염 형태로 1.93g(수율 97%) 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm) : 9.60(1H, br s), 8.23(1H, s), 8.01(1H, d), 7.77(1H, s), 7.47(1H, s), 7.19(1H, d), 5.75(1H, s), 3.61-3.42(5H, m), 2.87(3H, s), 2.44(3H, s), 2.05(2H, m), 1.90(2H, m).

Mass (m/e) = 400[M⁺+1]⁺

[실시예 2] 2-(3-클로로-4-히드록시페닐)-3-히드록시-6-메틸-8-(4- 피리디닐)-4H-크로멘-4-온의 합성.

제조예 4에서 합성한 화합물 145mg(0.357mmol)을 실시예 1과 동일한 방법으로 실험하여 브롬산염 형태로 목적 화합물 156mg(수율 94.8%)을 얻었다.

¹H NMR (CD₃OD, ppm) : 10.90(1H, br s), 9.80(1H, br s), 8.99(2H, s), 8.20(2H, s), 8.07(1H, s), 8.02(1H, s), 7.84(2H, m), 7.09(1H, d), 2.49(3H, s).

Mass (m/e) = 380[M⁺+1]⁺

[실시예 3] 4-[2-(3-클로로-4-히드록시페닐)-3-히드록시-6-메틸-4-옥소-4H-크로멘-8-일]-1-메틸피리디늄브로마이드의 합성.

제조예 5에서 합성한 화합물 30mg(0.054mmol)을 실시예 1과 동일한 방법으로 실험하여 브롬산염 형태로 목적 화합물 15mg(수율 58%)을 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm) : 10.94(1H, s), 9.82(1H, s), 9.17(2H, d), 8.56(2H, d), 8.12(2H, d), 7.92(1H, s), 7.75(1H, d), 7.10(1H, d), 4.42(3H, s), 2.53(3H, s).

Mass (m/e) = 394[M⁺]

[제조예 7] 2-(4-메톡시페닐)-3-메톡시-6-메틸-8-(4-피리디닐)-4H-크로멘-4-온의 합성.

1-(3-브로모-2-히드록시-5-메틸페닐)-1-에탄온 500mg (2.18mmol)과 4-메톡시벤즈알데히드 0.36g(1.2몰당량)을 제조예 1, 제조예 2, 제조예 3, 제조예 4와 동일한 방법으로 반응시켜 목적 화합물을 417mg(총수율 51%)을 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm): 8.74(2H, d), 8.12(1H, s), 7.92(2H, d), 7.57(2H, d), 7.50(1H, s), 6.94(2H, d), 3.88(3H, s), 3.85(3H, s), 2.50(3H, s)

Mass (m/e) = 374[M⁺+1]⁺

[제조예 8] 2-(4-메톡시페닐)-3-메톡시-6-메틸-8-(1-메틸-4-피페리디닐)-4H-크로멘-4-온의 합성.

제조예 7에서 얻은 화합물100mg(0.268mmol)을 제조예 5와 제조예 6과 동일한 방법으로 반응시켜 요오드화산염 형태로 목적화합물 108mg(총수율 85%)을 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm) : 8.16(2H, d), 7.86(1H, s), 7.49(1H, s),6.97(2H, d), 3.90(3H, s), 3.89(3H, s), 3.60(3H, m), 2.91(5H, m), 2.52(3H, s), 2.22-2.20(4H, m).

Mass (m/e) = 394 [M⁺+1]⁺

[실시예 4] 2-(4-히드록시페닐)-3-히드록시-6-메틸-8-(1-메틸-4- 피페리디닐)-4H-크로멘-4-온의 합성.

제조예 8에서 얻은 화합물 50mg(0.095mmol)을 실시예 1과 동일한 방법으로 반응시켜 브롬산염 형태로 목적 화합물 35mg(수율 82%)을 얻었다.

¹H NMR (CD₃OD, ppm) : 8.16(2H, d), 7.86(1H, s), 7.49(1H, s), 6.97(2H, d), 3.67(3H, m), 3.35(2H, m), 2.91(3H, s), 2.47(3H, s), 2.26(2H, m), 2.07(2H, m).

Mass (m/e) = 366 [M⁺+1]⁺

[제조예 9] 2-(3-메틸-4-메톡시페닐)-3-메톡시-6-메틸-8-(4-피리디닐)-4H-크로멘-4-온의 합성.

1-(3-브로모-2-히드록시-5-메틸페닐)-1-에탄온 500mg(2.18mmol)과 3-메틸-4-메톡시벤즈알데히드 0.4g(1.2몰당량)을 제조예 1, 제조예 2, 제조예 3, 제조예 4와 동일한 방법으로 반응시켜 목적 화합물을 252mg(총수율 30%)을 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm) : 8.76(2H, d), 8.13(1H, s), 7.90(1H, d), 7.76(1H, s), 7.56(2H, d), 7.52(1H, s), 6.87(1H, d), 3.90(3H, s), 3.89(3H, s), 2.52(3H, s)

Mass (m/e) = 388[M⁺+1]⁺

[제조예 10] 2-(3-메틸-4-메톡시페닐)-3-메톡시-6-메틸-8-(1-메틸-4-피페리디닐)-4H-크로멘-4-온의 합성.

제조예 9에서 얻은 화합물252mg(0.65mmol)을 제조예 5와 제조예 6과 동일한 방법으로 반응시켜 요오드화산염 형태로 목적화합물 178mg(총수율 51%)을 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃+CD₃OD, ppm) : 7.90(1H, s), 7.86(1H, d), 7.77(1H, s), 7.40(1H, s), 6.96(1H, d), 3.89(3H, s), 3.80(3H, s), 3.64(2H, m), 3.50(1H, m), 2.91(2H, m), 2.76(3H, s), 2.42(3H, s), 2.26(3H, s), 2.22-2.20(4H, m).

Mass (m/e) = 408 [M⁺+1]⁺

[실시예 5] 3-히드록시-2-(4-히드록시-3-메틸페닐)-6-메틸-8-(1-메틸-4-피페리디닐)-4H-크로멘-4-온의 합성.

제조예 10에서 얻은 화합물 178g(0.332mmol)을 실시예 1과 동일한 방법으로 실험하여 브롬산염 형태로 목적 화합물 115mg(수율 75%)을 얻었다.

¹H NMR (CD₃OD, ppm) : 8.02(1H, s), 7.96(1H, d), 7.85(1H, s), 7.50(1H, s), 6.92(1H, d), 3.69(3H, m), 3.44(2H, m), 2.98(3H, s), 2.48(3H, s), 2.30(5H, m), 2.10(2H, m).

Mass (m/e) = 380[M⁺+1]⁺

[제조예 11] 2-(3-트리플루오로메틸-4-메톡시페닐)-3-메톡시-6-메틸-8-(4-피리디닐)-4H-크로멘-4-온의 합성.

¹H NMR (CDCl₃, ppm) : 8.75(2H, d), 8.20(2H, m), 8.10(1H, s), 7.50(4H, m), 7.05(1H, d), 3.95 (3H, s), 3.92(3H, s), 2.51(3H, s).

Mass (m/e) = 442[M⁺+1]⁺

[제조예 12] 2-(3-트리플루오로메틸-4-메톡시페닐)-3-메톡시-6-메틸-8-(1-메틸-4-피페리디닐)-4H-크로멘-4-온의 합성.

제조예 11에서 얻은 화합물100mg(0.226mmol)을 제조예 5와 제조예 6과 동일한 방법으로 반응시켜 요오드화산염 형태로 목적화합물 100mg(총수율 75%)을 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm) : 8.64(1H, s), 8.25(1H, s), 7.81(1H, s), 7.45(1H, s), 7.22(1H, d), 4.00(3H, s), 3.96(3H, s), 3.65-3.30(5H, m), 2.89(3H, s), 2.46(3H, s), 2.21(2H, m), 1.94(2H, m).

Mass (m/e) = 462[M⁺+1]⁺

[실시예 6] 3-히드록시-2-(4-히드록시-3-트리플루오로메틸페닐)-6-메틸-8-(1-메틸-4-피페리디닐)-4H-크로멘-4-온의 합성.

제조예 12에서 얻은 화합물 100mg(0.169mmol)을 실시예 1과 동일한 방법으로 실험하여 브롬산염 형태로 목적 화합물 69mg(수율 79%)을 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm) : 9.60(1H, br s), 9.39(1H, s), 8.66(1H, s), 8.30(1H, d), 7.79(1H, s), 7.46(1H, s), 6.84(1H, d), 4.39(1H, m), 3.65-3.33(4H, m), 2.92(3H, s), 2.43(3H, s), 2.32(2H, m), 2.14(2H, m).

Mass (m/e) = 434[M⁺+1]⁺

[제조예 13] 4-[2-(3-클로로-4-메톡시페닐)-3-메톡시-6-메틸-4-옥소-4H-크로멘-8-일]-1-(2-메톡시에틸)피리디늄브로마이드의 합성.

제조예 4에서 얻은 화합물 50mg(0.122mmol)을 2당량의 2-브로모에틸메틸에테르와 함께 5ml 아세토니트릴 용매에서 3시간 환류하였다. 용액을 농축하고 메탄올로 처리한 후, 여과하였고 메탄올 용매로 씻어서 목적 화합물 52mg(수율 78%)을 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm) : 9.15(2H, d), 8.57(2H, d), 8.13(1H, s), 7.97(2H, m), 7.88(1H, d), 7.31(1H, d), 4.41(3H, s), 3.95(6H, d), 3.85(3H, s), 3.80(2H, t), 2.54(3H, s).

Mass (m/e) = 466[M⁺]ms=545

[제조예 14] 2-(3-클로로-4-메톡시페닐)-3-메톡시-8-[1-(2-메톡시에틸)-4-피페리디닐]-6-메틸-4H-크로멘-4-온의 합성.

제조예 13에서 얻은 화합물45mg( 0.082mmol)을 제조예 6과 동일한 방법으로 반응시켜 브롬화산염 형태로 목적화합물 30mg(수율 66%)을 얻었다.

¹H NMR (CDCl₃, ppm) : 8.09(1H, d), 7.95(2H, s), 7.44(1H, s), 7.10(1H, d), 4.00(3H, s), 3.93(6H, d), 3.80(2H, t), 3.77(4H, m), 3.57(1H, m), 3.03(2H, m), 2.85(3H, s), 2.74(2H, m), 2.46(3H, s), 2.23(2H, m).

Mass (m/e) = 472[M⁺+1]⁺

[실시예 7] 2-(3-클로로-4-히드록시페닐)-3-히드록시-8-[1-(2-히드록시-에틸)-4-피페리디닐]- 6-메틸-4H-크로멘-4-온의 합성.

제조예 14에서 얻은 화합물 25mg(0.045mmol)을 실시예 1과 동일한 방법으로 반응시켜 브롬산염 형태로 15mg(수율 65%) 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm) : 9.60(1H, br s), 8.23(1H, s), 8.01(1H, d), 7.77(1H, s), 7.47(1H, s), 7.19(1H, d), 5.75(1H, s), 3.61-3.42(7H, m), 2.87(2H, m), 2.44(3H, s), 2.05(2H, m), 1.90(2H, m).

Mass (m/e) = 430[M⁺+1]⁺

[제조예 15] 4-[2-(3-클로로-4-메톡시페닐)-3-메톡시-6-메틸-4-옥소-4H-크로멘-8-일]-1-[2-(1,3-디옥소-1,3-디하이드로-2H-이소인돌-2-일)에틸]피리디늄브로마이드의 합성.

제조예 4에서 얻은 화합물 50mg(0.122mmol)을 2당량의 N-(2-브로모에틸)프탈이미드와 함께 제조예 13과 동일한 방법으로 반응시켜 목적 화합물 60mg(수율 74%)을 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm) : 9.15(2H, d), 8.57(2H, d), 8.13(1H, s), 7.97(2H, m), 7.88(1H, d), 7.55-7.40(4H, m), 7.31(1H, d), 4.41(2H, m), 3.95(3H, s), 3.85(3H, s), 2.54(3H, s), 2.23(2H, t).

Mass (m/e) = 581[M+]ms=660

[제조예 16] 2-(2-{4-[2-(3-클로로-4-메톡시페닐)-3-메톡시-6-메틸-4-옥소-4H-크로멘-8-일]-1-피페리디닐}에틸)-1H-이소인돌-1,3(2H)-디온의 합성.

제조예 15에서 얻은 화합물50mg( 0.075mmol)을 제조예 6과 동일한 방법으로 반응시켜 브롬화산염 형태로 목적화합물 45mg(수율 89%)을 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm) : 8.09(1H, d), 7.95(2H, s), 7.58-7.47(4H, m), 7.44(1H, s), 7.10(1H, d), 4.00(3H, s), 3.93(3H, s), 3.77(2H, m), 3.57(1H, m), 3.03(2H, m), 2.85(2H, s), 2.74(2H, m), 2.46(3H, s), 2.23(4H, m).

Mass (m/e) = 587[M⁺+1]⁺

[제조예 17] 2-(2-{4-[2-(3-클로로-4-히드록시페닐)-3-히드록시-6-메틸-4-옥소-4H-크로멘-8-일]-1-피페리디닐}에틸)-1H-이소인돌-1,3(2H)-디온의 합성.

제조예 16에서 얻은 화합물 40mg(0.060mmol) 실시예 1과 동일한 방법으로 반응시켜 브롬산염 형태로 25mg(수율 65%) 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm) : 9.60(1H, br s), 8.23(1H, s), 8.01(1H, d), 7.77(1H, s), 7.62-7.49(4H, m), 7.47(1H, s), 7.19(1H, d), 5.75(1H, s), 3.61-3.42(5H, m), 2.87(2H, t), 2.44(3H, s), 2.23(2H, t), 2.05(2H, m), 1.90(2H, m).

Mass (m/e) = 559[M⁺+1]⁺

[실시예 8] 8-[1-(2-아미노에틸)-4-피페리디닐]-2-(3-클로로-4-히드록시페닐)-3-히드록시-6-메틸-4H-크로멘-4-온의 합성.

제조예 17에서 얻은 화합물 25mg(0.040mmol)을 5ml 에탄올에 넣고 3당량의 하이드라진을 넣고 60℃에서 1 시간 가열하였다. 상온으로 냉각후 소듐카보네이트 수용액을 넣고 생성된 고체를 여과하여 목적 화합물 12mg(수율 70%) 얻었다.

¹H NMR (DMSO-d₆, ppm) : 9.60(1H, br s), 8.23(1H, s), 8.01(1H, d), 7.77(1H, s), 7.47(1H, s), 7.19(1H, d), 5.75(1H, s), 3.61-3.42(5H, m), 2.87(2H, t),2.55(2H, t), 2.44(3H, s), 2.05(2H, m), 1.90(2H, m).

Mass (m/e) = 429[M⁺+1]⁺

실험예 1) CDK2 와 CDK4 의 억제활성

CDK2,4의 효소활성 억제효과의 분석은 Kitagawa 및 Carson (Kitagawa, M. et al.; Oncogene, 9: 2549, 1994; Carlson, B. A. et al.; Cancer Research 56:2473, 1996) 의 방법에 따라 수행되었다. 활성화된 CDK2 효소는 히스티딘으로 표지된 인체 CDK2 단백질과 사이클린(Cyclin) A 단백질의 결합체로 발현 정제하여 사용하였고, His-CDK2 유전자를 발현하는 배큐로바이러스(baculovirus)와 사이클린 A유전자를 발현하는 배큐로바이러스를 동시에 감염시킨 곤충세포로부터 정제된, 단위 활성 14 nmole/min/mg, ATP 에대한 Km 이 22 uM 의 활성효소를 사용하였다. 활성화된 CDK4 효소는 GST(Glutathion-S-transferase) 와 연결한 인체 CDK4 단백질과 CyclinD1 단백질의 결합체로 곤충 세포에서 발현 정제하였으며, 단위활성 57 nmole/min/mg, ATP 에 대한 Km 이 940 uM 의 활성 효소를 사용하였다. 두효소의 기질은 인체 Rb 단백질의 기질 특이성이 있는 C 말단 부위 단백질을 정제 사용하였고, 농도별로 희석한 화합물, 적당량의 CDK2/cyclinA 또는 CDK4/cyclinD1와 기질 단백질 존재하에 비포화 농도의 [gamma-32P labeled] ATP를 넣고 반응한 후 기질을 분리하여 기질에 포함된 방사성활성을 측정하였다.

이상 설명한 방법에 따라 CDK2 와 CDK4 에 대해 측정된 본 발명에 따른 저해제의 각 효소활성 저해능력을 IC50 값으로 나타내었다. 그 결과는 하기 표 1에 나타난 바와 같다.

[표 1]

CDK2와 CDK4의 억제활성

표 1 계속)

실험예 2) 급성독성 시험

실시예 1 및 3 으로부터 얻은 화합물의 급성 경구 독성을 조사하기 위해 화합물을 각기 다른 여러 농도로 함유하는 용액을 ICR 계통의 수컷 생쥐에게 1kg 당 10 ml의 투여량으로 경구 투여 하였다. 경구 투여후 치사율 및 7 일 동안의 증상을 관측하고 리츠필드-윌콕손 (Litchfield-Wilcoxon) 방법에 따라 중등 치사량치 (LD50, mg/kg) 를 계산하고 그 결과를 표 2 에 나타 내었다.

[표 2]

시험 화합물	LD50 (mg/kg)
실시예 1	>3,000
실시예 3	>3,000

Claims

다음 화학식 1, 2 또는 3의 화합물, 약제학적으로 허용되는 그의 염, 수화물, 용매화물 또는 이성체:

[화학식 1]

[화학식 2]

[화학식 3]

상기식에서,

R1은 수소, 알킬, 아미노 알킬 또는 히드록시 알킬그룹이며,

R2는 수소, 메틸, 트리플루오로메틸 또는 할로겐이며,

R3는 알킬, 아미노 알킬 또는 히드록시 알킬 그룹을 나타내고,

X는 할로겐을 나타낸다.
제 1 항에 있어서,

1. 2-(3-클로로-4-히드록시페닐)-3-히드록시-6-메틸-8-(1-메틸-4-피페리디닐)-4H-크로멘-4-온,

2. 2-(3-클로로-4-히드록시페닐)-3-히드록시-6-메틸-8-(4-피리디닐)-4H-크로멘-4-온,

3. 4-[2-(3-클로로-4-히드록시페닐)-3-히드록시-6-메틸-4-옥소-4H-크로멘-8-일]-1-메틸피리디늄 브로마이드,

4. 2-(4-히드록시페닐)-3-히드록시-6-메틸-8-(1-메틸-4-피페리디닐)-4H-크로멘-4-온,

5. 3-히드록시-2-(4-히드록시-3-메틸페닐)-6-메틸-8-(1-메틸-4- 피페리디닐)-4H-크로멘-4-온,

6. 3-히드록시-2-(4-히드록시-3-트리플루오로메틸페닐)-6-메틸-8-(1-메틸-4-피페리디닐)-4H-크로멘-4-온,

7. 2-(3-클로로-4-히드록시페닐)-3-히드록시-8-[1-(2-히드록시에틸)-4-피페리디닐]-6-메틸-4H-크로멘-4-온, 및

8. 8-[1-(2-아미노에틸)-4-피페리디닐]-2-(3-클로로-4-히드록시페닐)-3-히드록시-6-메틸-4H-크로멘-4-온로 구성된 그룹 중에서 선택되는 화합물.
약제학적으로 허용되는 담체와 함께 활성성분으로 제 1 항에 정의된 화학식 1, 2 또는 3의 화합물, 약제학적으로 허용되는 그의 염, 수화물, 용매화물 또는 이성체를 함유하는 항암제 조성물.
화학식 4의 페닐에탄온을 화학식 5의 벤즈알데히드와 반응시켜 화학식 6의 프로펜온을 얻고, 이 화합물을 폐환반응시켜 화학식 7의 크로멘온을 얻고, 이 화합물에서 히드록시기를 보호하여 화학식 8의 크로멘온을 얻고, 이 화합물과 4-브로모피리딘을 반응시켜 화학식 9의 크로멘온을 얻은 다음, 탈보호하여 화학식 2의 화합물을 얻거나, 또는 화학식 9의 크로멘온을 할로게노알칸과 반응시켜 화학식 10의 화합물을 얻고, 탈보호하여 화학식 3의 화합물을 얻거나, 또는 화학식 10의 화합물을 환원시키고, 탈보호하여 화학식 1의 화합물을 얻는 것을 특징으로 하여, 제 1 항에 따른 화학식 1, 2 또는 3의 화합물을 제조하는 방법:

[화학식 4]

[화학식 5]]

[화학식 6]

[화학식 7]

[화학식 8]

[화학식 9]

[화학식 10]

[화학식 11]

상기식에서,

R1, R2, R3 및 X는 제 1 항에서 정의한 바와 같으며,

R', R", R'"는 각각 히드록시 보호기이다.