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KR20010012606A - 리보뉴클레오티드 환원효소 저해제 3-에이피 및3-에이엠피의 프로드럭제형 - Google Patents

리보뉴클레오티드 환원효소 저해제 3-에이피 및3-에이엠피의 프로드럭제형 Download PDF

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KR20010012606A
KR20010012606A KR1019997010565A KR19997010565A KR20010012606A KR 20010012606 A KR20010012606 A KR 20010012606A KR 1019997010565 A KR1019997010565 A KR 1019997010565A KR 19997010565 A KR19997010565 A KR 19997010565A KR 20010012606 A KR20010012606 A KR 20010012606A
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KR
South Korea
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benzyl
compound
ortho
mmol
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Application number
KR1019997010565A
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Inventor
리준
니우천-셍
리지우얀
도일테렌스더블유
쳰슈-히
Original Assignee
비온 퍼마슈티컬즈 인코포레이티드
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Publication date
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Abstract

본 발명은 수용성, 생체이용률, 및 대사 불활성화에 대한 내성을 향상시키는 3--아미노피리딘-2-카르복스알데히드 티오세미카르바존(3-AP), 및 이들의 3--아미노-4-메틸피리딘-2-카르복스알데히드 티오세미카르바존(3-AMP)의 프로드럭 제형에 관한 것이다. 본 발명의 신규의 화합물은 하기 식(1)의 화합물이다.
(I)
상기 식에서, R4는 H 또는 CH3이고; R5는 CHR, 벤질, 또는 오르쏘 또는 파라 치환된 벤질; R은 H, CH3, CH2CH3, CH2CH2CH3, 또는 이소프로필; R'은 자유산, 인산염, 또는 -S-S-R", R"는 CH2CH2NHR6, CH2CH2OH, CH2COOR7, 오르쏘 또는 파라 치환된 C1-C3알킬페닐, 또는오르쏘 또는 파라 치환된 니트로페닐; R6는 H, C1-C4아실 그룹, 트리플루오로아세틸, 벤조일 또는 치환된 벤조일 그룹이고, R7은 C1-C4알킬, 페닐, 치환된 페닐, 또는 벤질 또는 치환된 벤질이다.

Description

리보뉴클레오티드 환원효소 저해제 3-에이피 및 3-에이엠피의 프로드럭 제형{Prodrug forms of ribonucleotide reductase inhibitors 3-AP and 3-AMP}
암은 현대인의 주 사망 원인으로 알려져 있다. 세포 복제를 위한 필수 효소인, 리보뉴클레오티드 환원효소에 대해 강력한 저해 효과를 갖는 신규의 항종양제, 는 암 치료를 위한 유용한 처치방법이 될 것이다.
리보뉴클레오티드를 환원하여 상응하는 데옥시리보뉴틀레오티드로 변환시키는 것이 DNA에 결정적인 단계라는 것은 공지의 사실이다. 데옥시리보뉴클레오티드는 포유동물 세포에 극히 소량으로 존재하므로, DNA 합성을 막는데 있어서 리보뉴클레오티드 환원효소의 제해제를 사용하는 것이 DNA 중합효소의 억제제를 사용하는 것보다 효과적이다.[Inhibitors of Rlbonucleoside diphosphate reductase activity, Cory, J.G. and Cory, A.M.Eds; Pergamon Press; Oxford, 1988; pp 245-264 참조] 따라서, 리보뉴클레오티드 환원효소에 대한 강력한 저해제는 암에 대한 강력하고 효과적인 무기가 될 수 있다.
여러해 동안, 신규의 강력한 리보뉴클레오티드 환원효소의 제해제인, α-(N)-헤테로사이클 카르복스알데히드 티오세미카르바존(HCT)에 대한 연구에 관심이 집중되어 왔다. HCT류로는 5-히드록시피리딘-2-카르복스알데히드 티오세미카르바존 (5HP), 4-메틸-1-포르닐이소퀴놀린 티오세미카르바존(MAIQ-I), 5-(아세틸아미노)피리딘-2-카르복스알데히드 티오세미카르바존(5-AAP), 3- 및 5-아미노피리딘-2-카르복스알데히드 티오세미카르바존(3-AP 및 5-AP), 및 이들의 4-메틸 유도체(3-AMP 및 5-AMP), 3- 및 5-히드록시-4-메틸피리딘-2-카르복스알데히드 티오세미카르바존(3-HMP 및 5-HMP)가 있다. [Cancer Res.,1972, 32, 1455-1462; J. Med. Chem. 1976, 19, 970-972; J. Med. Chem. 1974, 17, 172-181; J. Med. Chem. 1992, 35, 3672-3677; J. Med. Chem. 1992, 35, 3667-3671 참조]
HCT 시리즈에 대한 활성 연구에서, 3-AP 및 3-AMP는 L1120 백혈병, M-109 폐암 및 A2780 난소암에 대해 다른 HCT들보다 효과적인 것으로 밝혀졌다. [J. Med. Chem. 1992, 35, 3672-3667; "The Chemistry and Biological Activity of the α-(N)-헤테로사이클릭 카르복스알데히드 티오세미카르바존" Progress in Medical Chemistry, Ellis, G. P.; West G. B., Eds; Elsevier/North-Holland Biomedical Press: New York, 1978; Vol. 15, pp321-356 참조] 또한, 3-AP 및 3-AMP는히드록시우레아와 비교할 때 현저한 항암활성을 갖는 제제로 치료용 리보뉴클레오티드 환원효소의 저해제로 승인되었다.
3-AP 및 3-AMP의 생체내 활성에도 불구하고, HCT 시리즈의 이들 두 선도 화합물의 치료효능은 제한된 수용성과 생체이용률때문에 한계가 있었다. [. Med. Chem. 1992, 35, 3672] 또한, 3-AP 및 3-AMP의 아미노기의 아세틸화는 이들 항종양제를 불활성화시키는 대사에 문제가 많은 경로로 지적되었다. 따라서, 본 발명은 3-AP 및 3-AMP의 몇 수용성 프로드럭에 관한 것이다. 이들은 인산염-함유 프로드럭을 포함한다.
본 발명의 목적은 환자의 활성 부위에 전달될 수 있는 3-AP 및 3-AMP의 농도를 향상시키기 위한 3-AP 및 3-AMP의 수용성 프로드럭 제형을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 생체이용률을 향상시키는 3-AP 및 3-AMP의 수용성 프로드럭 제형을 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 아미노기의 생체 내 아세틸화를 감소시키는 3-AP 및 3-AMP의 수용성 프로드럭 제형을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 본 발명의 프로드럭 화합물을 사용하여 동물 및 인간의 신생물을 치료하는 방법을 제공하는 것이다.
본 발명은, 향상된 수용성, 생물학적 유용성 및 생체 내 대사 불활성화에 대한 내성을 갖는 리보뉴클레오티드 환원효소 저해제의 프로드럭 제형 및 암 및/또는 종양의 처치를 위한 이들의 용도에 관한 것이다.
도 1은 본 발명의 프로드럭을 나타내는 도면.
도 2 및 도 3은 인산염 및 디설파이드 함유 프로드럭의 각각 생체 내 및 생체 밖에서의 메카니즘을 나타내는 개략도.
도 4 및 도 5는 프로드럭 I의 합성 경로(오르소 및 파라).
도 6은 프로드럭 II의 다른 합성 경로.
도 7은 디설파이드 프로드럭 29의 합성경로
도 8은 프로드럭 III의 합성 경로.
도 9는 간의 S9 분획에서 프로드럭 I의 3-AP로의 전환을 나타내는 도면.
도 10 및 도 11은 대조군, A-AP 또는 프로드럭 I(파라)으로 처치된 쥐의 M109 종양 성장의 감소를 비교하는 그래프
본 발명은 수용성, 생체이용률, 및 대사 불활성화에 대한 내성을 향상시키는 3--아미노피리딘-2-카르복스알데히드 티오세미카르바존(3-AP), 및 이들의 3--아미노-4-메틸피리딘-2-카르복스알데히드 티오세미카르바존(3-AMP)의 프로드럭 제형에 관한 것이다. 3-AP 및 3-AMP보다 잘 녹는 3-AP 및 3-AMP의 프로드럭 제형에서, 3-AP 및 3-AMP의 3-아미노 그룹은 메틸 또는 우레아, 바람직하게는 우레탄으로 변성되어, 도 1에서와 같이, 유기인산염 그룹 또는 디설파이드 그룹으로 치환된다. 인산염-함유 프로드럭은 중성 pH에서 우수한 수용성을 나타내고 향상된 생체이용률을 나타낸다. 수용성 디설파이드 프로드럭은 높은 농도의 글루타티온 및/또는 글루타티온 S-트랜스페라제를 갖는 종양 세포에서 선택적으로 활성화되어, 공지 방법의 여러 약제에 대한 내성을 불식시킬수 있다. 모든 경우에, 카르바모일 프로드럭 링커는 모 약제 3-AP 및 3-AMP의 3-아미노 치환기의 일시적 보호그룹으로 작용하여, 이들 프로드럭이 N-아세틸화에 의해 대사적으로 불활성화되는 것을 방지한다.
본 발명의 프로드럭은 동물 및 인체의 신생물 치료에 유용하다. 생체 내에서, 이들 프로드럭은 대사화되어 3-AP 및 3-AMP 치료제로 활성화된다. 프로드럭의 투여와 모 치료제를 투여하는 경우 고체 종양의 성장을 저해하는 효능을 비교해 보면 프로드럭의 효율이 우수하다. 본 발명의 특히 바람직한 프로드럭은 유기인산염 그룹이 우레탄을 통해 3-아미노 위치에서 3-AP에 연결되어 있는, 3-AP의 유기인산염 유도체인 프로드럭I, 및 II; 및 디설파이드 그룹이 우레탄을 통해 3-아미노 위치에서 3-AP에 연결되어 있는, 3-AP의 디설파이드 유도체인 프로드럭III를 포함한다.
(오르쏘 또는 파라)
프로드럭 I
프로드럭 II
(오르쏘 또는 파라)
프로드럭 III
R=CH2CH2NH2, CH2CH2CNHAc, CH2CH2OH, CH2COOH, 등
본 발명은 하기 식의 화합물에 관한 것이다.
상기 식에서,R4는 H 또는 CH3이고;
R5는 CHR, 벤질, 또는 오르쏘 또는 파라 치환된 벤질;
R은 H, CH3, CH2CH3, CH2CH2CH3, 또는 이소프로필;
R'은 자유산, 인산염, 또는 -S-S-R",
R"는 CH2CH2NHR6, CH2CH2OH, CH2COOR7, 오르쏘 또는 파라 치환된 C1-C3알킬페닐, 또는오르쏘 또는 파라 치환된 니트로페닐;
R6는 H, C1-C4아실 그룹, 트리플루오로아세틸, 벤조일 또는 치환된 벤조일 그룹, 이고
R7은 C1-C4알킬, 페닐, 치환된 페닐, 또는 벤질 또는 치환된 벤질이다.
본 발명은 또한 항신생물 유효량의 하나 이상의 상기 프로드럭 화합물을 포함하는 약제학적 조성물에 관한 것이다. 임의로, 그리고 바람직하게 본 발명의 약제학적 조성물은 또한 약제학적 첨가제, 희석제, 부형제를 포함하며, 바람직한 투여형태는 경구용 투여 형태이다.
본 발명의 치료 방법은 종양 또는 암 환자에게 항 신생물 유효량의 하나 이상의 상기 프로드럭 화합물을 투여하는 것으로 구성된다. 이 경우 암은 완화되고, 종양의 크기가 적어진다.
본 명세서에서, 환자는 사람과 같은 포유동물을 포함하는 동물로서, 본 발명의 조성물에 의해 처치를 받는 대상을 말한다. 특정 동물에 특정되는 증상, 질병,감염 등의 경우에는 그 대상이 되는 특정 동물을 의미한다.
본 명세서에서 "신생물"이라 함은 세포 증식에 의한 정상세포보다 빠른 속도로 비정상적으로 성장한 조직, 즉 악성 신생물 또는 암을 의미한다. 악성 신생물은 정상 조직과의 구조적 및 기능적인 조화가 일부 또는 전부 결여되어 있고 대부분 주변 조직들을 공격하여 제거함으로서 적절한 치료가 없으면 환자를 죽음에까지 이르게 하는 것이다. 본 명세서에서 신생물은 모든 암 질병과 악성 종양과 관련되어 사용된다.
본 명세서에서 "항신생물 유효량"이란 의미는 암종으로 고통받는 환자에게 투여하여 신생물의 더 이상의 성장을 방지하고 성장을 조절하여 바람직하게는 종양을 감소시키는 화합물의 양을 의미한다.
본 명세서에서, "치료 유효량"은 암으로 고통받는 인간을 포함하는 포유동물 환자에게 종양의 확산 또는 성장을 저해하기 위해 투여되는 화합물의 양을 의미한다. 바람직하게, 본 발명의 화합물은 악성 신생물의 조절을 가능하게 한다. 종양의 경우, 본 발명의 화합물은 종양 조직의 더 이상의 성장을 저해하고 현존하는 종양을 수축시키는 효능이 있다.
본 명세서에서, "보호된"이란 의미는 하나 이상의 중간체에서 바람직하지 않은 반응을 보호하는 포스패이트 그룹 또는 히드록실 그룹을 언급하기 위해 사용되나, 선택조건에 따라 보호기는 제거될 수 있다. 이러한 보호기로는, 예를 들어, 트리클로로에틸, 에틸, 시아노에틸, 트리메틸실일에틸, 실일에틸, t-부틸디메틸실일, t-부틸, 트리페닐실일 및 t-부틸디페닐실일 등도 있다. 보호기는 실일 보호기, 에테르 보호기, 에스테르 보호기 및 다른 기로부터 선택될 수 있고, 각 보호기는 보호능과 제거 용이성 등을 고려하여 선택된다.
본 발명은 각각 3-AP 및/또는 3-AMP에 비해, 향상된 수용성, 생체이용율, 및/또는 대사 불활성화에 대한 내성을 갖는 3-AP 및 3-AMP의 프로드럭 제형에 관한 것이다. 모 약제인 3-AP 및 3-AMP 보다 현저하게 물에 잘 녹는 프로드럭 제형을 제조하기 위해, 3-AP 및 3-AMP의 아미노 그룹을, 메틸 또는 우레탄 단위, 바람직하게는 도 1에 도시한 바와 같이 유기인산염 그룹 또는 디설파이드 그룹으로 치환된 우레탄으로 변성된다. 본 발명의 프로드럭 화합물은 비-프로드럭 형태에 비해 현저하게 증가된 수용성 및/또는 활성을 나타낸다.
3-AP 및 3-AMP 프로드럭 제형의 합성
프로드럭 Ⅰ의 합성
도 4에 나타낸 본 발명의 프로드럭 Ⅰ의 합성에서, 포스패이트 트리에스테르 2a를 2-스티렌일-3-카르복실산 피리딘 유사체 6과 (PhO)2P(O)N3및 Et3N 존재하에 반응시켜 포스포트리에스테르 우레탄 화합물 7을 만들고, 오존분해한 후, 티오세미카르바지드와 반응시키고, 포스패이트 에스테르 보호기를 제거하여 3-AP의 프로드럭 Ⅰ(파라)를 제조한다. 프로드럭 Ⅰ(오르쏘)의 유사체 합성은 도 5에 도시되어 있다. 2-비닐피리딘-3-카르복실산 유도체를 포스패이트 트리에스테르 2b와 축합하여 우레탄 화합물 10을 만들고, 오존분해하여 2-우레탄-피리딘-카르복스알데히드 유도체 11을 제조한후, 티오세미카르바지드와 반응시켜 티오세미카르바존 12를 제조하고, 산성 조건에서 트리메틸실일 포스패이트 보호기를 제거하여 3-AP의 프로드럭 Ⅰ(오르쏘)를 제조한다.
프로드럭 Ⅱ의 합성
도 6에 본 발명의 프로드럭 Ⅱ의 합성과정이 도시되어 있다. 프로드럭 Ⅱ는 프로드럭 Ⅰ의 우레탄 측쇄에서 벤젠링이 제거된 것만 제외하고는 프로드럭 Ⅰ과 유사하다. 도 6에 도시된 바와 같이, 프로드럭 Ⅱ는 표준 전구체로부터 용이하게 합성될 수 있다. 도 6에서, 포스포트리에스테르 링커(15 a-b)를 2-메틸피리딘 유도체 13 또는 2-비닐피리딘 유도체 14(2-클로로-3-아미노 피리딘의 비닐화 또는 다른 방법으로 제조가능)와 반응시켜 우레탄 유도체(16 a-b) 및 (17 a-b)를 제조하고, 오존 또는 이산화셀레늄과 반응시키는 산화반응으로 2-카르복스알데히드 유도체 18 및 19를 제조한다. 이들 각각의 2-카르복스알데히드 유도체를 티오세미카르바지드와 반응시킨 후, 포스포트리에스테르 보호기를 제거하여 프로드럭 Ⅱ를 제조한다.
프로드럭 Ⅲ의 합성
도 7에 본 발명의 프로드럭 Ⅲ의 합성과정이 도시되어 있다. 이 합성에서, (도 4의 방법대로 제조된) 비닐 유도체 5를 오존분해하여 피리딘-2-카르복스알데히드 21을 제조한후, 디메틸 아세탈 유도체 22로 변성하고 탈에스테르화하여 아세탈 카르복실산 유도체 23을 제조한다. 아세탈 카르복실산 유도체 23을 디설파이드 중간체 24(2-티오벤질 알콜 25와 p-니트로페닐-클로로메르캅티드 26의 축합으로 제조)와 트리에틸아민 및 벤젠 중의 (PhO)2P(O)N3및 Et3N 존재하에 반응시켜 변성된 디메틸 아세탈 유도체 27을 만들고, 상승된 온도와 산성조건하의 물/THF에서 카르복스알데히드 유도체 28을 제조한다. 카르복스알데히드 유도체 28을 촉매량의 진한 염산 존재 하에 티오세미카르바지드와 반응시켜 프로드럭 29를 제조한다. 프로드럭 29의 파라 형태는 중간체 24를 변성하여 벤질 알콜 그룹이 황에 대해 파라 위치에 있는 것을 사용하는 것을 제외하고는 오르쏘 형태와 동일한 방법으로 제조한다.
도 8은 R이 트리플루오로아세틸 그룹인 프로드럭 Ⅲ의 오르쏘 형태의 합성방법을 도시한 것이다. 중간체인 혼합된 디설파이드 32는 오르쏘 티올 벤질 알콜 및 트리플루오로아세틸화된 아민 알킬 메르캅티드 33의 산화반응에 의해 제조된 디설파이드 30과의 트랜스-티올화 반응으로 제조된다. 혼합된 디설파이드 32는 아세탈 카르복실산 유도체 23과 80℃에서, 트리에틸아민 및 벤젠 중의 (PhO)2P(O)N3 및 Et3N 존재하에 반응시켜 우레탄 유도체 33을 만들고, 상승된 온도(60℃)와 물/THF 중의 톨루엔술폰산으로 처리하여 카르복스알데히드 유도체 34를 제조한다. 카르복스알데히드 유도체 34을 촉매량의 산 존재 하에 티오세미카르바지드와 반응시켜 R이 트리플루오로아세틸 그룹인 프로드럭 Ⅲ을 제조한다.
수용성
3-AP와 프로드럭 Ⅰ의 수용성을 비교 시험하기 위해, 하기 방법을 사용하였다. 탈이온수 중의 3-AP의 수용성을 시험하기 위해, 5㎎의 3-AP를 125㎖ 삼각플라스크에 넣고 100㎖의 물을 가했다. 혼합물을 실온에서 흔들었다. 2시간 후, 고체 3-AP는 물에 완전히 녹지 않았다. 탈이온수 3-AP의 전체 용해도는 〈1㎎/20㎖였다.
프로드럭 Ⅰ(파라)의 경우, 8㎎의 프로드럭을 50㎖ 삼각플라스크에 넣고 0.5㎖의 물을 가했다. 수분 이내에 용해하여 연노랑색의 용액이 되었다. 프로드럭(이나트륨 염)의 전체 용해도는 ≥16㎎/㎖였다. 3-AP에 비해 300배 이상 증가된 수용성을 나타냈다.
생체이용률
포스패이트 함유 프로드럭의 생체이용률은 포스패이트 그룹을 메틸 도는 우레탄 단위와 연결하는 인-산소 결합의 분해와 퀴논 메타이드, 포름알데히드 및/또는 이산화탄소의 손실과 함께 생기는 분절로 최종 생성물로 모 약제인 3-AP 또는 3-AMP가 생기는 것에 의해 일어난다. 경로는 도 2에 도시되어 있다. 퀴논 메타이드는 그자체로 DNA에 손상을 가져올 수 있고 이에 의해 세포 복제를 저해한다. 따라서, 이들 퀴논 메타이드는 모약제와 함께 첨가 또는 서로 상승되는 방법으로 모 약제와 함께 보조적인 저해를 할 수 있다.
도 3은 디설파이드 연결된 생체이용경로를 나타낸 것이다. 이론 또는 메카니즘에 제한되지는 않으나, GSH 또는 관련된 티올로 배양시, 방향족 고리에 부착된 황 치환기가 이탈기로 작용하여 디-설파이드로 연결된 프로드럭의 환원 활성화가 일어나, 최종생성물로 3-AP, 3-AMP 및 다른 퀴논 메타이드를 생성한다.
도 9는 쥐 간의 S9 분획의 존재하에 생체 밖에서 프로드럭 Ⅰ의 3-AP로의 전환을 나타낸 것이다. 배양 매질 중의 프로드럭 Ⅰ 1μM 용액을 2.5㎎의 간의 S9 분획으로 배양하였다. 37℃에서 100분간 배양한 후, 프로드럭의 농도는 급격히 감소하여 검출한계 이하로 떨어졌다. 약 80%의 프로드럭이 3-AP로 전환되었고 다른 대사물질은 발견되지 않았다. 프로드럭 Ⅰ의 3-AP로의 전환율은 20nM/분/㎎ 쥐 간 조직이었다. 전환된 3-AP는 간의 S9 분획에서 안정하였다. 프로드럭 Ⅰ을 배양 매질 단독으로 37℃에서 2시간동안 배양했을 때, 프로드럭 농도는 비교적 안정하였고 HPLC 분석에서 3-AP는 발견되지 않았다. 이 결과는 프로드럭 Ⅰ의 3-AP로의 전환이 효소적 과정이라는 것을 나타낸다.
생체 내 효율
3-AP와 프로드럭 Ⅰ의 생체 내 효능을 비교 시험한 결과를 도 10에 나타내었다. 3-M109 종양 세포의 5×106 세포/㎖ 현탁액 0.2㎖를 Balb/c 쥐에 정맥주사하고 0으로 날짜를 표시하였다. 3-AP, 프로드럭 Ⅰ, 부형제 대조군을 제 3일에 두번, 제 4일에 한번, 제 6일에 두번, 제 7일에 한번 주사하였다. 10마리 쥐는 3-AP 주사만 받았고,투여량은 4.5㎎/㎏체중 이었다. 10마리 쥐는 프로드럭 Ⅰ주사만 받았고, 투여량은 10㎎/㎏체중이었다. 10마리 쥐는 부형제 대조군의 주사만 받았다. 종양의 크기를 제 7, 10, 13 및 17일에 각각 측정하여 그 결과를 도 10에 나타내었다. 이 실험은 프로드럭 Ⅰ이 동일한 투여량의 3-AP에 비해 현저히 우수한 효능이 있음을 보여준다. 도 11에서는, 인산염 완충액(1)과 디메틸설폭사이드 수용액(10%)(2)을 대조군으로 사용하여 프로드럭 Ⅰ의 항종양 활성을 3-AP와 비교하였다. 이 실험에서도, 프로드럭 Ⅰ은 3-AP보다 우수한 효능을 나타낸다. 대조군(1)은 프로드럭의 대조군으로, 대조군(2)는 모 약제의 대조군으로 사용하였다.
본 발명의 치료는 동물 또는 인간 환자의 신생물을 치료하는 방법, 특히 항신생물 유효량의 본 발명의 프로드럭을 투여하여 신생물의 성장을 저해하고 성장을 조절하여, 바람직하게는 감소시키는 것으로 구성되는, 인간의 종양을 치료하는 방법에 관한 것이다. 본 발명의 방법에서, 본 발명의 적어도 하나의 프로드럭이 치료에 유효한 양으로 암, 또는 악성 종양으로 고통 받는 환자에게 투여되어 암 또는 종양의 확산을 또는 성장을 저해하게 된다. 바람직하게, 본 발명의 방법에 의해 암 또는 고체 종양이 성장을 멈추고, 고체 종야의 경우 크기가 수축되게 된다.
상기 신생물을 처치하기 위한 본 발명의 프로드럭을 유효량 포함하는 약재학적 조성물은 약제학적으로 수용가능한 첨가제, 담체, 부형제를 포함할 수 있다. 당업자는 치료 유효량이 처치 조건, 상태의 경중, 사용되는 처방전, 환자 등에 따라 달라질 수 있다는 것을 알 수 있다.
일반적으로, 본 발명의 약제학적 조성물은 경구로 투여되는 것이 바람직하고, 보다 바람직하게는 정제, 캡슐등의 제형을 가질 수 있으나, 정맥, 피하 주사 등등의 다른 형태로 투입될 수도 있다. 물론, 당업자는 본 발명의 조성물의 안정성과 치료 활성을 해하지 않는 범위 내에서 다양한 제제형을 만들 수 있다.
본 화합물은 항 신생물 제제인 3-AP 및 3-AMP의 프로드럭이다. 어떤 약제 형태에서는, 투여 경로에 따라, 본 발명의 어떤 화합물이 다른 화합물보다 더 적절할 수 있다. 당업자는 환자의 표적 부위에 본 발명의 화합물을 전달하는 하나 이상의 투여 형태를 제공하기 위해 본 발명의 화합물에 어떻게 다양한 화학적 방법을 사용할 것인지 알 수 있다. 당업자는 또한, 환자의 표적 부위에 본 발명의 화합물을 전달하는데 있어서 프로드럭 형태의 바람직한 인자를 선택하여, 항신생물 효과를 극대화시킬 수 있다.
본 발명의 제제에 사용되는 화합물의 양은 암 또는 종양을 치료하기에 유효한 양이다. 일반적으로 본 발명의 화합물의 치료 유효량은 환자의 체중 당 0.05㎎/㎏ 내지 500㎎/㎏, 또는 그 이상이고, 사용되는 화합물, 처치되어야 할 종양, 처치되어야 할 조직에 위치했을 경우의 화합물의 활성, 화합물의 환자에의 투여 경로에 따라 달라질 수 있다. 고체 종양의 경우, 화합물은 보통 한번에, 0.05㎎/㎏ 내지 250㎎/㎏으로 투여된다, 이 투여량은 일반적으로 0.001 내지 500㎍/㎖의 혈액 농도를 나타내게 된다. 처치 기간은 하루 이상으로 처치되어야 할 질병의 상태에 따라 수개월 또는 그 이상 길어질 수 있다. 본 발명의 프로드럭 화합물은 3-AP 또는 3-AMP에 비해 덜 투여하여도 된다. 따라서, 본 발명의 화합물 및 방법은 환자에게 미치는 독성이 덜하다.
본 발명에서, 활성 화합물의 투여는 연속적인(정맥주사) 내지 근육주사, 하루 몇 번의 경구 투여, 또는 다른 여러가지 투여 방법으로 투여될 수 있다. 본 발명의 화합물의 가장 바람직한 투여 경로는 경구 투여이다.
본 발명의 약제학적 조성물의 제조를 위해, 치료 유효량의 본 발명의 화합물은 종래의 제약 기술에 의해 임의의 약제학적으로 수용가능한 담체와 혼합된다. 담체는 투여 경로에 따라 여러 가지 형태를 가질 수 있다.
주사 제제형을 위해서는 증류수 또는 식염수가 에탄올과 같은 분산 보조제, 및 DMSO와 같은 다른 약제학적으로 수용가능한 용매와 혼합된다. 물론, 사용되는 용액은 멸균 상태로 유지되며 조성물과 담체도 멸균되어야 한다. 주사가능한 현탁액의 제조를 위해, 액체 담체, 현탁제 등이 사용될 수 있다.
경구용 제제로 조성물을 제조하기 위해서는, 하나 이상의 약제학적 매질이 사용된다. 따라서, 현탁액, 용액 등의 액체 경구용 제제를 위해서는 물, 글리콜, 오일, 알콜, 향료, 방부제, 착색제 등의 적절한 담체 및 첨가제가 사용된다. 분말, 정제, 캡슐 등의 고체 경구용 제제를 위해서는 전분, 덱스트로즈, 만니톨, 락토즈와 같은 당, 희석제, 과립화제, 윤활제, 결합제, 등의 적절한 담체 및 첨가제가 사용된다. 필요하다면, 정제 및 캡슐은 종래 기술에 의해 전체적으로 코팅될 수 있다.
본 발명의 화합물 및 조성물은 인간을 포함한 동물의 암을 포함한 신생물 치료를 위해 사용된다. 일반적으로, 악성 종양의 치료를 위해, 조성물은 주사제, 바람직하게는 정맥 주사제로 하루 1번 내지 4번, 10 내지 500 마이크로그램의 양으로 투여된다. 바람직하게 본 발명의 화합물은 경구로 투여되나, 기타의 제형으로 투여될 수 있다.
본 발명의 화합물은 단독으로, 또는 다른 제제, 특히 본 발명의 다른 제제와 혼합하여 사용될 수 있다. 또한, 본 발명의 하나 이상의 화합물은 다른 항신생물 제제, 예를 들어 항 대사제, 에토포시드, 독소루비신, 택솔, 빈크리스틴, 시클로포스파미드, 또는 미토마이신 C 등과 함께 사용될 수 있다.
실시예
각 화합물의 상세한 반응조건 및 특성을 설명한다. 모든 NMR 스펙트라는 1H에 대해서는 300MHZ에서 13C에 대해서는 75MHZ에서 QE 플러스 300MHZ NMR 분광분석기로 측정하였다. MS 스펙트라는 VG ZAB-SE 질량 분광분석기 및 VG-70-SE-4F 장치로 기록하였다. 모든 용매는 사용 전 증류하였다.
프로드럭 Ⅰ의 합성
포스패이트 트리에스테르 화합물2a의 합성
0℃에서, 건조 아세토니트릴 30㎖ 중의 4-히드록시벤질알콜(1.09g, 8.79밀리몰) 용액에 사염화탄소(6.76g, 44밀리몰), N,N-디이소프로필에틸아민(2.39g, 18.5밀리몰) 및 DMAP(107mf, 0.88밀리몰)을 가했다. 2분 후, 아세토니트릴 5㎖ 중의 디-(2-트리메틸실일)에틸 포스파이트 1을 적가하였다. 실온에서 4시간에 걸쳐 반응을 진행시켰다. 용매를 제거하고 잔류물을 크로마토그래피하여(헥산: EtOAc, 1:1) 무색 오일로 2a를 얻었다.
2-클로로니코틴의 메틸에스테르 화합물 4의 합성
0℃에서, 건조 메탄올 100㎖ 중의 2-클로로니코틴산(15.8g, 0.1몰) 현탁액에, 티오닐 클로라이드(17.8g, 0.15몰)을 적가하였다. 실온에서 2일간에 걸쳐 반응을 진행시켰다. 용매를 진공으로 제거하고 잔류물을 포화 NaHCO3에 용해시켰다. 생성된 염기 용액을 EtOAc(3×100㎖)로 추출하였다. 모아진 유기층을 식염수로 세척하고, 황산나트륨으로 건조시킨 다음, 진공으로 농축하여 2-클로로니코틴의 메틸에스테르 화합물 4(15.3g, 89%)를 오일로 얻었다.
비닐에스테르 피리딘 화합물 5의 합성
DMF 10㎖ 중의 2-클로로니코틴산 메틸에스테르(1.71g, 10밀리몰)용액에, 아세트산 나트륨(1.64g, 20밀리몰), 트리페닐포스핀(1.05g, 4밀리몰), 아세트산 팔라듐(Ⅱ)(0.112g, 0.5밀리몰)을 가하고 스티렌((10.4g, 0.10몰)을 가했다. 혼합물을 130℃에서 3일간 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각시키고 20㎖의 물로 급냉시켰다. 혼합물을 EtOAc(3×50㎖)로 추출하였다. 모아진 유기층을 황산나트륨으로 건조시킨 다음, 진공으로 농축하였다. 잔류물을 크로마토그래피하여(헥산: EtOAc, 8:1 내지 6:1) 연한 노랑색 오일로 화합물 5를 얻었다(1.70g, 71%).
비닐 카르복실산 화합물 6의 합성
THF 10㎖ 중의 비닐에스테르 피리딘 화합물 5(3.31g, 13.85밀리몰)용액에, NaOH(3N, 5㎖)를 가하고 밤새 교반하였다. 반응 용액을 Dowex 50w8-100으로 pH 7로 산성화하고 잔류물을 여과하여 버리고 여과액을 농축하여 다음 단계 반응에 안정한 조 화합물 6(3.0g, 96%)를 얻었다.
우레탄 화합물 7의 합성
벤젠 10㎖ 중의 상기에서 제조된 6(1.0g, 4.46밀리몰), 디페닐 포스포릴 아지드(1.3g, 2.97밀리몰) 및 트리에틸아민(0.48g, 4.75밀리몰) 혼합물을 환류시키면서 10분간 가열하였다. 벤젠 5㎖ 중의 알콜 2a(1.2g, 2.97밀리몰)을 가하고 혼합물을 환류시키면서 3시간동안 가열하였다. 5㎖의 디옥산을 가하고 혼합물을 계속하여 2시간동안 계속하여 가열하였다. 냉각 후, 용매를 제거하고 실리카겔 칼럼(헥산: EtOAc, 5:1 내지 2:1) 으로 정제하여 노란 고체를 얻었다(1.20g, 64%)
2-카르복스알데히드 우레탄 화합물 8의 합성
디클로로메틸렌/메탄올(100㎖, 1:4) 중의 7(1.14g, 1.82밀리몰) 용액을 -78℃에서 오존분해하고 반응을 TLC로 관찰하였다. 반응 후, 과량의 오존을 푸른 용액이 무색이 될 대까지 산소 버블링으로 제거하였다. -78℃에서 반응액을 메틸 설파이드(3㎖)로 급냉시켰다. 혼합물을 서서히 가열하여 실온에서 5시간 교반하였다. 용매를 증발시키고 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(헥산: EtOAc, 4:1)로 정제하여 8을 엷은 노란색 오일로 얻었다(0.708g, 70%)
티오세미카르바존 화합물 9의 합성
에탄올/물(6㎖, 5:1) 중의 알데히드 8(1.40g, 2.54밀리몰) 용액에 에탄올/물(30㎖, 7:3) 중의 티오세미카르바지드(0.254g, 2.79밀리몰)을 적가하였다. 실온에서 3시간 교반하고, 혼합물을 여과하여 고체를 5㎖ 에탄올/물(7:3)과 5㎖ 에테르로 세척하려 9(1.20g)을 흰색 고체로 얻었다. 여과액을 농축시키고 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(디클로로메틸렌:메탄올=20:1)로 정제하여 9를 얻었다. 전체 수율은 1.296g(82%)였다.
프로드럭 Ⅰ의 합성
자유 산: 화합물 9(48㎎, 0.077밀리몰)을 디클로로메틸렌/TFA(1㎖, 4:1)로 실온에서 30분간 처리하였다. 용매를 진공으로 증류하고 잔류물을 디클로로메틸렌/메탄올(5㎖, 10:1)로 세척하여 프로드럭 Ⅰ의 자유산 형태를 노란색 고체로 얻었다(35㎎, 108%).
나트륨염: 화합물 9(47㎎, 0.075밀리몰)을 디클로로메틸렌/TFA(1㎖, 4:1)로 실온에서 30분간 처리하였다. 용매를 진공으로 증류하여 얻은 프로드럭의 산 생성물을 25㎖의 0.5M NaHCO3에 용해시켰다. 생성된 용액을 C-18 칼럼으로 정제하여 프로드럭 Ⅰ의 나트륨 염을 얻었다(22㎎, 67%)
프로드럭 Ⅰ(오르쏘)의 합성
포스포트리에스테르 중간체 2b의 합성
0℃에서, 건조 아세토니트릴 30㎖ 중의 4-히드록시벤질알콜(1.09g, 8.79밀리몰) 용액에 사염화탄소(6.76g, 44밀리몰), N,N-디이소프로필에틸아민(2.39g, 18.5밀리몰) 및 DMAP(107mf, 0.88밀리몰)을 가했다. 2분 후, 아세토니트릴 5㎖ 중의 디-(2-트리메틸실일)에틸 포스파이트 1을 적가하였다. 반응물을 밤새 서서히 실온으로 승온시켰다. 용매를 제거하고 잔류물을 크로마토그래피하여(헥산: EtOAc, 4:1) 무색 오일로 2b를 얻었다(2.50g, 64%)
우레탄 화합물 10의 합성
벤젠 20㎖ 중의 6(2.0g, 8.81밀리몰), 디페닐 포스포릴 아지드(2.61g, 5.94밀리몰) 및 트리에틸아민(0.96g, 9.50밀리몰) 혼합물을 환류시키면서 10분간 가열하였다. 벤젠 5㎖ 중의 알콜 2b(2.40g, 5.94밀리몰)을 가하고 혼합물을 환류시키면서 4시간동안 가열하였다. 냉각 후, 용매를 제거하고 실리카겔 칼럼(헥산: EtOAc, 4:1) 으로 정제하여 노란 고체 10을 얻었다(2.41g, 73%)
2-카르복스알데히드 우레탄 화합물 11의 합성
디클로로메틸렌/메탄올(100㎖, 1:4) 중의 7(1.14g, 1.82밀리몰) 용액을 -78℃에서 오존분해하고 반응을 TLC로 관찰하였다. 반응 후, 과량의 오존을 푸른 용액이 무색이 될 대까지 산소 버블링으로 제거하였다. -78℃에서 반응액을 메틸 설파이드(3㎖)로 급냉시켰다. 혼합물을 서서히 가열하여 실온에서 5시간 교반하였다. 용매를 증발시키고 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(헥산: EtOAc, 4:1)로 정제하여 8을 엷은 노란색 오일로 얻었다(1.70g, 83%)
티오세미카르바존 화합물 12의 합성
에탄올/물(6㎖, 5:1) 중의 알데히드 8(1.60g, 2.90밀리몰) 용액에 에탄올/물(50㎖, 7:3) 중의 티오세미카르바지드(0.29g, 3.19밀리몰)을 적가하였다. 실온에서 4시간 교반하고, 혼합물을 여과하여 고체를 5㎖ 에탄올/물(7:3)과 5㎖ 에테르로 세척하여 12(1.20g)을 노란색 고체로 얻었다(1.50g, 83%).
자유 산: 프로드럭 Ⅰ(오르쏘)의 합성
화합물 12(580㎎, 0.93밀리몰)을 디클로로메틸렌/TFA(1㎖, 4:1)로 실온에서 30분간 처리하였다. 용매를 진공으로 증류하고 잔류물을 디클로로메틸렌/메탄올(5㎖, 10:1)로 세척하여 프로드럭 Ⅰ(오르쏘)의 자유산 형태를 노란색 고체로 얻었다(395㎎, 102%).
나트륨염:
프로드럭 Ⅰ(오르쏘)의 산 생성물을 50㎖의 포화 NaHCO3에 용해시켰다. 생성된 용액을 C-18 칼럼으로 정제하여 프로드럭 Ⅰ(오르쏘)의 나트륨 염을 얻었다(120㎎, 31%)
피리딘 카르복스알데히드 21의 합성
디클로로메틸렌(55㎖) 및 메탄올(100㎖) 중의 5(10.0g, 41.84밀리몰) 용액을 -78℃에서 1시간동안 오존분해하였다. 녹색용액을 -78℃에서 디메틸 설파이드(10㎖)로 급냉시켰다. 혼합물을 밤새 교반하였다. 용매를 증발시키고 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피로 정제하여 흰색의 알데히드 21을 얻었다(6.248g, 90%)
피리딘 디메틸아세탈 메틸에스테르 22의 합성
알데히드 21(3.10g, 18.79밀리몰)의 메탄올 용액(47㎖)에 트리메틸오르쏘포르메이트(10.3㎖, 93.95밀리몰)와 촉매량의 TsOH를 가했다. 12시간동안 가열하면서 환류시켜 반응시켰다. 반응 혼합물을 냉각시키고 용매를 증발시켰다. 잔류물을 EtOAc(125㎖) 및 Et2O(25㎖)에 용해시켰다. 유기층을 포화 중탄산나트륨 및 식염수로 세척하였다. 유기층을 황산 나트륨으로 건조시키고 진공 농축시켜 디메틸아세탈 22 오일(3.65g, 92%)을 얻었다.
피리딘 디메틸아세탈 카르복실산 23의 합성
22(3.65g, 17.29밀리몰)의 THF 용액(10㎖)에 3N NaOH 용액(8.64㎖, 25.93밀리몰)을 실온에서 가했다. 노란 용액을 22시간동안 실온에서 교반하였다. 반응 혼합물을 Dowex 산성 수지(50WX8-100)로 pH 4.5로 산성화시켰다. 고체를 여과하고 THF(30㎖)로 세척하였다. 여과액을 진공 농축시켜 산 23(3.4g, 100%)을 노란색 거품 형태로 얻었다.
우레탄 디설파이드 화합물 27의 합성
산 23(894㎎, 4.54밀리몰), 디설파이드 링커 24(1.33g, 80% 순도, 4.54밀리몰), 트리에틸아민(0.63㎖, 4.54밀리몰) 및 디페닐포스포릴아지드(0.98㎖, 4.54밀리몰)의 벤젠 현탁액을 16시간동안 환류시키면서 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각하고 용매를 진공(40℃에서)으로 제거하여 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(헥산: EtOAc, 60-40%)로 정제하여 27을 얻었다(0.942g, 53%)
우레탄 디설파이드 카르복스알데히드 화합물 28의 합성
THF(20㎖) 중의 27(700㎎, 1.437밀리몰) 용액에 물(3㎖) 및 소량의 TsOH를 가했다. 반응용액을 60℃에서 16시간동안 가열하였다. 반응액을 냉각시키고 용매를 진공 증발시켰다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(30-40% EtOAc/헥산)로 정제하여 노란색 분말로 28을 얻었다(391㎎, 62%)
프로드럭 29(오르쏘)의 합성
THF(6㎖) 중의 28(175㎎, 0.397밀리몰) 용액에 티오세미카르바지드(18.2㎎, 0.197밀리몰)의 따뜻한 (∼40℃) 수용액(0.75㎖)을 가했다. 생성된 노란 용액에 2 방울의 10% 염산을 가했다. 반응용액을 실온에서 3시간동안 교반하였다. 용매를 진공 증발시키고 생성물을 THF(4×5㎖)와 함께 증발시켰다. 얻어진 노란 고체를 고진공하에서 12시간동안 건조하여 디설파이드 프로드럭 29를 거의 100% 수율로 얻었다.
디설파이드 중간체 32의 합성
0℃에서, THF/물(50㎖, 4:1) 중의 2-티오벤질 알콜 25(2.63g, 18.78밀리몰), 2-티오에틸 트리플루오로아세트아미드31(3.25g, 18.78밀리몰) 및 트리에틸아민(2.85g, 28.2 밀리몰) 혼합물에 과산화수소(1.7㎖, 30% w/w)를 적가했다. 반응물을 0℃에서 30분간 교반하고 진한 염산으로 pH 2로 산성화하였다. 혼합물을 EtOAc로 추출하여 32와 티오에틸 트리플루오로아세트아미드의 혼합물을 얻었다. 혼합물은 더 정제없이 다음 단계에 사용할 수 있다. 순수한 32의 소 분획은 무색 오일로 얻어졌다,
우레탄 디설파이드 디메틸아세탈 33의 합성
벤젠(25㎖) 중의 미정제 23(1.38g, 7.0밀리몰), 미정제 32(3.5g, 11.3밀리몰) , 디페닐포스포릴아지드(3.09g, 11.3 밀리몰) 및 트리에틸아민(1.14g, 11.3 밀리몰) 혼합물을 환류시키면서 12시간동안 가열하였다. 반응액을 냉각시키고 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(헥산:EtOAc 2:1)로 정제하여 엷은 노란색 오일 33을 얻었다(1.50g, 42%)
우레탄 디설파이드 카르복스알데히드 화합물 34의 합성
THF/물(40㎖/㎖) 중의 33(0.394g, 0.78밀리몰) 용액을 60℃로 가열하고 반응을 TLC로 관찰하였다. 30시간 후, 용매를 진공 증발시켰다. 잔류물을 실리카겔 크로마토그래피(헥산:EtOAc 2:1)로 정제하여 노란색 고체로 34를 얻었다(0.282g, 79%)
프로드럭 Ⅲ(오르쏘)의 합성
알데히드 34(0.216g, 0.47밀리몰)을 뜨거운 에탄올 2㎖에 녹이고 실온으로 식혔다. 이 용액에 에탄올/물(2.4㎖, 1:1) 중의 티오세미카르바지드(47㎎, 0.52밀리몰)를 한번에 가하고, 실온에서 4시간동안 교반하였다. 혼합물을 냉장고(0-5℃)에서 밤새 저장하였다. 혼합물을 여과하고 고체를 2㎖의 물, 2㎖의 에탄올/물(2:1) 및 4㎖의 에테르로 세척하여 흰색고체 35(0.206g, 82%)를 얻었다.
생물학적 활성
M109 종양 세포의 5×106 세포/㎖ 현탁액 0.2㎖를 Balb/c 쥐에 정맥주사하고 0으로 날짜를 표시하였다. 3-AP, 프로드럭 Ⅰ, 부형제 대조군을 제 3일에 두번, 제 4일에 한번, 제 6일에 두번, 제 7일에 한번 주사하였다. 10마리 쥐는 3-AP 주사만 받았고,투여량은 4.5㎎/㎏체중 이었다. 10마리 쥐는 프로드럭 Ⅰ주사만 받았고,투여량은 10㎎/㎏체중 이었다. 10마리 쥐는 부형제 대조군의 주사만 받았다. 종양의 크기를 제 7, 10, 13 및 17일에 각각 측정하여 그 결과를 도 10에 나타내었다. 이 실험은 프로드럭 Ⅰ이 동일한 투여량의 3-AP에 비해 현저히 우수한 효능이 있음을 보여준다. 도 11에서는, 인산염 완충액과 디메틸설폭사이드 수용액(10%)을 대조군으로 사용하여 프로드럭 Ⅰ의 항종양 활성을 3-AP와 비교하였다. 이 실험에서, 프로드럭 Ⅰ은 3-AP 또는 두 대조군보다 우수한 효능을 나타낸다.
본 발명을 보다 상세하게 설명하기 위해 이상의 실시예를 사용하였으나. 본 발명을 이에 한정하는 것은 아니다. 본 발명의 사상과 특허청구범위에서 벗어나지 않는 범위에서 다양한 변형과 응용이 가능함은 자명한 사실이다.

Claims (21)

  1. 하기 식의 화합물:
    상기 식에서, R4는 H 또는 CH3이고;
    R5는 CHR, 벤질, 또는 오르쏘 또는 파라 치환된 벤질;
    R은 H, CH3, CH2CH3, CH2CH2CH3, 또는 이소프로필;
    R'은 자유산, 인산염, 또는 -S-S-R",
    R"는 CH2CH2NHR6, CH2CH2OH, CH2COOR7, 오르쏘 또는 파라 치환된 C1-C3알킬페닐, 또는오르쏘 또는 파라 치환된 니트로페닐;
    R6는 H, C1-C4아실 그룹, 트리플루오로아세틸, 벤조일 또는 치환된 벤조일 그룹, 이고
    R7은 C1-C4알킬, 페닐, 치환된 페닐, 또는 벤질 또는 치환된 벤질이다.
  2. 제 1 항에 있어서, R5는 CH2인 것을 특징으로 하는 화합물.
  3. 제 1 항에 있어서, R5는 CHR인 것을 특징으로 하는 화합물.
  4. 제 3 항에 있어서, R은 CH3인 것을 특징으로 하는 화합물.
  5. 제 1 항에 있어서, R4는 H인 것을 특징으로 하는 화합물.
  6. 제 1 항에 있어서, R4는 CH3인 것을 특징으로 하는 화합물.
  7. 하기 식의 화합물:
    상기 식에서, R4는 H 또는 CH3; R5는 CH2또는 벤질; 이고
    R8는 CH2CH2NH2, CH2CH2CNHAc, CH2CH2OH, 또는 CH2COOH이다.
  8. 제 7 항에 있어서, R4는 CH3인 것을 특징으로 하는 화합물.
  9. 제 7 항에 있어서, R4는 H인 것을 특징으로 하는 화합물.
  10. 유효량의 하기 식의 화합물을 투여하는 것으로 구성되는 인간 또는 동물의 신생물 처치방법:
    상기 식에서, R4는 H 또는 CH3; R5는 CH2또는 벤질; 이고
    R8는 CH2CH2NH2, CH2CH2CNHAc, CH2CH2OH, 또는 CH2COOH이다.
  11. 제 10 항에 있어서, R4는 CH3인 것을 특징으로 하는 방법.
  12. 제 10 항에 있어서, R4는 H인 것을 특징으로 하는 방법.
  13. 유효량의 하기 식의 화합물을 투여하는 것으로 구성되는 인간 또는 동물의 신생물 처치방법:
    상기 식에서, R4는 H 또는 CH3이고;
    R5는 CHR, 벤질, 또는 오르쏘 또는 파라 치환된 벤질;
    R은 H, CH3, CH2CH3, CH2CH2CH3, 또는 이소프로필;
    R'은 자유산, 인산염, 또는 -S-S-R",
    R"는 CH2CH2NHR6, CH2CH2OH, CH2COOR7, 오르쏘 또는 파라 치환된 C1-C3알킬페닐, 또는오르쏘 또는 파라 치환된 니트로페닐;
    R6는 H, C1-C4아실 그룹, 트리플루오로아세틸, 벤조일 또는 치환된 벤조일 그룹, 이고
    R7은 C1-C4알킬, 페닐, 치환된 페닐, 또는 벤질 또는 치환된 벤질이다.
  14. 제 13 항에 있어서, R4는 H 또는 CH3이고, R"는 CH2CH2NH2, CH2CH2CNHAc, CH2CH2OH, 또는 CH2COOH인 것을 특징으로 하는 방법.
  15. 제 13 항에 있어서, R4는 CH3인 것을 특징으로 하는 방법.
  16. 제 13 항에 있어서, R4는 H인 것을 특징으로 하는 방법.
  17. 제 13 항에 있어서, R4는 H 또는 CH3이고, R5는 CH2또는 벤질이고, R"는 오르쏘 또는 파라 치환된 니트로페닐인 것을 특징으로 하는 방법.
  18. 제 17 항에 있어서, R4는 H인 것을 특징으로 하는 방법.
  19. 제 17 항에 있어서, R4는 CH3인 것을 특징으로 하는 방법.
  20. 제 17 항에 있어서, R5는 벤질인 것을 특징으로 하는 방법.
  21. 제 17 항에 있어서, R5는 CH2인 것을 특징으로 하는 방법.
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