KR102622016B1

KR102622016B1 - 푸나르나바의 증숙건조물을 이용한 질 또는 자궁경부의 염증 또는 암종에 대한 예방 또는 치료 조성물

Info

Publication number: KR102622016B1
Application number: KR1020210058331A
Authority: KR
Inventors: 최미정
Original assignee: 주식회사 바이오의생명공학연구소
Priority date: 2021-05-06
Filing date: 2021-05-06
Publication date: 2024-01-09
Anticipated expiration: 2041-05-06
Also published as: KR20220151287A

Abstract

본 발명은 푸나르나바(Punarnava herb)의 증숙건조물을 이용한 질내 염증 및 자궁경부암 예방 또는 치료를 개시한다. 상기 증숙건조물은 푸나르나바(Punarnava herb), 야생 참마(Dioscorea) 및 에키네시아(Echinacea)을 이용한 증숙건조물을 제조한 것으로, 이를 알코올로 추출하여 질 세정, 질내 염증 및 자궁경부암에 대한 세포증식 억제를 통한 예방 또는 치료 효과를 제공한다.

Description

푸나르나바의 증숙건조물을 이용한 질 또는 자궁경부의 염증 또는 암종에 대한 예방 또는 치료 조성물{COMPOSITION PREVENTING OR TREATING INFLAMMATION OR CANCER FOR VAGINA AND CERVIX USING STEAM EXTRACT OF PUNARNAVA HERB}

본 발명은 푸나르나바의 증숙건조물을 이용하여 질 또는 자궁경부의 염증 또는 암종에 대한 세포증식 억제를 통한 예방 또는 치료능과 질 세정능을 발현할 수 있는 조성물에 관한 것이다.

건강한 여성의 질은 pH3.5~4 정도의 산성을 띠고 있어서 질내로 병원균이 침입하여 번식하는 것을 방지하는 자정작용을 한다. 그러나 질내 산도에 이상이 생기면, 질내에 병원균 등이 침입하여 염증이 생기고, 이에 따라 질분비물인 냉에서 악취가 나며 그 분비량도 많아지는 냉대하증이 발생된다. 그리고 이러한 냉대하증이 심한 경우에는 수시로 속옷을 갈아 입어야 할 정도로 냉의 양이 많아지기도 하며, 주변사람들까지 냄새를 느낄 정도로 심한 악취가 나기도 한다.

또한, 자궁경부암은 자궁을 구성하고 있는 체부(corpus)와 경부(cervix) 중에서, 질에 연결된 자궁경부에 발생하는 악성종양을 말한다. 자궁경부암은 전 세계적으로 여성에게 발병하는 암 중 두 번째로 흔한 암이며, 여성의 암에 의한 사망원인 중 4위에 해당될 정도로 그 수가 매우 방대하다. 또한, 생활 습관의 변화와 환경적 요인으로 인하여 자궁경부암의 발병률이 점차 높아지고 있으며 과거에는 중년층 여성에서 많이 발병하였지만 지금은 20~30대의 젊은 연령층에서의 발병이 높아지고 있는 추세이다.

전술한 질내염 및 자궁경부암은 모두 세포증식성 질환에 해당하여 세포증식 억제를 우선적으로 필요로 한다.

푸나르나바(Punarnava herb)는 보에르하비아(Boerhavia) 속에 속하는 식물 종(Boerhavia diffusa)으로 인도, 태평양, 미국 남부 전역에 널리 퍼져있고 꽃이 작고 그 잎은 녹색 채소로 인도의 많은 지역에서 섭취되며, 진통 효과가 있는 것으로 알려져 있다.

야생 참마(Dioscorea)는 마과의 참마(Dioscorea japonica Thunb)의 뿌리로, 참마는 원산지가 한국으로 기후가 아주 추운 산간지대를 제외하고는 전국 산지에 분포를 하고 있으며, 덩굴성의 다년생 초본식물이다. 잎은 대생하지만 간혹 호생하는 것도 있으며, 엽병이 길고, 길이 5 - 10cm, 폭 2 - 2.5cm로서 긴 타원형 또는 좁은 삼각형이며, 끝이 뾰족하다. 꽃은 자웅이주로서 6 - 7월에 피며, 줄기는 물체에 감기고 많은 가지가 갈라지고, 뿌리는 긴 원주형의 모양을 하고 있다. 한방에서는 예로부터 참마를 동상, 다뇨, 요실금, 피부 습진 등의 치료에 사용하여 왔으며, 최근에는 당뇨병의 치료에도 활용되고 있고, 자양, 강장, 보신 등으로 이용되어온 약재이다. 참마에 함유된 유효 성분으로는 다이오스게인(diosgenin), 비타민 C, 폴리페롤 산화효소(polyphenoloxidase), 당단백질(glycoprotein), 사포닌(saponin) 등이 함유되어 있는 것으로 알려져 있다. 그러나, 야생 참마의 근 기능 증진 성능과 관련하여 문헌 어디에도 개시되거나 공개된 바가 없다.

에키네시아(Echinacea)는 국화과의 다년생 화초로 굵고 길쭉한 줄기를 가지고 있으며, 그 줄기 꼭대기에 다양한 색상의 꽃이 핀다. 에키네시아라는 이름은 꽃 중앙의 꽃술 부분에서 유래한 이름으로 언뜻 보면 가시가 비죽 비죽 돋은 성게 같아 그리스어로 성게를 의마하는 enhinos에 유래한 echinacea라는 이름이 붙었다. 뽀족한 원추형의 꽃술 덕분에 영어로는 콘플라워(cornflower)라는 이름으로 불리기도 하며, 북미가 원산지로 북미 원주민들이 많이 이용하여 '인더언의 허브'라는 이름이 붙기도 하였다. 그러나, 아직까지 야생 참마 또는 에키네시아의 질내 염증, 자궁경부암 예방 또는 치료능 및 질 세정능과 관련하여 상기 문헌 어디에도 개시되거나 공개된 바가 없다.

이에 본 발명자들은 푸나르나바에 대한 연구를 하던 중, 질 또는 자궁경부의 염증 또는 암종에 대한 세포증식 억제 측면에서 예방 또는 치료능과 질 세정능을 동시에 발현할 수 있음을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

한국 공개특허 제2005-0059286호

본 발명의 목적은 푸나르나바(Punarnava herb)의 증숙건조물을 이용한 질 또는 자궁경부의 염증 또는 암종에 대한 세포증식 억제를 통한 예방 또는 치료능과 질 세정능을 동시에 발현하는 조성물을 제공하는데 있다.

본 발명의 상기 목적 및 기타 목적들은 하기 설명된 본 발명에 의하여 모두 달성될 수 있다.

상기의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은

푸나르나바(Punarnava herb), 야생 참마(Dioscorea) 및 에키네시아(Echinacea)을 이용한 증숙건조물의 분말이나 그 추출물을 유효성분으로 포함하는 질 또는 자궁경부의 염증 또는 암종에 대한 세포증식 억제를 통한 예방 또는 치료 조성물을 제공한다.

상기 푸나르나바(Punarnava herb), 야생 참마(Dioscorea) 및 에키네시아(Echinacea)는 1: 0.5~1.5 : 0.5~1.5의 중량비를 만족하는 것일 수 있다.

상기 증숙건조물은 90 내지 110℃에서 1 내지 24시간 1차 증숙하고, 상기 1차 증숙건조물을 90 내지 110℃에서 1 내지 24시간 2차 증숙하고, 상기 2차 증숙건조물을 90 내지 110℃에서 1 내지 24시간 3차 증숙한 증숙건조물을 60 내지 92℃에서 1 내지 8시간 건조시킨 다음 영하 30℃ 이하에서 건조시켜 수분함량 10% 이하로 증숙 건조물일 수 있다.

상기 증숙건조물은 알코올 후추출을 수행한 것일 수 있다.

상기 알코올 후추출은 리플럭스 하에 60 내지 90℃ 에서 2 내지 5 시간 동안 추출한 것일 수 있다.

상기 조성물은 질 세정 효과, 질염 유발균에 대한 항균 효과, 또는 질 상피세포주나 자궁경부암세포에 대한 세포증식 억제 효과를 갖는 것일 수 있다.

본 발명에 따르면, 질 또는 자궁경부의 염증 또는 암종에 대한 세포증식 억제를 통한 예방 또는 치료능과 질 세정능을 동시에 발현하는 푸나르나바의 증숙건조물의 분말이나 추출물을 유효성분으로 하는 질내 염증 및 자궁경부암 예방 또는 치료를 제공할 수 있다.

도 1은 실시예 1에서 수득된 샘플과 비교예 1 내지 3에서 수득된 샘플 4종에 대해 농도별 ABTS, DPPH 라디칼 소거활성을 대비한 그래프이다.
도 2는 실시예 1에서 수득된 샘플과 비교예 1 내지 3에서 수득된 샘플 4종에 대해 질 상피세포주 세포독성 평가결과를 대비한 그래프이다.
도 3은 실시예 1에서 수득된 샘플과 비교예 1 내지 3에서 수득된 샘플 4종에 대해 LPS 염증유도 질 상피세포주 사이토카인 평가결과를 대비한 그래프이다.
도 4는 실시예 1에서 수득된 샘플과 비교예 1 내지 3에서 수득된 샘플 4종에 대해 자궁경부암세포 세포증식억제 평가결과를 대비한 그래프이다.

이하 본 발명에 대한 이해를 돕기 위하여 본 발명을 보다 상세하게 설명한다.

본 명세서 및 청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 아니되며, 발명자는 발명을 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 점을 감안하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야 한다.

본 기재에서 질 또는 자궁경부의 염증은 바이러스성 질환과 세균성 질환을 포함한다.

본 발명은 아래의 실시예 및 실험예에서 확인되는 바와 같이, 푸나르나바(Punarnava herb), 야생 참마(Dioscorea) 및 에키네시아(Echinacea)을 이용한 증숙건조물의 분말이나 추출물을 제조할 경우 그 분말이나 추출물이 질 또는 자궁경부 내 세균에 대한 억제 및 사멸능이 상승하고 세포증식 억제능을 동시에 발현함으로써, 질 또는 자궁경부의 염증 또는 암종에 대한 세포증식 억제를 통한 예방 또는 치료능과 질 세정하기 위한 조성물을 제공할 수 있다.

푸나르나바 증숙건조물의 열수 추출물은 질 또는 자궁경부 내 세균에 대한 억제 및 사멸능이 상승하고 세포증식 억제능을 동시에 나타내지 않았으며, 또한 아래의 실험예에서 제시되어 있지 않지만, 푸나르나바(Punarnava herb), 야생 참마(Dioscorea) 및 에키네시아(Echinacea)의 함량비가 1: 0.5~1.5 : 0.5~1.5의 중량비를 만족하지 못하는 경우 질 또는 자궁경부 내 세균에 대한 억제 및 사멸능이 상승하고 세포증식 억제능을 동시에 나타내지 않았다.

본 발명의 질 또는 자궁경부 내 세균에 대한 억제 및 사멸능이 상승하고 세포증식 억제능을 동시에 구현하는 조성물은 이러한 실험 결과에 기초하여 제공되는 것으로, 본 발명의 질 또는 자궁경부의 염증 또는 암종에 대한 예방 및 치료용 조성물은 푸나르나바(Punarnava herb), 야생 참마(Dioscorea) 및 에키네시아(Echinacea)의 함량비가 1: 0.5~1.5 : 0.5~1.5의 중량비로 혼합한 다음 수득한 증숙건조물의 분말이나 그 추출물을 유효성분으로 포함함을 특징으로 한다.

본 기재에서 유효성분은 달리 특정하지 않는 한, 단독으로 목적하는 활성을 나타내거나 또는 그 자체는 활성이 없는 담체와 함께 활성을 나타낼 수 있는 성분을 의미한다.

본 기재에서 증숙건조물은 달리 특정하지 않는 한, 90 내지 110℃에서 1 내지 24시간 1차 증숙하고, 상기 1차 증숙건조물을 90 내지 110℃에서 1 내지 24시간 2차 증숙하고, 상기 2차 증숙건조물을 90 내지 110℃에서 1 내지 24시간 3차 증숙한 증숙건조물을 60 내지 92℃에서 1 내지 8시간 건조시킨 다음 영하 30℃ 이하에서 건조시켜 수분함량 10% 이하로 증숙 건조물일 수 있다. 이 경우에 유효성분의 증대 효과를 제공할 수 있어 바람직하다.

이때 상기 증숙을 위해 통상의 증숙 장치를 사용할 수 있으며, 건조를 위해 열풍 건조기 등의 통상의 건조 장치를 이용할 수 있고, 수분함량 조절을 위한 건조를 위해 동결 건조기 등의 통상의 건조 장치를 이용할 수 있다.

본 발명의 증숙건조물은 바람직하게는 건조 전처리를 통해 수분함량을 10% 이하로 조절한 것을 상기 증숙건조에 이용하여 수득한 것이 바람직하다.

또한, 보다 바람직하게는 상기 1차 증숙건조에서 증숙시간을 6 내지 15시간으로 하고, 2차 증숙건조에서 증숙시간을 8 내지 15 시간으로 하고, 3차 증숙건조에서 증숙시간을 8 내지 12 시간으로 하여 수득한 것이 바람직하다.

상기 증숙건조물은 10 내지 500 메쉬, 구체적인 예로 50 내지 150 메쉬로 분쇄한 것을 이후 알코올 추출에 사용할 수 있다.

상기 분쇄는 통상의 분쇄장치에서 수행할 수 있다.

상기 증숙건조물은 알코올 후추출을 수행한 것일 수 있다.

상기 분말 또는 추출물은 증숙건조물을 알코올 후추출시켜 수득될 수 있다.

상기 알코올 후추출은 증숙건조물 무게의 3 내지 20배의 에탄올을 사용하여 수행하는 것이 바람직하다.

상기 알코올은 이에 특정하는 것은 아니나 60~90% 농도의 탄소수 1 내지 4의 알코올을 사용하는 것이 반응 효율을 고려할 때 바람직하다.

본 기재에서 상기 알코올 후추출은 리플럭스 하에 60 내지 90℃ 에서 2 내지 5 시간 동안 수행하는 것으로, 이 경우 증숙건조물로부터의 유효성분 추출효율을 극대화할 수 있다.

본 기재에서 증숙건조물의 분말이나 그 추출물은 달리 특정하지 않는 한, 추출 대상인 그 고상물 자체 또는 그 분말을 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올(메탄올, 에탄올, 부탄올 등), 메틸렌클로라이드, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 디메틸포름아마이드, 디메틸설폭사이드, 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 또는 이들의 혼합 용매를 사용하여 침출하여 얻어진 추출물, 이산화탄소, 펜탄 등 초임계 추출 용매를 사용하여 얻어진 추출물 또는 그 추출물을 분획하여 얻어진 분획물을 의미하며, 추출 방법은 활성물질의 극성, 추출 정도, 보존 정도를 고려하여 냉침, 환류, 가온, 초음파 방사, 초임계 추출 등 임의의 방법을 적용할 수 있다.

분획된 추출물의 경우 추출물을 특정 용매에 현탁시킨 후 극성이 다른 용매와 혼합, 정치시켜 얻은 분획물, 조추출물을 실리카겔 등이 충진된 칼럼에 흡착시킨 후 소수성 용매, 친수성 용매 또는 이들의 혼합 용매를 이동상으로 하여 얻은 분획물을 포함하는 의미이다.

상기 추출물의 의미에는 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조 등의 방식으로 추출 용매가 제거된 농축된 액상의 추출물 또는 고상의 추출물이 포함된다. 바람직하게는 추출용매로서 물, 탄소수 1 내지 4의 저급 알코올(메탄올, 에탄올, 부탄올 등) 또는 이들의 혼합 용매를 사용하여 얻어진 추출물의 의미한다.

본 기재에서, 상기 고상물의 형상은 특별히 제한하지 않으며, 환(pills) 형태, 과립 형태, 가루 형태 등일 수 있다.

본 발명의 조성물은 질 세정 효과, 질염 유발균에 대한 항균 효과, 또는 질 상피세포주나 자궁경부암 세포에 대한 세포증식 억제 효과를 필요로 하는 용도로 다양하게 사용될 수 있다.

일례로, 해당 용도에 대한 예방 또는 치료로 사용될 수 있다.

본 기재에서 상기 예방 또는 치료는 인간 대상체에의 투여를 위해 세포의 면역억제 특성 또는 면역특권(immunoprivileged) 특성을 향상시키기 위해 처리되었거나 변형되었거나 또는 처리 및 변형되었고; 그리고 선택적으로, 세포는 세포에서 바이러스의 증폭을 향상시키기 위하여 처리되었거나 변형된 세포를 사용하여 확인할 수 있다. 또는 상기 세포는 종양용해 바이러스 증폭이 허용되고, 종양에 축적되고/거나 대상체에서 바이러스를 종양에 전달하기에 충분한 시간 동안 대상체의 면역 체계에 의해 인식되지 않는 것인 세포를 사용하여 수행할 수 있다.

이때 사용가능한 상업적 동종 세포주로 다음을 들 수 있다: 중간엽 줄기 세포, 예컨대, 예를 들어, APCETH-201, APCETH-301(APCETH), Cx601(TIGENIX), TEMCELL, MSC-100-IV, Prochymal(MESOBLAST); 유도된 만능성 줄기 세포(iPSC), 예컨대, 예를 들어, ToleraCyte(Fate Therapeutics); 섬유모세포 세포, 예를 들어, CCD-16Lu, WI-38; 종양-관련 섬유모세포, 예를 들어, Malme-3M, COLO 829, HT-144, Hs 895.T, hTERT PF179T CAF, 등; 내피 세포, 예를 들어, HUVEC, HUVEC/TERT 2, TIME; 배아 상피 세포, 예를 들어, HEK-293, HEK-293 STF, 293T/17, 293T/17 SF, HEK-293.2sus; 배아 줄기 세포, 예를 들어, hESC BG01V; 및 상피 세포, 예를 들어, NuLi-1, ARPE-19, VK2/E6E7, Ect1/E6E7, RWPE-2, WPE-stem, End1/E6E7, WPMY-1, NL20, NL20-TA, WT 9-7, WPE1-NB26, WPE-int, RWPE2-W99, BEAS-2B.

구체적인 예로, 질 상피세포주에서 하기 수학식 1로 나타내는 세포 생존율(cell viability)이 90 내지 100%, 또는 92 내지 100%일 수 있다.

[식 1]

Cell viability (%) = [(Exp. - Blank)/Control] Х 100

(상기 식 1에서, Exp: 세포를 포함한 추출물의 흡광도, Blank: 세포를 포함하지 않은 추출물의 흡광도, Control: 세포를 포함한 증류수의 흡광도이다.)

또다른 구체적인 예로, 자궁경부암 세포에서 상기 수학식 1로 나타내는 세포 생존율이 45 내지 60 %, 또는 50 내지 55%일 수 있다.

본 명세서에서 상기 조성물은 약학 조성물일 수 있다.

상기 약학 조성물은 약학적으로 허용되는 담체(carrier) 또는 첨가제를 포함할 수 있다. 본 명세서에서 상기 "약학적으로 허용되는" 의미는 유효성분의 활성을 억제하지 않으면서 적용(처방) 대상이 적응 가능한 이상의 독성을 지니지 않는다는 의미이다. 상기 "담체"는 세포 또는 조직 내로의 화합물의 부가를 용이하게 하는 화합물로 정의된다.

본 명세서의 약학 조성물은 단독으로 또는 어떤 편리한 담체 등과 함께 혼합하여 투여될 수 있고, 그러한 투여제형은 단회투여 또는 반복투여 제형일 수 있다. 상기 약학 조성물을 포함하는 약학 조성물은 고형 제제 또는 액상 제제일 수 있다. 고형 제제는 산제, 과립제, 정제, 캅셀제, 좌제 등이 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 고형 제제에는 담체, 착향제, 결합제, 방부제, 붕해제, 활택제, 충진제 등이 포함될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 액상 제제로는 물, 프로필렌 글리콜 용액 같은 용액제, 현탁액제, 유제 등이 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며, 적당한 착색제, 착향제, 안정화제, 점성화제 등을 첨가하여 제조할 수 있다. 예를 들어, 산제는 본 명세서의 유효 성분인 약학 조성물과 유당, 전분, 미결정 셀룰로오스 등 약제학적으로 허용되는 적당한 담체를 단순 혼합함으로써 제조될 수 있다. 과립제는 본 명세서의 상기 약학 조성물; 약학적으로 허용되는 적당한 담체; 및 폴리비닐피롤리돈, 히드록시프로필셀룰로오스 등의 약학적으로 허용되는 적당한 결합제를 혼합한 후, 물, 에탄올, 이소프로판올 등의 용매를 이용한 습식과립법 또는 압축력을 이용한 건식과립법을 이용하여 제조될 수 있다. 또한 정제는 상기 과립제를 마그네슘스테아레이트 등의 약학적으로 허용되는 적당한 활택제와 혼합한 후, 타정기를 이용하여 타정함으로써 제조될 수 있다.

본 명세서의 약학 조성물은 치료해야 할 질환 및 개체의 상태에 따라 경구제, 주사제(예를 들어, 근육주사, 복강주사, 정맥주사, 주입(infusion), 피하주사, 임플란트), 흡입제, 비강투여제, 질제, 직장투여제, 설하제, 트랜스더말제, 토피칼제 등으로 투여될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 투여 경로에 따라 통상적으로 사용되고 비독성인, 약학적으로 허용되는 운반체, 첨가제, 비히클을 포함하는 적당한 투여 유닛 제형으로 제제화될 수 있다.

특히, 상기 약학 조성물은 국소적 또는 질내 투여의 방법으로 투여될 수 있다. 본 발명의 조성물이 질내 투여를 위해 제조될 때, 이들은 일반적으로, 제약학적으로 허용가능한 담체, 희석제 또는 부형제와 조합하여, 약학적 제형 또는 단위 투여 형태를 형성한다. 질내 투여를 위해, 조성물은 용액, 현탁액, 에멀션, 분말, 과립 제형, 또는 천연 또는 합성 중합체 또는 수지로서 제시될 수 있다. 활성 조성물은 또한 볼루스 또는 페이스트로서 제시될 수 있다. 본 발명의 질내 투여된 치료 조성물은 또한 서방성을 위해 제형화될 수 있으며, 예를 들어, 조성물은 코팅되거나, 미소캡슐화되거나, 또는 서방성 운반 장치 내에 배치될 수 있다. 상기 제형의 전체 활성 성분은 제형의 0.1 내지 99.9중량％를 포함할 수 있다.

본 명세서의 약학 조성물은 매일 약 0.0001 mg/kg 내지 약 10 g/kg이 투여될 수 있으며, 약 0.001 mg/kg 내지 약 1 g/kg의 1일 투여 용량이 바람직하다. 그러나 상기 투여량은 상기 혼합물의 정제 정도, 환자의 상태(연령, 성별, 체중 등), 치료하고 있는 상태의 심각성 등에 따라 다양할 수 있다. 필요에 따라 편리성을 위하여 1일 총 투여량이 나누어지고 하루 동안 여러 번 나누어 투여될 수 있다.

본 명세서의 조성물이 약학 조성물로 사용될 경우, 상기 조성물 내의 약학 조성물의 함량은 질환의 증상, 증상의 진행 정도, 환자의 상태 등에 따라서 항염 활성을 나타낼 수 있는 유효량을 적절히 조절 가능하며, 예컨대, 상기 약학 조성물의 양은 전체 조성물 총 중량을 기준으로 0.0001 중량% 이상, 구체적으로 0.001 중량% 이상일 수 있고, 80 중량% 이하, 구체적으로는 50 중량% 이하일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 명세서에서 상기 조성물은 식품 조성물일 수 있다.

본 명세서의 조성물이 식품 조성물로 사용될 경우, 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.

본 명세서에서 식품은 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 구체적으로 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서, 각종 식품, 기능성 식품, 음료, 식품 첨가제 및 음료 첨가제를 모두 포함하는 의미로 사용된다. 상기 식품의 예로서 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 기능성 식품 등이 있다. 추가로, 본 명세서의 식품에는 특수영양식품(예, 조제유류, 영,유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(예, 라면류, 국수류 등), 건강보조식품, 조미식품(예, 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(예, 스넥류), 유가공품(예, 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(각종 김치류, 장아찌 등), 음료(예, 과실,채소류 음료, 두유류, 발효음료류, 아이스크림류 등), 천연조미료(예, 라면 스프 등), 비타민 복합제, 알코올 음료, 주류 및 그 밖의 건강보조식품류를 포함하나 이에 한정되지 않는다. 상기 기능성 식품, 음료, 식품첨가제 또는 음료첨가제는 통상의 제조방법으로 제조될 수 있다.

상기 "기능성 식품"이란 식품에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병 방지와 회복 등에 관한 체내조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미하며, 구체적으로는 건강 기능성 식품일 수 있다. 상기 기능성 식품에는 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 기능성 식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.

또한, 상기 식품 조성물에서, 상기 약학 조성물의 유효성분의 양은 식품 조성물 총 중량의 0.00001 중량% 이상, 구체적으로 0.1 중량% 이상일 수 있고, 800 중량% 이하, 구체적으로 50 중량% 이하, 더욱 구체적으로 40 중량% 이하로 포함될 수 있으며, 상기 식품이 음료인 경우에는 식품 전체의 부피 100 ml 를 기준으로 0.001 g 이상, 구체적으로 0.01 g 이상, 50 g 이하, 구체적으로 10 g이하, 더욱 구체적으로 2g 이하의 비율로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 명세서의 식품 조성물에는 그 유효성분 이외에 감미제, 풍미제, 생리활성 성분, 미네랄 등이 포함될 수 있다. 감미제는 식품이 적당한 단맛을 나게 하는 양으로 사용될 수 있으며, 천연의 것이거나 합성된 것일 수 있다. 구체적으로는 천연 감미제를 사용하는 경우인데, 천연 감미제로서는 옥수수 시럽 고형물, 꿀, 수크로오스, 프룩토오스, 락토오스, 말토오스 등의 당 감미제를 들 수 있다. 풍미제는 맛이나 향을 좋게 하기 위하여 사용될 수 있는데, 천연의 것과 합성된 것 모두 사용될 수 있다. 구체적으로는 천연의 것을 사용하는 경우이다. 천연의 것을 사용할 경우에 풍미 이외에 영양 강화의 목적도 병행할 수 있다. 천연 풍미제로서는 사과, 레몬, 감귤, 포도, 딸기, 복숭아 등에서 얻어진 것이거나 녹차잎, 둥굴레, 대잎, 계피, 국화 잎, 자스민 등에서 얻어진 것일 수 있다. 또 인삼(홍삼), 죽순, 알로에 베라, 은행 등에서 얻어진 것을 사용할 수 있다. 천연 풍미제는 액상의 농축액이나 고형상의 약학 조성물일 수 있다. 경우에 따라서 합성 풍미제가 사용될 수 있는데, 합성 풍미제는 에스테르, 알콜, 알데하이드, 테르펜 등이 이용될 수 있다. 생리 활성 물질로서는 카테킨, 에피카테킨, 갈로가테킨, 에피갈로카테킨 등의 카테킨류나, 레티놀, 아스코르브산, 토코페롤, 칼시페롤, 티아민, 리보플라빈 등의 비타민류 등이 사용될 수 있다. 미네랄로서는 칼슘, 마그네슘, 크롬, 코발트, 구리, 불소화물, 게르마늄, 요오드, 철, 리튬, 마그네슘, 망간, 몰리브덴, 인, 칼륨, 셀레늄, 규소, 나트륨, 황, 바나듐, 아연 등이 사용될 수 있다.

또한 본 명세서의 식품 조성물은 상기 감미제 등 이외에도 필요에 따라 보존제, 유화제, 산미료, 점증제 등을 포함할 수 있다.

이러한 보존제, 유화제 등은 그것이 첨가되는 용도를 달성할 수 있는 한 극미량으로 첨가되어 사용되는 것이 바람직하다. 극미량이란 수치적으로 표현할 때 식품 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 0.0005 중량％ 내지 약 0.5 중량％ 범위를 의미한다.사용될 수 있는 보존제로서는 소듐 소르브산칼슘, 소르브산나트륨, 소르브산칼륨, 벤조산칼슘, 벤조산나트륨, 벤조산칼륨, EDTA(에틸렌디아민테트라아세트산) 등을 들 수 있다. 사용될 수 있는 유화제로서는 아카시아검, 카르복시메틸셀룰로스, 잔탄검, 펙틴 등을 들 수 있다. 사용될 수 있는 산미료로서는 말산, 푸마르산, 아디프산, 인산, 글루콘산, 타르타르산, 아스코르브산, 아세트산, 인산 등을 들 수 있다. 이러한 산미료는 맛을 증진시키는 목적 이외에 미생물의 증식을 억제할 목적으로 식품 조성물이 적정 산도로 되도록 첨가될 수 있다. 사용될 수 있는 점증제로서는 현탁화 구현제, 침강제, 겔형성제, 팽화제 등을 들 수 있다.

본 발명의 조성물은 세포증식을 억제시켜서 질내염의 예방 또는 치료용으로 유용하게 활용될 수 있으며, 특히 질 상피세포 조직 강화 용도를 가지며, 기존의 호르몬 요법을 대체하는 질내염 예방과 치료용으로 활용될 수 있다.

나아가, 전술한 양태 이외에 질 또는 자궁경부의 염증 또는 암종에 대한 세포증식 억제를 통한 예방 또는 치료능과 질 세정능이 동시에 발현될 것이 요구되는 용도라면 제한없이 사용될 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물, 기능성 식품 조성물은 해당 분야에 공지된 유효성분을 포함하는 것을 제외하고는 당업계에서 통상적으로 행하여지는 해당 조성물의 제조방법에 따라 제조할 수 있다.

본 기재의 질내 염증 및 자궁경부암 예방 또는 치료를 설명함에 있어서, 명시적으로 기재하지 않은 다른 조건이나 장비 등은 당업계에서 통상적으로 실시되는 범위 내에서 적절히 선택할 수 있고, 특별히 제한되지 않음을 명시한다.

이하, 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정하는 것은 아니다.

[실시예]

<실시예 1> 다단증숙에탄올 푸나르나바 추출물의 제조

(1)푸나르나바(Punarnava herb), 야생 참마(Dioscorea), 에키네시아(Echinacea)을 깨끗이 세정한 후 60℃에서 건조하였다.

(2)건조한 원료를 일정한 중량(100 g : 100 g : 100 g)으로 혼합하였다.

(3)혼합한 원료는 100 ℃로 12시간 증숙하였다.

(4)상기 증숙을 2회 더 반복 실시하였다.

(5)증숙된 원료를 70℃ 하에 6시간 열풍건조한 다음 -80℃에서 동결건조한 증숙건조물을 100 메쉬로 분쇄하였다.

(6)상기 증숙건조 원료의 무게 대비 10 배의 70 % 에탄올을 투입하고 70 ℃에서 6시간 동안 환류관을 연결하여 3회 반복하여 환류 추출하였다. 이후 얻어진 추출액을 0.45 μm membrane filter로 여과한 후 감압농축기로 에탄올을 제거하여 다단증숙알코올 푸나르나바 추출물(샘플 PDE-4)을 제조하였다.

<비교예 1> 증숙열수 푸나르나바 추출물의 제조1

(3)혼합한 원료는 100 ℃로 12시간 증숙하였다.

(6')상기 증숙건조 원료의 무게 대비 10 배의 증류수를 투입하고 70 ℃에서 6시간 동안 환류관을 연결하여 3회 반복하여 환류 추출하였다. 이후 얻어진 추출액을 0.45 μm membrane filter로 여과한 후 감압농축하여 증숙열수 푸나르나바 추출물(샘플 PDE-1)을 제조하였다.

<비교예 2> 다단증숙열수 푸나르나바 추출물의 제조2

(3)혼합한 원료는 100 ℃로 12시간 증숙하였다.

(4)상기 증숙을 2회 더 반복 실시하였다.

(6')상기 증숙건조 원료의 무게 대비 10 배의 증류수를 투입하고 70 ℃에서 6시간 동안 환류관을 연결하여 3회 반복하여 환류 추출하였다. 이후 얻어진 추출액을 0.45 μm membrane filter로 여과한 후 감압농축하여 다단증숙열수 푸나르나바 추출물(샘플 PDE-2)을 제조하였다.

<비교예 3> 단독증숙에탄올 푸나르나바 추출물의 제조

(3)혼합한 원료는 100 ℃로 12시간 증숙하였다.

(6)상기 증숙건조 원료의 무게 대비 10 배의 70 % 에탄올을 투입하고 70 ℃에서 6시간 동안 환류관을 연결하여 3회 반복하여 환류 추출하였다. 이후 얻어진 추출액을 0.45 μm membrane filter로 여과한 후 감압농축기로 에탄올을 제거하여 단독증숙에탄올 푸나르나바 추출물(샘플 PDE-3)을 제조하였다.

<실험예>

<실험예 1> 항산화 시험

상기 실시예 1에서 수득한 샘플과 비교예 1 내지 3에서 수득한 샘플에 대한 항산화 시험으로 시료의 라디칼 소거능을 평가할 수 있는 ABTS 라디칼 소거활성과 DPPH법 라디칼 소거능 실험을 수행하였다.

구체적으로, 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플(PDE-1~4)을 물에 희석하여 100 μg/mL, 250 μg/mL, 500 μg/mL, 1000 μg/mL 농도의 검액을 조제하였다. 7 mM ABTS와 2.45 mM potassium persulfate를 혼합하여 암실에서 12시간동안 상온에서 반응시켜 ABTS양이온을 형성시켰다. 이후 734 nm에서 흡광도 값이 0.70 ± 0.02가 되도록 에탄올을 넣어 조절하였다. 96 well plate에 검액 100 μL와 조제한 ABTS 용액 100 μL를 가하여 7 분간 실온에서 반응하여 734 nm에서 측정하였다.

공시험액과 비교하여 하기 수학식 2에 따라 ABTS 라디칼 소거율을 백분율(%)로 구하고, 결과를 하기 도 1에 함께 나타내었다.

[수학식 2]

ABTS 라디칼 소거능 (%) = [Control - (Sample - Blank)]/Control Х 100

(상기 식에서, Control : ABTS reagent의 흡광도, Sample : Sample + ABTS reagent의 흡광도, Blank : Sample + Blank의 흡광도)

또한, 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플(PDE-1~4)을 물에 희석하여 100 μg/mL, 250 μg/mL, 500 μg/mL, 1000 μg/mL 농도의 검액을 조제하였다. 96 well plate에 검액 100 μL와 0.2 mM DPPH 100 μL를 넣고 30분 후 microplate reader를 이용하여 517 nm에서 흡광도를 측정하였다.

공시험액과 비교하여 하기 수학식 3에 따라 DPPH 라디칼 소거율을 백분율(%)로 구하고, 결과를 하기 도 1에 함께 나타내었다.

[수학식 3]

DPPH 라디칼 소거능 (%) = [Control - (Sample - Blank)]/Control Х 100

(상기 식에서, Control : DPPH reagent의 흡광도, Sample : Sample + DPPH reagent의 흡광도, Blank : Sample + Blank의 흡광도)

하기 도 1에서 보듯이, DPPH 라디칼 분석결과, 대조군으로 사용한 아스코르브산의 항산화능이 가장 뛰어났으며, 1000 μg/mL에서 99.5 %로 확인되었다.

또한, 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플(PDE-1~4) 중에서 항산화능이 가장 뛰어난 실험군은 실시예 1의 PDE-4로서, 1000 μg/mL에서 91.2 %로 확인되었다.

다음으로, 비교예 3의 PDE-3에서 82.8 %로 확인되었고, 비교예 2의 PDE-2 및 비교예 1의 PDE-1 순서로 분석되었으며, 각각 1000 μg/mL에서 75.4 %, 71.3 %로 분석되었다.

ABTS 라디칼 분석결과, 전술한 DPPH 라디칼 분석결과와 같은 경향을 나타냈으며, 실시예 1의 PDE-4, 비교예 3의 PDE-3, 비교예 2의 PDE-2, 비교예 1의 PDE-1 순서로 1000 μg/mL에서 91.2 %, 89.1 %, 74.5 %, 70.9 %로 분석되었다. 참고로, 대조군인 아스코르브산은 1000 μg/mL에서 99.6 %로 분석되었다.

<실험예 2> 항균활성 시험

상기 실시예 1에서 수득한 샘플과 비교예 1 내지 3에서 수득한 샘플에 대한 질염유발균과 질내유용균에 대한 항균활성을 측정하였다.

질염유발균 및 질내유용균 세포배양

실험에서 사용한 질염유발균은 칸디나 알비칸(Candida albicans, ATCC 28367), 크리세오박테리움 글레움(Chryseobacterium gleum, KCTC 2904), 스핀고모나스 파우치모빌리스(Sphingomonas paucimobilis, KCTC 2510), 프로튜스 미라빌리스(Proteus mirabilis, KCTC 2834) 4종이었고, 질내유용균은 락토바실러스 콜레오호미니스(Lactobacillus coleohominis, KCTC 21007)으로, 모든 균주는 생물자원센터(KCTC)에서 분양받아 사용하였다.

질내유용균인 락토바실러스 콜레오호미니스(Lactobacillus coleohominis, KCTC 21007)은 Lactobacilli MRS broth 배지에서 35 ℃ 조건으로 배양하였으며, 질염유발균인 크리세오박테리움 글레움(Chryseobacterium gleum, KCTC 2904), 프로튜스 미라빌리스(Proteus mirabilis, KCTC 2834)는 nutrient broth 배지에서 각각 28 ℃, 35 ℃조건으로 배양하였다. 스핀고모나스 파우치모빌리스(Sphingomonas paucimobilis, KCTC 2510)는 R2A broth 배지에서 28 ℃조건으로 배양하였고, 칸디나 알비칸(Candida albicans, ATCC 28367)는 YM broth 배지에서 28 ℃조건으로 배양하여 실험에 사용하였다.

구체적으로, 질염유발균 및 질내유용균에 대한 항균시험은, 배양된 질염유발균 칸디나 알비칸(Candida albicans, ATCC 28367), 크리세오박테리움 글레움(Chryseobacterium gleum, KCTC 2904), 스핀고모나스 파우치모빌리스(Sphingomonas paucimobilis, KCTC 2510), 프로튜스 미라빌리스(Proteus mirabilis, KCTC 2834) 4종과 질내유용균 락토바실러스 콜레오호미니스(Lactobacillus coleohominis, KCTC 21007)은 1 Х 10⁶CFU/mL으로 맞추어 사용하였다. 각 균주는 고체배지(agar 20 g/L)에 100 μL씩 멸균 면봉을 사용하여 도말하였다. 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플(PDE-1~4)을 물에 희석하여 500 μg/mL농도로 조제하여 disc 당 20 μL씩 paper disc(diameter 6mm, Roshi Kaisha., Tokyo, Japan)에 천천히 흡수시킨 뒤, 건조과정을 거쳐 용매를 휘발시켰다. 각 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플을 흡수시킨 paper disc를 균주를 도말한 평판배지 위에 밀착시킨 후 배양시켜 disc 주변에 생성된 저해환(clear zone, mm)을 측정하여 항균활성을 비교하였으며, 결과를 하기 표 1에 나타내었다.

상기 표 1에서 보듯이, 시험결과, 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플(PDE-1~4)은 질염유발균주 4종 모두에서 항균효과가 확인되었으며 특히 실시예 1의 PDE-4에서 clear zone 직경이 Candida albicans, Chryseobacterium gleum, Sphingomonas paucimobilis, Proteus mirabilis균 각각 11.1 mm, 13.4 mm, 13.1 mm, 13.6 mm로 가장 큰 것으로 확인되었다.

다음으로, 비교예 3의 PDE-3, 비교예 2의 PDE-2, 비교예 1의 PDE-1 순서로, 항산화능의 실험결과와 같은 경향성으로 분석되었다.

또한, 질내유용균인 Lactobacillus coleohominis에서는 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플 모두 항균특성이 없는 것으로 확인되었다.

따라서 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플은 질내유용균에 영향을 주지 않으며, 질염유발균에 관하여 선택적으로 항균특성을 나타내는 것이 확인되었다.

<실험예 3> 질 상피세포주 세포독성 평가

실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플(PDE-1~4)의 세포독성을 확인하기 위하여 MTS 분석을 진행하였다. 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플의 농도는 실시예 1에서 DPPH, ABTS 라디칼 소거활성이 확인된 100~1,000 μg/mL 범위로 설정하였으며, 여성의 질 상피세포주인 VK2/E6E7(ATCC CRL 2616)을 배지로 사용하여 시험물질이 질 상피세포주에 영향을 미치는지 확인하였다.

질 상피세포주 배양

질 상피세포주인 VK2/E6E7(ATCC CRL 2616)는 ATCC에서 분양받았으며, Keratinocyte serum free medium에 growth factor 5 μg/L, bovine pituitary extract 50 mg/L, 1% antibiotics와 0.4 mM calcium chloride를 첨가하여 생육배지로 사용하였고, 37 ℃, 5% CO₂의 조건에서 배양하였다.

구체적으로, 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플(PDE-1~4)의 안전성시험으로 세포독성시험인 MTS assay를 사용하였다. 정량은 Mosmann 방법을 변형하여 측정하였다.

질 상피세포주인 VK2/E6E7(ATCC CRL 2616)을 1Х10⁴ cell/ml 씩 분주하여 24시간 배양 후 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플(PDE-1~4)을 100~1,000 μg/ml의 농도로 희석후 첨가하고 다시 24시간 동안 배양하였다. 이후 MTS 시약 20 μL를 넣고 2시간 동안 배양 후, microplate reader를 이용하여 570nm에서 흡광도를 측정하였다.

세포생존율(cell viability)을 상기 식 1을 사용하여 계산하고, 하기 도 2에 결과를 나타내었다.

하기 도 2에서 보듯이, 질 상피세포주에서 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플의 세포독성 결과, 모든 농도에서 세포생존율이 95 % 이상임을 확인하였다.

따라서, 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플(PDE-1~4)은 모두 여성의 질 상피세포주에서 세포독성이 없는 것으로 확인되었다.

<실험예 4> LPS 염증유도 질 상피세포주 사이토카인 평가시험

전술한 실험예 3의 세포독성평가시험 결과를 바탕으로 여성의 질 상피세포주인 VK2/E6E7(ATCC CRL 2616)에 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플(PDE-1~4)을 0 μg/mL, 100 μg/mL, 250 μg/mL, 500 μg/mL 농도로 처리 후, 염증유도물질인 LPS를 처리하여 발현된 염증성 사이토카인 지표물질인 TNF-α의 농도를 평가하였다.

구체적으로, 세포배양액 내의 염증관련 사이토카인(TNF-α)의 생성량 평가를 위하여 ELISA kit를 이용하여 측정하였다. 질 상피세포주인 VK2/E6E7(ATCC CRL 2616)을 96-well plate에 1x10⁵ cell/well의 농도로 분주한 후, 37 ℃, 5 % 이산화탄소배양기에서 12시간 동안 배양하면서 세포를 완전히 부착시킨다. 이후 0, 100, 250, 500 μg/mL 농도의 시험물질(PDE-1~4)을 처리하고 염증유도 물질인 LPS 1 μg/mL를 처리하여 24시간 재 배양하였다. 이후 Human TNF-α quantikine ELISA kit(R&D systems®, USA)를 사용하여 TNF-α를 정량하고, 결과를 하기 도 3에 나타내었다.

하기 도 3에서 보듯이, 염증유도물질 투여 후 염증성 사이토카인의 발현정도를 비교한 결과, 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플의 농도에 따라 염증성 사이토카인 TNF-α의 농도가 감소함을 확인하였다.

실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플(PDE-1~4) 중에서 TNF-α의 농도감소가 가장 큰 것은 실시예 1의 PDE-4)로 분석되었으며, 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플을 처리하지 않았을 때, TNF-α는 1069.6 pg/mL로 분석되었다.

또한, 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플의 농도가 높아질수록 TNF-α의 농도는 감소하였으며, 500 μg/mL로 처리하였을 때 TNF-α는 396.4 pg/mL로 염증성 사이토카인의 발현정도를 감소시키는 것이 확인되었다. TNF-α의 발현 억제는 비교예 3의 PDE-3, 비교예 2의 PDE-2, 비교예 1의 PDE-1 순서로 큰 것으로 확인되었다.

<실험예 5> 자궁경부암세포 세포증식억제 평가시험

자궁경부암에서 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플의 효력을 확인하기 위하여 자궁경부암세포주인 HeLa 세포에 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플(PDE-1~4)을 0 μg/mL, 100 μg/mL, 250 μg/mL, 500 μg/mL 농도로 처리하여 세포증식억제를 평가하였다.

자궁경부암세포 배양

자궁경부암 HeLa 세포(한국세포주은행)는 DMEM 배지에 10 % FBS(fetal bovine serum)와 100 unit/mL penicillin와 100 mg/mL의 streptomycin을 첨가하여 사용하였고, 37 ℃, 5% CO₂ 조건에서 배양하였다.

구체적으로는, 배양된 HeLa 세포는 96 well plate에 1Х10⁵cells/mL 농도가 되도록 분주한 뒤 37 ℃, 5 % CO₂배양기에서 24시간 배양한다. 이후 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플(PDE-1~4)을 PBS(phosphate buffered saline)에 희석하여 0, 100, 250, 500 μg/mL의 농도로 처리하여 24시간 재 배양한다. 이후 MTS 시약 20 μL를 넣고 2시간 동안 배양 후, microplate reader를 이용하여 570nm에서 흡광도를 측정하였다. 세포생존율(cell viability)을 상기 식 1을 사용하여 계산하고, 하기 도 4에 결과를 나타내었다.

하기 도 4에서 보듯이, 자궁경부암세포에서 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플(PDE-1~4)을 0 μg/mL 처리한 결과를 대조군으로 하였을 때, 실시예 1 및 비교예 1 내지 3의 샘플(PDE-1~4)의 처리 농도가 증가함에 따라 자궁경부암세포에서 세포증식억제가 증가하는 경향성을 나타내었다.

이러한 경향성은, 질 상피세포주에서 질염유발균의 항균평가 및 사이토카인결과와 마찬가지로, 실시예 1의 PED-4 500 μg/mL 농도에서 자궁경부암세포 세포증식억제가 52.2 %로 가장 높은 암세포 세포증식억제력을 나타내었다.

다음으로 자궁경부암세포 세포증식억제가 높은 물질은 비교예 3의 PDE-3으로 500 μg/mL 농도에서 59.9 %로 확인되었다. 또한, 비교예 2의 PDE-2와 비교예 1의 PDE-1은 500 μg/mL 농도에서 각각 66.5 %, 69.1 %로 자궁경부암세포 세포증식억제율을 나타내었다.

결론적으로, 푸나르나바(Punarnava herb), 야생 참마(Dioscorea) 및 에키네시아(Echinacea)을 이용한 증숙건조물의 분말이나 추출물을 유효성분으로 포함하는 경우, 수득된 조성물은 질 또는 자궁경부의 염증 또는 암종에 대한 세포증식 억제를 통한 질 세정 효과, 질염 유발균에 대한 항균 효과, 또는 질 상피세포주나 자궁경부암세포에 대한 세포증식 억제 효과와 제품 안전성을 제공하여 세정용 조성물, 약제학적 조성물, 기타 질 또는 자궁경부의 염증 또는 암종에 대한 예방 또는 치료능과 질 세정능을 동시에 발현하는 효과를 필요로 하는 적용처에 적합함을 확인할 수 있었다.

Claims

푸나르나바(Punarnava herb), 야생 참마(Dioscorea) 및 에키네시아(Echinacea)을 이용한 증숙건조물의 분말이나 그 추출물을 유효성분으로 포함하는 질 또는 자궁경부의 염증 또는 암종에 대한 예방 또는 치료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 푸나르나바(Punarnava herb), 야생 참마(Dioscorea) 및 에키네시아(Echinacea)는 1: 0.5~1.5 : 0.5~1.5의 중량비를 만족하는 질 또는 자궁경부의 염증 또는 암종에 대한 예방 또는 치료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 증숙건조물은 90 내지 110℃에서 1 내지 24시간 1차 증숙하고, 상기 1차 증숙건조물을 90 내지 110℃에서 1 내지 24시간 2차 증숙하고, 상기 2차 증숙건조물을 90 내지 110℃에서 1 내지 24시간 3차 증숙한 증숙건조물을 60 내지 92℃에서 1 내지 8시간 건조시킨 다음 영하 30℃ 이하에서 건조시켜 수분함량 10% 이하로 증숙 건조물인 질 또는 자궁경부의 염증 또는 암종에 대한 예방 또는 치료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 증숙건조물은 알코올 후추출을 수행한 것인 질 또는 자궁경부의 염증 또는 암종에 대한 예방 또는 치료 조성물.
제4항에 있어서,
상기 알코올 후추출은 리플럭스 하에 60 내지 90℃ 에서 2 내지 5 시간 동안 추출한 것인 질 또는 자궁경부의 염증 또는 암종에 대한 예방 또는 치료 조성물.
삭제