KR102617562B1 - 우도 땅콩 새싹 추출물을 유효성분으로 함유하는 근감소증의 개선, 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명의 목적은 우도 땅콩 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 질환의 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 것으로서, 우도 땅콩 추출물은 지질 축적과 고지방/고자당 식이 유발된 근육 약화를 치료하는 것으로서, 우도 땅콩 추출물은 근육 약화된 마우스 모델에 투여시, 약력과 매달리는 능력을 향상시켰으며, 근육 위축 인자인 MuRF-1(Muscle RING-finger protein-1) 및 근육 위축 F-box(MAFbx/Atrogin-1)의 발현을 억제를 확인하였다. 또한, 골격근 세포(C2C12)에서 미토콘드리아 생합성(biogenesis) 및 기능 활성 마커인 페르옥시좀 증식인자 활성화 수용체 감마 공동활성제 1-알파(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha, PGC1-α) 발현을 증가시켜, 골격근 위축을 개선 시키며 미토콘드리아 기능을 활성화 시키는 것을 확인하여, 이와 관련된 사업에 유용하게 사용될 수 있다.

Description

우도 땅콩 새싹 추출물을 유효성분으로 함유하는 근감소증의 개선, 예방 또는 치료용 조성물{Composition for the prevention or treatment of sarcopenia comprising Udo peanut sprout extract as an active ingredient}

본 발명의 목적은 우도 땅콩 새싹 추출물을 유효성분으로 함유하는 근감소증의 개선, 예방 또는 치료용 조성물을 제공하는 것이다.

근육을 형성하는 근육세포는 근필라멘트로 구성되어 있는데, 이는 세포의 크기를 변하도록 하여 수축을 유발한다. 근육 조직이 수축할 때 장력이 발생하게 되는데, 이를 근력이라고 한다. 근육은 이러한 근력을 통하여 개체의 이동, 자세 유지, 체액분비 등을 담당하는 신체기관이다.

근 위축증(muscle atrophy) 또는 근 감소증(sarcopenia)은 호르몬 불균형, 심한 부상, 패혈증, 암 및 노화로 인한 여러 가지 이화 상태(catabolic condition)에서 발생하는 근육세포 및 근조직의 크기 및 질량적 손실을 의미한다. 근 위축증 또는 근 감소증은 근육의 손실을 유발하여 근육 약화 및 피로감을 유발하고 합병증을 악화시킨다. 근 위축증 또는 근 감소증은 크레아틴 키나아제(Creatine kinase: CK), 근전도검사, 근육생검, 분자생물학적 유전자검사, 세포유전학적 검사 등을 통해 진단이 이루어진다. 현재 근 위축증 또는 근 감소증을 치료하기 위한 방법으로, 물리치료가 일반적으로 수행되며, 합병증, 기형 및 기능 장애 예방을 위한 작업치료, 호흡치료, 지지요법(supportive therapy)등이 병행되고 있으나, 이러한 치료는 대증요법으로써의 한계를 갖는다는 점에서, 근위축에 대한 치료제 개발이 절실한 상황이다.

근 위축증 또는 근 감소증 발병의 또 다른 원인으로 보고된 것은 산화물질 증가에 의한 근세포 손상, 스트레스 단백질 발현 감소로 인한 근단백질 생성 및 재생 감소, 프로테아좀-유비퀴틴 활성화에 따른 근단백질 분해 촉진 등이 알려져 있다. 또한, 항염증제로 잘 알려진 합성 글루코코르티코이드인 덱사메타손(DEX)의 투여에 의하여 근육량과 관련된 단백질의 분해가 촉진된다는 사실이 많은 연구에서 보고되었다.

근감소증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 하나의 방법으로 운동이 있는데, 이는 단기적으로 골격근의 단백질 합성 능력을 증가시키며 노인들의 근육의 힘이나 운동성을 증가시킨다고 보고되고 있으나 장기적 치료방법으로 부적절하다. 근감소증의 예방, 개선 또는 치료를 위한 다른 방법으로 테스토스테론(Testosterone) 또는 아나볼릭 스테로이드(anabolic steroid)과 같은 약물을 투여하는 것인데, 이는 여성에게는 남성화를 유도하며 남성에게는 전립선 증상(prostate symptoms)을 유도하는 등의 부작용을 나타낸다. 이에 근감소증 예방, 개선 또는 치료를 위한 신규한 방법에 대한 연구가 필요한 실정이다.

덱사메타손은 암과 같은 여러 질병을 치료하는데 사용되지만, 유비퀴틴-프로테아좀 시스템을 통해 골격근에서 단백질 합성 속도를 감소시키고, 단백질 분해 속도를 증가시켜 근 위축증 또는 근 감소증을 유발한다. 2개의 근육 유비퀴틴 리가아제(ubiquitin ligase)는 Atrogin-1 및 MuRF1과 관련이 있는데, 덱사메타손은 Atrogin-1을 통해 MyoD(myogenic differentiation antigen)를 저하시키고, 이와 같은 기전을 통하여 근육량이 감소하게 된다.

이에, 본 발명자들은 땅콩 새싹 추출물의 생리활성에 대한 연구를 진행하던 중, 우도 땅콩 새싹 추출물이 근감소증을 억제할 수 있음을 확인함에 따라 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 땅콩(Arachis hypogaea L.) 새싹 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 재생용 조성물을 제공하는 것이다.

또한, 본 발명의 목적은 땅콩(Arachis hypogaea L.) 새싹 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 손상 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

또한, 본 발명의 목적은 땅콩(Arachis hypogaea L.) 새싹 추출물을 유효성분으로 포함하는 운동 능력 개선용 조성물을 제공하는 것이다.

아울러, 본 발명의 목적은 땅콩(Arachis hypogaea L.) 새싹 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육량 증대용 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명은 땅콩(Arachis hypogaea L.) 새싹 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 재생용 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 땅콩(Arachis hypogaea L.) 새싹 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 손상 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 땅콩(Arachis hypogaea L.) 새싹 추출물을 유효성분으로 포함하는 운동 능력 개선용 조성물을 제공한다.

아울러, 본 발명은 땅콩(Arachis hypogaea L.) 새싹 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육량 증대용 조성물을 제공한다.

본 발명의 우도 땅콩 추출물은 지질 축적과 고지방/고자당 식이 유발된 근육 약화를 치료하는 것으로서, 우도 땅콩 추출물은 근육 약화된 마우스 모델에 투여시, 약력과 매달리는 능력을 향상시켰으며, 근육 위축 인자인 MuRF-1(Muscle RING-finger protein-1) 및 근육 위축 F-box(MAFbx/Atrogin-1)의 발현을 억제를 확인하였다. 또한, 골격근 세포(C2C12)에서 미토콘드리아 생합성(biogenesis) 및 기능 활성 마커인 페르옥시좀 증식인자 활성화 수용체 감마 공동활성제 1-알파(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha, PGC1-α) 발현을 증가시켜, 골격근 위축을 개선 시키며 미토콘드리아 기능을 활성화 시키는 것을 확인하여, 이와 관련된 사업에 유용하게 사용될 수 있다.

도 1은 각각의 Control군, Dex군, Dex+HFHS군, Dex+HFHS+PSE군을 각 6일동안 복강내 주사 후, 체중 변화를 나타낸 도이다.
(control군:식염수 식이한 마우스 모델, Dex군:덱사메타손(dexamethasone) 만 주사한 마우스 모델, Dex+HFHS군:덱사메타손(dexamethasone)주사 및 HFHS:고자당/고지방(high-fat/high-sucrose diet)를 식이한 마우스 모델, Dex+HFHS+PSE군:덱사메타손(dexamethasone)주사 및 HFHS:고자당/고지방(high-fat/high-sucrose diet)식이 및 우도 땅콩 새싹 추출물(Peanut sprout extracts, PSE)을 식이한 마우스 모델)
도 2는 각각의 Control군, Dex군, Dex+HFHS군, Dex+HFHS+PSE군들의 포도당하부검사(Glucose tolerance test)를 나타낸 도이다.
도 3은 각각의 Control군, Dex군, Dex+HFHS군, Dex+HFHS+PSE군들의 공복 혈당 수치를 나타낸 도이다.
도 4는 각각의 Control군, Dex군, Dex+HFHS군, Dex+HFHS+PSE군들의 혈장 중성지방 함량을 나타낸 도이다.
도 5는 각각의 Control군, Dex군, Dex+HFHS군, Dex+HFHS+PSE군들의 혈장 총 콜레스테롤을 나타낸 도이다.
도 6은 각각의 Control군, Dex군, Dex+HFHS군, Dex+HFHS+PSE군들의 체중대비 앞다리 악력을 나타낸 도이다.
도 7은 각각의 Control군, Dex군, Dex+HFHS군, Dex+HFHS+PSE군들의 뒷다리, 앞다리의 악력정도를 나타낸 도이다.
도 8은 각각의 Control군, Dex군, Dex+HFHS군, Dex+HFHS+PSE군들의 몸무게 대비 악력 유지를 나타낸 도이다.
도 9는 각각의 Control군, Dex군, Dex+HFHS군, Dex+HFHS+PSE군들의 대퇴사두근을 헤마톡실린과 에오신(H&E)염색을 나타낸 도이다.
도 10은 각각의 Control군, Dex군, Dex+HFHS군, Dex+HFHS+PSE군들의 MIPAR 프로그램을 이용하여 대퇴사두근의 근섬유 크기를 나타낸 도이다.
도 11은 각각의 Control군, Dex군, Dex+HFHS군, Dex+HFHS+PSE군들의 비복근에서 근육 위축 인자인 MuRF-1, Atrogin-1, Myogenin의 mRNA 발현량을 나타낸 도이다.
도 12는 각각의 Control군, Dex군, Dex+HFHS군, Dex+HFHS+PSE군들의 비복근에서 MuRF-1, Atrogin-1 및 PGC1-α의 단백질 발현를 나타낸 도이다.
(대조군:GAPDH)
도 13은 각각의 Control군, Dex군, Dex+HFHS군, Dex+HFHS+PSE군들의 염증성 마커인 TNF-α, IL-6 및 IL-1β의 RNA 발현량을 나타낸 도이다.
도 14는 각각의 Control군, Dex군, Dex+HFHS군, Dex+HFHS+PSE군들의 대퇴사두근에서 MuRF-1, Atrogin-1 및 Myogenin의 mRNA 발현량을 나타낸 도이다.
도 15는 골격근 세포(C2C12)에 각각의 Control, Dex+HFHS 및 Dex+HFHS+PSE 처리 시, PGC1-α의 단백질 및 mRNA 발현을 나타낸 도이다.
도 16은 골격근 세포(C2C12)에 우도 땅콩 추출물(PSE)을 처리 시, 세포 생존율을 나타낸 도이다.
도 17은 골격근 세포(C2C12)에 각각의 Control, Dex+HFHS 및 Dex+HFHS+PSE 처리 시, MuRF-1, Atrogin-1 및 PGC1-α의 mRNA 발현를 나타낸 도이다.

이하, 첨부된 도면을 참조하여 본 발명의 구현 예로 본 발명을 상세히 설명하기로 한다. 다만, 하기 구현 예는 본 발명에 대한 예시로 제시되는 것으로, 당업자에게 주지 저명한 기술 또는 구성에 대한 구체적인 설명이 본 발명의 요지를 불필요하게 흐릴 수 있다고 판단되는 경우에는 그 상세한 설명을 생략할 수 있고, 이에 의해 본 발명이 제한되지는 않는다, 본 발명은 후술하는 특허청구범위의 기재 및 그로부터 해석되는 균등 범주 내에서 다양한 변형 및 응용이 가능하다.

또한, 본 명세서에서 사용되는 용어 (terminology)들은 본 발명의 바람직한 실시예를 적절히 표현하기 위해 사용된 용어들로서, 이는 사용자, 운용자의 의도 또는 본 발명이 속하는 분야의 관례 등에 따라 달라질 수 있다. 따라서, 본 용어들에 대한 정의는 본 명세서 전반에 걸친 내용을 토대로 내려져야 할 것이다. 명세서전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함"한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.

본 발명에서 사용되는 모든 기술용어는, 달리 정의되지 않는 이상, 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미로 사용된다. 또한 본 명세서에는 바람직한 방법이나 사료가 기재되나, 이와 유사하거나 동등한 것들도 본 발명의 범주에 포함된다. 본 명세서에 참고문헌으로 기재되는 모든 간행물의 내용은 본 발명에 도입된다.

본 발명에 따른 추출물은 당업계에 공지된 추출 및 분리방법을 사용하여 천연으로부터 추출 및 분리하여 수득한 것을 사용할 수 있으며, 본 발명에서 정의된 "추출물"은 적절한 용매를 이용하여 창출으로부터 추출한 것이며, 예를 들어, 조추출물, 극성용매 가용 추출물 또는 비극성용매 가용 추출물을 모두 포함한다. 상기 창출으로부터 추출물을 추출하기 위한 적절한 용매로는 약학적으로 허용되는 유기용매라면 어느 것을 사용해도 무방하며, 물 또는 유기용매를 사용할 수 있으며, 이에 제한되지는 않으나, 예를 들어, 정제수, 메탄올(methanol), 에탄올(ethanol), 프로판올(propanol), 이소프로판올(isopropanol), 부탄올(butanol) 등을 포함하는 탄소수 1 내지 4의 알코올, 아세톤(acetone), 에테르(ether), 벤젠(benzene), 클로로포름(chloroform), 에틸아세테이트(ethyl acetate), 메틸렌클로라이드(methylene chloride), 헥산(hexane) 및 시클로헥산(cyclohexane) 등의 각종 용매를 단독으로 혹은 혼합하여 사용할 수 있다.

추출 방법으로는 열수추출법, 냉침추출법, 환류냉각추출법, 용매추출법, 수증기증류법, 초음파추출법, 용출법, 압착법 등의 방법 중 어느 하나를 선택하여 사용할 수 있다. 또한, 목적하는 추출물은 추가로 통상의 분획 공정을 수행할 수도 있으며, 통상의 정제 방법을 이용하여 정제될 수도 있다.

본 발명에서 사용되는 용어, "예방"이란, 본 발명에 따른 근육손상 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 개체에 투여하여 근육손상 질환의 발병을 억제하거나 지연시키는 모든 행위를 의미할 수 있다.

본 발명에서 사용되는 용어, "치료"란, 본 발명의 상기 조성물을 근육손상 질환 발병의 의심 개체에 투여하여 근육손상 질환의 증세가 호전되도록 하거나 이롭게 되도록 하 는 모든 행위를 의미할 수 있다.

본 발명에서 사용되는 용어, "개선"은 치료되는 상태와 관련된 파라미터, 예 를 들면 증상의 정도를 적어도 감소시키는 모든 행위를 의미할 수 있다.

본 발명은 땅콩(Arachis hypogaea L.) 새싹 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 재생용 조성물을 제공한다.

일 실시예에 있어서, 상기 추출물은 물, C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 용매로 추출된 것이나, 이에제한되지 않는다.

일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 대사 매개 변수를 유지시는 것이나, 이에 제한되지 않는다.

상기 대사는 체중, 포도당 내성 시험, 공복 혈당 수치, 혈장의 중성지방 함량, 또는 총 콜레스테롤인 것일 수 있다.

일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 근 섬유를 증가시키는 것이나, 이에 제한되지 않는다.

상기 근 섬유는 대퇴사두근, 상완근, 상완이두근, 전완근, 복직근, 대퇴이두근, 박근, 반건양근, 반막양근, 비복근, 외측광근, 내측광근, 지골근, 장두, 내측근등으로 이루어진 군에서 1이상인 것일 수 있다.

일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 근육 신생 및 분화에 관여하는 인자의 발현을 증진시키는 것이나, 이에 제한되지 않는다.

상기 인자는 MuRF-1(Muscle RING-finger protein-1), 아트로진-1(Atrogin-1) 및 미오게닌(Myogenin)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상인 것일 수 있다.

일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 미토콘드리아 생합성(biogenesis) 및 기능 활성 관여하는 인자의 발현을 증진시키는 것이나, 이에 제한되지 않는다.

상기 인자는 PGC1-α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha)인 것일 수 있다.

일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 염증성 인자인 TNF-α, IL-6 및 IL-1β 감소시키는 것이나, 이에 제한되지 않는다.

일 실시예에 있어서, 상기 조성물은 근육 재생으로 인한 악력 및 악력 유지를 증가시키는 것이나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명은 땅콩 새싹 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육 손상 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명의 약학 조성물에는 유효성분 이외에 보조제(adjuvant)를 추가로 포함할 수 있다. 상기 보조제는 당해 기술분야에 알려진 것이라면 어느 것이나 제한 없이 사용할 수 있으나, 예를 들어 프로인트(Freund)의 완전 보조제 또는 불완전 보조제를 더 포함하여 그 면역성을 증가시킬 수 있다.

본 발명에 따른 약학 조성물은 유효성분을 약학적으로 허용된 담체에 혼입시킨 형태로 제조될 수 있다. 여기서, 약학적으로 허용된 담체는 제약 분야에서 통상 사용되는 담체, 부형제 및 희석제를 포함한다. 본 발명의 약학 조성물에 이용할 수 있는 약학적으로 허용된 담체는 이들로 제한되는 것은 아니지만, 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로스, 메틸 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.

본 발명의 약학 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀전, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.

제제화할 경우에는 통상 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 그러한 고형 제제는 유효성분에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면 전분, 칼슘 카르보네이트, 수크로스, 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 일반적으로 사용되는 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수용성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수용성용제, 현탁제로는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브유와 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명에 따른 약학 조성물은 개체에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식이 예상될 수 있는데, 예를 들면 경구, 정맥, 근육, 피하, 복강내 주사에 의해 투여될 수 있다.

상기 약학 조성물은 다양한 경구 또는 비경구 투여 형태로 제형화될 수 있다.

경구 투여용 제형으로는 예를 들면 정제, 환제, 경질, 연질 캅셀제, 액제, 현탁제, 유화제, 시럽제, 과립제 등이 있는데, 이들 제형은 유효성분 이외에 희석제(예: 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로즈 및/또는 글리신), 활택제(예: 실리카, 탈크, 스테아르산 및 그의 마그네슘 또는 칼슘염 및/ 또는 폴리에틸렌 글리콜)를 추가로 포함할 수 있다. 또한, 상기 정제는 마그네슘 알루미늄 실리케이트, 전분 페이스트, 젤라틴, 트라가칸스, 메틸셀룰로즈, 나트륨 카복시메틸셀룰로즈 및/또는 폴리비닐피롤리딘과 같은 결합제를 함유할 수 있으며, 경우에 따라 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨 염과 같은 붕해제 또는 비등 혼합물 및/또는 흡수제, 착색제, 향미제 및 감미제를 함유할 수 있다. 상기 제형은 통상적인 혼합, 과립화 또는 코팅 방법에 의해 제조될 수 있다.

또한, 비경구 투여용 제형의 대표적인 것은 주사용 제제이며, 주사용 제제의 용매로서 물, 링거액, 등장성 생리식염수 또는 현탁액을 들 수 있다. 상기 주사용 제제의 멸균 고정 오일은 용매 또는 현탁 매질로서 사용할 수 있으며 모노-, 디-글리세라이드를 포함하여 어떠한 무자극성 고정오일도 이러한 목적으로 사용될 수 있다.

또한, 상기 주사용 제제는 올레산과 같은 지방산을 사용할 수 있다.

상기 상기 질환은 근육 좌상(muscle strain), 근육 파열(muscle rupture), 근육 열상(muscle tearing), 타박상(contusion), 염좌(distortion), 회전근개 증후근(roator cuff syndrome) 및 근육염(myositis)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 근육 손상 질환인 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명은 땅콩(Arachis hypogaea L.) 새싹 추출물을 유효성분으로 포함하는 운동 능력 개선용 조성물을 제공한다.

본 발명은 땅콩(Arachis hypogaea L.) 새싹 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육량 증대용 조성물을 제공한다.

일 실시예에서, 상기 정서행동장애는 주의력 결핍장애, 과잉행동장애, 대인관계장애, 우울증 장애, 반사회성 장애, 불안증 장애, ADHD(Attention Deficit Hyperactivity Disorder) 장애, 품행장애, 자폐증, 강박 장애, 조현병, 뚜렛 증후군 등에서 이루어진 군에서 하나 이상 선택된 것이나, 이에 제한되지 않는다.

본 발명의 식품 조성물은 유효성분인 추출물을 함유하는 것 외에 통상의 Aa식품 조성물과 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.

상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 향미제는 천연 향미제 (타우마틴), 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제 (사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 본 발명의 식품 조성물은 상기 약학적 조성물과 동일한 방식으로 제제화되어 기능성 식품으로 이용하거나, 각종 식품에 첨가할 수 있다. 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 음료류, 육류, 초코렛, 식품류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 사탕류, 아이스크림류, 알코올 음료류, 비타민 복합제 및 건강보조식품류 등이 있다.

또한 상기 식품 조성물은 유효성분인 추출물 외에 여러 가지 영양제, 비타민, 광물 (전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제 (치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 식품 조성물은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.

본 발명의 기능성 식품 조성물은, 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상, 환 등의 형태로 제조 및 가공될 수 있다. 본 발명에서 '건강기능성 식품 조성물'이라 함은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 말하며, 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능식품은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 식품 첨가물로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전청에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다. 상기 '식품 첨가물 공전'에 수재된 품목으로는 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼슘, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물; 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물; L-글루타민산나트륨 제제, 면류첨가알칼리제, 보존료 제제, 타르색소제제 등의 혼합제제류 등을 들 수 있다. 예를 들어, 정제 형태의 건강기능식품은 본 발명의 유효성분을 부형제, 결합제, 붕해제 및 다른 첨가제와 혼합한 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 다음, 활택제 등을 넣어 압축성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축 성형할 수 있다. 또한 상기 정제 형태의 건강기능식품은 필요에 따라 교미제 등을 함유할 수도 있다. 캅셀 형태의 건강기능식품 중 경질 캅셀제는 통상의 경질 캅셀에 본 발명의 유효성분을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 충진하여 제조할 수 있으며, 연질 캅셀제는 본 발명의 유효성분을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 젤라틴과 같은 캅셀기제에 충진하여 제조할 수 있다. 상기 연질 캅셀제는 필요에 따라 글리세린 또는 소르비톨 등의 가소제, 착색제, 보존제 등을 함유할 수 있다. 환 형태의 건강기능식품은 본 발명의 유효성분과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 성형하여 조제할 수 있으며, 필요에 따라 백당이나 다른 제피제로 제피할 수 있으며, 또는 전분, 탈크와 같은 물질로 표면을 코팅할 수도 있다. 과립 형태의 건강기능식품은 본 발명의 유효성분의 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 입상으로 제조할 수 있으며, 필요에 따라 착향제, 교미제 등을 함유할 수 있다.

본 명세서 전체에 걸쳐, 특정 물질의 농도를 나타내기 위하여 사용되는 '%'는 별도의 언급이 없는 경우, 고체/고체는 (w/w) %, 고체/액체는 (w/v) %, 그리고 액체/액체는 (v/v) %이다.

이하 하기 실시예를 통해 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 그러나 하기 실 시예는 본 발명의 기술적 사상의 내용과 범위를 쉽게 설명하기 위한 예시일 뿐, 이 에 의해 본 발명의 기술적 범위가 한정되거나 변경되는 것은 아니다. 또한 이러한 예시에 기초하여 본 발명의 기술적 사상의 범위 안에서 다양한 변형과 변경이 가능 함은 당업자에 의해 용이하게 결정될 수 있다.

실시예 1. 실험 준비

실시예 1-1. 실험용 화학물질 및 시료 준비

모든 세포 배양 접시와 플라스크는 달리 명시되지 않는 한 SPL(서울, 한국)에서 구입하였다. Dulbecco's Modified Eagle 's Medium (DMEM), 태아 소 혈청 (FBS), 말 혈청 (HS) 및 페니실린 / 스트렙토 마이신 (P/S)은 Gibco (Grand Island, NY, USA)에서 구입하였다. 다른 모든 화학 물질 및 시약들도 달리 명시되지 않는 한 Sigma Chemical Co.(St. Louis, MO, USA)에서 구입하였다. 9일 동안 발아된 우도 땅콩 새싹(Peanut sprouts, PS)은 WooYoung E&T(제주, 대한민국)에서 구매하였고, 건조 후 동결건조된 우도 땅콩 새싹(PS)을 분말화하여 -80℃ 냉동고에 보관하였다. 건조된 우도 땅콩 새싹(PS) 분말 10g을 100mL의 초순수 제조장치인Milli-Q로 수득한 100ml의 물과 함께 가압 열수 추출 방법을 사용하여 혼합하였다. 추출된 샘플을 3000rpm에서 3분 동안 원심분리하고 Whatman® 필터 페이퍼를 사용하여 여과하였다. 분말 추출물을 얻기 위해 여과액을 동결건조하였다. 마지막으로, 얻어진 샘플을 세포 및 동물 실험을 위해 각각 100 mg/mL 농도로 디메틸 설폭사이드(DMSO, Sigma, St. Louis, MO, USA)에 용해시켰다.

본 발명자들은 동물 실험에 사용하기 전에 우도 땅콩 새싹 추출물(Peanut sprout extracts, PSE) 스톡을 인산완충식염수(PBS)로 신선하게 희석하였다.

실시예 1-2. 동물과 식단

6주령 수컷 C57BL/6 마우스는 ORIENT BIO Animal Center(한국 성남시)에서 구입하여 식이와 물을 자유롭게 섭취하면서 12시간 암/광 주기를 유지하였다. 실험 전에 마우스는 경구 위관 영양법으로 1주일 동안 적응기를 가졌으며 모든 동물 실험 및 실험 프로토콜은 제주대학교 동물관리위원회(IACUC)의 승인을 받았으며(2021-0026), 기관 지침에 따라 수행되었다. 8주령 수컷 C57BL/6 마우스에게 10주 동안 식염수 또는 우도 땅콩 새싹 추출물(Peanut sprout extracts, PSE) (10mg/kg 체중(BW))와 함께 저지방 식이(fed low fat diet, LF) 또는 고지방/고당 식이(high-fat/high-sucrose diet, HFHS)를 먹였다. 본 발명의 덱사메타손(Dexamethasone, Dex, 10mg/kg BW)은 6일 동안 복강내 주사에 하여 쥐의 근육 위축을 악화시키기 위해 처리되었다: (ⅰ) 대조군, (ⅱ) Dex (ⅲ) Dex+HFHS 및 (ⅳ) Dex+HFHS+PSE를 마우스 동물모델에 투여하여 실험 하였다. 실험 종료 후 C57BL/6 마우스를 12시간 절식시킨 후 이산화탄소 마취로 희생시켰다. 희생 시킨 마우스로 부터 혈액, 간, 부고환 지방, 대퇴사두근 및 비복근을 수집하였다.

저지방 식단(LF, 11% kcal 지방) 및 고지방식(HF, 60% kcal 지방) 준비는 AIN-93G 식단으로 표 1로 수정되었다. 고자당수(High sucrose water, HS)는 115°C에서 15분 동안 20% 자당수를 고압멸균하여 제조하였다. 체중과 음식 섭취량은 매주 측정하였다.

Ingredients	LF	HF
	g/kg	g/kg
Casein	200	200
l-Cysteine	3	3
Sucrose	0	69
Corn starch	600	0
Maltodextrin 10	50	125
Lard	10	245
Cholesterol	0	2
Soybean oil	39	39
Cellulose	50	50
Mineral mix	35	35
Calcium phosphate	4	4
Vitamin mix	10	10
Choline bitartrate	2	2
Total	1003	784
	kcal (%)	kcal (%)
Carbohydrate	67.8	19.8
Protein	20.9	19.3
Fat	11.3	60.8

실시예 1-3. 포도당부하검사(Glucose tolerance test, GTT) 분석

실험 동물은 실험 9주차에 포도당부하검사(GTT)를 하였다. 마우스를 12시간 절식시킨 후 10% D-glucose 용액(1g/kg BW)을 복강내 주사하였다. 혈당 수치를 측정하기 위해 혈당 측정기(Contour plus, BAYER)를 0, 15, 30, 60 및 120분에 사용하였다.

실시예 1-4. 혈장 생화학(Plasma biochemistry)

실험이 완료된 후 혈청 생화학을 결정하기 위해 희생된 마우스의 심장 천자에서 혈액을 수집하였다. 채혈한 혈액에 헤파린을 넣고 10,000rpm에서 10분간 원심분리하여 혈장을 얻었고, 혈장 중성지방(TG, mg/dL) 및 총 콜레스테롤(TC, mg/dL)의 농도는 분광광도계를 효소 분석 키트(아산제약, 서울, 한국)를 사용하여 각각OD 500, 550nm에서 흡광도에 따라 제조 프로토콜에 따라 측정하였다.

실시예 1-5. 행잉 테스트 및 악력 테스트(Hanging test and grip strength test)

실험 10주차에 Grip Strength Meter(Ugo-Basile)로 쥐의 악력을 측정하였다. 앞다리의 악력은 3회 측정하여 가장 큰 값을 사용하였으며 앞다리와 뒷다리를 합하여 측정하였을 때도 동일하게 적용하였다.

행잉 테스트(Hanging test)는 마우스가 스스로 철망을 잡고 있게 한 후 철망을 뒤집어 놓았을 때 마우스의 철망에 매달려 있는 지속 시간을 측정하였다. 이 실험은 각 마우스는 최소 3번 이상 측정하였으며 가장 큰 값을 사용하였다.

실시예 1-6. 헤마톡실린 및 에오신(H&E) 염색 및 지방세포, 지방증 및 근섬유 크기 정량화

부검시 부고환 지방, 간 및 대퇴사 두근을 마우스에서 분리하고 10 % 포르말린 완충액으로 플래시 고정하였다. 파라핀 내장된 조직을 5-7 μm 섹션으로 절단하고 헤마톡실린 및 에오신(H&E)으로 염색하였다. 브라이트 필드 이미지(Bright-field image)는 10x, 20x 배율에서 Invitrogen 현미경(Invitrogen™ EVOS™ FL Digital Inverted Fluorescence Microscope, Invitrogen, CA, USA)으로 캡처하였다.

부고환 지방 조직의 H&E 염색은 지방 세포 크기를 측정하기 위해 정량화되었다. 지방세포 크기의 정량적 분석을 위해 NIH(National Institutes of Health)의 Image J 및 Adiposoft를 사용하였다. MIPAR 소프트웨어(MIPARTM, Worthington, OH, USA)는 H&E 염색 간 조직의 지방증 정량화 및 H&E 염색 대퇴사두근의 근육 섬유 정량화 하는데 사용되었다.

실시예 1-7. 세포배양

골격근세포인, C2C12 근아세포(myoblast cell)(American Type Culture Collection(ATCC), Manassas, VA, USA)를 1% P/S가 포함된 DMEM에서 10% FBS를 함유하는 기본 배지에서 배양하였다. C2C12 근아세포가 80-90% 융합에 도달한 후(0일째라고 함), 성장 배지를 1% P/S를 갖는 DMEM에서 2% HS를 함유하는 분화 배지로 교체하여 세포를 근관으로 분화시켰다. 이후, 격일로 배지를 교체하면서 세포를 최대 4-6일 동안 유지하였다.

실시예 1-8. 세포 생존율 분석

골격근 세포(C2C12)에 대한 우도 땅콩 새싹 추출물(Peanut sprout extracts, PSE)의 세포독성 효과를 알아보기 위해 EZ-cytox Cell Viability assay kit(Daeil Lab Service Co Ltd, Seoul, Korea)를 사용하여 측정하였고 제조사의 프로토콜을 따랐다.

골격근 세포(C2C12)는 성장 배지에서 대략 20,000개 세포/웰의 파종 밀도로 96-웰 플레이트에서 배양되었다. 세포를 DMSO 또는 다른 농도의 우도 땅콩 새삭 추출물(PSE)과 함께 24시간 동안 인큐베이션하였다. 그 후, 세포를 10% EZ-cytox 용액을 함유한 새로운 배지로 교체하고 37℃에서 인큐베이션하였다. 플레이트는 30분 에서 4시간 동안 마이크로플레이트 리더를 사용하여 OD 450nm에서 측정하였다.

실시예 1-9. 실시간 중합효소연쇄반응(실시간 PCR)에 의한 mRNA 분석

근육과 세포의 total RNA는 Trizol 시약(Invitrogen)으로 추출하였다.

mRNA는 잠재적인 게놈 DNA 오염을 제거하기 위해 DNase(Mediatech)를 처리하였다. RNA 농도는 cDNA 합성 전에 Nanodrop(Nano-200 Micro-Spectrophotometer, Hangzhou City, China)으로 측정하였다. cDNA는 iScript cDNA 합성 키트(Biorad, Hercules, CA, USA)로 합성되었다. 유전자 발현은 실시간 qPCR(CFX96™ Real-Time PCR Detection System, Bio-Rad, CA, USA)에 의해 결정되었다. 히포크산틴포스포리보실전달효소(hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase, HPRT) 및/또는 리보솜 단백질 가로줄기 서브유닛(ribosomal protein lateral stem subunit P0) (RPLP0/36B4)는 상대적인 유전자 발현을 표준화하는데 사용되었다.

qPCR을 위한 유전자 특이적 프라이머(표 2)는 Cosmo Genetech(서울, 한국)에서 구입하였다.

Gene	Forward	Reverse
mIl-6	CTGCAAGAGACTTCCATCCAGTT	AGGGAAGGCCGTGGTTGT
mTnfα	GGCTGCCCCGACTACGT	ACTTTCTCCTGGTATGAGATAGCAAAT
m36b4	GGATCTGCTGCATCTGCTTG	GGCGACCTGGAAGTCCAACT
mHprt	TTGCTCGAGATGTCATGAAGGA	AGCAGGTCAGCAAAGAACTTATAGC
mMuf1-1	AGTGTCCATGTCTGGAGGTCGTTT	ACTGGAGCACTCCTGCTTGTAGAT
mAtrogin-1	GAGGCAGATTCGCAAGCGTTTGAT	TCCAGGAGAGAATGTGGCAGTGTT
mMyogenin	CTACAGGCCTTGCTCAGCTC	AGATTGTGGGCGTCTGTAGG
mPgc1-α	CCCTGCCATTGTTAAGACC	TGCTGCTGTTCCTGTTTTC
mIl-1β	AAATACCTGTGGCCTTGGGC	CTTGGGATCCACACTCTCCAG

실시예 1-10. 단백질 분리 및 웨스턴 블로팅

조직 샘플을 수확하고 프로테아제 및 포스파타제 억제제 홉합제가 포함된 RIPA(ice-col radioimmunoprecipitation) 분석 용해 완충액에서 균질화기로 균질화하였다. C2C12 세포를 프로테아제 및 포스파타제 억제제를 함유하는 얼음처럼 차가운 RIPA 분석 용해 완충액으로 긁어냈다. 그 후, 10,000 rpm, 4℃에서 10분간 원심분리하여 상층액을 모은 후, 8-10% SDS-PAGE를 사용하여 10-15 μg의 단백질을 분리하고 단백질을 Tris-buffered saline/Tween 20이 있는 PVDF(polyvinylidene difluoride) 멤브레인(Thermo Fisher Scientific, MA, USA)으로 옮기고 실온에서 1시간 동안 빛을 차단하였다. 막(membrane)을 Tris-buffered saline with tween 20(TBST) 용액으로 여러 번 세척하고, 근육 위축 F-box(MAFbx/Atrogin-1), 근육 특이적 링 핑거 단백질 근육 특이적 링 핑거 단백질 (Muscle specific RING finger protein, MuRF1) (Santa Cruz biotechnology, CA, USA), 글리세르알데히드-3-인산 수소 이탈 효소(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase GAPDH), β-엑틴(β-Actin)(Cell signaling Technology, Danvers, MA, USA), 산화적 인산화(oxidative phosphorylation, OXPHOS)(Abcam, Cambridge, MA, USA) 및 페르옥시좀 증식인자 활성화 수용체 감마 공동활성제 1-알파(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha, PGC1-α) (Novus biologicals)에 대한 1차 항체로 4℃에서 밤새 반응시켰다. 다음달, 막(membrane)을 1X TBST로 여러 번 세척하고 2차 항체, 염소 항토끼(Cell signaling Technology, Danvers, MA, USA) 또는 염소 항마우스 IgG-HRP(Santa Cruz biotechnology, CA, USA)와 함께 1시간 동안 인큐베이션하였다. 막을 세척하고 ECL(Enhanced chemiluminescence) 시약(PerkinElmer, Waltham, MA, USA)으로 반응시켰다. 밴드를 확인하기 위해 ChemiDoc MP(Bio-Rad, CA, USA)를 사용하였고, Image Lab(Bio-Rad, CA, USA) 또는 Image J(NIH, MD, USA)를 이용하여 발현 정도를 계산하였다.

실시예 1-11. 통계 분석

실험 결과는 평균 ± 평균의 표준 오차(SEM)로 표시되었다. Bonferroni의 다중 비교 테스트 또는 학생 t-테스트와 함께 ANOVA(일방향 분산 분석)를 사용하여 통계 계산을 수행하였다. p-값 <0.05는 통계적으로 유의한 것으로 간주되었다. 모든 분석은 GraphPad Prism 8.02.263(La Jolla, California., USA)으로 수행하였다.

실시예 2. 본 발명의 우도 땅콩 새싹 추출물(PSE)의 대사 매개변수에 영향 확인

우도 땅콩 새싹 추출물(PSE)이 대사(metabolic)에 영향을 미치는지 알아 보기 위해, 8주령 수컷 C57BL/6 마우스에 1)식염수(control) 투여 군, 2)저지방 식이(LF)군, 3)덱사메타손(Dex)만 주사한 군, 4)고지방/고당(HFHS) 식이+덱사메타손(Dex)군, 5)고지방/고당(HFHS)식이+덱사메타손(Dex)+우도 땅콩 새싹 추출물(PSE)군을 두고, 각 10주 동안 식이하여, 대사의 변화를 알아 보았다. 모든 Dex 투여군은 지난 6일 동안 복강 내 주사로 투여하였다.

표 3에 나와있듯이, Control 그룹은 HFHS+Dex 그룹보다 더 높은 음식 섭취량과 kcal 섭취를 나타냈다. 또한, 10주 동안 그룹 간에 마우스의 체중과 체중 증가에는 유의한 차이가 없음을 확인하였고(도 1), 포도당 부하 테스트(도 2), 공복 혈당(도 3), 부고환 지방 중량, 간 중량 및 근육 중량에는 유의한 차이가 없음을 확인하였다(표 3). 중성지방과 총 콜레스테롤 수치는 고지방/고당(HFHS) 식이+덱사메타손(Dex)군보다 고지방/고당(HFHS) 식이+덱사메타손(Dex)+우도 땅콩 새싹 추출물(PSE)군에서 감소하는 것을 확인하였다(도 4,도 5).

Group	Control	Dex	HFHS+Dex	HFHS+Dex+PSE	p-value
Diet intake
Food intake (g/mouse/day)	4.03±0.27b	4.63±0.11a	1.29±0.07c	1.15±0.11c	<0.0001
Sucrose drink intake (g/mouse/day)	-	-	7.97±0.60	8.48±0.74	n.s.
Total kcal intake (kcal/mouse/day)	15.65±1.03b	17.98±0.44a	12.67±0.56c	12.29±0.72c	<0.0001
Phenotypes
BW (g)	32.0±1.13	30.5±0.52	31.9±0.90	31.2±1.63	n.s.
BWG (g)	9.10±1.22	11.60±0.77	13.56±1.20	12.56±2.22	n.s.
Muscle (g)	0.61±0.03	0.54±0.02	0.58±0.02	0.52±0.02	n.s.
Muscle/BW (%)	1.00±0.04	0.94±0.04	0.96±0.03	0.90±0.06	n.s.
Liver (g)	1.05±0.05b	1.55±0.06a	1.55±0.07a	1.57±0.08a	<0.0001
Liver/BW (%)	1.00±0.05b	1.55±0.05a	1.48±0.06a	1.53±0.02a	<0.0001
Epididymal fat (g)	0.99±0.12	0.91±0.08	1.15±0.13	1.21±0.22	n.s.
Epididymal fat/BW (%)	1.00±0.09	0.98±0.09	1.17±0.12	1.22±0.16	n.s.
Blood Chemistry
Triglyceride (mg/dL)	128.50±10.56c	278.25±22.63b	233.92±20.39a	228.69±14.17ab	<0.0001
Total Cholesterol (mg/dL)	223.83±34.24c	350.17±14.14a	401.94±23.31b	379.43±24.76b	<0.0001

실시예 3. 우도 땅콩 새싹 추출물(Peanut sprout extracts, PSE)의 운동 능력을 개선 확인

우도 땅콩 새싹 추출물(PSE)이 운동능력을 개선에 영향을 미치는지 알아 보기 위해, 8주령 수컷 C57BL/6 마우스에 1)식염수(control) 투여 군, 2)저지방 식이(LF)군, 3)덱사메타손(Dex)만 주사한 군, 4)고지방/고당(HFHS) 식이+덱사메타손(Dex)군, 5)고지방/고당(HFHS)식이+덱사메타손(Dex)+우도 땅콩 새싹 추출물(PSE)군을 두고, 각 10주 동안 식이하여, 마우스 모델들의 악력시험과 매달리기 시험으로 평가 하였다.

그 결과, 덱사메타손(Dex)만 주사한군과 비교하여, 고지방/고당(HFHS) 식이+덱사메타손(Dex)군에서 앞다리 뒷다리에 악력 강도가 유의적으로 약해졌음을 확인하였다(도 6,도 7). 또한, 매달리기 테스트(hanging test) 또한, 고지방/고당(HFHS) 식이+덱사메타손(Dex)군 낮아졌으나, 고지방/고당(HFHS) 식이+덱사메타손(Dex)+우도 땅콩 새싹 추출물(PSE)을 군에서 앞다리 뒷다리의 그립 강도가 유의적으로 높아졌음을 확인하였으며, 매달리기 테스트(hanging test) 능력 즉 악력 유지 향상됨을 확인 하였다(도 8).

따라서, 각각의 마우스 모델을 희생시켜 대퇴사두근을 헤마톡실린과 에오신(H&E)으로 염색한 뒤(도 9), MIPAR 프로그램을 이용하여 대퇴사두근의 근섬유 크기를 측정한 결과 우도 땅콩 새싹 추출물(Peanut sprout extracts, PSE)을 같이 처리한 군에서 근 섬유가 회복된 것을 확인 하였다(도 10).

실시예 4. 우도 땅콩 새싹 추출물(Peanut sprout extracts, PSE)의 골격근 위축 개선 효과

우도 땅콩 새싹 추출물(PSE)이 골격근 위축을 개선시키는지 알아 보기 위하여, 8주령 수컷 C57BL/6 마우스에 1)식염수(control) 투여 군, 2)저지방 식이(LF)군, 3)덱사메타손(Dex)만 주사한 군, 4)고지방/고당(HFHS) 식이+덱사메타손(Dex)군, 5)고지방/고당(HFHS)식이+덱사메타손(Dex)+우도 땅콩 새싹 추출물(PSE)군을 두고, 각 10주 동안 식이하여, 마우스 모델들의 근육 위축인자, 미토콘드리아 생성 마커 및 염증 마커를 확인 하였다.

그 결과, 고지방/고당(HFHS) 식이+덱사메타손(Dex)+우도 땅콩 새싹 추출물(PSE)군 에서, 종아리 뒤쪽의 두갈래로 갈라진 근육인 비복근(gastrocnemius)의 근육 위측 인자인 MuRF1 및 Atrogin1 단백질 및 mRNA 발현 수준이 덱사메타손(Dex) 군 및 고지방/고당(HFHS) 식이+덱사메타손(Dex) 군에 비해 억제된 것을 확인하였으며(도 11,도 12), 염증 마커인 TNF-α, IL-6 및 IL-1β의 mRNA 발현은 고지방/고당(HFHS) 식이+덱사메타손(Dex)군 보다 고지방/고당(HFHS) 식이+덱사메타손(Dex)+우도 땅콩 새싹 추출물(PSE)군에서 억제된 것을 확인 하였다(도 13).

또한, 대퇴사두근에서 위축 유전자인 MuRF-1(Muscle RING-finger protein-1), 아트로진-1(Atrogin-1), 미오게닌(Myogenin)의 mRNA 발현 수준은 고지방/고당(HFHS) 식이+덱사메타손(Dex)군 보다 고지방/고당(HFHS) 식이+덱사메타손(Dex)+우도 땅콩 새싹 추출물(PSE)군에서 감소하는 되었으며(도 14), PGC1-α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha) 발현을 증가시키는 것을 확인하였다(도 15).

또한, 우도 땅콩 새싹 추출물(PSE)을 농도별로 골격근 세포(C2C12)에 처리시, 우도 땅콩 새싹 추출물 200 ug/ml에 농도에서 세포 독성 나타났으나, 그 외 농도에서는 세포 생존률에 영향이 없음을 확인하였다(도 16). 또한, 덱사메타손(Dex) 단독 처리 군과, 덱사메타손(Dex)+우도 땅콩 새싹 추출물(PSE) 처리군과 비교하여 근육 위축 유전자인 MuRF-1, Atrogin-1 발현은 감소하였다. 또한, 미토콘드리아 생합성 및 기능 활성 유전자인 PGC1-α의 mRNA 발현을 증가시킨 것을 확인하였다(도 17).

이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본 질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관 점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으 로 해석되어야 할 것이다.

Claims (16)

1. 땅콩(Arachis hypogaea L.) 새싹 열수 추출물을 유효성분으로 포함하며 근육을 재생시키는, 근육 좌상(muscle strain), 근육 파열(muscle rupture), 근육 열상(muscle tearing), 타박상(contusion), 염좌(distortion), 회전근개 증후근(roator cuff syndrome) 및 근육염(myositis)으로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 근육 손상 질환의 예방 또는 치료용 약학적 조성물.
2. 삭제
3. 제 1항에 있어서,
   상기 조성물은 체중, 포도당 내성 시험, 공복 혈당 수치, 혈장의 중성지방 함량 및 총 콜레스테롤로 이루어진 군으로부터 선택된 하나 이상의 대사 매개 변수를 유지시키는 것인, 조성물.
4. 삭제
5. 제 1항에 있어서,
   상기 조성물은 근 섬유를 증가시키는 것인, 조성물.
6. 제 5항에 있어서,
   상기 근 섬유는 대퇴사두근, 상완근, 상완이두근, 전완근, 복직근, 대퇴이두근, 박근, 반건양근, 반막양근, 비복근, 외측광근, 내측광근, 지골근, 장두, 내측근등으로 이루어진 군에서 1이상인 것인, 조성물.
7. 제 1항에 있어서,
   상기 조성물은 MuRF-1(Muscle RING-finger protein-1), 아트로진-1(Atrogin-1) 및 미오게닌(Myogenin)으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상의 근육 신생 및 분화에 관여하는 인자의 발현을 증진시키는 것인, 조성물.
8. 삭제
9. 제 1항에 있어서,
   상기 조성물은 미토콘드리아 생합성(biogenesis) 및 기능 활성에 관여하는 인자인 PGC1-α(peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-alpha)의 발현을 증진시키는 것인, 조성물.
10. 삭제
11. 제 1항에 있어서,
    상기 조성물은 염증성 인자인 TNF-α, IL-6 및 IL-1β 감소시키는 것인, 조성물.
12. 제 1항에 있어서,
    상기 조성물은 근육 재생으로 인한 악력 및 악력 유지를 증가시키는 것인, 조성물.
13. 삭제
14. 삭제
15. 땅콩(Arachis hypogaea L.) 새싹 열수 추출물을 유효성분으로 포함하는 운동 능력 개선용 식품 조성물.
16. 땅콩(Arachis hypogaea L.) 새싹 열수 추출물을 유효성분으로 포함하는 근육량 증대용 식품 조성물.