KR102574601B1 - 티트리 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조방법 및 이로부터 제조된 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 티트리 원료를 세척하는 단계, 상기 세척된 티트리 원료에 1차 용매로 정제수를 투입 후, 마이크로웨이브를 조사하여 1차 추출물을 얻는 단계, 상기 1차 추출물에 유산균 및 2차 용매로 다가 알코올계 화합물을 투입하여 혼합물을 제조하는 단계, 상기 혼합물을 발효하여 2차 추출물을 얻는 단계, 상기 발효된 2차 추출물을 저온 멸균 및 여과하여 티트리 추출물을 수득하는 단계 및 상기 수득된 티트리 추출물과 정제수, 글리세린, 프로판디올, 1,2-헥산디올, 잔탄검, 부틸렌글라이콜, 판테놀, 트레할로스, 베타인, 카보머, 알란토인, 폴리글리세릴-10 라우레이트, 알지닌, 디소듐이디티에이, 디포타슘글리시리제이트 및 토코페릴아세테이트로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합하여 화장료 조성물을 제조하는 단계를 포함하는 티트리 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조방법 및 이로부터 제조된 화장료 조성물을 제공한다.

Description

티트리 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조방법 및 이로부터 제조된 화장료 조성물{PREPARATION METHOD OF COSMETIC COMPOSITION COMPRISING TEA TREE EXTRACTS AND COSMETIC COMPOSITION PREPARED THEREOF}

본 발명은 티트리 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조방법 및 이로부터 제조된 화장료 조성물에 관한 것이다.

천연물에 포함되는 티트리는 오일의 형태로 증류하여 사용하는 경우가 많은데, 항균성과 항진균성 등의 효능으로 상처 소독제, 여드름 진정제, 무좀 치료제, 호흡기 질환 치료제 등으로 알려져 있다.

티트리(Melaleuca alternifolia)는 도금양목 도금양과에 속하는 상록교목이며, 늪지대에서 자라는 티트리는 줄기를 잘라내도 잘 자랄 만큼 생명력이 강하다. 티트리는　신선한 차를 찾던 도중 호주와 뉴질랜드 해안 일대에서 발견되었으며, 티트리 나무 주변의 물이 붉은 갈색으로 변해있어 홍차와 비슷하다고 생각하여 차로 마시기 시작하여 tea tree라는 이름의 유래가 되었다.

티트리로부터 추출되는 추출물은 통칭하여 에센셜 오일로 불리며, 종래 에센셜 오일의 추출은 대부분 증류추출법이나 용매추출법을 통해 제조하였다. 이와 같이 이루어진 종래 추출방법은 열을 가하는 방법이 사용되어왔다.

통상적으로 에센셜 오일은 휘발성이 큰 물질들로 이루어져 있어서, 추출 후 활성물질과 용매(정제수 또는 유기용매)를 분리하는 과정에서 유효성분이 휘발되어 추출량과 유효성분이 줄어드는 단점이 있다. 또한, 분리하는 과정에서 잔존 폐기물과 유기용매가 잔류하는 문제점이 있고 오일 향과 유효성분이 파괴되는 단점이 있었다.

국내특허공개 제2018-0051821호

본 발명이 해결하고자 하는 과제는 높은 추출 효율로 확보된 티트리 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조방법 및 이의 제조방법에 의해 제조된 티트리 추출물을 포함하는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

상기 과제를 해결하기 위하여 본 발명은 티트리 원료를 세척하는 단계, 상기 세척된 티트리 원료에 1차 용매로 정제수를 투입 후, 마이크로웨이브를 조사하여 1차 추출물을 얻는 단계, 상기 1차 추출물에 유산균 및 2차 용매로 다가 알코올계 화합물을 투입하여 혼합물을 제조하는 단계, 상기 혼합물을 발효하여 2차 추출물을 얻는 단계, 상기 발효된 2차 추출물을 저온 멸균 및 여과하여 티트리 추출물을 수득하는 단계 및 상기 수득된 티트리 추출물과 정제수, 글리세린, 프로판디올, 1,2-헥산디올, 잔탄검, 부틸렌글라이콜, 판테놀, 트레할로스, 베타인, 카보머, 알란토인, 폴리글리세릴-10 라우레이트, 알지닌, 디소듐이디티에이, 디포타슘글리시리제이트 및 토코페릴아세테이트로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합하여 화장료 조성물을 제조하는 단계를 포함하는 티트리 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조방법 및 이의 제조방법에 의해 제조된 티트리 추출물을 포함하는 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 티트리 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조방법을 이용하면, 티트리 원료로부터 확보된 플라보노이드 유도체 화합물을 고함량으로 함유할 수 있고, 티트리 원료의 추출 과정 중 발생되는 산화물인 p-사이멘(p-Cymene) 화합물을 최소한으로 함유하는 화장료 조성물을 제조할 수 있다.

이하, 본 발명의 다양한 실시예가 첨부된 도면을 참조하여 기재된다. 본 발명은 특정 실시예에 대해 한정되지 아니며, 본 발명의 실시예들의 다양한 변경(Modification), 균등물(Equivalent) 및/또는 대체물(Alternative)을 포함하는 것으로 이해되어야 한다. 도면의 설명과 관련하여, 유사한 구성요소에 대해서는 유사한 참조 부호가 사용될 수 있다.

본 문서에서, "가진다", "가질 수 있다", "포함한다", 또는 "포함할 수 있다" 등의 표현은 해당 특징(예: 수치, 기능, 동작, 또는 부품 등의 구성요소)의 존재를 가리키며, 추가적인 특징의 존재를 배제하지 않는다.

본 문서에서, "A 또는 B", "A 또는/및 B 중 적어도 하나", 또는 "A 또는/및 B 중 하나 또는 그 이상" 등의 표현은 함께 나열된 항목들의 모든 가능한 조합을 포함할 수 있다. 예를 들면, "A 또는 B", "A 및 B 중 적어도 하나", 또는 "A 또는 B 중 적어도 하나"는, (1) 적어도 하나의 A를 포함, (2) 적어도 하나의 B를 포함, 또는 (3) 적어도 하나의 A 및 적어도 하나의 B 모두를 포함하는 경우를 모두 지칭할 수 있다.

본 문서에서 사용된 표현 "~하도록 구성된(또는 설정된)(Configured to)"은 상황에 따라, 예를 들면, "~에 적합한(Suitable for)", "~하는 능력을 가지는(Having the capacity to)", "~하도록 설계된(Designed to)", "~하도록 변경된(Adapted to)", "~하도록 만들어진(Made to)", 또는 "~를 할 수 있는(Capable of)"과 바꾸어 사용될 수 있다. 용어 "~하도록 구성(또는 설정)된"은 "특별히 설계된(Specifically designed to)"것 만을 반드시 의미하지는 않는다.

본 문서에서 사용된 용어들은 단지 특정한 실시예를 설명하기 위해 사용된 것으로, 다른 실시예의 범위를 한정하려는 의도가 아닐 수 있다. 단수의 표현은 문맥상 명백하게 다르게 뜻하지 않는 한, 복수의 표현을 포함할 수 있다. 기술적이거나 과학적인 용어를 포함해서 여기서 사용되는 용어들은 본 문서에 기재된 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에 의해 일반적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 가질 수 있다. 본 문서에 사용된 용어들 중 일반적인 사전에 정의된 용어들은 관련 기술의 문맥 상 가지는 의미와 동일 또는 유사한 의미로 해석될 수 있으며, 본 문서에서 명백하게 정의되지 않는 한, 이상적이거나 과도하게 형식적인 의미로 해석되지 않는다. 경우에 따라서, 본 문서에서 정의된 용어일지라도 본 문서의 실시예들을 배제하도록 해석될 수 없다.

본 문서에 개시된 실시예는 개시된, 기술 내용의 설명 및 이해를 위해 제시된 것이며, 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다. 따라서, 본 문서의 범위는, 본 발명의 기술적 사상에 근거한 모든 변경 또는 다양한 다른 실시예를 포함하는 것으로 해석되어야 한다.

이하, 본 발명의 바람직한 실시 예를 상세히 설명하기로 한다. 이에 앞서, 본 명세서 및 청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 아니 되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.

따라서, 본 명세서에 기재된 실시예의 구성은 본 발명의 가장 바람직한 일부 실시예에 불과할 뿐이고 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원시점에 있어서 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다.

명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함"한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.

이하에서는 본 발명에 대하여, 구체적으로 설명한다.

본 발명의 일 실시예에 따른 티트리 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조방법은, 티트리 원료를 세척하는 단계, 상기 세척된 티트리 원료에 1차 용매로 정제수를 투입 후, 마이크로웨이브를 조사하여 1차 추출물을 얻는 단계, 상기 1차 추출물에 유산균 및 2차 용매로 다가 알코올계 화합물을 투입하여 혼합물을 제조하는 단계, 상기 혼합물을 발효하여 2차 추출물을 얻는 단계, 상기 발효된 2차 추출물을 저온 멸균 및 여과하여 티트리 추출물을 수득하는 단계, 및 상기 수득된 티트리 추출물과 정제수, 글리세린, 프로판디올, 1,2-헥산디올, 잔탄검, 부틸렌글라이콜, 판테놀, 트레할로스, 베타인, 카보머, 알란토인, 폴리글리세릴-10 라우레이트, 알지닌, 디소듐이디티에이, 디포타슘글리시리제이트 및 토코페릴아세테이트로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합하여 화장료 조성물을 제조하는 단계를 포함한다. 이하에서는 각 단계에 대하여 상세하게 설명한다.

상기 티트리 원료를 세척하는 단계는, 자연으로부터 채취된 티트리 원료 이외 물질들을 제거하고, 생물학적·화학적 위해요소를 식품분야에서 요구하는 허용 수준까지 감소시키기 위해 수행되는 것으로, 예를 들면 티트리 원료를 흐르는 물에 세척하여 수행될 수 있다.

또한, 이후의 추출 과정을 보다 효과적으로 수행하기 위하여 절단, 건조 과정을 추가로 수행할 수 있다.

절단과정은 건조 시의 티트리 원료의 표면적을 넓혀서 건조 효율 및 추출 효율을 상승시키기 위해 수행되는 것으로, 상기 세척된 티트리 원료를 2 내지 3㎝의 크기로 절단하는 것이다.

건조과정은 티트리 원료에 함유된 수분량을 낮춰서 미생물의 대사를 억제하고 저장성을 좋게 하기 위하여 건조하는 것으로, 예를 들면, 건조기를 사용하여 티트리 원료를 건조할 수 있다.

상기 세척된 티트리 원료에 1차 용매로 정제수를 투입 후, 마이크로웨이브를 조사하여 1차 추출물을 얻는 단계는, 추출 과정 중 발생되는 산화물인 p-사이멘(p-Cymene) 화합물의 발생을 최소화하면서 목적하는 중간 화합물인 α-terpinene, γ-terpinene을 높은 수율로 확보하기 위한 것이다.

상기 마이크로웨이브 조사에 이용되는 마이크로파는 전자기 에너지 중 낮은 주파수를 가진 에너지의 한 형태이다. 마이크로파는 센티파라고도 하며, 그 파장이 센티미터 단위(cm)인 전자파의 일종이다. 주파수 범위로서는 300 내지 300,000 MHz일 수 있다. 또한, 마이크로파는 광속 (300,000 km/s)으로 전파되며, 이 때의 마이크로파 광자 에너지(0.037 kcal/mol)는 분자간의 결합을 끊을 수 있는 전형적인 에너지(80 내지 120 kcal/mol)에 비해서는 상대적으로 매우 낮기 때문에 분자의 구조에는 영향을 미치지 않고, 분자의 전자 스핀을 들뜬 상태로 유도할 수 있다. 상술한 마이크로파의 특성을 본 발명에 이용하면 분자의 운동으로 인해 티트리 원료의 분자 주위에 마이크로 버블을 형성시키고, 계면장력을 낮추어 줄 수 있어서 추출효율을 극대화할 수 있다.

마이크로 웨이브 조사는 가압 하에서, 예를 들면 1 기압 내지 100 기압의 압력 하에서 수행되는 것일 수 있다. 마이크로웨이브 출력은 특별히 한정되는 것은 아니며, 반응물의 양에 따라 적절히 증감될 수 있고 예를 들어 500 내지 1000W가 사용될 수 있다. 바람직하게는, 마이크로웨이브의 출력은 850 내지 1000W가 사용될 수 있다. 보다 바람직하게는, 마이크로웨이브의 출력은 900 내지 1000W가 사용될 수 있다.

마이크로웨이브 조사는 100℃ 내지 150℃에서 수행될 수 있다. 또한, 마이크로웨이브 조사는 30 분 내지 90 분 동안 수행할 수 있다.

상기 마이크로웨이브 조사 시에는 티트리 원료를 그대로 사용할 수도 있고, 티트리 원료의 건조물 또는 동결 건조물을 이용할 수도 있다. 일 구체예에서, 마이크로웨이브 조사는 티트리 원료 및 정제수를 포함하는 용액에 대하여, 30분 내지 90 분 동안, 100 내지 150℃의 온도로, 1 기압 내지 100기압에서 수행되는 것일 수 있다.

상기 마이크로웨이브 조사 시 용매로서 정제수를 공급하여 마이크로웨이브에 의해 티트리 원료 내외부를 전체적으로 가열하고, 가열된 수증기를 냉각 응축하여 추출용기로 반복 순환시키는 상온 상압의 증숙 과정에 의해 1차 추출물을 형성한다.

특히, 본 발명의 일 실시예에 의하면, 정제수 내에 배치된 티트리 원료에 직접적으로 마이크로웨이브의 에너지가 전달될 수 있으므로, 종래의 열수 추출법과 같이 용매를 가열하고 가열된 용매의 에너지가 티트리 원료로 전달되는 간접적인 에너지 전달 경로를 보다 간소화할 수 있다. 이 때문에, 티트리 원료 내에 마이크로웨이브의 에너지가 직접 전달되어 추출 효율이 증대될 수 있다.

마이크로웨이브는 1mm 내지 1m의 파장으로서 분광학적으로 상대적으로 긴 파장대에 속한다. 상대적으로 긴 파장이 티트리 원료에 조사되었을 때, 티트리 원료의 내부까지 침투가 가능하여 보다 효과적으로 추출물을 확보할 수 있다. 구체적으로, 티트리를 구성하는 입자의 내부는 실온에서 원자의 전자 스핀이 바닥상태(ground state)에 있다가, 긴 파장으로부터 흡수되는 에너지를 얻어 들뜬 상태(excited state)가 될 수 있다. 단순히 표면에 열을 가하는 열수 추출법과 달리 긴 파장을 이용하는 경우 원료 내부까지 침투된 에너지로 인하여 보다 높은 효율로 목적하는 추출물을 획득할 수 있고, 열수 추출법에 소요되는 시간보다 짧은 시간만으로도 효과적으로 목적하는 추출물을 획득할 수 있어 티트리 원료가 열에 노출되는 시간을 최소할 수 있다.

티트리 원료의 목적하는 추출물로서는 α-terpinene, γ-terpinene 화합물을 포함할 수 있는데, 상기 화합물은 대기중의 산소, 빛, 습도 및 높은 온도에 노출되어 산화될 수 있고, 이 경우 α-terpinene, γ-terpinene 화합물은 p-Cymene으로 변화할 수 있다. 추출물 내에서 p-Cymene의 함량은, 조건에 따라서 최대 10배까지 증가될 수 있다. 추출물로부터 생성된 p-Cymene은 티트리 추출물에 잔존하여, 이후에 화장료 조성물로 적용시 피부에 트러블과 같은 부정적인 효과를 발생시킬 수 있다.

이러한, p-Cymene의 발생을 최소화하기 위하여, 마이크로웨이브를 조사하여 1차 추출물을 얻는 단계에서 티트리 원료와 정제수의 비율은 정밀하게 조절되어야 한다. 구체적으로 티트리 원료와 정제수는 중량비로서 1 : 10 내지 15의 비율로 적용되는 것일 수 있다. 정제수가 상기 범위 미만일 경우, 과도한 마이크로웨이브의 조사로 인하여 p-Cymene의 함량이 오히려 상승할 수 있으며, 상기 범위 초과일 경우 티트리 원료에 대한 마이크로웨이브의 조사 빈도가 낮아서 목적하는 추출물을 낮게 확보하게 되는 문제가 있다.

상기 정제수는 당업계에 통상적으로 사용되는 정제수, 초순수 정제수를 이용할 수 있으며, 바람직하게는 초순수 정제수를 이용할 수 있다. 일반 정제수는 제약, 화장품 등에 일반적으로 사용되는 물로서, 순도를 나타내는 용존 고형분이 1.0 내지 0.5ppm이고, 정제수 제조 시 미립자 및 미생물의 제거를 위해 사용하는 필터의 사이즈가 0.2 내지 0.45㎛이며, pH는 약산으로부터 약알칼리까지 다양하다. 상기 초순수 정제수는 용존 고형분이 0.03ppm으로 순도가 매우 높고, 초순수 정제수 제조 시 사용되는 필터의 사이즈는 0.001㎛로서 이를 이용하여 미생물이 99.99% 제거된 것이다. 특히, 초순수 정제수는 금속이온의 제거로 자동산화 반응을 방지할 수 있다.

상기 1차 추출물에 유산균 및 2차 용매로 다가 알코올계 화합물을 투입하여 혼합물을 제조하는 단계 및 상기 혼합물을 발효하여 2차 추출물을 얻는 단계는, α-terpinene, γ-terpinene 화합물의 산화를 방지하고, 발효 공정을 동시에 진행하면서 양친매성 용매를 이용하여 보다 높은 효율로 목적하는 추출물을 얻기 위해 도입하는 것이다.

상기 다가 알코올계 화합물은 양친매성 물질로써 수용성과 지용성 용매 모두와 친한 성질을 가진다. 티트리의 추출물들은 기본적으로, terpene alcohol, monocyclic terpene, dicyclic terpene, sesquiterpene과 같은 지용성 구조를 가지고 있기 때문에, 열수 추출과 같은 수용성 용매를 이용하는 경우 추출 효율이 떨어질 수 있다.

상기 마이크로웨이브 조사로 인하여 티트리 원료 내부의 원자가 들뜬 상태로 추출이 이루어진 이후 안정화 단계에서 2차 추출 단계로 돌입하게 되면, 상대적으로 지용성 구조를 가지는 성분들에 다가 알코올계 화합물 용매를 적용하여 추출 효율을 극대화할 수 있다.

본 발명자들은 예의 연구결과, p-Cymene의 발생을 최소화하기 위하여, 마이크로웨이브를 조사하여 1차 추출물을 얻은 후, 얻어지는 성분들의 산화를 방지하면서도 안정적으로 목적하는 물질을 얻기 위해서는 다가 알코올계 화합물 용매를 적용한 추출 방법이 효율적인 것임을 발견하였다. 상술한 1차 및 2차 추출 과정을 연속적으로 수행함으로써, 최종적으로 얻어지는 티트리 추출물 내에 포함되는 p-Cymene의 함량을 티트리 추출물 총 100 중량% 중 0.0001 내지 2 중량%로 줄일 수 있었다.

추출 효율을 높이면서 이후 화장료 조성물에 추출물이 적용될 때의 피부 적용 안전성을 위하여 상기 다가 알코올계 화합물은 디프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 글리세린, 1,3-프로판디올 및 헥산디올로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 포함하는 것일 수 있다. p-Cymene의 함량을 최소화하면서 후술하는 유산균과의 상용성을 위해서는 바람직하게는 디프로필렌 글리콜을 이용할 수 있다.

상기 유산균으로서는, 천연 추출물의 발효에 통상적으로 사용되는 균주, 예를 들어, 단백질 분해효소를 생산할 수 있는 아스퍼질러스 속(Aspergillus sp.), 뮤코 속(Mucor sp.), 락토바실러스 속(Lactobacillus　sp.) 또는 리조푸스 속(Rhizopus sp.) 등의 균주를 사용할 수 있으며, 이들은 단독 또는 2종 이상의 혼합 균주로도 사용할 수 있다. 상술한 2차 용매인 다가알코올계 화합물과의 상용성 및 균주의 최적 생육을 위해서는 락토바실러스 속(Lactobacillus sp.) 균주를 이용하는 것이 바람직하다. 보다 바람직하게는, 상기 유산균은 락토바실러스 플록터서스 Mediheal 01(Lactobacillus fructosus Mediheal 01) KCTC 14924BP일 수 있다.

본 발명에서 “락토바실러스 플록터서스 Mediheal 01(Lactobacillus fructosus Mediheal 01) KCTC 14924BP”은 코스모스에서 분리 동정된 락토바실러스 플록터서스의 신규한 유산균으로, 한국생명공학연구원 생물자원센터에 2022년 3월 25일자로 기탁하였다(수탁번호 KCTC 14924BP).

본 발명의 일 실시예에 따르면, 상기 혼합물에 포함되는 유산균은 유산균주를 NB broth에 30℃ 내지 40℃의 온도에서 20 내지 30시간 배양한 유산균 배양액일 수 있다. 상기 유산균 배양액의 함량은 상기 혼합물 100 중량%를 기준으로 3 내지 15 중량%를 칭량하여 접종하는 것일 수 있다.

결과적으로 상기 혼합물에는 다가 알코올계 화합물은 30 내지 50 중량%, 유산균 배양액 3 내지 15 중량% 및 잔부의 1차 추출물이 포함되는 것일 수 있다.

유산균의 발효를 방해하지 않으면서, 티트리 원료로부터 Terpene 화합물인 α-terpinene, γ-terpinene를 최적으로 추출하기 위한 효율성 확보를 위하여, 상기 혼합믈에 포함되는 다가 알코올계 화합물 함량은 정밀하게 조절되어야 한다. 구체적으로 상기 혼합물 100 중량%를 기준으로 다가 알코올계 화합물은 30 내지 50 중량%로 포함되는 것일 수 있다. 다가 알코올계 화합물이 상기 범위 미만일 경우, 추출 효율이 급격히 감소하고, 상기 범위 초과일 경우 추출효율 대비 경제성의 측면, 너무 높은 알코올 농도에 의한 유산균의 생존이 미비한 측면에서 바람직하지 않다.

상기 발효는 열처리 없이 티트리 원료로부터 목적하는 추출물에 대한 성분을 최대의 효율로 추출하기 위하여 적용되는 것이다. 즉, 종래 이용되는 고압 멸균 기술보다 추출된 물질의 성분 변화를 최소화시킬 수 있다. 상기 발효 단계는 구체적으로, 2차 혼합물을 생성 후 통기가 잘 되도록 하여 30℃ 내지 40℃의 온도에서 30 내지 60시간 배양한다.

배양 종료 후에는 배양된 미생물을 제거하는 저온 멸균단계와 마이크로필터로 정제하는 단계를 거쳐 주요 발효 성분 중 α-terpinene, γ-terpinene 화합물로부터 유도되는 저분자 성분인 플라보노이드 유도체 화합물을 얻을 수 있다.

상기 2차 추출물을 농축하는 단계는 로터리 저온 농축기에 감압 및 저온에서 2차 추출물의 용매를 증발시켜 증발되는 2차 추출물을 냉각 컨덴서에서 포집하여 농축하는 단계이다. 다만, 농축 전에 마이크로 필터로 여과하는 단계를 더 포함할 수 있다. 상기 농축단계는 온도 25 내지 35℃에서 증발 농축하며, 바람직하게는 30℃로 한다. 이때의 상기 로터리 저온 농축기의 내부 진공도는 39 내지 43mmHg으로 한다.

상기 플라보노이드 유도체 화합물은 식물이나 균류의 이차대사산물의 일종이므로, 두 개의 페닐 고리와 헤테로 사이클릭 고리로 구성된 15개의 탄소 골격의 일반적인 구조를 가지고 있다. 이 탄소 구조는 C6-C3-C6으로 축약될 수 있으며 이러한 골격을 갖는 식물 색소를 통틀어 플라보노이드라 칭한다.

상기 수득된 티트리 추출물과 정제수, 글리세린, 프로판디올, 1,2-헥산디올, 잔탄검, 부틸렌글라이콜, 판테놀, 트레할로스, 베타인, 카보머, 알란토인, 폴리글리세릴-10 라우레이트, 알지닌, 디소듐이디티에이, 디포타슘글리시리제이트 및 토코페릴아세테이트로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합하여 화장료 조성물을 제조하는 단계는 티트리 원료로부터 확보된 플라보노이드 유도체 화합물 성분들을 보존하고 고함량으로 함유하면서 피부에 수분 공급, 수분 유지 및 진정 효과를 추가적으로 갖는 화장료 조성물을 제조하기 위한 것이다. 바람직하게는, 상기 수득된 티트리 추출물과 정제수, 글리세린, 프로판디올, 1,2-헥산디올, 화이트윌로우껍질추출물, 병풀추출물, 어성초추출물, 검정콩추출물, 완두콩추출물, 세이지추출물, 라벤더추출물, 로즈마리추출물, 레몬그라스추출물, 잔탄검, 부틸렌글라이콜, 인도유향수지추출물, 판테놀, 트레할로스, 베타인, 카보머, 알란토인, 폴리글리세릴-10 라우레이트, 알지닌, 디소듐이디티에이, 디포타슘글리시리제이트, 토코페릴아세테이트 및 티트리오일(50ppm)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합하여 화장료 조성물을 제조할 수 있다.

상기 수득된 티트리 추출물의 함량은 상기 화장료 조성물 100 중량%를 기준으로 30 내지 70 중량%일 수 있다. 바람직하게는 상기 수득된 티트리 추출물의 함량은 상기 화장료 조성물 100 중량%를 기준으로 40 내지 60 중량%일 수 있다. 상기 티트리 추출물의 함량이 30 중량% 미만일 경우 피부에 적용된 경우의 항산화 및 보습 효과가 미미한 문제가 있고, 70 중량%를 초과할 경우에는 함유량 증가에 따른 뚜렷한 효과는 없이 제품의 제형 안정성을 저하시키는 문제가 발생할 수 있다.

상기 제조방법에 의하여 티트리 원료로부터 추출된 플라보노이드 유도체 화합물을 고함량으로 확보할 수 있고, 추출 과정 중 발생되는 산화물인 p-Cymene 화합물의 발생을 최소화하여 티트리 추출물을 포함하는 화장료 조성물을 제조할 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따른 티트리 추출물을 포함하는 화장료 조성물은 피부에 적용하기 위한 화장료 조성물로 제조될 수 있다. 본 발명의 조성물의 제형은 피부에 적용할 수 있는 성상의 것이면 제한되지 않으며, 예를 들면, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클렌징, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나의 제형으로 제조될 수 있다. 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 미스트, 영양 크림, 보습크림, 마사지 크림, 에센스, 아 이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 마스크팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 조성물에 포함되는 성분은 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 첨가성분을 포함할 수 있다. 예를 들면, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료, 향료 및 담체로 이루어진 군에서 선택되는 적어도 하나를 포함할 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 상기 첨가성분은 본 발명의 조성물의 제형에 따라 조절될 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.

실시예 및 비교실시예

실시예 1

제주도에서 입수한 티트리 원료를 흐르는 물에 세척하였다(S1).

상기 세척된 티트리 원료 10g에 1차 용매로 정제수 100g을 가한 후, Milestone사 START D기기 기기의 주파수 1000w 마이크로웨이브를 60분간 조사하여 1차 추출물을 얻었다(S2).

상기 수득한 1차 추출물을 용기에 옮긴 후, 2차 용매로서 디프로필렌 글리콜 30 중량% 및 락토바실러스 속 유산균주 배양액 8 중량%을 가한 후 혼합물을 제조하였다(S3). 상기 중량%는 혼합물 총 100 중량%를 기준으로 하였다. 상기 유산균은 락토바실러스 플록터서스 Mediheal 01(Lactobacillus fructosus Mediheal 01) KCTC 14924BP로서, NB broth에 35℃에 24시간 배양한 배양액을 준비하였다.

이후, 통기가 우수한 곳에서, 35℃에서 36시간 발효하여 2차 추출물을 얻는 단계를 진행하였다(S4).

얻어진 발효액을 저온 멸균하고, 0.2 마이크로 크기의 마이크로 필터로 여과한 후 티트리 추출물을 수득하였다(S5).

실시예 2 내지 실시예 11

투입되는 구성과 함량을 하기 표 1과 같이 조절하고, 나머지는 실시예 1의 방법과 동일하게 진행하여 티트리 추출물을 수득하였다.

비고	티트리 원료(S1, g)	1차 용매 (S2, g)	2차 용매 (S3, 중량%)	유산균 배양액 (S3, 중량%)	발효 조건 (S4, 시간)
실시예 1	10	100	30	8	36
실시예 2	10	150	30	8	36
실시예 3	10	50	30	8	36
실시예 4	10	300	30	8	36
실시예 5	10	100	40	8	36
실시예 6	10	100	50	8	36
실시예 7	10	100	20	8	36
실시예 8	10	100	60	8	36
실시예 9	10	100	30	8	36
실시예 10	10	100	30	8	36
실시예 11	10	100	30	8	36
실시예 9 : 2차 용매를 1,3-부틸렌 글리콜로 변경 실시예 10 : 2차 용매를 글리세린으로 변경 실시예 11 : 2차 용매를 1,3-프로판디올로 변경

비교실시예 1

제주도에서 입수한 티트리 원료를 흐르는 물에 세척하였다.

상기 실시예 1의 제조방법 대신 상기 티트리 원료 10g을 환류냉각 추출법으로서, 상기 티트리 원료와 정제수 100g을 혼합하여 100 내지 150℃로 가열을 진행하여 증기를 발생시키게 된 후 증발된 증기가 냉각 터널을 통과해 액상으로 추출될 수 있도록 4시간 동안 공정을 이용하여 1차 추출물을 수득하였다.

상기 수득한 추출물을 용기에 옮긴 후, 락토바실러스 속 유산균주 배양액 8 중량%을 가한 후 혼합물을 제조하였다. 상기 중량%는 혼합물 총 100 중량%를 기준으로 하였다. 상기 유산균은 락토바실러스 플록터서스 Mediheal 01(Lactobacillus fructosus Mediheal 01) KCTC 14924BP로서, NB broth에 35℃에 24시간 배양한 배양액을 준비하였다. 이후, 통기가 우수한 곳에서, 35℃에서 36시간 발효하였다. 얻어진 발효액을 저온 멸균하고, 0.2 마이크로 크기의 마이크로 필터로 여과한 후 티트리 추출물을 수득하였다.

비교실시예 2

제주도에서 입수한 티트리 원료를 흐르는 물에 세척하였다.

상기 티트리 원료 10g을 통상적인 열수 추출법으로 60분간 추출하여 1차 추출물을 수득하였다.

상기 수득한 추출물을 용기에 옮긴 후, 락토바실러스 속 유산균주 배양액 8 중량%을 가한 후 혼합물을 제조하였다. 상기 중량%는 혼합물 총 100 중량%를 기준으로 하였다. 상기 유산균은 락토바실러스 플록터서스 Mediheal 01(Lactobacillus fructosus Mediheal 01) KCTC 14924BP로서, NB broth에 35℃에 24시간 배양한 배양액을 준비하였다. 이후, 통기가 우수한 곳에서, 35℃에서 36시간 발효하였다. 얻어진 발효액을 저온 멸균하고, 0.2 마이크로 크기의 마이크로 필터로 여과한 후 티트리 추출물을 수득하였다.

비교실시예 3

제주도에서 입수한 티트리 원료를 흐르는 물에 세척하였다.

상기 티트리 원료 10g을 통상적인 열수 추출법으로 120분간 추출하여 1차 추출물을 수득하였다.

상기 수득한 추출물을 용기에 옮긴 후, 락토바실러스 속 유산균주 배양액 8 중량%을 가한 후 혼합물을 제조하였다. 상기 중량%는 혼합물 총 100 중량%를 기준으로 하였다. 상기 유산균은 락토바실러스 플록터서스 Mediheal 01(Lactobacillus fructosus Mediheal 01) KCTC 14924BP로서, NB broth에 35℃에 24시간 배양한 배양액을 준비하였다. 이후, 통기가 우수한 곳에서, 35℃에서 36시간 발효하였다. 얻어진 발효액을 저온 멸균하고, 0.2 마이크로 크기의 마이크로 필터로 여과한 후 최종 추출물을 수득하였다.

비교실시예 4

제주도에서 입수한 티트리 원료를 흐르는 물에 세척하였다.

상기 세척된 티트리 원료 10g에 용매로서 정제수 100g를 가한 후, Milestone사 START D기기 기기의 주파수 1000w 마이크로웨이브를 60분간 조사하여 1차 추출물을 수득하였다.

상기 수득한 추출물을 용기에 옮긴 후, 락토바실러스 속 유산균주 배양액 8 중량%을 가한 후 혼합물을 제조하였다. 상기 중량%는 혼합물 총 100 중량%를 기준으로 하였다. 상기 유산균은 락토바실러스 플록터서스 Mediheal 01(Lactobacillus fructosus Mediheal 01) KCTC 14924BP로서, NB broth에 35℃에 24시간 배양한 배양액을 준비하였다. 이후, 통기가 우수한 곳에서, 35℃에서 36시간 발효하였다. 얻어진 발효액을 저온 멸균하고, 0.2 마이크로 크기의 마이크로 필터로 여과한 후 티트리 추출물을 수득하였다.

비교실시예 5

제주도에서 입수한 티트리 원료를 흐르는 물에 세척하였다.

상기 세척된 티트리 원료 10g에 용매로서 디프로필렌 글리콜 70g을 가한 후, 35℃에서 600분간 추출하여 1차 추출물을 수득하였다.

상기 수득한 추출물을 용기에 옮긴 후, 락토바실러스 속 유산균주 배양액 8 중량%을 가한 후 혼합물을 제조하였다. 상기 중량%는 혼합물 총 100 중량%를 기준으로 하였다. 상기 유산균은 락토바실러스 플록터서스 Mediheal 01(Lactobacillus fructosus Mediheal 01) KCTC 14924BP로서, NB broth에 35℃에 24시간 배양한 배양액을 준비하였다. 이후, 통기가 우수한 곳에서, 35℃에서 36시간 발효하였다. 얻어진 발효액을 저온 멸균하고, 0.2 마이크로 크기의 마이크로 필터로 여과한 후 티트리 추출물을 수득하였다.

비교실시예 6

제주도에서 입수한 티트리 원료를 흐르는 물에 세척하였다.

상기 세척된 티트리 원료 10g에 1차 용매로 정제수 100g을 가한 후, Milestone사 START D기기 기기의 주파수 1000w 마이크로웨이브를 60분간 조사하여 1차 추출물을 얻었다.

상기 수득한 1차 추출물을 용기에 옮긴 후, 2차 용매로서 디프로필렌 글리콜 30 중량%을 가한 후 혼합물을 제조하였다. 상기 중량%는 혼합물 총 100 중량%를 기준으로 하였다. 얻어진 발효액을 저온 멸균하고, 0.2 마이크로 크기의 마이크로 필터로 여과한 후 최종 추출물을 수득하였다.

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제조예

제조예 1

상기 실시예 1의 (S1) 내지 (S5) 단계를 거쳐서 수득된 티트리 추출물과 정제수, 글리세린, 프로판디올, 1,2-헥산디올, 잔탄검, 부틸렌글라이콜, 판테놀, 트레할로스, 베타인, 카보머, 알란토인, 폴리글리세릴-10 라우레이트, 알지닌, 디소듐이디티에이, 디포타슘글리시리제이트 및 토코페릴아세테이트로를 혼합하여 화장료 조성물을 제조하였다(S6).

상기 실시예 1에 따라 수득된 티트리 추출물은 상기 화장료 조성물 100 중량%를 기준으로 50 중량%로 포함되었다.

제조예 2 내지 7

투입되는 구성과 함량을 하기 표 2와 같이 조절하고, 나머지는 제조예 1의 방법과 동일하게 진행하여 화장료 조성물을 제조하였다.

화장료 조성물의 성분별 함량

성분명(중량%)	시료명
	제조예 1	제조예 2	제조예 3	제조예 4	제조예 5	제조예 6	제조예 7
티트리 추출물(중량%)	50	40	60	30	70	10	80
정제수	To 100	To 100	To 100	To 100	To 100	To 100	To 100
글리세린	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0	2.0
프로판디올	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
1,2-헥산디올	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5	1.5
잔탄검	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
부틸렌글라이콜	0.3	0.3	0.3	0.3	0.3	0.3	0.3
판테놀	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
트레할로스	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
베타인	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2
카보머	0.12	0.12	0.12	0.12	0.12	0.12	0.12
알란토인	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5	0.5
폴리글리세릴-10라우레이트	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2	0.2
알지닌	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1	0.1
디소듐이디티에이	0.02	0.02	0.02	0.02	0.02	0.02	0.02
디포타슘글리시리제이트	0.05	0.05	0.05	0.05	0.05	0.05	0.05
토코페릴아세테이트	0.03	0.03	0.03	0.03	0.03	0.03	0.03

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실험예 1: 실시예 및 비교실시예의 티트리 추출물의 성분 함량 확인

1) terpinen-4-ol함량 확인

상기 실시예 및 비교예에서 티트리 추출물을 모두 회수한 뒤, 추출물 전체에 포함된 terpinen-4-ol의 함량을 확인하였다. 대조군 1은 티트리 원료 10g에 포함된 terpinen-4-ol의 순 함량을 g수로 나타내었다. 결과를 표 3에 나타내었다.

비고	terpinen-4-ol 추출량(g) (10g 티트리 원료 내 순수함량 대비 %)
실시예 1	0.01497g (33.18%)
실시예 2	0.01215g (26.93%)
실시예 3	0.01738g (38.52%)
실시예 4	0.00917g (20.32%)
실시예 5	0.01540g (34.13%)
실시예 6	0.01605g (35.57%)
실시예 7	0.01398g (30.98%)
실시예 8	0.01492g (33.07%)
실시예 9	0.01484g (32.89%)
실시예 10	0.01397g (30.96%)
실시예 11	0.01387g (30.74%)
비교실시예 1	0.00421g (9.33%)
비교실시예 2	0.00221g (4.90%)
비교실시예 3	0.00315g (6.98%)
비교실시예 4	0.01205g (26.71%)
비교실시예 5	0.02515g(55.74%)
대조군 1	0.04512g

2) p-Cymene 함량 확인

상기 실시예 및 비교예의 단계에서 티트리 추출물을 모두 회수한 뒤, 추출물 전체에 포함된 p-Cymene 함량을 확인하였다. 대조군 1은 티트리 원료 10g에 포함된 p-Cymene의 순 함량을 g수로 나타내었다. 결과를 표 4에 나타내었다.

비고	p-Cymene 함량 (10g 티트리 원료 내 순수함량 대비 %)
실시예 1	0.00081g (30.57%)
실시예 2	0.00094g (35.47%)
실시예 3	0.00138g (52.08%)
실시예 4	0.00071g (26.79%)
실시예 5	0.00102g (38.49%)
실시예 6	0.00105g (39.62%)
실시예 7	0.00099g (37.36%)
실시예 8	0.00111g (41.89%)
실시예 9	0.00093g (35.09%)
실시예 10	0.00090g (33.96%)
실시예 11	0.00091g (34.34%)
비교실시예 1	0.00558g (210.57%)
비교실시예 2	0.00515g (194.34%)
비교실시예 3	0.00758g (286.04%)
비교실시예 4	0.00424g (160.00%)
비교실시예 5	0.00222g (83.77%)
비교실시예 6	0.00266g (100.38%)
대조군 1	0.00265g

3) α-terpinene, γ-terpinene 함량 확인

상기 실시예 및 비교실시예의 단계에서 티트리 추출물을 모두 회수한 뒤, 추출물 전체에 포함된 α-terpinene, γ-terpinene을 확인하였다. 대조군 1은 티트리 원료 10g에 포함된 α-terpinene, γ-terpinene의 순 함량을 g수로 나타내었다. 결과를 표 5에 나타내었다.

비고	α-terpinene 함량 (10g 티트리 원료 내 순수함량 대비 %)	γ -terpinene 함량 (10g 티트리 원료 내 순수함량 대비 %)
실시예 1	0.00657g (31.29%)	0.00412g (37.45%)
실시예 2	0.00412g (19.62%)	0.00298g (27.09%)
실시예 3	0.00345g (16.43%)	0.00195g (17.73%)
실시예 4	0.00332g (15.81%)	0.00185g (16.82%)
실시예 5	0.00698g (33.24%)	0.00425g (38.64%)
실시예 6	0.00725g (34.52%)	0.00434g (39.45%)
실시예 7	0.00647g (30.81%)	0.00409g (37.18%)
실시예 8	0.00751g (35.76%)	0.00451g (41.00%)
실시예 9	0.00402g (19.14%)	0.00303g (27.55%)
실시예 10	0.00208g (9.90%)	0.00224g (20.36%)
실시예 11	0.00101g (4.81%)	0.00165g (15.00%)
비교실시예 1	0.00316g (15.05%)	0.00198g (18.00%)
비교실시예 2	0.00284g (13.52%)	0.00165g (15.00%)
비교실시예 3	0.00292g (13.90%)	0.00172g (15.64%)
비교실시예 4	0.00291g (13.86%)	0.00166g (15.09%)
비교실시예 5	0.01102g (52.48%)	0.00654g (59.45%)
비교실시예 6	0.00321g (15.29%)	0.00199 (18.09%)
대조군 1	0.021g	0.011

4) 플라보노이드 유도체 화합물 함량 확인

상기 실시예 및 비교실시예로부터 티트리 추출된 추출물에 대하여 플라보노이드 유도체 화합물을 확인하였다. 결과를 표 6에 나타내었다.

비고	플라보노이드 유도체 함량(중량%) (전체 추출물 총 100중량% 대비)
실시예 1	312 QE/g
실시예 2	283 QE/g
실시예 3	271 QE/g
실시예 4	268 QE/g
실시예 5	308 QE/g
실시예 6	304 QE/g
실시예 7	291 QE/g
실시예 8	288 QE/g
실시예 9	287 QE/g
실시예 10	284 QE/g
실시예 11	281 QE/g
비교실시예 1	198 QE/g
비교실시예 2	168 QE/g
비교실시예 3	200 QE/g
비교실시예 4	121 QE/g
비교실시예 5	15 QE/g
비교실시예 6	8 QE/g

5) 발효 효율 확인

상기 실시예 및 비교실시예로부터 발효 후, 저온 멸균 전의 추출물에 대하여 OD600(600 ㎚의 광학 밀도)에 의해 측정한 결과를 표 7에 나타내었다.

비고	0D 값
실시예 1	0.915
실시예 2	0.901
실시예 3	0.880
실시예 4	0.811
실시예 5	0.819
실시예 6	0.623
실시예 7	0.599
실시예 8	0.550
실시예 9	0.592
실시예 10	0.576
실시예 11	0.499
비교실시예 1	0.802
비교실시예 2	0.811
비교실시예 3	0.786
비교실시예 4	0.581
비교실시예 5	-
비교실시예 6	-(변화 없음, 유산균 발효 진행 안함)

실험예 2 피부자극물질에 대한 진정효과

피부질환이나 알러지 증상이 없으며 과민반응 이력이 없는 20 ~ 50대 건강한 성인남녀 20명을 대상을 인체피부 첩보실험을 통하여 피부 진정 효과를 확인하였다.

상기 제조예 1 내지 7 화장료 조성물(표 2) 및 대조시료로서 피부자극물질인 락틱산 5%를 첨가하여 각각에 대하여 피부첩포 시험을 실시하였다. 진정시험 진행에 앞서 시험대상자의 전완 안쪽부위에 70% 에탄올로 충분히 닦아낸 후 완전히 건조하여 9종의 화장료를 각 30 ㎍씩 첩포하였다. 첩포 시간을 기준으로 24시간이 경과한 후 패치를 제거하고 약 30분 후 확대경(MicroView)으로 첩포 부위를 관찰하여 홍반 및 부종 유무를 확인하였다. 평가는 하기 표 8의 기준으로 시행하였으며, 하기 수학식에 따라 평균피부 반응도를 계산하였다. 그 결과는 표 9에 나타내었다.

기호	점수	피부자극	평가기준
-	0	무자극	무반응
±	0.5	미자극	희미한 또는 가까스로 감지할 수 있는 가벼운 홍반
+	1.0	경자극	경계가 뚜렷하나 약한 홍반
++	2.0	중자극	뚜렷한 홍반
+++	3.0	강자극	심한 홍반 및 대 수포

수학식:

평균피부반응도 =

시료명	점수					반응도
	0	0.5	1.0	2.0	3.0
제조예 1	20	-	-	-	-	0
제조예 2	19	1	-	-	-	0.008
제조예 3	19	1	-	-	-	0.008
제조예 4	17	1	2	-	-	0.042
제조예 5	18	2	-	-	-	0.016
제조예 6	17	1	3	-	-	0.058
제조예 7	14	5	1	-	-	0.058
대조시료(락틱산)	3	12	3	2	-	0.216

실험예 3 피부보습 효과

상기 제조예 1 내지 7 에 따른 화장료 조성물을 피시험자(25세-50세)의 남성 및 여성 20명을 대상으로 1일 2회씩 4주간 안면 양쪽의 얼굴 및 전반부에 각각 도포하여 도포하기 전, 2주 경과 후, 그리고 4주 경과 후의 피부보습 개선상태를 피부수분측정기 Corneometer CM 820(Courage + Khazaka, Germany)를 이용하여 측정하였다. 단위는 기기에서 부여하는 임의의 단위(Arbitrary Unit, AU)로 표현되며, 측정값이 높을수록 피부표면에 수분량이 높음을 의미한다. 피부보습 개선에 관한 실험 결과는 표 10에 나타내었다.

시료명	피부보습 효과(AU)
	도포 전	2주 후	4주 후
제조예 1	48	62	67
제조예 2	49	61	65
제조예 3	48	64	70
제조예 4	47	58	62
제조예 5	48	64	69
제조예 6	48	55	59
제조예 7	49	59	63

실험예 4 화장료 조성물의 제형 경시안정도 및 이물감 평가

1) 경시안정도는 상기 제조예 1 내지 7 에 따른 화장료 조성물을 제조 직후부터 2주 경과 시점까지, 상온의 온도 조건하에서 경시적 변화, 즉, 제형 뭉침, 변색, 석출을 육안으로 관찰하였고, 결과를 표 11에 정리하였다.

2) 이물감 평가는 상기 제조예 1 내지 7 에 따른 화장료 조성물을 제조 직후 유리판(가로*세로*두께=19cm*19cm*0.3cm)으로 밀어 제형의 경시적 이물감(균질 분산물)을 확인하고, 결과를 표 11에 작성하였다.

시료명	경시 안정도	이물감 평가(균질 분산)
제조예 1	○	++++
제조예 2	○	++++
제조예 3	○	++++
제조예 4	○	++++
제조예 5	×	++-
제조예 6	○	++++
제조예 7	×	-+-

<경시안정도 평가 기준>

×: 불안정(제형 뭉침, 변색, 석출 중 적어도 1가지 발생)

○: 안정 (제형 뭉침, 변색, 석출 미발생)

<경시적 이물감 평가기준>

+++: 유리판에 도포된 상태가 깔끔하나 드물게 거친 부분이 있고, 경시적 이물감이 드물게 관찰됨

++++: 유리판에 도포된 상태가 전체적으로 깔끔하고, 경시적 이물감이 관찰되지 않음

++-: 유리판에 도포된 상태가 매끄러운 편이나 일부 거친 부분이 확인되고, 경시적 이물감이 드물게 관찰됨

-+-: 유리판에 도포된 상태가 전체적으로 거칠고, 경시적 이물감이 일부 관찰됨

---: 유리판에 도포된 상태가 전반적으로 거칠고, 경시적 이물감이 전체적으로 관찰됨

Claims (8)

1. 티트리 원료를 세척하는 단계;
   상기 세척된 티트리 원료에 1차 용매로 정제수를 투입 후, 마이크로웨이브를 조사하여 1차 추출물을 얻는 단계;
   상기 1차 추출물에 유산균 및 2차 용매로 다가 알코올계 화합물을 투입하여 혼합물을 제조하는 단계;
   상기 혼합물을 발효하여 2차 추출물을 얻는 단계;
   상기 발효된 2차 추출물을 저온 멸균 및 여과하여 티트리 추출물을 수득하는 단계; 및
   상기 수득된 티트리 추출물과 정제수, 글리세린, 프로판디올, 1,2-헥산디올, 잔탄검, 부틸렌글라이콜, 판테놀, 트레할로스, 베타인, 카보머, 알란토인, 폴리글리세릴-10 라우레이트, 알지닌, 디소듐이디티에이, 디포타슘글리시리제이트 및 토코페릴아세테이트로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 혼합하여 화장료 조성물을 제조하는 단계를 포함하고,
   상기 유산균은 락토바실러스 플록터서스 Mediheal 01(Lactobacillus fructosus Mediheal 01) KCTC 14924BP인 것인 티트리 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조방법.
   
2. 청구항 1에 있어서,
   상기 세척된 티트리 원료와 1차 용매의 중량비는 1 : 10 내지 15인 것인 티트리 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조방법.
   
3. 청구항 1에 있어서,
   상기 티트리 추출물 내에 포함되는 p-사이멘(p-Cymene)의 함량이 티트리 추출물 총 100 중량% 중 0.0001 내지 2 중량%인 것인 티트리 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조방법.
   
4. 청구항 1에 있어서,
   상기 2차 용매의 함량은 상기 혼합물 100 중량%를 기준으로 30 내지 50 중량%인 것인 티트리 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조방법.
   
5. 청구항 1에 있어서,
   상기 다가 알코올계 화합물은 디프로필렌 글리콜, 1,3-부틸렌 글리콜, 글리세린, 1,3-프로판디올 및 헥산디올로 이루어진 군에서 선택되는 1종 이상을 포함하는 것인 티트리 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조방법.
   
6. 삭제
7. 청구항 1에 있어서,
   상기 수득된 티트리 추출물의 함량은 상기 화장료 조성물 100 중량%를 기준으로 30 내지 70 중량%인 것인 티트리 추출물을 포함하는 화장료 조성물의 제조방법.
   
8. 청구항 1 내지 5 및 7의 제조방법 중 어느 한 항에 의해 제조된 화장료 조성물.