KR102557706B1

KR102557706B1 - 사포나린 및 영지버섯 추출물을 포함하는 피부보호용 화장료 조성물

Info

Publication number: KR102557706B1
Application number: KR1020200167364A
Authority: KR
Inventors: 박영진; 박채훤; 민선영; 유혜원
Original assignee: 주식회사 포러스젠
Priority date: 2020-08-18
Filing date: 2020-12-03
Publication date: 2023-07-24
Anticipated expiration: 2040-12-03
Also published as: KR20230110475A; KR20220022427A; KR102632743B1

Abstract

본 발명은 사포나린 및 영지버섯 추출물을 포함하는 피부보호용 화장료 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 사포나린 및 영지버섯 추출물을 혼합하여 사용하는 경우, 사포나린 또는 영지버섯 추출물을 단독으로 사용하는 경우와 비교하여 피부 물리적 장벽 및 화학정 장벽 수준을 우수하게 증가시키므로, 피부보습 증진, 피부탄력 증진 또는 피부보호용 조성물로서 효과적으로 제공될 수 있다.

Description

사포나린 및 영지버섯 추출물을 포함하는 피부보호용 화장료 조성물 {Composition for skin-protective comprising saponarin and Ganoderma lucidum extract}

본 발명은 사포나린 (saponarin) 및 영지버섯 (Ganoderma lucidum) 추출물을 포함하는 피부보호용 화장료 조성물에 관한 것이다.

포유동물 피부의 표피 (epidermis) 및 진피 (dermis)는 각종 유형의 세포를 포함함으로써, 다양한 기능을 수행하고 다양한 화학적 조성물을 보유하고 있다. 이러한 각기 다른 피부층 간에는 다양한 지질이 다양한 농도로 존재한다. 구체적으로, 피부의 진피는 콜라겐과 기타의 단백질을 주로 생성하고 지질은 매우 소량을 생성하는 섬유아세포로 구성되어 있다. 이와는 반대로, 표피는 지질을 생성하는 반면 콜라겐은 실질적으로 생성하지 않는 각질 세포를 포함한다. 섬유아세포 (fibroblast) 에 의해 생성된 콜라겐은 피부에 신장 강도를 부여하게 되는 반면, 각질세포에 의해 생성된 지질은 생조직과 외부와의 차단층을 형성하여 피부장벽기능을 수행한다.

각질층 또는 피부 장벽 (Stratum corneum, Skin barrier)은 죽은 각질세포 (Coneocyte)와 세포간 지질 (Intercellular lipid)로 구성되어 있고, 외부 자극으로부터 피부를 보호하며 피부에서 수분이 증발하는 것을 막아주는 피부 보호막으로서 피부건강에 핵심적인 기능을 담당한다. 특히, 피부의 수분 불투과성은 죽은 각질세포 (corneocyte)와 세포간 지질에 의해 획득되는데, 죽은 각질세포의 표면을 구성하는 각질세포 외피 (corneocyte envelope)는 세포간 지질의 안정성에 중요한 역할을 한다. 각질세포 외피는 인볼루크린 (involucrin), 로리크린 (loricrin), 필라그린 (filaggrin) 등의 단백질 막으로 구성된다. 또한, 피부는 filaggrin에서 유래한 천연함습인자 외에도 hyaluronic acid (HA), urea, citrate, lactate, glycerol 등의 다양한 함습인자에 의해 보습장벽 기능을 수행한다. 이중 HA 는 분자량이 20-40만에 이르는 고분자화합물로써 표피의 수분 증발을 막아 피부의 탄력성을 유지할 뿐만 아니라, 영양성분의 저장과 확산, 세포 이동 등에 관여한다. HA는 주로 각질형성세포 및 섬유아세포 (fibroblast)의 hyaluronic acid synthase (HAS)에 의해 합성되어 세포외기질에 축적된다. 지금까지 알려진 HAS 유전자는 HAS-1, HAS-2, HAS-3의 세 가지 형태가 보고 되었으며, 이들의 발현저하로 인한 보습장벽의 결함은 표피의 위축, 주름형성, 피부 수분량 감소, 탄력성 저하 등 피부노화를 일으키는 것으로 보고되었다. 이 중 HAS-3 유전자는 피부의 화학적 장벽 기능과 밀접한 연관이 있는 것으로 알려져 있다.

상기 화학적 장벽 기능은 각질세포 간 지질의 투과 장벽 기능과 피부 표면의 낮은 산성도 (pH 5.5), 각질층 내 항균 펩타이드 등에 의해 유지된다. 피부에서 분비되는 항균 펩타이드에는 디펜신 (human β-defensin-1, 2, 3)과 cathelicidin, secretory leukocyte proteinase inhibitor, dermcidin, adrenomedullin 등이 있다. 이러한 항균 펩타이드는 감염이나 염증반응에 의해 급격하게 증가하면서 일차적인 방어기능을 수행하고, 2차적으로 호중구, 비만세포, 단핵구 등과 같은 면역 세포를 활성화하여 면역을 증진하는 화학 장벽 기능을 수행한다. 만성 피부질환에서 높은 세균 감염율을 보이는 것은 이러한 항균성 펩타이드의 발현의 저하와 관련 있는 것으로 보고되었다.

한편, 사포나린 (saponarin)은 새싹보리, 무궁화 등에 함유되어 있는 기능성 물질로 플라본 글루코사이드이다. 최근 연구 결과에 따르면 사포나린 (saponarin)은 폴리페놀의 일종으로 식물성 생리활성물질이며, 당분해 효소를 억제하여 혈당을 낮추고 인슐린 저항성을 예방하여 알코올성 지방간 예방 또는 개선효과가 뛰어난 것으로 알려져 있다.

또한, 영지버섯 (Ganoderma lucidum)은 불로초과 (Ganodermataceae)에 속하며, 불로초, 만년버섯 등으로 불리며, 한국, 일본, 중국 등 북반구 온대 이북에 분포한다. 여름부터 가을까지 활엽수의 생목밑동이나 그루터기 위에 군생 또는 단생하는 근주심재 부후성 버섯으로, 여러 가지 아미노산과 수용성 단백질, 스테로이드물질, 안트라퀴논 유도체, 탄수화물, 각종 배당체, 소량의 알칼로이드 환원성 물질들과 리그닌을 분해하는 효소를 함유하고 있다. 영지버섯은 부작용이 없으며, 항암효과, 조압작용, 정혈작용, 감당작용, 이뇨작용, 해독작용 등 170여 가지의 각종 질환의 치료 및 예방에 유효하여 약용으로 널리 이용되고 있으며, 영지버섯에서 유래된 다당류는 종양에 대한 비특이적인 능동 면역을 부여할 수 있는 생체반응 조절물질로 인식되고 있다 (Shimura, K. et al., Japan. J. Pharmac., 33:403, 1983). 또한 영지버섯 균사체 배양물로부터 추출·분리된 다당체는 미생물 및 종양세포에 대한 직접적인 세포독성과 대식세포 활성에 따른 숙주의 면역기능이 활성화되어 면역능을 높이는 작용에 의해 항미생물작용과 항암작용을 가진다고 보고되고 있다.

본 발명의 사포나린 및 영지버섯 추출물을 포함하는 혼합 조성물은 피부 물리적 장벽 및 화학적 장벽 수준을 우수하게 증가시키므로, 피부보습, 피부 장벽 보호용 조성물로서 효과적으로 이용될 수 있음을 확인하고 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 사포나린 및 영지버섯 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부보습 증진, 피부탄력 증진 또는 피부보호용 화장료 조성물을 제공하는데 있다.

또한, 본 발명의 다른 목적은 사포나린 및 영지버섯 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부보습 증진, 피부탄력 증진 또는 피부보호용 식품 조성물을 제공하는데 있다.

또한, 본 발명의 다른 목적은 사포나린 및 영지버섯 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부보습 증진, 피부탄력 증진 또는 피부보호용 건강기능식품 조성물을 제공하는데 있다.

상기 목적을 달성하기 위해 본 발명은 사포나린 및 영지버섯 추출물을 유효성분으로 포함하는, 피부보습 또는 피부보호용 화장료 조성물을 제공한다.

또한, 상기 조성물은 피부 장벽 기능 개선 및 피부 장벽 기능 강화 효과를 가지는 것일 수 있다.

이어서, 본 발명은 사포나린 및 영지버섯 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부보습 증진, 피부탄력 증진 또는 피부보호용 식품 또는 건강식품 조성물을 제공한다.

본 발명의 사포나린 및 영지버섯 추출물을 혼합하여 사용하는 경우, 사포나린 또는 영지버섯 추출물을 단독으로 사용하는 경우와 비교하여 피부 물리적 장벽 및 화학정 장벽 수준을 우수하게 증가시키므로, 피부보습 증진, 피부탄력 증진 또는 피부보호용 조성물로서 효과적으로 제공될 수 있다.

도 1은 각질형성세포에 대한 사포나린의 세포독성을 나타낸 그래프이다.
도 2는 각질형성세포에 대한 영지버섯 추출물의 세포독성을 나타낸 그래프이다.
도 3은 각질형성세포에 대한 사포나린 및 영지버섯 추출물의 세포독성을 나타낸 그래프이다.
도 4는 사포나린 및 영지버섯 추출물의 피부 장벽 기능 관련 유전자의 발현 분석 결과를 나타낸 그래프이다.

이하, 본 발명에 대하여 보다 상세하게 설명하도록 한다.

본 발명에서 사용되는 용어 (terminology)들은 본 발명의 바람직한 실시예를 적절히 표현하기 위해 사용된 용어들로서, 이는 사용자, 운용자의 의도 또는 본 발명이 속하는 분야의 관례 등에 따라 달라질 수 있다. 따라서, 본 용어들에 대한 정의는 본 명세서 전반에 걸친 내용을 토대로 내려져야 할 것이다. 명세서 전체에서, 어떤 부분이 어떤 구성요소를 "포함"한다고 할 때, 이는 특별히 반대되는 기재가 없는 한 다른 구성요소를 제외하는 것이 아니라 다른 구성 요소를 더 포함할 수 있는 것을 의미한다.

본 발명에서 사용되는 모든 기술용어는, 달리 정의되지 않는 이상, 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미로 사용된다. 또한 본 명세서에는 바람직한 방법이나 시료가 기재되나, 이와 유사하거나 동등한 것들도 본 발명의 범주에 포함된다. 본 명세서에 참고문헌으로 기재되는 모든 간행물의 내용은 본 발명에 도입된다.

본 발명의 사포나린 및 영지버섯 추출물을 혼합한 혼합물은 사람 피부 각질 형성 세포에 독성을 띄지 않는 조건에서 이의 피부 물리적 장벽 내지 화학적 장벽 수준을 유의하게 증가시켜 피부 장벽 보호 효과를 제공할 수 있다.

따라서, 본 발명은 사포나린 및 영지버섯 추출물을 유효성분으로 포함하는 피부보습 증진, 피부탄력 증진 또는 피부보호용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명에서 사용되는 용어 “사포나린 (saponarin)”은 분자식 C₂₇H₃₀O₁₅를 갖는 플라보노이드이며, 식물의 2차 대사산물이다. 또한 사포나린은 주로 새싹 작물에 포함되어 있는 것으로 알려져 있다. 특히 보리 새싹, 보리순 또는 청보리 등에 함유되어 있는 것으로 보고되었다. 플라보노이드는 당-연결 글리코사이드 및 아글리콘 (aglycone)을 포함하며, 아글리콘과 부착된 당 부분의 다른 조합에 의해 여러 플라보노이드가 자연적으로 발생한다.

본 발명에서 사용되는 용어 “영지버섯 (Ganoderma lucidum)”은 담자균류 민주름버섯목 구멍장이버섯과의 1년생 버섯으로, 여름에서 가을에 걸쳐 활엽수 뿌리 밑동이나 그루터기에서 주로 자란다. 한방에서는 심신을 안정시켜주고 기혈을 보충해주며 기침을 진정시키는 등의 효능이 있어 신경쇠약·불면증·어지러움증·오래된 기침 등에 사용한다. 암과 관련된 연구도 진행되고 있으며, 일부 동물실험에서 영지가 암의 성장을 억제한다는 결과가 보고된 바 있다.

또한, 상기 조성물은 로리크린 (loricrin, LOR), 히알루론산 합성효소-1 (hyaluronic acid synthase-1, HAS-1), 히알루론산 합성효소-3 (hyaluronic acid synthase-3, HAS-3) 유전자의 발현을 증가시키는 것일 수 있다.

또한, 상기 조성물은 피부 장벽 기능을 개선 및 강화시키는 것일 수 있다.

본 발명에서 사용되는 용어 “로리크린 (loricrin)”은 피부 각질의 껍질을 구성하고 있는 단백질 중 하나로, 글리신, 세린, 메티오닌이 풍부하며 피부 장벽 기능에 관여하는 단백질을 의미한다. 이 단백질에 결함이 있으면 여러 가지 각화 이상 질환이 발생하는 것으로 알려져 있다.

본 발명에서 사용되는 용어 “히알루론산”은 글루코사민글라이칸 (glycosaminoglycan)의 하나이다. 히알루론산은 N-아세틸 글루코사민 (N-acetyl glucosamine)과 글루쿠론산 (Glucuronic acid)으로 이루어지는데, 히알루론산 합성효소 (hyaluronic acid synthase, HAS)를 통해 합성되며 합성 과정 중에는 세포외기질에 축적된다. 조직의 수분 유지, 세포 성장인자 및 영양성분의 저장 및 확산에 관여하며, 각질형성세포와 섬유아세포에 의해 합성되는 것으로 알려져 있다. 피부 내 히알루론산의 감소는 피부탄력 감소 및 주름 증가의 원인으로 알려져 있다.

본 발명에서 사용되는 용어 “히알루론산 합성효소 (hyaluronic acid synthase)”는 히알루론산을 합성하는 효소 단백질로, 히알루론산은 동물 등의 피부에 많이 존재하는 생체 합성 천연 물질이다. 히알루론산 합성효소-1 (HAS-1), 히알루론산 합성효소-2 (HAS-2) 및 히알루론산 합성효소-3 (HAS-3)이 알려져 있으며, 특히 HAS-3는 섬유아세포와 각질형성세포에서 히알루론산 합성에 중요한 역할을 한다고 알려져 있다.

따라서, 피부 내 히알루론산 함량 유지는 피부보습, 피부탄력 유지에 중요한 역할을 한다.

또한, 상기 사포나린은 5 내지 80 μg/mL 농도로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

또한, 상기 영지버섯 추출물은 50 내지 1000 μg/mL 농도로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

또한, 상기 영지버섯 추출물은 물, C₁ 내지 C₄ 알코올 또는 이들의 혼합용매로 추출한 것일 수 있으며, 바람직하게는 물로 추출한 것일 수 있다.

본 발명의 “화장료 조성물”은 상술한 본 발명의 사포나린의 화장품학적 유효량 (cosmetically effective amount) 및 화장품학적으로 허용되는 담체를 포함하여 제조할 수 있다.

본 명세서에서 용어 “화장품학적 유효량”은 상술한 본 발명의 조성물의 표피 각질형성세포의 증식을 통한 피부 재생 효능을 달성하는 데 충분한 양을 의미한다.

화장료 조성물의 외형은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유한다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는, 이온형 (리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다. 본 발명에 따른 조성물은 또한 포말 (foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따른 상기 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없으며, 예를 들면, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 아이크림, 아이에센스, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 팩, 파우더, 바디로션, 바디크림, 바디오일 및 바디에센스 등의 화장품으로 제형화될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 스킨, 로션, 크림, 에센스, 팩, 파운데이션, 색조화장품, 선크림, 투웨이케이크, 페이스파우더, 콤팩트, 메이크업베이스, 스킨커버, 아이쉐도우, 립스틱, 립글로스, 립픽스, 아이브로우 펜슬, 화장수 등의 화장품 및 샴푸, 비누 등의 세정제에 적용될 수 있다.

본 발명의 일 실시예에 따른 화장료 조성물에는 상기 사포나린 및 영지버섯 추출물 이외에 기능성 첨가물 및 일반적인 화장료 조성물에 포함되는 성분이 추가로 포함될 수 있다. 상기 기능성 첨가물로는 수용성 비타민, 유용성 비타민, 고분자 펩티드, 고분자 다당, 스핑고 지질 및 해초 엑기스로 이루어진 군에서 선택된 성분을 포함할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물에는 또한, 상기 기능성 첨가물과 더불어 필요에 따라 일반적인 화장료 조성물에 포함되는 성분을 배합해도 된다. 이외에 포함되는 배합 성분으로서는 유지 성분, 보습제, 에몰리엔트제, 계면 활성제, 유기 및 무기 안료, 유기 분체, 자외선 흡수제, 방부제, 살균제, 산화 방지제, 식물 추출물, pH 조정제, 알콜, 색소, 향료, 혈행 촉진제, 냉감제, 제한 (制汗)제, 정제수 등을 들 수 있다.

상기 사포나린 및 영지버섯 추출물은 상기 피부보습 증진, 피부탄력 증진 또는 피부보호용 화장료 조성물에 포함되는 것과 동일하므로 설명은 그 기재로 대신한다.

본 발명의 식품 조성물은 유효성분인 사포나린 및 영지버섯 추출물을 함유하는 것 외에 통상의 식품 조성물과 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.

상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨,소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 향미제는 천연 향미제 (타우마틴), 스테비아 추출물 (예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제 (사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다. 본 발명의 식품 조성물은 상기 약학적 조성물과 동일한 방식으로 제제화되어 기능성 식품으로 이용하거나, 각종 식품에 첨가할 수 있다. 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 음료류, 육류, 초코렛, 식품류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 사탕류, 아이스크림류, 알코올 음료류, 비타민 복합제 및 건강보조식품류 등이 있다.

또한, 상기 식품 조성물은 유효성분인 추출물 외에 여러 가지 영양제, 비타민, 광물 (전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제 (치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 식품 조성물은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.

본 발명의 기능성 식품 조성물은, 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상, 환 등의 형태로 제조 및 가공될 수 있다. 본 발명에서 '건강기능성식품 조성물'이라 함은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 말하며, 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다. 본 발명의 건강기능성식품은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 식품 첨가물로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전청에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다. 상기 '식품 첨가물 공전'에 수재된 품목으로는 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼슘, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물; 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물; L-글루타민산나트륨 제제, 면류첨가알칼리제, 보존료 제제, 타르색소제제 등의 혼합제제류 등을 들 수 있다. 예를 들어, 정제 형태의 건강기능성식품은 본 발명의 유효성분을 부형제, 결합제, 붕해제 및 다른 첨가제와 혼합한 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 다음, 활택제 등을 넣어 압축성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축 성형할 수 있다. 또한 상기 정제 형태의 건강기능성식품은 필요에 따라 교미제 등을 함유할 수도 있다. 캅셀 형태의 건강기능성식품 중 경질 캅셀제는 통상의 경질 캅셀에 본 발명의 유효성분을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 충진하여 제조할 수 있으며, 연질 캅셀제는 본 발명의 유효성분을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 젤라틴과 같은 캅셀기제에 충진하여 제조할 수 있다. 상기 연질 캅셀제는 필요에 따라 글리세린 또는 소르비톨 등의 가소제, 착색제, 보존제 등을 함유할 수 있다. 환 형태의 건강기능성식품은 본 발명의 유효성분과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 성형하여 조제할 수 있으며, 필요에 따라 백당이나 다른 제피제로 제피할 수 있으며, 또는 전분, 탈크와 같은 물질로 표면을 코팅할 수도 있다. 과립 형태의 건강기능성식품은 본 발명의 유효성분의 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 입상으로 제조할 수 있으며, 필요에 따라 착향제, 교미제 등을 함유할 수 있다.

본 발명에 따른 건강기능식품 조성물은 당업계에 공지된 통상적인 방법에 따라 다양한 형태로 제조할 수 있다. 일반 식품으로는 이에 한정되지 않지만 음료 (알콜성 음료 포함), 과실 및 그의 가공식품 (예: 과일통조림, 병조림, 잼, 마아말레이드 등), 어류, 육류 및 그 가공식품 (예: 햄, 소시지 콘비이프 등), 빵류 및 면류 (예: 우동, 메밀국수, 라면, 스파게이트, 마카로니 등), 과즙, 각종 드링크, 쿠키, 엿, 유제품 (예: 버터, 치이즈 등), 식용식물 유지, 마아가린, 식물성 단백질, 레토르트 식품, 냉동식품, 각종 조미료 (예: 된장, 간장, 소스 등) 등에 본 발명의 사포나린 및 영지버섯 추출물을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한, 영양보조제로는 이에 한정되지 않지만 캡슐, 타블렛, 환 등에 본 발명의 사포나린 및 영지버섯 추출물을 첨가하여 제조할 수 있다. 또한, 건강기능식품으로는 이에 한정되지 않지만 예를 들면, 본 발명의 사포나린 및 영지버섯 추출물 자체를 차, 쥬스 및 드링크의 형태로 제조하여 음용 (건강음료)할 수 있도록 액상화, 과립화, 캡슐화 및 분말화하여 섭취할 수 있다. 또한, 본 발명의 사포나린 및 영지버섯 추출물을 식품 첨가제의 형태로 사용하기 위해서는 분말 또는 농축액 형태로 제조하여 사용할 수 있다. 또한, 본 발명의 사포나린 및 영지버섯 추출물과 피부보습 증진, 피부탄력 증진 및 피부보호 효과가 있다고 알려진 공지의 활성 성분과 함께 혼합하여 조성물의 형태로 제조할 수 있다.

본 발명의 사포나린 및 영지버섯 추출물을 건강음료로 이용하는 경우, 상기 건강음료 조성물은 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드; 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드; 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 폴리사카라이드; 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜일 수 있다. 감미제는 타우마틴, 스테비아 추출물과 같은 천연 감미제; 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100 mL 당 일반적으로 약 0.01 ~ 0.04 g, 바람직하게는 약 0.02 ~ 0.03 g 이다.

또한, 본 발명의 사포나린 및 영지버섯 추출물은 피부보습 증진, 피부탄력 증진 및 피부보호용 식품 조성물의 유효성분으로 함유될 수 있는데, 그 양은 피부보습 증진, 피부탄력 증진 및 피부보호 작용을 달성하기에 유효한 양으로 특별히 한정되는 것은 아니나, 전체 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 100 중량%인 것이 바람직하다. 본 발명의 건강기능식품 조성물은 사포나린 및 영지버섯 추출물과 함께 피부보습 증진, 피부탄력 증진 및 피부보호 효과가 있는 것으로 알려진 다른 활성 성분과 함께 혼합하여 제조될 수 있다.

상기 외에 본 발명의 건강기능식품은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산, 펙트산의 염, 알긴산, 알긴산의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올 또는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강기능식품은 천연 과일주스, 과일주스 음료, 또는 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 혼합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100 중량부당 0.01 ~ 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.

이하, 본 발명의 실시예를 첨부된 도면을 참고하여 보다 상세하게 설명하도록 한다. 그러나, 하기의 실시예는 본 발명의 내용을 구체화 하기 위한 것일 뿐, 이에 의해 본 발명이 한정되는 것은 아닐 것이다.

<실시예 1> 영지버섯 추출물의 제조

영지버섯 추출물을 제조하기 위해, 분쇄된 80g의 영지버섯 및 3차 증류수 1.2L을 혼합한 혼합물을 80 ℃에서 2 시간 동안 2회 환류 추출하고 여과 후 감압 농축하여 영지버섯 추출물을 제조하였다.

<실시예 2> 세포 독성 확인

2-1. 사포나린의 세포 독성 확인

사포나린이 사람 피부 각질 형성 세포 (human keratinocyte cell, ATCC)에 독성을 띄는지 여부를 확인하고자 하였다.

구체적으로, HaCaT 세포를 DMEM 배지에 10% 소 태아 혈청 (FBS) 및 1% 항생제 (페니실린 및 스트렙토마이신)를 첨가하고 37 ℃ (5% CO₂)에서 배양하였다. 배양된 세포를 10% FBS가 함유된 DMEM으로 24-웰 플레이트에 웰 당 5 × 10⁴ 세포로 37 ℃ (5% CO₂)에서 24 시간 동안 부착시킨 후 농도별 사포나린 (5, 10, 20, 30, 40, 60, 80 μg/mL)을 처리하여 24 시간 배양 후 배지에 MTT (3- (4,5-dimethylthiazol-2-y1)-2-5-diphenyltetrazolium bromide)를 첨가하고 암조건에서 2 시간 동안 추가 배양 하였다. 배양 후 배지를 제거하고, dimethyl sulfoxide (DMSO) 200 ㎕를 첨가하여 570 nm 흡광도를 측정하여 하기 수학식 1으로 세포 생존율을 확인하였다. 그 결과는 도 1에 나타내었다.

도 1에 나타낸 바와 같이, 5 내지 80 μg/mL 농도의 사포나린 처리는 HaCaT 세포의 생존율에 영향을 미치지 않는 것을 확인할 수 있었다.

[수학식 1]

세포 생존율 (%) = (대조군 흡광도/실험군 흡광도)×100

2-2. 영지버섯 추출물의 세포 독성 확인

실시예 1의 영지버섯 추출물이 사람 피부 각질 형성 세포 (human keratinocyte cell, ATCC)에 독성을 띄는지 여부를 확인하고자 하였다. 실험방법은 실시예 2-1의 방법과 동일하게 수행하였으며, 50, 100, 200, 400, 500, 800, 1000 μg/mL 농도의 영지버섯 추출물을 사용하였다. 그 결과는 도 2에 나타내었다.

도 2에 나타낸 바와 같이, 50 내지 1000 μg/mL 농도의 영지버섯 추출물의 처리는 HaCaT 세포의 생존율에 영향을 미치지 않는 것을 확인할 수 있었다.

2-3. 사포나린 및 영지버섯 추출물 혼합물의 세포 독성 확인

다양한 농도의 사포나린 및 영지버섯 추출물을 혼합한 혼합물의 사람 피부 각질 형성 세포 (human keratinocyte cell, ATCC)에 독성을 띄는지 여부를 확인하고자 하였다. 실험방법은 실시예 2-1의 방법과 동일하게 수행하였으며, 혼합물은 각각의 사포나린 및 영지버섯 추출물을 동일한 농도로 처리하여 제조하였다.

<실시예 3> 피부 장벽 보호 기능 유전자 발현 분석

세포 생존율에 영향을 미치지 않는 농도의 사포나린 처리에 따른 HaCaT의 물리적 장벽 관련 유전자인 LOR 및 HAS-1과 화학적 장벽 관련 유전자인 HAS-3 발현량을 확인하고자 하였다.

구체적으로, 실험에는 80 μg/mL 농도의 사포나린, 80 μg/mL 농도의 영지버섯 추출물 및 이들의 혼합물이 사용되었으며, HaCaT 세포의 총 RNA는 TRIzol 시약을 사용하여 추출하였으며, 1 ㎍의 RNA를 oligo-dT 프라이머 및 ImProm-II reverse transcriptase와 혼합하고 42 ℃에서 60 분 동안 반응하여 cDNA를 합성하였다. cDNA 1 ㎕를 12.5 ㎕의 Sensi-FAST SYBR No_ROX 및 10 pmol의 피부 장벽 관련 유전자 특이 프라이머와 혼합한 후 최종 25 ㎕의 반응액으로 95 ℃에서 3분 1 회, 95 ℃에서 5초, 60 ℃에서 10초로 40회 및 최종 72 ℃에서 15초 반응하여 정량 PCR 분석을 수행하였다. 그 결과는 도 4에 나타내었다.

도 4에 나타낸 바와 같이, 사포나린 및 영지버섯 추출물을 혼합한 혼합물은 LOR, HAS-1, HAS-3 유전자의 발현을 유의하게 증가시켰다. 특히, 사포나린 및 영지버섯 추출물을 혼합한 혼합물은 대조군 (사포나린 및 영지버섯 추출물이 처리되지 않은 실험군) 뿐만 아니라 사포나린 및 영지버섯 추출물을 단독으로 사용한 경우와 비교하여 LOR 및 HAS-1 유전자의 발현을 2배 이상 증가시켰다.

이러한 결과는 사포나린 및 영지버섯 추출물을 혼합한 혼합물은 LOR, HAS-1 및 HAS-3 유전자의 발현을 유의적인 수준에서 증가시키므로 피부세포 내 로리크린 및 히알루론산을 증가시켜 피부보습, 피부탄력 또는 피부보호용 조성물로 유용하게 이용될 수 있을 뿐만 아니라, 사포나린 및 영지버섯 추출물을 혼합할 경우, 단독으로 사용한 경우와 비교하여 현저히 우수한 피부보습 증진, 피부탄력 증진 및 피부 장벽 기능 강화 효과를 가진다는 것을 의미한다.

이상에서 살펴본 바와 같이, 본 발명의 구체적인 실시예를 상세하게 설명되었으나, 본 발명의 사상을 이해하는 당업자는 동일한 사상의 범위 내에서 다른 구성요소를 추가, 변경, 삭제 등을 통하여, 퇴보적인 다른 발명이나 본 발명 사상의 범위 내에 포함되는 다른 실시예를 용이하게 제안할 수 있을 것이다. 그러므로 이상에서 기술한 실시예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적이 아닌 것으로 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상술한 상세한 설명보다는 후술하는 특허청구의 범위에 의하여 나타내어지며, 특허청구의 범위의 의미 및 범위 그리고 그 균등 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims

사포나린 및 영지버섯 물 추출물을 유효성분으로 포함하는, 피부보습 증진, 피부탄력 증진 또는 피부보호용 화장료 조성물.
◈청구항 2은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.◈

제1항에 있어서,
상기 조성물은 로리크린 (loricrin, LOR), 히알루론산 합성효소-1 (hyaluronic acid synthase-1, HAS-1) 및 히알루론산 합성효소-3 (hyaluronic acid synthase-3, HAS-3) 유전자의 발현을 증가시키는 것을 특징으로 하는, 피부보습 증진, 피부탄력 증진 또는 피부보호용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 사포나린은 5 내지 80 μg/mL 농도로 포함되는 것을 특징으로 하는, 피부보습 증진, 피부탄력 증진 또는 피부보호용 화장료 조성물.
제1항에 있어서,
상기 영지버섯 물 추출물은 50 내지 1000 μg/mL 농도로 포함되는 것을 특징으로 하는, 피부보습 증진, 피부탄력 증진 또는 피부보호용 화장료 조성물.
삭제
◈청구항 6은(는) 설정등록료 납부시 포기되었습니다.◈

제1항에 있어서,
상기 조성물은 피부 장벽 기능을 개선 및 강화시키는 것을 특징으로 하는, 피부보습 증진, 피부탄력 증진 또는 피부보호용 화장료 조성물.
사포나린 및 영지버섯 물 추출물을 유효성분으로 포함하는, 피부보습 증진, 피부탄력 증진 또는 피부보호용 식품 조성물.
사포나린 및 영지버섯 물 추출물을 유효성분으로 포함하는, 피부보습 증진, 피부탄력 증진 또는 피부보호용 건강기능식품 조성물.