KR101868701B1 - 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법에 관한 것 이다. 본 발명에 따른 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법은 건조된 상엽을 분쇄한 뒤 분쇄된 상엽을 열수추출하여 상엽 추출물을 제조하는 상엽 추출물 제조 단계; 물에 상기 상엽 추출물을 희석하여 상기 상엽 추출물이 0.1 내지 10 중량%로 포함되도록 하여 조반죽용 상엽 추출물을 제조하는 조반죽용 상엽 추출물 제조단계; 보리를 수분함량이 15중량% 이하가 되도록 건조하고, 건조된 보리를 분쇄하여 보리 가루를 제조하는 보리가루 제조 단계; 상기 보리가루를 1000 내지 2000 mesh의 입경크기를 가지는 제1 보리가루; 300 내지 800 mesh의 입경크기를 가지는 제2 보리가루 및 100 내지 300 mesh의 입경크기를 가지는 제3 보리가루로 분류하는 보리가루 분류 단계; 상기 제1 보리가루와 조반죽용 상엽 추출물을 혼합하고, 50 내지 90 ℃를 유지하면서 1500 내지 5500 RPM 으로 교반하면서 제1 조반죽을 제조하는 제1 조반죽 제조단계; 상기 제1 조반죽에 대하여 상기 제2 보리가루를 혼합하고, 30 내지 50 ℃를 유지하면서 1000 내지 3500 RPM 으로 교반하면서 제2 조반죽을 제조하는 제2 조반죽 제조단계; 상기 제2 조반죽에 대하여 상기 제3 보리가루를 혼합하고, 15 내지 40 ℃를 유지하면서 300 내지 1000 RPM 으로 교반하면서 제3 조반죽을 제조하는 제3 조반죽 제조단계; 상기 제3 조반죽을 압축 틀에 삽입하고, 압착한 뒤 0.1 내지 10 ℃를 유지하면서 10 내지 30 시간 동안 제3 조반죽을 숙성시키는 제1 숙성단계; 상기 숙성된 제3 조반죽에 정제염을 혼합하고, 50 내지 80 ℃를 유지하면서 800 내지 2000 RPM 이상으로 교반하면서, 보리가루 반죽을 제조하는 보리가루 반죽 제조단계; 상기 보리가루 반죽을 종이로 감싼 뒤 압축 틀에서 압착한 뒤 2 내지 5 ℃를 유지하면서 18 내지 72 시간 동안 보리가루 반죽을 숙성시키는 제2 숙성단계; 상기 숙성된 보리가루 반죽을 25 내지 45 ℃로 가열하면서 압연하여 제1 면대를 형성하는 제1 면대 제조단계; 상기 제1 면대를 60 내지 70 ℃로 가열하면서 압연하여 제2 면대를 형성하는 제2 면대 제조단계; 상기 제2 면대를 0.1 내지 10 ℃를 유지하면서 10 내지 80 시간 동안 숙성시키는 제3 숙성단계; 상기 제3 숙성단계를 거치 제2 면대를 50 내지 99중량%의 에탄올에 침지한 뒤 건조시키는 에탄올 침지 단계 및 상기 에탄올 침지 단계를 거친 제2 면대를 0.1 내지 3 를 유지하면서 18 내지 72 시간 동안 숙성시키는 제4 숙성단계를 포함하는 것일 수 있다.

Description

보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법{PROCESS FOR PRODUCING NOODLES CONTAINING BARLEY POWDER AND MULBERRY LEAF EXTRACT}

본 발명은 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법에 관한 것 이다. 보다 상세하게는 보리의 함량을 높이고 밀가루 기타 효소 또는 화학첨가제를 사용하지 않으면서도 식감과 풍미가 뛰어나고, 항염 효과를 낼 수 있는 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법에 관한 것이다.

다양한 연구를 통하여 IL-1β(IL-1β, 이하 'IL-1β'라 한다) 등이 염증 반응을 촉진하는 사이토카인의 한 종류로 알려져 있다(Punzi L. et al., Crit Rev Clin Lab Sci., 2002, 39(1):63-88). IL-1β 에 의해 유도되는 NF-κB (factor nuclear factor-kappa B)는 다양한 염증 인자들을 조절하는데, 비활성화 NF-κB인 p65 및 p50 서브유닛(subunit)으로 이루어진 헤테로다이머(heterodimer)가 IκB-α(inhibitor κB-alpha)와 결합된 상태로 세포질(cytoplasm)에 존재하다가, 전염증사이토카인(pro-inflammatory cytokine), 케모카인, 효소 등의 자극에 의하여 IκB-α가 인산화(phosphorylation)되면, IκB-α가 분해(degradation)되고 NF-κB가 핵 내로 이동하여 타겟 유전자의 프로모터(promoter)에 바인딩하여 염증 반응에 의한 사이토카인을 분비한다[Jeong et al., 2010].

또한, IL-1β에 의해 유도되는 신호전달 체계와 염증성 질환 및 대사성 질환과의 관련성은 다양하게 알려져 있다. 염증성 질환은 염증을 주병변으로 하는 질병을 총칭하는 것으로서, 상기 염증성 질환에는 급성 및 만성 염증 질환이 있으며, 구체적으로 부종, 피부염, 알레르기, 아토피, 천식, 결막염, 비염, 중이염, 인후염, 편도염, 폐렴, 위염, 크론병, 대장염, 치질, 통풍, 간직성 척추염, 루푸스, 섬유근통(fibromyalgia), 건선관절염, 골관절염, 류마티스 관절염, 견관절주위염, 건염, 건초염, 근육염, 간염, 방광염, 신장염, 쇼그렌 증후군(sjogren's syndrome) 및 다발성 경화증 등이 있다.

또한, 대사성 질환은 당질, 지질, 단백질, 비타민, 미네랄 및 수분 등의 불균형에 의한 질환을 총칭하는 것으로, 골다공증, 당뇨병, 고혈압, 고지혈증, 심장병 등이 있으며, 특히 우리 몸은 골형성과 골흡수가 반복하여 일어나는데, 이 과정에서 불균형이 일어나 골다공증이 발생한다. 이 때, IL-1β은 파골세포 분화에 관여하고 있어, 골다공증에 있어 치료 표적이 될 수 있음이 알려져 있다(A Nemetz, Gut 2001;49:644-649).

이와 같이 IL-1β에 의한 질환을 치료하기 위하여, IL-1β에 의해 유도되는 신호전달체계의 억제에 대하여 연구가 활발히 진행되고 있으며, IL-1β의 수용체인 항 IL-1R 항체를 이용한 것(선행기술 1, 대한민국 등록특허 10-1317045호)이 알려져 있다. 그러나 항 IL-1R 항체의 경우 개체 내로 도입되는 경우 외래 단백질로서 인지될 수 있는 부분인 에피토프를 가질 수 있으므로, 치료제로서 사용될 경우 여전히 면역원성일 수 있다. 상기와 같은 문제를 해결하기 위하여 면역체계에 인지되지 않는 단백질이 아닌 작은 분자 화합물(small molecule compound)을 이용하여 IL-1β에 의해 매개되는 질병의 치료제를 개발하기 위하여 많은 연구가 이루어지고 있다.

약학 조성물을 천연물 소재로 개발하고 있는 것으로는 대부분 추출물을 이용하여 제품화하고 있어 정확한 약리기전이 밝혀져 있지 않으나, 경구제로서 복용이 용이하고 독성 및 그에 따른 부작용이 적어 장기간 복용을 할 수 있으므로 그 개발이 활발하게 이루어지고 있다.

이러한 배경하에서 본 발명자들은 본 발명자들은 IL-1β에 의해 활성화되는 경로를 표적으로 하는 천연물을 찾기 위하여 노력한 결과, 상엽 추출물이 IL-1β에 의해 유도되는 신호전달 체계를 효과적으로 저해시킴을 확인하고, 상기 추출물을 유효성분으로 포함하는 IL-1β에 의한 질환 예방 또는 개선할 수 있다는 것을 확인하였다.

따라서, 건강식품으로 최근 각광받고 있는 보리를 활용한 식품 분야에 이를 활용함으로써, IL-1β에 의한 질환 예방 또는 개선할 수 있는 면 식품 조성물을 제공하기 위해 연구를 진행하였다.

특히 보리의 경우 후술하는 바와 같이 반죽에 점성이 없으므로 보리 가루 외에 밀가루를 혼합하거나, 효소 또는 기타 화학첨가제를 사용하여 면을 만들고 있는데, 보리 가루 이외에 다른 효소 또는 기타 화학첨가제나 밀가루 등을 포함하지 않으면서도 보리 가루 자체로서 탄력과 식감이 뛰어난 면류에 대한 개발을 진행하면서 상기 IL-1β에 의한 질환 예방 또는 개선할 수 있는 추출물을 활용하여 기능성 식품으로 완성하기에 이르렀다.

한편, 식생활의 서구화 내지 편리한 식생활 추구경향으로 변모되면서 밥을 대신하는 대용식으로 소비가 늘어 왔다. 그 중 밀가루를 이용한 국수나 라면과 같은 면류의 밀가루 자체의 부드러운 미감과 반죽 제조의 용이성으로 인해 소비 증가가 두드러지는 경향이다.

한편, 최근 생활수준이 향상됨에 따라 식품에 대한 소비자들의 기호성이 다양해지고 고급화되면서, 건강에 대해 유익한 가공식품을 선호하는 경향이 높아지고 있다. 이에 따라 밀가루보다 영양학적으로 우수한 곡물을 이용해서 국수와 같은 면류를 제조할 수 있는 방법에 대한 연구가 계속되고 있다.

대표적인 곡물인 쌀을 이용해서 쌀가루 자체의 거친 맛과 가공성이 부족한 문제를 해결하기 위한 방안으로, 가내 및 소규모의 쌀국수의 생산은 동양의 쌀 생산 국가에서는 예로부터 널리 알려져 왔다. 사용되는 방법은 지역 또는 국가에 따라 다르나, 지역의 전통 및 쌀의 지역 형태의 특성의 기능에 따라 전해지는, 연결 및/또는 반복되는 몇 가지 기본 조작에 기초하고 있다. 근본적인 문제는 쌀반죽에 부족한 점착성을 부여하는 것이다. 한편으로는 쌀의 저단백질 함량 및 다른 한편으로는 이러한 단백질의 성질은, 빵 또는 파스타(pasta)와 같은 제품에서 밀의 글루텐에 의해 형성되는 것과 비교되는 쌀에 있어서 망상 구조를 생산하게 함을 불가능하게 하는 것을 의미한다. 녹말 입자가 묻혀 있는 이러한 망상구조를 대신하기 위해 접합제를 사용하거나, 녹말 입자에 처리를 하여 스스로 필요한 점착성을 갖는 덩어리를 형성할 수 있도록 하는 것이 필요하다. 점착성의 이러한 문제점은 신선한 파스타 반죽의 단계 뿐만 아니라 최종 제품의 재구성 및 소비 단계에서 다시 직면한다.

한편, 보리의 경우 그 영양학적 우수성에 불구하고, 보리를 분쇄한 보리 가루만으로는 전분이 극히 부족하여 그대로 물에 반죽 하여도 부드럽지 못하고 푸석거리며 면발을 만들 때 끊어지는 등 상기 언급한 쌀에 비하여도 면류로 가공하는데 상당히 많은 제한을 가진다.

또한 보리를 면류의 주재료로 사용하는 경우 보리의 함량을 높일수록 면으로 가공하기 어렵고, 특히 매끄럽고 고운 면발로 뽑아내는데 어려움이 있을 뿐만 아니라, 보리의 거친 식감이 기호도를 저하시키며, 만들어진 면에 탄력이 적고, 쉽게 끊어지기 때문에 면류를 이용한 다양한 음식에서 활용되기 어려운 문제를 가진다.

구체적으로 보면, 밀가루의 함유 단백질인 글루텐 중 특히 글루테닌(glutenins), 글리아딘(gliadin) 등은 물과 혼화되어 반죽을 만들기 쉽고, 면의 형태를 잘 형성시킬 수 있는 특징을 가지지만, 보리가루는 그 함유 단백질이 대부분 홀데인(hordein)이기 때문에 이를 물과 혼화시켰을 경우 글루텐 단백질과 달리 물과 잘 혼화되지 않고 점성이 약하기 때문에 면의 형태를 잡기 어렵기 때문에 보리 가루를 단독으로 사용하는 경우 면류를 생산하기가 상당히 어렵다.

따라서, 종래 보리를 포함하는 면류를 살펴보면, 보리 가루에 상당량의 밀가루를 혼합하여 면류로 가공하고 있는데, 실질적으로 보리의 함량이 상대적으로 적게 포함되는 경우가 많으며, 보리 함량을 높이면서 면의 탄력성을 배가하기 위하여 합성첨가제를 사용하는 경우가 많다.

이러한 문제점에 따라 보리가 가지는 영양학적 우수성 또는 다이어트 기능성에 불구하고, 보리를 면류로 제공하여 다양한 면요리에 보리 가공식품을 쉽게 보급하는데 걸림돌이 되고 있다.

따라서, 밀가루 등 다른 곡물과 기타 합성 첨가제를 첨가하지 않으면서도 보리의 함량을 높일 수 있을 뿐만 아니라 가공된 면류가 높은 식감과 기호성을 가질 수 있도록 하는 보리를 포함하는 면류에 대한 개발이 필요하다.

관련 선행기술을 참조하면, KR 10-2009-0018465 A(선행기술 2, 공개일자: 2009년 2월 20일)은 글루타미나아제 또는 트랜스글루타미나아제를 첨가한 반죽을 이용하여 면발을 제조하는 제면방법을 개시하고 있으며, 상기 반죽은 보리가루를 주원료로 하는 것으로 개시하고 있다. 그러나, 상기 글루타미나아제 또는 트랜스글루타미나아제는 식용접착제로 사용되는 첨가제로서 상술한 바와 같이 보리가루에 부족한 혼화 및 점성을 부여하기 위한 것이다. 이에 의하는 경우 보리가 가진 향미와 식감을 그대로 살리기가 어렵고, 소비자의 이러한 첨가제에 대한 거부감 때문에 제품화 하여 널리 보급하는데 한계를 가진다.

또한, KR 10-1293279 B1(선행기술 3, 공고일자: 2013년 8월 9일)은 메성쌀보리가루 20 내지 60중량%, 강력분 밀가루 40 내지 80중량%를 혼합한 혼합분을 이용하여 보리국수를 제조하는 방법이 개시되어 있다. 이 역시 상술한 바와 같이 보리의 혼화 및 점성이 충분하지 않은 점은 보완하기 위해 강력분을 포함하는 것으로 보리의 함량을 밀가루의 함량보다 낮을 수 밖에 없어, 보리 함량이 높은 면을 제조할 수 없다는 문제를 가진다.

KR 10-1317045 B1 KR 10-2009-0018465 A KR 10-1293279 B1

본 발명의 목적은 보리와 함께 잘 어우러지면서 보리를 포함하는 면의 향미와 식감을 높일 수 있고 IL-1β에 의한 질환 예방 또는 개선할 수 있는 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법을 제공하기 위한 것이다.

또한, 보리를 90중량% 이상으로 포함하면서도 면의 표면이 매끄러울 뿐만 아니라 탄력이 우수하고, 보리의 향미와 식감이 높아 기호성이 우수할 수 있는 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법을 제공하기 위한 것이다.

그리고 본 발명의 다른 목적은 IL-1β에 의한 질환 예방 또는 개선할 수 있고, 우수한 식감과 기호성을 가지는 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법으로 제조된 면류를 제공하기 위한 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 실시예에 따른 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법은 건조된 상엽을 분쇄한 뒤 분쇄된 상엽을 용매로 추출하여 상엽 추출물을 제조하는 상엽 추출물 제조 단계; 물에 상기 상엽 추출물을 희석하여 상기 상엽 추출물이 0.1 내지 10 중량%로 포함되도록 하여 조반죽용 상엽 추출물을 제조하는 조반죽용 상엽 추출물 제조단계; 보리를 수분함량이 15중량% 이하가 되도록 건조하고, 건조된 보리를 분쇄하여 보리 가루를 제조하는 보리가루 제조 단계; 상기 보리가루를 1000 내지 2000 mesh의 입경크기를 가지는 제1 보리가루; 300 내지 800 mesh의 입경크기를 가지는 제2 보리가루 및 100 내지 300 mesh의 입경크기를 가지는 제3 보리가루로 분류하는 보리가루 분류 단계; 상기 제1 보리가루와 조반죽용 상엽 추출물을 혼합하고, 50 내지 90 ℃를 유지하면서 1500 내지 5500 RPM 으로 교반하면서 제1 조반죽을 제조하는 제1 조반죽 제조단계; 상기 제1 조반죽에 대하여 상기 제2 보리가루를 혼합하고, 30 내지 50 ℃를 유지하면서 1000 내지 3500 RPM 으로 교반하면서 제2 조반죽을 제조하는 제2 조반죽 제조단계; 상기 제2 조반죽에 대하여 상기 제3 보리가루를 혼합하고, 15 내지 40 ℃를 유지하면서 300 내지 1000 RPM 으로 교반하면서 제3 조반죽을 제조하는 제3 조반죽 제조단계; 상기 제3 조반죽을 압축 틀에 삽입하고, 압착한 뒤 0.1 내지 10 ℃를 유지하면서 10 내지 30 시간 동안 제3 조반죽을 숙성시키는 제1 숙성단계; 상기 숙성된 제3 조반죽에 정제염을 혼합하고, 50 내지 80 ℃를 유지하면서 800 내지 2000 RPM 이상으로 교반하면서, 보리가루 반죽을 제조하는 보리가루 반죽 제조단계; 상기 보리가루 반죽을 종이로 감싼 뒤 압축 틀에서 압착한 뒤 2 내지 5 ℃를 유지하면서 18 내지 72 시간 동안 보리가루 반죽을 숙성시키는 제2 숙성단계; 상기 숙성된 보리가루 반죽을 25 내지 45 ℃로 가열하면서 압연하여 제1 면대를 형성하는 제1 면대 제조단계; 상기 제1 면대를 60 내지 70 ℃로 가열하면서 압연하여 제2 면대를 형성하는 제2 면대 제조단계; 상기 제2 면대를 0.1 내지 10 ℃를 유지하면서 10 내지 80 시간 동안 숙성시키는 제3 숙성단계; 상기 제3 숙성단계를 거치 제2 면대를 50 내지 99중량%의 에탄올에 침지한 뒤 건조시키는 에탄올 침지 단계 및 상기 에탄올 침지 단계를 거친 제2 면대를 0.1 내지 3 를 유지하면서 18 내지 72 시간 동안 숙성시키는 제4 숙성단계를 포함하는 것일 수 있다.

상기 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법에 있어서, 상기 제2 숙성단계는 상기 보리가루 반죽에 삼지닥나무를 삽입하여 18 내지 72 시간 동안 숙성된 것이고, 상기 제1 면대 제조 단계 이전에 상기 보리가루 반죽에서 상기 삼지닥나무를 제거한 것일 수 있다.

상기 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법에 있어서, 에탄올 침지 단계 이후에 상기 제2 면대에 홍화씨유를 도포하고, 0.1 내지 10 를 유지하면서 60 내지 80 시간 동안 숙성시키는 표면 숙성단계를 더 포함하는 것일 수 있다.

상기 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법에 있어서, 에탄올 침지 단계에서 상기 에탄올은 미역, 질경이 및 칡을 침지한 뒤 그 여액을 분리한 것이고, 상기 건조는 냉풍 건조하는 것일 수 있다.

상기 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법에 있어서, 상기 상엽 추출물 제조단계에서 상기 용매는 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 및 이들의 혼합 용매로 구성되는 군으로부터 선택된 것일 수 있다.

상기 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법에 있어서, 상기 상엽 추출물 제조단계에서 상기 용매는 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 및 이들의 혼합 용매로 구성되는 군으로부터 선택된 것이고, 항염효과를 가지는 것일 수 있다.

상기 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법에 있어서, 상기 상엽 추출물 제조단계에서 상기 상기 상엽은 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus), 비피도 박테리윰 비피듐(Bifidobacterium bifidum) 비피더스균, 비피도 박테리움 브레브(Bifidobacterium breve) 비피더스균, 및 락토바실러스 아시도 필루스(Lactobacillus acidophilus)로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 접종하여 발효된 것일 수 있다.

보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법에 있어서, 상기 조반죽용 상엽 추출물 제조단계에서 상기 조반죽용 상엽 추출물은 물에 상기 상엽 추출물을 희석하여 상기 상엽 추출물이 0.1 내지 10 중량%로 포함되도록 하고, 노간주나무 열수추출물, 병조희풀 열수추출물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나를 더 포함하는 것일 수 있다.

본 발명의 다른 일 실시예에 따른 항염 효과를 가지는 면류는 상기 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법에 따라 제조되고, 항염효과를 가지는 것일 수 있다.

이하, 본 발명을 더욱 상세하게 설명한다.

본 발명의 일 실시예에 따른 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법은 건조된 상엽을 분쇄한 뒤 분쇄된 상엽을 용매로 추출하여 상엽 추출물을 제조하는 상엽 추출물 제조 단계(C1); 물에 상기 상엽 추출물을 희석하여 상기 상엽 추출물이 0.1 내지 10 중량%로 포함되도록 하여 조반죽용 상엽 추출물을 제조하는 조반죽용 상엽 추출물 제조단계(C2); 보리를 수분함량이 15중량% 이하가 되도록 건조하고, 건조된 보리를 분쇄하여 보리 가루를 제조하는 보리가루 제조 단계(S1); 상기 보리가루를 1000 내지 2000 mesh의 입경크기를 가지는 제1 보리가루; 300 내지 800 mesh의 입경크기를 가지는 제2 보리가루 및 100 내지 300 mesh의 입경크기를 가지는 제3 보리가루로 분류하는 보리가루 분류 단계(S2); 상기 제1 보리가루와 조반죽용 상엽 추출물을 혼합하고, 50 내지 90 ℃를 유지하면서 1500 내지 5500 RPM 으로 교반하면서 제1 조반죽을 제조하는 제1 조반죽 제조단계(S3); 상기 제1 조반죽에 대하여 상기 제2 보리가루를 혼합하고, 30 내지 50 ℃를 유지하면서 1000 내지 3500 RPM 으로 교반하면서 제2 조반죽을 제조하는 제2 조반죽 제조단계(S4); 상기 제2 조반죽에 대하여 상기 제3 보리가루를 혼합하고, 15 내지 40 ℃를 유지하면서 300 내지 1000 RPM 으로 교반하면서 제3 조반죽을 제조하는 제3 조반죽 제조단계(S5); 상기 제3 조반죽을 압축 틀에 삽입하고, 압착한 뒤 0.1 내지 10 ℃를 유지하면서 10 내지 30 시간 동안 제3 조반죽을 숙성시키는 제1 숙성단계(S6); 상기 숙성된 제3 조반죽에 정제염을 혼합하고, 50 내지 80 ℃를 유지하면서 800 내지 2000 RPM 이상으로 교반하면서, 보리가루 반죽을 제조하는 보리가루 반죽 제조단계(S7); 상기 보리가루 반죽을 종이로 감싼 뒤 압축 틀에서 압착한 뒤 2 내지 5 ℃를 유지하면서 18 내지 72 시간 동안 보리가루 반죽을 숙성시키는 제2 숙성단계(S87); 상기 숙성된 보리가루 반죽을 25 내지 45 ℃로 가열하면서 압연하여 제1 면대를 형성하는 제1 면대 제조단계(S9); 상기 제1 면대를 60 내지 70 ℃로 가열하면서 압연하여 제2 면대를 형성하는 제2 면대 제조단계(S10); 상기 제2 면대를 0.1 내지 10 ℃를 유지하면서 10 내지 80 시간 동안 숙성시키는 제3 숙성단계(S11); 상기 제3 숙성단계를 거치 제2 면대를 50 내지 99중량%의 에탄올에 침지한 뒤 건조시키는 에탄올 침지 단계(S12) 및 상기 에탄올 침지 단계를 거친 제2 면대를 0.1 내지 3 를 유지하면서 18 내지 72 시간 동안 숙성시키는 제4 숙성단계(S13)를 포함하는 것일 수 있다.

본 발명에서 말하는 상엽은 뽕나무 Morus alba Linne 또는 산뽕나무 Morus bombycis Koidzumi(뽕나무과 Moraceae)의 잎이다. 일명 동상엽(冬桑葉)이라고도 한다. 잎으로 달걀모양 또는 넓은 달걀모양이고 3 내지 5개로 갈라진 것도 있으며 길이 8 내지 15cm, 너비 7 내지 13cm이다. 윗면은 황록색 또는 연한 황갈색이다. 잎 끝은 뾰족하고 아랫부분은 심장형으로 되어 있으며, 잎 가장자리는 거치가 있다. 아랫면에는 엽맥이 돌출되어 있고 작은 엽맥은 그물 모양이며 그 위에 털이 나 있다. 질은 부스러지기 쉽고 가볍다. 냄새가 거의 없고 맛은 담담하나 약간 쓰며 떫다.

바람직하게 상기 상엽 추출물을 포함함에 따라 MAPK 패밀리 및 NF-κB의 활성을 저해함으로써, iNOS, NO, COX-2, PGE₂ 및 MMP 발현을 억제하여 기질을 보호하고 염증 반응을 억제할 수 있다. 또한, 상기 상엽 추출물은 IL-1β에 의한 질환 예방 또는 개선할 수 있는 효과를 가지는데, 상기 'IL-1β에 의한 질환'은 IL-1β이 IL-1β의 수용체에 결합하여, MAPK와 NF-κB의 활성을 유도하고, 그의 타겟 유전자를 발현시킴으로써 발병되는 질환을 의미한다. 상기 IL-1β에 의한 질환은 이에 한정되지 않으나, 염증성 질환 또는 대사성 질환일 수 있다. 상기 염증성 질환은 염증을 주병변으로 하는 질병을 총칭하는 의미로서, 골관절염, 류마티스 관절염, 건선관절염, 아토피성 피부염, 건선, 천식, 전신 홍반성 루푸스, 및 다발성 경화증으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것일 수 있고, 바람직하게는 골관절염 또는 류마티스 관절염인 것일 수 있다. 상기 대사성 질환은 생체 내 물질대사 장애에 의해서 발생하는 질환을 총칭하는 의미로서, 골다공증, 동맥경화 및 심근경색으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것일 수 있으며, 바람직하게는 골다공증일 수 있다.

상기 'IL-1β에 의한 질환'은 IL-1β이 IL-1β의 수용체에 결합하여, MAPK와 NF-κB의 활성을 유도하고, 그의 타겟 유전자를 발현시킴으로써 발병되는 질환을 의미한다. 상기 IL-1β에 의한 질환은 이에 한정되지 않으나, 염증성 질환 또는 대사성 질환일 수 있다. 상기 염증성 질환은 염증을 주병변으로 하는 질병을 총칭하는 의미로서, 골관절염, 류마티스 관절염, 건선관절염, 아토피성 피부염, 건선, 천식, 전신 홍반성 루푸스, 및 다발성 경화증으로 구성되는 군으로부터 선택되는 것일 수 있고, 바람직하게는 골관절염 또는 류마티스 관절염인 것일 수 있다. 상기 대사성 질환은 생체 내 물질대사 장애에 의해서 발생하는 질환을 총칭하는 의미로서, 골다공증, 동맥경화 및 심근경색으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것일 수 있으며, 바람직하게는 골다공증일 수 있다.

IL-1β는 IL-1β의 수용체인 IL-1R에 결합하면서 이후 다운스트림(down stream)에 있는 MAPK와 NF-κB를 경유하여 기질 분해 관련 MMP와 염증 관련 iNOS, COX-2를 조절한다. 본 발명의 상엽 추출물은 IL-1β에 의한 신호 전달에 있어서, MAPK 패밀리인 p38, JNK의 발현을 억제하는 활성을 가지며, IκB-α의 분해의 저해제(inhibitor)로서 IκB-α의 분해를 억제하고 NF-κB 활성을 감소시킬 수 있다(도 7 및 도 8 참조).

본 발명의 일 실시예에서는 본 발명의 상엽 추출물이 염증 유발 관련 iNOS 및 iNOS에 의해 증가하는 NO(산화질소), COX-2 및 아라키돈산으로부터 합성되는 PGE₂(프로스타글란딘E₂)의 발현을 억제함으로써, 염증 반응을 억제하는데 우수한 조성물임을 알 수 있었다. 이와 같은 결과로부터 본 발명의 상엽 추출물이 대표적인 염증성 질환의 일종인 골관절염, 류마티스 관절염을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있음을 보여, 염증성 질환과 같은 IL-1β에 의한 질환의 치료에 유용하게 사용할 수 있음을 확인하였다.

본 발명의 일 실시예에서는 본 발명의 상엽 추출물이 결합조직의 세포외 기질과 기저막의 주성분을 분해하는 MMP의 활성을 효과적으로 억제하는 것을 확인하였다. MMP는 섬유아세포와 다형핵성백혈구, 상피세포 및 대식세포에 의하여 분비되는 콜라게나아제로, 골 흡수와 관련하여 부갑상선 호르몬 및 세포내 독소, 프로스타글란딘은 MMP의 합성을 증가시키는 것으로 알려져 있다. 본 발명의 상엽 추출물은 MAPK 패밀리 및 MAPK의 타겟 유전자인 MMP, 특히 MMP-1, MMP-3, MMP-13의 발현을 감소시켜 콜라게나아제를 억제함으로써 연골을 보호하므로 골대사 질환에 적합한 약학 조성물이라는 것을 보여주었다. 이와 같은 결과로부터 본 발명의 상엽 추출물이 대표적인 염증성 질환인 골관절염, 류마티스 관절염과 대표적인 대사성 질환인 골다공증을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있음을 확인하였고, 이는 염증성 질환 또는 대사성 질환과 같은 IL-1β에 의한 질환의 치료에 효과적일 수 있음을 의미한다.

본 발명에 있어서, '예방'은 상기 조성물의 투여에 의해 IL-1β에 의한 질환을 억제하거나 발병을 지연시키는 모든 행위를 의미하며, '치료'는 상기 조성물의 투여에 의해 IL-1β에 의한 질환에 의한 증세가 호전되거나 이롭게 변경하는 행위를 의미한다.

본 발명에 있어서, 상기 상엽 추출물은 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 및 이들의 혼합 용매로 구성되는 군으로부터 선택된 용매로 추출한 것일 수 있다. 상기 '상엽 추출물'이란 상엽을 추출하여 수득한 추출물을 의미한다. 상기 상엽 추출물은 상엽 분쇄물을 물, 에탄올, 메탄올 등과 같은 탄소수(C₁) 내지 (C₆)의 알코올과 같은 극성 용매, 또는 알코올과 물의 1:0.1 내지 1:10의 혼합비를 갖는 혼합 용매로 용출할 수 있으며, 바람직하게는 1: 3 내지 5 의 에탄올과 물의 혼합비를 가지는 혼합 용매로 용출할 수 있다. 이 때, 추출 온도는 10℃ 내지 100℃, 바람직하게는 실온에서, 추출 기간은 12시간 내지 4일, 바람직하게는 24시간 동안 추출한 추출물 일 수 있다. 여과된 추출물을 진공 회전 농축기로 감압 농축하여 수득한 결과물일 수 있으나, 본 발명의 IL-1β에 의한 질환의 치료 효과를 나타낼 수 있는 상엽 추출물인 한, 이에 제한되지 않고, 추출액, 추출액의 희석액 또는 농축액, 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 또는 이의 조정제물 또는 정제물을 모두 포함한다.

상기 상엽은 뽕나무의 줄기, 뿌리, 열매 등에 비하여 IL-1β에 대한 억제 효과가 우수하다. 따라서, 바람직하게는 상엽에 대한 에탄올 추출물을 사용하는 것일 수 있다.

바람직하게는 상기 에탄올은 12 내지22 중량%인 것일 수 있다. 상기 범위에 의한 추출물은 유효성분의 수득에 가장 유리할 수 있다.

상기 상엽 추출물은 발효된 상엽을 사용하여 추출된 것일 수 있다. 발효된 상엽을 사용하는 경우 세포독성이 낮아 상대적으로 높은 농도에서 안정적으로 사용할 수 있는 장점이 있다.

상기 발효에 사용하는 미생물로는 락토바실러스 살리바리우스(Lactobacillus salivarius), 락토바실러스 아시도필루스(Lactobacillus acidophilus), 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus), 락토바실러스 플랜타룸(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 헬베티쿠스(Lactobacillus helveticus), 락토바실러스 퍼멘툼(Lactobacillus fermentum), 락토바실러스 파라카세이(Lactobacillus paracasei), 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 델브루에키(Lactobacillus delbrueckii), 락토바실러스 레우테리(Lactobacillus reuteri), 락토바실러스 부츠네리(Lactobacillus buchneri), 락토바실러스 가세리(Lactobacillus gasseri), 락토바실러스 존스니(Lactobacillus johonsonii), 락토바실러스 케피르(Lactobacillus kefir) 등과 같은 유산 바실리, 락토코코스 락티스(Lactococcus lactis), 락토코코스 플랜타룸(Lactococcus plantarum), 락토코코스 라피노락티스(Lactococcus raffinolactis), 엔테로코코스파에칼리스(Enterococcus faecalis), 엔테로코코스 파에시늄(Enterococcus faecium), 스트렙토코코스 터모필리우스(Streptococcus thermophilus), 류코노스톡락티스(Leuconostoc lactis), 류코노스톡 메센테로이드(Leuconostoc mesenteroides) 등과 같은 유산 콕사이 및 비피도박테리움 애닐멀스(Bifidobacterium animals), 비피도 박테리움 비피듐(Bifidobacterium bifidum),비피도박테리움 브레브(Bifidobacterium breve), 비피도박테리움 인판티스(Bifidobacterium infantis), 비피도바테리움 롱굼(Bifidobacterium longum), 비피도박테리움 수도롱굼(Bifidobacterium pseudolongum), 비피도박테리움 터모필룸(Bifidobacterium themophilum), 비피도박테리움 아돌센티스(Bifidobacterium adolescentis) 등과 같은 비피도박테리아를 포함할 수 있으며, 더욱 바람직하게는 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus), 비피도 박테리윰 비피듐(Bifidobacterium bifidum) 비피더스균, 비피도 박테리움 브레브(Bifidobacterium breve) 비피더스균, 및 락토바실러스 아시도 필루스(Lactobacillus acidophilus)로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상인 것일 수 있다.

상기 상엽 추추물 제조단계(C1)에서 제조된 상엽 추출물은 항염 등의 효과 뿐만 아니라, 하기의 보리를 주원료로 포함하는 면류와 잘 어우러지면서 풍분한 향미와 식감을 낼 수 있다.

상기 조반죽용 상엽 추출물 제조단계(C2)는 물에 상기 상엽 추출물을 희석하여 상기 상엽 추출물이 0.1 내지 10 중량%로 포함되도록 하여 조반죽용 항염 효과를 높이고 제조된 면류의 향미를 높이기 위한 제1 조반죽에 첨가하는 추출물을 제조하는 과정이다.

상기 조반죽용 상엽 추출물을 상기 범위로 희석하지 않으며, 제1 조반죽이 잘 만들어지지 않기 때문에 보리 함량이 높은 면 자체를 만들 수 없는 문제가 있다.

따라서 상기 상엽 추출물이 0.1 중량% 미만으로 포함되는 경우 MAPK 패밀리 및 NF-κB의 활성을 저해함으로써, iNOS, NO, COX-2, PGE₂ 및 MMP 발현을 억제하여 기질을 보호하고 염증 반응을 억제하는 효과가 거의 나타나지 않으며, 또한 10 중량%를 초과하는 경우 알코올 함량이 높아지고, 수분이 적어 제1 조반죽의 점성이 낮아 반죽이 만들어지지 않는 문제가 있다.

본 발명에서 보리는 보리 알갱이 일 수 있다.

상기 보리가루 제조단계(S1)에서 보리는 수분함량이 15% 이하가 되어야 한다. 상기 범위를 초과하여 수분이 함유된 경우 분쇄 및 보리가루를 입경별로 분류하는 것이 원할하지 않는 문제가 있다.

상기 분쇄는 보리를 일정한 크기로 절단하는 과정을 말하며, 상기 분쇄방법은 압착밀링, 볼밀 등 해당 분야에서 통상적으로 사용될 수 있는 분쇄방법을 포함하는 것으로 본다.

제1 보리가루는 1000 내지 2000 mesh의 입경크기를 가지는 것으로 상대적으로 미세한 입자로 구성된 것이다. 상기 제1 보리가루는 상대적으로 작은 입경으로 보리 가루가 물에 혼화될 때 보리 가루 입자가 물과 맞닿는 표면적을 넓혀 점도와 탄성을 향상시킬 수 있다. 특히 상기 제1 보리가루는 반죽의 초기 점도와 탄성을 부여하기 때문에 상당히 중요하다.

상기 제1 보리가루가 1000 mesh 미만의 입경을 가지는 경우 보리가루 입자가 물과 맞닿는 표면적이 감소하여 보리의 낮은 점성과 탄성으로 전체적으로 반죽이 잘 뭉쳐지지 않기 때문에 높은 보리 함량을 가지는 면을 제조할 수 없는 문제를 가진다. 반면, 상기 제1 보리가루가 2000 mesh를 초과하는 경우 상기 제1 보리가루가 물에 분산되면서 각 입자의 응집력에 의해 뭉쳐지기 때문에 입자의 형태가 고르게 형성되지 않을 뿐만 아니라, 물과 제1 보리가루 입자 간의 분산이 원활하지 않다는 문제를 가진다. 따라서 상기 제1 보리가루가 2000 mesh를 초과하는 경우 반죽의 점성과 탄성이 오히려 감소하게 되는 문제를 가진다.

상기 제2 보리가루는 300 내지 800 mesh의 입경크기를 가지는데, 상기 제2 보리 가루는 상기 제1 보리가루에 의해서 만들어진 제1 조반죽에 포함되면서 반죽의 점도를 높이게 된다. 제2 보리가루 반죽이 300 mesh 미만인 경우 보리가루의 입자가 상대적으로 크기 때문에 상기 제1 조반죽에 고르게 분산되면서 점도를 높일 수가 없고, 오히려 제1 조반죽의 점성을 낮추고, 각 입자가 따로 분산되어 반죽의 탄력을 감소시키는 문제가 있다. 반면, 제2 보리가루가 800 mesh를 초과하는 경우 입자크기가 상대적으로 작기 때문에 제1 조반죽에서 일면 달라붙어 분산되지 않기 때문에 제2 보리가루를 사용하여 제1 조반죽의 점성을 높이는 효과를 낼 수가 없다.

상기 제3 보리가루는 100 내지 300 mesh의 입경크기를 가진다. 상기 제3 보리가루는 상대적으로 큰 입경으로 보리가 가지고 있는 향미와 식감이 높아질 수 있도록 하며, 제2 조반죽에 포함되면서 반죽의 점성을 보다 높여줄 수 있다.

상기 제3 보리가루가 100 mesh 미만으로 포함된 경우 입경이 너무 크기 때문에 반죽이 잘 되지 않을 뿐만 아니라, 최종 결과물이 면이 잘 끊어져 탄력을 가지지 못하게 하는 문제가 있다. 또한 300 mesh를 초과하는 경우에는 면에 상대적으로 큰 입자가 낼 수 있는 보리의 향미와 식감을 높이는 효과가 미미할 뿐만 아니라, 제2 조반죽의 수분을 순간적으로 흡수하면서 반죽의 점성을 오히려 낮추는 문제가 있다.

한편 본 발명에서 발하는 조반죽은 면을 제조하기 위해 만든 반죽 이전에 숙성을 위하여 만들어진 초기 만죽을 의미한다.

상기 제1 보리가루, 제2 보리가루 및 제3 보리가루를 한꺼번에 혼합한 뒤 물에 혼화시켜 반죽을 제조하는 경우 점성이 거의 없어 면을 제조하기 어렵고, 설사 제조하는 경우라 할지라도 면이 상당히 잘 끊어지며 탄력이 없기 때문에 식감이 낮아지는 문제를 가진다.

따라서 상기 제1 조반죽 단계를 통하여 기본반죽을 먼저 만들어야 한다. 상기 제1 조반죽 단계는 상대적으로 높은 온도인 50 내지 90 ℃에서 진행되어야 하는데, 제1 보리가루가 순간적으로 팽창하면서 보다 높은 표면으로 물과 맞닿으면서 초기 점성을 부여하여 반죽을 만들기 위함이다. 따라서 온도가 50 ℃ 미만인 경우 보리입자가 팽창하면서 넒은 표면적으로 물과 혼화되어 점성이 높아지는 효과를 낼 수 없고, 90 ℃ 초과하는 경우 상대적으로 높은 온도에 의해 점성이 부여되지 않는 문제를 가진다.

또한 상기 제1 조반죽은 1500 내지 5500 RPM으로 상대적으로 빠르게 교반시켜야 반죽의 초기 점성을 나타낼 수 있다. 따라서 1500 RPM 미만으로 교반하는 경우에는 반죽의 초기 점성 부여가 어렵기 때문에 제1 조반죽이 잘 만들어지지 않으며, 5500 RPM을 초과하는 경우에는 상대적으로 교반속도가 너무 빨라 초기 분산에는 유리하지만 빠른 교반으로 보리가루와 물의 혼화가 안정적으로 이루어지지 않기 때문에 반죽의 점성이 오히려 떨어지는 문제를 가진다.

또한 제2 조반죽 제조단계는 상기 제1 조반죽에 직접 상기 제2 보리가루를 혼합하여 조반죽의 점성을 증진시키는 과정이다. 따라서 점도를 증가시키기 위해 상기 제1 조반죽 제조단계에 비하여 온도를 낮추어야 하며, 일정한 반죽이 만들어진 뒤에 점성을 높이는 과정이기 때문에 교반기의 RPM도 낮추어야 한다.

따라서 상기 제2 조반죽 단계에서 30 ℃ 미만의 온도를 유지하는 경우 제1 조반죽의 점도가 급격하게 높아지면서 상기 제2 보리가루가 제1 조반죽에 잘 섞이지 않아 점성을 높아지지 않는다는 문제가 있다. 또한, 온도를 50℃를 초과하는 경우 상대적으로 높은 온도에 의해 제1 조반죽의 점도가 증가하지 않으므로 제2 보리가루의 혼합에 의한 반죽의 점도 증가효과를 낼 수 없는 문제가 있다.

또한 제2 조반죽 제조단계에서 1000 RPM 미만으로 교반하는 경우 제1 조반죽에서 상기 제2 보리가루가 잘 분산되지 않는 문제가 생기며, 3500 RPM을 초과하는 경우에는 높은 회전 수에 의해 제1 조반죽에 잔존하는 수분에 의해 제2 보리가루가 혼화되는 것을 방해하여 반죽의 점성이 증가하지 않는 문제가 발생한다.

제3 조반죽 제조단계는 상대적으로 큰 입자의 보리가루로 제조되는 면에 대한 보리의 향미와 식감을 높여줄 뿐만 아니라, 상대적으로 큰입자가 상기 제2 조반죽에 엉기면서 전체적으로 반죽의 점도를 높여주고, 제조된 면을 삶았을 때 팽창하면서 면의 탄력을 높여주게 된다.

따라서 상기 제3 조반죽 단계는 15 내지 40 ℃를 유지하면서 300 내지 1000 RPM 이상으로 교반하는데, 상기 제3 조반죽 단계의 온도가 15 ℃ 미만인 경우 제2 조반죽의 점도이 급격히 높아지면서 상기 제3 보리가루와 잘 섞이지 않게 되는 문제가 있고, 40 ℃를 초과하는 경우 상대적으로 제2 조반죽의 점도가 낮아지면서 상대적으로 입경이 큰 상기 제3 보리가루가 상기 제2 조반죽에 고정되지 못하고 계속 움직이게 되어 반죽의 점도와 탄력을 저하시키는 문제가 있다.

바람직하게 제3 조반죽은 제1 보리가루를 포함하고 상기 제1 보리가루 100 중량부에 대하여, 제2 보리가루 10 내지 30 중량부 및 제3 보리가루 1 내지 5 중량부가 포함된 것이다.

상기 제2 보리가루가 10 중량부 미만으로 포함되는 경우 제1 조반죽에 대한 점도 향상효과가 잘 나타나지 않으며, 30 중량부를 초과하는 경우 상대적으로 큰 입자의 보리가루의 함량이 증가하면서 반죽의 질감을 저하시키고, 오히려 반죽의 점도를 낮추게 되는 문제가 있다.

또한 상기 제3 보리가루가 1 중량부 미만으로 포함되는 경우에는 제3 보리가루 사용에 따른 보리의 향미와 식감을 향상시키는 효과를 낼 수 없고, 이후 면을 삶으면서 팽창에 의한 면의 탄력상승효과를 낼 수 없는 문제가 있다. 반면, 제3 보리가루가 5 중량부를 초과하는 경우에는 제2 조반죽에서 상기 제3 보리가루 입자를 고정시킬 수가 없어, 전체적으로 점성이 낮아져 면으로 만들기가 어렵다는 문제가 있다.

제1 숙성단계는 반죽의 점성을 높이고 반죽에 포함된 보리가루 간에 결합력을 높여 제조되는 면의 점성과 탄력을 부여하는 과정이다.

상기 제1 숙성단계는 먼저 제3 조반죽을 압축 틀에 삽입한 뒤 압착하는 과정을 진행하는데, 상기 압착과정을 통하여 반죽에 포함된 물이 배출되고, 배출된 물 중 일정부만 다시 반죽 쪽으로 이동하게 되는데, 반죽의 점성을 높여줄 뿐만 아니라 물의 이동과정에서 혼화력을 높여줄 수 있다.

상기 제1 숙성단계는 빛이 들지 않는 응달에서 0.1 내지 10 ℃를 유지하면서 진행된다. 이는 저온숙성과정으로 이를 통하여 반죽의 점도를 높이고 그 과정에서 보리 입자 간 강한 결합으로 탄력성이 좋은 면이 생성될 수 있다.

0.1 ℃ 미만의 온도에서는 반죽이 얼어버리기 때문에 해동과정에서 반죽에 형성된 결합력이 깨지면서 반죽의 점성이 없어지는 문제가 생긴다. 반면, 10 ℃를 초과하는 경우에는 저온숙성에 의한 점도 및 반죽의 탄력 향상 효과를 낼 수 없다는 문제가 있다.

상기 보리가루 반죽 제조단계는 밀가루 반죽 등에 비하여 결합력과 점성이 낮은 보리가루 반죽에 점성을 높이는 과정으로, 상기 제3 조반죽에 정제염이 포함되면서, 반죽에 포함된 보리입자 간에 결합력을 높여 반죽의 점성과 탄력을 높여주게 된다.

상기 보리가루 반죽 제조단계 정제염이 혼합시키면서 보리가루 반죽이 만들어지는데, 이 때 반죽 표면으로 일정량의 수분이 발생하게 된다. 따라서, 제2 숙성단계는 상기 보리가루 반죽을 종이로 감싸 뒤 압축 틀에서 압착합으로써, 상기 보리가루 반죽의 과포함된 수분을 전부 제거해야 한다. 그렇지 않으면, 수분의 함량이 높아 반죽의 점성이 떨어지고, 숙성에 의한 반죽의 점성 및 탄력 상승 효과를 낼 수가 없다.

한편, 상기 제2 숙성단계는 2 내지 5 ℃를 유지하면서 진행되는데 이는 점성을 최대한 높여 입자간의 결합을 높이기 위함이다.

면대란, 막대기 형태 등의 면 모양을 갖춘 것을 말하며, 면대 제조단계는 반죽을 면의 형태로 제조 또는 성형하는 과정을 의미한다.

면대 제조단계는 2번 이상에 걸쳐 진행해야 하는데, 보리가루 면의 경우 탄력과 점성이 낮기 때문에 1번의 면대 제조단계에 의하는 경우 면대로 성형하기 어렵고, 반죽에 잔존하는 공기에 의하여 면의 탄력이 저하되는 문제가 있기 때문이다.

따라서, 제1 면대 제조단계는 숙성된 보리가루 반죽을 25 내지 45 ℃로 가열하면서 압연함으로서 제1 면대를 형성하게 한다. 온도를 25 내지 45 ℃로 유지해야 높은 점성이 유지되면서 압연에 의한 면대 형성이 가능하기 때문이다. 즉, 온도가 25 ℃ 미만인 경우에는 점도가 너무 높아 압연 과정에서 면이 갈라지거나 굵기가 일정하게 만들어지지 않을 수 있고, 45 ℃를 초과하는 경우 점도가 너무 높아지고, 공기가 유입될 수 있어 면의 탄력을 저하시키게 된다.

또한, 제2 면대 제조단계는 상기 제1 면대 제조단계 보다 높은 온도인 60 내지 70 ℃로 제1 면대를 가열하면서 압연과정을 통하여 제2 면대를 형성하게 하는데, 이 2번의 압연과정을 통하여 면의 굵기가 일정하고 표면에 갈라짐이 없는 면을 만들 수 있다. 특히 상대적으로 높은 온도에 의해 압연과정에서 ?아지는 면에 가열로 제1 면대에 포함된 보리입자가 팽창하면서 결합력이 높아지고, 포함된 면에 공기 제거에 유리할 수 있다. 따라서, 온도가 60 ℃ 미만인 경우 이러한 효과를 내기 어렵고, 반대로 온도가 70 ℃를 초과하는 경우 면 자체의 점성과 탄력이 급격히 낮아지는 문제가 생긴다.

상기 제3 숙성단계는 제2 면대의 최종 형상 안에서 각 입자의 결합력을 높이고, 제2 면대 제조과정에서 높였었던 온도를 급격히 낮추면서 면대에 포함된 공기를 제거함으로써, 면의 점성과 탄력을 높일 수 있다.

상기 에탄올 침지 단계에 의하는 경우 면대의 표면을 매끄럽게 하여 식감을 높여줄 뿐만 아니라, 면대 표면의 수분이 제거되면서 면의 탄력이 높아질 수 있다.

또한, 제4 숙성단계는 상기 에탄올 침지 단계에 의해 표면이 고르게 되고, 표면의 수분이 제거된 상태에서 그 면대 내부의 보리입자 간에 점성을 한층 더 높여 보리가루 면의 낮은 점성의 한번 더 높여줌으로써 실질적으로 쫄깃한 면발을 만들 수 있도록 하는 것이다.

상기 보리를 포함하는 보리면류의 제조방법에 있어서, 상기 제2 숙성단계는 상기 보리가루 반죽에 삼지닥나무를 삽입하여 18 내지 72 시간 동안 숙성된 것이고, 상기 제1 면대 제조 단계 이전에 상기 보리가루 반죽에서 상기 삼지닥나무를 제거한 것일 수 있다.

삼지닥나무(Edgeworthia chrysantha Lindl)는 높이는 1 내지 2m이고, 가지는 굵으며 황색을 띤 갈색이고 보통 3개로 갈라진다. 잎은 어긋나고 길이 8 내지 15cm의 넓은 바소꼴 또는 바소꼴이며 막질(膜質)이고 양끝이 뾰족하며 가장자리가 밋밋하다. 잎 양면에 털이 있고, 앞면은 밝은 녹색이며 뒷면은 흰빛이 돈다. 한편 꽃은 3 내지 4월에 잎보다 먼저 노란 색으로 피고 가지 끝에 둥글게 모여서 달리며 꽃자루가 밑으로 처진다. 꽃받침은 통 모양이고 길이가 12 내지 14mm이며 겉에 흰색 잔털이 있고 끝이 4개로 갈라진다. 갈라진 조각은 타원 모양이고 안쪽이 노란 색이며, 8개의 수술이 통부에 2줄로 달리고, 암술은 1개이다.

상기 삼지닥 나무를 상기 보리가루 반죽에 꽂은 뒤 저온숙성을 진행하면, 보리가루 반죽의 점성과 탄력이 크게 높아져 보리가루 면이 높은 탄력을 가질 수 있어 우수한 식감을 낼 수 있다.

또한, 상기 보리를 포함하는 보리면류의 제조방법은 에탄올 침지 단계 이후에 상기 제2 면대에 홍화씨유를 도포하고, 0.1 내지 10 ℃를 유지하면서 60 내지 80 시간 동안 숙성시키는 표면 숙성단계를 더 포함하는 것일 수 있다.

상기 홍화씨유를 도포하는 경우 면의 표면이 외부 공기층과 단절되어 면의 탄력을 높여줄 뿐만 아니라, 상기 홍화씨유가 면의 내부에 스미면서 보리 가루 입자간의 결합을 높여 면의 식감을 좋게 한다.

상기 보리를 포함하는 보리면류의 제조방법은 에탄올 침지 단계에서 상기 에탄올은 미역, 질경이 및 칡을 침지한 뒤 그 여액을 분리한 것이고, 상기 건조는 냉풍 건조하는 것일 수 있다.

바람직하게 상기 에탄올은 50 내지 99중량% 에탄올 100 중량부에 대하여 상기 미역 100 내지 200 중량부, 질경이 30 내지 80 중량부 및 칡 100 내지 200 중량부를 침지한 뒤 10 내지 30 시간 뒤에 그 여액을 분리한 것일 수 있다.

상기 여액을 사용하는 경우 보리가루 면의 탄력이 훨씬 높아지게 될 뿐만 아니라, 표면의 부드러운 느낌과 면대 내부의 탄력으로 상당히 우수한 식감을 낼 수 있다.

상기 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법은 상기 상엽 추출물 제조단계에서 상기 용매는 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 및 이들의 혼합 용매로 구성되는 군으로부터 선택된 것이고 항염효과를 가지는 것일 수 있다.

상기 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법은 상기 상엽 추출물 제조단계에서 상기 상기 상엽은 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus), 비피도 박테리윰 비피듐(Bifidobacterium bifidum) 비피더스균, 비피도 박테리움 브레브(Bifidobacterium breve) 비피더스균, 및 락토바실러스 아시도 필루스(Lactobacillus acidophilus)로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 접종하여 발효된 것일 수 있다.

상기 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법은 상기 조반죽용 상엽 추출물 제조단계에서 상기 조반죽용 상엽 추출물은 물에 상기 상엽 추출물을 희석하여 상기 상엽 추출물이 0.1 내지 10 중량%로 포함되도록 하고, 노간주나무 열수추출물, 병조희풀 열수추출물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나를 더 포함하는 것일 수 있다.

본 명세서에서 말하는 '병조희풀'은 낙엽 관목으로 미나리아재빗과 에 속한다. 그 잎은 마주나고 3개의 작은 잎으로 구성되는 3출 겹잎이다. 작은 잎은 넓은 달걀꼴이며 3개 중 옆에 달린 2개는 작다. 잎은 위로 올라갈수록 커지는데 끝이 뾰족하고 거칠며 가장자리에 약간 붉은빛이 도는 거친 톱니가 드문드문 있으나 흔히 3개로 얕게 갈라진다.

상기 병조희풀을 사용하는 경우 세정 및 피부 주름개선에 효과가 있다. 다만 상기 병조희풀은 자체의 독성이 있으므로 발효과정을 통하여 독성을 제거할 필요가 있다.

바람직하게 상기 병조희풀 추출물은 발효 추출법에 의해 제조된 병조희풀 발효 추출물인 것일 수 있다. 상기 병조희풀은 약한 독성이 있으므로 발효과정을 통하여 독성을 제거할 필요가 있다.

본 발명에서 말하는 병조희풀 발효 추출물은 쌀뜨물 100 부피부에 대하여, 1 ~ 3 부피부의 당류 및 0.05 ~ 0.25 부피부의 천일염을 첨가하고, 0.5 ~ 2.0 부피부의 미생물액을 혼합한 혼합물에 병조희풀 분쇄물을 10 ~30 부피비로 부피부로 침지시킨 후, 공기와 차단된 상온 분위기에서 3 ~ 15일 발효시켜 수득할 수 있다.

상기 미생물은 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus), 비피도 박테리윰 비피듐(Bifidobacterium bifidum) 비피더스균, 비피도 박테리움 브레브(Bifidobacterium breve) 비피더스균, 및 락토바실러스 아시도 필루스(Lactobacillus acidophilus)로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나 이상인 것일 수 있다.

본 발명에서 사용하는 노간주나무는 두송(杜松)이라고도 불리우며, 측백나뭇과에 속한다. 잎은 좁고 가는 선형의 바늘잎이 한 마디에서 3개씩 돌려나는데 길이는 12 내지 20mm이고 끝이 뾰족하며 표면의 가운데에 흰색의 좁은 홈이 있다.

바람직하게 상기 노간주나무는 상기 병조희풀과 동일한 방법으로 발효된 것일 수 있다. 상기 노간주나무를 발효시키는 경우 상엽이 가지는 고유한 텁텁한 향을 제거하는 효과가 높고 향미가 증진될 수 있도록 하는 장점을 가진다.

본 발명에서 사용하는 '낭아초'는 장미과에 속한 여러해살이풀. 높이는 30~100센티미터 정도이고, 굵은 뿌리줄기에서 줄기가 나와 자라며 전체에 털이 있다. 잎은 어긋나고 깃꼴 겹잎이며 작은 잎은 5~7개이다. 6~8월에 노란 꽃이 총상(總狀) 꽃차례로 피고, 열매에는 가시 모양의 털이 있어 다른 것에 잘 붙는다.

상기 병조희풀 추출물 및 노간주나무 추출물이 더 포함되는 경우 상엽과 함께 향미와 풍미를 증진시켜 보리를 포함하는 면의 식감을 높이고, 보리와 함께 향미가 잘 어우러지기 때문에 기호성이 높아질 수 있는 장점을 가진다.

본 발명의 다른 일실시예에 따른 면류는 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법에 의해 제조되는 것이고, 항염효과를 가지는 것일 수 있다.

본 발명에 따른 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법은 보리와 함께 잘 어우러지면서 보리를 포함하는 면의 향미와 식감을 높일 수 있고 IL-1β에 의한 질환 예방 또는 개선할 수 있도록 하여 기능성과 우수한 식감을 가지는 보리 면류 제조방법을 제공하는 것이다.

또한, 상기 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법은 보리를 90중량% 이상으로 포함하면서도 면의 표면이 매끄러울 뿐만 아니라 탄력이 우수하고, 보리의 향미와 식감이 높아 기호성이 우수한 면류를 제조하게 할 수 있다.

본 발명의 다른 일실시예에 따른 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류는 IL-1β에 의한 질환 예방 또는 개선할 수 있고, 우수한 식감과 기호성을 가질 수 있다.

도 1은 SW1353 연골세포의 생존에 대한 본 발명의 일실시예에 따른 상엽 추출물의 효과에 관한 그래프이다.
도 2는 SW1353 연골세포의 생존에 대한 본 발명의 일실시예에 따른 상엽 발효 추출물의 효과에 관한 그래프이다.
도 3은 본 발명의 일실시예에 따른 SW1353 연골세포에서 MMP-1 및 MMP-13의IL-1β 유도 생산을 억제하는 효과에 관한 것이다.
도 4는본 발명의 일실시예에 따른 SW1353 연골 세포에서 MMP-1 및 MMP-13의 IL-1β 유도 발현을 억제하는 효과에 관한 것이다.
도 5는 본 발명의 일실시예에 따른 SW1353 연골 세포에서 IL-1β 유도 산화 질소 및 PGE2의 생산 억제하는 효과에 관한 것이다.
도 7은 본 발명의 일실시예에 따른 SW1353 연골세포에서 IL-1β 유도 iNOS및 COX-2 발현에 관한 것이다.
도 8은 본 발명의 일실시예에 따른 SW1353 연골 세포에서 p38 MAPK의 IL-1β 유도 활성화를 억제하는 효과에 관한 것이다.
도 9는 본 발명의 일실시예에 따른 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법에 관한 공정도이다.
도 10은 본 발명의 일실시예에 따른 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법에 관한 공정도이다.

이하, 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자가 용이하게 실시할 수 있도록 본 발명의 실시예에 대하여 상세히 설명한다. 그러나 본 발명은 여러 가지 상이한 형태로 구현될 수 있으며 여기에서 설명하는 실시예에 한정되지 않는다.

[제조예1: 상엽 추출물의 제조 및 실험조건]

1. 상엽의 준비.

뽕나무(M. alba L)의 잎인 상엽(Mori folium)은 바이오-포트 코리사사(부산, 한국)로부터 입수하였고, 동의대 한의대(부산, 한국), 생화학과의 S.H. Hong 교수에 의해서 인증받았다. 건조된 잎은 작은 조각으로 절단하고, 미세한 분말로 만든 후에, 3시간 동안 증류수(50g/500㎖)에서 가열하였다. 추출액은 불용성 물질을 제거하기 위해서 와트만 3호 여과지를 통하여 두 번 여과하고, 여액은 동결건조시킨 다음, 미세한 분말로 분쇄하였다.

상엽 추출물은 증류수로 100㎎/㎖의 농도로 용해시키고, 저장액(stock solution)은 사용하기 전에 목적하는 농도로 배지에 희석하였다.

또한, 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei)를 접종하여 5일간 발효시킨 상엽을 사용하여 상기 상엽 추출물의 제조방법과 동일하게 추출하여 발효상엽 추출물을 제조하였다.

2. 세포 배양

SW1353연골세포는 아메리칸 타입 컬쳐 컬렉션(Manassas, VA, USA)에서 구입하였다.

상기 세포는 소태아혈청(fetal bovine serum) 10% v/v, 페니실린 100 유닛/㎖ 및 스트렙토마이신 100㎎/㎖을 함유하고, 상엽이 있거나 또는 없는 상태에서, 5% 이산화탄소와 37℃로 가습된 공기로 둘베코수정이글배지(Gibco-BRL, Grand Island, NY, USA)에서 배양하였다.

[실험예1: 상엽 추출물에 대한 시험방법]

1. MTT분석법

세포의 생존율은 3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)- 2,5-디페닐테트라졸륨브로바이드를 사용하여 (MMT)분석하였다. 간단하게, SW1353 셀은 웰 당 2X105 세포의 밀도로 6 개의 웰 플레이트에 시딩하였다. 24시간 동안 배양한 후에, 상기 세포들은 상엽 추출물의 다양한 농도 또는 IL-1β의 40ng/㎖ (R&D Systems Inc., Minneapolis, MN, USA)로 개별적으로 처리되거나,또는 상기 세포들은 IL-1β처리 전의 1시간 동안 상엽 추출물의 상이한 농도로 전처리 하였다.

24시간 후에, 배지를 제거하고, MMT 작업 용액(0.5㎎/㎖, Sigma-Aldrich Chemical Co., St. Louis, MO, USA)은 배양 플레이트들에 첨가하고, 2시간 동안 37℃에서 지속적으로 배양하였다.

그후, 배양 상청액을 웰로부터 제거하고, 디메틸설폭사이드 (DMSO, Sigma-Aldrich Chemical Co.)를 가하여, 포르마잔 결정을 용해시켰다.

진탕한 후에, 각 웰의 흡광도를 마이크로 플레이트 리더(Dynatech Laboratories, Chantilly VA, USA)로 540㎚의 파장에서 측정하고, 그 결과는 100% 생존한 것과 처리되지 않은 대조군에 관하여 세포 활성도로 표현하였다.

2. 효소-결합 면역 분석법(Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)

MMPs (MMP-1, MMP-2, MMP-3 및 MMP-13)및 PGE2 의 생산에 대한 상엽 추출물의 억제 효과는 상용화된 ELISA 키트(R&D Systems Inc.)를 사용하여 측정되었다.

간략하게, 세포들은 IL-1β(40ng/㎖)으로 각각 처리하거나, 또는 IL-1β처리 전 1시간 동안 상엽 추출물의 다양한 농도로 전처리 하였다.

24시간 후에, 배양 배지에서의 MMPs및 PGE2의 농도는 제조업체의 지침에 따라, 선택적인 ELISA 키트들을 사용하여 측정하였다.

3. RNA 분리 및 역전사 중합효소 연쇄 반응 (RT-PCR) 분석.

배양된 세포로부터의 총 RNA는 제조업체의 지침에 따라, 트리졸(TRIzol) 시약(Invitrogen Life Technologies, Carlsbad, CA, USA)을 사용하여 단리하였다.

cDNA는 MMLV(moloney murine leukemia virus)역전사 효소를 함유하는 AccuPower® RT PreMix(바이오니아, 대전, 한국)를 사용하여 총 RNA 1㎍을 합성하였다. 역전사 효소로 생성된 cDNA는 선택적으로 바이오니아에서 구입한 프라이머[표 1]를 사용하여 PCR로 증폭하였다.

RT-PCR 프라이머(primer)의 염기 서열

프라이머		서열
iNOS	정방향 프라이머	5'- GTG-AGG-ATC-AAA-AAC-TGG-GG-3'
	역방향 프라이머	5'-ACC-TGC-AGG-TTG-GAC-CAC-3'
COX-2	정방향 프라이머	5'-TCA-GCC-ACG-CAG-CAA-ATC-CT-3'
	역방향 프라이머	5'-GTG-ATC-TGG-ATG-TCA-CG-3'
MMP-1	정방향 프라이머	5'-CTG-TTC-AGG-GAC-AGA-ATG-TGC-3'
	역방향 프라이머	5'-TTG-GAC-TCA-CAC-CAT-GTG-TT-3'
MMP-3	정방향 프라이머	5'-TGC-GTG-GCA-GTT-TGC-TCA-GCC-3'
	역방향 프라이머	5'-GAA-TGT-GAG-TGG-AGT-CAC-CTC-3'
MMP-13	정방향 프라이머	5'-GGC-TCC-GAG-AAA-TGC-AGT-CTT-TCT-T-3'
	역방향 프라이머	5'-ATC-AAA-TGG-GTA-GAA-GTC-GCC-ATG-C-3'
GAPDH	정방향 프라이머	5'-CGA-TGC-TGG-GCG-TGA-GTA-C-3'
	역방향 프라이머	5'-CGT-TCA-GCT-CAG-GGA-TGA-CC-3'

증폭 후에, PCR 반응은 1% 아가로오스겔에서 전기영동하고, 에티디움 브로마이드(EtBr, Sigma-Aldrich Chemical Co.)염색법을 사용하여 시각화하였다.

평행 실험에서, 글리세르알데히드-3-포스페이트탈수소효소(GAPDH)를 내부 대조군으로 사용하였다.

4. 단백질 추출 및 웨스턴블롯 분석(western blot analysis)

총 단백질의 추출을 위해, 세포를 수확하고, 1시간 동안 용해 완충액[25mM Tris-Cl(pH 7.5), 250mM NaCl, 5mM 에틸렌디아민테트라아세트산(EDTA), 1% 노니뎃(Nonidet-P40, NP-40), 1mM 페닐메틸설포닐플루오라이드(PMSF) 및 5mM 디티오트레이톨(dithiothreitol, DTT)] 에 용해하였다.

평행 실험에서, 핵 및 세포질 단백질은 제조업체의 지침에 따라, 핵 추출 시약(Pierce, Rockford, IL, USA)을 사용하여 제조하였다.

불용성 물질은 4℃에서 20분 동안 13,000xg로 원심 분리하여 폐기하였다.

단백질 농도를 제조업체의 지침에 따라, 바이오레드 단백질 분석키트 (BioRad Laboratories, Hercules, CA, USA)를 사용하여 측정하였다.

웨스턴 브롯 분석을 위해, 단백질에 상응하는 양의 소듐도데실설페이트(SDS)-폴리아크릴아미드 겔에서 전기 영동에 의해 분리하고, 니트로 셀룰로스 막(Schleicher and Schuell, Keene, NH, USA)으로 옮겼다.

5% 탈지유(skimmed milk)로 차단(blocking) 후에, 막은 1시간 동안 단백질 특이적 항체와 함께 배양하였고, 이어서, 적절한 효소-결합 이차항체(ELSA)(Amersham Corp., Arlington Heights, IL, USA)와 함께 배양하고, 제조업체의 지침에 따라 향상된 화학발광(ECL)용액(Amersham Corp.)을 사용하여 시각화하였다.

일차 항체는 산타크루즈 생명공학주식회사(Santa Cruz, CA, USA)와 Abcam (Cambridge, UK)에서 구입하였다.

5. 산화 질소 생성의 측정

배양 상청액에서 산화 질소의 농도는 그리스(Griess) 시약(Sigma-Aldrich Chemical Co.)을 사용하여, 산화 질소의 안정한 산화 생성물, 아질산(nitrite)을 측정함으로써 결정하였다.

세포 배양 조건은 ELISA에 사용된 것과 동일하였다. 24시간 동안 IL-1β및/또는 상엽 추출물과 배양한 다음, 각각의 배양 상청액 100㎕를 상온에서 10분 동안 그리스 시약의 동일한 부피로 혼합하였다.

그 후, 흡광도를 마이크로 플레이트 리더로 540㎚에서 측정하였고, 아질산의 생산은 NaNO₂표준 곡선에 의해서 결정하였다.

6. 형광항체법(Immunofluorescence staining)

NF-κB p65의 전위를 검출하기 위해서, SW1353 세포는 24시간 동안 6 웰 플레이트에 있는 커버 글라스(glass coverslips)에서 성장시켰다.

세포는 IL-1β(40ng/㎖)로 자극하기 전에 1시간 동안 상엽 추출물(800㎍/ml)로 전처리 하였다.

30분 동안 배양한 후에, 세포를 인산 완충 식염수(phosphate-buffered saline, PBS)로 두 번 세척하고, 3.7% 파라포름알데히드로 고정하고,0.2% 트리톤 X-100로 처리되고, 2% 소혈청 알부민(bovine serum albumin)으로 차단하였다.

상기 세포는 항 NF-κB p65 항체 및 플루오레세인이소티오시아네이트-콘쥬게이티드돈키안티-래빗면역글로블린 G(IgG, Jackson ImmunoResearch Laboratories, Inc., West Grove, PA, USA)와 함께 순차적으로 배양하였다.

PBS로 세정한 후에, 핵은 4'6-디아미디노-2-페닐인돌(DAPI, Sigma-Aldrich Chemical Co.)로 염색하고, 형광은 형광 현미경(Carl Zeiss, Jena, Germany)을 사용하여 시각화하였다.

7. 복합추출물의 제조

상기 상엽 추출물 A 및 락토바실러스 카세이(Lactobacillus casei)로 발효시킨 발효 상엽 추출물 B를 제조하였다.

또한 이를 쌀뜨물로 발효시킨 노간주나무에 대한 열수추출물(추출물 C), 이를 쌀뜨물로 발효시킨 병조희풀에 대한 열수추출물(추출물 D), 낭아초 열수추출물(추출물 E), 녹두에 대한 열수추출물(추출물 F)를 제조하였다.

이후 상기 추출물을 하기의 [표 1]에 따라 혼합하여 실시예를 제조하였다.

	A	B	C	D	E	F
T1	500	-	-	-	-	-
T2		500	-	-	-	-
T3		500	500	-	-	-
T4	-	500	-	500	-	-
T5	-	500	250	250	-	-
T6	-	500	100	400	-	-
T7	-	500	400	100	-	-
T8	-	500	300	100	100	-
T9	-	500	300	100	-	100
T10	-	500	300	100	50	50

(단위: 중량부)

[실험예1: 상엽 추출물에 대한 시험결과]

1. SW1353 연골세포의 생존에 대한 상엽 추출물의 효과

상엽 추출물이 SW1353 세포에 대하여 독성 효과가 있는지 여부를 평가하기 위해서, 세포를 24시간 동안 상엽 추출물의 다양한 농도로 처리하였다.

MTT 분석법에서, 상엽 추출물의 농도가 800㎍/ml까지 SW1353 세포에서 세포 독성을 유발하지 않았다.

반면, 상엽 추출물 1000㎍/ml에서 생존율은 현저하게 감소하였다(약 70%, 도. 1A).

이후의 실험에서는, IL-1β 유도 SW1353 세포에 상엽 추출물을 800㎍/ml 이하의 농도로 처리한 경우 또한, 세포 생존율에 불리한 영향이 없었다(도 1B).

한편, 발효상엽 추출물을 사용한 경우 세포생존율이 상당히 우수하였으며, 1000㎍/ml에서도 생존율이 상대적으로 높게 유지될 수 있다는 것을 확인할 수 있었다.(도 2) 따라서 발효상엽 추출물을 사용하는 경우 세포독성이 낮아 부작용 없이 제공될 수 있는 장점이 있다.

따라서, 상엽 추출물의 농도는 800㎍/ml 내에서 나머지 실험에 적용하였다.

2. SW1353 연골세포에서 MMP-1 및 MMP-13의IL-1β 유도 생산을 억제

상기 상엽 추출물은 SW1353 연골세포에서 MMP-1 및 MMP-13의IL-1β 유도 생산을 억제한다.

다양한 MMPs는 관절 연골에서 생리학적 콜라겐 전환 및 관절염 연골에서 매트릭스 분해 모두에 관여한다. 그러므로, IL-1β 유도 MMPs 생성에 대한 상엽 추출물의 억제 효과를 조사하기 위해서, SW1353 세포는 상엽추출물의 존재 및 부재 하에 24시간 동안 IL-1β(40ng/ml)로 자극하고 나서, SW1353 세포로부터 MMPs의 방출은 ELISA를 사용하여 배양 상청액에서 검출되었다.

MMPs(MMP-1, MMP-2, MMP-3 및 MMP-13)의 증가된 방출은 IL-1β로 자극(도 3) 후에 배양 상청액에서 검출되었다.

그러나, 상엽 추출물로 SW1353 세포의 전처리는IL-1β 자극 콜라게나아제, 예를 들어, MMP-1 및 MMP-13의 생산이 농도 의존적으로 감소되었다. 그러나, MMP-2(겔라티나아제 A) 또는 MMP-3(스트로멜라이신)은 미처리 세포에서 발견되는 수준에 필적하였다.

3. SW1353 연골 세포에서 MMP-1 및 MMP-13의 IL-1β 유도 발현을 억제

상기 상엽 추출물은 SW1353 연골 세포에서 MMP-1 및 MMP-13의 IL-1β 유도 발현을 억제한다.

SW1353 세포에서 MMPs의 IL-1β 유도 발현에 대한 상엽 추출물의 효과를 평가하기 위해서, 세포는 IL-1β 단독으로 또는 상엽 추출물의 다른 농도로 24시간 동안 처리하였다.

RT-PCR 및 면역 블롯 이미지 분석은 IL-1β 단독으로 처리된 SW1353 세포에서 모든 MMPs의 수준이 미처리 세포에서 검출된 수준에 비해 현저하게 증가된 것으로 나타났다(도 4).

4. SW1353 연골 세포에서 IL-1β 유도 산화 질소 및 PGE2의 생산 억제

상기 상엽 추출물은 SW1353 연골 세포에서 IL-1β 유도 산화 질소 및 PGE2의 생산을 억제시킨다.

산화 질소 및 PGE2와 같은, 염증 매개물질은 관절염에서 연골 파괴의 진행에 중요한 역할을 하는 것으로 잘 알려져 있기 때문에, IL-1β 자극된 SW1353 세포에서 산화 질소 및 PGE2의 농도(level)에 대한 상엽 추출물의 효과를 측정하였다.

SW1353 세포에 의해 생성된 산화 질소 및 PGE2의 농도에 대한 상엽 추출물의 효과를 확인하기 위해서, 처리된 세포배양 상청액을 수집하고, 각각을 그리스 시약 및 ELISA로 처리하였다.

IL-1β 단독으로 SW1353 세포의 치료는 대조군(도 5A 및 B)과 비교할 때, 산화 질소 및 PGE2의 농도가 현저하게 상승한다.

그러나, 상엽 추출물은 200 내지 800㎍/ml 의 범위에서 농도 의존적인 방법으로 IL-1β 유도 SW1353 세포에서 산화 질소 및 PGE2의 방출을 상당히 줄인다.

5. SW1353 연골세포에서 IL-1β 유도 iNOS및 COX-2 발현

상기 상엽추출물은 SW1353 연골세포에서 IL-1β 유도 iNOS및 COX-2 발현을 감소시킨다.

다음으로, RT-PCR 및 웨스턴 브롯 분석은 iNOS 및 COX-2 발현의 감소된 농도와 연관된 IL-1β 자극된 SW1353 세포들에서 상엽 추출물에 의한 산화 질소 및 PGE2 생성의 억제 여부를 결정하기 위해 수행되었다.

그 결과는 iNOS 및 COX-2 mRNA 농도에서 IL-1β 유도 증가는 농도 의존적인 방법으로 상엽 추출물과 반대인 것을 나타낸다.(도 6A)

평행 실험에서, IL-1β로 인한 자극 때문에 iNOS 및 COX-2의 상승된 단백질 농도는 상엽 추출물과 전처리가 감소되었다.(도 6B)

이러한 결과는 전사 농도에서 iNOS 및 COX-2 감소된 발현이 IL-1β 유도 산화질소 및 PGE2 생성에 대한 상엽 추출물의 억제 효과에 기여하고 있음을 나타낸다.

6. SW1353 연골 세포에서 IL-1β 유도 NF-κB의 핵 전위를 차단

상엽 추출물은 SW1353 연골 세포에서 IL-1β 유도 NF-κB의 핵 전위를 차단한다.

많은 연구는 IL-1β 유도 NF-κB 활성화는 MMPs, iNOS 및 COX-2 전사 활동 상승조절에 관여하는 것으로 보고 있다.

그러므로, NF-κB 신호전달의 억제를 통해 매개되는 MMPs, iNOS 및 COX-2의IL-1β 유도 활성화에 대한 상엽 추출물이 억제 효과가 있는지 여부는 NF-κB의 핵 전위를 측정함으로써 결정하였다.

IL-1β의 치료는 30분 이내에 NF-κB 단백질의 핵 축적을 향상하고, 세포질에서 IκB-α의 분해를 수반하는 것으로 나타났다(도 7A).

그러나, 상엽 추출물과 전처리는IL-1β 유도 NF-κB의 핵 축적 및 IL-1β 단독으로 처리된 세포에 비해 IκB-α의 분해를 감소시켰다.

면역 형광 이미지는 또한 NF-κB P65의 핵 전위가 IL-1β와 세포의 자극 후에 강하게 유도하고, 핵 NF-κB P65에서 변위(shift)는상엽 추출물과 세포 전처리 후에 완전히 없어졌음을 밝혔다.(도 7B)

이러한 연구 결과는 상엽 추출물이 IκB 저하의 억제 및 NF-κB의 핵 전위를 통해 SW1353 세포에서 IL-1β 유도 NF-κB 활성화를 억제할 수 있음을 나타낸다.

7. SW1353 연골 세포에서 p38 MAPK의 IL-1β 유도 활성화를 억제

상엽 추출물은 SW1353 연골 세포에서 p38 MAPK의 IL-1β 유도 활성화를 억제한다.

MAPKs 경로는 IL-1β 유도 MMPs 및 염증성 매개물질 발현에 매우 연관되어 있음이 잘 알려져 있기 때문에, 우리는 상엽 추출물의 억제 효과가 그들의 발현에 MAPKs 시그날링캐스케이드에 의해 매개되는지 여부를 조사하였다.

웨스턴 브롯 분석은 IL-1β 치료가 총 단백질 농도에 영항을 주지 않고 실험 시스템에서 JNK, p38 MAPK 및 ERK의 인산화를 향상하는 것이 확인되었다.(도 8A)

그러므로, SW1353세포에서 MAPKs의 IL-1β 유도 인산화에 대한 상엽 추출물의 효과를 평가하였다.

결과는 상엽 추출물과 전처리가 농도 의존적 방법으로 대조 농도(control level) 근처에서 p38 MAPK의 IL-1β 자극 활성이 크게 감소되는 것으로 밝혀졌으나, JNK 및 ERK의 활성에 대한 이러한 효과는 없었다(도 8B).

결과는 상엽 추출물에 의한 IL-1β 유도 p38 MAPK 활성의 억제는 IL-1β 자극된 SW1353세포에 상엽 추출물의 관측된 연골 보호 가능성의 역할을 시사한다.

8. 복합추출물의 관능성 평가

위 복합추출물 T1 내지 T10을 음료로 제조하고, 성인남녀 20인에 대한 관능성 평가를 수행하였다. 관능성 평가는 향과 맛을 기초로 기호성에 따라 1 내지 10의 지수로 평가하여 평균지수로 구분하였고 그 결과를 [표 2]에 나타내었다.(하기의 지수는 그 숫자가 높을수록 기호성이 높은 것이다)

	T1	T2	T3	T4	T5	T6	T7	T8	T9	T10
향	2	2	4	4	7	6	9	9	9	10
맛	3	2	2	3	4	5	5	7	7	9
기호성	2.5	2	3	3.5	5.5	5.5	7	8	8	9.5

(단위: 지수)

상기 표 2를 참조하면, 상엽 추출물은 텁텁한 맛이 있고 기호성 있는 향이 나지 않는다. 발효에 의하는 경우 세포독성이 저감되는 장점이 있으나 향미가 높아지는 것은 아니라는 것을 확인할 수 있다.

또한 상기 발효된 상엽에 대한 향은 발효된 병조희풀만으로는 제거되지 않았고, 발효된 노간주나무 열수추출물을 함께 사용하는 경우 거의 나지 않는다는 것을 확인할 수 있었다.

또한, 낭아초 및 녹두 추출물을 사용하는 경우 음료의 풍미가 높아지면서 높은 기호성을 가지는 것을 확인할 수 있었다.

따라서 상기 복합 추출물에 의하는 경우 상엽 추출물을 포함하여 IL-1β에 의한 관절염 예방 또는 개선 효과를 낼 수 있으면서도, 기호성이 높아 보급하기 용이한 식품 또는 기능성 식품으로 제공될 수 있다.

[제조예2: 보리면의 제조]

본 발명에 따른 보리를 포함하는 보리면류의 제조방법에 따른 효과를 확인하기 위하여 하기의 표 4에 개시된 바와 같은 방법으로 보리면을 제조하였다. 구체적인 단계는 본 발명의 명세서에 개시된 보리를 포함하는 보리면류의 제조방법의 순서에 따라 진행하였다.

	공정
실시예 1	S1: 건조된 보리(수분함량 13중량% 이하)를 분쇄하여 보리 가루를 제조. S2: 제1 보리가루(1000 내지 2000 mesh), 제2 보리가루(300 내지 800 mesh) 및 제3 보리가루(100 내지 300 mesh)로 분류. S3: 제1 보리가루+ 물, 50 ~ 90 ℃, 1500 ~ 5500 RPM 교반(제1 조반죽) S4: 제1 조반죽 + 제2 보리가루, 30 ~ 50 ℃, 1000 ~ 3500 RPM 교반(제2 조반죽) S5: 제2 조반죽 + 제3 보리가루, 15 ~ 40 ℃, 300 ~ 1000 RPM 교반(제3 조반죽) <S3 ~ S5에서 제1 보리가루 : 제2 보리가루 : 제3 보리가루 = 100 : 20 : 3> S6: 제3 조반죽 압착, 0 내지 10 ℃, 10 ~ 30 시간 숙성 S7: 숙성된 제3 조반죽 + 정제염, 50 ~ 80 ℃, 800 ~ 2000 RPM 교반(보리가루 반죽) S8: 보리가루 반죽을 종이로 감싼 뒤 압착, 2 ~ 5 ℃, 18 ~ 72 시간 S9: 25 ~ 45 ℃ 압연(제1면대 제조) S10: 60 ~ 70 ℃ 압연(제2면대 제조) S11: 제2 면대를 0 ~ 10 ℃, 10 ~ 80 시간 숙성 S12: 제2 면대 50 ~ 99중량% 에탄올에 침지 S13: 제2 면대 0 ~ 3 ℃, 18 ~ 72 시간 숙성
실시예 2	실시예 1에서 S3 ~ S5 단계를<제1 보리가루 : 제2 보리가루 : 제3 보리가루 = 100 : 40 : 7>로 변경하고, 나머지 공정조건은 실시예 1과 동일
실시예 3	실시예 1에서 S3 ~ S5 단계를 <제1 보리가루 : 제2 보리가루 : 제3 보리가루 = 100 : 7 : 0.5>로 변경하고, 나머지 공정조건은 실시예 1과 동일
실시예 4	실시예 1에서 S8 단계의 보리가루 반죽에 삼지닥나무 조각을 꽂아 숙성과정 진행하고, 나머지 공정조건은 실시예 1과 동일
실시예 5	실시예 3에서 S12 단계 이후에 제2 면대에 홍화씨유를 도포하고 5℃에서 60 ~ 80 시간동안 표면 숙성 진행과정을 추가하고 나머지 공정조건은 실시예 1과 동일
실시예 6	실시예 4에서 S12 단계를 에탄올에 미역, 질경이, 칡(3 : 1 : 3 중량비)을 침지한 후 그 여액을 분리하여 상기 분리된 여액으로 에탄올 침지를 진행하고 냉풍 건조로 건조하고 나머지 공정조건은 실시예 1과 동일
비교예 1	실시예 1에서, S2: 제1 보리가루(1000 내지 2000 mesh)로 분류하고, S3 내지 S5 과정을 생략하고, S6에서 제1 조반죽을 압착 및 숙성 나머지 공정조건은 실시예 1과 동일
비교예 2	실시예 1에서, S3 내지 S5 과정을 생략하고, 제1 보리가루 : 제2 보리가루 : 제3 보리가루 = 100 : 20 : 3를 혼합한 뒤 물을 섞어 50 ~ 90 ℃, 1500 ~ 5500 RPM 교반하여 반죽을 생성하고 S6에서 상기 반죽을 사용함. 나머지 공정조건은 실시예 1과 동일
비교예 3	실시예 1에서, S6 단계를 생략하고, 나머지 공정조건은 실시예 1과 동일
비교예 4	실시예 1에서, S7 단계를 생략하고, 나머지 공정조건은 실시예 1과 동일
비교예 5	실시예 1에서, S8 단계를 생략하고, 나머지 공정조건은 실시예 1과 동일
비교예 6	실시예 1에서, S10 단계를 생략하여 1번의 압연과정으로 면대를 제조, 나머지 공정조건은 실시예 1과 동일
비교예 7	실시예 1에서, S12 단계를 생략하고, 나머지 공정조건은 실시예 1과 동일

[실험예2: 실시예 및 비교예에 대한 평가]

상기 표 4에 개시된 바와 같은 방법에 따라 실시예 및 비교예를 제조하였고, 실시예 및 비교예에 대한 면류 적합테스트를 하였다. 면류 적합테스트는 면대 형성, 표면, 면의 강도를 유관으로 평가하여 면이 완성된 것인지 평가하였고, 그 결과를 하기의 표 5에 나타냈었다.

	평가	비고
실시예 1	적합	면대 형성, 면의 굵기 일정, 표면 갈라짐 거의 없음, 강도 보통
실시예 2	다소 부적합	면대 형성, 면의 굵기 불규칙, 표면 갈라짐 많음, 강도 낮음
실시예 3	다소 부적합	면대 형성, 면의 굵기 불규칙, 표면 갈라짐 많음, 강도 낮음
실시예 4	적합	면대 형성, 면의 굵기 일정, 표면 갈라짐 거의 없음. 강도 좋음
실시예 5	적합	면대 형성, 면의 굵기 일정, 표면 갈라짐 없음. 강도 매우 좋음
실시예 6	적합	면대 형성, 면의 굵기 일정, 표면 갈라짐 없음. 강도 매우 좋음
비교예 1	부적합	면대 형성 불가
비교예 2	부적합	면대 형성 불가
비교예 3	다소 부적합	면대 형성, 면의 굵기 불규칙, 표면 갈라짐 많음, 강도 낮음
비교예 4	부적합	끊어진 면대 형성, 면의 굵기 불규칙, 표면 갈라짐 많음, 강도 매우 낮음
비교예 5	부적합	끊어진 면대 형성, 면의 굵기 불규칙, 표면 갈라짐 많음, 강도 매우 낮음
비교예 6	부적합	끊어진 면대 형성, 면의 굵기 불규칙, 표면 갈라짐 많음, 강도 매우 낮음
비교예 7	다소 부적합	면대 형성, 면의 굵기 불규칙, 표면 갈라짐 많음, 강도 매우 낮음

상기 표 5를 참조하면, 비교예의 경우 면대 자체가 형성되지 않거나 끊어진 면대가 만들어지는 것을 알 수 있다. 이는 보리 자체가 가지는 점성이 상당히 낮아 본 발명에서 따른 보리를 포함하는 보리면류의 제조방법에 의하지 않는 경우 면대 자체가 형성되기 어렵다는 것을 알 수 있다.

또한 실시예 1 내지 6를 참조하면, 거의 보리만을 사용하면서 면대를 형성할 수 있고, 특히 실시예 1, 3 내지 6의 경우 표면에 갈라짐이 없으며 강도가 보통 또는 우수하여 면 제품으로 적합할 수 있다는 것을 알 수 있다.

[실험예3: 실시예 및 비교예에 대한 관능성 평가]

상기 실험예 2에서 부적합 판정을 받은 비교예 1, 2, 4, 5 및 6을 제외하고 실시예 및 비교예 3 및 7에 따라 만들어진 면을 삶아 비빔국수를 만들었다.

상기 실시예 및 비교예에 따라 제조된 면을 삶는 과정에서 면의 끊어짐이 발생하는지 여부를 확인하였고, 기호성을 평가 하기 위하여 무작위로 선정한 30 인이 상기 비빔국수에 대한 유관평가 및 시식을 통하여 1 내지 10의 범위로 정해진 지수를 통하여 면의 탄력성, 향미 및 그 식감을 평가하였다. 상기 지수 값 별로 평균 값을 계산하여 하기의 표 6에 나타내었으며, 기호성은 면의 탄력성, 향미 및 식감의 지수에 대한 평균 값으로 산정하였다. 한편, 상기 지수는 그 숫자가 높을수록 효과가 우수한 것이다.

	실시예1	실시예2	실시예3	실시예4	실시예5	실시예6	비교예3	비교예4
조리중 면의 끊어짐	없음	있음	있음	없음	없음	없음	있음	있음
면의 탄력	7.1	4.1	3.3	8.9	9.1	9.7	2	3.4
향미	6.9	6.2	4.7	6.7	7.9	8.4	4.6	6.7
식감	7.2	3.1	1.6	8.1	8.7	9.4	4.5	2.9
기호성	7.1	4.5	3.2	7.9	8.6	9.2	3.7	4.3

상기 표 6을 참조하면, 실시예 1, 4 내지 6의 경우 높은 기호성을 나타내어 면제품으로 활용할 수 있으며, 특히 실시예 4 내지 6의 경우 기호성이 상당히 높다는 것을 알 수 있다.

따라서 본 발명에 따른 보리를 포함하는 보리면류의 제조방법에 의하는 경우 밀가루 기타 다른 곡물을 혼합하거나 기타 효소 또는 합성첨가제를 혼합하지 않고, 거의 보리만을 사용하여 탄력 있는 면을 제조할 수 있을 뿐만 아니라 높은 기호성을 가지는 보리면을 제공할 수 있다.

[제조예3: 상엽 추출물이 포함된 보리면의 제조]

본 발명에 따른 상기 상엽 추출물과 보리가 포함된 면류의 제조방법에 따라 하기의 표 7에 개시된 바와 같은 방법으로 보리면을 제조하였다.

공정

실시예 7

C1 내지 C2: 제조예 1의 상엽 추출물 제조 및 물에 5중량%로 희석 S1: 건조된 보리(수분함량 13중량% 이하)를 분쇄하여 보리 가루를 제조. S2: 제1 보리가루(1000 내지 2000 mesh), 제2 보리가루(300 내지 800 mesh) 및 제3 보리가루(100 내지 300 mesh)로 분류. S3: 제1 보리가루+ 물에 5중량%희석된 상엽 추출물 혼합, 50 ~ 90 ℃, 1500 ~ 5500 RPM 교반(제1 조반죽) S4: 제1 조반죽 + 제2 보리가루, 30 ~ 50 ℃, 1000 ~ 3500 RPM 교반(제2 조반죽) S5: 제2 조반죽 + 제3 보리가루, 15 ~ 40 ℃, 300 ~ 1000 RPM 교반(제3 조반죽) <S3 ~ S5에서 제1 보리가루 : 제2 보리가루 : 제3 보리가루 = 100 : 20 : 3> S6: 제3 조반죽 압착, 0 내지 10 ℃, 10 ~ 30 시간 숙성 S7: 숙성된 제3 조반죽 + 정제염, 50 ~ 80 ℃, 800 ~ 2000 RPM 교반(보리가루 반죽) S8: 보리가루 반죽을 종이로 감싼 뒤 압착, 2 ~ 5 ℃, 18 ~ 72 시간 S9: 25 ~ 45 ℃ 압연(제1면대 제조) S10: 60 ~ 70 ℃ 압연(제2면대 제조) S11: 제2 면대를 0 ~ 10 ℃, 10 ~ 80 시간 숙성 S12: 제2 면대 50 ~ 99중량% 에탄올에 침지 S13: 제2 면대 0 ~ 3 ℃, 18 ~ 72 시간 숙성

[실험예4: 실시예 7에 대한 면대 평가]

실험예 2와 동일한 발명으로 상기 실시예 7 및 비교예 8에 따라 제조된 면대에 대한 적합성 평가를 진행하였고, 그 결과를 하기의 표 8에 나타내었다.

	평가	비고
실시예 7	적합	면대 형성, 면의 굵기 일정, 표면 갈라짐 없음, 강도 보통

상기 표 8을 참조하면, 실시예 7에 의하는 경우 거의 보리만으로 만든 면류로서 면대가 형성되고 표면 갈라짐이 없으며 강도가 면으로 사용하기에 적당하여 면대로서 적합성이 있다는 것을 확인할 수 있고, 실시예 1과 비교해 볼 때 특히 희석된 상엽 추출물을 제1 조반죽 제조단계에서 사용하는 경우 면대의 표면갈라짐이 완화된다는 것을 알 수 있었다.

[실험예5: 실시예 7 및 비교예 8에 대한 관능성 평가

실험예 3과 동일한 방법으로 실시예 7 및 비교예 8에 대한 관능성 평가를 진행하였고, 그 결과를 하기의 표 9에 나타내었다.

	실시예1	실시예7
조리중 면의 끊어짐	없음	없음
면의 탄력	7.1	8.0
향미	6.9	9.4
식감	7.2	8.1
기호성	7.1	8.5

상기 표 9을 참조하면, 실시예 7는 면의 끊어짐이 개선될 뿐만 아니라, 면의 탄력과 함께 상기 상엽의 향이 보리와 잘 어우러지면서 보리의 고소한 식감과 상엽 고유의 향이 은은하게 퍼지면서 전체적으로 우수한 향미와 식감을 낼 수 있어 기호도가 높아진다는 것을 확인하였다. 또한 면의 탄력이 증가하여 보리를 포함하는 면류의 탄력을 보강함으로써 보다 쫄깃한 식감을 낼 수 있다는 것을 확인하였다.

따라서 본 발명에 의하는 경우 보리 순도가 상당히 높은 면류와 함께 항염 효과를 낼 수 있어 항염 기능성과 높은 향미 및 식감으로 기호성이 뛰어난 면류를 제공할 수 있다. 따라서 항염 기능성을 가지는 식품으로 다양한 면요리에 쉽게 적용될 수 있다. 또한 높은 기호성으로 항염 기능성과 함께 보리의 수요를 증진하는데 기여할 수 있다.

이상에서 본 발명의 바람직한 실시예에 대하여 상세하게 설명하였지만 본 발명의 권리범위는 이에 한정되는 것은 아니고 다음의 청구범위에서 정의하고 있는 본 발명의 기본 개념을 이용한 당업자의 여러 변형 및 개량 형태 또한 본 발명의 권리범위에 속하는 것이다.

Claims (9)

1. 건조된 상엽을 분쇄한 뒤 분쇄된 상엽을 용매로 추출하여 상엽 추출물을 제조하는 상엽 추출물 제조 단계;
   물에 상기 상엽 추출물을 희석하여 상기 상엽 추출물이 0.1 내지 10 중량%로 포함되도록 하여 조반죽용 상엽 추출물을 제조하는 조반죽용 상엽 추출물 제조단계;
   보리를 수분함량이 15중량% 이하가 되도록 건조하고, 건조된 보리를 분쇄하여 보리 가루를 제조하는 보리가루 제조 단계;
   상기 보리가루를 1000 내지 2000 mesh의 입경크기를 가지는 제1 보리가루; 300 내지 800 mesh의 입경크기를 가지는 제2 보리가루 및 100 내지 300 mesh의 입경크기를 가지는 제3 보리가루로 분류하는 보리가루 분류 단계;
   상기 제1 보리가루와 조반죽용 상엽 추출물을 혼합하고, 50 내지 90 ℃를 유지하면서 1500 내지 5500 RPM 으로 교반하면서 제1 조반죽을 제조하는 제1 조반죽 제조단계;
   상기 제1 조반죽에 대하여 상기 제2 보리가루를 혼합하고, 30 내지 50 ℃를 유지하면서 1000 내지 3500 RPM 으로 교반하면서 제2 조반죽을 제조하는 제2 조반죽 제조단계;
   상기 제2 조반죽에 대하여 상기 제3 보리가루를 혼합하고, 15 내지 40 ℃를 유지하면서 300 내지 1000 RPM 으로 교반하면서 제3 조반죽을 제조하는 제3 조반죽 제조단계;
   상기 제3 조반죽을 압축 틀에 삽입하고, 압착한 뒤 0.1 내지 10 ℃를 유지하면서 10 내지 30 시간 동안 제3 조반죽을 숙성시키는 제1 숙성단계;
   상기 숙성된 제3 조반죽에 정제염을 혼합하고, 50 내지 80 ℃를 유지하면서 800 내지 2000 RPM 이상으로 교반하면서, 보리가루 반죽을 제조하는 보리가루 반죽 제조단계;
   상기 보리가루 반죽을 종이로 감싼 뒤 압축 틀에서 압착한 뒤 2 내지 5 ℃를 유지하면서 18 내지 72 시간 동안 보리가루 반죽을 숙성시키는 제2 숙성단계;
   상기 숙성된 보리가루 반죽을 25 내지 45 ℃로 가열하면서 압연하여 제1 면대를 형성하는 제1 면대 제조단계;
   상기 제1 면대를 60 내지 70 ℃로 가열하면서 압연하여 제2 면대를 형성하는 제2 면대 제조단계;
   상기 제2 면대를 0.1 내지 10 ℃를 유지하면서 10 내지 80 시간 동안 숙성시키는 제3 숙성단계;
   상기 제3 숙성단계를 거친 제2 면대를 50 내지 99중량%의 에탄올에 침지한 뒤 건조시키는 에탄올 침지 단계 및
   상기 에탄올 침지 단계를 거친 제2 면대를 0.1 내지 3 ℃를 유지하면서 18 내지 72 시간 동안 숙성시키는 제4 숙성단계를 포함하는 것이고,
   상기 제3 조반죽은 제1 보리가루를 포함하고 상기 제1 보리가루 100 중량부에 대하여, 제2 보리가루 10 내지 30 중량부 및 제3 보리가루 1 내지 5 중량부가 포함된 것인
   보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법.
2. 제1 항에 있어서,
   상기 제2 숙성단계는 상기 보리가루 반죽에 삼지닥나무를 삽입하여 18 내지 72 시간 동안 숙성된 것이고,
   상기 제1 면대 제조 단계 이전에 상기 보리가루 반죽에서 상기 삼지닥나무를 제거한 것인
   보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법.
3. 제2 항에 있어서,
   에탄올 침지 단계 및 제4 숙성단계 사이에,
   상기 제2 면대에 홍화씨유를 도포하고, 0.1 내지 10 ℃를 유지하면서 60 내지 80 시간 동안 숙성시키는 표면 숙성단계를 더 포함하는 것인
   보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법.
4. 제3 항에 있어서,
   에탄올 침지 단계에서 상기 에탄올은 미역, 질경이 및 칡을 침지한 뒤 그 여액을 분리한 것이고,
   상기 건조는 냉풍 건조하는 것인
   보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법.
5. 제 1항에 있어서,
   상기 상엽 추출물 제조단계에서 상기 용매는 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 및 이들의 혼합 용매로 구성되는 군으로부터 선택된 것인
   보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법.
6. 제 1항에 있어서,
   상기 상엽 추출물 제조단계에서 상기 용매는 물, 탄소수 1 내지 6의 알코올 및 이들의 혼합 용매로 구성되는 군으로부터 선택된 것이고,
   항염효과를 가지는 것인
   보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법.
7. 제 6항에 있어서,
   상기 상엽 추출물 제조단계에서 상기 상기 상엽은 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 람노수스(Lactobacillus rhamnosus), 비피도 박테리윰 비피듐(Bifidobacterium bifidum) 비피더스균, 비피도 박테리움 브레브(Bifidobacterium breve) 비피더스균, 및 락토바실러스 아시도 필루스(Lactobacillus acidophilus)로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상을 접종하여 발효된 것인
   보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법.
8. 제 6항에 있어서,
   상기 조반죽용 상엽 추출물 제조단계에서 상기 조반죽용 상엽 추출물은 물에 상기 상엽 추출물을 희석하여 상기 상엽 추출물이 0.1 내지 10 중량%로 포함되도록 하고, 노간주나무 열수추출물, 병조희풀 열수추출물 및 이들의 혼합물로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나를 더 포함하는 것인
   보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법.
9. 제 1항 내지 제 8항 중 어느 한 항 따른 보리가루 및 상엽 추출물을 포함하는 면류의 제조방법에 의해 제조된 것이고, 항염효과를 가지는 면류.

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