KR101816638B1

KR101816638B1 - 차나무 뿌리 유래 사포닌을 포함하는 구강용 조성물

Info

Publication number: KR101816638B1
Application number: KR1020110099525A
Authority: KR
Inventors: 김정기; 김수경; 서대방; 문석식
Original assignee: (주)아모레퍼시픽
Priority date: 2011-09-30
Filing date: 2011-09-30
Publication date: 2018-01-10
Anticipated expiration: 2031-09-30
Also published as: KR20130035323A

Abstract

본 발명은 차나무 뿌리 유래 사포닌을 포함하는 구강용 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 차나무 뿌리에서 추출한 트리테르페노이드 사포닌을 포함함으로써 치은염 또는 치주염과 같은 치주질환을 효과적으로 예방 또는 치료하고, 구취를 억제 또는 개선할 수 있는 효능이 우수한 구강용 조성물에 관한 것이다.

Description

차나무 뿌리 유래 사포닌을 포함하는 구강용 조성물{Oral composition comprising saponin extracted from the root of Camellia sinensis}

본 발명은 사포닌을 유효성분으로 포함하는 구강 조성물에 관한 것이다.

보다 상세하게는, 트리테르페노이드 사포닌, 바람직하게는 차나무 뿌리에서 추출한 트리테르페노이드 사포닌을 유효성분으로 포함하여 부작용을 최소화하고 우수한 항염 효과를 가지는 치주질환 개선용 및 구취 억제용 구강용 조성물에 관한 것이다.

치아는 인산칼슘(Calcium phosphate)으로 이루어진 무기질로서 그 질환에는 크게 충치와 치주질환이 있다. 이중 충치는 어린이부터 성인까지 치과질병의 가장 큰 부분을 차지하고 있으며 발생빈도가 높아지고 있다. 대한치과의사협회의 보고에 따르면, 아동의 90% 이상이 치아 우식(Dental caries)을 경험하며, 성인의 80% 이상이 치주질환을 갖고 있다고 한다.

일반적으로 치주질환을 예방하기 위하여 고안된 구강용 조성물에는 염화나트륨, 알란토인클로로히드록시 알루미늄, 아미노카프론산, 초산토코페롤 등 합성원료들이 그 주를 이루고 있었다. 그러나, 최근 치·의학계에서는 천연식물 등을 이용한 민간전통의학의 효용성을 찾고 극대화하기 위한 수많은 연구가 이루어지고 있으며, 구강에의 효과들이 알려지면서 많은 추출물들이 치주질환 개선용 및 구취 억제용 구강 조성물에 응용되고 있다.

국내공개특허 제2002-0087672호는 정향 추출물을 함유하고 있어 입안 가글시 청량감을 제공할 뿐만 아니라 항균활성으로 인한 구취제거 및 치주질환을 예방하는데 뛰어난 효과가 있고 기존의 청정제가 지니지 못한 진통효과를 가지고 있다는 사실이 개시되어 있다.

국내공개특허 제2002-0066042호는 석류추출물을 함유한 구강 위생 증진용 조성물에 관한 것으로서, 석류 추출물이 활성산소와 산화질소 생성을 억제시키는 작용이 우수함을 확인하여 이러한 항산화 효능을 통하여 구강위생을 증진시키는데 역할이 뛰어나다는 사실이 개시되어 있다.

국내공개특허 제2001-0036152호는 식물추출물 파우더의 제조 방법 및 이 방법에 의해 제조된 식물추출물 파우더를 함유하는 구강용 조성물에 관한 것으로서, 인공적인 항생제, 살균제보다 민간에서 널리 알려져 온 약용 식물 추출물, 특히 솔잎을 사용하여 구강 내에서 우수한 치주질환 및 충치예방효과를 제공할 수 있다고 개시되어 있다.

상기에서 살펴본 바와 같이, 많은 식물추출물들이 구강위생의 증진목적으로 배합되어 사용되어오고 있으나, 대개의 경우 빈약한 항균 효과를 가지거나 단순히 소염, 수렴, 지혈, 혈액순환 촉진과 같은 추상적인 효능을 통하여 치주질환의 발생을 예방한다는 정도만을 나타내고 있으며, 안정도 면에서 미흡한 단점이 있어 구강용 조성물로 사용하는데 어려움이 있었다.

이에, 본 발명자들은 차의 다양한 생리활성 연구를 수행하던 중 차나무의 뿌리부분에서 추출한 사포닌이 구강 내 염증을 억제하여 치주질환의 개선 및 구취 억제에 유용하게 사용할 수 있음을 발견하여 본 발명을 완성하였다.

이에 본 발명자들은 치주질환 예방 및 치료를 위해서 여러 식물추출물들을 조사하여 분석한 결과, 차나무 뿌리에서 추출한 트리테르페노이드 사포닌이 우수한 항염 효과를 갖고 천연물을 사용하여 부작용이 없음을 발견하고 본 발명을 완성하였다.

따라서, 본 발명의 목적은 차나무 뿌리에서 추출한 트리테르페노이드 사포닌을 유효성분으로 함유하여 우수한 항염효과를 갖는 치주질환의 개선 및 구취 억제용 구강 조성물을 제공하는 것이다.

상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 차나무 뿌리에서 추출한 트리테르페노이드 사포닌을 유효성분으로 포함하는 치주질환의 개선 및 구취 억제용 구강 조성물을 제공한다.

본 발명의 조성물은 차나무 뿌리에서 추출한 트리테르페노이드 사포닌을 유효성분으로 포함함으로써 항염효과가 있고, 따라서 치주질환을 예방 또는 치료하고 구취를 억제 또는 개선할 수 있다.

도 1은 피검자 120명을 대상으로 치면 착색 정도를 통해 차나무 뿌리에서 유래한 트리테르페노이드 사포닌 조성물을 이용한 군의 치면 세균막 지수를 대조군과 비교하여 나타낸 그래프이다.
도 2는 피검자 120명을 대상으로 차나무 뿌리에서 유래한 트리테르페노이드 사포닌 조성물을 이용한 군의 치은염 지수를 대조군과 비교하여 나타낸 그래프이다.
도 3은 피검자 120명을 대상으로 차나무 뿌리에서 유래한 트리테르페노이드 사포닌 조성물을 이용한 군의 구취 발생 지수를 대조군과 비교하여 나타낸 그래프이다.

본 발명은 차나무 뿌리 유래 사포닌(saponin)을 유효성분으로 포함하는 구강용 조성물을 제공한다.

본 발명에서 유효성분으로 이용되는 차나무 뿌리 유래 사포닌은 바람직하게는 차나무 뿌리의 추출물에서 분리한 트리테르페노이드 사포닌을 유효성분으로 포함하며, 상기 트리테르페노이드 사포닌은 치주질환을 예방 및 개선할 뿐 아니라 구취를 억제 및 개선하는 효과가 있다.

본 발명에서 사용되는 트리테르페노이드 사포닌은 차나무 뿌리의 메탄올 추출물에서 분리한 10종류의 사포닌이며, 본 발명에서는 이를 각각 '차나무 뿌리 유래 사포닌 R1 내지 R10'로 지칭한다. 이들 차나무 뿌리 유래 사포닌 R1 내지 R10은 하기 화학식 1 내지 10의 구조를 가진다.

본 발명의 조성물은 상기 트리테르페노이드 사포닌을 조성물 총 중량에 대하여 0.01~65중량%의 양으로 포함하는 것이 바람직하다. 이는 상기 유효성분의 함량이 0.01중량% 미만이 경우에는 그 효과가 나타나기 어렵고, 65중량%를 초과할 경우에는 함량 의존적으로 효과가 증대하지 않고 구강 점막에 자극을 줄 수 있다.

치아는 무기질인 인산칼슘(Calcium phosphate)이 주 구성성분이며, 약 200~300여종의 미생물이 치아표면, 치근부의 치아와 잇몸 사이, 혀의 표면에 상주하는 것으로 알려져 있다. 구강 위생 활동이 적절히 이루어지지 않은 경우에는 스트렙토코커스(Streptococcus) 계통의 미생물이 생산하는 유기산에 의해 인산칼슘으로 구성된 치아 경조직을 손상시켜, 충치, 치은염과 같은 각종 치주질환을 발생시킬 뿐 아니라 미생물이 음식물 유래의 아미노산을 탈회산 효소나 아미노 효소 등을 통해 악취를 유발하는 물질인 휘발성 황화물(volatile sulfide compounds)을 생성함으로써 구취를 발생시키게 된다. 따라서 페니실린과 같은 항생제를 이용하여 유해 미생물 증식에 의해 발생하는 치주질환을 감소시킬 수 있다는 보고가 있지만 장기간 사용시 항생제 내성이 발생할 수 있으므로 임상에서는 사용되지 않고 있다.

차나무 뿌리 유래 트리테르페노이드 사포닌은 비 항생제로써 부작용 없이 치아 우식증을 발생시키는 스트렙토코커스 뮤탄스(Streptococcus mutans) 및 대표적인 치주질환 관련균인 포피로모나스 진지발리스(Porphyromonas gingivalis) 에 대하여 항균력을 가질 뿐만 아니라 스트렙토코커스 뮤탄스가 치아 우식을 유발하는 과정의 핵심효소인 글로코실트랜스퍼라아제(glucosyltransferase)를 저해하는 효과가 있는 것으로 나타났다. 또한 구강 미생물에 대한 항균 활성을 통해 구취 물질이 발생하는 현상을 감소시키는 것으로 확인되었다.

본 발명의 구강용 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되지 않으며, 구체적인 예를 들면, 치약, 구강용 세정제, 구강 청정제 등의 제형을 가질 수 있다.

예를 들면, 치약류의 경우에는 당업계에서 통상적으로 사용되는 연마제, 습윤제, 기포제, 결합제, 감미제, pH 조절제, 방부제, 약효성분, 향료, 증백제, 색소, 용제 등을 함유할 수 있다.

연마제 성분으로는 탄산칼슘, 침강 실리카, 수산화알루미늄, 인산일수소칼슘 및 불용성 메타인산나트륨 등이 있으며, 이들 연마제를 단독 혹은 2종 이상 혼합하여 조성물 총 중량에 대하여 1~60 중량%, 바람직하게는 10~50 중량%를 사용한다.

습윤제 성분으로는 글리세린, 소르비톨액, 폴리에틸렌글리콜 및 프로필렌글리콜 등이 있으며 단독 또는 2종 이상 혼합하여 20~60 중량% 사용한다.

기포제로는 라우릴황산나트륨, 소디움라우릴사르코시네이트, 자당지방산에스테르, 폴리옥시에틸렌경화피마자유 및 폴리옥시에틸렌폴리옥시프로피렌공중합체 등의 음이온 및 비이온 계면활성제를 단독 혹은 2종 이상 혼합하여 0.5~5 중량%, 바람직하게는 0.5~3 중량%를 사용한다.

결합제로서는 카르복시메칠 셀룰로오스 나트륨, 하이드록시메칠셀룰로오스, 카라기난, 잔탄검 및 알긴산 나트륨 등을 단독 혹은 2종 이상 혼합하여 0.1~5 중량%, 바람직하게는 0.1~2 중량%를 사용한다.

감미제로서는 삭카린나트륨, 아스파탐, 스테비오사이드, 자일리톨 및 감초산 등을 단독 혹은 2종 이상 혼합하여 0.05~5 중량%를 사용하는 것이 좋다.

pH 조절제로서는 인산나트륨, 인산이나트륨, 인산삼나트륨, 피로인산나트륨, 구연산나트륨, 구연산 및 주석산 등이 있고, 방부제로서는 파라옥시안신향산메칠, 파라옥시안식향산프로필 및 안식향산나트륨을 단독 혹은 2종 이상 혼합하여 사용한다.

약효성분으로는 불화나트륨, 일불소인산나트륨, 불화주석, 클로로헥시딘, 알란토인 클로로히드록시알루미네이트, 아미노카프론산, 트리클로산, 염화세틸피리디움, 염화아연, 염산피리독신 및 초산토코페롤 등을 단독 혹은 2종 이상 혼합하여 사용하고, 향료로는 페퍼민트오일, 스피아민트오일, 멘톨 및 아네톨 등을 적당량 혼합하여 사용하며, 증백제로는 산화티탄을, 색소로는 식용색소를, 정제수 및 에탄올의 용제로 통상의 치약 제조방법에 따라 제조한다.

이하, 하기 실시예에 의하여 본 발명을 더욱 상세하게 설명하고자 한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐 본 발명의 범위가 이들만으로 한정되는 것은 아니다

[참고예 1] 차나무 뿌리 유래 사포닌의 분리

차나무의 뿌리는 2005년 11월에 제주도 서귀포시 남원읍 한남리에서 수집하였으며, 차나무는 야부기다(Yabukita) 품종으로 20년 된 것을 선택하였다.

신선한 차나무 뿌리 10kg을 작은 조각으로 자르고 80%의 수성 MeOH 8L에 담그어 2일 동안 실온에 두었고, 이러한 추출 방법을 2번 반복하였다. 추출물을 합하고, 진공 하에서 농축시켜 고무질의 갈색 잔여물 540g을 수득하였다. 잔여물 100g을 C18 실리카겔 플래시 컬럼(flash column)에서 용리액으로 H₂O(각각 4L) 내의 MeOH를 0 내지 100%로 10%씩 증가시킨 것을 사용하여 크로마노크래피로 분리하고 11개의 분획물(A 내지 K)을 얻었다. 이 중 활성인 분획물 G(4g) 및 H(10g)를 합하고, 실리카겔 컬러에서 다시 크로마토그래피를 실시하여 8개의 분획물(GH1 내지 GH8)을 얻었다.

분획물 중 효소 억제 사포닌 분획물인 GH5(1.02g)를 C18 HPLC(용리액 B; 50~60% 수성 MeCN)로 정제하여 9개의 사포닌인 1(108mg, t_R 19.9분), 2(92mg, t_R 20.9분), 3(37mg, t_R 23.3분), 4(60mg, t_R 32.7분), 5(161mg, t_R 35.7분), 6(113mg, t_R 37.8분), 7(48mg, t_R 39.4분), 8(33mg, t_R 41.9분), 및 9(56mg, t_R 47.9분)를 획득하였다. 또한 C18 HPLC에서 용리액 A(40~49% 수성 MeCN)를 사용하여 분석 샘플 1~3을, 용리액 D(70~80% 수성 MeOH)를 사용하여 샘플 4~8을 수득하였다(각각 49mg, 32mg, 12mg, 16mg, 71mg, 20mg, 12mg, 및 9mg). 상기 분획물 9는 HPLC로 용리액 C(55~60% 수성 MeCN)를 사용하여 추가 정제하였고, 분석 샘플 9(26mg, t_R 43.3분) 및 10(8mg, t_R 62.7분)를 수득하였다.

분리된 10종의 트리테르페노이드 사포닌을 각각 '차나무 뿌리 유래 사포닌 R1 내지 R10'으로 지칭하며, 이에 대한 구체적인 분석 결과는 다음과 같다.

차나무 뿌리 유래 사포닌 R1: 백색 고체; 녹는점 228 - 229℃; [α]²⁰ _D : -28.83 (c 0.43, MeOH); IR (neat): ν_max = 3406, 1738, 1714, 1447, 1249, 1039 cm^-1; ¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ = 0.69 (3H, s, H-24) , 0.87 (3H, t, J = 7.2 Hz, 2MB-H-4), 0.89 (3H, s, H-29), 1.00 (5H, 3H,s, H-25 and 2H, m, H-6), 1.01 (3H, s, H-26), 1.02 (1H, m, H_a-1), 1.03 (3H, d, J = 7.2 Hz, 2MB-H-5), 1.05 (3H, s, H-30), 1.07 (1H, m, H_a-7), 1.26 (1H, t, J = 10.4 Hz, H-5), 1.35 (1H, dd, J = 13.2, 5.2 Hz, H_a-19), 1.38 (1H, m, 2MB-H_a-3), 1.48 (1H, m, H_b-7), 1.50 (3H, s, H-27), 1.56 (1H, m, 2MB-H_b-3), 1.64 (2H, m, H_b-1, H-9), 1.74 (1H, m, H_a-2), 1.84 (1H, m, H_b-2), 1.91 (3H, s, Ac), 1.96 (3H, s, Ac), 1.98 (2H, m, H-11), 2.23 (1H, m, 2MB-H-2), 2.25 (3H, s, Ac), 2.47 (1H, t, J = 14.2 Hz, H_b-19), 2.77 (1H, dd, J = 14.0, 4.0 Hz, H-18), 3.10 (1H, d, J = 11.2 Hz, H_a-28), 3.26 (1H, d, J = 11.2 Hz, H_a-23), 3.36 (1H, d, J = 11.2 Hz, H_b-28), 3.42 (1H, t J = 8.0, Hz, GlcA-H-2), 3.54 (2H, m, GlcA-H-3 & Ara-H-3), 3.57 (1H, m, GlcA-H-4), 3.58 (1H, m, Ara-H_a-5), 3.60 (1H, d, J = 11.2 Hz, H_b-23), 3.62 (1H, m, Ara-H-2), 3.63 (1H, m, H-3), 3.80 (1H, m, Ara-H-4), 3.82 (1H, m, GlcA-H-5), 3.90 (1H, m, Ara-H_b-5), 4.51 (2H, d, J = 7.2 Hz, GlcA-H-1, Ara-H-1), 5.16 (1H, d, J = 4.8 Hz, H-15), 5.29 (1H, d, J = 4.8 Hz, H-16), 5.30 (1H, d, J = 10.0 Hz, H-21), 5.52 (1H, d, J = 10.0 Hz, H-22), 5.59 (1H, brs, H-12); HR-TOF-ESI-MS: m/z = 1041.5258 [M + H]⁺(calcd. for C₅₂H₈₀O₂₁ + H: 1041.5270).

차나무 뿌리 유래 사포닌 R2: 백색 고체; 녹는점 229 - 230℃; [α]²⁰ _D : -37.61 (c 0.545, MeOH); IR (neat): ν_max = 3314,, 1727, 1444, 1248, 1038 cm^-1; ¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ = 0.69 (3H, s, H-24), 0.91 (3H, s, H-29), 1.00 (3H, s, H-25), 1.01 (3H, s, H-26), 1.08 (3H, s, H-30), 1.26 (1H, m, H_a-19), 1.50 (3H, s, H-27), 1.71 (3H, s, Ang-H-5), 1.90 (3H, s, Ac), 1.91 (3H, d, J = 7.6 Hz , Ang-H-4), 1.93 (3H, s, Ac), 2.24 (3H, s, Ac), 2.50 (1H, t, J = 14.0, H_b-19), 2.78 (1H, dd, J = 14.4, 4.0 Hz, H-18), 3.14 (1H, d, J = 10.8 Hz, H_a-28), 3.26 (1H, d, J = 10.8 Hz, H_a-23), 3.39 (1H, d, J = 10.0 Hz, H_b-28), 3.60 (1H, d, J = 10.8 Hz, H_b-23), 3.63 (1H, m, H-3), 4.50 (2H, d, J = 7.2 Hz, GlcA-H-1, Ara-H-1), 5.18 (1H, d, J = 4.4 Hz, H-15), 5.28 (1H, d, J = 4.0 Hz, H-16), 5.38 (1H, d, J = 10.8 Hz, H-21), 5.60 (1H, brs, H-12), 5.61 (1H, d, J = 10.8 Hz, H-22), 6.08 (1H, q, J = 7.6 Hz, Ang-H-3); HR-TOF-ESI-MS: m/z = 1039.5142 [M + H]⁺(calcd. for C₅₂H₇₈O₂₁ + H: 1039.5114).

차나무 뿌리 유래 사포닌 R3: 백색 고체; 녹는점 233 - 234℃; [α]²⁰ _D : -28.84 (c 0.208, MeOH); IR (neat): ν_max = 3415, 1726, 1368, 1249, 1023 cm^-1; ¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ = 0.70 (3H, s, H-24), 0.91 (3H, s, H-29), 0.95 (3H, s, H-26), 1.01 (3H, s, H-25), 1.08 (3H, s, H-30), 1.35 (3H, s, H-27), 1.50 (1H, m, H_a-15), 1.74 (3H, s, Ang-H-4), 1.80 (1H, m, H_b-15), 1.90 (3H, s, Ac), 1.93 (3H, d, J = 7.6 Hz , Ang-H-5), 2.20 (3H, s, Ac), 2.66 (1H, dd, J = 14.4, 4.8 Hz, H-18), 3.10 (1H, d, J = 10.8 Hz, H_a-28), 3.27 (1H, d, J = 10.8 Hz, H_a-23), 3.29 (1H, d, J = 10.8 Hz, H_b-28), 3.60 (1H, d, J = 10.8 Hz, H_b-23), 3.64 (1H, m, H-3), 4.51 (2H, d, J = 7.2 Hz, GlcA-H-1, Ara-H-1), 5.10 (1H, brs, H-16), 5.46 (1H, brs, H-12), 5.50 (1H, d, J = 10.4 Hz, H-21), 5.58 (1H, d, J = 10.4 Hz, H-22), 6.08 (1H, q, J = 7.6 Hz, Ang-H-3); HR-TOF-ESI-MS: m/z = 981.5094 [M + H]⁺(calcd. for C₅₀H₇₆O₁₉ + H: 981.5059).

차나무 뿌리 유래 사포닌 R4: 백색 고체; 녹는점 227 - 228℃; [α]²⁰ _D : -12.56 (c 0.565, MeOH); IR (neat): ν_max = 3421, 1718, 1370, 1257, 1041 cm^-1; ¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ = 0.71 (3H, s, H-24), 0.88 (3H, s, H-29), 0.86 (3H, t, J = 8.4 Hz, 2MB-H-4), 0.98 (3H, d, J = 6.8 Hz, 2MB-H-5), 1.00 (3H, s, H-26), 1.02 (3H, s, H-25), 1.07 (3H, s, H-30), 1.38 (3H, s, H-27), 1.40 (1H, m, 2MB-H_a-3), 1.58 (1H, m, 2MB-H_b-3), 1.82 (3H, s, Ang-H-5), 1.96 (3H, d, J = 7.2 Hz, Ang-H-4), 2.22 (1H, m, 2MB-H-2), 2.32 (3H, s, Ac), 2.66 (1H, dd, J = 14.0, 4.0 Hz, H-18), 3.12 (1H, d, J = 10.8 Hz, H_a-28), 3.27 (1H, overlapped with solvent, H_a-23), 3.37 (1H, d, J = 10.8 Hz, H_b-28), 3.60 (1H, d, J = 10.4 Hz, H_b-23), 3.64 (1H, m, H-3), 3.99 (1H, d, J = 4.0 Hz, H-15), 4.51 (2H, d, J = 7.2 Hz, GlcA-H-1, Ara-H-1), 5.29 (1H, d, J = 4.0 Hz, H-16), 5.41 (1H, d, J = 10.4 Hz, H-21), 5.52 (1H, brs, H-12), 5.54 (1H, d, J = 10.4 Hz, H-22), 6.15 (1H, q, J = 6.8 Hz, Ang-H-3); HR-TOF-ESI-MS: m/z = 1039.5471 [M + H]⁺(calcd. for C₅₃H₈₂O₂₀ + H: 1039.5478).

차나무 뿌리 유래 사포닌 R5: 백색 고체; 녹는점 231 - 232℃; [α]²⁰ _D : + 4.35 (c 0.46, MeOH); IR (neat): ν_max = 3395, 1711, 1442, 1256, 1039 cm^-1; ¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ = 0.85 (3H, s, H-29), 0.88 (3H, t, J = 7.2 Hz, 2MB-H-4), 1.01 (3H, s, H-25), 1.02 (3H, d, J = 6.0 Hz , 2MB-H-5), 1.04 (3H, s, H-26), 1.07 (3H, s, H-30), 1.13 (3H, s, H-24), 1.42 (1H, m, 2MB-H_a-3), 1.44 (3H, s, H-27), 1.60 (1H, m, 2MB-H_b-3), 1.85 (3H, s, Ang-H-5), 1.98 (3H, d, J = 6.8 Hz, Ang-H-4), 2.32 (1H, m, 2MB-H-2), 2.62 (1H, dd, J = 14.0, 4.0 Hz, H-18), 3.00 (1H, d, J = 10.4 Hz, H_a-28), 3.27 (1H, d, J = 10.8 Hz, H_b-28), 3.71 (1H, d, J = 4.0 Hz, H-15), 3.79 (1H, d, J = 4.8 Hz, H-16), 3.89 (1H, m, H-3), 4.32 (1H, d, J = 7.6 Hz, GlcA-H-1), 4.50 (1H , d, J = 6.4 Hz, Ara-H-1), 5.47 (1H, brs, H-12), 5.55 (1H, d, J = 10.4 Hz, H-22), 5.86 (1H, d, J = 10.4 Hz, H-21), 6.14 (1H, q, J = 7.2 Hz, Ang-H-3), 9.41 (1H, s, H-23); HR-TOF-ESI-MS: m/z = 995.5282 [M + H]⁺(calcd. for C₅₁H₇₈O₁₉ + H: 995.5216).

차나무 뿌리 유래 사포닌 R6: 백색 고체; 녹는점 229 - 230℃; [α]²⁰ _D : -9.56 (c 0.23, MeOH); IR (neat): ν_max = 3424, 1728, 1538, 1456, 1229, 1070 cm^-1; ¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ = 0.86 (3H, t, J = 6.4 Hz, 2MB-H-4), 0.92 (3H, s, H-29), 0.99 (3H, d, J = 7.2 Hz , 2MB-H-5), 1.02 (3H, s, H-25), 1.04 (3H, s, H-26), 1.07 (3H, s, H-30), 1.10 (3H, s, H-24), 1.36 (H, dd, J = 13.6, 4.0 Hz, 2MB-H_a-3), 1.57 (1H, dd, J = 13.6, 7.2 Hz, 2MB-H_b-3), 1.39 (3H, s, H-27), 1.84 (3H, s, Ang-H-5), 1.97 (3H, d, J = 7.2 Hz , Ang-H-4), 2.24 (1H, m, 2MB-H-2), 2.32 (3H, s, Ac), 2.64 (1H, dd, J = 14.4, 4.0 Hz, H-18), 3.12 (1H, d, J = 10.8 Hz, H_a-28), 3.34 (1H, d, J = 10.8 Hz, H_b-28), 3.90 (1H, dd, J = 8.8 & 2.8 Hz, H-3), 3.97 (1H, d, J = 4.8 Hz, H-15), 4.33 (1H, d, J = 7.6 Hz, GlcA-H-1), 4.49 (1H , d, J = 6.8 Hz, Ara-H-1), 5.28 (1H, d, J = 4.4 Hz, H-16), 5.41 (1H, d, J = 10.4 Hz, H-21), 5.54 (1H, d, J = 10.4 Hz, H-22), 5.55 (1H, brs, H-12), 6.16 (1H, q, J = 7.2 Hz, Ang-H-3), 9.40 (1H, s, H-23); HR-TOF-ESI-MS: m/z = 1037.5406 [M + H]⁺(calcd. for C₅₃H₈₀O₂₀ + H: 1037.5321).

차나무 뿌리 유래 사포닌 R7: 백색 고체; 녹는점 223 - 224℃; [α]²⁰ _D : -13.01 (c 0.315, MeOH); IR (neat): ν_max = 3407, 1714, 1370, 1249, 1039 cm^-1; ¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ = 0.86 (3H, t, J = 7.4 Hz, 2MB-H-4), 0.89 (3H, s, H-29), 0.98 (3H, s, H-25), 0.99 (3H, d, J = 7.2 Hz , 2MB-H-5), 1.00 (3H, s, H-26), 1.07 (3H, s, H-30), 1.16 (3H, s, H-24), 1.37 (3H, s, H-27), 1.38 (1H, m, 2MB-H_a-3), 1.56 (1H, m, 2MB-H_b-3), 1.82 (3H, s, Ang-H-5), 1.97 (3H, d, J = 7.2 Hz, Ang-H-4), 2.26 (1H, m, 2MB-H-2), 2.31 (3H, s, Ac), 2.66 (1H, dd, J = 14.8, 4.0 Hz, H-18), 3.12 (1H, d, J = 10.8 Hz, H_a-28), 3.34 (1H, d, J = 10.8 Hz, H_b-28), 3.68 (3H, s, 23-COOCH ₃ ), 3.96 (1H, d, J = 4.8 Hz, H-15), 4.03 (1H, dd, J = 11.6, 4.4 Hz, H-3), 4.30 (1H, d, J = 8.0 Hz, GlcA-H-1), 4.50 (1H , d, J = 6.8 Hz, Ara-H-1), 5.28 (1H, d, J = 4.4 Hz, H-16), 5.41 (1H, d, J = 10.4 Hz, H-21), 5.54 (1H, brs, H-12), 5.54 (1H, d, J = 10.8 Hz, H-22), 6.16 (1H, q, J = 7.0 Hz, Ang-H-3); HR-TOF-ESI-MS: m/z = 1067.5492 [M + H]⁺(calcd. for C₅₄H₈₂O₂₁ + H: 1067.5427).

차나무 뿌리 유래 사포닌 R8: 백색 고체; 녹는점 231 - 232℃; [α]²⁰ _D : -8.62 (c 0.105, MeOH); IR (neat): ν_max = 3411, 1722, 1441, 1242, 1073 cm^-1; ¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ = 0.84 (3H, s, H-29), 0.85 (3H, s, H-24), 0.88 (3H, t, J = 7.2 Hz, 2MB-H-4), 0.98 (3H, s, H-25), 1.01 (3H, s, H-26), 1.02 (3H, d, J = 7.2 Hz , 2MB-H-5), 1.05 (3H, s, H-23), 1.07 (3H, s, H-30), 1.41 (3H, s, H-27), 1.42 (1H, m, 2MB-H_a-3), 1.60 (H, m, 2MB-H_b-3), 1.84 (3H, s, Ang-H-5), 1.98 (3H, d, J = 7.2 Hz, Ang-H-5), 2.30 (1H, m, 2MB-H-2), 2.62 (1H, m, H-18), 2.99 (1H, d, J = 10.0 Hz, H_a-28), 3.18 (1H, dd, J = 9.2, 5.2 Hz, H-3), 3.30 (1H, overlapped with solvent, H_b-28), 3.73 (1H, d, J = 4.0 Hz, H-15), 3.80 (1H, d, J = 4.0 Hz, H-16), 4.41 (1H, d, J = 7.2 Hz, GlcA-H-1), 4.53 (1H , d, J = 6.8 Hz, Ara-H-1), 5.47 (1H, brs, H-12), 5.55 (1H, d, J = 10.0 Hz, H-22), 5.86 (1H, d, J = 10.0 Hz, H-21), 6.16 (1H, q, J = 7.2 Hz, Ang-H-3); HR-TOF-ESI-MS: m/z = 981.5435 [M + H]⁺(calcd. for C₅₁H₈₀O₁₈ + H: 981.5423).

차나무 뿌리 유래 사포닌 R9: 백색 고체; 녹는점 232 - 233℃; [α]²⁰ _D : -24.15 (c 0.31, MeOH); IR (neat): ν_max = 3443, 1724, 1459, 1234, 1072 cm^-1; ¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ = 0.71 (3H, s, H-24), 0.84 (3H, t, J = 7.2 Hz, 2MB-H-4), 0.88 (3H, s, H-29), 0.95 (3H, s, H-26), 0.98 (3H, d, J = 6.8 Hz , 2MB-H-5), 1.01 (3H, s, H-25), 1.09 (3H, s, H-30), 1.32 (1H, m, 2MB-H_a-3), 1.37 (3H, s, H-27), 1.44 (1H, m, H_a-15), 1.57 (H, m, 2MB-H_b-3), 1.80 (1H, m, H_b-15), 1.83 (3H, s, Ang-H-5), 1.97 (3H, d, J = 7.2 Hz, Ang-H-4), 2.20 (1H, m, 2MB-H-2), 2.27 (3H, s, Ac), 2.66 (1H, dd, J = 14.0, 3.6 Hz, H-18), 3.08 (1H, d, J = 10.4 Hz, H_a-28), 3.29 (1H, overlapped with solvent, H_a-23), 3.32 (1H, overlapped with solvent, H_b-28), 3.60 (1H, d, J = 10.0 Hz, H_b-23), 3.63 (1H, m, H-3), 4.51 (2H, d, J = 7.2 Hz, GlcA-H-1, Ara-H-1), 5.15 (1H, brs, H-16), 5.45 (1H, brs, H-12), 5.54 (2H, s, H-21 and H-22), 6.16 (1H, q, J = 7.6 Hz, Ang-H-3); HR-TOF-ESI-MS: m/z = 1023.5556 [M + H]⁺(calcd. for C₅₃H₈₂O₁₉ + H: 1023.5529).

차나무 뿌리 유래 사포닌 R10: 백색 고체; 녹는점 232 - 233℃; [α]²⁰ _D : -22.06 (c 0.29, MeOH); IR (neat): ν_max = 3433, 1720, 1458, 1229, 1072 cm^-1; ¹H-NMR (400 MHz, CD₃OD): δ = 0.70 (3H, s, H-24), 0.85 (3H, t, J = 7.6 Hz, 2MB-H-4), 0.89 (3H, s, H-29), 0.95 (3H, s, H-26), 0.98 (3H, d, J = 6.8 Hz , 2MB-H-5), 1.01 (3H, s, H-25), 1.09 (3H, s, H-30), 1.36 (3H, s, H-27), 1.37 (1H, m, 2MB-H_a-3), 1.43 (1H, m, H_a -15), 1.55 (1H, m, 2MB-H_b-3), 1.81 (1H, m, H_b-15), 1.83 (3H, s, Ang-H-5), 1.96 (3H, d, J = 7.2 Hz, Ang-H-4), 2.22 (1H, m, 2MB-H-2), 2.27 (3H, s, Ac), 2.66 (1H, dd, J = 14.0, 4.0 Hz, H-18), 3.08 (1H, d, J = 10.8 Hz, H_a-28), 3.29 (1H, overlapped with solvent, H_a-23), 3.32 (1H, overlapped with solvent, H_b-28), 3.60 (1H, d, J = 10.8 Hz, H_b-23), 3.62 (1H, m, H-3), 3.77 (3H, s, GlcA-6-OCH ₃ ), 4.51 (2H, d, J = 7.2 Hz, GlcA-H-1, Ara-H-1), 5.16 (1H, brs, H-16), 5.46 (1H, brs, H-12), 5.54 (2H, s, H-21 and H-22), 6.16 (1H, q, J = 7.0 Hz, Ang-H-3); HR-TOF-ESI-MS: m/z = 1037.5684 [M + H]⁺(calcd. for C₅₄H₈₄O₁₉ + H: 1037.5685).

[실시예 1∼2 및 비교예 1] 치약 조성물의 제조

하기 표 1과 같은 성분을 주성분으로 하여 본 발명의 치약 조성물(실시예 1∼2) 및 통상적인 치약 조성물(비교예 1)을 제조하였다.

성분명	실시예 1	실시예 2	비교예 1
함수규산	17	17	17
불화나트륨	0.22	0.22	0.22
소르비톨액	50	50	50
카르복시메칠셀룰로오스나트륨	1.0	1.0	1.0
라우릴황산나트륨	2.0	2.0	2.0
메틸파라벤	0.2	0.2	0.2
조합향료	1.0	1.0	1.0
삭카린 나트륨	0.2	0.2	0.2
구연산 나트륨	0.4	0.4	0.4
트리테르페노이드 사포닌 (차나무 뿌리 유래 사포닌 R4-8)	3.0	-	-
트리테르페노이드 사포닌 (차나무 뿌리 유래 사포닌 R1-10)	-	3.0	-
이산화티탄	0.3	0.3	0.3
정제수	잔량	잔량	잔량

[시험예 1] 치면 세균막 지수 비교 시험

본 실험은 비교적 동일한 환경에 있는 피검자 120명을 대상으로 실시하였으며, 피검자 전원이 실험 전 1차 구강정밀검사를 실시하여 기준선(base line)을 구하였다. 단일 맹검법을 적용하였고 실험 전 4주 동안의 잔류효과 제거기간 동안 피검자 전원에게 동일 세치제 및 동일규격의 칫솔을 제공하였다. 2개월 간격으로 총 3차례 측정하였으며 검사방법은 치면 착색액 10방울에 물 20ml를 혼합하여 입안에서 1분간 머금은 뒤 뱉어내고 물로 가볍게 양치한 후 착색상태를 Quigley & Hein의 Turesky modification 기준을 적용하였으며, 그 결과를 하기 표 2에 나타내었다.

그룹	피검자	기준선 mean±S.D.	2개월 후 mean±S.D.	5개월 후 mean±S.D.	P 값 (by ANOVA)
비교예 1	33	0.76±0.58	0.78±0.53	0.74±0.50	p>0.05
실시예 1	33	0.77±0.67	0.65±0.31	0.61±0.45	p<0.05
실시예 2	33	0.76±0.58	0.54±0.41	0.45±0.42	p<0.05

처음 2개월 후 1차 정밀구강검사 결과, 치면세균막 지수에서 비교예 1은 2.6%의 증가를 보였지만 실시예 1 및 실시예 2는 각각 15.6% 및 28.9%의 감소를 나타냈다. 5개월 후의 2차 정밀구강검사 결과에서는 비교예 1은 2.6%의 감소를, 실시예 1 및 실시예 2는 각각 20.8% 및 40.8%의 치면세균막 지수의 감소를 나타내었다 (도 1).

상기 결과에서 실시예 1 및 실시예 2가 비교예 1에 비해 모두 유의한 수준으로 치면세균막이 감소함을 보였다.

[시험예 2] 치은염지수 비교 시험

본 실험은 비교적 동일한 환경에 있는 피검자 120명을 대상으로 실시하였으며, 피검자 전원이 실험 전 1차 구강정밀검사를 실시하여 기준선을 구하였다. 단일 맹검법을 적용하였고, 실험 전 4주 동안의 잔류효과 제거기간 동안 피검자 전원에게 동일 세치제 및 동일규격의 칫솔을 제공하였다. 2개월 간격으로 총 3차례 측정하였으며 실험 방법은 한 개의 치아 당 치은을 협면과 설면으로 구획한 후 산출된 지수의 평균값으로 산출하였다. 각 치은염은 Loe & Silness의 평점 기준에 따라 0점부터 3점까지로 평가하여 치아별 치은염 지수를 구한 뒤 평균성적으로 개체의 치은염 지수를 산출하였으며, 그 결과를 하기 표 3에 나타내었다.

그룹	피검자	기준선 mean±S.D.	2개월 후 mean±S.D.	5개월 후 mean±S.D.	P 값 (by ANOVA)
비교예 1	33	0.62±0.48	0.57±0.47	0.57±0.46	p>0.01
실시예 1	33	0.65±0.22	0.43±0.31	0.45±0.14	p<0.01
실시예 2	33	0.60±0.43	0.48±0.25	0.41±0.30	p<0.01

처음 2개월 후인 1차 정밀구강검사 결과에서 치은염지수는 비교예 1이 8.1% 감소를 보였지만, 실시예 1 및 실시예 2는 각각 33.8% 및 20.0% 감소를 나타내었다. 5개월 후의 2차 정밀구강검사 결과에서는 비교예 1이 9% 감소를 나타내었으며, 실시예 1 및 실시예 2는 각각 30.8%와 31.7%의 감소를 나타내었다 (도 2).

상기 결과로부터 실시예 1 및 실시예 2가 비교예 1에 비해 모두 유의한 수준으로 치은염지수가 감소함을 보였다.

[시험예 3] 구취농도지수

본 실험은 비교적 동일한 환경에 있는 피검자 120명을 대상으로 실시하였으며, 피검자 전원이 실험 전 1차 구강정밀검사를 실시하여 기준선을 구하였다. 단일 맹검법을 적용하였고, 실험 전 4주 동안의 잔류효과 제거기간 동안 피검자 전원에게 동일 세치제 및 동일규격의 칫솔을 제공하였다. 2개월 간격으로 총 3차례 측정하였으며, 측정방법은 측정 전 3분간 입을 다물게 한 후 Halimeter(model RH-17(Interscan co, U.S.A)에 스트로우를 연결하고 0±5ppb로 영점 세팅한 후 기기 제조사가 지정하는 소정의 방법에 따라 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 4에 나타내었다.

그룹	피검자	기준선 mean±S.D.	2개월 후 mean±S.D	5개월 후 mean±S.D.	P 값 (by ANOVA)
비교예 1	33	48.61±35.27	48.21±31.31	49.39±38.49	p>0.05
실시예 1	33	47.32±30.28	42.25±35.50	40.25±36.24	p<0.05
실시예 2	33	48.98±32.08	40.31±31.24	36.74±32.52	p<0.05

처음 2개월 후 1차 정밀구강검사 결과에서 구취농도지수는 비교예 1이 0.8% 감소를 보였고, 실시예 1 및 실시예 2가 각각 10.7% 및 17.7% 감소를 나타내었다. 5개월 후 2차 정밀구강검사 결과에서 비교예 1은 1.6% 증가, 실시예 1과 실시예 2는 각각 14.9% 및 25.0% 감소를 나타내었다 (도 3).

상기 결과에서 실시예 1과 실시예 2가 비교예 1에 비해 모두 유의한 수준으로 치은염지수가 감소함을 보였다.

상기에서 살펴본 바와 같이, 본 발명에 따른 구강용 조성물은 치은염지수의 감소 및 구취농도 지수의 유효한 수치의 감소로 판단했을 때 치은염 및 치주염 등의 치주질환 개선 효과 및 구취 억제 효과가 우수하였다.

본 발명에 의한 구강용 조성물은 하기의 제형예와 같이 제조될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

[제형예 1] 치약

참조예 1의 차나무 뿌리 유래 사포닌 R1-10를 총 조성물 중량의 1 내지 3중량%로 포함시키고, 향료, 감미제, 점증제, 연마제 및 치석 제거제를 적량으로 첨가한 후 정제수로 전체량을 조절하여 치약을 제조하였다.

[제형예 2] 구강 스프레이제

참조예 1의 차나무 뿌리 유래 사포닌 R1-10 10mg을 통상의 구강 스프레이 제조방법에 따라 정제수에 첨가하고 맛 차단제 및/또는 향미제를 총 조성물의 0.75 내지 7.5 중량%로 첨가한 후, 전체를 300ml로 조절하여 구강 스프레이제를 제조하였다.

Claims

차나무 뿌리 유래 트리테르페노이드계 사포닌을 유효성분으로 포함하는 치주 질환 예방 및 개선용 조성물로서,
상기 트리테르페노이드계 사포닌은 하기 화학식 1 내지 10으로 나타내는 사포닌 중 하나 이상인, 치주 질환 예방 및 개선용 조성물.
[화학식 1]

[화학식 2]

[화학식 3]

[화학식 4]

[화학식 5]

[화학식 6]

[화학식 7]

[화학식 8]

[화학식 9]

[화학식 10]
제 1항에 있어서, 상기 트리테르페노이드계 사포닌의 함량은 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 65 중량%임을 특징으로 하는, 치주 질환 예방 및 개선용 조성물.
제 1항에 있어서, 상기 조성물은 치약, 구강용 세정제, 또는 구강 청정제로 제형화되는 치주 질환 예방 및 개선용 조성물.
차나무 뿌리 유래 트리테르페노이드계 사포닌을 유효성분으로 포함하는 구취 억제용 조성물로서,
상기 트리테르페노이드계 사포닌은 하기 화학식 1 내지 10으로 나타내는 사포닌 중 하나 이상인, 구취 억제용 조성물.
[화학식 1]

[화학식 2]

[화학식 3]

[화학식 4]

[화학식 5]

[화학식 6]

[화학식 7]

[화학식 8]

[화학식 9]

[화학식 10]
제 4항에 있어서, 상기 트리테르페노이드계 사포닌의 함량은 조성물 총 중량에 대하여 0.01 내지 65 중량%임을 특징으로 하는, 구취 억제용 조성물.
제 4항에 있어서, 상기 조성물은 치약, 구강용 세정제, 또는 구강 청정제로 제형화되는 구취 억제용 조성물.