KR100900725B1

KR100900725B1 - 고함량의 유파틸린을 함유하는 쑥 추출물의 제조방법

Info

Publication number: KR100900725B1
Application number: KR1020080093016A
Authority: KR
Inventors: 왕훈식; 박준상; 염대일; 오진섭
Original assignee: 지엘팜텍 주식회사
Priority date: 2008-02-14
Filing date: 2008-09-23
Publication date: 2009-06-05
Anticipated expiration: 2028-09-23
Also published as: CN101518558B; CN101518558A; CN102512471A; KR20090088343A; KR20140041654A

Abstract

본 발명은 프로판올로 추출하여 얻는 쑥 추출물의 제조방법에 관한 것으로서, 이를 통해 항위염 물질인 유파틸린을, 기존 기술에 비해 고함량으로 함유할 뿐만 아니라 별도의 제거 공정 없이 혈액응고억제 물질이 완전히 제거된 쑥 추출물을 확보할 수 있다.

쑥(Artemisia), 쑥 추출물(Artemisia extract), 프로판올(propanol)

Description

고함량의 유파틸린을 함유하는 쑥 추출물의 제조방법{A PREPARATION METHOD OF ARTEMISIA EXTRACT CONTAINING HIGH CONTENT OF EUPATILIN}

쑥( Artemisia mongolica , A. asiatica , A. princeps var . orientalis , A. argyi, A. montana 등)은 국화과에 속하는 다년생 약초로서 예로부터 강장보혈, 부인병, 설사치료제로 사용되어 왔으며 규명된 화학성분으로서 이소쿠마린, 쿠마린, 디테르펜락톤 등이 있으며 유파틸린, 자세오시딘 등의 플라보이노이드 성분 등도 확인되었다.

대한약전외 한약(생약)규격집에서는 상기 쑥의 잎 및 어린줄기를 일컬어 애엽(艾葉, Artemisiae argyi Herb)이라 지칭하고 있다.

이 중 플라보노이드 성분인 유파틸린(eupatilin)은 항알러지 효과(일본 공개특허공보 소59-155314호)가 알려진 바 있으며 최근 국내에서도 위장질환 치료제로서의 효용성에 대해서도 밝혀진 바 있다. (대한민국 특허등록 127777) 더불어, 또 다른 플라보노이드 성분인 자세오시딘(jaseocidin) 역시 동일한 위장질환 치료제로서 사용 가능함이 특허로 등록된 바 있다. (대한민국 특허등록 181751)

한편, 대한민국 특허등록 181751에서는, 쑥으로부터 정제한 유파틸린 또는 자세오시딘의 항위염 효과에 비해 쑥 추출물 자체의 항위염 효과가 더욱 뛰어나 해 당 추출물 중 미지의 물질들이 항위염 효과를 상승시키는 것으로 추정 기술하고 있다.

상기한 바와 같이, 쑥 추출물 자체가 유효 개별성분인 유파틸린 또는 자세오시딘에 비해 그 효과가 높다 하더라도 대한민국 등록특허 181751에서 보듯이, 쑥 추출물 중 개별 유효성분의 함유율이 높을수록 비례적으로 위병변 억제효과가 높아지는 경향이 명확하게 나타나 있어 해당 추출물 중 유효성분 함유량을 증가시키는 것은 그 치료효과를 더욱 상승시킬 수 있는 기회를 확보할 수 있다 하겠다.

더불어, 대한민국 특허공개 2006-0002639에서는, 쑥에 함유되어 있는 혈액응고억제 성분 즉, 쿠마린(coumarin)류가 포함되어 있으며 특히, 이 가운데 디쿠마롤(Dicoumarol) 성분이 추출 과정에서 포함된다고 적시하고 있다. 선행기술에 기술된 바와 같이 디쿠마롤은 소량의 투약으로도 혈소판 수를 급격히 감소시킬 수 있고 간독성도 보고된 바 있어 의학적 용도로 사용할지라도 매우 신중을 기해 투약되어야 하는 성분에 해당한다. 더욱이, 위염 또는 위궤양 환자는 위장 손상에 의한 위출혈이 동반되는 경우가 허다하므로 이 같은 성분은 반드시 제거되어야만 약효 증가를 더욱 기대할 수 있다 하겠다.

또한, 상기 선행기술에서는, 기존의 대한민국 특허등록 181751에 따른 알코올 또는 알코올 수용액 추출물에서는 이 성분의 제거가 용이하지 않음을 적시하고 있으며 이를 제거할 수 있는 방법으로서, 1) 애엽 잎을 알코올 또는 알코올 수용액으로 추출하는 단계(단계1), 2) 상기 단계1에서 얻어진 추출물에 알칼리 용액을 첨가하고 80℃에서 1시간 이상 반응시키는 단계(단계2), 3) 상기 단계2에서 얻어진 추출물에 산성 용액을 첨가하여 중화시키는 단계(단계3) 및 4) 상기 단계3에서 얻어진 추출물을 감압농축한 후 동결건조하는 단계(단계4)를 포함하는 제조방법을 제공하고 있다. 즉, 선행기술에 단계2 및 단계3의 알칼리 처리 및 이의 중화 과정을 포함시킴으로써 디쿠마롤 성분을 용이하게 제거할 수 있음을 알 수 있다.

본 발명에서는 기존 추출법과 달리 추출 용매를 에탄올에서 프로판올로 치환할 경우, 예상치 않게 높은 유파틸린 함량을 확보할 수 있음과 더불어 별도의 추가 공정을 거치지 않더라도, 혈액응고억제성분인 디쿠마롤이 포함되지 않는 것을 발견하여 본 발명을 완성하였다.

본 발명은 위병변 억제 효과를 나타내는 유파틸린이 고함량으로 함유되고 별도의 제거공정을 거치지 않더라도 혈액응고성분인 디쿠마롤이 포함되지 않는 쑥 추출물의 제조방법을 확보하는 것을 목적으로 한다.

본 발명은 쑥(애엽)을 프로판올로 추출, 농축하여 고농도의 유파틸린을 함유하는 쑥 프로판올 추출물에 대한 것으로 추출, 농축 과정에서 혈액응고억제 물질 즉, 디쿠마롤을 제거하기 위한 별도의 공정을 포함시키지 않더라도 디쿠마롤을 함유하지 않는 것을 특징으로 하고 있다.

본 발명에 사용되는 쑥은 황해쑥(Artemisia argyi), 쑥(A. princeps var. orientalis, A. asiatica), 산쑥(A. montana), 참쑥(A. mongolica) 및 대한약전외 한약(생약)규격집에 정의된 동속식물을 포함한다.

본 발명에서 사용되는 프로판올은 1-프로판올(n-프로판올) 또는 2-프로판올(이소프로판올)을 포함한다.

본 발명은, 쑥에 상기 프로판올을 가해 통상의 생약추출물 즉, 침지법, 환류법을 통해 추출 및/또는 재추출하여 이를 적절한 방법으로 여과한 뒤 별도의 추가 공정 없이 바로 농축하여 쑥 프로판올 추출물을 최종 확보한다.

침지법을 사용하는 경우, 쑥에 프로판올을 가해 충분한 시간 동안 침지하고 이를 적절한 방법으로 여과한 뒤 감압농축하여 추출물을 획득한다.

환류법을 사용할 경우, 여과병에 쑥을 넣고 이 병에 프로판올을 계속 환류시켜 추출액을 얻은 뒤 마찬가지로 적절한 방법으로 여과한 뒤 감압농축하여 최종 추출물을 획득한다.

본 발명을 통해 고함량의 유파틸린을 함유할 뿐만 아니라 약효가 더욱 개선되고 특히, 별도의 추가 제거공정을 포함하지 않더라도 혈액응고억제성분이 포함되지 않는 쑥 추출물을 확보할 수 있다.

<실시예1>

쑥 (Artemisia princeps Pamp. var. orientalis) 2kg에 2-프로판올 20kg을 가해 약 24시간 동안 환류추출하고 이를 400mesh 천으로 여과한다. 잔류물에 2-프로판올 46kg을 추가로 가해 이를 400mesh 천으로 여과하여 합친 뒤, 49℃ 부근을 유지하며 감압농축하여 프로판올 쑥 추출물 100g을 얻었다. (수득율 20:1)

<실시예2>

쑥 (Artemisia princeps Pamp. var. orientalis) 2kg에 2-프로판올 20kg을 가해 약 24시간 동안 침지추출하고 이를 1500mesh 천으로 여과한다. 잔류물에 2-프로판올 46kg을 추가로 가해 이를 400mesh 천으로 여과하여 합친 뒤, 47-48℃ 부근을 유지하며 감압농축하여 프로판올 쑥 추출물 100g을 얻었다. (수득율 20:1)

<실시예3>

쑥 (Artemisia princeps Pamp. var. orientalis) 2kg에 1-프로판올 20kg을 가해 약 24시간 동안 환류추출하고 이를 1500mesh 천으로 여과한다. 잔류물에 2-프로판올 46kg을 추가로 가해 이를 400mesh 천으로 여과하여 합친 뒤, 47-48℃ 부근을 유지하며 감압농축하여 프로판올 쑥 추출물 100g을 얻었다. (수득율 20:1)

<실시예4>

쑥 (Artemisia princeps Pamp. var. orientalis) 3kg에 2-프로판올 39kg을 가해 약 24시간 동안 환류추출하고 이를 3㎛ 멤브레인 필터로 여과한다. 잔류물에 2-프로판올 7.5kg을 추가로 가해 이를 3㎛ 멤브레인 필터로 여과하여 합친 뒤, 49-57℃ 부근을 유지하며 감압농축하여 프로판올 쑥 추출물 150g을 얻었다. (수득율 20:1)

<비교예1>

쑥 (A. asiatica) 1kg에 에탄올(약전) 10kg을 가해 약 24시간 동안 추출하고 이를 400mesh 천으로 여과한다. 잔류물에 에탄올(약전) 23kg을 추가로 가해 이를 400mesh 천으로 여과하여 합친 뒤, 49℃ 부근을 유지하며 감압농축하여 에탄올 쑥 추출물 50g을 얻었다. (수득율 20:1)

<실험예1> 추출용매에 따른 유파틸린 함량 비교

상기 실시예 및 비교예와 동일한 제조방법으로 추가적으로 1 batch씩을 제조하여 얻은 쑥 추출물 중 약효성분인 유파틸린의 함유량은 다음과 같다.

추출물	Batch No.	유파틸린 함량
		개별값	평균
에탄올 쑥 추출물 (비교예 1)	No. 1	0.73%	약 0.98%
	No. 2	1.22%
프로판올 쑥 추출물 (실시예 1)	No. 1	1.81%	약 1.90%
	No. 2	1.98%

결과적으로, 에탄올 추출물에 비해 프로판올 추출물에서 약효성분인 유파틸린이 약 2배 가량 증가한 결과를 나타내었다.

더욱이, 도1에서와 같이 유파틸린뿐만 아니라 기타 성분도 유사 비율로 증가한 결과를 나타내어, 선행기술에서 공지된 바와 같이 단일 약효성분이 아닌 추출물 자체의 약효가 더욱 증가되었다는 점을 감안할 때, 본 발명은 기타 약효성분의 함유율도 크게 증가시킨 쑥 추출물을 확보할 수 있음을 개시한다고 할 수 있다.

<실험예2> 혈액응고억제 성분인 디쿠마롤 측정

본 발명에 따른 프로판올추출물 중 디쿠마롤 성분 함유 여부를 확인하기 위해 다음과 같은 시험법으로 측정하였다.

시험법 고속액체크로마토그래프법 (HPLC법)

컬럼 캅셀팩 C18 (4.6 x 250mm; 5㎛)

유속 1.0mL/min

검출 UV 350nm

주입량 10㎕

이동상 이동상 A 5mM 메탄설폰산나트륨 및 10mM 인산칼륨 혼

액(pH 3.0)

이동상 B 아세토니트릴

이동상 그라디에이션(gradiation)

시간(분)	이동상 A	이동상 B
10	50	50
15	50	50
30	60	40
34	50	50
40	50	50

도2에 기재된 시험결과에서와 같이, 실시예 1 및 3의 추출물에서 디쿠마롤 성분이 전혀 검출되지 않았다.

따라서, 본 발명에 따른 쑥 프로판올 추출물은 프로판올을 이용한 추출 공정 이외에 별도의 추가 공정을 가하지 않더라도 기존 에탄올 추출물과 달리 디쿠마롤 성분이 포함되지 않음을 알 수 있다.

<실험예3> 쑥 프로판올 추출물의 위염병변 억제 효과

실시예1에 따라 제조된 쑥 추출물을 약 1.5배에 해당하는 부형제(마이크로셀락)에 가해 희석, 건조하여 이 희석건조물을 대상으로 통상의 염산-에탄올 유발 위 손상 랫드(rat) 모델에서 위점막보호 효과를 평가하였다. 대조군으로서는, 비교예1에 따라 제조된 쑥 에탄올 추출물을 함유하는 동아제약 스티렌정을 분말화하여 사용하였다.

도3에 도시된 바와 같이 실시예1에 따라 제조된 쑥 프로판올 추출물은 위손 상 억제효과가 뚜렷하였고 그 효과는 투여용량에 비례한 결과를 나타내었다.

특히, 쑥 에탄올 추출물을 함유하여 시판되고 있는 스티렌정과 추출물로서 동량을 투약한 그룹 3 및 그룹 5를 비교할 때, 위병변 억제 효과가 더욱 개선되었음을 알 수 있다.

도 1은 실시예1 및 비교예1에 따라 제조된 각 추출물에 대한 액체크로마토그래프법에 따른 크로마토그램이다.

도 2a 및 2b는 실시예1 및 실시예3에 따라 제조된 쑥 프로판올 추출물에 대한 혈액응고억제 물질, 디쿠마롤(Dicoumarol) 함유 유무를 확인한 크로마토그램이다.

도 3a 및 3b는 실시예1에 따라 제조된 추출물에 대한 위병변 억제 효과를 나타내는 도이다.

Claims

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쑥의 프로판올 추출물을 제조하는 방법으로서,

쑥을 프로판올로 추출하는 공정; 및

상기 추출액을 감압, 농축하는 공정을 포함하며,

별도의 디쿠마롤 제거 공정을 포함하지 않는 것을 특징으로 하는 쑥 프로판 올 추출물의 제조방법.
제 5항에 있어서, 쑥 추출물의 수득율이 최총 추출물을 기준으로 하여 20:1인 것을 특징으로 하는 쑥 프로판올 추출물의 제조방법.
제 5항에 있어서, 프로판올은 1-프로판올 또는 2-프로판올인 것을 특징으로 하는 쑥 프로판올 추출물의 제조방법.