KR100703598B1

KR100703598B1 - 리폭시제나아제에 대한 저해 활성을 갖는 신규벤즈옥사졸 아미드 유도체 화합물, 이의 제조방법 및 이를포함하는 천식의 치료 및 예방용 조성물

Info

Publication number: KR100703598B1
Application number: KR1020050061181A
Authority: KR
Inventors: 한균희; 이진하; 남기엽; 박혜영; 송현민; 김건철; 이기연; 김주헌; 김소영; 성인옥; 이형규; 오세량; 민병선; 안경섭; 이상구; 천태규; 박보영; 권옥경; 김정희; 김은아
Original assignee: 한국생명공학연구원
Priority date: 2005-07-07
Filing date: 2005-07-07
Publication date: 2007-04-06
Anticipated expiration: 2025-07-07
Also published as: KR20070006115A

Abstract

본 발명은 리폭시제나아제(Lipoxygenase)에 대한 저해활성을 갖는 신규 벤즈옥사졸 아미드 유도체 (Ⅰ) 화합물, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 천식 치료 및 예방용 조성물을 제공한다. 본 발명에 따른 화합물은 리폭시제나아제에 대해 강한 저해활성을 나타내므로, 이를 함유하는 조성물은 천식의 치료를 위한 약제로써 이용가능하다.

리폭시제나아제, 저해활성, 천식, 벤즈옥사졸, 유도체, 화합물

Description

리폭시제나아제에 대한 저해 활성을 갖는 신규 벤즈옥사졸 아미드 유도체 화합물, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 천식의 치료 및 예방용 조성물{Novel benzoxazole amide compound having lipoxygenase inhibitory activity, the preparation method thereof and a composition containing the same for preventing and treating asthma}

본 발명은 리폭시제나아제에 대한 저해 활성을 갖는 신규 벤즈옥사졸 아미드 유도체 화합물, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 천식 치료 및 예방용 조성물에 관한 것이다.

천식(ASTHMA)이란 가역적인 기도 폐쇄, 기도 염증 및 기도 과민성으로 특징 지워지는 호흡기 질환으로 미국에서는 현재 약 1,200만 명의 천식 환자가 있다고 알려져 있다. 1982 년부터 1992 년까지의 통계를 보면 천식 유병률은 1,000 명당 34.7 명에서 1000 명당 49.4 명으로 증가되었고 사망률도 백만 명당 13.4 명에서 18.8 명으로 약 40% 가 증가하였다. 1995년에 국내에서 조사한 결과를 보면, 어린 이 및 청소년의 약 10% 내외가 최근 1년 이내에 천식증상을 경험한 적이 있고 성인에서도 비슷한 결과를 보이는데, 젊은 성인인 경우에는 유병률이 적지만 40세 이후의 성인에서는 인구의 약 10%가 천식증상을 경험하는 것으로 나타난다.

천식의 기도 폐쇄는 기도 평활근의 연축, 기도 점막의 부종, 점액 분비 증가, 염증 세포들의 기도 침윤(특히 호산구 및 림프구), 기도 상피세포의 손상 및 탈락 등의 복합적인 요인들로 초래되는데 분비물에 있는 염증매개 물질들이 기관지 경련, 점액 분비, 미세혈관 누출 등에 관여한다. 미세혈관 누출은 점막하 부종, 기도 저항의 증가를 초래하고 기도 과민성에도 관여한다. 염증 매개 물질로는 히스타민과 아라키돈산 대사산물(류코트리엔 및 트롬복산) 등이 있는데 시스테인 류코트리엔인 LTC4(Leukotriene C4) 및 LTD4(Leukotriene D4)는 가장 강력한 기관지 수축물질이다. 한편, 알레르기 반응에서의 T 세포 활성화가 기도 염증에 가장 중요한 역할을 하는데 CD4TH2 세포에서 생성되는 사이토카인은 염증 세포들의 증식과 분화 및 활성화를 촉진시키고, 염증 세포들의 기도로의 이동 및 세포 수명을 연장시키는 역할을 한다( Higgins, G. Inpharma, 1077, pp9-10, 1997).

천식을 원인에 따라 분류하면 크게 외인성, 내인성, 혼합형, 아스피린 유발성, 운동 유발성, 직업성 천식으로 분류할 수 있다. 외인성 천식은 원인항원에 노출되었을 때 증상이 나타나는데 원인 항원에 대한 피부시험이나 기관지 유발시험이 양성 반응을 보이며 발병 연령이 젊다. 집먼지 진드기가 가장 많은 원인 항원이며, 그밖에 꽃가루, 동물의 상피, 곰팡이 등이 원인항원으로 작용한다. 내인성 천식은 상기도 감염, 운동, 정서불안, 한랭 기후 및 습도의 변화 등에 의해 유발되거나 악 화되고, 성인형 천식에서 흔히 볼 수 있다. 혼합형 천식은 외인성 및 내인성 요인이 혼합되어 유발되는데 소아형 천식에 많다. 아스피린 유발성 천식은 아스피린에 대한 특이체질 반응으로서, 기관지천식, 비용종(鼻茸腫), 아스피린 불내성(不耐性)의 3대 증상이 있는 경우를 말한다. 운동 유발성 천식은 운동으로 인한 과호흡, 이에 따른 기도의 열 또는 수분의 손실이 발병에 관여한다. 직업성 천식은 작업장에서 흡입되는 물질에 의해 발생하는데 초기에는 증상 없이 지내다가 수개월 혹은 수년 후에 천식 증상이 나타나며 주말이나 휴가 시엔 완화되고 직장에 복귀하면 악화되는 경향이 있다.

천식발작은 천명, 기침, 호흡곤란 등이 갑자기 나타나는 경우 및 점진적으로 발병하는 경우가 있는데 대부분 처음에 기침, 가슴 부위의 답답함이나 압박감 등을 느끼게 되고 천명음이 들리기도 한다. 급성 발작 동안에는 다양한 호흡곤란 증세를 나타내게 되며 빠른 호흡과 빠른 맥박을 호소한다. 흉부 진찰시에 흡기와 대부분의 호기 동안에 고조의 천명음이 들리고 호기의 연장을 관찰할 수 있다. 천식발작이 더 심해지면 피로와 심한 호흡곤란으로 인해 빠르고 얕은 호흡 양상을 보이고 더욱 심해지면 청색증이 나타나게 된다. 환자가 의식 혼탁과 무력감을 보이면 CO₂ 혼수에 의한 호흡부전증으로 진행되는 것을 의미하는데 이 경우, 심한 점액 폐색(plugging)으로 인해서 천명음이 거의 들리지 않게 되고 탈진에 의해 가스 교환이 더 악화된다. 중증 발작의 가장 확실한 징후들로는 안정시에도 호흡이 곤란하고 대화를 할 수 없으며 청색증, 기이맥(>20-30 mmHg) 및 무호흡근의 사용 등이 있다. 중증도는 동맥혈 가스 측정을 통해서 가장 정확하게 평가할 수 있다.(천식연구회·한국보건사회연구원, 『대한내과학회지』, 60, pp196-205, 2001)

지금까지 개발된 천식 치료제로는 상시 복용하는 예방용 약물 및 돌연 발생한 천식 증상을 신속하게 완화시키는 약물이 있다. 전자에는 비클로메타손(beclomethasone), 버드노시드(budenoside), 플루니솔리드(flunisolide), 플루티카손(fluticasone), 트리암시놀론(triamcinolone) 등의 흡입용 코르티코스테로이드(corticosteroid), 메티프레드니솔론(methyprednisolone), 프레드니솔론(prednisolone), 프레드니손(prednisone) 등의 경구용 코르티코스테로이드(corticosteroid), 살메테롤(salmeterol) 등의 지효성 베타-아고니스트(beta-agonist), 네도크로밀(nedocromil), 소듐 크로모글리케이트(sodium cromoglycate) 등의 마스터셀 안정제(mast-cell stabilizer), 티오필린(theophylline) 등의 메틸크산틴(methylxanthines) 및 자피르루카스트(zafirlukast), 질루톤(zileuton) 등의 류코트리엔 길항제(leukotriene antagonist)가 있고 증상을 신속하게 완화해주는 약물에는 살부타몰(salbutamol), 비톨테롤(bitolterol), 피르부테롤(·pirbuterol), 테르부탈린(terbutaline) 등의 속효성 흡입용 베타-길항제(beta-antagonist), 이프라트로피움 브로마이드(ipratropium bromide) 등의 항콜린제 및 메틸프리드니솔론(methylprednisolone), 프리드니솔론(prednisolone), 프리드니손(prednisone) 등의 경구용 코르티코스테로이드(corticosteroid)가 있다(NAEPP(National Asthma Education and Prevention Program), guideline, 1997).

상기한 약물 중, LT(류코트리엔(Leukotrienes)) 길항제(antagonist)는 LT의 합성이나 작용을 저해하는 약물으로써, 크게 시스테이닐-LT 길항제(cysteinyl-LT antagonist), 5-리폭시게나제 저해제(5-lipoxygenase inhibitor), 5-리폭시게나제 활성 단백질 저해제(5-lipoxygenase activating protein inhibitor), LTB₄ 길항제 (antagonist)로 분류할 수 있다. 리폭시제나아제(Lipoxygenase)는 일종의 디옥시제나아제(Dioxygenase)인데 산소가 공격하는 이중결합 위치(5,11,15번)에 따라 분류된다. 류코트리엔(Leukotriene)은 5-리폭시제나아제(5-Lioxygenase)의 분해산물로 염증시 중요한 역할을 한다. 5-리폭시제나아제는 아라키돈산(Arachidoic acid)을 5-HPETE로 바꾸고, 이를 다시 류코트리엔(Leukotriene) A₄로 바꾼다. 이것으로부터 다시 LTB₄, LTC₄가 생성되고 LTC₄의 글루탐산(glutamic acid)과 글리신(glycine) 잔기가 디펩티다아제(dipeptidase)에 의해 잘려지며 LTD₄ 및 LTE₄ 가 생성된다. HETE와 LTB₄는 호중구(neutrophil)과 에오시노필(eosinophil)의 작용에 관여하여 케모시스(Chemoxis)를 중계한다. 이는 아데닐릴 사이클라아제(adenylyl cyclase)를 자극하고 PMN을 유도하며 리소조말 하이드로라이틱 효소(lysosomal hydrolytic enzyme)를 활성화한다. LTC₄와 LTD₄는 평활근을 수축하고 폐기도를 수축하며 기관지, 장의 근육을 수축한다. 또한 모세혈관의 투과도를 증가시켜 부종을 일으키기도 한다. LTB4는 면역억제적이다. 이는 CD4⁺ 세포를 억제하고 CD8⁺세포를 증식시킨다. 또한 Neutrophil-endothelial cell의 부착을 촉진하여 알레르기(Allergy), 감염(Inflammation), 인슐린(Insulin)의 분비, 세포의 이동(Cell movement), 세포성장 (Cell growth), Ca2⁺의 흐름(fluxes)에 관여한다. LTC4와 LTD4는 히스타민(histamine)보다 더 강력한 알레르기 유발물질이다(Fabien, J. et al, Expert Opinion. Ther. Patents 13(1), pp1-13. 2003).

본 발명자들은 상기한 LT 길항제 중에서, 5-리폭시제나아제 저해제로 시판되고 있는 대표적 약물인 질루톤(Zileuton) 및 일본에서 개발중인 E-6080 (Eisai)의 구조를 모델로 벤즈옥사졸(Benzoxazole), 벤조 티아졸 (Benzothiazol), 피리디노옥사졸(pyridinoxazole) 및 피리디노 티아졸(pyridinoxazole) 유도체를 기본으로 다양한 치환기를 도입함으로서, 5-리폭시제나아제에 대하여 강력한 활성을 나타내는 유도체를 합성 및 개발하고자 연구를 계속 진행하여 왔다.

본 발명자는 본 발명자들에 의하여 새롭게 제조된 신규 벤즈옥사졸 아미드 유도체 화합물들이 5-리폭시제나아제 효소에 대하여 강력한 저해활성을 나타내므로 본 발명의 화합물들이 천식 치료제로서 개발가능성이 높음을 확인하고 본 발명을 완성하게 되었다.

본 발명의 목적은 5-리폭시게나제 효소에 대하여 강력한 저해활성을 나타내는 벤즈옥사졸 아미드 유도체 화합물, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 천식 예방 및 치료를 위한 조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 천식 치료 및 예방에 유용한, 하기 일반식 (Ⅰ)의 구조를 가진 벤즈옥사졸 아미드 유도체 화합물, 이의 약리학적으로 허용가능한 염 및 그 이성체를 제공한다:

(Ⅰ)

상기 식에서,

R₁ 은 각각 독립적으로, 수소원자, 할로겐 원자, 니트로기, 아민기, 카르복실산, 저급알킬에스테르, 할로알킬기, C₁ - C₆ 저급알킬기, 또는 C₁ - C₆ 저급알콕시기군으로부터 선택된 하나 이상의 치환기이며,

P는 수소원자, 할로겐 원자, 니트로기, 쇄상 또는 가지상 C₁ - C₆ 저급알킬기, 또는 C₁ - C₆ 저급알콕시, 또는 R'로 치환되거나 비치환된 페닐기, 페닐저급알킬 또는 페닐저급알킬렌기이며,

R' 는 할로겐 원자, 할로알킬기, 아민기 또는 C₁ - C₆ 저급알킬기이다.

상기 일반식 (Ⅰ)에 속하는 화합물군 중에 바람직하기로는 R₁ 은 각각 독립적으로, 수소원자, 할로겐 원자, 니트로기, 아민기, 카르복실산, 할로알킬기, C₁-C₃저급알킬기, 또는 C₁-C₃ 저급알콕시기군인 화합물군; P는 쇄상 또는 가지상 C₁-C₃ 저급알킬기, 또는 C₁-C₃ 저급알콕시기, 또는 할로겐 원자, 할로알킬기, 또는 C₁-C₃ 저급알킬기로 치환되거나 비치환된 페닐기, 또는 페닐저급알킬렌기인 화합물군들을 들 수 있다.

상기 일반식 (Ⅰ) 중에서 특히 바람직한 일군의 화합물들은, 다음과 같은 화합물 및 약제학적으로 허용가능한 이들의 염을 포함한다:

N-(벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체(D1), N-(5-클로로-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체(D2), N-(5-니트로-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체(D3), N-(5-메톡시-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체(D4), N-(5-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체(D5), N-(6-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체(D6), N-(4-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체(D7), 2-벤조일 아미노벤즈옥사졸-5-카르복실산 (D8), N-(5-트리풀루오로메틸-벤조[d]옥사졸-2-일-벤즈아미드 (D9), N-(벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드(E1), N-(5-클로로-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 (E2), N-(5-클로로-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 (E3), N-(5-메톡시-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 (E4), N-(5-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 (E5), N-(6-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 (E6), N-(4-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 (E7), 2-(2-이소부틸아미노-옥사졸-4-일리 덴 메틸)-아크릴산 (E8), N-(5-트리풀루오로메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 (E9), N-(5-클로로-벤조[d]옥사졸-2-일)-3, 5-비스 (트리풀루오로메틸)벤즈아미드 (F1), 3,5-비스-(트리풀루오로메틸)-N-(5-메틸벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드 (F2), 3,5-비스-(트리풀루오로메틸)-N-(4-메틸벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드 (F3), 3,5-비스-(트리풀루오로메틸)-N-(6-메틸벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드 (F4), 3,5-비스-(트리풀루오로메틸)-N-(5-메톡시벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드 (F5), (E)-N-(5-클로로벤조[d]옥사졸-2-일)-3-(4-클로로페닐) 아크릴아미드 (G1), (E)-3-(4-클로로페닐)-N-(4-메틸벤조[d]옥사졸-2-일) 아크릴아미드 (G2), (E)-3-(4-클로로페닐)-N-(5-메틸벤조[d]옥사졸-2-일) 아크릴아미드 (G3), (E)-3-(4-클로로페닐)-N-(6-메틸벤조[d]옥사졸-2-일) 아크릴아미드 (G4), (E)-3-(4-클로로페닐)-N-(5-메톡시벤조[d]옥사졸-2-일) 아크릴아미드 (G5), N-(5-클로로벤조[d]옥사졸-2-일) 아세타미드(H1), N-(5-메틸벤조[d]옥사졸-2-일) 아세타미드 (H2), N-(5-클로로벤조[d]옥사졸-2-일) 프로피온아미드 (I1), N-(5-클로로벤조[d]옥사졸-2-일) 프로피온아미드 (I2).

상기 일반식 (Ⅰ)으로 표시되는 본 발명의 화합물들은 당해 기술분야에서 통상적인 방법에 따라 약학적으로 허용가능한 염 및 용매화물로 제조될 수 있다.

염으로는 약학적으로 허용가능한 유리산(free acid)에 의해 형성된 산부가염이 유용하다. 산 부가염은 통상의 방법, 예를 들면 화합물을 과량의 산 수용액에 용해시키고, 이 염을 수혼화성 유기 용매, 예를 들면 메탄올, 에탄올, 아세톤 또는 아세 토니트릴을 사용하여 침전시켜서 제조한다. 동몰량의 화합물 및 물 중의 산 또는 알코올 (예, 글리콜 모노메틸에테르)을 가열하고 이어서 상기 혼합물을 증발시켜서 건조시키거나, 또는 석출된 염을 흡인 여과시킬 수 있다.

이 때, 유리산으로는 유기산과 무기산을 사용할 수 있으며, 무기산으로는 염산, 인산, 황산, 질산, 주석산 등을 사용할 수 있고 유기산으로는 메탄술폰산, p-톨루엔술폰산, 아세트산, 트리플루오로아세트산, 시트르산, 말레인산(maleic acid), 숙신산, 옥살산, 벤조산, 타르타르산, 푸마르산, 만데르산, 프로피온산(propionic acid), 구연산(citric acid), 젖산 (lactic acid), 글리콜산(glycollic acid), 글루콘산(gluconic acid), 갈락투론산, 글루탐산, 글루타르산(glutaric acid), 글루쿠론산(glucuronic acid), 아스파르트산, 아스코르브산, 카본산, 바닐릭산, 히드로 아이오딕산 등을 사용할 수 있다.

또한, 염기를 사용하여 약학적으로 허용가능한 금속염을 만들 수 있다. 알칼리 금속 또는 알칼리토 금속염은, 예를 들면 화합물을 과량의 알칼리 금속 수산화물 또는 알칼리토 금속 수산화물 용액 중에 용해하고, 비용해 화합물염을 여과한 후 여액을 증발, 건조시켜 얻는다. 이때, 금속염으로서는 특히 나트륨, 칼륨 또는 칼슘염을 제조하는 것이 제약상 적합하며, 또한 이에 대응하는 은염은 알칼리 금속 또는 알칼리토 금속염을 적당한 은염 (예, 질산은)과 반응시켜 얻는다.

상기의 일반식 (Ⅰ)의 약학적으로 허용가능한 염은, 달리 지시되지 않는 한, 일반식 (Ⅰ)의 화합물에 존재할 수 있는 산성 또는 염기성기의 염을 포함한다. 예를 들면, 약학적으로 허용가능한 염으로는 히드록시기의 나트륨, 칼슘 및 칼륨 염 이 포함되며, 아미노기의 기타 약학적으로 허용가능한 염으로는 히드로브로마이드, 황산염, 수소 황산염, 인산염, 수소 인산염, 이수소 인산염, 아세테이트, 숙시네이트, 시트레이트, 타르트레이트, 락테이트, 만델레이트, 메탄설포네이트(메실레이트) 및 p-톨루엔설포네이트(토실레이트) 염이 있으며, 당업계에서 알려진 염의 제조방법이나 제조과정을 통하여 제조될 수 있다.

또한, 상기의 일반식 (Ⅰ)의 화합물은 비대칭 중심을 가지므로 하나 이상의 부제탄소 (*표시)를 갖고 있어 다양한 상이한 거울상 이성질체 형태로 존재할 수 있으며, 일반식 (Ⅰ)의 화합물의 모든 기하 이성체, 입체 이성질체, 광학 이성질체 및 R 또는 S형 입체 이성질체, 라세믹체 및 이들의 혼합물도 본 발명의 범주내에 포함되는 것으로 한다. 본 발명은 라세미체, 하나 이상의 거울상 이성질체 형태, 하나 이상의 부분 입체 이성질체 형태 또는 이들의 혼합물의 용도를 포함하며, 이러한 이성질체의 제조(예를 들어, 비대칭적 합성법) 및 분리는(예를 들어, 분별결정 및 크로마토그래피법) 당업계에서 공지된 방법, 또는 본원에 교시된 방법 즉, 공지된 방법을 공지의 방식으로 채택함으로써 용이하게 수행될 수 있다.

본 발명의 다른 목적은 상기 일반식 (Ⅰ) 화합물의 제조방법을 제공하는 것으로, 하기의 반응식들에 도시된 방법에 의해 화학적으로 합성될 수 있지만, 이들 예로만 한정되는 것은 아니다.

하기의 반응식들은 본 발명의 대표적인 화합물들의 제조방법을 제조 단계별로 나타내는 것으로 본 발명의 여러 화합물들은 반응식 1 내지 2의 합성과정에서 사용되는 시약, 용매 및 반응 순서를 바꾸는 등의 작은 변경으로 제조될 수 있다. 본 발명의 몇몇 화합물들은 반응식 1 내지 2의 범주에 포함되지 않는 과정에 따라 합성되었으며, 이러한 화합물들에 대한 상세한 합성 과정은 이들 각각의 실시예에 설명되어 있다.

상기 반응식 1에 도시된 바와 같이, P로 치환된 아민체(2a)에 이황화탄소(CS2), 요오드메탄(MeI), 및 고체상태의 수소화나트륨(NaH) 혼합물을 O ℃ 내지 실온에서 아르곤 가스하에서 서서히 반응시켜 N-(비스-메틸설파닐메틸렌)아미드 유도체 화합물(2b)을 제조하는 제 1단계;

상기 반응식 2에 도시된 바와 같이, 아미노페놀체 (1b)를 반응식 1에서 얻은 N-(비스-메틸설파닐메틸렌)아미드 유도체 화합물(2b)을 불활성 유기용매하에서 환류반응시켜 다양한 치환기를 갖는 일반식 (I)의 본 발명의 벤즈옥사졸 아미드 유도체 화합물들을 제조할 수 있다.

따라서 본 발명에서는 상기 일반식 (Ⅰ)의 벤즈옥사졸 아미드 유도체 화합물을 제조하는 방법을 제공한다.

상기 제조방법으로 얻어진 일반식 (I) 화합물들은 리폭시게나제효소에 대한 억제활성을 실험한 시험관내 시험 및 BALB/c 마우스를 이용한 천식에 대한 억제활성을 실험한 동물실험들을 통하여 강력한 천식억제활성을 나타냄을 확인하여 천식질환을 치료 또는 예방할 수 있는 치료제로서 유용하다.

따라서, 본 발명은 일반식 (I)의 벤즈옥사졸 아미드 유도체 화합물을 유효성분으로 포함하는 천식 치료 및 예방을 위한 약학 조성물을 제공한다.

본 발명의 화합물을 포함하는 조성물은 통상의 방법에 따른 적절한 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함할 수 있다.

본 발명의 조성물에 포함될 수 있는 담체, 부형제 및 희석제로는 락토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메 틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.

본 발명의 화합물을 포함하는 조성물은, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.

상세하게는, 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose), 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는 데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜 (propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.

본 발명의 화합물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 그러나, 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 화합물은 0.0001 ~ 100mg/kg으로, 바람직하게는 0.001 ~ 100mg/kg의 양을 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다. 조성물에서 본 발명의 화합물은 전체 조성물 총 중량에 대하여 0.0001 ~ 10 중량%, 바람직하게는 0.001 ~ 1 중량%의 양으로 존재하여야 한다.

또한, 본 발명의 화합물의 약학적 투여 형태는 이들의 약학적 허용가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 타 약학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다.

본 발명의 약학 조성물은 쥐, 마우스, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하, 자궁내 경막 또는 뇌혈관내 (intracerebroventricular) 주사에 의해 투여될 수 있다.

이하, 본 발명을 하기 실시예에 의거하여 좀더 상세하게 설명하고자 한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 이들 만으로 제한되는 것은 아니다.

참고예 1. 실험 준비 및 기기

1-1. 분석기기

본 실험에서 얻은 생성물의 구조 확인을 위해 사용된 기기는 하기와 같다. 핵자기 공명 스펙트럼 (1H NMR, 13C NMR) 은 300 MHz 또는 400MHz 를, 용매는 CDCl₃, DMSO-d₆를 사용하였다. 짝지음(Coupling) 상수 ( J )는 Hz 로 표시하였다. 질량(Mass) 스펙트럼은 m/z 형태로 표시하였다.

1-2. TLC 및 관 크로마토그래피

TLC (Thin layer chromatography)는 E. Merck 사 제품인 실리카겔(Merck F254)을 사용하였으며 관크로마토그래피(Column chromatography)를 위해서는 실리카(Merck EM9385, 230-400 mesh)를 사용하였다. 또한, TLC 상에서 분리된 물질을 확인하기 위해서 UV 램프(= 254 nm)를 이용하거나 아니스알데히드(Anisaldehyde), 과망간산칼륨(KMnO₄) 발색 시약에 담근 후, 플레이트를 가열하여 확인하였다.

1-3. 사용 시약

본 실험에서 사용된 시약은 시그마-알드리치(Sigma-Aldrich), 란캐스터(Lancaster), 플루카(Fluka) 제품을 구입하여 사용하였으며, 반응에 사용된 용매는 시그마-알드리치(Sigma-Aldrich), 머크(Merck), 준세이 화학(Junsei Chemical Co.) 제품의 1급 시약을 정제 없이 사용하였다. 용매에 사용한 THF 는 아르곤 기류에서 Na 금속과 벤조페논(Benzophenone)을 넣고 가열환류하여 청색으로 되었을 때 사용하였다. 또한, 디클로로메탄(CH₂Cl₂) 은 아르곤 기류에서 CaH₂를 넣고 가열환류하여 사용하였다. 에틸아세테이트와 헥산은 아르곤 기류에서 가열환류하여 정제하여 사용하였다.

실시예 1. N-( 벤조[d]옥사졸 -2-일)- 벤즈아미드체(D1) 합성.

1-1. N-( 비스 - 메틸술파닐 -메틸렌)- 벤즈아미드의 제조(d)

질소 기체로 치환된 둥근플라스크(round flask)에 들어있는 벤즈아미드(Benzamide)(2.00 g, 16.51 mmol)을 DMF (66 ml) 에 녹인 후, 0 ℃에서 카본 디술피드(Carbon disulfide)(4 ml, 66.04mmol), 요오도메탄(Iodomethane)(3.3 ml, 52.83 mmol), 소듐 히드리드(Sodium hydride) 60% (1.32 g, 33.02 mmol)을 순서대로 첨가하여 실온에서 5 시간 동안 교반하였다. 냉수로 반응을 종료시키고 EtOAc로 추출하였다. 유기층은 무수 MgSO4로 건조한 뒤 여과하여 감압농축하였으며, 관크로마토그래피 (EtOAc : n-Hexane = 1 : 7)로 분리하여 황색분말상의 N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-벤즈아미드(d) 화합물을 41 %의 수율(1.52 g)로 얻었다.

1H NMR (300 MHz, CDCl₃) : 8.13(d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.65(t, J = 6.6 Hz, 1H), 7.55(t, J = 6.6 Hz, 2H), 2.47(s, 6H), 1.19(s, 3H), 1.17(s, 3H)

1-2. N-( 벤조[d]옥사졸 -2-일)- 벤즈아미드체(D1) 합성

상기 단계에서 수득한 N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-벤즈아미드 화합물(100mg, 0.44mM)와 2-아미노페놀(48mg, 0.44mM)을 DMF(0.25M)에 넣고 실온에서 강하게 교반시킨 후 혼합물을 환류하에 가열하여 5시간 동안 교반시켰다. 반응이 종료된 후 실온으로 식힌 후 DMF를 감압하 제거하고 냉 MeOH 또는 디에틸에테르로 세 척하여 하기 물성치를 갖는 N-((벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체 (D1, 80mg, 76%)를 얻었다.

연황색(pale yellow)

mp: 190.3-192.1 ℃

1H NMR (Acetone-d₆, 400MHz) δ7.30~7.37(m. 2H), 7.51~7.63(m, 5H), 8.20(d, 2H J=7.2Hz)

FAB-HRMS (m/z): 239.0817 (M++1, C₁₄H₁₁N₂O₂ requires 239.0821)

실시예 2. N-(5-클로로-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체(D2) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-벤즈아미드 화합물(100mg, 0.44mM)와 2-아미노-4-클로로페놀 (64mg, 0.44mmol)을 상기 실시예 1에 기재된 제조공정과 유사한 방법으로 실험하여 N-(5-클로로-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체(D2) (85mg, 31%)을 얻었다.

연갈색(Pale brown),

mp; 214.6~218.3 ℃,

1H NMR (Acetone-d₆, 400MHz) δ7.32 (dd, 1H J= 8.4 and 2.4Hz), 7.55(m, 2H), 7.66(m, 1H), 7.68(d, 1H, J=8.4Hz), 8.02~8.03(m, 2H) 8.30(d, 1H, J=2.4Hz),

FABHRMS (m/z): 273.0431(M++1, C₁₄H₁₀C_lN₂O₂ requires 273.0431)

실시예 3. N-(5-니트로-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체(D3) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-벤즈아미드 화합물(100mg, 0.44mM)와 2-아미노-4-니트로페놀 (54.6mg, 0.44mmol)을 상기 실시예 1에 기재된 제조공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 N-(5-니트로-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체 D3 (82mg, 29%)을 얻었다.

연황색(Pale yellow),

mp: 204.9~207.1℃,

1H NMR (DMSO, 400MHz) δ7.55~ 7.59(m, 2H) 7.65~7.69(m, 1H), 7.92(d, 1H, J=9.2Hz), 8.04~8.06(m, 2H), 8.24(dd, 1H, J=9.2 and 2.0Hz), 8.46(d, 1H J=2.0Hz),

FABHRMS (m/z): 284.0675(M++1, C₁₄H₁₀N₃O₄ requires 284.0671)

실시예 4. N-(5-메톡시-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체(D4) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-벤즈아미드 화합물(100mg, 0.44mM)와 2-아미노-4-메톡시페놀 (62mg, 0.44mmol)을 상기 실시예 1에 기재된 제조공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 N-(5-메톡시-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체 D4 (53mg, 45%)을 얻었다.

연갈색(Pale brown),

mp: 162.4~166.2℃,

1H NMR (Acetone-d₆, 400MHz) δ3.85(s, 3H), 6.88(dd, 1H J=8.8 and 2.4Hz), 7.14(d, 1H, J=2.4Hz) 7.44(d, 1H, J=8.8Hz), 7.50~7.54(m, 2H), 7.60(m, 1H), 8.18~8.20(m, 2H),

FABHRMS (m/z): 269.0929(M++1, C₁₅H₁₃N₂O₃requires 269.0926)

실시예 5. N-(5-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체(D5) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-벤즈아미드 화합물(100mg, 0.44mM)와 2-아미노-4-메틸페놀 (68mg, 0.44mmol)을 상기 실시예 1에 기재된 제조공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 N-(5-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체 D5 (66mg, 59%)을 얻었다.

백색 분말(White powder),

mp: 158.2~161.8℃,

1H NMR (DMSO, 400MHz) δ2.45(s, 1H), 6.86(br d, 1H, J=8.4Hz), 7.23(d, 1H, J=8.4Hz), 7.44~7.52(m, 2H), 7.50(m, 1H), 8.31(m, 1H),

FABHRMS (m/z): 253.0976(M++1, C₁₅H₁₃N₂O₂requires 253.0977)

실시예 6. N-(6-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체(D6) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-벤즈아미드 화합물(100mg, 0.44mM)와 2-아미노-5-메틸페놀 (68mg, 0.44mmol)을 상기 실시예 1에 기재된 제조공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 N-(6-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체 D6 (90mg, 80%)를 얻었다.

백색분말(White powder)

mp: 204.2~206.0℃,

1H NMR (DMSO, 400MHz) δ2.41(s, 3H), 7.10(brd, 1H, J=8.0Hz), 7.40~7.42(m, 2H), 7.49~7.52(m, 2H), 7.59(m, 1H), 8.04~8.06(m, 2H),

FABHRMS (m/z): 253.0976(M++1, C₁₅H₁₃N₂O₂ requires 253.0977)

실시예 7. N-(4-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체(D7) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-벤즈아미드 화합물(100mg, 0.44mM)와 2-아미노-3-메틸페놀 (68mg, 0.44mmol)을 상기 실시예 1에 기재된 제조 공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 N-(4-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체 D7 (31mg, 28%)을 얻었다.

황색분말(Yellow powder),

mp: 141.6~142.2℃,

1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ2.47(s, 3H), 7.04(brd, 1H, J=7.6Hz), 7.10(t, 1H, J=7.6Hz), 7.24(brd, 1H, J=7.6Hz) 7.43~ 7.47(m, 2H), 7.55(m, 1H), 7.93(m, 2H),

FABHRMS (m/z): 253.0983(M++1, C₁₅H₁₃N₂O₂ requires 253.0977)

실시예 8. 2-벤조일 아미노벤즈옥사졸-5-카르복실산 (D8) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-벤즈아미드 화합물(100mg, 0.44mM)와 2-아미노-4-히드록시벤조산 (68mg, 0.44mmol)을 상기 실시예 1에 기재된 제조 공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 2-벤조일 아미노벤즈옥사졸-5-카르복실산 D8 (102mg, 81%)을 얻었다.

백색분말(White powder)

mp: >280℃,

1H NMR (DMSO, 400MHz) δ7.54~7.57(m, 2H), 7.65(m, 1H), 7.74(d, 1H, J=8.4Hz), 7.94(dd, 1H, J=8.4 and 1.6Hz), 8.05~8.07(m, 2H), 8.11(d, 1H, 1.6Hz),

FABHRMS (m/z): 283.0716 (M++1, C₁₅H₁₁N₂O₄ requires 283.0719)

실시예 9. N-(5-트리풀루오로메틸-벤조[d]옥사졸-2-일-벤즈아미드 (D9) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-벤즈아미드 화합물(100mg, 0.44mM)와 2-아미노-4-트리풀루오로메틸페놀 (79mg, 0.44mmol)을 상기 실시예 1에 기재된 제조 공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 N-(5-트리풀루오로메틸-벤조[d]옥사졸-2-일-벤즈아미드 D9 (74mg, 54%)을 얻었다.

연갈색분말(Pale brown powder),

mp; 182.6~183.9℃,

1H NMR (CD₃OD, 400MHz)δ7.42~7.46(m, 2H), 7.50~7.57(m, 2H), 7.59(d, 1H, J=8.4Hz) 7.77 (brs, 1H), 7.91~7.93(m, 2H),

FABHRMS (m/z): 307.0691(M++1, C₁₅H₁₀F₃N₂O₂ requires 307.0694)

실시예 10. N-( 벤조[d]옥사졸 -2-일)- 이소부티르아미드(E1) 합성.

10-1. N-( 비스 - 메틸술파닐 -메틸렌)- 이소부틸아미드의 제조(e)

질소 기체로 치환된 라운드 플라스크에 들어 있는 이소부틸아미드(Isobutyramide) (1.00 g, 11.47 mmol)을 DMF(46 ml)에 녹이고 0℃에서 카본 디술 피드(Carbon disulfide)(2.8 ml, 45.91 mmol), 요오도메탄(Iodomethane)(2.2 ml, 36.73 mmol), 소듐 히브리드(Sodium hydride) 60% (0.92 g, 22.96 mmol)을 순서대로 첨가하여 실온에서 5 시간 동안 교반하였다. DW 로 반응을 종료시키고 EtOAc 로 추출하였다. 유기층은 무수 MgSO₄ 로 건조한 뒤 여과하여 감압 농축하였으며, 관크로마토그래피 (EtOAc : n-Hexane = 1 : 7)로 분리하여 하기 물성치를 갖는 N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-이소부티르아미드(e) 화합물을 64 %의 수율(1.41 g)로 얻었다.

황색분말(Yellow powder),

1H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ1.17(s, 3H), 1.19(s, 3H), 2.47(s, 6H), 2.71-2.62(m, 1H)

10-2. N-( 벤조[d]옥사졸 -2-일)- 이소부틸아미드 ( E1 )의 제조

상기 단계에서 수득한 N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-이소부티르아미드 화합물(100mg, 0.52mM)와 2-아미노페놀(57mg, 0.52mmol)을 DMF(0.25M)에 넣고 실온에서 강하게 교반시킨 후 혼합물을 환류하에 가열하여 5시간 동안 교반시켰다. 반응이 종료된 후 실온으로 식힌 후 DMF를 감압하에 제거하고 냉 MeOH 또는 디에틸에테르로 세척하여 하기 물성치를 갖는 N-(벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부틸아미드(E1) (54mg, 51%)을 얻었다.

황색분말(Yellow powder),

mp: 137.8~138.9℃,

1H NMR (CDCl₃ 400MHz) δ1.25(d, 6H, J=6.8Hz), 2.96(brs, 1H), 7.19(td, 1H J =7.6 and 1.2 Hz), 7.25 (td, 1H, J =7.6 and 1.2 Hz), 7.45(dd, 1H J =7.6 and 1.2 Hz), 7.48(dd, 1H J =7.6 and 1.2 Hz),

FABHRMS (m/z): 205.0978(M++1, C₁₁H₁₃N₂O₂requires 205.0977)

실시예 11. N-(5-클로로-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 (E2) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-이소부티르아미드 화합물(80mg, 0.42mM)과 2-아미노-4-클로로페놀 (60mg, 0.42mmol)을 상기 실시예 10에 기재된 제조 공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 N-(5-클로로-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 E2 (34mg, 34%)을 얻었다.

연갈색 분말(Pale brown powder),

mp: 177.7~180.8℃,

1H NMR (CD₃OD, 400MHz) δ1.32(d, 6H, J=6.4Hz), 2.75(q, 1H J=6.4Hz), 7.25(dd, 1H J=8.8 and 2.0Hz), 7.45(d, 1H, J=8.8Hz), 7.53(d, 1H, J=2.0Hz),

FABHRMS (m/z): 239.0586(M++1, C₁₁H₁₂CN₂O₂requires 239.0587)

실시예 12. N-(5- 클로로 - 벤조[d]옥사졸 -2-일)- 이소부티르아미드 ( E3 ) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-이소부티르아미드 화합물(80mg, 0.42mM)과 2-아미노-4-니트로페놀 (64mg, 0.42mmol)을 상기 실시예 10에 기재된 제조 공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 N-(5-클로로-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 E3 (47mg, 45%)을 얻었다.

황색 분말(Yellow powder),

mp: 212.4~216.1℃,

1H NMR (CD₃OD, 400MHz) δ1.24(d, 6H, J=6.8Hz), 2.76(q, 1H, J=6.8Hz), 7.66(d, 1H, J=9.2Hz), 8.22(dd, 1H, J=9.2 and 2.0Hz), 8.38(d, 1H, J=2.0Hz),

FABHRMS (m/z): 250.0822(M++1, C₁₁H₁₂N₃O₄ requires 250.0828)

실시예 13. N-(5-메톡시-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 (E4) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-이소부티르아미드 화합물(100mg, 0.52mM)과 2-아미노-4-메톡시페놀 (72.7mg, 0.52mM)을 상기 실시예 10에 기재된 제조 공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 N-(5-메톡시-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 E4 (39mg, 32%)을 얻었다.

연자주색분말(Pale pink powder),

mp: 129.4~131.4℃,

1H NMR (CD₃OD, 400MHz) δ1.13(d, 6H, J=6.8Hz), 2.67(q, 1H J=6.8Hz), 3.72(s, 3H), 6.75(dd, 1H, J=8.8 and 2.8Hz), 7.00(d, 1H, J=2.8Hz), 7.26(d, 1H, J=8.8Hz),

FABHRMS (m/z): 235.1082(M++1, C₁₂H₁₅N₂O₃ requires 235.1083)

실시예 14. N-(5-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 (E5) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-이소부티르아미드 화합물(100mg, 0.52mM)과 2-아미노-4-메틸페놀 (64mg, 0.52mmol)을 상기 실시예 10에 기재된 제조 공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 N-(5-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 E5 (71mg, 62%)을 얻었다.

백색분말(White powder),

mp: 156.5~159.8 ℃,

H NMR (CD₃Cl, 400MHz) δ1.30(d, 6H, J=6.8Hz), 2.44(s, 3H), 2.88(brs, 1H), 7.07(dd, 1H, J=8.4 and 1.6Hz), 7.26(d, 1H, J=1.6Hz), 7.35(d, 1H, J=8.4Hz),

FABHRMS (m/z): 219.1137(M++1, C₁₂H₁₅N₂O₂ requires 219.1134)

실시예 15. N-(6-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 (E6) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-이소부티르아미드 화합물(100mg, 0.52mM)과 2-아미노-6-메틸페놀 (64mg, 0.52mmol)을 상기 실시예 10에 기재된 제조 공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 N-(6-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 E6 (94mg, 83%)을 얻었다.

연황색분말(Pale yellow powder),

mp: 156.5~159.8℃,

1H NMR (CD₃OD, 400MHz) δ1.12(d, 6H, J=6.4Hz), 2.33(S, 3H), 2.63(q, 1H, J=6.4Hz), 7.01(d, 1H, J=7.6Hz) 7.18(s, 1H), 7.30(d, 1H, J=7.6Hz),

FABHRMS (m/z): 219.1130(M++1, C₁₂H₁₅N₂O₂ requires 219.1134)

실시예 16. N-(4-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 (E7) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-이소부티르아미드 화합물(100mg, 0.52mM)과 2-아미노-3-메틸페놀 (64mg, 0.52mmol)을 상기 실시예 10에 기재된 제조 공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 N-(4-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 E7 (30mg, 36%)을 얻었다.

황색분말(Yellow powder),

mp: 171.2~173.8 ℃,

1H NMR (CD3OD, 400MHz) δ1.14(d, 6H, J=6.8Hz), 2.43(s, 3H), 2.66(q, 1H J=6.8Hz), 7.00(d, 1H, J=8.0Hz), 7.06(t, 1H, J=8.0Hz), 7.18(d, 1H, J=8.0Hz),

FABHRMS (m/z): 219.1137(M++1, C₁₂H₁₅N₂O₂ requires 219.1134)

실시예 17. 2-(2-이소부틸아미노-옥사졸-4-일리덴 메틸)-아크릴산 (E8) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-이소부티르아미드 화합물(200mg, 1.04mM)과 2-아미노-4-히드록시-벤조산 (160mg, 1.04mmol)을 상기 실시예 10에 기재된 제조 공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 2-(2-이소부틸아미노-옥사졸-4-일리덴 메틸)-아크릴산 E8 (94mg, 36%)을 얻었다.

백색 분말(White powder),

mp: 253.9~255.0℃,

1H NMR (DMSO, 400MHz) δ1.13(d, 6H, J=6.8), 2.79(q, 1H, J=6.8Hz), 7.7(d, 1H, J=8.4Hz), 7.9(dd, 1H, J=8.4 and 1.6Hz), 8.0(d, 1H, J=1.6Hz), 11.75(brs, 1H),

FABHRMS (m/z): 249.0877 (M++1, C₁₂H₁₃N₂O₄ requires 249.0875)

실시예 18. N-(5-트리풀루오로메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 (E9) 합 성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-이소부티르아미드 화합물(200mg, 1.04mM)과 2-아미노-4-트리풀루오로페놀 (185mg, 1.04mmol)을 상기 실시예 10에 기재된 제조 공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 N-(5-트리풀루오로메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 E9 (156mg, 76%)을 얻었다.

연황색분말 (Pale yellow powder),

mp: 142.8~147.5 ℃,

1H NMR (CD₃OD, 400MHz) δ1.14(d, 6H, J=6.8Hz), 2.67(q, 1H, J=6.8Hz), 7.49(dd, 1H, J=8.4 and 0.8Hz), 7.66(d, 1H, J=8.4Hz), 7.74(d, 1H, J=0.8Hz),

FABHRMS (m/z): 273.0847(M++1, C₁₂H₁₂F₃N₂O₂ requires 273.0851)

실시예 19. N-(5-클로로-벤조[d]옥사졸-2-일)-3, 5-비스 (트리풀루오로메틸)벤즈아미드 (F1) 합성.

19-1. N-( 비스 - 메틸술파닐 -메틸렌)-3,5- 비스트리풀루오로메틸벤즈아미드의 제조(f)

질소 기체로 치환된 라운드 플라스크에 들어 있는 3,5-비스(트리풀루오로메틸) 벤즈아미드 (500mg, 1.94mmol)를 DMF(7.8ml) 에 녹인 뒤 0 ℃에서 이황화탄소 (0.47mM),요오도메탄(Iodomethane)(2.2 ml, 36.73 mmol), 소듐 히브리드(Sodium hydride) 60% (0.92 g, 22.96 mmol)을 순서대로 첨가하여 실온에서 5 시간 동안 교 반하였다. 빙수를 가한 후 EtOAc로 추출하였다. 유기층은 무수 MgSO4로 건조한 뒤 여과하여 감압 농축하였으며, 관크로마토그래피 (EtOAc: n-Hexane = 1: 7)로 분리하여 N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-3,5-비스트리풀루오로메틸벤즈아미드 화합물 f (225mg, 32%)를 얻었다.

백색분말(White powder),

1H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ1.26(6H), 8.03(s, 1H), 8.64(s, 2H)

19-2. N-(5- 클로로 - 벤조[d]옥사졸 -2-일)-3, 5- 비스 ( 트리풀루오로메틸 ) 벤즈아미드 (F1)의 제조

상기 단계에서 수득한 N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-3,5-비스트리풀루오로메틸벤즈아미드 화합물(100mg, 0.27mM)와 2-아미노페놀(57mg, 0.25mmol)을 DMF(0.25M)에 넣고 실온에서 강하게 교반시킨 후 혼합물을 환류하에 가열하여 5시간 동안 교반시켰다. 반응이 종료된 후 실온으로 식힌 후 DMF를 감압하에 제거하고 냉 MeOH 또는 디에틸에테르로 세척하여 하기 물성치를 갖는 N-(5-클로로-벤조[d]옥사졸-2-일)-3, 5-비스 (트리풀루오로메틸)벤즈아미드 (F1) (38mg, 34%)을 얻었다.

연황색분말(Pale yellow powder),

mp: 179.4~181.2 ℃,

1H NMR (Acetone-d₆, 400MHz) δ7.402(dd, 1H, J=2.4 and 8.8Hz), 7.614~7.637(m, 2H), 8.292(br s, 1H), 8.766(br s, 2H),

FABHRMS (m/z): 409.0188(M++1, C₁₆H₈F₆N₂O₂ requires 409.0178)

실시예 20. 3,5- 비스 -( 트리풀루오로메틸 )-N-(5- 메틸벤조[d]옥사졸 -2-일)- 벤즈아미드 (F2) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-3,5-비스트리풀루오로메틸벤즈아미드 화합물(100mg, 0.27mM)과 2-아미노-4-메틸페놀 (34.08mg, 0.27mmol)을 상기 실시예 19에 기재된 제조 공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 3,5-비스-(트리풀루오로메틸)-N-(5-메틸벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드 (F2)(52mg, 49%)을 얻었다.

연갈색분말(Pale brown powder),

mp: 178.6~181.7 ℃,

1H NMR (Acetone-d₆, 400MHz) δ2.455(s, 3H), 7.2115(d, 1H, J=8.4Hz), 7.441(br s, 1H), 7.467(d, 1H, J=8.4Hz), 8.257(br s, 1H), 8.777(br s, 1H),

FABHRMS (m/z): 389.0722(M++1, C₁₇H₁₁F₆N₂O₂ requires 389.0725)

실시예 21. 3,5-비스-(트리풀루오로메틸)-N-(4-메틸벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드 (F3) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-3,5-비스트리풀루오로메틸벤즈아미드 화합물(100mg, 0.27mM)과 2-아미노-3-메틸페놀 (34.08mg, 0.27mmol)을 상기 실시예 19에 기재된 제조 공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 3,5-비스-(트리풀루오로메틸)-N-(4-메틸벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드 (F3)(39mg, 36%)을 얻었다.

황색분말(Yellow powder),

mp: 188.3~189.7 ℃,

1H NMR (Acetone-d₆, 400MHz) δ2.578(s, 3H), 7.009(d, 1H, J=8Hz), 7.277(t, 1H, J=8Hz), 7.415(d, 1H, J=8Hz), 8.297(brs, 1H), 8.768(brs, 2H),

FABHRMS (m/z): 389.0720 (M++1, C₁₇H₁₁F₆N₂O₂ requires 389.0725)

실시예 22. 3,5-비스-(트리풀루오로메틸)-N-(6-메틸벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드 (F4) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-3,5-비스트리풀루오로메틸벤즈아미드 화합물(100mg, 0.27mM)과 2-아미노-5-메틸페놀 (34.08mg, 0.27mmol)을 상기 실시예 19에 기재된 제조 공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 3,5-비스-(트리풀루오로메틸)-N-(6-메틸벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드 (F4)(50mg, 47%)을 얻었다.

연갈색분말(Pale brown powder),

mp: 170.9~173.5 ℃,

1H NMR (Acetone-d₆, 400MHz) δ2.474(s, 3H), 7.227(d, 1H, J=8Hz), 7.425(brs, 1H), 7.497(d, 1H, J=8Hz), 8.249(brs, 1H), 8.780(brs, 2H)

실시예 23. 3,5-비스-(트리풀루오로메틸)-N-(5-메톡시벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드 (F5) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-3,5-비스트리풀루오로메틸벤즈아미드 화합물(100mg, 0.27mM)과 2-아미노-4-메톡시페놀 (38.51mg, 0.27mmol)을 상기 실시예 19에 기재된 제조 공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 3,5-비스-(트리풀루오로메틸)-N-(5-메톡시벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드 (F5)(53mg, 48%)을 얻었다.

갈색분말(Brown powder),

mp: 110.5~111.2℃,

1H NMR (Acetone-d₆, 400MHz) δ3.869 (s, 3H), 6.947(dd, 1H, J=2.8 and 8.8Hz), 7.199(d, 1H, J=2.8Hz), 7.498(d, 1H, J=8.8Hz), 8.245(m, 2H), 8.774(brs, 1H),

FABHRMS (m/z): 405.0670 (M++1, C₁₇H₁₁F₆N₂O₃ requires 405.0674)

실시예 24. (E)-N-(5-클로로벤조[d]옥사졸-2-일)-3-(4-클로로페닐) 아크릴아미드 (G1) 합성.

24-1. N-( 비스 - 메틸술파닐 -메틸렌)-4- 클로로신남아미드의 제조(g)

질소 기체로 치환된 둥근 플라스크에 들어있는 4-클로로신남아미드(500mg, 2.75mmol)를 DMF(11ml) 에 녹인 뒤 0 ℃에서 이황화탄소 (0.67ml, 11mmol), 요오도메탄(Iodomethane)(0.55ml, 8.8mmol), 소듐 히브리드(Sodium hydride) (220mg, 5.5mmol)을 순서대로 첨가하여 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 빙수를 가한 후 EtOAc로 추출하였다. 유기층은 무수 MgSO4로 건조한 뒤 여과하여 감압농축 하였으며, 관크로마토그래피 (EtOAc: n-Hexane = 1: 7)로 분리하여 N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-4-클로로신남아미드 화합물 g(207mg, 26%)를 얻었다.

백색분말(White powder),

1H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ1.50(s, 6H), 3.38(s, 1H) 6.63(d, J=15.2Hz, 1H), 7.41~7.45(m, 1H), 7.49~7.53(m, 2H), 7.79(d, J=15.2Hz, 1H)

24-2. (E)-N-(5- 클로로벤조[d]옥사졸 -2-일)-3-(4- 클로로페닐 ) 아크릴아미드 ( G1 )의 제조

상기 단계에서 수득한 N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-4-클로로신남아미드 화합물(100mg, 0.35mmol)와 2-아미노-4-클로로페놀 (50.23mg, 0.35mmol)을 DMF(0.25M) 에 넣고 실온에서 강하게 교반시킨 후 혼합물을 환류하에 가열하여 5시간 동안 교반시켰다. 반응이 종료된 후 실온으로 식힌 후 DMF를 감압하에 제거하고 냉 MeOH 또는 디에틸에테르로 세척하여 하기 물성치를 갖는 (E)-N-(5-클로로벤조[d]옥사졸-2-일)-3-(4-클로로페닐) 아크릴아미드 (G1) (17mg, 15%)을 얻었다.

연갈색분말(Pale brown powder),

mp: 237.7~240.8 ℃,

1H NMR (Acetone-d₆, 400MHz) δ7.2185(d, 1H,J=16Hz), 7.292~7.318(m, 1H), 7.495~7.516(m, 2H), 7.561~ 7.583(m, 2H), 7.724~7.745(m, 2H), 7.819(d, 1H, J=16Hz),

FABHRMS (m/z): 333.0193(M++1, C₁₆H₁₁Cl₂N₂O₂ requires 333.0198)

실시예 25. (E)-3-(4-클로로페닐)-N-(4-메틸벤조[d]옥사졸-2-일) 아크릴아미드 (G2) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-4-클로로신남아미드 (100mg, 0.35mmol)와 2-아미노-3-메틸페놀 (34.35mg, 0.28mmol)을 상기 실시예 24에 기재된 제조 공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 (E)-3-(4-클로로페닐)-N-(4-메틸벤조[d]옥사졸-2-일) 아크릴아미드 (G2) (14mg, 16%)을 얻었다.

진황색 분말(Dark yellow powder),

mp: 199.1~205.9 ℃,

1H NMR (Acetone-d₆, 400MHz) δ2.507(s, 3H), 7.136(d, 1H, J=7.6Hz), 7.178(t, 1H, J=7.6Hz), 7.264(d, 1H, J=15.6Hz), 7.355(d, 1H, J=7.6Hz), 7.499~7.520(m, 2H), 7.721~7.748(m, 2H), 7.813(d, 1H, J=15.6Hz),

FABHRMS (m/z): 313.0745(M++1, C₁₇H₁₄ClN₂O₂ requires 313.0744)

실시예 26. (E)-3-(4-클로로페닐)-N-(5-메틸벤조[d]옥사졸-2-일) 아크릴아미드 (G3) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-4-클로로신남아미드 (80mg, 0.28mmol)와 2-아미노-4-메틸페놀 (30.2mg, 0.25mmol)을 상기 실시예 24에 기재된 제조 공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 (E)-3-(4-클로로페닐)-N-(5-메틸벤조[d]옥사졸-2-일) 아크릴아미드 (G3) (13mg, 18%)을 얻었다.

갈색분말(Brown powder),

mp: 129.5~132.8 ℃,

1H NMR (Acetone-d₆, 400MHz) δ2.488(s, 3H), 6.686(d, 1H, J=8.4Hz), 6.738(s, 1H), 7.434(d, 1H, J=8.8Hz), 7.604(d, 1H, J=8.8Hz), 7.639~7.661(m, 2H), 7.718~7.738(m, 2H), 8.246(d, 1H, J=8.4Hz),

FABHRMS (m/z): 313.0743(M++1, C₁₇H₁₄ClN₂O₂ requires 313.0744)

실시예 27. (E)-3-(4-클로로페닐)-N-(6-메틸벤조[d]옥사졸-2-일) 아크릴아미드 (G4) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-4-클로로신남아미드 (70mg, 0.25mmol)와 2-아미노-5-메틸페놀 (32.3mg, 0.26mmol)을 상기 실시예 24에 기재된 제조 공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 (E)-3-(4-클로로페닐)-N-(6-메틸벤조[d]옥사졸-2-일) 아크릴아미드 (G4) (41mg, 49%)을 얻었다.

갈색분발(Brown powder),

mp: 167.8~175.8 ℃,

1H NMR (Acetone-d₆, 400MHz) δ3.846(s, 3H), 6.179(d, 1H, J=16Hz), 6.861(dd, 1H, J=2.4 and 8.8Hz), 7.105(d, 1H, J=2.Hz), 7.485~7.524(m, 2H), 7.600(d, 1H, J=8.8Hz), 7.719~7.740(m, 2H), 7.802(d, 1H, J=16Hz),

FABHRMS (m/z): 313.0742(M++1, C₁₇H₁₄ClN₂O₂ requires 313.0744)

실시예 28. (E)-3-(4-클로로페닐)-N-(5-메톡시벤조[d]옥사졸-2-일) 아크릴아미드 (G5) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-4-클로로신남아미드 (75mg, 0.26mmol)와 2-아미노-4-메톡시페놀 (26.7mg, 0.19mmol)을 상기 실시예 24에 기재된 제조 공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 (E)-3-(4-클로로페닐)-N-(5-메톡시벤조[d]옥사졸-2-일) 아크릴아미드 (G5) (51mg, 81%)을 얻었다.

갈색분말(Brown powder),

mp: 151.8~156.0 ℃,

1H NMR (Acetone-d₆, 400MHz) δ3.846(s, 3H), 6.718(d, 1H, J=15.6Hz), 6.860(dd, 1H, J=2.8 and 8.8Hz), 7.104(d, 1H, J=2.8Hz), 7.480~7.513(m, 2H), 7.600(d, J=8.8Hz), 7.717~7.739(m, 2H), 7.800(d, J=15.6Hz),

FABHRMS (m/z): 329.0697(M++1, C₁₇H₁₄ClN₂O₃ requires 329.0693)

실시예 29. N-(5- 클로로벤조[d]옥사졸 -2-일) 아세타미드 (H1) 합성.

29-1. N-( 비스 - 메틸술파닐 -메틸렌)- 아세타미드의 제조(h)

질소 기체로 치환된 둥근 플라스크에 들어있는 아세타미드 (500 mg, 8.46 mmol)를 DMF(33.9ml)에 녹인 뒤 0 ℃에서 이황화탄소 (2.0 ml, 33.8 mmol), 요오도메탄(Iodomethane)(1.7 ml, 27.1 mmol), 소듐 히브리드(Sodium hydride) (445 mg, 18.6 mmol)을 순서대로 첨가하여 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 빙수를 가한 후 EtOAc로 추출하였다. 유기층은 무수 MgSO₄로 건조한 뒤 여과하여 감압농축 하였으며, 관크로마토그래피 (EtOAc: n-Hexane = 1: 7)로 분리하여 N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-아세타미드 화합물 h (163mg, 25%)을 얻었다.

황색 오일상(Yellow oil),

1H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ2.23(s, 3H), 2.47(s, 6H)

29-2. N-(5-클로로벤조[d]옥사졸-2-일) 아세타미드(H1)의 제조

상기 단계에서 수득한 N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-아세타미드 화합물 (75mg, 0.46mmol)와 2-아미노-4-클로로페놀 (65.9mg, 0.46mmol)을 DMF(0.25M)에 넣고 실온에서 강하게 교반시킨 후 혼합물을 환류하에 가열하여 5시간 동안 교반시켰다. 반응이 종료된 후 실온으로 식힌 후 DMF를 감압하에 제거하고 냉 MeOH 또는 디에틸에테르로 세척하여 하기 물성치를 갖는 N-(5-클로로벤조[d]옥사졸-2-일) 아세타미드(H1)(14mg, 15%)을 얻었다.

연갈색분말(Pale brown powder),

mp: 209.7~208.3 ℃,

1H NMR (Acetone-d₆, 400MHz) δ2.521(s, 3H), 7.241(dd, 1H, J=2.0 and 8.4Hz, 1H), 7.394(d, J=8.4Hz, 1H), 7.590(d, J=2.0Hz, 1H),

FABHRMS (m/z): 211.0272 (M++1, C₉H₈N₂O₂ requires 211.0274)

실시예 30. N-(5-메틸벤조[d]옥사졸-2-일) 아세타미드 (H2) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-아세타미드 화합물 (75mg, 0.46mmol)와2-아미 노-4-메틸페놀 (75.4mg, 0.61mmol)을 상기 실시예 29에 기재된 제조 공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 N-(5-메틸벤조[d]옥사졸-2-일) 아세타미드 (H2) (30mg, 26%)을 얻었다.

갈색분말(Brown powder),

mp: 172.3~175.8 ℃,

FABHRMS (m/z): 211.0272 (M++1, C₉H₈N₂O₂ requires 211.0274)

실시예 31. N-(5-클로로벤조[d]옥사졸-2-일) 프로피온아미드 (I1) 합성.

31-1. N-( 비스 - 메틸술파닐 -메틸렌)- 프로피온아미드의 제조(i)

질소 기체로 치환된 둥근 플라스크에 들어있는 프로피온아미드 (1.0 g, 13.68 mmol)를 DMF(54.7ml)에 녹인 뒤 0 ℃에서 이황화탄소 (3.3 ml, 54.72 mmol), 요오도메탄(Iodomethane)(2.7 ml, 43.78 mmol), 소듐 히브리드(1.09 g, 27.36 mmol)을 순서대로 첨가하여 실온에서 5시간 동안 교반하였다. 빙수를 가한 후 EtOAc로 추출하였다. 유기층은 무수 MgSO4로 건조한 뒤 여과하여 감압농축 하였으며, 관크로마토그래피 (EtOAc: n-Hexane = 1: 7)로 분리하여 N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-프로피온아미드 화합물 i (850 mg, 35 %)를 얻었다.

황색 오일(Yellow oil),

1H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ1.16(s, 6H), 2.33(t, J=7.2Hz, 3H), 2.73(q, J=7.2Hz, 2H)

31-2. N-(5- 클로로벤조[d]옥사졸 -2-일) 아세타미드(I 1)의 제조

상기 단계에서 수득한 N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-프로피온아미드(75mg, 0.46mmol)와 2-아미노-4-클로로페놀 (65.9mg, 0.46mmol)을 DMF(0.25M)에 넣고 실온에서 강하게 교반시킨 후 혼합물을 환류하에 가열하여 5시간 동안 교반시켰다. 반응이 종료된 후 실온으로 식힌 후 DMF를 감압하에 제거하고 냉 MeOH 또는 디에틸에테르로 세척하여 하기 물성치를 갖는 N-(5-클로로벤조[d]옥사졸-2-일) 프로피온아미드 (I 1)(22mg, 14%)을 얻었다.

갈색분말(Brown powder),

mp: 184.0~190.1 ℃,

1H NMR (Acetone-d₆, 400MHz) δ1.173(t, J=7.2Hz, 3H), 2.436(q, J=7.2Hz, 2H), 7.274(dd, J=2.4 and 8.4Hz, 1H), 7.532(d, J=8.4Hz, 1H), 7.537(d, J=2.4Hz, 1H),

FABHRMS (m/z): 211.0272 (M++1, C₉H₈N₂O₂ requires 211.0274)

실시예 32. N-(5-클로로벤조[d]옥사졸-2-일) 프로피온아미드 (I2) 합성.

N-(비스-메틸술파닐-메틸렌)-프로피온아미드(75mg, 0.46mmol)와 N-(비스-메틸설파닐-메틸렌)-프로피온아미드 (75mg, 0.46mmol)와 2-아미노-4-클로로페놀 (65.9mg, 0.46mmol)을 상기 실시예 31에 기재된 제조 공정과 유사한 방법으로 실험하여 하기 물성치를 갖는 N-(5-클로로벤조[d]옥사졸-2-일) 프로피온아미드 (I2) (20mg, 12%)를 얻었다.

갈색 분말(Brown powder),

mp: 169.4~171.5 ℃,

1H NMR (Acetone-d₆, 400MHz) δ1.169(t, J=7.6Hz, 3H), 2.411(s, 3H), 2.699(q, J=7.6Hz, 2H), 7.071(dd, J=2.0 and 8.4Hz, 1H), 7.321(d, J=2.0Hz, 1H), 7.336(d, J=8.4Hz, 1H),

FABHRMS (m/z): 211.0272 (M++1, C₉H₈N₂O₂ requires 211.0274)

실험예 1. 세포수준에서의 리폭시게나아제의 저해도 평가

상기 실시예 화합물들의 리폭시게나제에 대한 저해 활성을 확인하기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.

1-1. BMMC (Bone-marrow mast cell)의 제조

5 ∼ 6 주 정도의 암컷 BALB/c 쥐를 두 마리 준비하여 71 % EtOH 로 소독을 하고 다리뼈를 분리하였다. 25 G 바늘을 다리뼈 중앙에 꽂은 후 25 ml RPMI로 골수를 밀어내고 원심분리(1000rpm, 5mins)를 하여 상등액을 버린다. RPMI 1640/10% FBS 로 배양한다. 하루 정도 지난 후 관찰하여 계대 배양을 하고 90% 이상 BMMC 확인한 후 실험을 하였다.

1-2. 류코트리엔 ( LTC ₄ ) 어세이

3주 이상 지난 BMMC를 50ml 폴콘 튜브(falcon tube)에 옮긴 후 원심분리(1000rpm, 5min, 4 ℃)를 하여 상등액을 버리고 RPMI 1640 만 첨가한다. 50 ul 상등액 시료와 50 ul LTC₄ AChE tracer, 50 ul LTC₄ antiserum을 각 웰에 분주하였다. 희석 시 EIA buffer를 사용하였다. NSB well에는 100ul EIA buffer와 50ul LTC4 AChE tracer를 분주하고 B0 well에는 50ul EIA buffer와 50ul LTC4 AChE tracer, 50 ul LTC4 antiserum을 분주하였다. 실온에서 16시간에서 20시간 동안 배양을 한 후 wash buffer 200ul 로 5번 정도 씻어준다. 각 well에 엘만 시약 (Ellman's reagent) 200 ul를 첨가해준다. 60분 동안 배양을 한 후 405 nm에서 플레이트를 읽어주었다.

상기 실험 결과, 본 발명의 실시예 화합물중 (E)-3-(4-클로로페닐)-N-(6-메틸벤조[d]옥사졸-2-일) 아크릴아미드 (G4) 이 1uM농도에서 97.0%, 10uM 농도에서 97.9%의 가장 강력한 5-리폭시게나제 저해활성을 나타냄을 확인할 수 있었다 (표 1 내지 표 5 참조).

Compound	R₁	R₂	R₃	(%)Inhibition
Compound	R₁	R₂	R₃	1uM	10uM
D1	H	H	H	-106	57.1
D2	H	Cl	H	-69	74
D3	H	NO₂	H	-23	-19
D4	H	OCH₃	H	2	94.7
D5	H	CH₃	H	-74	89.6
D6	H	H	CH₃	-28	88.6
D7	CH₃	H	H	16.1	82.3
D8	H	COOH	H	-13	-20
D9	H	CF₃	H	3	-301

Compound	R₁	R₂	R₃	(%)Inhibition
Compound	R₁	R₂	R₃	1uM	10uM
E1	H	H	H	-16	24.8
E2	H	Cl	H	33	89.2
E3	H	NO₂	H	16	40.3
E4	H	OCH₃	H	3	32.6
E5	H	CH₃	H	34	20.8
E6	H	H	CH₃	35	36.6
E7	CH₃	H	H	5	9.6
E8	H	COOH	H	27	29.1
E9	H	CF₃	H	-2	27.7

Compound	R₁	R₂	R₃	(%)Inhibition
Compound	R₁	R₂	R₃	1uM	10uM
F1	H	Cl	H	-19.5	32.4
F2	H	CH₃	H	50.7	-89.3
F3	CH₃	H	H	37.2	88.5
F4	H	H	CH₃	64.1	67.9
F5	H	OCH₃	H	40.5	96.6

Compound	R₁	R₂	R₃	(%)Inhibition
Compound	R₁	R₂	R₃	1uM	10uM
G1	H	Cl	H	34.7	81.3
G2	CH₃	H	H	31.5	4.6
G3	H	CH₃	H	79.0	96.3
G4	H	H	CH₃	97.0	97.9
G5	H	OCH₃	H	-13.7	69.7

Compound	R₁	R₂	(%)Inhibition
Compound	R₁	R₂	1uM	10uM
H1	Cl	CH₃	-20.2	-7.6
I1	Cl	CH₂CH₃	35.7	25.5
I2	H	CH₂CH₃	2.7	1.8

본 발명은 리폭시제나아제에 대한 저해 활성을 갖는 신규 화학구조의 벤즈옥 사졸아미드 유도체 화합물에 대한 것으로써, 이를 포함하는 화합물을 유효성분으로 하는 약학 조성물은 천식 치료 및 예방을 위한 약제로 이용가능하다.

Claims

N-(벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체(D1), N-(5-클로로-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체(D2), N-(5-니트로-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체(D3), N-(5-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체(D5), N-(6-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체(D6), N-(4-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드체(D7), 2-벤조일 아미노벤즈옥사졸-5-카르복실산 (D8), N-(5-트리풀루오로메틸-벤조[d]옥사졸-2-일-벤즈아미드 (D9), N-(벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드(E1), N-(5-클로로-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 (E2), N-(5-클로로-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 (E3), N-(5-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 (E5), N-(6-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 (E6), N-(4-메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 (E7), 2-(2-이소부틸아미노-옥사졸-4-일리덴 메틸)-아크릴산 (E8), N-(5-트리풀루오로메틸-벤조[d]옥사졸-2-일)-이소부티르아미드 (E9), N-(5-클로로-벤조[d]옥사졸-2-일)-3, 5-비스 (트리풀루오로메틸)벤즈아미드 (F1), 3,5-비스-(트리풀루오로메틸)-N-(5-메틸벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드 (F2), 3,5-비스-(트리풀루오로메틸)-N-(4-메틸벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드 (F3), 3,5-비스-(트리풀루오로메틸)-N-(6-메틸벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드 (F4), 3,5-비스-(트리풀루오로메틸)-N-(5-메톡시벤조[d]옥사졸-2-일)-벤즈아미드 (F5), (E)-N-(5-클로로벤조[d]옥사졸-2-일)-3-(4-클로로페닐) 아크릴아미드 (G1), (E)-3-(4-클로로페닐)-N-(4-메틸벤조[d]옥사졸-2-일) 아크릴아미드 (G2), (E)-3-(4-클로로페닐)-N-(5-메틸벤조[d]옥사졸-2-일) 아크릴아미드 (G3), (E)-3-(4-클로로페닐)-N-(6-메틸벤조[d]옥사졸-2-일) 아크릴아미드 (G4), (E)-3-(4-클로로페닐)-N-(5-메톡시벤조[d]옥사졸-2-일) 아크릴아미드 (G5), N-(5-클로로벤조[d]옥사졸-2-일) 아세타미드(H1), N-(5-메틸벤조[d]옥사졸-2-일) 아세타미드 (H2), N-(5-클로로벤조[d]옥사졸-2-일) 프로피온아미드 (I1) 또는 N-(5-클로로벤조[d]옥사졸-2-일) 프로피온아미드 (I2) 화합물, 이의 약리학적으로 허용가능한 염 및 (E)-형의 기하이성질체.
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제 1 항에 기재된 화합물 또는 이의 약리학적으로 허용가능한 염을 유효성분으로 포함하는 천식질환의 치료 및 예방을 위한 약학 조성물.