JPH11290094A - アスタキサンチン脂肪酸エステルの製造方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】アスタキサンチン脂肪酸ジエステルの製造方法
の提供。 【解決手段】アスタキサンチンと脂肪酸を用いてエステ
ル化反応を行うに際して、リパーゼを用いることを特徴
とするアスタキサンチン脂肪酸をジエステルの製造方
法。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、アスタキサンチン
脂肪酸モノエステルまたはアスタキサンチン脂肪酸ジエ
ステルの製造方法に関する。更に詳細には遊離アスタキ
サンチンまたはアスタキサンチン脂肪酸モノエステルと
脂肪酸とを用いてエステル化を行うに際して、リパーゼ
を用いて製造することを特徴とするアスタキサンチン脂
肪酸モノエステルまたはアスタキサンチン脂肪酸ジエス
テルの製造方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】アスタキサンチンは一般には次式［１］

【０００３】

【化１】

【０００４】で示される色素である。アスタキサンチン
は食品や医薬品・化粧料（特開平８−２４５３３５号公
報）及びマダイ、サケ、マス、ハマチなどの養殖魚の色
揚げ剤（特開昭４９−７９８９５号公報、特開昭５７−
５８８６０号公報、特開平４−３４９８５６号公報）な
どに使用することが開示されている。最近、アスタキサ
ンチンには、酸化防止機能（特開平２−４９０９１号公
報）、活性酸素フリーラジカルの消去作用（特開平６−
１４５０６２号公報）、抗腫瘍効果（Ｃａｒｃｉｎｏｇ
ｅｓｉｓ，第１５巻，第１５頁，１９９４年）、抗スト
レス（特開平９−１２４４７０号公報）などの機能があ
ることが報告されている。これらアスタキサンチンは、
オキアミ、エビ、カニなどの甲殻類やイクラなどの魚卵
及び酵母や藻類あるいは遺伝子組み替え微生物（バイオ
サイエンスとインダストリー、第５３巻，第１０３６
頁，１９９５年）などの体内に蓄積している。アスタキ
サンチンの製造方法としては甲殻類の殻より溶剤を用い
て抽出する方法（特開昭５８−８８３５３号公報、特開
平９−３０１９５０号公報）、オキアミ油から超臨界状
態で抽出する方法（特開昭６０−３５０５７号公報、特
開昭６０−４５５８号公報、特開平６−２００１７９号
公報）およびファフィア酵母などから溶剤抽出する方法
（月刊フードケミカル１９９４年（１１月号），第６３
頁，１９９４年、食品工業１９９４年．（１２月号）第
３０頁，第４７頁、特開平８−２８３号公報）などが知
られている。また、アスタキサンチンの化学的な合成法
は、特開昭５２−６８１５７号公報、特開昭５５−３８
８号公報、特開平５−６５２９０号公報などに開示され
ている。

【０００５】生物中に蓄積されたアスタキサンチンは脂
肪酸が結合していない遊離アスタキサンチンあるいは１
分子の脂肪酸がエステル結合しているアスタキサンチン
脂肪酸モノエステル、２分子の脂肪酸が結合しているア
スタキサンチン脂肪酸ジエステルとして存在している。
例えば、オキアミやアメリカザリガニには遊離及びアス
タキサンチンの脂肪酸ジまたはモノエステルが、またフ
ァフィアやヘマトコッカスなど微生物の産生するアスタ
キサンチンは、そのほとんどが遊離アスタキサンチンで
ある（食品と開発第２７巻（Ｎｏ．３），第３８頁，１
９９２年）。アスタキサンチンの酸素や熱・光に対する
安定性はアスタキサンチン脂肪酸ジまたはモノエステル
の方が遊離アスタキサンチンに比べて安定である。腸管
における吸収効率はアスタキサンチン脂肪酸ジまたはモ
ノエステルの方が遊離アスタキサンチンよりも優れてい
る｛食品と開発第２７巻（Ｎｏ．３），第３８頁，１９
９２年｝。一重項酸素の消去能やフリーラジカル及び活
性酸素の捕捉・消去活性は遊離アスタキサンチンのみで
発現し、アスタキサンチン脂肪酸ジエステルにこの効果
はない｛Ｆｏｏｄ Ｓｔｙｌｅ２１．第１巻，第７３
頁，１９９７年｝。しかしながらアスタキサンチン脂肪
酸ジまたはモノエステルは腸管吸収時に酵素によって加
水分解され、体内で遊離アスタキサンチンとなり、一重
項酸素の消去や活性酸素の捕捉・消去効果が発揮される
｛食品と開発，第２７巻（Ｎｏ．３），第３８頁，１９
９２年｝。油脂への溶解性は、エステル型の方が優れて
いる。遊離アスタキサンチンが５０ｐｐｍ程度しか溶け
ないのに対して、エステル型のアスタキサンチンは１０
０ｐｐｍ程度でも容易に溶けるので食品、医薬品への用
途展開が広がる。このため、アスタキサンチンの持つ生
体内での抗酸化効果を期待してアスタキサンチン脂肪酸
ジエステルを経口摂取することには何ら問題はないと考
えられている。

【０００６】アスタキサンチン脂肪酸ジエステルは、前
記のように有用であり、しかも安定性が高く吸収効率が
良く、医薬品や食品の分野で応用が期待できるが、その
製造法についての報告は少ない。天然資源から分画して
アスタキサンチンの脂肪酸エステルを製造する方法とし
て例えば、オキアミの抽出物から高速液体クロマトグラ
フィー（以下ＨＰＬＣと略す。）を用いて分画すること
が知られているが（特開平７−３００４２１号公報）、
この場合オキアミ由来の臭気を除くことはできず、前記
アスタキサンチン脂肪酸エステルは、食品、医薬品、化
粧品の原料としては好ましくない。ＨＰＬＣで分画され
たアスタキサンチン脂肪酸ジエステルを水蒸気蒸留する
方法や活性炭・活性白土など吸着剤を用いる既知の脱臭
方法を行った場合には、アスタキサンチンは分解あるい
は吸着され、その含有率は著しく減少し、効果を十分発
揮できない。微生物由来のアスタキサンチンを抽出する
際には、微生物の細胞壁を破砕する必要があるために、
アスタキサンチンの抽出効率が悪い問題がある。また、
含有されるアスタキサンチンもそのほとんどが遊離アス
タキサンチンであり、アスタキサンチン脂肪酸ジまたは
モノエステルを得るには適当な原料ではない。また、遊
離アスタキサンチンの化学合成法についての報告は数多
くなされているが、アスタキサンチン脂肪酸ジまたはモ
ノエステルの化学的な合成法についての報告はない。

【０００７】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、医薬
品や食品の分野で応用が期待でき、しかも安定で吸収効
率が高い脂肪酸ジエステル型アスタキサンチンを効率的
に合成する方法を提供するものである。

【０００８】

【発明を解決するための手段】本発明者らは、前記の問
題点に鑑み、アスタキサンチン脂肪酸ジエステルの合成
方法を鋭意検討した結果、脂肪酸と遊離アスタキサンチ
ンあるいはアスタキサンチン脂肪酸モノエステルと脂肪
酸とからアスタキサンチン脂肪酸ジエステルを合成する
に際して、酵素であるリパーゼを用いると収率よく合成
できる知見を得て、本発明を完成するに至った。即ち本
発明は、次の（１）〜（６）である。 （１）アスタキサンチンと脂肪酸を用いてエステル化反
応を行うに際してリパーゼを用いることを特徴とするア
スタキサンチン脂肪酸モノエステルまたはアスタキサン
チン脂肪酸ジエステルの製造方法。 （２）脂肪酸が炭素数１４〜２２の直鎖または分岐の飽
和もしくは不飽和の脂肪酸である前記のアスタキサンチ
ン脂肪酸モノエステルまたはアスタキサンチン脂肪酸ジ
エステルの製造方法。 （３）リパーゼがカンジダ属の微生物由来のリパーゼ、
クロモバクテリウム属の微生物由来のリパーゼ、動物の
膵臓由来のリパーゼから選ばれる１種以上を用いる前記
のアスタキサンチン脂肪酸モノエステルまたはアスタキ
サンチン脂肪酸ジエステルの製造方法。 （４）アスタキサンチンの脂肪酸モノエステルと脂肪酸
を用いてエステル化反応を行うに際してリパーゼを用い
ることを特徴とするアスタキサンチン脂肪酸ジエステル
の製造方法。 （５）アスタキサンチンの脂肪酸モノエステルと脂肪酸
を用いてエステル化反応を行うに際して、脂肪酸が炭素
数１４〜２２の直鎖または分岐の飽和もしくは不飽和の
脂肪酸である前記のアスタキサンチン脂肪酸ジエステル
の製造方法。 （６）アスタキサンチンの脂肪酸モノエステルと脂肪酸
を用いてエステル化反応を行うに際して、リパーゼがカ
ンジダ属の微生物由来のリパーゼ、クロモバクテリウム
属の微生物由来のリパーゼ、動物の膵臓由来のリパーゼ
から選ばれる１種以上を用いる前記のアスタキサンチン
脂肪酸ジエステルの製造方法。

【０００９】

【発明の実施の形態】本発明で用いる原料のアスタキサ
ンチンは、遊離アスタキサンチンやアスタキサンチン脂
肪酸モノエステルであり、単品でもあるいは両者の混合
物であってもよい。遊離アスタキサンチンは化学合成に
よって得られたものでも、前記のように抽出等により得
られる天然物を用いてもよい。天然物のアスタキサンチ
ンとしては、遊離アスタキサンチンあるいはアスタキサ
ンチン脂肪酸モノエステルはファフィアやヘマトコッカ
スなど微生物が産生した油脂由来のアスタキサンチン、
さらには、エビ、カニ殻、オキアミなど甲殻類あるいは
魚卵などから抽出分画されたアスタキサンチン類などが
挙げられる。また、前述の微生物や甲殻類などから生産
された遊離、脂肪酸モノエステル、脂肪酸ジエステルの
各アスタキサンチンが混在したものを用いることができ
る。

【００１０】本発明で用いる原料の脂肪酸は、炭素数が
１４〜２２の直鎖または分岐の飽和あるいは不飽和脂肪
酸が好ましい。具体的には例えば、パルミチン酸、イソ
パミチン酸、ステアリン酸、パルミトオレイン酸、オレ
イン酸、バクセン酸、エライジン酸、リノール酸、α−
リノレン酸、γ−リノレン酸（γ−ＬＮ）、共役リノー
ル酸（ＣＬＡ）、ビスホモ−γ−リノレン酸、アラキド
ン酸（ＡＡ）、イコサペンタエン酸（ＥＰＡ）、ドコサ
ペンタエン酸（ＤＰＡ）、ドコサヘキサエン酸（ＤＨ
Ａ）などから選ばれる脂肪酸または２種以上の混合脂肪
酸が挙げられる。さらに、ハエカビ類（Ｅｎｔｏｍｏｐ
ｈｔｈｏｒａｃｅａ属）、海洋微細藻類（Ｉｓｏｃｈｒ
ｙｓｉｓ属）、ケカビ類（Ｍｏｒｔｉｅｒｅｌｌａ属）
などの微生物油；オリーブ油、菜種油、紅花油、ヒマワ
リ油、トウモロコシ油などの植物油；イワシ油、カツオ
油、マグロ油、鯨油、イカ肝油、タラ肝油、サメ肝油、
魚卵油など海産動物油；あるいは卵黄油から精製濃縮し
て得られる混合脂肪酸や精製した脂肪酸を用いることが
できる。

【００１１】本発明で用いるリパーゼは、カンジダ属の
微生物由来のリパーゼ｛Ｃａｎｄｉｄａ ｃｙｎｄｒａ
ｃｅａ由来のリパーゼ（名糖産業（株）商品名：リパー
ゼＯＦ）、Ｃａｎｄｉｄａ Ａｎｔａｒｅｔｉｃａ由来
のリパーゼ（ノボインダストリー（株）商品名：リパー
ゼＳＰ３８２）｝、クロモバクテリウム属の微生物由来
のリパーゼ｛Ｃｈｒｏｍｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｖｉｓ
ｃｏｓｕｍ由来のリパーゼ、旭化成工業（株）商品名：
リパーゼＡＣ｝、動物の膵臓由来のリパーゼ等のリパー
ゼが好ましく挙げらる。微生物由来のリパーゼとして
は、前記の他に、糸状菌（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓ ｎ
ｉｇｅｒ）由来あるいはシュードモナス属（Ｐｓｅｕｄ
ｏｍｏｎａｓ属）のリパーゼが挙げられる。また動物の
膵臓由来のリパーゼとしては、豚膵臓由来のアルドリッ
チ社製の市販品を挙げることができる。これらのリパー
ゼから選ばれる一種、あるいは二種以上のリパーゼを用
いてもよい。

【００１２】本発明で用いるリパーゼは、粉末あるいは
担体に固定化した固定化リパーゼが用いることができ
る。リパーゼの固定化方法は公知の方法によって行わ
れ、固定化担体としてシリカゲル、セライト、к−カラ
ギナン、キチン、アルギン酸ナトリウムなど公知の担体
｛バイオリアクター 福井三郎監修・編 講談社サイエ
ンティフィック（１９８５年）、実践バイオリアクタ
ー，食品産業バイオリアクターシステム技術研究組合編
食品化学新聞社（１９９０年）｝が用いられる。

【００１３】本発明で用いるアスタキサンチンと脂肪酸
のモル比は、遊離アスタキサンチンに対して２（〜２０
倍モルの脂肪酸であり、好ましくは５〜１０倍モルであ
る。２倍モルより少ない場合は高いアスタキサンチン脂
肪酸ジエステルの含量得られず、２０倍モルより多くし
ても著しい効果の向上は期待できないので好ましくな
い。

【００１４】本発明で用いるリパーゼの量は、アスタキ
サンチンに対して１００ｕ（＝単位）／ｍｍｏｌ〜５０
００ｕ／ｍｍｏｌ、好ましくは５００〜３０００ｕ／ｍ
ｍｏｌであり、１００ｕ／ｍｍｏｌより少ないと、アス
タキサンチン脂肪酸ジエステルを高収率で得られず、５
０００ｕ／ｍｍｏｌより多く使用しても著しい効果の向
上は期待できないので好ましくない。

【００１５】本発明のエステル化の反応温度は、２０〜
５０℃が好ましく挙げられる。本来酵素反応において
は、それぞれの酵素リパーゼの持つ至適温度や至適ｐＨ
等の条件において行うことが好ましい。しかしながら、
反応温度が５０℃より高いと反応に用いる原料の遊離ア
スタキサンチンの劣化が促進されるので好ましくない。
また、反応温度が２０℃より低いとリパーゼの活性が落
ち、反応速度が遅くなるために好ましくない。

【００１６】本発明では反応時に有機溶媒を用いても差
し支えない。反応時のリパーゼの安定性から無極性溶媒
が好ましい。具体的には例えば、ｎ−ヘキサン、ベンゼ
ン、四塩化炭素などが挙げられる。これらの溶媒を用い
ることができるが、毒性など安全性の面からｎ−ヘキサ
ンが好ましく挙げられる。特にパルミチン酸やステアリ
ン酸など融点が高い飽和脂肪酸を反応に用いる場合には
有効である。

【００１７】本発明で行う酵素反応の反応時間は１２時
間から４８時間が望ましい。反応時間が１２時間より短
いと反応が充分進まず、また、反応時間が４８時間を超
えても著しい純度の向上したアスタキサンチン脂肪酸ジ
エステルを得ることはできないので好ましくない。本発
明では脂肪酸及びアスタキサンチンの酸化劣化反応を防
ぐために窒素やアルゴンなど不活性ガス気流下で行うこ
とも好ましく挙げられる。

【００１８】本発明における反応は可逆的平衡反応のた
めに、反応の進行に伴って生成する水分が反応を妨げる
要因になる。本発明においては反応時における水分含量
は２００ｐｐｍ〜１０００ｐｐｍが望ましい。水分含量
が１０００ｐｐｍより多いと反応の中心が合成反応から
分解反応に移り、アスタキサンチン脂肪酸ジエステルの
純度は低くなり好ましくない。水分含量が２００ｐｐｍ
より少ないとリパーゼが安定に存在するために持ってい
る水和水までも除去することになり、リパーゼが不活性
化してしまうので好ましくない。この副生する水を除去
するために、有機溶剤を用いない場合には不活性ガスで
バブリングあるいは真空によって蒸散せしめるか、ある
いは有機溶媒を用いる場合にはモレキュラシーブスなど
で吸着除去することなどを行うことが好ましい。

【００１９】

【発明の効果】本発明のアスタキサンチン脂肪酸エステ
ルの製造方法は、リパーゼを用いるので温和な条件下で
反応することができ、原料のアスタキサンチンの分解な
どを引き起こすことなく高い収率でアスタキサンチンの
脂肪酸エステルを製造することができる。

【００２０】

【実施例】以下、実施例に基づいて、本発明を詳細に説
明する。次に用いた測定方法を示した。 ＜担体なしのリパーゼ活性の測定方法＞リパーゼのエス
テル合成活性は次の方法により定めた。オレイン酸｛純
度９９％：日本油脂（株）製エキストラオレイン｝１ｍ
ｏｌ及び水分含量１０％のグリセリン１ｍｏｌの混液に
１００μＬの酵素水溶液を添加し、３７℃で５００ｒｐ
ｍで１０分間かき混ぜた時のオレイン酸の減少量より算
出した。１分間に１μｍｏｌのオレイン酸を消費する活
性を１ｕ（＝単位）とした。 ＜固定化リパーゼ活性の測定方法＞リパーゼのエステル
合成活性は次の方法により定めた。オレイン酸｛純度９
９％：日本油脂（株）製エキストラオレイン｝１ｍｏｌ
及び水分含量１０％のグリセリン１ｍｏｌの混液に１０
ｍｌのｎ−ヘキサンに溶解し、ここに１ｇの固定化リパ
ーゼを添加し、３７℃で５００ｒｐｍで１０分間かき混
ぜた時のオレイン酸の減少量より算出した。１分間に１
μｍｏｌのオレイン酸を消費する活性を１ｕ（＝単位）
とした。 ＜アスタキサンチンの分析方法＞アスタキサンチンの含
量の分析は高速液体クロマトグラフィーを用い以下に示
す条件で行った。 機種；高速液体クロマトグラフィー｛以下、ＨＰＬＣと
略す、Ｃｉｃａ−Ｍｅｒｃｋ社製のＨｉｂａｒ ｃｏｌ
ｕｍｎ ＬｉＣｈｒｏｓｏｒｂ Ｓｉ ６０のカラムを
装着した東ソー（株）社製、８０２０システム｝、 移動相；ｎ−ヘキサン：酢酸エチル：酢酸＝５０：５
０：１（ｖ：ｖ：ｖ） 流量；２ｍｌ／ｍｉｎ 検出方法；紫外可視吸収スペクトル４９２ｎｍ。 前記の条件において分析した結果、アスタキサンチン脂
肪酸ジエステル、アスタキサンチン脂肪酸モノエステ
ル、遊離アスタキサンチンはそれぞれ保持時間２．３，
３．９および５．２分付近に検出される。この３種類の
アスタキサンチンのピーク面積の合計を１００重量％と
して、それぞれのピーク面積比をアスタキサンチン脂肪
酸ジエステル、アスタキサンチン脂肪酸モノエステルお
よび遊離アスタキサンチンのそれぞれの組成比（重量
％）として算出した。次に実施例に用いた酵素リパーゼ
のエステル合成活性を表１に示した。

【００２１】

【表１】 注；担体のあるもの、およびないものも示した。 担体のあるものは次の方法により固定化リパーゼを作成
した。 ＜セライトに固定化リパーゼ＞前記の方法で測定して合
成活性が１０００ｕに相当する重量のリパーゼを２０ｍ
ｌの精製水に溶解した。このリパーゼ水溶液を１００ｇ
のセライト５３５（関東化学（株）社製）と混和して固
定化を行った。固定化後リパーゼ水溶液とセライトの混
和物を２日間２５℃で風乾した後、８時間真空乾燥して
固定化リパーゼとした。 ＜キトパールによる固定化リパーゼ＞５０ｇ（湿重量）
のキトパールを４００ｍｌの１２％グルタルアルデヒド
に懸濁し、０℃で６０分間かき混ぜた。十分な精製水で
グルタルアルデヒドを洗浄除去した後、前記の方法で測
定した合成活性が１０００ｕに相当する重量のリパーゼ
を１００ｍｌの精製水に溶解したリパーゼ水溶液を混和
して３７℃、３０分間かき混ぜて固定化を行った。固定
化後リパーゼの混和物を２日間２５℃で風乾した後、８
時間真空乾燥して固定化リパーゼとした。

【００２２】実施例１ 遊離アスタキサンチン（ロッシュ社）０．１２ｇ（０．
２ｍｍｏｌ）及び遊離脂肪酸としてオレイン酸０．２８
２ｇ（１．０ｍｍｏｌ）を反応用ガラス瓶にとった。こ
こにカンジダ属由来のリパーゼＯＦを５００ｕを加え、
かき混ぜながら反応した。２４，４８時間反応した後に
この溶液をとり、ＨＰＬＣによってアスタキサンチンの
組成比を分析した。結果を表２に示した。

【００２３】実施例２−８ 表２および表３に示したように、遊離アスタキサンチン
の添加量及び遊離脂肪酸の種類、添加量、使用したリパ
ーゼの種類及び量、固定化の有無、溶剤の使用の有無、
反応温度などの条件を変えた以外は実施例１に準じて反
応を行って、ＨＰＬＣによりアスタキサンチンの組成比
を分析した。結果を表２および表３に示した。

【００２４】実施例９ エビ殻より抽出した下記の組成のアスタキサンチン溶液
（注１；日本キレート社製）２０ｇとｎ−ヘキサン１０
０ｍｌを反応用のガラス容器にとり、リパーゼＳＰ３８
２を２０００ｕ加え、４０℃に加温し、かき混ぜた。２
４，４８時間後にこのアスタキサンチンヘキサン溶液を
採り、ＨＰＬＣによってアスタキサンチンの組成比を分
析した。注１；アスタキサンチン溶液：アスタキサンチ
ン類の重量比は全容液の約０．２％である。また、その
中でアスタキサンチン類の組成比はアスタキサンチン脂
肪酸ジエステルが２５重量％、アスタキサンチン脂肪酸
モノエステルが重量５％、遊離アスタキサンチンが７０
重量％であった。アスタキサンチン類の他には約８５重
量％の遊離脂肪酸、約１５重量％のトリグリセライドが
含まれている。

【００２５】

【表２】

【００２６】

【表３】

【００２７】注＊ 脂肪酸の略号は次のとおり。 ＯＡ；オレイン酸、ＬＡ；リノール酸、ＥＰＡ；イコサ
ペンタエン酸、ＤＨＡ；ドコサヘキサエン酸、γ−ＬＮ
Ａ：γ−リノレン酸、ＡＡ；アラキドン酸、ＰＡ；パル
ミチン酸、ＣＯ；トウモロコシ油より調整した脂肪酸

【００２８】比較例１ 遊離アスタキサンチン（ロッシュ社）０．１２ｇ（０．
２ｍｍｏｌ）及び遊離脂肪酸としてオレイン酸０．２８
２ｇ（１．０ｍｍｏｌ）、ｎ−ヘキサン５０ｍｌを反応
用ガラス瓶にとった。ここに通常のエステル化触媒とし
てパラトルエンスルホン酸（ＰＴＳ）０．１ｇを加え、
４０℃でかき混ぜながら反応した。４８時間反応した後
にこの溶液をとり、ＨＰＬＣによってアスタキサンチン
の組成比を分析した。その結果、アスタキサンチン脂肪
酸ジエステル、アスタキサンチン脂肪酸モノエステルに
相当する保持時間２．３，３．９分付近にはピークが検
出されなかった。原料のスタキサンチンの保持時間５．
２分にのみピークが検出さた。

【００２９】比較例２ 遊離アスタキサンチン（ロッシュ社）０．１２ｇ（０．
２ｍｍｏｌ）及び遊離脂肪酸としてオレイン酸０．２８
２ｇ（１．０ｍｍｏｌ）、ｎ−ヘキサン５０ｍｌを反応
用ガラス瓶にとった。ここに通常のエステル化触媒とし
てパラトルエンスルホン酸（ＰＴＳ）０．１ｇを加え、
６８℃〜７０℃の還流下でかき混ぜながら反応した。８
時間反応した後にこの溶液をとり、ＨＰＬＣによってア
スタキサンチンの組成比を分析した。その結果、アスタ
キサンチンの組成比（重量％）はアスタキサンチン脂肪
酸ジエステル、アスタキサンチン脂肪酸モノエステルお
よび遊離アスタキサンチンに相当するそれぞれの保持時
間２．３，３．９および５．２分付近に検出されなかっ
た。反応終了後、アスタキサンチンを抽出してその濃度
を測定したところ反応前に添加した２１重量％まで減少
していた。

【００３０】実施例１０ 遊離アスタキサンチン（ロッシュ社）０．１２ｇ（０．
２ｍｍｏｌ）及び遊離脂肪酸としてオレイン酸０．２８
２ｇ（１．０ｍｍｏｌ）を反応用ガラス瓶にとった。こ
こにカンジダ属由来のリパーゼＯＦを５００ｕを加え、
かき混ぜながら反応した。１２時間反応した後にこの溶
液をとり、ＨＰＬＣによってアスタキサンチンの脂肪酸
モノエステルのみを分取したアスタキサンチンの脂肪酸
モノエステルを用いて、さらにリパーゼＯＦを５００ｕ
添加して２４時間反応して前記と同様に分析した。その
結果は、アスタキサンチンの脂肪酸ジエステルが８０重
量％であった。

【００３１】以上の結果から本発明のリパーゼを反応に
用いる方法は、収率よくアスタキサンチン脂肪酸ジエス
テルが合成できることがわかる。

Claims (6)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】アスタキサンチンと脂肪酸を用いてエステ
   ル化反応を行うに際してリパーゼを用いることを特徴と
   するアスタキサンチン脂肪酸モノエステルまたはアスタ
   キサンチン脂肪酸ジエステルの製造方法。
2. 【請求項２】前記の脂肪酸が炭素数１４〜２２の直鎖ま
   たは分岐の飽和もしくは不飽和の脂肪酸である請求項１
   記載のアスタキサンチン脂肪酸モノエステルまたはアス
   タキサンチン脂肪酸ジエステルの製造方法。
3. 【請求項３】リパーゼがカンジダ属の微生物由来のリパ
   ーゼ、クロモバクテリウム属の微生物由来のリパーゼ、
   動物の膵臓由来のリパーゼから選ばれる１種以上を用い
   る請求項１または２のいずれか１項に記載のアスタキサ
   ンチン脂肪酸モノエステルまたはアスタキサンチン脂肪
   酸ジエステルの製造方法。
4. 【請求項４】アスタキサンチンの脂肪酸モノエステルと
   脂肪酸を用いてエステル化反応を行うに際してリパーゼ
   を用いることを特徴とするアスタキサンチン脂肪酸ジエ
   ステルの製造方法。
5. 【請求項５】前記の脂肪酸が炭素数１４〜２２の直鎖ま
   たは分岐の飽和もしくは不飽和の脂肪酸である請求項４
   記載のアスタキサンチン脂肪酸ジエステルの製造方法。
6. 【請求項６】リパーゼがカンジダ属の微生物由来のリパ
   ーゼ、クロモバクテリウム属の微生物由来のリパーゼ、
   動物の膵臓由来のリパーゼから選ばれる１種以上を用い
   る請求項４または５に記載のアスタキサンチン脂肪酸ジ
   エステルの製造方法。