JPH064671B2

JPH064671B2 - シアル酸誘導体及びその製造方法

Info

Publication number: JPH064671B2
Application number: JP6974185A
Authority: JP
Inventors: 治夫小倉; 公夫古畑; 秀司藤田; 正善伊藤; 昌治吉村; 善保志鳥
Original assignee: KANTO ISHI PHARMA CO Ltd
Current assignee: KANTO ISHI PHARMA CO Ltd
Priority date: 1985-04-02
Filing date: 1985-04-02
Publication date: 1994-01-19
Anticipated expiration: 2009-01-19
Also published as: JPS61243096A

Description

【発明の詳細な説明】本発明は免疫学的に活性な、シアル酸誘導体及びその製
造方法に関する。シアル酸は、動物界あるいはいくつか
の細菌の細胞表面にシアロ複合体（糖蛋白、糖脂質、オ
リゴ糖、および多糖）として存在することが知られてい
る。

この化合物は近年、神経機能、癌、炎症、免疫、ウィル
ス感染、分化、ホルモンレセプターなど、医学ならびに
薬学的に重要視され、細胞表面に局在する特異な活性分
子として注目されつつある。しかしながらシアロ複合体
においてシアル酸の演ずる役割については、いまだ推測
の域を出るものではない。

この化合物は更に、多くの天然物有機化学者によって研
究され、既に単純な各種誘導体に導かれている。しかし
ながら顕著な生理活性誘導体はまだ知られていない。そ
れ故本発明は、優れた生理活性を有する新規化合物を得
ることにある。

さらに近年、造血臓器の悪性腫瘍をはじめ、各種癌疾
患、膠原病などの治療の多角化によって、確かに延命効
果がもたらされている。しかしその反面、使用する薬剤
例えば副腎皮質ホルモン剤や、免疫抑制剤の使用の頻度
の増加をすることがさけられず、その結果いわゆる免疫
力の低下・減少と共に、多くの副作用がおこりつつあ
る。本発明者等は、生体固有成分であるシアル酸に注目
し、その化学的修飾によって副作用が少なく、かつ免疫
監視機構の調整作用をもつ、免疫調整剤の研究を鋭意行
ない、その結果抑制Ｔ細胞を活性化し、Ｂ細胞の免疫グ
ロブリン産生を抑制するいわゆる免疫調整作用を持つ本
発明の新規化合物に到達したのである。

すなわち、本発明は一般式（式中、Ｒ₁及びＲ₂はいずれか一方がカルボキシル基ま
たはメトキシカルボニル基であり、他方が式で示される基であり、Ｒ³は水素またはアセチル基であ
る）で表わされるシアル酸誘導体に関する。

また、本発明は一般式で示される化合物をコレステロールと反応せしめ、つい
で必要により加水分解することを特徴とする、上記式
〔Ｉ〕のシアル酸誘導体の製造方法に関する。

前記一般式〔Ｉ〕のシアル酸誘導体は、次の化学式で示
すように製造される。

本発明に於いて使用する式〔II〕の化合物は公知化合物
であり、容易に商業的に入手し得る。

上記製造方法に於いて、式〔II〕の化合物をKoenigs-Kn
orr反応用触媒の存在下にコレステロール常圧で約２０
〜２５℃の温度で約２〜７日反応させる。その際、コレ
ステロール化合物〔II〕１モルに対して約２〜５倍モル
用いる。

尚、上記触媒としては、臭化第二水銀、シアン化第二水
銀、過塩素酸銀、トリフルオロメタンスルホン酸銀、ト
リフルオロ酢酸銀糖が使用できる。

上記触媒は化合物〔II〕１当量に対して約1.0当量〜1.2
当量の範囲で使用する。

また、溶媒としてはアセトニトリル、ニトロメタン、ア
セトン、ベンゼン、テトラヒドロフラン、ジクロルメタ
ン、塩化メチレン等が挙げられる。就中、ベンゼン、テ
トラヒドロフラン、ジクロルメタンが好ましい溶媒であ
る。

かくして得られた反応生成物は、カラムクロマトグラフ
ィーの如き常法により単離、精製される。

更に、上記生成物は必要により加水分解してメトキシカ
ルボニル基をカルボキシル基に、アセチル基を水素に変
換し得る。加水分解は、常法により、例えば約１〜３Ｎ
のアルカリ溶液で約１５〜２５℃の温度で約５〜１５時
間処理することにより行ない得る。

本発明に於て、一般式〔Ｉ〕で示される化合物は、夫々
顕著な免疫調整作用を有する。

諸免疫調整作用は、次のような方法により確認すること
ができた。

ConAによるマウス脾臓リンパ球活性化に対する作用：Ｔ細胞は、ConAにより非特異的に活性化されるが、この
反応系に本発明のシアル酸誘導体を加え、その作用を検
討した。即ち、BALB/Cマウスより得た脾臓リンパ球（Ｓ
ＰＣ）にConA及び一般式〔Ｉ〕の化合物を夫々加え、ミ
クロプレート上で３７℃で５％ＣＯ₂を与えながら２０
数時間培養した。これにトリチウムで標識したチミジン
を加え、さらに３７℃で１０数時間培養後、ＳＰＣを収
集し、シンチレーションカウンターでＳＰＣに取り込ま
れた³Ｈ−チミジンの量を測定した。

一般式〔Ｉ〕で示される化合物に関し、³Ｈ−チミジン
の取り込み促進・増強が認められ、ConAによるＴ細胞活
性化に対する増強作用があった。

マウス脾臓リンパ球の免疫グロブリン産生に対する作
用：前述の実験により、Ｔ細胞活性化作用があらわれた本発
明のシアル酸誘導体について、さらに免疫グロブリン産
生に対する作用をプラーク形成細胞数を測定することに
より検討した。まづＳＰＣに羊赤血球（ＳＲＢＣ）及び
夫々の一般式〔Ｉ〕の化合物を加え、３７℃で５日培養
した。得られた感作ＳＰＣに、再びＳＲＢＣおよび補体
を加えた。カニンガム・チャンバー中で３７℃３〜１２
時間培養後ＰＦＣ（プラーク形成細胞）を数えた。

ＰＦＣの減少が認められ、かつ細胞生存度は対照標準と
同等であったことから免疫グロブリン産生に対する抑制
作用の増強を確認した。

本発明の化合物は、前述の二種の試験に於て活性を示し
た。すなわち抑制Ｔ細胞の活性化により免疫グロブリン
産生を抑制したものと考えられる。

従来、例えば膠原病などの自己免疫疾患においては、抑
制Ｔ細胞の機能低下が認められている。それ故、抑制Ｔ
細胞活性化作用を有する本発明のシアル酸誘導体は免疫
調整剤として、臨床的応用の有用性が期待される。

以下、本発明を実施例により説明する。これらの実施例
は、単に本発明を説明するためのものであり、従って勿
論本発明を限定するためのものではない。

実施例１メチル５−アセトアミド−４，７，８，９−テトラ−Ｏ
−アセチル−２−Ｏ−（５−コレステン−３−β−イ
ル）−３，５−ジデオキシ−α−Ｄ−グリセロ−Ｄ−ガ
ラクト−２−ノニュロピラノソネートの合成コレステロール3.87g(10mmole)をドライベンゼン２０ｍ
に溶解し、これにＡｇＣｌＯ₄0.829g(4mmole)を加え
更にドライライト２ｇを加えて、室温で1.5時間攪拌し
た。次に式〔II〕の化合物の塩化メチレン５０ｍ溶液
を加え、室温で７日間反応させた。

反応液をセライトロ過し、瀘液を減圧乾固した。残渣を
酢酸エチルに溶解し、飽和食塩水で十分洗浄し、Ｎａ₂
ＳＯ₄で乾燥後、酢酸エチルを減圧留去した。褐色粉末
4.78ｇを得た。

このものをカラムクロマトグラフィー（シリカゲル）に
より分離精製し、標題の化合物α体244mg(16.0%)および
β体２５３mg(16.6%)を得た。

またメチル５−アセトアミド−４，７，８，９−テトラ
−Ｏ−アセチル−２，６−アンハイドロ−３，５−ジデ
オキシ−Ｄ−グリセロ−Ｄ−ガラクト−ノン−２−エン
−オネイト１０６mg(11.2%)を得た。

標題化合物の物理恒数 Mass(EI)m/z859(M⁺),800(M⁺-59) ¹H NMR CDCl₃ δ(TMS) 90MHz 0.68 3H,s,CH₃-18 0.84と0.87 6H,CH₃-26,CH₃＝27 0.90 3H.d,J＝4.5Hz,CH₃-21 0.99 3H,s,CH₃-19 1.90 3H,s,NAc 2.03,2.12,2.15 12H,3s,OAc×4 2.60 1H,dd,J＝4.5および12.6Hz,3-Heq 3.78 3H,s,COOMe 4.86 1H,m,4-H β体の物理恒数 Mass(FD)m/z860(M⁺+1) ¹H NMR CDCl₃ δ(TMS) 90MHz 0.66 3H,s,CH₃-18 0.83および0.87 6H,CH₃-26,CH₃-27 0.90 3H,d,J＝4.5Hz,CH₃-21 1.00 3H,s,CH₃-19 1.86 3H,s,NAc 2.00,2.03,2.06および2.11 12H,4s,OAc×4 2.53 1H,dd,J＝4.5および12.6Hz,3-Heq 3.78 3H,s,COOMe 実施例２５−アセトアミド−２−Ｏ−アセチル−（５−コレステ
ン−３−β−イル）−３，５−ジデオキシ−α−Ｄ−グ
リセロ−Ｄ−ガラクト−２−ノニュロピラノソン酸の合
成実施例１で得られた化合物（α体）をメタノール２ｍ
に溶解し、これにＩＮの苛性ソーダ溶液３ｍを加え、
室温で一夜攪拌した。反応液に水２ｍを加え、ダウエ
ックス(Dowe-X)50で中和後、微量の沈殿を瀘去し、瀘液
を減圧乾固した。白色粉末の標題化合物31.4mg(79.7%)
を得た。

上記と同様にして、実施例１で得られたβ体から標題化
合物の異性体であるβ体30.0mg(76.1%)を得た。

標題化合物の物理恒数 ¹H NMR CDCl₃ δ(TMS) 90MHz 0.71 3H,s,CH₃-18 0.84および0.91 6H,CH₃-26およびCH₃-27 0.95 3H.d,J＝4.5Hz,CH₃-21 1.00 3H,s,CH₃-19 2.01 3H,s,NAc 2.43 1H,dd,J＝4.5および12.6Hz,3-Heq β体の物理恒数 ¹H NMR CD₃OD δ(TMS) 90MHz 0.71 3H,s 0.86および0.92 6H,CH₃-26およびCH₃-27 0.95 3H,d,J＝4.5Hz,CH₃-21 1.00 3H,s,CH₃-19 2.00 3H,s,NAc 2.39 1H,dd,J＝4.5および12.6Hz,3-Heq

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者志鳥善保東京都武蔵野市中町３−５―24―408 (56)参考文献特開昭57−193496（ＪＰ，Ａ)

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】下記の一般式〔Ｉ〕で示されるシアル酸誘
導体。式中、Ｒ₁及びＲ₂はいずれか一方がカルボキシル基又は
メトキシカルボニル基であり、他方が下記の式で示される基であり、Ｒ₃は水素又はアセチル基であ
る。
【請求項２】一般式〔II〕で示される化合物をコレステロールと反応せしめ、次い
で必要により加水分解することを特徴とする下記の一般
式〔Ｉ〕で示されるシアル酸誘導体の製造方法。式中、Ｒ₁及びＲ₂はいずれか一方がカルボキシル基又は
メトキシカルボニル基であり、他方が下記の式で示される基であり、Ｒ₃は水素又はアセチル基であ
る。