JP7236065B1 - トリアジン誘導体を含有する医薬組成物 - Google Patents

Abstract

本発明は、コロナウイルス増殖阻害活性を示す化合物を含有する医薬組成物を提供する。TIFF0007236065000050.tif3459（式中、ＹはＮであり；Ｒ１は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；Ｒ２は、置換または非置換の６員芳香族炭素環式基であり；Ｒ３は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；－Ｘ－は、－ＮＨ－であり；ｍは、０または１であり；Ｒ５ａは、水素原子であり；Ｒ５ｂは、水素原子であり；ｎは、１であり；Ｒ４ａは、水素原子であり；Ｒ４ｂは、水素原子である）で示される化合物またはその製薬上許容される塩、を含有する医薬組成物。

Description

特許法第３０条第２項適用 公開１ 令和３年１１月２９日に、ＡＩＭＥＣＳ２０２１オンラインシンポジウムにてスライドを用いて発表。 公開２ 令和４年１月２６日に、ウェブサイト ｈｔｔｐｓ：／／ｗｗｗ．ｂｉｏｒｘｉｖ．ｏｒｇ／にてプレプリントを公表。

本発明は、コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼ阻害活性を示す化合物を含有する医薬組成物に関する。

ニドウイルス目コロナウイルス科オルトコロナウイルス亜科に属するコロナウイルスは、約３０キロベースのゲノムサイズを有し、既知のＲＮＡウイルスでは最大級の一本鎖＋鎖ＲＮＡウイルスである。コロナウイルスはアルファコロナウイルス属、ベータコロナウイルス属、ガンマコロナウイルス属およびデルタコロナウイルス属の４つに分類され、ヒトに感染するコロナウイルスとして、アルファコロナウイルス属の２種類（ＨＣｏＶ－２２９Ｅ、ＨＣｏＶ－ＮＬ６３）およびベータコロナウイルス属の５種類（ＨＣｏＶ－ＨＫＵ１、ＨＣｏＶ－ＯＣ４３、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）の計７種類が知られている。この内、４種類（ＨＣｏＶ－２２９Ｅ、ＨＣｏＶ－ＮＬ６３、ＨＣｏＶ－ＨＫＵ１、ＨＣｏＶ－ＯＣ４３）は風邪の病原体であるが、残りの３種類は重症肺炎を引き起こす重症急性呼吸器症候群（ＳＡＲＳ）コロナウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ）、中東呼吸器症候群（ＭＥＲＳ）コロナウイルス（ＭＥＲＳ－ＣｏＶ）および新型コロナウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）である。

２０１９年１２月に中国武漢で発生した新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）は急速に国際社会に蔓延し、２０２０年３月１１日にＷＨＯよりパンデミックが表明された。２０２２年９月２１日時点で確認された感染者数は６．１億人以上、死者数は６５０万人以上に達する（非特許文献１）。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の主な感染経路として飛沫感染、接触感染およびエアロゾル感染が報告されており、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２は３時間程度エアロゾルと共に空気中を漂い続け、感染力を維持することが確認されている（非特許文献２）。潜伏期間は２～１４日程度であり、発熱（８７．９％）、空咳（６７．７％）、倦怠感（３８．１％）、痰（３３．４％）等の風邪様症状が典型的である（非特許文献３）。重症例では、急性呼吸窮迫症候群や急性肺障害、間質性肺炎等による呼吸器不全が起こる。また、腎不全や肝不全などの多臓器不全も報告されている。

本邦においては、既存薬のドラッグリポジショニングから、抗ウイルス薬であるレムデシビル、抗炎症薬であるデキサメタゾン、リウマチ薬であるバリシチニブがＣＯＶＩＤ－１９に対する治療薬として承認され、２０２２年１月に抗ＩＬ－６受容体抗体であるトシリズマブが追加承認されている。また、２０２１年７月に、抗体カクテル療法であるロナプリーブ（カシリビマブ／イムデビマブ）が特例承認され、２０２１年９月にソトロビマブが特例承認され、２０２１年１２月にモルヌピラビルが特例承認された。これらの薬剤についての有効性や安全性については、十分なエビデンスが得られていない。したがって、ＣＯＶＩＤ－１９に対する治療薬、特に経口薬の創製は急務である。

コロナウイルスは、細胞に感染すると、自己複製に必要な様々なタンパク質を合成する。その中に２つのポリタンパク質があり、ウイルスゲノムを作る複製複合体、２つのプロテアーゼが含まれている。プロテアーゼは、ウイルスから合成されたポリタンパク質を切断し、それぞれのタンパク質を機能させるために不可欠な働きをする。２つのプロテアーゼのうち、ポリタンパク質の切断のほとんどを担うのが、３ＣＬプロテアーゼ（メインプロテアーゼ）である（非特許文献４）。
３ＣＬプロテアーゼを標的とした、ＣＯＶＩＤ－１９治療薬としては、２０２１年６月、Ｐｆｉｚｅｒ社によるＰＦ－００８３５２３１のプロドラッグであるＬｕｆｏｔｒｅｌｖｉｒ（ＰＦ－０７３０４８１４）のＰｈａｓｅ１ｂ試験の完了がＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖに掲載された（ＮＣＴ０４５３５１６７）。また、２０２１年３月、Ｐｆｉｚｅｒ社は新型コロナウイルス感染症に対する治療薬ＰＦ－０７３２１３３２のＰｈａｓｅ１試験を開始すると発表した。ＰＦ－００８３５２３１、ＬｕｆｏｔｒｅｌｖｉｒおよびＰＦ－０７３２１３３２の構造式は以下に示す通りで、本発明に係る化合物とは化学構造が異なる（非特許文献５、１２および１３ならびに特許文献５および６）。
ＰＦ－００８３５２３１：

Ｌｕｆｏｔｒｅｌｖｉｒ（ＰＦ－０７３０４８１４）：

ＰＦ－０７３２１３３２：

さらに２０２１年７月、ハイリスク因子を持つＣＯＶＩＤ－１９患者を対象とした、ＰＦ－０７３２１３３２およびリトナビル併用のＰｈａｓｅ２／３試験が開始されることがＣｌｉｎｉｃａｌＴｒｉａｌｓ．ｇｏｖに掲載された（ＮＣＴ０４９６０２０２）。また、２０２１年１１月、Ｐｆｉｚｅｒ社のホームページにおいて、ＰＡＸＬＯＶＩＤ（ＴＭ）（ＰＦ－０７３２１３３２；リトナビル）は、成人のハイリスク患者において、プラセボと比較して入院または死亡のリスクを８９％減少させたことが報告された（非特許文献１４）。さらに、２０２１年１２月、ＰＡＸＬＯＶＩＤ（ＴＭ）は米国で緊急使用許可が承認され、２０２２年２月１０日、パキロビッド（登録商標）パックが日本で特例承認された。

３ＣＬプロテアーゼ阻害活性を有する化合物が非特許文献５～８に開示されているが、いずれの文献においても本発明に係る化合物を含む医薬組成物は記載も示唆もされていない。
Ρ２Ｘ_３および／またはΡ２Ｘ_２／３受容体拮抗作用を有するトリアジン誘導体が特許文献１～４に開示されているが、いずれの文献においても、３ＣＬプロテアーゼ阻害活性および抗ウイルス効果を有する化合物を含む医薬組成物については記載も示唆もされていない。
抗腫瘍効果を有するトリアジン誘導体が非特許文献９～１１に開示されているが、いずれの文献においても、コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼ阻害活性および抗ウイルス効果については記載されておらず、また、本発明に係る化合物を含む医薬組成物は記載も示唆もされていない。

国際公開第２０１２／０２０７４９号 国際公開第２０１３／０８９２１２号 国際公開第２０１０／０９２９６６号 国際公開第２０１４／２０００７８号 国際公開第２０２１／２０５２９８号 国際公開第２０２１／２５０６４８号

"COVID-19 Dashboard by the Center for Systems Science and Engineering at Johns Hopkins University"、［online］、Johns Hopkins University、［２０２２年９月２１日検索］、インターネット<URL:https://coronavirus.jhu.edu/map.html> The NEW ENGLAND JOURNAL of MEDICINE（２０２０年）、３８２巻、１５６４～１５６７頁 "Report of the WHO-China Joint Mission on Coronavirus Disease 2019 (COVID-19)"、［online］、２０２０年２月２８日、ＷＨＯ、［２０２２年９月２１日検索］、インターネット<URL:https://www.who.int/docs/default-source/coronaviruse/who-china-joint-mission-on-covid-19-final-report.pdf> Science（２００３年）、３００巻、１７６３～１７６７頁 "A comparative analysis of SARS-CoV-2 antivirals characterizes 3CLpro inhibitor PF-00835231 as a potential new treatment for COVID-19"、Journal of Virology、［online］、２０２１年２月２３日、［２０２２年９月２１日検索］、インターネット<URL: https://jvi.asm.org/content/early/2021/02/19/JVI.01819-20><doi: 10.1128/JVI.01819-20> Cell Research（２０２０年）、３０巻、６７８～６９２頁 Science（２０２０年）、３６８巻、４０９～４１２頁 ACS Central Science（２０２１年）、７巻、３号、４６７～４７５頁 Cancer Treatment Reviews（１９８４年）、１１巻、Supplement 1、９９～１１０頁 Contributions to Oncology（１９８４年）、１８巻、２２１～２３４頁 Arzneimittel-Forschung（１９８４年）、１１巻、６号、６６３～６６８頁 261st Am Chem Soc (ACS) Natl Meet ・ 2021-04-05 / 2021-04-16 ・ Virtual, N/A ・ Abst 243 Science（２０２１年）、３７４巻、１５８６～１５９３頁 "Pfizer’s Novel COVID-19 Oral Antiviral Treatment Candidate Reduced Risk Of Hospitalization Or Death By 89% In Interim Analysis Of Phase 2/3 EPIC-HR Study"、［online］、２０２１年１１月５日、 Pfizer Press Release、［２０２２年９月２１日検索］、インターネット＜URL：https://www.pfizer.com/news/press-release/press-release-detail/pfizers-novel-covid-19-oral-antiviral-treatment-candidate＞

本発明の目的は、コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼ阻害活性を有する化合物を含有する医薬組成物を提供することにある。好ましくは、本発明は、抗ウイルス作用、特にコロナウイルスの増殖阻害作用を有する化合物を含有する医薬を提供する。

本発明は、以下に関する。
（１）
式（Ｉ）：

（式中、ＹはＮであり；
Ｒ^１は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
Ｒ^２は、置換または非置換の６員芳香族炭素環式基であり；
Ｒ^３は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
－Ｘ－は、－ＮＨ－であり；
ｍは、０または１であり；
Ｒ^５ａは、水素原子であり；
Ｒ^５ｂは、水素原子であり；
ｎは、１であり；
Ｒ^４ａは、水素原子であり；
Ｒ^４ｂは、水素原子である）で示される化合物またはその製薬上許容される塩、を含有する医薬組成物。
（２）Ｒ^１が、置換または非置換の５～６員芳香族複素環式基である、上記項目（１）記載の医薬組成物。
（３）Ｒ^２が、置換基群Ｇから選択される１、２または３個の置換基で置換された６員芳香族炭素環式基であり；
ここで置換基群Ｇは、ハロゲン、シアノおよびアルキルからなる群である、上記項目（１）または（２）記載の医薬組成物。
（４）Ｒ^３が置換または非置換の９～１０員芳香族複素環式基である、上記項目（１）～（３）のいずれかに記載の医薬組成物。
（５）式（Ｉ）で示される化合物が、化合物Ｉ－００３、化合物Ｉ－００５、化合物Ｉ－０１７および化合物Ｉ－０２３からなる群から選択される、上記項目（１）記載の化合物またはその製薬上許容される塩、を含有する医薬組成物。
（６）３ＣＬプロテアーゼ阻害剤である、上記項目（１）～（５）のいずれかに記載の医薬組成物。
（７）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス増殖を阻害するために用いられる、上記項目（１）～（６）のいずれかに記載の医薬組成物。
（８）新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療剤および／または予防剤である、上記項目（１）～（７）のいずれかに記載の医薬組成物。
（９）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の重症化抑制のために用いられる、上記項目（１）～（８）のいずれかに記載の医薬組成物。
（１０）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の症状が発現してから、または、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２陽性判定から、７２時間以内に投与を開始するように用いられる、上記項目（１）～（９）のいずれかに記載の医薬組成物。
（１１）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の症状が発現してから、または、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２陽性判定から、２４時間以内に投与を開始するように用いられる、上記項目（１）～（９）のいずれかに記載の医薬組成物。
（１２）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の症状が発現してから、または、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２陽性判定から、１２０時間以内に投与を開始するように用いられる、上記項目（１）～（９）のいずれかに記載の医薬組成物。
（１３）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の症状が、ＣＯＶＩＤ－１９の１２症状のうちいずれか１項目以上を有し、当該症状が中等度以上の症状である、上記項目（１）～（１２）のいずれかに記載の医薬組成物。
（１４）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス伝播を抑制するために用いられる、上記項目（１）～（９）のいずれかに記載の医薬組成物。

（１５）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス増殖阻害方法であって、新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療および／または予防を必要とする個体に、式（Ｉ）：

（式中、ＹはＮであり；
Ｒ^１は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
Ｒ^２は、置換または非置換の６員芳香族炭素環式基であり；
Ｒ^３は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
－Ｘ－は、－ＮＨ－であり；
ｍは、０または１であり；
Ｒ^５ａは、水素原子であり；
Ｒ^５ｂは、水素原子であり；
ｎは、１であり；
Ｒ^４ａは、水素原子であり；
Ｒ^４ｂは、水素原子である）で示される化合物またはその製薬上許容される塩、を投与することを含む、
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス増殖阻害方法。
（１６）Ｒ^１が、置換または非置換の５～６員芳香族複素環式基である、上記項目（１５）記載のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス増殖阻害方法。
（１７）Ｒ^２が、置換基群Ｇから選択される１、２または３個の置換基で置換された６員芳香族炭素環式基であり；
ここで置換基群Ｇは、ハロゲン、シアノおよび非置換アルキルからなる群である、上記項目（１５）または（１６）記載のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス増殖阻害方法。
（１８）Ｒ^３が、置換または非置換の９～１０員芳香族複素環式基である、上記項目（１５）～（１７）のいずれかに記載のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス増殖阻害方法。
（１９）式（Ｉ）で示される化合物が、化合物Ｉ－００３、化合物Ｉ－００５、化合物Ｉ－０１７および化合物Ｉ－０２３からなる群から選択される、上記項目（１５）記載のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス増殖阻害方法。

（２０）新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療および／または予防方法であって、新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療および／または予防を必要とする個体に、式（Ｉ）：

（式中、ＹはＮであり；
Ｒ^１は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
Ｒ^２は、置換または非置換の６員芳香族炭素環式基であり；
Ｒ^３は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
－Ｘ－は、－ＮＨ－であり；
ｍは、０または１であり；
Ｒ^５ａは、水素原子であり；
Ｒ^５ｂは、水素原子であり；
ｎは、１であり；
Ｒ^４ａは、水素原子であり；
Ｒ^４ｂは、水素原子である）で示される化合物またはその製薬上許容される塩、を投与することを含む、
新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療および／または予防方法。
（２１）Ｒ^１が、置換または非置換の５～６員芳香族複素環式基である、上記項目（２０）記載の新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療および／または予防方法。
（２２）Ｒ^２が、置換基群Ｇから選択される１、２または３個の置換基で置換された６員芳香族炭素環式基であり；
ここで置換基群Ｇは、ハロゲン、シアノおよび非置換アルキルからなる群である、上記項目（２０）または（２１）記載の新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療および／または予防方法。
（２３）Ｒ^３が、置換または非置換の９～１０員芳香族複素環式基である、上記項目（２０）～（２２）のいずれかに記載の新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療および／または予防方法。
（２４）式（Ｉ）で示される化合物が、化合物Ｉ－００３、化合物Ｉ－００５、化合物Ｉ－０１７および化合物Ｉ－０２３からなる群から選択される、上記項目（２０）記載の新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療および／または予防方法。

（２５）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の重症化抑制方法であって、新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療および／または予防を必要とする個体に、式（Ｉ）：

（式中、ＹはＮであり；
Ｒ^１は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
Ｒ^２は、置換または非置換の６員芳香族炭素環式基であり；
Ｒ^３は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
－Ｘ－は、－ＮＨ－であり；
ｍは、０または１であり；
Ｒ^５ａは、水素原子であり；
Ｒ^５ｂは、水素原子であり；
ｎは、１であり；
Ｒ^４ａは、水素原子であり；
Ｒ^４ｂは、水素原子である）で示される化合物またはその製薬上許容される塩、を投与することを含む、
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の重症化抑制方法。
（２６）Ｒ^１が、置換または非置換の５～６員芳香族複素環式基である、上記項目（２５）記載のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の重症化抑制方法。
（２７）Ｒ^２が、置換基群Ｇから選択される１、２または３個の置換基で置換された６員芳香族炭素環式基であり；
ここで置換基群Ｇは、ハロゲン、シアノおよび非置換アルキルからなる群である、上記項目（２５）または（２６）記載のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の重症化抑制方法。
（２８）Ｒ^３が、置換または非置換の９～１０員芳香族複素環式基である、上記項目（２５）～（２７）のいずれかに記載のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の重症化抑制方法。
（２９）式（Ｉ）で示される化合物が、化合物Ｉ－００３、化合物Ｉ－００５、化合物Ｉ－０１７および化合物Ｉ－０２３からなる群から選択される、上記項目（２５）記載のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の重症化抑制方法。

（３０）新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療および／または予防方法であって、新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療および／または予防を必要とする個体に、式（Ｉ）：

（式中、ＹはＮであり；
Ｒ^１は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
Ｒ^２は、置換または非置換の６員芳香族炭素環式基であり；
Ｒ^３は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
－Ｘ－は、－ＮＨ－であり；
ｍは、０または１であり；
Ｒ^５ａは、水素原子であり；
Ｒ^５ｂは、水素原子であり；
ｎは、１であり；
Ｒ^４ａは、水素原子であり；
Ｒ^４ｂは、水素原子である）で示される化合物またはその製薬上許容される塩、をＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の症状が発現してから、または、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２陽性判定から、７２時間以内に投与することを含む、
新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療方法。
（３１）Ｒ^１が、置換または非置換の５～６員芳香族複素環式基である、上記項目（３０）記載の新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療方法。
（３２）Ｒ^２が、置換基群Ｇから選択される１、２または３個の置換基で置換された６員芳香族炭素環式基であり；
ここで置換基群Ｇは、ハロゲン、シアノおよび非置換アルキルからなる群である、上記項目（３０）または（３１）記載の新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療方法。
（３３）Ｒ^３が、置換または非置換の９～１０員芳香族複素環式基である、上記項目（３０）～（３２）のいずれかに記載の新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療方法。
（３４）式（Ｉ）で示される化合物が、化合物Ｉ－００３、化合物Ｉ－００５、化合物Ｉ－０１７および化合物Ｉ－０２３からなる群から選択される、上記項目（３０）記載の新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療方法。

（３５）新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療および／または予防方法であって、新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療および／または予防を必要とする個体に、式（Ｉ）：

（式中、ＹはＮであり；
Ｒ^１は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
Ｒ^２は、置換または非置換の６員芳香族炭素環式基であり；
Ｒ^３は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
－Ｘ－は、－ＮＨ－であり；
ｍは、０または１であり；
Ｒ^５ａは、水素原子であり；
Ｒ^５ｂは、水素原子であり；
ｎは、１であり；
Ｒ^４ａは、水素原子であり；
Ｒ^４ｂは、水素原子である）で示される化合物またはその製薬上許容される塩、をＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の症状が発現してから、または、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２陽性判定から、２４時間以内に投与することを含む、
新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療方法。
（３６）Ｒ^１が、置換または非置換の５～６員芳香族複素環式基である、上記項目（３５）記載の新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療方法。
（３７）Ｒ^２が、置換基群Ｇから選択される１、２または３個の置換基で置換された６員芳香族炭素環式基であり；
ここで置換基群Ｇは、ハロゲン、シアノおよび非置換アルキルからなる群である、上記項目（３５）または（３６）記載の新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療方法。
（３８）Ｒ^３が、置換または非置換の９～１０員芳香族複素環式基である、上記項目（３５）～（３７）のいずれかに記載の新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療方法。
（３９）式（Ｉ）で示される化合物が、化合物Ｉ－００３、化合物Ｉ－００５、化合物Ｉ－０１７および化合物Ｉ－０２３からなる群から選択される、上記項目（３５）記載の新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療方法。

（４０）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス伝播を抑制する方法であって、新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療および／または予防を必要とする個体に、式（Ｉ）：

（式中、ＹはＮであり；
Ｒ^１は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
Ｒ^２は、置換または非置換の６員芳香族炭素環式基であり；
Ｒ^３は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
－Ｘ－は、－ＮＨ－であり；
ｍは、０または１であり；
Ｒ^５ａは、水素原子であり；
Ｒ^５ｂは、水素原子であり；
ｎは、１であり；
Ｒ^４ａは、水素原子であり；
Ｒ^４ｂは、水素原子である）で示される化合物またはその製薬上許容される塩、を投与することを含む、
ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス伝播を抑制する方法。
（４１）Ｒ^１が、置換または非置換の５～６員芳香族複素環式基である、上記項目（４０）記載のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス伝播を抑制する方法。
（４２）Ｒ^２が、置換基群Ｇから選択される１、２または３個の置換基で置換された６員芳香族炭素環式基であり；
ここで置換基群Ｇは、ハロゲン、シアノおよび非置換アルキルからなる群である、上記項目（４０）または（４１）記載のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス伝播を抑制する方法。
（４３）Ｒ^３が、置換または非置換の９～１０員芳香族複素環式基である、上記項目（４０）～（４２）のいずれかに記載のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス伝播を抑制する方法。
（４４）式（Ｉ）で示される化合物が、化合物Ｉ－００３、化合物Ｉ－００５、化合物Ｉ－０１７および化合物Ｉ－０２３からなる群から選択される、上記項目（４０）記載のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス伝播を抑制する方法。

（４５）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス増殖阻害のための、式（Ｉ）：

（式中、ＹはＮであり；
Ｒ^１は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
Ｒ^２は、置換または非置換の６員芳香族炭素環式基であり；
Ｒ^３は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
－Ｘ－は、－ＮＨ－であり；
ｍは、０または１であり；
Ｒ^５ａは、水素原子であり；
Ｒ^５ｂは、水素原子であり；
ｎは、１であり；
Ｒ^４ａは、水素原子であり；
Ｒ^４ｂは、水素原子である）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の使用。
（４６）Ｒ^１が、置換または非置換の５～６員芳香族複素環式基である、上記項目（４５）記載の使用。
（４７）Ｒ^２が、置換基群Ｇから選択される１、２または３個の置換基で置換された６員芳香族炭素環式基であり；
ここで置換基群Ｇは、ハロゲン、シアノおよび非置換アルキルからなる群である、上記項目（４５）または（４６）記載の使用。
（４８）Ｒ^３が、置換または非置換の９～１０員芳香族複素環式基である、上記項目（４５）～（４７）のいずれかに記載の使用。
（４９）式（Ｉ）で示される化合物が、化合物Ｉ－００３、化合物Ｉ－００５、化合物Ｉ－０１７および化合物Ｉ－０２３からなる群から選択される、上記項目（４５）記載の使用。

（５０）新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療および／または予防用医薬を製造するための、式（Ｉ）：

（式中、ＹはＮであり；
Ｒ^１は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
Ｒ^２は、置換または非置換の６員芳香族炭素環式基であり；
Ｒ^３は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
－Ｘ－は、－ＮＨ－であり；
ｍは、０または１であり；
Ｒ^５ａは、水素原子であり；
Ｒ^５ｂは、水素原子であり；
ｎは、１であり；
Ｒ^４ａは、水素原子であり；
Ｒ^４ｂは、水素原子である）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の使用。
（５１）Ｒ^１が、置換または非置換の５～６員芳香族複素環式基である、上記項目（５０）記載の使用。
（５２）Ｒ^２が、置換基群Ｇから選択される１、２または３個の置換基で置換された６員芳香族炭素環式基であり；
ここで置換基群Ｇは、ハロゲン、シアノおよび非置換アルキルからなる群である、上記項目（５０）または（５１）記載の使用。
（５３）Ｒ^３が、置換または非置換の９～１０員芳香族複素環式基である、上記項目（５０）～（５２）のいずれかに記載の使用。
（５４）式（Ｉ）で示される化合物が、化合物Ｉ－００３、化合物Ｉ－００５、化合物Ｉ－０１７および化合物Ｉ－０２３からなる群から選択される、上記項目（５０）記載の使用。

（５５）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の重症化抑制のための、式（Ｉ）：

（式中、ＹはＮであり；
Ｒ^１は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
Ｒ^２は、置換または非置換の６員芳香族炭素環式基であり；
Ｒ^３は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
－Ｘ－は、－ＮＨ－であり；
ｍは、０または１であり；
Ｒ^５ａは、水素原子であり；
Ｒ^５ｂは、水素原子であり；
ｎは、１であり；
Ｒ^４ａは、水素原子であり；
Ｒ^４ｂは、水素原子である）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の使用。
（５６）Ｒ^１が、置換または非置換の５～６員芳香族複素環式基である、上記項目（５５）記載の使用。
（５７）Ｒ^２が、置換基群Ｇから選択される１、２または３個の置換基で置換された６員芳香族炭素環式基であり；
ここで置換基群Ｇは、ハロゲン、シアノおよび非置換アルキルからなる群である、上記項目（５５）または（５６）記載の使用。
（５８）Ｒ^３が、置換または非置換の９～１０員芳香族複素環式基である、上記項目（５５）～（５７）のいずれかに記載の使用。
（５９）式（Ｉ）で示される化合物が、化合物Ｉ－００３、化合物Ｉ－００５、化合物Ｉ－０１７および化合物Ｉ－０２３からなる群から選択される、上記項目（５５）記載の使用。

（６０）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の症状が発現してから、または、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２陽性判定から、７２時間以内に投与するための、式（Ｉ）：

（式中、ＹはＮであり；
Ｒ^１は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
Ｒ^２は、置換または非置換の６員芳香族炭素環式基であり；
Ｒ^３は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
－Ｘ－は、－ＮＨ－であり；
ｍは、０または１であり；
Ｒ^５ａは、水素原子であり；
Ｒ^５ｂは、水素原子であり；
ｎは、１であり；
Ｒ^４ａは、水素原子であり；
Ｒ^４ｂは、水素原子である）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の使用。
（６１）Ｒ^１が、置換または非置換の５～６員芳香族複素環式基である、上記項目（６０）記載の使用。
（６２）Ｒ^２が、置換基群Ｇから選択される１、２または３個の置換基で置換された６員芳香族炭素環式基であり；
ここで置換基群Ｇは、ハロゲン、シアノおよび非置換アルキルからなる群である、上記項目（６０）または（６１）記載の使用。
（６３）Ｒ^３が、置換または非置換の９～１０員芳香族複素環式基である、上記項目（６０）～（６２）のいずれかに記載の使用。
（６４）式（Ｉ）で示される化合物が、化合物Ｉ－００３、化合物Ｉ－００５、化合物Ｉ－０１７および化合物Ｉ－０２３からなる群から選択される、上記項目（６０）記載の使用。

（６５）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の症状が発現してから、または、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２陽性判定から、２４時間以内に投与するための、式（Ｉ）：

（式中、ＹはＮであり；
Ｒ^１は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
Ｒ^２は、置換または非置換の６員芳香族炭素環式基であり；
Ｒ^３は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
－Ｘ－は、－ＮＨ－であり；
ｍは、０または１であり；
Ｒ^５ａは、水素原子であり；
Ｒ^５ｂは、水素原子であり；
ｎは、１であり；
Ｒ^４ａは、水素原子であり；
Ｒ^４ｂは、水素原子である）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の使用。
（６６）Ｒ^１が、置換または非置換の５～６員芳香族複素環式基である、上記項目（６５）記載の使用。
（６７）Ｒ^２が、置換基群Ｇから選択される１、２または３個の置換基で置換された６員芳香族炭素環式基であり；
ここで置換基群Ｇは、ハロゲン、シアノおよび非置換アルキルからなる群である、上記項目（６５）または（６６）記載の使用。
（６８）Ｒ^３が、置換または非置換の９～１０員芳香族複素環式基である、上記項目（６５）～（６７）のいずれかに記載の使用。
（６９）式（Ｉ）で示される化合物が、化合物Ｉ－００３、化合物Ｉ－００５、化合物Ｉ－０１７および化合物Ｉ－０２３からなる群から選択される、上記項目（６５）記載の使用。

（７０）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス伝播を抑制するための、式（Ｉ）：

（式中、ＹはＮであり；
Ｒ^１は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
Ｒ^２は、置換または非置換の６員芳香族炭素環式基であり；
Ｒ^３は、置換または非置換の芳香族複素環式基であり；
－Ｘ－は、－ＮＨ－であり；
ｍは、０または１であり；
Ｒ^５ａは、水素原子であり；
Ｒ^５ｂは、水素原子であり；
ｎは、１であり；
Ｒ^４ａは、水素原子であり；
Ｒ^４ｂは、水素原子である）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の使用。
（７１）Ｒ^１が、置換または非置換の５～６員芳香族複素環式基である、上記項目（７０）記載の使用。
（７２）Ｒ^２が、置換基群Ｇから選択される１、２または３個の置換基で置換された６員芳香族炭素環式基であり；
ここで置換基群Ｇは、ハロゲン、シアノおよび非置換アルキルからなる群である、上記項目（７０）または（７１）記載の使用。
（７３）Ｒ^３が、置換または非置換の９～１０員芳香族複素環式基である、上記項目（７０）～（７２）のいずれかに記載の使用。
（７４）式（Ｉ）で示される化合物が、化合物Ｉ－００３、化合物Ｉ－００５、化合物Ｉ－０１７および化合物Ｉ－０２３からなる群から選択される、上記項目（７０）記載の使用。

本発明に係る化合物は、コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼに対する阻害活性を有し、本発明に係る化合物を含有する医薬組成物は、コロナウイルス感染症の治療剤および／または予防剤として有用である。
また、本発明に係る化合物のうち、化合物（Ｉ－００３）または化合物（Ｉ－００５）を含有する医薬組成物は、医薬原体として有用である。
さらに、化合物（Ｉ－００３）のｐ－トルエンスルホン酸塩結晶または化合物（Ｉ－００５）のフマル酸共結晶を含有する医薬組成物は、新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療剤として非常に有用である。

式（Ｉ－Ａ）で示される化合物のｐ－トルエンスルホン酸塩Ｉ形結晶（Ｆｏｒｍ Ｉ）の粉末Ｘ線回折パターンを示す。横軸は２θ（°）で、縦軸は強度（Ｃｏｕｎｔ）を表す。 式（Ｉ－Ａ）で示される化合物のｐ－トルエンスルホン酸塩Ｉ形結晶の非対称単位中の構造を示す。 式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形（Ｆｏｒｍ Ｉ）の粉末Ｘ線回折パターンを示す。横軸は２θ（°）で、縦軸は強度（Ｃｏｕｎｔ）を表す。 式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形（Ｆｏｒｍ Ｉ）の非対称単位中の構造を示す。 ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ７－５０１／２０２１感染マウス（１．００×１０^４ ＴＣＩＤ_５０／マウスを経鼻接種）について、媒体を一日二回または（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を単回で感染直後から投与した際の、感染１日後の肺内ウイルス力価を示す。縦軸は肺内ウイルス力価、横軸は各投与群を示す。 ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ７－５０１／２０２１感染マウス（１．００×１０^４ ＴＣＩＤ_５０／マウスを経鼻接種）について、媒体および（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を一日二回で感染直後から投与した際の、感染１日後の肺内ウイルス力価を示す。縦軸は肺内ウイルス力価、横軸は各投与群を示す。 ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ７－５０１／２０２１感染マウス（１．００×１０^４ ＴＣＩＤ_５０／マウスを経鼻接種）について、媒体および（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を一日二回で感染１日後から２日間投与した際の、感染１－３日後の肺内ウイルス力価を示す。縦軸は肺内ウイルス力価、横軸は感染後からの日数を示す。 ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ７－５０１／２０２１感染マウス（１．００×１０^４ ＴＣＩＤ_５０／マウスを経鼻接種）について、媒体および（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を一日二回で感染３日後から２日間投与した際の、感染１－５日後の肺内ウイルス力価を示す。縦軸は肺内ウイルス力価、横軸は感染後からの日数を示す。 ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ７－５０１／２０２１感染マウス（１．００×１０^４ ＴＣＩＤ_５０／マウスを経鼻接種）について、媒体および（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を一日三回で感染１日後から２日間投与した際の、感染１－３日後の肺内ウイルス力価を示す。縦軸は肺内ウイルス力価、横軸は感染後からの日数を示す。 ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ７－５０１／２０２１感染マウス（１．００×１０^５ ＴＣＩＤ_５０／マウスを経鼻接種、高週齢３５－４５週齢リタイヤマウス）について、媒体および（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を一日二回で感染１日後から５日間投与した際の、感染７日後までの体重変動を示す。縦軸は感染当日の体重を１００％とした場合の体重変動（％）、横軸は感染後からの日数を示す。 ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ７－５０１／２０２１感染マウス（１．００×１０^５ ＴＣＩＤ_５０／マウスを経鼻接種、高週齢３５－４５週齢リタイヤマウス）について、媒体および（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を一日二回で感染１日後から５日間投与した際の、感染７日後までの生存率を示す。縦軸は生存率（％）、横軸は感染後からの日数を示す。 ｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ／ＷＫ－５２１／２０２０株マウス馴化株ＭＡ－Ｐ１０感染マウス（１．００×１０^３ ｏｒ １．００×１０^４ ＴＣＩＤ_５０／マウスを経鼻接種、１５週齢マウス）について、媒体および（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を一日二回で感染１日後から５日間投与した際の、感染７日後までの体重変動を示す。縦軸は感染当日の体重を１００％とした場合の体重変動（％）、横軸は感染後からの日数を示す。 ｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ／ＷＫ－５２１／２０２０株マウス馴化株ＭＡ－Ｐ１０感染マウス（１．００×１０^３ ｏｒ １．００×１０^４ ＴＣＩＤ_５０／マウスを経鼻接種、１５週齢マウス）について、媒体および（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を一日二回で感染１日後から５日間投与した際の、感染７日後までの生存率を示す。縦軸は生存率（％）、横軸は感染後からの日数を示す。 ｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ／ＷＫ－５２１／２０２０株マウス馴化株ＭＡ－Ｐ１０感染マウス（１．００×１０^３ ＴＣＩＤ_５０／マウスを経鼻接種、高週齢３５－４５週齢リタイヤマウス）について、媒体および（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を一日二回で感染１日後から５日間投与した際の、感染７日後までの体重変動を示す。縦軸は感染当日の体重を１００％とした場合の体重変動（％）、横軸は感染後からの日数を示す。 ｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ／ＷＫ－５２１／２０２０株マウス馴化株ＭＡ－Ｐ１０感染マウス（１．００×１０^３ ＴＣＩＤ_５０／マウスを経鼻接種、高週齢３５－４５週齢リタイヤマウス）について、媒体および（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を一日二回で感染１日後から５日間投与した際の、感染７日後までの生存率を示す。縦軸は生存率（％）、横軸は感染後からの日数を示す。 ｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ１１－９２７／２０２１感染ハムスター（５．００×１０³ＰＦＵ／ハムスターを経鼻接種）とウイルスを接種しない投薬ハムスターを同居させたときの感染６日後の投薬ハムスターの肺内ウイルス力価を示す。投薬ハムスターは媒体および（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を一日二回で感染直後から投与した。縦軸は肺内ウイルス力価、横軸は各投与群を示す。 ｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ１１－９２７／２０２１感染ハムスター（５．００×１０³ＰＦＵ／ハムスターを経鼻接種）に化合物を投薬し、ウイルスを接種しない非感染ハムスターを感染直後から同居させたときの感染６日後の感染（Ｉｎｆｅｃｔｅｄ）及び非感染（Ｃｏｎｔａｃｔ）ハムスターの肺内ウイルス力価を示す。投薬ハムスターは媒体および（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を一日二回で感染直後から投与した。縦軸は肺内ウイルス力価、横軸は各投与群を示す。 ｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ１１－９２７／２０２１感染ハムスター（１．００×１０^２ＴＣＩＤ_５０／ハムスターを経鼻接種）に化合物を投薬し、ウイルスを接種しない非感染ハムスターを感染２日後から同居させたときの感染５日後の感染（Ｉｎｆｅｃｔｅｄ）及び非感染（Ｃｏｎｔａｃｔ）ハムスターの肺内ウイルス力価を示す。投薬ハムスターは媒体および（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を一日二回で感染１日後から投与した。縦軸は肺内ウイルス力価、横軸は各投与群を示す。 ｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ１１－９２７／２０２１感染ハムスター（１．００×１０^２ＴＣＩＤ_５０／ハムスターを経鼻接種）に化合物を投薬し、ウイルスを接種しない非感染ハムスターを感染２日後から同居させたときの感染５日後の感染（Ｉｎｆｅｃｔｅｄ）及び非感染（Ｃｏｎｔａｃｔ）ハムスターの肺内ウイルス力価を示す。投薬ハムスターは媒体および（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を一日二回で感染１日後から投与した。縦軸は鼻甲介中ウイルス力価、横軸は各投与群を示す。 ｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ／ＷＫ－５２１／２０２０株マウス馴化株ＭＡ－Ｐ１０感染マウス（３．００×１０^２ＴＣＩＤ_５０／マウスを経鼻接種、３７－５７週齢マウス）について、媒体および（Ｉ－Ｂ）で示される化合物を感染２４時間前に皮下投与した際の、感染１４日後までの体重変動を示す。縦軸は感染当日の体重を１００％とした場合の体重変動（％）、横軸は感染後からの日数を示す。 ｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ／ＷＫ－５２１／２０２０株マウス馴化株ＭＡ－Ｐ１０感染マウス（３．００×１０^２ＴＣＩＤ_５０／マウスを経鼻接種、３７－５７週齢マウス）について、媒体および（Ｉ－Ｂ）で示される化合物を感染２４時間前に皮下投与した際の、感染１４日後までの生存率を示す。縦軸は生存率（％）、横軸は感染後からの日数を示す。

以下に本明細書において用いられる各用語の意味を説明する。各用語は特に断りのない限り、単独で用いられる場合も、または他の用語と組み合わせて用いられる場合も、同一の意味で用いられる。
「からなる」という用語は、構成要件のみを有することを意味する。
「含む」という用語は、構成要件に限定されず、記載されていない要素を排除しないことを意味する。
以下、本発明について実施形態を示しながら説明する。本明細書の全体にわたり、単数形の表現は、特に言及しない限り、その複数形の概念をも含むことが理解されるべきである。従って、単数形の冠詞（例えば、英語の場合は「ａ」、「ａｎ」、「ｔｈｅ」など）は、特に言及しない限り、その複数形の概念をも含むことが理解されるべきである。
また、本明細書において使用される用語は、特に言及しない限り、当上記分野で通常用いられる意味で用いられることが理解されるべきである。したがって、他に定義されない限り、本明細書中で使用される全ての専門用語および科学技術用語は、本発明の属する分野の当業者によって一般的に理解されるのと同じ意味を有する。矛盾する場合、本明細書（定義を含めて）が優先する。

「ハロゲン」とは、フッ素原子、塩素原子、臭素原子、およびヨウ素原子を包含する。特にフッ素原子および塩素原子が好ましい。

「アルキル」とは、炭素数１～１５、好ましくは炭素数１～１０、より好ましくは炭素数１～６、さらに好ましくは炭素数１～４の直鎖又は分枝状の炭化水素基を包含する。例えば、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ｎ－ペンチル、イソペンチル、ネオペンチル、ｎ－ヘキシル、イソヘキシル、ｎ－へプチル、イソヘプチル、ｎ－オクチル、イソオクチル、ｎ－ノニル、ｎ－デシル等が挙げられる。
「アルキル」の好ましい態様として、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｎ－ブチル、イソブチル、ｓｅｃ－ブチル、ｔｅｒｔ－ブチル、ｎ－ペンチルが挙げられる。さらに好ましい態様として、メチル、エチル、ｎ－プロピル、イソプロピル、ｔｅｒｔ－ブチルが挙げられる。

「アルケニル」とは、任意の位置に１以上の二重結合を有する、炭素数２～１５、好ましくは炭素数２～１０、より好ましくは炭素数２～６、さらに好ましくは炭素数２～４の直鎖又は分枝状の炭化水素基を包含する。例えば、ビニル、アリル、プロペニル、イソプロペニル、ブテニル、イソブテニル、プレニル、ブタジエニル、ペンテニル、イソペンテニル、ペンタジエニル、ヘキセニル、イソヘキセニル、ヘキサジエニル、ヘプテニル、オクテニル、ノネニル、デセニル、ウンデセニル、ドデセニル、トリデセニル、テトラデセニル、ペンタデセニル等が挙げられる。
「アルケニル」の好ましい態様として、ビニル、アリル、プロペニル、イソプロペニル、ブテニルが挙げられる。さらに好ましい態様として、エテニル、ｎ－プロペニル、等が挙げられる。

「アルキニル」とは、任意の位置に１以上の三重結合を有する、炭素数２～１０、好ましくは炭素数２～８、さらに好ましくは炭素数２～６、さらに好ましくは炭素数２～４の直鎖又は分枝状の炭化水素基を包含する。さらに任意の位置に二重結合を有していてもよい。例えば、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニル、ヘキシニル、ヘプチニル、オクチニル、ノニニル、デシニル等を包含する。
「アルキニル」の好ましい態様として、エチニル、プロピニル、ブチニル、ペンチニルが挙げられる。さらに好ましい態様として、エチニル、プロピニル等が挙げられる。

「芳香族炭素環式基」とは、単環または２環以上の、環状芳香族炭化水素基を意味する。例えば、フェニル、ナフチル、アントリル、フェナントリル等が挙げられる。
「芳香族炭素環式基」の好ましい態様として、フェニルが挙げられる。
「６員芳香族炭素環式基」とは、単環の環状芳香族炭化水素基を意味する。例えば、フェニルが挙げられる。

「非芳香族炭素環式基」とは、単環または２環以上の、環状飽和炭化水素基または環状非芳香族不飽和炭化水素基を意味する。２環以上の「非芳香族炭素環式基」は、単環または２環以上の非芳香族炭素環式基に、上記「芳香族炭素環式基」における環が縮合したものも包含する。
さらに、「非芳香族炭素環式基」は、以下のように架橋している基、またはスピロ環を形成する基も包含する。

単環の非芳香族炭素環式基としては、炭素数３～１６が好ましく、より好ましくは炭素数３～１２、さらに好ましくは炭素数４～８である。例えば、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロノニル、シクロデシル、シクロプロペニル、シクロブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘプテニル、シクロヘキサジエニル等が挙げられる。
２環以上の非芳香族炭素環式基としては、炭素数８～２０が好ましく、より好ましくは炭素数８～１６である。例えば、インダニル、インデニル、アセナフチル、テトラヒドロナフチル、フルオレニル等が挙げられる。

「芳香族複素環式基」とは、Ｏ、ＳおよびＮから任意に選択される同一または異なるヘテロ原子を環内に１以上有する、単環または２環以上の、芳香族環式基を意味する。
２環以上の芳香族複素環式基は、単環または２環以上の芳香族複素環式基に、上記「芳香族炭素環式基」における環が縮合したものも包含し、該結合手はいずれの環に有していても良い。
単環の芳香族複素環式基としては、５～８員が好ましく、より好ましくは５員または６員である。５員芳香族複素環式基としては、例えば、ピロリル、イミダゾリル、ピラゾリル、トリアゾリル、テトラゾリル、フリル、チエニル、イソオキサゾリル、オキサゾリル、オキサジアゾリル、イソチアゾリル、チアゾリル、チアジアゾリル等が挙げられる。６員芳香族複素環式基としては、例えば、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、トリアジニル等が挙げられる。
２環の芳香族複素環式基としては、８～１０員が好ましく、より好ましくは９員または１０員である。例えば、インドリル、イソインドリル、インダゾリル、インドリジニル、キノリニル、イソキノリニル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、ナフチリジニル、キノキサリニル、プリニル、プテリジニル、ベンズイミダゾリル、ベンズイソオキサゾリル、ベンズオキサゾリル、ベンズオキサジアゾリル、ベンズイソチアゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾフリル、イソベンゾフリル、ベンゾチエニル、ベンゾトリアゾリル、イミダゾピリジル、トリアゾロピリジル、イミダゾチアゾリル、ピラジノピリダジニル、オキサゾロピリジル、チアゾロピリジル等が挙げられる。９員芳香族複素環式基としては、インドリル、イソインドリル、インダゾリル、インドリジニル、プリニル、ベンズイミダゾリル、ベンズイソオキサゾリル、ベンズオキサゾリル、ベンズオキサジアゾリル、ベンズイソチアゾリル、ベンゾチアゾリル、ベンゾチアジアゾリル、ベンゾトリアゾリル、ベンゾフラニル、イミダゾピリジル、トリアゾロピリジル、オキサゾロピリジル、チアゾロピリジル等が挙げられる。１０員芳香族複素環式基としては、キノリニル、イソキノリニル、シンノリニル、フタラジニル、キナゾリニル、ナフチリジニル、キノキサリニル、プテリジニル、ピラジノピリダジニル等が挙げられる。
３環以上の芳香族複素環式基としては、１３～１５員が好ましい。例えば、カルバゾリル、アクリジニル、キサンテニル、フェノチアジニル、フェノキサチイニル、フェノキサジニル、ジベンゾフリル等が挙げられる。
「５～６員芳香族複素環式基」とは、上記「芳香族複素環式基」のうち、５員または６員の芳香族複素環式基を意味する。
「９～１０員芳香族複素環式基」とは、上記「芳香族複素環式基」のうち、９員または１０員の芳香族複素環式基を意味する。

「非芳香族複素環式基」とは、Ｏ、ＳおよびＮから任意に選択される同一または異なるヘテロ原子を環内に１以上有する、単環または２環以上の、非芳香族環式基を意味する。２環以上の非芳香族複素環式基は、単環または２環以上の非芳香族複素環式基に、上記「芳香族炭素環式基」、「非芳香族炭素環式基」、および／または「芳香族複素環式基」におけるそれぞれの環が縮合したもの、さらに、単環または２環以上の非芳香族炭素環式基に、上記「芳香族複素環式基」における環が縮合したものも包含し、該結合手はいずれの環に有していても良い。
さらに、「非芳香族複素環式基」は、以下のように架橋している基、またはスピロ環を形成する基も包含する。

単環の非芳香族複素環式基としては、３～８員が好ましく、より好ましくは５員または６員である。
３員非芳香族複素環式基としては、例えば、チイラニル、オキシラニル、アジリジニルが挙げられる。４員非芳香族複素環式基としては、例えば、オキセタニル、アゼチジニルが挙げられる。５員非芳香族複素環式基としては、例えば、オキサチオラニル、チアゾリジニル、ピロリジニル、ピロリニル、イミダゾリジニル、イミダゾリニル、ピラゾリジニル、ピラゾリニル、テトラヒドロフリル、ジヒドロチアゾリル、テトラヒドロイソチアゾリル、ジオキソラニル、ジオキソリル、チオラニル等が挙げられる。６員非芳香族複素環式基としては、例えば、ジオキサニル、チアニル、ピペリジル、ピペラジニル、モルホリニル、モルホリノ、チオモルホリニル、チオモルホリノ、ジヒドロピリジル、テトラヒドロピリジル、テトラヒドロピラニル、ジヒドロオキサジニル、テトラヒドロピリダジニル、ヘキサヒドロピリミジニル、ジオキサジニル、チイニル、チアジニル等が挙げられる。７員非芳香族複素環式基としては、例えば、ヘキサヒドロアゼピニル、テトラヒドロジアゼピニル、オキセパニルが挙げられる。
２環以上の非芳香族複素環式基としては、８～２０員が好ましく、より好ましくは８～１３員、さらに好ましくは８～１０員である。例えば、インドリニル、イソインドリニル、クロマニル、イソクロマニル等が挙げられる。

本明細書中、「置換基群αで置換されていてもよい」とは、「置換基群αから選択される1以上の基で置換されていてもよい」ことを意味する。置換基群β、γおよびγ’についても同様である。

置換基群α：ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、アルキルオキシ、ハロアルキルオキシ、アルケニルオキシ、アルキニルオキシ、スルファニル、およびシアノ。

置換基群β：ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、シアノ、置換基群αで置換されていてもよいアルキル、置換基群αで置換されていてもよいアルケニル、置換基群αで置換されていてもよいアルキニル、置換基群αで置換されていてもよいアルキルカルボニル、置換基群αで置換されていてもよいアルケニルカルボニル、置換基群αで置換されていてもよいアルキニルカルボニル、置換基群αで置換されていてもよいアルキルスルファニル、置換基群αで置換されていてもよいアルケニルスルファニル、置換基群αで置換されていてもよいアルキニルスルファニル、置換基群αで置換されていてもよいアルキルスルフィニル、置換基群αで置換されていてもよいアルケニルスルフィニル、置換基群αで置換されていてもよいアルキニルスルフィニル、置換基群αで置換されていてもよいアルキルスルホニル、置換基群αで置換されていてもよいアルケニルスルホニル、置換基群αで置換されていてもよいアルキニルスルホニル、
置換基群γで置換されていてもよい芳香族炭素環式基、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族炭素環式基、置換基群γで置換されていてもよい芳香族複素環式基、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族複素環式基、置換基群γで置換されていてもよい芳香族炭素環アルキル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族炭素環アルキル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族複素環アルキル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族複素環アルキル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族炭素環カルボニル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族炭素環カルボニル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族複素環カルボニル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族複素環カルボニル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族炭素環オキシカルボニル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族炭素環オキシカルボニル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族複素環オキシカルボニル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族複素環オキシカルボニル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族炭素環スルファニル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族炭素環スルファニル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族複素環スルファニル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族複素環スルファニル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族炭素環スルフィニル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族炭素環スルフィニル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族複素環スルフィニル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族複素環スルフィニル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族炭素環スルホニル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族炭素環スルホニル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族複素環スルホニルおよび置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族複素環スルホニル。

置換基群γ：置換基群α、アルキル、ハロアルキル、ヒドロキシアルキル、アルケニル、アルキニル、アルキルカルボニル、ハロアルキルカルボニル、アルケニルカルボニルおよびアルキニルカルボニル。

置換基群γ’：置換基群γおよびオキソ。

「置換芳香族炭素環式基」および「置換芳香族複素環式基」の「芳香族炭素環」および「芳香族複素環」の環上の置換基としては、次の置換基群Ｂが挙げられる。環上の任意の位置の原子が次の置換基群Ｂから選択される１以上の基と結合していてもよい。
置換基群Ｂ：ハロゲン、ヒドロキシ、カルボキシ、ホルミル、ホルミルオキシ、スルファニル、スルフィノ、スルホ、チオホルミル、チオカルボキシ、ジチオカルボキシ、チオカルバモイル、シアノ、ニトロ、ニトロソ、アジド、ヒドラジノ、ウレイド、アミジノ、グアニジノ、ペンタフルオロチオ、トリアルキルシリル、
置換基群αで置換されていてもよいアルキル、置換基群αで置換されていてもよいアルケニル、置換基群αで置換されていてもよいアルキニル、置換基群αで置換されていてもよいアルキルオキシ、置換基群αで置換されていてもよいアルケニルオキシ、置換基群αで置換されていてもよいアルキニルオキシ、置換基群αで置換されていてもよいアルキルカルボニルオキシ、置換基群αで置換されていてもよいアルケニルカルボニルオキシ、置換基群αで置換されていてもよいアルキニルカルボニルオキシ、置換基群αで置換されていてもよいアルキルカルボニル、置換基群αで置換されていてもよいアルケニルカルボニル、置換基群αで置換されていてもよいアルキニルカルボニル、置換基群αで置換されていてもよいアルキルオキシカルボニル、置換基群αで置換されていてもよいアルケニルオキシカルボニル、置換基群αで置換されていてもよいアルキニルオキシカルボニル、置換基群αで置換されていてもよいアルキルスルファニル、置換基群αで置換されていてもよいアルケニルスルファニル、置換基群αで置換されていてもよいアルキニルスルファニル、置換基群αで置換されていてもよいアルキルスルフィニル、置換基群αで置換されていてもよいアルケニルスルフィニル、置換基群αで置換されていてもよいアルキニルスルフィニル、置換基群αで置換されていてもよいアルキルスルホニル、置換基群αで置換されていてもよいアルケニルスルホニル、置換基群αで置換されていてもよいアルキニルスルホニル、
置換基群βで置換されていてもよいアミノ、置換基群βで置換されていてもよいイミノ、置換基群βで置換されていてもよいカルバモイル、置換基群βで置換されていてもよいスルファモイル、
置換基群γで置換されていてもよい芳香族炭素環式基、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族炭素環式基、置換基群γで置換されていてもよい芳香族複素環式基、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族複素環式基、置換基群γで置換されていてもよい芳香族炭素環オキシ、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族炭素環オキシ、置換基群γで置換されていてもよい芳香族複素環オキシ、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族複素環オキシ、置換基群γで置換されていてもよい芳香族炭素環カルボニルオキシ、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族炭素環カルボニルオキシ、置換基群γで置換されていてもよい芳香族複素環カルボニルオキシ、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族複素環カルボニルオキシ、置換基群γで置換されていてもよい芳香族炭素環カルボニル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族炭素環カルボニル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族複素環カルボニル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族複素環カルボニル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族炭素環オキシカルボニル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族炭素環オキシカルボニル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族複素環オキシカルボニル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族複素環オキシカルボニル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族炭素環アルキル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族炭素環アルキル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族複素環アルキル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族複素環アルキル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族炭素環アルキルオキシ、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族炭素環アルキルオキシ、置換基群γで置換されていてもよい芳香族複素環アルキルオキシ、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族複素環アルキルオキシ、置換基群γで置換されていてもよい芳香族炭素環アルキルオキシカルボニル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族炭素環アルキルオキシカルボニル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族複素環アルキルオキシカルボニル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族複素環アルキルオキシカルボニル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族炭素環アルキルオキシアルキル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族炭素環アルキルオキシアルキル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族複素環アルキルオキシアルキル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族複素環アルキルオキシアルキル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族炭素環スルファニル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族炭素環スルファニル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族複素環スルファニル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族複素環スルファニル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族炭素環スルフィニル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族炭素環スルフィニル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族複素環スルフィニル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族複素環スルフィニル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族炭素環スルホニル、置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族炭素環スルホニル、置換基群γで置換されていてもよい芳香族複素環スルホニルおよび置換基群γ’で置換されていてもよい非芳香族複素環スルホニル。

「置換非芳香族炭素環式基」および「置換非芳香族複素環式基」の「非芳香族炭素環」および「非芳香族複素環」の環上の置換基としては、次の置換基群Ｃが挙げられる。環上の任意の位置の原子が次の置換基群Ｃから選択される１以上の基と結合していてもよい。
置換基群Ｃ：置換基群Ｂおよびオキソ。

「非芳香族炭素環」および「非芳香族複素環」が「オキソ」で置換されている場合、以下のように炭素原子上の２個の水素原子が置換されている環を意味する。

Ｒ^１における「置換もしくは非置換の芳香族複素環式基」または「置換もしくは非置換の５～６員芳香族複素環式基」の置換基としては、例えば、
ハロゲン；
置換もしくは非置換のアルキル；
が挙げられる。これらから選択される１以上の基で置換されていてもよい。

Ｒ^１における「置換もしくは非置換の芳香族複素環式基」または「置換もしくは非置換の５～６員芳香族複素環式基」の置換基としては、例えば、
ハロゲン；
置換アルキル（置換基としては、ヒドロキシ）；非置換アルキル；
が挙げられる。これらから選択される１以上の基で置換されていてもよい。

Ｒ^２における「置換もしくは非置換の６員芳香族炭素環式基」の置換基としては、例えば、
ハロゲン；シアノ；
置換もしくは非置換のアルキル；
が挙げられる。これらから選択される１以上の基で置換されていてもよい。

Ｒ^２における「置換もしくは非置換の６員芳香族炭素環式基」の置換基としては、例えば、
ハロゲン；シアノ；
置換アルキル（置換基としては、ハロゲン）；非置換アルキル；
が挙げられる。これらから選択される１以上の基で置換されていてもよい。

Ｒ^３における「置換もしくは非置換の芳香族複素環式基」または「置換もしくは非置換の９～１０員芳香族複素環式基」の置換基としては、例えば、
ハロゲン；
置換もしくは非置換のアルキル；
置換もしくは非置換の非芳香族複素環式基；
が挙げられる。これらから選択される１以上の基で置換されていてもよい。

Ｒ^３における「置換もしくは非置換の芳香族複素環式基」または「置換もしくは非置換の９～１０員芳香族複素環式基」の置換基としては、例えば、
ハロゲン；
置換アルキル（置換基としては、ハロゲン、ヒドロキシ、アルキルカルボニルアミノ、非芳香族複素環式基）；非置換アルキル；
置換非芳香族複素環式基（置換基としては、アルキルカルボニル）；非置換非芳香族複素環式基；
が挙げられる。これらから選択される１以上の基で置換されていてもよい。

式（Ｉ）：

で示される化合物における、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびｍの好ましい態様を以下に示す。式（Ｉ）で示される化合物としては、以下に示される具体例のすべての組み合わせの態様が例示される。なお、Ｙ、－Ｘ－、Ｒ^５ａ、Ｒ^５ｂ、ｎ、Ｒ^４ａおよびＲ^４ｂは、上記項目（１）に示す通りである。
Ｒ^１は、置換または非置換の芳香族複素環式基が挙げられる（以下、Ａ－１とする）。
Ｒ^１は、置換または非置換の５～６員芳香族複素環式基が挙げられる（以下、Ａ－２とする）。
Ｒ^１は、ハロゲン、置換アルキル（置換基：ヒドロキシ）もしくは非置換アルキルで置換された芳香族複素環式基または非置換芳香族複素環式基が挙げられる（以下、Ａ－３とする）。
Ｒ^１は、ハロゲン、置換アルキル（置換基：ヒドロキシ）もしくは非置換アルキルで置換された５～６員芳香族複素環式基または非置換５～６員芳香族複素環式基が挙げられる（以下、Ａ－４とする）。
Ｒ^１は、非置換アルキルもしくはハロゲンで置換された芳香族複素環式基または非置換芳香族複素環式基が挙げられる（以下、Ａ－５とする）。
Ｒ^１は、非置換アルキルもしくはハロゲンで置換された５～６員芳香族複素環式基または非置換５～６員芳香族複素環式基が挙げられる（以下、Ａ－６とする）。
Ｒ^１は、非置換アルキルまたはハロゲンで置換された芳香族複素環式基が挙げられる（以下、Ａ－７とする）。
Ｒ^１は、非置換アルキルまたはハロゲンで置換された５～６員芳香族複素環式基が挙げられる（以下、Ａ－８とする）。
Ｒ^１は、非置換アルキルで置換された芳香族複素環式基または非置換芳香族複素環式基が挙げられる（以下、Ａ－９とする）。
Ｒ^１は、非置換アルキルで置換された５～６員芳香族複素環式基または非置換５～６員芳香族複素環式基が挙げられる（以下、Ａ－１０とする）。
Ｒ^１は、非置換アルキルで置換された芳香族複素環式基が挙げられる（以下、Ａ－１１とする）。
Ｒ^１は、非置換アルキルで置換された５～６員芳香族複素環式基が挙げられる（以下、Ａ－１２とする）。

Ｒ^２は、置換または非置換の６員芳香族炭素環式基が挙げられる（以下、Ｂ－１とする）。
Ｒ^２は、ハロゲン、シアノ、置換アルキル（置換基：ハロゲン）または非置換アルキルで置換された６員芳香族炭素環式基が挙げられる（以下、Ｂ－２とする）。
Ｒ^２は、ハロゲン、シアノ、または非置換アルキルで置換された６員芳香族炭素環式基が挙げられる（以下、Ｂ－３とする）。
Ｒ^２は、置換基群Ｇ（置換基群Ｇ：ハロゲン、シアノおよび非置換アルキル）から選択される２～４個の置換基で置換された６員芳香族炭素環式基が挙げられる（以下、Ｂ－４とする）。
Ｒ^２は、置換基群Ｇ（置換基群Ｇ：ハロゲン、シアノおよび非置換アルキル）から選択される２～３個の置換基で置換された６員芳香族炭素環式基が挙げられる（以下、Ｂ－５とする）。
Ｒ^２は、置換基群Ｇ（置換基群Ｇ：ハロゲン、シアノおよび非置換アルキル）から選択される３～４個の置換基で置換された６員芳香族炭素環式基が挙げられる（以下、Ｂ－６とする）。
Ｒ^２は、３個のハロゲンで置換された６員芳香族炭素環式基が挙げられる（以下、Ｂ－７とする）。

Ｒ^３は、置換または非置換の芳香族複素環式基が挙げられる（以下、Ｃ－１とする）。
Ｒ^３は、置換または非置換の９～１０員芳香族複素環式基が挙げられる（以下、Ｃ－２とする）。
Ｒ^３は、ハロゲンまたは置換もしくは非置換アルキルで置換された芳香族複素環式基が挙げられる（以下、Ｃ－３とする）。
Ｒ^３は、ハロゲンまたは置換もしくは非置換アルキルで置換された９～１０員芳香族複素環式基が挙げられる（以下、Ｃ－４とする）。
Ｒ^３は、ハロゲンまたは非置換アルキルで置換された芳香族複素環式基が挙げられる（以下、Ｃ－５とする）。
Ｒ^３は、ハロゲンまたは非置換アルキルで置換された９～１０員芳香族複素環式基が挙げられる（以下、Ｃ－６とする）。
Ｒ^３は、ハロゲンまたは非置換アルキルで置換されたインダゾリルが挙げられる（以下、Ｃ－７とする）。
Ｒ^３は、ハロゲンおよび非置換アルキルで置換されたインダゾリルが挙げられる（以下、Ｃ－８とする）。

ｍは０または１が挙げられる（以下、Ｄ－１とする）。
ｍは０が挙げられる（以下、Ｄ－２とする）。
ｍは１が挙げられる（以下、Ｄ－３とする）。

式（Ｉ）で示される化合物としては、以下に示される態様が例示される。
（ａ－１）
Ｒ^１は、（Ａ－１２）であり；
Ｒ^２は、（Ｂ－７）であり；
Ｒ^３は、（Ｃ－８）であり；
ｍは、（Ｄ－２）である。
（ａ－２）
Ｒ^１は、（Ａ－１２）であり；
Ｒ^２は、（Ｂ－７）であり；
Ｒ^３は、（Ｃ－８）であり；
ｍは、（Ｄ－３）である。
（ａ－３）
Ｒ^１は、（Ａ－１２）であり；
Ｒ^２は、（Ｂ－７）であり；
Ｒ^３は、（Ｃ－８）であり；
ｍは、（Ｄ－１）である。
（ａ－４）
Ｒ^１は、（Ａ－４）であり；
Ｒ^２は、（Ｂ－４）であり；
Ｒ^３は、（Ｃ－４）であり；
ｍは、（Ｄ－１）である。

式（Ｉ）で示される化合物としては、式（Ｉ－Ａ）で示される化合物、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物が好ましい。

式（Ｉ）、式（Ｉ－Ａ）および式（Ｉ－Ｂ）で示される化学構造式も、それぞれの式において統一して用いられる。

式（Ｉ）で示される化合物は、特定の異性体に限定するものではなく、全ての可能な異性体（例えば、ケト－エノール異性体、イミン－エナミン異性体、ジアステレオ異性体、光学異性体、回転異性体等）、ラセミ体またはそれらの混合物を含む。例えば、式（Ｉ）で示される化合物は、以下のような互変異性体を包含する。

例えば、式（Ｉ－Ａ）で示される化合物や化合物（Ｉ－００３）は、以下のような互変異性体およびそれらの混合物を包含する。

例えば、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物や化合物（Ｉ－００５）は、以下のような互変異性体およびそれらの混合物を包含する。

式（Ｉ）で示される化合物の一つ以上の水素、炭素および／または他の原子は、それぞれ水素、炭素および／または他の原子の同位体で置換され得る。そのような同位体の例としては、それぞれ^２Ｈ、^３Ｈ、^１１Ｃ、^１３Ｃ、^１４Ｃ、^１５Ｎ、^１８Ｏ、^１７Ｏ、^３１Ｐ、^３２Ｐ、^３５Ｓ、^１８Ｆ、¹²³Ｉおよび^３６Ｃｌのように、水素、炭素、窒素、酸素、リン、硫黄、フッ素、ヨウ素および塩素が包含される。式（Ｉ）で示される化合物は、そのような同位体で置換された化合物も包含する。該同位体で置換された化合物は、医薬品としても有用であり、式（Ｉ）で示される化合物のすべての放射性標識体を包含する。また該「放射性標識体」を製造するための「放射性標識化方法」も本発明に包含され、該「放射性標識体」は、代謝薬物動態研究、結合アッセイにおける研究および／または診断のツールとして有用である。
また、本発明の結晶は重水素変換体であってもよい。本発明の結晶は同位元素（例、^３Ｈ，^１４Ｃ，^３５Ｓ，^１２５Ｉ等）で標識されていてもよい。

式（Ｉ）で示される化合物の放射性標識体は、当該技術分野で周知の方法で調製できる。例えば、式（Ｉ）で示されるトリチウム標識化合物は、トリチウムを用いた触媒的脱ハロゲン化反応によって、式（Ｉ）で示される特定の化合物にトリチウムを導入することで調製できる。この方法は、適切な触媒、例えばＰｄ／Ｃの存在下、塩基の存在下または非存在下で、式（Ｉ）で示される化合物が適切にハロゲン置換された前駆体とトリチウムガスとを反応させることを包含する。トリチウム標識化合物を調製するための他の適切な方法は、“Ｉｓｏｔｏｐｅｓ ｉｎ ｔｈｅ Ｐｈｙｓｉｃａｌ ａｎｄ Ｂｉｏｍｅｄｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｖｏｌ．１，Ｌａｂｅｌｅｄ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ （Ｐａｒｔ Ａ），Ｃｈａｐｔｅｒ ６ （１９８７年）”を参照することができる。^１４Ｃ－標識化合物は、^１４Ｃ炭素を有する原料を用いることによって調製できる。

式（Ｉ）で示される化合物の製薬上許容される塩としては、例えば、式（Ｉ）で示される化合物と、アルカリ金属（例えば、リチウム、ナトリウム、カリウム等）、アルカリ土類金属（例えば、カルシウム、バリウム等）、マグネシウム、遷移金属（例えば、亜鉛、鉄等）、アンモニア、有機塩基（例えば、トリメチルアミン、トリエチルアミン、ジシクロヘキシルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン、メグルミン、エチレンジアミン、ピリジン、ピコリン、キノリン等）およびアミノ酸との塩、または無機酸（例えば、塩酸、硫酸、硝酸、炭酸、臭化水素酸、リン酸、ヨウ化水素酸等）、および有機酸（例えば、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、トリフルオロ酢酸、クエン酸、乳酸、酒石酸、シュウ酸、マレイン酸、フマル酸、コハク酸、マンデル酸、グルタル酸、リンゴ酸、安息香酸、フタル酸、アスコルビン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ－トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、トリフルオロ酢酸等）との塩が挙げられる。これらの塩は、通常行われる方法によって形成させることができる。
式（Ｉ－Ａ）で示される化合物の製薬上許容される塩としては、例えば、式（Ｉ－Ａ）で示される化合物とカウンター分子またはカウンターイオンからなり、任意の数のカウンター分子またはカウンターイオンを含んでいても良い。式（Ｉ－Ａ）で示される化合物の製薬上許容される塩は、化合物とカウンター分子またはカウンター原子との間でプロトン移動することにより、イオン結合を介するものをいう。
式（Ｉ－Ａ）で示される化合物の製薬上許容される塩としては、式（Ｉ－Ａ）で示される化合物のｐ－トルエンスルホン酸塩が好ましい。

本発明の製剤においては、式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩の複合体を用いることができる。式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩は、溶媒和物（例えば、水和物等）、共結晶および／または包接化合物を形成する場合があり、本明細書中ではそれらを「複合体」と記載する。

本明細書中で用いる「溶媒和物」とは、例えば式（Ｉ）で示される化合物に対し、任意の数の溶媒分子（例えば、水分子等）と配位していてもよい。式（Ｉ）で示される化合物またはその製薬上許容される塩を、大気中に放置することにより、水分を吸収し、吸着水が付着する場合や、水和物を形成する場合がある。

溶媒分子としては、例えば、アセトニトリル、クロロベンゼン、クロロホルム、シクロヘキサン、１，２‐ジクロロエテン、ジクロロメタン、１，２‐ジメトキシエタン、Ｎ，Ｎ‐ジメチルアセトアミド、Ｎ，Ｎ‐ジメチルホルムアミド、１，４‐ジオキサン、２‐エトキシエタノール、エチレングリコール、ホルムアミド、ヘキサン、メタノール、２‐メトキシエタノール、メチルブチルケトン、メチルシクロヘキサン、Ｎ‐メチルピロリドン、ニトロメタン、ピリジン、スルホラン、テトラリン、トルエン、１，１，２‐トリクロロエテン、キシレン、酢酸、アニソール、１‐ブタノール、２‐ブタノール、酢酸ｎ‐ブチル、ｔ‐ブチルメチルエーテル、クメン、ジメチルスルホキシド、酢酸エチル、ジエチルエーテル、ギ酸エチル、ギ酸、ヘプタン、酢酸イソブチル、酢酸イソプロピル、酢酸メチル、３‐メチル‐１‐ブタノール、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、２‐メチル‐１‐プロパノール、ペンタン、１‐ペンタノール、１‐プロパノール、２‐プロパノール、酢酸プロピル、テトラヒドロフラン、水（すなわち水和物）、エタノール、アセトン、１，１‐ジエトキシプロパン、１，１‐ジメトキシメタン、２，２‐ジメトキシプロパン、イソオクタン、イソプロピルエーテル、メチルイソプロピルケトン、メチルテトラヒドロフラン、石油エーテル、トリクロロ酢酸およびトリフルオロ酢酸、好ましくは、酢酸、アニソール、１‐ブタノール、２‐ブタノール、酢酸ｎ‐ブチル、ｔ‐ブチルメチルエーテル、クメン、ジメチルスルホキシド、酢酸エチル、ジエチルエーテル、ギ酸エチル、ギ酸、ヘプタン、酢酸イソブチル、酢酸イソプロピル、酢酸メチル、３‐メチル‐１‐ブタノール、メチルエチルケトン、メチルイソブチルケトン、２‐メチル‐１‐プロパノール、ペンタン、１‐ペンタノール、１‐プロパノール、２‐プロパノール、酢酸プロピル、テトラヒドロフラン、水（すなわち水和物）、エタノール、アセトン、１，１‐ジエトキシプロパン、１，１‐ジメトキシメタン、２，２‐ジメトキシプロパン、イソオクタン、イソプロピルエーテル、メチルイソプロピルケトン、メチルテトラヒドロフラン、石油エーテル、トリクロロ酢酸およびトリフルオロ酢酸、より好ましくは、水（すなわち水和物）、エタノール、アセトン、１，１‐ジエトキシプロパン、１，１‐ジメトキシメタン、２，２‐ジメトキシプロパン、イソオクタン、イソプロピルエーテル、メチルイソプロピルケトン、メチルテトラヒドロフラン、石油エーテル、トリクロロ酢酸およびトリフルオロ酢酸などが挙げられる。

本明細書中で用いる「共結晶」とは、カウンター分子が同一結晶格子内に規則的に配列することを意味し、任意の数のカウンター分子を含んでいても良い。また、共結晶とは、化合物とカウンター分子との分子間相互作用が、水素結合、ファンデルワールス力などの、非共有結合性かつ非イオン性の化学的相互作用を介するものをいう。
例えば、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物の共結晶としては、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物とカウンター分子からなり、任意の数のカウンター分子を含んでいても良い。好ましくは、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物とフマル酸からなり、任意の数のフマル酸を含んでいても良い。さらに好ましくは、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物およびフマル酸が１：１のモル比の共結晶である。
共結晶は、化合物が本質的に無電荷または中性のままであるという点で、塩と区別される。
共結晶は、カウンター分子が水もしくは溶媒ではないという点で水和物または溶媒和物と区別される。

本明細書中で用いる「結晶」とは、構成する原子、イオン、分子などが三次元的に規則正しく配列した固体を意味し、そのような規則正しい内部構造を持たない非晶質固体とは区別される。本発明の結晶は、単結晶、双晶、多結晶などであってもよい。
さらに、「結晶」には、組成が同一でありながら結晶中の配列が異なる「結晶多形」が存在することがあり、それらを含めて「結晶形態」という。
結晶形態および結晶化度は、例えば、粉末Ｘ線回折測定、ラマン分光法、赤外吸収スペクトル測定法、水分吸脱着測定、示差走査熱量測定、溶解特性を含めた多くの技術によって測定することができる。

また、式（Ｉ）で示される化合物、その製薬上許容される塩またはそれらの複合体を、再結晶することで「結晶多形」を形成する場合がある。
本発明製剤においては、そのような各種の塩、複合体（水和物、溶媒和物、共結晶、包接化合物）、結晶多形を用いることができ、また、それらの二つ以上の混合物であっても用いることができる。

（粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ））
粉末Ｘ線回折（ＸＲＰＤ）は、固体の結晶形態および結晶性を測定するための最も感度の良い分析法の１つである。Ｘ線が結晶に照射されると、結晶格子面で反射し、互いに干渉しあい、構造の周期に対応した秩序だった回折線を示す。一方、非晶質固体については、通常、その構造の中に秩序だった繰返し周期をもたないため、回折現象は起こらず、特徴のないブロードなＸＲＰＤパターン（ハローパターンとも呼ばれる）を示す。

式（Ｉ－Ａ）および式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物の結晶形態は、粉末Ｘ線回折パターンおよび特徴的な回折ピークにより識別可能である。式（Ｉ－Ａ）および式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物の結晶形態は、特徴的な回折ピークの存在によって他の結晶形態と区別することができる。
本明細書中で用いる特徴的な回折ピークは、観測された回折パターンから選択されるピークである。特徴的な回折ピークは、好ましくは回折パターンにおける約１０本、より好ましくは約５本、さらに好ましくは約３本から選択される。
複数の結晶を区別する上では、ピークの強度よりも、当該結晶で確認され、他の結晶では確認されないピークが、その結晶を特定する上で好ましい特徴的なピークとなる。そういった特徴的なピークであれば、一つまたは二つのピークでも、当該結晶を特徴付けることができる。測定して得られたチャートを比較し、これらの特徴的なピークが一致すれば、粉末Ｘ線回折パターンが実質的に一致するといえる。

一般に、粉末Ｘ線回折における回折角度（２θ）は±０．２°の範囲内で誤差が生じ得るため、粉末Ｘ線回折の回折角度の値は±０．２°程度の範囲内の数値も含むものとして理解される必要がある。したがって、粉末Ｘ線回折におけるピークの回折角度が完全に一致する結晶だけでなく、ピークの回折角度が±０．２°程度の誤差で一致する結晶も本発明に含まれる。

以下の表および図において表示されるピークの強度は、一般に、多くの因子、例えばＸ線ビームに対する結晶の選択配向の効果、粗大粒子の影響、分析される物質の純度またはサンプルの結晶化度によって変動し得ることが知られている。また、ピーク位置についても、サンプル高の変動に基づいてシフトし得る。さらに、異なる波長を使用して測定するとブラッグ式（ｎλ＝２ｄｓｉｎθ）に従って異なるシフトが得られるが、このような別の波長の使用により得られる別のＸＲＰＤパターンも、本発明の範囲に含まれる。

（単結晶構造解析）
結晶を特定する方法の一つで、当該結晶における結晶学的パラメーター、さらに、原子座標（各原子の空間的な位置関係を示す値）および３次元構造モデルを得ることができる。桜井敏雄著「Ｘ線構造解析の手引き」裳華房発行（１９８３年）、Stout & Jensen著 X-Ray Structure Determination： A Practical Guide, Macmillan Co., New York (1968)などを参照。本発明のような複合体、塩、光学異性体、互変異性体、幾何異性体の結晶の構造を同定する際には、単結晶構造解析が有用である。

本発明に係る化合物は、コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼ阻害活性を有するため、コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼが関与する疾患の治療および／または予防剤として有用である。本発明において「治療剤および／または予防剤」という場合、症状改善剤も包含する。コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼが関与する疾患としては、ウイルス感染症が挙げられ、好ましくはコロナウイルス感染症が挙げられる。
一つの態様として、コロナウイルスとしては、ヒトに感染するコロナウイルスが挙げられる。ヒトに感染するコロナウイルスとしては、ＨＣｏＶ－２２９Ｅ、ＨＣｏＶ－ＮＬ６３、ＨＣｏＶ－ＨＫＵ１、ＨＣｏＶ－ＯＣ４３、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、および／またはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２が挙げられる。
一つの態様として、コロナウイルスとしては、アルファコロナウイルスおよび／またはベータコロナウイルス、より好ましくはベータコロナウイルス、さらに好ましくはサルベコウイルスが挙げられる。
一つの態様として、アルファコロナウイルスとしては、ＨＣｏＶ－２２９ＥおよびＨＣｏＶ－ＮＬ６３が挙げられる。特に好ましくは、ＨＣｏＶ－２２９Ｅが挙げられる。
一つの態様として、ベータコロナウイルスとしては、ＨＣｏＶ－ＨＫＵ１、ＨＣｏＶ－ＯＣ４３、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、および／またはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２が挙げられる。好ましくはＨＣｏＶ－ＯＣ４３またはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、特に好ましくはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２が挙げられる。
一つの態様として、ベータコロナウイルスとしては、ベータコロナウイルスＡ系統（β－ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ｌｉｎｅａｇｅ Ａ）、ベータコロナウイルスＢ系統（β－ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ｌｉｎｅａｇｅ Ｂ）、およびベータコロナウイルスＣ系統（β－ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ｌｉｎｅａｇｅ Ｃ）が挙げられる。より好ましくは、ベータコロナウイルスＡ系統（β－ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ｌｉｎｅａｇｅ Ａ）、およびベータコロナウイルスＢ系統（β－ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ｌｉｎｅａｇｅ Ｂ）、特に好ましくはベータコロナウイルスＢ系統（β－ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ｌｉｎｅａｇｅ Ｂ）が挙げられる。
ベータコロナウイルスＡ系統（β－ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ｌｉｎｅａｇｅ Ａ）としては、例えばＨＣｏＶ－ＨＫＵ１およびＨＣｏＶ－ＯＣ４３、好ましくは、ＨＣｏＶ－ＯＣ４３が挙げられる。ベータコロナウイルスＢ系統（β－ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ｌｉｎｅａｇｅ Ｂ）としては、例えばＳＡＲＳ－ＣｏＶおよびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、好ましくはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２が挙げられる。ベータコロナウイルスＣ系統（β－ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ ｌｉｎｅａｇｅ Ｃ）としては、好ましくはＭＥＲＳ－ＣｏＶが挙げられる。
一つの態様として、コロナウイルスとしては、ＨＣｏＶ－２２９Ｅ、ＨＣｏＶ－ＯＣ４３、および／またはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２、特に好ましくはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２が挙げられる。
なお、ウイルスは増殖や感染を繰り返す中で変異することが一般的に知られている。上記コロナウイルスには、本発明に係る化合物が、コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼ阻害活性を発揮することができる株である限り、当該分野で公知の変異株のみならず、今後出現する変異株も含まれる。ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の公知の変異株としては、例えば、本明細書の実施例で使用した変異株が挙げられる。
コロナウイルス感染症としては、ＨＣｏＶ－２２９Ｅ、ＨＣｏＶ－ＮＬ６３、ＨＣｏＶ－ＯＣ４３、ＨＣｏＶ－ＨＫＵ１、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、および／またはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症が挙げられる。好ましくは、ＨＣｏＶ－２２９Ｅ、ＨＣｏＶ－ＯＣ４３、および／またはＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症、特に好ましくは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症が挙げられる。
コロナウイルス感染症としては、特に好ましくは、新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）が挙げられる。

新型コロナウイルス感染者の重症度分類は、例えば以下に例示される。（参考：新型コロナウイルス感染症COVID-19 診療の手引き第5.2版（厚生労働省））
（軽症）
酸素飽和度が９６％以上である。臨床状態は、呼吸器症状はない、または咳のみで呼吸困難はなく、いずれの場合であっても肺炎所見を認めない。
（中等症Ｉ）
酸素飽和度が９６％未満～９３％超である。呼吸困難があり、肺炎所見がある。
（中等症ＩＩ）
酸素飽和度が９３％未満である。呼吸不全があり、酸素投与が必要である。
（重症）
ＩＣＵに入室している、または、人工呼吸器が必要である。
上記の分類は日本における重症度分類の定義であり、例えば、中国や米国ＮＩＨの重症度分類を援用することが可能である。
また、無症候のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染者とは、無症状病原体保有者を意味する。例えば、ＣＯＶＩＤ－１９症状の１４症状が認められていない者が挙げられる。
（ＣＯＶＩＤ－１９の１４症状：疲労感、筋肉又は体の痛み、頭痛、悪寒、熱っぽさ、味覚異常、嗅覚異常、鼻水又は鼻づまり、喉の痛み、咳、息切れ、吐き気、嘔吐、下痢）

本明細書中、ＣＯＶＩＤ－１９の１２症状とは、疲労感、筋肉又は体の痛み、頭痛、悪寒、熱っぽさ、鼻水又は鼻づまり、喉の痛み、咳、息切れ、吐き気、嘔吐、下痢が挙げられる。

本明細書中、重症化抑制とは、無症候のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染者が、軽症、中等症Ｉ、中等症ＩＩまたは重症に分類される重症度に引き上げられることを抑制することである。
本明細書中、重症化抑制とは、無症候のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染者または軽症のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染者が、中等症Ｉ、中等症ＩＩまたは重症に分類される重症度に引き上げられることを抑制することである。
本明細書中、重症化抑制とは、無症候のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染者、軽症のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染者または中等症ＩのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染者が、中等症ＩＩまたは重症に分類される重症度に引き上げられることを抑制することである。
本明細書中、重症化抑制とは、無症候のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染者、軽症のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染者、中等症ＩのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染者または中等症ＩＩのＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染者が、重症に分類される重症度に引き上げられることを抑制することである。
本明細書中、重症化抑制とは、本剤のウイルス増殖抑制効果を介して、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染者の入院や死亡リスクが減少することを意味する。
本明細書中、重症化抑制とは、本剤のウイルス増殖抑制効果を介して、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染者の肺での炎症を軽減することを意味する。
本明細書中、重症化抑制とは、本剤のウイルス増殖抑制効果を介して、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス感染によって引き起こされる肺炎を抑制することを意味する。
本明細書中、重症化抑制とは、本剤のウイルス増殖抑制効果を介して、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス感染によって引き起こされる宿主の過剰な免疫反応を抑制することを意味する。

一つの実施態様として、本発明の医薬組成物は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染者のうち、次に示す重症化リスク因子を少なくとも一つ有する感染者に投与することが挙げられる。
・５０歳以上
・肥満（ＢＭＩ ３０ｋｇ／ｍ^２以上）
・心血管疾患（高血圧、先天性心疾患を含む心血管系疾患を含む）
・慢性肺疾患（喘息、間質性肺疾患を含む）
・１型又は２型糖尿病
・慢性腎障害（透析患者を含む）
・慢性肝疾患
・免疫抑制状態（例：悪性腫瘍治療、骨髄又は臓器移植、免疫不全、コントロール不良の ＨＩＶ、ＡＩＤＳ、鎌状赤血球貧血、サラセミア、免疫抑制剤の長期投与）
・慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）
・脂質異常症
・喫煙
・固形臓器移植後の免疫不全
・妊娠
・神経発達疾患や複雑な病態を抱える患者（例：脳性麻痺、先天性疾患）
・医療依存度の高い患者（例：気管切開、胃ろう、陽圧換気）

一つの実施態様として、本発明の医薬組成物は、重症化リスク因子を少なくとも一つ有する感染者に投与され、ＣＯＶＩＤ－１９症状の重症化を抑制するために用いられる。

一つの実施態様として、本発明の医薬組成物は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による肺炎を有する患者に用いられる。

一つの実施態様として、本発明の医薬組成物は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染者のうち、次に示す重症化リスク因子を少なくとも一つ有する感染者に投与することが挙げられる。
・ＥＣＭＯ（体外式膜型人工肺）装着患者
・人工呼吸器装着患者
・ＩＣＵ入室中の患者
・酸素飽和度（ＳｐＯ_２）９３％（室内気）以下または酸素吸入が必要な患者

一つの実施態様として、本発明の医薬組成物は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染者のうち、次に示す重症化リスク因子を少なくとも一つ有する感染者に投与することが挙げられる。
・酸素飽和度（ＳｐＯ２）９４％未満（室内気、海面位）
・ＰａＯ２／ＦｉＯ２が３００ｍｍＨｇ未満
・呼吸数が３０以上／分
・肺浸潤が５０％以上

（式（Ｉ）で示される化合物の製造法）
式（Ｉ）で示される化合物は、例えば、下記に示す一般的合成法によって製造することができる。抽出、精製等は、通常の有機化学の実験で行う処理を行えばよい。当該分野において公知の手法を参考にしながら合成することができる。抽出、精製等は、通常の有機化学の実験で行う処理を行えばよい。
式（Ｉ）で示される化合物は、当該分野において公知の手法を参考にしながら製造することができる。例えば、ＷＯ２０１００９２９６６、ＷＯ２０１２０２０７４９、ＷＯ２０１３０８９２１２、ＷＯ２０１４２０００７８、ＷＯ２０１２０２０７４２およびＷＯ２０１３１１８８５５等を参考にして製造することができる。

（Ａ法）

（式中、ＡｌｋはＣ１－Ｃ３アルキルであり、Ｌｇ^１は脱離基であり、Ｒ^６は水素原子であり、その他の記号は前記と同義である。）
（第１工程）
化合物（Ａ－１）またはその塩酸塩もしくは臭素酸塩等を、Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド、Ｎ，Ｎ－ジメチルアセタミド、Ｎ，Ｎ’－ジメチルイミダゾリジノン、ジメチルスルホキシド、ＴＨＦ等の溶媒中、ＤＢＵ、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン等の塩基（好ましくは、ＤＢＵ）の存在下、－２０℃～５０℃、好ましくは－１０℃～氷冷下で、イソシアネート（Ａ－２）または１－カルバモイルイミダゾール（Ａ－２’）と反応させる。続けて、反応混合物を、１，１’－カルボニルジイミダゾール、ホスゲン、トリホスゲン等のカルボニル化剤、およびＤＢＵ、トリエチルアミン、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン、ピリジン等の塩基（好ましくは、ＤＢＵ）と、－２０℃～５０℃、好ましくは－１０℃～氷冷下で、反応させることにより化合物（Ａ－３）を製造することができる。
（第２工程）
化合物（Ａ－３）をアセトニトリル、アセトン、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ等の溶媒中、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン等の塩基の存在下、５０℃～加熱還流下、好ましくは加熱還流下で、化合物（Ａ－４）と反応させることで、化合物（Ａ－５）を製造することができる。
脱離基としては、例えば、ハロゲンおよび－ＯＳＯ_２（Ｃ_ｔＦ_２ｔ＋１）（式中、ｔは１～４の整数）等が挙げられる。ハロゲンとしては、塩素、ヨウ素および臭素が好ましく、－ＯＳＯ_２（Ｃ_ｔＦ_２ｔ＋１）基としては、－ＯＴｆ基（トリフルオロメタンスルホン酸エステル）が好ましい。
（第３工程）
化合物（Ａ－５）をＮＭＰ、ＤＭＦ、ＤＭＡ、ＤＭＳＯ、ｔｅｒｔ－ブタノール、２－メチル－２－ブタノール等の溶媒中、酢酸等の酸の存在下または非存在下、６０℃～１５０℃、好ましくは８０℃～１２０℃で、化合物（Ａ－６）または化合物（Ａ－６’）と反応させることにより、化合物（Ｉ）で示される化合物を製造することができる。
光学活性なイソシアネート（Ａ－２）を用いることで、光学活性である化合物（Ｉ）で示される化合物を製造することができる。

（Ｂ法）

（式中、ＡｌｋはＣ１－Ｃ３アルキルであり、ＰｒｏはＣ１－Ｃ４アルキルまたはｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル、Ｌｇ^２は脱離基であり、Ｒ^６は水素原子であり、その他の記号は前記と同義である。）
（第１工程）
上記Ａ法の第２工程と同様にして、化合物（Ｂ－１）から化合物（Ｂ－２）を製造することができる。
（第２工程）
化合物（Ｂ－２）を有機溶媒の存在下または非存在下において、－２０℃～室温、好ましくは室温で、ＴＦＡ等の強酸で処理することにより、化合物（Ｂ－３）を製造することができる。
（第３工程）
上記Ａ法の第３工程と同様にして、化合物（Ｂ－３）から化合物（Ｂ－４）を製造することができる。
（第４工程）
化合物（Ｂ－４）および化合物（Ｂ－５）を用いたゴールドバーグアミノ化反応により、化合物（Ｉ－Ｘ）を製造することができる。
脱離基としては、上記Ａ法工程１に記載の脱離基が挙げられる。
触媒としては、例えば、ヨウ化銅、シアン化銅、臭化銅等、市販の銅触媒を用いることができる。
配位子としては、１，２－ジメチルエチレンジアミン、ｔｒａｎｓ-Ｎ,Ｎ‘-ジメチルシクロヘキサン－１,２－ジアミン等を用いることができる。
塩基としては、炭酸カリウム、リン酸カリウム等を用いることができる。
溶媒としては、ＮＭＰ、ジオキサン、ＤＭＳＯ等を用いることができる。
反応温度は、室温から溶媒が還流する温度で反応を行えばよく、好ましくは、加熱還流下で反応すればよい。

（Ｃ法）

（式中、ＡｌｋはＣ１－Ｃ３アルキルであり、Ｌｇ^３は脱離基であり、その他の記号は前記と同義である。）
（第１工程）
上記Ａ法の第２工程と同様にして、化合物（Ｃ－２）を製造することができる。
脱離基としては、上記Ａ法工程１に記載の脱離基が挙げられる。
（第２工程）
上記Ａ法の第３工程と同様にして、化合物（Ｉ）で示される化合物を製造することができる。

本発明に係る化合物は、コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼ阻害活性を有するため、ウイルス感染症の治療および／または予防剤として有用である。
さらに本発明に係る化合物は、医薬としての有用性を備えており、好ましくは、下記のいずれか、または複数の優れた特徴を有している。
ａ）ＣＹＰ酵素（例えば、ＣＹＰ１Ａ２、ＣＹＰ２Ｃ９、ＣＹＰ２Ｃ１９、ＣＹＰ２Ｄ６、ＣＹＰ３Ａ４等）に対する阻害作用が弱い。
ｂ）高いバイオアベイラビリティー、適度なクリアランス等良好な薬物動態を示す。
ｃ）代謝安定性が高い。
ｄ）ＣＹＰ酵素（例えば、ＣＹＰ３Ａ４）に対し、本明細書に記載する測定条件の濃度範囲内で不可逆的阻害作用を示さない。
ｅ）変異原性を有さない。
ｆ）心血管系のリスクが低い。
ｇ）高い溶解性を示す。
ｈ）タンパク質非結合率（ｆｕ値）が高い。
ｉ）高いコロナウイルス３ＣＬプロテアーゼ選択性を有している。
ｊ）高いコロナウイルス増殖阻害活性を有している。例えば、ヒト血清（ＨＳ）またはヒト血清アルブミン（ＨＳＡ）添加下において、高いコロナウイルス増殖阻害活性を有している。
コロナウイルス増殖阻害剤としては、例えば後述のＣＰＥ抑制効果確認試験（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２）において、例えばＥＣ_５０が１０μＭ以下、好ましくは１μＭ以下、より好ましくは１００ｎＭ以下である態様が挙げられる。
また、式（Ｉ）で示される化合物の塩・結晶・複合体（共結晶）は、医薬としての有用性を備えており、好ましくは、下記のいずれか、または複数の優れた特徴を有している。
Ａ）高いバイオアベイラビリティー、適度なクリアランス、高いＡＵＣ、高い最高血中濃度等、良好な薬物動態を示す。
Ｂ）高い溶解性、高い化学安定性、低い吸湿性を示す。

本発明の医薬組成物は、経口的、非経口的のいずれの方法でも投与することができる。非経口投与の方法としては、経皮、皮下、静脈内、動脈内、筋肉内、腹腔内、経粘膜、吸入、経鼻、点眼、点耳、膣内投与等が挙げられる。

経口投与の場合は常法に従って、内用固形製剤（例えば、錠剤、散剤、顆粒剤、カプセル剤、丸剤、フィルム剤等）、内用液剤（例えば、懸濁剤、乳剤、エリキシル剤、シロップ剤、リモナーデ剤、酒精剤、芳香水剤、エキス剤、煎剤、チンキ剤等）等の通常用いられるいずれの剤型に調製して投与すればよい。錠剤は、糖衣錠、フィルムコーティング錠、腸溶性コーティング錠、徐放錠、トローチ錠、舌下錠、バッカル錠、チュアブル錠または口腔内崩壊錠であってもよく、散剤および顆粒剤はドライシロップであってもよく、カプセル剤は、ソフトカプセル剤、マイクロカプセル剤または徐放性カプセル剤であってもよい。

非経口投与の場合は、注射剤、点滴剤、外用剤（例えば、点眼剤、点鼻剤、点耳剤、エアゾール剤、吸入剤、ローション剤、注入剤、塗布剤、含嗽剤、浣腸剤、軟膏剤、硬膏剤、ゼリー剤、クリーム剤、貼付剤、パップ剤、外用散剤、坐剤等）等の通常用いられるいずれの剤型でも好適に投与することができる。注射剤は、Ｏ／Ｗ、Ｗ／Ｏ、Ｏ／Ｗ／Ｏ、Ｗ／Ｏ／Ｗ型等のエマルジョンであってもよい。

本発明に係る化合物の有効量にその剤型に適した賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤等の各種医薬用添加剤を必要に応じて混合し、医薬組成物とすることができる。さらに、該医薬組成物は、本発明に係る化合物の有効量、剤型および／または各種医薬用添加剤を適宜変更することにより、小児用、高齢者用、重症患者用または手術用の医薬組成物とすることもできる。例えば、小児用医薬組成物は、新生児（出生後４週未満）、乳児（出生後４週～１歳未満）幼児（１歳以上７歳未満）、小児（７歳以上１５歳未満）若しくは１５歳～１８歳の患者に投与されうる。例えば、高齢者用医薬組成物は、６５歳以上の患者に投与されうる。

本発明の医薬組成物（例えば、式（Ｉ－Ａ）で示される化合物のｐ－トルエンスルホン酸塩Ｉ形結晶を含む医薬組成物、または、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形を含む医薬組成物）の投与量は、患者の年齢、体重、疾病の種類や程度、投与経路等を考慮した上で設定することが望ましいが、経口投与する場合、通常０．０５～２００ｍｇ／ｋｇ／日であり、好ましくは０．１～１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲内である。非経口投与の場合には投与経路により大きく異なるが、通常０．００５～２００ｍｇ／ｋｇ／日であり、好ましくは０．０１～１００ｍｇ／ｋｇ／日の範囲内である。これを１日１回～数回に分けて投与すれば良い。

本発明に係る化合物は、該化合物の作用の増強または該化合物の投与量の低減等を目的として、例えば、他の新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療薬（該治療薬としては、承認を受けた薬剤、および開発中または今後開発される薬剤を含む）（以下、併用薬剤と称する）と組み合わせて用いてもよい。この際、本発明に係る化合物と併用薬剤の投与時期は限定されず、これらを投与対象に対し、同時に投与してもよいし、時間差をおいて投与してもよい。さらに、本発明に係る化合物と併用薬剤とは、それぞれの活性成分を含む２種類以上の製剤として投与されてもよいし、それらの活性成分を含む単一の製剤として投与されてもよい。

併用薬剤の投与量は、臨床上用いられている用量を基準として適宜選択することができる。また、本発明に係る化合物と併用薬剤の配合比は、投与対象、投与ルート、対象疾患、症状、組み合わせ等により適宜選択することができる。例えば、投与対象がヒトである場合、本発明に係る化合物１重量部に対し、併用薬剤を０．０１～１００重量部用いればよい。

以下に実施例および参考例、ならびに試験例を挙げて本発明をさらに詳しく説明するが、本発明はこれらにより限定されるものではない。

また、本明細書中で用いる略語は以下の意味を表す。
Ｂｏｃ：ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル
ＣＤＩ：カルボニルジイミダゾール
ＤＢＵ：１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］－７－ウンデセン
ＤＩＥＡ：Ｎ，Ｎ－ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡ：Ｎ，Ｎ－ジメチルアセトアミド
ＤＭＦ：Ｎ，Ｎ－ジメチルホルムアミド
ＤＭＳＯ：ジメチルスルホキシド
ＤＴＴ：ジチオトレイトール
ＥＤＣ：１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド
ＥＤＴ：１，２－エタンジチオール
ＥＤＴＡ：エチレンジアミン四酢酸
ＦＢＳ：ウシ胎児血清
ＨＯＢＴ：１－ヒドロキシベンゾトリアゾール
ＬＨＭＤＳ：リチウムビス（トリメチルシリル）アミド
ＭＥＭ：イーグル最小必須培地
ＮＭＰ：Ｎ－メチルピロリドン
Ｐｄ（ＯＡｃ）_２：酢酸パラジウム
ＴＦＡ：トリフルオロ酢酸
ＴＭＳＣｌ：クロロトリメチルシラン
Ｘａｎｔｐｈｏｓ：４，５’－ビス（ジフェニルホスフィノ）－９，９’－ジメチルキサンテン
ｍＭ：ｍｍｏｌ／Ｌ
μＭ：μｍｏｌ／Ｌ
ｎＭ：ｎｍｏｌ／Ｌ

（化合物の同定方法）
各実施例で得られたＮＭＲ分析は４００ＭＨｚで行い、ＤＭＳＯ－ｄ_６、ＣＤＣｌ_３、ＭｅＯＨ－ｄ_４を用いて測定した。また、ＮＭＲデータを示す場合は、測定した全てのピークを記載していない場合が存在する。
明細書中にＲＴとあるのは、ＬＣ／ＭＳ：液体クロマトグラフィー／質量分析でのリテンションタイムを表し、以下の条件で測定した。
（測定条件１）
カラム：ＡＣＱＵＩＴＹ ＵＰＬＣ（登録商標）ＢＥＨ Ｃ１８ （１．７μｍ ｉ．ｄ．２．１ｘ５０ｍｍ） （Ｗａｔｅｒｓ）
流速：０．８ｍＬ／分
ＵＶ検出波長：２５４ｎｍ
移動相：［Ａ］は０．１％ギ酸含有水溶液、［Ｂ］は０．１％ギ酸含有アセトニトリル溶液
グラジエント：３．５分間で５％－１００％溶媒［Ｂ］のリニアグラジエントを行った後、０．５分間、１００％溶媒［Ｂ］を維持した。
（測定条件２）
カラム：Ｓｈｉｍ－ｐａｃｋ ＸＲ－ＯＤＳ （２．２μｍ、ｉ．ｄ．３．０ｘ５０ｍｍ） （Ｓｈｉｍａｄｚｕ）
流速：１．６ｍＬ／分
ＵＶ検出波長：２５４ｎｍ
移動相：［Ａ］は０．１％ギ酸含有水溶液、［Ｂ］は０．１％ギ酸含有アセトニトリル溶液
グラジエント：３分間で１０％－１００％溶媒［Ｂ］のリニアグラジエントを行い、０．５分間、１００％溶媒［Ｂ］を維持した。
なお、明細書中、ＭＳ（ｍ／ｚ）との記載は、質量分析で観測された値を示す。

（粉末Ｘ線回折パターンの測定）
日本薬局方の一般試験法に記載された粉末Ｘ線回折測定法に従い、各実施例で得られた結晶の粉末Ｘ線回折測定を行った。測定条件を以下に示す。
（装置）
リガク社製ＳｍａｒｔＬａｂ
（操作方法）
測定法：反射法
使用波長：ＣｕＫα線
管電流：２００ｍＡ
管電圧：４５ｋＶ
試料プレート：アルミニウム
Ｘ線の入射角：２．５°
サンプリング幅：０．０２°
検出器：ＨｙＰｉｘ－３０００（２次元検出モード）

（単結晶構造解析の測定と解析方法）
単結晶構造解析の測定条件および解析方法を以下に示す。
（装置）
リガク社製 ＸｔａＬＡＢ Ｐ２００ ＭＭ００７
（測定条件）
測定温度：２５℃
使用波長：ＣｕＫα線（λ＝１．５４１８Å）
ソフト：ＣｒｙｓＡｌｉｓＰｒｏ １．１７１．３９．４６ｅ (Ｒｉｇａｋｕ Ｏｘｆｏｒｄ Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ， ２０１８)
（データ処理）
ソフト：ＣｒｙｓＡｌｉｓＰｒｏ １．１７１．３９．４６ｅ (Ｒｉｇａｋｕ Ｏｘｆｏｒｄ Ｄｉｆｆｒａｃｔｉｏｎ， ２０１８)
データはローレンツおよび偏光補正、吸収補正を行った。
（結晶構造解析）
直接法プログラムＳｈｅｌＸＴ（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ, Ｇ.Ｍ.，２０１５）を用いて位相決定を行い、精密化はＳｈｅｌＸＬ（Ｓｈｅｌｄｒｉｃｋ, Ｇ.Ｍ.，２０１５）を用いて、ｆｕｌｌ－ｍａｔｒｉｘ最小二乗法を実施した。非水素原子の温度因子はすべて異方性で精密化を行った。水素原子はＳｈｅｌＸＬのデフォルトパラメータを用いて計算により導入し、ｒｉｄｉｎｇ ａｔｏｍとして取り扱った。全ての水素原子は、等方性パラメーターで精密化を行った。
図２および図４の作図にはＰＬＡＴＯＮ（Ｓｐｅｋ，１９９１）／ＯＲＴＥＰ（Ｊｏｈｎｓｏｎ，１９７６）を使用した。

化合物（Ｉ－００３）の合成

工程１ 化合物１４の合成
３，４，５－トリフルオロベンジルアミン（３．３４ｇ、２０．７ｍｍｏｌ）をジクロロメタン（３３．４ｍＬ）に溶解し、水浴で冷却した。反応溶液にイソチオシアン酸ベンゾイル（２．９３ｍＬ、２１．８ｍｍｏｌ）を加え、室温で３０分間攪拌した。
溶媒を留去し、残渣をメタノールで希釈し、１ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液（７．４５ｍＬ、７．４５ｍｍｏｌ）を加えた。反応溶液を室温で３０分間攪拌し、２ｍｏｌ／Ｌ塩酸水溶液を加えた。水層を酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液および飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し、溶媒を減圧留去して化合物１４の粗生成物（８．３ｇ）を得た。この粗生成物はこれ以上精製することなく収率１００％として次の工程に用いた。
ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝２２１、ＲＴ＝１．４５ｍｉｎ、ＬＣ／ＭＳ測定条件２

工程２ 化合物１５の合成
化合物１４の粗生成物（８．３ｇ）、ＤＭＦ（８５ｍＬ）、ヨウ化メチル（４．８４ｍＬ、７７ｍｍｏｌ）を混合し、反応溶液を５０℃で４０分間攪拌した。反応溶液に水を加え、酢酸エチルで抽出し、水で洗浄した。水層に２ｍｏｌ／Ｌ水酸化ナトリウム水溶液を加え、水層を酢酸エチルで抽出した。有機層を水および飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を減圧留去し、化合物１５の粗生成物（３．８６ｇ、１６．５ｍｍｏｌ、収率８０％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝２３５、ＲＴ＝０．８４ｍｉｎ、ＬＣ／ＭＳ測定条件２

工程３ 化合物１６の合成
トリホスゲン（０．５０７ｇ、１．７１ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（６ｍＬ）を混合し、反応溶液を氷浴で冷却した。３－アミノ－５－メチルピリジン（０．４６２ｇ、４．２７ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．４８ｍＬ、１０．７ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（６ｍＬ）中で混合し、得られた溶液を反応溶液に滴下した。反応溶液を室温で４０分間攪拌した後、氷浴中で冷却した。化合物１５（１ｇ、４．２７ｍｍｏｌ）を反応溶液に加え、室温で５５分間攪拌した。水を加え、水層を酢酸エチルで抽出し、有機層を水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、溶媒を減圧留去し、化合物１６の粗生成物（１．５７ｇ、４．２６ｍｍｏｌ、収率：定量）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝３６９、ＲＴ＝１．５２ｍｉｎ、ＬＣ／ＭＳ測定条件１

工程４ 化合物１７の合成
ＣＤＩ（２．７８ｇ、１７．２ｍｍｏｌ）、化合物１６（１．５８ｇ、４．２９ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（１２．６ｍＬ）を混合した。反応溶液にジイソプロピルエチルアミン（３．００ｍＬ、１７．２ｍｍｏｌ）を加え、１１０℃で攪拌しながら３０分間マイクロウェーブを照射した。反応溶液を氷に注ぎ、生成した沈殿物を濾別し、水で洗浄した。得られた残渣を減圧乾燥し、化合物１７の粗生成物（６４９ｍｇ、１．５１ｍｍｏｌ、収率３５％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝３９５、ＲＴ＝１．７４ｍｉｎ、ＬＣ／ＭＳ測定条件１

工程５ 化合物（Ｉ－００３）の合成
６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－アミン（５５．３ｍｇ、０．３０４ｍｍｏｌ）、化合物１７（１００ｍｇ、０．２５４ｍｍｏｌ）およびＴＨＦ（１ｍＬ）を混合した。反応溶液を氷浴中で冷却し、ＬＨＭＤＳ（０．７６１ｍＬ、０．７６１ｍｍｏｌ）を加えた。反応溶液を氷浴中で４０分間攪拌し、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えた。有機層を酢酸エチルで抽出し、減圧濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール）により精製し、化合物（Ｉ－００３）（８０ｍｇ、０．１４５ｍｍｏｌ、収率５７．４％）を得た。
¹H-NMR (Methanol-d4) δ: 8.43 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 8.36 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.72 (br s, 1H), 7.48-7.35 (m, 3H), 5.32 (s, 2H), 4.20 (s, 3H), 2.42 (s, 3H).
ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝５２８、ＲＴ＝１．９３ｍｉｎ、ＬＣ／ＭＳ測定条件１

化合物（Ｉ－００５）の合成

工程１ 化合物１８の合成
化合物４（９２６ｍｇ、４．０４ｍｍｏｌ）（合成法はＷＯ２０１２０２０７４９、ＷＯ２０１３０８９２１２およびＷＯ２０１４２０００７８参照）、アセトニトリル（７．４１ｍＬ）、炭酸カリウム（７２６ｍｇ、５．２５ｍｍｏｌ）および２，４，５－トリフルオロベンジルブロミド（１０００ｍｇ、４．４４ｍｍｏｌ）を混合した。反応溶液を８０℃で４０分間攪拌し、放冷後、酢酸エチルで希釈した。不溶物を濾別後、ろ液を濃縮し、化合物１８の粗生成物（１．５１ｇ、４．０４ｍｍｏｌ、収率：定量）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝３７４、ＲＴ＝２．５４ｍｉｎ、ＬＣ／ＭＳ測定条件１

工程２ 化合物１９の合成
化合物１８（１．５１ｇ、４．０４ｍｍｏｌ）およびＴＦＡ（３．０２ｍＬ）を混合した。反応溶液を室温で４時間攪拌し、一晩静置した。ＴＦＡを減圧留去し、残渣にトルエンを加え共沸した。残渣にイソプロピルエーテルを加え懸濁後、ろ取し、化合物１９（１．２２ｇ、３．８４ｍｍｏｌ、収率９５％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝３１８、ＲＴ＝１．６８ｍｉｎ、ＬＣ／ＭＳ測定条件１

工程３ 化合物２０の合成
化合物１９（２００ｍｇ、０．６３ｍｍｏｌ）、ＤＭＦ（１．８ｍＬ）、炭酸カリウム（２６１ｍｇ、１．８９ｍｍｏｌ）および３－（クロロメチル）－１－メチル－１Ｈ－１，２，４－トリアゾール 塩酸塩（１５９ｍｇ、０．９４６ｍｍｏｌ）を混合した。反応溶液を６０℃で２時間攪拌し、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えた。水層を酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過して濃縮した。残渣をイソプロピルエーテル、ヘキサン、酢酸エチルおよびクロロホルムの混合溶媒で懸濁し、ろ取した。残渣、ＤＭＦ（１．８ｍＬ）、炭酸カリウム（２６１ｍｇ、１．８９ｍｍｏｌ）および３－（クロロメチル）－１－メチル－１Ｈ－１，２，４－トリアゾール 塩酸塩（１５９ｍｇ、０．９４６ｍｍｏｌ）を混合した。反応溶液を６０℃で６時間攪拌し、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えた。水層を酢酸エチルで抽出し、有機層を飽和食塩水で洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過して濃縮した。残渣をイソプロピルエーテル、ヘキサン、酢酸エチルおよびクロロホルムの混合溶媒で懸濁してろ取し、化合物２０（１１６ｍｇ、０．２８１ｍｍｏｌ、収率４５％）を得た。
ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝４１３、ＲＴ＝１．８４ｍｉｎ、ＬＣ／ＭＳ測定条件：１

工程４ 化合物（Ｉ－００５）の合成
化合物２０（１１５ｍｇ、０．２７９ｍｍｏｌ）、ＴＨＦ（２．３０ｍＬ）および６－クロロ－２－メチル－２Ｈ－インダゾール－５－アミン（６０．８ｍｇ、０．３３５ｍｍｏｌ）を混合した。反応溶液に、ＬＨＭＤＳ（５５８μＬ、０．５５８ｍｍｏｌ）を０℃で滴下した。反応溶液を０℃で２時間半、室温で４０分間攪拌し、飽和塩化アンモニウム水溶液を加えた。クロロホルムで抽出し、有機層を濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（クロロホルム／メタノール）で精製し、化合物（Ｉ－００５）（６１．８ｍｇ、０．１１６ｍｍｏｌ、収率４２％）を得た。
¹H-NMR(CDCl₃)δ：7.96 (s, 1H), 7.82 (d, J = 2.5Hz, 2H), 7.48 (br s, 1H), 7.45-7.37 (m, 1H), 7.08 (s, 1H), 6.97-6.88 (m, 1H), 5.35 (s, 2H), 5.17 (s, 2H), 4.21 (s, 3H), 3.89 (s, 3H).
ＬＣ／ＭＳ（ＥＳＩ）：ｍ／ｚ＝５３２、ＲＴ＝１．７０ｍｉｎ、ＬＣ／ＭＳ測定条件１

上記一般的合成法および実施例１および２記載の方法に準じて、本発明に用いることができる化合物を合成した。実施例１および２で製造した化合物を含め、各化合物の構造および物性（ＬＣ／ＭＳデータ）を以下の表に示す。表中にアミノ構造で記載した化合物はイミノ構造を取ることもあり、イミノ構造で示した化合物もアミノ構造を取ることがある。すなわち、同一の化合物でも、結晶化条件等により、イミノ構造を取る場合とアミノ構造を取る場合が存在し、塩や複合体を形成している場合においても、その塩や複合体のカウンター分子の種類により、イミノ構造を取る場合とアミノ構造を取る場合が存在し、同一カウンター分子であっても、結晶化条件等により、イミノ構造を取る場合とアミノ構造を取る場合が存在する。また、イミノ構造を取る化合物、その塩またはそれらの複合体とアミノ構造を取る化合物、その塩またはそれらの複合体の混合物であることもある。

化合物（Ｉ－００３）１４００ｍｇに、酢酸エチル７ｍＬおよび５ｍｏｌ／Ｌのｐ－トルエンスルホン酸水溶液５５７μＬ（１．０５ｅｑ）を加えた。６０℃で１５分間攪拌した後、２５℃で２時間攪拌した。固体をろ取し、乾燥することで、式（Ｉ－Ａ）で示される化合物のｐ－トルエンスルホン酸塩Ｉ形結晶（１２８９．６ｍｇ、６９％）を得た。

式（Ｉ－Ａ）で示される化合物のｐ－トルエンスルホン酸塩Ｉ形結晶の単結晶構造解析の結果を以下に示す。
Ｒ１ （Ｉ＞２．００ｓ（Ｉ））は０．０４４４であり、最終の差フーリエから電子密度の欠如も誤置もないことを確認した。
結晶学的データを表１０に示す。

ここで、Ｖｏｌｕｍｅは単位格子体積、Ｚは単位格子中の分子数を意味する。

式（Ｉ－Ａ）で示される化合物のｐ－トルエンスルホン酸塩Ｉ形結晶の、非対称単位中の構造を図２に示す。
非対称単位中には、式（Ｉ－Ａ）で示される化合物、ｐ－トルエンスルホン酸が、それぞれ１分子存在していた。ｐ－トルエンスルホン酸のＯ３、Ｏ４およびＯ５で示される酸素原子には水素原子が結合しておらず、式（Ｉ－Ａ）で示される化合物のＮ７の窒素原子に水素原子が結合していることから、塩を形成していることを確認した。
Ｎ３－Ｃ９の結合距離は約１．２７Åであり、Ｎ４－Ｃ９の結合距離は約１．３７Åであった。この結合距離より、ｐ－トルエンスルホン酸塩Ｉ形結晶中の式（Ｉ－Ａ）で示される化合物は、イミノ構造：

であると同定した。
また、式（Ｉ－Ａ）で示される化合物のｐ－トルエンスルホン酸塩Ｉ形結晶の粉末Ｘ線回折の結果を示す。
粉末Ｘ線回折パターンにおいて、回折角度（２θ）：９．１±０．２°、１１．５±０．２°、１４．６±０．２°、１５．２±０．２°、１８．８±０．２°、２０．２±０．２°、２３．６±０．２°、２４．２±０．２°、２４．９±０．２°および２６．９±０．２°にピークが認められた。
上記粉末Ｘ線回折パターンにおいて、回折角度（２θ）：９．１±０．２°、１５．２±０．２°、１８．８±０．２°、２３．６±０．２°および２４．９±０．２°のピークが式（Ｉ－Ａ）で示される化合物のｐ－トルエンスルホン酸塩Ｉ形結晶として特に特徴的である。

化合物（Ｉ－００５）１１７０ｍｇにフマル酸 ２７８ｍｇ（１．１ｅｑ）および酢酸エチル ５．８５ｍＬを加え、室温下で４５分間攪拌した。固体をろ取し、乾燥することで、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶（１３６９．４ｍｇ、９４．６％）を得た。

式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形の単結晶構造解析の結果を以下に示す。
Ｒ１ （Ｉ＞２．００ｓ（Ｉ））は０．０４７０であり、最終の差フーリエから電子密度の欠如も誤置もないことを確認した。
結晶学的データを表１１に示す。

ここで、Ｖｏｌｕｍｅは単位格子体積、Ｚは単位格子中の分子数を意味する。

式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形の、非対称単位中の構造を図４に示す。

非対称単位中に、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物、フマル酸がそれぞれ１分子存在していた。イオン性の化学的相互作用は確認されず、１：１のモル比の共結晶であることを確認した。
Ｎ１０－Ｃ９の結合距離は約１．２６Åであり、Ｎ１６－Ｃ９の結合距離は約１．３７Åであった。この結合距離より、フマル酸共結晶Ｉ形の式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物は、イミノ構造：

であると同定した。
また、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶の粉末Ｘ線回折の結果を示す。
粉末Ｘ線回折パターンにおいて、回折角度（２θ）：７．８±０．２°、９．５±０．２°、１０．１±０．２°、１０．９±０．２°、１３．８±０．２°、１４．７±０．２°、１８．６±０．２°、２２．６±０．２°、２３．５±０．２°および２４．６±０．２°にピークが認められた。
上記粉末Ｘ線回折パターンにおいて、回折角度（２θ）：９．５±０．２°、１０．９±０．２°、１８．６±０．２°、２３．５±０．２°および２４．６±０．２°のピークが式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶として特に特徴的である。

以下に、本発明に係る化合物の生物試験例を記載する。本発明化合物は、本質的に下記試験例のとおり試験することができる。
本発明に係る式（Ｉ）で示される化合物は、コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼ阻害作用を有し、コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼを阻害するものであればよい。
具体的には、以下に記載する評価方法において、ＩＣ５０は５０μＭ以下が好ましく、より好ましくは、１μＭ以下、さらにより好ましくは１００ｎＭ以下である。

試験例１：ｈｕｍａｎ ＴＭＰＲＳＳ２発現Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞（Ｖｅｒｏ Ｅ６／ＴＭＰＲＳＳ２細胞）を用いたＣｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ（ＣＰＥ）抑制効果確認試験
＜操作手順＞
・被験試料の希釈、分注
予め被験試料をＤＭＳＯで適度な濃度に希釈し、２～５倍段階希釈系列を作製後、３８４ウェルプレートに分注する。
・細胞およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の希釈、分注
ＶｅｒｏＥ６／ＴＭＰＲＳＳ２細胞（ＪＣＲＢ１８１９、５×１０^３ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）とＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（１００－３００ＴＣＩＤ_５０／ｗｅｌｌ）を培地（ＭＥＭ、２％ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシン）で混合し、被験試料が入ったウェルに分注した後、ＣＯ_２インキュベーターで３日間培養する。
・ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０の分注および発光シグナルの測定
３日間培養したプレートを室温に戻した後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０を各ウェルに分注し、プレートミキサーで混和する。一定時間置いた後、プレートリーダーで発光シグナル（Ｌｕｍ）を測定する。

＜各測定項目値の算出＞
・５０％ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染細胞死阻害濃度（ＥＣ_５０）算出
ｘを化合物濃度の対数値、ｙを％Ｅｆｆｉｃａｃｙとしたとき、以下のＬｏｇｉｓｔｉｃ回帰式で阻害曲線を近似し、ｙ＝５０（％）を代入したときのｘの値をＥＣ_５０として算出する。

y = min + (max - min)/{1 + (X50/x) ^Hill}

%Efficacy = {(Sample - virus control) / (cell control - virus control)} * 100%
cell control： the average of Lum of cell control wells
virus control： the average of Lum of virus control wells

min：y軸下限値、max：y軸上限値、X50：変曲点のx座標、Hill：minとmaxの中間点でのカーブの傾き

本発明化合物を本質的に上記のとおり試験した。結果を以下の表に示す。
なお、ＥＣ_５０値は、１μＭ未満を「Ａ」、１μＭ以上１０μＭ未満を「Ｂ」とする。
化合物Ｉ－００３：０．１７７μＭ
化合物Ｉ－００５：０．３２８μＭ
化合物Ｉ－００６：０．７４７μＭ
化合物Ｉ－０１０：０．３０６μＭ
化合物Ｉ－０１２：０．１３１μＭ
化合物Ｉ－０１７：０．０９６０μＭ
化合物Ｉ－０２３：１．０３μＭ
化合物Ｉ－０３５：０．３９５μＭ

試験例１－２：ｈｕｍａｎ ＴＭＰＲＳＳ２発現Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞（Ｖｅｒｏ Ｅ６／ＴＭＰＲＳＳ２細胞）を用いたＣｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ（ＣＰＥ）抑制効果確認試験
＜操作手順＞
・被験試料の希釈、分注
予め被験試料をＤＭＳＯで適度な濃度に希釈し、３倍段階希釈系列を作製後、９６ウェルプレートに分注する。
・細胞およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の希釈、分注
ＶｅｒｏＥ６／ＴＭＰＲＳＳ２細胞（ＪＣＲＢ１８１９、１．５×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）とＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ／ＷＫ－５２１／２０２０、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＱＫ００２／２０２０、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＱＨＮ００１／２０２０、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＱＨＮ００２／２０２０、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ７－５０１／２０２１、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ７－５０３／２０２１、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ８－６１２／２０２１、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ１１－９２７－Ｐ１／２０２１、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ３３－４５６／２０２１、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ２８－４４４／２０２１、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ２６－７１７／２０２１（３０－３０００ＴＣＩＤ_５０／ｗｅｌｌ）を培地（ＭＥＭ、２％ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシン）で混合し、被験試料が入ったウェルに分注した後、ＣＯ_２インキュベーターで３日間あるいは４日間培養する。
・ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０の分注および発光シグナルの測定
３日間培養したプレートを室温に戻した後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０を各ウェルに分注し、プレートミキサーで混和する。一定時間置いた後、プレートリーダーで発光シグナル（Ｌｕｍ）を測定する。

＜各測定項目値の算出＞
・５０％ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染細胞死阻害濃度（ＥＣ_５０）算出
ｘを化合物濃度の対数値、ｙを％Ｅｆｆｉｃａｃｙとしたとき、以下のＬｏｇｉｓｔｉｃ回帰式で阻害曲線を近似し、ｙ＝５０（％）を代入したときのｘの値をＥＣ_５０として算出する。

y = min + (max - min)/{1 + (X50/x) ^Hill}

%Efficacy = {(Sample - virus control) / (cell control - virus control)} * 100%
cell control： the average of Lum of cell control wells
virus control： the average of Lum of virus control wells

min：y軸下限値、max：y軸上限値、X50：変曲点のx座標、Hill：minとmaxの中間点でのカーブの傾き

本発明化合物を本質的に上記のとおり試験した。結果を以下に示す。

試験例１－３：ｈｕｍａｎ ＴＭＰＲＳＳ２発現Ｖｅｒｏ Ｅ６細胞（Ｖｅｒｏ Ｅ６／ＴＭＰＲＳＳ２細胞）を用いたＣｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ（ＣＰＥ）抑制効果確認試験
＜操作手順＞
・被験試料の希釈、分注
予め被験試料をＤＭＳＯで適度な濃度に希釈し、３倍段階希釈系列を作製後、９６ウェルプレートに分注する。
・細胞およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の希釈、分注
ＶｅｒｏＥ６／ＴＭＰＲＳＳ２細胞（ＪＣＲＢ１８１９、１．５×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）とＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ３８－８７３／２０２１、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ３８－８７１／２０２１、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ４０－３８５／２０２２、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ４１－７１６／２０２２、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ４１－７０３／２０２２、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ４１－７０２／２０２２、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ４１－６８６／２０２２（３００－３０００ＴＣＩＤ_５０／ｗｅｌｌ）を培地（ＭＥＭ、２％ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシン）で混合し、被験試料が入ったウェルに分注した後、ＣＯ_２インキュベーターで４日間培養する。
・ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０の分注および発光シグナルの測定
３日間培養したプレートを室温に戻した後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０を各ウェルに分注し、プレートミキサーで混和する。一定時間置いた後、プレートリーダーで発光シグナル（Ｌｕｍ）を測定する。

＜各測定項目値の算出＞
・５０％ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染細胞死阻害濃度（ＥＣ_５０）算出
ｘを化合物濃度の対数値、ｙを％Ｅｆｆｉｃａｃｙとしたとき、以下のＬｏｇｉｓｔｉｃ回帰式で阻害曲線を近似し、ｙ＝５０（％）を代入したときのｘの値をＥＣ_５０として算出する。

y = min + (max - min)/{1 + (X50/x) ^Hill}

%Efficacy = {(Sample - virus control) / (cell control - virus control)} * 100%
cell control： the average of Lum of cell control wells
virus control： the average of Lum of virus control wells

min：y軸下限値、max：y軸上限値、X50：変曲点のx座標、Hill：minとmaxの中間点でのカーブの傾き

本発明化合物を本質的に上記のとおり試験した。結果を以下に示す。

試験例２：ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ３ＣＬプロテアーゼに対する阻害活性試験
＜材料＞
・市販のＲｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ３ＣＬ Ｐｒｏｔｅａｓｅ
・市販の基質ペプチド
Ｄａｂｃｙｌ－Ｌｙｓ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ｌｅｕ－Ｇｌｎ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－Ｌｙｓ－Ｍｅｔ－Ｇｌｕ（Ｅｄａｎｓ）－ＮＨ２（配列番号：１）
・Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｓｔａｎｄａｒｄペプチド
Ｄａｂｃｙｌ－Ｌｙｓ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ｌｅｕ（１３Ｃ６，１５Ｎ）－Ｇｌｎ（配列番号：２）
Ｄａｂｃｙｌ－Ｌｙｓ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ｌｅｕ（１３Ｃ６，１５Ｎ）－Ｇｌｎは、文献（Atherton, E.; Sheppard, R. C.、“In Solid Phase Peptide Synthesis, A Practical Approach”、IRL Press at Oxford University Pres、1989.およびBioorg. Med. Chem.、５巻、９号、１９９７年、１８８３－１８９１頁、等）を参考に合成できる。以下に一例を示す。
Ｒｉｎｋアミド樹脂を用いて、Ｆｍｏｃ固相合成によって、Ｈ－Ｌｙｓ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ｌｅｕ（１３Ｃ６，１５Ｎ）－Ｇｌｕ（ｒｅｓｉｎ）－ＯαＯｔＢｕ（Ｌｙｓ側鎖はＢｏｃ保護、Ｔｈｒ側鎖はｔｅｒｔ－ブチル基で保護、Ｓｅｒ側鎖はｔｅｒｔ－ブチル基で保護、ＧｌｕのＣ末端ＯＨはｔｅｒｔ－ブチル基で保護されており、Ｇｌｕ側鎖のカルボン酸を樹脂に縮合）を合成する。Ｎ末端Ｄａｂｃｙｌ基の修飾は４－ジメチルアミノアゾベンゼン－４’－カルボン酸（Ｄａｂｃｙｌ－ＯＨ）をＥＤＣ／ＨＯＢＴを用いて樹脂上で縮合する。最終脱保護、および樹脂からの切り出しはＴＦＡ／ＥＤＴ＝９５：５で処理することで行う。その後、逆相ＨＰＬＣによって精製する。
・ＲａｐｉｄＦｉｒｅ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅ Ｃ４ ｔｙｐｅＡ
＜操作手順＞
・アッセイバッファーの調製
本試験では、２０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、１００ｍＭ 塩化ナトリウム、１ｍＭ ＥＤＴＡ、１０ｍＭ ＤＴＴ、０．０１％ ＢＳＡからなるアッセイバッファーを使用する。ＩＣ_５０値が１０ｎＭ以下の化合物については、２０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、１ｍＭ ＥＤＴＡ、１０ｍＭ ＤＴＴ、０．０１％ ＢＳＡからなるアッセイバッファーを使用する。
・被験試料の希釈、分注
予め被験試料をＤＭＳＯで適度な濃度に希釈し、２～５倍段階希釈系列を作製後、３８４ウェルプレートに分注する。
・酵素と基質の添加、酵素反応
準備した化合物プレートに、８μＭの基質、及び６または０．６ｎＭの酵素溶液を添加し、室温で３～５時間インキュベーションを行う。その後、反応停止液（０．０６７μＭ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｓｔａｎｄａｒｄ、０．１％ ギ酸、１０または２５％ アセトニトリル）を加え酵素反応を停止させる。
・反応産物の測定
反応完了したプレートはＲａｐｉｄＦｉｒｅ Ｓｙｓｔｅｍ ３６０及び質量分析器（Ａｇｉｌｅｎｔ、６５５０ ｉＦｕｎｎｅｌ Ｑ－ＴＯＦ）、またはＲａｐｉｄ Ｆｉｒｅ Ｓｙｓｔｅｍ ３６５及び質量分析器（Ａｇｉｌｅｎｔ、 ６４９５Ｃ Ｔｒｉｐｌｅ Ｑｕａｄｒｕｐｏｌｅ）を用いて測定する。測定時の移動相としてＡ溶液（７５％ イソプロパノール、１５％ アセトニトリル、５ｍＭ ギ酸アンモニウム）とＢ溶液（０．０１％ トリフルオロ酢酸、０．０９％ ギ酸）を用いる。
質量分析器によって検出された反応産物は、ＲａｐｉｄＦｉｒｅ Ｉｎｔｅｇｒａｔｏｒまたは同等の解析が可能なプログラムを用いて算出しＰｒｏｄｕｃｔ ａｒｅａ値とする。また、同時に検出されたＩｎｔｅｒｎａｌ Ｓｔａｎｄａｒｄも算出しＩｎｔｅｒｎａｌ Ｓｔａｎｄａｒｄ ａｒｅａ値とする。
＜各測定項目値の算出＞
・Ｐ／ＩＳの算出
前項目で得られたａｒｅａ値を下記の式によって計算し、Ｐ／ＩＳを算出する。
Ｐ／ＩＳ＝ Ｐｒｏｄｕｃｔ ａｒｅａ値／ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｓｔａｎｄａｒｄ ａｒｅａ値
・５０％ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ３ＣＬプロテアーゼ阻害濃度（ＩＣ_５０）算出
ｘを化合物濃度の対数値、ｙを％Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎとしたとき、以下のＬｏｇｉｓｔｉｃ回帰式で阻害曲線を近似し、ｙ＝５０（％）を代入したときのｘの値をＩＣ_５０として算出する。

y = min + (max - min)/{1 + (X50/x) ^Hill}

%Inhibition = {1-(Sample - Control(-)) / Control(+)-Control(-))} * 100

Control(-)：the average of P/IS of enzyme inhibited condition wells
Control(+)：the average of P/IS of DMSO control wells
min：y軸下限値、max：y軸上限値、X50：変曲点のx座標、Hill：minとmaxの中間点でのカーブの傾き

本発明化合物を本質的に上記のとおり試験した。結果を以下の表に示す。
なお、ＩＣ_５０値は、０．１μＭ未満を「Ａ」、０．１μＭ以上１μＭ未満を「Ｂ」、１μＭ以上１０μＭ未満を「Ｃ」とする。
化合物Ｉ－００３：０．０１４μＭ
化合物Ｉ－００５：０．０１０μＭ
化合物Ｉ－００６：０．００５８μＭ
化合物Ｉ－０１０：０．００５４μＭ
化合物Ｉ－０１２：０．００９１μＭ
化合物Ｉ－０１７：０．００３４μＭ
化合物Ｉ－０２３：０．００６３μＭ
化合物Ｉ－０３５：０．００９８μＭ

試験例２－２：ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ３ＣＬプロテアーゼに対する阻害活性試験
＜材料＞
・市販のＲｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ３ＣＬ Ｐｒｏｔｅａｓｅ
・ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ３ＣＬ Ｐｒｏｔｅａｓｅ 各変異（G１５Ｓ，Ｔ２１Ｉ，Ｔ２４Ｉ，Ｋ８８Ｒ，Ｌ８９Ｆ，Ｋ９０Ｒ，Ｐ１０８Ｓ，Ｐ１３２Ｈ，Ａ１９３Ｖ，Ｈ２４６Ｙ，Ａ２５５Ｖ）
・市販の基質ペプチド
Ｄａｂｃｙｌ－Ｌｙｓ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ｌｅｕ－Ｇｌｎ－Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｐｈｅ－Ａｒｇ－Ｌｙｓ－Ｍｅｔ－Ｇｌｕ（Ｅｄａｎｓ）－ＮＨ２（配列番号：１）
・Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｓｔａｎｄａｒｄペプチド
Ｄａｂｃｙｌ－Ｌｙｓ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ｌｅｕ（１３Ｃ６，１５Ｎ）－Ｇｌｎ（配列番号：２）
Ｄａｂｃｙｌ－Ｌｙｓ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ｌｅｕ（１３Ｃ６，１５Ｎ）－Ｇｌｎは、文献（Ａｔｈｅｒｔｏｎ， Ｅ．； Ｓｈｅｐｐａｒｄ， Ｒ． Ｃ．、“Ｉｎ Ｓｏｌｉｄ Ｐｈａｓｅ Ｐｅｐｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ， Ａ Ｐｒａｃｔｉｃａｌ Ａｐｐｒｏａｃｈ”、ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ ａｔ Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓ、１９８９．およびＢｉｏｏｒｇ． Ｍｅｄ． Ｃｈｅｍ．、５巻、９号、１９９７年、１８８３－１８９１頁、等）を参考に合成できる。以下に一例を示す。
Ｒｉｎｋアミド樹脂を用いて、Ｆｍｏｃ固相合成によって、Ｈ－Ｌｙｓ－Ｔｈｒ－Ｓｅｒ－Ａｌａ－Ｖａｌ－Ｌｅｕ（１３Ｃ６，１５Ｎ）－Ｇｌｕ（ｒｅｓｉｎ）－ＯαＯｔＢｕ（Ｌｙｓ側鎖はＢｏｃ保護、Ｔｈｒ側鎖はｔｅｒｔ－ブチル基で保護、Ｓｅｒ側鎖はｔｅｒｔ－ブチル基で保護、ＧｌｕのＣ末端ＯＨはｔｅｒｔ－ブチル基で保護されており、Ｇｌｕ側鎖のカルボン酸を樹脂に縮合）を合成する。Ｎ末端Ｄａｂｃｙｌ基の修飾は４－ジメチルアミノアゾベンゼン－４’－カルボン酸（Ｄａｂｃｙｌ－ＯＨ）をＥＤＣ／ＨＯＢＴを用いて樹脂上で縮合する。最終脱保護、および樹脂からの切り出しはＴＦＡ／ＥＤＴ＝９５：５で処理することで行う。その後、逆相ＨＰＬＣによって精製する。
・ＲａｐｉｄＦｉｒｅ Ｃａｒｔｒｉｄｇｅ Ｃ４ ｔｙｐｅＡ
＜操作手順＞
・アッセイバッファーの調製
本試験では、２０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、１ｍＭ ＥＤＴＡ、１０ｍＭ ＤＴＴ、０．０１％ ＢＳＡからなるアッセイバッファーを使用する。
・被験試料の希釈、分注
予め被験試料をＤＭＳＯで適度な濃度に希釈し、３倍段階希釈系列を作製後、３８４ウェルプレートに分注する。
・酵素と基質の添加、酵素反応
準備した化合物プレートに、最終濃度２－４μＭの基質、及び最終濃度２－６ｎＭの酵素溶液を添加し、室温で２－３時間インキュベーションを行う。その後、反応停止液（０．０７２μＭ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｓｔａｎｄａｒｄ、０．１％ ギ酸、１０％ アセトニトリル）を加え酵素反応を停止させる。
・反応産物の測定
反応完了したプレートはＲａｐｉｄＦｉｒｅ Ｓｙｓｔｅｍ ３６０及び質量分析器（Ａｇｉｌｅｎｔ、６５５０ ｉＦｕｎｎｅｌ Ｑ－ＴＯＦ）を用いて測定する。測定時の移動相としてＡ溶液（７５％ イソプロパノール、１５％ アセトニトリル、５ｍＭ ギ酸アンモニウム）とＢ溶液（０．０１％ トリフルオロ酢酸、０．０９％ ギ酸）を用いる。
質量分析器によって検出された反応産物は、ＲａｐｉｄＦｉｒｅ Ｉｎｔｅｇｒａｔｏｒを用いて算出しＰｒｏｄｕｃｔ ａｒｅａ値とする。また、同時に検出されたＩｎｔｅｒｎａｌ Ｓｔａｎｄａｒｄも算出しＩｎｔｅｒｎａｌ Ｓｔａｎｄａｒｄ ａｒｅａ値とする。
＜各測定項目値の算出＞
・Ｐ／ＩＳの算出
前項目で得られたａｒｅａ値を下記の式によって計算し、Ｐ／ＩＳを算出する。
Ｐ／ＩＳ＝ Ｐｒｏｄｕｃｔ ａｒｅａ値／ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｓｔａｎｄａｒｄ ａｒｅａ値
・５０％ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ３ＣＬプロテアーゼ阻害濃度（ＩＣ_５０）算出
ｘを化合物濃度の対数値、ｙを％Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎとしたとき、以下のＬｏｇｉｓｔｉｃ回帰式で阻害曲線を近似し、ｙ＝５０（％）を代入したときのｘの値をＩＣ_５０として算出する。

ｙ ＝ ｍｉｎ ＋ （ｍａｘ － ｍｉｎ）／｛１ ＋ （Ｘ５０／ｘ） ＾Ｈｉｌｌ｝

％Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ ＝ ｛１－（Ｓａｍｐｌｅ － Ｃｏｎｔｒｏｌ（－）） ／ Ｃｏｎｔｒｏｌ（＋）－Ｃｏｎｔｒｏｌ（－））｝ ＊ １００

Ｃｏｎｔｒｏｌ（－）：ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｏｆ Ｐ／ＩＳ ｒａｔｉｏ ｉｎ ｔｈｅ ｗｅｌｌｓ ｗｉｔｈｏｕｔ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ３ＣＬ ｐｒｏｔｅａｓｅ ａｎｄ ｔｅｓｔ ｓｕｂｓｔａｎｃｅ
Ｃｏｎｔｒｏｌ（＋）：ｔｈｅ ａｖｅｒａｇｅ ｏｆ Ｐ／ＩＳ ｒａｔｉｏ ｉｎ ｔｈｅ ｗｅｌｌｓ ｗｉｔｈ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ３ＣＬ ｐｒｏｔｅａｓｅ ａｎｄ ｗｉｔｈｏｕｔ ｔｅｓｔ ｓｕｂｓｔａｎｃｅ

ｍｉｎ：ｙ軸下限値、ｍａｘ：ｙ軸上限値、Ｘ５０：変曲点のｘ座標、Ｈｉｌｌ：ｍｉｎとｍａｘの中間点でのカーブの傾き

本発明化合物を本質的に上記のとおり試験した。結果を以下に示す。

試験例３：式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶の投与によるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染マウスの肺内ウイルス力価増殖抑制試験
＜材料と方法＞
・化合物
式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶は、０．５％メチルセルロース（０．５％ＭＣ）溶液を用いて調製した。投与容量は、１０ｍＬ／ｋｇとした。投与量はフリー体で換算した量を示す。
・ウイルス
国立感染症研究所にて分離されたＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ７－５０１／２０２１株を用いた。
・マウス肺感染、投薬、肺回収
特定病原体不在の５週齢の雌性ＢＡＬＢ／ｃマウス（ＣＬＥＡ Ｊａｐａｎ，Ｉｎｃ．）を本研究において使用した。ウイルス接種の際、ＰＢＳ中に０．０３ｍｇ／ｍＬの塩酸メデトミジン、０．４ｍｇ／ｍＬのミダゾラム、０．５ｍｇ／ｍＬの酒石酸ブトルファノールを含む１００μＬの麻酔液の筋内投与によってマウスを麻酔した。マウスに、麻酔下で、５０μＬのｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ７－５０１／２０２１（１．００×１０^４ＴＣＩＤ_５０）を経鼻接種した。ウイルス感染直後を開始点として、マウス（ｎ＝５―１０／群）に、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を２ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、１６ｍｇ／ｋｇ、３２ｍｇ／ｋｇ、６４ｍｇ／ｋｇで単回もしくは１ｍｇ／ｋｇ、２ｍｇ／ｋｇ、４ｍｇ／ｋｇ、８ｍｇ／ｋｇ、１６ｍｇ／ｋｇ、３２ｍｇ／ｋｇの用量で１日２回経口投与した。対照マウスには、０．５％ＭＣを１日２回経口投与した。ウイルス感染１日後にマウス肺を回収し、２ｍＬのＰＢＳを添加、ホモジナイズし、遠心後の上清を回収した。
・肺内ウイルス力価の測定
肺ホモジネート液を培地（ＭＥＭ、２％ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシン）にて１０倍希釈系列を作製後、ＶｅｒｏＥ６／ＴＭＰＲＳＳ２細胞（ＪＣＲＢ１８１９、１．５×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）と混合し、９６ウェルプレートに播種した。ＣＯ_２インキュベーターで４日間培養後、Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ（ＣＰＥ）を観察し、肺ホモジネート液中に含まれるウイルス力価を算出した。
・統計解析
肺ホモジネート液中ウイルス力価の群間差を、ダネット検定によって分析した。統計解析は、統計解析ソフトウェアＳＡＳバージョン９．４Ｗｉｎｄｏｗｓ用（ＳＡＳ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ（Ｃａｒｙ，ＮＣ））を使用して実施した。調整済み両側Ｐ値０．０５未満は、統計的に有意であると見なした。

本発明化合物を本質的に上記のとおり試験した。結果を以下に示す。
式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶投与群は、単回もしくは１日２回いずれの投与においても用量依存的に感染1日後の肺内ウイルス力価を低下させ、２ｍｇ／ｋｇ以上の全ての投与量において０．５％ＭＣ投与群と比べて有意に低いウイルス力価を示した（図５Ａおよび図５Ｂ）。単回投与では３２、６４ｍｇ／ｋｇ投与群、１日２回投与では１６、３２ｍｇ／ｋｇ投与群で肺内ウイルス力価がおよそ定量下限（１．８０－ｌｏｇ_１０ＴＣＩＤ_５０／ｍＬ）に達した。

試験例４：式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶の遅延投与によるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染マウスの肺内ウイルス力価増殖抑制試験
＜材料と方法＞
・化合物
本発明化合物（式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶）は、０．５％メチルセルロース（０．５％ＭＣ）溶液を用いて調製した。投与容量は、１０ｍＬ／ｋｇとした。投与量はフリー体で換算した量を示す。
・ウイルス
国立感染症研究所にて分離されたＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ７－５０１／２０２１株を用いた。
・マウス肺感染、投薬、肺回収
特定病原体不在の５週齢の雌性ＢＡＬＢ／ｃマウス（ＣＬＥＡ Ｊａｐａｎ，Ｉｎｃ．）を本研究において使用した。ウイルス接種の際、ＰＢＳ中に０．０３ｍｇ／ｍＬの塩酸メデトミジン、０．４ｍｇ／ｍＬのミダゾラム、０．５ｍｇ／ｍＬの酒石酸ブトルファノールを含む１００μＬの麻酔液の筋内投与によってマウスを麻酔した。マウスに、麻酔下で、５０μＬのｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ７－５０１／２０２１（１．００×１０^４ＴＣＩＤ_５０）を経鼻接種した。ウイルス感染１日後もしくは３日後を開始点として、マウス（ｎ＝５／群）に、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を３０ｍｇ／ｋｇ、１５０ｍｇ／ｋｇの用量で１日２回経口投与した。対照マウスには、０．５％ＭＣを１日１回経口投与した。化合物投与は投与開始から２日間とした。投与開始から２日後にマウス肺を回収し、２ｍＬのＰＢＳを添加、ホモジナイズし、遠心後の上清を回収した。
・肺内ウイルス力価の測定
肺ホモジネート液を培地（ＭＥＭ、２％ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシン）にて１０倍希釈系列を作製後、ＶｅｒｏＥ６／ＴＭＰＲＳＳ２細胞（ＪＣＲＢ１８１９、１．５×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）と混合し、９６ウェルプレートに播種した。ＣＯ_２インキュベーターで４日間培養後、Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ（ＣＰＥ）を観察し、肺ホモジネート液中に含まれるウイルス力価を算出した。

本発明化合物を本質的に上記のとおり試験した。結果を以下に示す。
感染１日後から投与開始した群では、投与開始２日後の肺内ウイルス力価は０．５％ＭＣ投与群では６．４７－ｌｏｇ_１０ＴＣＩＤ_５０／ｍＬを示し、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶 ３０、１５０ｍｇ／ｋｇ投与群ではそれぞれ４．４７－ｌｏｇ_１０ＴＣＩＤ_５０／ｍＬ、２．９０－ｌｏｇ_１０ＴＣＩＤ_５０／ｍＬを示した（図６Ａ）。感染３日後から投与開始した群では、投与開始２日後の肺内ウイルス力価は０．５％ＭＣ投与群では４．８３－ｌｏｇ_１０ＴＣＩＤ_５０／ｍＬを示し、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶 ３０、１５０ｍｇ／ｋｇ投与群ではそれぞれ３．６３－ｌｏｇ_１０ＴＣＩＤ_５０／ｍＬ、３．３５－ｌｏｇ_１０ＴＣＩＤ_５０／ｍＬを示した（図６Ｂ）。
投与開始が感染１日後、３日後のどちらの場合においても式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶投与群では肺内ウイルス力価が０．５％ＭＣ投与群に比べて低値を示したことから、感染から投与までの期間が空いても肺内ウイルス力価を低減する効果があることが示唆された。

試験例４－２：式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶の遅延投与によるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染マウスの肺内ウイルス力価増殖抑制試験
＜材料と方法＞
・化合物
式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶は、０．５％メチルセルロース（０．５％ＭＣ）溶液を用いて調製した。投与容量は、１０ｍＬ／ｋｇとした。投与量はフリー体で換算した量を示す。
・ウイルス
国立感染症研究所にて分離されたＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ７－５０１／２０２１株を用いた。
・マウス肺感染、投薬、肺回収
特定病原体不在の５週齢の雌性ＢＡＬＢ／ｃマウス（ＣＬＥＡ Ｊａｐａｎ，Ｉｎｃ．）を本研究において使用した。ウイルス接種の際、ＰＢＳ中に０．０３ｍｇ／ｍＬの塩酸メデトミジン、０．４ｍｇ／ｍＬのミダゾラム、０．５ｍｇ／ｍＬの酒石酸ブトルファノールを含む１００μＬの麻酔液の筋内投与によってマウスを麻酔した。マウスに、麻酔下で、５０μＬのｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ７－５０１／２０２１（１．００×１０^４ＴＣＩＤ_５０）を経鼻接種した。ウイルス感染１日後を開始点として、マウス（ｎ＝５／群）に、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を８、１６、３２、６４ｍｇ／ｋｇの用量で１日３回経口投与した。対照マウスには、０．５％ＭＣを１日１回経口投与した。化合物投与は投与開始から２日間とした。投与開始から２日後にマウス肺を回収し、２ｍＬのＰＢＳを添加、ホモジナイズし、遠心後の上清を回収した。
・肺内ウイルス力価の測定
肺ホモジネート液を培地（ＭＥＭ、２％ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシン）にて１０倍希釈系列を作製後、ＶｅｒｏＥ６／ＴＭＰＲＳＳ２細胞（ＪＣＲＢ１８１９、１．５×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）と混合し、９６ウェルプレートに播種した。ＣＯ_２インキュベーターで４日間培養後、Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ（ＣＰＥ）を観察し、肺ホモジネート液中に含まれるウイルス力価を算出した。

本発明化合物を本質的に上記のとおり試験した。結果を以下に示す。
感染１日後から投与開始した群では、投与開始２日後の肺内ウイルス力価は０．５％ＭＣ投与群では６．５７－ｌｏｇ_１０ＴＣＩＤ_５０／ｍＬを示し、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶 ８、１６、３２、６４ｍｇ／ｋｇ投与群ではそれぞれ５．５５、４．６６、２．８５、２．４０－ｌｏｇ_１０ＴＣＩＤ_５０／ｍＬを示した。式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶投与群では肺内ウイルス力価が０．５％ＭＣ投与群に比べて低値を示したことから、感染から投与までの期間が空いても肺内ウイルス力価を低減する効果があることが示唆された（図７）。

試験例５：式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶の投与によるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染マウスの致死、体重減少抑制試験
＜材料と方法＞
・化合物
本発明化合物（式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶）は、０．５％メチルセルロース（０．５％ＭＣ）溶液を用いて調製した。投与容量は、１０ｍＬ／ｋｇとした。投与量はフリー体で換算した量を示す。
・ウイルス
国立感染症研究所にて分離されたＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ７－５０１／２０２１株（ＴＹ７－５０１）および北海道大学で分離したＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ／ＷＫ－５２１／２０２０株マウス馴化株ＭＡ－Ｐ１０を用いた。
・マウス肺感染、投薬、体重測定
特定病原体不在の１５週齢もしくは３５－４５週齢リタイヤの雌性ＢＡＬＢ／ｃマウス（ＣＬＥＡ Ｊａｐａｎ，Ｉｎｃ．）を本研究において使用した。ウイルス接種の際、ＰＢＳ中に０．０３ｍｇ／ｍＬの塩酸メデトミジン、０．４ｍｇ／ｍＬのミダゾラム、０．５ｍｇ／ｍＬの酒石酸ブトルファノールを含む１００μＬの麻酔液の筋内投与によってマウスを麻酔した。マウスに、麻酔下で、５０μＬのＴＹ７－５０１（１．００×１０^５ＴＣＩＤ_５０）、ＭＡ－Ｐ１０（１．００×１０^３ＴＣＩＤ_５０もしくは１．００×１０^４ＴＣＩＤ_５０）を経鼻接種した。ＴＹ７－５０１は３５－４５週齢リタイヤマウスのみ使用した。ウイルス感染１日後から、マウス（ｎ＝４／群）に、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を５０ｍｇ／ｋｇで１日２回経口投与した。対照マウスには、０．５％ＭＣを１日２回経口投与した。体重を１日１回モニタリングし、生存率の評価においては、感染直前の体重を基準として８０％未満となった場合には死亡と見做した。

本発明化合物を本質的に上記のとおり試験した。結果を以下に示す。
高週齢３５－４５週齢リタイヤマウスにＴＹ７－５０１ １．００×１０^５ＴＣＩＤ_５０を感染させた場合、感染３日後から体重が減少し、感染５日後に全例が死亡した。このとき式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶 ５０ｍｇ／ｋｇ投与群では観察した感染７日後まで全例が生存し、体重減少が抑制された（図８Ａおよび図８Ｂ）。１５週齢マウスにＭＡ－Ｐ１０ １．００×１０^３ＴＣＩＤ_５０を感染させた場合、感染３日後から体重減少を認めたものの、死亡例は認められなかった。一方で、１５週齢マウスにＭＡ－Ｐ１０ １．００×１０^４ＴＣＩＤ_５０を感染させた場合、感染３日後から体重が減少し、感染４日後に一部の個体で死亡例が認められ、感染６日後に全例が死亡した。このとき式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶 ５０ｍｇ／ｋｇ投与群では観察した感染７日後まで全例が生存し、体重減少が認められなかった（図８Ｃおよび図８Ｄ）。
次に、高週齢３５－４５週齢リタイヤマウスにＭＡ－Ｐ１０ １．００×１０^３ＴＣＩＤ_５０を感染させた場合、感染３日後から体重が減少し、感染５日後に一部の個体で死亡例が認められ、感染６日後に全例が死亡したことから、高週齢である３５－４５週齢リタイヤマウスではより低感染量でも重症化しやすいと考えられる。このとき式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶 ５０ｍｇ／ｋｇ投与群では観察した感染７日後まで全例が生存し、体重減少が抑制された（図８Ｅおよび図８Ｆ）。
以上の結果から、１５週齢マウスおよび高週齢３５－４５週齢リタイヤマウスのいずれにおいても、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶投与により致死および体重減少抑制効果があることが示唆された。

若齢マウスと比較すると、加齢マウスでは、ヒトと同様、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の受容体として知られているＡＣＥ２受容体の発現量が増加することが知られており（参考文献：Scientific Reports (2020)10:22401およびMolecular Therapy Methods & Clinical Development, Vol. 18, P1-6, 2020）、また感染源から身体を防御し、それらを排除する正常な免疫応答が低下するため、ウイルス感染により致死に至ることが想定される。しかしながら、上記に示す通り、加齢マウスを用いたＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染マウスモデルにおいて、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶の投与により、感染７日後のマウスの生存率は１００％を示した。加齢マウスを用いた非臨床試験は、基礎疾患を有するハイリスク患者が重症化に至る過程を模した非臨床評価系の一つとして位置づけられるため、重症化リスクの高い患者に対する治療オプションとして、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶の有用性を支持する。
また、上記試験結果は、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶投与群においてウイルス感染による重症化が抑制されたことを示唆しており、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２に対する抗ウイルス効果のみならず、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の重症化抑制用医薬としての有用性を支持する。

試験例６：ＳＡＲＳ－ＣｏＶに対する抗ウイルス効果
＜材料＞
・維持培地（２％ ＦＢＳ ｉｎ ＭＥＭ）
１０００ｍＬのＭｉｎｉｍｕｍ Ｅｓｓｅｎｔｉａｌ Ｍｅｄｉｕｍに８．５％ ＮａＨＣＯ_３を１０ｍＬ、ＦＢＳを２０ｍＬ、Ｌ－Ｇｌｕｔａｍｉｎｅを１０ｍＬ加えて調製した。
・ＭＴＴ液
３－（４，５－ｄｉｍｅｔｈｙｌ－２－ｔｈｉａｚｏｌ）－２，５－ｄｉｐｈｅｎｙｌ－２Ｈ－ｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ ｂｒｏｍｉｄｅを５μｇ／ｍＬになるようにＰＢＳで溶解後、０．４５μｍあるいは０．２２μｍフィルターでろ過した。
・細胞溶解液（ウイルス不活化液）
５００ｍＬイソプロパノールに５０ｍＬのＴｒｉｔｏｎ Ｘ、４ｍＬの塩酸（１２ｍｏｌ／Ｌ）を入れて調製した。
・Ｄｉｍｅｔｈｙｌ ｓｕｌｆｏｘｉｄｅ（ＤＭＳＯ）
・プレートリーダー（サーモフィッシャー社、パーキンエルマー社、等）

＜操作手順＞
・被験試料の希釈、分注
予め被験試料をＤＭＳＯで適当な濃度に希釈し、３倍段階希釈系列を作製した。さらに維持培地で希釈して５０μＬ／ｗｅｌｌとなるように９６ウェルプレートに分注した。
・細胞およびウイルスの希釈、分注
ウイルス（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ Ｈａｎｏｉ ｓｔｒａｉｎ（１０００ＴＣＩＤ_５０／ｗｅｌｌ））をそれぞれ維持培地で希釈し、被験試料が入った９６ｗｅｌｌプレートに５０μＬ／ｗｅｌｌずつ分注した。
維持培地で調製したＶｅｒｏＥ６／ＴＭＰＲＳＳ２細胞（１．５×１０⁴ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）を、被験試料およびウイルスが入った９６ ｗｅｌｌプレートに１００μＬ／ｗｅｌｌずつ分注した。プレートミキサーで混和し、ＣＯ_２インキュベーターで３日間培養した。
・ＭＴＴ液、細胞溶解液の分注
３日間培養した９６ ｗｅｌｌプレートを肉眼、顕微鏡下で観察し、細胞の形態・結晶の有無等を確認した。ＭＴＴ液を各ｗｅｌｌに３０μＬずつ分注し、ＣＯ_２インキュベーターで４～６時間培養した。プレートから細胞を吸わないように上清を１５０μＬずつ除いた。細胞溶解液（ウイルス不活化液）を各ｗｅｌｌに１５０μＬずつ分注した。乾燥しないようにプレートをラップで包み、室温で一晩放置した。
・吸光度の測定（９６ ｗｅｌｌプレート）
翌日プレートをプレートミキサーで混和した。９６ｗｅｌｌプレートは、プレートリーダーを用いて５７０ｎｍと６３０ｎｍの２波長の吸光度を測定した。

＜各測定項目値の算出＞
・５０％ ウイルス感染細胞死阻害濃度（ＥＣ_５０）算出
ｘを化合物濃度の対数値、ｙを％Ｅｆｆｉｃａｃｙとしたとき、以下のＬｏｇｉｓｔｉｃ回帰式で阻害曲線を近似し、ｙ＝５０（％）を代入したときのｘの値をＥＣ_５０として算出した。

y = min + (max - min)/{1 + (X50/x) ^Hill}

%Efficacy = {(Sample - virus control) / (cell control - virus control)} * 100%

Sample：the average of ODs of Sample wells
cell control： the average of ODs of cell control wells
virus control： the average of ODs of virus control wells
OD：OD(570 nm)-OD(630 nm)

min；y軸下限値、max；y軸上限値、X50;変曲点のx座標、Hill；minとmaxの中間点でのカーブの傾き

本発明化合物を本質的に上記のとおり試験した。ＥＣ_５０を以下に示す。
式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶：ＳＡＲＳ－ＣｏＶ ０．２０９μＭ

試験例７：ＨＣｏＶ－ＯＣ４３に対する抗ウイルス効果
＜操作手順＞
・被験試料の希釈、分注
予め被験試料をＤＭＳＯで適度な濃度に希釈し、３倍段階希釈系列を作製後、９６ウェルプレートに分注し維持培地（ＭＥＭ、２％ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシン）で希釈する。
・細胞およびＨＣｏＶ－ＯＣ４３の希釈、分注
継代培地（ＤＭＥＭ、１０％ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシン）に懸濁させたＭＲＣ－５細胞（２×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）を感染前日に９６ｗｅｌｌプレートに播種し、翌日、維持培地（ＭＥＭ、２％ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシン）に懸濁させたＨＣｏＶ－ＯＣ４３（１００ＴＣＩＤ_５０／ｗｅｌｌ）を1時間で感染させる。その後、維持培地で1回洗浄後、被験試薬が入った維持培地を添加し、ＣＯ_２インキュベーターで４２時間培養する。また被験試薬の細胞毒性を調べるために、ウイルス非存在下にて同様の操作を実施する。
・ウイルス量の定量
４２時間培養したプレートの上清を回収し、Ｑｕｉｃｋ－ＲＮＡ Ｖｉｒａｌ Ｋｉｔ（ＺＹＭＯ ＲＥＳＥＡＲＣＨ、＃Ｒ１０４１）を用いてＲＮＡを抽出する。抽出後のＲＮＡ溶液をリアルタイムＰＣＲ（Ａｐｐｌｉｅｄ ＢｉｏＳｙｓｔｅｍｓ ＱｕａｎｔＳｔｕｄｉｏ３）にて定量する。プライマーは文献を参照する（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ．、２００５、Ｊｕｎ ４３（１１）、５４５２－５４５６）。

＜各測定項目値の算出＞
・９０％ ＨＣｏＶ－ＯＣ４３ウイルス複製阻害濃度（ＥＣ_９０）算出
ｘを化合物濃度の対数値、ｙをウイルスのコピー数（Ｌｏｇ ｃｏｐｉｅｓ／ｍＬ）とした濃度依存性曲線においてウイルスコントロールからの１ ｌｏｇ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎに相当する値をその前後の２濃度のコピー数から二点法で算出する。すなわち、
X = log10 (high conc.)
x = log10 (low conc.)
Y = log10 (low copies/mL) - log10 (control copies /mL)
y = log10 (high copies /mL) - log10 (control copies /mL)
EC₉₀ value was calculated by the following formula.
EC₉₀ = 10[x + (-1 - y) × (X - x)/(Y - y)]

本発明化合物を本質的に上記のとおり試験した。結果を以下に示す。
式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶：ＥＣ_９０ ０．０７４μＭ

試験例８：ＨＣｏＶ－２２９Ｅに対する抗ウイルス効果
＜操作手順＞
・被験試料の希釈、分注
予め被験試料をＤＭＳＯで適度な濃度に希釈し、３倍段階希釈系列を作製後、９６ウェルプレートに分注し維持培地（ＭＥＭ、２％ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシン）で希釈する。
・細胞およびＨＣｏＶ－２２９Ｅの希釈、分注
継代培地（ＤＭＥＭ、１０％ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシン）に懸濁させたＭＲＣ－５細胞（２×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）を感染前日に９６ｗｅｌｌプレートに播種し、翌日、維持培地（ＭＥＭ、２％ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシン）に懸濁させたＨＣｏＶ－２２９Ｅ（１０００ＴＣＩＤ_５０／ｗｅｌｌ）を1時間で感染させる。その後、ウイルス液を除去し、被験試薬が入った維持培地を添加し、ＣＯ_２インキュベーターで７２時間培養する。また被験試薬の細胞毒性を調べるために、ウイルス非存在下にて同様の操作を実施する。
・ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０の分注および発光シグナルの測定
７２時間培養したプレートを室温に戻した後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０を各ウェルに分注し、プレートミキサーで混和する。一定時間置いた後、プレートリーダーで発光シグナル（Ｌｕｍ）を測定する。

＜各測定項目値の算出＞
・５０％ ＨＣｏＶ－２２９Ｅ感染細胞死阻害濃度（ＥＣ_５０）算出
ｘを化合物濃度の対数値、ｙを％Ｅｆｆｉｃａｃｙとしたとき、以下のＬｏｇｉｓｔｉｃ回帰式で阻害曲線を近似し、ｙ＝５０（％）を代入したときのｘの値をＥＣ_５０として算出する。

y = min + (max - min)/{1 + (X50/x) ^Hill}

%Efficacy = {(Sample - virus control) / (cell control - virus control)} * 100%
cell control： the average of Lum of cell control wells
virus control： the average of Lum of virus control wells

min：y軸下限値、max：y軸上限値、X50：変曲点のx座標、Hill：minとmaxの中間点でのカーブの傾き

・５０％細胞毒性濃度の算出
ｘを化合物濃度の対数値、ｙを％Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙとしたとき、以下のＬｏｇｉｓｔｉｃ回帰式で阻害曲線を近似し、ｙ＝５０（％）を代入したときのｘの値をＣＣ_５０として算出する。

y = min + (max - min)/{1 + (X50/x) ^Hill}

%Cytotoxicity = {(Sample - medium control) / (cell control - medium control)} * 100%
cell control： the average of Lum of cell control wells
medium control： the average of Lum of medium control wells

min：y軸下限値、max：y軸上限値、X50：変曲点のx座標、Hill：minとmaxの中間点でのカーブの傾き

本発明化合物を本質的に上記のとおり試験した。結果を以下に示す。
式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶：ＥＣ_５０ ５．５３μＭ、ＣＣ_５０＞２００μＭ

試験例９：抗ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２活性に対するヒト血清及びマウス血清の影響
＜操作手順＞
・被験試料の希釈、分注
予め被験試料をＤＭＳＯで適度な濃度に希釈し、３倍段階希釈系列を作製後、９６ウェルプレートに分注する。
・血清添加培地の添加
０、６．２５％、１２．５、２５、５０％ヒト血清もしくは０、３．１２５、６．２５、１２．５、２５％マウス血清となるよう培地（ＭＥＭ、２％ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシン）で調整し、被験試料が入ったウェルに分注し、室温で１時間インキュベートする。
・細胞およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の希釈、分注
ＶｅｒｏＥ６／ＴＭＰＲＳＳ２細胞（ＪＣＲＢ１８１９、１．５×１０^３ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）とＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ７－５０１／２０２１（ヒト血清では１０００ＴＣＩＤ_５０／ｗｅｌｌ、マウス血清では１００００ＴＣＩＤ_５０／ｗｅｌｌ）を培地（ＭＥＭ、２％ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシン）で混合し、被験試料およびヒト血清、マウス血清が入ったウェルに等量分注した後、ＣＯ_２インキュベーターで３日間培養する。
・ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０の分注および発光シグナルの測定
３日間培養したプレートを室温に戻した後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０を各ウェルに分注し、プレートミキサーで混和する。一定時間置いた後、プレートリーダーで発光シグナル（Ｌｕｍ）を測定する。

＜各測定項目値の算出＞
・５０％ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染細胞死阻害濃度（ＥＣ_５０）算出
ｘを化合物濃度の対数値、ｙを％Ｅｆｆｉｃａｃｙとしたとき、以下のＬｏｇｉｓｔｉｃ回帰式で阻害曲線を近似し、ｙ＝５０（％）を代入したときのｘの値をＥＣ_５０として算出する。

y = min + (max - min)/{1 + (X50/x) ^Hill}

%Efficacy = {(Sample - virus control) / (cell control - virus control)} * 100%
cell control： the average of Lum of cell control wells
virus control： the average of Lum of virus control wells

min：y軸下限値、max：y軸上限値、X50：変曲点のx座標、Hill：minとmaxの中間点でのカーブの傾き

・Ｐｒｏｔｅｉｎ－Ａｄｊｕｓｔｅｄ ＥＣ_５０（ＰＡ－ＥＣ_５０）の算出
各血清濃度でのＥＣ_５０を算出後、線形回帰によって血清１００％条件でのＰＡ－ＥＣ_５０値を計算した。

本発明化合物を本質的に上記のとおり試験した。結果を以下に示す。
式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶：ヒト血清ＰＡ－ＥＣ_５０ ３．０２μＭ、マウス血清ＰＡ－ＥＣ_５０ ３．９３μＭ

試験例１０－１：ｈｕｍａｎ ＡＣＥ２、ＴＭＰＲＳＳ２発現ＨＥＫ２９３Ｔ細胞（ＨＥＫ２９３Ｔ／ＡＣＥ２－ＴＭＰＲＳＳ２細胞）を用いたＣｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ（ＣＰＥ）抑制効果確認試験
＜操作手順＞
・被験試料の希釈、分注
予め被験試料をＤＭＳＯで適度な濃度に希釈し、３倍段階希釈系列を作製後、９６ウェルプレートに分注する。
・細胞およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の希釈、分注
ＨＥＫ２９３Ｔ／ＡＣＥ２－ＴＭＰＲＳＳ２細胞（ＳＬ２２２、１．５×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）とＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ／ＷＫ－５２１／２０２０、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＱＫ００２／２０２０、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ７－５０１／２０２１、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ８－６１２／２０２１、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ１１－９２７－Ｐ１／２０２１（３０００－９０００ＴＣＩＤ_５０／ｗｅｌｌ）を培地（ＭＥＭ、２％ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシン）で混合し、被験試料が入ったウェルに分注した後、ＣＯ_２インキュベーターで３日間培養する。
・ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０の分注および発光シグナルの測定
３日間培養したプレートを室温に戻した後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０を各ウェルに分注し、プレートミキサーで混和する。一定時間置いた後、プレートリーダーで発光シグナル（Ｌｕｍ）を測定する。

＜各測定項目値の算出＞
・５０％ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染細胞死阻害濃度（ＥＣ_５０）算出
ｘを化合物濃度の対数値、ｙを％Ｅｆｆｉｃａｃｙとしたとき、以下のＬｏｇｉｓｔｉｃ回帰式で阻害曲線を近似し、ｙ＝５０（％）を代入したときのｘの値をＥＣ_５０として算出する。

y = min + (max - min)/{1 + (X50/x) ^Hill}

%Efficacy = {(Sample - virus control) / (cell control - virus control)} * 100%
cell control： the average of Lum of cell control wells
virus control： the average of Lum of virus control wells

min：y軸下限値、max：y軸上限値、X50：変曲点のx座標、Hill：minとmaxの中間点でのカーブの傾き

本発明化合物を本質的に上記のとおり試験した。結果を以下に示す。
式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶：０．０２６－０．０５８μＭ

試験例１０－２：ｈｕｍａｎ ＡＣＥ２、ＴＭＰＲＳＳ２発現ＨＥＫ２９３Ｔ細胞（ＨＥＫ２９３Ｔ／ＡＣＥ２－ＴＭＰＲＳＳ２細胞）を用いたＣｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ（ＣＰＥ）抑制効果確認試験
＜操作手順＞
・被験試料の希釈、分注
予め被験試料をＤＭＳＯで適度な濃度に希釈し、３倍段階希釈系列を作製後、９６ウェルプレートに分注する。
・細胞およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２の希釈、分注
ＨＥＫ２９３Ｔ／ＡＣＥ２－ＴＭＰＲＳＳ２細胞 （ＳＬ２２２、１．５×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）とＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ３８－８７３／２０２１（９０００ＴＣＩＤ_５０／ｗｅｌｌ）を培地（ＭＥＭ、２％ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシン）で混合し、被験試料が入ったウェルに分注した後、ＣＯ_２インキュベーターで３日間培養する。
・ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０の分注および発光シグナルの測定
３日間培養したプレートを室温に戻した後、ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｇｌｏ（登録商標）２．０を各ウェルに分注し、プレートミキサーで混和する。一定時間置いた後、プレートリーダーで発光シグナル（Ｌｕｍ）を測定する。

＜各測定項目値の算出＞
・５０％ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染細胞死阻害濃度（ＥＣ_５０）算出
ｘを化合物濃度の対数値、ｙを％Ｅｆｆｉｃａｃｙとしたとき、以下のＬｏｇｉｓｔｉｃ回帰式で阻害曲線を近似し、ｙ＝５０（％）を代入したときのｘの値をＥＣ_５０として算出する。

y = min + (max - min)/{1 + (X50/x) ^Hill}

%Efficacy = {(Sample - virus control) / (cell control - virus control)} * 100%
cell control： the average of Lum of cell control wells
virus control： the average of Lum of virus control wells

min：y軸下限値、max：y軸上限値、X50：変曲点のx座標、Hill：minとmaxの中間点でのカーブの傾き

本発明化合物を本質的に上記のとおり試験した。結果を以下に示す。
式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶：０．０８３μＭ

試験例１１：式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶の予防投与によるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染動物から非感染動物へのウイルス伝播抑制試験
＜材料と方法＞
・化合物
式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶は、０．５％メチルセルロース（０．５％ＭＣ）溶液を用いて調製した。投与容量は、１０ｍＬ／ｋｇとした。投与量はフリー体で換算した量を示す。
・ウイルス
国立感染症研究所にて分離されたＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ１１－９２７／２０２１株を用いた。
・ハムスター肺感染、投薬、肺回収
特定病原体不在の５週齢の雄性シリアンハムスター（Ｊａｐａｎ ＳＬＣ，Ｉｎｃ．）を本研究において使用した。ウイルスを接種する感染ハムスター１匹とウイルスを接種しない投薬ハムスター３匹を同一ケージ内で飼育し、感染ハムスターと同居する投薬ハムスターへのウイルス伝播を試験した。ウイルス接種の際、イソフルランの吸入投与によってハムスターを麻酔した。ハムスターに、麻酔下で、２００μＬのｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ１１－９２７／２０２１（５．００×１０³ＰＦＵ）を経鼻接種した。ウイルス接種をしない投薬ハムスターには、感染ハムスターへのウイルス接種時を開始点として、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を３０、２００ｍｇ／ｋｇの用量で１日２回経口投与した。対照ハムスターには、０．５％ＭＣを１日２回経口投与した。化合物投与は投与開始から６日間とした。投与開始から６日後にハムスター肺を回収し、５ｍＬのＰＢＳを添加、ホモジナイズし、遠心後の上清を回収した。
・肺内ウイルス力価の測定
肺ホモジネート液を培地（ＭＥＭ、２％ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシン）にて１０倍希釈系列を作製後、予め２４ウェルプレートに培養したＶｅｒｏＥ６／ＴＭＰＲＳＳ２細胞（ＪＣＲＢ１８１９、２．０×１０⁵ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）へ接種した。ＣＯ_２インキュベーターで２日間培養後、ウイルスプラークを観察し、肺ホモジネート液中に含まれるウイルス力価を算出した。

本発明化合物を本質的に上記のとおり試験した。結果を以下に示す。
感染ハムスターとの同居開始6日後、投薬ハムスターの肺内ウイルス力価は０．５％ＭＣ投与群では６．１２－ｌｏｇ_１０ＰＦＵ／ｍＬを示し、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶 ３０、２００ｍｇ／ｋｇ投与群ではそれぞれ３．４８－ｌｏｇ_１０ＰＦＵ_５０／ｍＬ、検出限界値以下を示した（図９）。式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶投与群では肺内ウイルス力価が０．５％ＭＣ投与群に比べて低値を示したことから、感染ハムスターからのウイルス伝播を低減する効果があることが示唆された。

試験例１２：式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶の感染直後投与によるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染動物から非感染動物へのウイルス伝播抑制試験
＜材料と方法＞
・化合物
式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶は、０．５％メチルセルロース（０．５％ＭＣ）溶液を用いて調製した。投与容量は、１０ｍＬ／ｋｇとした。投与量はフリー体で換算した量を示す。
・ウイルス
国立感染症研究所にて分離されたＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ１１－９２７／２０２１株を用いた。
・ハムスター肺感染、投薬、肺回収
特定病原体不在の５週齢の雄性シリアンハムスター（Ｊａｐａｎ ＳＬＣ，Ｉｎｃ．）を本研究において使用した。ウイルスを接種する感染ハムスター１匹とウイルスを接種しない非感染ハムスター２匹を同一ケージ内で飼育し、感染ハムスターと同居する非感染ハムスターへのウイルス伝播を試験した。ウイルス接種の際、イソフルランの吸入投与によってハムスターを麻酔し、２００μＬのｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ１１－９２７／２０２１（５．００×１０³ＰＦＵ）を経鼻接種した。感染ハムスターには、ウイルス接種時を開始点として、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を２００ｍｇ／ｋｇの用量で１日２回経口投与した。対照の感染ハムスターには、０．５％ＭＣを１日２回経口投与した。化合物投与は投与開始から４日間とした。感染６日後に非感染ハムスター肺を回収し、５ｍＬのＰＢＳを添加、ホモジナイズし、遠心後の上清を回収した。
・肺内ウイルス力価の測定
肺ホモジネート液を培地（ＭＥＭ、２％ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシン）にて１０倍希釈系列を作製後、予め２４ウェルプレートに培養したＶｅｒｏＥ６／ＴＭＰＲＳＳ２細胞（ＪＣＲＢ１８１９、２．０×１０⁵ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）へ接種した。ＣＯ_２インキュベーターで２日間培養後、ウイルスプラークを観察し、肺ホモジネート液中に含まれるウイルス力価を算出した。

本発明化合物を本質的に上記のとおり試験した。結果を以下に示す。
感染ハムスターとの同居開始６日後、非感染ハムスターの肺内ウイルス力価は０．５％ＭＣ投与群では６．３６－ｌｏｇ_１０ＰＦＵ／ｍＬを示し、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶 ２００ｍｇ／ｋｇ投与群では検出限界値以下を示した（図１０）。式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶投与群では肺内ウイルス力価が０．５％ＭＣ投与群に比べて低値を示したことから、感染ハムスターからのウイルス伝播を低減する効果があることが示唆された。

試験例１３：式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶の感染後遅延投与によるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染動物から非感染動物へのウイルス伝播抑制試験
＜材料と方法＞
・化合物
式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶は、０．５％メチルセルロース（０．５％ＭＣ）溶液を用いて調製した。投与容量は、５ｍＬ／ｋｇとした。投与量はフリー体で換算した量を示す。
・ウイルス
国立感染症研究所にて分離されたＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ１１－９２７／２０２１株を用いた。
・ハムスター肺感染、投薬、肺及び鼻甲介回収
特定病原体不在の６週齢の雄性シリアンハムスター（Ｊａｐａｎ ＳＬＣ，Ｉｎｃ．）を本研究において使用した。ウイルスを接種する感染ハムスター１匹とウイルスを接種しない非感染ハムスター１匹を、感染２日後を開始点として同一ケージ内で飼育し、感染ハムスターと同居する非感染ハムスターへのウイルス伝播を試験した。各群ｎ＝３で実施した。ウイルス接種の際、０．０７ｍｇ／ｍＬの塩酸メデトミジン、６．９８ｍｇ／ｍＬのアルファキサロン、１．１６ｍｇ／ｍＬの酒石酸ブトルファノールを含む２００μＬの麻酔液の皮下投与によってハムスターを麻酔し、１００μＬのｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ１１－９２７／２０２１（１．００×１０^２TCID_５０）を経鼻接種した。感染ハムスターには、ウイルス接種１日後を開始点として、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶を５０ｍｇ／ｋｇの用量で１日２回経口投与した。対照の感染ハムスターには、０．５％ＭＣを１日２回経口投与した。化合物投与は投与開始から４日間とした。感染５日後に感染及び非感染ハムスター肺及び鼻甲介を回収し、それぞれ５ｍＬ若しくは１ｍLのＰＢＳを添加、ホモジナイズし、遠心後の上清を回収した。
・肺内及び鼻甲介内ウイルス力価の測定
肺若しくは鼻甲介ホモジネート液を培地（ＭＥＭ、２％ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシン）にて１０倍希釈系列を作製後、予め９６ウェルプレートに培養したＶｅｒｏＥ６／ＴＭＰＲＳＳ２細胞（ＪＣＲＢ１８１９、１．５×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）へ接種した。ＣＯ_２インキュベーターで５日間培養後、Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ（ＣＰＥ）を観察し、肺若しくは鼻甲介ホモジネート液中に含まれるウイルス力価を算出した。

本発明化合物を本質的に上記のとおり試験した。結果を以下に示す。
感染ハムスターとの同居開始３日後、非感染ハムスターの肺内ウイルス力価は０．５％ＭＣ投与群では５．３０－ｌｏｇ_１０TCID_５０／ｍＬを示し、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶 ５０ｍｇ／ｋｇ投与群では２．９７－ｌｏｇ_１０TCID_５０／ｍＬを示した（図１１A）。また、感染ハムスターとの同居開始３日後、非感染ハムスターの鼻甲介内ウイルス力価は０．５％ＭＣ投与群では６．０６－ｌｏｇ_１０TCID_５０／ｍＬを示し、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶 ５０ｍｇ／ｋｇ投与群では２．８９－ｌｏｇ_１０ＴＣＩＤ_５０／ｍＬを示した（図１１Ｂ）。式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のフマル酸共結晶Ｉ形結晶投与群では肺内及び鼻甲介内のウイルス力価が０．５％ＭＣ投与群に比べて低値を示したことから、感染ハムスターからのウイルス伝播を低減する効果があることが示唆された。

試験例１４：式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物の予防投与によるＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染マウスの致死、体重減少抑制試験
＜材料と方法＞
・化合物
本発明化合物（式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物）は、０．５％メチルセルロース（０．５％ＭＣ）溶液を用いて調製した。投与容量は、１０ｍＬ／ｋｇ×２か所とした。
・ウイルス
北海道大学で分離したＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｈＣｏＶ１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ／ＷＫ－５２１／２０２０株マウス馴化株ＭＡ－Ｐ１０を用いた。
・マウス肺感染、投薬、体重測定
特定病原体不在の３７－５７週齢リタイヤの雌性ＢＡＬＢ／ｃマウス（ＣＬＥＡ Ｊａｐａｎ，Ｉｎｃ．）を本研究において使用した。ウイルス接種の際、ＰＢＳ中に０．０３ｍｇ／ｍＬの塩酸メデトミジン、０．４ｍｇ／ｍＬのミダゾラム、０．５ｍｇ／ｍＬの酒石酸ブトルファノールを含む１００μＬの麻酔液の筋内投与によってマウスを麻酔した。マウスに、麻酔下で、５０μＬのＭＡ－Ｐ１０（３．００×１０^２ＴＣＩＤ_５０）を経鼻接種した。ウイルス感染１日前に、マウス（ｎ＝１５／群）に、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物を３２、６４、９６、１２８ｍｇ／ｋｇで１回皮下投与した。対照マウスには、０．５％ＭＣを１回皮下投与した。体重を１日１回モニタリングし、生存率の評価においては、感染直前の体重を基準として８０％未満となった場合には死亡と見做した。

本発明化合物を本質的に上記のとおり試験した。結果を以下に示す。
高週齢３７－５７週齢リタイヤマウスにＭＡ－Ｐ１０ ３．００×１０^２ＴＣＩＤ_５０を感染させた場合、感染翌日から体重が減少し、感染４日後に一部の個体で死亡例が認められ、感染８日後に全例が死亡した。このとき式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物 ３２、６４、９６、１２８ｍｇ／ｋｇ投与群では感染１４日後までの生存率はそれぞれ６．７％、６０％、８０％、１００％であり、３２ｍｇ／ｋｇ以上の投与群では体重減少が抑制された（図１２A、B）。なお、感染直前、つまりは投与１日後の血漿中濃度を測定したところ、それぞれ１７４０、２９９０、３１１０、３３７０μｇ／ｍＬであった。
以上の結果から、高週齢３７－５７週齢リタイヤマウスにおいて、感染１日前に式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物を６４ｍｇ／ｋｇ以上を皮下投与し、ウイルス感染時の血漿中濃度が２９９０μｇ／ｍＬ以上で致死および体重減少抑制効果があることが示された。

上記試験結果は、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物の予防的な皮下投与においてウイルス感染による重症化が抑制されたことを示しており、式（Ｉ－Ｂ）で示される化合物のＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の予防薬としての有用性を支持する。

試験例１５：ｈｕｍａｎ ａｉｒｗａｙ ｅｐｉｔｈｅｌｉａｌ ｃｅｌｌｓ細胞を用いたウイルス増殖抑制効果確認試験
＜操作手順＞
・被験試料の希釈、分注
予め被験試料をＤＭＳＯで適度な濃度に希釈し、３倍段階希釈系列を作製後、ＭｕｃｉｌＡｉｒ^ＴＭ培養液で２００倍希釈し、２４ウェルプレートに分注した。
・ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２感染
Ｔｒａｎｓｗｅｌｌに播種してあるＭｕｃｉｌＡｉｒ^ＴＭ（Ｎａｓａｌ ｃａｖｉｔｙ、約５．０×１０^５ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）にＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ１１－９２７－Ｐ１／２０２１、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ３８－８７３／２０２１（５０００ＴＣＩＤ_５０／ｗｅｌｌ）を感染させ、ＣＯ_２インキュベーターで２時間培養した。その後ＭｕｃｉｌＡｉｒ^ＴＭ培養液で洗浄し、ｔｒａｎｓｗｅｌｌを被験試料が入ったウェルに乗せ、ＣＯ_２インキュベーターで培養した。ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ１１－９２７－Ｐ１／２０２１は感染２、３日後、ｈＣｏＶ－１９／Ｊａｐａｎ／ＴＹ３８－８７３／２０２１は感染１、２日後に、ｔｒａｎｓｗｅｌｌにＭｕｃｉｌＡｉｒ^ＴＭ培養液を添加し、その上清を回収した。
・上清中ウイルス力価の測定
回収した上清を培地（ＭＥＭ、２％ＦＢＳ、ペニシリン－ストレプトマイシン）にて１０倍希釈系列を作製後、ＶｅｒｏＥ６／ＴＭＰＲＳＳ２細胞（ＪＣＲＢ１８１９、１．５×１０^４ｃｅｌｌｓ／ｗｅｌｌ）と混合し、９６ウェルプレートに播種した。ＣＯ_２インキュベーターで４日間培養後、Ｃｙｔｏｐａｔｈｉｃ ｅｆｆｅｃｔ（ＣＰＥ）を観察し、上清中に含まれるウイルス力価を算出した。

＜各測定項目値の算出＞
・９０％ ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２ウイルス産生阻害濃度（ＥＣ_９０）算出
ｘを化合物濃度の対数値、ｙをウイルス力価（Ｌｏｇ_１０ ＴＣＩＤ_５０／ｍＬ）とした濃度依存性曲線においてウイルスコントロールからの１ ｌｏｇ_１０ ｒｅｄｕｃｔｉｏｎに相当する値をその前後の２濃度のウイルス力価から二点法で算出する。

本発明化合物を本質的に上記のとおり試験した。結果を以下に示す。

以下に示す製剤例は例示にすぎないものであり、発明の範囲を何ら限定することを意図するものではない。
本発明に係る化合物は、任意の従来の経路により、特に、経腸、例えば、経口で、例えば、錠剤またはカプセル剤の形態で、または非経口で、例えば注射液剤または懸濁剤の形態で、局所で、例えば、ローション剤、ゲル剤、軟膏剤またはクリーム剤の形態で、または経鼻形態または座剤形態で医薬組成物として投与することができる。少なくとも１種の薬学的に許容される担体または希釈剤と一緒にして、遊離形態または薬学的に許容される塩の形態の本発明の化合物を含む医薬組成物は、従来の方法で、混合、造粒またはコーティング法によって製造することができる。例えば、経口用組成物としては、賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤等および有効成分等を含有する錠剤、顆粒剤、カプセル剤とすることができる。また、注射用組成物としては、溶液剤または懸濁剤とすることができ、滅菌されていてもよく、また、保存剤、安定化剤、緩衝化剤等を含有してもよい。

本発明に係る化合物は、コロナウイルス３ＣＬプロテアーゼに対する阻害活性を有し、本発明に係る化合物を含有する医薬組成物は、コロナウイルス感染症の治療剤および／または予防剤として有用である。

Claims (9)

1. 以下の式：
   

   

   
   で示される化合物またはその製薬上許容される塩、を含有する医薬組成物。
2. ３ＣＬプロテアーゼ阻害剤である、請求項１記載の医薬組成物。
3. ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス増殖を阻害するために用いられる、請求項１または２記載の医薬組成物。
4. 新型コロナウイルス感染症（ＣＯＶＩＤ－１９）の治療剤および／または予防剤である、請求項１または２記載の医薬組成物。
5. ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の重症化抑制のために用いられる、請求項１または２記載の医薬組成物。
6. ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の症状が発現してから、または、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２陽性判定から、７２時間以内に投与を開始するように用いられる、請求項１または２記載の医薬組成物。
7. ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の症状が発現してから、または、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２陽性判定から、２４時間以内に投与を開始するように用いられる、請求項１または２記載の医薬組成物。
8. ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２による感染症の症状が発現してから、または、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２陽性判定から、１２０時間以内に投与を開始するように用いられる、請求項１または２記載の医薬組成物。
9. ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２のウイルス伝播を抑制するために用いられる、請求項１または２記載の医薬組成物。

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