JP7279081B2 - Ｍｉｒ－１２２を調節するためのマイクロｒｎａ化合物及び方法 - Google Patents

Description

ｍｉＲ－１２２の活性を調節する際に使用するための化合物及び方法が本明細書に提供される。こうした方法には、ＨＣＶ感染などのｍｉＲ－１２２活性に関連する疾患の治療を含む。

「成熟マイクロＲＮＡ」としても知られるマイクロＲＮＡ（マイクロＲＮＡ）は小さく（長さ約１８～２４ヌクレオチド）、植物及び動物のゲノムにコードされている非コードＲＮＡ分子である。特定の例では、高度に保存された内因的に発現するマイクロＲＮＡは、特定のｍＲＮＡの３’非翻訳領域（３’－ＵＴＲ）に結合することによって遺伝子の発現を調節する。植物及び動物において、１０００を超える異なるマイクロＲＮＡが同定されている。特定の成熟マイクロＲＮＡは、多くの場合、長さが数百ヌクレオチドであり、長い内因性の一次マイクロＲＮＡ転写産物（ｐｒｉ－マイクロＲＮＡ、ｐｒｉ－ｍｉｒ、ｐｒｉ－ｍｉＲ、またはｐｒｉ－ｐｒｅ－マイクロＲＮＡとしても公知である）に由来すると考えられている（Ｌｅｅ，ｅｔ ａｌ．，ＥＭＢＯ Ｊ．，２００２，２１（１７），４６６３－４６７０）。

ｍｉＲ－１２２は、肝臓において豊富かつ特異的に発現するマイクロＲＮＡであり、Ｃ型肝炎ウイルスの蓄積にとって重要な宿主因子である（Ｊｏｐｌｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ．２００５，３０９（５７４０）：１５７７－８１）。ｍｉＲ－１２２は、ＨＣＶゲノムの５’非コード領域にある２つの近接したシード配列部位に結合することにより、ＨＣＶと相互作用し、ＨＣＶゲノムの安定化をもたらし、複製及び翻訳を補助する（Ｊａｎｇｒａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｖｉｒｏｌ．，２０１０，８４：６６１５－６６２５；Ｍａｃｈｌｉｎ，ｅｔ ａｌ．，２０１１）。重要なことに、ｍｉＲ－１２２結合部位は、すべての遺伝子型及びサブタイプにおいてＨＣＶゲノム内に完全に保存されている（Ｗｉｌｓｏｎ ｅｔ ａｌ．，Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．，２０１１，８５：２３４２－２３５０）。ｍｉＲ－１２２を抗－ｍｉＲにより阻害することにより、マウス及びカニクイザルの総循環コレステロールレベルが低下し、コレステロールの恒常性、脂肪酸、及び脂質代謝に関与する遺伝子の発現が変化する（Ｅｓａｕ ｅｔ ａｌ．，２００６，Ｃｅｌｌ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ，３：８７－９８）。慢性治療を受けていないＨＣＶ感染対象では、ＬＮＡ修飾抗－ｍｉＲ－１２２オリゴヌクレオチドであるｍｉｒａｖｉｒｓｅｎにより、血清ＨＣＶ ＲＮＡの減少が生じた（Ｊａｎｓｓｅｎ ｅｔ ａｌ．，Ｎ Ｅｎｇｌ Ｊ Ｍｅｄ．，２０１３，３６８：１６８５－１６９４）。肝細胞を標的とした抗ｍｉＲ－１２２化合物であるＲＧ－１０１の単回投与は忍容性が高く、その結果、ＨＣＶ感染対象においてウイルス量が大幅に減少した（ｖａｎ ｄｅｒ Ｒｅｅ ｅｔ ａｌ．，２０１７，Ｌａｎｃｅｔ，３８９（１００７０）：７０９－７１７）。

現在の直接作用型抗ウイルスは、高率の持続的ウイルス応答を達成しているが、現在の治療に応答しないか、または治療の奏功後に再発する十分でないＨＣＶ感染対象の集団が存在する。抗ウイルス療法への耐性は、ＨＣＶの高い突然変異率に関連する主要な問題であり、薬剤の組み合わせでも見られる。さらに、長期間（例えば、ハーボニー（登録商標）の場合は１２週間）経口剤を少なくとも１日１回投与する必要がある治療レジメンに対する対象のコンプライアンスが不十分な場合、高い奏効率の達成が妨げられるおそれがある。したがって、ｍｉＲ－１２２などの保存された突然変異耐性ウイルス宿主因子を標的とする治療法は、より高く、より持続的な治癒率をもたらす機会を表している。

実施形態１
以下の構造：

の化合物、またはその薬学的に許容される塩。

実施形態２
本構造の薬学的に許容される塩である、実施形態１に記載の化合物。

実施形態３
本構造のナトリウム塩である、実施形態２に記載の化合物。

実施形態４
実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物及び薬学的に許容される希釈剤を含む医薬組成物。

実施形態５
薬学的に許容される希釈剤が水溶液である、実施形態４に記載の医薬組成物。

実施形態６
水溶液が生理食塩水である、実施形態５に記載の医薬組成物。

実施形態７
凍結乾燥組成物である、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物を含む医薬組成物。

実施形態８
実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物を含む生理食塩水から本質的になる医薬組成物。

実施形態９
細胞を実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物と接触させることを含む、細胞内のｍｉＲ－１２２の活性を阻害する方法。

実施形態１０
細胞がｉｎ ｖｉｖｏに存在する、実施形態９に記載の方法。

実施形態１１
細胞がｉｎ ｖｉｔｒｏに存在する、実施形態９に記載の方法。

実施形態１２
ＨＣＶ感染対象に、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態４～８のいずれか１つに記載の医薬組成物の少なくとも１つの用量を投与することを含む、ＨＣＶ感染を治療する方法。

実施形態１３
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染を治療する方法であって、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態４～８のいずれか１つに記載の医薬組成物及び少なくとも１つの直接作用型抗ウイルス（ＤＡＡ）の少なくとも１つの用量を、治療期間中に、ＨＣＶ感染対象に投与することを含み、治療期間の期間は１２週間以内であり、化合物または医薬組成物の開始用量が治療期間の開始時に投与され、化合物または医薬組成物の終了用量が治療期間の終了時に投与される、前記方法。

実施形態１４
開始用量及び終了用量が、治療期間中に投与される化合物または医薬組成物の唯一の用量である、実施形態１３に記載の方法。

実施形態１５
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染を治療する方法であって、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態４～８のいずれか１つに記載の医薬組成物及び少なくとも１つの直接作用型抗ウイルス（ＤＡＡ）の少なくとも１つの用量を、治療期間中に、ＨＣＶ感染対象に投与することを含み、治療期間の期間は１２週間以内であり、化合物または医薬組成物の開始用量が治療期間の開始時に投与され、開始用量が、治療期間中に投与される化合物または医薬組成物の唯一の用量である、前記方法。

実施形態１６
Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染を治療する方法であって、実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態４～８のいずれか１つに記載の医薬組成物及び少なくとも１つの直接作用型抗ウイルス（ＤＡＡ）の少なくとも１つの用量を、治療期間中に、ＨＣＶ感染対象に投与することを含み、治療期間の期間は１２週間以内であり、化合物または医薬組成物の終了用量が、治療期間の終了時に投与され、終了用量が、治療期間中に投与される化合物または医薬組成物の唯一の用量である、前記方法。

実施形態１７
治療期間の期間が２～１０週間、４～８週間、２～６週間、または１～４週間である、実施形態１３～１６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態１８
治療期間の期間が、１１週間、１０週間、９週間、８週間、７週間、６週間、５週間、４週間、３週間、２週間、または１週間である、実施形態１３～１６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態１９
治療期間の期間が、２６日、２７日、２８日、２９日、または３０日である、実施形態１３～１６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態２０
治療期間の期間が、２８日または２９日である、実施形態１３～１６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態２１
治療期間の期間が、１８日、１９日、２０日、２１日、または２２日である、実施形態１３～１６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態２２
治療期間の期間が、２１日または２２日である、実施形態１３～１６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態２３
治療期間の期間が、１２日、１３日、１４日、１５日、または１６日である、実施形態１３～１６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態２４
治療期間の期間が、１４日または１５日である、実施形態１３～１６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態２５
治療期間の期間が、６日、７日、８日、または９日である、実施形態１３～１６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態２６
治療期間の期間が、７日または８日である、実施形態１３～１６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態２７
化合物または医薬組成物の開始用量及びＤＡＡの第１の用量が、互いの７日以内に投与される、実施形態１３～１５または１７～２６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態２８
化合物または医薬組成物の開始用量が、ＤＡＡの第１の用量の１日前に投与される、実施形態１３～１５または１７～２６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態２９
化合物または医薬組成物の開始用量が、ＤＡＡの第１の用量と同じ日に投与される、実施形態１３～１５または１７～２６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態３０
化合物または医薬組成物の開始用量が、ＤＡＡの第１の用量の１日後に投与される、実施形態１３～１５または１７～２６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態３１
化合物または医薬組成物の終了用量及びＤＡＡの終了用量が、互いの７日以内に投与される、実施形態１３、１４または１６～２６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態３２
化合物または医薬組成物の終了用量が、ＤＡＡの最終用量の１日前に投与される、実施形態１３、１４または１６～２６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態３３
化合物または医薬組成物の終了用量が、ＤＡＡの最終用量と同じ日に投与される、実施形態１３、１４または１６～２６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態３４
化合物または医薬組成物の終了用量が、ＤＡＡの最終用量の翌日に投与される、実施形態１３、１４または１６～２６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態３５
ＨＣＶ感染対象において遺伝子型１に感染している、実施形態１２～３４のいずれか１つに記載の方法。

実施形態３６
ＨＣＶ感染対象が遺伝子型１ａに感染している、実施形態３５に記載の方法。

実施形態３７
ＨＣＶ感染対象が遺伝子型１ｂに感染している、実施形態３５に記載の方法。

実施形態３８
ＨＣＶ感染対象が遺伝子２型に感染している、実施形態１２～３４のいずれか１つに記載の方法。

実施形態３９
ＨＣＶ感染対象が遺伝子３型に感染している、実施形態１２～３４のいずれか１つに記載の方法。

実施形態４０
ＨＣＶ感染対象が遺伝子４型に感染している、実施形態１２～３４のいずれか１つに記載の方法。

実施形態４１
ＨＣＶ感染対象が遺伝子５型に感染している、実施形態１２～３４のいずれか１つに記載の方法。

実施形態４２
ＨＣＶ感染対象が遺伝子６型に感染している、実施形態１２～３４のいずれか１つに記載の方法。

実施形態４３
ＨＣＶ感染対象が、１つ以上の耐性関連多型を有するＨＣＶに感染していると決定される、実施形態１２～４２のいずれか１つに記載の方法。

実施形態４４
ＨＣＶ感染対象が治療を受けていない対象である、実施形態１２～４３のいずれか１つに記載の方法。

実施形態４５
ＨＣＶ感染対象がＨＣＶ関連疾患を有する、実施形態１２～４４のいずれか１つに記載の方法。

実施形態４６
ＨＣＶ関連疾患が肝硬変、肝線維症、脂肪性肝炎、脂肪症、または肝細胞癌である、実施形態４５に記載の方法。

実施形態４７
ＨＣＶ感染対象が腎機能障害を伴うＨＣＶ感染対象である、実施形態１２～４６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態４８
ＨＣＶ感染対象が、ＨＣＶ／ＨＩＶ同時感染対象である、実施形態１２～４７のいずれか１つに記載の方法。

実施形態４９
投与することにより持続的ウイルス応答が達成される、実施形態１２～４８のいずれか１つに記載の方法。

実施形態５０
治療期間の終了時または治療期間の終了後の時点で、ＨＣＶ ＲＮＡレベルが定量下限（ＬＬＯＱ）を下回る、実施形態１３～４９のいずれか１項に記載の方法。

実施形態５１
ＨＣＶ ＲＮＡレベルが、治療期間の終了後４週間で、ＬＬＯＱを下回る、実施形態５０に記載の方法。

実施形態５２
ＨＣＶ ＲＮＡレベルが、治療期間の終了後８週間で、ＬＬＯＱを下回る、実施形態５０または５１に記載の方法。

実施形態５３
ＨＣＶ ＲＮＡレベルが、治療期間の終了後１２週間で、ＬＬＯＱを下回る、実施形態５０～５２のいずれか１つに記載の方法。

実施形態５４
ＨＣＶ ＲＮＡレベルが、治療期間の終了後２４週間で、ＬＬＯＱを下回る、実施形態５０～５３のいずれか１つに記載の方法。

実施形態５５
ＨＣＶ ＲＮＡレベルが、治療期間の終了後３６週間で、ＬＬＯＱを下回る、実施形態５０～５４のいずれか１つに記載の方法。

実施形態５６
ＨＣＶ ＲＮＡレベルが、治療期間の終了後４８週間で、ＬＬＯＱを下回る、実施形態５０～５５のいずれか１つに記載の方法。

実施形態５７
ＬＬＯＱが、２５ＩＵ／ｍＬである、実施形態５０～５６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態５８
ＬＬＯＱが、１５ＩＵ／ｍＬである、実施形態５０～５６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態５９
ＬＬＯＱが、１２ＩＵ／ｍＬである、実施形態５０～５６のいずれか１つに記載の方法。

実施形態６０
ＨＣＶ ＲＮＡレベルが、リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応に基づくアッセイを使用して定量化される、実施形態５０～５９のいずれか１つに記載の方法。

実施形態６１
ＤＡＡは１日１回投与される、実施形態１３～６０のいずれか１つに記載の方法。

実施形態６２
ＤＡＡが、プロテアーゼ阻害剤、ヌクレオシドポリメラーゼ阻害剤、ヌクレオチドポリメラーゼ阻害剤、非ヌクレオシドポリメラーゼ阻害剤、ＮＳ３Ｂ阻害剤、ＮＳ３／４Ａ阻害剤、ＮＳ４Ａ阻害剤、ＮＳ５Ａ阻害剤、ＮＳ５Ｂ阻害剤、及びシクロフィリン阻害剤から選択される、実施形態１３～６１のいずれか１つに記載の方法。

実施形態６３
ＤＡＡは、ソホスブビル、レジパスビル、オムビタスビル、ダサブビル、グレカプレビル、ピブレンタスビル、エルバスビル、グラゾプレビル、リバビリン、オムビタスビル、パリタプレビル、リトナビル、ボセプレビル、バニプレビル、アスナプレビル、ダクラタスビル、シメプレビル、メリシタビン、テゴブビル、ダノプレビル、ソバプレビル、ボキシラプレビル、ベルパタスビル、及びＧＳＫ２８７８１７５のうちの１つ以上から選択される、実施形態１３～６２のいずれか１つに記載の方法。

実施形態６４
少なくとも１つのＤＡＡがソホスブビルを含む、実施形態１３～６３のいずれか１つに記載の方法。

実施形態６５
少なくとも１つのＤＡＡがレジパスビル及びソホスブビルを含む、実施形態１３～６４のいずれか１つに記載の方法。

実施形態６６
化合物の用量が４．０ｍｇ／ｋｇ以下、３．５ｍｇ／ｋｇ以下、３．０ｍｇ／ｋｇ以下、２．５ｍｇ／ｋｇ以下、２．０ｍｇ／ｋｇ以下、１．５ｍｇ／ｋｇ以下、１．０ｍｇ／ｋｇ以下、または０．５ｍｇ／ｋｇ以下である、実施形態１２～６５のいずれか１つに記載の方法。

実施形態６７
治療法に使用するための実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態４～８のいずれか１つに記載の医薬組成物。

実施形態６８
ＨＣＶ感染対象の治療に使用するための実施形態１～３のいずれか１つに記載の化合物、または実施形態４～８のいずれか１つに記載の医薬組成物。

ＰＢＳ、ＲＧ－１０１、またはＲＧ６６５０により治療した後のＨＣＶ感染マウスモデルの血清中のＨＣＶ ＲＮＡの減少を示す図である。

別途定義されない限り、本明細書で使用されるすべての技術用語及び科学用語は、本発明が属する当業者によって一般に理解される意味と同一の意味を有する。特別な定義が与えられない限り、本明細書に記載する分析化学、合成有機化学、ならびに医化学及び製薬化学に関連して用いられる命名法、ならびにそれらの手順及び技法は、当技術分野において周知であり、一般に使用されるものである。本明細書の用語に複数の定義がある場合は、このセクションの定義が優先される。標準技術が、化学合成、化学分析、薬学的調製、配合、及び送達、ならびに患者の治療のために使用され得る。ある特定のそのような技法及び手順は、例えば、「Ｃａｒｂｏｈｙｄｒａｔｅ Ｍｏｄｉｆｉｃａｔｉｏｎｓ ｉｎ Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｒｅｓｅａｒｃｈ」Ｅｄｉｔｅｄ ｂｙ Ｓａｎｇｖｉ ａｎｄ Ｃｏｏｋ，Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｏｃｉｅｔｙ，Ｗａｓｈｉｎｇｔｏｎ Ｄ．Ｃ．，１９９４；及び「Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ」Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，Ｐａ．，１８ｔｈ ｅｄｉｔｉｏｎ，１９９０；の例に見ることができる。これは、任意の目的のために参照により本明細書に組み込まれる。許容される場合、本明細書の開示全体を通して言及されるすべての特許、特許出願、公開出願及び刊行物、ＧＥＮＢＡＮＫシーケンス、ウェブサイト及び他の公開された資料は、特に明記しない限り、参照によりその全体が組み込まれる。ＵＲＬまたは他のそのような識別子またはアドレスを参照する場合、そのような識別子は変更され得、インターネット上の特定の情報は変更される可能性があると理解されるが、同等の情報は、インターネットを検索することによって見つけることができる。それらへの言及は、そのような情報の入手可能性と一般への普及を証明するものである。

本発明の組成物及び方法を開示及び記載する前に、本明細書において使用される専門用語は、特定の実施形態を説明するためのものにすぎず、限定的であることを意図するものではないことを理解されたい。本明細書及び添付の特許請求の範囲において使用される場合、単数形「ａ」、「ａｎ」、及び「ｔｈｅ」は、文脈上、別途明確に指示されない限り、複数形の指示対象を含むことに留意されなければならない。

定義
「ＨＣＶ感染」とは、Ｃ型肝炎ウイルスの１つ以上の遺伝子型による感染を意味する。

「ＨＣＶ感染対象」とは、Ｃ型肝炎ウイルスの１つ以上の遺伝子型に感染した対象を意味する。ＨＣＶ感染対象は、ＨＣＶ感染の症状を呈する場合と呈さない場合がある。ＨＣＶ感染対象には、１つ以上の遺伝子型のＨＣＶ感染対象が含まれるが、対象の血液中のＨＣＶ ＲＮＡは検出可能レベルを下回っている。

「治療を受けていないＨＣＶ感染対象」とは、ＨＣＶ感染の前治療を受けていないＨＣＶ感染対象を意味する。

「ＨＣＶ関連疾患」とは、ＨＣＶ感染によって媒介される病理学的プロセスを意味する。ＨＣＶ関連疾患としては、これらに限定されないが、肝硬変、肝線維症、脂肪性肝炎、及び肝細胞癌が挙げられる。

「血液ＨＣＶ ＲＮＡ」は、ＨＣＶ感染対象の血液中に存在するＣ型肝炎ウイルスＲＮＡを意味する。血液には、全血及び血清が含まれる。

「血液」とは、全血ならびに血清及び血漿などの血液画分を意味する。

「血清ＨＣＶ ＲＮＡのリバウンド」とは、以前のＨＣＶ ＲＮＡレベルの減少後にＨＣＶ ＲＮＡレベルが増加することを意味する。

「ＨＣＶ ＲＮＡレベル」は、対象の血液の所与の体積中のＨＣＶ ＲＮＡの量を意味する。ＨＣＶ ＲＮＡレベルは、１ミリリットルあたりのＲＮＡのコピーとして表すことができる。「ＨＣＶ ＲＮＡレベル」は、「ＨＣＶウイルス量」または「ＨＣＶＲＮＡ力価」と呼ばれることもある。ＨＣＶ ＲＮＡレベルは、ｉｎ ｖｉｔｒｏ逆転写ポリメラーゼ連鎖反応アッセイを使用して測定され得る。

「持続的ウイルス学的応答」とは、治療の全過程の終了時及びさらに１２週間後の対象の血液中の検出不可能なＣ型肝炎ウイルスＲＮＡを意味する。特定の実施形態では、ＨＣＶ ＲＮＡは、血液１ミリリットルあたり４０コピー未満では検出不可能と見なされる。

「ＳＶＲＸ」（Ｘは、治療期間終了以降の週数）は、治療期間の終了後のその時点での持続的ウイルス学的応答を意味する。例えば、ＳＶＲ８は、治療期間の終了後８週間での持続的ウイルス学的応答である。

「非応答者」とは、治療を受けたが、疾患マーカーまたは症状の臨床的に許容可能な改善を経験していない対象を意味する。

「インターフェロン非応答者」とは、インターフェロンによる治療を受けたが、ＨＣＶ ＲＮＡレベルの臨床的に許容可能な低下を経験していないＨＣＶ感染対象を意味する。

「直接作用型抗ウイルス剤」または「ＤＡＡ」は、ＨＣＶゲノムによってコードされるタンパク質と直接相互作用することによって、ＨＣＶの活性を阻害する医薬剤を意味する。ＤＡＡは、ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ、ＮＳ５Ａ非構造タンパク質、またはＮＳ５Ｂポリメラーゼの阻害剤であり得る。ＤＡＡは、ヌクレオシド化合物、または非ヌクレオシド化合物であり得る。

「直接作用型抗ウイルス非応答者」とは、直接作用型抗ウイルス剤による治療を受けたが、ＨＣＶ ＲＮＡレベルの臨床的に許容可能な低下を経験していないＨＣＶ感染対象を意味する。特定の実施形態では、ウイルスは、直接作用型抗ウイルス剤に対する耐性を発現させている。

「腎機能障害」とは、腎臓が血液から老廃物を適切に濾過できない状態を意味する。腎機能障害は、推定糸球体濾過速度、または測定された糸球体濾過速度によって決定され得る。腎機能障害は、クレアチニンクリアランスによっても決定され得る。

「ｍｉＲ－１２２関連状態」とは、ｍｉＲ－１２２を調節することによって治療、予防、または改善できるあらゆる疾患、障害、または状態を意味する。ｍｉＲ－１２２関連疾患は、過剰なｍｉＲ－１２２を特徴とする必要はない。ｍｉＲ－１２２関連疾患としては、これらに限定されないが、ＨＣＶ感染、コレステロール上昇、鉄過剰症が挙げられる。

「鉄過剰症」とは、身体内の過剰な鉄を特徴とするあらゆる疾患、障害、または状態を意味する。

「対象」とは、処置または治療のために選択されたヒトを意味する。

「それを必要としている対象」とは、処置または治療を必要としていると特定された対象を意味する。

「有することが疑われる対象」とは、疾患の１つ以上の臨床的指標を呈する対象を意味する。

「投与すること」は、対象に医薬剤または組成物を提供することを意味し、これらに限定されないが、医療専門家による投与及び自己投与が挙げられる。

「非経口投与」とは、注入または注射を介する投与を意味する。

非経口投与としては、これらに限定されないが、皮下投与、静脈内投与、及び筋肉内投与が挙げられる。

「皮下投与」とは、皮膚の直下への投与を意味する。

「静脈内投与」とは、静脈内への投与を意味する。

「同時に投与される」とは、任意の方法での対象への２つ以上の剤の同時投与を指し、各薬剤の薬理学的効果が対象に存在する。同時投与は、これら両方の剤が、単一の医薬組成物で、同一の剤形で、または同一の投与経路によって投与される必要はない。これら両方の剤の効果が同時に現われる必要はない。効果は、ある期間の重複のみ必要とし、共に広範囲に及ぶ必要はない。

「期間」とは、活性または事象が継続している期間を意味する。特定の実施形態では、治療期間とは、ある用量の医薬剤または医薬組成物が投与される期間である。

「治療法」とは、疾患の治療方法を意味する。特定の実施形態では、治療法として、これらに限定されないが、化学療法、放射線療法、または医薬剤の投与が挙げられる。

「治療」とは、疾患の治癒または改善のために使用される１つ以上の特定の手順を適用することを意味する。特定の実施形態では、特定の手順は、１つ以上の医薬剤を投与することである。

「改善」とは、状態または疾患の少なくとも１つの指標の重症度が低下することを意味する。特定の実施形態では、改善は、状態または疾患の１つ以上の指標の進行を遅延させることまたは減速させることを含む。指標の重症度は、当業者に公知である主観的尺度または客観的尺度によって決定され得る。

「発症のリスクがある」とは、対象が状態または疾患を発症する素因がある状態を意味する。特定の実施形態では、状態または疾患を発症するリスクのある対象は、状態または疾患の１つ以上の症状を呈するが、状態または疾患と診断されるのに十分な数の症状を呈さない。特定の実施形態では、状態または疾患を発症するリスクのある対象は、状態または疾患の１つ以上の症状を呈するが、状態または疾患と診断される必要がある程度は低い。

「発生を予防する」とは、疾患または状態を発症するリスクのある対象における状態または疾患の発症を予防することを意味する。特定の実施形態では、疾患または状態を発症するリスクのある対象は、すでに疾患または状態を有する対象が受けられる治療と同様の治療を受ける。

「発生を遅延させる」とは、疾患または状態を発症するリスクがある対象において、状態または疾患の発症を遅延させることを意味する。特定の実施形態では、疾患または状態を発症するリスクのある対象は、すでに疾患または状態を有する対象が受けられる治療と同様の治療を受ける。

「治療剤」とは、疾患の治癒、改善または予防に使用される医薬剤を意味する。

「用量」とは、単回投与で提供される医薬剤の特定の量を意味する。特定の実施形態では、用量は、２またはそれ以上のボーラス、錠剤、または注射で投与され得る。例えば、ある特定の実施形態では、皮下投与が所望される場合、所望の用量は、単回注射では容易に対応できない体積を必要とする。こうした実施形態では、２回以上の注射を使用して、所望の用量を達成してもよい。特定の実施形態では、用量は、個体における注射部位反応を最小化するために、２回以上の注射で投与され得る。特定の実施形態では、用量は、緩徐な注入として投与される。

「投薬単位」とは、医薬剤が提供される形態を意味する。ある特定の実施形態では、投薬単位は、凍結乾燥されたオリゴヌクレオチドを含むバイアルである。ある特定の実施形態では、投薬単位は、再構成されたオリゴヌクレオチドを含むバイアルである。

「治療有効量」とは、動物に治療的利益をもたらす医薬剤の量を意味する。

「医薬組成物」とは、個体への投与に好適な物質の混合物を意味し、医薬剤を含む。例えば、医薬組成物は、滅菌水溶液を含み得る。

「医薬剤」とは、対象に投与されたときに治療的効果を提供する物質を意味する。

「活性医薬成分」とは、所望の効果を提供する医薬組成物中の物質を意味する。

「薬学的に許容される塩」は、本明細書で提供される化合物の生理学的及び薬学的に許容される塩、すなわち、化合物の所望の生物学的活性を保持し、対象に投与されたときに望ましくない毒物学的効果を有さない塩を意味する。本明細書で提供される化合物の非限定的で例示的な薬学的に許容される塩としては、ナトリウム及びカリウム塩の形態が挙げられる。本明細書で使用される「化合物」、「オリゴヌクレオチド」、及び「修飾オリゴヌクレオチド」という用語は、特に明記しない限り、その薬学的に許容される塩を含む。

「生理食塩水」とは、塩化ナトリウムの水溶液を意味する。

「器官機能の改善」とは、正常な限界に向かう臓器機能の変化を意味する。特定の実施形態では、器官機能は、対象の血液または尿中に見出される分子を測定することによって評価される。例えば、特定の実施形態では、肝機能の改善は、血中の肝トランスアミナーゼレベルの低下によって測定される。特定の実施形態では、腎機能の改善は、血中尿素窒素の減少、タンパク尿の減少、アルブミン尿の減少などによって測定される。

「許容可能な安全性プロファイル」とは、臨床的に許容可能な制限内にある副作用のパターンを意味する。

「副作用」とは、所望の効果以外の、治療に起因する生理学的応答を意味する。ある特定の実施形態では、副作用としては、これらに限定されないが、注射部位反応、肝機能検査異常、腎機能異常、肝臓毒性、腎臓毒性、中枢神経系異常、及びミオパシーが挙げられる。このような副作用は、直接的または間接的に検出され得る。例えば、血清中のアミノトランスフェラーゼレベルの増加は、肝毒性または肝機能異常を示し得る。例えば、ビリルビンの増加は、肝毒性または肝機能異常を示し得る。

「注射部位反応」とは、個体の注射部位での皮膚の炎症または異常な発赤を意味する。

「対象のコンプライアンス」とは、対象が推奨または処方された治療法を順守することを意味する。

「遵守する」とは、対象が推奨された治療法を順守することを意味する。

「推奨された治療法」とは、疾患を治療する、改善する、遅延させる、または予防するために医療専門家によって推奨された治療を意味する。

「ｍｉＲ－１２２」とは、核酸塩基配列ＵＧＧＡＧＵＧＵＧＡＣＡＡＵＧＧＵＧＵＵＵＧ（配列番号１）を有するマイクロＲＮＡを意味する。

「オリゴヌクレオチド」とは、各々が互いに独立して、修飾され得るかまたは修飾され得ない複数の連結したヌクレオシドを含む化合物を意味する。

「修飾オリゴヌクレオチド」は、天然に存在する末端、糖、核酸塩基、及び／またはヌクレオシド間連結に対して１つ以上の修飾を有する一本鎖オリゴヌクレオチドを意味する。修飾オリゴヌクレオチドは、非修飾ヌクレオシドを含み得る。

「抗ｍｉＲ」は、マイクロＲＮＡに相補的な核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを意味する。

「抗ｍｉＲ－１２２」は、ｍｉＲ－１２２に相補的な核酸塩基配列を有する修飾オリゴヌクレオチドを意味する。特定の実施形態では、抗ｍｉＲ－１２２は、ｍｉＲ－１２２に対して完全に相補的である（すなわち、１００％相補的である）。特定の実施形態では、抗ｍｉＲ－１２２は、少なくとも９０％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、または１００％相補的である。

「標的化」とは、標的核酸にハイブリダイズする核酸塩基配列の設計及び選択のプロセスを意味する。

「を標的にする」とは、標的核酸へのハイブリダイゼーションが可能になる核酸塩基配列を有することを意味する。

「変調」とは、機能、量、または活性の摂動を意味する。特定の実施形態では、変調は、機能、量、または活性の増加を意味する。特定の実施形態では、変調は、機能、量、または活性の低下を意味する。

「発現」とは、遺伝子のコード化された情報が、細胞内に存在し、作動する構造に変換される任意の機能及びステップを意味する。

「核酸塩基配列」は、オリゴマー化合物または核酸における隣接している核酸塩基の順序を意味し、典型的には、任意の糖、連結、及び／または核酸塩基の修飾とは関係なく、５’から３’の配向で列挙される。

「隣接する核酸塩基」とは、核酸内で互いに直接隣接する核酸塩基を意味する。

「核酸塩基相補性」とは、２つの核酸塩基が水素結合を介して非共有結合により対になる能力を意味する。

「相補的」とは、１つの核酸が別の核酸またはオリゴヌクレオチドにハイブリダイズすることができることを意味する。特定の実施形態では、相補的とは、標的核酸にハイブリダイズすることができるオリゴヌクレオチドを指す。

「完全に相補的」とは、オリゴヌクレオチドの各核酸塩基が、標的核酸内の対応する各位置において、核酸塩基と対を形成できることを意味する。特定の実施形態では、オリゴヌクレオチドは、マイクロＲＮＡに対して完全に相補的である（１００％相補的とも呼ばれる）。すなわち、オリゴヌクレオチドの各核酸塩基は、マイクロＲＮＡ内の対応する位置において、核酸塩基に対して相補的である。修飾オリゴヌクレオチドは、マイクロＲＮＡに完全に相補的であり、かつマイクロＲＮＡの長さよりも短い複数の連結ヌクレオシドを有し得る。例えば、１０個の連結されたヌクレオシドを有するオリゴヌクレオチドは、オリゴヌクレオチドの各核酸塩基がマイクロＲＮＡの対応する位置において核酸塩基に相補的である場合、マイクロＲＮＡに完全に相補的である。

「パーセント相補性」とは、標的核酸の等長部分に相補的であるオリゴヌクレオチドの核酸塩基の割合を意味する。相補性パーセントは、標的核酸中の対応する位置において核酸塩基に相補的であるオリゴヌクレオチド中の核酸塩基の数を、オリゴヌクレオチド中の核酸塩基の総数で割ることによって計算される。

「パーセント同一性」とは、第２の核酸中の対応する位置において核酸塩基と同一である第１の核酸中の核酸塩基の数を、第１の核酸中の核酸塩基の総数で割ったものを意味する。特定の実施形態では、第１の核酸は、マイクロＲＮＡであり、第２の核酸は、マイクロＲＮＡである。特定の実施形態では、第１の核酸は、オリゴヌクレオチドであり、第２の核酸は、オリゴヌクレオチドである。

「ハイブリダイゼーション」は、核酸塩基の相補性を介して起こる相補的な核酸のアニーリングを意味する。

「ミスマッチ」は、第２の核酸の対応する位置において、核酸塩基とワトソンクリックペアリングすることができない第１の核酸の核酸塩基を意味する。

核酸塩基配列の文脈における「同一」とは、糖、連結、及び／または核酸塩基修飾とは関係なく、かつ存在する任意のピリミジンのメチル状態とは関係なく、同じ核酸塩基配列を有することを意味する。

「マイクロＲＮＡ」とは、長さが１８～２５核酸塩基の内因性非コードＲＮＡを意味し、酵素ダイサーによるプレマイクロＲＮＡの切断の産物である。成熟したマイクロＲＮＡの例は、マイクロＲＮＡデータベースとして公知であるｍｉＲＢａｓｅ（ｈｔｔｐ：／／ｍｉｃｒｏｒｎａ．ｓａｎｇｅｒ．ａｃ．ｕｋ／）で見られる。特定の実施形態では、マイクロＲＮＡは、「マイクロＲＮＡ」または「ｍｉＲ」と略される。

「マイクロＲＮＡ調節転写物」とは、マイクロＲＮＡによって調節される転写物を意味する。

「シード配列」とは、成熟マイクロＲＮＡ配列の５’末端の核酸塩基２～７を含む核酸塩基配列を意味する。

「シードマッチ配列」とは、シード配列に相補的であり、シード配列と同じ長さである核酸塩基配列を意味する。

「天然に存在するヌクレオシド間連結」とは、ヌクレオシド間の３’から５’へのホスホジエステル連結を意味する。

「天然糖」とは、ＤＮＡ（２’－Ｈ）またはＲＮＡ（２’－ＯＨ）に見られる糖を意味する。

「ヌクレオシド間連結」とは、隣接しているヌクレオシド間の共有結合による連結を意味する。

「連結ヌクレオシド」とは、共有結合による連結によって結合されたヌクレオシドを意味する。

「核酸塩基」は、別の核酸塩基と非共有結合により対を形成することができる複素環部分を意味する。

「ヌクレオシド」とは、糖部分に連結された核酸塩基を意味する。

「ヌクレオチド」とは、ヌクレオシドの糖部分に共有結合により連結したリン酸基を有するヌクレオシドを意味する。

複数の連結ヌクレオシド「からなる修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物」とは、特定の数の連結ヌクレオシドを有する修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物を意味する。したがって、化合物は、追加の置換基または抱合体を含み得る。特に明記しない限り、化合物は、修飾オリゴヌクレオチドのものを超える任意の追加のヌクレオシドを含まない。

「修飾ヌクレオシド」とは、天然に存在するヌクレオシドからの何らかの変化を有するヌクレオシドを意味する。修飾ヌクレオシドは、修飾された糖、及び非修飾核酸塩基を有し得る。修飾ヌクレオシドは、修飾糖部分及び修飾核酸塩基を有し得る。修飾ヌクレオシドは、天然糖及び修飾核酸塩基を有し得る。特定の実施形態では、修飾ヌクレオシドは、二環式ヌクレオシドである。特定の実施形態では、修飾ヌクレオシドは、非二環式ヌクレオシドである。

「２’－修飾ヌクレオシド」は、位置が２－デオキシリボースまたはリボースで番号付けされているので、フラノシル環の２’位に相当する位置に任意の修飾を有する糖を含むヌクレオシドを意味する。２’－修飾ヌクレオシドとしては、これに限定されないが、二環式糖部分を含むヌクレオシドが挙げられることが理解されるものとする。

「修飾ヌクレオシド間連結」は、天然に存在するヌクレオシド間連結からのあらゆる変化を意味する。

「ホスホロチオエートヌクレオシド間連結」とは、非架橋原子のうちの１つが硫黄原子であるヌクレオシド間の連結、すなわちＯＰ（Ｏ）（Ｓ）Ｏ－を意味する。誤解を避けるために、硫黄原子はプロトン化されているか、Ｎａ^＋、Ｋ^＋などの対イオンと関連し得る。

「ホスホジエステル連結」は、構造－ＯＰ（Ｏ）_２Ｏ－を有するヌクレオシド間での連結を意味する。誤解を避けるために、非架橋酸素のうちの１つがプロトン化され得るか、またはＮａ^＋、Ｋ^＋などの対イオンと関連し得る。

「非修飾核酸塩基」とは、ＲＮＡまたはＤＮＡの天然に存在する複素環式塩基を意味し、プリンは、アデニン（Ａ）及びグアニン（Ｇ）をベースとし、ピリミジンは、チミン（Ｔ）、シトシン（Ｃ）（５－メチルシトシンなど）、及びウラシル（Ｕ）をベースとする。

「５－メチルシトシン」とは、シトシン環の５位に付着しているメチル基を含むシトシンを意味する。

「非メチル化シトシン」とは、シトシン環の５位にメチル基付着しているメチル基を有さないシトシンを意味する。

「修飾核酸塩基」とは、非修飾核酸塩基ではない任意の核酸塩基を意味する。

「糖部分」とは、天然に存在するフラノシルまたは修飾糖部分を意味する。

「修飾糖部分」とは、置換糖部分または糖代理物を意味する。

「２’－Ｏ－メチル糖」または「２’－ＯＭｅ糖」とは、２’位にＯ－メチル修飾を有する糖を意味する。

「２’－Ｏ－メトキシエチル糖」または「２’－ＭＯＥ糖」は、２’位にＯ－メトキシエチル修飾を有する糖を意味する。

「２’－Ｏ－フルオロ」または「２’－Ｆ」は、２’位のフルオロ修飾を有する糖を意味する。

「二環式糖部分」とは、４～７員環の２個の原子を接続して第２の環を形成して、二環式構造をもたらす橋を含む４～７員環（これに限定されないが、フラノシルなど）を含む修飾糖部分を意味する。特定の実施形態では、４～７員環は、糖環である。特定の実施形態では、４～７員環は、フラノシルである。ある特定のそのような実施形態では、橋は、フラノシルの２’－炭素と４’－炭素とを接続する。非限定的な例示的な二環式糖部分としては、ＬＮＡ、ＥＮＡ、ｃＥｔ、Ｓ－ｃＥｔ、及びＲ－ｃＥｔが挙げられる。

「ロックド核酸（ＬＮＡ）糖部分」とは、４’及び２’のフラノース環原子の間に（ＣＨ_２）－Ｏブリッジを含む置換糖部分を意味する。

「ＥＮＡ糖部分」とは、４’及び２’のフラノース環原子の間に（ＣＨ_２）_２－Ｏブリッジを含む置換糖部分を意味する。

「拘束エチル（ｃＥｔ）糖部分」は、４’及び２’フラノース環原子の間にＣＨ（ＣＨ_３）－Ｏブリッジを含む置換糖部分を意味する。特定の実施形態では、ＣＨ（ＣＨ_３）－Ｏブリッジは、Ｓ配向に拘束されている。特定の実施形態では、ＣＨ（ＣＨ_３）－Ｏブリッジは、Ｒ配向に拘束されている。

「Ｓ－ｃＥｔ糖部分」とは、４’及び２’のフラノース環原子の間にＳ－拘束ＣＨ（ＣＨ_３）－Ｏブリッジを含む置換糖部分を意味する。

「Ｒ－ｃＥｔ糖部分」は、４’及び２’のフラノース環原子の間にＲ拘束されたＣＨ（ＣＨ_３）－Ｏブリッジを含む置換糖部分を意味する。

「２’－Ｏ－メチルヌクレオシド」は、２’－Ｏ－メチル糖修飾を有する修飾ヌクレオシドを意味する。

「２’－Ｏ－メトキシエチルヌクレオシド」とは、２’－Ｏ－メトキシエチル糖修飾を有する修飾ヌクレオシドを意味する。２’－Ｏ－メトキシエチルヌクレオシドは、修飾または非修飾の核酸塩基を含み得る。

「２’－フルオロヌクレオシド」は、２’－フルオロ糖修飾を有する修飾ヌクレオシドを意味する。２’－フルオロヌクレオシドは、修飾または非修飾核酸塩基を含み得る。

「二環式ヌクレオシド」とは、二環式糖部分を有する修飾ヌクレオシドを意味する。二環式ヌクレオシドは、修飾または非修飾の核酸塩基を有し得る。

「ｃＥｔヌクレオシド」は、ｃＥｔ糖部分を含むヌクレオシドを意味する。ｃＥｔヌクレオシドは、修飾または非修飾核酸塩基を含み得る。

「Ｓ－ｃＥｔヌクレオシド」は、Ｓ－ｃＥｔ糖部分を含むヌクレオシドを意味する。

「Ｒ－ｃＥｔヌクレオシド」は、Ｒ－ｃＥｔ糖部分を含むヌクレオシドを意味する。

「β－Ｄ－デオキシリボヌクレオシド」とは、天然に存在するＤＮＡヌクレオシドを意味する。

「β－Ｄ－リボヌクレオシド」とは、天然に存在するＲＮＡヌクレオシドを意味する。

「ＬＮＡヌクレオシド」は、ＬＮＡ糖部分を含むヌクレオシドを意味する。

「ＥＮＡヌクレオシド」は、ＥＮＡ糖部分を含むヌクレオシドを意味する。

本明細書で使用される「連結基」は、１つ以上の共有結合を介して第１の化学成分を第２の化学成分に付着させる原子または原子の群を指す。

本明細書で使用される「リンカー」は、１つ以上の共有結合を介して１つ以上のリガンドを修飾または非修飾ヌクレオシドに付着させる原子または原子群を指す。修飾または非修飾ヌクレオシドは、本明細書に記載の修飾オリゴヌクレオチドの一部であり得るか、またはホスホジエステルもしくはホスホロチオエート結合を介して修飾オリゴヌクレオチドに付着させ得る。いくつかの実施形態では、リンカーは、１つ以上のリガンドを修飾オリゴヌクレオチドの３’末端に付着させる。いくつかの実施形態では、リンカーは、１つ以上のリガンドを修飾オリゴヌクレオチドの５’末端に付着させる。いくつかの実施形態では、リンカーは、１つ以上のリガンドを、修飾オリゴヌクレオチドの３’末端に付着させた修飾または非修飾ヌクレオシドに付着させる。いくつかの実施形態では、リンカーは、１つ以上のリガンドを、修飾オリゴヌクレオチドの５’末端に付着させた修飾または非修飾ヌクレオシドに付着させる。リンカーが１つ以上のリガンドを修飾オリゴヌクレオチドの３’末端または修飾オリゴヌクレオチドの３’末端に付着させた修飾または非修飾ヌクレオシドに付着させる場合、いくつかの実施形態では、リンカーの付着点は、修飾または非修飾糖部分の３’炭素であり得る。リンカーが１つ以上のリガンドを修飾オリゴヌクレオチドの５’末端または修飾オリゴヌクレオチドの５’末端に付着させた修飾または非修飾ヌクレオシドに付着させる場合、いくつかの実施形態では、リンカーの付着点は、修飾または非修飾糖部分の５’炭素であり得る。

概要
ＲＧ－１０１は、ｍｉＲ－１２２を標的とするＧａｌＮＡｃ抱合型修飾オリゴヌクレオチドである。完了した第Ｉ相ヒトの概念証明研究では、単剤療法としてのＲＧ－１０１の単回皮下用量による治療により、遺伝子型の治療が困難な対象、様々な肝線維症の状態及び以前のＩＦＮを含むレジメンの後にウイルスの再発を経験した対象など、治療を受けたすべてのＨＣＶ感染対象においてウイルス量が有意に減少した。

ＲＧ－１０１と複数の承認された直接作用型抗ウイルス（ＤＡＡ）薬の組み合わせを評価する完了した第ＩＩ相試験では、ＲＧ－１０１とハーボニー（登録商標）を投与されたすべての対象が４８週間の追跡期間を通じてウイルス量の有意かつ持続的な減少を経験した。ＲＧ－１０１及びダクルインザ（商標）またはオリシオ（登録商標）を投与された群での奏効率は、１００％未満であった。第２相試験中、２００名中１０名の対象が一過性の高ビリルビン血症を経験し、これは、正常上限（ＵＬＮ）を超える抱合型及び総ビリルビンの増加を特徴としている。米国食品医薬品局は、慢性ＨＣＶ感染症の治療用のＲＧ－１０１のＩＮＤを臨床試験差し止めとした。

追加の対象固有の寄与因子を明確に除外することはできないが、本明細書に記載のとおり、ＲＧ－１０１による抱合型ビリルビン輸送の阻害が、観察された高ビリルビン血症に寄与した可能性が高いと考えられる。これを考慮して、強力なＨＣＶ抗ウイルス活性を維持し、ＭＲＰ２トランスポーターを介したビリルビン輸送への実質的な干渉がないことなど、好適な安全性プロファイルを有するｍｉＲ－１２２を標的とする代替化合物のスクリーニングを実施した。このスクリーニングプロセスにより、化合物ＲＧ６６５０をこれらの基準を満たす抗ｍｉＲ－１２２化合物として同定した。

特定の抗－ｍｉＲ－１２２化合物
ここに提供されるのは、ＧａｌＮＡｃ含有抱合部分及びｍｉＲ－１２２に相補的な修飾オリゴヌクレオチドを含むＲＧ６６５０という名前の化合物である。修飾オリゴヌクレオチドはＲＧ７４４３と名付けられ、構造Ｕ_ＳＣ_ＳＡＣ_ＳＡＣ_ＳＴＣ_ＳＣ_Ｓを有し、下付き文字が続かないヌクレオシドは、β－Ｄ－デオキシリボヌクレオシドであり、下付き文字「Ｓ」が続くヌクレオシドは、Ｓ－ｃＥｔヌクレオシドであり、各ヌクレオシド間連結は、ホスホロチオエートヌクレオシド間連結である。

特定の実施形態では、化合物ＲＧ６６５０は、以下の構造によって表される：

式中、ＭＯは、修飾オリゴヌクレオチドであり、構造は、Ｕ_ＳＣ_ＳＡＣ_ＳＡＣ_ＳＴＣ_ＳＣ_Ｓであり、下付き文字が続かないヌクレオシドはβ－Ｄ－デオキシリボヌクレオシドであり、下付き文字「Ｓ」が続くヌクレオシドは、Ｓ－ｃＥｔヌクレオシドであり、各ヌクレオシド間連結は、ホスホロチオエートヌクレオシド間連結であり；Ｘ_１が、ホスホジエステル連結であり；ｍは、１であり；Ｎは、β－Ｄ－デオキシリボアデノシンであり；Ｘ_２は、ホスホジエステル連結であり；抱合部分は、修飾オリゴヌクレオチドの３’末端に連結されている。

特定の実施形態では、化合物ＲＧ６６５０は、以下の構造によって表される：

またはその薬学的に許容される塩である。

各ヌクレオシド間連結（例えば、各ホスホロチオエート連結及び各ホスホジエステル連結）において、非架橋ヘテロ原子（例えば、Ｓ^－またはＯ^－）は、プロトン化される得か、またはＮａ^＋、Ｋ^＋などの対イオンと結合され得る。化合物の薬学的に許容される塩は、分子あたりのホスホロチオエート及び／またはホスホジエステル連結が存在するよりも少ないカチオン性対イオン（Ｎａ^＋、Ｋ^＋など）を含み得る（すなわち、いくつかのホスホロチオエート及び／またはホスホジエステル連結は、プロトン化され、いくつかは対イオンと結合される）。いくつかの実施形態では、ＲＧ６６５０の薬学的に許容される塩は、ＲＧ６６５０の分子あたり１０未満のカチオン性対イオン（Ｎａ^＋、Ｋ^＋など）を含む。すなわち、いくつかの実施形態では、ＲＧ６６５０の薬学的に許容される塩は、平均して、ＲＧ６６５０の分子あたり１、２、３、４、５、６、７、８または９のカチオン性対イオンを含み得、残りのホスホロチオエート及び／またはホスホジエステル連結は、プロトン化されている。

本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される化合物、及び薬学的に許容される希釈剤を含む医薬組成物である。特定の実施形態では、薬学的に許容される希釈剤は、水溶液である。特定の実施形態では、水溶液は生理食塩水である。本明細書で使用される場合、薬学的に許容される希釈剤は、無菌の希釈剤であると理解されている。

特定の実施形態では、本明細書に記載の医薬組成物は、皮下注射により投与される。追加の好適な投与経路としては、これらに限定されないが、静脈内投与、経口投与、及び筋肉内投与が挙げられる。

抗ｍｉＲ－１２２化合物及び組成物の特定の使用
本明細書に提供されるのは、ＨＣＶ感染の治療のための方法であり、本方法は、ＨＣＶ感染対象に本明細書に提供される化合物または医薬組成物の少なくとも１つの用量を投与することを含む。特定の実施形態では、本明細書で提供される方法は、ＨＣＶ感染対象を選択することを含む。

現在の直接作用型抗ウイルスは、高率の持続的ウイルス応答を達成しているが、現在の治療に応答しないか、または治療の奏功後に再発する十分でないＨＣＶ感染対象の集団が存在する。抗ウイルス療法への耐性は、ＨＣＶの高い突然変異率に関連する主要な問題であり、薬剤の組み合わせでも見られる。さらに、長期間（例えば、ハーボニー（登録商標）の場合は１２週間）経口剤を少なくとも１日１回投与する必要がある治療レジメンに対するＨＣＶ感染対象のコンプライアンスが不十分な場合、高い奏効率の達成が妨げられ得る。ウイルス宿主因子ｍｉＲ－１２２を標的とする抗ｍｉＲ－１２２治療薬と、１つ以上の直接作用型抗ウイルス剤とを組み合わせた治療は、例えば、対象のコンプライアンスの改善、副作用の減少、及び／またはより大きな効果などを通じて、より高く、より耐久性のある治癒率を達成する機会を表わす。したがって、特定の実施形態では、本明細書で提供されるのは、治療期間中の、本明細書で提供される化合物または医薬組成物及び少なくとも１つの直接作用型抗ウイルス剤（ＤＡＡ）の同時投与を含む方法である。

特定の実施形態では、治療期間は、少なくとも１つのＤＡＡ単独の治療期間よりも実質的に短い。

本明細書で提供されるのは、治療期間中に、本明細書で提供される化合物または医薬組成物及び少なくとも１つの直接作用型抗ウイルス（ＤＡＡ）をＨＣＶ感染対象に投与することを含む、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染を治療する方法であり、治療期間の期間は１２週間以内であり、化合物または医薬組成物の開始用量が治療期間の開始時に投与され、化合物または医薬組成物の終了用量が治療期間の終了時に投与される。特定の実施形態では、開始用量及び終了用量は、治療期間中に投与される化合物または医薬組成物の唯一の用量である。

本明細書で提供されるのは、治療期間中に、本明細書で提供される化合物または医薬組成物及び少なくとも１つのＤＡＡをＨＣＶ感染対象に投与することを含む、ＨＣＶ感染を治療する方法であり、治療期間の期間は１２週間以内であり、化合物または医薬組成物の開始用量は、治療期間の開始時に投与され、開始用量は、治療期間中に投与される化合物または医薬組成物の唯一の用量である。

本明細書で提供されるのは、治療期間中に、本明細書で提供される化合物または医薬組成物及び少なくとも１つのＤＡＡをＨＣＶ感染対象に投与することを含む、ＨＣＶ感染を治療する方法であり、治療期間の期間は１２週間以内であり、化合物または医薬組成物の終了用量は、治療期間の終了時に投与され、終了用量は、治療期間中に投与される化合物または医薬組成物の唯一の用量である。

本明細書で提供される方法のいずれにおいても、治療期間の期間は、１１週間以下、１０週間以下、９週間以下、８週間以下、７週間以下、６週間以下、５週間以下、４週以下、２週間以下、または１週間以下である。本明細書で提供される方法のいずれにおいても、治療期間の期間は、１～１２週間、２～１０週間、４～８週間、２～６週間、または１～４週間である。本明細書で提供される方法のいずれにおいても、治療期間の期間は、１１週間、１０週間、９週間、８週間、７週間、６週間、または５週間である。特定の実施形態では、治療期間の期間は、１１週間である。特定の実施形態では、治療期間の期間は、１０週間である。特定の実施形態では、治療期間の期間は、９週間である。特定の実施形態では、治療期間の期間は、８週間である。特定の実施形態では、治療期間の期間は、７週間である。特定の実施形態では、治療期間の期間は、６週間である。特定の実施形態では、治療期間の期間は、５週間である。

特定の実施形態では、治療期間の期間は、４週間である。特定の実施形態では、治療期間の期間は、３週間である。特定の実施形態では、治療期間の期間は、２週間である。特定の実施形態では、治療期間の期間は、１週間である。特定の実施形態では、治療期間の期間は、２６日、２７日、２８日、２９日、または３０日である。特定の実施形態では、治療期間の期間は、２８日または２９日である。特定の実施形態では、治療期間の期間は、１８日、１９日、２０日、２１日、または２２日である。特定の実施形態では、治療期間の期間は、２１日である。特定の実施形態では、治療期間の期間は、１２日、１３日、１４日、１５日、または１６日である。特定の実施形態では、治療期間の期間は、１４日または１５日である。特定の実施形態では、治療期間の期間は、６日、７日、または８日である。特定の実施形態では、治療期間の期間は、７日または８日である。

特定の実施形態では、化合物または医薬組成物の開始用量及び少なくとも１つのＤＡＡの第１の用量は、互いの７日以内に投与される。特定の実施形態では、化合物または医薬組成物の開始用量は、少なくとも１つのＤＡＡの第１の用量の１日前に投与される。特定の実施形態では、化合物または医薬組成物の開始用量は、少なくとも１つのＤＡＡの第１の用量と同じ日に投与される。特定の実施形態では、化合物または医薬組成物の開始用量は、少なくとも１つのＤＡＡの第１の用量の１日後に投与される。特定の実施形態では、化合物または医薬組成物の終了用量及び少なくとも１つのＤＡＡの最終用量は、互いの７日以内に投与される。特定の実施形態では、化合物または医薬組成物の終了用量は、少なくとも１つのＤＡＡの最終用量の１日前に投与される。特定の実施形態では、化合物または医薬組成物の終了用量は、少なくとも１つのＤＡＡの最終用量と同じ日に投与される。特定の実施形態では、化合物または医薬組成物の終了用量は、少なくとも１つのＤＡＡの最終用量の翌日に投与される。

特定の実施形態では、本明細書で提供される化合物は、５ｍｇ／ｋｇ以下、４．５ｍｇ／ｋｇ以下、４ｍｇ／ｋｇ以下、３．５ｍｇ／ｋｇ以下、３ｍｇ／ｋｇ以下、２．５ｍｇ／ｋｇ以下、２ｍｇ／ｋｇ以下、１．５ｍｇ／ｋｇ以下、１ｍｇ／ｋｇ以下、０．７５ｍｇ／ｋｇ以下、０．５ｍｇ／ｋｇ以下、または０．２５ｍｇ／ｋｇ以下の用量で投与される。

特定の実施形態では、ＨＣＶ感染対象は、遺伝子型１に感染している。特定の実施形態では、ＨＣＶ感染対象は、遺伝子型１ａに感染している。特定の実施形態では、ＨＣＶ感染対象は、遺伝子型１ｂに感染している。特定の実施形態では、ＨＣＶ感染対象は、遺伝子２型に感染している。特定の実施形態では、ＨＣＶ感染対象は、遺伝子３型に感染している。特定の実施形態では、ＨＣＶ感染対象は、遺伝子４型に感染している。ＨＣＶ感染対象は、遺伝子５型に感染している。特定の実施形態では、ＨＣＶ感染対象は、遺伝子６型に感染している。

特定の実施形態では、ＨＣＶ感染対象は、遺伝子型１ａ、遺伝子型１ｂ、遺伝子型２ａ、遺伝子型２ｂ、遺伝子型２ｃ、遺伝子型２ｄ、遺伝子型３ａ、遺伝子型３ｂ、遺伝子型３ｃ、遺伝子型３ｄ、遺伝子型３ｅ、遺伝子型３ｆ、遺伝子型４ａ、遺伝子型４ｂ、遺伝子型４ｃ、遺伝子型４ｄ、遺伝子型４ｅ、遺伝子型４ｆ、遺伝子型４ｇ、遺伝子型４ｈ、遺伝子型４ｉ、遺伝子型４ｊ、遺伝子型５ａ、または遺伝子型６ａに感染している。

ＨＣＶゲノムは、ウイルスＲＮＡの複製及びビリオンアセンブリに必須であるいくつかのタンパク質をコードしている。ＨＣＶゲノムは、高速で突然変異できる。場合によっては、ＤＡＡによる治療は、ＤＡＡに対するウイルスの耐性に関連している可能性のあるヌクレオチド配列多型の出現をもたらす。したがって、本明細書で提供されるのは、１つ以上の耐性関連多型を有するＨＣＶ遺伝子型に感染したＨＣＶ感染対象の治療方法である。特定の実施形態では、ＨＣＶ感染対象は、治療前に、１つ以上の耐性関連多型の存在について検査される。多型の存在は、いくつかの実施形態では、ＨＣＶ ＲＮＡの配列決定を行うことによって決定され得る。

特定の実施形態では、ＨＣＶ ＲＮＡに存在するのは、１つ以上のＨＣＶコード化タンパク質において１つ以上のアミノ酸多型をコードするヌクレオチド変化である。特定の実施形態では、アミノ酸多型は、ＨＣＶにコードされたＮＳ５Ａタンパク質にある。特定の実施形態では、ＮＳ５Ａアミノ酸多型は、ＮＳ５Ａタンパク質のアミノ酸位置Ｍ２８、Ｑ３０、Ｌ３１、及びＹ９３のうちの１つ以上にある。特定の実施形態では、アミノ酸多型は、ＨＣＶにコードされたＮＳ３タンパク質にある。特定の実施形態では、アミノ酸多型は、ＮＳ３タンパク質の位置Ｑ８０、Ｓ１２２、Ｒ１５５、Ｄ１６８、及びＤ１６９のうちの１つ以上にある。特定の実施形態では、アミノ酸多型は、ＨＣＶにコードされたＮＳ４Ａタンパク質にある。特定の実施形態では、アミノ酸多型は、ＨＣＶにコードされたＮＳ４Ｂタンパク質にある。特定の実施形態では、アミノ酸多型は、ＨＣＶにコードされたＮＳ５Ｂタンパク質にある。

特定の実施形態では、ＨＣＶ感染対象は、治療を受けていないＨＣＶ感染対象であり、すなわち、対象は、本明細書に提供される治療のために選択される前に治療を受けていない。特定の実施形態では、治療は、ＨＣＶ感染対象へインターフェロンを投与することを含まない。特定の実施形態では、ＨＣＶ感染対象は、インターフェロン非応答者である。特定の実施形態では、ＨＣＶ感染対象は、直接作用型抗ウイルス非応答者である。

ＨＣＶ感染対象は、ＨＣＶ関連疾患を発症し得る。ＨＣＶ感染の主な肝学的結果は、肝硬変、ならびに出血、肝不全、及び肝細胞癌などの合併症である。追加の合併症は、線維症であり、この疾患は、細胞外マトリックス成分の沈着を引き起こす慢性炎症の結果であり、肝構造の歪み及び微小循環及び肝機能の遮断につながる。ＨＣＶ感染のさらなる合併症は、脂肪症であり、次いで、糖尿病、タンパク質栄養失調、高血圧、細胞毒素、肥満、及び無酸素症などの肝外の病状につながり得る。合併症は、重症度が増すにつれて、肝臓は最終的に機能不全になり得、ＨＣＶ感染対象は、肝移植を必要とする場合がある。ＨＣＶ感染対象も、肝細胞癌を発症し得る。特定の実施形態では、ＨＣＶ感染対象は、ＨＣＶ関連疾患を有する。特定の実施形態では、ＨＣＶ関連疾患は、肝硬変、線維症、脂肪性肝炎、脂肪症、及び／または肝細胞癌である。

特定の実施形態では、ＨＣＶ感染対象は、肝移植レシピエントである。

特定の実施形態では、ＨＣＶ感染対象は、ＨＣＶ以外の１つ以上のウイルスに感染している。特定の実施形態では、ＨＣＶ感染対象は、ＨＣＶ／ＨＩＶ同時感染対象であり、すなわち、対象は、ＨＣＶ及びＨＩＶの両方に感染している。特定の実施形態では、本明細書において提供される方法は、ＨＩＶ感染の治療に使用される抗ウイルス剤の投与を含む。特定の実施形態では、追加の治療剤は、非ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤（ＮＮＲＴＩ）である。特定の実施形態では、追加の治療剤は、ヌクレオシド逆転写酵素阻害剤（ＮＲＴＩ）である。いくつかの実施形態では、追加の治療剤は、プロテアーゼ阻害剤である。いくつかの実施形態では、追加の治療剤は、侵入阻害剤または融合阻害剤である。いくつかの実施形態では、追加の治療剤は、インテグラーゼ阻害剤である。特定の実施形態では、追加の治療剤は、エファビレンツ、エトラビリン、ネビラピン、アバカビル、エムトリシタビン、テノホビル、ラミブジン、ジドブジン、アタザナビル、ダルナビル、フォサンプレナビル、リトナビル、エンフビルチド、マラビロク、及びラルテグラビルから選択される。

特定の実施形態では、ＨＣＶ感染対象は、腎機能障害を伴うＨＣＶ感染対象である。腎機能障害は、推定糸球体濾過速度（ｅＧＦＲ）を決定することによって評価され得る。特定の実施形態では、対象は、軽度の腎機能障害を有する。特定の実施形態では、軽度腎機能障害は、糸球体濾過速度６０～８９ｍｌ／分／１．７３ｍ^２を特徴とする。特定の実施形態では、対象は、中等度腎機能障害を有する。特定の実施形態では、中等度腎機能障害は、糸球体濾過速度３０～５９ｍｌ／分／１．７３ｍ^２を特徴とする。特定の実施形態では、対象は、重度腎機能障害を有する。特定の実施形態では、重度腎機能障害は、糸球体濾過速度１５～２９ｍｌ／分／１．７３ｍ^２を特徴とする。特定の実施形態では、対象は腎不全を経験している。特定の実施形態では、腎不全を経験している対象は、１５ｍｌ／分／１．７３ｍ^２未満の糸球体濾過速度を有する。腎機能障害を有するＨＣＶ感染対象に投与される化合物またはＤＡＡの投薬量は、腎機能障害を有する対象における薬物の薬物動態学的挙動に応じて、腎機能障害を有さない対象に投与される投薬量よりも多くまたは少なく調整され得る。

特定の実施形態では、本明細書で提供される治療は、ＨＣＶ感染の症状である。ＨＣＶ感染は、多くの場合、無症候性であるが、存在する場合、ＨＣＶ感染の症状としては、これらに限定されないが、肝臓内または肝臓周辺の痛み、黄疸、悪心、食欲不振、及び倦怠感が挙げられる。

ＨＣＶ ＲＮＡレベルは、ＨＣＶ感染の診断、疾患活動の監視、及び／または治療に対するＨＣＶ感染対象の応答の監視に使用され得る。特定の実施形態では、本明細書で提供される治療は、ＨＣＶ ＲＮＡレベルを低下させる。特定の実施形態では、本明細書で提供される方法は、ＨＣＶ感染を治療するのに有効な量で、化合物または医薬組成物及びＤＡＡを投与することを含む。特定の実施形態では、本明細書で提供される方法は、血清１ミリリットルあたり３５０，０００コピーを超える、血清１ミリリットルあたり３５０，０００～３，５００，０００コピー、または血清１ミリリットルあたり３，５００，０００コピーを超えるＨＣＶ ＲＮＡレベルを有する対象を選択することを含む。特定の実施形態では、本明細書で提供される方法は、ＨＣＶ ＲＮＡレベルを低下させることを含む。特定の実施形態では、本明細書で提供される方法は、ＨＣＶ ＲＮＡレベルを、血清１ミリリットルあたり２００コピー未満、血清１ミリリットルあたり１００コピー未満、血清１ミリリットルあたり４０コピー未満に低下させることを含む。ＨＣＶ ＲＮＡレベルは、「ウイルス量」または「ＨＣＶＲＮＡ力価」と呼ばれる得る。

ＨＣＶ ＲＮＡレベルの変化は、対数変化として記載される場合がある。例えば、６０，０００から６００への低下は、ＨＣＶ ＲＮＡレベルの２ｌｏｇの低下となる。特定の実施形態では、本明細書で提供される方法では、２ｌｏｇ以上のＨＣＶ ＲＮＡレベルの減少が達成される。特定の実施形態では、本明細書で提供される方法は、少なくとも０．５倍、少なくとも１倍、少なくとも１．５倍、少なくとも２倍、少なくとも１０倍、少なくとも５０倍、少なくとも１００倍、少なくとも５００倍、少なくとも１０００倍、少なくとも５０００倍、または少なくとも１０，０００倍のＨＣＶ ＲＮＡレベルの低下を達成する。

特定の実施形態では、本明細書で提供される方法は、持続的ウイルス学的応答を達成することを含む。特定の実施形態では、ＨＣＶ ＲＮＡレベルは、治療期間終了前または終了時の定量下限（ＬＬＯＱ）を下回っている。特定の実施形態では、ＨＣＶ ＲＮＡレベルは、治療期間の終了後４週間でＬＬＯＱを下回る。特定の実施形態では、ＨＣＶ ＲＮＡレベルは、治療期間の終了後８週間でＬＬＯＱを下回る。特定の実施形態では、ＨＣＶ ＲＮＡレベルは、治療期間の終了後１２週間でＬＬＯＱを下回る。特定の実施形態では、ＨＣＶ ＲＮＡレベルは、治療期間の終了後２４週間でＬＬＯＱを下回る。特定の実施形態では、ＨＣＶ ＲＮＡレベルは、治療期間の終了後３６週間でＬＬＯＱを下回る。特定の実施形態では、ＨＣＶ ＲＮＡレベルは、治療期間の終了後４８週間でＬＬＯＱを下回る。特定の実施形態では、ＬＬＯＱは、２５ＩＵ／ｍＬである。特定の実施形態では、ＬＬＯＱは、１５ＩＵ／ｍＬである。特定の実施形態では、ＬＬＯＱは、１２ＩＵ／ｍＬである。

特定の実施形態では、ＨＣＶ ＲＮＡレベルは、リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応に基づくアッセイを使用して定量化される。アッセイでは、定量下限（ＬＬＯＱ）が異なり得る。例えば、Ｈｉｇｈ Ｐｕｒｅ Ｓｙｓｔｅｍで使用するためのＣＯＢＡＳＴａｑＭａｎ ＨＣＶ ｔｅｓｔ（バージョン２．０）は、定量下限（ＬＬＯＱ）２５ＩＵ／ｍＬを有し、ＣＯＢＡＳ ＡｍｐｌｉＰｒｅｐ／ＣＯＢＡＳ Ｔａｑｍａｎ ＨＣＶ ｔｅｓｔ（バージョン２．０）は、ＬＬＯＱ１５ＩＵ／ｍＬを有する。Ａｂｂｏｔｔ ＲｅａｌＴｉｍｅ ＨＣＶ ｔｅｓｔの定量下限（ＬＬＯＱ）は、１２ＩＵ／ｍＬを有する。

ＨＣＶ感染対象は、ＨＣＶ治療レジメン後、ＨＣＶ ＲＮＡレベルの減少、その後ＨＣＶ ＲＮＡレベルの上昇を経験し得る。その後の上昇は、ＨＣＶＲＮＡレベルのリバウンドとして公知である。特定の実施形態では、本明細書で提供される方法は、ＨＣＶ ＲＮＡレベルのリバウンドを防ぐ。特定の実施形態では、本明細書で提供される方法は、ＨＣＶ ＲＮＡレベルのリバウンドを遅延させる。

本明細書で提供される実施形態のいずれかにおいて、少なくとも１つのＤＡＡは、１日１回または１日２回投与される。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、１日１回投与される。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、１日２回投与される。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤、ＮＳ５Ａ阻害剤、ヌクレオシドＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤、及び非ヌクレオシドＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤から選択される。特定の実施形態では、ＮＳ５Ａ阻害剤は、エルバスビルである。特定の実施形態では、ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤は、グラゾプレビルである。特定の実施形態では、ＮＳ５Ａ阻害剤は、オムビタスビルである。特定の実施形態では、ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤は、パリタプレビルである。特定の実施形態では、非ヌクレオシドＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤は、ダスブビル（ｄａｓｂｕｖｉｒ）である。特定の実施形態では、ＮＳ５Ａ阻害剤は、ダクラタスビルである。特定の実施形態では、ＮＳ３／４Ａプロテアーゼ阻害剤は、シメプレビルである。特定の実施形態では、ＮＳ５Ａ阻害剤は、レジパスビルである。特定の実施形態では、ＮＳ５Ｂポリメラーゼ阻害剤は、ソホスブビルである。特定の実施形態では、ＮＳ３／４Ａ阻害剤は、グレカプレビルである。特定の実施形態では、ＮＳ５Ａ阻害剤は、ピブレンタスビルである。特定の実施形態では、１つ以上の直接作用型抗ウイルス剤が投与される。

特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、ソホスブビル、レジパスビル、オムビタスビル、ダサブビル、エルバスビル、グラゾプレビル、リバビリン、オムビタスビル、パリタプレビル、リトナビル、ボセプレビル、バニプレビル、アスナプレビル、ダクラタスビル、シメプレビル、メリシタビン、テゴブビル、ダノプレビル、ソバプレビル、グレカプレビル、ピブレンタスビル、ボキシラプレビル、ベルパタスビル、及びＧＳＫ２８７８１７５から選択される。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、ＨＣＶ感染を治療するのに有効な量で投与される。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、ＤＡＡが本明細書で提供される化合物または医薬組成物なしで投与されるときに処方される治療期間よりも短い治療期間で投与される。

特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、ソホスブビルを含む。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、４００ｍｇのソホスブビルを含む。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、４００ｍｇのソホスブビルを含む１つの錠剤であり、１日１回経口投与される。ソホスブビルは、リバビリンの有無にかかわらず投与され得る。

特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、レジパスビル及びソホスブビルを含む。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、９０ｍｇの用量で投与されるレジパスビル及び４００ｍｇの用量でのソホスブビルを含む。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、９０ｍｇのレジパスビル及び４００ｍｇのソホスブビルを含み、１日１回経口投与される１つの錠剤である。

特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、シメプレビルまたはその塩形態を含む。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、１５０ｍｇの投薬量で投与されるシメプレビルを含む。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、１５０ｍｇのシメプレビルを含む１つのカプセルであり、１日１回経口投与される。

特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、ダクラタスビルまたはその塩形態を含む。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、６０ｍｇの投薬量で投与されるダクラタスビルを含む。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、６０ｍｇのダクラタシビル（ｄａｃｌａｔａｓｉｖｉｒ）を含む１つの錠剤であり、１日１回経口投与される。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、各々が３０ｍｇのダクラタスビルを含む２つの錠剤であり、１日１回経口投与される。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、６０ｍｇの用量で投与されるダクラタシブル（ｄａｃｌａｔａｓｉｖｒ）及び４００ｍｇの用量で投与されるソホスブビルを含む。特定の実施形態では、ＨＣＶ感染対象は、１つ以上の耐性関連多型を有するＨＣＶ遺伝子型に感染していると判断される。特定の実施形態では、耐性関連多型は、ＮＳ５Ａ多型である。特定の実施形態では、ＮＳ５Ａ多型は、位置Ｍ２８、Ｑ３０、Ｌ３１、及びＹ９３のうちの１つ以上にある。

特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、グレカプレビル及びピブレンタスビル、またはそれらの塩形態を含む。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、１００ｍｇの用量で投与されるグレカプラビル及び４０ｍｇの用量で投与されるピブレンタスビルを含む。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、それぞれが１００ｍｇのグレカプラビル及び４０ｍｇのピブレンタスビルを含有する３つの錠剤であり、１日１回経口投与される。

特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、オムビタスビル、パリタプレビル、リトナビル、及びダサブビル、またはそれらの塩形態を含む。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、１２．５ｍｇの投薬量で投与されるオムビタスビル、７５ｍｇの投薬量で投与されるパリタプレビル、５０ｍｇの投薬量で投与されるリトナビル、及び２５０ｍｇの投薬量で投与されるダサブビルを含む。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、それぞれが１２．５ｍｇのオムビタスビル、７５ｍｇのパリタプレビル、５０ｍｇのリトナビルを１日１回経口投与する２錠、及び２５０ｍｇのダサブビルを含む１錠を１日２回投与する。

特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、オムビタスビル、パリタプレビル、リトナビル、ダサブビル、及びリバビリンを含む。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、１２．５ｍｇの投薬量で投与されるオムビタスビル、７５ｍｇの投薬量で投与されるパリタプレビル、５０ｍｇの投薬量で投与されるリトナビル、及び８００ｍｇ、１０００ｍｇ、１２００ｍｇ、または１４００ｍｇの投薬量で投与されるリバビリンを含む。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、各々が１２．５ｍｇのオムビタスビル、７５ｍｇのパリタプレビル、５０ｍｇのリトナビルを１日１回経口投与する２錠、２５０ｍｇのダサブビルを含む１錠を１日２回投与、及び８００ｍｇ、１０００ｍｇ、１２００ｍｇ、または１４００ｍｇの用量のリバビリンを投与する。

特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、エルバスビル及びグラゾプレビルを含む。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、５０ｍｇの用量で投与されるエルバスビル及び１００ｍｇの用量で投与されるグラゾプレビルを含む。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、５０ｍｇのエルバスビル及び１００ｍｇのグラゾプレビルを含み、１日１回経口投与される１つの錠剤である。

特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、エルバスビル、グラゾプレビル、及びリバビリンを含む。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、５０ｍｇの用量で投与されるエルバスビル、１００ｍｇの用量で投与されるグラゾプレビル、及び８００ｍｇ、１０００ｍｇ、１２００ｍｇ、または１４００ｍｇの用量で投与されるリバビリンを含む。特定の実施形態では、少なくとも１つのＤＡＡは、１日１回経口投与する５０ｍｇのエルバスビル、及び１００ｍｇのグラゾプレビル、１０００ｍｇ、１２００ｍｇ、または１４００ｍｇの用量で投与するリバビリンを含む１錠である。特定の実施形態では、ＨＣＶ感染対象は、１つ以上の耐性関連多型を有するＨＣＶ遺伝子型に感染していると判断される。特定の実施形態では、耐性関連多型は、ＮＳ５Ａ多型である。特定の実施形態では、ＮＳ５Ａ多型は、位置Ｍ２８、Ｑ３０、Ｌ３１、及びＹ９３のうちの１つ以上にある。

リバビリンの推奨投薬量は、体重に基づく。特定の実施形態では、リバビリンの１日投薬量は、体重が７５ｋｇ未満の対象に対して１０００ｍｇである。特定の実施形態では、１日投薬量は、７５ｋｇ以上の体重の対象について１２００ｍｇのリバビリンである。

特定の実施形態では、１日投薬量は、２つの分割された用量で経口投与され、朝に１つの用量が投与され、夕方に１つの用量が投与される。特定の実施形態では、リバビリンは、２００ｍｇのリバビリンを含むカプセルとして提供される。

特定の実施形態では、リバビリンの１日投薬量は、体重が６６ｋｇ未満の対象に対して８００ｍｇである。特定の実施形態では、リバビリンの１日投薬量は、体重６６～８０ｋｇの対象に対して１０００ｍｇである。特定の実施形態では、リバビリンの１日投薬量は、体重８１～１０５ｋｇの対象に対して１２００ｍｇである。特定の実施形態では、リバビリンの１日投薬量は、体重が１０５ｋｇを超える対象に対して１４００ｍｇである。

本明細書で提供される化合物または医薬組成物の投与は、ＨＣＶ感染対象に投与される少なくとも１つのＤＡＡの用量または頻度の低減が可能になり得る。投与される１つ以上のＤＡＡの量または頻度が低減することにより、副作用を減少させ得、かつ／または対象のコンプライアンスが改善され得る。したがって、特定の実施形態では、治療期間中に投与される少なくとも１つのＤＡＡの用量は、ＤＡＡが単独で投与される場合よりも低い用量である。例えば、少なくとも１つのＤＡＡは、少なくとも１つのＤＡＡが単独で投与される場合よりも２５％低い用量で投与され得る。特定の実施形態では、治療期間中に投与される少なくとも１つのＤＡＡの用量は、少なくとも１つのＤＡＡが単独で投与される場合よりも少ない頻度で投与される。例えば、少なくとも１つのＤＡＡは、１日１回ではなく、１週間に１回投与され得る。特定の実施形態では、投与される少なくとも１つのＤＡＡの量及び頻度は両方とも、少なくとも１つのＤＡＡが単独で投与される場合よりも少ない。

特定の実施形態では、本明細書で提供される化合物及び少なくとも１つのＤＡＡは、単一の医薬組成物として投与され、すなわち、化合物及び少なくとも１つのＤＡＡは、医薬組成物中で共配合される。好適な投与経路としては、皮下、静脈内、経口、または筋肉内投与が挙げられる。

特定の実施形態では、１つ以上の追加の治療剤が、ＨＣＶ感染対象に投与される。特定の実施形態では、１種以上の追加の治療剤は、免疫療法、免疫調節剤、治療ワクチン、抗線維化剤、抗炎症剤、気管支拡張剤、粘液溶解剤、抗ムスカリン剤、抗ロイコトリエン、細胞接着阻害剤、抗酸化剤、サイトカインアゴニスト、サイトカインアンタゴニスト、肺界面活性剤、抗菌剤、抗癌剤、ＲＮＡｉ剤またはシクロフィリン阻害剤を含む。

特定の実施形態では、１種以上の追加の治療剤は、補因子阻害剤、ＨＣＶ構造タンパク質阻害剤、シクロフィリン阻害剤、侵入阻害剤、ＴＬＲ７アゴニスト、及びインターフェロンから選択され得る。

現在のほとんどの治療法の目標は、インターフェロンを使用しないようにすることであるが、一部のＨＣＶ感染対象では、インターフェロンによる治療が保証され得る。特定の実施形態では、追加の治療剤は、インターフェロン、リバビリン、及びテラプレビルから選択される。特定の実施形態では、インターフェロンは、インターフェロンアルファ－２ａ、インターフェロンアルファ－２ｂ、インターフェロンアルファコン－１、ペグインターフェロンアルファ－２ｂ、及びペグインターフェロンアルファ－２ａから選択される。

ＨＣＶ感染対象は、異常な肝機能を経験する可能性があり、これは、ビリルビン、アルブミン、及びプロトロンビン時間のうちの１つ以上を測定することによって評価される。肝臓の炎症を評価するために、肝臓の酵素であるアラニンアミノトランスフェラーゼ（ＡＬＴ）及びアスパラギン酸アミノトランスフェラーゼ（ＡＳＴ）の測定が行われる。これらのマーカーの１つ以上の異常なレベルは、異常な肝機能を示し得る。特定の実施形態では、本明細書で提供される方法は、肝機能を正常化させることを含む。特定の実施形態では、本明細書で提供される方法は、肝酵素レベルを正常化させることを含む。

本明細書で提供される方法のいずれにおいても、化合物は、医薬組成物中に存在し得る。

本明細書で提供される化合物は、治療法で使用するためのものであり得る。特定の実施形態では、化合物は、ＨＣＶ感染対象を治療する際に使用するためのものである。ＨＣＶ感染対象を治療する際に使用するための化合物は、特定の実施形態では、本明細書に記載の任意の治療方法で使用するためのものであり得る。

ＨＣＶ感染対象への抗ｍｉＲ－１２２化合物の投与は、血清コレステロールの低下をもたらし、したがって、本明細書で提供される抗ｍｉＲ－１２２化合物の活性を単独でまたは有効性の別の指標、例えばＨＣＶ ＲＮＡレベルの低下に加えて評価するためのバイオマーカーとして使用され得る。したがって、本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される化合物または医薬組成物をＨＣＶ感染対象に投与することと、対象から血液サンプルを収集することと、ＨＣＶ感染対象からの血液サンプル中のコレステロールを測定することと、を含む方法である。コレステロールのレベルは、ＨＣＶ感染対象における抗ｍｉＲ－１２２化合物活性の指標として使用され得る。

特定の修飾
特定の実施形態では、本明細書には、抱合部分（例えば、リンカーまたはリガンド）の特徴が、化合物の所望の特性（例えば、ＨＣＶ感染対象のＨＣＶ ＲＮＡレベルを低下させる効力、及びＭＲＰ２トランスポーターの有意な阻害がない）を保持するように修飾される化合物が提供される。

ＲＧ６６５０、及びＲＧ７４４３を含む化合物は、構造Ｃ：
Ｌ_ｎ－リンカー－Ｘ_１－Ｎ_ｍ－Ｘ_２－ＭＯ
によって記載され得る。
式中、各Ｌは、独立して、リガンドであり；ｎは、１～１０であり；各Ｎは、独立して、修飾または非修飾ヌクレオシドであり、ｍは、１～５であり；Ｘ_１は、ホスホジエステル連結またはホスホロチオエート連結であり；Ｘ_２は、ホスホジエステル連結またはホスホロチオエート連結であり；ＭＯは、ＲＧ７４４３である。

例えば、ＲＧ６６５０は、構造Ｃの次の実施形態によって説明することができる：

式中、ＭＯは、修飾オリゴヌクレオチドであり、構造Ｕ_ＳＣ_ＳＡＣ_ＳＡＣ_ＳＴＣ_ＳＣ_Ｓ（ＲＧ７４４３）を有し、下付き文字が続かないヌクレオシドはβ－Ｄ－デオキシリボヌクレオシドであり、下付き文字「Ｓ」が続くヌクレオシドは、Ｓ－ｃＥｔヌクレオシドであり、各ヌクレオシド間連結は、ホスホロチオエートヌクレオシド間連結であり；Ｘ_１は、ホスホジエステル連結であり；ｍは、１であり；Ｎは、β－Ｄ－デオキシリボアデノシンであり；Ｘ_２は、ホスホジエステル連結であり；抱合部分は、修飾オリゴヌクレオチドの３’末端に連結されている。

特定の実施形態では、構造Ｃの１つ以上のリガンドは、ＧａｌＮＡｃ部分のように、肝臓への取り込みを促進するリガンドであり得る。そのようなリガンドとしては、コレステロール、及びこれらに限定されないが、ガラクトースまたはガラクトース誘導体などのアシアロ糖タンパク質受容体（ＡＳＧＰＲ）に対して親和性を有する他のリガンドが挙げられる。特定の実施形態では、ＡＳＧＰＲに対して親和性を有するリガンドは、Ｎ－アセチルガラクトサミン、ガラクトース、ガラクトサミン、Ｎ－ホルミルガラクトサミン、Ｎ－プロピオニル－ガラクトサミン、Ｎ－ｎ－ブタノイルガラクトサミン、またはＮ－イソ－ブタノイル－ガラクトサミンである。

特定の実施形態では、ｎが１より大きい場合、リンカーは、化合物の残りの部分（すなわち、修飾オリゴヌクレオチド（ＭＯ）、Ｘ_１－Ｎ_ｍ－Ｘ_２－ＭＯ、Ｘ－Ｎ_ｍ－Ｙ－ＭＯなど）に２つ以上のＬを連結できる足場を含む。いくつかのそのような実施形態では、化合物（構造Ａ、Ｂ、Ｃ、またはＤの化合物など）のＬ_ｎリンカー部分は、構造Ｅを含む：

式中、各Ｌは、独立して、リガンドであり；ｎは、１～１０であり；Ｓは、足場であり；Ｑ’及びＱ’’は、独立して、連結基である。

特定の実施形態では、各Ｑ’及びＱ’’は、独立して、ペプチド、エーテル、ポリエチレングリコール、アルキル、Ｃ_１～Ｃ_２０アルキル、置換Ｃ_１～Ｃ_２０アルキル、Ｃ_２～Ｃ_２０アルケニル、置換Ｃ_２～Ｃ_２０アルケニル、Ｃ_２～Ｃ_２０アルキニル、置換Ｃ_２～Ｃ_２０アルキニル、Ｃ_１～Ｃ_２０アルコキシ、置換Ｃ_１～Ｃ_２０アルコキシ、アミノ、アミド、ピロリジン、８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート、及び６－アミノヘキサン酸から選択される。

特定の実施形態では、足場は、２、３、４、または５のリガンドを修飾オリゴヌクレオチドに連結する。特定の実施形態では、足場は、３つのリガンドを修飾オリゴヌクレオチドに連結する。

非限定的な例示的な構造Ｅは、構造Ｅ（ｉ）である：

式中、Ｌ_１、Ｌ_２、及びＬ_３は、それぞれ、独立して、リガンドであり；Ｑ’_１、Ｑ’_２、Ｑ’_３、及びＱ’’は、それぞれ、独立して、連結基であり、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、及びＲ_４は、それぞれ、独立して、Ｈ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、及び置換Ｃ_１～Ｃ_６アルキルから選択される。

いくつかの実施形態では、Ｑ’_１、Ｑ’_２、Ｑ’_３、及びＱ’’は、それぞれ、独立して、ペプチド、エーテル、ポリエチレングリコール、アルキル、Ｃ_１～Ｃ_２０アルキル、置換Ｃ_１～Ｃ_２０アルキル、Ｃ_２～Ｃ_２０アルケニル、置換Ｃ_２～Ｃ_２０アルケニル、Ｃ_２～Ｃ_２０アルキニル、置換Ｃ_２～Ｃ_２０アルキニル、Ｃ_１～Ｃ_２０アルコキシ、置換Ｃ_１～Ｃ_２０アルコキシ、アミノ、アミド、ピロリジン、８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート、及び６－アミノヘキサン酸から選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、及びＲ_４は、それぞれ、独立して、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、及びブチルから選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、及びＲ_４は、それぞれ、Ｈ及びメチルから選択される。

さらなる非限定的な例示的な構造Ｅは、構造Ｅ（ｉｉ）である：

式中、Ｌ_１、Ｌ_２、及びＬ_３は、それぞれ、独立して、リガンドであり；Ｑ’_１、Ｑ’_２、Ｑ’_３、及びＱ’’は、それぞれ、独立して、連結基であり、Ｒ_１は、Ｈ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、及び置換Ｃ_１～Ｃ_６アルキルから選択される。

いくつかの実施形態では、Ｑ’_１、Ｑ’_２、Ｑ’_３、及びＱ’’は、それぞれ、独立して、ペプチド、エーテル、ポリエチレングリコール、アルキル、Ｃ_１～Ｃ_２０アルキル、置換Ｃ_１～Ｃ_２０アルキル、Ｃ_２～Ｃ_２０アルケニル、置換Ｃ_２～Ｃ_２０アルケニル、Ｃ_２～Ｃ_２０アルキニル、置換Ｃ_２～Ｃ_２０アルキニル、Ｃ_１～Ｃ_２０アルコキシ、置換Ｃ_１～Ｃ_２０アルコキシ、アミノ、アミド、ピロリジン、８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート、及び６－アミノヘキサン酸から選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ_１は、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、及びブチルから選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ_１は、Ｈまたはメチルである。

さらなる非限定的な例示的な構造Ｅは、構造Ｅ（ｉｉｉ）である：

式中、Ｌ_１、Ｌ_２、及びＬ_３は、それぞれ、独立して、リガンドであり；Ｑ’_１、Ｑ’_２、Ｑ’_３、及びＱ’’は、それぞれ、独立して、連結基であり、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４及びＲ_５は、それぞれ、独立して、Ｈ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、及び置換Ｃ_１～Ｃ_６アルキルから選択される。

いくつかの実施形態では、Ｑ’_１、Ｑ’_２、Ｑ’_３、及びＱ’’は、それぞれ、独立して、ペプチド、エーテル、ポリエチレングリコール、アルキル、Ｃ_１～Ｃ_２０アルキル、置換Ｃ_１～Ｃ_２０アルキル、Ｃ_２～Ｃ_２０アルケニル、置換Ｃ_２～Ｃ_２０アルケニル、Ｃ_２～Ｃ_２０アルキニル、置換Ｃ_２～Ｃ_２０アルキニル、Ｃ_１～Ｃ_２０アルコキシ、置換Ｃ_１～Ｃ_２０アルコキシ、アミノ、アミド、ピロリジン、８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート、及び６－アミノヘキサン酸から選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、及びＲ_５は、それぞれ、独立して、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、及びブチルから選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、Ｒ_４、及びＲ_５はそれぞれ、Ｈ及びメチルから選択される。

さらなる非限定的な例示的な構造Ｅは、構造Ｅ（ｉｖ）である：

式中、Ｌ_１及びＬ_２は、それぞれ、独立して、リガンドであり；Ｑ’_１、Ｑ’_２、及びＱ’’は、それぞれ、独立して、連結基であり、Ｒ_１、Ｒ_２、及びＲ_３は、それぞれ、独立して、Ｈ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、及び置換Ｃ_１～Ｃ_６アルキルから選択される。

いくつかの実施形態では、Ｑ’_１、Ｑ’_２、及びＱ’’は、それぞれ、独立して、ペプチド、エーテル、ポリエチレングリコール、アルキル、Ｃ_１～Ｃ_２０アルキル、置換Ｃ_１～Ｃ_２０アルキル、Ｃ_２～Ｃ_２０アルケニル、置換Ｃ_２～Ｃ_２０アルケニル、Ｃ_２～Ｃ_２０アルキニル、置換Ｃ_２～Ｃ_２０アルキニル、Ｃ_１～Ｃ_２０アルコキシ、置換Ｃ_１～Ｃ_２０アルコキシ、アミノ、アミド、ピロリジン、８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート、及び６－アミノヘキサン酸から選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ_１、Ｒ_２、及びＲ_３は、それぞれ、独立して、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、及びブチルから選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ_１、Ｒ_２、及びＲ_３は、それぞれ、Ｈ及びメチルから選択される。

さらなる非限定的な例示的な構造Ｅは、構造Ｅ（ｖ）である：

式中、Ｌ_１及びＬ_２は、それぞれ、独立して、リガンドであり；Ｑ’_１、Ｑ’_２、及びＱ’’は、それぞれ、独立して、連結基であり、Ｒ_１、Ｒ_２、及びＲ_３は、それぞれ、独立して、Ｈ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、及び置換Ｃ_１～Ｃ_６アルキルから選択される。
いくつかの実施形態では、Ｑ’_１、Ｑ’_２、及びＱ’’は、それぞれ、独立して、ペプチド、エーテル、ポリエチレングリコール、アルキル、Ｃ_１～Ｃ_２０アルキル、置換Ｃ_１～Ｃ_２０アルキル、Ｃ_２～Ｃ_２０アルケニル、置換Ｃ_２～Ｃ_２０アルケニル、Ｃ_２～Ｃ_２０アルキニル、置換Ｃ_２～Ｃ_２０アルキニル、Ｃ_１～Ｃ_２０アルコキシ、置換Ｃ_１～Ｃ_２０アルコキシ、アミノ、アミド、ピロリジン、８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート、及び６－アミノヘキサン酸から選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ_１、Ｒ_２、及びＲ_３は、それぞれ、独立して、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、及びブチルから選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ_１、Ｒ_２、及びＲ_３は、それぞれ、Ｈ及びメチルから選択される。

さらなる非限定的な例示的な構造Ｅは、構造Ｅ（ｖｉ）である：

式中、Ｌ_１、Ｌ_２、及びＬ_３は、それぞれ、独立して、リガンドであり；Ｑ’_１、Ｑ’_２、Ｑ’_３、及びＱ’’は、それぞれ、独立して、連結基であり、Ｒ_１、Ｒ_２、及びＲ_３は、それぞれ、独立して、Ｈ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、及び置換Ｃ_１～Ｃ_６アルキルから選択される。

いくつかの実施形態では、Ｑ’_１、Ｑ’_２、Ｑ’_３、及びＱ’’は、それぞれ、独立して、ペプチド、エーテル、ポリエチレングリコール、アルキル、Ｃ_１～Ｃ_２０アルキル、置換Ｃ_１～Ｃ_２０アルキル、Ｃ_２～Ｃ_２０アルケニル、置換Ｃ_２～Ｃ_２０アルケニル、Ｃ_２～Ｃ_２０アルキニル、置換Ｃ_２～Ｃ_２０アルキニル、Ｃ_１～Ｃ_２０アルコキシ、置換Ｃ_１～Ｃ_２０アルコキシ、アミノ、アミド、ピロリジン、８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート、及び６－アミノヘキサン酸から選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ_１、Ｒ_２、及びＲ_３は、それぞれ、独立して、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、及びブチルから選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ_１、Ｒ_２、及びＲ_３は、それぞれ、Ｈ及びメチルから選択される。

さらなる非限定的な例示的な構造Ｅは、構造Ｅ（ｖｉｉ）である：

式中、Ｌ_１、Ｌ_２、及びＬ_３は、それぞれ、独立して、リガンドであり；Ｑ’_１、Ｑ’_２、Ｑ’_３、及びＱ’’は、それぞれ、独立して、連結基であり、Ｒ_１、Ｒ_２、及びＲ_３は、それぞれ、独立して、Ｈ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、及び置換Ｃ_１～Ｃ_６アルキルから選択され、Ｚ及びＺ’は、それぞれＯ及びＳから独立して選択される。

いくつかの実施形態では、Ｑ’_１、Ｑ’_２、Ｑ’_３、及びＱ’’は、それぞれ、独立して、ペプチド、エーテル、ポリエチレングリコール、アルキル、Ｃ_１～Ｃ_２０アルキル、置換Ｃ_１～Ｃ_２０アルキル、Ｃ_２～Ｃ_２０アルケニル、置換Ｃ_２～Ｃ_２０アルケニル、Ｃ_２～Ｃ_２０アルキニル、置換Ｃ_２～Ｃ_２０アルキニル、Ｃ_１～Ｃ_２０アルコキシ、置換Ｃ_１～Ｃ_２０アルコキシ、アミノ、アミド、ピロリジン、８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート、及び６－アミノヘキサン酸から選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ_１、Ｒ_２、及びＲ_３は、それぞれ、独立して、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、及びブチルから選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ_１、Ｒ_２、及びＲ_３は、それぞれ、Ｈ及びメチルから選択される。いくつかの実施形態では、少なくとも１つのＰ原子上のＺまたはＺ’はＳであり、他のＺまたはＺ’は、Ｏ（すなわち、ホスホロチオエート連結）である。いくつかの実施形態では、各－ＯＰ（Ｚ）（Ｚ’）Ｏ－は、ホスホロチオエート連結である。いくつかの実施形態では、Ｚ及びＺ’は両方とも、少なくとも１つのＰ原子（すなわち、ホスホジエステル連結）上のＯである。いくつかの実施形態では、各－ＯＰ（Ｚ）（Ｚ’）Ｏ－は、ホスホジエステル連結である。

さらなる非限定的な例示的な構造Ｅは、構造Ｅ（ｖｉｉｉ）である：

式中、Ｌ_１、Ｌ_２、及びＬ_３は、それぞれ、独立して、リガンドであり；Ｑ’_１、Ｑ’_２、Ｑ’_３、及びＱ’’は、それぞれ、独立して、連結基であり、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、及びＲ_４は、それぞれ、独立して、Ｈ、Ｃ_１～Ｃ_６アルキル、及び置換Ｃ_１～Ｃ_６アルキルから選択される。

いくつかの実施形態では、Ｑ’_１、Ｑ’_２、Ｑ’_３、及びＱ’’は、それぞれ、独立して、ペプチド、エーテル、ポリエチレングリコール、アルキル、Ｃ_１～Ｃ_２０アルキル、置換Ｃ_１～Ｃ_２０アルキル、Ｃ_２～Ｃ_２０アルケニル、置換Ｃ_２～Ｃ_２０アルケニル、Ｃ_２～Ｃ_２０アルキニル、置換Ｃ_２～Ｃ_２０アルキニル、Ｃ_１～Ｃ_２０アルコキシ、置換Ｃ_１～Ｃ_２０アルコキシ、アミノ、アミド、ピロリジン、８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート、及び６－アミノヘキサン酸から選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、及びＲ_４は、それぞれ、独立して、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、及びブチルから選択される。いくつかの実施形態では、Ｒ_１、Ｒ_２、Ｒ_３、及びＲ_４は、それぞれ、Ｈ及びメチルから選択される。

非限定的な例示的な足場及び／または足場を含むリンカー、及びそれらの合成は、例えば、ＰＣＴ公開番号ＷＯ２０１３／０３３２３０、米国特許第８，１０６，０２２ Ｂ２号、米国公開第２０１２／０１５７５０９Ａ１号；米国特許第５，９９４，５１７号；米国特許第７，４９１，８０５Ｂ２号；米国特許第８，３１３，７７２Ｂ２号；Ｍａｎｏｈａｒａｎ，Ｍ．，Ｃｈａｐｔｅｒ １６，Ａｎｔｉｓｅｎｓｅ Ｄｒｕｇ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｃｒｏｏｋｅ，Ｓ．Ｔ．，Ｍａｒｃｅｌ Ｄｅｋｋｅｒ，Ｉｎｃ．，２００１，３９１－４６９に記載されている。

特定の実施形態では、化合物のＬ_ｎ－リンカー部分は、構造Ｆを含む：

式中、
Ｂは、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｎ（Ｒ^Ｎ）－、－Ｚ－Ｐ（Ｚ’）（Ｚ’’）Ｏ－、－Ｚ－Ｐ（Ｚ’）（Ｚ’’）Ｏ－Ｎ_ｍ－Ｘ－、及び－Ｚ－Ｐ（Ｚ’）（Ｚ’’）Ｏ－Ｎ_ｍ－Ｙ－から選択され；
ＭＯは、ＲＧ７４４３であり；
Ｒ^Ｎは、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、及びベンジルから選択され；
Ｚ、Ｚ’、及びＺ’’は、それぞれＯ及びＳから独立して選択され；
各Ｎは、独立して、修飾または非修飾ヌクレオシドであり；
ｍは、１～５であり；
Ｘは、ホスホジエステル連結及びホスホロチオエート連結から選択され；
Ｙは、ホスホジエステル連結であり；
波線は、残りのリンカー及びリガンド（複数可）への接続を示す。

特定の実施形態では、波線は、上記の構造Ｅへの接続を示す。

特定の実施形態では、ｎは１～５、１～４、１～３、または１～２である。特定の実施形態では、ｎは１である。特定の実施形態では、ｎは２である。特定の実施形態では、ｎは３である。特定の実施形態では、ｎは４である。特定の実施形態では、ｎは５である。

特定の実施形態では、化合物のＬ_ｎ－リンカー部分は、構造Ｇを含む：

式中、
Ｂは、－Ｏ－、－Ｓ－、－Ｎ（Ｒ^Ｎ）－、－Ｚ－Ｐ（Ｚ’）（Ｚ’’）Ｏ－、－Ｚ－Ｐ（Ｚ’）（Ｚ’’）Ｏ－Ｎ_ｍ－Ｘ－、及び－Ｚ－Ｐ（Ｚ’）（Ｚ’’）Ｏ－Ｎ_ｍ－Ｙ－から選択され；
ＭＯは、ＲＧ７４４３であり；
Ｒ^Ｎは、Ｈ、メチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、及びベンジルから選択され；
Ｚ、Ｚ’、及びＺ’’は、それぞれＯ及びＳから独立して選択され；
各Ｎは、独立して、修飾または非修飾ヌクレオシドであり；
ｍは、１～５であり；
Ｘは、ホスホジエステル連結及びホスホロチオエート連結から選択され；
Ｙは、ホスホジエステル連結であり；
各Ｌは、独立して、リガンドであり；ｎは、１～１０であり；Ｓは、足場であり；Ｑ’及びＱ’’は、独立して、連結基である。

特定の実施形態では、各Ｑ’及びＱ’’は、独立して、ペプチド、エーテル、ポリエチレングリコール、アルキル、Ｃ_１～Ｃ_２０アルキル、置換Ｃ_１～Ｃ_２０アルキル、Ｃ_２～Ｃ_２０アルケニル、置換Ｃ_２～Ｃ_２０アルケニル、Ｃ_２～Ｃ_２０アルキニル、置換Ｃ_２～Ｃ_２０アルキニル、Ｃ_１～Ｃ_２０アルコキシ、置換Ｃ_１～Ｃ_２０アルコキシ、アミノ、アミド、ピロリジン、８－アミノ－３，６－ジオキサオクタン酸（ＡＤＯ）、スクシンイミジル４－（Ｎ－マレイミドメチル）シクロヘキサン－１－カルボキシレート、及び６－アミノヘキサン酸から選択される。

化合物の非限定的な例示的なＬ_ｎ－リンカー部分（例えば、構造ＦまたはＧの）は、以下の構造Ｈに示されている：

ここで、波線は、修飾オリゴヌクレオチドＲＧ７４４３への、例えば、構造ＢでのＸ_１への、または例えば、構造ＣまたはＤでのＸもしくはＹへの付着を示す。

特定の実施形態では、本明細書に記載の抱合型修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物は、構造Ａを有する：
Ｌ_ｎ－リンカー－ＭＯ；
式中、各Ｌは独立してリガンドであり、ｎは、１～１０であり；ＭＯは、ＲＧ７４４３である。

いくつかの実施形態では、化合物は以下の構造を有する：

式中、各Ｎは、独立して、修飾または非修飾ヌクレオシドであり、ｍは、１～５であり；Ｘ_１及びＸ_２は、それぞれ、独立して、各ホスホジエステル連結またはホスホロチオエート連結であり；ＭＯは、ＲＧ７４４３である。

特定の実施形態では、Ｘ_１及びＸ_２のうちの少なくとも１つは、ホスホジエステル連結である。特定の実施形態では、Ｘ_１及びＸ_２のそれぞれは、ホスホジエステル連結である。

特定の実施形態では、ｍは、１である。特定の実施形態では、ｍは、２である。特定の実施形態では、ｍは、３、４、または５である。特定の実施形態では、ｍは、２、３、４、または５である。特定の実施形態では、ｍが１より大きい場合、Ｎ_ｍの各修飾または非修飾ヌクレオシドは、ホスホジエステルヌクレオシド間連結またはホスホロチオエートヌクレオシド間連結によって、Ｎ_ｍの隣接する修飾または非修飾ヌクレオシドに接続され得る。

本明細書に記載の実施形態のいずれにおいても、Ｎ_ｍは、Ｎ’_ｐＮ’’であり得、ここで、各Ｎ’は、独立して、修飾または非修飾ヌクレオシドであり、ｐは、０～４であり；Ｎ’’は、非修飾糖部分を含むヌクレオシドである。

特定の実施形態では、ｐは０である。特定の実施形態では、ｐは、１、２、３、または４である。特定の実施形態では、ｐが１、２、３、または４である場合、各Ｎ’は、非修飾糖部分を含む。

特定の実施形態では、非修飾糖部分は、β－Ｄ－リボースまたはβ－Ｄ－デオキシリボースである。

ｐが１、２、３、または４である特定の実施形態では、Ｎ’は、プリン核酸塩基を含む。特定の実施形態では、Ｎ’’は、プリン核酸塩基を含む。特定の実施形態では、プリン核酸塩基は、アデニン、グアニン、ヒポキサンチン、キサンチン、及び７－メチルグアニンから選択される。特定の実施形態では、Ｎ’は、β－Ｄ－デオキシリボアデノシンまたはβ－Ｄ－デオキシリボグアノシンである。特定の実施形態では、Ｎ’’は、β－Ｄ－デオキシリボアデノシンまたはβ－Ｄ－デオキシリボグアノシンである。

特定の実施形態では、ｐは１であり、Ｎ’及びＮ’’は、それぞれβ－Ｄ－デオキシリボアデノシンであり、Ｎ’及びＮ’’はホスホジエステルヌクレオシド間連結によって連結されている。特定の実施形態では、ｐは１であり、Ｎ’及びＮ’’は、それぞれβ－Ｄ－デオキシリボアデノシンであり、Ｎ’及びＮ’’は、ホスホジエステルヌクレオシド間連結によって連結されている。特定の実施形態では、ｐは１であり、Ｎ’及びＮ’’は、それぞれβ－Ｄ－デオキシリボアデノシンであり、Ｎ’及びＮ’’は、ホスホロチオエートヌクレオシド間連結によって連結されている。

ｐが１、２、３、または４である特定の実施形態では、Ｎ’は、ピリミジン核酸塩基を含む。特定の実施形態では、Ｎ’’は、ピリミジン核酸塩基を含む。特定の実施形態では、ピリミジン核酸塩基は、シトシン、５－メチルシトシン、チミン、ウラシル、及び５，６－ジヒドロウラシルから選択される。

特定の実施形態では、各Ｎの糖部分は、β－Ｄ－リボース、β－Ｄ－デオキシリボース、２’－Ｏ－メトキシ糖、２’－Ｏ－メチル糖、２’－フルオロ糖、及び二環式糖部分である。特定の実施形態では、各二環式糖部分は、ｃＥｔ糖部分、ＬＮＡ糖部分、及びＥＮＡ糖部分から独立して選択される。特定の実施形態では、ｃＥｔ糖部分は、Ｓ－ｃＥｔ糖部分である。特定の実施形態では、ｃＥｔ糖部分は、Ｒ－ｃＥｔ糖部分である。

特定の実施形態では、化合物は、修飾オリゴヌクレオチドの５’末端に連結された抱合部分を含む。特定の実施形態では、化合物は、修飾オリゴヌクレオチドの３’末端に連結された抱合部分を含む。特定の実施形態では、化合物は、修飾オリゴヌクレオチドの５’末端に連結された抱合部分を含む。特定の実施形態では、化合物は、修飾オリゴヌクレオチドの３’末端に連結された第１の抱合部分と、修飾オリゴヌクレオチドの５’末端に連結された第２の抱合部分とを含む。

特定の代謝産物
Ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏにおけるエキソヌクレアーゼ及び／またはエンドヌクレアーゼに曝露すると、化合物は、化合物全体の様々な位置で切断を受け得る。そのような切断の生成物は、親化合物のある程度の活性を保持し得るので、それ自体、活性代謝物と見なされる。したがって、化合物の代謝産物は、本明細書に記載の方法で使用され得る。特定の実施形態では、（非抱合型または抱合型）修飾オリゴヌクレオチドは、５’末端及び／または３’末端で切断を受け、５’／または３’末端において、親修飾オリゴヌクレオチドと比較して、１、２、または３少ないヌクレオチドを有する代謝産物が得られる。特定の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは５’末端で切断を受け、５’末端ヌクレオチドを放出し、親修飾オリゴヌクレオチドと比較して、５’末端においてヌクレオチドが１つ少ない代謝産物をもたらす。特定の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは５’末端で切断を受け、２つの５’末端ヌクレオシドを放出し、親修飾オリゴヌクレオチドと比較して、５’末端で２つ少ないヌクレオチドを有する代謝産物をもたらす。特定の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは３’末端で切断を受け、３’末端ヌクレオチドを放出し、親修飾オリゴヌクレオチドと比較して、３’末端に１つ少ないヌクレオチドを有する代謝産物をもたらす。特定の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは３’末端で切断を受け、２つの３’末端ヌクレオシドを放出し、親修飾オリゴヌクレオチドと比較して、３’末端で２つ少ないヌクレオチドを有する代謝産物をもたらす。

抱合部分に連結された修飾オリゴヌクレオチドを含む化合物はまた、修飾オリゴヌクレオチドとリガンドとの間のリンカー内のある部位で切断を受け得る。特定の実施形態では、切断により、抱合部分の一部分を含む親修飾オリゴヌクレオチドが生じる。特定の実施形態では、切断により、修飾オリゴヌクレオチドとリガンドとの間のリンカーの１つ以上のサブユニットを含む親修飾オリゴヌクレオチドが生じる。例えば、化合物が、構造Ｌ_ｎ－リンカー－Ｘ_１－Ｎ_ｍ－Ｘ_２－ＭＯを有する場合、いくつかの実施形態では、切断により、Ｎ_ｍの１つ以上のヌクレオチドを含む親修飾オリゴヌクレオチドが生じる。いくつかの実施形態では、抱合型修飾オリゴヌクレオチドの切断により、親修飾オリゴヌクレオチドが生じる。いくつかのそのような実施形態では、例えば、化合物が、構造Ｌ_ｎ－リンカー－Ｘ_１－Ｎ_ｍ－Ｘ_２－ＭＯを有する場合、いくつかの実施形態では、切断により、Ｎ_ｍのヌクレオチドをいずれも含まない親修飾オリゴヌクレオチドが生じる。

特定の核酸塩基配列
これらに限定されないが、実施例及び配列表に見られるものなど、本明細書に記載の任意の抗ｍｉＲ－１２２核酸塩基配列は、核酸へのいかなる修飾からも独立している。したがって、配列番号によって定義される核酸は、独立して、１つ以上の糖部分、１つ以上のヌクレオシド間連結、及び／または１つ以上の核酸塩基に対する１つ以上の修飾を含み得る。

本出願に添付される配列表が必要に応じて各核酸塩基配列を「ＲＮＡ」または「ＤＮＡ」のいずれか一方と特定するが、実際には、それらの配列は、化学修飾の任意の組み合わせによって修飾され得る。当業者は、修飾オリゴヌクレオチドを説明するための「ＲＮＡ」または「ＤＮＡ」などの指定がいくらか恣意的であることを容易に理解するであろう。例えば、２’－ＯＨ糖部分及びチミン塩基を含むヌクレオシドを含む修飾オリゴヌクレオチドは、修飾糖を有するＤＮＡ（ＤＮＡの天然２’－Ｈの場合は、２’－ＯＨ）または修飾塩基（ＲＮＡの天然ウラシルのためのチミン（メチル化ウラシル））を有するＲＮＡとして説明することができる。

したがって、配列表中のものを含むが、これらに限定されない本明細書に提供される核酸配列は、修飾核酸塩基を有するそのような核酸を含むが、これらに限定されない天然または修飾ＲＮＡ及び／またはＤＮＡの任意の組み合わせを含有する核酸を包含するよう意図される。さらなる例であり、限定するものではないが、核酸塩基配列「ＡＴＣＧＡＴＣＧ」を有する修飾オリゴヌクレオチドは、修飾または非修飾にかかわらず、これらに限定されないが、配列「ＡＵＣＧＡＵＣＧ」を有するものなどのＲＮＡ塩基、及び「ＡＵＣＧＡＴＣＧ」などのいくつかのＤＮＡ塩基及びいくつかのＲＮＡ塩基を有するもの、及び「ＡＴ^ｍｅＣＧＡＵＣＧ（式中、^ｍｅＣは、５－メチルシトシンを示す）」などの他の修飾塩基を有するオリゴヌクレオチドを含むそのような化合物など、そのような核酸塩基配列を有する任意のオリゴヌクレオチドを包含する。同様に、核酸塩基配列「ＡＵＣＧＡＵＣＧ」を有する修飾オリゴヌクレオチドは、修飾または非修飾にかかわらず、これらに限定されないが、配列「ＡＴＣＧＡＴＣＧ」を有するものなどのＤＮＡ塩基、及び「ＡＵＣＧＡＴＣＧ」などのいくつかのＲＮＡ塩基、及び「ＡＴ^ｍｅＣＧＡＵＣＧ（式中、^ｍｅＣは、５－メチルシトシンを示す）」などの他の修飾塩基を有するオリゴヌクレオチドを含むそのような化合物など、そのような核酸塩基配列を有する任意のオリゴヌクレオチドを包含する。

特定の修飾
修飾オリゴヌクレオチドは、核酸塩基、糖、及び／またはヌクレオシド間連結に対する１つ以上の修飾を含み得る。修飾核酸塩基、糖、及び／またはヌクレオシド間連結は、例えば、細胞取り込みの増強、他のオリゴヌクレオチドまたは核酸標的に対する親和性の増強、及びヌクレアーゼの存在下での安定性の増大などの望ましい特性のために、非修飾形態よりも選択され得る。

特定の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは、１つ以上の修飾ヌクレオシドを含む。特定の実施形態では、修飾ヌクレオシドは、安定化ヌクレオシドである。安定化ヌクレオシドの例は、２’修飾ヌクレオシドである。

特定の実施形態では、修飾ヌクレオシドは、修飾糖部分を含む。特定の実施形態では、修飾糖部分を含む修飾ヌクレオシドは、非修飾核酸塩基を含む。特定の実施形態では、修飾糖は、修飾核酸塩基を含む。特定の実施形態では、修飾ヌクレオシドは、２’－修飾ヌクレオシドである。

特定の実施形態では、２’修飾ヌクレオシドは、二環式糖部分を含む。特定のそのような実施形態では、二環式糖部分は、アルファ配置のＤ糖である。特定のそのような実施形態では、二環式糖部分は、ベータ配置のＤ糖である。特定のそのような実施形態では、二環式糖部分は、アルファ配置のＬ糖である。特定のそのような実施形態では、二環式糖部分は、ベータ配置のＬ糖である。

特定の実施形態では、二環式糖部分は、２’と４’－炭素原子間のブリッジ基を含む。二環式糖部分を含むヌクレオシドは、二環式ヌクレオシドまたはＢＮＡと称される。特定の実施形態では、以下に示すように、二環式ヌクレオシドとしては、これらに限定されないが、（Ａ）α－Ｌ－メチレンオキシ（４’－ＣＨ_２－Ｏ－２’）ＢＮＡ；（Ｂ）β－Ｄ－メチレンオキシ（４’－ＣＨ_２－Ｏ－２’）ＢＮＡ；（Ｃ）エチレンオキシ（４’－（ＣＨ_２）_２－Ｏ－２’）ＢＮＡ；（Ｄ）アミノオキシ（４’－ＣＨ_２－Ｏ－Ｎ（Ｒ）－２’）ＢＮＡ；（Ｅ）オキシアミノ（４’－ＣＨ_２－Ｎ（Ｒ）－Ｏ－２’）ＢＮＡ；（Ｆ）メチル（メチレンオキシ）（４’－ＣＨ（ＣＨ_３）－Ｏ－２’）ＢＮＡ（拘束エチルまたはｃＥｔとも称する）；（Ｇ）メチレン－チオ（４’－ＣＨ_２－Ｓ－２’）ＢＮＡ；（Ｈ）メチレン－アミノ（４’－ＣＨ２－Ｎ（Ｒ）－２’）ＢＮＡ；（Ｉ）メチル炭素環式（４’－ＣＨ_２－ＣＨ（ＣＨ_３）－２’）ＢＮＡ；（Ｊ）ｃ－ＭＯＥ（４’－ＣＨ_２－ＯＭｅ－２’）ＢＮＡ及び（Ｋ）プロピレン炭素環式（４’－（ＣＨ_２）_３－２’）ＢＮＡが挙げられる。

式中、Ｂｘは、核酸塩基部分であり、Ｒは、独立して、Ｈ、保護基、またはＣ_１～Ｃ_１２アルキルである。

特定の実施形態では、２’修飾ヌクレオシドは、Ｆ、ＯＣＦ_３、Ｏ－ＣＨ_３、ＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３、２’－Ｏ（ＣＨ_２）_２ＳＣＨ_３、Ｏ－（ＣＨ_２）_２－Ｏ－Ｎ（ＣＨ_３）_２、－Ｏ（ＣＨ_２）_２Ｏ（ＣＨ_２）_２Ｎ（ＣＨ_３）_２、及びＯ－ＣＨ_２－Ｃ（＝Ｏ）－Ｎ（Ｈ）ＣＨ_３から選択される２’置換基を含む。

特定の実施形態では、２’－修飾ヌクレオシドは、Ｆ、Ｏ－ＣＨ_３、及びＯＣＨ_２ＣＨ_２ＯＣＨ_３から選択される２’－置換基を含む。

特定の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは、１つ以上のヌクレオシド間修飾を含む。特定のそのような実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの各ヌクレオシド間連結は、修飾ヌクレオシド間連結である。特定の実施形態では、修飾ヌクレオシド間連結が、リン原子である。

特定の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは、少なくとも１つのホスホロチオエートヌクレオシド間連結を含む。特定の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドの各ヌクレオシド間連結は、ホスホロチオエートヌクレオシド間連結である。

特定の実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは、１つ以上の修飾核酸塩基を含む。特定の実施形態では、修飾核酸塩基は、７－デアザグアニン、７－デアザアデニン、ヒポキサンチン、キサンチン、７－メチルグアニン、２－アミノピリジン及び２－ピリドンから選択される。特定の実施形態では、修飾核酸塩基は、２－アミノプロピルアデニン、５－プロピニルウラシル及び５－プロピニルシトシンなど、５－置換ピリミジン、６－アザピリミジン及びＮ－２、Ｎ－６及びＯ－６置換プリンから選択される。

特定の合成方法
修飾オリゴヌクレオチドは、当技術分野で公知である自動化された固相合成法で作製され得る。固相合成中、ホスホルアミダイトモノマーは、固体支持体に共有結合により連結しているヌクレオシドに順次結合する。このヌクレオシドは、修飾オリゴヌクレオチドの３’末端ヌクレオシドである。通常、カップリングサイクルは、脱トリチル化（酸による５’－ヒドロキシル保護基の除去）、カップリング（活性化ホスホロアミダイトの支持体結合ヌクレオシドまたはオリゴヌクレオチドへの付着）、酸化または硫化（酸化剤または硫化剤による新しく形成されたホスファイトトリメステルの変換）、及びキャッピング（未反応の５’－ヒドロキシル基のアセチル化）の４つのステップで構成される。最終カップリングサイクルの後、固体支持体に結合したオリゴヌクレオチドは、脱トリチル化ステップに供され、続いて切断及び脱保護ステップが行われ、同時にオリゴヌクレオチドが固体支持体から放出され、保護基が塩基から除去される。固体支持体を濾過により除去し、濾液を濃縮し、得られた溶液を同一性及び純度について試験する。次に、オリゴヌクレオチドは、例えば、陰イオン交換樹脂が充填されたカラムを使用して精製される。

ＧａｌＮＡｃ抱合型修飾オリゴヌクレオチドは、非抱合型オリゴヌクレオチドを生成した固相合成と同様に、自動化された固相合成により作製され得る。ＧａｌＮＡｃ抱合型オリゴヌクレオチドの合成中に、ホスホルアミダイトモノマーは、固体支持体に共有結合により連結しているＧａｌＮＡｃ抱合体に連続的に連結される。ＧａｌＮＡｃ抱合体及びＧａｌＮＡｃ抱合体固体支持体の合成は、例えば、米国特許第８，１０６，０２２号及び国際出願公開第ＷＯ２０１３／０３３２３０号に記載されており、これらのそれぞれは、１つ以上のＧａｌＮＡｃ部分を含む抱合体など、炭水化物含有抱合体の合成、及び固体支持体に共有結合により連結した抱合体の合成の説明のためにその全体が参照により本明細書に組み込まれる。

特定の医薬組成物
本明細書で提供されるのは、本明細書で提供される化合物、及び薬学的に許容される希釈剤を含む医薬組成物である。特定の実施形態では、薬学的に許容される希釈剤は、水溶液である。特定の実施形態では、水溶液は生理食塩水である。本明細書で使用される場合、薬学的に許容される希釈剤は、無菌の希釈剤であると理解されている。好適な投与経路としては、これらに限定されないが、静脈内及び皮下投与が挙げられる。

特定の実施形態では、医薬組成物は、好適な希釈剤中で調製され、調製中に酸または塩基でｐＨ７．０～９．０に調整され、次いで滅菌条件下で凍結乾燥された、本明細書で提供される化合物である。その後、凍結乾燥された修飾オリゴヌクレオチドは、好適な希釈剤、例えば、水などの水溶液、または生理食塩水、ハンクス溶液、またはリンゲル液などの生理学的に適合性のある緩衝液で再構成される。再構成された生成物は、皮下注射または静脈内注入として投与される。凍結乾燥された医薬品は、２ｍＬのタイプＩの透明なガラスバイアル（硫酸アンモニウム処理）にパッケージされ、ブロモブチルゴムクロージャーで栓をされ、アルミニウムのオーバーシールで密封される。

特定の実施形態では、医薬組成物は、投薬単位（例えば、錠剤、カプセル、ボーラスなど）の形態で投与される。いくつかの実施形態では、医薬組成物は、２５ｍｇ～２５０ｍｇから選択される範囲内の用量で本明細書に提供される化合物を含む。特定の実施形態では、こうした医薬組成物は、２５ｍｇ、３０ｍｇ、３５ｍｇ、４０ｍｇ、４５ｍｇ、５０ｍｇ、５５ｍｇ、６０ｍｇ、６５ｍｇ、７０ｍｇ、７５ｍｇ、８０ｍｇ、８５ｍｇ、９０ｍｇ、９５ｍｇ、１００ｍｇ、１０５ｍｇ、１１０ｍｇ、１１５ｍｇ、１２０ｍｇ、１２５ｍｇ、１３０ｍｇ、１３５ｍｇ、１４０ｍｇ、１４５ｍｇ、１５０ｍｇ、１５５ｍｇ、１６０ｍｇ、１６５ｍｇ、１７０ｍｇ、１７５ｍｇ、１８０ｍｇ、１８５ｍｇ、１９０ｍｇ、１９５ｍｇ、２００ｍｇ、２０５ｍｇ、２１０ｍｇ、２１５ｍｇ、２２０ｍｇ、２２５ｍｇ、２３０ｍｇ、２３５ｍｇ、２４０ｍｇ、２４５ｍｇ、または２５０ｍｇから選択される用量で存在する本明細書に提供される化合物を含む。

医薬組成物は、好適な安定剤または高度に濃縮された溶液の調製を可能にする医薬剤の溶解度を増加させる剤も含有し得る。

特定の実施形態では、本明細書で提供される医薬組成物は、それらの当技術分野で確立された使用レベルで、医薬組成物に従来見られる他の補助成分をさらに含み得る。したがって、例えば、組成物は、例えば、鎮痒剤、収斂剤、局所麻酔薬または抗炎症剤などの、追加の適合性のある薬学的に活性な材料を含み得る。

特定のｍｉＲ－１２２キット
本発明は、キットも提供する。いくつかの実施形態では、キットは、本明細書で提供される１つ以上の化合物を含む。いくつかの実施形態では、本明細書で提供される化合物は、バイアル内に存在する。１０など、複数のバイアルは、例えば、分配パック内に存在することができる。いくつかの実施形態では、バイアルは、注射器でアクセスできるように製造されている。キットには、本明細書で提供される化合物を使用するための説明書も含まれ得る。

いくつかの実施形態では、キットは、本明細書で提供される化合物を対象に投与するために使用することができる。そのような場合、本明細書で提供される少なくとも１つの化合物を含むことに加えて、キットは、注射器、アルコールスワブ、綿棒、及び／またはガーゼパッドのうちの１つ以上をさらに含むことができる。いくつかの実施形態では、ｍｉＲ－１２２に相補的な化合物は、バイアル内ではなく、事前に充填された注射器（例えば、ニードルガードを有する２７ゲージ、１／２インチのニードルを備えた単回投与注射器など）内に存在し得る。１０などの複数の事前に充填された注射器は、例えば、分配パック内に存在することができる。キットはまた、本明細書で提供される化合物を投与するための説明書を含むことができる。

特定の実験モデル
特定の実施形態では、本発明は、実験モデルにおいて本明細書に提供される化合物を使用及び／または試験する方法を提供する。当業者は、本明細書で提供される化合物を評価するために、そのような実験モデルのプロトコルを選択及び修正することができる。

抗ｍｉＲ化合物の投与後のマイクロＲＮＡのアンチセンス阻害の効果は、当技術分野で公知である様々な方法によって評価することができる。特定の実施形態では、これらの方法は、ｉｎ ｖｉｔｒｏまたはｉｎ ｖｉｖｏで細胞または組織中のマイクロＲＮＡレベルを定量化するために使用される。特定の実施形態では、マイクロＲＮＡレベルの変化は、マイクロアレイ分析によって測定される。特定の実施形態では、マイクロＲＮＡレベルの変化は、ＴａｑＭａｎ（登録商標）ＭｉｃｒｏＲＮＡアッセイ（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ，ａ Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ ｂｒａｎｄ）などのいくつかの市販のＰＣＲアッセイのうちの１つによって測定される。

抗ｍｉＲ化合物のｉｎ ｖｉｔｒｏ活性は、ルシフェラーゼ細胞培養アッセイを使用して評価され得る。このアッセイでは、マイクロＲＮＡルシフェラーゼセンサー構築物は、ルシフェラーゼ遺伝子に融合した目的のマイクロＲＮＡの１つ以上の結合部位を含むように設計されている。マイクロＲＮＡが、ルシフェラーゼセンサー構築物内の同族部位に結合すると、ルシフェラーゼの発現が抑制される。適切な抗－ｍｉＲは、細胞に導入されると、標的マイクロＲＮＡに結合し、ルシフェラーゼ発現の抑制を緩和する。したがって、このアッセイでは、目的のマイクロＲＮＡの効果的な阻害剤である抗－ｍｉＲが、ルシフェラーゼ発現の増加を引き起こす。

抗ｍｉＲ化合物の活性は、マイクロＲＮＡの標的のｍＲＮＡ及び／またはタンパク質レベルを測定することによって評価され得る。マイクロＲＮＡは、１つ以上の標的ＲＮＡ内の相補的部位に結合し、これにより標的ＲＮＡの抑制がもたらされる。したがって、マイクロＲＮＡの阻害により、マイクロＲＮＡの標的のｍＲＮＡ及び／またはタンパク質のレベルの増加（すなわち、抑制解除）がもたらされる。１つ以上の標的ＲＮＡの抑制解除は、ｉｎ ｖｉｖｏまたはｉｎ ｖｉｔｒｏで測定され得る。例えば、ｍｉＲ－１２２の標的は、アルドラーゼＡ（ＡＬＤＯＡ）である。ｍｉＲ－１２２の阻害により、ＡＬＤＯＡ ｍＲＮＡのレベルが上昇するため、ＡＬＤＯＡ ｍＲＮＡレベルを使用して、抗ｍｉＲ－１２２化合物の阻害活性を評価することができる。

ＨＣＶ複製に対する抗ｍｉＲ－１２２化合物の効果は、ＨＣＶレプリコンアッセイで測定され得る。このアッセイでは、化合物は、安定したルシフェラーゼレポーター及び３つの細胞培養適応突然変異（ｌｕｃ－ｕｂｉ－ｎｅｏ／ＥＴ）を含むＨＣＶのサブゲノムレプリコンを含む細胞株（例えば、ヒト肝癌細胞株）に導入させる。ルシフェラーゼレポーターは、ＨＣＶ複製の間接的な尺度として使用される。使用されるレプリコンは、親ＨＣＶ遺伝子型または抗ウイルス剤に対する耐性を付与する突然変異を有するＨＣＶ遺伝子型であり得る。抗ｍｉＲ－１２２化合物は、単独で、またはＨＣＶ感染治療に使用される他の剤と組み合わせて評価され得る。いくつかの実施形態では、修飾オリゴヌクレオチドは、ｉｎ ｖｉｖｏまたはｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイで試験され得、その後、本明細書に記載の方法で使用するための化合物を形成するために抱合され得る。

以下の例は、本発明のいくつかの実施形態をより完全に例示するために提示されている。しかし、それらは、本発明の広い範囲を限定するものとして決して解釈されるべきではない。当業者は、本発明の趣旨から逸脱することなく、様々な化合物を設計するために、この発見の基礎となる原理を容易に採用するであろう。

実施例１：ＨＣＶ感染の治療のための抗ｍｉＲ－１２２化合物
ｍｉＲ－１２２は、肝臓内で豊富にかつ特異的に発現するマイクロＲＮＡであり、Ｃ型肝炎ウイルスの蓄積にとって重要な宿主因子である（Ｊｏｐｌｉｎｇ ｅｔ ａｌ．，Ｓｃｉｅｎｃｅ．２００５，３０９（５７４０），１５７７－８１）。ｍｉＲ－１２２は、ＨＣＶゲノムの５’非コード領域内の２つの近接に離間しているシード配列部位に結合することにより、ＨＣＶと相互作用し、その結果、ＨＣＶゲノムの安定化をもたらし、複製及び翻訳を補助する（Ｊａｎｇｒａ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｖｉｒｏｌ．，２０１０，８４：６６１５－６６２５；Ｍａｃｈｌｉｎ，ｅｔ ａｌ．，２０１１）。ＲＧ－１０１は、ｍｉＲ－１２２を標的とするＧａｌＮＡｃ抱合型修飾オリゴヌクレオチドである。

完了した第Ｉ相ヒト概念証明研究では、単剤療法としてのＲＧ－１０１の単回皮下用量による治療により、遺伝子型の治療が困難な対象、様々な肝線維症状態及び以前のＩＦＮを含むレジメンの後にウイルスの再発を経験した対象など、治療を受けたすべてのＨＣＶ感染対象においてウイルス量が有意にかつ持続して減少した。

ＲＧ－１０１と複数の承認された直接作用型抗ウイルス（ＤＡＡ）薬との組み合わせを評価する完了第ＩＩ相試験では、対象は１日目に２ｍｇ／ｋｇのＲＧ－１０１の皮下注射を１回受け、その後、１日１回のＤＡＡ（ハーボニー（登録商標）、オリシオ（登録商標）、またはダクルインザ（商標））の経口投与を２８日間、その後２９日目に２ｍｇ／ｋｇのＲＧ－１０１の追加皮下注射を受けた。ウイルス学的応答は、ＬＬＯＱ＝１２ＩＵ／ｍＬのリアルタイムＨＣＶアッセイ（Ａｂｂｏｔｔ）を使用して、定量下限（ＬＬＯＱ）を下回るＨＣＶＲＮＡウイルス量として定義した。ウイルス学的応答を示した対象の数及び割合を表１に示す。特に、ＲＧ－１０１＋ハーボニー群のすべての対象は、４８週間の追跡期間を通じて有意かつ持続的なウイルス量の減少を経験した。ＲＧ－１０１＋オリシオ群及びＲＧ－１０１＋ダクルインザ群では、それぞれ６名及び４名の対象が再発を経験した。ＲＧ－１０１＋オリシオ群では、１名の対象が同意を撤回したため、４８週目の時点には含まれなかった。

第２相試験中、２００名中１０名の対象が一過性の高ビリルビン血症を経験し、これは、正常上限（ＵＬＮ）を超える抱合型及び総ビリルビンの増加を特徴としている。米国食品医薬品局は、慢性ＨＣＶ感染症の治療用のＲＧ－１０１のＩＮＤを臨床試験差し止めとした。

高ビリルビン血症の根底にあるメカニズムを特定するために、文献検索を行い、ＲＧ－１０１研究からの前臨床データを徹底的に再分析した。文献検索では、これまでに報告されたｍｉＲ－１２２とビリルビン代謝経路、または薬物のクラスとしてのオリゴヌクレオチドとビリルビン代謝経路との関連性は明らかにならなかった。マウス、ラット、及びサルで実施された多数の研究において、試験された臨床用量よりも実質的に高い用量において、ビリルビンが増加した症例は確認されなかった。さらに、事前のＩＮＤの段階で、ＲＧ－１０１及びその活性代謝物を、シトクロムＰ４５０酵素ならびに取り込み及び排出のトランスポーターと相互作用する能力について試験した。オリゴヌクレオチドに予想されるとおり、いずれの化合物もこれらの酵素及びトランスポーターと有意に相互作用しなかった。

肝臓内のビリルビントランスポーターへの干渉が、高ビリルビン血症につながる可能性があるという仮説が立てられた。肝臓には、肝細胞と胆汁との間のビリルビンの輸送に関与するいくつかのトランスポーターが存在する。そのようなトランスポーターの１つである多剤耐性関連タンパク質２（ＭＲＰ２）は、ＡＢＣＣ２遺伝子によってコードされ、肝細胞の頂端側、近位尿細管細胞の頂端膜、及び腸管腔（腸細胞）に発現する。ＭＲＰ２トランスポーターは、抱合型ビリルビンなど、有機アニオンの排泄に関与している。ＭＲＰ２トランスポーターの既知の阻害剤としては、プロベネシド、フロセミド、リトナビル、アバカビル、シクロスポリンＡ、及びテノホビルが挙げられる。しかし、上記のとおり、オリゴヌクレオチドは、これまでＭＲＰ２の阻害剤として報告されていない。

高ビリルビン血症に寄与する追加の要因は、ＨＣＶ感染対象におけるＭＲＰ２発現のレベルであり得る。ＭＲＰ２の発現は、ＨＣＶ感染対象では、非感染対象と比較して、約７０％少ない（Ｊ Ｈｅｐａｔｏｌ．２００１ Ｄｅｃ；３５（６）：７６５－７３）。したがって、ＨＣＶ感染対象ではＭＲＰ２のレベルがすでに低下しているため、ＨＣＶ感染対象は、ＭＲＰ２トランスポーター活性を阻害する化合物の影響を受けやすい可能性がある。さらに、ＭＲＰ２の発現は、げっ歯類及び非ヒト霊長類よりもヒトにおいてより少なく、これにより、前臨床試験またはＩＮＤ対応試験では、高ビリルビン血症が観察されなかった理由が説明され得る。

ＲＧ－１０１がＭＲＰ２トランスポーター活性を干渉するという仮説の試験を行うために、当技術分野において公知である方法に従って、ｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイを実施した（例えば、Ｖｅｒｍｅｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｄｒｕｇ Ｍｅｔａｂ．Ｄｉｓｐｏｓ．，２０１６，４４（３）：４５３－９を参照のこと）。このアッセイでは、排出トランスポーターを発現する小胞を使用して、薬物がトランスポーターの基質または阻害剤であるかを評価する。裏返しの膜小胞は、単一の排出トランスポーター、この場合はＭＲＰ２により一時的にトランスフェクトさせた昆虫細胞から調製する。小胞は配向が裏返しになっているため、ＭＲＰ２トランスポーターは、放射性標識基質［３Ｈ］－エストラジオール－１７β－グルクロニドをＡＴＰ依存的に小胞に送り込み、小胞内の放射性標識基質の蓄積を測定する。化合物がＭＲＰ２輸送阻害剤である場合、放射性標識基質の蓄積は、対照サンプルと比較して減少する。化合物の阻害効果は、ＩＣ５０、すなわち、放射性標識基質のトランスポーター媒介取り込みの５０％阻害をもたらす濃度を決定することによって評価する。

ＲＧ－１０１について、ｉｎ ｖｉｔｒｏＭＲＰ２アッセイを実施した。ＲＧ－１０１、及びＲＧ－１０１の非抱合型抗ｍｉＲであるＲＧ１６４９の両方を、０、０．１、０．３、１、３、１０、３０、及び１００ｕＭの濃度で試験を行った。計算されたＩＣ５０値は、ＲＧ－１０１及びＲＧ１６４９において、それぞれ５．９８ｕＭ及び２．２１ｕＭであった。したがって、このアッセイでは、ＲＧ－１０１により、ＭＰＲ２トランスポーターが阻害された。追加の研究を行い、ＲＧ－１０１及びＲＧ１６４９の両方がこのアッセイにおいてＭＲＰ２トランスポーターを阻害することを確認した（ＲＧ－１０１ ＩＣ５０は、５～６２ｕＭの範囲、ＲＧ１６４９ ＩＣ５０は、２～１１ｕＭの範囲であった）。

追加のＨＣＶ感染対象固有の寄与因子を明確に除外することはできないが、一部、ＭＲＰ２アッセイデータに基づいて、ＲＧ－１０１による抱合型ビリルビン輸送の阻害、ＨＣＶ感染対象におけるベースラインビリルビン輸送の障害、及び肝細胞による（ＧａｌＮＡｃ抱合部分による）ＲＧ－１０１の優先的な取り込みなどの要因の組み合わせが、観察された高ビリルビン血症の一因となった可能性があると考えられる。これを考慮して、強力なＨＣＶ抗ウイルス活性を維持するが、ＭＲＰ２トランスポーターを介するビリルビン輸送を有意に干渉することのないｍｉＲ－１２２を標的とする代替化合物のスクリーニングを実施した。

実施例２：有意なＭＲＰ２阻害を有さない強力な抗ＭＩＲ－１２２化合物のＩｎ Ｖｉｔｒｏスクリーニング
抗ＭＩＲ－１２２化合物は、ＨＣＶ感染のマウスモデルにおいて、ＨＣＶレプリコン阻害、ＭＲＰ２トランスポーター阻害、ｉｎ ｖｉｔｒｏ及びｉｎ ｖｉｖｏ安全性、ｉｎ ｖｉｖｏ薬力学的効力、及びｉｎ ｖｉｖｏでの有効性を評価するために試験するために選択した。これらの化合物は、長さ、ヌクレオシド糖修飾、及びヌクレオシド間連結修飾が異なるものであった。さらに、非抱合型化合物及びＧａｌＮＡｃ抱合型化合物の両方の試験を行った。

ＨＣＶレプリコン研究
ＨＣＶレプリコンアッセイを使用して、ＨＣＶ遺伝子型１ｂの複製を阻害する抗ｍｉＲ－１２２化合物の能力を決定した。このアッセイでは、試験化合物は、ルシフェラーゼレポーター遺伝子を含むＨＣＶＧＴ１ｂレプリコンで安定的にトランスフェクトさせたＨｕｈ７細胞に導入する。ルシフェラーゼレポーターは、ＨＣＶ複製の間接的な尺度として使用される。ＧａｌＮＡｃ抱合型化合物は、肝細胞への送達が強化されているため、ＨＣＶ感染の治療に好ましいことが予想され、いくつかの非抱合型化合物の試験を行った。

選択した化合物は、０．０１５ｕＭから１００ｕＭの範囲の９つの濃度で試験を行った。ＧＳ－７９７７（ソホスブビル）は、陽性対照として含めた。細胞は、９６ウェルプレートに８，０００細胞／ウェルの密度でプレーティングした。化合物を、７２時間細胞に加えた。Ｂｒｉｇｈｔ－Ｇｌｏ試薬を使用して上清中の発光シグナルを検出し、このシグナルを使用して、各化合物の抗ウイルス活性を計算した。ＣｅｌｌＴｉｔｅｒ－Ｆｌｕｏｒ試薬を使用して細胞の生存率を評価した。ＥＣ_５０（５０％阻害が観察された濃度）を計算した。

レプリコンアッセイで試験が行われた特定の抗－ｍｉＲ－１２２化合物、及びそれらの計算されたＥＣ５０値を表２に示す。下付き文字が続いていないヌクレオシドは、β－Ｄ－デオキシリボヌクレオシドを示す。ヌクレオシドの後に下付き文字「Ｅ」が続く場合は、２’－ＭＯＥヌクレオシドを示し、ヌクレオシドの後に下付き文字「Ｓ」が続く場合は、Ｓ－ｃＥｔヌクレオシドを示す。ホスホジエステル連結は「ＰＯ」で示す。他のすべての連結は、ホスホロチオエートである。「Ｍｅ」は、ヌクレオシドの基部にある５－メチル基を示す。

表２に例示するとおり、長さ、ヌクレオシド糖修飾、及び／またはヌクレオシド間連結の変化が、ウイルス阻害の差となる。例えば、ＲＧ３０５４は、ＲＧ２６３４と比較して５’末端に単一の追加のヌクレオシドを含むが、ＲＧ３０５４は、ＲＧ２６３４よりも実質的に効力が低い。ＲＧ６３７１及びＲＧ６３７０は、ホスホジエステル及びホスホロチオエートのヌクレオシド間連結の数のみ異なるが、異なる効力を呈した。ＧａｌＮＡｃ抱合型化合物のうち、ＲＧ６６５０及びＲＧ２６３４が、このアッセイで最も効力が高かった。ＲＧ６２３４及びＲＧ４９７９９８は、非抱合型化合物として、このｉｎ ｖｉｔｒｏアッセイにおいて強力であるが、ｉｎ ｖｉｖｏでの効力は、治療剤としての使用に好適であるとは予想されていない。

特定の化合物は、複数の実験で試験を行った。ＲＧ－１０１のＥＣ５０は、１．９９４～１０．６８ｕＭの範囲であった。ＲＧ２６３４のＥＣ５０は、１３．９３～３１．１ｕＭの範囲であった。ＲＧ６６５０のＥＣ５０は、７．７１６～１１．３ｕＭの範囲であった。ＲＧ４９７９９８のＥＣ５０は、７．７０８～１０．８７ｕＭの範囲であった。

ＭＲＰ２アッセイは、ＨＣＶレプリコンアッセイでの効力及び構造の多様性に基づいて選択された抗ｍｉＲ－１２２化合物に対して実施した。表３に示すとおり、ＲＧ－１０１及びＲＧ１６４９は、このアッセイにおいてＭＲＰ２トランスポーター活性を阻害した。ＲＧ６６５０、ＲＧ２６３４、ＲＧ３０５４、ＲＧ６３７０、ＲＧ６２３４、及びＲＧ４９７９９８は、それぞれ１００ｕＭを超えるＩＣ_５０を呈し、このことは、これらの化合物がこのアッセイにおいてＭＲＰ２トランスポーター活性に有意に干渉しないことを示している。

いくつかの化合物については、本アッセイを複数回実施した。ＲＧ１６４９のＩＣ５０は、２～１１ｕＭの範囲であり、ＲＧ－１０１のＩＣ５０は、５～６２の範囲であった。ＲＧ６６５０は、この化合物の試験を行うとき、毎回１００ｕＭを超えていた。

実施例３：ＭＲＰ２阻害のない強力な抗－ｍｉＲ－１２２化合物のｉｎ ｖｉｖｏスクリーニング
レプリコンアッセイにおいて、ＨＣＶ複製を阻害し、ｉｎ ｖｉｔｒｏトランスポーターアッセイにおいてＭＲＰ２を阻害しなかった化合物について、ｉｎ ｖｉｖｏでの効力及び安全性の試験をさらに行った。

効力
Ｉｎ ｖｉｖｏでの効力を決定するために、ｍｉＲ－１２２活性によって通常抑制される遺伝子である肝臓アルドラーゼＡ（ＡＬＤＯＡ）の発現を抑制解除する能力について、化合物の評価を行った。ｍｉＲ－１２２を阻害することにより、ＡＬＤＯＡの発現が増加するため、ＡＬＤＯＡ ｍＲＮＡレベルを使用して、ｉｎ ｖｉｖｏにおけるｍｉＲ－１２２の阻害活性を測定することができる。

このアッセイでは、ＧａｌＮＡｃ抱合型化合物についてのみ、試験を行った。化合物は、化合物の抗ｍｉＲ部分に関してモル当量で投与した。ＲＧ－１０１の単回皮下用量は、０．００４～１．１１６ｕｍｏｌ／ｋｇの範囲の用量で皮下投与した。他の化合物は、０．００６～１．９４２ｕｍｏｌ／ｋｇの範囲の用量で単回皮下用量で投与した。７日後に、研究を終了した。肝臓組織は、ＡＬＤＯＡ ｍＲＮＡ及び薬物レベルを測定するために収集した。腎臓組織は、薬物レベルを測定するために収集した。血液は、コレステロールを測定するために採取した。

ＡＬＤＯＡ ｍＲＮＡレベルは、肝臓から単離されたＲＮＡ中で、定量ＰＣＲによって測定した。表４に示すとおり、生理食塩水に対するＡＬＤＯＡ ｍＲＮＡの倍率変化を使用して、各化合物のＥＤ５０（ｕｍｏｌ／ｋｇ）を計算した（「ＮＤ」は「未決定」を示す）。

ＲＧ６３７０（及び結果が解釈できないＲＧ３０５４）を除いて、ＡＬＤＯＡ抑制解除（表４）については、このアッセイにおいて試験対象の各化合物は、ＲＧ－１０１と同様のＥＤ５０を呈した。コレステロールの低下については（表５）、試験対象の各化合物は、ＲＧ－１０１と同等であるかまたはそれ以上のＥＤ５０を呈した。

安全性
また、ｉｎ ｖｉｖｏ効力の基準を満たした化合物は、安全性についての試験を行った。炎症誘発性応答を誘発する化合物の能力は、肝臓におけるインターフェロン誘導性遺伝子ＩＦＩＴの発現を測定することによって評価した。さらに、化合物の投与後のＡＬＴのレベルも測定した。化合物ＲＧ６３７０及びＲＧ３０５４により、ＩＦＩＴの発現が増加し、これは、潜在的な炎症誘発性反応を示唆するものである。

これらのＨＣＶレプリコンアッセイ、ＭＲＰ２アッセイ、及びｉｎ ｖｉｖｏでの効力と安全性の研究に基づいて、２つの化合物ＲＧ６６５０及びＲＧ２６３４は、好適にも強力で安全な化合物を選択するために確立された基準を満たしていた。

作用の開始
作用の開始によってＲＧ６６５０及びＲＧ２６３４を区別できるかを判断するために、マウスの群を０．０１４～１．１１７ｕｍｏｌ／ｋｇの範囲の用量の化合物により治療した。肝臓組織は、投与の１日、３日、７日、または１４日後に４～５匹のマウスの群から収集した。ＲＮＡを単離し、ＡＬＤＯＡ ｍＲＮＡを測定した。ＲＧ６６５０は、ＲＧ２６３４と比較して、より低い用量及びより早い時点でＡＬＤＯＡ ｍＲＮＡの抑制解除の増加を呈することが観察され、これは、ＡＬＤＯＡ ｍＲＮＡ抑制解除によって測定されるとおり、より迅速な作用の開始を示唆するものである。

実施例４：ｍｉＲ－１２２の阻害に対する応答におけるＨＣＶ ＲＮＡレベルの低下
ＨＣＶは、宿主病原体の特異性により、ヒト及びチンパンジーにのみ感染し得る。したがって、実験的ｉｎ ｖｉｖｏ研究に通常使用されるマウスなどのより小さい種は、ＨＣＶ感染の治療のための候補剤の試験を行うために、ＨＣＶに感染させることができない。この問題に対処するために、ヒト肝臓キメラマウスモデルを利用することができる（例えば、Ｂｉｓｓｉｇ ｅｔ ａｌ．，Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ ＵＳ Ａ，２００７，１０４：２０５０７－２０５１１；Ｂｉｓｓｉｇ ｅｔ ａｌ．，Ｊ Ｃｌｉｎ Ｉｎｖｅｓｔ．，２０１０，１２０：９２４－９３０を参照のこと）。このモデルでは、免疫不全マウスの肝臓をヒト肝細胞で再増殖させ、その結果、ほとんどの肝細胞がヒト肝細胞であるキメラ肝臓が得られる。次に、マウスをＨＣＶに感染させ、抗ＨＣＶ剤により治療する。このマウスモデルは、例えば、ＰｈｏｅｎｉｘＢｉｏから市販されている。

ＨＣＶ感染ヒトキメラ肝マウスの治療
抗－ｍｉＲ－１２２化合物は、ＨＣＶ感染のヒトキメラ肝マウスモデルにおいて試験を行った。免疫不全マウスの肝臓で、ヒト肝細胞を再増殖させ、その結果、ほとんどの肝細胞がヒト肝細胞であるキメラ肝臓を得た。ＨＣＶ遺伝子型１ａの接種から６週間後、本研究に含まれる各動物のベースラインウイルス力価を得た。

４匹の動物群をそれぞれＰＢＳ、４５ｍｇ／ｋｇの用量のＲＧ－１０１、または６０ｍｇ／ｋｇの用量のＲＧ６６５０で治療した。血液は、３日目、７日目、１０日目、１４日目、２１日目、２８日目、３５日目、４２日目、及び４９日目に採取した。本研究は４９日目に終了した。

図１に示すとおり、ＲＧ－１０１及びＲＧ６６５０の両方により治療することにより、血清ＨＣＶ ＲＮＡによって測定した場合、ウイルス力価が有意に低下した。ＲＧ６６５０治療では、ＨＣＶ感染動物において、２ｌｏｇを超える血清ＨＣＶ ＲＮＡの減少がもたらされた。

これらの結果は、ＧａｌＮＡｃ抱合型修飾オリゴヌクレオチドＲＧ６６５０の単回投与後、ＨＣＶウイルス力価がＨＣＶ感染動物において有意に低下し、かつ作用が早期に開始し、作用期間が持続したことを実証している。

本明細書で実証されているとおり、ＲＧ６６５０は、ＨＣＶ複製の強力な阻害剤であり、重要なことに、ｉｎ ｖｉｔｒｏにおいてＭＲＰ２トランスポーター活性には、実質的に干渉しない。したがって、ＲＧ６６５０は、ＨＣＶ感染症の治療のための候補治療剤として同定された。

経口投与後の抗ｍｉＲ－１２２化合物の薬力学的活性
ＲＧ６６５０の経口投与により、肝臓内において、ｍｉＲ－１２２の薬力学的調節がもたらされるかを決定するために実験を行った。また、ＲＧ６６５０の非抱合型抗－ｍｉＲであるＲＧ７４４３の試験も行った。非抱合型抗ｍｉＲ－１２２は、ＨＣＶの治療におけるｍｉＲ－１２２の阻害についてＧａｌＮＡｃ抱合体ほど効果的ではないが、経口投与研究での比較のために含めた。

表６及び７に示すとおり、それぞれ５匹のマウスの群をＲＧ６６５０またはＲＧ７４４３により治療を行った。ここで、「ｓｃ」は皮下投与を示し、「ｐｏ」は経口投与を示す。抗ｍｉＲ化合物は、皮下投与のためにＰＢＳ中で送達した。経口投与された抗ｍｉＲ化合物は、ＰＢＳ溶液中で調製され、ｐＨ９．５になるまで０．３Ｍ重炭酸ナトリウム（ＢＣ）を添加した。経口投与のために、動物は、１２時間絶食させた。すべての治療群について、マウスに単回投与し、４日後に屠殺した。肝臓組織は、薬力学的及び薬物動態学的分析のために収集した。ＲＮＡは、肝臓及び腎臓から単離した。肝臓におけるＡＬＤＯＡ抑制を測定した。

肝臓におけるＲＧ６６５０（＊）の場合、１匹を除くすべての動物の結果は定量化できなかったため、１匹の動物のデータのみが報告されている。

非抱合型及びＧａｌＮＡｃ抱合型抗ｍｉＲ－１２２化合物の両方の皮下投与により、肝臓においてＡＬＤＯＡの抑制解除がもたらされた。非抱合型抗－ｍｉＲ－１２２化合物ＲＧ７４４３の経口投与では、肝臓において実質的なＰＤ効果がもたらされなかったが、ＧａｌＮＡｃ抱合型化合物ＲＧ６６５０の経口投与により、皮下投与後に観察されたものと同等のＰＤ効果がもたらされた。これらのデータは、ＧａｌＮＡｃ抱合型抗ｍｉＲ－１２２化合物ＲＧ６６５０が、経口投与及び皮下投与の両方の後、ｍｉＲ－１２２の効果的な阻害剤であることを実証している。

初代ヒト肝細胞における抗－ｍｉＲ－１２２化合物の自由な取り込み
ＲＧ－１０１、ＲＧ６６５０、及びＲＧ７４４３の活性をさらに比較するために、初代ヒト肝細胞（ＰＰＨ）を各化合物により治療した。ＰＨＨによるＡＳＧＰＲの発現は、プレーティング後にダウンレギュレートされるため、ＣＣＬ－１６３フィーダーセル及びＣｅｌｌＡｂｌｅプレート（Ｔｏｙｏ Ｇｏｓｅｉ Ｃｏ．，Ｊａｐａｎ）を使用して３ＤＰＨＨスフェロイドを形成させた。フィーダーセルにプレーティングして４日後、ＰＰＨを用量（０．０００１ｎＭ、０．００１ｎＭ、０．０１ｎＭ、０．１ｎＭ、１ｎＭ、１０ｎＭ、または１００ｎＭ）の抗－ｍｉＲにより治療した。対照群はＰＢＳにより治療した。３日後、細胞を回収し、ＲＮＡを単離し、ＲＴ－ＰＣＲによってＡＬＤＯＡレベルを測定した。各化合物のＥＣ５０を計算した。ＲＧ－１０１、ＲＧ６６０、及びＲＧ７４４３のＥＣ５０は、それぞれ６．０ｎＭ、２．０７ｎＭ、及び１．９１μＭであった。ＧａｌＮＡｃ抱合型９－ｍｅｒの活性は、診療所においてＨＣＶ力価の効果的な低下を示したＲＧ－１０１の活性と同等であった。さらに、ＧａｌＮＡｃ抱合体により、ＥＣ５０の約１０００分の１の減少（ＲＧ７４４３の１．９１μＭと比較してＲＧ６６５０の２．０７ｎＭ）によって示されるとおり、９－ｍｅｒの抗－ｍｉＲ－１２２の活性が劇的に向上された。したがって、初代ヒト肝細胞では、ＧａｌＮＡｃ抱合型抗－ｍｉＲ－１２２は、非抱合型抗ｍｉＲ－１２２よりも低用量で有意に活性がある。

本明細書に記載されているものに加えて、本発明の様々な修正は、前述の説明から当業者には明らかとなるであろう。こうした修正は、添付の特許請求の範囲内に入るようにも意図されている。本出願で引用された各参考文献（ジャーナル記事、米国及び米国以外の特許、特許出願刊行物、国際特許出願刊行物、ＧＥＮＢＡＮＫ（登録商標）アクセッション番号などを含むがこれらに限定されない）は、その全体が、参照により本明細書に具体的に組み込まれる。

Claims (68)

1. 以下の構造：
   

   

   の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
2. 前記構造の薬学的に許容される塩である、請求項１に記載の化合物。
3. 前記構造のナトリウム塩である、請求項２に記載の化合物。
4. 請求項１～３のいずれか１項に記載の化合物と、薬学的に許容される希釈剤と、を含む、医薬組成物。
5. 前記薬学的に許容される希釈剤が、水溶液である、請求項４に記載の医薬組成物。
6. 前記水溶液が生理食塩水である、請求項５に記載の医薬組成物。
7. 凍結乾燥組成物である、請求項１～３のいずれか１項に記載の化合物を含む医薬組成物。
8. 生理食塩水中の請求項１～３のいずれか１項に記載の化合物から本質的になる医薬組成物。
9. 請求項１～３のいずれか１項に記載の化合物を含む、細胞内のｍｉＲ－１２２の活性を阻害するための組成物。
10. 前記細胞がｉｎ ｖｉｖｏに存在する、請求項９に記載の組成物。
11. 前記細胞がｉｎ ｖｉｔｒｏに存在する、請求項９に記載の組成物。
12. 請求項１～３のいずれか１項に記載の化合物または請求項４～８のいずれか１項に記載の医薬組成物の少なくとも１つの用量を含み、ＨＣＶ感染対象に投与するように用いられる、ＨＣＶ感染症を治療するための組成物。
13. Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染を治療するための組成物であって、請求項１～３のいずれか１項に記載の化合物、または請求項４～８のいずれか１項に記載の医薬組成物、及び少なくとも１つの直接作用型抗ウイルス（ＤＡＡ）の少なくとも１つの用量を含み、治療期間中、ＨＣＶ感染対象に投与するように用いられ、前記治療期間の期間が１２週間以内であり、前記化合物または医薬組成物の開始用量が、前記治療期間の開始時に投与され、前記化合物または医薬組成物の終了用量が、前記治療期間の終了時に投与される、前記組成物。
14. 前記開始用量及び前記終了用量が、前記治療期間中に投与される前記化合物または医薬組成物の唯一の用量である、請求項１３に記載の組成物。
15. Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染を治療するための組成物であって、請求項１～３のいずれか１項に記載の化合物、または請求項４～８のいずれか１項に記載の医薬組成物及び少なくとも１つの直接作用型抗ウイルス（ＤＡＡ）の少なくとも１つの用量を含み、治療期間中に、ＨＣＶ感染対象に投与するように用いられ、前記治療期間の前記期間が１２週間以内であり、前記化合物または医薬組成物の開始用量が前記治療期間の前記開始時に投与され、前記開始用量が、前記治療期間中に投与される前記化合物または医薬組成物の唯一の用量である、前記組成物。
16. Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）感染を治療するための組成物であって、請求項１～３のいずれか１項に記載の化合物、または請求項４～８のいずれか１項に記載の医薬組成物及び少なくとも１つの直接作用型抗ウイルス（ＤＡＡ）の少なくとも１つの用量を含み、治療期間中に、ＨＣＶ感染対象に投与するように用いられ、前記治療期間の前記期間が１２週間以内であり、前記化合物または医薬組成物の終了用量が前記治療期間の前記終了時に投与され、前記終了用量が、前記治療期間中に投与される前記化合物または医薬組成物の唯一の用量である、前記組成物。
17. 前記治療期間の前記期間が２～１０週間、４～８週間、２～６週間、または１～４週間である、請求項１３～１６のいずれか１項に記載の組成物。
18. 前記治療期間の前記期間が、１１週間、１０週間、９週間、８週間、７週間、６週間、５週間、４週間、３週間、２週間、または１週間である、請求項１３～１６のいずれか１項に記載の組成物。
19. 前記治療期間の前記期間が２６日、２７日、２８日、２９日、または３０日である、請求項１３～１６のいずれか１項に記載の組成物。
20. 前記治療期間の前記期間が、２８日または２９日である、請求項１３～１６のいずれか１項に記載の組成物。
21. 前記治療期間の前記期間が、１８日、１９日、２０日、２１日、または２２日である、請求項１３～１６のいずれか１項に記載の組成物。
22. 前記治療期間の前記期間が、２１日または２２日である、請求項１３～１６のいずれか１項に記載の組成物。
23. 前記治療期間の前記期間が１２日、１３日、１４日、１５日、または１６日である、請求項１３～１６のいずれか１項に記載の組成物。
24. 前記治療期間の前記期間が、１４日または１５日である、請求項１３～１６のいずれか１項に記載の組成物。
25. 前記治療期間の前記期間が、６日、７日、８日、または９日である、請求項１３～１６のいずれか１項に記載の組成物。
26. 前記治療期間の前記期間が７日または８日である、請求項１３～１６のいずれか１項に記載の組成物。
27. 前記化合物または医薬組成物の開始用量及び前記ＤＡＡの第１の用量が互いの７日以内に投与される、請求項１３～１５または１７～２６のいずれか１項に記載の組成物。
28. 前記化合物または医薬組成物の前記開始用量が、前記ＤＡＡの前記第１の用量の１日前に投与される、請求項１３～１５または１７～２６のいずれか１項に記載の組成物。
29. 前記化合物または医薬組成物の前記開始用量が、前記ＤＡＡの前記第１の用量と同じ日に投与される、請求項１３～１５または１７～２６のいずれか１項に記載の組成物。
30. 前記化合物または医薬組成物の前記開始用量が、前記ＤＡＡの前記第１の用量の１日後に投与される、請求項１３～１５または１７～２６のいずれか１項に記載の組成物。
31. 前記化合物または医薬組成物の終了用量及び前記ＤＡＡの最終用量が、互いの７日以内に投与される、請求項１３、１４または１６～２６のいずれか１項に記載の組成物。
32. 前記化合物または医薬組成物の前記終了用量が、前記ＤＡＡの前記最終用量の１日前に投与される、請求項１３、１４または１６～２６のいずれか１項に記載の組成物。
33. 前記化合物または医薬組成物の前記終了用量が、前記ＤＡＡの前記最終用量と同じ日に投与される、請求項１３、１４または１６～２６のいずれか１項に記載の組成物。
34. 前記化合物または医薬組成物の前記終了用量が、前記ＤＡＡの前記最終用量の翌日に投与される、請求項１３、１４または１６～２６のいずれか１項に記載の組成物。
35. 前記ＨＣＶ感染対象が遺伝子型１に感染している、請求項１２～３４のいずれか１項に記載の組成物。
36. 前記ＨＣＶ感染対象が遺伝子型１ａに感染している、請求項３５に記載の組成物。
37. 前記ＨＣＶ感染対象が遺伝子型１ｂに感染している、請求項３５に記載の組成物。
38. 前記ＨＣＶ感染対象が遺伝子２型に感染している、請求項１２～３４のいずれか１項に記載の組成物。
39. 前記ＨＣＶ感染対象が遺伝子３型に感染している、請求項１２～３４のいずれか１項に記載の組成物。
40. 前記ＨＣＶ感染対象が遺伝子４型に感染している、請求項１２～３４のいずれか１項に記載の組成物。
41. 前記ＨＣＶ感染対象が遺伝子５型に感染している、請求項１２～３４のいずれか１項に記載の組成物。
42. 前記ＨＣＶ感染対象が遺伝子６型に感染している、請求項１２～３４のいずれか１項に記載の組成物。
43. 前記ＨＣＶ感染対象が、１つ以上の耐性関連多型を有するＨＣＶに感染していると決定される、請求項１２～４２のいずれか１項に記載の組成物。
44. 前記ＨＣＶ感染対象が治療を受けていない対象である、請求項１２～４３のいずれか１項に記載の組成物。
45. 前記ＨＣＶ感染対象がＨＣＶ関連疾患を有する、請求項１２～４４のいずれか１項に記載の組成物。
46. 前記ＨＣＶ関連疾患が、肝硬変、肝線維症、脂肪性肝炎、脂肪症、または肝細胞癌である、請求項４５に記載の組成物。
47. 前記ＨＣＶ感染対象が、腎機能障害を伴うＨＣＶ感染対象である、請求項１２～４６のいずれか１項に記載の組成物。
48. 前記ＨＣＶ感染対象が、ＨＣＶ／ＨＩＶ同時感染対象である、請求項１２～４７のいずれか１項に記載の組成物。
49. 前記投与することにより、持続的ウイルス応答が達成される、請求項１２～４８のいずれか１項に記載の組成物。
50. 前記治療期間の終了時または前記治療期間の終了後の時点で、前記ＨＣＶ ＲＮＡレベルが、定量下限（ＬＬＯＱ）を下回る、請求項１３～４９のいずれか１項に記載の組成物。
51. 前記治療期間の前記終了後４週間で、前記ＨＣＶ ＲＮＡレベルが、前記ＬＬＯＱを下回る、請求項５０に記載の組成物。
52. 前記治療期間の前記終了後８週間で、前記ＨＣＶ ＲＮＡレベルが、前記ＬＬＯＱを下回る、請求項５０または請求項５１に記載の組成物。
53. 前記治療期間の前記終了後１２週間で、前記ＨＣＶ ＲＮＡレベルが、前記ＬＬＯＱを下回る、請求項５０～５２のいずれか１項に記載の組成物。
54. 前記ＨＣＶ ＲＮＡレベルが、前記治療期間の前記終了後２４週間で、前記ＬＬＯＱを下回る、請求項５０～５３のいずれか１項に記載の組成物。
55. 前記ＨＣＶ ＲＮＡレベルが、前記治療期間の終了後３６週間で、前記ＬＬＯＱを下回る、請求項５０～５４のいずれか１項に記載の組成物。
56. 前記ＨＣＶ ＲＮＡレベルが、前記治療期間の前記終了後４８週間で、前記ＬＬＯＱを下回る、請求項５０～５５のいずれか１項に記載の組成物。
57. 前記ＬＬＯＱが、２５ＩＵ／ｍＬである、請求項５０～５６のいずれか１項に記載の組成物。
58. 前記ＬＬＯＱが、１５ＩＵ／ｍＬである、請求項５０～５６のいずれか１項に記載の組成物。
59. 前記ＬＬＯＱが、１２ＩＵ／ｍＬである、請求項５０～５６のいずれか１項に記載の組成物。
60. 前記ＨＣＶ ＲＮＡレベルが、リアルタイムポリメラーゼ連鎖反応に基づくアッセイを使用して定量化される、請求項５０～５９のいずれか１項に記載の組成物。
61. 前記ＤＡＡは１日１回投与される、請求項１３～６０のいずれか１項に記載の組成物。
62. 前記ＤＡＡが、プロテアーゼ阻害剤、ヌクレオシドポリメラーゼ阻害剤、ヌクレオチドポリメラーゼ阻害剤、非ヌクレオシドポリメラーゼ阻害剤、ＮＳ３Ｂ阻害剤、ＮＳ３／４Ａ阻害剤、ＮＳ４Ａ阻害剤、ＮＳ５Ａ阻害剤、ＮＳ５Ｂ阻害剤、及びシクロフィリン阻害剤から選択される、請求項１３～６１のいずれか１項に記載の組成物。
63. 前記ＤＡＡは、ソホスブビル、レジパスビル、オムビタスビル、ダサブビル、グレカプレビル、ピブレンタスビル、エルバスビル、グラゾプレビル、リバビリン、オムビタスビル、パリタプレビル、リトナビル、ボセプレビル、バニプレビル、アスナプレビル、ダクラタスビル、シメプレビル、メリシタビン、テゴブビル、ダノプレビル、ソバプレビル、ボキシラプレビル、ベルパタスビル、及びＧＳＫ２８７８１７５のうちの１つ以上から選択される、請求項１３～６２のいずれか１項に記載の組成物。
64. 前記少なくとも１つのＤＡＡが、ソホスブビルを含む、請求項１３～６３のいずれか１項に記載の組成物。
65. 前記少なくとも１つのＤＡＡが、レジパスビル及びソホスブビルを含む、請求項１３～６４のいずれか１項に記載の組成物。
66. 前記化合物の用量が４．０ｍｇ／ｋｇ以下、３．５ｍｇ／ｋｇ以下、３．０ｍｇ／ｋｇ以下、２．５ｍｇ／ｋｇ以下、２．０ｍｇ／ｋｇ以下、１．５ｍｇ／ｋｇ以下、１．０ｍｇ／ｋｇ以下、または０．５ｍｇ／ｋｇ以下である、請求項１２～６５のいずれか１項に記載の組成物。
67. 治療法に使用するための請求項１～３のいずれか１項に記載の化合物、または請求項４～８のいずれか１項に記載の医薬組成物。
68. ＨＣＶ感染対象の治療に使用するための請求項１～３のいずれか１項に記載の化合物、または請求項４～８のいずれか１項に記載の医薬組成物。

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