JP6105475B2 - 可溶性の乏しい化合物の可溶性を増大させる方法ならびにそのような化合物の配合物を作る、および用いる方法 - Google Patents

Description

この出願は２０１１年４月２２に出願された米国出願第１３／０６４，８８２号の継続出願であり、それは２０１０年１０月２２日に出願されたＰＣＴ／ＵＳ２０１０／００２８２１の一部継続出願であり、それは２００９年１０月２２日に出願された米国仮出願第６１／２５３，８５７号からの優先権を主張する。この出願は２０１０年１０月２２日に出願されたＰＣＴ／ＵＳ２０１０／００２８２１の一部継続出願でもあり、それは２００９年１０月２２日に出願された米国仮出願第６１／２５３，８５７号からの優先権を主張する。これらの出願の全ての内容全体をこの出願において本明細書に援用する。

本発明は、フラボノイド類を含む平面状環構造の有機化合物の新規の可溶性の形態およびそれらの製造に関する。本発明は、配合物および製品の調製におけるこれらの平面状環構造の有機化合物の新規配合物の使用も含む。本発明は、本発明の配合物の多種多様な適用にも関する。

フラボノイド類
癌に対する保護を提供すると信じられている植物由来の薬剤の本質はフラボノイド類および食物線維である(Patel, D, et al., Apigenin and cancer chemoprevention: Progress, potential, and promise, Intl. J. Oncology 2007 Jan; 30(1): 233-45)。化学予防は腫瘍学の一面であり、それは天然存在または合成薬剤による癌の予防に焦点を合わせている。

フラボノイド類はフリーラジカル除去剤、抗酸化剤、スーパーオキシドアニオン、紫外線吸収剤、および過酸化脂質ラジカルとして作用することが示されてきた。フラボノイド化合物はコラーゲンの構造の強化において有効であることも知られている。さらに、フラボノイド類は抗変異原性、抗炎症、および抗ウイルス作用を示すことが示されてきた。

全てのフラボノイド類は同じ基本的な化学構造を有する三環状分子である。群中の個々のフラボノイド類は互いに置換基（例えばヒドロキシ、メトキシ、または糖基）の数および位置が異なっている。フラボノイド類は次の一般式に従う平面状芳香環構造を有する：

。

フラボノイド類はおおよそ５０００種類の天然存在化合物を含む。多数の他の置換を合成的に作り出すことができ、多くのタイプのフラボノイド類がもたらされている。

多くのフラボノイド類は実質的に水ならびに医薬品、機能性食品（強化食品および食事栄養補助剤）、コスメシューティカル（ｃｏｓｍｅｃｅｕｔｉｃａｌ）および医療用食品（ｍｅｄｉｃａｌ ｆｏｏｄ）適用に適したほとんど全ての溶媒中で不溶性である。従って、許容できる成分および方法を利用することによりフラボン類を含むこれらのフラボノイド類および他の平面状環構造の有機化合物の可溶性および生物学的利用能を高めるための方法に関する必要性が存在する。

有効薬剤の可溶化
有効薬剤は生物学的に活性である組成物中の物質である。可溶性は、薬理学的応答が引き出されるための溶液中の有効薬剤の望まれる濃度を達成するための重要なパラメーターの１つである。可溶性は、生体マトリックスを通る拡散または生体膜を越える受動輸送が可能であるのは溶解した状態の薬物のみであるため、薬物の動態において本質的な役割を果たしている。薬物吸収に関する最大速度は浸透性および可溶性の積である。薬物の有効性は乏しい水溶性により厳しく制限され得る。医薬品産業では、新しく発見された薬物候補の平均で４０％より多くが水溶性に乏しいことが一般的に認識されている。薬物の乏しい水溶性の特性は、投与部位からの効果のない吸収につながり；それは乏しい薬物動態による高い臨床的失敗の重要な部分であると指摘されてきた（Liu, R., Introduction, In: Liu, R., (編者), Water-Insoluble Drug Formulation, 第２版, 2008, CRS press, ニューヨーク）。

有効薬剤の可溶性を高めるために用いられてきた多くの技法が存在する。それらには、可溶性の乏しい有効薬剤の水溶性を、それらをシクロデキストリン分子の疎水性のバケット形状の空洞中に封入する（ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｎｇ）ことにより増大させるシクロデキストリン類のような錯体形成リガンドの使用；有効薬剤のナノサイズの結晶へのナノサイズ化（ｎａｎｏ−ｓｉｚｉｎｇ）；有効薬剤の塩の形態（元の有効薬剤と比較して向上した水溶性および溶解特性を示す傾向がある）の使用；および有効薬剤のｐＨ微小環境の変更；等が含まれる。

局所用薬物製品を配合する場合、その有効医薬的成分を典型的には溶媒または溶媒混合物に添加してその成分を混合またはホモジナイゼーションにより溶解または分散させる。その配合物の低融点賦形剤を融解させて混合を助けるために、熱、典型的には３５℃〜７０℃の範囲の熱が用いられてきた。熱は、分解、曇点に達した際の分離、またはその賦形剤もしくは有効成分のいずれかの蒸発による喪失を防ぐために、最小限に保たれる。

エマルジョンを形成する場合、その有効成分をその配合物の水相または脂質相（一般に、その有効薬剤に関して最高の可溶性を有する相）のどちらかに添加する。一方または両方の相を、その２つの相を混合してエマルジョンを作る前または間のどちらかに、上記で言及した温度範囲と同じ温度範囲で加熱することができる。

ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）は、インビトロおよびインビボ研究の両方で、アピゲニンを含む多くの水に不溶性の化合物のための溶媒として広く用いられてきた。しかし、毒性および“味”の懸念のため、ジメチルスルホキシドはヒトへの適用に関して局所用配合物が考えられる場合は溶媒として広く用いられてはいない。抗皮膚癌局所処置に向けられたほぼ全てのアピゲニンの動物試験は、アピゲニンの水（１ミリリットルあたり０．００５ミリグラム（ｍｇ／ｍｌ）未満）および他の水性溶媒中での乏しい可溶性のため、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を一般的に好まれる溶媒として利用してきた（Li el al, Evaluation of Apigenin and [G-³H], Apigenin and analytical method development, J. of Pharmaceutical Sciences. Vol. 86, No. 6, June 1991）。

皮膚癌
皮膚癌の発生は主な世界的な公衆衛生の脅威である。紫外線（ＵＶ）、例えば太陽紫外線Ｂ（ＵＶＢ）および太陽紫外線（ＵＶＡ）の放射は皮膚癌の主因である。基底細胞癌、扁平上皮癌、およびメラノーマの発生率は、高いＳＰＦの成分を有するサンスクリーン剤の出現および使用にも関わらず、上がり続けている。早期発見および処置が生存率の向上において不可欠であるが、皮膚癌は大部分が完全に予防できる癌である。現在のサンスクリーン配合物は、人を紫外線放射のＤＮＡ損傷作用から完全に保護するのには不十分であることが証明されている。サンスクリーンの使用は、人が彼ら自身を太陽光に晒しすぎる可能性があるため、時に間違った安全性の感覚を作り出す可能性がある。

研究は、フラボン類が抗酸化、抗変異原性、抗腫瘍形成、抗炎症、抗増殖性、および抗進行特性を有することを示してきた(Patel, D, et al., Apigenin and cancer chemoprevention: Progress, potential, and promise, Intl. J. Oncology 2007 Jan; 30(1): 233-45)。加えて、Ｂｉｒｔおよび共同研究者らはインビボのマウスモデルを用いてＵＶＢ照射前のアピゲニンの局所適用は皮膚癌の発生率を著しく（９０％に至るまで）低減することを実証した(Birt et al., Anti-mutagenesis and anti-promotion by apigenin, robinetin and indole-3-carbinol, Carcinogenesis, June 1986; 7: 959 - 963)。他のグループは、マウスを大腸癌に対して保護するアピゲニンの能力を実証した(Wang et al, Cell cycle arrest at G2/M and growth inhibition by apigenin in human cell colon carcinoma cell lines, Molecular Carcinogenesis, 28: 102-110 (2000))。

Ｇ１／Ｓおよび／またはＧ２／Ｍ細胞周期チェックポイント制御の喪失は、形質転換および癌の進行につながる。細胞周期を通した開始および進行は、細胞増殖を促進する癌原遺伝子および細胞増殖を遅くする、または停止させる腫瘍抑制遺伝子により大部分が制御されている。癌原遺伝子および／または腫瘍抑制遺伝子のどちらかにおける変異は、Ｇ１またはＧ２／Ｍにおいて費やされる時間の長さを短くすることにより、細胞をＧ１／Ｓチェックポイントが弱められた状態になりやすくする。

研究者らは、アピゲニンが細胞周期のＧ１およびＧ２／Ｍ期における可逆的な細胞周期の停止を誘導することを見出した。さらに、アピゲニンは有糸分裂キナーゼｐ３４ｃｄｃ２の直接および間接的な阻害ならびにｐ５３依存性の様式での細胞周期阻害因子ｐ２１ＷＡＦ１の誘導が含まれる多数の機序による細胞周期に対する抑制を媒介していることが発見された。理論上、その正味の作用は紫外線に誘導されるＤＮＡの変異が細胞分裂前に正しく修復されることを可能にする(Lepley DM, et al., The chemopreventative flavonoid apigenin induces G2/M arrest in keratinocyies, Carcinogenesis, 17, 2367-75 (1996))。

他の皮膚障害
Kang、Ecklund、LiuおよびDatta(Arthritis Research & Therapy 2009, Vol. 11)は、食物性植物由来のＣＯＸ−２およびＮＦ−κＢ阻害因子、例えばアピゲニンの生物学的利用能を増大させることは、狼瘡および乾癬のような他のＴｈ１７に媒介される疾患における炎症の抑制に関して価値がある可能性があることを教示した。非変異原性食物性フラボノイドであるアピゲニンは、自己反応性Ｔｈ１およびＴｈ１７細胞の拡張に関する自己抗原の提示を阻害することにより、狼瘡を抑制する。

他の疾患
フェノール化合物に典型的であるように、フラボノイド類は強力な抗酸化剤および金属キレート剤として作用する。それらは、抗炎症、抗アレルギー、肝保護、抗血栓、抗ウイルス、および抗腫瘍形成活性を有することも長く認識されてきた。

フラボン類およびカテキン類は身体の活性酸素種（ＲＯＳ）に対する保護に関する非常に強力なフラボノイド類である。体細胞および組織は、通常の酸素代謝の間に生成される、または外因性の損傷により誘導されるフリーラジカルおよびＲＯＳにより引き起こされる損傷により継続的に脅かされている。フラボノイド類の抗炎症活性は多くの動物モデルにおいて報告されてきた。フラボン類／フラボノール類、例えばアピゲニン、ルテオリン、ケンフェロール、ケルセチン、ミリセチン、フィセチンは、リポキシゲナーゼ（ＬＯ）およびシクロオキシゲナーゼ（ＣＯＸ）阻害活性を有することが報告された。Jachak SM. Natural products: Potential source of COX inhibitors. CRIPS 2001; 2(1):12-15。

DoseffへのＰＣＴ／ＵＳ２００６／０２０９０５は、アピゲニンまたはその誘導体を用いて炎症を処置する方法を開示している。

Hammerstoneへの米国特許出願第ＵＳ２００８／０２２７８２９号は、アピゲニンが含まれる神経原性化合物を用いて対象を処置する方法を開示している。

Parkらへの米国特許出願第ＵＳ２００７／０１５４５４０号は、アピゲニンの骨関節炎の処置のための軟骨再生剤としての使用を開示している。

Bing-Huaらへの米国特許出願第ＵＳ２００７／０１８９６８０号は、アピゲニンの療法試薬と組み合わせた化学予防および化学療法のための使用を開示している。

Lintneraらへの米国特許出願第ＵＳ２００６／００６７９０５号は、アピゲニンの脱毛症を処置するための血管拡張剤としての使用を開示している。

調査研究は、アピゲニンが喘息の発病プロセスの改善において重要な役割を果たしているという証拠を提供してきた。最近の疫学的研究は、フラボノイド類の高い摂取量を有する集団において喘息の低い発生率が有意に観察されることを報告した。

ヒアルロン酸
ヒアルロン酸（ＨＡ）は、結合組織、上皮組織および神経組織全体にわたって広く分布している陰イオン性の硫酸化されていないグリコサミノグリカンである。それは、それがゴルジではなく細胞膜において硫酸化されていない形態であり、非常に大きい可能性があり、その分子量はしばしば数百万に達する点で、グリコサミノグリカン類の中で独特である。細胞外マトリックスの主な構成要素の１つであるＨＡは、細胞の増殖および移動に著しく寄与している。

多糖類、例えばＨＡは、比較的複雑な炭水化物である。多糖類は、グリコシド結合により一緒につながった多くの単糖類で構成されるポリマーである。従って、多糖類は、大きく、しばしば分岐した高分子である。多糖類は化粧的および医学的適用において役立ってきた。例えば、ＨＡは皮膚適用のための構造を安定化する増量剤としての用途を見出している。アピゲニンは抗ヒアルロニダーゼ活性を有し、それによりヒアルロン酸の分解を阻害する(Kuppusamy et al., Structure-activity studies of flavonoids as inhibitors of hyaluronoidase, Biochem Pharmacol, 40, 397-401 (1990)）。

Gervasio-Nugentらへの米国特許出願第２００５／０２７１６９２号は、フラボノイド類およびヒアルロン酸を含む局所用化粧組成物を開示している。

Morariuらへの米国特許出願第２００６／０２１６２５号は、老化した皮膚の外観を向上させるための局所用配合物および使用の方法を開示している。好ましい構成要素には、アピゲニンのようなフラボノイド類、およびヒアルロン酸が含まれる。

ポリソルベート界面活性剤
ポリソルベート類（商業的にＴｗｅｅｎ類としても知られている）は、ポリエトキシ化（ｐｏｌｙｅｔｈｏｘｙｌａｔｅｄ）ソルビタンおよび脂肪酸に由来する非イオン性界面活性剤および乳化剤である。それらはしばしば食品および化粧品において精油を水ベースの製品中に可溶化するために用いられる。ポリソルベート類は粘着性、水溶性の淡黄色の液体である。ポリソルベート類はまた、乳化されるべき物質の表面張力を低減することによりエマルジョンを形成するのを助ける。ポリソルベート類は成分がそれらが通常その中で溶解しないであろう溶媒中で溶解するのを助けるそれらの能力に関して認識されてきた。ポリソルベート類は、油中水に対して油を水中で分散させるように機能する。

ポリソルベート類は、ポリオール、ソルビトールをエチレンオキシドと反応させることにより製造される。次いでそのポリオキシエチレン化ソルビタンを、植物性脂肪および油から得られた脂肪酸、例えばステアリン酸、ラウリン酸、およびオレイン酸と反応させる。プレーンな（ｐｌａｉｎ）（ＰＥＧ化されていない）ソルビタンの脂肪酸とのエステル類である界面活性剤は、通常スパン（Ｓｐａｎ）という名前で呼ばれる。

Guptaへの米国特許第７，３２９，７９７号は、アピゲニンが含まれるフラボノイド類の抗炎症剤としての、およびポリソルベート界面活性剤の乳化剤としての使用を含む抗老化化粧用送達系を開示している。

Higuchietらへの米国特許出願第２００６／０２２９２６２号は、薬剤耐性細菌感染による感染症を、有効成分としてのアピゲニンのようなフラボノイド類、および乳化剤としてのポリソルベート類を含む剤で処置するための医薬組成物を開示している。

Behnamへの米国特許第６，０４８，５６６号は、非アルコール飲料およびそれらを作るプロセスを開示している。その特許は、ユビキノンＱ１０およびポリソルベート可溶化剤を混合することを開示している。

ポリエチレングリコール類
ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）は、他の名前ではポリ（オキシエチレン）またはポリ（エチレンオキシド）（ＰＥＯ）として知られており、ある範囲の分子量（ＭＷ）で容易に入手できる合成ポリエーテルである。１００，０００未満の分子量を有する材料が通常ＰＥＧと呼ばれ、一方でより高い分子量のポリマーはＰＥＯとして分類される。これらのポリマーは両親媒性であり、水中で、ならびに多くの有機溶媒中で可溶性である。低分子量（分子量１，０００未満）のＰＥＧは粘着性の無色の液体であるが、より高い分子量のＰＥＧは、それらの分子量に比例する上限約６７℃までの融点を有するろう様、白色の固体である。ＰＥＧは非毒性であることが分かっており、様々な医薬配合物、食品、および化粧品における界面活性剤として、またはキャリヤーとしての使用に関してＦＤＡにより認可されている。１，０００より大きい分子量を有するほとんどのＰＥＧは変化せずに体から急速に除去され、クリアランス速度はポリマーの分子量に反比例する。この特性は、広い範囲の目的−機能を有するＰＥＧの利用可能性と合わせて、ＰＥＧの生物医学研究における幅広い使用：薬物送達、組織工学の足場（ｓｃａｆｆｏｌｄｓ）、表面の機能性付与（ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｚａｔｉｏｎ）、および多くの他の適用に寄与する。

上述のことを考慮して、フラボノイド類が含まれる可溶性の乏しい化合物の可溶性を向上させることが最も望ましい。フラボノイド類、例えばフラボン類であるアピゲニンおよびルテオリンを日光への曝露の作用に起因する皮膚の損傷または皮膚癌の予防および／または処置を助けるために局所用配合物の一部として組み込むことも、そして様々な皮膚科の病気の処置において有用な皮膚処置組成物を提供することも望ましい。

本発明は、以下：ｉ）平面状環構造の有機化合物、およびｉｉ）熱安定性可溶化化合物を含む組成物に関し、ここでその平面状環構造の有機化合物の濃度はその平面状環構造の有機化合物の前記の熱安定性可溶化化合物中における飽和濃度より大きく、かつ前記の組成物は過飽和していない。その熱安定性可溶化化合物は典型的には非イオン性界面活性剤、例えばポリソルベートである。その組成物には典型的にはキャリヤーも含まれる。

本発明は、平面状環構造の有機化合物、例えばフラボノイド、および熱安定性可溶化化合物、例えば界面活性剤を含む組成物に関し、ここでその組成物は、その平面状環構造の有機化合物およびその可溶化化合物を混合して、前記の平面状環構造の有機化合物がその可溶化化合物中で溶解する高められた温度（典型的には１００℃より高い温度）にすることにより形成される。その溶解した混合物が周囲温度まで冷却された際、その平面状環構造の有機化合物はその周囲温度の飽和濃度レベルを超える濃度においてさえも溶解したままである。

その組成物には、以下：エタノール、小さい鎖のアルコール（例えばイソプロピルおよびベンジルアルコール）、エトキシジグリコール（ジエチレングリコールモノエチルエーテルまたはＴｒａｎｓｃｕｔｏｌ）、プロピレングリコール、ヘキシレングリコール、ブチレングリコール、ジプロピレングリコール、グリセリン、水、生理食塩水、ＤＭＳＯ、ミリスチン酸イソプロピル、鉱油、低粘性界面活性剤、およびジメチルイソソルビドからなる群から選択されるアルコールが含まれていてもよい。

好ましい態様において、その組成物は医薬組成物であり、そのキャリヤーは医薬的に許容できるキャリヤーである。その組成物にはヒアルロン酸および／または透過増進剤が含まれることができる。１態様において、その組成物はエマルジョンまたはマイクロエマルジョンの形態である。その組成物は、例えば医薬組成物、機能性食品（強化食品および食事栄養補助剤）、コスメシューティカル、食品栄養補助剤、または医療用食品であることができる。

本発明の別の態様は、平面状環構造の有機化合物、例えばフラボノイドの経皮適用のための、２つの面を有する支持体を含むパッチであり、第１の面は本発明の組成物および接着剤を有し（剥離ライナーを有する）、第２の面はその組成物に対して不浸透性であり、第１の面上に接着する材料を有する。別の態様において、そのパッチは２つの面を有する支持体を含み、第１の面は本発明の組成物を収容する液体リザーバーおよび半透膜およびその半透膜の裏面に取り付けられた接着性の層（剥離ライナーを有する）を有し、第２の面はその組成物に対して不浸透性であり、第１の面上に接着する材料を有する。

本発明の別の態様は、以下の工程を含む、可溶化された平面状環構造の有機化合物、例えばフラボノイド組成物を調製する方法である：平面状環構造の有機化合物、例えばフラボノイド粒子を熱安定性可溶化化合物、例えば界面活性剤と混合して混合物を形成し、その混合物をその平面状環構造の有機化合物が可溶化される温度まで加熱し、その溶液を冷却する。好都合な態様において、その熱安定性可溶化化合物は非イオン性界面活性剤である。典型的には、その混合物は加熱しながら撹拌され、１０重量％までの平面状環構造の有機化合物、例えばフラボノイド化合物が添加される。好都合な態様において、その界面活性剤はポリソルベートである。加熱または冷却工程の後は、その溶液を皮膚科、経口、注射可能、歯周用、皮膚用パッチ、またはエアロゾルキャリヤーに添加する工程である。エチルアルコール、イソプロピルアルコール、ベンジルアルコール、エトキシジグリコールおよびジメチルイソソルビドからなる群から選択される小さい鎖のアルコールをその溶液に添加することができる。

本発明は、以下の工程を含む、可溶性の乏しい平面状環構造の有機化合物の組成物の可溶性を増大させる方法にも関する：ｉ）平面状環構造の有機化合物を熱安定性可溶化化合物と混合して混合物を形成し、ｉｉ）その混合物をその平面状環構造の有機化合物の粒子が可溶化される温度まで加熱して溶液を形成し、そしてｉｉｉ）その溶液を冷却する。

本発明は、可溶化された平面状環構造の有機化合物、例えばフラボノイド、ならびにその平面状環構造の有機化合物、例えばフラボノイドの角質層および表皮への送達を可能にするキャリヤーを含む療法上有効量のサンスクリーン配合物を皮膚に適用することを含む、日光曝露の作用を低減および／または予防する方法にも関する。別の態様において、その配合物は、追加の紫外日光曝露保護を提供するための鉱物酸化物を追加で含む。

別の態様において、本発明は、可溶化された平面状環構造の有機化合物、例えばフラボノイド、ならびにそのフラボノイドの角質層および表皮への送達を可能にするキャリヤーを含む療法上有効量の配合物を日光で損傷した皮膚に適用することを含む、日光曝露の作用を処置する方法に関する。

別の態様において、本発明は、哺乳類において癌の可能性を低減する、または癌を処置する方法であって、そのような処置を必要とする哺乳類に予防的な量または療法上有効量の本発明の配合物を投与することを含む方法に関する。

別の態様において、本発明は、哺乳類において炎症を処置する方法であって、そのような処置を必要とする哺乳類に療法上有効量の本発明の配合物を投与することを含む方法に関する。

別の態様において、本発明は、哺乳類において正常な皮膚防壁の機能を回復させる方法であって、そのような処置を必要とする哺乳類に療法上有効量の本発明の配合物、例えばフラボノイド配合物を投与することを含む方法に関する。

別の態様において、本発明は、哺乳類において皮膚の疾患または障害、例えばアクネ、脱毛症、皮膚の敏感化（ｓｅｎｓｉｔｉｚａｔｉｏｎ）および過敏、乾燥皮膚（乾皮症、魚鱗癬）、真菌感染、ならびに酒さ、接触皮膚症を処置する方法であって、そのような処置を必要とする哺乳類に療法上有効量の本発明の配合物を投与することを含む方法に関する。

別の態様において、本発明は、自己免疫疾患、例えば乾癬、狼瘡、および関節炎を処置する方法であって、そのような処置を必要とする哺乳類に療法上有効量の本発明の配合物を投与することを含む方法に関する。

別の態様において、本発明は、アレルギー、喘息、アトピー性皮膚炎／湿疹を処置する方法であって、そのような処置を必要とする哺乳類に療法上有効量の本発明の配合物を投与することを含む方法に関する。

別の態様において、本発明は、ＴＮＦα関連疾患を処置またはその可能性を低減する方法であって、そのような処置を必要とする哺乳類に療法上有効量または予防的な量の本発明のフラボノイド配合物を投与することを含む方法に関する。

別の態様において、本発明は、ＩＬ−１β関連疾患を処理またはその可能性を低減する方法であって、そのような処置を必要とする哺乳類に療法上有効量または予防的な量の本発明のフラボノイド配合物を投与することを含む方法に関する。

図１は界面活性剤のそれらの頭部に従う分類：非イオン性、陰イオン性、陽イオン性および両性を示す。 図２は未処理のポリソルベート８０対照試料および熱処理したポリソルベート８０試料の間のわずかな化学組成の違いを示す質量分析のプロットである。 図３は、様々なアピゲニン濃度を含有するいくつかの適用された局所用配合物に関するヒト組織の上皮、真皮および受容器流体区分内に沈着したアピゲニン含有量を説明するグラフプロットである。

本発明は、平面状環構造の有機化合物、例えばフラボノイド類の新規配合物に関する。そのような配合物を含有する医薬組成物、機能性食品、コスメシューティカル、食品栄養補助剤、および医療用食品、ならびにそれらを作る、および用いるための方法が含まれる。

可溶性は、可溶性の乏しい平面状環構造の有機化合物、例えばフラボノイドの局所および経口生物学的利用能に関する重要なパラメーターである。薬物の溶解は、経口吸収および局所吸収に関する水溶性の乏しい薬物の律速段階であり得る。薬物の可溶性は、その薬物が溶解した状態であることが意図される様々な剤形の配合および開発に関する基本的な必要条件でもある。多くの平面状環構造の有機化合物、例えばフラボノイド類と関係する可溶性の問題のため、それらの生物学的利用能が制限され、従って可溶性の増進が必要になる。この開示において教示される可溶性の乏しい平面状環構造の有機化合物の新規の可溶性の形態を作る、および用いる方法は、可溶性の乏しい環構造の有機化合物の改良に取り組む。

本発明は、平面状環構造の有機化合物、例えばフラボノイドの熱安定性界面活性剤への添加、次いでその混合物の、その有効薬剤（例えばフラボノイド）またはその熱安定性可溶化剤（例えば界面活性剤）のどちらかの沸点または分解点を超えない高められた温度（典型的には１００℃より高い温度）までの加熱、次いでその混合物の冷却に関する。予想外にも、このプロセスは溶解を増進することができ、その平面状環構造の有機化合物の界面活性剤を含む溶液中での著しく高い濃度を達成することができることが観察された。さらに、結果として得られた溶液“濃縮物”は過飽和していない。有効薬剤の可溶化剤に対するモル比は典型的には１：２〜１：５であり、時にその有効薬剤／界面活性剤の組み合わせに応じてはるかに大きい（例えば１：２〜１：２０）。理論により束縛されることを望むわけではないが、溶解を促進するために必要な熱は、その平面状環構造の有機化合物の自己会合した積み重ね（ｓｔａｃｋｉｎｇ）と関係する結合（それがそれらの可溶性を制限している）に打ち勝つために必要であると信じられている。これらの平面状環構造の有機化合物の熱安定性可溶化剤中での熱による溶解の際、その可溶化分子はこれらの平面状化合物を覆う、または挟む−すなわち、その熱安定性可溶化剤およびその平面状化合物は“会合する”、または“複合体”を形成する。室温まで冷却した際、その濃縮物は、たとえその化合物の濃度が周囲条件−室温（その平面状環構造の有機化合物の自己会合したスタッキングの力に打ち勝つのに必要な温度より下の温度）におけるそれらの飽和濃度より大きくても、過飽和した溶液ではない。その濃縮物は安定であり、その化合物（または有効薬剤）はその濃縮物から配合物を作るのに十分な期間の間溶解したままである。

これらの平面状環構造の有機化合物の濃縮物は、その濃縮物を使用しないで達成可能である濃度よりも高い濃度の溶解した状態のその化合物を有する組成物を配合するために用いることができる。すなわち、これらの濃縮物を用いて、ａ）標準的な配合物調製技法の使用、またはｂ）その平面状環構造の有機化合物を界面活性剤および賦形剤と全部一緒に混合し、次いで高められた温度まで加熱することにより達成することができる濃度よりも高い濃度の溶解した状態のその平面状環構造の有機化合物を有する配合物を調製することができる。

Ｉ−本発明の化合物
本発明は、積み重ね配置を可能にする少なくとも１個の環構造を有する平面状の分子に関する。その環構造は芳香族構造であることができる。特徴的に積み重なるそれらの分子は、高い融点を有し、乏しい可溶性を示す。典型的にこれらの化合物の局所用製品および薬物配合物における使用に関して実用上の制限となるのは、その乏しい可溶性の特徴である。本明細書で用いられる際、用語“乏しい可溶性”は、１ｍｇ／ｍｌ未満、特に０．１ｍｇ／ｍｌ未満の水または油中での可溶性を有することを意味する。

乏しい可溶性を有する平面状環構造の有機化合物の例には、以下の重要なクラスの有効薬剤が含まれる：
クラス１．カンプトテシン類似体は抗腫瘍剤として用いられ、水中でわずかに可溶性である。本発明の方法は、これらの薬剤を可溶化するために適用することができる。カンプトテシン、トポテカン（ｔｏｐｏｔｅｃａｎ）およびイリノテカン（ｉｒｉｎｏｔｅｃａｎ）ならびにＲ１０、Ｒ９およびＲ７に関して他の置換を有する化合物が含まれる。

クラス２．抗ウイルス薬、特に抗ヘルペス処置として用いられるグアニジンヌクレオシド類。そのような薬剤は限られた水溶性を有する。アシクロビル（ａｃｙｃｌｏｖｉｒ）、ペンシクロビル（ｐｅｎｃｉｃｌｏｖｉｒ）、ガンシクロビル（ｇａｎｃｉｃｌｏｖｉｒ）、およびＲ１に関して他の置換を有する化合物が含まれる。

クラス３．ベンゾジアゼピン類は抑うつおよび不安のためのＣＮＳに有効な薬物である。これらの三環系薬剤は水中でわずかに可溶性であり、本発明の方法を用いて可溶化することができる。そのような化合物には、アルプラゾラム、オキサゼパム、および次の一般式の全ての関連する薬剤が含まれる。

クラス４．第三級アミン三環系抗うつ薬は、鉱酸を用いた処理により、および酸塩類として可溶性にすることができる。この発明の方法は、これらの薬剤を酸を使用せずに可溶化する。そのような化合物には、アミトリプチリン、クロミプラミン、ドキセピンおよび全ての関連する化合物、例えばマプロチリンおよびプロトリプチリンが含まれる。

クラス５．三環系フェノチアジン類は抗精神病薬として用いられ、本発明の方法により強酸を使用せずに可溶化することができる。そのような化合物には、クロルプロマジン、クロルプロチキセンおよび関連する三環系化合物が含まれる。

クラス６．三環系イミノスチルベン類は抗痙攣薬として用いられ、本発明の方法により可溶化することができる。そのような化合物は、カルバマゼピン、オキスカルバゼピン（ｏｘｃａｂａｚｅｐｉｎｅ）および全ての関連する三環系イミノスチルベン類である。

クラス７．本発明の方法は、非融合環系にも適用することができる。そのような化合物には、ジランチンおよびそのジカルバメート類、フェルバメートおよびレベチラセタム（ｌｅｖｅｔｉｒａｃｅｔａｍ）が含まれ、それらは全て非常に水に不溶性の抗痙攣薬である。他の関連する化合物も含まれる。

クラス８．ジヒドロ葉酸類似体の多くは水中でわずかに可溶性である。本発明の方法は、乾癬および自己免疫疾患に関して用いられるメトトレキセートおよびトリメトレキセート（ｔｒｉｍｅｔｒｘａｔｅ）が含まれるこのクラスの薬剤に適用することができる。関連する化合物が含まれる。

クラス９．サルファ系抗細菌薬は、本発明の方法により可溶化することができる。そのような化合物には、スルファメトキサゾール、スルファドキシンおよび全ての関連するサルファ系抗細菌化合物が含まれる。

クラス１０．いくつかのサルファ系薬物はカルボニックアンヒドラーゼ阻害剤でもあり、緑内障、潰瘍の処置に、および利尿薬として有用である。これらの化合物は水溶性が乏しく、本発明の方法により可溶化することができる。そのような化合物には、エトキスゾラミド、アセタゾラミド、および抗痙攣薬であるスルチアムが含まれる。

クラス１１．アントラサイクリン系抗癌剤は、乏しい水溶性を有するテトラサイクリン類である。そのような化合物には、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、ダウノルビシン、エピルビシン、イダルビシン、および全ての関連する化合物が含まれる。

クラス１２．エピポドフィロトキシン類は有用であり、抗癌剤である。本発明の方法は、このクラスの化合物を可溶化するために用いることができる。そのような薬剤には、エトポシド、テニポシド、および全ての関連する化合物が含まれる。

クラス１３．ピリミジンヌクレオシド類似体の特定のものは水中で可溶性が乏しく、抗腫瘍剤として、乾癬に関して、またはＤＮＡウイルスの増殖を阻害するために有用である。

このクラスの化合物は、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）、フロクスウリジン、ゲムシタビン、ジドブジン、スタブジン、および全ての関連する化合物である。

クラス１４．ピリミジンヌクレオシドに類似して、ＤＮＡウイルスに対して有用であるアデニンおよびグアニジンに基づく化学療法薬も、強酸と組み合わせない限り水中でわずかに可溶性である。本発明の方法は、これらの薬剤を強酸を使用せずに水中で可溶化することができる。このクラスに含まれる化合物には、ジダノシンおよびアバカビルならびに全ての関連する化合物が含まれる。

クラス１５．特定の選択的エストロゲン受容体調節薬（ｍｏｄｕｌａｔｏｒｓ）は、乳癌、骨粗鬆症および避妊に関する処置としての用途を見出してきた。これらのポリフェニル系薬剤の多くは、強酸と組み合わせない限り低い水中での可溶性を有する。本発明の方法は、酸を使用せずにその水溶性を増大させるために有用である。そのような薬剤には、タモキシフェン、クロミフェン、ラソフォキシフェンおよび全ての関連する薬剤が含まれる。

クラス１６．さらに他の選択的エストロゲン受容体調節薬は別の構造的クラスに属する。１つのそのような薬剤は、骨粗鬆症および他のエストロゲン関連疾患を処置するために有用であるラロキシフェンである。強酸または非常に低いＰＨの非存在下では、ラロキシフェンは水中でわずかに可溶性である。本発明の方法は、この薬剤および関連する薬剤の可溶性を増大することができる。

クラス１７．プロゲステロン類はステロイドホルモンの１つのクラスであり、雌の生殖周期に影響を及ぼす薬剤である。そのような薬剤には、酢酸メゲストロール（Ｍｅｇｅｓｔｅｒｏｌ Ａｃｅｔａｔｅ）およびメドロキシプロゲステロンおよび全ての関連する薬剤が含まれ、ヒトおよび動物の健康の多くの領域において用いられている。このクラスの全ての化合物は水中でわずかに可溶性である。水中での可溶性は、本発明の方法の適用により向上することができる。

クラス１８．エストロゲン類は、雌の生殖周期、発生、および成熟に影響を及ぼすステロイドホルモンのクラスである。そのような化合物には、エストラジオール、吉草酸エストラジオール、メストラノール、エストロンおよび全ての関連する類似体が含まれる。このクラス中の化合物の全ては水中でわずかに可溶性である。可溶性は、本発明の方法の適用により向上することができる。

クラス１９．テストステロン類およびノルテストステロン類は、ヒトにおける生殖周期に影響を及ぼすステロイドホルモンであり、それは成長、発生および成熟ならびに関連するプロセスにも影響を及ぼす。アナボリックステロイド類もこのクラスに属する。そのような薬剤には、メチルテストステロン、オキサンドロロン、ダナゾールおよびそのクラス内の多くの関連する化合物が含まれる。ステロイド類のほとんどと同様に、これらの化合物は水中でわずかに可溶性であり、本発明の方法により可溶化することができる。

クラス２０．コルチコステロイド類は炎症、炭水化物および脂質代謝症候群の処置に、ならびに他の疾患状態に関して有用である。そのような化合物には、ヒドロコルチゾン、フルドロコルチゾン、デキサメタゾンおよび全ての関連する薬剤が含まれる。これらのコルチコステロイド類は水中でわずかに可溶性であるが、本発明の方法の適用により、より可溶性にすることができる。

クラス２１．グリタゾン類（ｇｌｉｔｉｚｏｎｅｓ）は、高血糖およびインスリン抵抗性を処置するために用いられる化合物のクラスである。そのような化合物には、ロシグリタゾン（ｒｏｓｉｇｌｉｔａｚｏｎｅ）、ピオグリタゾン（ｐｉｏｇｌｉｔａｚｏｎｅ）、トログリタゾン（ｔｒｏｇｌｉｔｉｚｏｎｅ）および全ての関連する類似体が含まれる。これらの化合物は水中でわずかに可溶性であるが、本発明の方法の適用によりその可溶性を向上させることができる。

クラス２２．アトバコン（ａｔｏｖａｑｕｏｎｅ）、ブパルバコン（ｂｕｐａｒｖａｑｕｏｎｅ）およびパルバコン（ｐａｒｖａｑｕｏｎｅ）が含まれるキノンクラスの薬剤は、抗原虫薬として有用である。これらの薬剤およびそれらの類似体の全ては水中でわずかに可溶性である傾向がある。それらは本発明の方法の適用により可溶化することができる。

クラス２３．メフロキン、プリマキン、クロロキンおよび全ての関連する類似体が含まれるキノリンクラスの薬剤は、抗マラリア薬として有用である。これらの薬剤は強酸中で、またはそれらの酸塩として可溶性である。本発明の方法はこれらの薬剤を強酸を使用せずに水中で可溶化することができる。

クラス２４．ピロキシカムおよびメロキシカムならびにそれらの関連する類似体は、痛み、腫れ、および他の関連する症状を処置するのに有用である。これらの薬剤は水中でわずかに可溶性である。これらの薬剤および全ての関連する類似体は、本発明の適用により可溶化することができる。

クラス２５．プロピオネート類は、痛み、発熱、および炎症を処置するために有用な薬剤のクラスである。このクラスのメンバーには、イブプロフェン、ナプロキセン、フェノプロフェン、ナブメトンおよび多くの関連する類似体が含まれる。これらの化合物は弱酸であり、水中でわずかに可溶性である。それらは強アルカリおよび高ｐＨ中で可溶性であることができる。本発明の方法は、これらの薬剤を強アルカリまたは高ｐＨを必要とせずに可溶化する。

クラス２６．多環系抗炎症剤、例えばインドメタシン、スリンダクおよびそれらの類似体の全ては、強アルカリの添加または高ｐＨなしでは水中でわずかに可溶性である。本発明の方法を用いて、これらの薬剤をアルカリまたは高ｐＨを使用せずに可溶化することができる。

クラス２７．オンダンセトロン、ドラセトロン、グラニセトロンおよび全てのそれらの関連する類似体が含まれるインドールに基づく制吐薬は、５−ＨＴ３受容体拮抗薬である。これらの薬剤は水中でわずかに可溶性である傾向がある。それらおよびそれらの関連する類似体は、本発明の方法の適用により可溶化することができる。

クラス２８．アゾール抗真菌薬は、クロトリマゾール、ミコナゾール、スルコナゾール、ケトコナゾールおよびそれらの関連する類似体の全てが含まれる、重要な療法的クラスの薬剤である。これらの薬剤は水中でわずかに可溶性である傾向がある。それらは本発明の方法の適用により可溶化することができる。

クラス２９．ベンズイミダゾール類であるオメプラゾール、ランソプラゾール（ｌａｓｏｐｒａｚｏｌｅ）、およびその関連する類似体は、プロトンポンプ阻害剤としての有用性を有する。これらの薬剤は水中でわずかに可溶性であるが、本発明の方法の適用により可溶化することができる。

クラス３０．強酸または強アルカリによる可溶化のための部位を欠いている様々な芳香環を有する化合物を、本発明の方法の適用により可溶化することができる。可溶化することができるそのような薬剤の例は、以下のものである：

クラス３１．キノロンクラスの抗細菌薬の化合物、例えばシプロフロキサシン、モキシフロキサシンおよびオフロキサシンは水中でわずかに可溶性である。これらの化合物は塩基性窒素を有する複素環式側鎖を有し、それは強酸と塩を形成することができる。その塩は可溶性を増大させるが、その塩さえも時々望まれるよりも可溶性が低い。本発明の方法は、これらの化合物の水溶性を強酸を使用せずに増大させるであろう。塩基性窒素が存在しない、または弱塩基性の窒素しか存在しない場合でも、本発明の方法はこれらの薬剤を可溶化するであろう。１つのそのような例はＷＣＫ７７１である。一般構造は、その方法が適用されるであろう化合物のいくつかを記述する。

クラス３２．局所麻酔薬として作用する化合物の特定のもの、例えばベンゾカイン、メピバカイン、リドカインおよび関連する構造は、強酸の添加または低ｐＨなしでは水中でわずかに可溶性である。本発明の方法の適用は、強酸または低ｐＨを使用せずにそのような化合物の可溶性を増大させる。

クラス３３．カプサイシンおよびその関連する化合物は、痛みまたは損傷の処置に有用である。カプサイシンは冷水中でわずかに可溶性である。本発明の方法の適用は、カプサイシンおよび関連する化合物の可溶性を増大させる。

クラス３４．アリール酢酸類、例えばトルメチン、ケトロラック、ジクロフェナクおよびそれらの関連する構造は、抗炎症剤として、および痛みの処置に有用である。それらは水中でわずかに可溶性である。より高いｐＨにおいて、または塩基を用いた処理により、その可溶性が向上する。本発明の方法は、塩基または高められたｐＨを使用せずにこれらの薬剤およびそれらの類似体の水中での可溶性を増大させる。

クラス３５．いくつかの抗炎症剤および痛み止め、例えばロフェコキシブ、セレコキシブ、スルフィンピラゾン、フェニルブタゾンおよび関連する化合物は、ジフェニル複素環化合物の広いクラスに属する。これらの化合物は水中でわずかに可溶性である。本発明の方法の適用はこれらの化合物および関連する化合物の水中での可溶性を増大させる。

クラス３６．スタチン類は、高脂血症および関連する病気を処置するために有用である薬剤の周知のクラスである。このクラスの化合物には、ロバスタチン、アトルバスタチン、セリバスタチンおよび全ての関連する構造が含まれる。これらの化合物は水中でわずかに可溶性であり、その酸塩のいくつかさえも自由には溶けない。本発明の方法の適用は、これらおよびこのクラスの化合物に関する水中での可溶性を増大させる。

クラス３７．フィブレート類、例えばフェノフィブレートは可溶性の乏しい化合物である。本発明の方法の適用は、これらの化合物の水中での可溶性を増大させる。

以下は、いくつかの他の可溶性の乏しい平面状環構造の有機化合物の化学構造および化学的／物理的特性である：

フラボノイド類が含まれるポリフェノール類
いくつかの一般的に存在する植物性平面状環構造フラボノイド類の化学構造を下記で列挙する。

フラボノイド類には、フラボン類（例えばアピゲニン、ルテオリン）、フラボノール類（例えば、ケルセチン、ミリセチン）、フラボノン類、（例えばナリゲニン（ｎａｒｉｇｅｎｉｎ）、ヘスペリジン）、フラボノール類（またはカテキン類）（例えば、エピカテキン、ガロカテキン）、アントシアニジン類（例えばシアニジン（ｃｙａｎｉｄｉｎｇ）、ペラルゴニジン）、およびイソフラボン類（例えばゲニステイン、ダイゼイン（ｄａｉｄｅｚｉｎ））が含まれる。

アピゲニンはフラボン構造クラスのメンバーであり、化学的には４’，５，７，−トリヒドロキシフラボンとして知られている。アピゲニンは次の構造式を有する：

。

ルテオリンもフラボン構造クラスのメンバーであり、化学的には３’，４’，５，７−テトラヒドロキシフラボンとして知られている。ルテオリンは次の構造式を有する：

。

アピゲニンおよびルテオリンは両方とも実質的に水および医薬、化粧、および食品添加配合物に適したほぼ全ての溶媒中で不溶性である（すなわち、１ｍｇ／ｍｌ未満の可溶性）。

１態様において、本発明には平面状環構造の有機化合物が含まれるが、その平面状環構造の有機化合物がポリフェノール、フラボノイドおよび／またはユビキノンＱ１０ではないという条件が付く。

この発明の方法は、１ｍｇ／ｍｌ未満、特に０．１ｍｇ／ｍｌ未満の水中での可溶性を有する可溶性の乏しいフラボノイド類に適用可能である。

ＩＩ−本発明の化合物の配合物を調製する方法
本発明には、多種多様な適用を可能にする平面状環構造の有機化合物を配合するための多数の方法が含まれる。本明細書で開示するのは、比較的水に不溶性の、ならびに比較的油に不溶性の化合物の可溶性を、熱安定性可溶化化合物内で、高められた濃度レベルまで（例えば、周囲温度において約１０または２０重量％まで）実質的に増大させるための方法である。その可溶化された化合物を、許容できる局所用、皮下用、経口用、腹膜用、歯周用、エアロゾル用キャリヤーに添加して配合物を作ることができる。

本発明は、可溶性の乏しい平面状環構造の有機化合物、例えばフラボノイド類の可溶性濃度を、熱安定性の非毒性の可溶化化合物、例えばポリソルベート類が含まれる非イオン性界面活性剤化合物を用いて実質的に増大させるための方法であって、以下の工程を含む方法に関する：
ａ）平面状環構造の有機化合物、例えばフラボノイドを熱安定性可溶化化合物中で混合して混合物を形成し、
ｂ）その混合物を、その平面状環構造の有機化合物の微粒子が可溶化される温度まで撹拌しながら加熱し、結果として得られた混合物（“濃縮物”）は透明な溶液を形成し、そして
ｃ）その濃縮物を冷却し、そして
キャリヤーを添加してもよい。

その混合物は、例えば１００℃、１２０℃、１５０℃、または１７０℃より高い高温まで加熱される。選択される温度は、その平面状分子が溶解状態になることを可能にする温度である。その混合物は、その平面状化合物またはその可溶化化合物のどちらかの沸点または分解点を超えない温度まで加熱される。その加熱工程は、好都合にはその平面状化合物およびその可溶化化合物のみが存在する状態で行われる。そのキャリヤーは、好都合には混合または加熱の間は存在しない。多くの態様において、平面状分子の可溶化化合物に対するモル比は１：２に近い。平面状分子の可溶化化合物に対するモル比は、特定の組み合わせに関して、２モルの可溶化化合物、例えば界面活性剤に対して１モルの平面状化合物に近い。一部の有効薬剤／界面活性剤の組み合わせに関して、２モルの界面活性剤に対して１モルの有効薬剤よりも著しく多い界面活性剤、例えば２０モルの界面活性剤に対して１モルの有効薬剤が必要である。

医薬組成物、機能性食品、食事栄養補助剤、コスメシューティカル、食品栄養補助剤、または医療用食品の作製に関して、工程ｂ）またはｃ）の後に、その可溶化された化合物の混合物を皮膚科用、経口用、注射用、皮膚パッチ用、またはエアロゾル用キャリヤーに添加する工程がある。

別の態様において、工程ｂ）またはｃ）の後に、アルコール、例えばエチルアルコールをその濃縮物に添加して低減された粘着性を有する可溶性化合物溶液を形成する工程がある。その可溶化された化合物の混合物の粘着性レベルを低減するための他の好都合な物質には、以下のものが含まれる：小さい鎖のアルコール（例えばイソプロピルおよびベンジルアルコール）、エトキシジグリコール（ジエチレングリコールモノエチルエーテルまたはＴｒａｎｓｃｕｔｏｌ）、プロピレングリコール、ヘキシレングリコール、ブチレングリコール、ジプロピレングリコール、グリセリン、水、生理食塩水、ＤＭＳＯ、ミリスチン酸イソプロピル、鉱油、低粘性界面活性剤、およびジメチルイソソルビド。

本発明の方法は、乏しい可溶性を有する、または現在特定の適用を妨げる、もしくは困難にするような方法で（例えば塩として）可溶化されている化合物の可溶性の増大において有用である。

アピゲニン／ポリソルベート８０配合物は以下のように作ることができる：
・アピゲニン粉末および粘着性の液体のポリソルベート８０を、約５から１０重量％までのアピゲニン対９５から９０重量％までのポリソルベート８０の比率で混合する。少量（５〜１０重量％）の脱イオン水および、あってもよいアセトンおよび／またはエチルアルコールを添加してもよく、その混合物のブレンドを促進する。

・この混合物を徹底的に撹拌して濃厚なペースト様のブレンドを形成する。

・次いでその混合物を比較的高い温度（約１００〜１５０℃）まで撹拌しながらゆっくりと加熱する。その加熱は、水を、そしてポリソルベート８０中に存在する揮発性成分も沸騰させて除くことにより成し遂げられる。

・揮発性物質が除去され、約２００〜３００℃を越える温度まで加熱すると、全ての固体のアピゲニンがポリソルベート８０混合物中で可溶化されているような暗褐色の透明な液体が結果としてもたらされる。

・周囲温度まで冷却すると、濃厚な粘着性の褐色の液体が結果としてもたらされる。アピゲニンの含有量がより高いほど、結果として生じる色はより黒ずんでいる。

・アピゲニンのその粘着性のアピゲニンポリソルベート８０の液体中における４．０５％の濃度に基づいて、アピゲニンの含有量は４０．５ｍｇ／ｍｌまたは４０，５００ｐｐｍである。

アピゲニンおよび他の比較的水に不溶性のフラボノイド類の高い可溶性レベルをもたらすのに高い温度レベルが必要であったことは予想されていなかった。

アピゲニン／ポリソルベート８０のアルコール溶液中での使用は、アピゲニンおよび他の比較的不溶性のフラボノイド類を望まれる標的部位に送達することができる。本発明には、適切な極性の特徴の釣り合いを有する熱安定性化合物、例えば界面活性剤を他のフラボノイド類と組み合わせてその他のフラボノイド類の高められた濃度レベルを達成する方法が含まれる。実施例２および３は、他のフラボノイド類およびポリソルベート類の配合物を示す。

ＩＩＩ 平面状環状化合物の配合物および組成物
本発明は、平面状環構造の有機化合物、例えばフラボノイドおよび熱安定性可溶化化合物、例えば界面活性剤を含む組成物に関し、ここで前記の組成物はその平面状化合物およびその可溶化化合物を混合して前記の平面状化合物が前記の可溶化化合物中で溶解する高められた温度（典型的には１００℃より高い温度）にすることにより形成される。その溶解した混合物を周囲温度まで冷却した際、前記の溶解した平面状化合物はその周囲温度の飽和濃度レベルを超える濃度においてさえも溶解したままである。その平面状化合物または有効薬剤のその組成物中における濃度は、その有効薬剤の前記の熱安定性可溶化化合物中における周囲温度および圧力での飽和濃度よりも大きく、かつ前記の組成物は過飽和した溶液ではない。その組成物の“濃縮物”は、少なくとも配合物をその濃縮物から作製するまでの時間の間安定である。

本明細書で用いられる際、“熱安定性可溶化化合物”は、少なくともその可溶化されるべき平面状環構造の有機化合物の融解まで安定である化合物である。熱処理（加熱）の際、その熱安定性可溶化化合物は、平面状環構造の有機化合物、例えばフラボノイド類と混合された際、その平面状環構造の有機化合物を可溶化し、周囲温度まで冷却した際、その平面状環構造の有機化合物を可溶化し続ける。その混合物は、その平面状化合物またはその可溶化化合物のどちらかの沸点または分解点を超えない温度まで加熱される。医薬品、機能性食品および化粧品適用に関して、その熱安定性可溶化化合物は用いられるレベルにおいて非毒性でなければならない。

好都合には、その平面状環構造の有機化合物を可溶化する化合物は、周囲温度において、延長された期間、例えば１または２ヶ月、好都合には１または２年の間であるが少なくともその濃縮物をキャリヤーに添加して配合物を作製するのに必要なだけの長さの時間の間、その平面状環構造の有機化合物を可溶化し続けることができる。

本明細書で用いられる際、“過飽和した溶液”は、飽和濃度より高い濃度の溶質を含有する溶液であり；わずかな乱れまたは種晶添加（ｓｅｅｄｉｎｇ）が過剰な溶質の結晶化を引き起こす。

この開示の高温法を用いて平面状環状化合物の高められた可溶性濃度レベルを可能にする熱安定性可溶化化合物には、界面活性剤が含まれる。

界面活性剤
界面活性剤は以下のように分類される（図１参照）：
それらの尾部の組成に従う界面活性剤
界面活性剤の尾部は以下のものであり得る：
・炭化水素鎖：芳香族炭化水素（アレーン類）、アルカン類（アルキル）、アルケン類、シクロアルカン類、アルキンに基づく；
・アルキルエーテル鎖：
○エトキシ化界面活性剤：界面活性剤の親水性の特徴を増大させるためにポリエチレンオキシド類が挿入されている；
○プロポキシル化界面活性剤：界面活性剤の親油性の特徴を増大させるためにポリプロピレンオキシド類が挿入されている；
・フッ化炭素鎖：フッ素系界面活性剤；
・シロキサン鎖：シロキサン界面活性剤。

界面活性剤は１個または２個の尾部を有することができ、これらは二鎖型と呼ばれる。

それらの頭部の組成に従う界面活性剤
それらの頭部の組成に従う界面活性剤の分類：非イオン性、陰イオン性、陽イオン性、両性。

界面活性剤は、その頭部における正式に荷電した基の存在により分類することができる。非イオン性界面活性剤はその頭部において荷電した基を有しない。イオン性界面活性剤の頭部は正味の電荷を帯びている。その電荷が負である場合、その界面活性剤はより具体的に陰イオン性と呼ばれ；その電荷が正である場合、それは陽イオン性と呼ばれる。界面活性剤が２個の反対の電荷を有する頭部を含有する場合、それは双性イオン性と呼ばれる。

それぞれのタイプのいくつかの一般的に遭遇する界面活性剤には、以下のものが含まれる：
・イオン性
○陰イオン性：永久的な陰イオン（サルフェート、スルホネート、ホスフェート）またはｐＨ依存性陰イオン（カルボキシレート）に基づく：
・サルフェート類：
・アルキルサルフェート類：ラウリル硫酸アンモニウム、ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＤＳ、ドデシル硫酸ナトリウム、その化合物に関する別名）；
・アルキルエーテルサルフェート類：ラウレス硫酸ナトリウム（ラウリルエーテル硫酸ナトリウム（ＳＬＥＳ）としても知られている）、ミリス（ｍｙｒｅｔｈ）硫酸ナトリウム；
・スルホネート類：
・ドクセート類：スルホコハク酸ジオクチルナトリウム；
・スルホネートフッ素系界面活性剤：ペルフルオロオクタンスルホネート（ＰＦＯＳ）、ペルフルオロブタンスルホネート；
・アルキルベンゼンスルホネート類；
・ホスフェート類：
・アルキルアリールエーテルホスフェート
・アルキルエーテルホスフェート
・カルボキシレート類：
・アルキルカルボキシレート類：脂肪酸塩類（石けん）：ステアリン酸ナトリウム；
・ラウロイルサルコシンナトリウム；
・カルボキシレートフッ素系界面活性剤：ペルフルオロノナノエート、ペルフルオロオクタノエート（ＰＦＯＡまたはＰＦＯ）
○陽イオン性：以下のものに基づく：
・ｐＨ依存性の第一級、第二級または第三級アミン類：第一級アミン類は１０未満のｐＨにおいて正に荷電した状態になり、第二級アミン類は４未満のｐＨにおいて正に荷電した状態になる：
・オクテニジン二塩酸塩；
・永久的に荷電した第四級アンモニウム陽イオン：
・アルキルトリメチルアンモニウム塩類：臭化セチルトリメチルアンモニウム（ＣＴＡＢ）、別名臭化ヘキサデシルトリメチルアンモニウム、塩化セチルトリメチルアンモニウム（ＣＴＡＣ）；
・塩化セチルピリジニウム（ＣＰＣ）；
・ポリエトキシ化タローアミン（ＰＯＥＡ）；
・塩化ベンザルコニウム（ＢＡＣ）；
・塩化ベンゼトニウム（ＢＺＴ）；
・５−ブロモ−５−ニトロ−１，３−ジオキサン；
・塩化ジメチルジオクタデシルアンモニウム
・臭化ジオクタデシルジメチルアンモニウム（ＤＯＤＡＢ）
○双性イオン性（両性）：以下のものを有する第一級、第二級もしくは第三級アミン類または第四級アンモニウム陽イオンに基づく：
・スルホネート類：
・ＣＨＡＰＳ（３−［（３−コールアミドプロピル）−ジメチルアンモニオ］−１−プロパンスルホネート）；
・サルテイン類（Ｓｕｌｔａｉｎｅｓ）：コカミドプロピルヒドロキシサルテイン；
・カルボキシレート類：
・アミノ酸類
・イミノ酸類
・ベタイン類：コカミドプロピルベタイン；
・ホスフェート類：レシチン
・非イオン性
○脂肪アルコール類：
・セチルアルコール、
・ステアリルアルコール、
・セトステアリルアルコール（主にセチルおよびステアリルアルコールからなる）、
・オレイルアルコール；
○ポリオキシエチレングリコールアルキルエーテル類（Ｂｒｉｊ）：ＣＨ_３−（ＣＨ_２）_{１０−１６}−（Ｏ−Ｃ_２Ｈ_４）_１−２５−ＯＨ；
・オクタエチレングリコールモノドデシルエーテル、
・ペンタエチレングリコールモノドデシルエーテル；
○ポリオキシプロピレングリコールアルキルエーテル類：ＣＨ_３−（ＣＨ_２）_{１０−１６}−（Ｏ−Ｃ_３Ｈ_６）_１−２５−ＯＨ；
○グルコシドアルキルエーテル類：ＣＨ_３−（ＣＨ_２）_{１０−１６}−（Ｏ−グルコシド）_１−３−ＯＨ；
・デシルグルコシド、
・ラウリルグルコシド、
・オクチルグルコシド、
○ポリオキシエチレングリコールオクチルフェノールエーテル類：Ｃ_８Ｈ_１７−（Ｃ_６Ｈ_４）−（Ｏ−Ｃ_２Ｈ_４）_１−２５−ＯＨ；
・トリトンＸ−１００；
○ポリオキシエチレングリコールアルキルフェノールエーテル類：Ｃ_９Ｈ_１９−（Ｃ_６Ｈ_４）−（Ｏ−Ｃ_２Ｈ_４）_１−２５−ＯＨ；
・ノノキシノール−９；
○グリセロールアルキルエステル類：
・ラウリン酸グリセリル
○ポリオキシエチレングリコールソルビタンアルキルエステル類：ポリソルベート類；
○ソルビタンアルキルエステル類：スパン類；
○コカミドＭＥＡ、コカミドＤＥＡ；
○ドデシルジメチルアミンオキシド；
○ポリエチレングリコールおよびポリプロピレングリコールのブロックコポリマー類：ポロキサマー類
それらの対イオンの組成に従う界面活性剤
イオン性界面活性剤の場合、その対イオンは以下のものであることができる：
・単原子／無機性：
○陽イオン：金属：アルカリ金属、アルカリ土類金属、遷移金属；
○陰イオン：ハロゲン化物：塩化物（Ｃｌ⁻）、臭化物（Ｂｒ⁻）、ヨウ化物（Ｉ⁻）
・多原子／有機性：
○陽イオン：アンモニウム、ピリジニウム、トリエタノールアミン（ＴＥＡ）
○陰イオン：トシル類、トリフルオロメタンスルホネート類、メチルサルフェート
好都合な界面活性剤は以下の通りである：
・両性界面活性剤
アルキルアンモニウムスルホン酸
ベタイン
ＡＭＰＨＯＴＥＲＩＣ−２
ＡＭＰＨＯＴＥＲＩＣ−９
二ナトリウム ココアンホジアセテート（ＤＩＳＯＤＩＵＭ ＣＯＣＯＡＭＰＨＯＤＩＡＣＥＴＡＴＥ）
リン脂質
・用途／機能：洗浄剤、可溶化剤、乳化剤
・投与経路：局所、ＩＶ（注入）
・陰イオン性界面活性剤
アルキルアリールナトリウムスルホネート
ラウリル硫酸アンモニウム
アンモニウムノノキシノール−４サルフェート
二ナトリウムラウレススルホスクシネート
ドクセートナトリウム／安息香酸ナトリウム
ステアリン酸グリセリルＳＥ
ラウリルサルフェート
セトステアリル硫酸ナトリウム
ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム
スルホコハク酸化ウンデシレン酸ナトリウム（ＳＯＤＩＵＭ ＳＵＬＦＯＳＵＣＣＩＮＡＴＥＤ ＵＮＤＥＣＹＣＬＥＮＩＣ）
モノアルキルオラミド（ＯＬＡＭＩＤＥ）
トロラミンラウリルサルフェート
・用途／機能：洗浄剤、湿潤剤、可溶化剤
・投与経路：局所、経口、呼吸（吸入）、舌下
・陽イオン性界面活性剤
ステアリン酸アルミニウム
杏仁油ＰＥＧ−６エステル類
ベヘネス−１０
・用途／機能：乳化剤、可溶化剤、保存剤
・投与経路：局所、経口、眼、鼻、筋内、耳介
・非イオン性界面活性剤
塩化ベンザルコニウム
セテアレス−１２、−１５、−３０
セテアリルアルコール／セテアレス−２０
セテス−２、−１０、−２０
ステアリン酸グリセリル−ラウレス−２３
ステアリン酸グリセリル／ＰＥＧステアレート
ステアリン酸グリセリル／ＰＥＧ−１００ステアレート
ステアリン酸グリセリル／ＰＥＧ−４０ステアレート
ラノリン非イオン性誘導体
ラノリン、エトキシ化
ラウレス−２、−４、−２３
ラウロイルポリオキシルグリセリド類
オクトキシノール９、−４０
ＰＥＧ植物油
ＰＥＧ−１２０ メチルグルコースジオレエート
ＰＥＧ−１５０ ジステアレート
ＰＥＧ−２２ メチルエーテル／ドデシルグリコールコポリマー
ＰＥＧ−２５ プロピレングリコールステアレート
ＰＥＧ−７５ ラノリン
ＰＥＧ−８ カプリル／カプリン酸グリセリド
ＰＥＧ−８ ラウレート
ペグリコール−５−オレエート（ＰＥＧＬＩＣＯＬ−５−ＯＬＥＡＴＥ）
ペゴゾール ７ ステアレート（ＰＥＧＯＸＯＬ ７ ＳＴＥＡＲＡＴＥ）
ポロキサマー１２４、−１８１、−１８２、−１８８、−２３７、−３３１、−３３８、−４０７
ポリグリセリル−１０ オレエート
ポリグリセリル−１０ テトラリノレート
ポリグリセリル−３ オレエート、−４ オレエート
ポリオキシル１００ グリセリルステアレート
ポリオキシル１２ グリセリルラウレート
ポリオキシル２ ステアレート
ポリオキシル２０ セトステアリルエーテル
ポリオキシル２０ ステアレート
ポリオキシル３５ ヒマシ油
ポリオキシル４ ラウレート
ポリオキシル４０ ヒマシ油
ポリオキシル４０ 硬化ヒマシ油
ポリオキシル４０ ステアレート、−５０ ステアレート、−４００ ステアレート
ポリオキシル６およびポリオキシル３２
パルミトステアレート
ポリオキシル６ イソステアレート
ポリオキシル６０ ヒマシ油
ポリオキシル６０ 硬化ヒマシ油
ポリオキシル８ ステアレート
ポリオキシルグリセリルステアレート
ポリオキシルラノリン、パルミテート、−ステアレート
ポリソルベート２０、−４０、−６０、−６５、−８０
ＰＰＧ−１５ ステアリルエーテル
プロピレングリコールモノステアレート
ソルビタンモノラウレート
ソルビタンモノパルミテート
ソルビタンモノステアレート
ソルビタントリオレエート
ステアラミドエチルジエチルアミン
ステアレス−２，−１０、−２０、−２１、−４０、−１００
スクロースパルミテート
スクロースステアレート
ろう、乳化
・投与経路：局所、経口、筋内、病巣内、耳介（ＯＴＩＣ）、眼、経皮、皮下、ＩＶ（注入）、鼻、歯周、膣
・用途／機能：乳化剤、可溶化剤、湿潤剤、ゲル化剤
シリコンに基づく界面活性剤
有機シリコンとしても知られており、これらはそれらの優秀な広がる能力のため、人気が高まっている。このクラスはポリシロキサン鎖を含有する。これらのいくつかは非イオン性界面活性剤（ＮＩＳ）およびシリコンのブレンドであり、一方で他のものは完全にシリコンである。

非イオン性界面活性剤
ソルビタンの脂肪酸エステル類（一般にスパン類と呼ばれる）およびそれらのエトキシ化誘導体（一般にポリソルベート類と呼ばれる）は、おそらく最も一般的に用いられる非イオン性界面活性剤である。それらは単独で、または混合されたミセルを形成するような組み合わせで（例えばポリソルベート８０およびスパン８０）用いることができる。ソルビタンエステル類は水中で不溶性であるが、ほとんどの有機溶媒中で可溶性である（親水性−親油性バランス（ＨＬＢ）の数が小さい界面活性剤）。そのエトキシ化された生成物は一般に水中で可溶性であり、比較的高いＨＬＢの数値を有する。これらの非イオン性界面活性剤は、単独で、または望まれるＨＬＢの混合されたミセルを形成するような適切な組み合わせで用いることができる。そのソルビタンエステル類およびそれらのエトキシ化誘導体の主な利点の１つは、それらの食品添加物としての認可である。それらは化粧品および医薬製剤においても用いられる。

水中で１ｍｇ／ｍｌ未満の水中での可溶性を有するフラボノイド類の（この発明の熱処理法を用いる）可溶性濃度レベルの増進に関して有用である非イオン性界面活性剤化合物には、以下のものが含まれる：エトキシ化脂肪族アルコール類；ポリオキシエチレン界面活性剤；カルボン酸エステル類；ポリエチレングリコールエステル類；アンヒドロソルビトール（ａｎｈｙｄｒｏｓｏｒｂｉｔｏｌ）エステルおよびそのエトキシ化誘導体；脂肪酸のグリコールエステル類；ならびに脂肪アミンエトキシレート類。

最も一般的な非イオン性界面活性剤はエチレンオキシドに基づく非イオン性界面活性剤であり、エトキシ化界面活性剤と呼ばれる。いくつかのクラスを区別することができる：アルコールエトキシレート類、アルキルフェノールエトキシレート類、脂肪酸エトキシレート類、モノアルカオールアミド（ｍｏｎｏａｌｋａｏｌａｍｉｄｅ）エトキシレート類、ソルビタンエステルおよびそれらのエトキシ化誘導体、エトキシレート類、脂肪アミンエトキシレート類、およびエチレンオキシド−プロピレンオキシドコポリマー類（時々ポリマー系界面活性剤と呼ばれる）。非イオン性界面活性剤の別の重要なクラスは、多ヒドロキシ（ｍｕｌｔｉｈｙｄｒｏｘｙ）生成物、例えばグリコールエステル類、グリセロール（およびポリグリセロール）エステル類、グルコシド類（およびポリグルコシド類）およびスクロースエステル類である。アミンオキシド類およびスルフィニル界面活性剤は、小さい頭部基を有する非イオン性界面活性剤である（M. J. Schick (編者): Nonionic Surfactants: Physical Chemistry, Marcel Dekker, ニューヨーク, 1987）。

ＨＬＢは、界面活性剤の親水性（“水を好む”）および疎水性（“水を嫌う”）の基の関係に関する実験に基づいた表現である。ＨＬＢ値がより高いほど、その界面活性剤の水溶性がより大きい。最も一般的なエマルジョンのタイプである水中油型（ｏ／ｗ）は、しばしばより高いＨＬＢ（好ましくは１２〜１６）の界面活性剤を必要とし、一方で油中水型エマルジョン（ｗ／ｏ）は低いＨＬＢ（好ましくは７〜１１）の界面活性剤を必要とする。１０未満のＨＬＢを有する界面活性剤は油溶性であり、一方で１０より大きいＨＬＢを有する界面活性剤は水溶性である。

スパン２０は油中水型局所用配合物に非常に適しており、一方でポリソルベート８０は化合物を水中油型局所用配合物中で可溶化させるのに非常に適している。ポリソルベート８０のような高いＨＬＢ値を有する界面活性剤は、親水性の水性に基づく配合物の調製およびエマルジョンの水相中への組み込みにおける使用を意図された“濃縮物”を作るのにも適用可能である。一方で、スパン２０のような低いＨＬＢ値を有する界面活性剤は、親油性の非水性に基づく配合物の調製およびエマルジョンの非水性の相または油相中への組み込みにおける使用を意図された“濃縮物”を作るのにも適用可能である。

ポリソルベート系界面活性剤
ポリソルベート類（商業的にＴｗｅｅｎ類としても知られている）は非イオン性界面活性剤であり、ポリエトキシ化ソルビタンおよび脂肪酸に由来する乳化剤である。それらはしばしば食品において、および化粧品において、精油を水に基づく製品中に可溶化するために用いられる。ポリソルベート類は粘着性、水溶性の淡黄色の液体である。ポリソルベート類はまた、乳化するべき物質の表面張力を低減することによりエマルジョンを形成するのを助ける。ポリソルベート類は、成分がそれらが通常はその中で溶解しないであろう溶媒中で溶解するのを助けるそれらの能力に関して認識されてきた。ポリソルベート類は、油中水型とは対照的に水中で油を分散させるように機能する。

ポリソルベート類は、ポリオールであるソルビトールをエチレンオキシドと反応させることにより生成される。次いでそのポリオキシエチレン化ソルビタンを、植物性脂肪および植物油から得られた脂肪酸、例えばステアリン酸、ラウリン酸、およびオレイン酸と反応させる。プレーンな（ＰＥＧ化されていない）ソルビタンの脂肪酸とのエステルである界面活性剤は、通常スパンという名前で呼ばれる。

ポリソルベート類はポリオキシエチレンソルビタンの脂肪酸エステルからなり、それらの構造は典型的には下記に示す化学的に均質なポリソルベート類として示される。繰り返しエチレンオキシド小単位の数はそれぞれの位置において様々であるが、それらの総数（ｗ＋ｘ＋ｙ＋ｚ）はそれぞれのポリソルベートに関して一定（すなわち２０、４０、６０、８０）である。

ポリソルベート類は、一部の医薬品および食品の調製において用いられる乳化剤のクラスである。それらはしばしば化粧品において精油を水に基づく製品中に可溶化するために用いられる。ポリソルベート類は、ＰＥＧ化されたソルビタン（ソルビトールの誘導体）が脂肪酸によりエステル化されたものに由来する油性の液体である。プレーンな（ＰＥＧ化されていない）ソルビタンの脂肪酸とのエステルである界面活性剤は、通常スパンという名前で呼ばれる。

・ポリソルベート２０（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノラウレート）
・ポリソルベート４０（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノパルミテート）
・ポリソルベート６０（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノステアレート）
・ポリソルベート８０（ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンモノオレエート）
ポリオキシエチレン部分の後の２０という数は、その分子中にあるオキシエチレン−（ＣＨ_２ＣＨ_２Ｏ）−基の総数を指す。ポリソルベート部分の後ろの数は、その分子のポリオキシエチレンソルビタン部分と結合した脂肪酸のタイプに関する。モノラウレートは２０により示され、モノパルミテートは６０により示され、モノオレエートは８０により示される。その同じ番号付けがそれらのスパン均等物（スパン２０、スパン４０、スパン６０およびスパン８０）においても当てはまる。

本発明には、可溶性の乏しい化合物の可溶性濃度をポリソルベート類を用いて増大させるための方法が含まれる。前に言及したように、多くのフラボノイド類および特にアピゲニンは水溶液中で可溶性が乏しく、従って局所、医薬および機能性食品適用に関するそれらの生物学的利用能が厳しく制限される。

本発明には、ポリフェノール類の水相可溶性レベルを界面活性剤化合物、特にポリソルベート８０、６０、４０および２０を利用することにより増大させるための方法が含まれる。この例においてポリソルベート２０、４０および６０は様々な飽和脂肪酸を有するポリソルベート類の同種の（ｈｏｍｏｌｏｇｏｕｓ）系列であることは特筆すべきである。その脂肪酸鎖中の炭素の数は、１２（ポリソルベート２０）から１８（ポリソルベート６０）まで増大する。ポリソルベート８０は１８個の炭素長を有する不飽和脂肪酸（オレエート）を表す。これらの例は全く包括的ではなく、当業者はあらゆる他の脂肪酸を有するこれらのタイプの非イオン性界面活性剤の有用性を、および脂肪酸のポリオキシエチレンアルキルエーテル類のような他のクラスの他の非イオン性界面活性剤の有用性も認識するべきである。

ＰＥＧ
ポリ（エチレングリコール）（ＰＥＧ）は、他の名前ではポリ（オキシエチレン）またはポリ（エチレンオキシド）（ＰＥＯ）として知られており、ある範囲の分子量（ＭＷ）で容易に入手できる合成ポリエーテルである。１００，０００未満の分子量を有する材料が通常ＰＥＧと呼ばれ、一方でより高い分子量のポリマーはＰＥＯとして分類される。これらのポリマーは両親媒性であり、水中で、ならびに多くの有機溶媒中で可溶性である。低分子量（分子量１，０００未満）のＰＥＧは粘着性の無色の液体であるが、より高い分子量のＰＥＧは、それらの分子量に比例する上限約６７℃までの融点を有するろう様、白色の固体である。ＰＥＧまたはＰＥＯは次の構造を有する：

。

しばしばＰＥＧの名前の中に含まれている数はそれらの平均分子量を示し、例えばｎ＝９であるＰＥＧはおおよそ４００ダルトンの平均分子量を有すると考えられ、ＰＥＧ４００と呼ばれるであろう。

陰イオン性および陽イオン性界面活性剤
陰イオン性界面活性剤、例えばドクサートナトリウム（ｄｏｃｕｓｓａｔｅ ｓｏｄｉｕｍ）もしくはラウリル硫酸ナトリウム、または陽イオン性界面活性剤、たとえばセトリミドまたは塩化ベンザルコニウムも、本発明の配合物中で単独で、または非イオン性界面活性剤との組み合わせで用いることができる。２桁より大きい倍率を超える著しい水相の増進が、いくつかの比較的水に不溶性のポリフェノール類に関して達成されてきた。

高い平面状化合物濃度を有する新規配合物は、経口用、吸入用、局所用、腹膜用、歯周用および坐剤配合物中で利用することができる。それらは医薬、コスメシューティカルおよび機能性食品適用において有用である（下記参照）。

本明細書で用いられる際、用語“医薬組成物”または“医薬配合物”は、その組成物または配合物の構成要素が医薬グレードのものである組成物を意味するものとする。その組成物または配合物は、好都合には単位剤形で与えられることができ、薬学の技術で既知の方法により調製することができる。その配合物は、その拡散増進化合物の即時、または遅延もしくは制御放出のためのものであることができる。持続放出系（時間放出（ｔｉｍｅ ｒｅｌｅａｓｅ）、制御放出等としても知られている）の利点は、投与頻度を減少させることができ、全身薬物濃度がその同じ薬物の他の配合物と比較してより長い期間の間より安定することである。本発明の組成物の適切な投与量は、投与方式、所与の化合物の代謝、および処置されている病気の重症度に依存するであろう。

本発明には、平面状化合物、例えばフラボノイド類を配合するための多数の方法が含まれ、多種多様な適用を可能にする。本発明の化合物、組成物、および配合物は、下記で論じる障害および疾患の予防および処置において有用である。本明細書で用いられる際、“療法上有効量”は、望まれる作用を有するために必要な用量である。例えば、尋常性乾癬の場合、療法上有効量はその斑またはプラークの大きさまたは重症度を低減する量である。“予防的な量”は、障害または疾患が起こる可能性を予防または低減する用量である。

表ＩＶは、対象配合物を送達するための手段として役立ち得る様々な投薬タイプおよび形態を列挙する。

Ａ．局所投与
可溶化された化合物の局所投与は、典型的にはパッチ、ローション、クリーム、ゲル、溶液、スプレー、液体および美容液（ｓｅｒｕｍｓ）、泡または軟膏の形態で行われる。上記で記述したフラボノイド類または他の可溶性の乏しい平面状化合物の可溶性レベルを界面活性剤中で増大させるための方法は、その平面状化合物が溶解した状態であるローション、クリーム、ゲル、溶液、スプレー、泡または軟膏局所用製品の配合を可能にし；その比較的不溶性の平面状化合物の物理状態はこれらの方法の使用なしでは達成することができない。

経皮送達
平面状化合物の可溶性レベルを界面活性剤内で増大させるための記述された方法は、制御された速度での浸透による全身循環中への経皮送達を可能にする。対象配合物は、本質的に低い皮膚の浸透性に関する問題に取り組むことにより、薬物投与の非侵襲的経路を提供する。皮膚は薬物透過に対する優れた防壁である。透過増進剤の組み込みは、角質層の防壁の特性を変化させることにより、薬物の吸収を促進する。局所、経口および腹膜適用におけるいくつかの非イオン性界面活性剤、例えばポリソルベート８０は、薬理学的に不活性、非毒性、非刺激性、非アレルギー性、無臭であり、ほとんどの薬物および賦形剤と適合可能であり、優れた溶媒特性を有すると考えられる。

透過増進剤
アルコールおよびポリオール類（エタノール、グリセロール、プロピレングリコール）、界面活性剤（Ｔｗｅｅｎ、スパン）、脂肪酸類（オレイン酸）、アミン類およびアミド類（アゾン（Ａｚｏｎｅ）、Ｎ−メチルピロリドン）、テルペン類（リモネン）、スルホキシド類（ジメチルスルホキシド−ＤＭＳＯ）、エステル類（ミリスチン酸イソプロピル）が含まれる様々なクラスの透過増進剤が過去２０年にわたって開発されてきた(French E, Potton C, Walters K. Pharmaceutical skin penetration enhancement. In: Walters K, Hadgrafi J, 編者, ニューヨーク: Marcel Dekker; 1993. p.113-44)。

マイクロエマルジョン
皮膚の透過を増進することを目的とする別の配合アプローチは、マイクロエマルジョンの調製である。マイクロエマルジョンは水、油、および界面活性剤で構成され、それは透明な熱力学的に安定な溶液をもたらす。マイクロエマルジョンの特性には、光学的透明性、熱力学的安定性、ならびに疎水性および親水性構成要素の両方の可溶性が含まれる。マイクロエマルジョンは油、水、および界面活性剤、しばしば補助界面活性剤との組み合わせの透明、安定、等方性液体混合物である。その水相は塩（単数または複数）および／または他の成分を含有している可能性があり、その“油”は実際には様々な炭化水素およびオレフィン類の複雑な混合物である可能性がある。通常のエマルジョンとは対照的に、マイクロエマルジョンはその構成要素の単純な混合の際に形成され、通常のエマルジョンの形成において一般的に用いられる高剪断条件を必要としない。マイクロエマルジョンの２つの基本的なタイプは、直接（水中で分散した油、ｏ／ｗ）および逆（油中で分散した水、ｗ／ｏ）である。

マイクロエマルジョンからの透過増進は、そのビヒクルから皮膚への大きな濃度勾配を提供する薬物濃度の増大によるものである可能性がある。高められたフラボノイド濃度を含有する非イオン性界面活性剤溶媒（本明細書で記述される）は、経皮、経口および腹膜適用のためのマイクロエマルジョンの調製に十分に適している。

１態様において、マイクロエマルジョンは、水および補助界面活性剤としてのエチルアルコールと一緒でのポリソルベート８０中で溶解したアピゲニンならびにミリスチン酸イソプロピル（ＩＰＭ）の油相を含有する。この態様は、皮膚透過特性による局所適用、ならびに経口、注射および鼻内噴霧適用を有する。

この発明において開示される配合物は、フラボノイド類に関する増進された経皮薬物送達方法論を可能にする。特筆するのは、アピゲニンが含まれる比較的水に不溶性のフラボノイド類が非イオン性界面活性剤混合物中で可溶化されている、開示された配合物である。ヒトおよびマウスの皮膚を用いたインビトロ皮膚透過試験は、開示された非イオン性界面活性剤混合物の適用の結果としてもたらされた表皮および真皮層内の予想外に高いアピゲニンの蓄積を実証した。実施例１５参照。

経皮パッチ
可溶性の乏しい平面状化合物の経皮有効薬剤送達に有用なのは、比較的揮発性のエチルアルコールのようなアルコールで希釈された可溶化剤、例えば界面活性剤内に可溶化された化合物を含有する経皮パッチの使用である。そのパッチの外側の無孔性の障壁は、皮膚に適用された際に、その比較的揮発性のアルコールの蒸発を低減する役目を果たし、それによりその有効薬剤の増大された透過および送達を可能にする。化粧および食品適用において用いられる他の溶媒希釈剤、例えばアルコール（すなわち、エチルアルコール、グリコール類、エトキシジグリコール等）、エステル類（ジメチルイソソルビド等）は、比較的粘着性の非イオン性界面活性剤の粘着性を低減する役目を果たし、それにより皮膚の表面に適用された際に、または経皮パッチ内に含有された際に、皮膚透過の速度および深度を増大させる。特に、皮膚パッチおよび経皮パッチに有用なのは、有効薬剤のマイクロエマルジョン配合物の使用である。その配合物は、水中油型および油中水型マイクロエマルジョンからなる。

経皮パッチは、２つのタイプの送達系に分類することができる−リザーバーに基づくものおよびマトリックスに基づくもの。両方に関する組成物は、リザーバー系からの拡散を制御するために半透膜が用いられること以外は類似している。用いられる膜の例には、ポリプロピレン、低密度ポリエチレン、エチレン−酢酸ビニルコポリマー等が含まれる。マトリックスに基づく配合物では、薬物は接着剤中で分散している／可溶化されていることができる。２種類の一般的に用いられる接着剤のクラスには、アクリレートおよびシリコンに基づく物質が含まれる。感圧性アクリレート接着剤の例には、ＤＵＲＯ−ＴＡＫ（登録商標）シリーズ（Ｈｅｎｋｅｌ，米国）が含まれるが、それに限定されない。感圧性シリコン接着剤の例には、Ｂｉｏ−ＰＳＡ（登録商標）シリーズ（Ｄｏｗ Ｃｏｍｉｎｇ，米国）が含まれるが、それに限定されない。いくつかの特定のアクリレートおよびシリコンに基づく感圧性接着剤に関する追加の情報を表Ｖにおいて要約する。

当業者に既知の溶媒および透過増進剤もその組成物中に含まれ得る。可能性のある溶媒／増進剤には、脂肪酸類（オレイン酸）、エステル類（ミリスチン酸イソプロピル）、アルコール（エチルおよびイソプロピル）およびグリコール類（プロピレングリコール、ヘキシレングリコール）が含まれ得るが、それらに限定されない。他の構成要素には、抗酸化剤（例えばＢＨＴおよびＢＨＡ）またはキレート剤（例えばクエン酸）が含まれ得る。

実施例１５において、本発明の配合物は、表皮および真皮の皮膚層の両方に著しいアピゲニン濃度を送達した。

Ｂ．経口投与
この発明の配合物は経口投与することもできる。経口投与に関して、本明細書で開示される組成物は、例えば液体ゲルカプセルまたは溶液の形態であることができる。経口投与に関して、開示される組成物は、あらゆる経口で許容できる剤形であることができ、それにはエマルジョン、マイクロエマルジョン、および水溶液、および液体ゲルカプセルが含まれるが、それらに限定されない。

その化合物が経口投与のために調製される場合、それらは一般に医薬配合物または単位剤形を形成するために医薬的に許容できるキャリヤー、希釈剤または賦形剤と組み合わせられる。経口投与に関して、化合物は溶液、懸濁液、エマルジョンとして、またはその有効成分のチューインガムからの摂取のために天然もしくは合成のポリマーもしくは樹脂中に存在することができる。

経口投与される化合物は持続放出のために配合することもでき、例えばフラボノイド類は、コートされる、マイクロ封入される、または他の状況では持続送達デバイス内に配置されることができる。そのような配合物中の総有効成分は、その配合物の０．０１から１０重量％までを構成する。

医薬配合物は、当技術で既知の手順により、周知のすぐに入手できる成分を用いて調製することができる。例えば、フラボノイド類は一般的な賦形剤、希釈剤、またはキャリヤーを用いて配合することができ、カプセル、溶液、懸濁液、エアロゾル等のような剤形へと形作ることができる。これらの剤形の全ては、即時放出、持続放出のためのものであることができ、または腸溶コーティングされることができる。これらは経口または舌下またはバッカル送達のいずれかのためのものであることができる。そのような配合物に適した賦形剤、希釈剤、およびキャリヤーの例には、充填剤および増量剤、例えばデンプン、セルロース、糖類、マンニトール、およびケイ酸誘導体（ｓｉｌｉｃｉｃ ｄｅｒｉｖａｔｉｖｅｓ）が含まれる。結合剤、例えばカルボキシメチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキプロピルシメチルセルロースおよび他のセルロース誘導体、アルギネート類、ゼラチン、ならびにポリビニルピロリドンも含まれ得る。保湿剤、例えばグリセロール、崩壊剤、例えば炭酸カルシウムおよび重炭酸カルシウムが含まれ得る。溶解を遅らせるための薬剤、例えばパラフィンも含まれ得る。再吸収促進剤、例えば第四級アンモニウム化合物も含まれ得る。表面活性剤、例えばセチルアルコールおよびグリセロールモノステアレートが含まれ得る。吸収性キャリヤー、例えばカオリンおよびベントナイトを添加することができる。潤滑剤、例えばタルク、ステアリン酸カルシウムおよびマグネシウム、ならびに固体ポリエチルグリコール類も含まれ得る。

本発明の組成物は、増粘剤、例えばセルロースおよび／またはセルロース誘導体も含有することができる。それらはガム類、例えばキサンタン、グアーガムまたはアラビアガム、あるいはポリエチレングリコール類、ベントン類（ｂｅｎｔｏｎｅｓ）等も含有することができる。

フラボノイド類を含有する軟ゼラチンカプセルは、不活性成分、例えばゼラチン、微結晶性セルロース、グリセリン、ラウリル硫酸ナトリウム、デンプン、タルク、および二酸化チタン等、ならびに液体ビヒクル、例えばポリエチレングリコール類（ＰＥＧ類）および植物油を含有することができる。さらに、胃の中での分解に耐え、十二指腸のより中性〜アルカリ性の環境で溶解するように設計されたフラボノイド類または他の化合物を含有する腸溶コーティングされたカプセルは、典型的にはセルロースアセテート誘導体でコートされている。

その平面状化合物は、好都合な経口投与のためにエリキシル剤または溶液として配合することもできる。そのフラボノイド類の医薬配合物は、水性または無水の溶液または分散液の形態、あるいはエマルジョンまたは懸濁液の形態をとることもできる。

Ｃ．非経口投与
この発明の配合物は非経口で投与することもできる。非経口投与に関して、本明細書で開示される組成物は、注射可能な溶液または懸濁液、例えば生理食塩水溶液の形態であることができる。用語“非経口”には、本明細書で用いられる際、静脈内、皮下、筋内、滑液包内、胸骨内、病巣内および頭蓋内注射または注入技法が含まれる。典型的な配合物には、エマルジョンおよびマイクロエマルジョンが含まれる。エマルジョンが含まれる注射可能な配合物は、しばしば注射のための精製水、有機性共溶媒、界面活性剤、懸濁化剤、保存剤、抗酸化剤およびｐＨ調節剤の混合物からなる。それぞれのカテゴリーを説明する成分の例は以下の通りであるが、それらに限定されない：
共溶媒
プロピレングリコール、エチルアルコール、グリセリン、ポリエチレングリコール類、ベンジルアルコール、植物油、大豆油、ベニバナ油、綿実油、トウモロコシ油、ピーナッツ油、ヒマワリ油、落花生油、ヒマシ油、オリーブ油、中または長鎖脂肪酸のエステル、例えばモノ−、ジ−またはトリグリセリド、オレイン酸エチル、ミリスチン酸イソプロピル、ポリオキシル硬化ヒマシ油、リン脂質、およびそれらの組み合わせ。

界面活性剤
ポリオキシエチレン／ポリオキシプロピレンブロックコポリマー類、ホスファチド類、およびポリソルベート類が合成非イオン性界面活性剤として一般的に用いられる。

懸濁化剤
ポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）、カルボキシメチルセルロースナトリウムおよびデキストラン
保存剤
エデト酸二ナトリウム、安息香酸ナトリウム、塩化ベンザルコニウム、安息香酸、メチルパラベンおよびプロピルパラベン
抗酸化剤
アスコルビン酸、ブチルヒドロキシトルエン、ブチルヒドロキシアニソール、チオ硫酸ナトリウム
ｐＨ調節剤
水酸化ナトリウム、トロメタミン、クエン酸ナトリウム、二塩基性および一塩基性リン酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、クエン酸、リン酸、酢酸ならびにリン酸。

Ｄ．吸入投与
この発明の配合物は、吸入手段により投与することもできる。吸入投与に関して、本明細書で開示される組成物は、フラボノイド成分を微細な液滴のガス中における懸濁物として口または鼻の流路（ｐａｓｓａｇｅｓ）に送達するエアロゾルの形態であることができる。気化器および吸入装置はフラボノイド成分の送達を容易にする。

その組成物は気道に投与することができる。その組成物は、例えばカプセルもしくはカートリッジ、または例えばゼラチンもしくはブリスター包装中の単位剤形において与えられることができ、それからその組成物を吸入器、注入器、または定量吸入器（ＭＤＩ）もしくは乾燥粉末吸入器（ＤＰＩ）の助けにより投与することができる。

その化合物は、エアロゾル中で、またはドロッパーを用いて投与する際、水溶液中で投与することもできる。従って、他のエアロゾル医薬配合物は、例えば、約０．０１〜１０％の開示されたフラボノイド成分を含有する生理的に許容できる緩衝生理食塩水溶液を含むことができる。液体配合物は、保存剤、例えばメチルおよびプロピルパラベン、塩化ベンザルコニウム等、緩衝剤、例えばリン酸およびクエン酸緩衝剤、張性調節剤、例えばマンニトール、塩化ナトリウム等、ならびに抗酸化剤、例えばアスコルビン酸、メタ重亜硫酸ナトリウム、チオ流酸ナトリウム等、ならびに着色剤、例えばＤ＆Ｃ黄色１０号、ＦＤ＆Ｃ黄色６号等も含有していてよい。

上気道（鼻）または下気道への吸入による投与に関して、その有効薬剤は好都合にはネブライザーもしくは加圧されたパックまたはエアロゾルスプレーを送達する他の好都合な手段から送達される。加圧されたパックは適切な噴射剤、例えばジクロロジフルオロメタン、トリクロロフルオロメタン、ジクロロテトラフルオロエタン、二酸化炭素または他の適切なガスを含むことができる。加圧されたエアロゾルの場合、その投薬単位は、計量された量を送達するための弁を提供することにより決定することができる。製品はネブライザーの使用により送達することもできる。

鼻内投与に関して、その療法剤は点鼻剤、液体スプレーにより、例えばプラスチックボトルの噴霧器または定量吸入器により投与することもできる。噴霧器の典型的なものは、Ｍｉｓｔｏｍｅｔｅｒ（Ｗｉｎｔｒｏｐ）およびＭｅｄｉｈａｌｅｒ（Ｒｉｋｅｒ）である。

キャリヤーおよびビヒクル
有効薬剤に加えて、その配合物は１種類以上のビヒクル、例えば“医薬的に許容できる”または化粧的にもしくは“皮膚科学的に許容できる”キャリヤー／ビヒクルを含む。“医薬的に許容できるキャリヤー”は、その有効薬剤の薬理活性に実質的に悪影響を及ぼさず、その受容者に有害または不適切に有害ではなく、その有効成分の有効量を送達するのに十分な投与量で投与された際に非毒性であり、そのキャリヤー（希釈剤、賦形剤、および／または塩等）はその配合物の他の成分と適合性である。同様に、“皮膚科学的に許容できるキャリヤー”は同じ質を有する。

皮膚科学的に許容できるキャリヤーには典型的には、その有効成分（単数または複数）と化学的および物理的に適合性であり、十分な貯蔵寿命を有して安定であり、局所投与後にその有効成分（単数または複数）の皮膚中への（例えば表皮および／または真皮への）送達を助ける成分が含まれる。その皮膚科学的キャリヤーは、適用の容易さに寄与し、気持ちのよい美的特性（色、香り、感触等）を有する成分を含有してもよい。

薬物送達プロフィールに関する配合の目的は、局所用製品の意図される使用に依存する。サンスクリーン剤、抗真菌薬、および角質溶解配合物に関して、角質層（皮膚の外層）における増進された薬物送達および保持が望まれる。逆に、皮膚の生理を改変することを意図する局所用配合物は、皮膚のより低い層（生存可能な表皮および真皮）における、そしてしばしばそれを通る薬物の沈着を必要とする。

そのキャリヤーは、例えば、希釈剤、分散剤、および／またはその配合物中に存在する他の物質のための（例えばその組成物が皮膚に適用された際にそれらの分布を促進するような）キャリヤーの役目を果たすことができる。いくつかの典型的なビヒクルには以下のものが含まれる：有機性成分（例えばアルコール、油等）、水性に基づく溶媒（例えばその有効フラボン成分を、その療法処置における使用に適した濃度で溶解する、または分散させることができる溶媒）。

より具体的には、そのキャリヤー（単数または複数）にはエタノール、イソプロパノール、ベンジルアルコール、グリコール（例えばポリエチレングリコール類、プロピレングリコール、エトキシジグリコール等）、油（例えばブドウ種子油、ホホバ油、ココナッツ油、ゴマ油、鉱油等）、グリセロール、脂肪酸エステル類、ジメチルイソソルビド、ならびに前記のキャリヤーの少なくとも１種類を含む組み合わせが含まれ得る。

その配合物中にその配合物の総重量に基づいて９９．９９重量％以下、例えば８０重量％〜９９．９９重量％の量で存在することができるそのキャリヤーは、上記で論じたような望まれる最終的な配合物の様々な形態のいずれかであることができる。

水および油に加えてキャリヤー構成要素には液体皮膚軟化薬、固体皮膚軟化薬、溶媒、湿潤薬、シックナー、粉末、芳香、臭いマスキング剤、着色剤、分散剤、潤滑剤、シリケート類、ならびに前記のものの少なくとも１種類を含む組み合わせが含まれ得る。典型的な溶媒には、エチルアルコール、イソプロパノール、エトキシジグリコール、およびジメチルイソソルビド、およびアセトンが、乾燥の予防および／または軽減として、および／または皮膚の保護のために、例えばステアリルアルコール、セチルアルコール、アセチル化ラノリンアルコール類、ステアリン酸、パルミチン酸イソブチル、ステアリン酸イソセチル、パルミチン酸セチル、ステアリン酸イソプロピル、ステアリン酸ブチル、ラノリン、カカオ脂、シアバター、油（例えばオリーブ油、ヒマワリ種子油、アボカド油、鉱油）、ワセリン、およびミリステート（例えばミリスチン酸ブチル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸ミリスチル）、ならびに前記のものの少なくとも１種類を含む組み合わせが含まれる。

本発明の１態様において、その組成物は腸において有効薬剤を放出するための腸溶コーティングと共に配合される。

添加剤
ヒアルロン酸（ＨＡ）
皮膚構造内で、ＨＡは顕著な展性の物理的特性および優秀な生体適合性特性を有する空間充填、構造安定化、および細胞保護分子として機能する。加えて、高レベルの粘弾性を有するＨＡの構造は、この皮膚の高レベルの水和を保持する役目を果たす。皮膚中の水分含量と皮膚組織内のＨＡのレベルの間には強い相関が存在する。皮膚が（特に皮膚の代謝、内容物および機械的特性における劣化において）老化するにつれて、ＨＡの物理的および生物学的特性に重大な変化があることは、十分に文書で裏付けられている。皮膚の細胞間構造内の存続可能な（ｖｉａｂｌｅ）ＨＡの存在の維持は健康な皮膚の物理的外観の存続可能性に寄与していると信じられている。

別の観点において、多糖分子、例えばＨＡは酵素的および酸化的（フリーラジカル）機序の結果として分解することは十分に文書で裏付けられてきた。従って、多糖、例えばＨＡの分解を予防する役目を果たす局所用配合物を開発することが望ましい。この目的のため、フラボノイド類、例えばフラボン類はこの必要性をそれらの十分に文書で裏付けられた抗ヒアルロニダーゼおよび抗酸化特性により満たす役目を果たし、それによりその分解に寄与する機序に対して保護するＨＡの望ましい機能の存続可能性を維持する役目を果たす。

局所的に、ＨＡは水を貯蔵する特性を有し、それはＨＡを膨潤剤および潤滑剤として有益なものにし、皮膚の状態の知覚可能かつ目に見える向上をもたらす化粧品中へのそれの組み込みを可能にする。使用において、それは薄い透明な粘弾性表面被膜を形成し、それは若く健康な皮膚の特徴：柔軟性、弾性および張りを保つのを助ける。増大した皮膚の水和は、角質層の密に詰まった構造を膨潤させ、開く（ｏｐｅｎ ｕｐ）ことができ、それは本明細書で記述した局所用配合物の有効フラボノイド成分の透過の増大をもたらす。

その配合物はさらに添加剤（単数または複数）を、その特定の添加剤（単数または複数）が有効成分（単数または複数）に悪影響を及ぼさない限り含むことができる。その配合物の様々な態様において用いることができるいくつかの可能性のある添加剤（単数または複数）には、以下のものが含まれる：
抗酸化剤（単数または複数）（例えば、トコフェロール、トコフェリルアセテート、ブチルヒドロキシトルエン、メタ重亜硫酸ナトリウム、チオ流酸ナトリウム、および没食子酸プロピル）、
界面活性剤（単数または複数）（例えば、相の間の界面張力を低減する、および／またはその配合物の安定性を向上することができる、および／または乳化剤として作用することができる、例えばステアリン酸グリセリル、ステアリルアルコール、セチルアルコール、ステアリン酸、ジメチコーン、シリコン（シロキサン）界面活性剤、ポリソルベート類、ラウレスナトリウム）、
皮膚条件調節剤（単数または複数）、例えばシリコン油、
保存剤（単数または複数）（例えばメチルパラベン、プロピルパラベン、ベンジルアルコール、塩化ベンザルコニウム等）、
湿潤剤（単数または複数）または皮膚軟化薬または保湿剤、例えばグリセロール、ポリエチレングリコール、グリセリン、ソルビトール、鉱油、ミリスチン酸イソプロピル等、
緩衝剤（単数または複数）（例えばリン酸緩衝剤、クエン酸緩衝剤、および酢酸緩衝剤等）、ｐＨ調節剤、例えばトリエタノールアミン、水酸化カリウム、水酸化ナトリウム）、塩酸およびリン酸等、
ゲル化剤、例えばヒドロキシプロピルエチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース（ｈｙｄｒｏｘｙｒｔｈｙｌ ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ）、ポリアクリル酸ポリマー類、およびポロキサマー類等。

ビタミン（単数または複数）（例えば、Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ、Ｋ等）、
鉱質（単数または複数）、植物抽出物（単数または複数）（例えばアロエベラ、ウィッチヘーゼル、ニワトコ、キュウリ、カモミール等）、
抗炎症剤（単数または複数）、
皮膚軟化薬（単数または複数）、
保湿剤（単数または複数）、
皮膚保護剤（単数または複数）、
シリコン（単数または複数）、
鎮痛薬（単数または複数）、
皮膚透過増進剤（単数または複数）、例えばプロピレングリコール、トランスクトール（ｔｒａｎｓｃｕｔｏｌ）、ミリスチン酸イソプロピル、
着色剤（単数または複数）、例えば黄色５号、
芳香（単数または複数）（または香料）
ろう剤（単数または複数）（例えば蜜ろう、パラフィンろう等）、
噴射剤（単数または複数）（例えば圧縮空気、炭化水素（例えばプロパン、ブタン、イソブテン等）、
サンスクリーン成分（単数または複数）（例えば無機性および／または有機性サンスクリーン剤、例えば酸化チタン類、酸化亜鉛類、アボベンゾン、オキシベンゾン、ホモサラート、オクトクリレン（ｏｃｔｏｃｒｙｌｅｎｅ）、オクチノキサート等）、または
前記のものの少なくとも２種類を含む組み合わせ。

サンスクリーン剤に関して、その配合物はその配合物の総重量に基づいて０．０１重量％〜２０重量％、具体的には０．１重量％〜約１０重量％、より具体的には０．５重量％〜５重量％のサンスクリーン成分（単数または複数）を含有することができる。皮膚用製品に関して、それらのビヒクルは脂溶性であり、すなわちそれは有効に皮膚層を透過してそのフラボノイド類を皮膚の脂質に富む層に送達することができる。分散した、および／または可溶化されたフラボノイド類を混合コロイド形態中に含有する配合物は、そのフラボノイド類が使用者の皮膚内に優先的に吸収され、一方で亜鉛およびチタン酸化物を含有する相は吸収されないがその皮膚の表面の外部に紫外線保護薄膜防壁を形成するであろうように、チタンおよび亜鉛の酸化物と一緒にビヒクルに添加することができる。

本発明の濃縮物は、それを油／水（“ｏ／ｗ”）および／または水／油／水（“ｗ／ｏ／ｗ”）エマルジョン中に添加することにより配合物中に装填する（ｌｏａｄｅｄ）ことができ、それは分散剤（単数または複数）、乳化剤、界面活性剤等を含むことができる。

そのキャリヤーは比較的単純な溶媒または分散剤（例えば油および有機性アルコール類）を含むことができるが、そのキャリヤーがより局所適用の助けとなる組成物、特にそれが適用された皮膚上でその適用を限局化して発汗に対するいくらかの耐性を提供するように薄膜または層を形成するであろう組成物、および／またはその有効成分の皮膚への（例えば皮膚の表面下層への）送達および皮膚の脂質層中への透過を助ける組成物を含むことが一般に好まれることを特筆する。多くのそのような組成物は、ローション、クリーム、スプレーおよびゲルの形をとる。典型的な組成物には、水および／またはアルコール、皮膚軟化薬（例えば炭化水素油、炭化水素ろう、シリコン油、植物性脂肪および／または油、動物性脂肪および／または油、海産物性（ｍａｒｉｎｅ）脂肪および／または油、グリセリド誘導体、脂肪酸類、脂肪酸エステル類、アルコール類（例えば多価アルコール類、アルコールエステル類）、ラノリン（誘導体を含む）、エステル類（例えば多価エステル類、ろうエステル類）、ステロール類、リン脂質、ならびに前記のものの少なくとも１種類を含む組み合わせ）を、ならびに一般に乳化剤（非イオン性、陽イオン性または陰イオン性）も含有するローションが含まれる。これらの同じ一般的成分は、その成分の異なる比率の利用により、および／または増粘剤、例えばガム類または他の形態の親水性コロイド類を含ませることにより、ローションではなくクリームの中に、またはゲルの中に配合することができる。

１態様において、その配合物はその平面状化合物を溶解した形態および分散した（例えば微粒子）形態の両方で含む。その溶解した形態（単数または複数）は皮膚層を透過して生理活性になり、一方でその分散した化合物はその溶解した化合物が消費された際に持続的な送達を維持するために溶解した濃度レベルを維持するためのリザーバーの役目を果たすことができる。

配合物は、その配合物の総重量に基づいて約２．０重量％のアピゲニンおよび約０．５重量％のアスコルビン酸、約０．５重量％のトコトリエノールアセテートおよび約０．２５重量％のグリコール酸を含み、残りの部分はビヒクルの構成要素を含む、レシチンに基づく水中油型クリームを用いて調製することができる。

別の例において、その配合物は、その配合物の総重量に基づいて３．０重量％のレシチン、約０．５重量％のアスコルビン酸、約０．５重量％のトコトリエノールアセテート、約０．２５重量％のグリコール酸、ならびに合計約８重量％の亜鉛およびチタンの酸化物を含み、残りの部分はビヒクルの構成要素を含む、レシチンに基づく水中油型クリームを用いて調製することができる。

その組成物はさらに以下のものを含んでもよい：（ｉ）界面活性剤、ビタミン類、鉱質、植物抽出物、抗炎症剤、植物抽出物の濃縮物、皮膚軟化薬、保湿剤、皮膚保護剤、湿潤剤、シリコン類、皮膚を鎮静させる（ｓｏｏｔｈｉｎｇ）成分、皮膚透過増進剤、着色剤、香料（芳香）、保存剤、ｐＨ調節剤、および前記のものの少なくとも１種類を含む組み合わせからなる群から選択される添加剤；および／または（ｉｉ）酸化チタン、酸化亜鉛、または前記のものの少なくとも１種類を含む組み合わせ。

一般に、その平面状化合物の組成物は、その配合物の総重量に基づいて０．０１重量パーセント（重量％）以上、具体的には１重量％以上、例えば０．１重量％〜１０または２０重量％、具体的には０．５重量％〜８重量％、より具体的には２重量％〜５重量％の平面状化合物を含むことができる。その配合物は、その配合物の総重量に基づいて０．０１重量％以上（例えば０．０１重量％〜２０重量％）の平面状化合物、具体的には０．０５重量％〜１５重量％、より具体的には０．１重量％〜１０重量％の平面状化合物、さらにもっと具体的には０．５重量％〜４重量％の平面状化合物、さらにもっと具体的には１重量％〜２重量％の平面状化合物を含むことができる。

本明細書で開示される範囲は、包括的かつ組み合わせ可能である（例えば、“２５重量％まで、またはより具体的には０．５重量％〜５重量％”は端点および“５重量％〜２５重量％”の範囲の全ての中間の値を含む、等）。“組み合わせ”はブレンド、混合物、合金、反応産物等を含む。さらに、本明細書における用語“第１”、“第２”等はいずれかの順序、量、または重要性を意味するのではなく、１つの要素を別の要素と区別するために用いられており、本明細書における用語“ａ”および“ａｎ”は量の限定を意味するのではなく、言及された項目の少なくとも１個の存在を意味する。接尾辞“（単数または複数）”は、本明細書で用いられる際、それが修飾する用語の単数および複数の両方が含まれ、それによりその用語の１個以上が含まれる（例えば、薄膜（単数または複数）には１個以上の薄膜が含まれる）ことを意図している。本明細書全体にわたる“１態様（ｏｎｅ ｅｍｂｏｄｉｍｅｎｔ）”、“別の態様”、“１態様（ａｎ ｅｍｂｏｄｉｍｅｎｔ）”等への言及は、その態様に関連して記述されている特定の要素（例えば特徴、構造、および／または特性）が本明細書で記述される少なくとも１個の態様中に含まれ、他の態様中に存在していてよく、または存在していなくてよいことを意味する。加えて、その記述された要素は様々な態様においてあらゆる適切な様式で組み合わせられてよいことは理解されるべきである。本明細書で用いられる際、用語“（メタ）アクリレート”はアクリレートおよびメタクリレート基の両方を含む。

本発明の配合物の例を表ＶＩにおいて述べる。

好都合な局所用組成物
以下の組成物は本発明の好都合な態様である。他の態様において、濃縮物を作製するために、別のフラボノイド、例えばルテオリン、またはフラボノイド類の組み合わせをアピゲニンの代わりに用いることができ、別の界面活性剤をポリソルベート８０の代わりに用いることができる。本発明のさらに別の態様において、本発明の他の平面状化合物、例えばポリフェノール類をアピゲニンの代わりに用いることができる。

その配合物の総重量に基づいて１〜２０重量％（好都合には約１０重量％）のアピゲニン／ポリソルベート８０濃縮物、０〜９９．９重量％（好都合には約４５重量％）のジメチルスルホキシド、および水を含む残りの部分を含むジメチルスルホキシド−水溶液を用いるアピゲニン配合物。

その配合物の総重量に基づいて１〜２０重量％（好都合には約１０重量％）のアピゲニン／ポリソルベート８０濃縮物、０〜６０重量％（好都合には約４５重量％）のジメチルスルホキシド、２〜４重量％（好都合には約３重量％）のヒドロキシプロピルセルロース（望まれる粘性を達成するのに十分な量）、および水を含む残りの部分を含むジメチルスルホキシド−水溶液を用いるアピゲニンゲル配合物。

その配合物の総重量に基づいて１〜２０重量％（好都合には約１０重量％）のアピゲニン／ポリソルベート８０濃縮物、０〜８０重量％（好都合には約６６重量％）のエタノール、０〜２０重量％（好都合には約１０重量％）のプロピレングリコール、および水を含む残りの部分を含むエタノール−水溶液を用いるアピゲニン溶液配合物。

その配合物の総重量に基づいて１〜２０重量％（好都合には約１０重量％）のアピゲニン／ポリソルベート８０濃縮物、０〜８０重量％（好都合には約６６重量％）のエタノール、０〜２０重量％（好都合には約１０重量％）のプロピレングリコールを含み、約０．５〜約２．５重量％のヒドロキシエチルセルロースまたは約０．５〜約２．５重量％のヒアルロン酸ナトリウムまたは約０．５〜約２重量％のｃａｒｂｏｐｏｌ（望まれる粘性を達成するのに十分な量）のいずれかによりゲル化されており、水を含む残りの部分を含む、エタノール−水溶液を用いるアピゲニンゲル配合物。

その配合物の総重量に基づいて１〜２０重量％（好都合には約５〜１０重量％）のアピゲニン／ポリソルベート８０濃縮物、０〜２０重量％（好都合には約１０重量％）のエトキシジグリコール、０〜２０重量％（好都合には約１２重量％）の乳酸ミリスチル、０．１〜１．０重量％（好都合には約０．４重量％）のｃａｒｂｏｐｏｌ ９８０、０．１〜１．０重量％（好ましくは約０．３重量％）のＰｅｍｕｌｅｎ ＴＲ１、約０．１７重量％のメチルパラベン、約０．０３重量％のプロピルパラベン、約０．１重量％のＥＤＴＡ、０〜１５重量％（好都合には約１０重量％）のシクロメチコン、０〜１０重量％（好都合には約２重量％）のオレイルアルコール、約０．１重量％のブチルヒドロキシトルエン、および水を含む残りの部分を含む（最終的なｐＨは希ＨＣｌまたは１０％水酸化ナトリウム溶液を用いて約６．５に調節されている）、アピゲニンエマルジョン配合物。Ｐｅｍｕｌｅｎポリマー類は、アクリル酸およびＣ１０〜Ｃ３０アルキルアクリレートの高分子量の架橋されたコポリマーである。Ｃａｒｂｏｐｏｌ ９８０は架橋されたポリアクリレートポリマーである。

機能性食品／食事栄養補助剤
可溶化された化合物、例えばポリフェノール濃縮物、またはそのような濃縮物の配合物は、多くの機能性食品製品、例えば単離された栄養素、栄養強化食品および食事栄養補助剤のために用いることができる。本明細書で用いられる際、機能性食品は、疾患の処置および予防の両方に関して科学的に証明された健康への利益を有するあらゆる非毒性の食品抽出物栄養補助剤である。

食品／医療用食品
医療用食品は、医師の監督の下で消費される、または内部に投与されるために配合されている。それらは、認められた科学的原理に基づいて独特の栄養要求が医学的評価により確立されている疾患または病気の特定の食事管理に関して意図されている。医療用食品は、口を通して、または経管栄養法により摂取することができる。医療用食品は常に特定の疾患を有すると診断された人々に関する特定の栄養要求を満たすように設計されている。平面状化合物の濃縮物、例えばフラボノイド濃縮物、またはその配合物は、医療用食品において用いることができる。例えば、ポリフェノール（例えばフラボノイド）濃縮物の飲料（例えばアルコールタイプ）への添加は、可溶性が乏しいが有益なポリフェノール類の経口送達のための手段として役立つであろう。濃縮物を含む機能性飲料および機能性ショット（ｓｈｏｔｓ）、遺伝学的に設計された“デザイナー”食品、ハーブ製品、ならびに加工された製品、例えばシリアル、スープ、および飲料も、本発明に含まれる。

化粧品／コスメシューティカル
例えばポリフェノール濃縮物が含まれる本発明の濃縮物または配合物は、化粧用製品および皮膚科の製品のような多くの製品において用いることができ、それにはファンデーション、サンスクリーン製品、日光を用いずに皮膚を日焼けさせる製品（ｓｕｎｌｅｓｓ ｓｋｉｎ ｔａｎｎｉｎｇ ｐｒｏｄｕｃｔｓ）、脱毛製品、クリーム（例えば保湿クリーム、火傷クリーム（ｂｕｒｎ ｃｒｅａｍｓ）、皮膚の利益になるクリーム、ナイトクリーム、皮膚科用クリーム等）、美容液、液体、利益になるローション、軟化剤、ゲル、スプレー、泡、溶液、石鹸、シャンプー、軟膏、リップスティック、洗浄剤、トナー、マスク、毛髪用製品、指の爪用の製品、ならびに他の化粧用製品または適用が含まれる。

ＩＶ−キット
この発明の別の観点によれば、生理活性薬剤の送達のための配合物を形成するためのキットが提供される。本発明のキットは、濃縮物溶液の第１の分割量（ａｌｉｑｕｏｔ）部分、およびキャリヤーの第２の分割量部分を含む。混合した際、その第１および第２の分割量部分はその中に含有される生理活性薬剤の送達のための組成物を形成する。保存剤をその第１および第２の分割量部分の一方の中に組み込むことができる。そのキャリヤーは典型的には皮膚科用、経口用、注射用、またはエアロゾル用キャリヤーである。

本発明のキットは、好都合には、それぞれがその反応混合物の第１および第２の分割量部分を含有する第１および第２の注射筒を有する二重注射器（ｄｏｕｂｌｅ ｓｙｒｉｎｇｅ）を用いて提供される。二重注射器の構成は、本発明に従う配合物の調製において用いることができる。例えば、フラボノイド、例えばアピゲニンの濃縮物溶液を一方の注射器の筒の内部に収容し、一方でキャリヤーを他方の注射器の筒の内部に収容することができる。その注射器は、その混合物を一方の注射筒から別の注射筒に約３０サイクル交互に移動させることによりその内容物を混合することができるように、互いに連結されている。その濃縮物溶液は少なくとも１年間安定であり、そのキャリヤーは少なくともその時間の間、一部の場合では無期限に安定である。その生理活性薬剤の無菌性、幅広い適用可能性、安定性、および使用の容易さの維持は、そのような二重注射器システムの特質である。

Ｖ−本発明の化合物および配合物の使用
フラボノイド類
フラボノイド類は、それらがフリーラジカル除去剤、抗酸化剤、スーパーオキシドアニオン、紫外線吸収剤、血管拡張剤、抗ヒアルロニダーゼ性（ヒアルロニダーゼを阻害することによりヒアルロン酸の分解を阻害する）、抗コラゲナーゼ性（コラゲナーゼを阻害することによりコラーゲンの分解を阻害する）、抗エラスターゼ性（エラスターゼを阻害することによりエラスチンの分解を阻害する）であり、脂質過酸化物ラジカルを除去するため、多数の療法的適用を有する。フラボノイド化合物はコラーゲンの構造の強化において有効であることも知られている。さらに、フラボノイド類は抗変異原性、抗血管新生、抗腫瘍形成、抗炎症、抗細菌および抗ウイルス作用を有する。その抗炎症作用には、ＴＮＦ−アルファ、ＩＬ−ベータ、ＣＯＸ−２、プロテインキナーゼＰＫＣ、ｉＮＯＳ、ならびにヘルパーＴ細胞Ｔｈ１およびＴｈ１７の阻害が含まれる。フラボノイド類、特にアピゲニンはｐ５３の刺激物質である。研究者は、アピゲニンが細胞周期のＧ１およびＧ２／Ｍ期における可逆的な細胞周期の停止を誘導することを見出した。

単独または他の予防的および／または療法的有効薬物との組み合わせでのフラボノイド類は、ヒトが含まれる哺乳類においてほとんどの一般的な病気、例えば癌、自己免疫疾患、糖尿病、潰瘍、心血管疾患、アテローム性動脈硬化症、および肝疾患の処置または予防において有効である。その化合物は抗血栓活性も有する。

皮膚疾患
この開示は、フラボノイド類、例えばアピゲニンを皮膚科学的に許容できるｐＨ範囲において医薬的に意味のある濃度で含有する局所用配合物を作製するための方法を提供する。そのフラボノイド類は溶解した形態である。その局所適用配合物は、十分なフラボノイドを哺乳類（例えばヒト）の組織中に（例えば哺乳類の角質組織中に）送達するために、ゲル、軟膏、溶液、ローション、クリーム、スプレー、皮膚パッチ、経皮パッチ等の形態の組成物であることができる。

局所適用量
典型的な局所用量は、１から１０ｍｇ／ｃｍ^２まで、好ましくは１から５ｍｇ／ｃｍ^２まで、最も好ましくは１から３ｍｇ／ｃｍ^２までの範囲である。その投与量は、投与の条件および方式に従って様々である。ＦＤＡサンスクリーン局所試験において用いられる局所用量は、露出した皮膚に適用される２ｍｇ／ｃｍ^２の配合物である。“Re: Tentative Final Monograph for OTC Sunscreen ”, Food and Drug Administration (U.S.). 1998-09-11. 2009-09-25に訂正された。身長５フィート４インチ（１６３ｃｍ）および体重１５０ポンド（６８ｋｇ）、ウエスト３２インチ（８２ｃｍ）の“平均的な”成人の体格を仮定するならば、鼠径部領域を覆う水着を着ているその成人は覆われていない身体領域に２９ｇ（おおよそ１オンス）を均等に適用するべきである。顔のみを考えると、これは平均的な成人の顔に関して茶さじ約１／４〜１／３杯分に換算される。より大きな人はこれらの量をそれに応じて調整するべきである。

一般に冒された皮膚に適用されるべき局所用医薬品の量に関して、皮膚科医は推奨される手引きとして“指先単位”を参照する。１指先単位は、標準的なチューブから成人の指先に沿って搾り出された局所用配合物の量である。１指先単位はおおよそ５００ｍｇの配合物（標準的な５ｍｍノズルを有するチューブ）であり、冒された領域を覆うのに必要な単位の数に関する推奨が提供される。例えば、頭皮上の乾癬を十分に覆うのには３指先単位が必要であり、一方で脚および足全体に関して８指先単位が必要である。この方法は、患者に彼らの局所用医薬品をより正確に投与するための手段を提供する。

太陽放射による皮膚の損傷の予防および処置
フラボノイド、例えばアピゲニンおよび／またはルテオリンの可溶性の形態は、損傷（光老化）を予防するために、または損傷を受けた皮膚マトリックスを修復するために、すぐに皮膚中に透過し、皮膚により吸収されることができる。下記の実施例１５で示すように、本発明の配合物はフラボノイドの著しい皮膚透過を可能にする。

典型的にローションおよびクリームを構成する賦形剤中でのアピゲニンおよび／またはルテオリンの低い可溶性は、望まれる量の溶解した状態のフラボノイドを含むそのような組成物の形成を困難にする。１態様において、その配合物は、生きた皮膚マトリックス中に透過して皮膚組織の損傷を最小限にして、または排除して生きた皮膚を紫外線への曝露により引き起こされる損傷から保護する、および／または予め透過する（ｐｒｅ−ｐｅｎｅｔｒａｔｅ）ために、ほぼ中性のｐＨにおいて十分な量の可溶化されたフラボノイドを含有する。その局所用配合物は個人に、好ましくはその個人の皮膚への局所適用、経口（例えば食品栄養補助剤として）等により投与することができる。その配合物は、紫外線損傷を予防するために、例えばフリーラジカル、活性酸素種、および／または他の酸化性の種を阻害するために有効な量で投与することができる。

その抗皮膚癌活性に関して、アピゲニンは非常に低い濃度（約５０μＭ未満）においてさえも有効に作用する。アピゲニンは、前立腺癌、乳癌、肺癌、白血病、甲状腺癌および肝臓癌が含まれる様々な癌細胞の主な特徴である細胞増殖および血管新生の間にアポトーシスおよび壊死の機序に影響を及ぼすことにより、抗増殖および細胞毒性作用を示す。

機序
フラボノイド類、例えばアピゲニンの主な機序は、ｐ５３の安定性を増大させ、それによりＧ１およびＧ２／Ｍ細胞周期停止の両方を誘導するそれらの能力、ならびにその十分に文書で裏付けられた抗炎症、抗酸化、非毒性、および非変異原性の特性であると信じられている。これらの細胞周期停止は、皮膚からの洗浄またはそれの拡散によるアピゲニンの除去の後、完全に可逆的である。

アピゲニンがＧ１およびＧ２／Ｍ細胞周期停止の両方を引き起こすという事実を考慮すると、アピゲニンの化学予防活性の本質は、ＤＮＡ損傷および腫瘍促進因子の存在下で十分な内在性の、および人為的に課した細胞周期チェックポイントが存在することを確実にすることにより癌の開始および進行を阻害することである可能性がある。太陽光曝露の前の皮膚のアピゲニンおよびルテオリン処置は、細胞が通常ＤＮＡ損傷に応答してＧ１およびＧ２／Ｍで停止する時間を延長する可能性がある。これらのフラボン類はＧ１期の期間を通常の細胞においてＤＮＡ損傷に応答して起こるＧ１期の期間を越えて増大させ、あるいはこれらのフラボン類は、活性化された癌遺伝子を含有する細胞を、そうでなければ実質的なＤＮＡ損傷の存在下においてさえも細胞周期の進行が継続するであろう場合に、Ｇ１において遅延させる。従って、Ｇ１およびＧ２／Ｍにおいて費やされる時間は細胞にとって効率的に全てのＤＮＡ変異を修復する、従って発癌プロセスを遅くする、または妨げるために重要である。

太陽光損傷の作用は生涯にわたって蓄積するため、全てのヒトおよび動物の癌において最も一般的に変異している遺伝子である腫瘍抑制タンパク質ｐ５３は、人がアピゲニンおよび／またはルテオリンの局所適用を用いる時までに一部の角化細胞において既に不活性化されている可能性がある。これらのフラボン類の作用はＧ１停止においてｐ５３に依存し、Ｇ２／Ｍ停止においてｐ５３に依存しないため、角化細胞が既に不活性化されたｐ５３遺伝子を有する場合、アピゲニンは有糸分裂の間の追加の変異、転座、および／または染色体喪失を予防するために前悪性細胞のこれらの小さい焦点においてＧ２／Ｍ停止を強めるであろう。加えて、アピゲニンおよび／またはルテオリンはその保護作用をＵＶ−Ｂ／Ａ太陽光照射に応答して生成されたフリーラジカルを除去することにより発揮する可能性がある。

アピゲニン処置はＵＶＢにより開始されるアポトーシス応答を増進することができると信じられている。理論により束縛されるわけではないが、アピゲニンの化学予防作用は、皮膚癌のアポトーシスプロセスの主な要因であるｐ５３の安定性を著しく増大させることにより紫外線に誘導されるアポトーシスを増進するその能力により説明される。従って、アピゲニンを生存可能な表皮または全皮膚層中に皮膚癌の予防において有効であるような医薬的に意味のある濃度で送達する必要性が存在する(Li B.; Birt D.F. ; Pharmaceutical, Volume 13, Number 11, November 1996, pp. 1710-1715(6))。

本明細書で開示される際、フラボノイド類、特にアピゲニンおよび／またはルテオリンを含有する局所適用のための組成物は、太陽放射（ＵＶＡおよび／またはＵＶＢ）に対する曝露に起因する皮膚損傷の予防および／または処置に有用である。アピゲニンおよび／またはルテオリン組成物は、日焼けの予防および処置のための局所用組成物中の他の成分の有効性も増強する。

使用において、その製品は望まれる結果を達成するために１回または多数回の適用で用いることができる。一部の態様において、そのサンスクリーン成分はその配合物の一部であることができ、および／またはそのサンスクリーン成分を含有する薄膜が紫外線放射を遮断または反射することにより追加の完全なスペクトルの紫外線放射保護を提供する役目を果たすような第２の適用として適用することができる。

アピゲニンおよびルテオリンは細胞内で細胞周期に対して機能するため、どちらも単に太陽光中の紫外線エネルギーを吸収、遮断または反射するための細胞の外側上の防壁として機能する他のサンスクリーン剤と組み合わせることができるであろう。従って、可逆的な細胞周期調節剤であるアピゲニンおよび／またはルテオリンの局所適用は、皮膚癌の予防のための有用かつ新規のアプローチであり、現在市場に出されている局所用サンスクリーン製品と順次的に、またはそれとの組み合わせで用いることができる。

これらのフラボノイド類は、それらの抗酸化、抗炎症、紫外線皮膚保護および他の望ましい特性に関して、局所用配合物への添加剤として例外的に有益である。従って、アピゲニンおよびルテオリンの局所適用は、皮膚癌の予防／処置のための有用かつ新規のアプローチであり、現在市場に出されている局所用サンスクリーン製品の前に、またはそれとの組み合わせで用いることができるであろう。

理論により限定されるべきではないが、その配合物は、例えば紫外（ＵＶ）線または太陽光への曝露により引き起こされる皮膚癌を処置または予防するために用いることができる。

本明細書で開示されるのは、フラボノイド類を含有する組成物、または皮膚癌ならびに子宮頚癌および乳癌が含まれるがそれらに限定されない他の局所的な癌の予防および／または処置のための局所適用である。その組成物は、皮膚層中に透過して例えばｐ５３の安定性を増大させて皮膚癌および他の局所的な癌を予防および処置するための、医薬的に十分な量のアピゲニンを含有する。

抗酸化剤であるアピゲニンおよびルテオリンのＵＶＢ光保護作用は、適切なビヒクル中での別個の混合物中で適用された際に重要であると信じられている。フラボノイド（類）は、他の成分と一緒に、日焼けおよび慢性的な紫外線損傷からの保護の提供において、体自身の防御機構を効率的に支持するための自然なアプローチを提供する。鉱物質顔料と組み合わせられたアピゲニンおよび／またはルテオリンの天然の抗酸化剤特性および抗癌特性は、紫外線損傷および皮膚癌の危険性を低減するための相乗的な光保護作用を提供する。抗酸化剤、例えばビタミンＥが含まれる他の天然成分および保湿剤（ｍｏｉｓｔｕｒｉｚｅｓ）を添加して、紫外線保護を、そして皮膚の鎮静も増進する相乗作用を作り出すことができる。

フラボノイドおよびそのフラボノイド構成要素の送達を可能にするための皮膚科学的に許容できるキャリヤーを含む局所用配合物を哺乳類の角質組織に適用することを含み得る、日光曝露の作用を低減および／または予防する方法も、本明細書で開示される。その局所用化粧用組成物は、２回、３回、またはより多い回数適用してもよい。

癌
癌化学予防剤の３つの理想的な質は、以下：１）それが低減した癌の発生率と関係することが知られている食品中に存在する天然化合物であること；２）それが既知の作用機序を有すること；および３）その作用が可逆的であることである。フラボノイド類、例えばアピゲニンおよびルテオリンは３つの基準全てを満たすと信じられている。

本発明の配合物は、癌の予防ならびに癌の処置のために用いることができる。その配合物は、皮膚癌（日光性角化症、メラノーマ、基底細胞癌が含まれる）、卵巣癌、子宮頚癌、前立腺癌、乳癌、肺癌、白血病、甲状腺癌、肝臓癌および神経芽細胞腫が含まれる脳癌の処置または予防に有用である。

他の皮膚障害の処置の方法
本発明の化合物および配合物は、乾癬の処置に有用である。実施例１５は、局所用配合物が療法的価値があるのに十分な濃度でヒトの皮膚を透過することを実証している。

この発明の配合物および組成物の局所使用により処置または予防することができる追加の皮膚科学的障害および関連する苦痛／病気には以下のものが含まれるが、それらに限定されない：アクネ、脱毛症、アトピー性皮膚炎／湿疹、皮膚エリテマトーデス、皮膚の敏感化および過敏、乾燥皮膚（乾皮症、魚鱗癬）、真菌感染、ならびに酒さ、接触皮膚症、乾癬が含まれる自己免疫の苦痛、ならびに関節炎。アピゲニン／フラボノイド類の局所投与は、優れた生物学的利用能を可能にする。従って、これらの局所配合物は、高価でより望ましくないステロイド類および細胞毒性薬物に対する代替物である。

他の障害の処置の方法
本発明の化合物、組成物および配合物は、他の自己免疫疾患、例えば狼瘡、関節炎、アレルギーおよび喘息の処置のために用いることもできる。本発明のフラボノイド配合物は、自己免疫疾患における有効性を有する新規の補助療法である。食事性植物由来のＣＯＸ−２およびＮＦ−κＢ阻害剤、例えばアピゲニンの生物学的利用能は、狼瘡ならびに関節リウマチ、クローン病、および乾癬のような他のＴｈ１７に媒介される疾患における炎症を抑制するのに、ならびにＣＯＸ−２を過剰発現する炎症に基づく腫瘍（例えば大腸、乳房）の予防において役立つ。アピゲニンは、自己反応性Ｔｈ１およびＴｈ１７細胞の拡張に関する自己抗原の提示を阻害することにより狼瘡を抑制する。この発明の配合物は、自己免疫適応症／疾患の処置のためにアピゲニン／フラボノイド類を送達する新規の手段を提供する。その投与は、他の自己免疫療法、例えば（例えば乾癬に関する、または関節リウマチに関する）抗ＴＮＦ抗体への付属としてであることができる。

その化合物および配合物は、神経性障害および神経変性障害の処置にも有用である。いくつかの調査研究は、アルツハイマー病が含まれるさまざまな神経変性障害におけるアピゲニンおよびルテオリンの抗炎症作用およびそれらの神経保護／疾患修正特性に関する支持を提供してきた。

別の態様において、この発明の化合物および組成物は、アレルギー性疾患ならびに細菌感染の処置に有用である。

本発明のフラボノイド類を用いて処置、予防または改善され得るＴＮＦαが関連する病気の例には以下の病気が含まれるが、それらに限定されない：関節リウマチ、若年性関節リウマチ、骨関節炎、脊椎関節症（ｓｐｏｎｄｙｌｏａｒｔｈｒｏｐａｔｉｅｓ）、炎症性腸疾患、慢性心不全、糖尿病、全身性エリテマトーデス、強皮症、サルコイドーシス、多発性筋炎／皮膚筋炎、乾癬、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群、急性骨髄性白血病、パーキンソン病、エイズ認知症複合、アルツハイマー病、抑うつ、敗血症（ｓｅｐｓｉｓ）、壊疽性膿皮症、敗血症（ｈｅｍａｔｏｓｅｐｓｉｓ）、敗血症性ショック、ベーチェット症候群、移植片対宿主疾患、ブドウ膜炎（ｕｖｅｉｔｕｓ）、ヴェグナー肉芽腫症、シェーグレン症候群、慢性閉塞性肺疾患、喘息、急性膵炎、歯周疾患、悪液質、癌、中枢神経系損傷、ウイルス性呼吸器疾患、および肥満。

本発明のフラボノイド類を用いて処置、予防または改善されるべきＩＬ−１βが関連する病気の例には以下の病気が含まれるが、それらに限定されない：関節リウマチ、敗血症、歯周疾患、慢性心不全、多発性筋炎／皮膚筋炎、急性膵炎、慢性閉塞性肺疾患、アルツハイマー病、骨関節炎、細菌感染症、多発性骨髄腫、骨髄異形成症候群、ブドウ膜炎、中枢神経系損傷、ウイルス性呼吸器疾患、喘息、抑うつ、および強皮症。

フラボノイド類のＩＬ−４およびＩＬ−１３合成への阻害活性のため、フラボノイド類の摂取は量および質に依存してアレルギー症状を改善する、またはアレルギー性疾患の開始を予防することができることが予想され得る(Int Arch Allergy Immunol. 2004 Jun; 134(2): 135-40)。

アピゲニンはヒトの歯周靭帯（ｈＰＤＬ）細胞において抗炎症活性を有し、ヘムオキシゲナーゼ−１（ＨＯ−１）１の作用が関わる新規の機序により作用する。従って、アピゲニンは喫煙および歯垢と関係する歯周疾患の予防および処置において宿主調節剤（ｈｏｓｔ ｍｏｄｕｌａｔｏｒｙ ａｇｅｎｔ）としての利益を有する(Gil-Saeng Jeong et al.; Anti-inflammatory effects of apigenin on nicotine- and lipopolysaccharide-stimulated human periodontal ligament cells via heme oxygenase-1., International immunopharmacology, Vol.:9. Nov. 2009)。

別の態様において、この発明の化合物および配合物は毛髪の成長を促進するのに有用である可能性がある。調査研究は、アピゲニンがＴＧＦ−ベータ１遺伝子の下方制御により毛髪の成長を刺激することを教示している。

この発明の配合物は、動脈硬化の処置および予防においても有用である。

他の有効薬剤
上記の節Ｉ“本発明の化合物”において言及された化合物の、本発明の方法を用いて作製された配合物は、それらの化合物に関して明記された、または既知の適応（使用）のために用いることができる。例えば、本発明におけるようにポリソルベートを用いて作製されたカンプトテシンの配合物は、癌の処置において用いることができる。

実施例１．ポリソルベート類中での可溶性
アピゲニンおよびポリソルベート８０の結果としてもたらされる生成物は、“Ａ／ＰＳ８０”と呼ばれる。Ａ／ＰＳ８０は以下のように形成された：
・未処理のアピゲニン粉末および粘着性の液体ポリソルベート８０（ＰＳ８０）を、約５から１０重量％までのアピゲニン対９５から９０重量％までのポリソルベート８０の比率で、ならびに少量の脱イオン水および場合によりアセトンおよび／またはエチルアルコールを、ビーカー中で混合した。

・次いでこの混合物を徹底的に撹拌して濃厚なペースト様のブレンドを形成した。

・次いでその混合物を撹拌しながら比較的高い温度までゆっくりと加熱した。その加熱は、水を、そしてポリソルベート８０中に存在する揮発性成分も沸騰させて除くことにより成し遂げられた。その加熱プロセスは、その加熱プロセスの結果としてもたらされる発泡によりその混合物がビーカーから溢れるのを避けるため、注意深く実施された。

・揮発性物質が除去され、約２００〜３００℃を越える温度まで加熱すると、全ての固体のアピゲニンがポリソルベート８０混合物中で可溶化されているような暗褐色の透明な液体が結果としてもたらされた。

・周囲温度まで冷却すると、結果として粘着性の褐色の透明な液体が生じた。アピゲニンの含有量がより高いほど、結果として生じる色はより黒ずんでいた。アピゲニンの少数の結晶のその冷却されたＡ／ＰＳ８０液への添加は、結果として沈殿をもたらさなかった；それにより、Ａ／ＰＳ８０液は過飽和していないことが実証される。

表ＶＩＩにおいて示した公開された溶解度の結果に従って、アピゲニンの水、エチルアルコールおよびスパン８０中における溶解度は以下のように列挙される：(参考文献：Li et at, J of Pharm Sci, Vol.86, No. 6, June 1997)

アピゲニンのＡ／ＰＳ８０中における濃度をＨＰＬＣ−ＭＳにより測定した。アピゲニンの粘着性Ａ／ＰＳ８０液中における４．０５％濃度の計算された値に基づいてアピゲニンのＡ／ＰＳ８０中における濃度を測定し；アピゲニンの含有量は４０．５ｍｇ／ｍｌまたは４０，５００ｐｐｍである。

以下の段落は、Ａ／ＰＳ８０に起因し得る実験観察を列挙する。

・Ａ／ＰＳ８０の標準的な水和されたアピゲニンローション（実質的な濃度のナノ微粒子を含有する）への添加は、飽和可溶性濃度レベルの増大に寄与した。その高められた可溶性レベルは、０．２ミクロンフィルターを通過させた濾液に対して実施された比色試験により定性的に決定された。

・Ａ／ＰＳ８０のＰｕｒｅｌｌ（広く用いられている殺菌液）への添加は、結果としてＰｕｒｅｉｌの高いエチルアルコール含有量に起因し得る容易に認識できるアピゲニン可溶性レベルをもたらした。ポリソルベート８０を用いて達成された可溶性アピゲニンレベルは、水和されたアピゲニンおよび未処理のアピゲニンの両方よりも有意に大きかった。

・Ａ／ＰＳ８０がＰｕｒｅｌｌに添加された後アピゲニンローションが適用された実験は、極めて上手くいった。その考えは、エチルアルコールの好ましい透過および可溶性特性（エチルアルコールは適用後直ちに蒸発すると考えられ、それは皮膚を乾燥させる傾向があるであろうことを特筆する）を利用し、続いて我々のアピゲニン配合物を適用して皮膚の再水和を助けることであった。

ＬＣＭＳ（液体クロマトグラフィー−質量分析）により決定された、選択された溶媒に関する重量％でのアピゲニンの濃度を、表ＶＩＩＩにおいて示す。

追加の試験は、本質的に、ＰＳ８０をアピゲニンと共に約２５０〜３００℃近い高められた温度まで加熱したことの結果としてもたらされたわずかな分解産物が存在していたことを確かめた。

図２は、Ａ／ＰＳ８０溶液と比較した、加熱前のＰＳ８０の統計分析を示す。対照試料および本発明の試料の間でわずかな違いが観察され、これは界面活性剤が分解していなかったことを示す。図２において、検出されたそれぞれの構成要素は点により表されている。ＰＳ８０はポリマーであり、従って多くのオリゴマーを示す。これは、そのプロット上の多数の構成要素または点を説明する。Ｘは、Ａ／ＰＳ８０試料と統計的に異なる質量の特徴を示す。非常に少数の異なる特徴しか観察されず、これはＰＳ８０が有意に分解しなかったことを示している。ごく少数のＸの存在は、対照および本発明の試料の間のわずかな違いを示している。

実施例２．ＨＰＬＣにより決定された、選択されたフラボノイド濃縮物のポリソルベート８０およびＰＥＧ４００中における可溶性
この研究の目的は、ＰＳ８０およびＰＥＧ−４００中の合計６種類の異なるフラボノイド類を定量化することであった。その試料は、熱処理プロセスで必要とされる高められた温度による溶媒の分解の徴候を探すために、定性的にも分析された。

この計画は３つの別個の相に分けられた：方法の検証／開発、個々のフラボン類の定量化、およびＰＳ８０／ＰＥＧ４００の分解の徴候を探すための定性分析。方法開発は、以前に用いられたアピゲニンに関するＨＰＬＣ法の、ＰＥＧ４００またはＰＳ８０のどちらかにおいて定量化されるべき残りのフラボノイド類への適合性を決定するために実施された。

表ＩＸは、ＰＳ８０およびＰＥＧ−４００両方における熱処理プロセスにより配合された調製されたままのフラボノイド濃縮物中の、ＨＰＬＣで測定されたフラボノイド濃度を提供する。

対照のＰＳ−８０およびＰＥＧ−４００基準物質と比較した場合の、表ＩＸの様々なフラボノイド試料における独特の特徴の存在を探すために、統計分析ソフトウェアを用いた。液体クロマトグラフィー質量分析（ＬＣＭＳ）を用いてＰＳ８０およびＰＥＧ−４００分解産物を決定した。それぞれの試料中の独特の構成要素の数は、ヘスペリジン−ＰＥＧ−４００試料における１２個からアピゲニン−ＰＥＧ−４００試料における５５個までの範囲であった。少数の独特の構成要素は、フラボノイド類の添加およびフラボノイドと共に導入されたあらゆる微量の構成要素によるものであると予想された。従って、独特の構成要素の小さい数は、容易に認識できる分解が起きなかったことを示している。

実施例３．追加のフラボノイドポリソルベート配合物
アピゲニンに加えて、ポリソルベート８０を用いた試験をいくつかのフラボノイド化合物を含むように拡張した。表Ｘには、ポリソルベート８０を用いた可溶性試験のために選択されたフラボノイド類の化学的および物理的特性データが含まれる。

表ＸＩは、様々なフラボノイド類を用いたポリソルベート８０可溶性試験の結果の要約を含む。

実施例４．高温処理法による、ポリソルベート８０以外のポリソルベート類中での可溶性
非イオン性界面活性剤は、それらは多価アルコール、例えばソルビタン、スクロース、およびグリセリンの脂肪酸エステル類であるためにそれらは無害であると考えられるため、化粧品および食品において広く用いられている。従って、実施例１で開示した高温処理法による飽和溶解度濃度を高めるため、いくつかの適切な非イオン性のポリソルベート構造の界面活性剤を評価することが決定された。

表ＸＩＩは、脂肪酸でエステル化されたＰＥＧ化ソルビタン（ソルビトールの誘導体）からなるいくつかの非イオン性界面活性剤を列挙する。試験した全ての界面活性剤は油性の液体であり、それは２００℃より高い温度で安定なままであるという基準を満たしていた。同様に、アピゲニンが含まれる全ての試験したフラボノイド類は、乏しい可溶性の特性を有することに基づいて選択された。

温度レベルが２００〜３００℃を超えた際に、フラボノイドスラリー混合物が微粒子の可溶性および色（暗褐色〜赤色）の両方において変化することが観察された。アピゲニンの少数の結晶のその冷却された液体への添加は結果として沈殿をもたらさなかった；それによりその液体が過飽和していないことが実証される。

表ＸＩＩにおいて列挙された非イオン性界面活性剤は、（親水性−親油性バランス）ＨＬＢ値が上がっていく順番で並んでいる。ＨＬＢは、界面活性剤の親水性（“水を好む”）および疎水性（“水を嫌う”）の基の関係に関する実験に基づいた表現である。ＨＬＢ値がより高いほど、その界面活性剤の水溶性がより大きい。大部分はローション（水中油型エマルジョン）またはクリーム（油中水型エマルジョン）である。最も一般的なエマルジョンのタイプである水中油型（ｏ／ｗ）は、しばしばより高いＨＬＢ（好ましくは１２〜１６）の界面活性剤を必要とし、一方で油中水型エマルジョン（ｗ／ｏ）は低いＨＬＢ（好ましくは７〜１１）の界面活性剤を必要とする。１０未満のＨＬＢを有する界面活性剤は油溶性であり、一方で１０より大きいＨＬＢを有する界面活性剤は可溶性である。

表ＸＩＩにおいて言及したように、スパン２０は油中水型局所用配合物に非常に適しており、一方でポリソルベート８０はアピゲニンを水中油型局所用配合物中で可溶化するのに最も適している。

実施例５．熱処理法による有効薬剤のＰＳ８０およびＰＥＧ４００中での可溶性
開示された熱処理プロセスによりＰＳ８０およびＰＥＧ４００中で溶解した有効薬剤の水溶性の増大の可能性を調べるための試験を行った。

表ＸＩＩＩは、濃縮物を形成するための開示された熱処理プロセスを用いた４種類の有効薬剤の可溶性の結果を簡潔に要約しており、それは結果としていくつかの比較的不溶性のフラボノイド類の水溶性の増大をもたらした。

この試験の結果は、その熱処理プロセスが可溶性の乏しい薬物の可溶性、溶解速度、および続いて生物学的利用能を向上させるのに有用であることを示した。

実施例６．高温処理法によるセテアレス−２０中での可溶性
非イオン性界面活性剤であるセテアレス−２０ならびにフラボノイド類であるアピゲニン、ルテオリンおよびケルセチンを用いた可溶性試験を熱処理プロセスを用いて行い、水溶液中での可溶性の増大の可能性を調べた。

セテアレス−２０（ＣＡＳ ＃ ６８４３９−４９−６）はワシントン州レントンに位置するＭａｋｉｎｇ Ｃｏｓｍｅｔｉｃｓ．ｃｏｍから得た。セテアレス−２０は高級飽和脂肪アルコール類（セチル／ステアリルアルコール）のポリオキシエチレンエーテルである。室温においてセテアレス−２０は固体であり、臭いを有しておらず、４０℃で融解する。セテアレス−２０は水中油型エマルジョンを形成し、１５〜１７の範囲のＨＬＢ値を有する。

そのフラボノイド可溶性試験のそれぞれに関して、以下の手順に従った：
１． ６．０グラムの固体白色セテアレス−２０ペレットを５０ｍｌＰｙｒｅｘ容器中に量り分ける。

２． そのセテアレス−２０ペレットを、約１００℃をわずかに超える温度に加熱する（そのペレットの融点は約４０℃である）。

３． ０．０６グラムのフラボノイドを量り分ける。

４． 次いでそのフラボノイドをその融解したセテアレス−２０に添加する。

５． その混合物を２００℃を超える温度までゆっくりと加熱してそのフラボノイド／セテアレス−２０混合物を完全に可溶化する。

６． その可溶化された混合物を約８０℃未満まで冷却し、一方でなお液体状態において、水およびアルコール溶媒の両方を添加して可溶性の観察結果を記録する。結晶の添加により過飽和の観察結果も記録し、結果として沈殿が生じた場合は記録する。

表ＸＩＶは、熱処理で高められた可溶性の観察の実験観察結果を要約する。溶解の容易さは次の順序であるようである：
ケルセチン＞ルテオリン＞アピゲニン
その３種類の試験したフラボノイド類は、セテアレス−２０中で１ｗｔ／ｗｔ％を完全に可溶化するのに２００℃より高い温度を必要とした。全てのフラボノイド濃縮溶液はエチルアルコール中で完全に可溶性であった。また、全てのフラボノイド類溶液は、そのフラボノイド／セテアレス−２０溶液を等量の水と混合した際に完全に可溶化された。３種類の比較的水に不溶性のフラボノイド類のセテアレス−２０中における有意に増大した水溶性濃度が、その熱処理プロセスにより結果としてもたらされた。

実施例７．熱処理プロセスによる濃縮物の形成を用いた、および用いない、水に不溶性の平面状環状有機化合物のポリソルベート８０中での水溶性の比較
水に不溶性の平面状芳香族化合物であるメフェナム酸、ルテオリンおよびアピゲニンを、高められた温度においてポリソルベート８０中で可溶化させて安定な可溶性の濃縮物を形成し、それは周囲温度まで冷却した際に結果として可溶性の濃縮物をもたらし、それは過飽和しておらず、予想される飽和濃度をはるかに超えていた。過飽和に関する試験は、室温における結晶のその溶液への添加により評価された。水をこれらの濃縮物に添加し、それらの水溶液の特徴を記録した。比較目的のため、濃縮物中の成分の同じ量を同じ量の水に別々に添加した後、沸騰近くまで加熱した。室温まで冷却した後、ポリソルベート８０濃縮物および非濃縮物法の両方の視覚的観察結果を比較した。

その濃縮物を調製するために用いられた量と類似の量のメフェナム酸、ルテオリンおよびアピゲニンならびにポリソルベート８０を１７ｍｌの水に添加し、沸騰近くの温度に加熱した際、不透明な溶液が形成された。その溶液を周囲温度まで冷却した際、そのメフェナム酸、ルテオリンおよびアピゲニンのほとんどが水溶液から沈殿した。

比較的水に不溶性の環状有機化合物の水溶液中での可溶性を高めるためのポリソルベート８０の比較的水に不溶性の環状有機化合物との混合における順序および様式に関するそのデータは、その化合物を最初にポリソルベート８０中で加熱して可溶化して濃縮物を形成した後水中で溶解させるべきであることを示している。

実施例８．熱処理プロセスによるノノキシノール−９濃縮物の形成を用いた、および用いない、比較的水に不溶性の平面状環状有機化合物のノノキシノール−９中での水溶性の比較
化粧製品および洗浄製品において一般的に利用されている非イオン性界面活性剤であるノノキシノール−９を用いた可溶性試験を、比較的水に不溶性の平面状芳香族化合物、例えばアピゲニンに加えてメフェナム酸（有効薬剤）、ルテオリン（フラボノイド）のための可溶化剤として試験した。メフェナム酸、ルテオリンおよびアピゲニンを、高められた温度においてノノキシノール−９中で可溶化させて安定な可溶性の濃縮物を形成し、それは周囲温度まで冷却した際に結果として可溶性の濃縮物をもたらし、それは過飽和しておらず、予想される飽和濃度を超えていた。その濃縮物を水に添加し、それらの水溶液の特徴を記録した。濃縮物中の成分の同じ量を同じ量の水に別々に添加した後、沸騰近くまで加熱した。室温まで冷却した後、濃縮物および非濃縮物法の両方の視覚的観察結果を比較した。

表ＸＶＩは、調製されたノノキシノール−９濃度、可溶化に必要な温度、およびその水性濃縮物溶液の透明性に関する観察の結果を要約する。

濃縮物を調製するために用いられた量と類似の量のメフェナム酸、ルテオリンおよびアピゲニンならびにノノキシノール−９を１７ｍｌの水に添加し、沸騰近くの温度まで加熱した際、不透明な溶液が形成された。その溶液を周囲温度まで冷却した際、そのメフェナム酸、ルテオリンおよびアピゲニンのほとんどが水溶液から沈殿した。

比較的水に不溶性の環状有機化合物の水溶液中での可溶性を高めるためのノノキシノール−９の比較的水に不溶性の環状有機化合物との混合における順序および様式に関するそのデータは、その化合物を最初にノノキシノール−９中で加熱して可溶化して濃縮物を形成した後水中で溶解させるべきであることを示している。

実施例９．コレステロール可溶性試験
コレステロールの環は、その環のそれぞれの角が炭素原子からなり、その環から２個の水素原子が突き出ているため、飽和炭化水素環からなる。フラボノイド類は主に環状平面状不飽和芳香環からなり、一方でコレステロールは環状平面状飽和環を含有する。重要なことに、ほとんどのステロイド類はそのコレステロール環構造を共有している。

熱処理プロセスによる濃縮物の形成および非濃縮物法による、非イオン性界面活性剤ＰＳ８０およびノノキシノール−９ならびに溶媒ＰＥＧ４００を用いたコレステロールの水溶性試験を実施した。

この試験に関して用いられた物質には以下のものが含まれる：
・超精製グレード（Ｓｕｐｅｒ−ｒｅｆｉｎｅｄ ｇｒａｄｅｓ）のＰＳ８０およびＰＥＧ４００は、ニュージャージー州エジソンのＣｒｏｄａ Ｉｎｃから得た。

・ノノキシノール−９はＳｐｅｃｔｒｕｍ Ｃｈｅｍｉｃａｌ（ニュージャージー州ニューブランズウィック）から得た。

・コレステロールはＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（ミズーリ州セントルイス）から９９％より大きい純度のものを得た。

コレステロールの特性および調製された濃縮物の濃度を表ＸＶＩＩにおいて要約する。

最初に溶媒の濃縮物を形成することによるＰＳ８０、ノノキシノール−９およびＰＥＧ４００中でのコレステロール可溶性試験には、以下の工程が含まれていた：
・３０ｍｇのコレステロールを、別々の５０ｍｌビーカー中に含まれる２．９７グラムのＰＳ８０、ノノキシノール−９およびＰＥＧ４００に添加した。

・その混合物を、ＰＳ８０、ノノキシノール−９およびＰＥＧ４００組成物に関してそれぞれ約１２０℃および８０℃に加熱した。

・室温における過飽和に関する試験を、結晶をその溶液に添加して沈殿が生じるかどうか決定することにより評価した。

・１７ｍｌの水をその濃縮物のそれぞれに添加した後のＰＳ８０、ノノキシノール−９およびＰＥＧ４００中におけるコレステロール水溶液の透明性の視覚的観察を、室温まで冷却した５０時間より長い時間後に行った。

コレステロールのＰＳ８０およびノノキシノール−９水溶液は、その溶液を周囲温度まで冷却した後５０時間以上、透明なままであった。しかし、１７ｍｌの水をそのコレステロール／ＰＥＧ４００濃縮物に添加した際、結果として濁った不透明な溶液がもたらされた。数ｍｌの水の添加の後、結果として透明な溶液がもたらされたことを特筆するべきである。

比較目的のため、コレステロール濃縮物中に存在する成分の類似の量を同じ量の水に別々に添加した後、沸騰近くまで加熱した。

水溶液試験には以下の工程が含まれていた：
・別々の５０ｍｌビーカーにおいて、３０ｍｇのコレステロールおよび１７ｍｌの水を別々の５０ｍｌビーカー中に含まれる２．９７グラムのＰＳ８０、ノノキシノール−９およびＰＥＧ４００に添加した。

・それぞれの溶液を、混合しながら約１００℃に加熱した。

・コレステロール含有溶液のそれぞれの透明性の視覚的観察を、その溶液を室温まで冷却した後に行った。

ＰＳ８０、ノノキシノール−９およびＰＥＧ４００コレステロール溶液は結果として不透明な濁った溶液をもたらした。

この実施例は、その化合物を水の添加の前に界面活性剤、例えばＰＳ８０およびノノキシノール−９中で加熱して可溶化して濃縮物を形成するべきであることを示している。

実施例１０−アピゲニンのプロピレングリコールおよびエチレングリコール中での可溶性試験
アピゲニンは、２５℃において試験した親水性および親油性溶媒中でごく希薄に可溶性である（０．１５〜０．６８ｍｇ／ｍｌ）ことが知られている(Li et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, Vol. 86, No. 6, June 1997)。本明細書で開示される界面活性剤の熱処理法は結果として著しく高められた水相および親油性の相の可溶性の増大をもたらしたため、上記で評価された界面活性剤のいくつかを製造するための前駆体として用いられる界面活性剤溶媒であるプロピレングリコール（ＰＧ）およびエチレングリコール（ＥＧ）中でのアピゲニンの可溶性特性／特徴を決定するための実験を実施することが決定された。ＰＧおよびＥＧ中で可溶化されたアピゲニンの曝露の結果の観察を行った。

プロピレングリコールは無色、ほぼ無臭、透明、粘着性の液体であり、かすかに甘い味を有し、吸湿性であり水と混和性である。ＰＧは、経口、注射用および配合物が含まれる多くの医薬品における溶媒である。それは多くの適用に関して湿潤剤として、ならびに医薬品、化粧品、食品、練り歯磨き、シャンプー、マウスウォッシュ、ヘアケアおよびタバコ製品において保湿剤として用いられている。その沸点は１８８℃であり、その分子量は７６グラム／モルである。プロピレングリコールは、ポリプロピレングリコール界面活性剤（ＰＰＧ類）を構成する基本小単位である。

プロピレングリコールの構造式は次のものである：

。

エチレングリコールは無色の油性の液体であり、甘い味および穏やかな臭いを有する。その分子量は６２であり、その沸点は１９７℃である。エチレングリコールはポリエチレングリコール界面活性剤（ＰＥＧ類）を構成する基本小単位である。

エチレングリコールの構造式は次のものである：

。

ＰＧおよびＥＧ両方に関する可溶性試験を以下のように実施した。：
・別々の１８ｍｌバイアル中で、２００ｍｇのアピゲニンを４．８０グラムのＰＧに、およびＥＧにも添加した。両方のバイアルを、ＰＧのバイアルに関して約１７５℃に、ＥＧのバイアルに関して約１９０℃に加熱した。アピゲニンは両方のバイアル中で完全に可溶化され、４０ｍｇ／ｍｌの溶液が形成された。

・室温まで冷却した際、ＰＧおよびＥＧ溶液の両方に関して容易に認識できるアピゲニンの沈殿が観察された。従って、これらの溶液は過飽和していたことが示された。

・次いで、アピゲニン／ＰＧおよびアピゲニン／ＥＧ混合物を３，６００ｒｐｍで２０分間遠心分離し；結果として淡黄色の透明な液体および実質的な割合の沈殿したアピゲニンがもたらされ、それを両方の溶液から分離した。

加えて、数滴の水をその飽和した可溶化されたアピゲニン／ＰＧおよびＥＧ溶液に添加した後、可溶化されたアピゲニンのかなりの割合が両方の溶液から沈殿し、従ってそれに続く水性配合物の開発におけるそれらの有用性は限定される。

実施例１１−フラボノイド界面活性剤およびＰＥＧ４００濃縮物の油性溶媒中における可溶性
この試験の主な目的は、平面状環構造の有機化合物の油中における可溶性濃度の増大を評価することであった。一般に、非イオン性界面活性剤は、水中で感知されるほどにはイオン化しない親水性頭部基を特徴とする。例には、ポリオキシエチレン化アルキルフェノール類、アルコールエトキシレート類、アルキルフェノールエトキシレート類、およびアルカノールアミド類が含まれる。非イオン性界面活性剤は優れた可溶化剤である傾向があり、比較的非毒性である。それらは通常は他のタイプの界面活性剤と容易にブレンドされ（すなわち補助界面活性剤として用いられ）、従って化粧的、医薬的および環境的適用において広範な用途を見出してきた。非イオン性界面活性剤の性能は、陰イオン性界面活性剤とは異なり、比較的溶液中の塩の存在の影響を受けない。

親水性−親油性バランス（ＨＬＢ）の数はその分子の親水性および疎水性部分の相対強度の指標であり、水相および有機相への界面活性剤の相対的親和性を特性付けるために用いることができる。高いＨＬＢの数は一般に水中での優れた界面活性剤の可溶性を示し、一方で低いＨＬＢの数はより低い水溶性および有機相へのより高い相対的親和性を示す。低いＨＬＢの数を有する界面活性剤は有機相中に著しく分配され、親水性の内側および親油性の外側を有する逆ミセルを形成することができる。

ポリグリセリル−４オレエート（ＣＡＳ＃ ６８６０５−１９−６）は、５のＨＬＢ値を有する非イオン性界面活性剤であり、これは油に基づく局所用配合物のために平面状環構造の有機化合物の可溶性を高めるのに適していることを示唆しており、一方で１５のＨＬＢ値を有するポリソルベート８０は、実施例４で言及したように、アピゲニンを水中油型局所用配合物中で可溶化するのに最も適しているはずである。

Ｍａｋｉｎｇ Ｃｏｓｍｅｔｉｃｓ（ワシントン州レントン）から得たポリグリセロール−４オレエートは、植物性オレイン酸に基づく蒸留されたトリグリセロールエステルであり、ＰＥＧを含まない。それは水中で分散し、油中水型エマルジョンに十分に適している。ボラージオイルはＳｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（ミズーリ州セントルイス）から得て、鉱油、ＵＳＰ、カノーラ油およびホホバ油はニュージャージー州ニューブランズウィックのＳｐｅｃｔｒｕｍ Ｃｈｅｍｉｃａｌから得た。

表ＸＶＩＩＩ、ＸＩＸおよびＸＸは、ルテオリンのポリグリセリル−４オレエート中における濃縮物ならびにアピゲニンのポリソルベート８０およびＰＥＧ−４００中における濃縮物を様々な油に添加した際の視覚的観察結果を要約している。ルテオリンおよびアピゲニンはその試験された油中で不溶性であり、ポリグリセリル−４オレエート中における１０ｍｇ／ｍｌルテオリン濃縮物は、ルテオリンの結晶をそのルテオリン／ポリグリセリル−４オレエート濃縮物に添加した際に沈殿が存在しないことにより決定されるように、室温で過飽和していなかった。

より低いＨＬＢ値の乳化剤は、それらがより親油性であるため、油中水型においてより優れており；より高いＨＬＢ値の乳化剤はより親水性である。

実施例１２．カプサイシン可溶性試験
熱処理プロセスによる濃縮物の形成および非濃縮物法によるカプサイシン（鎮痛剤）の非イオン性界面活性剤ＰＳ８０および溶媒ＰＥＧ４００を用いた水溶性試験を比較した。

この試験に関して用いられた物質には以下のものが含まれていた：
・超精製グレードのＰＳ８０およびＰＥＧ４００は、ニュージャージー州エジソンのＣｒｏｄａ Ｉｎｃから得た。

・カプサイシンは、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ（ミズーリ州セントルイス）から得た（製品番号３６０３７６）。

カプサイシンの特性および調製された濃縮物の濃度を、表ＸＸＩにおいて要約する。

最初に熱処理法を用いて濃縮物を形成することによるＰＳ８０およびＰＥＧ４００中でのカプサイシン可溶性試験：
・３０ｍｇのカプサイシンを、別々の５０ｍｌビーカー中に含まれる２．９７グラムのＰＳ８０およびＰＥＧ４００に添加した。

・これらの混合物を、混合しながら約５０℃に加熱した。

・カプサイシンの少数の結晶のその冷却された溶液への添加は結果として沈殿をもたらさず、それによりこれらの液体が過飽和していないことが示された。

・１７ｍｌの水をそのカプサイシン濃縮物のそれぞれに添加した際のそのＰＳ８０およびＰＥＧ４００中におけるカプサイシン水溶液の透明性の視覚的観察を、室温まで冷却した後５０時間より長い時間後に行った。

１７ｍｌのＨ_２Ｏの添加の後にＰＳ８０濃縮物の透明な溶液が結果としてもたらされ、その溶液を室温まで冷却した後５０時間以上そのままであった。しかし、１７ｍｌのＨ_２Ｏの添加により不透明な濁った状態になったカプサイシン／ＰＥＧ４００濃縮物に数ｍｌの水（約２〜４ｍｌ）を添加しただけで、その後結果として透明な溶液がもたらされた。

比較目的のため、カプサイシン濃縮物中に存在する成分の類似の量を同じ量の水に別々に添加した後、沸騰近くまで加熱した。

水溶液試験には以下の工程が含まれていた：
・別々の５０ｍｌビーカーにおいて、３０ｍｇのカプサイシンおよび１７ｍｌの水を別々の５０ｍｌビーカー中に含まれる２．９７グラムのＰＳ８０およびＰＥＧ４００に添加した。

・それぞれの溶液を、混合しながら約１００℃に加熱した。

・１７ｍｌの水をそのカプサイシン濃縮物のそれぞれに添加した後のＰＳ８０およびＰＥＧ４００中におけるカプサイシン水溶液の透明性の視覚的観察を、室温まで冷却した後５０時間以上行った。

ＰＳ８０およびＰＥＧ４００カプサイシン溶液は結果として不透明な濁った溶液をもたらした。

この実施例は、これらの化合物を水の添加の前に界面活性剤、例えばＰＳ８０中で加熱して可溶化して濃縮物を形成するべきであることを示している。

実施例１３．補酵素Ｑ１０、ポリソルベート８０およびホホバ油可溶性試験
濃縮物（非イオン性界面活性剤、例えばＰＳ８０および平面状芳香環構造を含有する様々な有機化合物から作られる）を形成する熱的プロセスは水溶性を高めるのに有効であることが実験的に観察されたため、追加のデータを提供するために優れた油溶性を有する平面状芳香環構造の化合物であるＣｏＱ１０をＰＳ８０およびホホバ油のような油と一緒に用いた可溶性試験を実施した。

油溶性のビタミン様物質である補酵素Ｑ１０は、ほとんどの細胞中に、主にミトコンドリア中に存在する。それは電子伝達系の構成要素であり、ＡＴＰの形態のエネルギーを生成する好気性細胞呼吸に参加している。人体のエネルギーの９５パーセントはこの方法で生成される。

ホホバ油は、長さ３６〜４６炭素原子のろうエステル類の混合物である。それぞれの分子はエステル結合により連結された脂肪酸および脂肪アルコールからなる。その脂肪酸分子の９８％は９番目の炭素−炭素結合において不飽和である。

ホホバ油、補酵素Ｑ１０およびポリソルベート８０は、Ｍａｋｉｎｇ Ｃｏｓｍｅｔｉｃｓ（ワシントン州レントン）から得た。

最初の試験（試験１）は、ホホバおよび水油相（ｗａｔｅｒ ｏｉｌ ｐｈａｓｅｓ）の不混和性を確かめた。従って、
・６ｍｌのホホバ油および２０ｍｌの水を３０ｍｌビーカー中で徹底的に混合した。

・２時間より長い時間の後、淡黄色のホホバ油および水相が分離したことが観察された。その水相は透明であり、無色でもあり、これはその淡黄色のホホバ油がその水相中で不溶性であったことを示している。

次の試験（試験２）は以下のように実施された：
・０．３グラムのオレンジ色のＣｏＱ１０粉末を１グラムのＰＳ８０に添加し、約５０℃に加熱した。ＣｏＱ１０はＰＳ８０中で溶解し、赤／オレンジ色の溶液を形成した。そのＣｏＱ１０は可溶化されたままであり、その混合物を室温まで冷却した際に可溶化されたままであった。

・室温における過飽和に関する試験を、結晶をその溶液に添加して沈殿が起きたかどうか決定することにより評価した。そのＣｏＱ１０／ＰＳ８０濃縮物は過飽和していなかったことが観察された。

・６ｍｌのホホバ油を２０ｍｌの水と混合し、その混合物を約５０℃に加熱しながら徹底的に撹拌した。

・次いでその５０℃における油中水混合物をそのＣｏＱ１０／ＰＳ８０濃縮物に添加し、約１分間徹底的に撹拌した。

・２時間より少し長い時間の後、透明な赤／オレンジ色の水相により観察されるように、水相がＣｏＱ１０を含有したことに気付いた。ホホバ油相は水相から分離し、可溶化されたＣｏＱ１０／ＰＳ８０濃縮物を示す水相の赤／オレンジ色とは異なる淡黄色のホホバ油相により観察されるように、溶解したＣｏＱ１０を例えあるとしてもわずかしか有しないように見えた。

ＣｏＱ１０、ホホバ油および水を用いた最後の試験（試験３）を以下のように実施した：
・０．３グラムのＣｏＱ１０粉末を６ｍｌのホホバ油中で室温において溶解させた。この混合物に１グラムのＰＳ８０を添加し、次いで結果として得られた混合物を約５０℃に加熱した。

・約５０℃に予熱した２０ｍｌの水をこの混合物に添加した。その組み合わせられた混合物を１分間徹底的に撹拌した。

・約２時間後、そのＣｏＱ１０のほとんどが水相から分離し、大部分が赤／オレンジ色のホホバ油相中で濃縮されていたことが視覚的に観察された。また、その水相は部分的に不透明であり、赤／オレンジ色の可溶化されたＣｏＱ１０の大部分を含有していた試験２におけるビーカーの透明な水相とは極めて異なっていた。

これらの試験の結果として、可溶性の乏しいＣｏＱ１０の水溶液中での可溶性を高めるために最初にＰＳ８０中で可溶化して濃縮物を形成するべきであると結論付けられた。

実施例１４−アピゲニン／界面活性剤濃縮物を用いたアピゲニンの局所用配合物の調製
有効薬剤濃縮物を用いて、最初の有効薬剤濃縮物の作製を用いずに達成することができるよりも高い濃度の溶解した有効薬剤を調製された配合物中に有する組成物を配合することができる。アピゲニンを溶解した状態で含有する多数の原型溶液、ゲル、軟膏、およびエマルジョン型局所用配合物を、アピゲニン／ポリソルベート８０濃縮物およびアピゲニン／ＰＥＧ３００濃縮物を用いて調製した。これらの配合物を表ＸＸＩＩおよびＸＸＩＩＩにおいて要約する。

実施例１５−ヒトの皮膚を用いたアピゲニンの配合物からのインビトロ経皮吸収
全体として、このインビトロ皮膚浸透実験からのデータは、ＤＰＳＩ原型が対照的な感覚受容／化粧的特性を有する様々な配合基剤からのある範囲の送達プロフィールを示すことを示した。

この試験の目的は、待機手術からの切除されたヒトの皮膚への適用後の局所配合物からのアピゲニンのインビトロ経皮吸収を特性付けることであった。

この試験は、インビトロ経皮透過研究の原理および実践に関する研究集会のＦＤＡおよびＡＡＰＳの報告：生物学的利用能および生物学的同等性への関連性（FDA and AAPS Report of the Workshop on Principles and Practices of In Vitro Percutaneous Penetration Studies: Relevance to Bioavailability and Bioequivalence）(Skelly et al., 1987)から適合させた手順を用いて実施された。単一の提供者からのヒトの組織に５ｍｇ／ｃｍ^２の配合物を投与した。この研究において評価された全ての配合物の組成を表ＸＸＩＶおよびＸＸＶにおいて要約する。

臨床的に意義のある用量である５ｍｇ／ｃｍ^２を、待機手術後に得られた単一の提供者からの皮膚採取した（ｄｅｒｍａｔｏｍｅｄ）ヒトの腹部の組織に適用した。その組織の厚さは０．０３４インチ（０．８７０ｍｍ）からの範囲であり、厚さにおける平均＋／−標準偏差は＋／−０．００５インチ（＋／−０．１３１ｍｍ）であり、変動係数は１５％であった。

経皮吸収を、Ｂｒｏｎａｕｇｈフロースルー拡散セル中にマウントしたこの単一の提供者からのヒトの腹部の組織を用いて評価した。セルを再循環水浴の使用により３２℃の一定温度で維持した。これらのセルは０．６４ｃｍ^２の名目上の拡散領域を有する。新しい受容器相（ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｐｈａｓｅ）（ＰＢＳ、ｐＨ７．４、０．１％アジ化ナトリウムおよび４％ウシ血清アルブミンを含有）をその組織の下に名目上０．２５ｍｌ／時間の流速で連続的にポンプで送り、６時間の間隔で収集した。その受容器相の試料を予め重量を量ったシンチレーションバイアル中に収集し；後の重量をその試験の終了時に得た。２４時間の期間の曝露の後、組織表面上にある配合物をＣｕＤｅｒｍ Ｄ−Ｓｑｕａｍｅストリッピングディスク（ｓｔｒｉｐｐｉｎｇ ｄｉｓｃｓ）を用いてテープストリッピング（ｔａｐｅ−ｓｔｒｉｐｐｉｎｇ）することにより除去した。表皮、真皮、および受容器相の試料にラベルを付け、凍結した後、その後のＬＣ−ＭＳ／ＭＳによるアピゲニン含有量の分析を行い、最終的に試料を廃棄した。

一般に、アピゲニンの受容器区画中への浸透は少なかった。しかし、アピゲニンをニートの（ｎｅａｔ）ＤＭＳＯ中で適用した場合に、受容器相中への比較的高い浸透が達成された。中程度の真皮沈着が観察され、一方で比較的高い表皮の値が評価した組成物の大部分と関係していた。全体的に、ＤＭＳＯに基づく溶液、３５３０−１４Ａ、−１５Ｂおよび−３１（ニートＤＭＳＯ対照）は最も高い組織透過および沈着をもたらした。無水溶液（３５３０−１４Ｂ、ＥｔＯＨ／ＰＧ／ＩＰＭ／ＭＬ／オレイン酸）も比較的好ましい送達特性を与えた。配合物３５３０−１４ＢはＤＭＳＯに基づく溶液よりも低い組織透過および沈着をもたらしたが、それは実行可能な代替物を与える可能性がある。予想されたように、ＰＥＧに基づく溶液はＰＥＧ軟膏よりも大きな送達をもたらした。

いくつかの半固体の原型を評価し、それには水性ゲル（３５３０−２２）、水性ゲルに基づくナノ懸濁液（３５３０−２４）、２種類のエマルジョン（３５３０−２９［乳化ろう基剤］および−３０［Ｐｅｍｕｌｅｎ基剤］）およびＰＥＧ軟膏（３５３０−１８Ｂ）が含まれていた。水性ゲル中のヒアルロン酸ナトリウムポリマーの存在は、類似の溶液対照と比較した場合に受容器透過および真皮沈着を有意に損なわなかったことは注目に値した。

アピゲニンの送達効率（適用された用量の％）の点から、Ｐｅｍｕｌｅｎエマルジョンは可溶化されたアピゲニン／ヒアルロン酸ナトリウムに基づくゲル（３５３０−２２）と比較してわずかにより好ましい送達特性を与えた。送達された量を考慮した場合、その水性ゲル（３５３０−２２）はＰｅｍｕｌｅｎエマルジョンよりも高い組織沈着をもたらした。しかし、効率および送達された量を評価した場合、Ｐｅｍｕｌｅｎエマルジョンは試験した半固体組成物の最も高い受容器レベルをもたらした。

図３は、いくつかの局所用配合物に関する適用されたアピゲニン投与量の含有量の百分率としての表皮、真皮、受容器流体および総透過アピゲニンプロフィールのグラフによる図説である。

実施例１６−アピゲニン配合物のインビトロでの刺激性の決定
この試験の目的は、表皮ＭＴＴ ＥＴ_５０アッセイを用いて５種類のアピゲニン含有配合物の急性皮膚刺激の可能性を比較することであった。試験物が組織の生存率を５０％まで低減するために必要な時間、すなわちＥＴ_５０は、伝統的なインビボでのウサギ皮膚刺激試験と十分に相関する。

この試験は、表皮ＭＴＴアッセイを実施するために、ＭＢ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ（ペンシルバニア州スピナーズタウン）において実施された。表皮組織をアピゲネシス（Ａｐｉ Ｇｅｎｅｓｉｓ）配合物と共に１、４および２４時間培養した（それぞれの試験物に関して時点あたり２つの組織）。トリトンＸ−１００（１％）を陽性対照として用いた。培養後、その組織をすすいで試験物を除去し、細胞毒性をＭＴＴ色素［３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニルテトラゾリウムブロミド、チアゾリルブルー］を用いて決定した。生存可能な細胞のみがＭＴＴの紫色のホルマザン生成物への酵素的還元を行うことができ、それを組織から抽出した後定量的に測定する。死んだ細胞はＭＴＴを還元せず、従ってこのアッセイは、未処理の対照組織と比較した場合の組織の生存率への試験物の曝露の作用の決定を可能にする。

３つの培養時点における組織の生存率のデータを用いて、それぞれの配合物に関して組織の生存率を５０％まで低減するのに必要な時間（有効時間、ＥＴ_５０）を計算した。ＥＴ_５０は伝統的なドレイズウサギ皮膚刺激試験の皮膚の点数と十分に相関し、刺激性分類を予測するために用いられる（表ＸＸＶＩ）。

表ＸＸＶＩＩは、未監査のＥＴ_５０値およびそれらの予測されるインビボ刺激性の分類に基づく試験物のランク付けを示す。これらの配合物は、非刺激性から軽度〜中程度の刺激性の範囲であった。

配合物は、以下のようにＥＴ５０値に基づいてランク付けすることができる：

陽性対照である１％トリトンＸ−１００に関するＥＴ５０は５．９時間であり、これは製造業者のそのアッセイに関する歴史的（ｈｉｓｔｏｒｉｃａｌ）範囲内であり、それはその試験系が刺激物に感受性であることを確証した。

要約すると、５種類の配合物のインビボでの刺激性の決定は非刺激性から軽度〜中程度の刺激性までの範囲であり、低い急性皮膚刺激の可能性を有すると考えられる。

上記で記述した態様に広い範囲の変更および修正を行うことができるであろうことは理解されるべきである。従って、前記の記述はこの発明を限定するものではなく説明するものであり、この発明を定義するのは全ての均等物を含む以下の特許請求の範囲であることを意図している。

上記で引用された全ての文書および参考文献を、この出願において本明細書にそのまま援用する。

本発明は典型的な態様に関連して記述されたが、本発明の範囲から逸脱することなく様々な変更を行うことができ、その要素を均等物で置き換えることができることは当業者には理解されるであろう。加えて、個々の状況または物質を本発明の教示に適合させるために、その本質的な範囲から逸脱することなく多くの修正を行うことができる。従って、本発明はこの発明の実施に関して考えられる最高の方式として開示された特定の態様に限定されず、本発明は全てを含むであろうことを意図している。

Claims (39)

1. フラボノイドおよび非イオン性界面活性剤の濃縮物を含む組成物であって、前記濃縮物が過飽和してなく、前記フラボノイドがアピゲニンであり、前記非イオン性界面活性剤がポリソルベートであり、アピゲニンの濃度が１ｍｇ／ｍｌ以上である、前記組成物。
2. 前記非イオン性界面活性剤がポリソルベート８０である、請求項１に記載の組成物。
3. キャリヤーをさらに含む、請求項１または２に記載の組成物。
4. 前記キャリヤーが水に基づくキャリヤーである、請求項３に記載の組成物。
5. 前記キャリヤーが、ジメチルスルホキシドおよび水を含む、請求項３に記載の組成物。
6. 前記キャリヤーが、ジメチルスルホキシド、ヒドロキシプロピルセルロースおよび水を含む、請求項３に記載の組成物。
7. 前記キャリヤーが、エタノール、プロピレングリコールおよび水を含む、請求項３に記載の組成物。
8. 前記キャリヤーが、エタノール、プロピレングリコール、水、ならびにヒドロキシエチルセルロース、ヒアルロン酸ナトリウムおよびｃａｒｂｏｐｏｌからなる群から選択されるゲル化剤を含む、請求項３に記載の組成物。
9. 前記キャリヤーが、油相、界面活性剤および水を含む、請求項３に記載の組成物。
10. 前記油相が、エトキシジグリコール、乳酸ミリスチル、シクロメチコンまたはオレイルアルコールを含む、請求項９に記載の組成物。
11. 前記キャリヤーが油に基づくキャリヤーである、請求項３に記載の組成物。
12. 前記キャリヤーが、小さい鎖のアルコール、エトキシジグリコール、プロピレングリコール、ヘキシレングリコール、ブチレングリコール、ジプロピレングリコール、グリセリン、水、生理食塩水、ＤＭＳＯ、ミリスチン酸イソプロピル、鉱油、界面活性剤、またはジメチルイソソルビドを含む、請求項３に記載の組成物。
13. ヒアルロン酸をさらに含む、請求項１〜１２のいずれか１項に記載の組成物。
14. 医薬品の形態である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
15. 機能性食品、コスメシューティカル、食品、または医療用食品の形態である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
16. 飲料の形態である、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
17. 日光曝露の作用の低減または予防に使用するための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
18. 日光曝露の作用の処置に使用するための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
19. 癌の処置に使用するための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
20. 哺乳類において癌が生じる可能性の低減に使用するための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
21. アクネ、脱毛症、皮膚の敏感化および過敏、乾燥皮膚（乾皮症、魚鱗癬）、真菌感染、酒さまたは接触皮膚症の処置に使用するための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
22. 自己免疫疾患の処置に使用するための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
23. 前記自己免疫疾患が、乾癬、狼瘡、および関節炎からなる群から選択される、請求項２２に記載の組成物。
24. ＴＮＦα関連疾患の処置に使用するための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
25. ＴＮＦα関連疾患の可能性の低減に使用するための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
26. ＩＬ−１β関連疾患の処置に使用するための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
27. ＩＬ−１β関連疾患の可能性の低減に使用するための、請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物。
28. ｉ）フラボノイド、および
    ｉｉ）非イオン性界面活性剤、
    を含む組成物を調製する方法であって、前記フラボノイドを、前記非イオン性界面活性剤の存在下で、前記フラボノイドが前記非イオン性界面活性剤中で１５０℃より高い温度に加熱することを含む、前記方法。
29. ２つの面を有する支持体を含む経皮パッチであって、第１の面は、その上に配置された請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物および接着剤を有し、第２の面は、前記組成物および前記接着剤に対して不浸透性である物質を含む、前記パッチ。
30. ２つの面を有する支持体を含む、フラボノイドの適用のためのパッチであって、第１の面が、半透膜により接着剤から分離された液体リザーバー内に収容された請求項１〜１３のいずれか１項に記載の組成物を有する、前記パッチ。
31. 可溶化されたフラボノイドの組成物を調製する方法であって：
    ｉ）前記フラボノイドを非イオン性界面活性剤と混合して混合物を形成すること；
    ｉｉ）工程ｉ）の結果として得られた混合物を、１５０℃より高い温度に加熱して濃縮物を形成すること；そして
    ｉｉｉ）工程ｉｉ）の結果として得られた濃縮物を冷却すること、
    を含む、前記方法。
32. 工程ｉ）および工程ｉｉ）が同時に実施される、請求項３１に記載の方法。
33. 前記非イオン性界面活性剤がポリソルベートである、請求項３１または３２に記載の方法。
34. 前記混合物が２００℃より高い温度まで加熱される、請求項３１〜３３のいずれか１項に記載の方法。
35. 工程ｉｉ）または工程ｉｉｉ）の後に、キャリヤーを添加することをさらに含む、請求項３１〜３４のいずれか１項に記載の方法。
36. 前記非イオン性界面活性剤がポリソルベートであり、前記フラボノイドがアピゲニンである、請求項３１〜３５のいずれか１項に記載の方法。
37. 工程ｉｉ）または工程ｉｉｉ）の後に、小さい鎖のアルコールを前記混合物に添加して前記混合物の粘着性を低減することをさらに含む、請求項３１〜３６のいずれか１項に記載の方法。
38. 可溶性の乏しいフラボノイドの組成物の可溶性を増大させる方法であって：
    ｉ）前記フラボノイドを非イオン性界面活性剤と混合して混合物を形成すること；そして
    ｉｉ）工程ｉ）の結果として得られた混合物を、１５０℃より高い温度に加熱して濃縮物を形成すること、
    を含む、前記方法。
39. 前記フラボノイドが水中で可溶性が乏しい、請求項３８に記載の方法。