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JP6021847B2 - 扁平上皮ガン及び肝ガンの抑制剤とされるスチルベノイド化合物及びその用途 - Google Patents

扁平上皮ガン及び肝ガンの抑制剤とされるスチルベノイド化合物及びその用途 Download PDF

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Description

本発明は頭頸部扁平上皮ガン及び肝ガンの抑制剤とされるスチルベノイド化合物及びその用途に関する。さらに具体的には、本発明は頭頸部扁平上皮ガン及び肝ガンの細胞生存率と増殖率を抑制できる化合物、該化合物の医薬組成物と該化合物の薬物製造の用途に関する。
頭部と頸部のガンは全世界の６番目に多いガンであり且つ全てのガンの症例の６％を占め、頭部と頸部のガンはまた、台湾で４番目に多いガンである。頭部と頸部のガンは、副鼻腔（paranasal sinuses）、鼻腔(nasal cavity)、口腔(oral cavity)、咽（pharynx)、喉（larynx)の上皮悪性腫瘍（epithelial malignancies)を広く指す。約９５％の組織学分類は、頭頸部扁平上皮ガン(Head and neck squamous cell carcinoma,HNSCC)とされ、その他はすなわち、唾液腺腫瘍（salivary gland tumors)、リンパ腫(lymphomas)、及び肉腫(sarcomas)とされる。現在、頭頸部扁平上皮ガン性病変に関係のある多くの危険因子がわかっている。そのうち、頭頸部扁平上皮ガンの最も重要な危険因子は喫煙及び飲酒である。その他の危険因子には、工業吸入性物質における暴露、ヒトパピローマウイルス(human papilloma virus,HPV)感染、及び、エプスタイン・バールウイルス（Epstein-Barrvirus,EBV)感染等がある。頭頸部扁平上皮ガンの治療には進歩もあるが、患者の予後及び標準治療方法の後の効果は非常に悪い。比較的高い再発率及び転移率により、大部分の患者の生存率は非常に低い。
現在、頭頸部扁平上皮ガンには三種類の主要な治療及び管理方法があり、それは、放射線療法、手術療法、及び化学療法である。基本的な治療は放射線治療と手術であり、或いは両者を結合させ化学療法を組み合わせる。最も良好な治療方法の組み合わせは、ガン発生の部位及びステージにより定まる。放射線療法と組み合わされる（化学放射線療法，chemoradiation）最もよくみられる薬剤は、シスプラチン（cisplatin，商品名：Platinol，Platinol−AQ）、フルオロウラシル(fluorouracil，商品名：Aducil，Efudex，Fluoroplex)、及び、セツキシマブ (cetuximab，商品名：Erbitux）である。その他の使用される化学療法薬物にはさらに、カルボプラチン(carboplatin，商品名：Paraplatin)、ドセタキセル（docetaxel，商品名：Taxotere）とゲムシタビン (gemcitabine) 、パクリタキセル (paclitaxel, Taxol）、メトトレキサート（Methotrexate，商品名：Abitrexate，Folex，Folex PFS, Mexate，Mexate−AQ）、及び、ブレオマイシン(bleomycin,商品名：Blenoxane）がある。
上述の薬物は抗腫瘍効果を有するが、化学療法がもたらす多くの副作用は、頭頸部扁平上皮ガンの不便を形成し、それには、高い感染の危険、痣(bruising)、貧血（anemia)、悪心(nausea)、嘔吐(vomiting)、口瘡（sore mouth)、聴覚損失(hearing loss)、疲労（fatigue）、及び落髪がある。臨床観察によるとシスプラチンは、腎不全(renal failure)及び細胞毒性(cytotoxicity)をもたらし得る。シスプラチンとタキサン (taxanes）はいずれも毒性を有し、該毒性は、血液毒性(haematological toxicity)、神経毒性（neurotoxicity)、腎毒性（nephrotoxicity)及び耳毒性（ototoxicity)を含む。フルオロウラシル(fluorouracil）、メトトレキサート（Methotrexate）、及びパクリタキセル (paclitaxel）は粘膜細胞毒性（mucosal cytoxicity)を有し、放射線療法の結果を悪化させる。現在まで、シスプラチンを基礎とする化学療法は、頭頸部扁平上皮ガン治療に最も常用されている方法であり、それは比較的良好な生存率の優勢を有しているためである。しかし、シスプラチンの化学療法には制限があり、すなわち、耐薬性を発生させやすく、さらに高い用量は厳重な毒性を有し得ることである。このため、より優れた頭頸部扁平上皮ガン化学療法薬剤を探し求めることが、重要である。理想的な頭頸部扁平上皮ガン化学療法薬剤は、有効な抗腫瘍活性を有し、頭頸部扁平上皮ガンの再発及び転移を防止でき、並びに低毒性で、低副作用のものでなければならない。
肝ガン(Hepatocellular carcinoma,HCC)は、世界で五番目に多い悪性腫瘍であり且つ二番目に死亡に至らしめるガンである。肝ガンはアジア及び非ヨーロッパで多く、現在、その発生率は西洋国家でも上昇する傾向にある。肝ガンは一種の侵略性の腫瘍であり、頻繁に、慢性肝臓病及び肝硬変の患者に発生する。肝ガンの最も主要な危険因子は、Ｂ型肝炎ウイルス(hepatitis B virus,HBV)、或いはＣ型肝炎ウイルス(hepatitis C virus,HCV)感染、アルコール性肝臓病（alcoholic liver diseases)、及び非アルコール性脂肪肝（non-alcoholic fatty liver diseases)である。西洋国家では、第２型糖尿病及び肥満は二大新興肝ガン原因である。臨床上、肝ガンの診断は、通常比較的晩期であり、標準治療方法後の予後は極めて悪く、且つ生存率は非常に低い。
現在の肝ガン治療方法には、外科介入(surgical intervention)の腫瘍切除(tumor resection)と肝臓移植（liver transplantation)、経皮介入(percutaneous interventions)のエタノール或いは酢酸注射、高周波アブレーション（radiofrequency thermal ablation)、マイクロウエーブアブレーション（microwave ablation)、凍結治療(cryoablation)、動脈性介入(transarterial interventions)の塞栓術(embolization)、化学灌流治療(chemoperfusion)、或いは化学塞栓術（chemoembolization)、全身性化学療法(systemic chemotherapy)及び分子ターゲット治療(molecularly target therapies)がある。全身性化学療法(systemic chemotherapy)の薬物は、細胞傷害性薬物(cytotoxic drugs)及び分子ターゲット薬物（molecular target drugs)に分けることができ、前者はゼローダ(Xeloda，カペシタビン）、エトポシド(Etoposide)、イリノテカン (irinotecan)、5-フルオロウラシル（５−Fu）、ドクソルビシン（doxorubicin,）、ミトキサントロン（mitoxantrone）、サイミタク（thymitaq，商品名：nolatrexed)、これら細胞傷害性薬物の副作用は非常に強く、且つ抗薬性を容易に発生する。分子ターゲット薬物はソラフェニブ（sorafenib，商品名：Nexavar)、スニチニブ(sunitinib，商品名：Sutent）及びベバシズマブ(bevacizumab，商品名：Avastin）等を包含し、これらの薬物は抗薬性を発生しやすい。これらの副作用は肝ガン患者の不便を形成するのみならず、その生存率を下げる。
肝ガンに対して有効で且つ低毒性の新薬の開発は医薬領域の重要な課題である。副作用と肝ガンの発病率及び致死率低下を同時に達成するため、新規な全身性化学療法薬物の発展は、先進の肝ガン治療方法において最も重要である。理想的な化学治療薬剤は抗腫瘍、高効率、且つ患者の正常細胞に対する毒性が極めて低い等の特性を具備していなければならない。
3,5,4'−トリヒドロキシ−トランス−スチルベン（3,5,4'-trihydroxy-trans-stilbene) は、一種のスチルベン、一種の天然フェノール、及び一種のファイトアレキシン（phytoalexin）である。１９３９年にMichio Takaoka氏は、日本語の文献中で、有毒であるが薬効を有するバイケイソウ（Veratrum album ）より3,5,4'−トリヒドロキシ−トランス−スチルベンを分離することを開示した。3,5,4'−トリヒドロキシ−トランス−スチルベンは赤ブドウ或いはその他のフルーツの果皮中に存在することが発見されており、また、イタドリ（Japanese knotweed,Polygonum cuspidatum)の根中に存在する。3,5,4'−トリヒドロキシ−トランス−スチルベンの薬学上の効能は、以下のとおりである。すなわち、寿命を延長する、心血管の保護、抗糖尿病、抗炎症等である。このほか、動物モデル中では、3,5,4'−トリヒドロキシ−トランス−スチルベンは抗ガンの効果を有する。しかし、該薬物上の抗ガンの効果は低い生物可用性のため制限がある。
ラットに毎日０．３ｋｇの3,5,4'−トリヒドロキシ−トランス−スチルベンを与える実験では、明らかな毒性は観察されない。ある研究では高い用量の3,5,4'−トリヒドロキシ−トランス−スチルベンの不良反応について検討されており、被験者人数は１０４人であった（プラセボを含む）。７０ｋｇの人が一回に摂取する3,5,4'−トリヒドロキシ−トランス−スチルベンの最高摂取量は５ｇとされ、もし反復して3,5,4'−トリヒドロキシ−トランス−スチルベンを投与するなら、その用量は一日あたり０．９ｇとされる。このような研究中、厳重な不良反応は観察されなかった。いくらかの不良反応は軽微であり、且つ僅かに数日間しか続かなかった。
プテロスチルベン（Pterostilbene)は、一種の天然のフェノリックスチルベノイドであり、並びに一種のファイトアレキシンであり、ブドウ、各種菌類及び薬用植物中に存在する。プテロスチルベンの薬物上の薬効は、抗菌、抗酸化、抗炎症、抗高脂血症、抗糖尿病、及び記憶力アップである。プテロスチルベンの副作用及び毒性は非常に低く、２８日間の亜慢性(subchronic)毒性研究によると、用量が３．０ｇ／ｋｇ／日では不良の生化及び毒性効果は観察されなかった。
文献名：Higuchi et al., Pro-drugs as Novel = Delivery Systems, Vol. 14, A.C.S. Symposium Series; Roche et al., ed., Bioreversible Carriers in Drug Design, American Pharmaceutical = Association and Pergamon Press, 1987。 文献名： Rautio et al., Prodrugs: Design and Clinical Applications, Nature Reviews Drug Discovery, 2008, 7, 255-270。 文献名： Hecker et al, Prodrugs of Phosphates and Phosphonates, J. Med. Chem., 2008, 51, 2328-2345。 文献名： J. Pharmacol Sci, 1977, 66, 1-19。
本発明は頭頸部扁平上皮ガン及び肝ガンの抑制剤とされるスチルベノイド化合物及びその用途を提供し、さらに具体的には、本発明は頭頸部扁平上皮ガン及び肝ガンの細胞生存率と増殖率を抑制できる化合物、該化合物の医薬組成物と該化合物の薬物製造の用途を提供することを目的とする。
本発明の化合物は、一部の伝統的に使用されている薬物又は化合物と比較すると、より有効な抗ガン能力を表現し、且つ毒性が非常に低く、これにより、ガン症の治療に使用するのに適合し、且つ安全であるものとする。
本発明は一種の化合物を提供し、それは一般式Ｉで示される化合物或いは一般式Ｉで示される化合物の立体異性体、幾何異性体、互換異性体、窒素酸化物、水和物、溶媒和物、代謝産物、薬学上許容される塩或いはプロドラッグとされ、
そのうち、Ｒ’、Ｒは水素或いはＣ1-3アルキル基とされ、
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3はそれぞれが水素或いはＣ1-3アルキル基、或いは、
或いは、
とされ、
Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6はそれぞれが水素或いはＣ1-3アルキル基、或いは、（ＣＨ2）n−ＣＨ2Ｏ
Ｈ、或いは、（ＣＨＯＨ）n−ＣＨ2ＯＨとされ、ｎ＝０〜３である。該Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3 の少なくとも一つは、
とされる。
Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3 が
とされるとき、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6のうち少なくとも一つは（ＣＨ2）n−ＣＨ2ＯＨとされ、ｎ＝０〜３である。また、或いはＲ1、Ｒ2、Ｒ3 が
のとき、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6のうち、少なくとも一つは、（ＣＨＯＨ）n−ＣＨ2ＯＨとされ、
ｎ＝０〜３である。
本発明はまた、一種の医薬組成物を提供し、該医薬組成物は、一般式Ｉに示される化合物を包含し、且つさらに医学上許容される担体、賦形剤、希釈剤、助剤、触媒或いはその組み合わせを包含し得る。該医薬組成物は頭部と頸部の扁平上皮ガン及び肝ガンの抑制剤とされる。
本発明はさらにまた、一般式Ｉで示される化合物を薬物製造の用途に提供し、上述の薬物は、頭頸部扁平上皮ガン及び肝ガンを抑制するのに用いられる。
本発明はまた、一種の化合物を提供し、それは、一般式ＩＩで示される化合物或いは一般式ＩＩで示される化合物の立体異性体、幾何異性体、互換異性体、窒素酸化物、水和物、溶媒和物、代謝産物、薬学上許容される塩或いはプロドラッグとされ、
そのうち、Ｒ’、Ｒは水素或いはＣ1-3アルキル基とされ、
Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3はそれぞれが水素、Ｃ1-3アルキル基、或いは、
とされ、
そのうち、Ｒ7及びＲ8はそれぞれが水素或いはＣ1-3アルキル基とされ、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3は全てが水素とＣ1-3アルキル基より選ばれるわけではない。
本発明のもう一つの目的は、一般式Ｉの化合物を合成する方法を提供し、
該方法は、
一般式ＩＩの化合物を
脱保護して、一般式Ｉの化合物を生成するステップ、
を包含し、
そのうち、Ｒ’、Ｒは水素或いはＣ1-3アルキル基、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3 はそれぞ
れが水素或いはＣ1-3アルキル基、或いは、
或いは
とされ、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6は水素或いはＣ1-3アルキル基とされるか、或いは、（ＣＨ2）n−ＣＨ2ＯＨ、或いは（ＣＨＯＨ）n−ＣＨ2ＯＨとされ、ｎ＝０〜３とされる。該Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3 のうち少なくとも一つは、
とされ、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6のうち、少なくとも一つは、（ＣＨ2）n−ＣＨ2ＯＨ、ｎ＝０〜３とされ、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3はそれぞれが、水素或いはＣ1-3アルキル基とされるか、或いは、
とされ、Ｒ7、Ｒ8はそれぞれが、水素或いはＣ1-3アルキル基とされ、且つＸ1、Ｘ2、Ｘ3は全てが水素或いはＣ1-3アルキル基より選択されるわけではない。本発明の実施例において、一般式ＩＩの化合物は、3,5,4'-トリヒドロキシスチルベン(3,5,4'-trihydroxy-stilbene)、3-メトキシ-4',5-ジヒドロキシスチルベン(3-methoxy-4',5-dihydroxy-stilbene)、4'-メトキシ-3,5-ジヒドロキシスチルベン(4'-methoxy-3,5-dihydroxy-stilbene)、3,5-ジメトキシ-4'-ヒドロキシスチルベン(3,5-dimethoxy-4'-hydroxy-stilbene)及3,4'-ジメトキシ-5-ヒドロキシスチルベン(3, 4'-dimethoxy-5-hydroxy-stilbene)からなる群より選択したトリフェノール化合物（ triphenolic 化合物）と2,2,5-トリメチル-1,3-ジオキサン-5-カルボニル或いは2,2,5-トリメチル-1,3-ジオキサン-5-カルボニルクロライドから反応して生成されるステップ、
そのうち、Ｒ’、Ｒは水素或いはＣ1-3アルキル基、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3 はそれぞ
れが水素或いはＣ1-3アルキル基、或いは、
或いは
とされ、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6は水素或いはＣ1-3アルキル基とされるか、或いは、（ＣＨ2）n−ＣＨ2ＯＨ、或いは（ＣＨＯＨ）n−ＣＨ2ＯＨとされ、ｎ＝０〜３とされる。該Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3 のうち少なくとも一つは、
とされ、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6のうち、少なくとも一つは、（ＣＨ2）n−ＣＨ2ＯＨ、ｎ＝０〜３とされ、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3はそれぞれが、水素或いはＣ1-3アルキル基とされるか、或いは、
とされ、Ｒ7、Ｒ8はそれぞれが、水素或いはＣ1-3アルキル基とされ、且つＸ1、Ｘ2、Ｘ3は全てが水素或いはＣ1-3アルキル基より選択されるわけではない。
本発明の化合物は、一部の伝統的に使用されている薬物又は化合物と比較すると、より有効な抗ガン能力を表現し、且つ毒性が非常に低い。このほか、本発明の化合物は水中での溶解度が高いため、体内での吸収率も高くなる。これにより、ガン症の治療に使用するのに適合し、且つ安全であることに疑いはない。
化合物２−４の、シスプラチン耐性を有する頭頸部扁平上皮ガン細胞（ＣＡＲ）の活性抑制効果を示す図である。 化合物２−４の、Ｈｅｐ３Ｂ細胞の活性抑制効果を示す図である。 化合物２−４の、異性移植ヌードマウスモデルにおける、シスプラチン耐性を有する頭頸部扁平上皮ガン細胞の活性に対する抑制効果を示す図である。 化合物２−４の、異性移植ヌードマウスモデルにおける、シスプラチン耐性を有する頭頸部扁平上皮ガンの腫瘍サイズに対する抑制効果を示す図である。 化合物２−４の、異性移植ヌードマウスモデルにおける、シスプラチン耐性を有する頭頸部扁平上皮ガンの腫瘍重量に対する抑制効果を示す図である。 化合物２−４の、シスプラチン耐性を有する頭頸部扁平上皮ガンの、異性移植ヌードマウスモデルにおける、平均体重に対する時間の影響を示す図である。 化合物２−４の、正常な口腔細胞に対する影響を示す図である。
以下に本発明の技術内容、構造特徴、達成する目的及び作用効果について、以下に例を挙げ並びに図面を組み合わせて詳細に説明するが、以下に列挙される実施例は本発明を説明するためのものであって、本発明を限定するためのものではなく、この技術に習熟する者は、本発明の精神と範囲内から逸脱せずに、変更或いは修飾をなし得るのであり、これにより、本発明の保護範囲は添付の特許請求の範囲の規定に準じるものとする。
別に表明することがなければ、本発明が記載する構造式は、全ての異性体形態（鏡像異性体、ジアステレオ異性体、幾何異性体、（或いは立体配座））を包含し、たとえば、不対称中心のＲ、Ｓコンフィギュレーション、二重結合の（Ｚ）、（Ｅ）異性体、及び（Ｚ）、（Ｅ）の立体異性体とされる。これにより、本発明の化合物の単一の立体化学異性体或いはその鏡像異性体、ジアステレオ異性体、或いは幾何異性体（或いは立体異性体）の混合物はいずれも本発明の範囲に属する。
本発明で使用する用語「プロドラッグ(prodrug)」は、一つの化合物であって体内で一般式Ｉに転化する化合物を指す。このような転化は、プロドラッグが、血液中で加水分解されるか或いは血液或いは組織中で酵素で親化合物構造に転化される影響を受ける。本発明のプロドラッグは、たとえば、エステルとされ、既存の発明中のエステルであって、プロドラッグとされ得るものには、フェニルエステル、脂肪族Ｃ1-24エステル、アシルオキシメチルエステル、炭酸塩、カルバマート、及びアミノ酸エステルを包含する。たとえば、本発明の一つの化合物は水酸基を包含し、すなわち、そのアシル化によりプロドラッグ形式の化合物が得られる。その他のプロドラッグ形式は、リン酸エステルを包含し、たとえば、それらのリン酸エステルは、親化合物の水酸基をリン酸化して得られる。プロドラッグの全体の討論に関しては、上述の非特許文献１−３を参照されたい。
別に表明することがなければ、本発明の化合物のすべての互換異性形式は、いずれも本発明の範囲の内に包含される。このほか、別に表面することがなければ、本発明の記載する化合物の構造式は、一つ或いは複数の異なる原子の濃縮同位体を包含する。
本発明の「溶媒和物」とは、一つ或いは複数の溶剤分子と本発明の化合物が形成する締合物を指す。溶媒和物を形成するための溶媒は、以下に限られるわけではないが、水、イソプロパノール、エタノール、メタノール、ＤＭＳＯ、エチルアセテート、酢酸、及びエタノールアミンを包含する。「水和物」との用語は、溶媒分子と水が形成する締合物を指す。
「代謝産物」とは、具体的な化合物或いはその塩が体内で代謝作用を経た後に得られる産物である。一つの化合物の代謝産物は、全ての領域の公知の技術を通して同定される。その活性は、本発明の記載する試験の方法により表現される。このような産物は、投薬化合物の、酸化、還元、加水分解、アミド化、脱アミド化、エステル化、脱エステル化、酵素的開裂、及びそれらに類似の方法により得られる。したがって、本発明は化合物の代謝産物を包含し、それは本発明の化合物が哺乳動物と十分に所定時間接触することにより発生する代謝産物である。
本発明で使用される「薬学上許容される塩」とは、本発明の化合物の有機塩と無機塩を指す。薬学上許容される塩はこの技術の属する領域においてよく知られており、たとえば、上記の非特許文献４に記載されている。薬学上許容される無毒の酸が形成する塩は、以下に限定されるわけではないが、無機酸、たとえば、塩酸、臭化水素酸、リン酸、硫酸、過塩素酸、及び、有機酸たとえばアセチル酸、シュウ酸、マレイン酸、酒石酸、クエン酸、コハク酸、マロン酸とアミノグループの反応により形成される無機酸塩及び有機酸塩、或いは書籍、文献上に記載のその他の方法たとえばイオン交換法により得られる塩を包含する。その他の薬学上許容される塩は、アジピン酸塩、アルギン酸塩、アスコルビン酸塩、 L-アスパラギン酸塩、ベンゼンスルホン酸塩、安息香酸塩、重硫酸塩、ホウ酸塩、 酪酸塩、樟脳酸塩、 カンファースルホネート（camphorsulfonate）、 クエン酸塩、シクロペンタンプロピオネート、ジグルコネート、ドデシルサルフェート、エタンスルホン酸塩、蟻酸塩、フマル酸塩、グルコヘプトン酸、グリセロリン酸、グルコン酸塩、 ヘミサルフェート、ヘプタノエート、ヘキサノエート、ヨウ化水素酸塩、2 - ヒドロキシエタンスルホン酸塩、ラクトビオン酸塩、乳酸塩、ラウリン酸塩、ラウリル硫酸塩、 りんご酸塩、マレイン酸塩、マロン酸塩、メタンスルホン酸塩、2-ナフタレンスルホン酸塩、ニコチン酸塩、硝酸塩、オレイン酸塩、シュウ酸塩 、パルミチン酸塩、パモ酸塩、ペクチネート、過硫酸塩、3-フェニルプロピオン酸、リン酸塩、ピクリン酸塩、 ピバル酸塩、プロピオン酸塩、 ステアリン酸塩、 コハク酸塩、硫酸塩、酒石酸塩、 チオシアン酸塩、 パラトルエンスルホン酸塩、 ウンデカン酸塩、 吉草酸塩、及びそれらに類似のもの。薬剤的に許容される塩はアルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、アンモニウム塩、或いは N+(C1-4 アルキル）4塩である。本発明はまた、ここに記載の化合物の塩基性窒素含有基の第四級化 (quaternization) について考察する。水或いは油溶性或いは分散性製品が、このような第四級化により得られる。代表的なアルカリ金属、或いはアルカリ土類金属は、ナトリウム、カリウム、カルシウム、マグネシウム、及びそれらに類似のものを包含する。さらに薬学上許容される塩は、適当であるとき、無毒性アンモニウム、第４級アンモニウム、及びアミンのカチオンを包含し、該アミンのカチオンは、対イオン、たとえば、ハロゲン化合物、カルボン酸塩、硫酸塩、リン酸塩、硝酸塩、Ｃ1-8スルホン酸塩、及び アリールスルホン酸塩を使用して形成される。
本発明で使用される「薬学上許容される」とは、このような化合物、原料、組成物、及び又は薬剤型が、合理的な医学判断の範囲内で、患者組織との接触に適用されて過度の毒性、刺激性、変態反応がなく、或いはその他の問題と併発症について合理的なベネフィット・リスク比を有し、並びに規定用途において有効に用いられることを指す。
本発明の化合物は、総体的に述べると、合成方法１により合成される。合成方法１に示されるように、トリフェノール化合物（ triphenolic 化合物）（化合物１−１）と異なる当量の化合物１−２を反応させ、N,N-ジメチルアミノピリジン（dimethylaminopyridine，DMAP)中で反応させて、 N,N-ジシクロヘキシルカルボジイミド（N,N-dicyclohexylcarbodiimide，DCC)により触媒作用を及ぼして、結合させ(coupling)、純化した後に、多種類のエステル（化合物１−３から化合物１−７）を得る。さらにメタノールでルイス酸（Lewis acid)の存在下で脱保護を行ない(deprotection)、対応する化合物（化合物１−８から化合物１−９）を得る。
化合物２−３及び化合物２−４の合成方法については、合成方法２を参照されたい。
4-(3,5-ジメトキシスチリル）フェニル 2,2,5-トリメチル-1,3-ジオキサン-5-カルボキシレート（4-(3,5-dimethoxystyryl)phenyl 2,2,5-trimethyl-1,3-dioxane-5-carboxylate）（化合物 2-3)の合成。
合成方法２を参照されたい。室温下で、化合物２−２ (0.740 g, 4.25 mmol) を含有するＣＨ2Ｃｌ2(25 mL)溶液 を攪拌し、並びに順に、 N,N-ジシクロヘキシルカルボジイミド（ N,N-dicyclohexylcarbodiimide (DCC）, 1.140 g, 5.53 mmol)、化合物２−１すなわち 3,5-ジメトキシ-4'-ヒドロキシスチルベン(3,5-dimethoxy-4'-hydroxy-stilbene)(1.090 g, 4.25 mmol)、及び N,N-ジメチルアミノピリジン（ N,N-dimethylaminopyridine, (DMAP）,0.052g, 0.43 = mmol) を加える。混合液を同じ温度下で１８時間攪拌した後、水 (15 mL)を加えて反応を抑制する。該溶液の水性層を分離し、並びにＣＨ2Ｃｌ2(2 x 20mL)で抽出する。得られた有機抽出物を、塩水(brine)で洗い、並びに硫酸マグネシウム（ MgSO4）で乾燥、ろ過、濃縮して、 粗生成物を得る。該粗生成物をさらにシリカゲルでフラッシュクロマトグラフィー（ flash chromatography on silical gel ）して、エチルアセテート−ヘキサン（EtOAc/n-hexane， (1:2)）で純化し、白色固体の化合物２−３ (1.070 g, 61% yield) を得る。
1H NMR (CDCl3, 200 MHz): 83C2 7.49 (d, J 3D 8.6 Hz, 2H), 7.09-6.99 (m, 4H), 6.65-6.63 (m, 2H), 6.38 (s, 1H), 4.21 (d, J 3D 11.8 Hz, 2H), 3.80 (s, 6H), 3.75 (d, J 3D 11.8 Hz, 2H), 1.46 (s, 3H), 1,43 (s, 3H), 1,33 (s, 3H); 13C NMR (CDCl3, 50 MHz): 83C2172.7, 160.7, 150.1, 139.1, 134.5, 129.0, 128.0, 127.4, 121.7, 104.5, 100.1, 97.0, 66.0, 55.3, 43.0, 24.8, 22.1, 18.0。
4-(3,5-ジメトキシスチリル)フェニル-3-ヒドロキシ-2-(ヒドロキシメチル)-2-メチルプロパノエート（ 4-(3,5-dimethoxystyryl)phenyl-3-hydroxy-2-(hydroxymethyl)-2-methylpropanoate）（化合物 2-4)の合成。
合成方法２を参照されたい。室温下で、化合物2-3 (0.900 g, 2.18 mmol) を含有するＣＨ2Ｃｌ2 (20 mL)溶液を攪拌し、並びに、12 N HCl/MeOH (1:30, 2 ml)を加える。混合液を同じ温度下で３０分間攪拌した後、濃縮して粗生成物を得る。該粗生成物をさらに再結晶させ、白色固体の化合物 2-4 (0.66 g, 81% yield) を得る。
1H NMR (CDCl3, 200 MHz): 83C2 7.50 (d, J 3D 8.6 Hz, 2H), 7.19-6.99 (m, 4H), 6.64-6.63 (m, 2H), 6.38 (s, 1H), 4.05 (d, J 3D 10.0 Hz, 2H), 3.85-3.80 (m, 8H),2.89 (br s, 2H), 1,21 (s, 3H); 13C NMR (CDCl3, 50 MHz): 83C2174.7, 160.9, 149.9, 139.1, 135.2, 129.0, 128.0, 127.5, 121.8, 104.5, 100.1, 68.7, 55.3, 49.5, 17.0。化合物2-4の融点は108.0から109.5℃である。
化合物 3-3, 3-4, 3-5, and 3-6の詳細な合成方法については、合成方法３を参照されたい。
4'-(2,2,5-ジメトキシスチリル-1,3-ジオキサン-5-カルボキシ)-レスベラトロール(化合物 3-3) and 3,4'-(2,2,5-ジメトキシスチリル-1,3-ジオキサン-5-カルボキシ)-レスベラトロール(化合物 3-4)の合成。
室温下で、化合物 3-2 (1.373 g, 7.88 mmol) を含有するDMF (25 mL)溶液を攪拌し、 1-エチル-3-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド（ 1-ethyl-3-(3-dimethylaminopropyl)carbodiimide） (EDCI, 1.224 g, 7.88 mmol)、ヒドロキシベンゾトリアゾール（Hydroxybenzotriazole ）(HOBt, 1.065g, 7.88 mmol)、化合物 3-1すなわち3,5,4'-トリヒドロキシスチルベン(3,5,4'-trihydroxy-stilbene) (0.600 g, 2.62 mmol) 、及びトリエチルアミン(Et3N） (0.797g, 7.88 mmol) を順に加える。混合液を同じ温度下で３２時間攪拌した後に、水 (30 mL)を加える。得られた有機抽出物を、塩水（brine）で洗い、硫酸マグネシウム（MgSO4）で乾燥させ、ろ過、濃縮して粗生成物を得る。該粗生成物をさらにシリカゲルで、EtOAc/CH2Cl2/n-hexane (1:1:1)を使用してフラッシュクロマトグラフィーし白色固体の化合物 3-3 (0.537 g, 53% yield) と白色固体の化合物3-4 (0.125, 9% yield) を得る。注意すべきことは、本実施例の化合物3-3 は、合成方法１中の化合物 1-3であり、本実施例の化合物3-4 は、合成方法１中の化合物 1-3であることである。
化合物 3-3: 1H NMR (CDCl3, 500 MHz): 83C2 7.44 (d, J 3D 6.5 Hz, 2H), 7.07 (d, J 3D 6.5 Hz, 2H), 6.94-6.77 (m, 2H), 6.55 (s, 2H), 6.33 (s, 1H), 4.37 (d, J 3D 12.0 Hz, 2H), 3.80 (d, J 3D 12.0 Hz, 2H), 1.51 (s, 3H), 1,48 (s, 3H), 1,35 (s, 3H); 13C NMR (CDCl3, 125 MHz): 83C2173.1, 157.5, 149.9, 139.5, 135.2, 128.7,127.9, 127.4, 121.6, 121.7, 105.8, 102.6, 98.4, 66.0, 42.4, 25.3, 22.0, 18.4。
化合物 3-4: 1H NMR (CDCl3, 500 MHz): 83C2 7.49 (d, J 3D 6.5 Hz, 2H), 7.11 (d, J 3D 6.5 Hz, 2H), 7.09-6.91 (m, 2H), 6.84 (s, 2H), 6.53 (s, 1H), 4.36 (d, J 3D 11.0 Hz, 4H), 3.80 (d, J 3D 11.5 Hz, 4H), 1.51(s, 6H), 1.48 (s, 6H), 1,38 (s, 6H); 13C NMR (CDCl3, 125 MHz): 83C2173.2, 157.3, 151.9, 150.5, 139.6, 134.8,129.0, 127.7, 127.6, 121.7, 111.7, 111.1, 108.3, 98.3, 66.0, 42.3, 25.1, 22.2,18.5。
4'--[2,2-ビス(ヒドロキシメチル)プロパノキシ]レスベラトロール（4'--[2,2-Bis(hydroxymethyl)propanoxy]-resveratrol）(化合物 3-5)の合成。
室温下で、化合物 3-3 (0.232 g, 0.60 mmol) のCH2Cl2 (10 mL)溶液を攪拌し、12 N HCl/MeOH (1:30, 1 mL) を加える。混合液を同じ温度下で30分間攪拌し、濃縮して粗生成物を得る。該粗生成物をさらに再結晶させ、白色固体の化合物 3-5 (0.188 g, 90% yield) を得る。注意されたいことは、この実施例の化合物 3-5 はまた、合成方法１の化合物 1-8 であることである。
1H NMR (MeOD, 200 MHz): 83C2 7.65 (d, J 3D 8.6 Hz, 2H), 7.23-7.07 (m, 4H), 6.64-6.63 (m, 2H), 6.35 (s, 1H), 3.98 (d, J 3D 10.0 Hz, 2H), 3.87 (d, J 3D 10.0 Hz, 2H), 1,43 (s, 3H); 13C NMR (MeOD, 50 MHz): 83C2172.5, 156.8, 148.8, 137.7, 133.6, 127.3, 125.5, 125.4, 120.2, 103.2, 100.3, 63.0, 49.2, 14.4。化合物3-5の融点は138.0から139.5℃である。
3,4'-[2,2-ビス(ヒドロキシメチル)プロパノキシ]-レスベラトロール（3,4'-[2,2-Bis(hydroxymethyl)propanoxy]-resveratrol）(化合物 3-6)の合成。
室温下で、化合物 3-4 (0.098 g, 0.18 mmol) の CH2Cl2 (2 mL)溶液を攪拌し、 12N HCl/MeOH (1:30, 0.2 mL)を加える。混合液を 30分間攪拌した後、濃縮して粗生成物を得る。該粗生成物をさらに再結晶させ、白色固体の化合物 3-6 (0.075 g, 90% yield)を得る。注意すべきことは、この実施例の化合物 3-6 はまた、合成方法１の化合物 1-9 であることである。
1H NMR (MeOD, 500 MHz): 83C2 7.58 (d, J 3D 8.0 Hz, 2H), 7.20-7.05 (m, 4H), 6.87-6.84 (m, 2H), 6.49 (s, 1H), 3.87 (d, J 3D 11.0 Hz, 4H), 3.77 (d, J 3D 11.0 Hz, 4H), 1,32 (s, 6H); 13C NMR (MeOD, 125 MHz): 83C2172.5, 158.2, 152.2, 150.6,139.4, 134.9, 128.2, 127.1, 121.7, 110.5, 108.0, 64.5, 50.8, 50.7, 50.6, 16.0, 15.9。化合物3-6の融点は146.0から148.0℃である。
3,5,4'-[2,2-ビス(ヒドロキシメチル)プロパノキシ]-レスベラトロール（3,5,4'-[2,2-Bis(hydroxymethyl)propanoxy]-resveratrol）(化合物 4-3)の合成。
化合物 4-3の合成に関しては、合成方法４を参照されたい。
室温下で、化合物 4-1 (228 mg, 1.0 mmol)の塩化メチレン(5.0 mL)溶液に、 2,2,5-トリメチル-1,3-ジオキサン-5-カルボニルクロライド(636 mg, 3.3 mmol) 及びトリエチルアミン（ triethylamine） (0.55 mL, 3.96 mmol)をゆっくりと加え、それから 1.0 時間攪拌する。水で該混合溶液の反応を抑制し、並びに塩化メチレンで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、並びに硫酸マグネシウムで乾燥させ、並びに減圧の状態下でそれを濃縮し、シリカゲルでフラッシュクラマトグラフィーし純化し、化合物4-2を得る。
室温下で、化合物4-2 (348 mg, 0.5 mmol) のTHF (3.0 mL)溶液に、2N HCl(aq) (3.0 mL)をゆっくりと加え、それから一時間攪拌する。溶液を水で希釈し、EtOAcで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、並びに硫酸マグネシウムで乾燥させ、並びに減圧の状態下でそれを濃縮し、並びにシリカゲルでフラッシュクラマトグラフィーし純化し、化合物 4-3 (230 mg, 0.4 mmol) を得る。生産率は 80%である。この実施例の化合物 4-2 ofはまた、合成方法１中の化合物 1-5 であり、この実施例の化合物 4-3はまた、合成方法１の化合物 1-10であることに注意されたい。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 83C2: 1.21 ( s, 9H), 3.52-3.55 ( m, 6H ) , 3.65-3.70 ( m, 6H ) , 4.90-4.96 ( m, 6H ) , 6.78 ( s, 1H ), 7.09 ( d, 2H ), 7.22 (d, 2H ), 7.27 (d, 2H ), 7.66 ( d, 2H ). MS: 577 (M+1)。化合物4-3の融点は228.0から229.5℃である。
5-[2,2-ビス(ヒドロキシメチル)プロパノキシ]-レスベラトロール（ 5-[2,2-Bis(hydroxymethyl)propanoxy]-resveratrol）（化合物 5-3)の合成。
化合物 5-3の合成については、合成方法５を参照されたい。
室温下で、化合物 5-1すなわち3,4'-ジメトキシ-5-ヒドロキシスチルベン(3, 4'-dimethoxy-5-hydroxy-stilbene) (256 mg, 1.0 mmol)の塩化メチレン (5.0 mL)溶液に、 2,2,5-トリメチル-1,3-ジオキサン-5-カルボニルクロライド(212 mg, 1.1 mmol) 及びトリエチルアミン（triethylamine） (0.17 mL, 1.2 mmol) をゆっくりと加え、それから1.0時間攪拌する。混合物の反応を水で抑制し、それから塩化メチレンで抽出する。抽出で得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮させる。残留物をシリカゲルでカラムクロマトグラフィーして純化し、化合物 5-2を得る。
室温下で、化合物 5-2 (412 mg, 1.0 mmol) の 1,2-ジクロロエタン（1,2-dichloroethane）溶液 (10 mL)に、 BCl3.SMe2 (2.0M in CH2Cl2, 2.5 mL, 5.0 mmol) をゆっくりと加え、続いて、１６時間加熱して還流させる。該混合液の温度を室温まで下げ、水で反応を抑制し並びに EtOAcで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウム上で乾燥させ、減圧状態下で濃縮する。残留物をシリカゲルのクロマトグラフィーで純化し、化合物 5-3 (207 mg, 0.6 mmol) を 60% の生産率で得た。この実施例の化合物 5-3 はまた、合成方法１の化合物 1-11 であることに注意されたい。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 83C2: 1.19 ( s, 3H), 3.52 ( d, 4H ) , 3.65 ( d, 3H ) , 4.90 ( s, 2H ) , 6.35 ( t, 1H ), 6.70 ( s, 1H ), 6.74-6.78 ( m, 3H ), 6.90 (d, 1H ), 7.02 ( d, 1H ), 7.41 ( d, 2H ), 9.64 ( s ( br. ), 2H ). MS: 345 (M+1)。化合物5-3の融点は135.6から136.9℃である。
3,5-[2,2-ビス(ヒドロキシメチル)プロパノキシ]-レスベラトロール（ 3,5-[2,2-Bis(hydroxymethyl)propanoxy]-resveratrol）(化合物 6-3)の合成。
化合物 6-3の合成については、合成方法６を参照されたい。
室温下で、化合物 6-1すなわち4'-メトキシ-3,5-ジヒドロキシスチルベン(4'-methoxy-3,5-dihydroxy-stilbene) (242 mg, 1.0 mmol) の塩化メチレン(5.0 mL)溶液に、 2,2,5-トリメチル-1,3-ジオキサン-5-カルボニルクロライド(424 mg, 2.2 mmol)及びトリエチルアミン（ triethylamine） (0.37 mL, 2.64 mmol) をゆっくりと加え、それから1.0時間攪拌する。混合物の反応を水で抑制し、塩化メチレンで抽出する。抽出により得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、並びに減圧の状態下でそれを濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーで分析純化し、化合物 6-2を得る。
室温下で、化合物 6-2 (554 mg, 1.0 mmol) の 1,2-ジクロロエタン（ 1,2-dichloroethane） (10 mL)溶液に、 BCl3.SMe2 (2.0M in CH2Cl2, 2.5 mL, 5 mmol) をゆっくりと加え、それから加熱して１６時間還流させる。混合液の温度を室温まで下げ、水で反応を抑制し、並びに EtOAcで抽出する。抽出により得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、並びに減圧の状態下でそれを濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーで分析純化し、化合物 6-3 (300 mg, 0.65 mmol) を 65%生産率で得る。この実施例の化合物 6-3は、合成方法１中の化合物 1-12であることに注意されたい。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 83C2: 1.20 ( s, 6H), 3.53 ( m, 4H ) , 3.68 ( m, 4H ) , 4.95 ( m, 3H ) , 6.71 ( m, 1H ), 6.77 ( d, 2H ), 7.00-7.03 ( m, 1H ), 7.15 ( m, 3H ), 7.45 ( d, 2H ). MS: 461 (M+1)。化合物6-3の融点は195.0から197.0℃である。
3,4'-メチル-5-[2,2-ビス(ヒドロキシメチル)プロパノキシ]-レスベラトロール (3,4'-methyl-5-[2,2-Bis(hydroxymethyl)propanoxy]-resveratrol ）(化合物 7-3)の合成。
化合物 7-3の合成に関しては、合成方法７を参照されたい。
室温で、化合物 7-1 (256 mg, 1.0 mmol) の塩化メチレン (5.0 mL)溶液に、 2,2,5-トリメチル-1,3-ジオキサン-5-カルボニルクロライド(212 mg, 1.1 mmol)及びトリエチルアミン（ triethylamine ）(0.17 mL, 1.2 mmol)をゆっくりと加え、 1.0時間攪拌する。混合液の反応を水で抑制し、塩化メチレンで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮する。残留物をシリカゲルクロマトグラフィーで純化し、化合物7-2を得る。
室温で、化合物 7-2 (206 mg, 0.5 mmol) の THF (3.0 mL)溶液に、2N HCl(aq) (3.0 mL) をゆっくりと加え、それから 1.0時間攪拌する。この溶液を水で希釈し、EtOAcで抽出する。抽出された有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで純化し、化合物 7-3 (158 mg, 0.42 mmol)を生産率 84% で得る。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 83C2: 1.20 ( s, 3H), 3.54 ( m, 2H ) , 3.68 ( m, 2H ) , 3.78 ( s, 6H ), 4.89 ( s, 2H ), 6.53 ( s, 1H ), 6.87 ( s, 1H ), 6.94 (d, 2H ), 7.04 ( t, 2H ), 7.19 ( d, 1H ), 7.54 ( d, 2H ). MS: 372.9 (M+1)。化合物7-3の融点は101.0から102.5℃である。
3-メチル-5,4'-[2,2-ビス(ヒドロキシメチル)プロパノキシ]-レスベラトロール (3-methyl-5,4'-[2,2-Bis(hydroxymethyl)propanoxy]-resveratrol）(化合物 8-3) 。
化合物 8-3の合成に関しては、合成方法８を参照されたい。
室温で、化合物 8-1 (242 mg, 1.0 mmol) の塩化メチレン (5.0 mL)溶液に、 2,2,5-トリメチル-1,3-ジオキサン-5-カルボニルクロライド(424 mg, 2.2 mmol)及びトリエチルアミン（ triethylamine） (0.42 mL, 3.0 mmol)をゆっくりと加え、 1.0 時間攪拌する。混合液の反応を水で抑制し、塩化メチレンで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで純化し、 化合物 8-2を得る。
室温で、化合物 8-2 (277 mg, 0.5 mmol) の THF (3.0 mL)溶液に、2N HCl(aq) (3.0 mL) をゆっくりと加え、 1.0時間攪拌する。混合液を水で希釈し EtOAcで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで純化し、化合物 8-3 (190 mg, 0.4mmol) を 80%の生産率で得る。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 83C2: 1.20 ( s, 6H ), 3.53 ( m, 4H ) , 3.67 ( m, 4H ) , 3.79 ( s, 3H ) ,4.93 ( t, 4H ) , 6.57 ( t, 1H ), 6.92 ( s, 1H ), 7.06-7.09 ( m, 3H ), 7.18-7.29 ( m, 2H ), 7.63 ( d, 2H ). MS: 475.4 (M+1)。化合物8-3の融点は168.0から169.5℃である。
3,5-アセチル-4'-[2,2-ビスs(ヒドロキシメチル)プロパノキシ]-レスベラトロール (3,5-acetyl-4'-[2,2-Bis(hydroxymethyl)propanoxy]-resveratrol）(化合物 9-4)の合成。
化合物 9-4の合成に関しては、合成方法９を参照されたい。
化合物 9-1 (824 mg, 2.0 mmol) の 1,2-ジクロロエタン (1,2-dichloroethane ）(20 mL)溶液に、 BCl3.SMe2 (2.0M in CH2Cl2, 5.0 mL, 10 mmol) をゆっくりと加え、それから加熱して１６時間還流させる。混合液の温度を室温まで下げ、水で反応を抑制し、EtOAcで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで純化し、化合物 9-2を得る。
化合物 9-2 (230 mg, 0.67 mmol) と触媒効果を有する量の PTSAの 2,2-ジメトキシプロパン（ 2,2-dimethoxypropane） (5.0 mL) を室温下で１時間攪拌する。混合液にNaHCO3を加え、さらに１５分間攪拌する。この混合液を減圧状態下で濃縮し、 2,2-ジメトキシプロパンを除去し、それから水を加えて反応を抑制し、塩化メチレンで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮する。残留物をピリジン（pyridine） (2.0 mL)に溶かし、無水酢酸（acetic anhydride） (2.0 mL)を加え、室温で２．０時間攪拌する。混合液の反応を水で抑制し、EtOAcで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで純化し、化合物 9-3を得る。
化合物 9-3 の THF (3.0 mL)溶液に、 2N HCl(aq) (3.0 mL) をゆっくりと加え、室温で 1.0時間攪拌する。混合液を水で希釈し、EtOAcで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで純化し、 化合物 9-4 (172 mg, 0.4 mmol) を 60%の生産率で得る。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 83C2: 1.20 ( s, 3H), 2.29 ( s, 3H), 3.53 ( m, 2H ) , 3.68 ( m, 2H ) , 4.93 ( t, 2H ) , 6.90 ( t, 1H ), 7.10 ( d, 2H ), 7.21 ( d,1H ), 7.30 ( m, 3H ), 7.63 ( d, 2H ). MS: 429.1 (M+1)。化合物9-4の融点は121.0から122.5℃である。
3-アセチル-5,4'-[2,2-ビス(ヒドロキシメチル)プロパノキシ]-レスベラトロール(3-acetyl-5,4'-[2,2-Bis(hydroxymethyl)propanoxy]-resveratrol (化合物 10-4)の合成。
化合物 10-4 の合成方法に関しては、合成方法10を参照されたい。
化合物 10-1 (456 mg, 0.96 mmol) の 1,2-ジクロロエタン (1,2-dichloroethane）(10 mL)に、 BCl3.SMe2 (2.0M in CH2Cl2, 2.5 mL, 5.0 mmol) をゆっくりと加え、それから加熱して 16時間還流させる。混合液を室温まで冷まし、水で反応を抑制し、EtOAcで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで純化し、化合物 10-2を得る。
化合物 10-2 及び触媒効果を有する量のPTSA の、2,2-ジメトキシプロパン(2,2-dimethoxypropane） (5.0 mL)溶液を、室温下で 1.0 時間攪拌する。混合液に、NaHCO3を加え、さらに１５分間攪拌する。混合液を減圧状態下で濃縮して、2,2-ジメトキシプロパンを除去し、それから水で反応を抑制し、塩化メチレンで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮する。残留物をピリジンpyridine (2.0 mL)に溶かし、無水酢酸（ acetic anhydride） (2.0 mL) を加え、室温下で2.0時間攪拌する。混合液の反応を水で抑制し、EtOAcで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで純化し、化合物 10-3を得る。
化合物 10-3 (291 mg, 0.5 mmol) の THF (3.0 mL)溶液に、2N HCl(aq) (3.0 mL) をゆっくりと加え、室温下で 1.0時間攪拌する。混合液を水で希釈し、それからEtOAcで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで純化し、 化合物 10-4 (216 mg, 0.43 mmol) を 85% の生産率で得る。合成方法１０の化合物 10-1 はまた、合成方法８の 化合物 8-3 であることに注意されたい。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 83C2: 1.19 ( s, 3H),1.21 ( s,6H), 2.27 (s, 3H ) , 3.51 ( m, 4H ) , 3.66 ( m, 4H ) , 4.93 ( m, 4H ),6.82 ( t, 1H ), 7.07 ( d,2H ), 7.21-7.32 ( m, 4H ), 7.63 ( d, 2H ). MS: 503.5 (M+1)。化合物10-4の融点は161.0から163.0℃である。
3-メチル-4'-[2,2-ビス(ヒドロキシメチル)プロパノキシ]-レスベラトロール (3-methyl-4'-[2,2-Bis(hydroxymethyl)propanoxy]-resveratrol） (化合物 11-3)の合成。
化合物 11-3の合成方法については、合成方法 11を参照されたい。
化合物 11-1 (1.1 g, 4.3 mmol) の 塩化メチレン (10 mL)溶液に、 2,2,5-トリメチル-1,3-ジオキサン-5-カルボニルクロライド (913 mg, 4.7 mmol) 及びトリエチルアミン（ triethylamine） (0.9 mL, 6.5 mmol)をゆっくりと加え、室温下で 1.0 時間攪拌する。混合液の反応を水で抑制し、塩化メチレンで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで純化し、化合物 11-2を得る。
化合物 11-2 (824 mg, 2.0 mmol) の 1,2-ジクロロエタン (20 mL)溶液に、 BCl3.SMe2 (2.0M in = CH2Cl2, 5.0 mL, 10 mmol)をゆっくりと加え、加熱して5.0 時間還流させる。混合液を室温まで冷まし、水で反応を抑制し、 EtOAcで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで純化し、 化合物11-3 (287 mg, = 0.8 mmol) を 40%の生産率で得る。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 83C2: 1.20 ( s, 6H), 3.52 ( m, 2H ) , 3.67 ( m, 2H ) , 3.73 ( s, 3H ) , 4.92 ( t, 2H ) , 6.26 ( s, 1H ), 6.57-6.63 ( d, 2H ), 7.06-7.17 ( m, 4H ), 7.61 ( d, 2H ), 9.47 ( s, 1H ). MS: 359.2 (M+1)。化合物11-3の融点は129.0から131.0℃である。
5-アセチル-3-メチル-4'-[2,2-ビス(ヒドロキシメチル)プロパノキシ]-レスベラトロール (5-acetyl-3-methyl-4'-[2,2-Bis(hydroxymethyl)propanoxy]-resveratrol）(化合物 12-3)の合成。
化合物 12-3の合成に関しては、合成方法 12を参照ください。
化合物 12-1 (716 mg, 2 mmol) 及び触媒効果を有する量のPTSA の 2,2-ジメトキシプロパン (10 mL)溶液を室温で１時間攪拌する。混合液にNaHCO3を加え、さらに15分間攪拌する。混合液を減圧状態下で濃縮し、2,2-ジメトキシプロパンを除去し、それから水で反応を抑制し、塩化メチレンで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮する。残留物をピリジン(4.0 mL)に溶かし、無水酢酸 (4.0 mL) を加え、室温下で2.0時間攪拌する。混合物の反応を水で抑制し、 EtOAcで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで純化し、化合物 12-2を得る。
化合物 12-2 の THF (10 mL)溶液に、 2N HCl(aq) (10 mL) をゆっくりと加え、室温で 1.0 時間攪拌する。混合液を水で希釈し、EtOAcで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで純化し、 化合物 12-3 (560 mg, 1.4 mmol) を 70% 生産率で得る。合成方法12の化合物 12-1 はまた、合成方法11の化合物 11-3 であることに注意されたい。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 83C2: 1.20 ( s, 3H), 2.27 ( s, 3H ), 3.53 ( m, 2H) , 3.67 ( m, 2H ) , 3.79 ( s, 3H ), 4.93 ( t, 2H ) , 6.64 ( s, 1H ), 6.98 ( s, 1H ), 7.08 ( t, 3H ), 7.18 ( d, 1H ), 7.30 ( d, 1H ), 7.63 ( d, 2H ). MS: 401.1 (M+1)。化合物12-3の融点は109.0から111.0℃である。
3,5-[2,2-ビス(ヒドロキシメチル)プロパノキシ]-4'-メチル-レスベラトロール (3,5-[2,2-Bis(hydroxymethyl)propanoxy]-4'-methyl-resveratrol）(化合物 13-3)の合成。
化合物 13-3の合成については、合成方法 13を参照されたい。
化合物 13-1 (242 mg, 1.0 mmol) の塩化メチレン (5.0 mL)溶液に、 2,2,5-トリメチル-1,3-ジオキサン-5-カルボニルクロライド (424 mg, 2.2 mmol) とトリエチルアミン（triethylamine） (0.37 mL, 2.64 mmol)をゆっくりと加え、室温下で 1.0 時間攪拌する。混合液の反応を水で抑制し、塩化メチレンで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで純化し、 化合物 13-2を得る。
化合物 13-2 (277 mg, 0.5 mmol) の THF (3.0 mL) 溶液に、2N HCl(aq) (3.0 mL)を加え、室温下で 1.0時間攪拌する。混合液を水で希釈し、EtOAcで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで純化し、化合物 13-3 (197 mg, 0.42 mmol)を 84%の生産率で得る。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 83C2: 1.21 ( s, 6H), 3.53 ( m, 4H ) , 3.68 ( m, 4H ) , 3.77 ( m, 4H ) , 4.93 ( m, 4H ) , 6.73 (t, 1H ), 6.95 ( d, 2H ), 7.17 ( m, 4H ), 7.55 ( d, 2H ). MS: 475 (M+1)。化合物13-3の融点は141.0から142.5℃である。
プテロスチルベン D-リボニック酸 ジアセトナイド (Pterostilbene D-ribonic acid diacetonide） (化合物 14-5)の合成。
化合物 14-5の合成については、合成方法 14を参照されたい。
化合物 14-1 (1.484 g, 10 mmol) 及び PTSA (114 mg, 0.6 mmol) を 2,2-ジメトキシプロパン (2,2-dimethoxypropane） (20 mL)に加えて室温下で４８時間攪拌する。混合液にNaHCO3を加え、さらに１５分間攪拌する。混合液を減圧下で濃縮して2,2-ジメトキシプロパンを除去し、水で反応を抑制し、塩化メチレンで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮し、化合物 14-2を得る。
化合物 14-2 (5.047 g, 19.4 mmol) の水 (20 mL)溶液を 0℃に冷し、20分間攪拌する。混合液を室温まで温め、さらに 70分間攪拌する。混合物に水を加え、塩化メチレンで抽出する。抽出して得られた水性層に０℃でクエン酸 (15.42 g, 73.4 mmol) を加えることで酸化し、塩化メチレンで４度抽出する。水性層に NaCl (5.0 g) を加え、塩化メチレンでさらに３度抽出する。有機層を加え、抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮し、化合物 14-3を得る。
化合物 14-4 (2.2 g, 8.6 mmol) を含有するDMF溶液に、化合物 14-3 (3.19 g. 13.0 mmol)、ジシクロヘキシルカルボジイミド（dicyclohexylcarbodiimide ）(2.96 g, 14.3 mmol) 及び 4-ジメチルアミノピリジン (4-dimethylaminopyridine） (71.4 mg, 0.6 mmol)を逐次加え、室温下で１８時間攪拌する。混合液の反応を水で抑制し、塩化メチレンで抽出する。抽出して得られた有機層を塩水で洗い、硫酸マグネシウムで乾燥させ、減圧状態下で濃縮する。残留物をシリカゲルカラムクロマトグラフィーで純化し、 化合物 14-5 (3.0 g, 6.2 mmol) を 72%の生産率で得る。
1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): 83C2: 1.29 ( s, 3H), 1.35 ( s, 3H ), 1.36 ( s, 3H),1.47 ( s, 3H ), 3.78 ( s, 6H ) , 3.86 ( m, 1H ) , 4.12 ( m, 2H ) , 4.39 ( m,1H ), 5.04 ( d, 1H ), 6.42 ( t, 1H ), 6.78 ( d, 2H ), 7.19 ( m, 3H ), 7.27 ( d, 1H ), 7.66 ( d, 2H ). MS: 485.0 (M+1)。化合物14-5の融点は107.0から109.0℃である。
化合物 14-5 中のアセトニド保護基（acetonide protection group ）は、本領域中の既知の脱アセトニド保護基の方法により除去され、プテロスチルベンD-リボニック酸（化合物14-6)が得られる。
細胞株及び細胞培養：
人類頭頸部扁平上皮ガン細胞株ＣＡＬ２７がAmerican Tissue Culture Collection（ATCC)より入手される。シスプラチン耐性を有するＣＡＬ２７細胞株−ＣＡＲ細胞株は、.10-80 μＭのシスプラチン（ cisplatin ）(Sigma-Aldrich Corp. (St. Louis, MO, USA)より購入）でＣＡＬ２７細胞株を処理し並びに続いて回復時間を設け、合計で１０回循環し、クローン選択（clonal selection）となす。ＣＡＲ細胞株は、 10% FBS, 100 83μｇ/mL ストレプトマイシン（streptomycin）、 100 U/mL ペニシリンG（penicillin G）、2 mM L-グルタミン (L-glutamine） (Gibco by Life Technologies (Carlsbad, CA, USA))及び 80 μM のシスプラチン（ cisplatin）（Sigma-Aldrich Corp. (St. Louis, MO, USA)を含有する）Dulbecco's modified Eagle's medium (DMEM) で培養される。
細胞生存率分析（MTT assay）：
化合物 2-4 の抗細胞増生効果は、改良された細胞生存率分析により知ることができる。ＣＡＲ細胞を、281〜104 セル/ウェルの密度で、９６ウェルプレート中に接種し、並びにジメチルスルホキシド (Dimethyl sulfoxide、略称DMSO) のみで培養液中で処理(0.5% (v/v)し、対照（溶媒投与）群となす。)、あるいは異なる濃度（0, 25, 50, 75 and 100 μM)の化合物 2-4 を 24 and 48時間処理する。細胞は上述の方式で処理された後、まず上澄み液を除去し、さらに各ウェル中に100 μL MTT (500 83CAg/ml) を加え、３７℃下で４時間培養する。培養後、各200 μL のDMSOを加えて、該ＭＴＴが生成した紫色ホルマザン(formazan)結晶を可溶化する。細胞の生存率（％対照グループ）は、マイクロプレートリーダー(microplate reader)で細胞内の溶解したホルマザンの５７０ｎｍでの吸光値を検出した後に、計算により得られる。
動物投薬（ Animal administration）：
全ての動物実験は、いずれも国際規範（Affidavit of Approval of Animal Use Protocol)に依って実行され、並びに Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) of China Medical University (Taichung, Taiwan)の検査を合格したものとされる。全ての病原体を持たない生後４週の雄の BALB/c ヌードマウスは、いずれもNational Laboratory Animal Center (Taipei, Taiwan)より購入される。これらの動物は、恒温（室温）で、光照と黒暗がそれぞれ１２時間の動物房内で飼育され、並びに水分と標準の齧歯類動物の飼料は十分に供給される。
異性移植抗腫瘍研究（Xenograft antitumor study）：
0.2 mL (1:1) 培養基中 のCAR細胞 (181〜107 セル/マウス) とマトリゲル（Matrigel） (BD Biosciencesより購入) が、ヌードマウスの側面に皮下注射の方式で注入される。異性移植の腫瘍が約 50 mm3 (細胞摂取後 22日）に生長するとき、３２匹のマウスがランダムに四つのグループに８匹ずつ分けられる。経口投与の方式で、化合物2-4に、体重に対して用量25, 50 及び 100 mg/kgで、毎日３０回（投薬方法：ＱＤ×３０，ｐ．ｏ．）投与する。対照グループマウスには経口で30μL の DMSO を実験期間を通じて投与する。各マウスの腫瘍のサイズ(mm3)はカリパー測量され並びに0.5×長さ×（幅）2 で計算される。全ての実験の動物は処理後にいずれも二酸化炭素麻酔し並びに第３１日に安楽死させる。各マウスの腫瘍組織を取り出した後、それぞれ前述の方式で測量及び重さを計る。
生化学分析（Biochemical analysis）−酵素分布及び血液計数（levels of biochemical enzyme profiles and hematologic counts）各組のマウスの安楽死後に、その関係の毒性を観察し、心臓の全血液サンプルをとって、生化学分析を行ない、化合物2-4の安全性を評価する。簡単に述べると、各マウスより血液を収集し並びにそれを凝固させ、その後、室温下で1000×gで１０分間遠心分離し、
続いてさらに生化学試験を行ない、それは、総タンパク質、アルブミン、クレアチニン、血液尿素窒素（blood urea nitrogen,BUN)、尿酸、及びブドウ糖を包含する。
本発明の各化合物のHep3B 細胞 及び CAR 細胞に対する抗増生効果。
本発明の各化合物のHep3B 細胞 及び CAR 細胞に対する抗増生効果については表１を参照されたい。Hep3B 細胞及び CAR細胞は、異なる濃度の本発明の化合物で、48時間及び72時間処理され、並びに細胞生存率分析（MTT assay）で、その抗増生効果を評価する。結果はＩＣ50（μＭ）で表示し、すなわち、５０％の抗増生効果を達成するのに必要な濃度である。
表１中、全ての試験された化合物はいずれも顕著な抗Hep3B 及び CAR 細胞の効果を表現する。そのうち、化合物2−4、3−6、7−3、11−3、12−3、及び13−3は、レスベラトロール及びプテロスチルベンに較べ、より良好な抗ガン活性を有している。
化合物2−4のシスプラチン耐性を有する頭頸部扁平上皮ガン細胞（ＣＡＲ）に対する抗増生効果。
細胞生存率分析を利用し、CAR細胞を異なる濃度の化合物2−4 で２４時間、４８時間、及び７２時間処理する。その結果は図１に示されるとおりであり、化合物2−4はCAR細胞において抗増生効果を有し、且つ該効果は濃度−時間依存性とされる。７２時間処理後のＩＣ50 は５０μMである。
化合物2−4のHep3B細胞に対する抗増生効果。
細胞生存率分析で化合物2-4の肝ガン細胞に対する抗増生能力を評価する。Hep3B細胞を異なる濃度の化合物2−4 で４８時間、及び７２時間処理する。化合物2-4は、Hep3B細胞の生存率に対して、抑制の効果を有し、且つ濃度依存性とされる（図２に示されるとおり）。
化合物2−4の細胞内抗腫瘍効果。
化合物2−4のヌードマウス異性移植CAR細胞を評価し、並びに経口（ｐ．ｏ．）で用量は２５、５０及び１００ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙで、ＱＤ×３０のスケジュールで投与する。その結果は、図３、４、及び図５に示されるとおりであり、化合物2−4はCARの腫瘍サイズ（図３、４）及び腫瘍重量（図５）に対して、用量依存性の抑制効果を有する。また、用量が２５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの状況で、顕著な腫瘍生長抑制効果を観察した。また、用量が２５ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの状況で、CAR腫瘍の重量は対照グループに較べて２２％まで下降する（図５に示されるとおり）。
化合物2−4の抗腫瘍効果を評価するとき、化合物2−4で処理するマウスであっても、或いは対照グループのマウスであっても、いずれも顕著な体重変化は測定されない（図６に示されるとおり）。このほか、３０日間の処理の後、マウスを安楽死させ並びにその血液サンプルを収集し、総タンパク質、アルブミン、クレアチミン、血液尿素窒素、尿酸、及びブドウ糖の生化学定量を行なう。血液の分析結果は表２に示されるとおりであり、化合物2−4で処理したマウス及び対照グループのマウス中には、顕著な違いは観察されなかった。化合物2−4は顕著な抗腫瘍作用を表示すると共に、動物モデル中の経口投与毒性が非常に低い。
化合物2−4の正常口腔細胞に対する影響。
ヒト歯肉上皮細胞（Human normal gingival fibroblasts cells，HGF)及びヒト正常口腔粘膜角化細胞（ human normal oral keratinocyte cells，OK) は Department of Dental Hygiene, China Medical University（台湾）より取得され、並びにHGF と OK はDMEM中で培養される。
HGF 及び OK細胞は、いずれも、１×１０4セルが９６ウェルプレート中に置き入れられ、並びに濃度が0、25、50 及び100μMの化合物2-4 が、24、48 及び72 時間培養される。オートファジー阻害剤（autophagy inhibitor）と共同培養するために、細胞はまず、3-メチルアンフェタミン（3-methylamphetamine，3-MA）（ 10 mM) で一時間処理し、続いて、化合物2-4 (50 及び 75μM)で 48時間処理するか、或いは化合物2-4で処理しない。細胞を洗浄した後、MTT (0.5 mg/mL) を含有するDMEMを加えて細胞生存率を測定する。細胞生存率は対照グループの百分率で表示する。
化合物2-4 の正常口腔細胞（ HGF 及び OK）に対する影響については、図７を参照されたい。図７中 (A)は HGF 細胞を、 (B)は OK 細胞を異なる濃度の化合物2-4 で 72 時間処理した結果を代表する。細胞生存率は、 MTT で分析し、結果は各グループより少なくとも３つのサンプルを選び、平均±S.E.Mで表示する。図７に示されるように、化合物2−4で処理するとき、 HGF 細胞及び OK細胞は、いずれも生存率への影響を表現せず、それは化合物2−4の正常口腔細胞中での毒性が極めて低いことを説明し、ゆえに、化合物2−4を正常細胞に使用することは、完全に安全である。
化合物の水での溶解度の測定。
この分野の周知方法で本発明の各化合物の水での溶解度を測定する。その結果は表３に示すとおりである。
表２からわかるように、化合物3-6、4-3、5-3、6-3、8-3、9-4及び10-4の水での溶解度はレスベラトロールよりも１乃至12倍増加する。3-ヒドロキシ-2-(ヒドロキシメチル)-2-メチルプロパノエートをプテロスチルベンに入れると、水での溶解度を1乃至28倍まで増加する。
本発明の提供する化合物、医薬組成物、及びその用途は確実に産業上の利用価値を有するが、以上の記述は本発明の好ましい実施例の説明であって、この発明の属する技術の分野における通常の知識を有する者は上述の説明に基づいて、その他の種類の改良を行なうことができ、これらの変更はいずれも本発明の精神及び特許請求の範囲中に属するものとする。

Claims (10)

  1. 化合物において、該化合物は一般式Ｉで示される化合物或いは一般式Ｉで示される化合物の立体異性体、幾何異性体、互換異性体、水和物、溶媒和物、薬学上許容される塩とされ、
    そのうち、Ｒ’、Ｒは水素或いはＣ1-3アルキル基とされ、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3はそれぞれが水素或いはＣ1-3アルキル基、或いは、
    とされ、該Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3の少なくとも一つは
    とされ、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6はそれぞれが水素或いはＣ1-3アルキル基、或いは、（ＣＨ2）n−ＣＨ2ＯＨ、或いは、（ＣＨＯＨ）n−ＣＨ2ＯＨとされ、ｎ＝０〜３であり、
    該Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6のうち二つは （ＣＨ2）n−ＣＨ2ＯＨ、或いは、（ＣＨＯＨ）n−ＣＨ2ＯＨとされ、ｎ＝０〜３であることを特徴とする、化合物。
  2. 請求項１記載の化合物において、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3 が
    とされ、且つ、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6のうち二つは（ＣＨ2）n−ＣＨ2ＯＨとされ、ｎ＝０〜３であることを特徴とする、化合物。
  3. 請求項１記載の化合物において、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3 が
    とされ、且つ、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6のうち二つが、（ＣＨＯＨ）n−ＣＨ2ＯＨとされ、ｎ＝０〜３であることを特徴とする、化合物。
  4. 医薬組成物において、該医薬組成物は、請求項１に記載の化合物を包含することを特徴とする、医薬組成物。
  5. 請求項４記載の医薬組成物において、且つさらに医学上許容される担体、賦形剤、希釈剤、助剤、触媒或いはその組み合わせを包含することを特徴とする、医薬組成物。
  6. 請求項４記載の医薬組成物において、頭頸部扁平上皮ガン及び肝ガンの抑制剤とされることを特徴とする、医薬組成物。
  7. 請求項１記載の化合物を使用して製造された頭頸部扁平上皮ガン及び肝ガンを抑制する薬物。
  8. 化合物において、該化合物は一般式ＩＩで示される化合物或いは一般式ＩＩで示される化合物の立体異性体、幾何異性体、互換異性体、水和物、溶媒和物、薬学上許容される塩とされ、
    そのうち、Ｒ’、Ｒは水素或いはＣ1-3アルキル基とされ、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3はそれぞれが水素、Ｃ1-3アルキル基、或いは、
    とされ、そのうち、Ｒ7及びＲ8はそれぞれが水素或いはＣ1-3アルキル基とされ、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3は少なくとも一つが、
    とされることを特徴とする、化合物。
  9. 一般式Ｉの化合物を合成する方法において、
    該方法は、一般式ＩＩの化合物を
    脱保護して、一般式Ｉの化合物を生成するステップ、を包含し、
    そのうち、Ｒ’、Ｒは水素或いはＣ1-3アルキル基、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3 はそれぞれが水素或いはＣ1-3アルキル基、或いは、
    とされ、Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3 のうち少なくとも一つは、
    とされ、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6のうち、二つは、ＣＨ 2 ＯＨとされ、もう一つは、Ｃ 1 アルキル基とされ、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3はそれぞれが、水素或いはＣ1-3アルキル基とされるか、或いは、
    とされ、Ｒ7、Ｒ8はそれぞれが、水素或いはＣ1-3アルキル基とされ、且つＸ1、Ｘ2、Ｘ3は少なくとも一つが
    とされることを特徴とする、化合物を合成する方法。
  10. 請求項９記載の化合物を合成する方法において、一般式ＩＩの化合物は、3,5,4'-トリヒドロキシスチルベン(3,5,4'-trihydroxy-stilbene)、3-メトキシ-4',5-ジヒドロキシスチルベン(3-methoxy-4',5-dihydroxy-stilbene)、4'-メトキシ-3,5-ジヒドロキシスチルベン(4'-methoxy-3,5-dihydroxy-stilbene)、3,5-ジメトキシ-4'-ヒドロキシスチルベン(3,5-dimethoxy-4'-hydroxy-stilbene)及3,4'-ジメトキシ-5-ヒドロキシスチルベン(3, 4'-dimethoxy-5-hydroxy-stilbene)からなる群より選択したトリフェノール化合物と、2,2,5-トリメチル-1,3-ジオキサン-5-カルボニルハイドライド (2,2,5-trimethyl-1,3-dioxane-5-carbonyl hydride)或いは2,2,5-トリメチル-1,3-ジオキサン-5-カルボニルクロライド(2,2,5-trimethyl-1,3-dioxane-5-carbonyl-chloride) をカップリング(coupling)反応して生成され、
    そのうち、Ｒ’、Ｒは水素或いはＣ1-3アルキル基、Ｒ1、Ｒ2、Ｒ3 はそれぞれが水素或いはＣ1-3アルキル基、或いは、
    とされ、該Ｒ1、Ｒ2、及びＲ3 のうち少なくとも一つは、
    とされ、Ｒ4、Ｒ5、Ｒ6のうち、二つは、ＣＨ 2 ＯＨとされ、もう一つはＣ 1 アルキル基とされ、Ｘ1、Ｘ2、Ｘ3はそれぞれが、水素或いはＣ1-3アルキル基、或いは、
    とされ、Ｒ7、Ｒ8はそれぞれが、水素或いはＣ1-3アルキル基とされ、且つＸ1、Ｘ2、Ｘ3の少なくとも一つは
    とされることを特徴とする、化合物を合成する方法。
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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CN105012281A (zh) * 2015-06-24 2015-11-04 齐齐哈尔大学 紫檀芪在制备抑制肝癌细胞增殖和诱导肝癌细胞凋亡药物中的应用
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AU2005207029B2 (en) * 2004-01-20 2011-09-01 Brigham Young University Novel sirtuin activating compounds and methods for making the same
CN1331841C (zh) * 2006-01-26 2007-08-15 南京大学 一类白藜芦醇的衍生物及其制法和用途
JP2009531421A (ja) * 2006-03-28 2009-09-03 カウンスィル オブ サイエンティフィック アンド インダストリアル リサーチ 置換スチルベン及びその類似体の調製のための単一工程マイクロ波誘導方法
CN101085743B (zh) * 2006-06-06 2012-02-15 浙江大德药业集团有限公司 含氟烷氧基康普立停衍生物及制法和用途
US20080008745A1 (en) * 2006-06-21 2008-01-10 University Of Kentucky Research Foundation Transdermal delivery of naltrexone hydrochloride, naltrexol hydrochloride, and bis(hydroxy-methyl)propionyl-3-0 ester naltrexone using microneedles
BRPI0705319A2 (pt) * 2007-07-23 2009-07-21 Uniao Brasileira De Educacao Manedora Da Pucrs processo para obtenção de um complexo solúvel de resveratrol e/ou seus derivados; complexo de resveratrol e/ou seus derivados; composição nutracêutica
EP2185128B1 (en) * 2007-07-31 2018-08-08 ELC Management LLC Cosmetic compositions containing resveratrol derivatives
SI2215071T1 (sl) * 2007-11-30 2015-12-31 Zynerba Pharmaceuticals, Inc. Predzdravila tetrahidrokanabinola, sestavki, ki obsegajo predzdravila tetrahidrokanabinola in postopki njihove uporabe
US8318807B2 (en) * 2010-02-03 2012-11-27 Laurus Labs Private Limited Pterostilbene cocrystals
CN102050705B (zh) * 2010-11-02 2013-07-31 华润赛科药业有限责任公司 一种脱羰基heck反应制备白藜芦醇的方法
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