JP5860577B2

JP5860577B2 - クローディン産生促進剤及びオクルディン産生促進剤

Info

Publication number: JP5860577B2
Application number: JP2008107518A
Authority: JP
Inventors: 昭典木曽
Original assignee: Maruzen Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Maruzen Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 2008-04-17
Filing date: 2008-04-17
Publication date: 2016-02-16
Anticipated expiration: 2028-04-17
Also published as: JP2009256244A

Description

本発明は、植物やローヤルゼリーの抽出物を含有するクローディン産生促進剤、及びオクルディン産生促進剤、並びに、前記クローディン産生促進剤及び前記オクルディン産生促進剤の少なくともいずれかを含有する皮膚バリア機能改善剤に関する。

皮膚は、外界からの刺激、例えば、乾燥、紫外線、その他の物理的、化学的刺激を緩和したり、水分などの体内成分の喪失を防御する機能を有している。この重要な機能は、皮膚のバリア機能と呼ばれ、その機能維持に重要な役割を担っているのが、表皮角化細胞が終末分化して形成された角質細胞と、細胞間を埋める細胞間脂質から形成される角層であることが知られている。

これまでの研究では、皮膚のバリア機能は角層のみが担っていると考えられていたが、表皮顆粒層に存在するタイトジャンクション（以下「ＴＪ」と略記する）の構成タンパク質を遺伝子レベルで欠損させると皮膚のバリア機能が崩壊することから、近年、ＴＪも皮膚のバリア機能に重要な役割を担うと考えられている（非特許文献１参照）。ＴＪは、隣接する細胞同士を密着させるだけでなく、細胞と細胞の隙間をシールすることで物質の透過を制御する結合装置である。ＴＪを構成しているのは、細胞膜タンパク質のクローディンやオクルディンであり、これらのタンパク質はＴＪストランドの骨格を構成し、ＴＪのバリア機能を制御すると考えられている（非特許文献２参照）。以上のことから、クローディンやオクルディンの発現が何らかの原因で減少した場合、ＴＪの構造的な破壊が起こり、物質の透過バリアとして機能しなくなることによって、乾燥肌、荒れ肌、アトピー性皮膚炎や各種感染症などの皮膚症状の原因となる。

即ち、表皮においてクローディンやオクルディンの産生を促進することにより表皮角化細胞のＴＪ形成を促すことによって、皮膚のバリア機能及び水分保持機能を高め、前記皮膚症状を予防又は改善することができると考えられる。このような考えに基づき、ＴＪ形成促進作用を介して皮膚バリア機能を向上させるものとして、オウレン抽出物（特許文献１参照）、トウヒ抽出物（特許文献２参照）などが知られている。

しかしながら、これまで角層バリア機能の改善に用いられていた成分は、細胞間脂質の成分を補うことや、皮膚に被膜を形成させることにより、皮膚バリア機能の改善効果を発揮していたが、表皮角化細胞のＴＪの構造については改善効果が十分でない場合もあり、機能的なＴＪの形成に働きかける成分の開発が望まれているのが現状である。

特開２００７−１７６８３０号公報特開２００７−１７６８３５号公報ＴｈｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｅｌｌＢｉｏｌｏｇｙ１５６：１０９９−１１１１（２００２）日本香粧品科学会誌Ｖｏｌ．３１：２９６−３０１（２００７）

本発明は、前記従来における諸問題を解決し、以下の目的を達成することを課題とする。即ち、本発明は、優れたクローディン産生促進作用を有するクローディン産生促進剤、及び優れたオクルディン産生促進作用を有するオクルディン産生促進剤、並びに、表皮バリア機能の正常化による乾燥肌、荒れ肌、アトピー性皮膚炎や各種感染症などの皮膚症状の予防・改善を効果的に行うことができる皮膚バリア機能改善剤を提供することを目的とする。

本発明者は、前記課題を解決するために、種々検討を行ったところ、アスパラサスリネアリスの抽出物、イチョウの抽出物、イラクサの抽出物、ウコンの抽出物、ノイバラの抽出物、オウゴンの抽出物、ヨモギの抽出物、カミツレの抽出物、シソの抽出物、トウキンセンカの抽出物、モモの抽出物、マチルスオドラチシマの抽出物、メリッサの抽出物、ラベンダーの抽出物、レイシの抽出物、及びローヤルゼリーの抽出物がクローディン産生促進作用を有し、アスパラサスリネアリスの抽出物、イチョウの抽出物、イラクサの抽出物、オウゴンの抽出物、ヨモギの抽出物、カミツレの抽出物、マチルスオドラチシマの抽出物、メリッサの抽出物、ラベンダーの抽出物、レイシの抽出物、及びローヤルゼリーの抽出物がオクルディン産生促進作用を有することを見出し、本発明を完成するに至った。

本発明は、本発明者の前記知見に基づくものであり、前記課題を解決するための手段としては、以下の通りである。即ち、
＜１＞アスパラサスリネアリスの抽出物、イチョウの抽出物、イラクサの抽出物、ウコンの抽出物、ノイバラの抽出物、オウゴンの抽出物、ヨモギの抽出物、カミツレの抽出物、シソの抽出物、トウキンセンカの抽出物、モモの抽出物、マチルスオドラチシマの抽出物、メリッサの抽出物、ラベンダーの抽出物、レイシの抽出物、及びローヤルゼリーの抽出物から選択される少なくとも１種を含有することを特徴とするクローディン産生促進剤である。
＜２＞アスパラサスリネアリスの抽出物、イチョウの抽出物、イラクサの抽出物、オウゴンの抽出物、ヨモギの抽出物、カミツレの抽出物、マチルスオドラチシマの抽出物、メリッサの抽出物、ラベンダーの抽出物、レイシの抽出物、及びローヤルゼリーの抽出物から選択される少なくとも１種を含有することを特徴とするオクルディン産生促進剤である。
＜３＞前記＜１＞に記載のクローディン産生促進剤及び前記＜２＞に記載のオクルディン産生促進剤の少なくともいずれかを含有することを特徴とする皮膚バリア機能改善剤である。

本発明によれば、前記従来における諸問題を解決し、前記目的を達成することができ、優れたクローディン産生促進作用を有するクローディン産生促進剤、及び優れたオクルディン産生促進作用を有するオクルディン産生促進剤、並びに、表皮バリア機能の正常化による乾燥肌、荒れ肌、アトピー性皮膚炎や各種感染症などの皮膚症状の予防・改善を効果的に行うことができる皮膚バリア機能改善剤を提供することができる。

（クローディン産生促進剤、及びオクルディン産生促進剤）
本発明のクローディン産生促進剤は、アスパラサスリネアリスの抽出物、イチョウの抽出物、イラクサの抽出物、ウコンの抽出物、ノイバラの抽出物、オウゴンの抽出物、ヨモギの抽出物、カミツレの抽出物、シソの抽出物、トウキンセンカの抽出物、モモの抽出物、マチルスオドラチシマの抽出物、メリッサの抽出物、ラベンダーの抽出物、レイシの抽出物、及びローヤルゼリーの抽出物から選択される少なくとも１種を含有してなり、更に必要に応じてその他の成分を含有してなる。

本発明のオクルディン産生促進剤は、アスパラサスリネアリスの抽出物、イチョウの抽出物、イラクサの抽出物、オウゴンの抽出物、ヨモギの抽出物、カミツレの抽出物、マチルスオドラチシマの抽出物、メリッサの抽出物、ラベンダーの抽出物、レイシの抽出物、及びローヤルゼリーの抽出物から選択される少なくとも１種を含有してなり、更に必要に応じてその他の成分を含有してなる。

前記アスパラサスリネアリスは、マメ科（Ｌｅｇｕｍｉｎｏｓａｅ）の植物であり、学名はＡｓｐａｌａｔｈｕｓｌｉｎｅａｒｉｓ（Ｎ．Ｌ．Ｂｕｒｍ．）Ｒ．Ｄａｈｌｇｒである。
抽出原料として使用する前記アスパラサスリネアリスの部位としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、特に全草が好ましい。

前記イチョウは、イチョウ科（Ｇｉｎｋｇｏａｃｅａｅ）の植物であり、学名はＧｉｎｋｇｏｂｉｌｏｂａＬｉｎｎｅである。
抽出原料として使用する前記イチョウの部位としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、葉、花、蕾、果実、果皮、果核、これらの混合物などが挙げられ、これらの中でも、葉が好ましい。

前記イラクサは、イラクサ科（Ｕｒｔｉｃａｃｅａｅ）の植物であり、学名はＵｒｔｉｃａｔｈｕｂｅｒｇｉａｎａＳｉｅｂｏｌｄｅｔＺｕｃｃａｒｉｎｉである。
抽出原料として使用する前記イラクサの部位としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、葉、茎、花、蕾、果実、果皮、果核、地上部、全草、これらの混合物などが挙げられ、これらの中でも、葉が好ましい。

前記ウコンは、ショウガ科（Ｚｉｎｇｉｂｅｒａｃｅａｅ）の植物であり、学名はＣｕｒｃｕｍａｌｏｎｇａＬ．である。前記ウコンは、多年草であり、インド、東南アジア、中国南部などの熱帯地方や、日本では沖縄地方でも栽培されており、これらの地域から容易に入手可能である。
抽出原料として使用する前記ウコンの部位としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、葉、茎、花、蕾、根茎、地上部、これらの混合物などが挙げられ、これらの中でも、根茎が好ましい。

前記ノイバラは、バラ科（Ｒｏｓａｃｅａｅ）の植物であり、学名はＲｏｓａｍｕｌｔｉｆｌｏｒａＴｈｕｎｂｅｒｇである。
抽出原料として使用する前記ノイバラの部位としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、葉、茎、花、蕾、種子、果実、果皮、果核、地上部、全草、これらの混合物などが挙げられ、これらの中でも、果実（エイジツ）が好ましい。

前記オウゴンは、シソ科（Ｌａｂｉａｔａｅ）の植物であり、学名はＳｃｕｔｅｌｌａｒｉａｂａｉｃａｌｅｎｓｉｓＧｅｏｒｇｉである。
抽出原料として使用する前記オウゴンの部位としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、葉、茎、根、花、蕾、種子、果実、果皮、果核、地上部、全草、これらの混合物などが挙げられ、これらの中でも、根が好ましい。

前記ヨモギは、キク科（Ｃｏｍｐｏｓｉｔａｅ）の植物であり、学名はＡｒｔｅｍｉｓｉａｐｒｉｎｃｅｐｓＰａｍｐａｎｉｎｉである。
抽出原料として使用する前記ヨモギの部位としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、葉、茎、根、花、蕾、種子、果実、果皮、果核、地上部、全草、これらの混合物などが挙げられ、これらの中でも、葉（生薬名：ガイヨウ）が好ましい。

前記カミツレは、キク科（Ｃｏｍｐｏｓｉｔａｅ）の植物であり、学名はＭａｔｒｉｃａｒｉａｃｈａｍｏｍｉｌｌａＬ．である。
抽出原料として使用する前記カミツレの部位としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、葉、茎、根、花、蕾、種子、果実、果皮、果核、地上部、全草、これらの混合物などが挙げられ、これらの中でも、花が好ましい。

前記シソは、シソ科（Ｌａｂｉａｔａｅ）の植物であり、学名はＰｅｒｉｌｌａｆｒｕｔｅｓｃｅｎｓＢｒｉｔｔｏｎｖａｒ．ａｃｕｔａＫｕｂｏである。
抽出原料として使用する前記シソの部位としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、葉、茎、根、花、蕾、種子、果実、果皮、果核、地上部、全草、これらの混合物などが挙げられ、これらの中でも、葉が好ましい。

前記トウキンセンカは、キク科（Ｃｏｍｐｏｓｉｔａｅ）の植物であり、学名はＣａｌｅｎｄｕｌａｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓＬ．である。
抽出原料として使用する前記トウキンセンカの部位としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、葉、茎、花、蕾、種子、果実、果皮、果核、地上部、全草、これらの混合物などが挙げられ、これらの中でも、花が好ましい。

前記モモは、バラ科（Ｒｏｓａｃｅａｅ）の植物であり、学名はＰｒｕｎｕｓｐｅｒｓｉｃａＢ．である。
抽出原料として使用する前記モモの部位としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、葉、茎、花、蕾、種子、地上部、全草、これらの混合物などが挙げられ、これらの中でも、葉が好ましい。

前記マチルスオドラチシマは、クスノキ科（Ｌａｕｒａｃｅａｅ）の植物であり、学名はＭａｃｈｉｌｕｓｏｄｏｒａｔｉｓｓｉｍａである。
抽出原料として使用する前記マチルスオドラチシマの部位としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、葉、茎、花、根、樹皮、枝、これらの混合物などが挙げられ、これらの中でも、樹皮が好ましい。

前記メリッサは、シソ科（Ｌａｂｉａｔａｅ）の植物であり、学名はＭｅｌｉｓｓａｏｆｆｉｃｉｎａｌｉｓＬ．である。
抽出原料として使用する前記メリッサの部位としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、葉、茎、根、花、果実、果皮、果核、全草、これらの混合物などが挙げられ、これらの中でも、葉が好ましい。

前記ラベンダーは、シソ科（Ｌａｂｉａｔａｅ）の植物であり、学名はＬａｖａｎｄｕｌａｖｅｒａＤ．Ｃ．である。
抽出原料として使用する前記ラベンダーの部位としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、例えば、葉、茎、花、根、果実、果皮、果核、これらの混合物が挙げられ、これらの中でも、花が好ましい。

前記レイシは、サルノコシカケ科（Ｐｏｌｙｐｏｒａｃｅａｅ）の植物であり、学名はＧａｎｏｄｅｒｍａｌｕｃｉｄｕｍ（Ｆｒ．）Ｋａｒｓｔ．である。
抽出原料として使用する前記レイシの部位としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、特に子実体が好ましい。

前記ローヤルゼリーは、ミツバチ科（Ａｐｉｄａｅ）のミツバチの咽頭分泌物であり、学名はヨーロッパミツバチＡｐｉｓｍｅｌｉｆｉｃａＬ．である。
抽出原料としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。

前記アスパラサスリネアリスの抽出物、イチョウの抽出物、イラクサの抽出物、ウコンの抽出物、ノイバラの抽出物、オウゴンの抽出物、ヨモギの抽出物、カミツレの抽出物、シソの抽出物、トウキンセンカの抽出物、モモの抽出物、マチルスオドラチシマの抽出物、メリッサの抽出物、ラベンダーの抽出物、レイシの抽出物、及びローヤルゼリーの抽出物における、クローディン産生促進作用を発揮する物質の詳細については不明であるが、前記各抽出物がこのような優れた作用を有し、クローディン産生促進剤として有用であることは、従来には全く知られておらず、本発明者による新たな知見である。

前記アスパラサスリネアリスの抽出物、イチョウの抽出物、イラクサの抽出物、オウゴンの抽出物、ヨモギの抽出物、カミツレの抽出物、マチルスオドラチシマの抽出物、メリッサの抽出物、ラベンダーの抽出物、レイシの抽出物、及びローヤルゼリーの抽出物における、オクルディン産生促進作用を発揮する物質の詳細については不明であるが、前記各抽出物がこのような優れた作用を有し、オクルディン産生促進剤として有用であることは、従来には全く知られておらず、本発明者による新たな知見である。

前記各植物の抽出物は、植物の抽出に一般に用いられている方法を利用して、前記各植物の抽出原料に抽出処理を施すことにより、容易に得ることができる。また、前記各植物の抽出物としては、市販品を使用してもよい。なお、前記各植物の抽出物には、前記各植物の抽出原料の抽出液、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又は、これらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。

前記ローヤルゼリーの抽出物は、ローヤルゼリーの抽出に一般に用いられている方法を利用して、前記ローヤルゼリーの抽出原料に抽出処理を施すことにより、容易に得ることができる。中でも、ヨーロッパミツバチの咽頭部から分泌されるローヤルゼリーのエタノール抽出物が好ましい。また、前記ローヤルゼリーの抽出物としては、市販品を使用してもよい。なお、前記ローヤルゼリーの抽出物には、前記ローヤルゼリーの抽出原料の抽出液、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液を乾燥して得られる乾燥物、又は、これらの粗精製物若しくは精製物のいずれもが含まれる。

前記各植物の抽出原料の形態としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができるが、採取後ただちに乾燥し、粉砕したものが好ましい。前記乾燥は、例えば、天日で行ってもよいし、通常使用される乾燥機を用いて行ってもよい。なお、前記各植物の抽出原料は、ヘキサン、ベンゼンなどの非極性溶媒によって脱脂などの前処理を施してから、抽出原料として使用してもよい。脱脂などの前処理を行うことにより、前記各植物の抽出原料の極性溶媒による抽出処理を、効率よく行うことができる。

前記ローヤルゼリーの抽出原料の形態としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。

前記抽出に用いる溶媒としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、水、親水性有機溶媒、又は、これらの混合溶媒を、室温又は溶媒の沸点以下の温度で用いることが好ましい。前記各植物及び前記ローヤルゼリーに含まれるクローディン産生促進作用及びオクルディン産生促進作用の少なくともいずれかを示す成分は、極性溶媒を抽出溶媒とする抽出処理によって容易に抽出することができる。

前記抽出溶媒として使用し得る水としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、純水、水道水、井戸水、鉱泉水、鉱水、温泉水、湧水、淡水などの他、これらに各種処理を施したものが含まれる。水に施す処理としては、例えば、精製、加熱、殺菌、ろ過、イオン交換、浸透圧の調整、緩衝化などが含まれる。したがって、前記抽出溶媒として使用し得る水には、精製水、熱水、イオン交換水、生理食塩水、リン酸緩衝液、リン酸緩衝生理食塩水なども含まれる。

前記抽出溶媒として使用し得る前記親水性有機溶媒としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、メタノール、エタノール、プロピルアルコール、イソプロピルアルコールなどの炭素数１〜５の低級アルコール；アセトン、メチルエチルケトンなどの低級脂肪族ケトン；１，３−ブチレングリコール、プロピレングリコール、グリセリンなどの炭素数２〜５の多価アルコールなどが挙げられ、該親水性有機溶媒と水との混合溶媒などを用いることができる。
なお、前記水と前記親水性有機溶媒との混合溶媒を使用する際には、低級アルコールの場合は水１０質量部に対して１質量部〜９０質量部、低級脂肪族ケトンの場合は水１０質量部に対して１質量部〜４０質量部を混合したものを使用することが好ましい。また、多価アルコールの場合は水１０質量部に対して１質量部〜９０質量部を混合したものを使用することが好ましい。

前記各抽出原料から、クローディン産生促進作用及びオクルディン産生促進作用の少なくともいずれかを有する抽出物を抽出するにあたって、特殊な抽出方法を採用する必要はなく、室温又は還流加熱下で、任意の抽出装置を用いて抽出することができる。
具体的には、抽出溶媒を満たした処理槽内に、前記各抽出原料を投入し、更に必要に応じて時々攪拌しながら、３０分〜４時間静置して可溶性成分を溶出した後、ろ過して固形物を除去し、得られた抽出液から抽出溶媒を留去し、乾燥することにより抽出物を得ることができる。抽出溶媒量は通常、抽出原料の５倍量〜１５倍量（質量比）である。抽出条件は、抽出溶媒として水を用いた場合には、通常５０℃〜９５℃にて１時間〜４時間程度である。また、抽出溶媒として水とエタノールとの混合溶媒を用いた場合には、通常４０℃〜８０℃にて３０分〜４時間程度である。なお、溶媒で抽出することにより得られる抽出液は、抽出溶媒が安全性の高いものであれば、そのまま本発明のクローディン産生促進剤、及びオクルディン産生促進剤の少なくともいずれかの有効成分として使用することができるが、濃縮液又はその乾燥物としたものの方が利用しやすい。

抽出により得られる前記抽出液は、該抽出液の希釈液若しくは濃縮液、該抽出液の乾燥物、又はこれらの粗精製物若しくは精製物を得るため、常法に従って希釈、濃縮、乾燥、精製などの処理を施してもよい。なお、抽出により得られる前記抽出液は、そのままでもクローディン産生促進剤、及びオクルディン産生促進剤の少なくともいずれかの有効成分として使用することができるが、濃縮液又はその乾燥物としたものの方が利用しやすい。抽出液の乾燥物を得るにあたっては、常法を利用することができ、また、吸湿性を改善するためにデキストリン、シクロデキストリンなどのキャリアーを添加してもよい。また、各抽出原料は特有の匂いと味を有している場合があり、そのため、前記抽出原料の抽出物に対しては、生理活性の低下を招かない範囲で、脱色、脱臭などを目的とする精製を行うことも可能であるが、例えば、化粧料に添加する場合などには大量に使用するものではないから、未精製のままでも実用上支障はない。なお、精製は、具体的には活性炭処理、吸着樹脂処理、イオン交換樹脂処理などによって行うことができる。

以上のようにして得られる前記抽出物は、クローディン産生促進作用、及びオクルディン産生促進作用の少なくともいずれかを有し、これらの作用に基づき、本発明のクローディン産生促進剤、及びオクルディン産生促進剤の少なくともいずれかの有効成分として、それぞれ好適に利用可能なものである。
前記クローディン産生促進剤、及び前記オクルディン産生促進剤中の前記抽出物の含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、また、前記クローディン産生促進剤、及び前記オクルディン産生促進剤は、前記抽出物そのものであってもよい。
また、前記クローディン産生促進剤、及び前記オクルディン産生促進剤中、前記各抽出物は、いずれか１種のみが含まれていてもよいし、２種以上が含まれていてもよい。前記クローディン産生促進剤、及び前記オクルディン産生促進剤中に２種以上の前記抽出物が含まれる場合の、各々の含有量比としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。

また、前記クローディン産生促進剤、及び前記オクルディン産生促進剤中に含まれ得る、前記各抽出物以外のその他の成分としても、本発明の効果を損なわない範囲内であれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記各抽出物を所望の濃度に希釈などするための、生理食塩液などが挙げられる。また、前記クローディン産生促進剤、及び前記オクルディン産生促進剤中の前記その他の成分の含有量にも、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
また、前記クローディン産生促進剤、及び前記オクルディン産生促進剤は、必要に応じて製剤化することにより、粉末状、顆粒状、錠剤状など、任意の剤形とすることができる。

（皮膚バリア機能改善剤）
本発明の皮膚バリア機能改善剤は、前記クローディン産生促進剤及び前記オクルディン産生促進剤の少なくともいずれかを含有してなり、更に必要に応じてその他の成分を含有してなる。

前記皮膚バリア機能改善剤中の前記クローディン産生促進剤、及び前記オクルディン産生促進剤の少なくともいずれかの含有量としては、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、また、前記皮膚バリア機能改善剤は、前記クローディン産生促進剤、及び前記オクルディン産生促進剤の少なくともいずれかそのものであってもよい。
また、前記皮膚バリア機能改善剤中、前記クローディン産生促進剤、及び前記オクルディン産生促進剤は、いずれか１種のみが含まれていてもよいし、２種が含まれていてもよい。前記皮膚バリア機能改善剤中に前記クローディン産生促進剤、及び前記オクルディン産生促進剤が含まれる場合の、各々の含有量比としても、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。

また、前記皮膚バリア機能改善剤中に含まれ得る、前記クローディン産生促進剤、及び前記オクルディン産生促進剤以外のその他の成分としても、本発明の効果を損なわない範囲内であれば、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができ、例えば、前記クローディン産生促進剤、及び前記オクルディン産生促進剤の少なくともいずれかを所望の濃度に希釈などするための、生理食塩液などが挙げられる。また、前記皮膚バリア機能改善剤中の前記その他の成分の含有量にも、特に制限はなく、目的に応じて適宜選択することができる。
また、前記皮膚バリア機能改善剤は、必要に応じて製剤化することにより、粉末状、顆粒状、錠剤状など、任意の剤形とすることができる。

（効果）
本発明のクローディン産生促進剤、及びオクルディン産生促進剤、並びに、皮膚バリア機能改善剤は、日常的に使用することが可能であり、有効成分である前記各抽出物の働きによって、優れたクローディン産生促進作用、及び優れたオクルディン産生促進作用の少なくともいずれかを有し、これらの作用に基づく皮膚バリア改善作用を、極めて効果的に発揮させることができるものである。そのため、本発明のクローディン産生促進剤、及びオクルディン産生促進剤、並びに、皮膚バリア機能改善剤によれば、例えば、乾燥肌、荒れ肌、アトピー性皮膚炎、及び各種感染症などの皮膚症状の予防・改善を効果的に行うことができる。

なお、本発明のクローディン産生促進剤、及びオクルディン産生促進剤、並びに、皮膚バリア機能改善剤は、ヒトに対して好適に適用されるものであるが、その作用効果が奏される限り、ヒト以外の動物（例えば、マウス、ラット、ハムスター、イヌ、ネコ、ウシ、ブタ、サルなど）に対して適用することも可能である。
また、本発明のクローディン産生促進剤、及びオクルディン産生促進剤、並びに、皮膚バリア機能改善剤は、天然由来の各抽出物を有効成分としたものであり、安全性に優れる点でも、有利である。

以下、本発明の実施例を説明するが、本発明は、これらの実施例に何ら限定されるものではない。

（製造例１）
−各植物の水抽出物の製造−
各植物の抽出原料として、アスパラサスリネアスの全草、イチョウの葉、イラクサの葉、ウコンの根茎、ノイバラの果実、オウゴンの根、ヨモギの葉、カミツレの花、シソの葉、トウキンセンカの花、モモの葉、マチルスオドラチシマの樹皮、メリッサの葉、ラベンダーの花、レイシの子実体をそれぞれ使用した。前記各植物の抽出原料１００ｇを、水１，０００ｍＬに投入し、穏やかに攪拌しながら２時間、９０℃に保った後、ろ過した。ろ液を４０℃で減圧下に濃縮し、更に減圧乾燥機で乾燥して、粉末状の抽出物を得た。

（製造例２）
−ローヤルゼリーの抽出物の製造−
ヨーロッパミツバチ（ＡｐｉｓｍｅｌｉｆｉｃａＬ．）の咽頭部から分泌されるローヤルゼリー１ｋｇに５０体積％エタノール（水とエタノールとの体積比１：１）９．５Ｌを加えて、１０℃にて５時間撹拌した。これを５，０００ｒｐｍで３０分間遠心分離し、得られた上澄液を集め、冷所にて１ヶ月間放置した。これをメンブランフィルター（２μｍ）で濾過し、ろ液に５０体積％エタノール（水とエタノールとの体積比１：１）を追加し、全量を１０Ｌとした。これを真空凍結乾燥し、凍結乾燥物を得た。

（実施例１：クローディン‐１産生促進作用試験）
被験試料として、アスパラサスリネアリス抽出液、イチョウ葉抽出液、イラクサ抽出液、ウコン抽出液‐Ｊ、エイジツ抽出液‐Ｒ、オウゴン抽出液、ガイヨウ抽出液、カミツレ抽出液、シソ抽出液、トウキンセンカ抽出液、モモ抽出液、マチルス抽出液、メリッサ抽出液‐Ｊ、ラベンダー抽出液、レイシ抽出液、及びローヤルゼリー抽出液（全て丸善製薬株式会社製）の各凍結乾燥品を用い、下記の試験方法によりクローディン‐１産生促進作用を試験した。

正常ヒト皮膚表皮角化細胞（ＮＨＥＫ）を８０ｃｍ^２のフラスコで正常ヒト表皮角化細胞培地（ＫＧＭ）にて３７℃、５％ＣＯ_２下で培養し、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を２．０×１０^５個／ｍＬの細胞密度となるようにＫＧＭで希釈した後、９６ウェルプレートに１ウェルあたり１００μＬずつ播種し、５％ＣＯ_２下、３７℃で１日間培養した。
培養終了後、ＫＧＭで溶解した被験試料の溶液を各ウェルに１００μＬずつ添加し、３７℃、５％ＣＯ_２下で２４時間培養した。培養終了後、培地を抜き、細胞をプレートに固定させ、細胞表面に発現したクローディン‐１の量をポリクローナルクローディン‐１抗体を用いたＥＬＩＳＡ法により測定した。
得られた測定結果から、下記式によりクローディン‐１産生促進率（％）を算出した。
クローディン‐１産生促進率（％）＝Ａ／Ｂ × １００
ただし、式中、Ａは、「被験試料添加時の波長４０５ｎｍにおける吸光度」を表す。Ｂは、「被験試料無添加時の波長４０５ｎｍにおける吸光度」を表す。
上記試験の結果を表１〜１６に示す。なお、上記式において、試料無添加のクローディン‐１産生促進率は１００％となる。

表１〜１６の結果から、アスパラサスリネアリス、イチョウ、イラクサ、ウコン、ノイバラ、オウゴン、ヨモギ、カミツレ、シソ、トウキンセンカ、モモ、マチルスオドラチシマ、メリッサ、ラベンダー、レイシ、及びローヤルゼリーの各抽出物は、優れたクローディン‐１産生促進作用を有することが確認できた。

（実施例２：オクルディン産生促進作用試験）
被験試料として、アスパラサスリネアリス抽出液、イチョウ葉抽出液、イラクサ抽出液、オウゴン抽出液、ガイヨウ抽出液、カミツレ抽出液、マチルス抽出液、メリッサ抽出液‐Ｊ、ラベンダー抽出液、レイシ抽出液、及びローヤルゼリー抽出液（全て丸善製薬株式会社製）の各凍結乾燥品を用い、下記の試験方法によりオクルディン産生促進作用を試験した。

正常ヒト皮膚表皮角化細胞（ＮＨＥＫ）を８０ｃｍ²のフラスコで正常ヒト表皮角化細胞培地（ＫＧＭ）にて３７℃、５％ＣＯ_２下で培養し、トリプシン処理により細胞を回収した。回収した細胞を２．０×１０^５個／ｍＬの細胞密度となるようにＫＧＭで希釈した後、９６ウェルプレートに１ウェルあたり１００μＬずつ播種し、５％ＣＯ₂下、３７℃で１日間培養した。
培養終了後、ＫＧＭで溶解した試料溶液を各ウェルに１００μＬずつ添加し、３７℃、５％ＣＯ₂下で２４時間培養した。培養終了後、培地を抜き、細胞をプレートに固定させ細胞表面に発現したオクルディンの量をポリクローナルオクルディン抗体を用いたＥＬＩＳＡ法により測定した。
得られた測定結果から、下記式によりオクルディン産生促進率（％）を算出した。
オクルディン産生促進率（％）＝Ｃ／Ｄ × １００
ただし、式中、Ｃは、「被験試料添加時の波長４０５ｎｍにおける吸光度」を表す。Ｄは、「被験試料無添加時の波長４０５ｎｍにおける吸光度」を表す。
上記試験の結果を表１７〜２７に示す。なお、上記式において、試料無添加のオクルディン産生促進率は１００％となる。

表１７〜２７の結果から、アスパラサスリネアリス、イチョウ、イラクサ、オウゴン、ヨモギ、カミツレ、マチルスオドラチシマ、メリッサ、ラベンダー、レイシ、及びローヤルゼリーの各抽出物は、優れたオクルディン産生促進作用を有することが確認できた。

実施例１〜２の結果から、アスパラサスリネアリスの抽出物、イチョウの抽出物、イラクサの抽出物、ウコンの抽出物、ノイバラの抽出物、オウゴンの抽出物、ヨモギの抽出物、カミツレの抽出物、シソの抽出物、トウキンセンカの抽出物、モモの抽出物、マチルスオドラチシマの抽出物、メリッサの抽出物、ラベンダーの抽出物、レイシの抽出物、及びローヤルゼリーの抽出物は、クローディン産生促進作用、及びオクルディン産生促進作用の少なくともいずれかを有することが確認され、これらのことから、アスパラサスリネアリスの抽出物、イチョウの抽出物、イラクサの抽出物、ウコンの抽出物、ノイバラの抽出物、オウゴンの抽出物、ヨモギの抽出物、カミツレの抽出物、シソの抽出物、トウキンセンカの抽出物、モモの抽出物、マチルスオドラチシマの抽出物、メリッサの抽出物、ラベンダーの抽出物、レイシの抽出物、及びローヤルゼリーの抽出物が、皮膚バリア機能改善剤の有効成分として、好適に利用可能であることが示唆された。

本発明のクローディン産生促進剤、及びオクルディン産生促進剤、並びに、皮膚バリア機能改善剤は、優れたクローディン産生促進作用、及び優れたオクルディン産生促進作用の少なくともいずれかを有し、これらの作用に基づく皮膚バリア改善作用を、極めて効果的に発揮させることができるので、例えば、乾燥肌、荒れ肌、アトピー性皮膚炎、及び各種感染症などの皮膚症状の予防・改善を目的として、好適に利用可能である。

Claims

イラクサの葉の抽出物、オウゴンの根の抽出物、シソの葉の抽出物、トウキンセンカの花の抽出物、及びメリッサの葉の抽出物から選択される少なくとも１種を含有し、表皮顆粒層のタイトジャンクションを構成する蛋白質であるクローディンの産生促進作用を有することを特徴とするクローディン産生促進剤。
イラクサの葉の抽出物、及びオウゴンの根の抽出物から選択される少なくとも１種を含有し、表皮顆粒層のタイトジャンクションを構成する蛋白質であるオクルディンの産生促進作用を有することを特徴とするオクルディン産生促進剤。