JP5176127B2 - 視覚機能障害の予防または改善剤 - Google Patents

Description

本発明は、長期間服用しても安全で有効な視覚機能障害の予防または改善に有効な医薬品、医薬部外品または食品に関する。

高齢化社会、コンピュータ社会の到来とともに、視覚機能の低下が問題となっている。網膜の黄斑は、視力の中心を担っており、健全な視覚機能を維持する上で必要不可欠な組織である。その一方で、網膜は常に光に曝されているため、酸化ストレスを受けやすく障害を受けやすい部位である。網膜の障害は、眼精疲労、視力低下、老視、かすみ目、視野低下、暗順応低下、加齢黄斑変性症または網膜色素変性症といった症状で現れ、著しい視覚機能の低下を引き起こす。その結果、筋肉、神経等に過剰な負荷が生じ、眼精疲労を引き起こす（非特許文献１参照）。

眼に入った光は、角膜、水晶体、硝子体を通って網膜へと到達する。中でも、この光を捉える部位である網膜が視覚機能の中心を担っている。網膜は、眼球の内側から内境界膜、視神経線維層、神経節細胞層、内網状層、内顆粒層、外網状層、外顆粒層、外境界膜、視細胞層、網膜色素上皮層の１０層からなる。

これら網膜の各部位の機能を評価する方法としては、電気生理学的な手法である網膜電図が広く用いられている。網膜電図はａ波、ｂ波、ｃ波および律動様小波の４つの波形に大きく分類される。ａ波は視細胞を、ｂ波はミュラー細胞や双曲細胞を、ｃ波は網膜色素上皮細胞を、律動様小波はアマクリン細胞を起源とする波形を示している。つまり、網膜電図を測定することにより、網膜の障害部位を特定することができ、視覚機能を評価することが可能である。また、これらの波形は光暴露によっても減弱することが知られている（非特許文献２参照）。

網膜障害モデル動物としても、光障害モデルが広く用いられており、光照射を行うことにより、網膜電図の各波形が減弱するとともに、網膜にアポトーシスが生じることが知られている（非特許文献３及び４参照）。近年、網膜疾患の原因の一つとして、単なる光による酸化ストレスではなく、青色光による網膜細胞のアポトーシスが注目されている。網膜に青色光が照射されると網膜素上皮細胞に蓄積するリポフスチンと特異的に反応し、網膜色素上皮細胞のアポトーシスを誘導することが知られている（非特許文献５及び６参照）。

すなわち網膜電図の測定、青色光による網膜細胞のアポトーシスの測定により、眼精疲労、視力低下、老視、かすみ目、視野低下、暗順応低下、加齢黄斑変性症または網膜色素変性症の評価をすることができる。

網膜は、一度障害を受けると自然に再生することができない組織であり、現在のような高齢化社会、コンピュータ社会において、長期間の光刺激から網膜を保護することは質の高いＱＯＬを維持する上で必要不可欠である。

天然物由来の網膜障害予防剤としては、茶の抽出物を有効成分とした網膜障害予防剤（特許文献１及び２参照）が知られている。また、一部の抗酸化物質が網膜疾患に有効との報告もあるが、逆に負の相関があるとの報告もあり、未だ、十分効果のある予防及び治療薬は存在していない（非特許文献７）。

ケイヒ（桂皮）はクスノキ科（Lauraceae）のケイヒ（Cinnamomum Cassia）およびその他同属植物の主に樹皮を乾燥したものであり、健胃、駆風、矯味、発汗、解熱、鎮痛薬として、中枢神経系の興奮を鎮静し、水分代謝を調節し、体表の毒を去り、これを和解する作用があることから、頭痛、発熱、のぼせ、感冒、身体疼痛などに対する効果が知られている（非特許文献８）。また、ケイヒの網膜のアポトーシス抑制作用や網膜障害に由来する視覚機能障害に対する効果は知られていない。

レイシカクは，ムクロジ科（Sapindaceae）のレイシ（Litchi Chinensis）の果実の種子を乾燥したものであり、収斂、鎮痛、消炎薬として、瘰癧、胃痛、腸疝痛、睾丸炎腫痛、咳などに対する効果が知られている（非特許文献９）。また、レイシカクのアポトーシスに関する知見としては、ライチ抽出物を有効成分とするアポトーシス誘導剤（特許文献４）が知られているが、網膜に対するアポトーシス抑制作用や網膜障害に由来する視覚機能障害に対する効果は知られていない。

特開２００１−２７０８３２号公報 特開２００２−２２０３４０号公報 特開２００１−２２６２７６号公報 特開２００３−２５２７８０号公報 あたらしい眼科、14(9)、1289-1293、1997 加齢と眼、48-50、1999 Jpn J Ophthalmol、44、615-619、2000 Invest Ophthalmol Visual Sci、43(10)、3349-3354、2002 Invest Ophthalmol Visual Sci、42(6)、1356-1362、2001 J Biol Chem、278、18207-18213、2003 眼科診療プラクティス、5(7)、92、2002 和漢薬百科図鑑II １４０−１４２ 和漢薬百科図鑑I ２５３−２５４

本発明は、長期間服用しても安全で有効な視覚機能障害の予防または改善剤を提供することを目的とする。

本発明者らは、上記課題を解決するために鋭意検討を行った結果、ケイヒおよびレイシカクエキスが光照射により生じる網膜障害モデルラットに対する視覚機能障害の予防効果及び網膜アポトーシス抑制効果を有することを見出し、本発明を完成した。すなわち、本発明は、
（１）ケイヒおよびレイシカクから選ばれる１種または２種を配合したことを特徴とする視覚機能障害の予防または改善剤、
（２）視覚機能障害が網膜障害である（１）に記載の予防または改善剤、
（３）ケイヒおよびレイシカクから選ばれる１種または２種を配合したことを特徴とする網膜アポトーシス抑制剤、
である。

本発明により、光などにより生じる視覚機能障害の予防または改善に有効で安全性の高い医薬品、医薬部外品または食品の提供が可能になった。

本発明に用いるケイヒおよびレイシカクは、そのまま生薬末として、または水、有機溶媒、それらの混合溶媒などで抽出したエキスとして使用できる。またエキスは、乾燥エキス、流エキスなどを用いることもできる。

本発明に用いるケイヒはクスノキ科（Lauraceae）のCinnamomum Cassiaおよびその他同属植物の樹皮又は周皮の一部を除いたもの、枝、果実、葉などを使用することができる。好ましくは、Cinnamomum Cassia Blume又はその他同属植物の樹皮又は周皮の一部を除いたものである。

本発明に用いるレイシカクは、ムクロジ科（Sapindaceae）のレイシ（Litchi Chinensis）の果実及びその種子を使用することができる。好ましくは、成熟果実の種子である。

ケイヒおよびレイシカクの抽出に用いる溶媒は特に限定されず、例えば、抽出溶媒として水、エタノール、メタノール、プロピレングリコール、１，３−ブチレングリコール、酢酸エチル、ベンゼン、ヘキサン、エチルエーテル、アセトン、塩化メチレンなどがあげられる。またこれら溶媒は、一種または二種以上を組み合わせて使用することができる。そのうちで、好ましい抽出溶媒としては、水、エタノールまたはそれらの混合溶媒が好ましく、有効成分を効率良く抽出するためには、エタノール濃度１５〜８５質量％の含水エタノールがさらに好ましい。

本発明で用いるケイヒおよびレイシカクの投与量は、年齢、性別、体重などを考慮して適宜増減できるが、通常、成人で1日、原生薬換算量として、経口剤の場合１ｍｇ〜５０ｇ、好ましくは１００ｍｇ〜１５ｇであり、非経口剤の場合０．０１ｍｇ〜５ｇ、好ましくは０．０５ｍｇ〜２ｇである。

本発明においては、より優れた効果の点から、さらにビタミン類を添加すると好ましい。ビタミン類としてはビタミンＡ、ビタミンＢ群、ビタミンＣ、ビタミンＤ、ビタミンＥ、ビタミンＨ、ビタミンＫおよびその誘導体等があげられ、これらの一種または二種以上を配合することができ、より好ましいものとしては、ビタミンＢ群があげられる。

本発明に使用されるビタミンＢ群としては、ビタミンＢ１、ビタミンＢ２、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、ナイアシン、パントテン酸、葉酸、ニコチン酸等があげられ、ビタミンＢ１、ビタミンＢ６、ビタミンＢ１２、葉酸がより好ましく、ビタミンＢ６が特に好ましい。

本発明に使用されるビタミンＢ１としては、塩酸チアミン、硝酸チアミン、硝酸ビスチアミン、チアミンジスルフィド、チアミンジセチル硫酸エステル塩、塩酸ジセチアミン、塩酸フルスルチアミン、オクトチアミン、シコチアミン、ビスイブチアミン、ビスベンチアミン、フルスルチアミン、プロスルチアミン、ベンフォチアミン等があげられる。

本発明に使用されるビタミンＢ６としては、塩酸ピリドキシン、リン酸ピリドキサール等があげられる。

本発明に使用されるビタミンＢ１２としては、メコバラミン、塩酸ヒドロキソコバラミン、酢酸ヒドロキソコバラミン、シアノコバラミン、ヒドロキソコバラミン等があげられる。

本発明は、発明の効果を損なわない質的および量的範囲で、アミノ酸、賦形剤、pH調整剤、清涼化剤、懸濁化剤、消泡剤、粘稠剤、溶解補助剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、抗酸化剤、コーティング剤、着色剤、矯味矯臭剤、界面活性剤、可塑剤、香料などを配合することができ、常法により、錠剤、液剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、チュアブル錠、ドライシロップ剤、点眼剤、点鼻剤、クリーム剤、ローション剤、ゲル剤、軟膏剤、貼付剤、乳剤などの経口または非経口製剤とすることができる。

以下に実施例および試験例をあげ、本発明をさらに具体的に説明する。

原生薬量５００ｇのケイヒを細切後、１０倍量の５０％エタノールを加え、沸騰状態で３０分間加熱抽出し、濾過後減圧下でエタノールを留去し、さらに、濃縮を行うことによりエキスを得た。

原生薬量５００ｇのケイヒを細切後、１０倍量の水を加え、１００℃で３０分間加熱抽出し、濾過後減圧下で濃縮を行うことによりエキスを得た。

原生薬量５００ｇのレイシカクを細切後、１０倍量の５０％エタノールを加え、沸騰状態で３０分間加熱抽出し、濾過後減圧下でエタノールを留去し、さらに、濃縮を行うことによりエキスを得た。

実施例３で得られたレイシカクエキスに等量のデキストリンを添加し、乾燥粉末を得た。

原生薬量５００ｇのレイシカクを細切後、１０倍量の水を加え、１００℃で３０分間加熱抽出し、濾過後減圧下で濃縮を行うことによりエキスを得た。

実施例１で得られたケイヒエキスを１．６ｇ秤量し、精製水を加え、全量１００mLとし、エキス濃度が原生薬換算１．０ｇ／１０mLとなる液剤を調整した。

実施例３で得られたレイシカクエキスを１．３ｇ秤量し、精製水を加え、全量１００mLとし、エキス濃度が原生薬換算１．０ｇ／１０mLとなる液剤を調整した。

実施例１で得られたケイヒエキスを０．８ｇ、実施例３で得られたレイシカクエキスを０．６５ｇ秤量し、精製水を加え、全量１００mLとし、エキス濃度が原生薬換算１．０ｇ／１０mLとなる液剤を調整した。

実施例１で得られたケイヒエキスを０．１６ｇ、実施例３で得られたレイシカクエキスを０．１３ｇ、硝酸チアミンを０．１ｇ、塩酸ピリドキシンを０．１ｇ、シアノコバラミンを０．００１５ｇ秤量し、精製水を加え、全量１００mLとなる液剤を調整した。

ケイヒ末を１ｇを秤量し、精製水を加え、全量１００mLとなる懸濁液剤を調整した。

実施例３で得られたレイシカクエキスを０．１３ｇ秤量し、精製水を加え、全量１００mLとなる液剤を調整した。

ケイヒ末を１ｇ、実施例３で得られたレイシカクエキスを０．１３ｇ、塩酸ピリドキシンを１ｇ秤量し、精製水を加え、全量１００mLとなる液剤を調整した。

試験例１
試験にはＳＤ系雄性ラット９週齢オス（日本チャールスリバー）を用いた。ラットに実施例６及び実施例７にて得られた液剤を１０mL／Kgの用量で１日１回、２週間経口投与した。１２日目に中心波長約４７０ｎｍの青色光を２４時間照射した。照射終了４８時間後に約１５時間の暗順応の後、ケタミン−キシラジン麻酔下にて網膜電図を測定し、ａ波およびｂ波の振幅（μＶ）を測定した。また、比較対照群として、無処置群および光照射のみを行った光照射群を設定した。なお、すべての群の例数は１０とした。

結果を表１に示した。なお、表中数字は平均値±標準誤差を示している。

表１で示したように、無処置群と比較して、光照射群では、ａ波、ｂ波共に有意に振幅が低下した。一方、ケイヒエキス投与群およびレイシカクエキス投与群は光照射群と比較して、ａ波、ｂ波共に有意に振幅の低下が抑制された。

以上の結果、ケイヒエキスおよびレイシカクエキスは光照射により生じる網膜障害を防ぎ、視覚機能の低下を予防あるいは改善することが明らかになった。

試験例２
試験にはＳＤ系雄性ラット６週齢オス（日本チャールスリバー）を用いた。ラットに実施例１２にて得られた液剤を１０mL／Kgの用量で１日１回、１０日間経口投与した。無処置群及び光照射群には精製水を投与した。１２日目に中心波長約４７０ｎｍの青色光を２４時間照射した。照射終了４８時間後に約１５時間の暗順応の後、ケタミン−キシラジン麻酔下にて網膜電図を測定し、ａ波の振幅（μＶ）を測定した。また、比較対照群として、無処置群および光照射のみを行った光照射群を設定した。なお、すべての群の例数は１０とした。

結果を表２に示した。なお、表中数字は平均値を示している。

表２で示したように、無処置群と比較して、光照射群では、ａ波の振幅が有意に低下した。実施例１２投与群では光照射群と比較して、ａ波の振幅の低下が有意に抑制された。

以上の結果、ケイヒ、レイシカク、ビタミンを併用することにより、光照射により生じる網膜障害の抑制作用が増強されることが明らかになった。

試験例３
網膜色素上皮細胞を９６穴プレートにＤ−ＭＥＭ／Ｆ１２培地を用いて１ウェル当たり１×１０^４個になるように藩種し、ＣＯ_２インキュベータ内で培養した。正常サンプル以外にはリポフスチンを約２５μＭになるよう添加し、さらにケイヒエキスサンプル及びレイシカクエキスサンプルには実施例１または実施例３で得られたそれぞれのエキスを１００μｇ／mLになるよう添加した。約２４時間の培養の後、中心波長約４７０ｎｍの青色光をＣＯ_２インキュベータ内で１時間照射し、翌日、正常サンプルの細胞の生存率を１００％としたときの各群の生存率をＣｅｌｌ Ｃｏｕｎｔｉｎｇ Ｋｉｔ−８（和光純薬工業）を用いて算出した。また、細胞死の形態がアポトーシスであることはアポトーシススクリーニングキットワコー（和光純薬工業）を用いて確認した。結果を表３に示した。

表３で示したように対照群と比較してケイヒエキスサンプル及びレイシカクエキスサンプルでは、対照サンプルと比較して高い生存率を示した。すなわち、ケイヒ及びレイシカクは網膜細胞のアポトーシスを強く抑制し、網膜保護作用を示すことが明らかになった。

ケイヒおよびレイシカクは、網膜アポトーシスにより生じる網膜機能低下の抑制に有効であることから、本発明は視覚機能障害を予防あるいは改善するための医薬品、医薬部外品または食品に使用可能である。

Claims (4)

1. ケイヒおよびレイシカクから選ばれる１種または２種を配合したことを特徴とする網膜障害の予防または改善剤（ただし、糖尿病合併症に伴う網膜障害を除く）。
2. ケイヒおよびレイシカクから選ばれる１種または２種を配合したことを特徴とする網膜障害に起因する眼精疲労の予防または治療剤（ただし、糖尿病合併症に伴う網膜障害に起因する眼精疲労を除く）
3. ケイヒおよびレイシカクから選ばれる１種または２種を配合したことを特徴とする網膜アポトーシス抑制剤（ただし、糖尿病合併症に伴う網膜アポトーシスを除く）。
4. さらにビタミンＢ６を配合したことを特徴とする請求項１〜３のいずれか１項に記載の予防または改善剤。