JP3993670B2 - 感作金属コロイド試薬溶液の安定化方法および安定な感作金属コロイド試薬含有溶液 - Google Patents
感作金属コロイド試薬溶液の安定化方法および安定な感作金属コロイド試薬含有溶液 Download PDFInfo
- Publication number
- JP3993670B2 JP3993670B2 JP26162097A JP26162097A JP3993670B2 JP 3993670 B2 JP3993670 B2 JP 3993670B2 JP 26162097 A JP26162097 A JP 26162097A JP 26162097 A JP26162097 A JP 26162097A JP 3993670 B2 JP3993670 B2 JP 3993670B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- concentration range
- acid
- ions
- metal colloid
- solution
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 title claims description 38
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 title claims description 35
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 title claims description 35
- 239000002184 metal Substances 0.000 title claims description 35
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 15
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 title description 7
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N deoxycholic acid Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 KXGVEGMKQFWNSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 17
- FBZONXHGGPHHIY-UHFFFAOYSA-N xanthurenic acid Chemical compound C1=CC=C(O)C2=NC(C(=O)O)=CC(O)=C21 FBZONXHGGPHHIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N Calcium cation Chemical compound [Ca+2] BHPQYMZQTOCNFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 229910001424 calcium ion Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 229960003964 deoxycholic acid Drugs 0.000 claims description 10
- 229960000633 dextran sulfate Drugs 0.000 claims description 10
- BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N (3alpha,5alpha,7alpha,12alpha)-3,7,12-trihydroxy-cholan-24-oic acid Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(O)=O)C)C1(C)C(O)C2 BHQCQFFYRZLCQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 239000004380 Cholic acid Substances 0.000 claims description 9
- JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N Magnesium ion Chemical compound [Mg+2] JLVVSXFLKOJNIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- 229910001422 barium ion Inorganic materials 0.000 claims description 9
- BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N cholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 BHQCQFFYRZLCQQ-OELDTZBJSA-N 0.000 claims description 9
- 229960002471 cholic acid Drugs 0.000 claims description 9
- 235000019416 cholic acid Nutrition 0.000 claims description 9
- KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N deoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 KXGVEGMKQFWNSR-LLQZFEROSA-N 0.000 claims description 9
- 229910001425 magnesium ion Inorganic materials 0.000 claims description 9
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 8
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 claims description 7
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 claims description 7
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 claims description 6
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 claims description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 6
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims description 4
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 claims description 4
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 claims description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 36
- PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N Sodium azide Chemical compound [Na+].[N-]=[N+]=[N-] PXIPVTKHYLBLMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 10
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 10
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 9
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 7
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 7
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 6
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 6
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 6
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 6
- -1 dextran sulfate Substances 0.000 description 5
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 5
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 5
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 5
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 4
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 4
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 4
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 3
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 3
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 3
- 235000011147 magnesium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 3
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 3
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- SXGZJKUKBWWHRA-UHFFFAOYSA-N 2-(N-morpholiniumyl)ethanesulfonate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)CC[NH+]1CCOCC1 SXGZJKUKBWWHRA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XCBLFURAFHFFJF-UHFFFAOYSA-N 3-[bis(2-hydroxyethyl)azaniumyl]-2-hydroxypropane-1-sulfonate Chemical compound OCCN(CCO)CC(O)CS(O)(=O)=O XCBLFURAFHFFJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 2
- WDIHJSXYQDMJHN-UHFFFAOYSA-L barium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ba+2] WDIHJSXYQDMJHN-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910001626 barium chloride Inorganic materials 0.000 description 2
- OYLGJCQECKOTOL-UHFFFAOYSA-L barium fluoride Chemical compound [F-].[F-].[Ba+2] OYLGJCQECKOTOL-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229910001632 barium fluoride Inorganic materials 0.000 description 2
- VSGNNIFQASZAOI-UHFFFAOYSA-L calcium acetate Chemical compound [Ca+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O VSGNNIFQASZAOI-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000001639 calcium acetate Substances 0.000 description 2
- 235000011092 calcium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 229960005147 calcium acetate Drugs 0.000 description 2
- 229960002713 calcium chloride Drugs 0.000 description 2
- 239000004227 calcium gluconate Substances 0.000 description 2
- 235000013927 calcium gluconate Nutrition 0.000 description 2
- 229960004494 calcium gluconate Drugs 0.000 description 2
- OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L calcium sulfate Chemical compound [Ca+2].[O-]S([O-])(=O)=O OSGAYBCDTDRGGQ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- NEEHYRZPVYRGPP-UHFFFAOYSA-L calcium;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanoate Chemical compound [Ca+2].OCC(O)C(O)C(O)C(O)C([O-])=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C([O-])=O NEEHYRZPVYRGPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- UEGPKNKPLBYCNK-UHFFFAOYSA-L magnesium acetate Chemical compound [Mg+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O UEGPKNKPLBYCNK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000011654 magnesium acetate Substances 0.000 description 2
- 235000011285 magnesium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 229940069446 magnesium acetate Drugs 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 2
- OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L potassium sulfate Chemical compound [K+].[K+].[O-]S([O-])(=O)=O OTYBMLCTZGSZBG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 2
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 2
- NRHMKIHPTBHXPF-TUJRSCDTSA-M sodium cholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 NRHMKIHPTBHXPF-TUJRSCDTSA-M 0.000 description 2
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 2
- MGSRCZKZVOBKFT-UHFFFAOYSA-N thymol Chemical compound CC(C)C1=CC=C(C)C=C1O MGSRCZKZVOBKFT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CMCBDXRRFKYBDG-UHFFFAOYSA-N 1-dodecoxydodecane Chemical compound CCCCCCCCCCCCOCCCCCCCCCCCC CMCBDXRRFKYBDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AJTVSSFTXWNIRG-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(2-hydroxyethyl)amino]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+](CCO)CCS([O-])(=O)=O AJTVSSFTXWNIRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RZQXOGQSPBYUKH-UHFFFAOYSA-N 3-[[1,3-dihydroxy-2-(hydroxymethyl)propan-2-yl]azaniumyl]-2-hydroxypropane-1-sulfonate Chemical compound OCC(CO)(CO)NCC(O)CS(O)(=O)=O RZQXOGQSPBYUKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 108700016232 Arg(2)-Sar(4)- dermorphin (1-4) Proteins 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 239000006173 Good's buffer Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007987 MES buffer Substances 0.000 description 1
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 1
- BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N Selenium Chemical compound [Se] BUGBHKTXTAQXES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N Silver Chemical compound [Ag] BQCADISMDOOEFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ABBQHOQBGMUPJH-UHFFFAOYSA-M Sodium salicylate Chemical compound [Na+].OC1=CC=CC=C1C([O-])=O ABBQHOQBGMUPJH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000005844 Thymol Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 229940095672 calcium sulfate Drugs 0.000 description 1
- 235000011132 calcium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 229960002086 dextran Drugs 0.000 description 1
- 235000013681 dietary sucrose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000003317 immunochromatography Methods 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 229910001410 inorganic ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 1
- 229960002337 magnesium chloride Drugs 0.000 description 1
- 229960003390 magnesium sulfate Drugs 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- XBECFEJUQZXMFE-UHFFFAOYSA-N n-(4-aminobutyl)acetamide;hydrochloride Chemical compound Cl.CC(=O)NCCCCN XBECFEJUQZXMFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003742 phenol Drugs 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 1
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 1
- 229910052939 potassium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011151 potassium sulphates Nutrition 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 229910052711 selenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011669 selenium Substances 0.000 description 1
- 230000001235 sensitizing effect Effects 0.000 description 1
- 229910052709 silver Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004332 silver Substances 0.000 description 1
- 229940077386 sodium benzenesulfonate Drugs 0.000 description 1
- WXMKPNITSTVMEF-UHFFFAOYSA-M sodium benzoate Chemical compound [Na+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 WXMKPNITSTVMEF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 235000010234 sodium benzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004299 sodium benzoate Substances 0.000 description 1
- 229960003885 sodium benzoate Drugs 0.000 description 1
- FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M sodium deoxycholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC([O-])=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 FHHPUSMSKHSNKW-SMOYURAASA-M 0.000 description 1
- 229960004025 sodium salicylate Drugs 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- MZSDGDXXBZSFTG-UHFFFAOYSA-M sodium;benzenesulfonate Chemical compound [Na+].[O-]S(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 MZSDGDXXBZSFTG-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 229960000790 thymol Drugs 0.000 description 1
Landscapes
- Colloid Chemistry (AREA)
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】
本発明は感作金属コロイド試薬の溶液中での安定化に関するものである。特に、主として臨床検査の分野で、抗原抗体反応を利用した免疫学的測定に用いられる感作金属コロイド試薬の溶液中での安定化法とその含有組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
抗原抗体反応を利用した免疫学的測定において金属コロイドが広く用いられている。例えば、抗体を感作した金属コロイドを抗原と反応させて、抗原・抗体−金属コロイド複合体を形成させ、この複合体を抗体が固定化された判定紙（膜）上で泳動させると、固定化された抗体に複合体が捕捉され、その結果、金属コロイドによる着色が生じる。この着色を判定することにより抗原の有無を調べるイムノクロマト法がある。また、溶液中で抗体感作金コロイドと抗原を反応させると、金コロイドが凝集することによって、色調が変化する。この色調を吸光度変化として捉え測定することにより抗原の有無または量を調べるという凝集比色法がある。これらの測定方法においては、測定対象に特異的に結合する物質が金属コロイドに感作された感作金属コロイドが利用され、金属コロイドとしては金コロイドが用いられる場合が多い。
【０００３】
金属コロイドを感作処理後に懸濁させる溶液の組成について、多くの報告がある。特開平９−５３２７の０.０５％ポリエチレングリコール（分子量約２００００）／ＰＢＳ溶液（実施例１）、特開平２−１４１６６５の０.０５Ｍリン酸ナトリウム−０.１５Ｍ食塩−０.０５％カーボワックス２０Ｍ（ｐＨ７.２）（実施例３、ｐ４）、特開平８−２７８３０５の１０ｍＭＨＥＰＥＳ（ｐＨ７.１）、０.３Ｍ Ｄ−マンニトール、０.０５％ポリエチレングリコール（分子量２００００）、０.１％牛血清アルブミン(ＢＳＡ)（実施例：金コロイド標識抗ヒトヘモグロビンモノクローナル抗体の調製、ｐ３右カラム、４１−４７行）、特公平７−４６１０７の２０ｍＭトリス緩衝液（ｐＨ８.２）、１５０ｍＭ塩化ナトリウム、１％ＢＳＡ（実施例５、ｐ１０右カラム、４２−４３行）、特開平７−３１８５６０の０.１Ｍトリス緩衝液（ｐＨ７.６）、０.３％ＢＳＡ、０.２５％ポリエチレングリコール（６０００）、４％シュークロース、０.１％アジ化ナトリウム（実施例、ｐ７右カラム、１１−１５行）、特開平６−９４７１８の１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６.４）、１％ＢＳＡ、０.０５％アジ化ナトリウム（実施例１、ｐ５左カラム、９−１３行）、等がある。また、Ｂｉｏｃｈｅｍ.Ｂｉｏｐｈｙｓ. Ｒｅｓ. Ｃｏｍｍｕｎ. Ｖｏｌ.１２１、Ｎｏ.１（１９８４）ｐ２８４−２８９のｐ２８５では、感作金コロイドをＰＢＳ（リン酸緩衝生理食塩水）／１％ＢＳＡ／０.０２％アジ化ナトリウム溶液中に懸濁したものは、４℃保存で４週間は反応性の低下がなかったと記載されている。
【０００４】
また、金コロイド免疫測定時にナトリウム、カリウム、リチウム、マグネシウムの各塩を反応液中に存在させる方法が開示されている（特開平９−５３２６）が、これらの塩の添加は感作金コロイド試薬の安定化を目的とするものではなく、免疫反応の判定を容易にするためのものである。さらに、感作する前の金属コロイドの凝集防止方法（特開平９−７０５２７）として、無機イオンを含まず、かつ有機系である緩衝剤（例としてトリスヒドロキシメチルアミノメタン、Ｎ−トリスヒドロキシメチル−２−アミノメタンスルホン酸等）を組成成分として用いる方法が開示されている。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
上記のように感作処理後の金属コロイドを懸濁させる溶液には、緩衝剤、ＢＳＡ、ポリエチレングリコール、塩化ナトリウムの使用は一般的である。しかしながら、これら物質が添加された感作金属コロイド試薬溶液では経時的に反応性の低下が生じるので、臨床検査用試薬として、長期使用に耐えられる安定な試薬とすることが望まれる。よって、本発明の目的は、溶液中での感作金属コロイド試薬を安定化する方法、長期保存可能な感作金属コロイド試薬溶液を提供することである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
即ち、本発明はカルシウムイオン、マグネシウムイオンおよびバリウムイオンから選ばれる金属イオン、デキストラン硫酸、コール酸、デオキシコール酸、キサンツレン酸から選ばれる酸またはその塩の１種または２種以上を組成成分として用いることを特徴とする、感作金属コロイド試薬溶液を安定化する方法および安定な感作金属コロイド試薬含有組成物を提供するものである。
また、本発明はカルシウムイオン、マグネシウムイオンおよびバリウムイオンから選ばれる金属イオンの１種または２種以上と、デキストラン硫酸、コール酸、デオキシコール酸、キサンツレン酸から選ばれる酸またはその塩の１種または２種以上とを組み合わせて、組成成分として用いることを特徴とする、感作金属コロイド試薬溶液をさらに安定化する方法およびさらに安定な感作金属コロイド試薬含有組成物を提供するものである。
本発明によれば、感作金属コロイド試薬溶液の反応性を長期に維持することができ、公知の方法に従ってヘモグロビンの測定試薬として好適に使用される。
【０００７】
【発明の実施の形態】
本発明における金属コロイドとしては、金、銀、セレン等のコロイドがあるが、金コロイドが一般的に利用され易く、好ましい。
金属コロイドを感作するものとしては、抗体や抗原の他に、測定対象に特異的に結合するものであれば利用可能である。
本発明で安定化剤として用いられるカルシウムイオン、マグネシウムイオンおよびバリウムイオンから選ばれる金属イオンは、通常塩の形で用いられ、それらの塩としては、溶液中でそれらのイオンを形成する塩であればいずれも利用できる。例えばカルシウムイオンには塩化カルシウム、硫酸カルシウム、酢酸カルシウム、グルコン酸カルシウム等の塩、マグネシウムイオンには塩化マグネシウム、酢酸マグネシウム、硫酸マグネシウム等の塩、バリウムイオンには塩化バリウム、フッ化バリウム等の塩が含まれる。これらの金属イオンは０.０１８−４.５ｍＭの濃度範囲、好ましくは１ｍＭ付近の濃度で配合される。それらを塩の濃度で示せば、例えばカルシウムイオンとしての塩化カルシウムの濃度は０.０００２−０.０５％（０.０１８−４.５ｍＭ）の範囲で、０.０１％（０.９ｍＭ）付近が好ましい。
他の安定化剤であるデキストラン硫酸、コール酸、デオキシコール酸およびキサンツレン酸は遊離酸としてまたはそれらの塩として用いられ、例えばデキストラン硫酸はナトリウム、カリウム等のアルカリ金属塩等が利用でき、その用量は０.０００１−０.２％の濃度範囲である。コール酸およびデオキシコール酸はそのものまたはナトリウム塩等のアルカリ金属塩等が利用でき、その用量は０.０００１−０.５％の範囲である。またキサンツレン酸も、そのものまたはアルカリ金属塩として利用でき、その用量は０.００５−０.１％の範囲である。
本発明における感作金属コロイド試薬液には、従来用いられている緩衝剤、糖および糖アルコール、アルブミン、ポリエチレングリコール、塩化ナトリウム、防腐剤、その他の物質が適宜含まれる。
【０００８】
緩衝剤としては、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、トリス塩酸緩衝液、２−[４−(２−ヒドロキシエチル)−１−ピペラジニル]エタンスルフォン酸（ＨＥＰＥＳ）、Ｎ,Ｎ−ビス(２−ヒドロキシエチル)−２−アミノエタンスルフォン酸（ＢＥＳ）、２−モルフォリノエタンスルフォン酸（ＭＥＳ）、３−[Ｎ,Ｎ−ビス(２−ヒドロキシエチル)アミノ]−２−ヒドロキシプロパンスルフォン酸（ＤＩＰＳＯ）、２−ヒドロキシ−Ｎ−トリス(ヒドロキシメチル)メチル−３−アミノプロパンスルフォン酸（ＴＡＰＳＯ）等のグッド緩衝液が挙げられ、ｐＨは５−９が好ましく、濃度は１−１００ｍＭが好ましい。糖および糖アルコールとしては、グルコ−ス、マンノース、サッカロース、ラクトース、マルトース、マンニトール、ソルビトール等が挙げられ、濃度としては０.０１−１０％が好ましい。アルブミンとしては、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）が好ましく、濃度としては０.００１−１％が好ましい。防腐剤としてはアジ化ナトリウムが好ましく、濃度としては０.０１−０.５％が好ましい。その他の添加物質として、ツィーン２０、ポリエチレングリコール（分子量１、０００−５００、０００）、ポリエチレングリコールラウリルエーテル、５−ブロモサルチル酸、サリチル酸ナトリウム、安息香酸ナトリウム、ベンゼンスルホン酸ナトリウム、フェノール、チモール等が挙げられる。
【０００９】
【実施例】
以下、実施例に基づいて本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
実施例１
ヒトヘモグロビンを緩衝液Ａ（０.０５％ＢＳＡ、０.１％アスパラギン、０.９％塩化ナトリウム、１.８％ポリエチレングリコール、０.０５％アジ化ナトリウムを含む３０ｍＭ ＭＥＳ緩衝液ｐＨ５.７）に溶解して、ヘモグロビン濃度０、５０、１００および２００ｎｇ／ｍｌの溶液を調製し、小分け分注し−４０℃の冷凍庫に凍結保存したものを融解し、検体として使用する。
抗ヘモグロビン抗体を感作した金コロイド試薬（メイチェック ヘモプレート（オート）（日本商事（株）製）の金コロイド試薬凍結乾燥品（６０ｍｌ用）を０.２％ＢＳＡ、６％マンニトール、０.１％アジ化ナトリウムを含む１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液Ｂ(１５ｍｌ)で溶解する（金コロイド液）。各種の安定化剤（後記表１および表２を参照）を蒸留水に溶解し、試料溶液とする。ただし、酸の物質については水酸化ナトリウム溶液を添加し中性に調整する。前記、金コロイド液と試料溶液を１：１に混合し、金コロイド試薬溶液とする。
金コロイド試薬溶液の反応性は金コロイド凝集比色法により以下のように測定する。マイクロプレートに検体(２５μｌ)、緩衝液Ａ(５０μｌ)、金コロイド試薬溶液(１００μｌ)を添加後、マイクロプレートを撹拌し、撹拌後約３０秒後とその６分後の吸光度（主波長５４０ｎｍ、副波長７００ｎｍ）をプレートリーダーを用いて測定する。初期吸光度と６分後の吸光度の差（変化）を検体（ヘモグロビン）に対する金コロイド試薬溶液の反応性の指標とする。金コロイド試薬溶液の調製当日と３７℃にて３日保存後に検体を測定し、調製当日の金コロイド試薬溶液の反応性を１００％として、３７℃にて３日保存後の残存反応率（％）を求める。その結果を表１に示す。
【００１０】
【表１】
【００１１】
表１の安定化剤の濃度は金コロイド試薬溶液中の濃度である。対照（蒸留水添加）に比べ、塩化マグネシウム、酢酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、塩化カルシウム、酢酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、フッ化バリウム、デキストラン硫酸カリウム、コール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム、キサンツレン酸の添加で、金コロイド試薬溶液の反応の低下が抑制され、金コロイド試薬溶液の安定化効果が認められる。
【００１２】
実施例２
実施例１と同様の方法で、金コロイド試薬溶液の調製当日と３７℃にて３、６日保存後に検体を測定し、安定化剤の単独および組み合わせの添加による金コロイド試薬溶液の安定化効果について検討する。その結果を表２に示す。
【００１３】
【表２】
【００１４】
表２の試験結果から明らかなように、塩化バリウム、塩化マグネシウム、塩化カルシウム、デキストラン硫酸カリウム、コール酸ナトリウム、キサンツレン酸各単独とそれらの組み合わせの添加それぞれに金コロイド試薬溶液の安定化効果が認められる。
【００１５】
【発明の効果】
感作金属コロイド試薬溶液の反応性の低下をカルシウムイオン、マグネシウムイオンおよびバリウムイオンから選ばれる金属イオン、デキストラン硫酸、コール酸、デオキシコール酸、キサンツレン酸から選ばれる酸またはその塩の１種または２種以上を用いることにより抑制することができ、感作金属コロイド試薬の安定化が図れる。従って、本発明によれば、より長期にわたり感作金属コロイド試薬溶液の安定化が可能となり、感作金属コロイド試薬溶液を用いた抗原抗体反応等の測定を行う臨床検査分野において、使用期間の延長や測定精度の向上に寄与することができる。
【発明の属する技術分野】
本発明は感作金属コロイド試薬の溶液中での安定化に関するものである。特に、主として臨床検査の分野で、抗原抗体反応を利用した免疫学的測定に用いられる感作金属コロイド試薬の溶液中での安定化法とその含有組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】
抗原抗体反応を利用した免疫学的測定において金属コロイドが広く用いられている。例えば、抗体を感作した金属コロイドを抗原と反応させて、抗原・抗体−金属コロイド複合体を形成させ、この複合体を抗体が固定化された判定紙（膜）上で泳動させると、固定化された抗体に複合体が捕捉され、その結果、金属コロイドによる着色が生じる。この着色を判定することにより抗原の有無を調べるイムノクロマト法がある。また、溶液中で抗体感作金コロイドと抗原を反応させると、金コロイドが凝集することによって、色調が変化する。この色調を吸光度変化として捉え測定することにより抗原の有無または量を調べるという凝集比色法がある。これらの測定方法においては、測定対象に特異的に結合する物質が金属コロイドに感作された感作金属コロイドが利用され、金属コロイドとしては金コロイドが用いられる場合が多い。
【０００３】
金属コロイドを感作処理後に懸濁させる溶液の組成について、多くの報告がある。特開平９−５３２７の０.０５％ポリエチレングリコール（分子量約２００００）／ＰＢＳ溶液（実施例１）、特開平２−１４１６６５の０.０５Ｍリン酸ナトリウム−０.１５Ｍ食塩−０.０５％カーボワックス２０Ｍ（ｐＨ７.２）（実施例３、ｐ４）、特開平８−２７８３０５の１０ｍＭＨＥＰＥＳ（ｐＨ７.１）、０.３Ｍ Ｄ−マンニトール、０.０５％ポリエチレングリコール（分子量２００００）、０.１％牛血清アルブミン(ＢＳＡ)（実施例：金コロイド標識抗ヒトヘモグロビンモノクローナル抗体の調製、ｐ３右カラム、４１−４７行）、特公平７−４６１０７の２０ｍＭトリス緩衝液（ｐＨ８.２）、１５０ｍＭ塩化ナトリウム、１％ＢＳＡ（実施例５、ｐ１０右カラム、４２−４３行）、特開平７−３１８５６０の０.１Ｍトリス緩衝液（ｐＨ７.６）、０.３％ＢＳＡ、０.２５％ポリエチレングリコール（６０００）、４％シュークロース、０.１％アジ化ナトリウム（実施例、ｐ７右カラム、１１−１５行）、特開平６−９４７１８の１０ｍＭリン酸緩衝液（ｐＨ６.４）、１％ＢＳＡ、０.０５％アジ化ナトリウム（実施例１、ｐ５左カラム、９−１３行）、等がある。また、Ｂｉｏｃｈｅｍ.Ｂｉｏｐｈｙｓ. Ｒｅｓ. Ｃｏｍｍｕｎ. Ｖｏｌ.１２１、Ｎｏ.１（１９８４）ｐ２８４−２８９のｐ２８５では、感作金コロイドをＰＢＳ（リン酸緩衝生理食塩水）／１％ＢＳＡ／０.０２％アジ化ナトリウム溶液中に懸濁したものは、４℃保存で４週間は反応性の低下がなかったと記載されている。
【０００４】
また、金コロイド免疫測定時にナトリウム、カリウム、リチウム、マグネシウムの各塩を反応液中に存在させる方法が開示されている（特開平９−５３２６）が、これらの塩の添加は感作金コロイド試薬の安定化を目的とするものではなく、免疫反応の判定を容易にするためのものである。さらに、感作する前の金属コロイドの凝集防止方法（特開平９−７０５２７）として、無機イオンを含まず、かつ有機系である緩衝剤（例としてトリスヒドロキシメチルアミノメタン、Ｎ−トリスヒドロキシメチル−２−アミノメタンスルホン酸等）を組成成分として用いる方法が開示されている。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
上記のように感作処理後の金属コロイドを懸濁させる溶液には、緩衝剤、ＢＳＡ、ポリエチレングリコール、塩化ナトリウムの使用は一般的である。しかしながら、これら物質が添加された感作金属コロイド試薬溶液では経時的に反応性の低下が生じるので、臨床検査用試薬として、長期使用に耐えられる安定な試薬とすることが望まれる。よって、本発明の目的は、溶液中での感作金属コロイド試薬を安定化する方法、長期保存可能な感作金属コロイド試薬溶液を提供することである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】
即ち、本発明はカルシウムイオン、マグネシウムイオンおよびバリウムイオンから選ばれる金属イオン、デキストラン硫酸、コール酸、デオキシコール酸、キサンツレン酸から選ばれる酸またはその塩の１種または２種以上を組成成分として用いることを特徴とする、感作金属コロイド試薬溶液を安定化する方法および安定な感作金属コロイド試薬含有組成物を提供するものである。
また、本発明はカルシウムイオン、マグネシウムイオンおよびバリウムイオンから選ばれる金属イオンの１種または２種以上と、デキストラン硫酸、コール酸、デオキシコール酸、キサンツレン酸から選ばれる酸またはその塩の１種または２種以上とを組み合わせて、組成成分として用いることを特徴とする、感作金属コロイド試薬溶液をさらに安定化する方法およびさらに安定な感作金属コロイド試薬含有組成物を提供するものである。
本発明によれば、感作金属コロイド試薬溶液の反応性を長期に維持することができ、公知の方法に従ってヘモグロビンの測定試薬として好適に使用される。
【０００７】
【発明の実施の形態】
本発明における金属コロイドとしては、金、銀、セレン等のコロイドがあるが、金コロイドが一般的に利用され易く、好ましい。
金属コロイドを感作するものとしては、抗体や抗原の他に、測定対象に特異的に結合するものであれば利用可能である。
本発明で安定化剤として用いられるカルシウムイオン、マグネシウムイオンおよびバリウムイオンから選ばれる金属イオンは、通常塩の形で用いられ、それらの塩としては、溶液中でそれらのイオンを形成する塩であればいずれも利用できる。例えばカルシウムイオンには塩化カルシウム、硫酸カルシウム、酢酸カルシウム、グルコン酸カルシウム等の塩、マグネシウムイオンには塩化マグネシウム、酢酸マグネシウム、硫酸マグネシウム等の塩、バリウムイオンには塩化バリウム、フッ化バリウム等の塩が含まれる。これらの金属イオンは０.０１８−４.５ｍＭの濃度範囲、好ましくは１ｍＭ付近の濃度で配合される。それらを塩の濃度で示せば、例えばカルシウムイオンとしての塩化カルシウムの濃度は０.０００２−０.０５％（０.０１８−４.５ｍＭ）の範囲で、０.０１％（０.９ｍＭ）付近が好ましい。
他の安定化剤であるデキストラン硫酸、コール酸、デオキシコール酸およびキサンツレン酸は遊離酸としてまたはそれらの塩として用いられ、例えばデキストラン硫酸はナトリウム、カリウム等のアルカリ金属塩等が利用でき、その用量は０.０００１−０.２％の濃度範囲である。コール酸およびデオキシコール酸はそのものまたはナトリウム塩等のアルカリ金属塩等が利用でき、その用量は０.０００１−０.５％の範囲である。またキサンツレン酸も、そのものまたはアルカリ金属塩として利用でき、その用量は０.００５−０.１％の範囲である。
本発明における感作金属コロイド試薬液には、従来用いられている緩衝剤、糖および糖アルコール、アルブミン、ポリエチレングリコール、塩化ナトリウム、防腐剤、その他の物質が適宜含まれる。
【０００８】
緩衝剤としては、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）、トリス塩酸緩衝液、２−[４−(２−ヒドロキシエチル)−１−ピペラジニル]エタンスルフォン酸（ＨＥＰＥＳ）、Ｎ,Ｎ−ビス(２−ヒドロキシエチル)−２−アミノエタンスルフォン酸（ＢＥＳ）、２−モルフォリノエタンスルフォン酸（ＭＥＳ）、３−[Ｎ,Ｎ−ビス(２−ヒドロキシエチル)アミノ]−２−ヒドロキシプロパンスルフォン酸（ＤＩＰＳＯ）、２−ヒドロキシ−Ｎ−トリス(ヒドロキシメチル)メチル−３−アミノプロパンスルフォン酸（ＴＡＰＳＯ）等のグッド緩衝液が挙げられ、ｐＨは５−９が好ましく、濃度は１−１００ｍＭが好ましい。糖および糖アルコールとしては、グルコ−ス、マンノース、サッカロース、ラクトース、マルトース、マンニトール、ソルビトール等が挙げられ、濃度としては０.０１−１０％が好ましい。アルブミンとしては、ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）が好ましく、濃度としては０.００１−１％が好ましい。防腐剤としてはアジ化ナトリウムが好ましく、濃度としては０.０１−０.５％が好ましい。その他の添加物質として、ツィーン２０、ポリエチレングリコール（分子量１、０００−５００、０００）、ポリエチレングリコールラウリルエーテル、５−ブロモサルチル酸、サリチル酸ナトリウム、安息香酸ナトリウム、ベンゼンスルホン酸ナトリウム、フェノール、チモール等が挙げられる。
【０００９】
【実施例】
以下、実施例に基づいて本発明をより詳細に説明するが、本発明はこれら実施例に限定されるものではない。
実施例１
ヒトヘモグロビンを緩衝液Ａ（０.０５％ＢＳＡ、０.１％アスパラギン、０.９％塩化ナトリウム、１.８％ポリエチレングリコール、０.０５％アジ化ナトリウムを含む３０ｍＭ ＭＥＳ緩衝液ｐＨ５.７）に溶解して、ヘモグロビン濃度０、５０、１００および２００ｎｇ／ｍｌの溶液を調製し、小分け分注し−４０℃の冷凍庫に凍結保存したものを融解し、検体として使用する。
抗ヘモグロビン抗体を感作した金コロイド試薬（メイチェック ヘモプレート（オート）（日本商事（株）製）の金コロイド試薬凍結乾燥品（６０ｍｌ用）を０.２％ＢＳＡ、６％マンニトール、０.１％アジ化ナトリウムを含む１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液Ｂ(１５ｍｌ)で溶解する（金コロイド液）。各種の安定化剤（後記表１および表２を参照）を蒸留水に溶解し、試料溶液とする。ただし、酸の物質については水酸化ナトリウム溶液を添加し中性に調整する。前記、金コロイド液と試料溶液を１：１に混合し、金コロイド試薬溶液とする。
金コロイド試薬溶液の反応性は金コロイド凝集比色法により以下のように測定する。マイクロプレートに検体(２５μｌ)、緩衝液Ａ(５０μｌ)、金コロイド試薬溶液(１００μｌ)を添加後、マイクロプレートを撹拌し、撹拌後約３０秒後とその６分後の吸光度（主波長５４０ｎｍ、副波長７００ｎｍ）をプレートリーダーを用いて測定する。初期吸光度と６分後の吸光度の差（変化）を検体（ヘモグロビン）に対する金コロイド試薬溶液の反応性の指標とする。金コロイド試薬溶液の調製当日と３７℃にて３日保存後に検体を測定し、調製当日の金コロイド試薬溶液の反応性を１００％として、３７℃にて３日保存後の残存反応率（％）を求める。その結果を表１に示す。
【００１０】
【表１】
表１の安定化剤の濃度は金コロイド試薬溶液中の濃度である。対照（蒸留水添加）に比べ、塩化マグネシウム、酢酸マグネシウム、硫酸マグネシウム、塩化カルシウム、酢酸カルシウム、グルコン酸カルシウム、フッ化バリウム、デキストラン硫酸カリウム、コール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム、キサンツレン酸の添加で、金コロイド試薬溶液の反応の低下が抑制され、金コロイド試薬溶液の安定化効果が認められる。
【００１２】
実施例２
実施例１と同様の方法で、金コロイド試薬溶液の調製当日と３７℃にて３、６日保存後に検体を測定し、安定化剤の単独および組み合わせの添加による金コロイド試薬溶液の安定化効果について検討する。その結果を表２に示す。
【００１３】
【表２】
表２の試験結果から明らかなように、塩化バリウム、塩化マグネシウム、塩化カルシウム、デキストラン硫酸カリウム、コール酸ナトリウム、キサンツレン酸各単独とそれらの組み合わせの添加それぞれに金コロイド試薬溶液の安定化効果が認められる。
【００１５】
【発明の効果】
感作金属コロイド試薬溶液の反応性の低下をカルシウムイオン、マグネシウムイオンおよびバリウムイオンから選ばれる金属イオン、デキストラン硫酸、コール酸、デオキシコール酸、キサンツレン酸から選ばれる酸またはその塩の１種または２種以上を用いることにより抑制することができ、感作金属コロイド試薬の安定化が図れる。従って、本発明によれば、より長期にわたり感作金属コロイド試薬溶液の安定化が可能となり、感作金属コロイド試薬溶液を用いた抗原抗体反応等の測定を行う臨床検査分野において、使用期間の延長や測定精度の向上に寄与することができる。
Claims (10)
- 濃度範囲が0.018〜4.5mMの範囲の、カルシウムイオン、マグネシウムイオンおよびバリウムイオンから選ばれる金属イオン、または濃度範囲0.0001〜0.2％のデキストラン硫酸、濃度範囲0.0001〜0.5％のコール酸、濃度範囲0.0001〜0.5％のデオキシコール酸、および濃度範囲0.005〜0.1％のキサンツレン酸から選ばれる酸もしくはそれらの塩から選ばれる物質の１種または２種以上を用いることを特徴とする感作金属コロイド試薬溶液の安定化方法。
- 濃度範囲が0.018〜4.5mMの範囲の、カルシウムイオン、マグネシウムイオンおよびバリウムイオンから選ばれる金属イオンの１種または２種以上と、濃度範囲0.0001〜0.2％のデキストラン硫酸、濃度範囲0.0001〜0.5％のコール酸、濃度範囲0.0001〜0.5％のデオキシコール酸および濃度範囲0.005〜0.1％のキサンツレン酸から選ばれる酸もしくはそれらの塩の１種または２種以上とを組み合わせて用いることを特徴とする請求項１に記載の方法。
- 金属コロイドが金コロイドである請求項１または２に記載の方法。
- 金属コロイドの感作が抗体による感作である請求項１、２または３に記載の方法。
- 抗体がヒトヘモグロビンに対する抗体である請求項４に記載の方法。
- 濃度範囲が0.018〜4.5mMの範囲の、カルシウムイオン、マグネシウムイオンおよびバリウムイオンから選ばれる金属イオン、または濃度範囲0.0001〜0.2％のデキストラン硫酸、濃度範囲0.0001〜0.5％のコール酸、濃度範囲0.0001〜0.5％のデオキシコール酸、および濃度範囲0.005〜0.1％のキサンツレン酸から選ばれる酸もしくはそれらの塩から選ばれる物質の１種または２種以上を含有することを特徴とする安定な感作金属コロイド試薬含有溶液。
- 濃度範囲が0.018〜4.5mMの範囲の、カルシウムイオン、マグネシウムイオンおよびバリウムイオンから選ばれる金属イオンの１種または２種以上と、濃度範囲0.0001〜0.2％のデキストラン硫酸、濃度範囲0.0001〜0.5％のコール酸、濃度範囲0.0001〜0.5％のデオキシコール酸、および濃度範囲0.005〜0.1％のキサンツレン酸から選ばれる酸もしくはその塩の１種または２種以上とを含有することを特徴とする請求項６に記載の溶液。
- 金属コロイドが金コロイドである請求項６または７に記載の溶液。
- 金属コロイドの感作が抗体による感作である請求項６、７または８に記載の溶液。
- 抗体がヒトヘモグロビンに対する抗体である請求項９に記載の溶液。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP26162097A JP3993670B2 (ja) | 1997-09-26 | 1997-09-26 | 感作金属コロイド試薬溶液の安定化方法および安定な感作金属コロイド試薬含有溶液 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP26162097A JP3993670B2 (ja) | 1997-09-26 | 1997-09-26 | 感作金属コロイド試薬溶液の安定化方法および安定な感作金属コロイド試薬含有溶液 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH11101799A JPH11101799A (ja) | 1999-04-13 |
| JP3993670B2 true JP3993670B2 (ja) | 2007-10-17 |
Family
ID=17364435
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP26162097A Expired - Fee Related JP3993670B2 (ja) | 1997-09-26 | 1997-09-26 | 感作金属コロイド試薬溶液の安定化方法および安定な感作金属コロイド試薬含有溶液 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3993670B2 (ja) |
Families Citing this family (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8080430B2 (en) | 2006-04-25 | 2011-12-20 | Canon Kabushiki Kaisha | Target substance detection material and method and kit for detecting target substance |
| EP1980853A1 (en) * | 2007-04-11 | 2008-10-15 | Alfresa Pharma Corporation | Method of preventing precipitation of a reactive substance-bound microparticle, and reagent containing the micro particle |
| CN102667481A (zh) * | 2009-12-23 | 2012-09-12 | 皇家飞利浦电子股份有限公司 | 分析物测量设备和方法 |
| CN104792981B (zh) * | 2014-01-20 | 2016-10-05 | 辽宁成大动物药业有限公司 | 一种酶标记抗体结合物稳定剂及其应用 |
| JP6636070B2 (ja) * | 2017-02-27 | 2020-01-29 | 三洋化成工業株式会社 | 免疫測定方法及び免疫測定用キット |
| CN112051401B (zh) * | 2020-08-28 | 2022-09-06 | 武汉生之源生物科技股份有限公司 | 一种胃蛋白酶原的测定试剂盒 |
-
1997
- 1997-09-26 JP JP26162097A patent/JP3993670B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH11101799A (ja) | 1999-04-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0852009B1 (en) | Buffer composition for reagents for immunoassay | |
| EP0481020B1 (en) | Silver enhanced gold-labelled immuno assay method | |
| JP7784481B2 (ja) | ヘモグロビンの測定試薬、測定キット及び測定方法 | |
| CN115327137B (zh) | 一种人免疫球蛋白g4亚型化学发光免疫检测试剂盒 | |
| JP5364310B2 (ja) | 反応性物質が結合した微小粒子の安定化方法および該微小粒子含有試薬 | |
| JP3993670B2 (ja) | 感作金属コロイド試薬溶液の安定化方法および安定な感作金属コロイド試薬含有溶液 | |
| AU2025267460A1 (en) | Method of stabilizing protein contained in specimen and solution for stabilizing protein contained in specimen | |
| JP5442179B2 (ja) | 反応性物質が結合した微小粒子の沈降抑制方法および該微小粒子含有試薬 | |
| JPH06300761A (ja) | 免疫比濁測定試薬及び測定方法 | |
| EP0152847B1 (en) | Stabilized enzyme conjugate composition | |
| US20040033529A1 (en) | Stabilized composition of troponin for immunoassays and method of preparation of such a stabilized composition | |
| EP1980853A1 (en) | Method of preventing precipitation of a reactive substance-bound microparticle, and reagent containing the micro particle | |
| KR20100095422A (ko) | 면역학적 미소 입자의 응집 반응을 사용하는 검체의 아크롤레인 부가체의 측정 방법 및 측정용 키트 | |
| JP3983909B2 (ja) | 感作金属コロイド試薬溶液の安定化方法及び該安定化試薬溶液 | |
| JP4033534B2 (ja) | ヒトヘモグロビンの安定化方法 | |
| US4891311A (en) | Stabilized enzyme conjugate composition | |
| CN114966055B (zh) | 一种缓冲液在胶质纤维酸性蛋白检测试剂盒中的应用 | |
| US20080261328A1 (en) | Method of preventing precipitation of a reactive substance-bound microparticle, and reagent containing the micro particle | |
| JP3872880B2 (ja) | 感作金属コロイド含有安定化凍結乾燥物及びその製造方法 | |
| CN115290892B (zh) | 一种缓冲液在脑特异性蛋白产物9.5检测试剂盒中的应用 | |
| CN120847391B (zh) | 一种样本稀释液及其应用、试剂盒 | |
| JPH09224942A (ja) | ヒトヘモグロビンの安定化方法 | |
| CN118706772B (zh) | 一种抗干扰的尿微量白蛋白测定试剂盒 | |
| JP2885092B2 (ja) | Ｃ反応性タンパク質の測定法及び測定試薬 | |
| JP3230897B2 (ja) | 特異結合反応用組成物及び特異結合反応媒体組成物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20040820 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20060113 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20061024 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20061221 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20070501 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20070618 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20070710 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20070727 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100803 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110803 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120803 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120803 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130803 Year of fee payment: 6 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |