JP3596919B2

JP3596919B2 - Method for producing high-purity optically active compounds

Info

Publication number: JP3596919B2
Application number: JP30255694A
Authority: JP
Inventors: 明弘井村; 彰彦宮寺
Original assignee: 第一製薬株式会社
Priority date: 1994-12-07
Filing date: 1994-12-07
Publication date: 2004-12-02
Anticipated expiration: 2019-12-02
Also published as: JPH08157454A

Description

【０００１】
【産業上の利用分野】
本発明は、化７
【０００２】
【化７】

で表される優れたキノロン誘導体（特開平２−２３１４７５号）の製造原料として有用な、式（４）
【０００３】
【化８】

（式中、Ｒはベンジル基、トリチル基、ベンズヒドリル基または低級アルキル基を意味する。ここで置換基Ｒがベンゼン環を有する置換基の場合、そのベンゼン環は置換基を有していてもよい。ｎは２または３を表す。）
で示される光学活性なアミン化合物の製造法に関する。
【０００４】
【従来の技術】
従来、式（４）で表される立体配位のアミン化合物を立体異性体的に純粋に製造する方法は特開平４−１４９１７４号に記載の如く光学活性な酒石酸との塩として得る方法（ラセミ体の分割）が知られている。しかしこの方法は塩による光学分割であり、完全な分割が可能となっても不要な立体のアミン化合物が残存することを免れ得ない。
【０００５】
【発明が解決しようとする課題】
本発明の目的は、キノロン誘導体の製造原料として有用な式（４）で表される化合物（以下、化合物（４）という。他の番号の式の化合物についても同様に省略する。）について、微生物を用いた不斉還元反応によって所望の立体異性体のみを製造する方法を提供することにある。
【０００６】
すなわち本発明は、式（１）
【０００７】
【化９】

（式中、Ｒはベンジル基、トリチル基、ベンズヒドリル基または低級アルキル基を意味する。ここで置換基Ｒがベンゼン環を有する置換基の場合、そのベンゼン環は置換基を有していてもよい。ｎは２または３を表す。）
で示される化合物を、
ファエオクレオプシス属に属し不斉還元能を有する微生物の菌体、培養液または微生物菌体処理物で処理することを特徴とする、式（２）
【０００８】
【化１０】

（式中、Ｒはベンジル基、トリチル基、ベンズヒドリル基または低級アルキル基を意味する。ここで置換基Ｒがベンゼン環を有する置換基の場合、そのベンゼン環は置換基を有していてもよい。ｎは２または３を表す。）
で示される化合物の製法に関する。
【０００９】
さらに本発明は、式（１）の化合物が、Ｒがベンジル基でありｎが２もしくは３である化合物であるところの上記の製法に関する。
【００１０】
また本発明は、式（１）で示される化合物を、
ファエオクレオプシス属に属し不斉還元能を有する微生物の菌体、培養液または微生物菌体処理物で処理し、
式（２）で示される化合物を得、この式（２）で示される化合物にジフェニルホスホリルアジドを作用させ、式（３）
【００１１】
【化１１】

（式中、Ｒはベンジル基、トリチル基、ベンズヒドリル基または低級アルキル基を意味する。ここで置換基Ｒがベンゼン環を有する置換基の場合、そのベンゼン環は置換基を有していてもよい。ｎは２または３を表す。）
で示される化合物を得、この式（３）で示される化合物を還元することを特徴とする式（４）
【００１２】
【化１２】

（式中、Ｒはベンジル基、トリチル基、ベンズヒドリル基または低級アルキル基を意味する。ここで置換基Ｒがベンゼン環を有する置換基の場合、そのベンゼン環は置換基を有していてもよい。ｎは２または３を表す。）
で示される化合物の製造法に関する。
【００１３】
そして本発明は、式（３）で示される化合物の還元が、金属水素化アルミニウム化合物あるいはジボランによる還元である上記の製法に関する。
【００１４】
さらに本発明は、式（１）の化合物が、Ｒがベンジル基でありｎが２である化合物であるところ上記の製法に関する。
【００１５】
本発明について以下に詳細に説明する。
すなわち本発明は、化合物（１）に対してファエオクレオプシス属に属する微生物から選ばれるところの不斉還元能を有する微生物を作用させ、光学活性な化合物（２）を得、更にこれをアミン化合物である化合物（４）に変換する方法に関するものである。
【００１６】
本発明に使用される式（１）で示される化合物において置換基Ｒは、ベンジル基、トリチル基、ベンズヒドリル基または低級アルキル基を意味する。ここでＲが部分構造としてベンゼン環を有するベンジル基、トリチル基、ベンズヒドリル基であるとき、そのベンゼン環はさらに置換基を有していてもよい。ベンゼン環が複数ある場合、１以上のベンゼン環が置換されていてもよい。またベンゼン環１に対して置換基は１種以上が１以上置換していてもよい。このようなベンゼン環上の置換基としては、メチル基、エチル基、プロピル基、ブチル基、ペンチル基またはヘキシル基等のアルキル基類、メトキシル基、エトキシル基、プロポキシル基、ブトキシル基、ペントキシル基、ヘキシルオキシ基等のアルコキシル基類、ハロゲン原子類、およびニトロ基からなる群から選ばれる置換基でよい。式（１）で示される化合物は既知の方法によって調製することができる（特開平３−９５１７６号公報、特開平５−２８６９３３号公報参照）。
【００１７】
本発明の方法によって化合物（１）から化合物（２）を製造するには、市販のファエオクレオプシス属（Ｐｈａｅｏｃｒｅｏｐｓｉｓｓｐ．）に属する微生物であって、不斉還元能を有する微生物を使用して製造すればよい。この方法にはファエオクレオプシス属に属する微生物の菌体、培養液または微生物菌体処理物が使用できる。
【００１８】
微生物の菌体とは、培養液から遠心分離、濾過等により集菌された生菌体、あるいは、真空乾燥菌体、凍結乾燥菌体および有機溶媒による乾燥菌体等の乾燥菌体などである。また、菌体を公知の方法によって水不溶の担体（例えば、アクリルアミドゲル）などに固定化したものを使用してもよい。
【００１９】
微生物の培養液とは、当該微生物を適当な培地で培養したもので、増殖した微生物菌体およびその代謝物を含むものである。
【００２０】
微生物菌体処理物は、微生物菌体の抽出物や微生物菌体の磨砕物、微生物菌体を超音波処理ものや、さらには、それらをクロマトグラフィー、濾過等の公知の方法により分画し、本発明の不斉還元の処理に必要な成分を分離したものである。なお、この分画物に含まれる処理に必要な成分は完全に純粋な状態でなくともよく、反応に障害とならないのであれば他の成分を含んでいてもよい。
【００２１】
本発明の方法によって式（２）で表される化合物を製造する方法について述べる。すなわち、まず式（１）で表される化合物を適当な緩衝液に懸濁し、次いでファエオクレオプシス属する微生物の菌体、培養物または処理物を加え、撹拌して処理することによって行えばよい。
【００２２】
この処理に際して、処理温度は通常５℃から６０℃の範囲であればよいが、好ましくは２０℃から４０℃の範囲である。処理液のｐＨは４から９の範囲であればよく、好ましくはｐＨ５から７の範囲である。処理時間は、通常、１日から３日間であり、処理液を撹拌して行えばよい。
【００２３】
処理液中で使用されるところの式（１）で表される化合物の濃度は、０．１％から５％の間であればよいが、０．１％から０．５％の範囲が特に好ましい。微生物の培養液、微生物菌体または微生物菌体処理物の使用量は特に限定されないが、乾燥菌体重量に換算して、化合物（１）に対し重量比で０．２倍から２倍が適当である。
【００２４】
上記の処理の終了後、処理液を濾過して菌体を除去した後、濾液から抽出、減圧濃縮等の通常の操作を用いることによって目的の化合物（２）を単離することができる。
【００２５】
化合物（２）をアジド化合物である化合物（３）に変換するにはジフェニルホスホリルアジドを反応させる方法によるのが簡便である。本発明ではこの試薬で通常使用される反応条件を用いて実施すればよい。
【００２６】
この化合物（３）を化合物（４）に変換するための還元は、リチウムアルミニウムハイドライド、ナトリウムビス（２−メトキシエトキシ）アルミニウムハイドライド等の金属水素化アルミニウム化合物あるいはジボラン等の水素化ホウ素化合物を使用して行い、化合物（３）のアミド部分とアジド部分とを同時に還元すればよい。
【００２７】
【実施例】
以下に、本発明を実施例あるいは参考例によって具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
【００２８】
［参考例１］
ブドウ糖４％、ペプトン１％、リン酸水素二カリウム０．１％、リン酸二水素カリウム０．１％からなる液体培地（ｐＨ６．０）、１００ｍｌを坂口フラスコに分注し、オートクレーブにて加熱滅菌した。フラスコの培地にファエオクレオプシス属の種菌（ＪＣＭ１８８０）を接種し、３０℃で２晩振とう培養して菌体培養液を得た。
【００２９】
［実施例１］（Ｒ）−５− ベンジル −７− ヒドロキシ −４− オキソ −５− アザスピロ［２．４］ヘプタンの製造
５−ベンジル−４，７− ジオキソ−５− アザスピロ［２．４］ヘプタン３００ｍｇを上記参考例で得た培養液３００ｍｌに懸濁し、３日間撹拌した。反応液に酢酸エチル１００ｍｌを加えセライト濾過により菌体を除いた。水層を更に酢酸エチル１００ｍｌで２回抽出し有機層を乾燥後、溶媒を溜去した。残査をシリカゲルクロマトグラフィ−に供することにより目的物１９５ｍｇ（光学純度９９％ｅｅ）を得た。尚、光学異性体の分析はＨＰＬＣを用いて行った。
【００３０】
・使用カラム：キラルセルＯＪ（ダイセル化学工業株式会社製）
・移動相：ｎ−ヘキサン：イソプロパノ−ル＝１０：１
・流速：０．８ｍｌ／ｍｉｎ、波長：２３０ｎｍ
【００３１】
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） δ：
０．８８ − １．１８（４Ｈ，ｍ），３．１２ − ３．６３（３Ｈ，ｍ），３．９３ − ４．０６（１Ｈ，ｍ），４．４５（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ），７．１９ − ７．３５（５Ｈ，ｍ）．
【００３２】
［実施例２］（Ｒ）−６− ベンジル −８− ヒドロキシ −５− オキソ −６− アザスピロ［３．４］オクタンの製造
６−ベンジル−５，８− ジオキソ−６− アザスピロ［３．４］オクタン１００ｍｇを上記参考例で得た培養液１００ｍｌに懸濁し、２４時間撹拌した。反応液に酢酸エチル５０ｍｌを加えセライト濾過により菌体を除いた。水層を更に酢酸エチル５０ｍｌで２回抽出し有機層を乾燥後、溶媒を溜去した。残査をシリカゲルクロマトグラフィ−に供することにより目的物８０ｍｇ（光学純度９９％ｅｅ）を得た。尚、光学異性体の分析は実施例１と同様ＨＰＬＣを用いて行った。
【００３３】
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） δ：
１．８２ − １．６１（６Ｈ，ｍ），３．２４ − ３．６９（３Ｈ，ｍ），３．９６ − ４．１１（１Ｈ，ｍ），４．５９（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝２Ｈｚ），７．１５ − ７．４０（５Ｈ，ｍ）．
【００３４】
［実施例３］（Ｓ）−７− アジド −５− ベンジル −４− オキソ −５− アザスピロ［２．４］ヘプタンの製造
アゾジカルボン酸ジエチル２３０ｍｇとトリフェニルホスフィン３４０ｍｇを無水テトラヒドロフラン５ｍｌに溶解し、氷冷下３０分間撹拌した。次いで、（Ｒ）−５−ベンジル−７− ヒドロキシ−４− オキソ−５− アザスピロ［２．４］ヘプタン２２０ｍｇとジフェニルホスホリルアジド３６０ｍｇを無水テトラヒドロフランに溶解した溶液を滴下し一晩撹拌した。溶媒を溜去して残査をシリカゲルクロマトグラフィ−に供することにより標記の化合物１５０ｍｇを油状化合物として得た。
【００３５】
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） δ：
０．８５ − １．５１（４Ｈ，ｍ），３．２３ − ３．８３（３Ｈ，ｍ），４．６０（２Ｈ，ｄ，Ｊ＝３Ｈｚ），７．２６ − ７．３０（５Ｈ，ｍ）．
ＩＲ（ＫＢｒ）：２１００ｃｍ^−１（Ｎ_３）
【００３６】
［実施例４］（Ｓ）−７− アミノ −５− ベンジル −５− アザスピロ［２．４］ヘプタンの製造リチウムアルミニウムハイドライドテトラヒドロフラン溶液（１．０Ｍ／Ｌ）３ｍｌに氷冷撹拌下（Ｓ）−７−アジド−５− ベンジル−４− オキソ−５− アザスピロ［２．４］ヘプタン１４０ｍｇを無水テトラヒドロフラン５ｍｌに溶解して滴下し、加熱還流下で１時間撹拌した。反応液を氷冷し水０．２ｍｌ、１０％水酸化ナトリウム水溶液０．２ｍｌを滴下し室温で３０分間撹拌した。不溶物を濾過により除き、濾液を濃縮後残査をシリカゲルクロマトグラフィ−に供することにより標記の化合物９２ｍｇ（光学純度９８％ｅｅ）を得た。尚、光学異性体の分析は、アミンをジニトロベンゾイル体に誘導後ＨＰＬＣを用いて行った。
【００３７】
・使用カラム：スミキラルＯＡ−４６００（住友化学工業株式会社製）
・移動相：ｎ−ヘキサン：エチレンジクロリド：エタノ−ル：トリフルオロ酢酸＝８０：２０：５：０．２
・流速：１．２ｍｌ／ｍｉｎ，波長：２５４ｎｍ
【００３８】
^１Ｈ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ_３） δ：
０．２６ − ０．９６（４Ｈ，ｍ），２．２０ − ３．１６（５Ｈ，ｍ），３．６１（２Ｈ，ｓ），７．３３（５Ｈ，ｂｓ）
【００３９】
【発明の効果】
本発明の方法は、緩和な条件下で反応を行わせることができ、しかも反応時に副反応がほとんど生じないため高純度の光学活性な化合物（２）を得ることができる。さらに、得られた化合物（２）は化合物（３）を経由して化合物（４）に容易に誘導することができる。[0001]
[Industrial applications]
The present invention provides
[0002]
Embedded image

Formula (4) useful as a raw material for producing an excellent quinolone derivative represented by the formula (JP-A-2-231475)
[0003]
Embedded image

(In the formula, R represents a benzyl group, a trityl group, a benzhydryl group or a lower alkyl group. When the substituent R is a substituent having a benzene ring, the benzene ring may have a substituent. .N represents 2 or 3.)
And a method for producing an optically active amine compound represented by the formula:
[0004]
[Prior art]
Conventionally, a method for producing a stereoisomerically pure amine compound represented by the formula (4) in a stereoisomerically pure manner has been disclosed in Japanese Patent Application Laid-Open No. 4-149174, which is a method for obtaining a salt with an optically active tartaric acid (racemic). Body division) is known. However, this method is optical resolution using a salt, and even when complete resolution is possible, it is inevitable that an unnecessary steric amine compound remains.
[0005]
[Problems to be solved by the invention]
An object of the present invention is to provide a compound represented by the formula (4) useful as a raw material for producing a quinolone derivative (hereinafter referred to as compound (4). The same applies to compounds of other numbers). An object of the present invention is to provide a method for producing only a desired stereoisomer by an asymmetric reduction reaction using
[0006]
That is, the present invention relates to the formula (1)
[0007]
Embedded image

(In the formula, R represents a benzyl group, a trityl group, a benzhydryl group or a lower alkyl group. When the substituent R is a substituent having a benzene ring, the benzene ring may have a substituent. .N represents 2 or 3.)
A compound represented by
Formula (2), which is treated with a microorganism, a culture solution, or a treated microbial cell of a microorganism belonging to the genus Phaeocreopsis and having asymmetric reducing ability.
[0008]
Embedded image

(In the formula, R represents a benzyl group, a trityl group, a benzhydryl group or a lower alkyl group. When the substituent R is a substituent having a benzene ring, the benzene ring may have a substituent. .N represents 2 or 3.)
And a process for producing the compound represented by
[0009]
Furthermore, the present invention relates to the above process, wherein the compound of the formula (1) is a compound wherein R is a benzyl group and n is 2 or 3.
[0010]
Further, the present invention provides a compound represented by the formula (1):
Treated with microbial cells of a microorganism belonging to the genus Phaeocreopsis and having asymmetric reduction ability, a culture solution or a processed microbial cell,
A compound represented by the formula (2) is obtained, and diphenylphosphoryl azide is allowed to act on the compound represented by the formula (2).
[0011]
Embedded image

(In the formula, R represents a benzyl group, a trityl group, a benzhydryl group or a lower alkyl group. When the substituent R is a substituent having a benzene ring, the benzene ring may have a substituent. .N represents 2 or 3.)
Wherein the compound represented by the formula (3) is reduced and the compound represented by the formula (3) is reduced:
[0012]
Embedded image

(In the formula, R represents a benzyl group, a trityl group, a benzhydryl group or a lower alkyl group. When the substituent R is a substituent having a benzene ring, the benzene ring may have a substituent. .N represents 2 or 3.)
And a method for producing the compound represented by
[0013]
Further, the present invention relates to the above-mentioned production method, wherein the reduction of the compound represented by the formula (3) is reduction with a metal aluminum hydride compound or diborane.
[0014]
Furthermore, the present invention relates to the above-mentioned production method, wherein the compound of the formula (1) is a compound wherein R is a benzyl group and n is 2.
[0015]
The present invention will be described in detail below.
That is, the present invention provides a compound (1) which is reacted with a microorganism having an asymmetric reduction ability selected from microorganisms belonging to the genus Phaeocleoptis to obtain an optically active compound (2), To a compound (4).
[0016]
The substituent R in the compound represented by the formula (1) used in the present invention means a benzyl group, a trityl group, a benzhydryl group or a lower alkyl group. Here, when R is a benzyl group having a benzene ring as a partial structure, a trityl group, or a benzhydryl group, the benzene ring may further have a substituent. When there are a plurality of benzene rings, one or more benzene rings may be substituted. One or more substituents may be substituted on the benzene ring 1 by one or more. Examples of such a substituent on the benzene ring include alkyl groups such as methyl group, ethyl group, propyl group, butyl group, pentyl group and hexyl group, methoxyl group, ethoxyl group, propoxyl group, butoxyl group, pentoxyl group. Or a substituent selected from the group consisting of alkoxyl groups such as hexyloxy group, halogen atoms, and nitro group. The compound represented by the formula (1) can be prepared by a known method (see JP-A-3-95176 and JP-A-5-286933).
[0017]
In order to produce the compound (2) from the compound (1) by the method of the present invention, the production is carried out using a commercially available microorganism belonging to the genus Phaeocreopsis sp. do it. In this method, cells of a microorganism belonging to the genus Phaeocleoptis, a culture solution or a treated product of the microorganism can be used.
[0018]
Microbial cells are viable cells collected from a culture solution by centrifugation, filtration, or the like, or dried cells such as vacuum-dried cells, freeze-dried cells, and dried cells using an organic solvent. . Alternatively, a cell obtained by immobilizing cells on a water-insoluble carrier (eg, acrylamide gel) by a known method may be used.
[0019]
The culture solution of the microorganism is obtained by culturing the microorganism in an appropriate medium, and contains the grown microorganism cells and metabolites thereof.
[0020]
Microbial cell processed product, microbial cell extract or microbial cell ground product, and microbial cells are subjected to ultrasonic treatment, and further, they are fractionated by known methods such as chromatography and filtration. The components required for the asymmetric reduction treatment of the present invention are separated. The components required for the processing contained in this fraction may not be completely pure, and may contain other components as long as they do not hinder the reaction.
[0021]
A method for producing the compound represented by the formula (2) by the method of the present invention will be described. That is, the method may be carried out by first suspending the compound represented by the formula (1) in an appropriate buffer solution, then adding a cell, culture or treated product of a microorganism belonging to Phaeocreopsis, and treating with stirring.
[0022]
In this treatment, the treatment temperature is usually in the range of 5 ° C. to 60 ° C., preferably in the range of 20 ° C. to 40 ° C. The pH of the treatment liquid may be in the range of 4 to 9, and is preferably in the range of 5 to 7. The processing time is usually from 1 day to 3 days, and the processing liquid may be stirred.
[0023]
The concentration of the compound represented by the formula (1) used in the treatment solution may be between 0.1% and 5%, but is particularly preferably in the range of 0.1% to 0.5%. preferable. The amount of the culture solution of the microorganism, the microbial cells or the processed product of the microbial cells is not particularly limited, but is preferably 0.2 to 2 times the weight of the compound (1) in terms of the dry cell weight. It is.
[0024]
After completion of the above treatment, the treatment solution is filtered to remove bacterial cells, and then the target compound (2) can be isolated from the filtrate by using ordinary operations such as extraction and concentration under reduced pressure.
[0025]
In order to convert the compound (2) into the compound (3) which is an azide compound, a method of reacting diphenylphosphoryl azide is convenient. In the present invention, the reaction may be carried out using reaction conditions usually used for this reagent.
[0026]
The reduction for converting the compound (3) to the compound (4) uses a metal aluminum hydride compound such as lithium aluminum hydride and sodium bis (2-methoxyethoxy) aluminum hydride or a borohydride compound such as diborane. The amide moiety and the azide moiety of compound (3) may be reduced at the same time.
[0027]
【Example】
Hereinafter, the present invention will be described specifically with reference to Examples or Reference Examples, but the present invention is not limited thereto.
[0028]
[Reference Example 1]
100 ml of a liquid medium (pH 6.0) composed of glucose 4%, peptone 1%, dipotassium hydrogen phosphate 0.1% and potassium dihydrogen phosphate 0.1% is dispensed into a Sakaguchi flask and placed in an autoclave. And heat sterilized. The culture medium of the flask was inoculated with a bacterium of the genus Phaeocreopsis (JCM 1880), and cultured with shaking at 30 ° C. for 2 nights to obtain a cell culture solution.
[0029]
Example 1 Preparation of (R) -5- benzyl- 7 -hydroxy -4- oxo -5- azaspiro [2.4] heptane 5-benzyl-4,7-dioxo-5-azaspiro [2.4] Heptane (300 mg) was suspended in the culture solution (300 ml) obtained in the above Reference Example and stirred for 3 days. 100 ml of ethyl acetate was added to the reaction solution, and the cells were removed by filtration through celite. The aqueous layer was further extracted twice with 100 ml of ethyl acetate, the organic layer was dried, and the solvent was distilled off. The residue was subjected to silica gel chromatography to obtain 195 mg of the desired product (optical purity 99% ee). In addition, the analysis of the optical isomer was performed using HPLC.
[0030]
-Column used: Chiral Cell OJ (manufactured by Daicel Chemical Industries, Ltd.)
Mobile phase: n-hexane: isopropanol = 10: 1
-Flow rate: 0.8 ml / min, wavelength: 230 nm
[0031]
¹ H-NMR (CDCl ₃ ) δ:
0.88-1.18 (4H, m), 3.12-3.63 (3H, m), 3.93-4.06 (1H, m), 4.45 (2H, d, J = 2 Hz), 7.19-7.35 (5H, m).
[0032]
Example 2 Preparation of (R) -6- benzyl- 8 -hydroxy -5- oxo -6- azaspiro [3.4] octane 6-benzyl-5,8-dioxo-6-azaspiro [3.4] Octane (100 mg) was suspended in the culture solution (100 ml) obtained in the above Reference Example and stirred for 24 hours. Ethyl acetate (50 ml) was added to the reaction solution, and the cells were removed by celite filtration. The aqueous layer was further extracted twice with 50 ml of ethyl acetate, the organic layer was dried, and the solvent was distilled off. The residue was subjected to silica gel chromatography to obtain 80 mg of the desired product (optical purity: 99% ee). In addition, the analysis of the optical isomer was performed using HPLC similarly to Example 1.
[0033]
¹ H-NMR (CDCl ₃ ) δ:
1.82-1.61 (6H, m), 3.24-3.69 (3H, m), 3.96-4.11 (1H, m), 4.59 (2H, d, J = 2) Hz), 7.15-7.40 (5H, m).
[0034]
Example 3 Production of (S) -7- azido -5- benzyl -4- oxo -5- azaspiro [2.4] heptane 230 mg of diethyl azodicarboxylate and 340 mg of triphenylphosphine were dried. The residue was dissolved in 5 ml of tetrahydrofuran and stirred for 30 minutes under ice cooling. Next, a solution of (R) -5-benzyl-7-hydroxy-4-oxo-5-azaspiro [2.4] heptane (220 mg) and diphenylphosphoryl azide (360 mg) in anhydrous tetrahydrofuran was added dropwise and stirred overnight. The solvent was distilled off, and the residue was subjected to silica gel chromatography to obtain 150 mg of the title compound as an oily compound.
[0035]
¹ H-NMR (CDCl ₃ ) δ:
0.85-1.51 (4H, m), 3.23-3.83 (3H, m), 4.60 (2H, d, J = 3 Hz), 7.26-7.30 (5H, m) m).
IR (KBr): 2100 cm ⁻¹ (N ₃ )
[0036]
Example 4 Preparation of (S) -7- amino - 5 - benzyl - 5 - azaspiro [2.4] heptane Lithium aluminum hydride in 3 ml of tetrahydrofuran solution (1.0 M / L) was stirred under ice-cooling (S). ) -7-Azido-5-benzyl-4-oxo-5-azaspiro [2.4] heptane (140 mg) was dissolved in anhydrous tetrahydrofuran (5 ml) and added dropwise, followed by stirring under heating and reflux for 1 hour. The reaction solution was cooled on ice, 0.2 ml of water and 0.2 ml of a 10% aqueous sodium hydroxide solution were added dropwise, and the mixture was stirred at room temperature for 30 minutes. The insolubles were removed by filtration, the filtrate was concentrated, and the residue was subjected to silica gel chromatography to obtain 92 mg (98% ee of optical purity) of the title compound. In addition, the analysis of the optical isomer was performed using HPLC after derivatizing the amine into the dinitrobenzoyl form.
[0037]
-Column used: Sumichiral OA-4600 (manufactured by Sumitomo Chemical Co., Ltd.)
Mobile phase: n-hexane: ethylene dichloride: ethanol: trifluoroacetic acid = 80: 20: 5: 0.2
・ Flow rate: 1.2 ml / min, wavelength: 254 nm
[0038]
¹ H-NMR (CDCl ₃ ) δ:
0.26-0.96 (4H, m), 2.20-3.16 (5H, m), 3.61 (2H, s), 7.33 (5H, bs)
[0039]
【The invention's effect】
According to the method of the present invention, the reaction can be carried out under mild conditions, and since a side reaction hardly occurs during the reaction, a highly pure optically active compound (2) can be obtained. Further, the obtained compound (2) can be easily derived to compound (4) via compound (3).

Claims

Equation (1)

(In the formula, R represents a benzyl group, a trityl group, a benzhydryl group or a lower alkyl group. When the substituent R is a substituent having a benzene ring, the benzene ring may have a substituent. .N represents 2 or 3.)
A compound represented by
Formula (2), which is treated with a microorganism, a culture solution, or a treated microbial cell of a microorganism belonging to the genus Phaeocreopsis and having asymmetric reducing ability.

(Wherein, the definitions of R and n are the same as defined above.)
Method for producing compound represented by

The method according to claim 1, wherein the compound of the formula (1) is a compound wherein R is a benzyl group and n is 2.

The method according to claim 1, wherein the compound of the formula (1) is a compound wherein R is a benzyl group and n is 3.

Equation (1)

(In the formula, R represents a benzyl group, a trityl group, a benzhydryl group or a lower alkyl group. When the substituent R is a substituent having a benzene ring, the benzene ring may have a substituent. .N represents 2 or 3.)
The compound represented by the formula (2) is treated with a microbial cell, a culture solution or a processed microbial cell of a microorganism belonging to the genus Phaeocleoptis and having asymmetric reduction ability;

(Wherein, the definitions of R and n are the same as defined above.)
The compound represented by the formula (2) is reacted with diphenylphosphoryl azide to give a compound represented by the formula (3)

(Wherein, the definitions of R and n are the same as defined above.)
Wherein the compound represented by the formula (3) is reduced and the compound represented by the formula (3) is reduced:

The method according to claim 4, wherein the reduction of the compound represented by the formula (3) is reduction with a metal aluminum hydride compound or diborane.

The method according to claim 4 or 5, wherein the compound of the formula (1) is a compound wherein R is a benzyl group and n is 2.