JP3056881B2 - 殺ウイルス剤とその使用法 - Google Patents
殺ウイルス剤とその使用法Info
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- JP3056881B2 JP3056881B2 JP4108992A JP10899292A JP3056881B2 JP 3056881 B2 JP3056881 B2 JP 3056881B2 JP 4108992 A JP4108992 A JP 4108992A JP 10899292 A JP10899292 A JP 10899292A JP 3056881 B2 JP3056881 B2 JP 3056881B2
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- Apparatus For Disinfection Or Sterilisation (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、ＩＢＤＶのための殺ウ
イルス剤およびその使用法に関する。
イルス剤およびその使用法に関する。
【０００２】
【従来技術】鶏伝染性ファブリキウス嚢病は１９５７年
に米国東南部の養鶏地帯に初発生したウイルス性の感染
病で、免疫抑制を起こす性質があるため、その被害は大
きく現在ではさらに病原性の強いＩＢＤＶの発生流行が
アメリカ、ヨーロッパからアジア、および我が国でも１
９９０年以降起っている。このＩＢＤＶはウイルスの形
質上抵抗性が強く、現在市販されている殺菌消毒剤およ
びその旧知の用法では殺ウイルス効果は期待しにくい。
一般的に広く使われている界面活性剤の類（いわゆる逆
性石ケンおよび両性石ケン）にいたっては、ＩＢＤＶを
消毒、不活性化するには効果なしと言われ、これがある
程度常識になっていた。逆性石ケンである第４級アンモ
ニウム塩の「塩化ジアルキルジメチルアンモニウム」に
おいても実際にＩＢＤＶに対して殺ウイルス効果がない
ものとされていた。
に米国東南部の養鶏地帯に初発生したウイルス性の感染
病で、免疫抑制を起こす性質があるため、その被害は大
きく現在ではさらに病原性の強いＩＢＤＶの発生流行が
アメリカ、ヨーロッパからアジア、および我が国でも１
９９０年以降起っている。このＩＢＤＶはウイルスの形
質上抵抗性が強く、現在市販されている殺菌消毒剤およ
びその旧知の用法では殺ウイルス効果は期待しにくい。
一般的に広く使われている界面活性剤の類（いわゆる逆
性石ケンおよび両性石ケン）にいたっては、ＩＢＤＶを
消毒、不活性化するには効果なしと言われ、これがある
程度常識になっていた。逆性石ケンである第４級アンモ
ニウム塩の「塩化ジアルキルジメチルアンモニウム」に
おいても実際にＩＢＤＶに対して殺ウイルス効果がない
ものとされていた。
【０００３】
【目的】本発明は、ＩＢＤＶに対してすぐれた殺ウイル
ス効果を示す新らしい殺ウイルス剤とその使用法に関す
る。
ス効果を示す新らしい殺ウイルス剤とその使用法に関す
る。
【０００４】
【構成】本発明の第一は、一般式、
【化２】 で示される塩化ジアルキルジメチルアンモニウム（式
中、Ｒ1とＲ2はいずれもアルキル基であり、同一または
異っていてもよい。）とアルカリ剤を含有することを特
徴とする鶏伝染性ファブリキウス嚢病ウイルス（以下Ｉ
ＢＤＶと略称する）に対する殺ウイルス剤に関する。前
記塩化ジアルキルジメチルアンモニウムにおけるアルキ
ル基としてはＣ8以上、とくにＣ8〜Ｃ12のものが好まし
い。具体的化合物としては例えば塩化ジオクチルジメチ
ルアンモニウム、塩化オクチルデシルジメチルアンモニ
ウム、塩化ジデシルジメチルアンモニウムなどを挙げる
ことができるがそのなかでもとくに塩化ジデシルジメチ
ルアンモニウムが好ましい。
中、Ｒ1とＲ2はいずれもアルキル基であり、同一または
異っていてもよい。）とアルカリ剤を含有することを特
徴とする鶏伝染性ファブリキウス嚢病ウイルス（以下Ｉ
ＢＤＶと略称する）に対する殺ウイルス剤に関する。前
記塩化ジアルキルジメチルアンモニウムにおけるアルキ
ル基としてはＣ8以上、とくにＣ8〜Ｃ12のものが好まし
い。具体的化合物としては例えば塩化ジオクチルジメチ
ルアンモニウム、塩化オクチルデシルジメチルアンモニ
ウム、塩化ジデシルジメチルアンモニウムなどを挙げる
ことができるがそのなかでもとくに塩化ジデシルジメチ
ルアンモニウムが好ましい。
【０００５】
〈使用菌株〉 ＰＶ１株：イタリアにおいて発生したＩＢＤの鶏から分
離されたＩＢＤＶで、ＣＡＭで６２代、ＣＫで２３代継
代したものを使用した。この株はＩＢＤＶ１型に属す
る。 〈鶏および発育鶏卵〉隔離鶏舎で維持されているＰＤＬ
−１系の４〜８週齢のヒナをＣＫ用として使用した。Ｃ
ＡＭ用に１０日齢のＰＤＬ−１系の発育鶏卵を使用し
た。 〈ＣＫ培養法〉ＣＫの増殖培地には、イーグルＭＥＭ培
地「ニッスイ」に０．３％の割合のトリプトースホスフ
ェート培地（ＴＰＢ）を加え、さらに抗生物質（ペニシ
リン１００Ｕ／ｍｌ、カナマイシン１００μｇ／ｍｌ、
およびファンギゾン０．５μｇ／ｍｌ）、０．１５％炭
酸水素ナトリウムおよび５％小牛血清を添加して使用し
た。維持用培地には、イーグルＭＥＭ培地「ニッスイ」
に抗生物質および０．１５％炭酸水素ナトリウムを加え
たものを使用した。消化液は、クエン酸緩衝液にトリプ
シン（Difco, 1:250）を０．０５％の割合に溶解して使
用した。培養には、４〜８週齢のＳＰＦ鶏の腎を無菌的
に取り出し、消化し、細胞を遠心により厚め、その容積
を測って０．２５−０．３％の割合に浮遊させた。細胞
浮遊液を５ｍｌずつシャーレ（直径５５ｍｍ）に分注
し、５％炭酸ガスおよび湿度を含む３７℃の炭酸ガス鶏
卵器内で培養した。培養開始後２日でウイルス接種およ
び実験に使用した。 〈ウイルス継代〉ウイルス株の継代は、前記により準備
したＣＫで行い、ＬＥ（０．５％のラクトアルブミン水
解物、２μｇ／ｍｌのアンホテリシンＢ、２００Ｕ／ｍ
ｌのペニシリンおよび２００μｇ／ｍｌのストレプトマ
イシンを含むアール緩衝液）で１０倍に希釈したウイル
ス液を０．４ｍｌシャーレに接種し、１時間炭酸ガス鶏
卵器内に置いた後、接種ウイルス液を抜き取り、維持用
培地を５ｍｌ加え、４日間培養した。細胞変性効果（Ｃ
ＰＥ）の現われた細胞を培養液共々回収し、−４０℃に
置いて凍結させた後融解し、超音波処理を行った。それ
を遠心した上清をウイルス液として、同様の操作を３〜
４回行いウイルスの継代を行った。 〈ウイルス力価測定〉ウイルス力価は準備したＣＫを用
いて、ブラック法により行なった。ＬＥで１０倍階段希
釈したウイルス液をウイルス継代と同様にＣＫに接種し
た。接種ウイルス液を除いた後、約５０℃に調製した
０．８％の寒天（Bacto agar）、０．３％のＴＰＢ、抗
生物質および５％小牛血清を含むイーグルＭＥＭ培地を
５ｍｌ重層し３日間培養した。培養３日目に、約５０℃
に調製した０．８％の寒天、０．３％のＴＰＢ、抗生物
質および１％のニュートラルレッドを含むイーグルＭＥ
Ｍ培地を５ｍｌ重層し、翌日ブラック数を数えた。ブラ
ック形成単位（ＰＦＵ）はｌｏｇ／ｍｌで示した。
離されたＩＢＤＶで、ＣＡＭで６２代、ＣＫで２３代継
代したものを使用した。この株はＩＢＤＶ１型に属す
る。 〈鶏および発育鶏卵〉隔離鶏舎で維持されているＰＤＬ
−１系の４〜８週齢のヒナをＣＫ用として使用した。Ｃ
ＡＭ用に１０日齢のＰＤＬ−１系の発育鶏卵を使用し
た。 〈ＣＫ培養法〉ＣＫの増殖培地には、イーグルＭＥＭ培
地「ニッスイ」に０．３％の割合のトリプトースホスフ
ェート培地（ＴＰＢ）を加え、さらに抗生物質（ペニシ
リン１００Ｕ／ｍｌ、カナマイシン１００μｇ／ｍｌ、
およびファンギゾン０．５μｇ／ｍｌ）、０．１５％炭
酸水素ナトリウムおよび５％小牛血清を添加して使用し
た。維持用培地には、イーグルＭＥＭ培地「ニッスイ」
に抗生物質および０．１５％炭酸水素ナトリウムを加え
たものを使用した。消化液は、クエン酸緩衝液にトリプ
シン（Difco, 1:250）を０．０５％の割合に溶解して使
用した。培養には、４〜８週齢のＳＰＦ鶏の腎を無菌的
に取り出し、消化し、細胞を遠心により厚め、その容積
を測って０．２５−０．３％の割合に浮遊させた。細胞
浮遊液を５ｍｌずつシャーレ（直径５５ｍｍ）に分注
し、５％炭酸ガスおよび湿度を含む３７℃の炭酸ガス鶏
卵器内で培養した。培養開始後２日でウイルス接種およ
び実験に使用した。 〈ウイルス継代〉ウイルス株の継代は、前記により準備
したＣＫで行い、ＬＥ（０．５％のラクトアルブミン水
解物、２μｇ／ｍｌのアンホテリシンＢ、２００Ｕ／ｍ
ｌのペニシリンおよび２００μｇ／ｍｌのストレプトマ
イシンを含むアール緩衝液）で１０倍に希釈したウイル
ス液を０．４ｍｌシャーレに接種し、１時間炭酸ガス鶏
卵器内に置いた後、接種ウイルス液を抜き取り、維持用
培地を５ｍｌ加え、４日間培養した。細胞変性効果（Ｃ
ＰＥ）の現われた細胞を培養液共々回収し、−４０℃に
置いて凍結させた後融解し、超音波処理を行った。それ
を遠心した上清をウイルス液として、同様の操作を３〜
４回行いウイルスの継代を行った。 〈ウイルス力価測定〉ウイルス力価は準備したＣＫを用
いて、ブラック法により行なった。ＬＥで１０倍階段希
釈したウイルス液をウイルス継代と同様にＣＫに接種し
た。接種ウイルス液を除いた後、約５０℃に調製した
０．８％の寒天（Bacto agar）、０．３％のＴＰＢ、抗
生物質および５％小牛血清を含むイーグルＭＥＭ培地を
５ｍｌ重層し３日間培養した。培養３日目に、約５０℃
に調製した０．８％の寒天、０．３％のＴＰＢ、抗生物
質および１％のニュートラルレッドを含むイーグルＭＥ
Ｍ培地を５ｍｌ重層し、翌日ブラック数を数えた。ブラ
ック形成単位（ＰＦＵ）はｌｏｇ／ｍｌで示した。
【０００６】〈実施方法〉実験１では式
【化３】 で示される塩化ジデシルジメチルアンモニウムの希釈液
とウイルス液を０．４ｍｌずつ１：１の割合で接触さ
せ、以下の実験では消毒薬希釈液とウイルス液を０．３
ｍｌずつ１：１の割合で接触させた。塩化ジデシルメチ
ルアンモニウムの濃度を下記の表のとおりの三種類の濃
度とし、アルカル剤として水酸化ナトリウムを用い、そ
の濃度を０．０５％として使用した。ＩＢＤＶに対する
効果はつぎのとおりである。
とウイルス液を０．４ｍｌずつ１：１の割合で接触さ
せ、以下の実験では消毒薬希釈液とウイルス液を０．３
ｍｌずつ１：１の割合で接触させた。塩化ジデシルメチ
ルアンモニウムの濃度を下記の表のとおりの三種類の濃
度とし、アルカル剤として水酸化ナトリウムを用い、そ
の濃度を０．０５％として使用した。ＩＢＤＶに対する
効果はつぎのとおりである。
【表１】 ＊ 残存ウイルス価はｌｏｇ10ＰＦＵ／ｍｌで表わし
た。 ＊＊殺ウイルス度については、残存ウイルス価で ×は３．４ ｌｏｇ10以上のもの（効果なし） △は２．４〜３．４ ｌｏｇ10のもの（ほとんど効果な
し） ○は１．４〜２．４ ｌｏｇ10のもの（やゝ効果あり） ◎は１．４ ｌｏｇ10以下のもの（大へん効果あり） として示した。アルカリ剤併用の効果を確認するため、
水酸化ナトリウムの濃度をいろいろに変えて同様の試験
を行った。その結果はつぎの表のとおりである。
た。 ＊＊殺ウイルス度については、残存ウイルス価で ×は３．４ ｌｏｇ10以上のもの（効果なし） △は２．４〜３．４ ｌｏｇ10のもの（ほとんど効果な
し） ○は１．４〜２．４ ｌｏｇ10のもの（やゝ効果あり） ◎は１．４ ｌｏｇ10以下のもの（大へん効果あり） として示した。アルカリ剤併用の効果を確認するため、
水酸化ナトリウムの濃度をいろいろに変えて同様の試験
を行った。その結果はつぎの表のとおりである。
【表２】
【０００７】〈比較例〉前記実施例と同一の要領で、塩
化ジデシルジメチルアンモニウム塩のかわりに式
化ジデシルジメチルアンモニウム塩のかわりに式
【化４】 で示される（Ｒ3はＣ数９〜１５）〔モノおよびビス
（塩化トリメチルアンモニウムメチレン）〕−アルキル
（Ｃ9〜Ｃ15）トルエンを用いて試験した結果をつぎの
表に示す。
（塩化トリメチルアンモニウムメチレン）〕−アルキル
（Ｃ9〜Ｃ15）トルエンを用いて試験した結果をつぎの
表に示す。
【表３】
【０００８】
【効果】本発明は、単独では殺菌効果がないのに、２成
分を併用することにより、優れた殺菌効果をもつ新しい
殺ウイルス剤を提供することができた。
分を併用することにより、優れた殺菌効果をもつ新しい
殺ウイルス剤を提供することができた。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ Ａ６１Ｐ 31/12 １７１ Ａ６１Ｐ 31/12 １７１ (58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名) A61K 33/00 A01N 33/12 A01N 59/00 A61K 31/14 A61L 2/18 A61P 31/12 ＣＡＰＬＵＳ（ＳＴＮ) ＲＥＧＩＳＴＲＹ（ＳＴＮ)
Claims (3)
- 【請求項１】 一般式 【化１】 で示される塩化ジアルキルジメチルアンモニウム(式中
Ｒ1とＲ2はいずれもアルキル基であり、同一または異っ
ていてもよい。）とアルカリ剤を含有することを特徴と
する鶏伝染性ファブリキウス嚢病ウイルス（以下ＩＢＤ
Ｖと略称する）に対する殺ウイルス剤。 - 【請求項２】 塩化ジアルキルジメチルアンモニウムが
塩化ジデシルジメチルアンモニウムである請求項１記載
の殺ウイルス剤。 - 【請求項３】 塩化ジアルキルジメチルアンモニウムと
アルカル剤を含有する溶液を畜舎に適用することを特徴
とする畜舎の消毒法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4108992A JP3056881B2 (ja) | 1992-04-01 | 1992-04-01 | 殺ウイルス剤とその使用法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4108992A JP3056881B2 (ja) | 1992-04-01 | 1992-04-01 | 殺ウイルス剤とその使用法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05279261A JPH05279261A (ja) | 1993-10-26 |
| JP3056881B2 true JP3056881B2 (ja) | 2000-06-26 |
Family
ID=14498846
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4108992A Expired - Lifetime JP3056881B2 (ja) | 1992-04-01 | 1992-04-01 | 殺ウイルス剤とその使用法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3056881B2 (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2014156267A (ja) * | 2013-02-18 | 2014-08-28 | Univ Of Yamanashi | 包装方法及び包装装置 |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NZ534534A (en) * | 2002-01-18 | 2006-05-26 | Lonza Ag | Virucidal disinfectant |
| RU2290208C2 (ru) * | 2004-11-16 | 2006-12-27 | Елена Борисовна Иванова | Полифункциональная пенная композиция для комплексной специальной обработки поверхностей, объемов и объектов от опасных агентов и веществ |
-
1992
- 1992-04-01 JP JP4108992A patent/JP3056881B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2014156267A (ja) * | 2013-02-18 | 2014-08-28 | Univ Of Yamanashi | 包装方法及び包装装置 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH05279261A (ja) | 1993-10-26 |
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