JP2518605B2

JP2518605B2 - 水不溶性薬剤を含む微小滴

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Publication number: JP2518605B2
Application number: JP59502404A
Authority: JP
Inventors: ヘインズ，ダンカン・ハロルド
Original assignee: FUAAMA ROJITSUKU Inc
Current assignee: FUAAMA ROJITSUKU Inc
Priority date: 1983-06-17
Filing date: 1984-06-14
Publication date: 1996-07-24
Anticipated expiration: 2011-07-24
Also published as: CA1242645A; EP0153926A1; EP0153926B1; US4622219A; EP0153926B2; WO1985000011A1; JPS60501557A; DE3484104D1; EP0153926A4

Description

【発明の詳細な説明】発明の背景元来単層小胞と呼ばれていた微小滴（microdroplet
s）は、以前は、生体膜のモデルとなる典型的なリン脂
質小胞のモデルとしてリン脂質表面の性質を研究するた
めに使われていた。この方法によれば、イン・ヴィボお
よびイン・ヴィトロに於いて細胞の内部に水溶性薬剤を
運ぶために用いられているリポソーム（多層ラメラ構
造）および単層ラメラ構造リン脂質小胞とは区別され
る。これらのリポソームは本来小胞であり内部に水溶系
を含む球状脂質２重層から成っている。

微小滴は公知であり、直径がおおよそ500オングスト
ロームの有機液体相薬剤を含む球体から構成されてお
り、適当なリン脂質の単層で覆われている。

本発明の微小滴を使用すれば、どんな水不溶性／油溶
性薬化合物をも注射によって運搬することができる。現
在経口投与されている殆んどの非極性薬物が企図されて
おり、この発明の範囲に含まれる。有機液体相は薬剤そ
れ自体でもよく、また全身麻酔薬媒体，フルオロカーボ
ン，または鉱物油でもよい。本発明により提供される微
小滴が有する優れた点は、薬剤が比較的ゆっくりと組織
に遊離されることと、注射部位を注意深く選択すること
で薬剤を的確に運搬ができ且つ代謝分解，最初のパス効
果並びに肝臓およびその他の臓器中の有害な副作用を軽
減することにある。

通常の局所麻酔では、麻酔部位に水溶性化合物を注射
している。効果的には、薬剤に、細胞膜と結合し通過す
るために疎水性と水に溶け作用部位に拡散するために親
水性との両方の性質が要求されている。注射された麻酔
薬が非常に急速に血液中に吸収されてしまうため麻酔持
続時間は短い。ブピバカインは、作用時間の長い局所麻
酔薬として現在利用されており、数時間に亘り麻酔効果
を与えることもある。もっと長い時間、好ましくは非常
に長い時間に亘り局所麻酔を持続させるという要求も強
い。例えば手術後の痛みの緩和、神経痛（pinched nerv
es）の場合の慢性的な痛みからの解放、背中の痛みおよ
び他の長期間に亘って神経伝導作用を阻害する必要のあ
る場合などには、長時間に亘る麻酔効果が要求されてい
る。慢性痛に対してはアスピリンおよびオピオイド類の
ような鎮痛剤が投与されているが、これらの効果はしば
しば薄く、時には好ましからぬ副作用を引き起すことが
ある。

局所麻酔と対照的に、全身麻酔では麻酔ガスを吸入さ
せ意識を喪失させる。これらの麻酔ガスとしては酸化窒
素，ハロタン，イソフルラン（isofluorne），エンフル
ラン（enfluorane），メトキシフルラン（methoxyfluor
ane）がある。一番目の例は本当のガスである。他のも
のは揮発性フルオロ−クロロ−ハイドロカーボン類であ
り液体状で存在する。液体状の全身麻酔薬は水不溶性で
不混和性である。それらを空気中に揮発させ、患者に吸
わせ、それらが肺を通って循環することにより脳の神経
膜と結合して意識を喪失させる。

本発明の１つの具体例がもつ新規な点は、全身麻酔薬
を局所麻酔薬として使用することである。生体医学者お
よび医者の間で現在ポピュラーな考えでは、局所麻酔薬
として吸入麻酔薬を用いることは不可能である。教科書
や学術論文では、局所麻酔薬と全身麻酔薬（よく“揮発
性”および“吸入”麻酔薬と呼ばれる）は別の分類の薬
剤として扱われている。現在の考え方によればこの分類
は正しい。なぜなら揮発性麻酔薬は水に対する溶解度が
低いために注射不可能な油様液体として存在するので、
そのまま注射することは考えられないことだからであ
る。もし揮発性麻酔薬を液体相として注射したら、膜が
脱脂され細胞が損傷し、ついには組織の壊死が起こるで
あろう。それらの薬剤が水不溶性であるために、薬剤を
食塩水で薄めることは不可能である。しかしながら、こ
れらの薬剤が脳（そして生理的効果はより小さいが他の
場所）における神経伝導を効果的に阻害するのは、まさ
にこの低い水溶解性と膜相との高い溶解性に因るのであ
る。

図面の簡単な説明第１図は有機液体と薬物を含む単分子レシチン外膜で
包囲された本発明の微小滴の透視図であり、微小滴の一
部は取りこわされている。

第２図は実施例１の結果に基づき１％リドカイン注射
後200分間にわたる応答率を比較したグラフである。

第３図は実施例１の応答をテイル−クランプ法によっ
て引き起こされる痛み刺激に対するラットの応答率をメ
トキシフルラン微小滴の注射後の経過時間を関数として
表したグラフである。

第４図も実施例１に基づきメトキシフルランの投与量
（容量％）に対する初期応答率を表わしたグラフであ
る。

第５図も実施例１に基づきメトキシフルラン微小滴の
濃度（容量％）に対し微小滴注射後に50％応答を回復す
るのに要した時間を表わしたグラフである。

発明の詳細な説明本発明は、リン脂質のみから構成された単層で包まれ
た実質的に水不溶性の薬理学的に許容される薬剤球体か
らなる、直径が約200オングストロームから１ミクロン
までの微小滴であって、植物油、脂肪酸のエステル及び
トリグリセリドを含まず、該薬剤の容量のリン脂質単層
の重量に対する比が少なくとも1.0ml/gである前記微小
滴に係る。

また本発明は、（１）前記微小滴、及び（２）製薬的に許容され得る注射可能担体とから本質的になる、無菌の注射可能製薬組成物にも係る。

本発明の新規な特徴は、この油様液体相を微細な小滴
にする手段にあり、例えば現在では直径約500オングス
トローム（概算）の微小滴が使用されている。さらにこ
れらの微小滴はリン脂質単層のおかげで互いに癒合する
ことなく安定化されている。皮内注射するとこれら微小
滴は細胞間の間質部分に捕捉され、麻酔薬をゆっくり持
続的に遊離する。処置法または特別な理論に束縛される
つもりはないが、これについて３つの可能な機構が考え
られている；麻酔薬の拡散、小胞−細胞膜の衝突，融
合；以下の議論を参照のこと。これは、濃度が指数関数
的に減少する“１次”式で注射した薬物が消失されてい
く通常の消失速度論（elimination kinetics）と対照的
である。一定かつ持続的に遊離されている場合には、神
経およびその隣接組織中の薬剤濃度は有毒な濃度に達し
ない。遊離速度の調節は、蒸気圧および膜溶解度に基づ
き麻酔薬を選択し、ある程度は脂質を選択することによ
って行なわれうる。

以下の指示に従って当業者は経験的に、麻酔薬あるい
は水不溶性薬剤とそれに適合する脂質被膜との最適な組
み合せを容易に決めることができる。最も交換しにくい
試薬と非常に不活性な脂質の場合、効果持続時間は微小
滴が間質部分を離脱してリンパ系に入りこむのに要する
時間に支配されるであろう。この原理は、ベンゾカイ
ン，ダントロレンなどのような他の水不溶性薬剤の運搬
体（carrier）としてのレシチン−麻酔薬微小滴を使用
する場合にも適用され得る。

局所麻酔では、薬剤が神経膜に直接運搬されることが
要求される。このためには、薬剤が膜に結合し脂質膜
（すなわち細胞膜）を通ることができ且つ細胞間の水相
領域を通って神経膜に拡散できるために水溶性であるこ
とを要件とする。この要件は、例えばプロカインやリド
カインのような極性および非極性の両構造をもつ局所麻
酔薬を設計することで満されてきた。局所麻酔薬は水溶
性であるが故に、毛細血管に拡散し血液によって上に述
べた一次過程（first order process）で取り除かれて
いくので麻酔効果の持続時間（期間）が限られている。
理論的にはこの問題は例えばベンゾカインのような水に
難溶性の局所麻酔薬を使うことで回避されうるが、そう
すると麻酔薬の運搬が問題になる。水不溶性の局所麻酔
薬は皮膚を通してうまく吸収されないので、水溶性局所
麻酔のように注射することはできない。

上に述べたように全身麻酔薬は、意識を喪失させるべ
く吸入されるガスおよび揮発性液体である。それらは水
に難溶性の化合物であり、肺で吸収されて血流に入り血
球およびタンパク質と結合して血流中を運ばれる。この
方法で運ばれた場合、中枢神経系が麻酔薬の麻酔作用に
対して最も敏感に反応するので麻酔薬は中枢神経系に作
用する。

第１図に示した透視図から明らかなように（但し一部
をとりこわしているが）、本発明に係わる微小滴は、中
央部に薬剤を含む水不溶性／有機相があり、それをレシ
チンのようなリン脂質の単分子外層で包囲した形をして
いる。リン脂質膜の性質については例えば、有機化学お
よび生化学分野に於ける金属−リガンド相互作用に見ら
れる二価陽イオン−リガンド相互作用に関する私の論文
になかんずく記述されている（プールマンおよびゴール
ドブルム、第２部、189-212頁、デー・ライデル（197
7））。

本発明の新規な特徴の１つは、局所麻酔に揮発性液体
状全身麻酔薬を使うことである。本発明以前にはこのこ
とは不可能だと考えられていた。なぜならば、細胞膜の
溶解による局部障害や全身障害を伴なわないで有機相を
皮膚または他の組織に注射することは不可能だから、こ
のような手法は全く考えられないことであった。本発明
は、障害を与えることなしに揮発性全身麻酔薬の注射を
可能にした。

この望まれていた注射を可能にしたのは、水不溶性の
油または麻酔薬（液体）相を代表的には超音波処理によ
って微細な大きさに縮小し、そのものを脂質層で包んだ
からである。好ましくは、生体膜の天然構成成分であり
従ってそのままで生物学的に適合性のあるリン脂質であ
る。リン脂質としては、微小滴ができるだけ長い時間完
全体を留めるように目的組織の細胞膜に対して反発作用
を示すようなものを選ぶ。

上で述べたように、微小滴は次の３つの可能性ある機
構で麻酔薬を神経および組織に運ぶことができると考え
られている：（ａ）溶液、（ｂ）衝突／凝集、又は
（ｃ）融合。麻酔応答の注射後の経時変化を第３図に示
す。第３〜５図から、麻酔薬は微小滴から徐々にかつ持
続的に遊離されることが推定される。第３図に示される
ように、尾をつまんで引き起される痛み刺激に対するラ
ットの応答が6.7％メトキシフルラン微小滴0.5mlを注射
すると減少する。第４図に示されるように、初期応答性
（ｔ＝０〜２^１／_２時間）は投与量にも依存している。
第５図に示されるように応答性が回復するのに要する半
減期は麻酔薬濃度の増加に伴って長くなり、高濃度では
最高約70時間に達した。上で述べた例から、３種類の麻
酔薬を用い、ラットの様々な場所に投与量を変えて投与
し効果があることが示された。リドカインを対照として
用いた。リドカインによる麻酔持続時間は、常に本発明
製剤の1/10未満であった。

本発明を認識し完成するに至った研究に於いては先ず
麻酔薬について検討されそれに基づく説明，例示が本明
細書中で大半を占めているが、本発明は麻酔薬に限定さ
れるものではなく、私の発明にある新規や薬運搬システ
ムおよび方法には水不溶性有機薬剤も扱う類似システム
をも包含するものである。

微小滴調整法：本発明の微小滴を調製する好ましい方法
はプローブ式超音波装置を用いて超音波処理する方法で
ある。この方法については以下にもう少し詳細に述べ
る。あるいは微小滴を超音波槽中で調製してもよい。少
量を調製するには、水を満たした超音波槽に直径1.0cm
の試験管を試験管締め具で吊り下げる。微小滴の成分
（有機相，リン脂質，生理的食塩水および含有すべき薬
剤）を先ず、振とう，渦混合，ポリトロンまたはその他
の方法で全体的に混合する。次いで、この均質懸濁液を
超音波槽に導入し、１〜２時間超音波処理をする。もし
大量に調製する場合には、試験管を使用せず、微小滴成
分を直接超音波槽に入れることも可能であろう。

微小滴は、かなり強力な機械的撹拌によっても調製で
きる。例えばワーリングブレンダー，ポリトロンおよび
市販の塗料振とう機などのような高周波振とう機を使う
と便利である。

考えられるもう１つの代替法は溶媒希釈法である。所
望の微小滴成分をエタノールまたは他の水−及び油−混
和性有機液体に高濃度で溶かす。このエタノール溶液を
迅速に、激しく機械的に撹拌しながら生理的食塩水中で
希釈して、素早く混合する。エタノールは水相に溶ける
が他の成分は溶けることができない。微細に分散してい
る成分が自然に微小滴に形成する。エタノールは透析に
よって簡単に取り除くことができる。

また、微小滴をスプレー塗装に類似した方法で調製す
ることも可能である。微小滴成分を懸濁させ、市販のス
プレー塗装機の取入れ口に吸引し、そのスプレーを食塩
液中に吹出して微小滴を捕捉する。

材料と方法をうまく選ぶことによって、微小滴の直径
を約200オングストロームから１ミクロンの範囲に、方
法，出力や脂質の有機相に対する比を調節して調節する
ことができる。出力或いは比を大きくするとより小さい
微小滴が得られる傾向にある。天然脂質または不飽和脂
質を用いる場合は、酸素のない雰囲気中で調製する。

有機相の選択：本発明に係わる微小的は広範囲の有機相
から調製される。それら有機相は便宜上次に示すような
非限定的タイプや範疇で考えることができる。

1.ハロタン，イソフルランおよびエンフルランやメトキ
シフルランを含む揮発性液状麻酔薬。

2.長期間局所麻酔を持続させるのに適しているベンゾカ
インを微小滴に配合できるヘプタンを含むアルカン類。
高分子量アルカン類も有効である。鉱物油も大量の水不
溶性薬剤を運搬できるので有機相として有利に使用でき
る。もっと極性の高い有機化合物をアルカン相で封入す
る溶解度は高められるであろう。

3.エーテル類：微小滴はジプロプルエーテル（3.4mg/ml
ジミリストイルレシチン,6.5％ｎ−ジプロピルエーテ
ル，±4.1mg/mlベンゾカイン）およびジブチルエーテル
（5mg/mlジミリストイルレシチン,7.0％ｎ−ジブチルエ
ーテル，±4.1mg/mlベンゾカイン）から調製される。ジ
ブチルエーテル微小滴およびジブチルエーテル／クロロ
ホルム混合微小滴に麻酔効果があることは知られてい
た。しかしながら、おそらくジブチルエーテルおよびク
ロロホルムの水溶性が高くより迅速に取り除かれてしま
うため、麻酔持続時間は短い（約1/2時間）。より長鎖
の類似体の場合活性をもっと長く持続させることができ
た。

4.エステル類：長鎖または疎水性のエステルは特に、細
胞性エステラーゼあるいは血清による加水分解によって
活性薬に変換される“プロ薬”を運搬する便利な手段と
して考えられる。但し、長鎖または疎水性エステルは、
植物油、脂肪酸のエステルまたはトリグリセリドではな
い。

5.生物適合性のあることがわかっている他の有機物。こ
れらには例えばシリコーンおよび高分子量フルオロカー
ボン類が含まれる。

選ばれる有機相は、使われる薬物と十分に適合性があ
り且つ、生成物の処方／調製の目的に薬学的に許容され
うるものである。全ての医薬品の場合と同様に，所与の
有機相と有機相に配合される特定の薬物から微小滴がう
まく調製できたら、毒性と薬効スクリーニングを型通り
に行なう。微小滴を構成する種々の成分についても同じ
ように毒性学的スクリーンを行なうことが好ましい。

リン脂質類：種々の脂質類が本発明に係わる微小滴の調
製に用いられるのに適している。表面の性質や反応性を
変化させるため２つあるいはそれ以上の脂質を混ぜ合せ
ることは有用である。本明細書の実施例に記載されてい
る全ての微小滴は主にレシチン（ホスホァチジルコリ
ン）から作られている。このレシチンとこれも考えられ
ているスフィンゴミエリンとがクラスＡをつくる。クラ
スＢには、純粋な形態で微小滴を作ることもできるが血
清中のカルシウムと反応して微小滴の凝集や細胞膜への
結合を引き起すリン脂質が例示される。この傾向はホス
ファチジルコリンで希釈することによって弱められ、こ
うすれば微小滴の反応性を調節することができる。クラ
スＣの唯一の代表例がホスファチジルエタノールアミン
である。それは純粋な状態ではカルシウム非依存的に自
己凝集する。従って、細胞膜と凝集する傾向が強いと予
想される。レシチンで希釈することでこの傾向を弱める
ことができる。

クラスA:一次リン脂質（純粋な形態で使用可能）：レシチン（ホスファチジルコリン）スフィンゴミエリンクラスB:純粋な形態で微小滴（またはリン脂質小胞）を
作るのに用いられうる。カルシウム依存凝集性のために
これらの反応性は非常に高いことが予想される。これら
の脂質をレシチンと混ぜて細胞膜との反応性を調節する
ことが好ましい。リン脂質小胞調製における混合につい
てはすでに示されている。

ホスファチジン酸ホスファチジルセリンホスファチジルイノシトールカルジオリピン（ジホスファチジルグリセロール）ホスファチジルグリセロールクラスC:ホスファチジルエタノールアミンこれはpH9
に於いて純粋な形態で微小滴を作るのに用いられうる。
pH7にすると自己凝集を起すであろう。これがリン脂質
小胞の研究に役立つことは知られていた。ホスファチジ
ルエタノールアミンから作られた微小滴は、細胞膜との
反応性に富んでいることが予想される。この脂質を通常
のレシチンに混ぜて細胞膜への反応性を高めうることが
示唆される。

いくつかの種類のレシチンが考えられる。例えば卵レ
シチンまたは牛心臓レシチン（天然）または鎖長が異な
るいくつかの合成レシチンが利用されうる。これらには
連鎖が４から19個の炭素をもつもの（スペルコインコ
（Supelco,Inc.））がある。ジミリストイル（炭素数1
4）およびジドデカノイル（炭素数12）レシチンを（以
下）本実施例で使用した。ジドデカノイルレシチン（炭
素数12）の方が、微小滴が室温以下でより凝集しにくい
ためより有用と考えられるかもしれない。生物学的範囲
（炭素数10-18）の鎖長を持つレシチン類が様々な用途
に利用されると考えられている。不飽和レシチン類（ジ
オエオイル），ジリノエオイル；アルファー・パルミ
ト，ベータ・オレオイル；アルファ・パルミトイル・ベ
ータ・リノレオイルおよびアルファ・オレオイル・ベー
タ・パルミトイル）を利用できる。ジアラキドニルレシ
チン（高不飽和物でプロスタグランジン前駆体）もま
た、アルファ・パルミト・ベータ・ミリストイル（混合
不飽和鎖）レシチンであるので利用できる。

ホスファチジン酸は卵からまたは合成化合物（ジミリ
ストイル，ジパルミトイルまたはジステアロイル，カル
ビオケム（Calbiochem）のものも使用できる。牛ホスフ
ァチジルセリンを使うことができる（スペルコまたはカ
ルビオケム）。

ホスファチジル・イノシトールも植物源（スパルコ）
または牛源（カルビオケム）から得られる。カルジオリ
ピンも牛またはバクテリア源から得られる（スペル
コ）。ホスファチジル・グリセロールはバクテリア源か
ら得られ（スペルコ）また合成化合物（ジミリストイル
またはジパルミトイル：カルビオケム）も使用できる。

ホスファチジル・エタノールアミンは卵，バクテリ
ア，牛またはプラスマロゲン（スペルコ）として、また
合成化合物のジオクタデカノイルおよびジオレオイル同
族体並びにジヘキサデシル，ジラウリル，ジミリストイ
ルおよびジパルミトイル（スペルコおよびカルビオケ
ム）が使用できる。

薬剤：次に示すのは本発明の微小滴に取り込まれうる薬
物のリストである。このリストは単に説明のために示し
たものにすぎずこれに限定するつもりはない。

1.揮発性麻酔薬については前述の通りである。これには
メトキシフルラン，イソフルラン，エンフルランおよび
ハロタンが含まれる。ヘプタンにも麻酔作用のあること
が知られていた。

以下に示す薬物は主に微小滴の有機相に組み入れられ
る。それらは全て、電荷を持たない油溶性の高い親油水
不溶性薬物である。それらを使用すると、微小滴の有機
相が肉眼試験で最大の薬物溶解性を示した有機相で形成
されている。

2.水不溶性局所麻酔薬。2mg/mlの濃度でベンゾカインを
10％ヘプタン微小滴懸濁液（8.3mg/mlジミリストイル
レシチン）に組み入れることができる。

3.筋弛薬として直接作用するダントロレンをメトキシフ
ルラン微小滴、ヘプタンまたは鉱物油微小滴に組み入れ
る。この微小滴懸濁液を筋肉および神経周辺部に注射し
痙攣性を押える。これにより、薬物の長期経口投与で見
られる肝中毒の問題を解決できた。

4.バルビツル酸塩（バルビツル酸，ペントタール，フェ
ノバルビタール等）は神経節伝達を阻害することが知ら
れている。ベンゾジアゼピン群（ジアゾパム，オキサジ
パム等）の催眠剤／鎮痛剤は現在筋弛緩剤として用いら
れている。微小滴を介して直接注射することでこれらの
効果を増大させるとともに中枢神経系への影響を避ける
ことができる。

5.微小滴は、抗炎症剤を直接的確に投与するに優れた手
段と考えられる。フェニルブタゾンは高濃度で炎症部位
に投与されうる。経口投与の場合の典型的な副作用であ
る吐き気や嘔吐は殆んど起らず、大量の局所投与が可能
になった。他の抗炎症剤または抗間節炎症剤として使わ
れるものにはアセトアミノフェンおよびコルヒチンがあ
る。

6.現在ある証拠で、もし微小滴が皮内または筋肉内に注
射された場合は水不溶性物質の微小滴から血流への遊離
速度がおそくなるであろうことが推察される。次の種類
の薬物にとってこのように遊離が徐々であることが大変
都合が良いと考えられる：（ａ）心臓血管に作用する薬物類：プロペラノロー
ル，ラベタロール，レセルピン，ニトログリセリン；（ｂ）ホルモン類：エストロゲン類，アンドロゲン
類，ガン化学療法に用いられる同化ステロイド類；（ｃ）スピロラクトン（利尿薬）；（ｄ）クマリン（およびその他の経口抗凝固剤）；（ｅ）脂溶性ビタミン類；（ｆ）プロスタグランジンおよびそれらの類似体 7.微小滴に組み入れるのに適してはいるが、現段階では
これらを皮内または筋肉内注射の処置方法による利点が
特にはっきりしていない多数の薬物である。これらには
トリサイクリック抗うつ薬、フェニトイン（抗癲癇剤）
および他の中枢作用薬物類。

8.ナイスタチン、アムホテリシンＢおよびグラミシジ
ン。これらは、リン脂質膜の表面に結合してその浸透性
を変えることが知られている表面活性抗生物質である。
これらは微小滴の反応性を変えることが予想される。ま
た、微小滴はこれらの抗生物質を皮下運搬する手段でも
ある。

他の記載がない場合は明細書中、部および百分率は全
て、重量比であり、温度は全てセ氏を表わす。本発明の
組成物は上記物質から本質的に構成されるか又は含むこ
とができ、方法または手段はこれらの物質を用いて上記
段階から本質的に成るものまたは含んでいることができ
る。

実施例１麻酔薬を含みレシチンで包まれた微小滴は、超音波処
理で以下の方法で作られる。ジミリストイル・ホスファ
チジルコリン（41mg）を試験管にとり、メトキシフルラ
ン（0.2ml）をピペットで入れる。混合物を約37℃で試
験管内で撹拌すると、脂質が少し溶解または懸濁してみ
える。次に無菌の生理食塩水（3.0ml）を加え、ソニフ
ァー^Rセル・ディスラプター，モデアルW185D（ヒート
システムアンドウルトラソニックス、プレインビュ
ー、ニューヨーク）の下に試験管に吊るす。マイクロチ
ップを挿入し、試料が分散状態になるまで試料に約１分
間穏やかに（第２段階出力）超音波処理を施す。油，固
体および水性相が識別できなくなり全体に均質である。
得られたものはミルク状の単一相のようにみえる。

次に出力（power）を第４段階まで上げ、試料に超音
波処理を合計約５分間施す。この超音波処理温度は30〜
45℃である。温度の調節を、超音波処理容器の回りに冷
媒を循環させて、或いは超音波処理を定期的に止めて試
料を冷却させて行うことができる。超音波処理で得られ
たものは、レシチン−メトキシフルラン微小滴の安定で
均質な懸濁液である。上記濃度の懸濁液は目に僅かに濁
って見える。ベールの法則にしたがって試料を希釈する
につれてこの濁り度は減少する。広範囲の濃度にわたっ
て行なった実験結果から明らかな如く、薬効や微小滴の
性質は微小滴調製時の濃度に依存しない。この調製物は
30℃で数日間貯蔵しても安定である。この調製物にはメ
トキシフルランの臭気が残っており、この臭気が前記成
分が存在し遊離可能状態にあるという徴候となる。レシ
チンが媒体から除かれている比較実験では微小滴は得ら
れず、直ちに相分離が起った。

調製物の薬効を、ムンソンらの方法に従って実験用ラ
ットを用いテイル−クランプ法でテストした（ムンソン
イー・エス，ホフマンジェー．シー．およびディフ
ァジオシー．エー．“ラットのシクロプロパン要求
（MAC）に及ぼす急性甲状腺機能低下症および甲状腺機
能亢進症の影響”麻酔学（Anethesiology）29:1094-109
8（1968）。この麻酔薬調製物は、尾の全ての側を取り
巻いて３〜4cmの長さのみみずばれができるように尾の
４ケ所に注射した（合計0.5ml）。麻酔状態にあるか否
かは、処置部をピンセットでつまんだ時の動物の応答を
動物が鳴いたり又は急に動いたりするかどうか肉眼で観
察して判断する。尾の未処置部をその動物の痛みに対す
る応答性をみる対照として用いた。さらなる対照とし
て、数匹の動物に麻酔薬を含まない超音波処理レシチン
又は食塩水を注射した。これらの対照では全て効果がみ
られなかった。

微小滴調製物の薬効を、別の動物の処置に使用した0.
5mlの１％リドカイン（第２図）およびブピバカインと
比較した。この比較テストは平行して行なわれた。少な
くとも４匹の動物をそれぞれの処置および投与量のグル
ープに用いた。処置直後およびその後全ての動物が完全
に応答するまで定間隔で試験を行なった。

リドカイン処置により動物の応答性は０％になった。
図示されている時間スケールで効果が急速に消失した。
動物は2.5時間後に50％の応答を示し、６時間後には何
の効果も見られない。臨床上最も長い作用時間を有する
局所麻酔薬である0.5％ブピバカインを用いて、同様の
実験を行った。同様な応答が見られ（データは掲載され
ず）、動物の応答は6.5時間後50％になり８時間後には
何の効果も観察されなくなった。

第３図に、レシチン−メトキシフルラン微小滴（1.28
％レシチン,6.25％メトキシフルラン）および１％リド
カインを用いて12匹の動物の痛み刺激に対する応答性を
みた結果を示す。“応答性（responsiveness）”は全て
の動物の平均値である（100は全ての動物で完全な痛み
応答があったことを意味し、０％は全ての動物で痛み応
答がなかったことを意味する）この図では、応答性を処
置後の経時変化で示している。注射後１〜2.5時間の間
に動物の痛み刺激に対する応答性は８％になった。この
効果は、リドカインの効果が消失した間も続いている
（第２図と比較されたい）。

50％応答性は注射後70時間で見られた。効果は徐々に
うすれ、100％応答性は約140時間後すなわち約６日後に
見られた。

第４図は投与量に対する初期応答性の依存性を示す。
第５図は50％応答性に戻る半減期を示しており、メトキ
シフルラン微小滴の投与量に対しＳ字状依存性を示し最
大半減期は70時間に達する。初期応答性効果および半減
期効果は微小滴濃度に段階的に依存しており、提案され
ている作用機序と一致する。大量に投与すると、痛み刺
激に対する応答性が現われる前に除かれなければならな
い大量の麻酔薬が組織中に溜まる。より短時間で最大限
の麻酔を起すにはより少ない投与量が使用されうる。こ
の後者の場合の微小滴の注射量では組織を満たすに十分
な蓄積量にならない。最大投与量で見られる約70時間と
いう応答性回復の最大半減期は、小胞がリンパ管を経て
組織から除去されるのに要する時間に左右されると考え
られる。

実施例２ここでは、6.7％ｎ−ヘプタンを麻酔薬として用い実
施例１の実験を繰り返した。同様の結果が得られた。

実施例３ここでは、有機相としてｎ−ジブチルエーテルとクロ
ロホルムの1:1混合物（6.7％）を含む微小滴を用いて実
施例１を繰り返したが、麻酔時間は短かった（１〜２時
間）。これは、これらの薬物の揮発性が高く且つ水溶性
であるために薬物が血液を経てより急速に取り除かれる
からである。このｎ−ジブチルエーテルクロロホルム
微小滴はベンゾカインを溶かすには有効であるとみられ
たが、麻酔効果の増強は認められなかった。

実施例４レシチン被覆メトキシフルラン微小滴をラットの後肢
筋肉に注射した（総量2.0ml）。その結果、１日間ラッ
トの後蹄側部（hind quarters）が動かなくなった。リ
ドカインの量を調節して注射すると不動性状態はほんの
短い間だけとなった（約２時間）。

実施例５有機相が6.7％鉱物油から成り且つリン脂質単層がジ
ドセカノイル（ジラウリル）レシチン（12.8mg/ml）か
ら成る微小滴を、実施例１で述べられているように調製
した。この微小滴がイン・ヴィトロで37℃において１ケ
月にわたって安定であることが知見された。この微小滴
を２匹のラットの尾に注射し、毒性がないことを確認し
た。鉱物油が麻酔能力がないことから予想されるよう
に、局所麻酔も観察されなかった。

実施例６有機相が1.8mg/mlのベンゾカインを溶かした1.8％鉱
物油、2.42％メトキシフルランおよび2.42％ｎ−ジブチ
ルエーテルから成り、リン脂質単層がジドセカノイル
（ジラウリル）レシチン（12.8mg/ml）から成る微小滴
を、実施例１と同様にして調製した。この微小滴がイン
・ヴィトロで37℃において１ケ月にわたって安定である
ことが知見された。この微小滴を２匹のラットの尾に注
射し、毒性がないことを確認した。2.4％メトキシフル
ランについて第４図及び第５図に示したと同様の反応速
度論に従う局所麻酔が観察された。

Claims

(57)【特許請求の範囲】

【請求項１】リン脂質のみから構成された単層で包まれ
た実質的に水不溶性の薬理学的に許容される薬剤球体か
らなる、直径が約200オングストロームから１ミクロン
までの微小滴であって、植物油、脂肪酸のエステル及び
トリグリセリドを含まず、該薬剤の容量のリン脂質単層
の重量に対する比が少なくとも1.0ml/gである前記微小
滴。
【請求項２】アルカン、ジアルキルエーテル、長鎖エス
テル、疎水性エステル（但し、長鎖エステルまたは疎水
性エステルは、植物油、脂肪酸のエステルまたはトリグ
リセリドではない）、生物適合性のあるシリコーン、生
物適合性のある高分子量フルオロカーボン、油溶性ビタ
ミン及び揮発性液状麻酔薬から選ばれた、適合性があ
り、製薬的に許容され得る有機液体が更に含有されてい
る請求項１に記載の微小滴。
【請求項３】薬剤が有機液体に溶解している請求項２に
記載の微小滴。
【請求項４】薬剤が液状の全身麻酔薬である請求項１、
２または３に記載の微小滴。
【請求項５】薬剤が水不溶性局所麻酔薬である請求項
１、２または３に記載の微小滴。
【請求項６】薬剤が筋肉弛緩剤である請求項１、２また
は３に記載の微小滴。
【請求項７】薬剤が催眠／鎮静または鎮痛剤である請求
項１、２または３に記載の微小滴。
【請求項８】薬剤が非ステロイド系抗炎症剤である請求
項１、２または３に記載の微小滴。
【請求項９】薬剤がステロイド系抗炎症剤である請求項
１、２または３に記載の微小滴。
【請求項１０】薬剤が膜結合親油性抗生物質である請求
項１、２または３に記載の微小滴。
【請求項１１】薬剤が心臓血管活性薬剤である請求項
１、２または３に記載の微小滴。
【請求項１２】薬剤がホルモンである請求項１、２また
は３に記載の微小滴。
【請求項１３】薬剤が癌治療剤である請求項１、２また
は３に記載の微小滴。
【請求項１４】薬剤が利尿剤である請求項１、２または
３に記載の微小滴。
【請求項１５】薬剤が抗凝固剤である請求項１、２また
は３に記載の微小滴。
【請求項１６】薬剤が油溶性ビタミンである請求項１、
２または３に記載の微小滴。
【請求項１７】薬剤がプロスタグランジンである請求項
１、２または３に記載の微小滴。
【請求項１８】薬剤が三環系抗鬱剤である請求項１、２
または３に記載の微小滴。
【請求項１９】薬剤が抗癲癇剤である請求項１、２また
は３に記載の微小滴。
【請求項２０】（１）リン脂質のみから構成された単層
で包まれた実質的に水不溶性の薬理学的に許容される薬
剤球体からなる、直径が約200オングストロームから１
ミクロンまでの微小滴であって、植物油、脂肪酸のエス
テル及びトリグリセリドを含まず、該薬剤の容量のリン
脂質単層の重量に対する比が少なくとも1.0ml/gである
前記微小滴、及び（２）製薬的に許容され得る注射可能担体とから本質的になる、無菌の注射可能製薬組成物。
【請求項２１】薬剤が局所麻酔薬である請求項20に記載
の無菌の注射可能製薬組成物。
【請求項２２】薬剤が全身麻酔薬である請求項20に記載
の無菌の注射可能製薬組成物。
【請求項２３】実質的に水不溶性非麻酔薬が更に溶解し
ている請求項22に記載の無菌の注射可能製薬組成物。
【請求項２４】注射可能担体が等張液である請求項20に
記載の無菌の注射可能製薬組成物。