JP2023536840A

JP2023536840A - ユニバーサル抗原特異的ｔ細胞バンク及びそれを製造する方法並びにそれを治療に使用する方法

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Publication number: JP2023536840A
Application number: JP2023505972A
Authority: JP
Inventors: マリーリーン、アン; ヴァルデス、フアンフェルナンドヴェラ
Original assignee: Baylor College of Medicine
Current assignee: Baylor College of Medicine
Priority date: 2019-07-29
Filing date: 2021-02-02
Publication date: 2023-08-30
Also published as: US20230295565A1; WO2021021937A1; EP4188397A4; KR20230058398A; WO2022025984A1; MX2022001322A; EP4003378A4; AU2020322790A1; CN116261466A; CA3177064A1; IL290163A; AU2021318102A1; EP4003378A1; MX2023001287A; BR112023001642A2; BR112022001596A2; CO2022001972A2; IL300179A; EP4188397A1; CA3149145A1

Abstract

本開示の実施形態は、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物、並びにそれを作製及び使用する方法を含む。本開示の実施形態はまた、抗原特異的Ｔ細胞株のドナーミニバンクの構築において使用するための適切なドナーを同定及び選択する方法；抗原特異的Ｔ細胞株のドナーミニバンク；そのようなドナーミニバンク由来の複数の抗原特異的Ｔ細胞株を含むユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物、及び複数のそのようなミニバンクから構成されるドナーバンクを含む。本開示は、本明細書に開示される少なくとも１つのユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物を患者に投与することを含む、疾患又は状態を処置する方法を含む。【選択図】図１

Description

（関連出願の相互参照）
本出願は、２０２０年７月２９日に出願された特許協力条約出願ＰＣＴ／ＵＳ２０２０／０４４０８０号の優先権を主張し、これらの出願はそれぞれ参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

（技術分野）
本開示の実施形態は、少なくとも細胞生物学、分子生物学、免疫学、及び医学の分野に関するものである。

ウイルス感染は、様々な疾患の治療法として選択される同種造血幹細胞移植（ａｌｌｏ－ＨＳＣＴ）後の罹患率と死亡率の重大な原因である。しかし、移植後においても、移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）、原疾患の再発、ウイルス感染症は、依然として罹患率と死亡率の主要な原因である。ウイルス性病原体に関連する感染症には、ＣＭＶ、ＢＫウイルス（ＢＫＶ）、及びアデノウイルス（ＡｄＶ）などがあるが、これらに限定されるものではない。ウイルス感染は、同種移植片のレシピエントの大部分で検出される。一部のウイルスには抗ウイルス剤が使用されているが、必ずしも有効ではなく、新しい治療法の必要性が強調されている。これらのウイルス感染症を処置する一つの戦略は、養子免疫療法、例えば、ドナー由来のウイルス特異的Ｔ細胞の少なくとも輸注を含む養子Ｔ細胞移植である。このアプローチでは、ドナーから細胞を抽出し、生体外でウイルス特異的集団を拡大し、最後に、Ｔ細胞製品を幹細胞移植のレシピエントに注入することができる。同様のアプローチで、腫瘍関連抗原に特異性を持つＴ細胞を養子移入して、がんを処置することも可能である。

養子免疫療法は、疾患特異的細胞や操作されたＴ細胞（抗原特異的Ｔ細胞、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）発現Ｔ細胞など）を個体に移植・注入し、疾患関連細胞を認識・標的化し、破壊することを目的とした治療法である。養子免疫療法は、がん、移植後リンパ増殖性疾患、感染症（ウイルスなどの病原体感染症）、自己免疫疾患など、多くの疾患や障害の治療法として期待されている。例えば、Ａｄｖ、ＥＢＶ、ＣＭＶ、ＢＫ、ＨＨＶ６を標的とするｉｎｖｉｔｒｏで増幅したドナー由来及び第三者のウイルス特異的Ｔ細胞は、ウイルス感染症を有する幹細胞移植患者に養子移入しても安全であることが示されている。ウイルス特異的Ｔ細胞は、Ａｄｖ、ＥＢＶ、ＣＭＶ、ＢＫ、ＨＨＶ６に対する抗ウイルス免疫を再構成し、病変の除去に有効であり、生体内でかなりの拡大性を示すことがわかった。

養子免疫療法には、主に２つのタイプがある。自己免疫療法は、患者からＴ細胞のような細胞（例えば、抗原特異的Ｔ細胞）を分離、生産、及び／又は拡大し、必要に応じてその同じ患者に再投与するために患者から採取した細胞を保存することを含む。同種免疫療法は、患者と健康なドナーの２名が関与する。Ｔ細胞（例えば、抗原特異的Ｔ細胞）などの細胞は、健康なドナーから分離され、その後、いくつかのＨＬＡアレルに基づくヒト白血球抗原（ＨＬＡ）タイプが一致する（又は部分的に一致する）患者への投与用に製造、及び／又は拡大、保管される。ＨＬＡは、ヒト主要組織適合性複合体（ＭＨＣ）とも呼ばれる。ＨＬＡ分子は、臓器移植のためのマッチングや、ウイルスに対する適応免疫反応において重要な役割を担っている移植免疫学において重要な役割を担っている。ＨＬＡクラスＩ分子はＣＤ８＋Ｔ細胞にウイルスペプチドを提示し、ＨＬＡクラスＩＩ分子はＣＤ４＋Ｔ細胞にウイルスペプチドを提示する。

Ａｌｌｏ－ＨＳＣＴは、様々な悪性及び非悪性の血液疾患に対して治癒的であるが、Ｔ細胞免疫不全の期間があり、患者はサイトメガロウイルス、アデノウイルス、エプスタイン・バーウイルス、ヒトヘルペスウイルス６及びＢＫウイルスなどの一連のウイルスに対して脆弱な状態にある。いくつかの研究により、養子的に移植された同種Ｔ細胞が共通のＨＬＡアレルを介して抗ウイルス活性を持つことが確認されており、Ｔ細胞の抗ウイルス反応におけるＨＬＡ相互作用の重要な役割が強調されている。同種幹細胞移植のドナーは、血縁者（通常、ＨＬＡが厳密に適合した同胞又はＨＬＡが半分適合したハプロアイデンティカル・ドナー（例えば、子供のための親ドナー））又は非血縁者（血縁者以外のドナーでＨＬＡの適合度が非常に近いことが判明したドナー）でなければならない。しばしば、患者がドナーと高度にＨＬＡが一致した場合でも、レシピエントは移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）を軽減するために免疫抑制剤を必要とする。

移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）は、同種移植に特有の炎症性疾患である。移植された白血球又は再構成された白血球によるレシピエントの組織に対する攻撃である。これは、ドナーとレシピエントがＨＬＡ同一であっても、免疫系が細胞／組織間の他の相違を認識することができるため、起こり得る。急性ＧＶＨＤは通常、移植後３ヵ月以内に起こり、皮膚、腸、肝臓を侵すことがある。プレドニゾンのようなコルチコステロイドが標準的な治療法である。

慢性ＧＶＨＤは同種移植の後にも発症することがあり、晩期合併症の主な原因となっている。炎症に加えて、慢性ＧＶＨＤは、線維症、又は強皮症と同様の瘢痕組織の発生、又は他の自己免疫疾患を引き起こし、機能障害や長期の免疫抑制療法の必要性を引き起こす可能性がある。ＧＶＨＤは通常、Ｔ細胞が宿主のＭＨＣ上に提示された外来ペプチドに反応する際に介在する。したがって、養子Ｔ細胞療法の使用は、しばしば、ＭＨＣの不一致によって課される障壁によって制限される。本開示は、これらの障壁に対する解決策を提供する。

どちらが「最良の」部分的ＨＬＡ適合ドナー製品であるかを決定するための、ＨＬＡタイピング患者の時間のかかるプロセスは、養子免疫療法の有用性及び安全性を低下させる。さらに、第三者ドナー製品については、ＨＬＡ一致度が高い状況でも、治療される疾患又は状態を治療又は予防するために最も重要な養子移入細胞が速やかに拒絶される可能性がある。容易に生成及び／又はそれを必要とする患者に投与することができる安全な細胞療法が、当分野において長年必要とされてきた。本開示は、このようなニーズに対応するものである。

一態様では、本開示は、抗原特異的Ｔ細胞株などの細胞療法製品を含むドナーミニバンクを開発するための方法を含む。本開示はさらに、そのようなドナーミニバンク、又はそのようなドナーミニバンクに含まれる製品を一緒に組み合わせて、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品（例えば、ユニバーサルウイルス特異的Ｔ細胞製品）を生成する組成物及び方法を提供する。本明細書で提供されるユニバーサルな抗原特異的Ｔ細胞製品は、抗原特異的Ｔ細胞の集団を含む。本開示は、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品を含む組成物、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品の作製方法、及びユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品の使用による治療方法を提供する。

態様において、本開示は、複数の異なるドナーに由来する複数の抗原特異的Ｔ細胞株を含む抗原特異的Ｔ細胞の集団を提供し、各ドナーのＨＬＡ型は、少なくとも１つのＨＬＡアレルにおいて少なくとも１名の他のドナーとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、少なくとも２つのＨＬＡアレルにおいて少なくとも１名の他のドナーとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、少なくとも３つのＨＬＡアレルにおいて他の少なくとも１名のドナーとは異なる。

実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、少なくとも１つのクラスＩＨＬＡにおいて少なくとも１名の他のドナーとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、２つ以上のクラスＩＨＬＡアレルにおいて少なくとも１名の他のドナーとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、少なくとも１つのＨＬＡ－Ａアレル及び少なくとも１つのＨＬＡ－Ｂアレルにおいて少なくとも１名の他のドナーとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、１つ以上のクラスＩＩＨＬＡアレル上において少なくとも１名の他のドナーとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、２つ以上のクラスＩＩＨＬＡアレルにおいて少なくとも１名の他のドナーとは異なる。実施形態では、各ドナーのＨＬＡ型が、ＨＬＡ－ＤＰＡ１、ＨＬＡ－ＤＰＢ１、ＨＬＡ－ＤＱＡ１、ＨＬＡ－ＤＱＢ１、ＨＬＡ－ＤＲＡ、及びＨＬＡ－ＤＲＢ１のうちの１つ以上において、少なくとも１名の他のドナーとは異なる。実施形態では、各ドナーのＨＬＡ型が、ＨＬＡ－ＤＰＡ１、ＨＬＡ－ＤＰＢ１、ＨＬＡ－ＤＱＡ１、ＨＬＡ－ＤＱＢ１、ＨＬＡ－ＤＲＡ及びＨＬＡ－ＤＲＢ１からなる群から独立して選択される２つ以上のアレルにおいて、少なくとも１名の他のドナーとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、少なくとも１つのＨＬＡ－ＤＲＢ１アレル及び少なくとも１つのＨＬＡ－ＤＱＢ１アレルにおいて少なくとも１名の他のドナーとは異なる。実施形態において、複数のドナーは、少なくとも２つの異なるＨＬＡ－Ａアレル、少なくとも２つの異なるＨＬＡ－Ｂアレル、少なくとも２つの異なるＤＲＢ１アレル、及び／又は少なくとも２つの異なるＤＱＢ１アレルを有する。

実施形態において、複数の抗原特異的Ｔ細胞株は、３名以上の異なるドナー、４名以上の異なるドナー、又は５名以上の異なるドナーに由来する。実施形態において、複数の抗原特異的Ｔ細胞株は１５名以下のドナー、１４名以下のドナー、１３名以下のドナー、１２名以下のドナー、１１名以下のドナー、１０名以下のドナー、９名以下のドナー、８名以下のドナー、７名以下のドナー、６名以下のドナー、又は５名以下のドナー（例えば、２～５名のドナー）に由来する。実施形態において、複数の抗原特異的Ｔ細胞株は、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、又は２０名の異なるドナーに由来する。

実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、少なくとも１つのＨＬＡアレルにおいて、少なくとも２名の他のドナーとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、少なくとも２つのＨＬＡアレルにおいて少なくとも２名の他のドナーとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、少なくとも３つのＨＬＡアレルにおいて少なくとも２名の他のドナーとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、少なくとも３つのＨＬＡアレルにおいて少なくとも３名の他のドナーとは異なる。実施形態では、各ドナーのＨＬＡ型が少なくとも１つのＨＬＡアレルにおいて、他の各ドナーと異なる。互いに異なる。実施形態において、複数のドナーは、互いに血縁がない。実施形態において、複数のドナーにおける１つ以上のドナーは、互いに血縁がある。実施形態において、複数のドナーは、血縁があるドナー及び血縁がないドナーの両方を含む。

実施形態では、複数の異なるドナーのうちの少なくとも１名が少なくとも２つのＨＬＡアレルにおいて、見込み患者集団において取り得る最大数の患者と一致する。実施形態では、複数の異なるドナーのうちの少なくとも１名が少なくとも３つのＨＬＡアレルにおいて、見込み患者集団において取り得る最大数の患者と一致する。実施形態において、複数の抗原特異的Ｔ細胞株を含む抗原特異的Ｔ細胞の集団が、各ＨＬＡアレルにおいて、見込み患者集団における１名以上の患者と一致するＴ細胞を含む。

態様において、抗原特異的Ｔ細胞の集団は、クローン性、オリゴクローナル、及び／又はポリクローナルである抗原特異的Ｔ細胞株を含む。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞の集団が抗原特異的Ｔ細胞株を含み、ここで、Ｔ細胞株の１つ以上はポリクローナルである。実施形態では、集団中の抗原特異的Ｔ細胞株の全てがポリクローナルである。

実施形態において、各ドナー由来の抗原特異的Ｔ細胞株は、各細胞株が作製された後に一緒にプールされる。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株は、細胞株の同一性（ｉｄｅｎｔｉｔｙ）、生存率、無菌性、表現型、効力（ｐｏｔｅｎｃｙ）、及び／又は同種反応性について評価される。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株はプール前に、細胞株の同一性、生存性、無菌性、表現型、効力、及び／又は同種反応性について個々に評価される。実施形態において、細胞株の効力は、表現型、エフェクター分子の産生、及び／又は細胞溶解機能によって評価される。例えば、実施形態において、細胞株の効力は、ＩＦＮγ、ＴＮＦα、ＩＬ－２、及び／又はグランザイムＢの産生によって評価される。実施形態において、細胞株の効力は例えば、標的細胞に対する細胞溶解活性を測定することによって（例えばクロム放出アッセイによって）評価される。実施形態において、細胞株の効力は、細胞の表現型を決定することによって評価される。例えば、実施形態において、細胞株の効力は、活性化及び／又は脱顆粒マーカー（例えば、ＣＤ２５、ＣＤ６９、ＣＤ６２Ｌ、ＣＤ４４、ＣＤ２８、及び／又はＣＤ１０７ａ）のアップレギュレーションを測定することによって評価される。実施形態において、表現型は、フローサイトメトリーによって決定される。実施形態において、各細胞株は、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、又は少なくとも９５％のＣＤ３＋Ｔ細胞を含む。実施形態において、各細胞株は、少なくとも９０％のＣＤ３＋Ｔ細胞を含む。実施形態において、各細胞株の無菌性は、細菌汚染、真菌汚染、マイコプラズマ、及び／又はエンドトキシンレベルについて試験することによって決定される。さらなる実施形態では、各細胞株は、５ＥＵ／ｍＬ未満のエンドトキシンレベルを有する。実施形態において、非血縁及び／又は部分的にＨＬＡ適合及び／又はＨＬＡ不適合標的細胞に対する各抗原特異的Ｔ細胞株の同種反応性は、クロム放出アッセイによって評価される。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株がプールされた後、細胞株のプールはＨＬＡタイピングされる。実施形態において、細胞株のプールは、ＨＬＡ拘束性エピトープを用いて機能的応答について試験される。

実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株は、約１：１の比で一緒にプールされる。実施形態では、抗原特異的細胞の集団が２つの異なる抗原特異的Ｔ細胞株を含み、Ｔ細胞株が別の細胞株に対して各細胞株について約１０：１～約１：１０の範囲の比、例えば、約１０：１、９：１、８：１、７：１、６：１、５：１、４：１、３：１、２：１、１：１、１：２、１：３、１：４、１：５、１：６、１：７、１：８、１：９、又は１：１０である。実施形態では、抗原特異的Ｔ細胞の集団が２つを超える異なるＴ細胞株を含み、前述の範囲内の任意の比を利用され得る。例えば、実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞の集団は、約４：３：２：１の比で一緒にプールされた４つの異なるＴ細胞株を含み得る。実施形態では、抗原特異的Ｔ細胞株は、集団中の各Ｔ細胞株について、例えば、４つの異なるＴ細胞株を含む集団について、約１：１：１：１の比で一緒にプールされる。

実施形態において、各ドナー由来の抗原特異的Ｔ細胞株は、凍結解凍又は凍結保存の工程なしに、新鮮な細胞株として一緒にプールされる。さらなる実施形態では、プールされた製品は凍結保存される。実施形態において、各ドナー由来の抗原特異的Ｔ細胞株は、各細胞株が個々に凍結保存された後解凍され、その後に一緒にプールされる。実施形態において、各ドナー由来の抗原特異的Ｔ細胞株は、細胞株の同一性、生存率、無菌性、表現型、効力、及び／又は同種反応性について試験され；次いで、個々の細胞株として凍結保存され；その後、解凍され；次いで、一緒にプールされて、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品を生成している。場合により、得られたユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞治療製品は、さらなる凍結解凍工程を経ずに細胞療法として利用されてもよく、又は細胞療法製品として後に使用するために凍結保存されてもよい。

実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞の集団は、約１０×１０^６～約１００×１０^６個のＴ細胞を含む。実施形態では、集団が約１０×１０^６、約２０×１０^６、約３０ｘ１０^６、約４０×１０^６、約５０×１０^６、約６０×１０^６、約７０×１０^６、約８０×１０^６、約９０×１０^６、又は約１００×１０^６個のＴ細胞を含む。実施形態において、集団は、約４５×１０^６個のＴ細胞を含む。実施形態において、本開示は、約２．５×１０^６Ｔ細胞／ｍＬ～約２５×１０^６Ｔ細胞／ｍＬを含む抗原特異的Ｔ細胞の集団を含む組成物を提供する。

実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞の集団は、１つ以上のウイルス抗原又は１つ以上の腫瘍関連抗原に特異的なＴ細胞を含む。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞は、ウイルス特異的Ｔ細胞（ＶＳＴ）である。実施形態では、本開示は、本明細書でＵＶＳＴと呼ばれるユニバーサルＶＳＴ製品を提供する。実施形態において、１つ以上のウイルス抗原は、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）、サイトメガロウイルス（Ａｄｅｎｏｖｉｒｕｓ）、アデノウイルス（ＡｄＶ）、ＢＫウイルス（ＢＫＶ）、ＪＣウイルス、ヒトヘルペスウイルス６（ＨＨＶ６）、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、インフルエンザ、パラインフルエンザ、ボカウイルス、コロナウイルス、リンパ球脈絡髄膜炎ウイルス（ＬＣＭＶ）、ムンプス、麻疹、ヒトメタニューモウイルス（ｈＭＰＶ）、パルボウイルスＢ、ロタウイルス、メルケル細胞ウイルス、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、Ｄ型肝炎ウイルス（ＨＤＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１型（ＨＴＬＶ１）、ヒトヘルペスウイルス８型（ＨＨＶ８）、西ナイルウイルス、ジカウイルス、及びエボラウイルスからなる群から選択される。実施形態において、１つ以上のウイルス抗原は、ＢＫＶ、ＣＭＶ、ＡｄＶ、ＥＢＶ及びＨＨＶ－６由来の抗原を含む。実施形態において、１つ以上のウイルス抗原は、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ及びｈＭＰＶ由来の抗原を含む。実施形態において、１つ以上のウイルス抗原は、コロナウイルス由来の抗原を含む。実施形態において、コロナウイルスは、ＳＡＲＳ－Ｃｏｖ－２である。実施形態において、１つ以上のウイルス抗原は、ＨＢＶ由来の抗原を含む。実施形態において、１つ以上のウイルス抗原は、ＨＨＶ－８由来の抗原を含む。

実施形態において、１つ以上の腫瘍関連抗原は、ＣＥＡ、ＭＨＣ、ＣＴＬＡ－４、ｇｐ１００、メソテリン、ＰＤ－Ｌ１、ＴＲＰ１、ＣＤ４０、ＥＧＦＰ、Ｈｅｒ２、ＴＣＲα、ｔｒｐ２、ＴＣＲ、ＭＵＣ１、ｃｄｒ２、ｒａｓ、４－１ＢＢ、ＣＴ２６、ＧＩＴＲ、ＯＸ４０、ＴＧＦ－α．ＷＴ１、ＭＵＣ１、ＬＭＰ２、ＨＰＶＥ６Ｅ７、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＨＥＲ－２／ｎｅｕ、ＭＡＧＥＡ３、ｐ５３非変異体、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＳＭＡ、ＧＤ２、ＭｅｌａｎＡ／ＭＡＲＴ１、Ｒａｓ変異体、ｇｐ１００、ｐ５３変異体、プロテイナーゼ３（ＰＲ１）、ｂｃｒ－ａｂｌ、チロシナーゼ、サバイビン、ＰＳＡ、ｈＴＥＲＴ、ＥｐｈＡ２、ＰＡＰ、ＭＬ－ＩＡＰ、ＡＦＰ、ＥｐＣＡＭ、ＥＲＧ（ＴＭＰＲＳＳ２ＥＴＳ融合遺伝子）、ＮＡ１７、ＰＡＸ３、ＡＬＫ、アンドロゲン受容体、サイクリンＢ１、ポリシアル酸、ＭＹＣＮ、ＲｈｏＣ、ＴＲＰ－２、ＧＤ３、フコシルＧＭ１、メソテリン、ＰＳＣＡ、ＭＡＧＥＡ１、ｓＬｅ（ａ）、ＣＹＰ１Ｂ１、ＰＬＡＣ１、ＧＭ３、ＢＯＲＩＳ、Ｔｎ、ＧｌｏｂｏＨ、ＥＴＶ６－ＡＭＬ、ＮＹ－ＢＲ－１、ＲＧＳ５、ＳＡＲＴ３、ＳＴｎ、炭酸脱水酵素ＩＸ、ＰＡＸ５、ＯＹ－ＴＥＳ１、精子タンパク質１７、ＬＣＫ、ＨＭＷＭＡＡ、ＡＫＡＰ－４、ＳＳＸ２、ＸＡＧＥ１、Ｂ７Ｈ３、レグマイン、Ｔｉｅ２、Ｐａｇｅ４、ＶＥＧＦＲ２、ＭＡＤ－ＣＴ－１、ＦＡＰ、ＰＤＧＦＲ－β、ＭＡＤ－ＣＴ－２及びＦｏｓ関連抗原１から選択される。

本開示は、本明細書で提供される抗原特異的Ｔ細胞の集団を含む組成物を提供する。実施形態において、本開示は、本明細書に提供される抗原特異的Ｔ細胞の集団を含む、及び／又は本明細書に提供される抗原特異的Ｔ細胞株を含む、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物を提供する。例えば、実施形態において、本開示は、ユニバーサルＶＳＴ（ＵＶＳＴ）を提供する。実施形態において、提供される組成物は、凍結保存されるか、又は凍結保存されている。実施形態において、組成物は、凍結保存培地を含む。実施形態において、凍結保存培地は、ヒト血清アルブミン、ハンクス平衡塩類溶液（ＨＢＳＳ）、及びジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を含む。実施形態において、培地は、約１０％（ｖ／ｖ）のＤＭＳＯを含む。実施形態において、凍結保存培地は、約５０％（ｖ／ｖ）の２５％ヒト血清アルブミン及び約４０％（ｖ／ｖ）のＨＢＳＳを含む。

実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞の集団は、外来性分子を発現するように改変されている。例えば、実施形態において、外来性分子は治療剤である。さらなる実施形態では、治療剤は、化学療法薬、サイトカイン、ケモカイン、腫瘍増殖の小分子阻害剤、又は免疫阻害剤分子を隔離（ｓｅｑｕｅｓｔｅｒ）する分子である。実施形態において、外来性分子はトランスジェニック分子である。したがって、実施形態において、本開示は、抗原特異的Ｔ細胞の集団を提供し、ここで、集団内の抗原特異的Ｔ細胞は、外来性分子をコードする導入遺伝子で形質導入されている。実施形態において、トランスジェニック分子は、細胞外結合ドメイン、膜貫通ドメイン、及びシグナル伝達ドメインを含む。実施形態において、細胞外結合ドメインは、癌抗原に特異的である。実施形態において、トランスジェニック分子はキメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）、又はＮＫ細胞受容体（例えば、ＮＫＧ２Ｄ）である。実施形態において、１つ以上の抗原特異的Ｔ細胞株内のＴ細胞は、外来性分子を発現するように改変されている。実施形態において、集団中の全ての抗原特異的Ｔ細胞株内のＴ細胞は、外来性分子を発現するように改変されている。実施形態において、プールされた集団内のＴ細胞は、外来性分子を発現するように改変されている。実施形態では、Ｔ細胞株及び／又はＴ細胞株の集団中のＴ細胞の少なくとも約１０％、少なくとも約１５％、少なくとも約２０％、少なくとも約２５％、少なくとも約３０％、少なくとも約３５％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約５５％、少なくとも約６０％、少なくとも約６５％、少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、又は少なくとも約９０％が外来性分子を発現する。

実施形態では、本開示は、本明細書で提供される抗原特異的Ｔ細胞の集団を含むユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品を提供する。実施形態では、前記製品は、部分的にＨＬＡ適合及び／又はＨＬＡ不適合標的細胞に対する同種反応性の欠如を示す。実施形態において、前記製品は、標的集団における細胞に対する同種反応性の欠如を示す。実施形態において、前記製品は、前記製品を構成する抗原特異的Ｔ細胞の集団を含む組成物の形態であってもよい。実施形態において、前記製品は、各々が１つ以上の抗原特異的Ｔ細胞株を含む別々の組成物の形態であってもよい。このような実施形態では、別個の組成物が本明細書にさらに記載されるように、単一の投与セッションで患者に投与するためのものである。

実施形態において、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品は、それらがまとめて、見込み患者集団の少なくとも約７０％、少なくとも約７５％、少なくとも約８０％、少なくとも約８５％、少なくとも約９０％、少なくとも約９５％、又は少なくとも約９９％と少なくとも２つのＨＬＡアレルにおいて一致する少なくとも１つの抗原特異的Ｔ細胞株を提供する、互いに対して十分なＨＬＡ多様性の抗原特異的Ｔ細胞株を含む。

態様において、本開示は、患者の疾患又は状態を処置するための方法であって、本明細書で提供される抗原特異的Ｔ細胞株の集団、組成物、又はユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品を患者に投与することを含む、方法を提供する。実施形態において、集団、組成物、又はＴ細胞療法製品は、Ｔ細胞の混合物を含み、Ｔ細胞の混合物は、患者のＨＬＡ型に対して、部分的にＨＬＡ適合であるＴ細胞、部分的にＨＬＡ不適合であるＴ細胞、及び完全に不適合であるＴ細胞を含む。

態様において、本開示は、患者における疾患又は状態を処置するための方法であって、単回の投与セッションで、患者にユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法を投与する工程を含む、方法を提供する。実施形態において、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法は、抗原特異的Ｔ細胞の集団を含む１つの組成物の形態である。実施形態において、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法は、別個の組成物の形態であり、各組成物は、１つ以上の個々のＴ細胞株を含む。そのような実施形態では、前記方法は、複数の異なるドナー由来の複数の抗原特異的Ｔ細胞株を患者に投与することを含み、各ドナーのＨＬＡ型は少なくともＨＬＡアレルにおいて他の少なくとも１名のドナーとは異なり、前記方法は、単回の投与セッションで複数の抗原特異的Ｔ細胞株を患者に投与することを含む。

実施形態では、単回の投与セッションで投与することが、複数の抗原特異的Ｔ細胞株を同じ組成物中で同時に患者に投与することを含む。実施形態において、単回の投与セッションで投与することが、連続的に投与される別々の組成物中において複数の抗原特異的Ｔ細胞株を患者に投与することを含む。実施形態において、連続投与は、互いに５分以内、又は互いに３０分以内、又は互いに１時間以内に実施される。実施形態において、連続投与は患者が同じ日に全ての投与を受け、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法の１つ以上の追加のＴ細胞株の投与の前に１つ以上のＴ細胞株の有効性及び／又は寿命についての試験を受けないように、単回の投与セッションで投与される。

実施形態において、本明細書で提供される方法は、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法を対象に投与することを含み、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法は、患者のＨＬＡ型と部分的に一致するＴ細胞と、患者のＨＬＡ型と完全に不一致であるＴ細胞とを含むＴ細胞の混合物を含む。

実施形態において、本明細書に提供される方法は、約１０×１０^６～約１００×１０^６個の抗原特異的Ｔ細胞、又は約２０×１０^６～約８０×１０^６個の抗原特異的Ｔ細胞、又は約３０×１０^６～約６０×１０^６個の抗原特異的Ｔ細胞、又は約４０×１０^６～約５０×１０^６個の抗原特異的Ｔ細胞の用量を患者に投与することを含む。実施形態において、前記方法は、約４５×１０^６個のＴ細胞の用量を患者に投与することを含む。

実施形態において、前記方法は、２つ以上の個別抗原特異的Ｔ細胞製品を一緒にプールするか、１回の投与セッションで患者に投与すること、又は１つ以上の個別抗原特異的Ｔ細胞株を１つ以上のユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品を一緒にプールするか、１回の投与セッションで患者に投与することを含む。

実施形態において、疾患又は状態は、ウイルス感染である。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞は、ウイルス特異的Ｔ細胞（ＶＳＴ）である。実施形態において、本方法は、患者におけるウイルス量の減少及び／又はウイルス感染に関連する疾患の症状の減少又は排除を達成する。実施形態において、本方法は、ＶＳＴを受けなかった患者と比較して、ウイルス感染のより速い解消を達成する。

実施形態において、患者は免疫無防備状態である。実施形態において、患者は、疾患若しくは状態又は別の疾患若しくは状態を処置するために患者が受けた処置に起因して免疫無防備状態である。実施形態において、患者は、年齢に起因して免疫欠陥を有する。実施形態において、患者は、若年又は高齢のために免疫無防備状態である。

実施形態において、状態は免疫不全である。実施形態において、免疫不全は、原発性免疫不全である。実施形態において、患者は、移植を必要としている。実施形態において、患者は、移植を受けたことがある。

実施形態において、疾患又は状態は癌である。実施形態において、癌は、肺癌、腸癌、結腸癌、直腸癌、胆管癌、膵臓癌、精巣癌、前立腺癌、卵巣癌、乳癌、黒色腫、軟部組織肉腫、リンパ腫、白血病、及び多発性骨髄腫からなる群から選択される。

態様において、本開示は、抗原特異的Ｔ細胞の集団を含むユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品を生成するための方法を提供し、該方法は、（ｉ）複数のドナー（例えば、各ドナーのＨＬＡ型が少なくとも１つのＨＬＡアレルにおいて少なくとも１名の他のドナーとは異なる複数のドナー、及び／又は本明細書に記載されるドナーミニバンクに含めるのに適した複数のドナー）の各ドナーから単核細胞を培養することを含み、各々が１つ以上のサイトカイン及び１つ以上の抗原の存在下での別個の培養で、増殖した抗原特異的Ｔ細胞の複数の個別細胞株を生成すること、及び（ｉｉ）個別細胞株を一緒にプールして、複数のユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品を生成すること、を含む。実施形態において、単核細胞は、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）である。実施形態において、前記方法は、１つ以上の凍結解凍工程をさらに含む。例えば、実施形態において、各細胞株は、（ｉｉ）のプールの前に凍結保存され、次いで解凍される。他の実施形態では、各細胞系は、（ｉｉ）のプールの前に凍結融解工程を行わず、新たに調製された細胞系として一緒にプールされる。実施形態では、前記方法は、（ｉｉ）で得られた細胞系のプールを凍結することを含む。実施形態では、前記方法は、（ｉ）で提供されるように複数の個々の細胞株を作製すること、細胞株の同一性、生存性、無菌性、表現型、効力、及び／又は同種反応性を決定すること、個々の細胞株を凍結すること、その後、個々の細胞株を解凍すること、及び細胞株を一緒にプールして、ユニバーサルな抗原特異的Ｔ細胞療法製品を形成することを含む。あるいは、前記方法は、（ｉ）で提供されるように、複数の個々の細胞株を生成すること、個々の細胞株を凍結すること、個々の細胞株を解凍すること、次いで、細胞株の同一性、生存性、無菌性、表現型、効力、及び／又は同種反応性を決定すること、次いで、個々の細胞株を一緒にプールしてユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品を形成すること、又はその後の解凍前に個々の細胞株を再凍結して一緒にプールし、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品を形成すること、のいずれかを含む。実施形態では、本開示は、抗原特異的Ｔ細胞の集団を含むユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品を生成するための方法を提供し、該方法は（ｉ）複数のドナー（例えば、各ドナーのＨＬＡ型が少なくとも１つのＨＬＡアレルにおいて少なくとも１つの他のドナーとは異なる複数のドナー、及び／又は本明細書に記載されるドナーミニバンクに含めるのに適した複数のドナー）の各ドナーからの単核細胞をプールすること、（ｉｉ）１つ以上のサイトカイン及び１つ以上の抗原の存在下で単核細胞のプールを培養して、増殖した抗原特異的Ｔ細胞の集団を生成すること、を含む。実施形態において、単核細胞は末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）である。実施形態において、プールされた細胞の細胞株同一性、生存率、無菌性、表現型、効力、及び／又は同種反応性は、本明細書において提供されるように決定される。実施形態において、プールされた細胞は、工程（ｉ）及び／又は（ｉｉ）の後に凍結され得る。

したがって、実施形態において、本明細書に提供される方法は、個々の抗原特異的Ｔ細胞株及び／又はプールされたユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品を凍結保存培地中で凍結させることを含む。実施形態において、凍結保存培地は、ヒト血清アルブミン、ハンクス平衡塩類溶液（ＨＢＳＳ）、及びジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を含む。実施形態において、培地は、約１０％（ｖ／ｖ）のＤＭＳＯを含む。実施形態において、培地は、約５０％（ｖ／ｖ）の２５％ヒト血清アルブミン及び約４０％（ｖ／ｖ）のＨＢＳＳを含む。実施形態において、プールされたユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品は、患者の疾患又は状態を処置するための方法において使用するために選択されるまで、凍結保存及び保存される。したがって、本開示は、凍結保存培地中に抗原特異的Ｔ細胞株及び／又はプールされたユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品を含む組成物を提供する。実施形態において、前記方法は、１つ以上の濾過工程をさらに含む。実施形態では、前記方法が前項の工程（ｉ）で得られた各細胞株を濾過することをさらに含む。実施形態において、本方法は、前項の（ｉｉ）で得られたプールされたユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品を濾過することをさらに含む。実施形態において、本方法は凍結融解工程の前及び／又は後に、各細胞株を濾過すること、及び／又はプールされたユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品を濾過することをさらに含む。

実施形態において、前記方法は、前２項の（ｉ）で得られた１つ以上の個々の細胞株を導入遺伝子でトランスフェクトすることをさらに含む。実施形態において、前記方法は、前２項の（ｉｉ）で得られたプールされた細胞株を導入遺伝子でトランスフェクトすることをさらに含む。実施形態において、導入遺伝子は、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）、又はＮＫ細胞受容体をコードする。

実施形態において、本明細書に提供される製造方法の培養工程は、ガス透過性培養表面を含む容器中で実施される。実施形態では、容器はＧＲｅｘバイオリアクターである。実施形態では、単核細胞及び抗原と共に培養される１つ以上のサイトカインが、ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－２１、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。実施形態では、単核細胞及び抗原と共に培養される１つ以上のサイトカインが、ＩＬ－１、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－２１、及びそれらの組み合わせからなる群から選択され、ここでサイトカインはＩＬ－２を含まない。実施形態において、単核細胞及び抗原と共に培養される１つ以上のサイトカインは、ＩＬ－４及び／又はＩＬ－７である。実施形態において、サイトカインはＩＬ－４及びＩＬ－７を含み、ＩＬ－２を含まない。

実施形態では、１つ以上の抗原が（ａ）全タンパク質、（ｂ）各抗原の一部又は全配列にわたる一連の重複ペプチドを含むペプミックス（ｐｅｐｍｉｘ）、又は（ｃ）（ａ）及び（ｂ）の組み合わせの形態である。実施形態において、抗原は、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、又はそれ以上の異なるペプミックスを含む。

実施形態において、１つ以上の抗原は、ウイルス抗原又は腫瘍関連抗原である。実施形態において、培養物中の各抗原は、ウイルス抗原である。実施形態において、ウイルス抗原は、ＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫ、ＪＣウイルス、ＨＨＶ６、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ、ボカウイルス、コロナウイルス、ＬＣＭＶ、ムンプス、麻疹、ヒトメタニューモウイルス、パルボウイルスＢ、ロタウイルス、メルケル細胞ウイルス、ＨＳＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ、ＨＤＶ、ＨＰＶ、ＨＩＶ、ＨＴＬＶ１、ＨＨＶ８、西ナイルウイルス、ジカウイルス、及びエボラウイルスから選択されるウイルス由来である。

実施形態において、培養物中の各抗原は、腫瘍関連抗原である。実施形態において、腫瘍関連抗原は、ＣＥＡ、ＭＨＣ、ＣＴＬＡ－４、ｇｐ１００、メソテリン、ＰＤ－Ｌ１、ＴＲＰ１、ＣＤ４０、ＥＧＦＰ、Ｈｅｒ２、ＴＣＲα、ｔｒｐ２、ＴＣＲ、ＭＵＣ１、ｃｄｒ２、ｒａｓ、４－１ＢＢ、ＣＴ２６、ＧＩＴＲ、ＯＸ４０、ＴＧＦ－α．ＷＴ１、ＭＵＣ１、ＬＭＰ２、ＨＰＶＥ６Ｅ７、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＨＥＲ－２／ｎｅｕ、ＭＡＧＥＡ３、ｐ５３非変異体、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＳＭＡ、ＧＤ２、ＭｅｌａｎＡ／ＭＡＲＴ１、Ｒａｓ変異体、ｇｐ１００、ｐ５３変異体、プロテイナーゼ３（ＰＲ１）、ｂｃｒ－ａｂｌ、チロシナーゼ、サバイビン、ＰＳＡ、ｈＴＥＲＴ、ＥｐｈＡ２、ＰＡＰ、ＭＬ－ＩＡＰ、ＡＦＰ、ＥｐＣＡＭ、ＥＲＧ（ＴＭＰＲＳＳ２ＥＴＳ融合遺伝子）、ＮＡ１７、ＰＡＸ３、ＡＬＫ、アンドロゲン受容体、サイクリンＢ１、ポリシアル酸、ＭＹＣＮ、ＲｈｏＣ、ＴＲＰ－２、ＧＤ３、フコシルＧＭ１、メソテリン、ＰＳＣＡ、ＭＡＧＥＡ１、ｓＬｅ（ａ）、ＣＹＰ１Ｂ１、ＰＬＡＣ１、ＧＭ３、ＢＯＲＩＳ、Ｔｎ、ＧｌｏｂｏＨ、ＥＴＶ６－ＡＭＬ、ＮＹ－ＢＲ－１、ＲＧＳ５、ＳＡＲＴ３、ＳＴｎ、炭酸脱水酵素ＩＸ、ＰＡＸ５、ＯＹ－ＴＥＳ１、精子タンパク質１７、ＬＣＫ、ＨＭＷＭＡＡ、ＡＫＡＰ－４、ＳＳＸ２、ＸＡＧＥ１、Ｂ７Ｈ３、レグマイン、Ｔｉｅ２、Ｐａｇｅ４、ＶＥＧＦＲ２、ＭＡＤ－ＣＴ－１、ＦＡＰ、ＰＤＧＦＲ－β、ＭＡＤ－ＣＴ－２及びＦｏｓ関連抗原１の１つ以上である。

一態様では、本開示は、本明細書に提供される抗原特異的Ｔ細胞株及びユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品などの細胞療法製品を含む、ドナーミニバンクを開発するための方法を含む。実施形態において、本開示は、見込み患者の大部分と適合する様々なＨＬＡ（ヒト白血球抗原）アレル型を有する少なくとも１つのドナープールから１名以上の適切なドナーを特定するための方法を含む。いくつかの実施形態では、見込み患者は、同種造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）を受けたことがある。いくつかの実施形態では、見込み患者は、抑制された免疫を有するか、又は免疫不全に陥っている。様々な実施形態において、本開示における方法は、免疫不全である患者のＴ細胞免疫の回復に関係する。

いくつかの実施形態では、本開示の方法における１名以上の適切なドナーの特定は、複数の細胞療法製品を含む第１のドナーミニバンクの構築に関する。いくつかの実施形態では、第１のドナーミニバンクは、抗原特異的Ｔ細胞株を含む。いくつかの実施形態では、本開示における方法は、ドナー選択方法を含む。いくつかの実施形態では、ドナー選択方法は、（ａ）第１のドナープールからの第１の複数のドナー候補の各々のＨＬＡ型を、第１の見込み患者集団からの第１の複数の見込み患者の各々と比較する工程、（ｂ）上記工程（ａ）における比較に基づいて、第１の最適合ドナーを決定することを含み、ここで、第１の最適合ドナーは、第１の複数の見込み患者における最大数の患者と２以上のＨＬＡアレル一致を有する、第１のドナープールからのドナーとして定義することができ、（ｃ）第１のドナーミニバンクに含めるために第１の最適合ドナーを選択し、（ｄ）第１のドナープールから第１の最適合ドナーを除去することを含む。ここで、上記工程（ｄ）は、第１ドナープールから第１の最適合ドナーを除く第１複数のドナー候補の各々からなる第２ドナープールを生成し得る；（ｅ）第１複数の見込み患者から、第１最適合ドナーと２以上のアレル一致を有する各見込み患者を除去し、ここで上記工程（ｅ）は、第１最適合ドナーと２以上のアレル一致を有する各見込み患者以外の第１複数の見込み患者の各々からなる第２の複数の見込み患者を生成することを含み、ここで、第１複数の見込み患者から、第１最適合ドナーを除く第１複数のドナー候補の各々のアレルを有する見込みドナーのみを除去し、ここで、上記工程（ｅ）は、第１複数のドナー候補から、第１最適合ドナーのアレルを有する見込みドナーのみを除去することを含む。そして、（ｆ）前述の工程（ｄ）及び（ｅ）に従ってまだ除去されていない全てのドナー及び見込み患者について前述の工程（ａ）～（ｅ）を１回以上追加で繰り返す工程と、を含む。いくつかの実施形態では、追加の最適合ドナーが前述の工程（ｃ）に従って選択されるたびに、その追加の最適合ドナーは、前述の工程（ｄ）に従って、それぞれのドナープールから除去される。いくつかの実施形態では、後続の最適合ドナーがそれぞれのドナープールから除去されるたびに、前述の工程（ｅ）に従って、その後続の最適合ドナーと２以上のアレル一致を有する各見込み患者がそれぞれの複数の見込み患者から除去される。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、第１のドナーミニバンク内の選択された最適合ドナーの数を、方法の各サイクルの後に１つずつ順次増加させることができる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、方法の各サイクルの後に、選択された最適合ドナーへのそれらのＨＬＡ一致に従って、患者集団における複数の見込み患者の数を減少させることができる。他の実施形態では、前述の工程（ａ）～（ｅ）は、第１の見込み患者集団の所望の割合が複数の見込み患者集団に残るまで繰り返すことができる。他の実施形態では、前述の工程（ａ）～（ｅ）は、ドナープールにドナーが残らなくなるまで繰り返すことができる。

本開示は、本明細書に記載の方法の前述の工程（ａ）～（ｅ）が、第１の見込み患者集団の５％以下が複数の見込み患者の中に残るまで、前述の工程（ｆ）に従って循環され得ることを提供する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の第１のドナーミニバンクは、１０名以下のドナーに由来する抗原特異的Ｔ細胞株を含むことができる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の第１のドナーミニバンクは、１０、９、８、７、６、５、４、３、又は２のドナーに由来する抗原特異的Ｔ細胞株から構成されることができる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の第１のドナーミニバンクは、第１の見込み患者集団の９５％超に、少なくとも２つのＨＬＡアレル上で患者のＨＬＡ型に一致する１つ以上の抗原特異的Ｔ細胞株を提供するのに十分なＨＬＡ変動性を含むことができる。他の実施形態では、本明細書に記載の第１のドナーミニバンクは、５名以下のドナーに由来する抗原特異的Ｔ細胞株から構成され得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の第１のドナーミニバンクは、第１の見込み患者集団の９５％超に、少なくとも２つのＨＬＡアレル上の患者のＨＬＡ型に一致する１つ以上の抗原特異的Ｔ細胞株を提供するのに十分なＨＬＡ変動性を提供することができる。いくつかの実施形態では、前述の工程（ｂ）及び（ｅ）からの２つ以上のアレルは、少なくとも２つのＨＬＡクラスＩアレルを含むことができる。いくつかの実施形態では、前述の工程（ｂ）及び（ｅ）からの２つ以上のアレルは、少なくとも２つのＨＬＡクラスＩＩアレルから構成され得る。いくつかの実施形態では、前述の工程（ｂ）及び（ｅ）からの２つ以上のアレルは、少なくとも１つのＨＬＡクラスＩアレル及び少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩアレルから構成され得る。いくつかの実施形態では、前述の工程（ｂ）及び（ｅ）からの２つ以上のアレルは、ＨＬＡアレルＨＬＡＡ、ＨＬＡＢ、ＤＲＢ１、及びＤＱＢ１を含むことができる。

いくつかの実施形態では、本開示で使用される第１のドナープールは、少なくとも１０名のドナーを含むことができる。いくつかの実施形態では、本開示で提供される第１の見込み患者集団は、少なくとも１００名の患者から構成され得る。いくつかの実施形態では、第１の見込み患者集団は、全世界の同種造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）集団全体を構成することができる。いくつかの実施形態では、第１の見込み患者集団は、米国の同種造血幹細胞移植集団の全体を構成することができる。いくつかの実施形態では、第１の見込み患者集団は、世界的なウェブアドレスｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ．ｂｅｔｈｅｍａｔｃｈｃｌｉｎｉｃａｌ．ｏｒｇで利用できる全米骨髄バンク（ＮＭＤＰ）データベースに含まれる全ての患者を構成することができる。いくつかの実施形態では、第１の見込み患者集団は、世界的なウェブアドレス：ｅｂｍｔ．ｏｒｇ／ｅｂｍｔ－ｐａｔｉｅｎｔ－ｒｅｇｉｓｔｒｙで利用可能な欧州血液骨髄移植学会（ＥＢＭＴ）データベースに含まれる全ての患者から構成され得る。いくつかの実施形態では、全世界の同種造血幹細胞移植集団全体は、１６歳以下の小児を含むことができる。いくつかの実施形態では、米国の同種造血幹細胞移植集団全体は、１６歳以下の小児を含むことができる。いくつかの実施形態では、全世界の同種造血幹細胞移植集団全体は、６５歳以上の個人を含むことができる。いくつかの実施形態では、米国の同種造血幹細胞移植集団全体は、６５歳以上の個人を含むことができる。いくつかの実施形態では、全世界の同種造血幹細胞移植集団全体は、５歳以下の小児を含むことができる。いくつかの実施形態では、米国の同種造血幹細胞移植集団全体は、年齢５歳以下の小児を含むことができる。

本開示は、抗原特異的Ｔ細胞株の複数のミニバンクからなるドナーバンクを構築する際に使用するための適切なドナーを特定する方法を提供する。いくつかの実施形態では、ドナーバンクを構築することは、本明細書に記載されるように、最初に第１のミニバンクを開発することを含み得る。いくつかの実施形態では、第１のミニバンクを開発することは、前述の工程（ａ）～（ｆ）の全てを実行することを含むことができる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載されるドナーバンクのための第１のミニバンクを開発することは、１つ以上の第２のラウンドを含む前述の工程（ａ）～（ｆ）を繰り返して、１つ以上の第２のミニバンクを構築することを含むことができる。

いくつかの実施形態では、バンクを構築するための各第２ラウンドを開始する前に、新しいドナープールを生成することを含むことができる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の新しいドナープールは、第１のドナープールから、第１のラウンド及び任意の前の第２のラウンドから前述の工程（ｄ）の各前のサイクルに従って除去された任意の最適合ドナーを差し引いたものから構成され得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の新たなドナープールは、第１のドナープールに含まれないドナー候補の全く新しい集団から構成され得る。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の新規ドナープールは、第１ドナープールから、第１ラウンド及び任意の先行する第２ラウンドからの前述の工程（ｄ）の各サイクルにしたがって除去された任意の最適合ドナーと、第１ドナープールに含まれないドナー候補の全く新しい集団との組み合わせからなることが可能である。いくつかの実施形態では、本方法に記載のバンクを構築することは、本方法の第１ラウンド及び任意の先行する第２ラウンドから前述の工程（ｅ）の各先行サイクルに従って以前に除去された全ての見込み患者を戻すことにより、第１見込み患者集団から第１複数の見込み患者を再構成することを含むことができる。

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の１つ以上のミニバンクを構築するための各ラウンドは、複数の見込み患者のうち第１の見込み患者の５％以下が残るまで、上記工程（ａ）～（ｅ）を上記工程（ｆ）に従って循環させることを含み得る。いくつかの実施形態では、各ドナーミニバンクは、少なくとも２つのＨＬＡアレル上で患者のＨＬＡ型に適合する少なくとも１つの抗原特異的Ｔ細胞株を第１の見込み患者集団の９５％超提供するために、１つ以上の最適合ドナーの間の十分なＨＬＡ変動を含み得る。いくつかの実施形態では、結果として得られる各ドナーミニバンクは、１０名以下のドナーに由来する抗原特異的Ｔ細胞株から構成され得る。いくつかの実施形態では、各結果ドナーミニバンクは、５名以下のドナーに由来する抗原特異的Ｔ細胞株を含み得る。いくつかの実施形態において、得られる各ドナーミニバンクは、５名以下のドナーに由来する抗原特異的Ｔ細胞株を含み得る。いくつかの実施形態において、前述の工程（ｂ）及び（ｅ）からの２つ以上のアレルは、少なくとも２つのＨＬＡクラスＩＩアレルを含み得る。他の実施形態において、前述の工程（ｂ）及び（ｅ）からの２つ以上のアレルは、少なくとも１つのＨＬＡクラスＩアレル及び少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩアレルを含み得る。

いくつかの実施形態において、ドナーバンクを構築するために用いられる第１のドナープールは、少なくとも１０名のドナーを含み得る。いくつかの実施形態において、ドナーバンクを構築するために用いられる第１の見込み患者集団は、少なくとも１００名の患者を含み得る。いくつかの実施形態において、第１の見込み患者集団は、全世界の同種異系ＨＳＣＴ集団を含み得る。いくつかの実施形態において、第１の見込み患者集団は、全米の同種異系ＨＳＣＴ集団を含み得る。いくつかの実施形態において、第１の見込み患者集団は、ワールドワイドウェブアドレスｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ．ｂｅｔｈｅｍａｔｃｈｃｌｉｎｉｃａｌ．ｏｒｇにおいて利用可能なＮａｔｉｏｎａｌＭａｒｒｏｗＤｏｎｏｒＰｒｏｇｒａｍ（ＮＭＤＰ）データベースに含まれるすべての患者を含み得る。いくつかの実施形態において、第１の見込み患者集団は、ワールドワイドウェブアドレス：ｅｂｍｔ．ｏｒｇ／ｅｂｍｔ－ｐａｔｉｅｎｔ－ｒｅｇｉｓｔｒｙにおいて利用可能なＥｕｒｏｐｅａｎＳｏｃｉｅｔｙｆｏｒＢｌｏｏｄａｎｄＭａｒｒｏｗＴｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ（ＥＢＭＴ）データベースに含まれるすべての患者を含み得る。いくつかの実施形態において、全世界の同種異系ＨＳＣＴ集団は、１６歳以下の小児を含み得る。いくつかの実施形態において、全米の同種異系ＨＳＣＴ集団は、１６歳以下の小児を含み得る。いくつかの実施形態において、全世界の同種異系ＨＳＣＴ集団は、６５歳以上の個体を含み得る。いくつかの実施形態において、全米の同種異系ＨＳＣＴ集団は、６５歳以上の個体を含み得る。いくつかの実施形態において、全世界の同種異系ＨＳＣＴ集団は、５歳以下の小児を含み得る。いくつかの実施形態において、全米の同種異系ＨＳＣＴ集団は、５歳以下の小児を含み得る。

いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ドナーバンクに含まれる各ドナーから血液を収集する工程を含み得る。他の実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ドナーバンクに含まれる各ドナーから収集した血液を手に入れる工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ドナーバンクに含まれる各ドナーから単核球（ＭＮＣ）を収集する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ドナーバンクに含まれる各ドナーから収集したＭＮＣを手に入れる工程を含み得る。いくつかの実施形態において、各ドナーからＭＮＣを収集する工程は、ＭＮＣを単離する工程又は単離されたＭＮＣを手に入れる工程を含み得る。１つの実施形態において、ＭＮＣは、末梢血単核球（例えば、ＰＢＭＣ）を含む。１つの実施形態において、ＭＮＣは、血液アフェレーシス単核球を含む。いくつかの実施形態において、各ドナーからＭＮＣを収集する工程は、ＰＢＭＣを単離する工程又は単離されたＰＢＭＣを手に入れる工程を含み得る。いくつかの実施形態において、ＭＮＣを単離する工程は、フィコール勾配によって行われ得る。いくつかの実施形態において、ＭＮＣを単離する工程は、密度勾配によって行われ得る。他の実施形態において、本明細書中に開示されるようなＭＮＣを収集する工程は、その細胞を培養する工程を含み得る。他の実施形態において、本明細書中に開示されるようなＭＮＣを収集する工程は、その細胞を凍結保存する工程を含み得る。

いくつかの実施形態において、培養されたＭＮＣ又は凍結保存されたＭＮＣは、培養中の細胞を１つ以上の抗原と好適な培養条件下で接触させて、抗原特異的Ｔ細胞を刺激し、拡大することを含み得る。他の実施形態において、細胞と接触させる１つ以上の抗原は、１つ以上のウイルス抗原を含み得る。他の実施形態において、細胞と接触させる１つ以上の抗原は、１つ以上の腫瘍関連抗原を含み得る。いくつかの実施形態において、細胞と接触させる１つ以上の抗原は、１つ以上のウイルス抗原と１つ以上の腫瘍関連抗原との組み合わせを含み得る。

本開示は、抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築する方法を提供する。いくつかの実施形態において、その方法は、第１の複数の各ドナー候補のＨＬＡ型と第１の複数の各見込み患者のＨＬＡ型とを比較する工程（ａ）を含み得る。いくつかの実施形態において、その方法は、このパラグラフに記載されている方法の工程（ａ）における比較に基づいて、第１の最適合ドナーを決定する工程（ｂ）を含み得る。いくつかの実施形態において、第１の最適合ドナーは、第１の複数の見込み患者の中で最も多くの患者と２つ以上のアレルが適合する第１のドナープール由来のドナーと定義され得る。いくつかの実施形態において、その方法は、第１のドナーミニバンクに含めるために第１の最適合ドナーを選択する工程（ｃ）を含み得る。いくつかの実施形態において、その方法は、第１のドナープールから第１の最適合ドナーを除去する工程（ｄ）を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法の工程（ｄ）は、第１の最適合ドナーを除く第１のドナープール由来の第１の複数の各ドナー候補からなる第２のドナープールを作製する工程を含み得る。

いくつかの実施形態において、その方法は、第１の複数の見込み患者から、第１の最適合ドナーと２つ以上のアレルが適合する各見込み患者を除去する工程（ｅ）を含み得る。いくつかの実施形態において、このパラグラフに記載されているような工程（ｅ）は、第１の最適合ドナーと２つ以上のアレルが適合する各見込み患者を除く第１の複数の各見込み患者からなる第２の複数の見込み患者を得る工程を含み得る。

いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築する方法は、本明細書中に開示されるような工程（ｄ）及び（ｅ）に従って、まだ除去されていないすべてのドナー及び見込み患者を用いて、本明細書中に開示されるような工程（ａ）～（ｅ）をさらに１回以上反復する工程を含み得る。いくつかの実施形態では、工程（ｃ）に従って追加の最適合ドナーが選択されるたびに、その最適合ドナーは、工程
（ｄ）に従ってそれぞれのドナープールから除去される。いくつかの実施形態では、次の最適合ドナーがそれぞれのドナープールから除去されるたびに、工程（ｅ）に従って次の最適合ドナーと２つ以上のアレルが適合する各見込み患者がそれぞれの複数の見込み患者から除去される。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ドナーミニバンク内の選択された最適合ドナーの数を、その方法の各サイクル後に１ずつ増加させ得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、選択された最適合ドナーとのＨＬＡ適合に従ってその方法の各サイクル後に患者集団内の複数の見込み患者の数を減少させ得る。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築するための工程（ａ）～（ｅ）は、第１の見込み患者集団の所望のパーセンテージが複数の見込み患者に残るまで反復され得る。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築するための工程（ａ）～（ｅ）は、ドナープールにドナーが残らなくなるまで反復され得る。

いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ドナーミニバンクに含まれるそれぞれの各ドナーから得られた血液からＭＮＣを単離するか、又はその血液から単離されたＭＮＣを手に入れる工程（ｇ）を含む。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法の工程（ｈ）は、それぞれの各ドナーから得られたＭＮＣを培養する工程を含む。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、培養中のＭＮＣを１つ以上の抗原と好適な培養条件下で接触させて、それぞれの各ドナーのＭＮＣ由来の抗原特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団を刺激し、拡大する工程（ｉ）を含む。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、培養中のＭＮＣを１つ以上の抗原由来の１つ以上のエピトープと好適な培養条件下で接触させて、それぞれの各ドナーのＭＮＣ由来の抗原特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団を刺激し、拡大する工程（ｉ）を含む。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、複数の抗原特異的Ｔ細胞株を作製する工程を含む。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株の各々は、それぞれの各ドナーのＭＮＣに由来する抗原特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような工程（ｇ）～（ｉ）のＭＮＣは、ＰＢＭＣであり得る。いくつかの実施形態において、上記方法の工程（ｊ）は、複数の抗原特異的Ｔ細胞株を凍結保存する工程を含み得る。

いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築する方法は、工程（ｆ）に従って、第１の見込み患者集団の５％以下が複数の見込み患者に残るまで工程（ａ）～（ｅ）を繰り返す工程を含み得る。いくつかの実施形態において、各ドナーミニバンクは、第１の見込み患者集団の＞９５％に、少なくとも２つのＨＬＡアレルにおいて患者のＨＬＡ型に適合する少なくとも１つの抗原特異的Ｔ細胞株を提供するのに十分なＨＬＡ多様性を１名以上の最適合ドナーの間に含み得る。いくつかの実施形態において、得られる各ドナーミニバンクは、１０名以下のドナーに由来する抗原特異的Ｔ細胞株を含み得る。いくつかの実施形態において、得られる各ドナーミニバンクは、５名以下のドナーに由来する抗原特異的Ｔ細胞株を含み得る。いくつかの実施形態において、工程（ｂ）及び（ｅ）からの２つ以上のアレルは、少なくとも２つのＨＬＡクラスＩＩアレルを含み得る。他の実施形態において、工程（ｂ）及び（ｅ）からの２つ以上のアレルは、少なくとも１つのＨＬＡクラスＩアレル及び少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩアレルを含み得る。

いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築する方法において用いられる第１のドナープールは、少なくとも１０名のドナーを含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築する方法において用いられる第１のドナープールは、少なくとも１００名のドナーを含み得る。いくつかの実施形態において、第１の見込み患者集団は、全世界の同種異系ＨＳＣＴ集団を含み得る。いくつかの実施形態において、上記方法において用いられる第１の見込み患者集団は、全米の同種異系ＨＳＣＴ集団を含み得る。いくつかの実施形態において、第１の見込み患者集団は、ワールドワイドウェブアドレスｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ．ｂｅｔｈｅｍａｔｃｈｃｌｉｎｉｃａｌ．ｏｒｇにおいて利用可能なＮａｔｉｏｎａｌＭａｒｒｏｗＤｏｎｏｒＰｒｏｇｒａｍ（ＮＭＤＰ）データベースに含まれるすべての患者を含み得る。いくつかの実施形態において、第１の見込み患者集団は、ワールドワイドウェブアドレス：ｅｂｍｔ．ｏｒｇ／ｅｂｍｔ－ｐａｔｉｅｎｔ－ｒｅｇｉｓｔｒｙにおいて利用可能なＥｕｒｏｐｅａｎＳｏｃｉｅｔｙｆｏｒＢｌｏｏｄａｎｄＭａｒｒｏｗＴｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ（ＥＢＭＴ）データベースに含まれるすべての患者を含み得る。いくつかの実施形態において、全世界の同種異系ＨＳＣＴ集団は、１６歳以下の小児を含み得る。いくつかの実施形態において、全米の同種異系ＨＳＣＴ集団は、１６歳以下の小児を含み得る。いくつかの実施形態において、全世界の同種異系ＨＳＣＴ集団は、６５歳以上の個体を含み得る。いくつかの実施形態において、全米の同種異系ＨＳＣＴ集団は、６５歳以上の個体を含み得る。いくつかの実施形態において、全世界の同種異系ＨＳＣＴ集団は、５歳以下の小児を含み得る。いくつかの実施形態において、全米の同種異系ＨＳＣＴ集団は、５歳以下の小児を含み得る。

いくつかの実施形態において、ＭＮＣの培養は、気体透過性の培養表面を備える容器において行われ得る。１つの実施形態において、その容器は、気体透過性の部分を備える注入バッグであり得る。１つの実施形態において、その容器は、剛性容器であり得る。１つの実施形態において、その容器は、ＧＲｅｘバイオリアクターであり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築するためのＰＢＭＣを培養する工程は、１つ以上のサイトカインの存在下において行われ得る。１つの実施形態において、そのサイトカインには、ＩＬ４が含まれ得る。１つの実施形態において、そのサイトカインには、ＩＬ７が含まれ得る。１つの実施形態において、そのサイトカインには、ＩＬ４及びＩＬ７が含まれ得る。１つの実施形態において、そのサイトカインには、ＩＬ４及びＩＬ７が含まれ得るが、ＩＬ２は含まれない。

抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築する方法は、ＭＮＣを１つ以上の抗原の存在下において培養する工程を含み得る。１つの実施形態において、ＭＮＣは、ＰＢＭＣであり得る。いくつかの実施形態において、１つ以上の抗原は、ホールタンパク質
（ｗｈｏｌｅｐｒｏｔｅｉｎ）の形態であり得る。いくつかの実施形態において、１つ以上の抗原は、各抗原の一部又は配列全体を網羅する一連の重複ペプチドを含むペプミックスの形態であり得る。いくつかの実施形態において、１つ以上の抗原は、ホールタンパク質の形態と、各抗原の一部又は配列全体を網羅する一連の重複ペプチドを含むペプミックスの形態との組み合わせの形態であり得る。

抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築する方法は、ＭＮＣを複数のペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。１つの実施形態において、ＭＮＣは、ＰＢＭＣであり得る。いくつかの実施形態において、複数のペプミックス由来の各ペプミックスは、各抗原の一部又は配列全体を網羅する一連の重複ペプチドを含み得る。

いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築するための各抗原は、腫瘍関連抗原であり得る。いくつかの実施形態において、各抗原は、ウイルス抗原であり得る。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築するための少なくとも１つの抗原は、ウイルス抗原であり得、少なくとも１つの抗原は、腫瘍関連抗原であり得る。

いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株のドナーミニバンクを構築するための本明細書中に記載されるような方法は、選択されたドナー由来のＭＮＣを少なくとも２つの異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも３つの異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも４つの異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも５つの異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも６つの異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも７つの異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも８つの異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも９つの異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも１０個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも１１個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも１２個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも１３個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも１４個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも１５個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも１６個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも１７個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも１８個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも１９個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも２０個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも２０個を超える異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、ＭＮＣは、ＰＢＭＣであり得る。いくつかの実施形態において、各ペプミックスは、ある抗原の一部を網羅する一連の重複ペプチドを含み得る。いくつかの実施形態において、各ペプミックスは、ある抗原の配列全体を網羅する一連の重複ペプチドを含み得る。

いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株のドナーミニバンクを構築するための本明細書中に記載されるような方法は、選択されたドナー由来のＭＮＣを複数のペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、各ペプミックスは、複数のペプミックス中の他の各ペプミックスによってカバーされる抗原とは異なる少なくとも１つの抗原をカバーし得る。いくつかの実施形態において、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１２、少なくとも１３、少なくとも１４、少なくとも１５、少なくとも１６、少なくとも１７、少なくとも１８、少なくとも１９、少なくとも２０個の異なる抗原が、複数のペプミックスによってカバーされ得る。いくつかの実施形態において、少なくとも２０個を超える異なる抗原が、複数のペプミックスによってカバーされ得る。いくつかの実施形態において、少なくとも２つの異なるウイルス由来の少なくとも１つの抗原が、複数のペプミックスによってカバーされ得る。

いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような抗原特異的Ｔ細胞株のドナーミニバンクを構築するための方法において使用される抗原は、ＥＢＶ（エプスタイン・バーウイルス）由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＣＭＶ（サイトメガロウイルス）由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、アデノウイルス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＢＫウイルス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＪＣ（ＪｏｈｎＣｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルス）ウイルス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＨＨＶ６（ヘルペスウイルス６）由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＨＨＶ８（ヘルペスウイルス８）由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＨＢＶ（Ｂ型肝炎ウイルス）由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＲＳＶ（ヒト呼吸器合胞体ウイルス）由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、インフルエンザ由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、パラインフルエンザ由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ボカウイルス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、コロナウイルス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＬＣＭＶ（リンパ球脈絡髄膜炎ウイルス）由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ムンプス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、麻疹由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ヒトメタニューモウイルス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、パルボウイルスＢ由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ロタウイルス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、メルケル細胞ウイルス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、単純ヘルペスウイルス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＨＰＶ（ヒトパピローマウイルス）由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＨＴＬＶ１（ヒトＴ細胞白血病ウイルス１型）由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、西ナイルウイルス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ジカウイルス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、エボラ由来であり得る。いくつかの実施形態において、少なくとも１つのペプミックスが、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ及びＨＭＰＶ（ヒトメタニューモウイルス）の各々由来の抗原をカバーし得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるインフルエンザ抗原は、インフルエンザＡ抗原ＮＰ１であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるインフルエンザ抗原は、インフルエンザＡＭＰ１であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるインフルエンザ抗原は、インフルエンザＡ抗原であるＮＰ１及びＭＰ１であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるＲＳＶ抗原は、ＲＳＶＮタンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるＲＳＶ抗原は、ＲＳＶＦタンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるＲＳＶ抗原は、ＲＳＶＮタンパク質及びＲＳＶＦタンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるｈＭＰＶ抗原は、ｈＭＰＶＦタンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるｈＭＰＶ抗原は、ｈＭＰＶＮタンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるｈＭＰＶ抗原は、ｈＭＰＶＭ２－１タンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるｈＭＰＶ抗原は、ｈＭＰＶＭタンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるｈＭＰＶ抗原は、ｈＭＰＶＦタンパク質とｈＭＰＶＮタンパク質とｈＭＰＶＭ２－１とｈＭＰＶＭタンパク質との組み合わせであり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるＰＩＶ抗原は、ＰＩＶＭタンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるＰＩＶ抗原は、ＰＩＶＨＮタンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるＰＩＶ抗原は、ＰＩＶＮタンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるＰＩＶ抗原は、ＰＩＶＦタンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるＰＩＶ抗原は、ＰＩＶＭタンパク質とＰＩＶＨＮタンパク質とＰＩＶＮタンパク質とＰＩＶＦタンパク質との組み合わせであり得る。

いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株のドナーミニバンクを構築するための本明細書中に記載されるような方法は、選択されたドナー由来のＰＢＭＣを、インフルエンザＡ抗原ＮＰ１及びインフルエンザＡ抗原ＭＰ１を網羅するペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＲＳＶ抗原Ｎ及びＲＳＶ抗原Ｆを網羅するペプミックスの存在下においてＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ｈＭＰＶ抗原Ｆを網羅するペプミックスの存在下においてＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ｈＭＰＶ抗原Ｎを網羅するペプミックスの存在下においてＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１を網羅するペプミックスの存在下においてＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ｈＭＰＶ抗原Ｍを網羅するペプミックスの存在下においてＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＰＩＶ抗原Ｍを網羅するペプミックスの存在下においてＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＰＩＶ抗原ＨＮを網羅するペプミックスの存在下においてＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＰＩＶ抗原Ｎを網羅するペプミックスの存在下においてＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＰＩＶ抗原Ｆを網羅するペプミックスの存在下においてＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。

いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株のドナーミニバンクを構築するための本明細書中に記載されるような方法は、選択されたドナー由来のＰＢＭＣを、ＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫ及びＨＨＶ６の各々由来の抗原をカバーするペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、少なくとも１つのペプミックスが、ＥＢＶ由来の抗原をカバーし得、少なくとも１つのペプミックスが、ＣＭＶ由来の抗原をカバーし得、少なくとも１つのペプミックスが、アデノウイルス由来の抗原をカバーし得、少なくとも１つのペプミックスが、ＢＫ由来の抗原をカバーし得、少なくとも１つのペプミックスが、ＨＨＶ６由来の抗原をカバーし得る。いくつかの実施形態において、ＥＢＶ抗原は、ＬＭＰ２であり得る。いくつかの実施形態において、ＥＢＶ抗原は、ＥＢＮＡ１であり得る。いくつかの実施形態において、ＥＢＶ抗原は、ＢＺＬＦ１であり得る。いくつかの実施形態において、ＥＢＶ抗原は、ＣＭＶ抗原の組み合わせであり得る。いくつかの実施形態において、ＣＭＶ抗原は、ＩＥ１由来であり得る。いくつかの実施形態において、ＣＭＶ抗原は、ｐｐ６５由来であり得る。いくつかの実施形態において、ＣＭＶ抗原は、ＩＥ１とｐｐ６５との組み合わせ由来であり得る。いくつかの実施形態において、アデノウイルス抗原は、ヘキソン由来であり得る。いくつかの実施形態において、アデノウイルス抗原は、ペントン由来であり得る。いくつかの実施形態において、アデノウイルス抗原は、ヘキソンとペントンとの組み合わせ由来であり得る。いくつかの実施形態において、ＢＫウイルス抗原は、ＶＰ１由来であり得る。いくつかの実施形態において、ＢＫウイルス抗原は、ラージＴ由来であり得る。いくつかの実施形態において、ＢＫウイルス抗原は、ＶＰ１とラージＴとの組み合わせ由来であり得る。いくつかの実施形態において、ＨＨＶ６抗原は、Ｕ９０由来であり得る。いくつかの実施形態において、ＨＨＶ６抗原は、Ｕ１１由来であり得る。いくつかの実施形態において、ＨＨＶ６抗原は、Ｕ１４由来であり得る。いくつかの実施形態において、ＨＨＶ６抗原は、Ｕ９０とＵ１１とＵ１４との組み合わせ由来であり得る。

いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株のドナーミニバンクを構築するための本明細書中に記載されるような方法は、ＥＢＶ抗原であるＬＭＰ２を網羅するペプミックスの存在下においてＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＥＢＶ抗原であるＥＢＮＡ１を網羅するペプミックスの存在下においてＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＥＢＶ抗原であるＢＺＬＦ１を網羅するペプミックスの存在下においてＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＣＭＶ抗原であるＩＥ１を網羅するペプミックスの存在下においてＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＣＭＶ抗原であるｐｐ６５を網羅するペプミックスの存在下においてＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、アデノウイルス抗原であるヘキソンを網羅するペプミックスの存在下においてＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ペントンを網羅するペプミックスの存在下においてＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＢＫウイルス抗原であるＶＰ１を網羅するペプミックスの存在下においてＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＢＫウイルス抗原であるラージＴを網羅するペプミックスの存在下においてＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＨＨＶ６抗原であるＵ９０を網羅するペプミックスの存在下においてＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＨＨＶ６抗原であるＵ１１を網羅するペプミックスの存在下においてＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＨＨＶ６抗原であるＵ１４を網羅するペプミックスの存在下においてＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。

いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株のドナーミニバンクを構築するための本明細書中に記載されるような方法は、選択されたドナー由来のＰＢＭＣを、コロナウイルス由来の抗原をカバーするペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、コロナウイルスは、β－コロナウイルス（β－ＣｏＶ）である。いくつかの実施形態において、コロナウイルスは、α－コロナウイルス（α－ＣｏＶ）である。いくつかにおいて、β－ＣｏＶは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＨＣｏＶＨＫＵｌ及びＨＣｏＶ－ＯＣ４３から選択される。いくつかの実施形態において、ＨＣｏＶ－Ｅ２２９及びＨＣｏＶ－ＮＬ６３から選択されるα－ＣｏＶ。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株のドナーミニバンクを構築するための本明細書中に記載されるような方法は、ＰＢＭＣを複数のペプミックスライブラリーと培養する工程を含み得、各ペプミックスライブラリーは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２抗原又は１つ以上の追加のウイルス由来の抗原の全部若しくは一部を網羅する複数の重複ペプチドを含む。いくつかの実施形態において、ＶＳＴは、複数のペプミックスライブラリーでプライミングされたＤＣなどのＡＰＣとＴ細胞を接触させることによって作製され、各ペプミックスライブラリーは、ウイルス抗原の全部又は一部を網羅する複数の重複ペプチドを含み、その複数のペプミックスライブラリーの少なくとも１つは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２由来の第１の抗原を網羅し、その複数のペプミックスライブラリーの少なくとも１つの追加のペプミックスライブラリー（又は１つの追加のペプミックスライブラリーの一部）は、それぞれ第２の抗原を網羅する。いくつかの実施形態において、ＶＳＴは、少なくとも１つのＳＡＲＳ－ＣｏＶ２抗原をコードする少なくとも１つのＤＮＡプラスミド又はその一部及び各第２の抗原をコードする少なくとも１つのＤＮＡプラスミド又はその一部でヌクレオフェクトされたＤＣなどのＡＰＣとＴ細胞を接触させることによって作製される。いくつかの実施形態において、そのプラスミドは、少なくとも１つのＳＡＲＳ－ＣｏＶ２抗原又はその一部、及び少なくとも１つの追加の抗原又はその一部をコードする。いくつかの実施形態において、ＶＳＴは、ＣＤ４＋Ｔリンパ球及びＣＤ８＋Ｔリンパ球を含む。いくつかの実施形態において、ＶＳＴは、αβＴ細胞レセプターを発現する。いくつかの実施形態において、ＶＳＴは、ＭＨＣ拘束性である。いくつかの実施形態において、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２抗原は、ｎｓｐ１；ｎｓｐ３；ｎｓｐ４；ｎｓｐ５；ｎｓｐ６；ｎｓｐ７ａ、ｎｓｐ８、ｎｓｐ１０；ｎｓｐ１２；ｎｓｐ１３；ｎｓｐ１４；ｎｓｐ１５；及びｎｓｐ１６からなる群より選択される１つ以上の抗原を含む。いくつかの実施形態において、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２抗原は、スパイク（Ｓ）；エンベロープタンパク質（Ｅ）；マトリックスタンパク質（Ｍ）；及びヌクレオカプシドタンパク質（Ｎ）からなる群より選択される１つ以上の抗原を含む。いくつかの実施形態において、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２抗原は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＡＰ３Ａ）；ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＮＳＳ）；ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＯＲＦｌＯ）；ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＯＲＦ９Ｂ）；及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（Ｙｌ４）からなる群より選択される１つ以上の抗原を含む。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株のドナーミニバンクを構築するための本明細書中に記載されるような方法は、選択されたドナー由来のＰＢＭＣを、１つ以上のＳＡＲＳ－ＣｏＶ２抗原、並びにＰＩＶ抗原Ｍ、ＰＩＶ抗原ＨＮ、ＰＩＶ抗原Ｎ、ＰＩＶ抗原Ｆ、インフルエンザ抗原ＮＰｌ、インフルエンザ抗原ＭＰｌ、ＲＳＶ抗原Ｎ、ＲＳＶ抗原Ｆ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１、ｈＭＰＶ抗原Ｆ、ｈＭＰＶ抗原Ｎ及びＡｄＶ抗原ヘキソン、ＡｄＶ抗原ペントン並びにそれらの組み合わせからなる群より選択される１つ以上の追加の抗原をカバーするペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、追加の抗原は、ＰＩＶ抗原Ｍ、ＰＩＶ抗原ＨＮ、ＰＩＶ抗原Ｎ、ＰＩＶ抗原Ｆ、インフルエンザ抗原ＮＰｌ、インフルエンザ抗原ＭＰｌ、ＲＳＶ抗原Ｎ、ＲＳＶ抗原Ｆ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１、ｈＭＰＶ抗原Ｆ、ｈＭＰＶ抗原Ｎ、ＡｄＶ抗原ヘキソン、ＡｄＶ抗原ペントン及びそれらの組み合わせを含む。

いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株のドナーミニバンクを構築するための本明細書中に記載されるような方法は、選択されたドナー由来のＰＢＭＣを、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）由来の抗原をカバーするペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、ＨＢＶ抗原は、ＨＢＶコア抗原、ＨＢＶ表面抗原、並びにＨＢＶコア抗原及びＨＢＶ表面抗原の各々から選択される。

いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株のドナーミニバンクを構築するための本明細書中に記載されるような方法は、選択されたドナー由来のＰＢＭＣを、ヒトヘルペスウイルス－８（ＨＨＶ－８）由来の抗原をカバーするペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、ＨＨＶ－８抗原は、潜在性抗原を含む。いくつかの実施形態において、ＨＨＶ－８抗原は、溶解性抗原を含む。いくつかの実施形態において、ＨＨＶ－８抗原は、ＬＡＮＡ－１（ＯＲＦ３）；ＬＡＮＡ－２（ｖＩＲＦ３、Ｋ１０．５）；ｖＣＹＣ（ＯＲＦ７２）；ＲＴＡ（ＯＲＦ５０）；ｖＦＬＩＰ
（ＯＲＦ７１）；Ｋａｐｏｓｉｎ（ＯＲＦ１２、Ｋ１２）；ｇＢ（ＯＲＦ８）；ＭＩＲ１
（Ｋ３）；ＳＳＢ（ＯＲＦ６）；ＴＳ（ＯＲＦ７０）及びそれらの組み合わせから選択される。

いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株（例えば、ＶＳＴ）のドナーミニバンクを構築するための本明細書中に記載されるような方法は、抗原特異的Ｔ細胞株をＩＬ－７とＩＬ－４の両方の存在下においてエクスビボで培養する工程を含む。いくつかの実施形態において、ＶＳＴは、患者への投与の準備が整うように、９～１８日以内の培養で十分に拡大されたものである。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスは、１５ｍｅｒのペプチドを含み得る。１つの実施形態において、抗原を網羅するペプミックス中のペプチドは、順に１１アミノ酸重複し得る。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクの構築は、抗原特異的Ｔ細胞を拡大することを含み得る。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクの構築は、抗原特異的Ｔ細胞を抗原特異的細胞傷害性について試験することを含み得る。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株のミニバンクは、本明細書中に開示されるような抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築する方法を介して作製され得る。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株のミニバンクは、本明細書中に記載されるような方法を介して選択された複数のドナーに由来し得る。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株のバンクは、本明細書中に記載されるような方法を介して選択された複数のドナーに由来する複数のミニバンクを含み得る。

実施形態では、本明細書で提供される方法のいずれかによって生成されたドナーミニバンクの２つ以上の細胞株を一緒にプールして、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品を生成することができる。実施形態において、本明細書に記載されるように生成されたドナーミニバンクの２つ以上の細胞株は、例えば、単回の投与セッションにおいて患者に投与することによって、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品として使用され得る。

本開示は、本明細書に記載されるようなミニバンク由来の１つ以上の好適な抗原特異的Ｔ細胞株（例えば、２つ以上のそのようなＴ細胞株）、及び／又は本明細書に記載のユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品を患者に投与することによって、疾患又は状態を処置する方法を提供する。いくつかの実施形態において、患者に投与するために抗原特異的Ｔ細胞株を選択する場合の唯一の基準は、その患者が、抗原特異的Ｔ細胞株の製造において使用されるＭＮＣを単離してきたドナーと少なくとも２つのＨＬＡアレルを共有していることである。一実施形態では、ＭＮＣはＰＢＭＣであり得る。いくつかの実施形態では、患者が事前のＨＬＡタイピングなしに、及び／又は患者のＨＬＡ型を考慮することなく、本明細書に記載のユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品を投与され得る。いくつかの実施形態では、患者が事前のＨＬＡタイピングなしに、及び／又は患者のＨＬＡ型を考慮することなく、本明細書に記載のミニバンクに含まれる抗原特異的Ｔ細胞株のうちの２つ以上を単回投与セッションで投与され得る。いくつかの特定の実施形態では、患者が事前のＨＬＡタイピングなしで、及び／又は患者のＨＬＡ型を考慮することなく、本明細書に記載のミニバンクに含まれる抗原特異的Ｔ細胞株の全てを単回の投与セッションで投与され得る。いくつかの実施形態において、処置される疾患は、ウイルス感染症又はウイルス関連疾患であり得る。いくつかの実施形態において、処置される疾患は、癌であり得る。

いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなミニバンク由来の１つ以上の好適な抗原特異的Ｔ細胞株（例えば、２つ以上のそのようなＴ細胞株）、及び／又は本明細書に記載のユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品によって処置される患者は、免疫無防備状態であり得る。いくつかの実施形態において、それらの患者は、その疾患若しくは状態又は別の疾患若しくは状態を処置するために患者が受けた処置に起因して免疫無防備状態である。いくつかの実施形態において、それらの患者は、年齢に起因して免疫無防備状態である。１つの実施形態において、患者は、低年齢に起因して免疫無防備状態である。１つの実施形態において、患者は、高齢に起因して免疫無防備状態である。いくつかの実施形態において、処置される状態は、免疫不全であり得る。１つの実施形態において、免疫不全は、原発性免疫不全である。いくつかの実施形態において、患者は、移植治療を必要としている。

いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような患者によって受け取られた移植材料は、幹細胞を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような患者によって受け取られた移植材料は、実質臓器を含み得る。いくつかの実施形態において、実質臓器は、腎臓である。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような患者によって受け取られた移植材料は、骨髄を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような患者によって受け取られた移植材料は、幹細胞、実質臓器及び骨髄を含み得る。いくつかの実施形態において、上記方法は、直前のパラグラフに記載されているように工程（ｇ）において選択された第１の抗原特異的Ｔ細胞株を患者に投与する工程を含む。

いくつかの実施形態において、患者への投与は、ウイルス感染症を処置するための投与であり得る。いくつかの実施形態において、患者への投与は、腫瘍を処置するための投与であり得る。いくつかの実施形態において、患者への投与は、移植前の原発性免疫不全に対する投与であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載される方法は、複数の抗原特異的Ｔ細胞株を患者に投与する工程を含み、ここで第２の抗原特異的Ｔ細胞株は、前記第１の抗原特異的Ｔ細胞株と同じミニバンクから選択され得る。いくつかの実施形態において、第２の抗原特異的Ｔ細胞株は、第１の抗原特異的Ｔ細胞株が得られたミニバンクとは異なるミニバンクから選択され得る。いくつかの実施形態において、第２の抗原特異的Ｔ細胞株は、第１の抗原特異的Ｔ細胞株以外のドナーバンクに残っているすべての抗原特異的Ｔ細胞株を用いて、本明細書に記載のミニバンク、又は本明細書に記載のバンクに含まれるミニバンクから第１の抗原特異的Ｔ細胞株を選択する方法を繰り返すことによって選択され得る。実施形態では、本明細書に記載の方法は、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品を患者に投与することを含むことができ、製品は抗原特異的Ｔ細胞の集団を含み、抗原特異的Ｔ細胞の集団は少なくとも２つの細胞株を含み、各細胞株は別々のドナーから生成され、各ドナーのＨＬＡ型が、少なくとも１つのＨＬＡアレルにおいて少なくとも１つの他のドナーとは異なっている。ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞は、１つ以上のドナーミニバンクから細胞株をプールすることによって得ることができ、及び／又はドナーミニバンクからの個々の抗原特異的Ｔ細胞として単回の投与セッションで投与することができる。

本開示は、抗原特異的Ｔ細胞株の複数のミニバンクで構成されたドナーバンクを構築する方法を提供する。いくつかの実施形態において、その方法は、本明細書中に記載されるような抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築する方法に示された工程（ａ）～（ｊ）を行う工程Ａ）を含み得る。いくつかの実施形態において、第１のミニバンクが構築される。いくつかの実施形態において、その方法は、本明細書中に記載されるような抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築する方法に示された工程（ａ）～（ｊ）を反復する工程Ｂ）を含み得る。いくつかの実施形態において、１つ以上の第２のミニバンクを構築するために、１回以上の第２ラウンドが行われ得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法の各第２ラウンドを開始する前に、新しいドナープールが作製され得る。いくつかの実施形態において、その新しいドナープールは、本明細書中に記載されるような抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築する方法の第１ラウンド及び先の任意の第２ラウンドから先の各サイクルの工程（ｄ）に従って除去された任意の最適合ドナーを差し引いた第１のドナープールを含み得る。いくつかの実施形態において、その新しいドナープールは、第１のドナープールに含まれていない全く新しいドナー候補集団を含み得る。いくつかの実施形態において、その新しいドナープールは、本明細書中に記載されるような抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築する方法の第１ラウンド及び先の任意の第２ラウンドから先の各サイクルの工程（ｄ）に従って除去された任意の最適合ドナーを差し引いた第１のドナープールを含む新しいドナープールと、第１のドナープールに含まれていない全く新しいドナー候補集団との組み合わせを含み得る。

いくつかの実施形態において、上記方法は、本明細書中に記載されるような抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築する方法に示されている先の各サイクルの工程
（ｅ）に従って第１ラウンド及び先の任意の第２ラウンドから以前に除去されたすべての見込み患者を戻すことによって第１の見込み患者集団由来の第１の複数の見込み患者を再構成する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築する方法に示されている工程（ｇ）～（ｊ）は、必要に応じて、その方法の各ラウンド後に行われてもよいし、直前のパラグラフに記載されたように工程Ａ）の後の任意の時点において行われてもよい。

いくつかの実施形態において、ＭＮＣの培養は、気体透過性の培養表面を備える容器において行われ得る。１つの実施形態において、その容器は、気体透過性の部分を備える注入バッグであり得る。１つの実施形態において、その容器は、剛性容器であり得る。１つの実施形態において、その容器は、ＧＲｅｘバイオリアクター（ＷｉｌｓｏｎＷｏｌｆ，ＳｔＰａｕｌ，ＭＮ）であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築するためのＭＮＣの培養は、１つ以上のサイトカインの存在下において行われ得る。１つの実施形態において、ＭＮＣは、ＰＭＢＣであり得る。１つの実施形態において、サイトカインには、ＩＬ４が含まれ得る。１つの実施形態において、サイトカインには、ＩＬ７が含まれ得る。１つの実施形態において、サイトカインには、ＩＬ４及びＩＬ７が含まれ得る。１つの実施形態において、サイトカインには、ＩＬ４及びＩＬ７が含まれ得るが、ＩＬ２は含まれない。

いくつかの実施形態において、１つ以上の抗原は、ホールタンパク質の形態であり得る。いくつかの実施形態において、１つ以上の抗原は、各抗原の一部又は配列全体を網羅する一連の重複ペプチドを含むペプミックスの形態であり得る。いくつかの実施形態において、１つ以上の抗原は、ホールタンパク質の形態と、各抗原の一部又は配列全体を網羅する一連の重複ペプチドを含むペプミックスの形態との組み合わせの形態であり得る。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株の複数のミニバンクで構成されたドナーバンクを構築するための方法は、ＭＮＣを複数のペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。１つの実施形態において、ＭＮＣは、ＰＢＭＣであり得る。いくつかの実施形態において、複数のペプミックス由来の各ペプミックスは、各抗原の一部又は配列全体を網羅する一連の重複ペプチドを含み得る。抗原は、樹状細胞上に提示され得る。抗原は、本明細書中に開示される方法を介して選択されたドナー由来のＭＮＣ（例えば、ＰＢＭＣ）と直接接触され得る。

他の実施形態において、上記細胞と接触される各抗原は、腫瘍関連抗原を含み得る。他の実施形態において、各抗原は、ウイルス抗原であり得る。いくつかの実施形態において、上記細胞と接触される少なくとも１つの抗原は、ウイルス抗原であり得、上記細胞と接触される少なくとも１つの抗原は、腫瘍関連抗原であり得る。

いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような抗原特異的Ｔ細胞株の複数のミニバンクで構成されたドナーバンクを構築する方法は、ＭＮＣを少なくとも２つの異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも３つの異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも４つの異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも５つの異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも６つの異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも７つの異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも８つの異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも９つの異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも１０個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも１１個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも１２個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも１３個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも１４個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも１５個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも１６個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも１７個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも１８個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも１９個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも２０個の異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを少なくとも２０個を超える異なるペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、ＭＮＣは、ＰＢＭＣであり得る。いくつかの実施形態において、各ペプミックスは、ある抗原の一部を網羅する一連の重複ペプチドを含み得る。いくつかの実施形態において、各ペプミックスは、ある抗原の配列全体を網羅する一連の重複ペプチドを含み得る。

いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＭＮＣを複数のペプミックスの存在下において培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、各ペプミックスは、複数のペプミックス中の他の各ペプミックスによってカバーされる抗原とは異なる少なくとも１つの抗原をカバーし得る。いくつかの実施形態において、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８、少なくとも９、少なくとも１０、少なくとも１１、少なくとも１２、少なくとも１３、少なくとも１４、少なくとも１５、少なくとも１６、少なくとも１７、少なくとも１８、少なくとも１９、少なくとも２０個の異なる抗原が、複数のペプミックスによってカバーされ得る。いくつかの実施形態において、少なくとも２０個を超える異なる抗原が、複数のペプミックスによってカバーされ得る。いくつかの実施形態において、少なくとも２つの異なるウイルス由来の少なくとも１つの抗原が、複数のペプミックスによってカバーされ得る。

いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＥＢＶ（エプスタイン・バーウイルス）由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＣＭＶ（サイトメガロウイルス）由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、アデノウイルス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＢＫウイルス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＪＣウイルス（ＪｏｈｎＣｕｎｎｉｎｇｈａｍウイルス）由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＨＨＶ６（ヘルペスウイルス６）由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＲＳＶ（ヒト呼吸器合胞体ウイルス）由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、インフルエンザ由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、パラインフルエンザ由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ボカウイルス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、コロナウイルス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＬＣＭＶ（リンパ球脈絡髄膜炎ウイルス）由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ムンプス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、麻疹由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ヒトメタニューモウイルス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、パルボウイルスＢ由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ロタウイルス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、メルケル細胞ウイルス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、単純ヘルペスウイルス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＨＰＶ（ヒトパピローマウイルス）由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＨＩＶ（ヒト免疫不全ウイルス）由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＨＴＬＶ１（ヒトＴ細胞白血病ウイルス１型）由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ＨＨＶ８（ヘルペスウイルス８）由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、西ナイルウイルス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、ジカウイルス由来であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法において使用される抗原は、エボラ由来であり得る。

いくつかの実施形態において、少なくとも１つのペプミックスは、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ及びＨＭＰＶ（ヒトメタニューモウイルス）の各々由来の抗原をカバーし得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるインフルエンザ抗原は、インフルエンザＡ抗原ＮＰ１であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるインフルエンザ抗原は、インフルエンザＡＭＰ１であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるインフルエンザ抗原は、インフルエンザＡインフルエンザＡ抗原ＮＰ１及びインフルエンザＡ
ＭＰ１であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるＲＳＶ抗原は、ＲＳＶＮタンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるＲＳＶ抗原は、ＲＳＶＦタンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるＲＳＶ抗原は、ＲＳＶＮタンパク質及びＲＳＶＦタンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるｈＭＰＶ抗原は、ｈＭＰＶＦタンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるｈＭＰＶ抗原は、ｈＭＰＶＮタンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるｈＭＰＶ抗原は、ｈＭＰＶＭ２－１タンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるｈＭＰＶ抗原は、ｈＭＰＶＭタンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるｈＭＰＶ抗原は、ｈＭＰＶＦタンパク質とｈＭＰＶＮタンパク質とｈＭＰＶＭ２－１とｈＭＰＶＭタンパク質との組み合わせであり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるＰＩＶ抗原は、ＰＩＶＭタンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるＰＩＶ抗原は、ＰＩＶＨＮタンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるＰＩＶ抗原は、ＰＩＶＮタンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるＰＩＶ抗原は、ＰＩＶＦタンパク質であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスにおいて使用されるＰＩＶ抗原は、ＰＩＶＭタンパク質とＰＩＶＨＮタンパク質とＰＩＶＮタンパク質とＰＩＶＦタンパク質との組み合わせであり得る。

いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、インフルエンザＡ抗原ＮＰ１及びインフルエンザＡ抗原ＭＰ１を網羅するペプミックスの存在下においてＭＮＣ又はＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＲＳＶ抗原Ｎ及びＲＳＶ抗原Ｆを網羅するペプミックスの存在下における培養を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ｈＭＰＶ抗原Ｆを網羅するペプミックスの存在下における培養を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ｈＭＰＶ抗原Ｎを網羅するペプミックスの存在下における培養を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１を網羅するペプミックスの存在下における培養を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ｈＭＰＶ抗原Ｍを網羅するペプミックスの存在下における培養を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＰＩＶ抗原Ｍを網羅するペプミックスの存在下における培養を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＰＩＶ抗原ＨＮを網羅するペプミックスの存在下における培養を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＰＩＶ抗原Ｎを網羅するペプミックスの存在下における培養を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＰＩＶ抗原Ｆを網羅するペプミックスの存在下における培養を含み得る。

いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような少なくとも１つのペプミックスは、ＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫ及びＨＨＶ６由来の抗原をカバーし得る。いくつかの実施形態において、ＥＢＶ抗原は、ＬＭＰ２であり得る。いくつかの実施形態において、ＥＢＶ抗原は、ＥＢＮＡ１であり得る。いくつかの実施形態において、ＥＢＶ抗原は、ＢＺＬＦ１であり得る。いくつかの実施形態において、ＥＢＶ抗原は、ＬＭＰ２、ＥＢＮＡ１及びＢＺＬＦ１であり得る。いくつかの実施形態において、ＣＭＶ抗原は、ＩＥ１であり得る。いくつかの実施形態において、ＣＭＶ抗原は、ｐｐ６５であり得る。いくつかの実施形態において、ＣＭＶ抗原は、ＩＥ１及びｐｐ６５であり得る。

いくつかの実施形態において、アデノウイルス抗原は、ヘキソンであり得る。いくつかの実施形態において、アデノウイルス抗原は、ペントンであり得る。いくつかの実施形態において、アデノウイルス抗原は、ヘキソン及びペントンであり得る。いくつかの実施形態において、ＢＫウイルス抗原は、ＶＰ１であり得る。いくつかの実施形態において、ＢＫウイルス抗原は、ラージＴであり得る。いくつかの実施形態において、ＢＫウイルス抗原は、ＶＰ１及びラージＴであり得る。いくつかの実施形態において、ＨＨＶ６抗原は、Ｕ９０であり得る。いくつかの実施形態において、ＨＨＶ６抗原は、Ｕ１１であり得る。いくつかの実施形態において、ＨＨＶ６抗原は、Ｕ１４であり得る。いくつかの実施形態において、ＨＨＶ６抗原は、Ｕ９０、Ｕ１１及びＵ１４であり得る。

いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＥＢＶ抗原であるＬＭＰ２、ＥＢＶ抗原であるＥＢＮＡ１及びＥＢＶ抗原であるＢＺＬＦ１を網羅するペプミックスの存在下においてＭＮＣ又はＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＣＭＶ抗原ＩＥ１及びＣＭＶ抗原ｐｐ６５を網羅するペプミックスの存在下における培養を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、アデノウイルス抗原であるヘキソン及びアデノウイルス抗原であるペントンを網羅するペプミックスの存在下における培養を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＢＫウイルス抗原であるＶＰ１及びラージＴを網羅するペプミックスの存在下における培養を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＨＨＶ６抗原であるＵ９０、ＨＨＶ６抗原であるＵ１１及びＨＨＶ６抗原であるＵ１４を網羅するペプミックスの存在下における培養を含み得る。

いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＨＢＶコア抗原、ＨＢＶ表面抗原、並びにＨＢＶコア抗原及びＨＢＶ表面抗原の各々を網羅するペプミックスの存在下においてＭＮＣ又はＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。

いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、ＬＡＮＡ－１（ＯＲＦ３）；ＬＡＮＡ－２（ｖＩＲＦ３、Ｋ１０．５）；ｖＣＹＣ（ＯＲＦ７２）；ＲＴＡ（ＯＲＦ５０）；ｖＦＬＩＰ（ＯＲＦ７１）；Ｋａｐｏｓｉｎ（ＯＲＦ１２、Ｋ１２）；ｇＢ（ＯＲＦ８）；ＭＩＲ１（Ｋ３）；ＳＳＢ（ＯＲＦ６）；ＴＳ（ＯＲＦ７０）及びそれらの組み合わせから選択されるＨＨＶ－８抗原を網羅するペプミックスの存在下においてＭＮＣ又はＰＢＭＣを培養する工程を含み得る。

いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなペプミックスは、１５ｍｅｒのペプチドを含み得る。１つの実施形態において、抗原を網羅するペプミックス中のペプチドは、順に１１アミノ酸重複し得る。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクの構築は、抗原特異的Ｔ細胞を拡大することを含み得る。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクの構築は、抗原特異的Ｔ細胞を抗原特異的細胞傷害性について試験することを含み得る。

本開示は、抗原特異的Ｔ細胞株の複数のミニバンクを含み得るドナーバンクを提供する。いくつかの実施形態において、そのドナーバンクは、抗原特異的Ｔ細胞株の複数のミニバンクで構成されたドナーバンクを構築する方法を介して作製され得る。本開示は、本明細書中に記載されるようなドナーバンク由来の１つ以上の好適な抗原特異的Ｔ細胞株を患者に投与する工程を含む、疾患又は状態を処置する方法を提供する。

本開示は、本明細書中に記載されるようなドナーバンク由来の１つ以上の好適な抗原特異的Ｔ細胞株（例えば、２つ以上の適切な抗原特異的Ｔ細胞株）及び／又は本明細書に記載のユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品を患者に投与することによって疾患又は状態を処置する方法を提供する。いくつかの実施形態において、患者への抗原特異的Ｔ細胞株の投与に対する唯一の基準は、患者が、抗原特異的Ｔ細胞株の製造において使用されるＭＮＣを単離してきたドナーと少なくとも２つのＨＬＡアレルを共有していることである。１つの実施形態において、ＭＮＣは、ＰＢＭＣであり得る。いくつかの実施形態では、患者は、本明細書に記載のユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品を投与される。そのような実施形態では、患者が事前のＨＬＡタイピングなしで、及び／又は患者のＨＬＡ型を考慮することなく処置される。いくつかの実施形態において、処置される疾患は、ウイルス感染症であり得る。いくつかの実施形態において、処置される疾患は、癌であり得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるようなドナーバンク由来の１つ以上の好適な抗原特異的Ｔ細胞株によって処置される患者は、免疫無防備状態であり得る。いくつかの実施形態では、患者が疾患若しくは状態又は別の疾患若しくは状態を処置するために受けた処置に起因して免疫無防備状態である。いくつかの実施形態において、それらの患者は、年齢に起因して免疫無防備状態である。１つの実施形態において、患者は、低年齢に起因して免疫無防備状態である。１つの実施形態において、患者は、高齢に起因して免疫無防備状態である。いくつかの実施形態において、処置される状態は、免疫不全であり得る。１つの実施形態において、免疫不全は、原発性免疫不全である。いくつかの実施形態において、患者は、移植治療を必要としている。

いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような患者によって受け取られた移植材料は、幹細胞を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような患者によって受け取られた移植材料は、実質臓器を含み得る。いくつかの実施形態において、実質臓器は、腎臓である。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような患者によって受け取られた移植材料は、骨髄を含み得る。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような患者によって受け取られた移植材料は、幹細胞、実質臓器及び骨髄を含み得る。

いくつかの実施形態では、複数の抗原特異的Ｔ細胞株及び／又はユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品を投与することは既存の移植片対宿主病（ＧＶＨＤ）をもたらさず、又は悪化させない。いくつかの実施形態では、複数の抗原特異的Ｔ細胞株及び／又はユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品を投与することは、ウイルス感染症の処置のためであり得る。いくつかの実施形態では、複数の抗原特異的Ｔ細胞株及び／又はユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品を投与することは、腫瘍の処置のためであり得る。いくつかの実施形態では、複数の抗原特異的Ｔ細胞株及び／又はユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品を投与することは、移植前の原発性免疫不全のためであり得る。いくつかの実施形態では、前記方法は、第１及び第２の抗原特異的Ｔ細胞株を単回の投与セッションで患者に投与することを含むことができる。いくつかの実施形態において、第２の抗原特異的Ｔ細胞株は、第１の抗原特異的Ｔ細胞株と同じドナーバンクから選択され得る。いくつかの実施形態において、第２の抗原特異的Ｔ細胞株は、第１の抗原特異的Ｔ細胞株とは異なるドナーミニバンクから選択され得る。いくつかの実施形態では、第２の抗原特異的Ｔ細胞株は、同じ投与セッションで患者に投与することができる。いくつかの実施形態では、前記方法は、複数の抗原特異的Ｔ細胞株を患者に投与することを含むことができる。いくつかの実施形態において、複数の抗原特異的Ｔ細胞株は、ドナーミニバンク中の全ての抗原特異的Ｔ細胞株を含む。いくつかの実施形態では、第２の抗原特異的Ｔ細胞株は同じ投与セッションで患者に投与され得る。

いくつかの実施形態において、処置有効性は、患者からの感染のウイルス血症の消失に基づいて計測され得る。いくつかの実施形態において、処置有効性は、患者からの感染のウイルス尿症の消失（ｖｉｒｕｒｉｃｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ）に基づいて計測され得る。いくつかの実施形態において、処置有効性は、患者由来のサンプル中のウイルス量の消失に基づいて計測され得る。いくつかの実施形態において、処置有効性は、感染のウイルス血症の消失、感染のウイルス尿症の消失、及び患者由来のサンプル中のウイルス量の消失に基づいて計測され得る。いくつかの実施形態において、処置有効性は、抗原特異的Ｔ細胞株の投与後に計測され得る。

いくつかの実施形態において、サンプルは、患者由来の組織サンプルから選択され得る。いくつかの実施形態において、サンプルは、患者由来の体液サンプルから選択され得る。いくつかの実施形態において、サンプルは、患者由来の脳脊髄液（ＣＳＦ）から選択され得る。いくつかの実施形態において、サンプルは、患者由来の気管支肺胞洗浄（ＢＡＬ）から選択され得る。いくつかの実施形態において、サンプルは、患者由来の便から選択され得る。いくつかの実施形態において、サンプルは、患者由来の組織サンプル、体液サンプル、ＣＳＦ、ＢＡＬ及び便から選択され得る。

いくつかの実施形態において、処置有効性は、患者の末梢血中の検出可能なウイルス量をモニタリングすることによって計測され得る。いくつかの実施形態において、処置有効性は、肉眼的血尿の消失を含み得る。いくつかの実施形態において、処置有効性は、ＣＴＣＡＥ－ＰＲＯ又は患者及び／若しくは臨床医が報告するアウトカムを調べる類似の評価ツールによって計測される出血性膀胱炎症状の低減を含み得る。いくつかの実施形態において、処置有効性は、癌に対するものである。いくつかの実施形態において、処置有効性は、抗原特異的Ｔ細胞株の投与後の腫瘍サイズの減少に基づいて計測され得る。いくつかの実施形態において、処置有効性は、疾患負荷のマーカーをモニタリングすることによって計測され得る。いくつかの実施形態において、処置有効性は、患者の末梢血／血清中の検出可能な腫瘍溶解をモニタリングすることによって計測され得る。いくつかの実施形態において、処置有効性は、患者の末梢血／血清中の検出可能な疾患負荷及び腫瘍溶解のマーカーをモニタリングすることによって計測され得る。いくつかの実施形態において、処置有効性は、画像診断を介して腫瘍の状態をモニタリングすることによって計測され得る。他の実施形態において、処置有効性は、患者の末梢血／血清中の検出可能な疾患負荷のマーカーと腫瘍溶解と、画像診断を介した腫瘍の状態との組み合わせをモニタリングすることによって計測され得る。

いくつかの実施形態において、炎症反応は、１つ以上の症状又は徴候を観察することによって検出され得る。いくつかの実施形態において、１つ以上の症状又は徴候には、全身症状が含まれ得る。いくつかの実施形態において、全身症状は、発熱、悪寒、頭痛、倦怠感、疲労、悪心、嘔吐又は関節痛であり得る。いくつかの実施形態において、１つ以上の症状又は徴候には、低血圧を含む血管症状が含まれ得る。いくつかの実施形態において、１つ以上の症状又は徴候には、心臓症状が含まれ得る。１つの実施形態において、心臓症状は、不整脈である。いくつかの実施形態において、１つ以上の症状又は徴候には、呼吸困難が含まれ得る。いくつかの実施形態において、１つ以上の症状又は徴候には、腎症状が含まれ得る。１つの実施形態において、腎症状は、腎不全である。１つの実施形態において、腎症状は、尿毒症である。いくつかの実施形態において、１つ以上の症状又は徴候には、検査症状（ｌａｂｏｒａｔｏｒｙｓｙｍｐｔｏｍｓ）が含まれ得る。１つの実施形態において、検査症状は、凝固障害及び血球貪食性リンパ組織球症様症候群であり得る。

本開示は、抗原特異的Ｔ細胞の第１のドナーミニバンクの構築において使用するのに適したドナーを特定する方法を提供する。本開示は、抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築する方法を提供する。いくつかの実施形態において、その方法は、第１のドナープール由来の第１の複数の各ドナー候補のＨＬＡ型を決定するか又は決定されている工程（ａ）を含み得る。いくつかの実施形態において、その方法は、第１の見込み患者集団由来の第１の複数の各見込み患者のＨＬＡ型を決定するか又は決定されている工程（ｂ）を含み得る。いくつかの実施形態において、その方法は、第１のドナープール由来の第１の複数の各ドナー候補のＨＬＡ型と、第１の見込み患者集団由来の第１の複数の各見込み患者のＨＬＡ型とを比較する工程（ｃ）を含み得る。いくつかの実施形態において、その方法は、このパラグラフに記載されているような工程（ｄ）における比較に基づいて、第１の複数の見込み患者の中で最も多くの患者と２つ以上のアレルが適合する第１のドナープール由来のドナーと定義される第１の最適合ドナーを決定する工程（ｄ）を含み得る。

いくつかの実施形態において、上記方法は、第１のドナーミニバンクに含めるために第１の最適合ドナーを選択する工程（ｅ）を含み得る。いくつかの実施形態において、その方法は、第１のドナープールから第１の最適合ドナーを除去し、それにより、第１の最適合ドナーを除く第１のドナープール由来の第１の複数の各ドナー候補からなる第２のドナープールを作製する工程（ｆ）を含み得る。いくつかの実施形態において、その方法は、第１の複数の見込み患者から、第１の最適合ドナーと２つ以上のアレルが適合する各見込み患者を除去する工程（ｇ）を含み得る。いくつかの実施形態において、工程（ｇ）は、第１の最適合ドナーと２つ以上のアレルが適合する各見込み患者を除く第１の複数の各見込み患者からなる第２の複数の見込み患者を得ることを含み得る。

いくつかの実施形態において、上記方法は、工程（ｆ）及び（ｇ）に従って、まだ除去されていないすべてのドナー及び見込み患者を用いて、工程（ｃ）～（ｇ）をさらに１回以上反復する工程（ｈ）を含み得る。いくつかの実施形態において、追加の最適合ドナーが、工程（ｅ）に従って選択されるたびに、その最適合ドナーが、工程（ｆ）に従ってそれぞれのドナープールから除去される。いくつかの実施形態において、次の最適合ドナーがそれぞれのドナープールから除去されるたびに、工程（ｇ）に従って次の最適合ドナーと２つ以上のアレルが適合する各見込み患者がそれぞれの複数の見込み患者から除去される。いくつかの実施形態において、工程（ｈ）は、第１のドナーミニバンク内の選択された最適合ドナーの数を、その方法の各サイクル後に１ずつ増加させる。いくつかの実施形態において、工程（ｈ）は、選択された最適合ドナーとのＨＬＡ適合に従ってその方法の各サイクル後に患者集団内の複数の見込み患者の数を減少させることを含み得る。いくつかの実施形態において、工程（ｃ）～（ｇ）は、第１の見込み患者集団の所望のパーセンテージが複数の見込み患者に残るまで反復され得る。いくつかの実施形態において、工程（ｃ）～（ｇ）は、ドナープールにドナーが残らなくなるまで反復され得る。

いくつかの実施形態において、本開示は、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品、又はパラインフルエンザウイルス３型（ＰＩＶ）由来の少なくとも１つの第１の抗原及び１つ以上の第２のウイルス由来の少なくとも１つの第２の抗原を含む複数のウイルス抗原を含むドナーミニバンク又は複数のドナーミニバンクでできたドナーバンク由来の１つ以上の好適な抗原特異的Ｔ細胞株を患者に投与することを提供する。いくつかの実施形態において、少なくとも１つの第２の抗原は、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）である。いくつかの実施形態において、少なくとも１つの第２の抗原は、インフルエンザである。いくつかの実施形態において、少なくとも１つの第２の抗原は、ヒトメタニューモウイルス（ｈＭＰＶ）である。

図１は、難治性ウイルス感染症を有する患者において使用するためのドナーバンクの選択プロセスの全体的な概要を表している。略語：ＨＬＡ：ヒト白血球抗原。ＨＳＣＴ：造血幹細胞移植。

図２は、ドナー選択プロセスの一部を表している。各ドナーを患者集団と比較して、２アレルという最低閾値でのＨＬＡ適合に基づいて抗原特異的Ｔ細胞株によって患者の大部分に対応するドナーを特定する。

図３は、ドナー選択プロセスの一部を表している。患者の大部分に対応するドナーは、（ｉ）抗原特異的Ｔ細胞株作製の一次選考を通過し；（ｉｉ）全体のドナープールから除去され；（ｉｉｉ）このドナーによって対応されるすべての患者が、患者集団から除去される。

図４は、ドナー選択プロセスの一部を表している。図２に記載されたのと同じ工程であって、残りの患者を最もカバーするドナーを特定し、次いで、その後の考慮からそのドナーと対応される患者の両方を除去する工程を反復する。

図５は、ドナー選択プロセスの一部を表している。図３に記載されたのと同じ工程であって、残りの患者を最もカバーするドナーを特定し、次いで、その後の考慮からそのドナーと対応される患者の両方を除去する工程を反復する。

図６は、ドナー選択プロセスの一部を表している。図２に記載されたのと同じ工程であって、残りの患者を最もカバーするドナーを特定し、次いで、その後の考慮からそのドナーと対応される患者の両方を除去する工程を反復する。

図７は、ドナー選択プロセスの一部を表している。図３に記載されたのと同じ工程であって、残りの患者を最もカバーするドナーを特定し、次いで、その後の考慮からそのドナーと対応される患者の両方を除去する工程を反復する。

図８は、ドナー選択プロセスの一部を表している。図２に記載されたのと同じ工程であって、残りの患者を最もカバーするドナーを特定し、次いで、その後の考慮からそのドナーと対応される患者の両方を除去する工程を反復する。

図９は、ドナー選択プロセスの一部を表している。図３に記載されたのと同じ工程であって、残りの患者を最もカバーするドナーを特定し、次いで、その後の考慮からそのドナーと対応される患者の両方を除去する工程を反復する。

図１０は、患者の少なくとも９５％をカバーする（患者ｍ及びｋだけが適合しない）ミニバンク（ドナー２、３、５及び６を含む）の作製を示している。

図１１は、抗原特異的Ｔ細胞株の製造の一般概念を示している。

図１２は、抗原特異的Ｔ細胞株の製造のフローチャートを示している。

図１３は、ＩＦＮ－γ ＥＬＩＳＰＯＴアッセイを用いて評価したときのＡｄｖ、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＢＫＶ及びＨＨＶ６に対する抗原特異的Ｔ細胞株の効力を示している。

図１４は、Ａｄｖ、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＢＫＶ及びＨＨＶ６に対して効力のある抗原特異的Ｔ細胞株と効力のない抗原特異的Ｔ細胞株とを区別するための効力閾値の定義を示している。

図１５は、効力のある抗原特異的Ｔ細胞株での処置に成功した２０名のＢＫ－ＨＣ患者における、抗原特異的Ｔ細胞株の効力と臨床的有用性との相関を示している。Ｔ細胞株の効力が無いことと、処置後の患者におけるＢＫウイルス濃度の上昇とが相関している。

図１６は、効力閾値を超える抗原特異的Ｔ細胞株の使用と、ＢＫウイルスに対する臨床的有用性との相関関係を示しており、処置後にＢＫウイルスレベルが全体的に低下していることを示している。

生成されたＣＭＶＳＴ株の特徴及びスクリーニングされた被験者とのマッチングの程度（図１７Ａ）トリパンブルー排除を用いた細胞計数に基づく２０日間にわたって達成されたＣＭＶＳＴのＴ細胞拡張。（ｎ＝８）。（図１７Ｂ）凍結保存の日の拡張されたＣＭＶＳＴ株の表現型（平均ＳＥＭ、ｎ＝８）及び（図１７Ｃ）ＩＥ１及びｐｐ６５抗原スパンペミックスでのＣＭＶＳＴの一晩刺激後のＩＦＮ－γ ＥＬＩＳｐｏｔアッセイにより決定した抗原特異的Ｔ細胞の頻度である。結果は、プレーティングされた２ｘ１０５ＶＳＴあたりのスポット形成細胞（ＳＦＣ）として報告される。合計３０以上のＳＦＣ／２ｘ１０５を有するＣＭＶＳＴ株は、陽性とみなされた。（ｎ＝８）．（図１７Ｄ）スクリーニングした患者（ｎ＝２９）のレシピエントＨＬＡと臨床使用のために特定されたＣＭＶＳＴ株の一致するＨＬＡ抗原の数（合計８個のうち）。

サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）に感染した個々の患者における処置のアウトカム。ＣＭＶＳＴを注入する２週間前（－２週目に最も近いウイルス量レベル）、注入の直前（ｐｒｅ）及び注入後（ｐｏｓｔ）（２、４及び６週目）の患者の血漿中ＣＭＶウイルス量（ＩＵ／ｍＬ）の描写。矢印は注入時点を示している。

インビボにおけるＣＭＶ特異的Ｔ細胞の頻度。（図１９Ａ）ＩＥ１及びｐｐ６５ウイルスペプミックスで一晩刺激した後のＩＦＮ－γ ＥＬＩＳｐｏｔアッセイによって計測したときの注入前（ｐｒｅ）及び注入後（ｐｏｓｔ）の末梢血中のＣＭＶＳＴの頻度。結果は、投入した５×１０^５細胞あたりのスポット形成細胞（ＳＦＣ）（平均±ＳＥＭ、ｎ＝１０）として表現されている。（図１９Ｂ）インビボにおけるＣＭＶ特異的Ｔ細胞の頻度。個々の患者における注入されたＣＭＶＳＴの持続。ＣＭＶＳＴ株にしかないＨＬＡ抗原又はレシピエントとＣＭＶＳＴ株とで共有されるＨＬＡ抗原に限定されるエピトープ特異的ＣＭＶペプチドで刺激した後のＩＦＮ－γ ＥＬＩＳｐｏｔアッセイによって計測したときの末梢血中のＴ細胞の頻度。

健康ドナーからのポリクローナルマルチ－Ｒ－ＶＳＴの作製例。（図２０Ａ）マルチ－Ｒ－ＶＳＴ作製プロトコルの概略図を示している。（図２０Ｂ）トリパンブルー排除法を用いた細胞数に基づいて１０～１３日間にわたって達成された拡大倍率を示している（ｎ＝１２）。（図２０Ｃ）及び（図２０Ｄ）拡大された細胞の表現型を示している（平均値±ＳＥＭ、ｎ＝１２）。

図２１は、拡大されたＣＤ４＋Ｔ細胞集団内の制御性Ｔ細胞（Ｔｒｅｇ；ＣＤ４＋ＣＤ２５＋ＦｏｘＰ３＋）の検出が最小だったことを示している（平均値±ＳＥＭ、ｎ＝８）。

マルチ－Ｒ－ＶＳＴの特異性及び濃縮を示している。（図２２Ａ）各標的ウイルス由来の個々の刺激抗原に曝露した後の、拡大されたＴ細胞株内のウイルス反応性Ｔ細胞の特異性を示している。データは、平均値±ＳＥＭＳＦＣ／２×１０^５として表されている（ｎ＝１２）。（図２２Ｂ）特異性の濃縮倍率を表している（ＰＢＭＣ対マルチ－Ｒ－ＶＳＴ；ｎ＝１２）。（図２２Ｃ）１名の代表的なドナーにおけるウイルス刺激後のＣＤ４ヘルパーＴ細胞（上）及びＣＤ８細胞傷害性Ｔ細胞（下）からのＩＣＳによって評価したときのＩＦＮｙ産生を示すドットプロットはＣＤ３＋細胞についてゲーティングされたもの）。（図２２Ｄ）スクリーニングされた９名のドナーの要約結果を示す（平均値±ＳＥＭ）。

図２３は、個々の刺激抗原（インフルエンザ、ＲＳＶ、ｈＭＰＶ及びＰＩＶ）に応答するドナー由来ＶＳＴ株の数を示している。

図２４は、各標的ウイルス由来のプールされた刺激抗原に滴定濃度で曝露した後の拡大されたＴ細胞株内のウイルス反応性Ｔ細胞の特異性を示している。データは、平均値±ＳＥＭＳＦＣ／２×１０^５として表されている（ｎ＝７）。

図２５は、各標的ウイルス由来の個々の刺激抗原に曝露した後の健康ドナーの末梢血中のＣＡＲＶ特異的Ｔ細胞の頻度を示している。データは、平均値±ＳＥＭＳＦＣ／５×１０^５として表されている（ｎ＝１２）。

図２６は、末梢血ＣＡＲＶ特異的前駆体が主にＣＤ４＋コンパートメント内に検出されることを示している。各標的ウイルス由来の個々の刺激抗原に曝露した後の健康ドナーの末梢血から単離され、磁気ソーティングされたＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞集団内のＣＡＲＶ特異的Ｔ細胞の頻度がここに示されている。データは、平均値±ＳＥＭＳＦＣ／５×１０^５として表されている（ｎ＝４）。

マルチ－Ｒ－ＶＳＴがポリクローナルであり、多機能であることを示している。（図２７Ａ）１名の代表的なドナーにおける、ＩＣＳによって評価したときのＣＤ３＋Ｔ細胞からのＩＦＮｙとＴＮＦａとの二重産生を示す。（図２７Ｂ）スクリーニングされた９名のドナーの要約結果を示している（平均値±ＳＥＭ）。（図２７Ｃ）マルチプレックスビーズアレイによって計測したときのマルチ－Ｒ－ＶＳＴのサイトカインプロファイルを示している。（図２７Ｄ）ＥｌｌｓｐｏｔアッセイによってグランザイムＢの産生を評価している。結果は、ＳＦＣ／２×１０^５投入ＶＳＴとして報告されている（平均値±ＳＥＭ、ｎ＝９）。

マルチ－Ｒ－ＶＳＴが、ウイルスに感染した標的にもっぱら反応性であることを示している。（図２８Ａ）ペプミックスでパルスされた自己ＰＨＡ芽球を標的とし（Ｅ：Ｔ４０：１；ｎ＝８）、負荷されていないＰＨＡ芽球をコントロールとして使用して、標準的な４時間のＣｒ５１放出アッセイによって評価したマルチ－Ｒ－ＶＳＴの細胞溶解能力が図示されている。結果は、特異的溶解のパーセンテージとして表されている（平均値±ＳＥＭ）。（図２８Ｂ）Ｃｒ^５１放出アッセイによって評価したとき、マルチ－Ｒ－ＶＳＴが、感染していない自己ＰＨＡ芽球又は同種異系ＰＨＡ芽球に対して活性を示さないことを実証している。

図２９は、ペプミックスでパルスされた自己ＰＨＡ芽球を標的とし（Ｅ：Ｔ４０：１、２０：１、１０：１、５：１）、負荷されていないＰＨＡ芽球をコントロールとして使用して、標準的な４時間のＣｒ^５１放出アッセイによって評価したマルチ－Ｒ－ＶＳＴの細胞傷害活性を示している。結果は、特異的溶解のパーセンテージとして表されている（平均値±ＳＥＭ、ｎ＝８）。

ＨＳＣＴレシピエントの末梢血中のＲＳＶ特異的Ｔ細胞及びｈＭＰＶ特異的Ｔ細胞の検出を示している。３つの感染症に関する２名のＨＳＣＴレシピエントから単離されたＰＢＭＣを、読出しとしてＩＦＮｙＥｌｌｓｐｏｔを用いて感染ウイルスに対する特異性について試験した。（図３０Ａ）制御されたＲＳＶ関連ＵＲＴＩを有する２名の患者の結果を示しており、その制御は、内在性のＲＳＶ特異的Ｔ細胞の検出可能な増加と同時に起きていた。ＡＬＣ：絶対リンパ球数。（図３０Ｂ）制御されたＲＳＶ関連ＵＲＴＩを有する２名の患者の結果を示しており、その制御は、内在性のＲＳＶ特異的Ｔ細胞の検出可能な増加と同時に起きていた。一方（図３０Ｃ）は、ｈＭＰＶ－ＬＲＴＩのクリアランス及び内在性のｈＭＰＶ特異的Ｔ細胞の拡大を示している。ＡＬＣ：絶対リンパ球数。

ＨＳＣＴレシピエントの末梢血中のＲＳＶ特異的Ｔ細胞及びＰＩＶ（ここではＰＩＶ－３とも呼ばれる）特異的Ｔ細胞の検出を示している。３つの感染症に関する３名のＨＳＣＴレシピエントから単離されたＰＢＭＣを、読出しとしてＩＦＮｙＥｌｌｓｐｏｔを用いて感染ウイルスに対する特異性について試験した。（図３１Ａ及び図３１Ｂ）制御されたＲＳＶ関連及びＰＩＶ３関連のＵＲＴＩ及びＬＲＴＩを有する２名の患者の結果を示しており、その制御は、内在性のウイルス特異的Ｔ細胞の検出可能な増加と同時に起きていた。（図３１Ｃ）ウイルスに対してＴ細胞応答を開始しなかった、進行中のＰＩＶ３関連の重症ＵＲＴＩを有する患者の結果を示している。ＡＬＣ：絶対リンパ球数。

図３２は、５４名の見込み患者を用いたＰＯＣ研究において、臨床で使用するためのシミュレーションで特定されたＶｉｒａｌｙｍ－Ｍ株のＨＬＡ適合を示している。

図３３は、Ｂａｙｌｏｒ’ｓＣｅｎｔｅｒｆｏｒＣｅｌｌａｎｄＧｅｎｅＴｈｅｒａｐｙにおいて＞６５０名の同種異系ＨＳＣＴ患者集団全体を処置する際の、臨床で使用するためのシミュレーションで特定されたＶｉｒａｌｙｍ－Ｍ株のＨＬＡ適合を示している。

図３４は、ＨＬＡ不適合の標的に対する細胞傷害活性を計測することによって評価したとき、マルチウイルス特異的Ｔ細胞（Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ細胞）の同種反応性が無かったことを示している。

図３５は、奏効とＨＬＡの適合度との関係を示している。ＣＲ：完全奏効；ＰＲ：部分奏効；ＮＲ：非応答者。

図３６は、臨床試験の患者集団全体にわたる、ＨＬＡ－クラスＩ、ＩＩ、又はクラスＩとクラスＩＩの両方におけるＨＬＡ適合の程度を示している。

図３７は、ＨＬＡ適合アレル（ＨＬＡ－クラスＩ、ＩＩ、又はクラスＩとクラスＩＩの両方）に基づく１２週目の奏効を示している。

ＢＫ－ＨＣを有し、それらの疾患に対して標準的なケア処置のみを受けた自然史研究（ＮａｔｕｒａｌＨｉｓｔｏｒｙｓｔｕｄｙ）における３３名の小児同種異系ＨＳＣＴ患者（自然史患者）と比較して、ＶＳＴを受けて２、４、及び６週間後にＢＫ－ＨＣが解消した患者の割合を示す図である。

低レベルＨＬＡ一致設定（ＨＬＡ１－２／６）又はより高いレベルのＨＬＡ一致設定（ＨＬＡ３－４／６）のいずれかでＶＳＴを受けた患者における経時的な平均膀胱炎グレードを示す。

個別ドナー細胞株の製造、バンキング、及び使用の従来のプロセスと、ユニバーサルドナー細胞株を作製及び使用するための新しいプロセスとを比較する概略図である。

ドナーＰＨＡに対するＵＶＳＴの自己反応性及び非血縁ドナー由来のＰＨＡ芽球に対する同種反応性の割合を示す図である。

本発明の詳細を下記の添付の説明に示す。本明細書中に記載される方法及び材料と類似又は等価な方法及び材料を本発明の実施又は試験において使用することができるが、ここでは例証的な方法及び材料を説明する。本発明の他の特徴、目的及び利点は、この説明及び請求項から明らかになるだろう。明細書及び添付の請求項では、文脈が明らかに他のことを指示しない限り、単数形は、複数形も含む。別段定義されない限り、本明細書中で使用されるすべての専門用語及び科学用語は、本発明が属する分野の当業者が通常理解している意味と同じ意味を有する。本明細書において引用されるすべての特許及び刊行物は、その全体が参照により本明細書中に援用される。

（一般的な方法）
本発明の実施は、別段示されない限り、当該分野の技術範囲内である、細胞培養、分子生物学（組換え手法を含む）、微生物学、細胞生物学、生化学及び免疫学の従来の手法を用いる。そのような手法は、ＭｏｌｅｃｕｌａｒＣｌｏｎｉｎｇ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ，ｔｈｉｒｄｅｄｉｔｉｏｎ（Ｓａｍｂｒｏｏｋｅｔａｌ．，２００１）ＣｏｌｄＳｐｒｉｎｇＨａｒｂｏｒＰｒｅｓｓ；ＯｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅＳｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｐ．Ｈｅｒｄｅｗｉｊｎ，ｅｄ．，２００４）；ＡｎｉｍａｌＣｅｌｌＣｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ），ｅｄ．，１９８７）；ＭｅｔｈｏｄｓｉｎＥｎｚｙｍｏｌｏｇｙ（ＡｃａｄｅｍｉｃＰｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）；ＨａｎｄｂｏｏｋｏｆＥｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｄ．Ｍ．Ｗｅｉｒ＆Ｃ．Ｃ．Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ，ｅｄｓ．）；ＧｅｎｅＴｒａｎｓｆｅｒＶｅｃｔｏｒｓｆｏｒＭａｍｍａｌｉａｎＣｅｌｌｓ（Ｊ．Ｍ．Ｍｉｌｌｅｒ＆Ｍ．Ｐ．Ｃａｌｏｓ，ｅｄｓ．，１９８７）；ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ（Ｆ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌｅｔａｌ．，ｅｄｓ．，１９８７）；ＰＣＲ：ＴｈｅＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，（Ｍｕｌｌｉｓｅｔａｌ．，ｅｄｓ．，１９９４）；ＣｕｒｒｅｎｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｊ．Ｅ．Ｃｏｌｉｇａｎｅｔａｌ．，ｅｄｓ．，１９９１）；ＳｈｏｒｔＰｒｏｔｏｃｏｌｓｉｎＭｏｌｅｃｕｌａｒＢｉｏｌｏｇｙ（ＷｉｌｅｙａｎｄＳｏｎｓ，１９９９）；ＭａｎｕａｌｏｆＣｌｉｎｉｃａｌＬａｂｏｒａｔｏｒｙＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｂ．Ｄｅｔｒｉｃｋ，Ｎ．Ｒ．Ｒｏｓｅ，ａｎｄＪ．Ｄ．Ｆｏｌｄｓｅｄｓ．，２００６）；ＩｍｍｕｎｏｃｈｅｍｉｃａｌＰｒｏｔｏｃｏｌｓ（Ｊ．Ｐｏｕｎｄ，ｅｄ．，２００３）；ＬａｂＭａｎｕａｌｉｎＢｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ：ＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙａｎｄＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ（Ａ．ＮｉｇａｍａｎｄＡ．Ａｙｙａｇａｒｉ，ｅｄｓ．２００７）；ＩｍｍｕｎｏｌｏｇｙＭｅｔｈｏｄｓＭａｎｕａｌ：ＴｈｅＣｏｍｐｒｅｈｅｎｓｉｖｅＳｏｕｒｃｅｂｏｏｋｏｆＴｅｃｈｎｉｑｕｅｓ（ＩｖａｎＬｅｆｋｏｖｉｔｓ，ｅｄ．，１９９６）；ＵｓｉｎｇＡｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ＡＬａｂｏｒａｔｏｒｙＭａｎｕａｌ（Ｅ．ＨａｒｌｏｗａｎｄＤ．Ｌａｎｅ，ｅｄｓ．，１９８８）などの文献において十分に説明されている。

（定義）
別段定義されない限り、本明細書中で使用されるすべての専門用語及び科学用語は、本発明が属する分野の当業者が通常理解している意味と同じ意味を有する。本明細書中に記載される方法及び材料と類似又は等価な方法及び材料を本発明の実施又は試験において使用することができるが、好ましい方法及び材料を説明する。本発明のために、以下の用語を下記で定義する。

本明細書中で使用されるとき、語「ａ」又は「ａｎ」の使用は、請求項及び／又は明細書において用語「～を含む」とともに使用されるとき、「１つ」を意味し得るが、「１つ以上」、「少なくとも１つ」及び「１つ又は１つより多い」の意味とも一致する。例としては、「エレメント（ａｎｅｌｅｍｅｎｔ）」は、１つのエレメント又は１つより多いエレメントを意味する。本発明のいくつかの実施形態は、本発明の１つ以上のエレメント、方法工程及び／又は方法からなり得るか又は本質的になり得る。本明細書中に記載される任意の方法又は組成物が、本明細書中に記載される他の任意の方法又は組成物に関して実行され得ることが企図される。

ある数値の直前の用語「約」は、その数値の±０％～１０％、±０％～１０％、±０％～９％、±０％～８％、±０％～７％、±０％～６％、±０％～５％、±０％～４％、±０％～３％、±０％～２％、±０％～１％、±０％～１％未満、又はこれらの中の他の任意の値若しくは値の範囲を意味する。例えば、「約４０」は、４０の±０％～１０％（すなわち、３６～４４）を意味する。

用語「及び／又は」は、別段示されない限り、「及び」又は「又は」のいずれかを意味するために本開示において使用される。

本明細書全体にわたって、文脈が他のことを要求しない限り、語「～を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅ）」、「～を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」及び「～を含む（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」は、記載の工程若しくはエレメント又は工程群若しくはエレメント群を包含するが、他の任意の工程若しくはエレメント又は工程群若しくはエレメント群を排除しないことを暗に示すと理解される。「～からなる」は、句「～からなる」の前に何が置かれたとしても、「～を含み、それらに限定される」ことを意味する。したがって、句「～からなる」は、列挙されたエレメントが、不可欠又は必須であること、及び他のエレメントが存在しない可能性があることを示す。「～から本質的になる」は、この句の前に列挙される任意のエレメント、及び列挙されたエレメントについて本開示に明示される活性又は作用を干渉しない又はそれらに寄与しない他のエレメントに限定されるエレメントを含むことを意味する。したがって、句「～から本質的になる」は、列挙されたエレメントが、不可欠又は必須であるが、他のエレメントは自由選択であり、それらが列挙されたエレメントの活性又は作用に実質的に影響するか否かに応じて、存在してもよいか、又は存在してはならないことを示す。

用語「障害」は、疾患、状態又は疾病を意味するために本開示において使用され、別段示されない限り、それらの用語と交換可能に使用される。

「有効量」は、治療薬（例えば、本明細書中に開示される抗原特異的Ｔ細胞製品又は抗原特異的Ｔ細胞株）に関連して使用されるとき、本明細書中に記載されるような被験体における疾患又は障害を処置又は予防するために有効な量である。

用語「例えば（ｅ．ｇ．）」は、「例えば（ｆｏｒｅｘａｍｐｌｅ）」を意味するために本明細書中で使用され、記載の工程若しくはエレメント又は工程群若しくはエレメント群を包含するが、他の任意の工程若しくはエレメント又は工程群若しくはエレメント群を排除しないことを暗に示すと理解される。

「自由選択の」又は「必要に応じて」は、その後に記載される事象又は状況が起きるかもしれないし、起きないかもしれないこと、及びその説明にはその事象又は状況が起きる場合及び起きない場合が含まれることを意味する。

本明細書中で使用される用語「腫瘍関連抗原」とは、腫瘍細胞上で産生／発現され、かつ宿主において免疫応答を引き起こす、抗原性物質のことを指す。

例示的な腫瘍抗原としては、少なくとも以下が挙げられる：腸癌の場合の癌胎児抗原（ＣＥＡ）；卵巣癌の場合のＣＡ－１２５；乳癌の場合のＭＵＣ－１又は上皮性腫瘍抗原（ＥＴＡ）又はＣＡ１５－３；悪性黒色腫の場合のチロシナーゼ又はメラノーマ関連抗原（ＭＡＧＥ）；及び種々のタイプの腫瘍の場合の、ｒａｓの異常産物であるｐ５３；ヘパトーマ、卵巣癌又は精巣癌の場合のアルファフェトプロテイン；精巣癌を有する男性の場合の、ｈＣＧのベータサブユニット；前立腺癌の場合の前立腺特異抗原；複数のミエローマ及び一部のリンパ腫の場合のベータ２ミクログロブリン；直腸結腸癌、胆管癌及び膵癌の場合のＣＡ１９－９；肺癌及び前立腺癌の場合のクロモグラニンＡ；メラノーマ、軟部組織肉腫並びに乳癌、結腸癌及び肺癌の場合のＴＡ９０。腫瘍抗原の例は、当該分野で、例えばＣｈｅｅｖｅｒｅｔａｌ．，２００９（その全体が参照により本明細書中に援用される）において、公知である。

腫瘍抗原の具体例としては、例えば少なくともＣＥＡ、ＭＨＣ、ＣＴＬＡ－４、ｇｐ１００、メソテリン、ＰＤ－Ｌ１、ＴＲＰ１、ＣＤ４０、ＥＧＦＰ、Ｈｅｒ２、ＴＣＲアルファ、ｔｒｐ２、ＴＣＲ、ＭＵＣ１、ｃｄｒ２、ｒａｓ、４－１ＢＢ、ＣＴ２６、ＧＩＴＲ、ＯＸ４０、ＴＧＦ－α．ＷＴ１、ＭＵＣ１、ＬＭＰ２、ＨＰＶＥ６Ｅ７、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＨＥＲ－２／ｎｅｕ、ＭＡＧＥＡ３、ｐ５３非変異体、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＳＭＡ、ＧＤ２、ＭｅｌａｎＡ／ＭＡＲＴ１、Ｒａｓ変異体、ｇｐ１００、ｐ５３変異体、プロテイナーゼ３（ＰＲ１）、ｂｃｒ－ａｂｌ、チロシナーゼ、サバイビン、ＰＳＡ、ｈＴＥＲＴ、ＥｐｈＡ２、ＰＡＰ、ＭＬ－ＩＡＰ、ＡＦＰ、ＥｐＣＡＭ、ＥＲＧ（ＴＭＰＲＳＳ２ＥＴＳ融合遺伝子）、ＮＡ１７、ＰＡＸ３、ＡＬＫ、アンドロゲンレセプター、サイクリンＢ１、ポリシアル酸、ＭＹＣＮ、ＲｈｏＣ、ＴＲＰ－２、ＧＤ３、フコシルＧＭ１、メソテリン、ＰＳＣＡ、ＭＡＧＥＡ１、ｓＬｅ（ａ）、ＣＹＰ１Ｂ１、ＰＬＡＣ１、ＧＭ３、ＢＯＲＩＳ、Ｔｎ、ＧｌｏｂｏＨ、ＥＴＶ６－ＡＭＬ、ＮＹ－ＢＲ－１、ＲＧＳ５、ＳＡＲＴ３、ＳＴｎ、炭酸脱水酵素ＩＸ、ＰＡＸ５、ＯＹ－ＴＥＳ１、精子タンパク質１７、ＬＣＫ、ＨＭＷＭＡＡ、ＡＫＡＰ－４、ＳＳＸ２、ＸＡＧＥ１、Ｂ７Ｈ３、レグマイン（Ｌｅｇｕｍａｉｎ）、Ｔｉｅ２、Ｐａｇｅ４、ＶＥＧＦＲ２、ＭＡＤ－ＣＴ－１、ＦＡＰ、ＰＤＧＦＲ－β、ＭＡＤ－ＣＴ－２及びＦｏｓ関連抗原１が挙げられる。

用語「ウイルス抗原」は、本明細書中で使用されるとき、天然におけるタンパク質である抗原のことを指し、ウイルス粒子と密接に関連する。具体的な実施形態において、ウイルス抗原は、コートタンパク質である。

ウイルス抗原の具体例としては、ＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫ、ＪＣウイルス、ＨＨＶ６、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ、ボカウイルス、コロナウイルス、ＬＣＭＶ、ムンプス、麻疹、ヒトメタニューモウイルス、パルボウイルスＢ、ロタウイルス、メルケル細胞ウイルス、単純ヘルペスウイルス、ＨＰＶ、ＨＢＶ、ＨＩＶ、ＨＴＬＶ１、ＨＨＶ８及び西ナイルウイルス、ジカウイルス、エボラから選択されるウイルスが少なくとも挙げられる。

用語「ウイルス特異的Ｔ細胞」又は「ＶＳＴ」又は「ウイルス特異的Ｔ細胞株」又は「ＶＳＴ細胞株」は、被験体の外で拡大及び／又は製造された、かつ目的のウイルスに対して特異性及び効力を有する、Ｔ細胞株、例えば、本明細書中に記載されるようなＴ細胞株のことを指すために本明細書中で交換可能に使用される。ＶＳＴは、いくつかの実施形態において、モノクローナル又はオリゴクローナルであり得る。特定の実施形態において、ＶＳＴは、ポリクローナルである。本明細書中に記載されるとき、いくつかの実施形態では、あるウイルス抗原又はいくつかのウイルス抗原が、末梢血単核球中の天然のＴ細胞又はメモリーＴ細胞に対して提示され、それに応答して、それらのウイルス抗原に対して特異性を有する天然のＣＤ４＋及び／又はＣＤ８＋Ｔ細胞集団が拡大する。例えば、好適なドナーから得られたＰＢＭＣのサンプル中のＥＢＶに対するウイルス特異的Ｔ細胞は、ＥＢＶ抗原（例えば、必要に応じてＭＨＣによって提示される、ＥＢＶ抗原由来のペプチドエピトープ）を認識（に結合）でき、これは、ＥＢＶに特異的なＴ細胞の拡大を引き起こし得る。別の例では、好適なドナーから得られたＰＢＭＣのサンプル中のＢＫウイルスに対するウイルス特異的Ｔ細胞、ＰＢＭＣのサンプル中のアデノウイルスに対するウイルス特異的Ｔ細胞は、それぞれ、ＢＫウイルス抗原及びアデノウイルス抗原（例えば、必要に応じてＭＨＣによって提示される、それぞれ、ＢＫウイルス抗原及びアデノウイルス抗原由来のペプチドエピトープ）を認識し、それらに結合でき、これは、ＢＫウイルスに特異的なＴ細胞及びアデノウイルスに特異的なＴ細胞の拡大を引き起こし得る。

本明細書中で使用されるとき、用語「細胞療法製品」とは、被験体の外で拡大及び／又は製造された細胞株、例えば、本明細書中に記載されるような細胞株のことを指す。例えば、用語「細胞療法製品」は、培養において作製された細胞株を包含する。その細胞株は、エフェクター細胞を含み得るか、又はエフェクター細胞から本質的になり得る。その細胞株は、ＮＫ細胞を含み得るか、又はＮＫ細胞から本質的になり得る。その細胞株は、Ｔ細胞を含み得るか、又はＴ細胞から本質的になり得る。例えば、用語「細胞療法製品」は、培養において作製された抗原特異的Ｔ細胞株を包含する。そのような抗原特異的Ｔ細胞株には、場合によっては、メモリーＴ細胞の拡大集団、ナイーブＴ細胞を刺激することによって作製されたＴ細胞の拡大集団、及び操作されたＴ細胞（例えば、キメラＴ細胞レセプター又は組換えＴ細胞レセプター、共刺激レセプターなどのような外来性タンパク質を発現するＣＡＲ－Ｔ細胞及びＴ細胞）の拡大集団が含まれる。特に、用語「細胞療法製品」は、いくつかの実施形態において、ウイルス特異的Ｔ細胞株又は腫瘍特異的Ｔ細胞株（例えば、ＴＡＡ特異的Ｔ細胞株）を含む。その細胞株は、モノクローナル又はオリゴクローナルであり得る。特定の実施形態において、その細胞株は、ポリクローナルである。そのようなポリクローナル細胞株は、いくつかの実施形態において、多様な抗原特異性を有する細胞（例えば、抗原特異的Ｔ細胞）の複数の拡大集団を含む。例えば、用語「細胞療法製品」に包含される細胞株の非限定的な１つの例としては、Ｔ細胞の複数の拡大クローン集団（それらの少なくとも２つが、異なるウイルス抗原に対して特異性を有する）を含むウイルス特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団が挙げられる。ポリクローナルウイルス特異的Ｔ細胞を含む、本開示の組成物及び方法における使用に適したそのような抗原特異的Ｔ細胞は、ＷＯ２０１１０２８５３１、ＷＯ２０１３１１９９４７、ＷＯ２０１７０４９２９１、ＷＯ２０１３／００８１４７、ＰＣＴ／ＵＳ２０２０／０４６３８９、及びＰＣＴ／ＵＳ２０２０／０２４７２６に開示された任意の方法を少なくとも含む、当技術分野で公知の任意の方法に従って作製することができ、その各々は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

本明細書で使用される「ドナーミニバンク」という用語は、ドナーミニバンク内の細胞療法製品は、集合的に、標的患者集団において、定義された割合の患者（例えば、＞７０％、＞７５％、＞８０％、＞８５％、＞９０％、又は＞９５％）を提供するように、異なるドナーに由来する複数の細胞療法製品（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）を意味する。

本明細書中で使用される用語「ドナーミニバンク」は、そのドナーミニバンクが、標的患者集団内の規定のパーセンテージの患者に対して十分に適合する少なくとも１つの細胞療法製品（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）を含むように、多様なドナープールから集合的に得られる複数の細胞療法製品（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）を含む細胞バンクのことを指す。例えば、ある特定の実施形態において、本明細書中に記載されるドナーミニバンクは、標的患者集団（例えば、同種異系の造血幹細胞移植レシピエント又は免疫無防備状態の被験体）の少なくとも９５％に対して少なくとも１つの十分に適合する細胞療法製品（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）を含む。本明細書中で使用される用語「ドナーバンク」は、複数のドナーミニバンクのことを指す。様々な実施形態では、「ドナーバンク」に含めるためのいくつかの冗長でないミニバンクを作製して、確実に１名の見込み患者が２つ以上の十分に適合する細胞療法製品を利用できるようにすることが有益である。細胞バンクは、凍結保存され得る。凍結保存の方法は、当該分野で公知であり、例えば、－７０℃での、例えば、アクセスが規制されている領域における気相の液体窒素中での、細胞療法製品（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）の貯蔵が挙げられ得る。細胞療法製品の別個のアリコートが、複数の有効な液体窒素デュアーの中の容器（例えば、バイアル）において調製され、保存され得る。容器（例えば、バイアル）は、検索を可能にするユニークな識別番号でラベルされ得る。

本明細書中で使用されるとき、用語「患者」又は「被験体」は、ヒト、飼育動物及び家畜並びに動物園の動物、競技用動物及びペット動物（例えば、イヌ、ウマ、ネコ、ウシ、ヒツジ、ブタ、ヤギ、ラット、モルモット又は非ヒト霊長類（例えば、サル、チンパンジー、ヒヒ又はアカゲザル））をはじめとした任意の哺乳動物のことを指すために交換可能に使用される。１つの好ましい哺乳動物は、成人、小児及び高齢者を含むヒトである。

本明細書中で使用されるとき、用語「ドナー候補」とは、本明細書中に開示される細胞療法製品（例えば、抗原特異的Ｔ細胞）によって標的とされる抗原に対して血清陽性である個体（例えば、健康個体）のことを指す。いくつかの実施形態において、ドナープールに含めるのに適格であるすべてのドナー候補が、標的抗原についてプレスクリーニングされ、かつ／又は標的抗原に対して血清陽性とみなされる。

用語「標的患者集団」は、いくつかの実施形態において、本明細書中に記載される細胞療法製品（例えば、抗原特異的Ｔ細胞製品）を必要とする複数の患者（又は交換可能に「被験体」）を説明するために使用される。いくつかの実施形態において、この用語は、全世界の同種異系ＨＳＣＴ集団を包含する。いくつかの実施形態において、この用語は、全米の同種異系ＨＳＣＴ集団を包含する。いくつかの実施形態において、この用語は、ワールドワイドウェブアドレスｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ．ｂｅｔｈｅｍａｔｃｈｃｌｉｎｉｃａｌ．ｏｒｇにおいて利用可能なＮａｔｉｏｎａｌＭａｒｒｏｗＤｏｎｏｒ
Ｐｒｏｇｒａｍ（ＮＭＤＰ）データベースに含まれるすべての患者を包含する。いくつかの実施形態において、この用語は、ワールドワイドウェブアドレス：ｅｂｍｔ．ｏｒｇ／ｅｂｍｔ－ｐａｔｉｅｎｔ－ｒｅｇｉｓｔｒｙにおいて利用可能なＥｕｒｏｐｅａｎＳｏｃｉｅｔｙｆｏｒＢｌｏｏｄａｎｄＭａｒｒｏｗＴｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ（ＥＢＭＴ）データベースに含まれるすべての患者を包含する。いくつかの実施形態において、この用語は、全世界の１６歳以下の小児の同種異系ＨＳＣＴ集団を包含する。いくつかの実施形態において、この用語は、全米の１６歳以下の小児の同種異系ＨＳＣＴ集団を包含する。いくつかの実施形態において、この用語は、全世界の５歳以下の小児の同種異系ＨＳＣＴ集団を包含する。いくつかの実施形態において、この用語は、全米の５歳以下の小児の同種異系ＨＳＣＴ集団を包含する。いくつかの実施形態において、この用語は、全世界の６５歳以上の個体の同種異系ＨＳＣＴ集団を包含する。いくつかの実施形態において、この用語は、全米の６５歳以上の個体の同種異系ＨＳＣＴ集団を包含する。

本明細書中で使用される用語「処置する（ｔｒｅａｔ）」、「処置する（ｔｒｅａｔｉｎｇ）」、「処置」などは、別段示されない限り、そのような用語が適用される疾患、障害若しくは状態のプロセス又はそのような疾患、障害若しくは状態の１つ以上の症状を逆転させる、軽減する、阻害する、あるいはその疾患、障害若しくは状態又はそのような疾患、障害若しくは状態の１つ以上の症状を予防することを指し、その症状若しくは合併症の発生を予防するための本明細書中に記載される組成物、薬学的組成物若しくは剤形のいずれかを投与すること、又はその症状若しくは合併症を軽減すること、又はその疾患、状態若しくは障害を無くすことを含む。場合によっては、処置は、治癒的又は回復的である。

いくつかの実施形態における用語「第三者」への本明細書中での言及は、ドナーと同じではない被験体（例えば、患者）を意味する。したがって、例えば、「第三者の抗原特異的Ｔ細胞製品」（例えば、第三者のＶＳＴ製品）で被験体を処置するという言及は、その製品がドナー組織（例えば、ドナーの血液から単離されたＰＢＭＣ）に由来すること、及び被験体（例えば、患者）がドナーと同じ被験体ではないことを意味する。様々な実施形態において、同種異系細胞治療（例えば、同種異系抗原特異的Ｔ細胞治療）は、「第三者」細胞治療である。

被験体に関する用語「予防する（ｐｒｅｖｅｎｔ）」又は「予防する（ｐｒｅｖｅｎｔｉｎｇ）」とは、疾患又は障害が被験体を苦しめないようにすることを指す。予防には、予防的処置が含まれる。例えば、予防は、ある被験体が疾患に苦しむ前に本明細書中に開示される化合物をその被験体に投与することを含み得、その投与は、被験体がその疾患に苦しめられないようにする。例えば、予防は、同種異系Ｔ細胞療法設定において、本明細書に提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品の予防的投与を介して、ウイルス感染又は潜伏ウイルスの再活性化を予防又は制御するための方法を含む。

本明細書中で使用される用語「投与する（ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｉｎｇ）」、「投与する（ａｄｍｉｎｉｓｔｅｒ）」、「投与」などは、治療薬による処置を必要とする被験体にそのような作用物質を移す、送達する、導入する又は輸送する任意の様式のことを指す。そのような様式としては、眼内投与、経口投与、局所投与、静脈内投与、腹腔内投与、筋肉内投与、皮内投与、鼻腔内投与及び皮下投与が挙げられるが、これらに限定されない。

「ＵＶＳＴ」という語は、本明細書で提供されるユニバーサルＶＳＴを指す。

用語「ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物」、「ユニバーサル細胞療法製品」、「ユニバーサル抗原特異的細胞療法製品」などは、本明細書で互換的に使用され、本明細書に記載されるような抗原特異的Ｔ細胞の集団を含む２つ以上の抗原特異的Ｔ細胞株を含む細胞療法組成物を指し、前記抗原特異的Ｔ細胞株は少なくとも２つの別々のドナーに由来するドナー材料（例えば、ＭＮＣ又はＰＢＭＣ）に由来する。ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品及び／又は複数の抗原特異的Ｔ細胞株は、製品を構成する各抗原特異的Ｔ細胞株（すなわち、２つ以上の抗原特異的Ｔ細胞株）を含む組成物の形態であってもよく、又は単一の投与セッションでの投与のための個別抗原特異的Ｔ細胞株の複数の組成物の形態であってもよい。実施形態において、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品は、適切なドナー集団から生成された複数の個別抗原特異的Ｔ細胞株を含む。適切なドナー集団は、複数の異なるドナーを含んでもよく、ここで、各ドナーのＨＬＡ型は本明細書にさらに記載されるように、少なくとも１つのＨＬＡアレルにおいて少なくとも１つの他のドナーとは異なる。いくつかの実施形態では、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品（例えば、ＵＶＳＴ）は、本明細書に記載のドナーミニバンク又は本明細書に記載のドナーバンクに存在する複数の細胞株を含む。特定の実施形態では、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品（例えば、ＵＶＳＴ）は、本明細書に記載のドナーミニバンク又は本明細書に記載のドナーバンクに存在する細胞株の一部又は全部を含む。

様々な実施形態において、用語「十分に一致した」は、本明細書において、所定の患者及び所定の細胞療法製品（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）に関して使用され、患者及び細胞療法製品が予め設定された閾値数のＨＬＡアレルを共有する（すなわち、一致する）場合を記述する。例えば、実施形態において、細胞療法製品は、患者及び細胞療法製品が少なくとも２つのＨＬＡアレル上で一致する場合、患者と十分に一致する。

本発明の他の目的、特徴及び利点は、以下の詳細な説明から明らかになるだろう。しかしながら、この詳細な説明から当業者には本発明の趣旨及び範囲内での様々な変更及び改変が明らかになるので、その詳細な説明及び具体例は、本開示の具体的な実施形態を示すが、単に例証として与えられることを理解するべきである。

以下の議論は、本発明の様々な実施形態を対象にしている。用語「発明」は、任意の特定の実施形態のことを指すと意図されていないし、本開示の範囲を限定すると意図されていない。これらの実施形態のうちの１つ以上が好ましい場合もあるが、開示された実施形態は、請求項を含む本開示の範囲を限定するものとして解釈又は使用されるべきでない。さらに、当業者であれば、以下の説明が広範な適用を有し、任意の実施形態の議論が、その実施形態を例示することだけを意味し、請求項を含む本開示の範囲がその実施形態に限定されることを暗示すると意図されていないことを理解するだろう。

（概要）
本開示は、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物及び製品（例えば、ユニバーサルＶＳＴ組成物及びユニバーサルＶＳＴ製品）、並びにそれらの作製及び使用のための方法を提供する。ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物及び製品は、複数の異なるドナーに由来する抗原特異的Ｔ細胞の集団を含む。複数の異なるドナーにおいて、各ドナーのＨＬＡ型は、少なくとも１つのＨＬＡアレルにおいて少なくとも１名の他のドナーとは異なる。一態様では、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物及び製品が、組成物及び製品が患者集団全体にわたって高度の一致を達成するように、ＨＬＡアレルの多様性を有する十分な多様性のドナー由来のＴ細胞を含む。様々な実施形態では、複数の異なるドナーがＨＬＡアレルの十分な多様性（互いに対して）を有し、その結果、組成物及び製品が少なくとも１つのＨＬＡアレルにおいて患者集団全体にわたる患者の大部分（例えば、所与の患者集団の９５％以上）と一致し、例えば、特定の態様ではそのような組成物及び製品が少なくとも２つのＨＬＡアレルにおいて患者集団全体にわたる患者の９５％以上と一致する。したがって、態様において、複数の異なるＨＬＡアレルがユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物において表れ、その結果、組成物及び製品がＨＬＡタイピングを必要とせずに、レシピエントに普遍的に投与され得る。これは、十分に一致した患者にのみ投与され、したがって、患者の事前のＨＬＡタイピングを必要とする、従来の抗原特異的Ｔ細胞組成物及び製品とは対照的である。

態様において、本開示は、いくつかの驚くべき臨床的及び前臨床的観察に基づく。第１に、部分的に一致したＶＳＴ組成物は患者において有効であり、場合によっては、１つの一致したアレルしかないほど低い製品で患者を処置した場合でさえ、完全又は部分的応答が観察された（図３５）。したがって、これらの予備データは、低適合製品が治療上の利益を提供することを支持する。第２に、異なるＨＬＡ型を有するドナーから作製された２つ以上のＶＳＴ細胞株を所定の患者に投与すると、処置の６週間以内に急性移植片対宿主病（ａＧＶＨＤ）又は処置後１年以内に慢性ＧＶＨＤ（ｃＧＶＨＤ）を伴わず、又はほとんど伴わずに処置応答をもたらす（表７）（表８）。したがって、これらの予備データは、多様なＨＬＡプロファイルを有する複数のＶＳＴ細胞製品による処置が安全であり、製品の治療可能性を低下させない可能性があることを裏付けている。第３に、本明細書に提示されるインビトロデータは、個々のＶＳＴ細胞株がユニバーサルＶＳＴ細胞製品へのプール後にも効力を維持し（表１１及び１３）、自己反応性又は同種反応性を有しないことを実証している（図４０～４１）。したがって、これらのデータをまとめると、本明細書に開示されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物及び製品は、他のＴ細胞製品よりも非常に有利であることが裏付けられる；例えば、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物又は製品はＨＬＡ型を患者に投与する必要なしに（但し、事前のＨＬＡ型決定の採用は排除しない）、かつ患者に投与するためのＨＬＡ適合抗原特異的Ｔ細胞株を選択及び／又は生成する必要なしに、又は患者に投与するための自己抗原特異的Ｔ細胞株を生成する必要なしに、それを必要とする患者に投与され得る。したがって、本明細書に提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物及び製品、並びにその使用方法は、任意の患者に投与することができる既製の製品で患者を迅速に処置することを可能にする。これはパンデミック状況（ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２パンデミックなど）における既製のウイルス特異的Ｔ細胞によるウイルス感染の治療に特に有利であり得、１日以上療法へのアクセスを遅らせる可能性があるＨＬＡタイピングを待たずに患者に迅速に療法を施し得る。したがって、実施形態では、本明細書で提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物及び製品は、Ｔ細胞のより速い応答速度、疾患改善に関して優れた速度及び有効性、並びに／又は治療利益の改善された持続性を含めて、従来の抗原特異的Ｔ細胞組成物と比較して優れた効果を提供し得る。

実施形態において、本明細書で提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物及び製品は、従来のＨＬＡマッチングを用いることによって得られるカバー率と比較して、特定の患者についてＨＬＡアレルのカバー率がより良好なものを提供するという点で、他のＴ細胞製品よりも優れていてもよい。例えば、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品は、レシピエントと少なくとも部分的に適合するか又は十分に適合する複数のドナー由来の複数の抗原特異的Ｔ細胞株（例えば、ＶＳＴ細胞株）を含んでもよく、従来の治療パラダイムでは、これらの十分に一致するＴ細胞株のうちの１つのみが患者に投与され、効果的な処置を行うことができたであろう。しかしながら、本明細書で提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物及び製品では、製品は利用可能な最もよく適合した抗原特異的Ｔ細胞製品を含むだけでなく、レシピエントにあまり最適に適合しない可能性があるが、それにもかかわらず、本明細書で提供される本発明者らの結果に基づいて治療的に活性である可能性が高い複数の異なるドナーからの１つ以上のさらなるＴ細胞株も含むことになるであろう。すなわち、本明細書で提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物は、患者と部分的にＨＬＡが一致する組成物のうちの２つ以上の製品を含有する可能性が高く、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物内の異なる部分的ＨＬＡ一致製品は、異なるアレルで患者と一致し得る。したがって、本明細書に開示されるユニバーサルな抗原特異的Ｔ細胞組成物及び製品は、単一のＴ細胞製品よりも広い抗原特異的活性を提供する可能性が高い。したがって、推測によって限定されるものではないが、相加的又は相乗的な応答が観察され得る。さらに、実施形態において、本明細書で提供される組成物及び方法は、細胞製品のレシピエントのＨＬＡタイピングを必要とせずに、この優れたカバー率が達成されるという点で有利である。実施形態では、本明細書で提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品は、すべてのアレル上のレシピエントと適合される。

実施形態において、本明細書で提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物が単一の組成物に一緒にプールされた複数のドナー由来の抗原特異的Ｔ細胞株を含む。実施形態において、患者は、プールされた組成物を投与される。実施形態において、本明細書で提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物は、個々のドナー由来の個々の抗原特異的Ｔ細胞株を含み、組成物は単回の投与セッションで患者に投与される。したがって、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物は、投与前に個々の細胞株を混合したプール製品として投与してもよい。実施形態において、細胞株は、組成物を凍結する前に一緒にプールされてもよく、ここで、プールされた組成物は患者への投与の前に解凍され；又は個々の細胞株が凍結保存された（すなわち、非常に低温、典型的には約－８０℃に冷却された）後、一緒にプールされ、投与され得る。代替的に、実施形態において、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物は、一緒にプールされ、凍結又は解凍工程を受けていないプールされた製品として投与され得る。実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞組成物は、個々のＴ細胞株の個々の投与として、単回の投与セッションにおいて同時に又は連続して患者に投与され得る。本明細書で使用される「投与セッション」は、組成物を投与する医療専門家とのセッション又は訪問を指す。実施形態において、単回投与セッションは、数時間又は数日を包含し得る。実施形態において、単回投与セッションで投与される組成物は、互いに数分以内、又は互いに１、２、３、４、５、６、１２、若しくは１８時間以内、又は約１、２、３、４、５、６、若しくは７日以内に投与される。例えば、実施形態において、投与セッションは、２つ以上の個々の細胞株組成物の投与を含み、患者は投与の間に組成物が投与される施設又は場所を離れず、及び／又は患者は投与間の安全性モニタリング（そのようなモニタリングが開始又は必要とされる場合）以外に、インビボでの細胞の有効性又は寿命の評価などの試験又は評価を受けない。いくつかの投与セッションでは、組成物が投与される時点で、例えば、投与のためにシリンジ上に混合組成物を引き上げる前に個々のバイアルを混合することによって、個々の細胞株を一緒にプールする。いくつかの投与セッションでは、個々の細胞株をシリンジ内に一緒にプールし、例えば、個々の細胞株組成物の２つ以上のバイアルからシリンジ内に細胞を引き込む。いくつかの投与セッションにおいて、個々の細胞株は、単回の投与セッションにおいて患者に別々に投与される。

実施形態において、本明細書で提供される細胞療法製品は、一緒にプールされた２つ以上のユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品を含む。実施形態において、本明細書で提供される細胞療法製品は、１つ以上の追加の個々の抗原特異的Ｔ細胞株が添加されたユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品を含む。実施形態において、本開示は、Ｔ細胞療法製品の個別化投与のための方法を提供し、患者は患者のニーズ及び／又は遺伝子プロファイルに高度に個別化されたユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品を受け取るように、患者はユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品を、追加のユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品と組み合わせて、及び／又は１つ以上の追加の個々の抗原特異的Ｔ細胞株と組み合わせて投与される。例えば、実施形態において、本開示は、患者のＨＬＡ型が既知であり、患者のＨＬＡアレルの全て又は大部分をカバーする高度に個別化された抗原特異的Ｔ細胞製品が、２つ以上のユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品、２つ以上の個々の抗原特異的Ｔ細胞株、及び／又は１つ以上のユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品と１つ以上の個々の抗原特異的Ｔ細胞株と一緒にプールすることによって準備する、方法を提供する。実施形態において、本開示は高度に個別化された抗原特異的Ｔ細胞製品で患者を処置するための方法を提供し、この方法は、２つ以上の個々の抗原特異的Ｔ細胞株を単回の投与セッションにおいて患者に同時に又は順次投与する工程を包含する。

態様において、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物は病原体特異的Ｔ細胞及び／又は腫瘍特異的（例えば、腫瘍抗原、又はＴＡＡ）Ｔ細胞を含む。特定の態様では、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物は、ウイルス特異的Ｔ細胞及び／又は腫瘍特異的（例えば、腫瘍抗原、又はＴＡＡ）Ｔ細胞を含む。実施形態において、本明細書に提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法は、ユニバーサルウイルス特異的Ｔ細胞（ＵＶＳＴ）組成物である。

実施形態において、本明細書に提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物を構成する細胞株は、モノクローナル、オリゴクローナル、及び／又はポリクローナルである。実施形態において、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物中の細胞株のそれぞれは、ポリクローナル細胞株である。実施形態において、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物は、１つ以上のオリゴクローナル細胞株と組み合わせた１つ以上のモノクローナル細胞株；１つ以上のポリクローナル細胞株と組み合わせた１つ以上のモノクローナル細胞株；又は１つ以上のポリクローナル細胞株と組み合わせた１つ以上のオリゴクローナル細胞株を含む。

（ドナーとＨＬＡ型）
本明細書において提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物は、複数の異なるドナーに由来する複数の抗原特異的Ｔ細胞株を含む抗原特異的Ｔ細胞の集団を含み、各ドナーのＨＬＡ型は、少なくとも１つのＨＬＡアレルにおいて少なくとも１名の他のドナーとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、１、２、３、４、５、６、７又は８個のＨＬＡアレルにおいて、少なくとも１名の他のドナーとは異なる。実施形態において、本明細書に提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物は、ドナーミニバンクに細胞をプールすることによって生成される。実施形態において、複数の異なるドナーは、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５名、又はそれ以上のドナーのドナーの集団である。実施形態において、複数の異なるドナーは、１５名以下のドナー、１０名以下のドナー、又は５名以下のドナーのドナー集団にある。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型（例えば、１５名以下のドナー、１０名以下のドナー、又は５名以下のドナーのドナー集団における）は、少なくとも１つのＨＬＡアレルにおいて、他のドナーの少なくとも２名、少なくとも３名、少なくとも４名、少なくとも５名、少なくとも６名、少なくとも７名、少なくとも８名、少なくとも９名、少なくとも１０名、又は全てと異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、少なくとも２つのＨＬＡアレルにおいて、他のドナーの少なくとも２名、少なくとも３名、少なくとも４名、少なくとも５名、少なくとも６名、少なくとも７名、少なくとも８名、少なくとも９名、少なくとも１０名、又は全てと異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、少なくとも３つのＨＬＡアレルにおいて、他のドナーの少なくとも２名、少なくとも３名、少なくとも４名、少なくとも５名、少なくとも６名、少なくとも７名、少なくとも８名、少なくとも９名、少なくとも１０名、又は全てと異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、少なくとも４つのＨＬＡアレルにおいて、他のドナーの少なくとも２名、少なくとも３名、少なくとも４名、少なくとも５名、少なくとも６名、少なくとも７名、少なくとも８名、少なくとも９名、少なくとも１０名、又は全てと異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、少なくとも５つのＨＬＡアレルにおいて、他のドナーの少なくとも２名、少なくとも３名、少なくとも４名、少なくとも５名、少なくとも６名、少なくとも７名、少なくとも８名、少なくとも９名、少なくとも１０名、又は全てとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、６つのＨＬＡアレルにおいて、他のドナーの少なくとも２名、少なくとも３名、少なくとも４名、少なくとも５名、少なくとも６名、少なくとも７名、少なくとも８名、少なくとも９名、少なくとも１０名、又はすべてと異なる。

実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型（例えば、１５名以下のドナー、１０名以下のドナー、又は５名以下のドナーのドナー集団）は、１つ以上のクラスＩＨＬＡアレルにおいて、少なくとも１名の他のドナーとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、１つ以上のクラスＩＨＬＡアレルにおいて、他のドナーの少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０名、又はすべてとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、１つ以上のＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、及び／又はＨＬＡ－Ｃアレルにおいて、少なくとも１名の他のドナーとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、１つ以上のＨＬＡ－Ａ、ＨＬＡ－Ｂ、及び／又はＨＬＡ－Ｃアレルにおいて、他のドナーの少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０名、又はすべてとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、少なくとも１つのＨＬＡ－Ａ及び少なくとも１つのＨＬＡ－Ｂアレルにおいて、少なくとも１名の他のドナーとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、少なくとも１つのＨＬＡ－Ａ及び少なくとも１つのＨＬＡ－Ｂアレルにおいて、他のドナーの少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０名、又はすべてとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、少なくとも１つのＨＬＡ－Ａ及び少なくとも１つのＨＬＡ－Ｂアレル並びに少なくとも１つのＨＬＡ－Ｃアレルにおいて、少なくとも１名の他のドナーとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、少なくとも１つのＨＬＡ－Ａ及び少なくとも１つのＨＬＡ－Ｂアレル及び少なくとも１つのＨＬＡ－Ｃアレルにおいて、他のドナーの少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０名、又はすべてとは異なる。

実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型（例えば、１５名以下のドナー、１０名以下のドナー、又は５名以下のドナーのドナー集団）は、１つ以上のクラスＩＩＨＬＡアレルにおいて、少なくとも１名の他のドナーとは異なる。各ドナーのＨＬＡ型は、１つ以上のクラスＩＩＨＬＡアレルにおいて、他のドナーの少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０名又は少なくとも１つの他のドナーとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、１つ以上のＤＰ、ＤＱ、及び／又はＤＲアレル上の少なくとも１つの他のドナーとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、１つ以上のＤＰ、ＤＱ、及び／又はＤＲアレルにおいて、他のドナーの少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０名、又はすべてとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型がＨＬＡ－ＤＱＡ１、ＨＬＡ－ＤＱＢ１、ＨＬＡ－ＤＲＡ、及び／又はＨＬＡ－ＤＲＢのうちの１つ以上において、少なくとも１名の他のドナーとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、ＨＬＡ－ＤＱＡ１、ＨＬＡ－ＤＱＢ１、ＨＬＡ－ＤＲＡ、及びＨＬＡ－ＤＲＢのうちの１つ以上において、少なくとも１名の他のドナーとは異なる。実施形態では、各ドナーのＨＬＡ型は、ＨＬＡ－ＤＰＡ１、ＨＬＡ－ＤＰＢ１、ＨＬＡ－ＤＱＡ１、ＨＬＡ－ＤＱＢ１、ＨＬＡ－ＤＲＡ、及び／又はＨＬＡ－ＤＲＢのうちの１つ以上において、少なくとも１名の他のドナーとは異なる。

実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型（例えば、１５名以下のドナー、１０名以下のドナー、又は５名以下のドナーのドナー集団）は、少なくとも１つのクラスＩＨＬＡアレル及び少なくとも１つのクラスＩＩＨＬＡアレルにおいて、少なくとも１つの他のドナーとは異なる。実施形態において、各ドナーのＨＬＡ型は、１名以上の他のドナーにおいて、少なくとも２つのクラスＩＨＬＡアレル及び少なくとも２つのクラスＩＩＨＬＡアレルとは異なる。実施形態において、ドナーは、少なくとも２つの異なるＨＬＡ－Ａアレル、少なくとも２つの異なるＨＬＡ－Ｂアレル、少なくとも２つの異なるＤＲＢ１アレル、及び／又は少なくとも２つの異なるＤＱＢ１アレルを有する。

（外来性（トランスジェニック）分子を発現する細胞）
実施形態において、本明細書で提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物は、外来性分子を発現するＴ細胞を含む。実施形態において、そのようなＴ細胞は、本明細書に記載されるようなＵＶＳＴである。外来性分子の発現は、エレクトロポレーション、ヌクレオフェクション、リポソーム又は塩化カルシウム、塩化ルビジウム、リン酸カルシウム、ＤＥＡＥ－デキストラン、又は他の物質を用いるトランスフェクション；微粒子銃；リポフェクション；トランスポゾン又はトランスポザーゼ；及び感染（例えば、ベクターがウイルスなどの感染性因子である場合）を含む、当技術分野で公知の多くの適切な手段のいずれかによって達成され得る。実施形態において、外来性分子は、ＤＮＡ又はＲＮＡによってコードされる。実施形態において、ＤＮＡ又はＲＮＡは、修飾ＤＮＡ又は修飾ＲＮＡであり得る。実施形態において、外来性分子は、発現カセット又は発現ベクター（例えば、プラスミド、ウイルス（例えば、レンチウイルス）、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、又はコスミドを含むウイルスベクター）中に存在し得るｍＲＮＡ又はポリヌクレオチドによってコードされ、Ｔ細胞は、外来性分子の発現を達成するためにｍＲＮＡ又はベクターでトランスフェクトされる。実施形態において、本明細書で提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物は、外来性分子をコードする導入遺伝子を含有するレトロウイルス又はレンチウイルスベクターで形質導入されたＴ細胞を含み、外来性分子は、ＣＡＲ、トランスジェニックＴＣＲ、ＮＫ細胞受容体、又は治療剤である。実施形態において、外来性分子は、ＣＡＲ又はＴＣＲである。実施形態において、外来性分子は、癌抗原に特異的な抗原結合ドメインを含むＣＡＲである。

実施形態において、本明細書で提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物は、外来性分子のための担体として使用され、当該組成物は、複数の異なるドナー由来の細胞株の混合物を有利に含有するＴ細胞療法のための安全な送達ビヒクルを提供する。実施形態において、外来性分子のための担体として使用するためのそのようなユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物は、ＵＶＳＴである。抗原特異的Ｔ細胞組成物は、複数の異なるドナー由来の細胞株の混合物を含み、一部の細胞は不適合である一方で、一部の細胞はレシピエント患者に部分的に適合される。異なる細胞株のそのような混合物は、レシピエントへの投与時に迅速な拒絶反応を防止するために細胞のさらなる改変を必要とせずに、レシピエントにおいて持続することができる組成物を提供する。実施形態において、外来性分子を発現するように改変されたユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物は、宿主細胞に対する同種反応性を欠き、患者において持続することができる改変Ｔ細胞を含む。実施形態では、組成物は、所望の機能、例えば、癌細胞を標的とし、根絶することを行うのに十分な期間、患者内に存続する改変Ｔ細胞を含む。

実施形態において、外来性分子を発現する本明細書で提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物は、二重の機能を果たす。例えば、実施形態において、第１の機能は、外来性分子に関連するエフェクター活性（例えば、腫瘍細胞上の腫瘍抗原に特異的なＣＡＲを発現するＴ細胞の抗腫瘍細胞活性）であり、第２の機能は、Ｔ細胞自体によって発現されるネイティブＴ細胞受容体の特異性（例えば、複数の腫瘍抗原及び／又は複数のウイルス抗原に対する）に関連するエフェクター活性である。例えば、実施形態において、本開示は、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物を提供し、ここで、Ｔ細胞はＣＡＲを発現するように改変され、ＣＡＲを介して抗腫瘍活性を有するとともに、又は処置を受けている患者において、ウイルス感染を予防若しくは低減するための、又は、ウイルス再活性化若しくは溶解性ウイルス感染を予防若しくは処置するための、抗ウイルス活性を有する。

他の実施形態において、外来性分子を発現する本明細書で提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物は、Ｔ細胞の特異的抗原特異性に関連する機能を果たさないが、上記で提供されるような外来性分子の安全な担体として適している。そのような実施形態では、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物は、細胞がエフェクター機能を果たす炎症部位に移動してもよい。

実施形態において、本明細書に提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物のＴ細胞は、ＣＡＲを発現するように操作されている。本明細書で使用される「キメラ抗原受容体」（「ＣＡＲ」）という用語は、少なくとも細胞外抗原結合ドメイン、膜貫通ドメイン及び細胞質ドメインを含む組換えポリペプチド構築物を指す。実施形態において、細胞質ドメインは、細胞内シグナル伝達ドメインを含む。実施形態において、細胞内シグナル伝達ドメインは、刺激分子（例えば、刺激方法でＴＣＲ複合体の一次活性化を調節又は誘導するための一次細胞質シグナル伝達配列を提供する分子）に由来する機能的シグナル伝達ドメインを含む。実施形態において、細胞内シグナル伝達ドメインは、共刺激分子をさらに含む。例えば、実施形態において、細胞内シグナル伝達ドメインは一次シグナル伝達ドメイン（例えば、例えば、ＣＤ３－ζなどのimmmunoreceptor tyrosine-based activation motif（ＩＴＡＭ）を含む一次シグナル伝達ドメイン）、及び任意に、少なくとも１つの共刺激分子に由来する１つ以上の機能的シグナル伝達ドメインを含む。ＣＤ２７、ＩＣＯＳ、及び／又はＣＤ２８）。例示的な一次シグナル伝達ドメインとしては、ＴＣＲζ、ＦｃＲγ、ＦｃＲβ、ＦｃＲε、ＣＤ３γ、ＣＤ３ζ、ＣＤ３ε、ＣＤ５、ＣＤ２２、ＣＤ７９ａ、ＣＤ７９ｂ及びＣＤ６６ｄが挙げられる。例示的な共刺激分子には、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ８、４－１ＢＢ（ＣＤ１３７）、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ－１、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＩＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、ＭＨＣクラスＩ分子、ＢＴＬＡ、ＴＬＲ、及びＢ７－Ｈ３が含まれる。Ｔ細胞上の同種の共刺激シグナル分子に結合する例示的な共刺激リガンドは、ＣＤ７、Ｂ７－１（ＣＤ８０）、Ｂ７－２（ＣＤ８６）、ＰＤ－Ｌ１、ＰＤ－Ｌ２、４－１ＢＢＬ、ＯＸ４０Ｌ、誘導性共刺激リガンド（ＩＣＯＳ－Ｌ）、細胞間接着分子（ＩＣＡＭ、ＣＤ３０Ｌ、ＣＤ４０、ＣＤ７０、ＣＤ８３、ＨＬＡ－Ｇ、ＭＩＣＡ、Ｍ１ＣＢ、ＨＶＥＭ、リンホトキシンβ受容体、３／ＴＲ６、ＩＬＴ３、ＩＬＴ４、ＴＬＲに径都合するアゴニスト又は抗体、及びＢ７－Ｈ３に特異的に結合するリガンドを含む。共刺激リガンドは、とりわけ、例えば限定はされないが、ＣＤ２７、ＣＤ２８、４－１ＢＢ、ＯＸ４０、ＣＤ３０、ＣＤ４０、ＰＤ－１、ＩＣＯＳ、リンパ球機能関連抗原－１（ＬＦＡ－１）、ＣＤ２、ＣＤ７、ＬＴＧＨＴ、ＮＫＧ２Ｃ、Ｂ７－Ｈ３、及びＣＤ８３と特異的に結合するリガンドなどの、Ｔ細胞上に存在する共刺激分子と特異的に結合する抗体を包含する。

実施形態において、本明細書に提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物のＴ細胞は、外来性ＴＣＲ（例えば、αβＴＣＲ又はγδＴＣＲ）を発現するように操作されている。実施形態において、本明細書に提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物のＴ細胞は、ＮＫ細胞受容体を発現するように操作されている。例示的なＮＫＴ又はＮＫ細胞受容体としては、ＮＫＧ２Ｄ、ＮＫｐ３０、ＮＫｐ４４、ＮＫｐ４６．ＫＩＲ２ＤＳ１、ＫＩＲ２ＤＳ２／３、ＫＩＲ２ＤＬ４、ＫＩＲ２ＤＳ４、ＫＩＲ２ＤＳ５、ＫＩＲ３ＤＳ１、及びＮＫＧ２Ｃが挙げられる。実施形態では、ＣＡＲのような外来性ＴＣＲ又はＮＫ細胞受容体は、細胞におけるエフェクター機能を誘発する細胞内シグナル伝達ドメインを含む。

実施形態において、Ｔ細胞は、１つ以上の炎症誘発性サイトカイン及び／又はリガンド、又は１つ以上の化学療法剤などの１つ以上の治療剤又は分子を発現する。例えば、実施形態において、Ｔ細胞は、ＩＬ－２、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ－ｌ５、ＩＬ－１５／ＩＬ－１５ＲＡ、ＩＬ－１８、ＩＬ－２１、ＴＮＦα、ＩＦＮγ、キメラ受容体、キメラサイトカイン受容体、メトトレキサート、アミノプテリン、６－メルカプトプリン、シタラビン、５－フルオロウラシルデカルバジン、メクロレタミン、チオエパクロラムブシル、メルファラン、カルムスチン（ＢＳＮＵ）、マイトマイシンＣ、ロムスチン（ＣＣＮＵ）、１－メチルニトロソウレア、シクロホスファミド、メクロレタミン、ブスルファン、ジブロモマンニトール、ストレプトゾトシン、マイトマイシンＣ、シス－ジクロロジアミン白金（ＩＩ）（ＤＤＰ）、シスプラチン、カルボプラチン、シスプラチン及びカルボプラチン（パラプラチン）；ダウノルビシン、ドキソルビシン（アドリアマイシン）、デトルビシン、カルミノマイシン、イダルビシン、エピルビシン、ミトキサントロン及びビサントレン；抗生物質としてはダクチノマイシン（アクチノマイシンＤ）、ブレオマイシン、カリケアマイシン、ミトラマイシン、アントラマイシン（ＡＭＣ）、ビンカアルカロイド、ビンクリスチン、ビンブラスチン、パクリタキセル（タキソール）、リシン、シュードモナス外毒素、ゲムシタビン、サイトカラシンＢ、グラミシジンＤ、臭化エチジウム、エメチン、エトポシド、テノポシド、コルヒチン、ジヒドロキシアントラシンジオン、１－デヒドロテストステロン、グルココルチコイド、プロカイン、テトラカイン、リドカイン、プロプラノロール、ピューロマイシン、プロカルバジン、ヒドロキシウレア、アスパラギナーゼ、コルチコステロイド又はミトタン（Ｏ，Ｐ’－（ＤＤＤ））の１以上を発現するように遺伝的に修飾されたものである。

実施形態において、外来性分子は、１つ以上の小分子キナーゼ阻害剤、又は腫瘍微小環境の要素の阻害剤である。実施形態において、外来性分子は、腫瘍部位で阻害剤分子を隔離（ｓｅｑｕｅｓｔｅｒ）する１つ以上の受容体である。

実施形態において、本開示は組成物中のＴ細胞の１つ以上が外来性分子（例えば、治療剤、ＣＡＲ、外来性ＴＣＲ、ＮＫＴ又はＮＫ細胞受容体）を発現する、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物を作製するための方法を提供する。実施形態において、本明細書に記載されるように作製された個々のＴ細胞株は、外来性分子を発現するように操作される。他の実施形態において、個々のＴ細胞株は、本明細書に提供されるように一緒にプールされ、プールされた細胞製品は、外来性分子を発現するように操作される。実施形態において、個々のＴ細胞株及び／又はプールされた細胞製品は、本明細書において提供される治療方法において細胞株及び／又はプールされた細胞製品を使用する前に、外来性分子の発現率を評価するために試験される。

（ドナーミニバンク）
本開示の実施形態は、複数の細胞療法製品（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）を含むドナーミニバンク及び複数のそのようなドナーミニバンクから構成されるドナーバンク、並びに疾患又は障害を処置するための養子免疫療法において使用するために、そのようなドナーミニバンク、ドナーバンク、及びそれらに含まれる細胞療法製品（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）を作製し、使用する（単独で、又はユニバーサル細胞療法製品として一緒に）方法を含む。

実施形態において、本明細書に提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品は、ドナーミニバンクのいくつか又は全ての細胞株を一緒にプールすることによって生成される。例えば、実施形態において、本明細書に提供されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品は、ドナーミニバンク中の細胞株の全てを一緒にプールすることによって生成される。実施形態において、ミニバンク中の全ての細胞株を一緒にプールすることは、患者集団に対して＞９５％のカバー率を提供する組成物をもたらす。実施形態において、本開示は、ミニバンクにおける細胞株のサブセットを一緒にプールすること、及び／又は個々の抗原特異的Ｔ細胞株を一緒にプールすることを含み、プールされた組成物は、患者集団の＞７５％、＞８０％、＞８５％、＞９０％、又は＞９５％のカバー率を提供する。実施形態において、本開示は、ドナーミニバンクの細胞株を含む組成物を提供する。

特定の実施形態において、本発明は、細胞療法製品を構築する際に使用するための（そのＨＬＡ型に関して）適切に多様なドナーのセットを識別及び選択する方法及びコンピュータ実装アルゴリズムを含む（例えば、以下の通り。各ドナーミニバンクが標的集団の所望の割合に対して少なくとも１つの十分に適合した細胞療法製品（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）を含むことを確実にするために、ドナーミニバンクに含まれるか、又はドナーミニバンクから生成される細胞療法製品（複数の抗原特異的Ｔ細胞株及びユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品）を構築するために、（そのＨＬＡ型の観点から）適切に多様なドナーのセットを識別及び選択するための、方法及びコンピュータ実装アルゴリズムが挙げられる。本明細書中でさらに議論されるように、所与のミニバンクに含まれる、又はドナーミニバンクから生成される細胞療法製品（例えば、複数の抗原特異的Ｔ細胞株及びユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品）に十分に適合する標的集団のパーセンテージは、そのミニバンクを構築するとき予め決定され得るパラメータであって、標的集団のＨＬＡ型及びドナーミニバンクに含まれる細胞療法製品の数に基づき得るパラメータである。場合によっては、各ドナーミニバンクは、標的集団内の見込み患者の少なくとも７０％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、少なくとも９９．９％（これらの間のすべての範囲及び部分的な範囲を含む）と十分に適合する少なくとも１つの細胞療法製品（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）を含む。したがって、いくつかの実施形態において、本明細書中に開示される方法は、確実にドナーミニバンク内の少なくとも１つの細胞療法製品（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）が所与の標的集団の９５％以上と少なくとも２つのＨＬＡアレルにおいて適合するように、好適なドナー多様性（ＨＬＡタイピングに関して）を備えたそのようなドナーミニバンクの構築を可能にする。

特定の実施形態において、そのようなドナーミニバンクに含まれるそのような細胞療法製品（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）の作製において利用されるドナーは、標的患者集団の少なくとも９５％が、ミニバンク内の少なくとも１つの細胞療法製品（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）と２つ以上のＨＬＡアレルにおいて適合するようにドナー間で十分なＨＬＡ多様性を確保するために、本明細書中に開示されるドナー選択方法を用いて慎重に選択される。本開示は、抗原特異的Ｔ細胞株（例えば、ＶＳＴ細胞株）などの、部分的にしかＨＬＡが適合しない細胞治療が第三者において安全かつ有効であるという驚くべき発見に部分的に基づく。実際に、実施例１～３に示されるように、本発明者らの臨床試験では、わずか１つというＨＬＡアレルしか適合しない被験体に投与されても、第三者のＶＳＴが安全であり、有効であることが実証された（例えば、図３５～３７を参照のこと）。

本開示は、ドナーミニバンク（及び複数のそのようなドナーミニバンクを含むドナーバンク）を含み、そのドナーミニバンクは、本明細書中に開示されるドナー選択方法、並びに疾患又は障害を処置又は予防するためにそのような細胞療法製品（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株製品、例えば、ＶＳＴ製品を含む）を作製、投与及び使用する方法を介して特定されたそのような好適な第三者供血者から回収された血液サンプルに由来するそのような細胞療法製品を含む。したがって、様々な実施形態において、そのようなドナーミニバンクは、本明細書中に開示されるドナー選択方法を用いて慎重に選択されたドナーから得られるサンプル（例えば、ＰＢＭＣなどの単核球）に由来する複数の細胞療法製品（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）を含み、そのための細胞療法製品は、標的患者集団の少なくとも９５％が、ミニバンク内の少なくとも１つの細胞療法製品（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）と２つ以上のＨＬＡアレルにおいて適合するように、互いの間に十分なＨＬＡ多様性を備える。

様々な実施形態において、本明細書中に開示されるドナーミニバンクに含まれる１つ以上の細胞療法製品が、本明細書中に開示される患者適合方法に基づいて、そのような治療を必要とする、十分に適合する被験体に投与される。いくつかの実施形態において、ドナーミニバンクに含まれる複数のそのような細胞療法製品は、本明細書中に開示される患者適合方法に基づいて、十分に適合する被験体に投与される。いくつかの実施形態では、ドナーミニバンクに含まれる複数のそのような細胞療法製品は、被験体のＨＬＡ型が既知であるか否かに関係なく、被験体に投与される。例えば、下記でさらに議論されるように、いくつかのそのような実施形態では、被験体には、ドナーミニバンクに含まれる各細胞療法製品が投与され得、そのミニバンクは、本明細書中に開示されるドナー選択方法を用いて慎重に選択されたドナーから得られたサンプル（例えば、ＰＢＭＣ）に由来する複数の細胞療法製品（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）を含むので、その細胞療法製品は、標的患者集団の少なくとも９５％がそのミニバンク内の少なくとも１つの細胞療法製品（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）と２つ以上のＨＬＡアレルにおいて適合するように互いの間に十分なＨＬＡ多様性を備える。このように、ドナーミニバンクは、標的患者集団の＞９５％と適合性である（すなわち、十分に適合する）ユニバーサル細胞療法製品として働く。被験体に一緒に投与される複数の細胞療法製品は、連続的に投与されてもよいし、同時に投与されてもよい。いくつかの実施形態において、複数の細胞療法製品は、合わせてプールされており、単一のユニバーサル細胞療法製品として被験体に投与される。ドナーミニバンクに含まれるそのような細胞療法製品（例えば、抗原特異的Ｔ細胞株）のプールは、それを必要とする被験体への後の投与のために、細胞バンクに（例えば、凍結保存で）保存され得る。

いくつかの実施形態において、本明細書中に開示されるドナーミニバンクの構築において利用されるドナーは、血清陽性についてプレスクリーニングされ、かつ／又はそれらのドナーは、健康である。本開示は、これらの抗原特異的Ｔ細胞株を、将来を見越して作製し、次いで凍結保存することで、感染ウイルス又は複数のウイルスに対して実証できるほどの免疫活性を有する「既製品」としてすぐに利用できるようにする。

本開示は、いくつかの実施形態において、ポリクローナルＶＳＴが、製造プロセスにおいて生ウイルスの存在又は組換えＤＮＡ技術を必要とすることなく作製され得ることを提供する。いくつかの実施形態では、Ｔ細胞集団を拡大し、ウイルス特異性について濃縮して、その結果、同種反応性Ｔ細胞が減少する。本開示は、細胞治療（例えば、ＶＳＴ）ドナーバンクよびドナーミニバンクが、いくつかの実施形態において、同種異系ＨＳＣＴ患者集団（例えば、米国の同種異系ＨＳＣＴ患者集団）の＞９５％に対応できるようにデザインされ得ることも提供する。さらに、細胞治療（例えば、ＶＳＴ）ドナーバンク及びドナーミニバンクは、ウイルス感染細胞に対して抗ウイルス効果を媒介するほど十分にＨＬＡが適合している。例えば、十分にＨＬＡが適合しているとは、少なくとも２つのアレルが適合していることを指す。本開示は、いくつかの実施形態において、被験体の幹細胞ドナーと部分的にだけ適合している細胞療法製品、例えばＶＳＴを提供するが、そのような細胞療法製品（例えば、ＶＳＴ）は結果的に、幹細胞ドナーの細胞がレシピエント内で完全に再増殖する時点（この時点においてその細胞療法製品（例えばＶＳＴ）は、再構成された患者の免疫系によって拒絶される）までしか循環しないと予想される。

いくつかの実施形態において、ＶＳＴは、レシピエント内を最大１週間、２週間、３週間、４週間、５週間、６週間、７週間、８週間、９週間、１０週間、１１週間、１２週間、１３週間、１４週間、１５週間、１６週間、１７週間、１８週間（これらの間のすべての範囲及び部分的な範囲を含む）循環する。１つの実施形態において、ＶＳＴは、レシピエント内を最大１２週間循環する。

いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクの構築において使用するのに適したドナーを特定する方法は、第１のドナープール由来の第１の複数の各ドナー候補のＨＬＡ型を第１の見込み患者集団由来の第１の複数の各見込み患者と比較する工程（ａ）を含む。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような工程（ａ）における比較に基づいて、第１の複数の見込み患者の中で最も多くの患者と２つ以上のＨＬＡアレルが適合する第１のドナープール由来のドナーと定義される第１の最適合ドナーを決定する工程（図２）。いくつかの実施形態において、患者の大部分に対応するドナーは、（ｉ）抗原特異的Ｔ細胞株作製の一次選考を通過し、（ｉｉ）全体のドナープールから除去され、（ｉｉｉ）このドナーによって対応されるすべての患者が、患者集団から除去される（図３）。いくつかの実施形態において、第１の最適合ドナーは、第１のドナーミニバンクのために選択される。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、第１のドナープールから第１の最適合ドナーを除去し、それにより、第１の最適合ドナーを除く第１のドナープール由来の第１の複数の各ドナー候補からなる第２のドナープールを作製する工程（ｄ）を含む。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような方法は、第１の複数の見込み患者から、第１の最適合ドナーと２つ以上のアレルが適合する各見込み患者を除去し、それにより、第１の最適合ドナーと２つ以上のアレルが適合する各見込み患者を除く第１の複数の各見込み患者からなる第２の複数の見込み患者を得る工程（ｅ）を含む。

いくつかの実施形態において、第１のドナーミニバンクは、１０名以下、９名以下、８名以下、７名以下、６名以下、５名以下、４名以下、３名以下又は２名以下のドナーに由来する抗原特異的Ｔ細胞株を含み、第１の見込み患者集団の＞９５％に、少なくとも２つのＨＬＡアレルにおいて患者のＨＬＡ型に適合する１つ以上の抗原特異的Ｔ細胞株を提供するのに十分なＨＬＡ多様性を備える。いくつかの実施形態において、第１のドナーミニバンクは、１０名以下のドナーに由来する抗原特異的Ｔ細胞株を含む。いくつかの実施形態において、第１のドナーミニバンクは、５名以下のドナーに由来する抗原特異的Ｔ細胞株を含む。

いくつかの実施形態において、図４～図１０に示されているように、本方法は、工程（ｄ）及び（ｅ）に従って、まだ除去されていないすべてのドナー及び見込み患者を用いて、本明細書中に記載されるような工程（ａ）～（ｅ）をさらに少なくとも１回、少なくとも２回、少なくとも３回、少なくとも４回、少なくとも５回、少なくとも６回、少なくとも７回、少なくとも右回、少なくとも９回、少なくとも１０回又はそれ以上反復する工程（ｆ）を含む。いくつかの実施形態において、工程（ａ）～（ｅ）は、第１の見込み患者集団の所望のパーセンテージが複数の見込み患者に残るまで、又はドナープールにドナーが残らなくなるまで、反復される。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような工程（ａ）～（ｅ）は、第１の見込み患者集団の５％以下が複数の見込み患者に残るまで、工程（ｆ）に従って繰り返される。図１１に示されているように、選択されたドナーが、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９％、少なくとも９９．９％の見込み患者（これらの間のすべての範囲及び部分的な範囲を含む）に相当し得るとき、第１のドナーミニバンクは完成となる。

いくつかの実施形態において、第１の見込み患者集団は、少なくとも９５名、少なくとも９７名、少なくとも９９名、少なくとも１００名、少なくとも１０５名、少なくとも１１０名、少なくとも１１５名、少なくとも１２０名の患者を含む。いくつかの実施形態において、第１の見込み患者集団は、少なくとも１００名の患者を含む。

いくつかの実施形態では、本明細書中に記載されるような工程（ｃ）に従って追加の最適合ドナーが選択されるたびに、工程（ｄ）に従ってそれぞれのドナープールからその追加の最適合ドナーが除去される。いくつかの実施形態では、次の最適合ドナーがそれぞれのドナープールから除去されるたびに、工程（ｅ）に従ってそれぞれの複数の見込み患者から次の最適合ドナーと２つ以上のアレルが適合する各見込み患者が除去される。

いくつかの実施形態では、本明細書中に記載されるような工程（ａ）～（ｅ）を反復することにより、第１のドナーミニバンク内の選択された最適合ドナーの数が、上記方法の各サイクル後に１ずつ増加し、それにより、選択された最適合ドナーとのＨＬＡ適合に従って上記方法の各サイクル後に患者集団内の複数の見込み患者の数が減少する。いくつかの実施形態では、選択されたドナー集団が患者の少なくとも９５％をカバーできたら、第１のドナーミニバンクは完成となる。いくつかの実施形態において、確実に各患者が複数の抗原特異的Ｔ細胞株の選択肢を有するように、本明細書中に記載されるのと同じストラテジーを用いて追加のミニバンクが構築され得る。

いくつかの実施形態において、上記の２つ以上のアレルは、少なくとも２つのＨＬＡクラスＩアレルを含む。いくつかの実施形態において、上記の２つ以上のアレルは、少なくとも２つのＨＬＡクラスＩＩアレルを含む。いくつかの実施形態において、上記の２つ以上のアレルは、少なくとも１つのＨＬＡクラスＩアレル及び少なくとも１つのＨＬＡクラスＩＩアレルを含む。

いくつかの実施形態において、第１の見込み患者集団は、全世界の同種異系ＨＳＣＴ集団を含む。いくつかの実施形態において、第１の見込み患者集団は、全米の同種異系ＨＳＣＴ集団を含む。いくつかの実施形態において、第１の見込み患者集団は、ワールドワイドウェブアドレスｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ．ｂｅｔｈｅｍａｔｃｈｃｌｉｎｉｃａｌ．ｏｒｇにおいて利用可能なＮａｔｉｏｎａｌＭａｒｒｏｗＤｏｎｏｒＰｒｏｇｒａｍ（ＮＭＤＰ）データベースに含まれるすべての患者を含む。いくつかの実施形態において、第１の見込み患者集団は、ワールドワイドウェブアドレス：ｅｂｍｔ．ｏｒｇ／ｅｂｍｔ－ｐａｔｉｅｎｔ－ｒｅｇｉｓｔｒｙにおいて利用可能なＥｕｒｏｐｅａｎＳｏｃｉｅｔｙｆｏｒＢｌｏｏｄａｎｄＭａｒｒｏｗＴｒａｎｓｐｌａｎｔａｔｉｏｎ（ＥＢＭＴ）データベースに含まれるすべての患者を含む。いくつかの実施形態において、全米の同種異系ＨＳＣＴ集団は、代用物を使用することによって決定することができ、ここで、前記代用物のサンプルサイズは、十分大きく、米国の同種異系のＨＳＣＴ集団の代表でもある。例として、ＢａｙｌｏｒＣｏｌｌｅｇｅｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅ（Ｈｏｕｓｔｏｎ，ＴＸ）における６６６名の同種異系のＨＳＣＴレシピエントが、全米の同種異系ＨＳＣＴ集団の好適な代用物であり得る。いくつかの実施形態において、全世界の同種異系ＨＳＣＴ集団は、代用物を使用することによって決定することができ、ここで、前記代用物のサンプルサイズは、十分大きく、全世界の同種異系のＨＳＣＴ集団の代表である。いくつかの実施形態において、全世界の同種異系ＨＳＣＴ集団は、３歳以下、４歳以下、５歳以下、６歳以下、７歳以下、８歳以下、９歳以下、１０歳以下、１１歳以下、１２歳以下、１３歳以下、１４歳以下、１５歳以下、１６歳以下、１７歳以下の小児を含む。いくつかの実施形態において、全世界の同種異系ＨＳＣＴ集団は、５歳以下の小児を含む。いくつかの実施形態において、全世界の同種異系ＨＳＣＴ集団は、１６歳以下の小児を含む。いくつかの実施形態において、全世界の同種異系ＨＳＣＴ集団は、６５歳以上、７０歳以上、７５歳以上、８０歳以上、８５歳以上、９０歳以上の個体を含む。いくつかの実施形態において、全世界の同種異系ＨＳＣＴ集団は、６５歳以上の個体を含む。いくつかの実施形態において、全米の同種異系ＨＳＣＴ集団は、３歳以下、４歳以下、５歳以下、６歳以下、７歳以下、８歳以下、９歳以下、１０歳以下、１１歳以下、１２歳以下、１３歳以下、１４歳以下、１５歳以下、１６歳以下、１７歳以下の小児を含む。いくつかの実施形態において、全米の同種異系ＨＳＣＴ集団は、５歳以下の小児を含む。いくつかの実施形態において、全米の同種異系ＨＳＣＴ集団は、１６歳以下の小児を含む。いくつかの実施形態において、全米の同種異系ＨＳＣＴ集団は、６５歳以上、７０歳以上、７５歳以上、８０歳以上、８５歳以上、９０歳以上の個体を含む。いくつかの実施形態において、全米の同種異系ＨＳＣＴ集団は、６５歳以上の個体を含む。

いくつかの実施形態において、ドナーバンクは、本明細書中に記載されるような抗原特異的Ｔ細胞株の第１のミニバンクを構築することによって作製され得る。いくつかの実施形態において、ドナーバンクの作製は、本明細書中に記載されるような第１のミニバンクを構築するすべての工程を反復することを含む。いくつかの実施形態において、ドナーバンクの作製は、１つ以上の第２のミニバンクを構築するための１回以上の第２ラウンドを含む。

各第２ラウンドを始める前に、新しいドナープールが作製される。いくつかの実施形態において、その新しいドナープールは、上記方法の第１ラウンド及び先の任意の第２ラウンドから、第１のドナーミニバンクを構築する先の各サイクルの工程（ｄ）に従って除去された任意の最適合ドナーを差し引いた第１のドナープールを含む。いくつかの実施形態において、新しいドナープールは、第１のドナープールに含まれていない全く新しいドナー候補集団を含む。例えば、新しいドナープールは、第１のドナープールとは全く異なるドナー候補を含み得る。いくつかの実施形態において、新しいドナープールは、上記方法の第１ラウンド及び先の任意の第２ラウンドから、第１のドナーミニバンクを構築する先の各サイクルの工程（ｄ）に従って除去された任意の最適合ドナーを差し引いた第１のドナープールと、第１のドナープールに含まれていない全く新しいドナー候補集団との組み合わせを含み得る。例として、新しいドナープールは、第１のドナープール由来の３名のドナー及び第１のドナープールに含まれない７名の新しいドナーを含み得る。

いくつかの実施形態において、各第２ラウンドを始める前に、ドナーバンクを構築する方法は、第１の見込み患者集団から第１の複数の見込み患者を再構築する工程を含む。いくつかの実施形態において、再構築は、先の各サイクルの工程（ｅ）（すなわち、第１の複数の見込み患者から、第１の最適合ドナーと２つ以上のアレルが適合する各見込み患者を除去し、それにより、第１の最適合ドナーと２つ以上のアレルが適合する各見込み患者を除く第１の複数の各見込み患者からなる第２の複数の見込み患者を得る工程）に従って上記方法の第１ラウンド及び先の任意の第２ラウンドから以前に除去されたすべての見込み患者を戻すことを含む。

いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株の第１のドナーミニバンクを構築する方法は、ドナーミニバンクに含まれるそれぞれの各ドナーから得られた血液からＭＮＣを単離するか、又はその血液から単離されたＭＮＣを手に入れる工程を含む。ドナーバンクに含まれる各ドナー由来の血液が、収集され得る。いくつかの実施形態では、ドナーバンクに含まれる各ドナー由来の収集された血液中の単核球（ＭＮＣ）が回収される。ＭＮＣ及びＰＢＭＣは、当業者に公知の方法を用いることによって単離される。例として、密度遠心分離（勾配）（フィコール－パーク）が、ＰＢＭＣを単離するため使用され得る。他の例では、回収されたばかりの血液を含む細胞調製チューブ（ＣＰＴ）及びＳｅｐＭａｔｅチューブが、ＰＢＭＣを単離するために使用され得る。

いくつかの実施形態において、ＭＮＣは、ＰＢＭＣである。例として、ＰＢＭＣには、リンパ球、単球及び樹状細胞が含まれ得る。例として、リンパ球には、Ｔ細胞、Ｂ細胞及びＮＫ細胞が含まれ得る。いくつかの実施形態において、本明細書中で使用されるＭＮＣは、培養又は凍結保存される。いくつかの実施形態において、それらの細胞を培養又は凍結保存するプロセスは、培養中の細胞を１つ以上の抗原と好適な培養条件下で接触させて、抗原特異的Ｔ細胞を刺激し、拡大することを含み得る。いくつかの実施形態において、１つ以上の抗原には、１つ以上のウイルス抗原が含まれ得る。いくつかの実施形態において、１つ以上の抗原には、１つ以上の腫瘍関連抗原が含まれ得る。他の実施形態において、１つ以上の抗原には、１つ以上のウイルス抗原と１つ以上の腫瘍関連抗原との組み合わせが含まれ得る。例えば、培養又は凍結保存されたＭＮＣ又はＰＭＢＣを、１つのアデノウイルス、ＣＴＬＡ－４及びｇｐ１００と接触させ得る。他の実施形態において、各抗原は、腫瘍関連抗原である。他の実施形態において、各抗原は、ウイルス抗原である。他の実施形態では、少なくとも１つの抗原がウイルス抗原であり、少なくとも１つの抗原が腫瘍関連抗原である。

いくつかの実施形態において、上記細胞を培養又は凍結保存するプロセスは、培養中の細胞を１つ以上の抗原由来の１つ以上のエピトープと好適な培養条件下で接触させることを含み得る。いくつかの実施形態において、ＭＮＣ又はＰＢＭＣを１つ以上の抗原又は１つ以上の抗原由来の１つ以上のエピトープと接触させることにより、それぞれの各ドナーのＭＮＣ又はＰＭＢＣ由来の抗原特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団を刺激し、拡大する。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞株は、凍結保存され得る。

いくつかの実施形態において、上記の１つ以上の抗原は、ホールタンパク質の形態であり得る。いくつかの実施形態において、上記の１つ以上の抗原は、各抗原の一部又は配列全体を網羅する一連の重複ペプチドを含むペプミックスであり得る。いくつかの実施形態において、上記の１つ以上の抗原は、ホールタンパク質と、各抗原の一部又は配列全体を網羅する一連の重複ペプチドを含むペプミックスとの組み合わせであり得る。

いくつかの実施形態において、ＰＢＭＣ又はＭＮＣの培養は、気体透過性の培養表面を備える容器において行われる。１つの実施形態において、その容器は、気体透過性の部分を備える注入バッグ、又は剛性容器である。１つの実施形態において、その容器は、ＧＲｅｘバイオリアクターである。１つの実施形態において、その容器は、本明細書中に記載されるようなＰＢＭＣ又はＭＮＣの培養に適した任意の容器、バイオリアクターなどであり得る。

いくつかの実施形態において、ＰＢＭＣ又はＭＮＣは、１つ以上のサイトカインの存在下で培養される。実施形態では、単核細胞及び抗原と共に培養される１つ以上のサイトカインは、ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ１７、ＩＬ１８ＩＬ－２１、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。実施形態では、単核細胞及び抗原と共に培養される１つ以上のサイトカインは、ＩＬ－１、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ１７、ＩＬ１８、ＩＬ－２１、及びそれらの組み合わせからなる群から選択される。実施形態では、単核細胞及び抗原と共に培養される１つ以上のサイトカインは、ＩＬ－１、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ１７、ＩＬ１８、ＩＬ－２１、及びそれらの組み合わせからなる群から選択され、ＩＬ－２を含まない。いくつかの実施形態では、サイトカインはＩＬ－４である。いくつかの実施形態では、サイトカインはＩＬ－７である。いくつかの態様において、サイトカインはＩＬ－４及びＩＬ－７である。いくつかの実施形態において、サイトカインはＩＬ－４及びＩＬ－７を含むが、ＩＬ－２は含まない。いくつかの実施形態では、サイトカインは、本明細書に記載されるように、ＰＢＭＣ又はＭＮＣを培養するのに適したサイトカインの任意の組み合わせであり得る。

いくつかの実施形態において、ＭＮＣ又はＰＢＭＣの培養は、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０個又はそれ以上の異なるペプミックスの存在下において行われ得る。複数のペプチドであるペプミックスは、ある抗原の一部又は配列全体を網羅する一連の重複ペプチドを含む。いくつかの実施形態において、ＭＮＣ又はＰＢＭＣは、複数のペプミックスの存在下において培養され得る。この場合、各ペプミックスは、複数のペプミックス中の他の各ペプミックスによってカバーされる抗原とは異なる少なくとも１つの抗原をカバーする。いくつかの実施形態では、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０個又はそれ以上の異なる抗原が、複数のペプミックスによってカバーされる。いくつかの実施形態では、少なくとも２つの異なるウイルス由来の少なくとも１つの抗原が、複数のペプミックスによってカバーされる。図１１及び図１２は、抗原特異的Ｔ細胞株を構築する一般的なＧＭＰ製造プロトコルの例を示している。いくつかの実施形態において、複数の抗原特異的Ｔ細胞株は、この方法に従って個々に調製され、ここで、本発明のユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物を作製するために、それぞれの株は、選択されたドナーが互いに異なるＨＬＡ型を有するように、本開示に従って選択されたドナーから得られたドナー材料（例えば、ＭＮＣ又はＰＢＭＣ）から調製され、次いで、（場合により、凍結保存され、続いて解凍された後）これらの株はプールされる。本明細書においてさらに考察されるように、いくつかの実施形態において、複数の抗原特異的Ｔ細胞株は、所与の集団の大部分を有する少なくとも２つのＨＬＡアレル上において一致する少なくとも１つの細胞株を含有するユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物（例えば、ＵＶＳＴ組成物）をもたらすのに十分な数及び多様性のドナーから調製される。いくつかの実施形態では、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物（例えば、ＵＶＳＴ組成物）は、所与の患者集団（例えば、本明細書に記載の患者集団）の＞８０％、＞８５％、＞９０％、又は＞９５％と少なくとも２つのＨＬＡアレルにおいて一致する少なくとも１つの細胞株を含有する。

いくつかの実施形態において、ペプミックスは、１５ｍｅｒのペプチドを含む。いくつかの実施形態において、ペプミックスは、本明細書中に記載されるような方法に適したペプチドを含む。いくつかの実施形態において、抗原を網羅するペプミックス中のペプチドは、順に８アミノ酸、９アミノ酸、１０アミノ酸、１１アミノ酸、１２アミノ酸、１３アミノ酸、１４アミノ酸、１５アミノ酸重複する。いくつかの実施形態において、抗原を網羅するペプミックス中のペプチドは、順に１１アミノ酸重複する。

いくつかの実施形態において、１つ以上のペプミックス中のウイルス抗原は、ＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫ、ＪＣウイルス、ＨＨＶ６、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ、ボカウイルス、コロナウイルス、ＬＣＭＶ、ムンプス、麻疹、ヒトメタニューモウイルス、パルボウイルスＢ、ロタウイルス、メルケル細胞ウイルス、単純ヘルペスウイルス、ＨＰＶ、ＨＩＶ、ＨＴＬＶ１、ＨＨＶ８及び西ナイルウイルス、ジカウイルス、エボラから選択されるウイルスに由来する。いくつかの実施形態において、少なくとも１つのペプミックスは、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ、ヒトメタニューモウイルス（ＨＭＰＶ）由来の抗原をカバーする。いくつかの実施形態において、ウイルスは、任意の好適なウイルスであり得る。

いくつかの実施形態において、インフルエンザ抗原は、インフルエンザＡ抗原ＮＰ１であり得る。いくつかの実施形態において、インフルエンザ抗原は、インフルエンザＡ抗原ＭＰ１であり得る。いくつかの実施形態において、インフルエンザ抗原は、ＮＰ１とＭＰ１との組み合わせであり得る。いくつかの実施形態において、ＲＳＶ抗原は、ＲＳＶＮであり得る。いくつかの実施形態において、ＲＳＶ抗原は、ＲＳＶＦであり得る。いくつかの実施形態において、ＲＳＶ抗原は、ＲＳＶＮとＦとの組み合わせであり得る。いくつかの実施形態において、ｈＭＰＶ抗原は、Ｆであり得る。いくつかの実施形態において、ｈＭＰＶ抗原は、Ｎであり得る。いくつかの実施形態において、ｈＭＰＶ抗原は、Ｍ２－１であり得る。いくつかの実施形態において、ｈＭＰＶ抗原は、Ｍであり得る。いくつかの実施形態において、ｈＭＰＶ抗原は、ＦとＮとＭ２－１とＭとの組み合わせであり得る。いくつかの実施形態において、ＰＩＶ抗原は、Ｍであり得る。いくつかの実施形態において、ＰＩＶ抗原は、ＨＮであり得る。いくつかの実施形態において、ＰＩＶ抗原は、Ｎであり得る。いくつかの実施形態において、ＰＩＶ抗原は、Ｆであり得る。いくつかの実施形態において、ＰＩＶ抗原は、ＭとＨＮとＮとＦとの組み合わせであり得る。

他の実施形態において、少なくとも１つのペプミックスは、ＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫ及びＨＨＶ６由来の抗原をカバーする。いくつかの実施形態において、ＥＢＶ抗原は、ＬＭＰ２、ＥＢＮＡ１、ＢＺＬＦ１及びそれらの組み合わせに由来する。いくつかの実施形態において、ＣＭＶ抗原は、ＩＥ１、ｐｐ６５及びそれらの組み合わせに由来する。いくつかの実施形態において、アデノウイルス抗原は、ヘキソン、ペントン及びそれらの組み合わせに由来する。いくつかの実施形態において、ＢＫウイルス抗原は、ＶＰ１、ラージＴ及びそれらの組み合わせに由来する。いくつかの実施形態において、ＨＨＶ６抗原は、Ｕ９０、Ｕ１１、Ｕ１４及びそれらの組み合わせに由来する。

いくつかの実施形態において、ＰＢＭＣ又はＭＮＣは、インフルエンザＡ抗原ＮＰ１及びインフルエンザＡ抗原ＭＰ１、ＲＳＶ抗原Ｎ及びＦ、ｈＭＰＶ抗原Ｆ、Ｎ、Ｍ２－１及びＭ、並びにＰＩＶ抗原Ｍ、ＨＮ、Ｎ及びＦを網羅するペプミックスの存在下において培養される。いくつかの実施形態において、ＰＢＭＣ又はＭＮＣは、ＥＢＶ抗原ＬＭＰ２、ＥＢＮＡ１及びＢＺＬＦ１、ＣＭＶ抗原ＩＥ１及びｐｐ６５、アデノウイルス抗原ヘキソン及びペントン、ＢＫウイルス抗原ＶＰ１及びラージＴ、並びにＨＨＶ６抗原Ｕ９０、Ｕ１１及びＵ１４を網羅するペプミックスの存在下において培養される。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞は、抗原特異的細胞傷害性について試験される。

図１３は、アデノウイルス、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＢＫＶ及びＨＨＶ６に対する抗原特異的Ｔ細胞株のそれぞれの効力を、効力閾値より低いネガティブコントロールと比べて示している。これらのＴ細胞は、特異的なＴ細胞株の合格と不合格とを区別するための閾値である＞３０ＳＦＣ／２×１０^５投入ＶＳＴによって指摘されるように、５つすべてのウイルスに特異的である。＞３０ＳＦＣ／２×１０^５投入ＶＳＴという効力閾値は、内部ネガティブコントロールとして働く、標的ウイルスの１つ以上について血清陰性の（血清学的スクリーニングに基づいて）ドナーから作製されたＴ細胞株を用いた実験データに基づいて確立された（図１４）。

本開示は、本明細書中に記載されるようなミニバンク由来の１つ以上の好適な抗原特異的Ｔ細胞株を患者に投与する工程を含む、疾患又は状態を処置する方法を提供する。実施形態において、本開示は、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品を患者に投与することを含む、疾患又は状態を処置するための方法を含む。実施形態において、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品は、本明細書に記載のミニバンク由来の細胞株を含み、ここで、ミニバンク由来の細胞株は一緒にプールされている。実施形態において、本方法は、本明細書に記載のミニバンク由来の複数の抗原特異的Ｔ細胞株を患者に投与することを含み、ミニバンクを形成する細胞株が、単回の投与セッションで患者に投与される。

いくつかの実施形態では、患者は、造血幹細胞移植を受けている。実施形態において、患者は、造血幹細胞移植を受けており、本方法は本明細書に記載のミニバンク由来の細胞株を含むユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品を患者に投与することを含み、ここでミニバンク由来の細胞株は一緒にプールされている。いくつかのそのような実施形態では、ミニバンク由来の細胞株の一部が一緒にプールされている。いくつかのそのような実施形態では、ミニバンク中の細胞株の全てが一緒にプールされている。実施形態において、患者は造血幹細胞移植を受けており、本方法が本明細書に記載のミニバンク由来の複数の抗原特異的Ｔ細胞株を患者に投与することを含み、ミニバンクを形成する細胞株が単回の投与セッションで患者に投与される。したがって、実施形態において、患者のＨＬＡ型は、治療前に決定されてもよいし、決定されなくてもよい。

いくつかの実施形態において、処置される疾患は、ウイルス感染症である。いくつかの実施形態において、処置される疾患は、癌である。いくつかの実施形態において、処置される状態は免疫不全である。いくつかの実施形態において、免疫不全は、原発性免疫不全である。実施形態において、患者は、ウイルス感染症、癌、又は免疫不全を有し、本方法は、本明細書に記載のミニバンク由来の細胞株を含むユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品を患者に投与することを含み、ミニバンク由来の細胞株は一緒にプールされている。いくつかのそのような実施形態では、ミニバンク由来の細胞株の一部が一緒にプールされている。いくつかのそのような実施形態では、ミニバンク中の細胞株のすべてが一緒にプールされている。実施形態において、患者は、ウイルス感染、癌、又は免疫不全を有し、本方法は、本明細書に記載のミニバンク由来の複数の抗原特異的Ｔ細胞株を患者に投与することを含み、ミニバンクを形成する細胞株は、単回の投与セッションで患者に投与される。したがって、実施形態において、患者のＨＬＡ型が処置前に決定されてもよいし、決定されなくてもよい。

いくつかの実施形態において、患者は、免疫無防備状態である。本明細書中で使用されるとき、免疫無防備状態は、免疫系が弱くなっていることを意味する。例えば、免疫無防備状態の患者は、感染症及び他の疾患と戦う能力が低下している。いくつかの実施形態において、患者は、その疾患若しくは状態又は別の疾患若しくは状態を処置するためにその患者が受けた処置に起因して免疫無防備状態である。いくつかの実施形態において、免疫無防備状態の原因は、年齢に起因する。１つの実施形態において、免疫無防備状態の原因は、低年齢に起因する。１つの実施形態において、免疫無防備状態の原因は、高齢に起因する。いくつかの実施形態において、患者は、移植治療を必要としている。

本開示は、移植手技において移植ドナーから移植材料を受け取った患者に同種異系Ｔ細胞治療において投与するために、ミニバンク又はドナーバンクに含まれるミニバンクから第１の抗原特異的Ｔ細胞株を選択する方法を提供する。１つの実施形態において、投与は、ウイルス感染症を処置するための投与である。１つの実施形態において、投与は、腫瘍を処置するための投与である。１つの実施形態において、投与は、ウイルス感染症及び腫瘍を処置するための投与である。１つの実施形態において、投与は、移植前の原発性免疫不全に対する投与である。いくつかの実施形態において、移植材料には、幹細胞が含まれる。いくつかの実施形態において、移植材料には、実質臓器が含まれる。いくつかの実施形態において、移植材料には、骨髄が含まれる。いくつかの実施形態において、移植材料には、幹細胞、実質臓器及び骨髄が含まれる。

本開示は、抗原特異的Ｔ細胞株の複数のミニバンクで構成されたドナーバンクを構築する方法を提供する。本明細書中で使用されるとき、「複数のミニバンク」は、抗原特異的Ｔ細胞株の１つより多いミニバンクを意味する。例えば、ドナーバンクは、２、３、４、５又は６つのミニバンクを含み得る。いくつかの実施形態において、ドナーバンクの構築は、本明細書中に記載されるような第１のドナーミニバンクを構築するための工程及び手順を含む。それらの工程及び手順には、１回以上の第２ラウンドを行って、１つ以上の第２のミニバンクを構築することが含まれる。いくつかの実施形態において、その方法の各第２ラウンドを始める前に、その新しいドナープールが作製され得る。いくつかの実施形態において、その新しいドナープールは、本明細書中に開示されるような方法の第１ラウンド及び先の任意の第２ラウンドから除去された任意の最適合ドナーを差し引いた第１のドナープールを含む。いくつかの実施形態において、その新しいドナープールは、第１のドナープールに含まれていない全く新しいドナー候補集団を含む。いくつかの実施形態において、その新しいドナープールは、本明細書中に開示されるような方法の第１ラウンド及び先の任意の第２ラウンドから除去された任意の最適合ドナーを差し引いた第１のドナープール並びに第１のドナープールに含まれていない全く新しいドナー候補集団を含む。いくつかの実施形態において、新しいドナープールの作製は、本明細書中に記載されるような方法の第１ラウンド及び先の任意の第２ラウンドから以前に除去されたすべての見込み患者を戻すことによって第１の見込み患者集団由来の第１の複数の見込み患者を再構築することを含む。いくつかの実施形態において、選択及び除去の各ラウンドの後に、ドナーミニバンクに含まれるそれぞれの各ドナーから得られた血液からＭＮＣが単離される。いくつかの実施形態において、そのＭＮＣは、好適な培養条件下で１つ以上の抗原又は１つ以上の抗原由来の１つ以上のエピトープとともに培養及び接触される。いくつかの実施形態において、ＭＮＣは、刺激され、抗原特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団を拡大する。いくつかの実施形態では、複数のＴ細胞株が作製される。培養する方法、抗原を接触させる方法、及びペプミックスを調製する方法は、本明細書中に記載されるような第１のドナーミニバンクを構築するためのプロセスと同じである。

本開示は、本明細書に記載の抗原特異的Ｔ細胞株の複数のミニバンクを含む、ドナーバンク由来の２つ以上の適切な抗原特異的Ｔ細胞株を患者に投与することを含む、疾患又は状態を処置する方法を提供する。様々な実施形態において、ドナーバンク由来の２つ以上の適切な抗原特異的Ｔ細胞株は、単回の投与セッションで患者に投与される。いくつかの実施形態において、ドナーバンク由来の抗原特異的Ｔ細胞株の全てが、任意選択で単回の投与セッションで患者に投与される。

炎症反応は、（ｉ）発熱、悪寒、頭痛、倦怠感、疲労、悪心、嘔吐、関節痛から選択される全身症状；（ｉｉ）低血圧を含む血管症状；（ｉｉｉ）不整脈を含む心臓症状；（ｉｖ）呼吸困難；（ｖ）腎不全及び尿毒症を含む腎症状；並びに（ｖｉ）凝固障害及び血球貪食性リンパ組織球症様症候群を含む検査症状のうちの１つ以上の症状又は徴候を観察することによって検出され得る。いくつかの実施形態において、炎症反応は、既知の又は一般的な任意の徴候を観察することによって検出され得る。

いくつかの実施形態において、処置有効性は、複数の抗原特異的Ｔ細胞株及び／又はユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品の投与後に計測される。他の実施形態において、処置有効性は、感染のウイルス血症の消失に基づいて計測される。他の実施形態において、処置有効性は、感染のウイルス尿症の消失に基づいて計測される。他の実施形態において、処置有効性は、患者由来のサンプル中のウイルス量の消失に基づいて計測される。他の実施形態において、処置有効性は、感染のウイルス血症の消失、感染のウイルス尿症の消失及び患者由来のサンプル中のウイルス量の消失に基づいて計測される。いくつかの実施形態において、処置有効性は、患者の末梢血中の検出可能なウイルス量をモニタリングすることによって計測される。いくつかの実施形態において、処置有効性は、肉眼的血尿の消失を含む。いくつかの実施形態において、処置有効性は、ＣＴＣＡＥ－ＰＲＯ又は患者及び／若しくは臨床医が報告するアウトカムを調べる類似の評価ツールによって計測されるような出血性膀胱炎症状の低減を含む。いくつかの実施形態において、処置有効性は、その処置が癌に対する処置であるとき、複数の抗原特異的Ｔ細胞株及び／又はユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品の投与後の腫瘍サイズの減少に基づいて計測される。いくつかの実施形態において、処置有効性は、患者の末梢血／血清中の検出可能な疾患負荷のマーカーをモニタリングすることによって計測される。いくつかの実施形態において、処置有効性は、患者の末梢血／血清中の検出可能な腫瘍溶解のマーカーをモニタリングすることによって計測される。いくつかの実施形態において、処置有効性は、画像診断を介して腫瘍の状況をモニタリングすることによって計測される。

実施形態において、試料は、患者由来の組織試料から選択される。実施形態において、試料は、患者由来の体液試料から選択される。実施形態において、試料は、患者由来の脳脊髄液（ＣＳＦ）から選択される。実施形態において、試料は、患者由来のＢＡＬから選択される。実施形態において、試料は、患者由来の便から選択される。

本開示は、抗原特異的Ｔ細胞の第１のドナーミニバンクの構築において使用するのに適したドナーを特定する方法を提供する。いくつかの実施形態において、その方法は、第１のドナープール由来の第１の複数の各ドナー候補のＨＬＡ型を決定する工程又は決定した状態である工程を含む。いくつかの実施形態において、その方法は、第１の見込み患者集団由来の第１の複数の各見込み患者のＨＬＡ型を決定する工程又は決定した状態である工程を含む。いくつかの実施形態において、その方法は、第１のドナープール由来の第１の複数の各ドナー候補のＨＬＡ型を第１の見込み患者集団由来の第１の複数の各見込み患者と比較する工程を含む。いくつかの実施形態において、その方法は、第１の複数の見込み患者の中で最も多くの患者と２つ以上のＨＬＡアレルが適合する第１のドナープール由来のドナーと定義される第１の最適合ドナーを決定する工程を含む。いくつかの実施形態において、その方法は、第１のドナーミニバンクに含めるために第１の最適合ドナーを選択する工程を含む。

いくつかの実施形態において、上記方法は、第１のドナープールから第１の最適合ドナーを除去し、それにより、第１の最適合ドナーを除く第１のドナープール由来の第１の複数の各ドナー候補からなる第２のドナープールを作製する工程を含む。いくつかの実施形態において、その方法は、第１の複数の見込み患者から、第１の最適合ドナーと２つ以上のアレルが適合する各見込み患者を除去する工程を含む。次いで、第１の最適合ドナーと２つ以上のアレルが適合する各見込み患者を除く第１の複数の各見込み患者からなる第２の複数の見込み患者が得られる。いくつかの実施形態において、その方法は、まだ除去されていないすべてのドナー及び見込み患者に対して、本明細書中に記載されるような工程及びプロセスを反復する工程（例えば、第１のドナープール由来の第１の複数の各ドナー候補のＨＬＡ型と、第１の見込み患者集団由来の第１の複数の各見込み患者のＨＬＡ型とを比較する工程、最も適合するものを決定し、ドナーミニバンクのために選択する工程、第１のドナープールから第１の最適合ドナー及び見込み患者を除去する工程）を含む。

プロセスを反復する毎に、追加の最適合ドナーを選択することができ、その次の最適合ドナーと２つ以上のアレルが適合する各見込み患者を除去することができる。本明細書中に記載されるようなプロセスは、第１のドナーミニバンク内の選択された最適合ドナーの数を、その方法の各サイクル後に１ずつ増加させる。次いで、そのプロセスは、選択された最適合ドナーとのＨＬＡ適合に従ってその方法の各サイクル後に患者集団内の複数の見込み患者の数を減少させる。そのプロセスは、第１の見込み患者集団の所望のパーセンテージ（例えば、５％未満）が複数の見込み患者に残るまで又はドナープールにドナーが残らなくなるまで反復される。いくつかの実施形態において、そのプロセスは、見込み患者の９５％超が適合し、カバーされるまで反復される。

特定の実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞の第１のドナーミニバンクを構築する際に使用するための適切なドナーを特定するそのような方法は、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物を構築する際に使用するための適切なドナーを特定する際に同様に利用される。例えば、いくつかの実施形態では、本方法は、第１のドナープールからの第１の複数のドナー候補の各々のＨＬＡ型を決定すること、又は決定したことを含む。いくつかの実施形態では、本方法は、第１の見込み患者集団由来の第１の複数の見込み患者のそれぞれのＨＬＡ型を決定すること、又は決定したことを含む。いくつかの実施形態では、本方法は、第１のドナープール由来の第１の複数のドナー候補の各々のＨＬＡ型を、第１の見込み患者集団由来の第１の複数の見込み患者の各々と比較することを含む。いくつかの実施形態では、本方法は、第１の複数の見込み患者における最大数の患者と２つ以上のアレルの一致を有する第１のドナープール由来のドナーとして定義される、第１の最適合ドナーを決定することを含む。いくつかの実施形態では、本方法は、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物に含めるために、第１の最適合ドナーを選択することを含む。

いくつかの実施形態では、本方法は、第１のドナープールから第１の最適合ドナーを除去し、それによって、第１のドナープールから第１の最適合ドナーを除く第１の複数のドナー候補の各々からなる第２のドナープールを生成することを含む。いくつかの実施形態では、本方法は、第１の複数の見込み患者から、第１の最適合ドナーと２つ以上のアレルの一致を有する各見込み患者を除去することを含む。次いで、第１の最適合ドナーとの２つ以上のアレル一致を有する各見込み患者を除く第１の複数の見込み患者の各々からなる第２の複数の見込み患者が生成される。いくつかの実施形態では、本方法は、まだ除去されていない全てのドナー及び見込み患者について、本明細書に記載される工程及びプロセス（例えば、第１のドナープール由来の第１の複数のドナー候補の各々のＨＬＡ型を、第１の見込み患者集団由来の第１の複数の見込み患者の各々と比較すること、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物について最大一致を決定及び選択すること、第１のドナープールから、第１の最適合ドナー及び見込み患者を除去すること）を繰り返すことを含む。

各反復プロセスは、追加の最適合ドナーの選択、及びその後の最適合ドナーと２つ以上のアレル一致を有する各見込み患者の除去を可能にする。本明細書に記載されるプロセスは、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物における使用のための選択された最適合ドナーの数を、方法の各サイクル後に１つずつ順次増加させる。次いで、本プロセスは、選択された最適合ドナーとのそれらのＨＬＡ適合に従って、方法の各サイクル後に患者集団における複数の見込み患者の数を枯渇させる。本プロセスは、第１の見込み患者集団の所望の割合（例えば、５％未満）が複数の見込み患者に残るまで、又はドナープールにドナーが残らなくなるまで、繰り返される。いくつかの実施形態では、見込み患者の９５名％超が適合され、カバーされるまで、プロセスが繰り返される。ドナー細胞は、次いで、例えば、当技術分野において公知の又は本明細書において開示される方法を使用して、抗原特異的Ｔ細胞株を産生するために処理され得る。いくつかの実施形態では、次いで、そのような抗原特異的Ｔ細胞株を一緒にプールして、本明細書に記載のユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物を生成することができる。

ウイルス感染症は、同種異系造血幹細胞移植（アロＨＳＣＴ）の後の罹患及び死亡の重大な原因である。ウイルスの再活性化は、無形成の相対免疫不全又は絶対免疫不全の間、及びアロＨＳＣＴ後の免疫抑制療法中に起きる可能性が高い。サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、ＢＫウイルス（ＢＫＶ）及びアデノウイルス（ＡｄＶ）をはじめとしたウイルス病原体に関連する感染症は、アロＨＳＣＴ後にますます問題になり、有意な罹患及び死亡に関連する。

一般的な感染症のうち、依然としてＣＭＶが、同種異系造血幹細胞移植（ＨＳＣＴ）後の最も臨床的に有意な感染症である。ＣｅｎｔｅｒｆｏｒＩｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌＢｌｏｏｄａｎｄＭａｒｒｏｗＴｒａｎｓｐｌａｎｔＲｅｓｅａｒｃｈ（ＣＩＢＭＴＲ）データは、ＣＭＶ血清陽性のＨＳＣＴレシピエントの３０％超において、移植後初期のＣＭＶの再活性化が起き、その結果、大腸炎、網膜炎、肺臓炎及び死亡がもたらされ得ることを示している。ガンシクロビル、バルガンシクロビル、レテルモビル、ホスカルネット及びシドフォビルをはじめとした抗ウイルス剤は、予防的と治療的の両方で使用されているが、それらは必ずしも有効でなく、骨髄抑制、腎毒性及び究極的には非再発死亡を含む有意な毒性と関連する。依然として免疫再構成が感染制御にとって最も重要であるので、エクスビボで拡大／単離されたＣＭＶ特異的Ｔ細胞（ＣＭＶＳＴ）の養子移入が、抗ウイルスの利点を提供する有効な手段として台頭してきた。

ＣＭＶを標的とする初期の免疫療法は、幹細胞ドナー由来のＴ細胞製品に焦点が当てられ、２０年を超える一連の学術的な第Ｉ／ＩＩ相試験において、安全性と有効性の両方が証明された。しかしながら、その治療の個別性並びにウイルス免疫ドナー（ｖｉｒｕｓ－ｉｍｍｕｎｅｄｏｎｏｒｓ）の必要性（ウイルス無感作である可能性が高いより若いドナーを用いる利点を考えると重要な課題）が、広く実施することを妨げる障害として現れてきた。したがって、より最近では、臨床で必要になる前に将来を見越して調製し、バンク化（ｂａｎｋｅｄ）できる、部分的にＨＬＡが適合する第三者由来のウイルス特異的Ｔ細胞（ＶＳＴ）が治療様式の１つとして研究されている。これらのＶＳＴは、薬物抵抗性の感染症／疾患を有する１５０名を超えるＨＳＣＴレシピエント又は臓器移植（ＳＯＴ）レシピエントにおいて、エプスタイン・バーウイルス、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＨＨＶ６及びＢＫウイルスを含む範囲のウイルスに対して完全かつ効果的であると証明されている。これらの研究により、重要な研究及びその後の商品化に向けて「既製」のウイルス特異的Ｔ細胞を前進させることへの関心が促され、残った疑問は、（ｉ）多様な移植集団に対応するために必要な細胞株の数、及び（ｉｉ）臨床的有用性を保証するための株選択の基準の確立に関するものだった。

さらに、潜伏ＢＫＶ（ポリオーマウイルス科のメンバー）の再活性化によって引き起こされる感染症の出現は、ＨＳＣＴ患者では重症の臨床疾患の原因となる。同種異系ＨＳＣＴ後のＢＫＶ感染の主な臨床症状は、出血性膀胱炎（ＢＫ－ＨＣ）である。これは、同種異系ＨＳＣＴレシピエントの最大２５％に起き、持続的な麻酔薬注入を必要とする重症のしばしば消耗性の腹痛を伴う肉眼的血尿として現れる。健康個体では、Ｔ細胞免疫が、ウイルスから防御する。アロＨＳＣＴレシピエントでは、強力な免疫抑制性レジメン（及びその後の関連する免疫低下）を使用すると、患者は重症のウイルス感染症にかかりやすくなる。

呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、インフルエンザ、パラインフルエンザウイルス（ＰＩＶ）及びヒトメタニューモウイルス（ｈＭＰＶ）をはじめとした市中感染の呼吸器系ウイルス（ＣＡＲＶ）に起因する呼吸器系ウイルス感染症は、同種異系造血幹細胞移植（アロＨＳＣＴ）レシピエントの最大４０％において検出され、それらのレシピエントでは、それらのウイルスは、致死的であり得る細気管支炎及び肺炎などの重度の疾患を引き起こす恐れがある。ＲＳＶ誘発性の細気管支炎は、１歳未満の小児における入院の最も一般的な理由であるが、疾病管理センター（ＣＤＣ）は、インフルエンザが毎年、世界中で最大３５６０万人が罹患し、１４０，０００～７１０，０００人が入院し、米国だけでもおよそ８７１億ドルの年間コストが疾患管理にかかり、１２，０００～５６，０００人が死亡していると推定している。

本開示は、エクスビボで拡大された遺伝的に改変されていないウイルス特異的Ｔ細胞（ＶＳＴ）を投与することによってＴ細胞免疫の修復を提供して、移植患者自身の免疫系が回復するまでの期間にわたってウイルス感染症を制御し、症状を除去する。いかなる理論にも拘束されることを望むものではないが、ＶＳＴは、ウイルス由来のペプチドを提示している標的細胞上に発現された主要組織適合遺伝子複合体（ＭＨＣ）分子に結合する天然のＴ細胞レセプター（ＴＣＲ）を介してウイルス感染細胞を認識し、殺傷する。特定の実施形態において、本開示は、本明細書に記載のＵＶＳＴの投与によるＴ細胞免疫の回復を提供する。本明細書に記載のＶＳＴ組成物のいずれも、十分なＨＬＡ多様性を有する２つ以上のＶＳＴ組成物を一緒にプールすることによって、単にＵＶＳＴ組成物に製剤化することもできる（例えば、前記ＶＳＴ株は少なくとも２つの別々のドナーに由来するドナー材料に由来し、各ドナーのＨＬＡ型は、少なくとも１つのＨＬＡアレルにおいて少なくとも１名の他のドナーとは異なる）。

いくつかの実施形態において、プレスクリーニングされた血清陽性の健康ドナーから獲得された末梢血単核球（ＰＢＭＣ）由来のＶＳＴが提供される。いくつかの実施形態では、部分的にＨＬＡに適合する「既製」製品として入手可能で健康な、事前スクリーニングされた血清陽性ドナーから入手された末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）由来のＵＶＳＴが提供され、これらはＨＬＡ部分適合の「既製」品として入手可能である。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＵＶＳＴは、少なくともＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫウイルス、ＨＨＶ６、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ、ボカウイルス、コロナウイルス、ＬＣＭＶ、ムンプス、麻疹、メタニューモウイルス、パルボウイルスＢ、ロタウイルス、西ナイルウイルス、スペインインフルエンザ、又はそれらの組み合わせに応答する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＶＳＴは、少なくともＥＢＶ、ＣＭＶ、ＡｄＶ、ＢＫＶ及びＨＨＶ６に応答する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＵＶＳＴは、少なくともＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ、及びメタニューモウイルスに応答する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＵＶＳＴは、少なくともコロナウイルス（例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２）に応答する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＵＶＳＴは、少なくともＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ、メタニューモウイルス及びコロナウイルス（例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２）に応答する。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のＵＶＳＴは、少なくともＢ型肝炎（ＨＢＶ）に応答する。いくつかの実施形態において、本明細書に記載のＵＶＳＴは、少なくともヒトヘルペスウイルス－８に応答する。

いくつかの実施形態において、ＶＳＴは、ＨＳＣＴが生着し、免疫系が再配置された後、患者が免疫能を回復するまでだけ循環するようにデザインされる。理論に拘束されることを望むものではないが、本明細書中に記載されるようなＶＳＴ及び方法は、患者が移植を受けて、内在性の免疫応答を開始させることができるようになるまで、免疫無防備状態の患者にＴ細胞免疫を提供する「免疫学的な橋渡し治療」である。

実施形態において、本明細書に提供される方法は、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品及び／又は多様なＨＬＡ型のドナーから生成された２つ以上の抗原特異的Ｔ細胞株（例えば、本明細書に提供されるドナーミニバンク又はドナーバンクからの２つ以上の抗原特異的Ｔ細胞株）を患者に予防的に投与することを含む。実施形態において、２つ以上の抗原特異的Ｔ細胞株の予防的投与は、単回の投与セッションで行われる。実施形態において、本方法は、ＵＶＳＴを予防的に投与することを含む。予防的投与は、Ｔ細胞製品を投与されたときに、患者が活性ウイルス感染又は潜伏ウイルスの再活性化の証拠を示さないような投与である。例えば、実施形態において、患者は、１つ以上のウイルスに特異的なＵＶＳＴ製品を投与され、ここで、患者は１つ以上のウイルスに関して活動性感染を有さないか、又は患者はいかなる活動性ウイルス感染も有さない。実施形態において、患者は、Ｔ細胞株が投与されたときに、検出可能なウイルス血症又はウイルス尿症を有さない。

実施形態において、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品及び／又は多様なＨＬＡ型のドナーから生成された２つ以上の抗原特異的Ｔ細胞株（例えば、本明細書において提供されるドナーミニバンク又はドナーバンク由来の２つ以上の抗原特異的Ｔ細胞株）は、Ｔ細胞が特異性を有する活動性ウイルス感染の非存在下で、レシピエント患者において持続し、増殖能力を保持することができる。さらに、実施形態において、Ｔ細胞株は、患者への投与後数週間持続することができ、次いで、それらが特異的である１つ以上のウイルスに感染するか、又はそれを再活性化するとすぐに増殖することができる。いくつかの実施形態では患者におけるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品及び／又は多様なＨＬＡ型のドナーから生成された２つ以上の抗原特異的Ｔ細胞株（例えば、本明細書に提供されるドナーミニバンク又はドナーバンクからの２つ以上の抗原特異的Ｔ細胞株）の持続性は、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品及び／又は２つ以上の抗原特異的Ｔ細胞株を作製する際に利用した１つ以上の抗原を含有するブースターワクチンを患者に投与することによって増加する。したがって、本開示は、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品及び／又は本明細書に提供されるドナーミニバンク又はドナーバンク由来のＴ細胞株を使用して、同種異系環境におけるウイルス感染又は潜在性ウイルスの再活性化を予防又は制御するための非常に効率的な方法を提供する。特に、本明細書において提供される方法及び組成物は、高リスクの患者、例えば同種異系ＨＳＣＴのレシピエントである患者において、危険なウイルス感染に対して、即時利用可能で、安全で、かつ有効な防御を提供する。

（ウイルス抗原）
本開示のいくつかの実施形態では、生成された抗原特異的Ｔ細胞は、ウイルス感染症、細菌感染症、又は真菌感染症を含む病原性の感染症を有するか又は有するリスクがある個体に提供される。本開示のいくつかの実施形態において、生成されたユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物は、ウイルス感染症、細菌感染症又は真菌感染症をはじめとした病原性の感染症を有するか又は有するリスクがある個体に提供される。その個体は、免疫系に欠陥を有しているかもしれないし、有していないかもしれない。場合によっては、その個体は、器官移植又は幹細胞移植（造血幹細胞移植を含む）の後のウイルス感染症、細菌感染症又は真菌感染症を有するか、又は癌を有するか、又は例えば癌の処置に供されたことがある。場合によっては、その個体は、後天性免疫系不全の後の感染症を有する。

上記個体における感染症は、任意の種類であり得るが、具体的な実施形態では、その感染症は、１つ以上のウイルスの結果である。病原性のウイルスは、任意の種類であり得るが、具体的な実施形態では、それは、以下の科のうちの１つに由来する：アデノウイルス科、ピコルナウイルス科、ヘルペスウイルス科、ヘパドナウイルス科、フラビウイルス科、レトロウイルス科、オルトミクソウイルス科、パラミクソウイルス科、パポバウイルス科、ポリオーマウイルス科、ラブドウイルス科又はトガウイルス科。いくつかの実施形態において、ウイルスは、免疫優性の抗原又は準優位な抗原を生成するか、又は両方の種類を生成する。具体的な場合において、ウイルスは、ＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫウイルス、ＨＨＶ６、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ、ボカウイルス、コロナウイルス、ＬＣＭＶ、ムンプス、麻疹、メタニューモウイルス、パルボウイルスＢ、ロタウイルス、西ナイルウイルス、スペインインフルエンザ及びそれらの組み合わせからなる群より選択される。

いくつかの態様において、感染症は、ある病原菌の結果であり、本発明は、任意のタイプの病原菌に適用可能である。例示的な病原菌としては、少なくともＭｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｌｅｐｒａｅ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍｂｏｔｕｌｉｎｕｍ、Ｂａｃｉｌｌｕｓａｎｔｈｒａｃｉｓ、Ｙｅｒｓｉｎｉａｐｅｓｔｉｓ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａｐｒｏｗａｚｅｋｉｉ、連鎖球菌属、シュードモナス属、シゲラ属、カンピロバクター属及びサルモネラ属が挙げられる。

いくつかの態様において、感染症は、病原性真菌の結果であり、本発明は、任意のタイプの病原性真菌に適用可能である。例示的な病原性真菌としては、少なくともカンジダ属、アスペルギルス属、クリプトコッカス属、ヒストプラズマ属、ニューモシスチス属又はスタキボトリス属が挙げられる。いくつかの実施形態において、ウイルス抗原は、本開示に記載されるような使用に適した任意の抗原であり得る。

（腫瘍抗原）
癌の処置及び／又は予防のためにＴＡＡ特異的又はマルチＴＡＡ特異的な抗原特異的Ｔ細胞を使用する実施形態では、種々のＴＡＡが標的とされ得る。ＴＡＡ特異的又は多重ＴＡＡ特異的ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物が癌の処置及び／又は予防のために使用される実施形態では、様々なＴＡＡが標的化され得る。腫瘍抗原は、宿主において免疫応答を引き起こす、腫瘍細胞において産生される物質である。腫瘍抗原は、宿主において免疫応答を引き起こす、腫瘍細胞において産生される物質である。本明細書中で使用されるとき、用語「腫瘍抗原」と「腫瘍関連抗原」と「ＴＡＡ」とは交換可能に使用される。したがって、これらの用語は、腫瘍特異的抗原（腫瘍細胞上でのみ発現されている抗原であって、健康な細胞上では発現されていない抗原）と、腫瘍細胞上でアップレギュレート／過剰発現されていて、腫瘍細胞に特異的ではない腫瘍関連抗原の両方を包含する。

腫瘍抗原の具体例としては、例えば少なくともＣＥＡ、ＭＨＣ、ＣＴＬＡ－４、ｇｐ１００、メソテリン、ＰＤ－Ｌ１、ＴＲＰ１、ＣＤ４０、ＥＧＦＰ、Ｈｅｒ２、ＴＣＲアルファ、ｔｒｐ２、ＴＣＲ、ＭＵＣ１、ｃｄｒ２、ｒａｓ、４－１ＢＢ、ＣＴ２６、ＧＩＴＲ、ＯＸ４０、ＴＧＦ－α．ＷＴ１、ＭＵＣ１、ＬＭＰ２、ＨＰＶＥ６Ｅ７、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＨＥＲ－２／ｎｅｕ、ＭＡＧＥＡ３、ｐ５３非変異体、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＳＭＡ、ＧＤ２、ＭｅｌａｎＡ／ＭＡＲＴ１、Ｒａｓ変異体、ｇｐ１００、ｐ５３変異体、プロテイナーゼ３（ＰＲ１）、ｂｃｒ－ａｂｌ、チロシナーゼ、サバイビン、ＰＳＡ、ｈＴＥＲＴ、ＥｐｈＡ２、ＰＡＰ、ＭＬ－ＩＡＰ、ＡＦＰ、ＥｐＣＡＭ、ＥＲＧ（ＴＭＰＲＳＳ２ＥＴＳ融合遺伝子）、ＮＡ１７、ＰＡＸ３、ＡＬＫ、アンドロゲンレセプター、サイクリンＢ１、ポリシアル酸、ＭＹＣＮ、ＲｈｏＣ、ＴＲＰ－２、ＧＤ３、フコシルＧＭ１、メソテリン、ＰＳＣＡ、ＭＡＧＥＡ１、ｓＬｅ（ａ）、ＣＹＰ１Ｂ１、ＰＬＡＣ１、ＧＭ３、ＢＯＲＩＳ、Ｔｎ、ＧｌｏｂｏＨ、ＥＴＶ６－ＡＭＬ、ＮＹ－ＢＲ－１、ＲＧＳ５、ＳＡＲＴ３、ＳＴｎ、炭酸脱水酵素ＩＸ、ＰＡＸ５、ＯＹ－ＴＥＳ１、精子タンパク質１７、ＬＣＫ、ＨＭＷＭＡＡ、ＡＫＡＰ－４、ＳＳＸ２、ＸＡＧＥ１、Ｂ７Ｈ３、レグマイン、Ｔｉｅ２、Ｐａｇｅ４、ＶＥＧＦＲ２、ＭＡＤ－ＣＴ－１、ＦＡＰ、ＰＤＧＦＲ－β、ＭＡＤ－ＣＴ－２及びＦｏｓ関連抗原１が挙げられる。いくつかの実施形態において、腫瘍抗原は、本開示に記載されるような使用に適した任意の抗原であり得る。

例示的な癌としては、固形腫瘍又は血液悪性腫瘍である癌が挙げられる。実施形態において、癌は、肺癌（例えば、非小細胞肺癌、小細胞肺癌、扁平上皮肺癌、又は大細胞肺癌）、頭頸部癌、中皮腫（例えば、悪性胸膜中皮腫）、膵臓癌（例えば、膵管腺癌、又は転移性膵管腺癌（ＰＤＡ））、食道癌、卵巣癌、子宮頸癌、卵管癌、乳癌、胃癌、結腸直腸癌、又は膀胱癌、黒色腫、又はそれらの任意の組み合わせからなる群から選択される。実施形態において、癌は、白血病又はリンパ腫である。実施形態において、癌は、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、マントル細胞リンパ腫（ＭＣＬ）、多発性骨髄腫、急性リンパ性白血病（ＡＬＬ）、ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞急性リンパ性白血病（ＢＡＬＬ）、Ｔ細胞急性リンパ性白血病（ＴＡＬＬ）、小リンパ球性性白血病（ＳＬＬ）、Ｂ細胞性前リンパ球性白血病、芽球性形質細胞性樹状細胞新生物、バーキットリンパ腫、びまん性大細胞型Ｂ細胞リンパ腫（ＤＬＢＣＬ）、慢性炎症を伴うＢＣＬ、慢性骨髄性白血病、骨髄増殖性新生物、濾胞性リンパ腫、小児濾胞性リンパ腫、有毛細胞白血病、小細胞性又は大細胞濾胞性リンパ腫、悪性リンパ増殖性疾患、ＭＡＬＴリンパ腫（粘膜関連リンパ組織の節外辺縁帯リンパ腫）、辺縁帯リンパ腫、骨髄異形成症候群、非ホジキンリンパ腫、形質芽細胞性リンパ腫、形質細胞性樹状細胞新生物、ワルデンシュトレームマクログロブリン血症、脾臓辺縁帯リンパ腫、脾臓リンパ腫／白血病、脾びまん性赤脾髄小型Ｂ細胞リンパ腫、有毛細胞白血病変異型、リンパ形質細胞性リンパ腫、重鎖疾患、形質細胞骨髄腫、骨の孤立性形質細胞腫、髄外性形質細胞腫、結節性辺縁帯リンパ腫、小児結節性辺縁帯リンパ腫、原発性皮膚濾胞中心リンパ腫、リンパ腫様肉芽腫症、原発性縦隔（胸腺）大Ｂ細胞リンパ腫、血管内大Ｂ細胞リンパ腫、ＡＬＫ＋大Ｂ細胞リンパ腫、ＨＨＶ８関連多中心性キャッスルマン病に生じる大Ｂ細胞リンパ腫、原発性滲出性リンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、及び分類不能リンパ腫からなる群より選択される。

（ペプミックスライブラリーの作製）
本発明のいくつかの実施形態では、ペプチドのライブラリーがＰＢＭＣに提供されて、抗原特異的Ｔ細胞が最終的に作製される。そのライブラリーは、特定の場合において、同じ抗原の一部又は全部を網羅するペプチドの混合物（「ペプミックス」）を含む。本発明において利用されるペプミックスは、ある特定の態様において、１５アミノ酸長のペプチドであって、互いに１１アミノ酸重複しているペプチドで構成されている、商業的に入手可能なペプチドライブラリー由来であり得る。場合によっては、それらは、合成的に作製され得る。例としては、ＪＰＴＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ（Ｓｐｒｉｎｇｆｉｅｌｄ，ＶＡ）製又はＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ（Ａｕｂｕｒｎ，ＣＡ）製のものが挙げられる。特定の実施形態において、それらのペプチドは、例えば、少なくとも７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４若しくは３５アミノ酸長又はそれ以上であり、具体的な実施形態において、例えば、少なくとも３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３又は３４アミノ酸長の重複がある。

いくつかの実施形態において、ペプミックスにおいて使用されるようなアミノ酸は、少なくとも８５％、少なくとも８６％、少なくとも８７％、少なくとも８８％、少なくとも８９％、少なくとも９０％、少なくとも９１％、少なくとも９２％、少なくとも９３％、少なくとも９４％、少なくとも９５％、少なくとも９６％、少なくとも９７％、少なくとも９８％、少なくとも９９、少なくとも９９．９％の純度（これらの間のすべての範囲及び部分的な範囲を含む）を有する。いくつかの実施形態において、ペプミックスにおいて本明細書中で使用されるようなアミノ酸は、少なくとも９０％の純度を有する。

異なるペプチドの混合物は、任意の比の異なるペプチドを含み得るが、いくつかの実施形態において、特定の各ペプチドは、別の特定のペプチドと実質的に同じ数でその混合物中に存在する。広範な特異性を有するマルチウイルス抗原特異的Ｔ細胞用のペプミックスを調製及び生成する方法は、ＵＳ２０１８／０１８７１５２（この全体が参照により援用される）に記載されている。

（ユニバーサルウイルス特異的Ｔ細胞組成物）
本開示は、臨床的に有意なウイルスに対する特異性を有する、血清陽性ドナー（例えば、本明細書中に開示されるドナー選択方法を介して選択されたドナー）から作製される、ポリクローナルなウイルス特異的Ｔ細胞組成物を含む。本開示はまた、複数のそのようなドナーから生成された複数のそのようなポリクローナルウイルス特異的Ｔ細胞組成物を含む、本明細書に開示されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物を含む。いくつかの実施形態において、臨床的に有意なウイルスとしては、ＥＢＶ、ＣＭＶ、ＡｄＶ、ＢＫＶ及びＨＨＶ６が挙げられ得るがこれらに限定されない。いくつかの実施形態において、ウイルス抗原は、ＢＫウイルス（ＶＰ１及びラージＴ）、ＡｄＶ（ヘキソン及びペントン）、ＣＭＶ（ＩＥ１及びｐｐ６５）、ＥＢＶ（ＬＭＰ２、ＥＢＮＡ１、ＢＺＬＦ１）及びＨＨＶ６（Ｕ９０、Ｕ１１及びＵ１４）由来の免疫原性抗原を網羅する。

本開示は、抗原特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団を含む組成物を提供する。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団は、複数のウイルス抗原を認識し得る。いくつかの実施形態において、複数のウイルス抗原は、パラインフルエンザウイルス３型（ＰＩＶ）由来の少なくとも１つの第１の抗原を含み得る。いくつかの実施形態において、複数のウイルス抗原は、１つ以上の第２のウイルス由来の少なくとも１つの第２の抗原を含み得る。いくつかの実施形態では、本開示はまた、本明細書に開示されるユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞組成物であって、複数のそのようなドナーから生成された複数のそのような抗原特異的Ｔ細胞を含む、組成物を含む。

いくつかの実施形態において、ポリクローナルなウイルス特異的Ｔ細胞組成物は、任意の臨床的に有意なウイルス又は臨床的に関連性のあるウイルスに対する特異性を有する。例えば、ポリクローナルなウイルス特異的Ｔ細胞組成物は、ＣＭＶ、ＢＫＶ、ＰＩＶ及びＲＳＶを含むウイルス抗原に特異性を有するＶＳＴを含むことができる。いくつかの実施形態において、ＵＶＳＴ組成物は、任意の臨床的に有意な又は関連するウイルスに対して特異性を有する。例えば、ＵＶＳＴ組成物は、ＣＭＶ、ＢＫＶ、ＰＩＶ、及びＲＳＶを含むウイルス抗原に対して特異性を有するＶＳＴを含むことができる。

いくつかの実施形態では、第１の抗原は、ＰＩＶ抗原Ｍであり得る。いくつかの実施形態では、第１の抗原は、ＰＩＶ抗原ＨＮであり得る。いくつかの実施形態では、第１の抗原は、ＰＩＶ抗原Ｎであり得る。いくつかの実施形態では、第１の抗原は、ＰＩＶ抗原Ｆであり得る。いくつかの実施形態では、第１の抗原は、ＰＩＶ抗原Ｍ、ＰＩＶ抗原ＨＮ、ＰＩＶ抗原Ｎ、及びＰＩＶ抗原Ｆの任意の組み合わせであり得る。いくつかの実施形態では、組成物は、１つの第１の抗原に対して特異性を有するＶＳＴを含むことができる。いくつかの実施形態では、組成物は、２つの第１の抗原に対して特異性を有するＶＳＴを含むことができる。いくつかの実施形態では、組成物は、３つの第１の抗原に対して特異性を有するＶＳＴを含むことができる。いくつかの実施形態では、組成物は、４つの第１の抗原に対して特異性を有するＶＳＴを含むことができる。いくつかの実施形態において、４つの第１の抗原は、ＰＩＶ抗原Ｍ、ＰＩＶ抗原ＨＮ、ＰＩＶ抗原Ｎ、及びＰＩＶ抗原Ｆを含み得る。

いくつかの実施形態において、１つ以上の第２のウイルスは、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）であり得る。いくつかの実施形態において、１つ以上の第２のウイルスは、インフルエンザであり得る。いくつかの実施形態において、１つ以上の第２のウイルスは、ヒトメタニューモウイルス（ｈＭＰＶ）であり得る。いくつかの実施形態において、１つ以上の第２のウイルスは、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、インフルエンザ及びヒトメタニューモウイルスを含み得る。いくつかの実施形態において、１つ以上の第２のウイルスは、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、インフルエンザ及びヒトメタニューモウイルスからなり得る。いくつかの実施形態において、１つ以上の第２のウイルスは、本明細書中に記載されるような任意の好適なウイルスから選択され得る。いくつかの実施形態では、ＵＶＳＴ組成物は、ＲＳＶ、インフルエンザ、又はｈＭＰＶのうちの１つ以上に対して特異性を有する。

いくつかの実施形態では、組成物は、２つ又は３つの第２のウイルスに対する特異性を有するＶＳＴを含むことができる。いくつかの実施形態では、組成物は、３つの第２のウイルスに対して特異性を有するＶＳＴを含むことができる。いくつかの実施形態において、３つの第２のウイルスは、インフルエンザ、ＲＳＶ、及びｈＭＰＶを含み得る。いくつかの実施形態では、組成物は、各第２のウイルスあたり少なくとも２つの第２の抗原に対して特異性を有するＶＳＴを含むことができる。いくつかの実施形態では、組成物は、１つの第２の抗原に対して特異性を有するＶＳＴを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、２つの第２の抗原に対して特異性を有するＶＳＴを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、３つの第２のの抗原に対して特異性を有するＶＳＴを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、４つの第２の抗原に対して特異性を有するＶＳＴを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、５つの第２の抗原に対して特異性を有するＶＳＴを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、６つの第２の抗原を含む。いくつかの実施形態では、組成物は、７つの第２の抗原に対して特異性を有するＶＳＴを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、８つの第２の抗原に対して特異性を有するＶＳＴを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、９つの第２の抗原に対して特異性を有するＶＳＴを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、１０個の第２の抗原に対して特異性を有するＶＳＴを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、１１個の第２の抗原に対して特異性を有するＶＳＴを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、１２個の第２の抗原に対して特異性を有するＶＳＴを含む。いくつかの実施形態では、組成物は、本明細書に記載の組成物に適しているであろう任意の数の第２の抗原に対する特異性を有するＶＳＴを含む。

いくつかの実施形態において、第２の抗原は、インフルエンザ抗原ＮＰ１であり得る。いくつかの実施形態において、第２の抗原は、インフルエンザ抗原ＭＰ１であり得る。いくつかの実施形態において、第２の抗原は、ＲＳＶ抗原Ｎであり得る。いくつかの実施形態において、第２の抗原は、ＲＳＶ抗原Ｆであり得る。いくつかの実施形態において、第２の抗原は、ｈＭＰＶ抗原Ｍであり得る。いくつかの実施形態において、第２の抗原は、ｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１であり得る。いくつかの実施形態において、第２の抗原は、ｈＭＰＶ抗原Ｆであり得る。いくつかの実施形態において、第２の抗原は、ｈＭＰＶ抗原Ｎであり得る。いくつかの実施形態において、第２の抗原は、インフルエンザ抗原ＮＰ１、インフルエンザ抗原ＭＰ１、ＲＳＶ抗原Ｎ、ＲＳＶ抗原Ｆ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１、ｈＭＰＶ抗原Ｆ及びｈＭＰＶ抗原Ｎの任意の組み合わせであり得る。

いくつかの実施形態において、第２の抗原は、インフルエンザ抗原ＮＰ１を含む。いくつかの実施形態において、第２の抗原は、インフルエンザ抗原ＭＰ１を含む。いくつかの実施形態において、いくつかの実施形態において、第２の抗原は、インフルエンザ抗原ＮＰ１とインフルエンザ抗原ＭＰ１の両方を含む。いくつかの実施形態において、第２の抗原は、ＲＳＶ抗原Ｎを含む。いくつかの実施形態において、第２の抗原は、ＲＳＶ抗原Ｆを含む。いくつかの実施形態において、第２の抗原は、ＲＳＶ抗原ＮとＲＳＶ抗原Ｆの両方を含む。

いくつかの実施形態において、第２の抗原は、ｈＭＰＶ抗原Ｍを含む。いくつかの実施形態において、第２の抗原は、ｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１を含む。いくつかの実施形態において、第２の抗原は、ｈＭＰＶ抗原Ｆを含む。いくつかの実施形態において、第２の抗原は、ｈＭＰＶ抗原Ｎを含む。いくつかの実施形態において、第２の抗原は、ｈＭＰＶ抗原ＭとｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１とｈＭＰＶ抗原ＦとｈＭＰＶ抗原Ｎとの組み合わせを含む。

いくつかの実施形態では、第２の抗原は、インフルエンザ抗原ＮＰ１、インフルエンザ抗原ＭＰ１、ＲＳＶ抗原Ｎ、ＲＳＶ抗原Ｆ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１、ｈＭＰＶ抗原Ｆ、ｈＭＰＶ抗原Ｎのそれぞれを含む。いくつかの実施形態では、複数の抗原は、ＰＩＶ抗原Ｍ、ＰＩＶ抗原ＨＮ、ＰＩＶ抗原Ｎ、ＰＩＶ抗原Ｆ、インフルエンザ抗原ＮＰ１、インフルエンザ抗原ＭＰ１、ＲＳＶ抗原Ｎ、ＲＳＶ抗原Ｆ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１、ｈＭＰＶ抗原Ｆ及びｈＭＰＶ抗原Ｎを含む。いくつかの実施形態では、複数の抗原は、ＰＩＶ抗原Ｍ、ＰＩＶ抗原ＨＮ、ＰＩＶ抗原Ｎ、ＰＩＶ抗原Ｆ、インフルエンザ抗原ＮＰ１、インフルエンザ抗原ＭＰ１、ＲＳＶ抗原Ｎ、ＲＳＶ抗原Ｆ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１、ｈＭＰＶ抗原Ｆ、及びｈＭＰＶ抗原Ｎを含む。いくつかの実施形態では、複数の抗原は、ＰＩＶ抗原Ｍ、ＰＩＶ抗原ＨＮ、ＰＩＶ抗原Ｎ、ＰＩＶ抗原Ｆ、インフルエンザ抗原ＭＰ１、ＲＳＶ抗原Ｎ、ＲＳＶ抗原Ｆ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１、ｈＭＰＶ抗原Ｆ、及びｈＭＰＶ抗原Ｎから本質的になる。いくつかの実施形態において、第２の抗原は、本明細書に記載の組成物のための任意の適切な抗原を含み得る。

いくつかの実施形態において、臨床的に有意なウイルスとしては、ＨＨＶ８が挙げられ得るがこれに限定されない。いくつかの実施形態において、ウイルス抗原は、ＨＨＶ８由来の免疫原性抗原を網羅する。いくつかの実施形態において、ＨＨＶ８由来の抗原は、ＬＡＮＡ－１（ＯＲＦ３）；ＬＡＮＡ－２（ｖＩＲＦ３、Ｋ１０．５）；ｖＣＹＣ（ＯＲＦ７２）；ＲＴＡ（ＯＲＦ５０）；ｖＦＬＩＰ（ＯＲＦ７１）；Ｋａｐｏｓｉｎ（ＯＲＦ１２、Ｋ１２）；ｇＢ（ＯＲＦ８）；ＭＩＲ１（Ｋ３）；ＳＳＢ（ＯＲＦ６）；ＴＳ（ＯＲＦ７０）及びそれらの組み合わせから選択される。

いくつかの実施形態において、臨床的に有意なウイルスとしては、ＨＢＶが挙げられ得るがこれに限定されない。いくつかの実施形態において、ウイルス抗原は、ＨＢＶ由来の免疫原性抗原を網羅する。いくつかの実施形態において、ＨＢＶ由来の抗原は、（ｉ）ＨＢＶコア抗原、（ｉｉ）ＨＢＶ表面抗原、並びに（ｉｉｉ）ＨＢＶコア抗原及びＨＢＶ表面抗原から選択される。

実施形態において、ＵＶＳＴ組成物は、任意の臨床的に有意な又は関連するウイルスに対して特異性を有する。例えば、ＵＶＳＴ組成物は、ＨＨＶ８及び／又はＨＢＶ由来の抗原を含むウイルス抗原に対して特異性を有するＶＳＴを含むことができる。

いくつかの実施形態において、臨床的に有意なウイルスとしては、コロナウイルスが挙げられ得るがこれに限定されない。いくつかの実施形態において、コロナウイルスは、α－コロナウイルス（α－ＣｏＶ）である。いくつかの実施形態において、コロナウイルスは、β－コロナウイルス（β－ＣｏＶ）である。いくつかの実施形態において、β－ＣｏＶは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２、ＭＥＲＳ－ＣｏＶ、ＨＣｏＶ－ＨＫＵ１及びＨＣｏＶ－ＯＣ４３から選択される。いくつかの実施形態において、コロナウイルスは、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２である。いくつかの実施形態において、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２抗原は、（ｉ）ｎｓｐ１；ｎｓｐ３；ｎｓｐ４；ｎｓｐ５；ｎｓｐ６；ｎｓｐ１０；ｎｓｐ１２；ｎｓｐ１３；ｎｓｐ１４；ｎｓｐ１５；及びｎｓｐ１６；（ｉｉ）スパイク（Ｓ）；エンベロープタンパク質（Ｅ）；マトリックスタンパク質（Ｍ）；及びヌクレオカプシドタンパク質（Ｎ）；並びに（ｉｉｉ）ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＡＰ３Ａ）；ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＮＳ７）；ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＮＳ８）；ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＯＲＦ１０）；ＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（ＯＲＦ９Ｂ）；及びＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２（Ｙ１４）からなる群より選択される１つ以上の抗原を含む。実施形態において、ＵＶＳＴ組成物は、コロナウイルス由来の抗原、例えば、ＳＡＲＳ－ＣｏＶ２を含むウイルス抗原に対して特異性を有するＶＳＴを含むことができる。

いくつかの実施形態では、組成物中の抗原特異的Ｔ細胞は、単核細胞（ＭＮＣ）を複数のペプミックスライブラリーと接触させることによって作製することができる。いくつかの実施形態において、組成物中の抗原特異的Ｔ細胞は、末梢血単核球（ＰＢＭＣ）を複数のペプミックスライブラリーと接触させることによって作製され得る。いくつかの実施形態において、各ペプミックスライブラリーは、ウイルス抗原の少なくとも一部を網羅する複数の重複ペプチドを含む。いくつかの実施形態において、複数のペプミックスライブラリーのうちの少なくとも１つは、ＰＩＶ由来の第１の抗原を網羅する。いくつかの実施形態において、複数のペプミックスライブラリーのうちの少なくとも１つの追加のペプミックスライブラリーは、第２の各抗原を網羅する。

いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞は、少なくとも１つのＤＮＡプラスミドでヌクレオフェクトされた樹状細胞（ＤＣ）とＴ細胞を接触させることによって作製され得る。いくつかの実施形態において、そのＤＮＡプラスミドは、ＰＩＶ抗原をコードし得る。いくつかの実施形態において、少なくとも１つのＤＮＡプラスミドは、第２の各抗原をコードする。いくつかの実施形態において、プラスミドは、少なくとも１つのＰＩＶ抗原及び少なくとも１つの第２の抗原をコードする。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は、ＣＤ４＋Ｔリンパ球及びＣＤ８＋Ｔリンパ球を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、αβＴ細胞レセプターを発現している抗原特異的Ｔ細胞を含む。いくつかの実施形態において、組成物は、ＭＨＣ拘束性の抗原特異的Ｔ細胞を含む。

いくつかの実施形態において、Ｔ細胞は、ＩＬ－１、ＩＬ－２、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ１７、ＩＬ１８及びＩＬ－２１から選択される１つ以上のサイトカインの存在下でエクスビボで培養され得る。実施形態において、Ｔ細胞は、ＩＬ－１、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ１７、ＩＬ１８及びＩＬ－２１から選択される１つ以上のサイトカインの存在下でエクスビボで培養され得る。実施形態において、Ｔ細胞は、ＩＬ－１、ＩＬ－４、ＩＬ－６、ＩＬ－７、ＩＬ－１２、ＩＬ－１５、ＩＬ１７、ＩＬ１８及びＩＬ－２１から選択される１つ以上のサイトカインの存在下でエクスビボで培養することができ、ここでサイトカインはＩＬ－２を含まない。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞は、ＩＬ－７とＩＬ－４の両方の存在下においてエクスビボで培養され得る。いくつかの実施形態において、マルチウイルス抗原特異的Ｔ細胞は、培養の９日以内、１０日以内、１１日以内、１２日以内、１３日以内、１４日以内、１５日以内、１６日以内、１７日以内、１８日以内、１９日以内、２０日以内（これらの間のすべての範囲及び部分的な範囲を含む）に十分に拡大し、患者への投与の準備が整う。いくつかの実施形態において、マルチウイルス抗原特異的Ｔ細胞は、本明細書中に記載されるような組成物に適した任意の日数以内に十分に拡大した。

本開示は、無視できる同種反応性を示す抗原特異的Ｔ細胞を含む組成物を提供する。いくつかの実施形態において、より活性化を示さない抗原特異的Ｔ細胞を含む組成物は、ある患者から収集された抗原特異的Ｔ細胞の細胞死を、同じ患者から収集された対応する抗原特異的Ｔ細胞の細胞死よりも誘導した。いくつかの実施形態において、その組成物は、ＩＬ－７とＩＬ－４の両方の存在下において培養されない。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞を含む組成物は、７０％を超える生存能を示す。

いくつかの実施形態において、組成物は、培養中の少なくとも１日間、少なくとも２日間、少なくとも３日間、少なくとも４日間、少なくとも５日間、少なくとも６日間、少なくとも７日間、少なくとも８日間、少なくとも９日間、少なくとも１０日間、細菌及び真菌に対して陰性である。いくつかの実施形態において、組成物は、培養中の少なくとも７日間、細菌及び真菌に対して陰性である。いくつかの実施形態において、組成物は、１ＥＵ／ｍｌ未満、２ＥＵ／ｍｌ未満、３ＥＵ／ｍｌ未満、４ＥＵ／ｍｌ未満、５ＥＵ／ｍｌ未満、６ＥＵ／ｍｌ未満、７ＥＵ／ｍｌ未満、８ＥＵ／ｍｌ未満、９ＥＵ／ｍｌ未満、１０ＥＵ／ｍｌ未満のエンドトキシンを示す。いくつかの実施形態において、組成物は、５ＥＵ／ｍｌ未満のエンドトキシンを示す。いくつかの実施形態において、組成物は、マイコプラズマに対して陰性である。

いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団を構築するために使用されるペプミックスは、化学的に合成される。いくつかの実施形態において、ペプミックスは、必要に応じて＞１０％、＞２０％、＞３０％、＞４０％、＞５０％、＞６０％、＞７０％、＞８０％、＞９０％（これらの間のすべての範囲及び部分的な範囲を含む）純粋である。いくつかの実施形態において、ペプミックスは、必要に応じて＞９０％純粋である。

いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞は、Ｔｈ１に極性化している。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞は、ウイルス抗原を発現している標的細胞を溶解することができる。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞は、他の好適なタイプの、抗原を発現している標的細胞を溶解することができる。いくつかの実施形態において、組成物中の抗原特異的Ｔ細胞は、感染していない標的自己細胞を有意に溶解しない。いくつかの実施形態において、組成物中の抗原特異的Ｔ細胞は、感染していない同種異系の自己標的細胞を有意に溶解しない。

本開示は、静脈内送達用に製剤化された任意の組成物を含む薬学的組成物（例えば、静脈内送達用に製剤化された本明細書中に記載されるドナーミニバンク由来の抗原特異的Ｔ細胞株を含む薬学的組成物）を提供する。いくつかの実施形態において、組成物は、培養中の少なくとも１、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８日間、少なくとも９日間、少なくとも１０日間、細菌に対して陰性である。いくつかの実施形態において、組成物は、培養中の少なくとも７日間、細菌に対して陰性である。いくつかの実施形態において、組成物は、培養中の少なくとも１、少なくとも２、少なくとも３、少なくとも４、少なくとも５、少なくとも６、少なくとも７、少なくとも８日間、少なくとも９日間、少なくとも１０日間、真菌に対して陰性である。いくつかの実施形態において、組成物は、培養中の少なくとも７日間、真菌に対して陰性である。

本薬学的組成物は、１ＥＵ／ｍｌ未満、２ＥＵ／ｍｌ未満、３ＥＵ／ｍｌ未満、４ＥＵ／ｍｌ未満、５ＥＵ／ｍｌ未満、６ＥＵ／ｍｌ未満、７ＥＵ／ｍｌ未満、８ＥＵ／ｍｌ未満、９ＥＵ／ｍｌ未満又は１０ＥＵ／ｍｌ未満のエンドトキシンを示す。いくつかの実施形態において、本薬学的組成物は、マイコプラズマに対して陰性である。

本開示は、標的細胞を溶解する方法を提供し、その方法は、標的細胞を、本明細書中に記載されるような組成物又は薬学的組成物（例えば、本明細書中に記載されるドナーミニバンク由来の抗原特異的Ｔ細胞株又は静脈内送達用に製剤化されたそのようなＴ細胞株を含む薬学的組成物）と接触させる工程を含む。いくつかの実施形態において、標的細胞と組成物又は薬学的組成物との接触は、被験体内のインビボで行われる。いくつかの実施形態において、標的細胞と組成物又は薬学的組成物との接触は、被験体への抗原特異的Ｔ細胞の投与を介してインビボで行われる。いくつかの実施形態において、被験体は、ヒトである。

本開示は、ウイルス感染症を処置又は予防する方法を提供し、その方法は、それを必要とする被験体に、本明細書中に記載されるような組成物又は薬学的組成物（例えば、本明細書中に記載されるドナーミニバンク由来の抗原特異的Ｔ細胞株又は静脈内送達用に製剤化されたそのようなＴ細胞株を含む薬学的組成物）を投与する工程を含む。いくつかの実施形態において、投与される抗原特異的Ｔ細胞の量は、５×１０^３～５×１０^９抗原特異的Ｔ細胞／ｍ^２、５×１０^４～５×１０^８抗原特異的Ｔ細胞／ｍ^２、５×１０^５～５×１０^７抗原特異的Ｔ細胞／ｍ^２、５×１０^４～５×１０^８抗原特異的Ｔ細胞／ｍ^２、５×１０^６～５×１０^９抗原特異的Ｔ細胞／ｍ^２（これらの間のすべての範囲及び部分的な範囲を含む）の範囲である。いくつかの実施形態において、抗原特異的Ｔ細胞が、被験体に投与される。いくつかの実施形態において、被験体は、免疫無防備状態である。いくつかの実施形態において、被験体は、急性骨髄性白血病を有する。いくつかの実施形態において、被験体は、急性リンパ芽球性白血病を有する。いくつかの実施形態において、被験体は、慢性肉芽腫症を有する。

いくつかの実施形態において、被験体は、１つ以上の病状を有し得る。いくつかの実施形態において、被験体は、抗原特異的Ｔ細胞を投与される前に、強度軽減移植前治療とともに適合血縁ドナー移植を受ける。いくつかの実施形態において、被験体は、抗原特異的Ｔ細胞を投与される前に、骨髄破壊的移植前治療とともに適合非血縁ドナー移植を受ける。いくつかの実施形態において、被験体は、抗原特異的Ｔ細胞を投与される前に、強度軽減移植前治療とともにハプロタイプ一致の移植を受ける。いくつかの実施形態において、被験体は、抗原特異的Ｔ細胞を投与される前に、骨髄破壊的移植前治療とともに適合血縁ドナー移植を受ける。いくつかの実施形態において、被験体は、臓器移植を受けたことがある。いくつかの実施形態において、被験体は、化学療法を受けたことがある。いくつかの実施形態において、被験体は、ＨＩＶに感染している。いくつかの実施形態において、被験体は、遺伝性免疫不全を有する。いくつかの実施形態において、被験体は、同種異系幹細胞移植を受けたことがある。いくつかの実施形態において、被験体は、このパラグラフに記載されているような１つより多い病状を有する。いくつかの実施形態において、被験体は、このパラグラフに記載されているようなすべての病状を有する。

いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は、被験体に複数回投与される。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は、被験体に１回より多く投与される。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は、被験体に２回より多く投与される。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は、被験体に３回より多く投与される。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は、被験体に４回より多く投与される。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は、被験体に５回より多く投与される。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は、被験体に６回より多く投与される。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は、被験体に７回より多く投与される。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は、被験体に８回より多く投与される。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は、被験体に９回より多く投与される。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は、被験体に１０回より多く投与される。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は、被験体に適した回数だけ被験体に投与される。

いくつかの実施形態において、組成物の投与は、被験体のウイルス感染症を効果的に処置又は予防する。いくつかの実施形態において、そのウイルス感染症は、パラインフルエンザウイルス３型である。いくつかの実施形態において、そのウイルス感染症は、呼吸器合胞体ウイルスである。いくつかの実施形態において、そのウイルス感染症は、インフルエンザである。いくつかの実施形態において、そのウイルス感染症は、ヒトメタニューモウイルスである。

本開示は、複数のウイルス抗原を認識する抗原特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団を含む組成物、及びそのような抗原特異的Ｔ細胞を含む複数の細胞株を含む本明細書中に記載されるようなドナーミニバンクを提供する。本開示は、複数のウイルス抗原が少なくとも１つの抗原を含むことを提供する。いくつかの実施形態において、その少なくとも１つの抗原は、パラインフルエンザウイルス３型（ＰＩＶ）であり得る。いくつかの実施形態において、その少なくとも１つの抗原は、呼吸器合胞体ウイルスであり得る。いくつかの実施形態において、その少なくとも１つの抗原は、インフルエンザであり得る。いくつかの実施形態において、その少なくとも１つの抗原は、ヒトメタニューモウイルスであり得る。

一部の実施形態では、本開示は、パラインフルエンザウイルス３型（ＰＩＶ）呼吸器合胞体ウイルス、インフルエンザ、及びヒトメタニューモウイルスのそれぞれからの少なくとも１つの抗原を含む複数のウイルス抗原を認識する抗原特異的Ｔ細胞のポリクローナル集団、並びにかかる抗原特異的Ｔ細胞を含む複数の細胞株を含む本明細書に記載のドナーミニバンクを提供する。いくつかの実施形態では、本開示は、複数のウイルス抗原が、パラインフルエンザウイルス３型（ＰＩＶ）呼吸器合胞体ウイルス、インフルエンザ、及びヒトメタニューモウイルスのそれぞれからの少なくとも２つの抗原を含んでなる、複数のウイルス抗原を認識する抗原特異的Ｔ細胞のポリクローン集団、並びに、そのような抗原特異的Ｔ細胞を含む複数の細胞株を含む本明細書に記載のドナーミニバンクを提供する。

いくつかの実施形態では、複数の抗原は、ＰＩＶ抗原Ｍ、ＰＩＶ抗原ＨＮ、ＰＩＶ抗原Ｎ、ＰＩＶ抗原Ｆ、インフルエンザ抗原ＮＰ１、インフルエンザ抗原ＭＰ１、ＲＳＶ抗原Ｎ、ＲＳＶ抗原Ｆ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１、ｈＭＰＶ抗原Ｆ、及びｈＭＰＶ抗原Ｎから構成される。いくつかの実施形態では、複数の抗原は、ＰＩＶ抗原Ｍ、ＰＩＶ抗原ＨＮ、ＰＩＶ抗原Ｎ、ＰＩＶ抗原Ｆ、インフルエンザ抗原ＮＰ１、インフルエンザ抗原ＭＰ１、ＲＳＶ抗原Ｎ、ＲＳＶ抗原Ｆ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ、ｈＭＰＶ抗原Ｍ２－１、ｈＭＰＶ抗原Ｆ、及びｈＭＰＶ抗原Ｎのいずれかから選択されることができる。

いくつかの実施形態において、本開示は、静脈内送達用に製剤化された本明細書中に記載されるような組成物を含む薬学的組成物を提供する。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は、細菌に対して陰性である。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は、真菌に対して陰性である。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は、培養中の少なくとも１日間、少なくとも２日間、少なくとも３日間、少なくとも４日間、少なくとも５日間、少なくとも６日間、少なくとも７日間、少なくとも８日間、少なくとも９日間、少なくとも１０日間、細菌又は真菌に対して陰性である。いくつかの実施形態において、本明細書中に記載されるような組成物は、培養中の少なくとも７日間、細菌又は真菌に対して陰性である。

いくつかの実施形態において、静脈内送達用に製剤化された薬学的組成物は、１ＥＵ／ｍｌ未満、２ＥＵ／ｍｌ未満、３ＥＵ／ｍｌ未満、４ＥＵ／ｍｌ未満、５ＥＵ／ｍｌ未満、６ＥＵ／ｍｌ未満、７ＥＵ／ｍｌ未満、８ＥＵ／ｍｌ未満、９ＥＵ／ｍｌ未満又は１０ＥＵ／ｍｌ未満のエンドトキシンを示す。いくつかの実施形態において、静脈内送達用に製剤化された薬学的組成物は、マイコプラズマに対して陰性である。

実施例１．ＣＭＶ特異的ＶＳＴ（ＣＭＶＳＴ）のドナーバンクの構築
ＣＭＶＳＴ作製用のドナーの選択：臨床的に有効な株を同種異系ＨＳＣＴ患者集団の大部分に提供できることを確実なものとするために、本発明者らは、所与の患者集団用の細胞療法製品を作製するために所与のドナープールから最良のドナーになり得るドナーを選択するためのドナー選択アルゴリズムを開発した。概して米国と類似の多様な人種構成を有するヒューストン地方（ＨｏｕｓｔｏｎＭｅｔｈｏｄｉｓｔ又はＴｅｘａｓＣｈｉｌｄｒｅｎ’ｓＨｏｓｐｉｔａｌ）において処置された６６６人の同種異系ＨＳＣＴレシピエントのＨＬＡ型を解析した。次いで、これらのＨＳＣＴレシピエントのＨＬＡを、多様で健康な適格のＣＭＶ血清陽性ドナーのプールのＨＬＡ型と比較した。最初の工程（図２、工程＃１）において、全体のドナープール内の各健康ドナーのＨＬＡ型を、患者プール内の各患者のＨＬＡ型と個別に比較し、最も適合度の高いドナー（本明細書中で「最適合ドナー」とも呼ぶ）を、患者プール内の最も多くの患者と少なくとも２つのＨＬＡアレルにおいて適合するドナーであると特定した（図２、工程＃２）。このドナーを全体のドナープールから除去し、また、このドナーによって対応される（すなわち、そのドナーと少なくとも２つのＨＬＡアレルにおいて適合する）すべての患者を、患者集団内の他の非適合患者から除去した。これにより、ドナープールは、ドナーが１名減り、非適合患者集団は、２つ以上のＨＬＡアレルにおいて第１のドナーと適合する患者の数だけ患者が減った（図２、工程＃３）。続いて、これらの工程を２回目、３回目などと、解析される患者集団内の患者の少なくとも９５％をカバーする（すなわち、それらの患者の少なくとも９５％と少なくとも２つのＨＬＡアレルにおいて適合する）ドナーのパネルが作製されるまで反復し（図１０）、その都度、その時点において非適合患者集団内に残っている最も多くの患者と少なくとも２つのＨＬＡアレルにおいて適合する、残りのドナープール内のドナーを特定し、その後の考慮からそのドナーと、そのドナーと適合するそれらのすべての患者の両方を除去した（図４～９）。その第１のドナーパネルを、ウイルス特異的Ｔ細胞の第１のミニバンクの構築において使用するために取っておいた。

この時点において、第１のドナーミニバンクの構築において非適合患者集団から除去された患者のすべてを患者集団に再導入し（しかし、先に除去されたどのドナーも全体のドナー集団に再導入しなかった）、次いで、この手順を２回目として反復して、解析される患者集団内の患者の少なくとも９５％をカバーする（すなわち、それらの患者の少なくとも９５％と少なくとも２つのＨＬＡアレルにおいて適合する）第２のドナーパネルを特定し、それにより、第２のドナーミニバンクを作製した。これにより、患者は、別個のドナーミニバンクにおいて１名より多い十分に適合するドナー候補オプションが手に入ることが確実になった。このモデルを使用すれば、たった８名の十分に選択されたドナーで、少なくとも２つのＨＬＡ抗原において適合するＴ細胞製品が患者集団の＞９５％に提供され得ることが見出され；この場合、ドナープールをさらに大きくしても、適合数は有意に増加しなかった。次いで、この多様な同種異系ＨＳＣＴレシピエント集団の≧９５％に対してＣＭＶ活性が確認された、カバー度が好適なＣＭＶＳＴ株（≧２の共有ＨＬＡ抗原）を提供する目的で、これらの８名のドナーを選択した。

第三者ＣＭＶＳＴバンクの調製：すべてのドナーに、ＩＲＢが承認したプロトコルについて書面によるインフォームドコンセントを行い、これらの全ドナーが血液バンクの適格基準を満たした。製造に向けて、末梢血の採血によって血液単位を回収し、フィコール勾配によってＰＢＭＣを単離した。１０×１０^６個のＰＢＭＣをＧ－Ｒｅｘ５バイオリアクター（ＷｉｌｓｏｎＷｏｌｆ，Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ）に播種し、８００Ｕ／ｍｌのＩＬ４及び２０ｎｇ／ｍｌのＩＬ７（Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ，Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ）及びＩＥ１、ｐｐ６５ペプミックス（２ｎｇ／ペプチド／ｍｌ）（ＪＰＴＰｅｐｔｉｄｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓＢｅｒｌｉｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を含むＴ細胞培地［ＡｄｖａｎｃｅｄＲＰＭＩ１６４０（ＨｙＣｌｏｎｅＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓＩｎｃ．Ｌｏｇａｎ，Ｕｔａｈ）、４５％Ｃｌｉｃｋ’ｓ（ＩｒｖｉｎｅＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，ＳａｎｔａＡｎａ，ＣＡ）、２ｍＭＧｌｕｔａＭＡＸ^ＴＭ］ＴＭ－Ｉ（ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓＧｒａｎｄＩｓｌａｎｄ，ＮＹ）及び１０％ウシ胎児血清（Ｈｙｃｌｏｎｅ）］中で培養した。開始後９～１２日目に、Ｔ細胞を収集し、計数し、Ｇ－Ｒｅｘ－１００ＭにおいてＩＬ４（８００Ｕ／ｍｌ）及びＩＬ７（２０ｎｇ／ｍｌ）とともに、ペプミックスでパルスされた照射済みの自己ＰＢＭＣ［１：４エフェクター：ターゲット（Ｅ：Ｔ）－４×１０^５ＣＭＶＳＴ：１．６×１０^６照射ＰＢＭＣ／ｃｍ２］で再刺激した。培養の３～４日目に、細胞に２００ｎｇ／ｍｌのＩＬ２（ＰｒｏｍｅｔｈｅｕｓＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡ）を供給し、２回目の刺激の９～１２日後に、Ｔ細胞を凍結保存に向けて収集した。凍結保存時に、各株を微生物学的に試験し、免疫表現型を決定し［ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ１４、ＣＤ１６、ＣＤ１９、ＣＤ２５、ＣＤ２７、ＣＤ２８、ＣＤ４５、ＣＤ４５ＲＡ、ＣＤ５６、ＣＤ６２ＬＣＤ６９、ＣＤ８３、ＨＬＡＤＲ及び７ＡＡＤ（ＢｅｃｔｏｎＤｉｃｋｉｎｓｏｎ，ＦｒａｎｋｌｉｎＬａｋｅｓ，ＮＪ）］、ＩＦＮγ酵素結合イムノスポット（ＥＬＩＳｐｏｔ）アッセイによってウイルス特異性について評価した。ＩＦＮγ ＥＬＩＳｐｏｔアッセイによって計測した反応性細胞の頻度が、＞３０スポット形成細胞（ＳＦＣ）／２×１０^５投入ウイルス特異的Ｔ細胞だったとき、その細胞株を「反応性」と定義した。

臨床試験デザイン：これは、食品医薬品局（ＦＤＡ）のＩＮＤの下で行われ、ＢａｙｌｏｒＣｏｌｌｅｇｅｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅＩｎｓｔｉｔｕｔｉｏｎａｌＲｅｖｉｅｗＢｏａｒｄ（ＩＲＢ）によって承認された、単一施設第Ｉ相試験（ＮＣＴ０２３１３８５７）だった。この試験は、ガンシクロビル、ホスカルネット又はシドフォビルによる処置と定義される標準的治療にもかかわらずＣＭＶ感染症又は少なくとも７日間持続していた疾患を有する同種異系ＨＳＣＴレシピエントに対して門戸が開かれた試験だった。除外規準には、≧０．５ｍｇ／ｋｇのプレドニゾン（又は等価物）による処置、室内空気において酸素飽和が＜９０％の呼吸不全、他の制御されない感染症及び≧グレードＩＩの活動性ＧＶＨＤが含まれた。投与予定日の２８日以内にＡＴＧ、Ｃａｍｐａｔｈ、他のＴ細胞免疫抑制性モノクローナル抗体、又はドナーリンパ球注入（ＤＬＩ）を投与された患者も、参加から除外した。まず患者に、好適なＶＳＴ株（≧２個の共有ＨＬＡ抗原を有する）の探索について同意を得て、利用可能であった場合、及び患者が適格基準を満たした場合、それらの患者を本研究の処置部分に登録できた。各患者に、２×１０^７個のＨＬＡ部分適合ＶＳＴ／ｍ２の静脈内注入を１回行い、４週間後に２回目の注入を行い、その後隔週で追加の注入を行うオプションがあった。処置担当の医師の判断で、標準的な抗ウイルス薬剤による治療を行うことができた。

安全性評価項目：このパイロット研究の主目的は、持続的なＣＭＶ感染症／疾患を有するＨＳＣＴレシピエントにおいてＣＭＶＳＴの安全性を判断することだった。ＮＣＩＣｏｍｍｏｎＴｅｒｍｉｎｏｌｏｇｙＣｒｉｔｅｒｉａｆｏｒＡｄｖｅｒｓｅＥｖｅｎｔｓ（ＣＴＣＡＥ），バージョン４．Ｘによって毒性を段階分けした。安全性評価項目には、最後のＣＭＶＳＴ投与の４２日以内の急性ＧｖＨＤグレードＩＩＩ～ＩＶ、注入の２４時間以内の注入関連毒性、又は最後のＣＭＶＳＴ投与の２８日以内の、Ｔ細胞製品に関連し、かつ元々の悪性疾患又は既存の併存症である既存の感染に起因し得ない、グレード３～５の造血系有害事象が含まれた。急性及び慢性ＧＶＨＤが存在した場合、標準的な臨床上の定義に従ってそれらを段階分けした。１，２本研究は、ＤａｎＬ．ＤｕｎｃａｎＣａｎｃｅｒＣｅｎｔｅｒＤａｔａＲｅｖｉｅｗＣｏｍｍｉｔｔｅｅがモニターした。

アウトカムの評価：末梢血中のＣＭＶ量を、臨床検査改善修正法案（Ｃｌｉｎｉｃａｌ
ＬａｂｏｒａｔｏｒｙＩｍｐｒｏｖｅｍｅｎｔＡｍｅｎｄｍｅｎｔｓ）（ＣＬＩＡ）によって承認された研究室において定量的ＰＣＲ（ｑＰＣＲ）によってモニターした。処置に対するウイルスの完全奏効（ＣＲ）は、ｑＰＣＲによる検出閾値未満へのウイルス量の減少、並びに組織疾患の臨床的徴候及び症状（ベースライン時に存在した場合）の消失と定義された。部分奏効（ＰＲ）は、ベースラインからの少なくとも５０％のウイルス量の減少と定義された。臨床応答及びウイルス学的応答は、ＣＭＶＳＴ注入後の６週目に割り当てられた。

免疫モニタリング：ＥＬＩＳｐｏｔ解析を使用して、ＣＭＶ抗原及びＣＭＶペプチドに応答してＩＦＮγを分泌する循環Ｔ細胞の頻度を求めた。注入前並びに注入後の１、２、３、４、６及び１２週目に臨床サンプルを回収した。ポジティブコントロールとして、ＰＢＭＣをブドウ球菌エンテロトキシンＢ（１μｇ／ｍｌ）（Ｓｉｇｍａ－ＡｌｄｒｉｃｈＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，ＳｔＬｏｕｉｓ，ＭＯ）で刺激した。１０００ｎｇ／ペプチド／ｍｌに希釈したＩＥ１及びｐｐ６５ペプミックス（ＪＰＴＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｂｅｒｌｉｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）を使用して、注入後のドナー由来ＣＭＶＳＴを追跡した。利用可能であるとき、公知のエピトープを表しているペプチド（ＧｅｎｅｍｅｄＳｙｎｔｈｅｓｉｓＩｎｃ．，ＳａｎＡｎｔｏｎｉｏ，ＴＸ、１２５０ｎｇ／ｍｌに希釈されたもの）もＥＬＩＳｐｏｔアッセイにおいて使用した。ＥＬＩＳｐｏｔ解析に向けて、ＰＢＭＣを５×１０^６／ｍｌでＴ細胞培地に再懸濁し、９６ウェルＥＬＩＳｐｏｔプレートにプレーティングした。各条件を２つ組で行った。２０時間のインキュベーションの後に、プレートを、先に記載されたように展開し、室温の暗所において一晩乾燥させ、次いで、定量のためにＺｅｌｌｎｅｔＣｏｎｓｕｌｔｉｎｇ（ＮｅｗＹｏｒｋ，ＮＹ）に送った。インターフェロン－γスポット形成細胞（ＳＦＣ）及び投入した細胞の数をプロットし、各抗原に特異的なＴ細胞の頻度を特異的ＳＦＣ／投入細胞数として表現した。

統計解析：記述統計量を計算して、データを要約した。抗ウイルス応答を要約し、正確な９５％二項信頼区間とともに奏効率を推定した。ウイルス量及びＴ細胞頻度のデータをプロットして、免疫応答のパターンを経時的に図示した。注入前と注入後のウイルス量及びＴ細胞頻度の変化の比較を、ウィルコクソン符号順位検定を用いて行った。ＳＡＳシステム（Ｃａｒｙ，ＮＣ）バージョン９．４及びＲバージョン３．２．１を用いてデータを解析した。Ｐ値＜０．０５を統計学的に有意とみなした。

結果

第三者ＣＭＶＳＴバンク：ＣＭＶＳＴのバンクを、移植集団の多様なＨＬＡプロファイルを代表するように選択された８名のＣＭＶ血清陽性ドナーから作製した（表１）。７．７×１０^８ＰＢＭＣという中央値（範囲４．６～８．８×１０^８）が、１回の採血（４２５ｍｌという中央値）から単離された。ＣＭＶＳＴを拡大するために、ＰＢＭＣを、ｐｐ６５及びＩＥ１を網羅するペプミックスに、培養中の２０日超にわたって曝露したところ、１０２±１２という平均拡大倍率（図１７Ａ）が達成された。得られた細胞はほぼ例外なく、セントラルＣＤ４５ＲＡ－／６２Ｌ＋（５８．５±４．８％）及びエフェクターＣＤ４５ＲＡ－／６２Ｌ－（３５．３±４．６％）メモリマーカーを発現する、ＣＤ４＋（２１．３±７．５％）サブセットとＣＤ８＋（７４．７±７．８％）サブセットの両方を含むＣＤ３＋（９９．３±０．４％）だった（図１７Ｂ）。８つすべての株が、刺激性のＣＭＶ抗原に対して反応性だった（ＩＥ１４１９±１００ＳＦＣ／２×１０^５及びｐｐ６５１０６９±２３０、図１７Ｃ）。表１に細胞株の特色が要約されている。これらの８つの株のうち、６つの製品を、処置される１０名の試験患者に投与した。

スクリーニング：ＣＭＶに感染している２９名の同種異系ＨＳＣＴレシピエントが、主要ＢＭＴ提供者から試験参加にまわされ、８つの株のバンクから、２８例における注入に適した製品（最低２／８のＨＬＡ適合閾値）が特定された（９６．６％；９５％ＣＩ：８２．２％～９９．９％）。そのようなＨＬＡ適合製品の投与に関連する臨床的有用性を実証した以前の第三者試験において行われた遡及的解析に基づいて、２／８のＨＬＡ適合閾値を確立した。ＨＬＡクラスＩの適合であるかクラスＩＩの適合であるかは、アウトカムに影響しないとみられた。注目すべきことに、本研究では、ほとんどの製品が≧４の抗原で適合した（図１８Ｄ）。株が利用可能な２８名の患者のうち、１７名の患者が標準的な抗ウイルス処置に応答したこと、及び１名の患者が最近のＤＬＩに起因して不適格だったことを理由に、細胞を投与されなかった。

処置患者の特色：持続的な感染に対して処置される１０名の患者（小児ｎ＝７及び成人ｎ＝３）の特色が表２に要約されており、それらの患者には、２名のアフリカ系アメリカ人レシピエント、３名のヒスパニック起源の白人患者及び５名の非ヒスパニック系コーカサス人レシピエントが含まれた。それらの１０名の患者のうちの３名は、確定されたウイルス関連疾患［ＣＭＶ網膜炎（ｎ＝１）、ＣＭＶ大腸炎が原因の下痢（ｎ＝２）］を有した。移植後４６～３６５日目（中央値、１３３日目）に、ＣＭＶＳＴ（２～６／８のＨＬＡ抗原で適合）を投与した。７名の患者は、２４日間という中央値（４８日間という平均値；範囲１４～２１１日間）にわたって、標準的な抗ウイルス処置に抵抗性の感染症を有し、それらの患者のうちの３名が、従来の抗ウイルス薬に対する抵抗性を付与する変異があるウイルスを有した。免疫療法の介入前に、これらの患者のうちの６名が、従来の抗ウイルス薬に関連する重症有害事象（ＳＡＥ）を経験し、それには急性腎傷害（ｎ＝４）、ホスカルネット誘発性の腎細尿管症（ｎ＝１）及び重症のホスカルネット関連膵炎
（ｎ＝１）が含まれ、３例で、任意の従来の薬物によるさらなる処置が不可能になった。

臨床上の安全性：すべての注入が良好な耐容性を示した。注入の８時間後に一過性の単発的な発熱を呈した１名の患者を除いて、即時型の毒性は観察されなかった。１名の患者が、体幹に軽度の斑状丘疹状皮疹を呈したが、これはウイルス性発疹を示唆するとみられ、局所処置又は全身処置なしに数日以内に自然に消失した。サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）又は注入したＣＭＶＳＴに関連する他の毒性の症例は観察されず、移植片不全、自己免疫性溶血性貧血又は移植関連微小血管障害を発症した患者もいなかった。患者を、急性ＧｖＨＤについて６週間追跡し、慢性ＧｖＨＤについて１２ヶ月間追跡した。患者と注入細胞との間でＨＬＡが異なるにもかかわらず、急性ＧｖＨＤの前病歴［グレードＩＩ（ｎ＝２）又はＩＩＩ（ｎ＝１）］を有する３名の患者を含む患者で、処置後に再発性又は新規の急性若しくは慢性のＧｖＨＤを発症した患者はいなかった（表３）。

臨床応答：注入された１０名すべての患者がＣＭＶＳＴに応答し、７名がＣＲであり、３名がＰＲであり、６週目までに、１００％の累積奏効率だった（９５％ＣＩ：６９．２～１００．０％）。６週目における平均血漿ウイルス量の減少は、８９．８％（＋／－２１．４％）だった。処置されたすべての患者の連続的なウイルス量計測値に基づくウイルス学的アウトカムが図１８に要約されている。著しいことに、難治性感染症を有する患者だけでなく、組織疾患を有する３名の個体［ＣＭＶ網膜炎（ｎ＝１）、ＣＭＶ大腸炎が原因の下痢（ｎ＝２）］においても、臨床的有用性が達成された。

８名の患者に、ＣＭＶＳＴの注入を１回行い、１名の患者（３９７６）には、注入を２回行い、１名（４２０１）には、ＣＭＶＳＴの注入を３回行った。患者３９７６は、６週目にＣＲを達成したが、１０週目にウイルス量が増えて再発した。その患者に、１回目の注入の８０日後に同じＣＭＶＳＴ株で２回目の注入を行ったところ、持続的なＣＲがもたらされた。患者４２０１には、最初の投与の２８日後に同じＣＭＶＳＴの２回目の注入を行ったが応答しなかったので、２週間後に異なるＣＭＶＳＴ株で３回目の注入を行ったところ、持続的なＣＲが達成された。これらの患者において達成された臨床応答及びウイルス学的応答は、１０名の処置患者のうち８名においてウイルス反応性ＣＭＶＳＴの増加
［注入前の平均値１２６±８４ＳＦＣから４４３±１７８／５×１０^５ＰＢＭＣというピークに増加（ｐ＝０．０２３；図１９Ａ）］を伴った。

Ｔ細胞の持続性：ＣＭＶＳＴ注入がこれらの患者において見られた防御作用に寄与したかを評価するため、及びこれらのＨＬＡ部分適合ＶＳＴのインビボ寿命を評価するために、注入される細胞株に限定されるＨＬＡ拘束性エピトープペプチドを用いて、注入前及び注入後の患者ＰＢＭＣにおけるＣＭＶＳＴの特異性を調べた。確認された第三者起源の機能的Ｔ細胞が、ＨＬＡ拘束性ペプチド試薬が利用可能であった５名の患者において検出され、これは最大１２週間持続し；８名すべての患者において、患者とＣＭＶＳＴ株との間で共有されるＨＬＡアレルに限定される抗ウイルス応答（図１９Ｂ）が観察された。したがって、注入されたＣＭＶＳＴが、ＣＭＶ感染を制御する抗ウイルス効果を誘導したと推測された。

上記の第Ｉ相試験では、少なくとも１４日間のガンシクロビル及び／又はホスカルネットによる処置を失敗していた又は標準的な抗ウイルス薬剤を許容できなかった同種異系ＨＳＣＴレシピエントにおけるＣＭＶ感染症／疾患を処置するために第三者ＣＭＶＳＴを投与した。注目すべき除外規準は、活動性ＧｖＨＤを有する患者又はコルチコステロイドを中用量若しくは高用量で投与された患者だった。人種的かつ民族的に多様な同種異系ＨＳＣＴ患者集団を幅広くカバーするように、ＨＬＡプロファイルに基づいて慎重に選択されたたった８名の健康ドナーからＣＭＶＳＴのバンクを作製した。実際に、試験参加についてスクリーニングされた２９名の患者のうち、２８名に対して好適な株（最低２つの共有ＨＬＡ抗原閾値）（９６．６％；９５％ＣＩ：８２．２～９９．９％）が特定されたことから、十分に選択された小さな細胞バンクで幅広い患者をカバーできるという実現可能性が証明された。これらの２８名の患者のうち、多様なバックグラウンドの１０名
（２名のアフリカ系アメリカ人、３名のヒスパニック起源の白人及び５名の非ヒスパニック系コーカサス人）を処置したところ、全員が急性若しくは慢性ＧｖＨＤ又は他の毒性を経験せずにウイルス学的有用性及び臨床的有用性を達成した。６名が、従来の抗ウイルス薬に関係する急性腎傷害、腎細尿管症及び膵炎をはじめとした重症有害事象を以前に経験していたので、これは注目すべきことであった。この第Ｉ相試験は、難治性ＣＭＶ感染症を処置するための、慎重にデザインされた小さなドナーバンクを起源とする第三者のウイルス反応性Ｔ細胞の投与に関連する安全性及び臨床的有用性を示す。

ＣＭＶは、最近数十年において疾患の割合が低下しているにもかかわらず、依然として同種異系ＨＳＣＴ後の主な罹患原因のままであり；最近のＣＩＢＭＴＲ報告では、９４６９名の患者［２００３～２０１０年にＡＭＬ（ｎ＝５３１０）、ＡＬＬ（ｎ＝１８８３）、ＣＭＬ（ｎ＝１０７９）及びＭＤＳ（ｎ＝１１９７）のために移植された患者］から得たデータを調べたところ、ＣＭＶの再活性化が、４つすべての疾患カテゴリーの間で、より高い非再発死亡率並びにより低い全生存率に関連した。さらに、２００８～２０１３年に移植された２０８名の患者の最近の研究では、ＣＭＶが再活性化した患者において平均の入院期間が２６日延長することが見出され、１つより多いＣＭＶ再活性化エピソードの発生が、同種異系ＨＳＣＴのコストを２５～３０％上昇させた（ｐ＜０．０００１）ことから、ＣＭＶ管理の経済的負担が強調されることとなった。

ホスカルネット及びガンシクロビルは、ＨＳＣＴ後のＣＭＶ感染症を処置するために頻繁に使用されている。しかしながら、ＣＭＶ網膜炎に対するガンシクロビルを除いて、その使用は適応外であり、両方の薬物が、有意な副作用、特に腎疾患及び移植片抑制に関連する。サイトメガロウイルスＤＮＡターミナーゼ複合体阻害剤であるレテルモビルは、予防的に使用されたとき、移植後のＣＭＶ感染／再活性化の発生率を低下させ６、２０１７年のＦＤＡ承認（成人ＨＳＣＴ患者におけるＣＭＶ予防のため）以来、高リスク患者においてますます使用されている。しかしながら、集学的なＣＭＶＤｒｕｇＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔＦｏｒｕｍのＣＭＶＲｅｓｉｓｔａｎｃｅＷｏｒｋｉｎｇＧｒｏｕｐは、レテルモビルをより広範に予防的に使用すると、ＣＭＶのブレークスルー感染が起きた場合に、従来の抗ウイルス薬に抵抗性である生物の出現が増加すると予想している。実際に、レテルモビル抵抗性ＣＭＶ株がますます報告されており、抵抗性疾患を有する患者の臨床成績は不良で、進行性の組織疾患及び死亡に関連する。

ＣＭＶＳＴは、本発明者らのグループなどが以前に報告したように、最初の再活性化と薬物抵抗性ウイルス株の両方を標的とする代替ストラテジーを提供する。実際に、本研究においてＣＭＶＳＴで処置された患者の３０％が、１つ以上の従来の抗ウイルス薬に抵抗性であると確認されたウイルス株に感染した。

本研究の目標の１つは、処置にまわされる同種異系ＨＳＣＴレシピエントの大部分をカバーするのに十分な多様性を有するＣＭＶ特異的Ｔ細胞バンクを調製することだった。したがって、＞６００名の同種異系ＨＳＣＴレシピエントのＨＬＡ型を、将来を見越して、ＣＭＶＳＴを作製できる多様で健康な適格の（ＣＭＶ血清陽性の）ドナーのプールと比較して、十分に適合する製品を患者に提供し得る最小のコホートを特定した。このモデルを用いて、十分に選択されたたった８名のドナーで、少なくとも２つのＨＬＡ抗原において適合するＴ細胞製品を患者集団の＞９５％に提供できることが見出された。ドナープールをさらに増加させても、適合数は有意に増加しない。臨床参加についてスクリーニングされた２９名の患者のうち２８名（９６．５％）に対して好適な株が特定された本研究は、そのようなドナーバンクが同種異系ＨＳＣＴ患者集団の大部分に効果的に供給できるという理論を裏付ける。

移植患者集団内の人種的及び民族的多様性を米国の移植集団のそれと比較した（表４）。これにより、本発明者らの患者集団内の多様性が、米国集団よりもわずかに多様でないが類似していることが明らかになった。これは、本研究のために開発された小さな細胞バンクを、この国全体にわたって臨床で使用するのに広く適用できることを示唆している。単一のドナーコレクションから＞２，０００回注入するための細胞を作製するのに十分な材料を生成できることにより、移植センターにわたって、試験されたＣＭＶＳＴをユニバーサルに使用することが、より実現可能になっている。したがって、「既製」の第三者のウイルス反応性Ｔ細胞の分散化分布モデルを想定することができ、細胞がオンデマンドで入手可能になることが確実になった。

まとめると、上記データは、十分に選択されたたった８名の第三者ドナーから調製されたＣＭＶ反応性Ｔ細胞の十分に特徴付けられたバンクが、難治性ＣＭＶ感染症を有する患者の大部分に、安全かつ有効な抗ウイルス活性を提供できる適切に適合した株を供給できることを示している。

実施例２．呼吸器系ウイルス感染症を予防及び処置するためのマルチウイルス特異的Ｔリンパ球の作製
本発明者らのグループは以前に、インビトロで拡大されたウイルス特異的Ｔ細胞（ＶＳＴ）の養子移入によって、同種異系ＨＳＣＴレシピエントにおいて潜伏ウイルス［エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、ＢＫウイルス（ＢＫＶ）、ヒトヘルペスウイルス６（ＨＨＶ６）と溶菌ウイルス［アデノウイルス（ＡｄＶ）］の両方に関連する感染症を安全かつ効果的に予防及び処置できることを実証した。ＣＡＲＶに対する感受性が、基本的な細胞免疫不全に関連することから、本研究において本発明者らは、インフルエンザ、ＲＳＶ、ｈＭＰＶ及びＰＩＶを含むようにＶＳＴ療法の治療範囲を拡大することの実現可能性を探索した。

本発明者らは、本発明者らの４つの標的ウイルスに由来する１２個の免疫優性抗原に対して特異性を有するポリクローナル（ＣＤ４＋及びＣＤ８＋）ＶＳＴの単一調製物を、ＧＭＰ準拠の製造方法を用いて迅速に作製できる機構を説明した。刺激のために使用したウイルスタンパク質は、Ｔ細胞に対する免疫原性とそれらの配列保存の両方に基づいて選択した。拡大された細胞は、Ｔｈ１に極性化しており、多機能であり、感染していない自己又は同種異系の標的に対しては活性を示さずに、ウイルス抗原を発現している標的細胞に選択的に反応し、殺傷することができることから、ウイルス標的に対する選択性と臨床での使用に対する安全性の両方が証明された。

本研究において、本発明者らは、健康ドナー由来のＰＢＭＣを、ある特定の標的ウイルス由来の免疫原性抗原［インフルエンザ－ＮＰ１及びＭＰ１；ＲＳＶ－Ｎ及びＦ；ｈＭＰＶ－Ｆ、Ｎ、Ｍ２－１及びＭ；ＰＩＶ－Ｍ、ＨＮ、Ｎ及びＦ］を網羅するペプミックス（重複ペプチドライブラリー）のカクテルに曝露した後、Ｇ－Ｒｅｘにおいて活性化サイトカインの存在下で拡大した。１０～１３日間にわたって、本発明者らは、平均８．５倍の拡大を達成した（０．２５×１０^７ＰＢＭＣ／ｃｍ２から平均１．９±０．２×１０^７細胞／ｃｍ^２への増加；ｎ＝１２）。

手短に言えば、ＢａｙｌｏｒＣｏｌｌｅｇｅｏｆＭｅｄｉｃｉｎｅＩＲＢが承認したプロトコル（Ｈ－７６３４、Ｈ－７６６６）を用いてインフォームドコンセントを受けた健康志願者及びＨＳＣＴレシピエントからＰＢＭＣを得て、それを使用してフィトヘマグルチニン（ＰＨＡ）芽球及びマルチ－Ｒ－ＶＳＴを作製した。ＰＨＡ芽球は、以前に報告したように作製し、インターロイキン２（ＩＬ２）（１００Ｕ／ｍＬ；ＮＩＨ，Ｂｅｔｈｅｓｄａ，Ｍａｒｙｌａｎｄ）（２日ごとに補充する）が補充されたＶＳＴ培地［４５％ＲＰＭＩ１６４０（ＨｙＣｌｏｎｅＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｌｏｇａｎ，Ｕｔａｈ）、４５％Ｃｌｉｃｋ’ｓ培地（ＩｒｖｉｎｅＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，ＳａｎｔａＡｎａ，Ｃａｌｉｆｏｒｎｉａ）、２ｍＭＧｌｕｔａＭＡＸＴＭ－Ｉ（ＬｉｆｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，ＧｒａｎｄＩｓｌａｎｄ，ＮｅｗＹｏｒｋ）及び１０％ヒトＡＢ血清（ＶａｌｌｅｙＢｉｏｍｅｄｉｃａｌ，Ｗｉｎｃｈｅｓｔｅｒ，Ｖｉｒｇｉｎｉａ）］中で培養した。

マルチ－Ｒ－ＶＳＴの作製に向けて、ペプミックスを作製した。手短に言えば、インフルエンザＡ（ＮＰ１、ＭＰ１）、ＲＳＶ（Ｎ、Ｆ）、ｈＭＰＶ（Ｆ、Ｎ、Ｍ２－１、Ｍ）
（ＪＰＴＰｅｐｔｉｄｅＴｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｂｅｒｌｉｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）及びＰＩＶ抗原（Ｍ、ＨＮ、Ｎ、Ｆ）（ＧｅｎｅｍｅｄＳｙｎｔｈｅｓｉｓ，ＳａｎＡｎｔｏｎｉｏ，ＴＸ）を網羅するペプチドライブラリー（１１ａａ重複する１５ｍｅｒ）でＰＢＭＣを刺激した。凍結乾燥されたペプミックスをジメチルスルホキシド
（ＤＭＳＯ）（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）で再構成し、－８０℃で保存した。マルチ－Ｒ－ＶＳＴの作製に向けて、ＰＢＭＣ（２．５×１０^７）を、ＩＬ７（２０ｎｇ／ｍｌ）、ＩＬ４（８００Ｕ／ｍｌ）（Ｒ＆ＤＳｙｓｔｅｍｓ，Ｍｉｎｎｅａｐｏｌｉｓ，ＭＮ）及びペプミックス（２ｎｇ／ペプチド／ｍｌ）が補充された１００ｍｌのＶＳＴ培地が入ったＧ－Ｒｅｘ１０（ＷｉｌｓｏｎＷｏｌｆＭａｎｕｆａｃｔｕｒｉｎｇＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｓｔ．Ｐａｕｌ，ＭＮ）に移し、１０～１３日間、３７℃、５％ＣＯ_２において培養した。

次いで、ＣＤ３、ＣＤ２５、ＣＤ２８、ＣＤ４５ＲＯ、ＣＤ２７９（ＰＤ－１）［ＢｅｃｔｏｎＤｉｃｋｉｎｓｏｎ（ＢＯ），ＦｒａｎｋｌｉｎＬａｋｅｓ，ＮＪ］、ＣＤ４、ＣＤ８、ＣＤ１６、ＣＤ６２Ｌ、ＣＤ６９（ＢｅｃｋｍａｎＣｏｕｌｔｅｒ，Ｂｒｅａ，ＣＡ）及びＣＤ３６６（ＴＩＭ－３）（Ｂｉｏｌｅｇｅｎｄ，ＳａｎＤｉｅｇｏ，ＣＡ）に対するモノクローナル抗体で表面染色したマルチ－Ｒ－ＶＳＴに対してフローサイトメトリーを行った。細胞をＧａｌｌｉｏｓ^ＴＭＦｌｏｗＣｙｔｏｍｅｔｅｒにおいて取得し、Ｋａｌｕｚａ（登録商標）ＦｌｏｗＡｎａｌｙｓｉｓＳｏｆｔｗａｒｅ（ＢｅｃｋｍａｎＣｏｕｌｔｅｒ）で解析した。詳細には、細胞をリン酸緩衝食塩水
（ＰＢＳ）（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ）中でペレットにし、次いで、抗体を飽和量（５μｌ）で加えた後、４℃で１５分間インキュベーションした。続いて、細胞を洗浄し、３００μｌのＰＢＳに再懸濁し、少なくとも２０，０００個の生細胞をＧａｌｌｉｏｓ^ＴＭＦｌｏｗＣｙｔｏｍｅｔｅｒにおいて取得し、Ｋａｌｕｚａ（登録商標）ＦｌｏｗＡｎａｌｙｓｉｓＳｏｆｔｗａｒｅ（ＢｅｃｋｍａｎＣｏｕｌｔｅｒ）で解析した。

細胞内サイトカイン染色に向けて、マルチ－Ｒ－ＶＳＴを収集し、ＶＳＴ培地に再懸濁し（２×１０^６／ｍｌ）、９６ウェルプレートの１ウェルあたり２００μＬを加えた。細胞を、ブレフェルジンＡ（１μｇ／ｍｌ）、モネンシン（１μｇ／ｍｌ）、ＣＤ２８及びＣＤ４９ｄ（１μｇ／ｍｌ）（ＢＤ）とともに２００ｎｇの個々の試験ペプミックス又はコントロールペプミックスと一晩インキュベートした。次に、ＶＳＴをＰＢＳで洗浄し、ペレットにし、ＣＤ８及びＣＤ３（５μ１／抗体／チューブ）で１５分間、４℃にて表面染色し、次いで、洗浄し、ペレットにし、固定し、４℃の暗所において２０分間、Ｃｙｔｏｆｉｘ／Ｃｙｔｏｐｅｒｍ溶液（ＢＤ）で透過処理した。Ｐｅｒｍ／ＷａｓｈＢｕｆｆｅｒ（ＢＤ）で洗浄した後、細胞を４℃の暗所において３０分間、１０μＬのＩＦＮγ抗体及びＴＮＦα抗体（ＢＤ）とインキュベートした。次いで、細胞をＰｅｒｍ／ＷａｓｈＢｕｆｆｅｒで２回洗浄し、少なくとも５０，０００個の生細胞をＧａｌｌｉｏｓ^ＴＭＦｌｏｗＣｙｔｏｍｅｔｅｒにおいて取得し、Ｋａｌｕｚａ（登録商標）ＦｌｏｗＡｎａｌｙｓｉｓＳｏｆｔｗａｒｅで解析した。

ｅＢｉｏｓｃｉｅｎｃｅＦｏｘＰ３キット（ＴｈｅｒｍｏＦｉｓｈｅｒＳｃｉｅｎｔｉｆｉｃ，Ｗａｌｔｈａｍ，ＭＡ）を製造者の指示書に従って用いて、ＦｏｘＰ３染色を行った。簡潔には、１×１０^６個の細胞をＣＤ３、ＣＤ４及びＣＤ２５抗体で表面染色し、次いで、洗浄し、１ｍｌの固定／透過処理緩衝液に再懸濁し、４℃の暗所において１時間インキュベートした。ＰＢＳで洗浄した後、細胞を透過処理緩衝液に再懸濁し、５μＬのアイソタイプ抗体又はＦｏｘＰ３抗体（ＣｌｏｎｅＰＣＨ１０１）と４℃で３０分間インキュベートし、次いで、洗浄し、Ｇａｌｌｉｏｓ^ＴＭＦｌｏｗＣｙｔｏｍｅｔｅｒにおいて取得した後、Ｋａｌｕｚａ（登録商標）ＦｌｏｗＡｎａｌｙｓｉｓＳｏｆｔｗａｒｅで解析した。

酵素結合イムノスポット（ＥＬＩｓｐｏｔ）スポット解析を用いて、ＩＦＮγ及びグランザイムＢを分泌する細胞の頻度を定量化した。簡潔には、ＰＢＭＣ、磁気的に選択されたＴ細胞部分集団及びマルチ－Ｒ－ＶＳＴを、５×１０^６又は２×１０^６細胞／ｍｌでＶＳＴ培地に再懸濁し、１００μｌの細胞を各ＥＬＩｓｐｏｔウェルに加えた。磁気ビーズ及びＬＳ分離カラム（ＭｉｌｔｅｎｙｉＢｉｏｔｅｃ，ＧｍｂＨ）を製造者の指示書に従って用いて、細胞選択を行った。個々の刺激ペプミックス［ＮＰ１、ＭＰ１（インフルエンザ）；Ｎ、Ｆ（ＲＳＶ）；Ｆ、Ｎ、Ｍ２－１、Ｍ（ｈＭＰＶ）；Ｍ、ＨＮ、Ｎ、Ｆ（ＰＩＶ）］又はコントロールペプミックス（サバイビン、ＷＴ１）による直接刺激（５００ｎｇ／ペプチド／ｍｌ）の後、抗原特異的活性を計測した。ブドウ球菌エンテロトキシンＢ（ＳＥＢ）（１μｇ／ｍｌ）及びＰＨＡ（１μｇ／ｍｌ）を、それぞれＰＢＭＣ及びＶＳＴに対するポジティブコントロールとして使用した。２０時間のインキュベーションの後、プレートを先に記載されたように展開し、室温で一晩乾燥させ、次いで、定量のためにＺｅｌｌｎｅｔＣｏｎｓｕｌｔｉｎｇ（ＮｅｗＹｏｒｋ）に送った。スポット形成細胞（ＳＦＣ）及び投入した細胞の数をプロットし、ＶＳＴに対する特異性閾値を≧３０ＳＦＣ／２×１０^５投入細胞と定義した。

マルチ－Ｒ－ＶＳＴサイトカインプロファイルを、ＭＩＬＬＩＰＬＥＸＨｉｇｈＳｅｎｓｉｔｉｖｉｔｙＨｕｍａｎＣｙｔｏｋｉｎｅＰａｎｅｌ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ，Ｂｉｌｌｅｒｉｃａ，ＭＡ）を用いて評価した。２×１０^５個のＶＳＴをペプミックス（ＮＰ１、ＭＰ１、Ｎ、Ｆ、Ｆ、Ｎ、Ｍ２－１、Ｍ、Ｍ、ＨＮ、Ｎ及びＦ）（１μｇ／ｍｌ）で一晩刺激した。続いて、上清を回収し、２つ組のウェルにプレーティングし、抗体が固定化されたビーズとともに４℃で一晩インキュベートし、次いで、洗浄し、ビオチン化検出抗体とともに室温で１時間プレーティングした。最後に、ストレプトアビジン－フィコエリトリンを室温で３０分間加えた。サンプルを洗浄し、ｘＰＯＮＥＮＴソフトウェアを用いてＬｕｍｉｎｅｘ２００（ＸＭＡＰＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）において解析した。

クロム放出アッセイを用いた。手短に言えば、標準的な４時間のクロム（Ｃｒ_５１）放出アッセイを使用し、自己抗原を負荷されたＰＨＡ芽球を標的として用いて（２０ｎｇ／ペプミックス／１×１０^６標的細胞）、マルチ－Ｒ－ＶＳＴの特異的細胞溶解活性を計測した。４０：１、２０：１、１０：１及び５：１というエフェクター：ターゲット（Ｅ：Ｔ）比を用いて、特異的溶解を解析した。特異的溶解のパーセンテージを計算した［（実験上の放出－自発的放出）／（最大放出－自発的放出）］×１００。マルチ－Ｒ－ＶＳＴ株の自己反応性及び同種反応性の能力を計測するために、自己ＰＨＡ芽球及び同種異系ＰＨＡ芽球だけを標的として使用した。

健康ドナー由来のポリクローナルなマルチ－Ｒ－ＶＳＴの作製

インフルエンザ、ＲＳＶ、ｈＭＰＶ及びＰＩＶに対して反応性の細胞の部分集団を含むＶＳＴ特異的Ｔ細胞株を作製することの実現可能性を検討するために、本発明者らは、各標的ウイルス由来の免疫原性抗原［インフルエンザ－ＮＰ１及びＭＰ１；ＲＳＶ－Ｎ及びＦ；ｈＭＰＶ－Ｆ、Ｎ、Ｍ２－１及びＭ；ＰＩＶ－Ｍ、ＨＮ、Ｎ及びＦ］を網羅する重複ペプチドライブラリーのプールを利用してＰＢＭＣを刺激した後、サイトカインが補充されたＶＳＴ培地が入ったＧ－Ｒｅｘ１０において培養した［図２０Ａ］。１０～１３日間にわたって、本発明者らは、平均８．５倍の細胞増加を達成した［図２０Ｂ］［０．２５×１０^７ＰＢＭＣ／ｃｍ２から平均値１．９±０．２×１０^７細胞／ｃｍ２への増加（中央値：２．０５×１０^７、範囲：０．６～２．８２×１０^７細胞／ｃｍ２ｎ＝１２）。これはほぼ例外なく、ＣＤ３＋Ｔ細胞（９６．２±０．６％；平均値±ＳＥＭ）、及び細胞傷害性Ｔ細胞（ＣＤ８＋；１８．１±１．３％）とヘルパーＴ細胞（ＣＤ４＋；７４．４±１．７％）との混合物［図２０Ｃ］からなり、ＣＤ４／ＣＤ２５／ＦｏｘＰ３＋染色によって評価したとき、制御性Ｔ細胞の増殖のエビデンスはなかった（図２１）。

さらに、拡大された細胞は、活性化マーカーＣＤ２５（５０．２±３．８％）、ＣＤ６９（５２．８±６．３％）、ＣＤ２８（８５．８±２％）のアップレギュレーション、並びにセントラルメモリーマーカー（ＣＤ４５ＲＯ＋／ＣＤ６２Ｌ＋：６１．４±３％）及びエフェクターメモリーマーカー（ＣＤ４５ＲＯ＋／ＣＤ６２Ｌ－：２０．３±２．３％）の発現、並びに最小のＰＤ１（６．９±１．４％）又はＴｉｍ３（１３．５±２．３％）の表面発現によって証明されるように、エフェクター機能及び長期メモリーと一致する表現型を示した（図２０Ｃ～Ｄ］。

マルチ－Ｒ－ＶＳＴの抗ウイルス特異性

次に、拡大集団が抗原特異的であるかを判定するために、免疫原として個々の各刺激抗原を用いてＩＦＮｙＥｌｌｓｐｏｔアッセイを行った。作製された１２個の株がすべて、標的ウイルスのすべてに対して反応性であることが判明した［表１、図２３］。図２２Ａには、各刺激抗原に対する活性の規模が要約されており、図２４は、漸増濃度のウイルス抗原に対する本発明者らの拡大ＶＳＴの応答を示している。著しいことに、培養中の１０～１３日間にわたって、本発明者らは、１４．６±４．３（ＰＩＶ－ＨＮ）～５０．４±９．９倍（ＲＳＶ－Ｎ）というウイルス特異的Ｔ細胞の濃縮を達成した［図２２Ｂ；ドナーＰＢＭＣ内でのＣＡＲＶ反応性Ｔ細胞の前駆体頻度が図２６及び２７に要約されている］。まとめると、これらのデータは、呼吸器系ウイルス特異的Ｔ細胞がメモリープールに存在し、ＧＭＰ準拠の製造方法を用いてエクスビボで容易に増幅できることを示唆している。

次に、ウイルス特異性が、ＣＤ４＋Ｔ細胞サブセット又はＣＤ８＋Ｔ細胞サブセット又は両Ｔ細胞サブセットとともに含まれているのかを評価するために、ＣＤ４＋及びＣＤ８＋ＩＦＮｙ産生細胞に対してゲーティングするＩＣＳを行った。図２２Ｃは、４つすべてのウイルスに対する活性が両方のＴ細胞コンパートメントにおいて検出された、１名のドナーからの代表的な結果を示しており［（ＣＤ４＋：インフルエンザ－５．２８％；ＲＳＶ－１１％；ｈＭＰＶ－６．５７％；ＰＩＶ－３．３７％）、（ＣＤ８＋：インフルエンザ－２．２６％；ＲＳＶ－４．３６％；ｈＭＰＶ－２．６９％；ＰＩＶ－２．１６％）］、図２２Ｄは、スクリーニングされた９名のドナーに対する要約結果を示しており、本発明者らのマルチ－Ｒ－ＶＳＴがポリクローナルであり、多特異的であることが確認された。

マルチ－Ｒ－ＶＳＴの機能的特性

複数の炎症促進性サイトカインの産生及びエフェクター分子の発現は、細胞溶解機能の増大及びインビボでのＴ細胞活性の改善と相関すると示されている。ゆえに、本発明者らは次に、抗原曝露後の本発明者らのマルチ－Ｒ－ＶＳＴのサイトカインプロファイルを調べた。図２７Ａ～Ｄに示されているように、Ｌｕｍｉｎｅｘアレイ［図２７Ｃ－左のパネル］及びプロトタイプのＴｈ２／抑制性サイトカインのベースラインレベル［図２７Ｃ－右のパネル］によって計測したとき、ＩＦＮｙ産生細胞の大部分は、ＧＭ－ＣＳＦに加えて、ＴＮＦａも産生した［図２７Ａ－１名のドナーからの詳細なＩＣＳ結果；９名のドナーに対する要約結果；図２７Ｂ］。さらに、抗原刺激を行うと、本発明者らの細胞は、エフェクター分子のグランザイムＢを産生したことから、これらの拡大された細胞の細胞溶解能力が示唆された［図２７Ｄ、ｎ＝９］。まとめると、このデータから、本発明者らのマルチ－Ｒ－ＶＳＴの、Ｔｈ１に極性化した多機能な特色が実証された。

マルチ－Ｒ－ＶＳＴは細胞溶解性であり、ウイルス負荷標的を殺傷する

これらの拡大した細胞の細胞溶解能力をインビトロで検討するために、マルチ－Ｒ－ＶＳＴを、ウイルスペプミックスで負荷された自己のＣｒ５１標識ＰＨＡ芽球及びコントロールとして働く負荷されていないＰＨＡ芽球と共培養した。図２８Ａ及び図２９に示されているように、ウイルス抗原を負荷された標的は、本発明者らの拡大されたマルチ－Ｒ－ＶＳＴによって特異的に認識され、溶解された（４０：１Ｅ：Ｔ－インフルエンザ：１３±５％、ＲＳＶ：３６±８％、ｈＭＰＶ：２６±７％、ＰＩＶ：２２±５％、ｎ＝８）。最後に、これらのＶＳＴは、１回だけ刺激を受けていたが、ＨＬＡ不適合のＰＨＡ芽球を標的として用いたとき、感染していないの自己標的に対する活性の証拠もなかったし、これらの細胞が同種異系ＨＳＣＴレシピエントに投与される場合に考慮すべき重要な事柄である同種反応性（移植片対宿主の可能性）の証拠もなかった（図２８Ｂ）。

ＨＳＣＴレシピエントにおけるＣＡＲＶ特異的Ｔ細胞の検出

最後に、マルチ－Ｒ－ＶＳＴの潜在的な臨床的関連性を評価するために、活動性／最近のＣＡＲＶ感染症を有する同種異系ＨＳＣＴレシピエントが、活動性のウイルスエピソード中／後に高レベルの反応性Ｔ細胞を示すかを検討した。図３０Ａは、強度軽減移植前治療とともに適合血縁ドナー（ＭＲＤ）移植を受けた、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を有する６４歳男性である患者＃１の結果を示している。この患者は、ＨＳＣＴの９ヶ月後に重症のＵＲＴＩを発症し、これは、ＰＣＲ解析によってＲＳＶに関係すると確かめられた。この患者は、感染時には何らの免疫抑制も受けていなかったが、感染の診断当日に肺の炎症を制御するためにプレドニゾンを投与した。

４週間以内に、その患者の症状は、具体的な抗ウイルス処置なしに消失した。Ｔ細胞免疫がウイルスのクリアランスに寄与したかを評価するために、その患者の感染経過にわたってＲＳＶ特異的Ｔ細胞の循環頻度を解析した。感染の直前に、この患者は、ＲＳＶ抗原Ｎ及びＦに対して非常に弱い応答しか示していなかった（６．５ＳＦＣ／５×１０^５ＰＢＭＣ）。しかしながら、ウイルス曝露の１ヶ月以内に、ＲＳＶ特異的Ｔ細胞がインビボにおいて拡大し（５２７ＳＦＣ／５×１０^５ＰＢＭＣ）、図３０Ａに見られるように、反応性細胞が８１倍増加し、その後ウイルスクリアランスと同時に減少した。著しいことに、観察されたＲＳＶ特異的応答は、リンパ球／ＣＤ４＋数の全体的な増加を伴わなかったので、Ｔ細胞の拡大が、全般的な免疫再構成に起因するのではなく、ウイルスによって引き起こされたことが示唆される。同様に、骨髄破壊的移植前治療とともに適合非血縁ドナー（ＭＵＤ）移植を受けた急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）を有する２３歳男性である患者＃２も、漸減用量のタクロリムス投与中の、ＨＳＣＴの５ヶ月後に重症のＲＳＶ関連ＵＲＴＩを発症した。この患者の感染は、リバビリンの投与と同時に１週間以内に症候が消失した。内因性の免疫もウイルスクリアランスにおいて役割を果たすかを検討するために、反応性のＴ細胞の数を経時的にモニターした。

図３０Ｂに見られるように、ウイルスクリアランスは、ＲＳＶ特異的Ｔ細胞の循環頻度の上昇（ピークは９３ＳＦＣ／５×１０^５ＰＢＭＣ）と同時に起き、この循環頻度はその後ベースラインレベルに戻った。当該患者は、その後の肺炎球菌性肺炎のために移植の７ヶ月後に入院し、同時に痰の中にｈＭＰＶが検出された（ＰＣＲによって）。この肺炎は、抗生物質で処置され、その後、ｈＭＰＶ特異的Ｔ細胞（Ｆ、Ｎ、Ｍ２－１及びＭに対して反応性）の顕著な拡大（４ＳＦＣから７０ＳＦＣのピークに増加した）と同時に疾患の消失及びウイルスのクリアランスが生じ、

その後、ベースラインレベルに低下した（図３０Ｃ）。この場合もまた、観察されたＲＳＶ特異的応答及びｈＭＰＶ特異的応答は、リンパ球／ＣＤ４＋数の全体的な増加と無関係だった。

図３１は、ＣＡＲＶ感染症を発症した追加の３名のＨＳＣＴレシピエントの結果を示している。患者＃３は、強度軽減移植前治療とともにハプロタイプ一致の移植を受けた、ＡＭＬを有する１５歳女性であり、移植の５週間後のタクロリムス投与中にＲＳＶ誘発性のＵＲＴＩ及びＬＲＴＩを発症した。この患者には、リバビリンが投与され、４週間以内に感染は消失した。ＲＳＶ反応性Ｔ細胞を経時的にモニターしたところ、図３１Ａに見られるように、ＲＳＶ特異的Ｔ細胞の頻度の急上昇（０から５０６ＳＦＣ／５×１０^５ＰＢＭＣへ）と同時にウイルスクリアランスが起きた。同様に、骨髄破壊的移植前治療とともにＭＵＤ移植を受けたＡＬＬを有する１０歳男性患者である患者＃４は、タクロリムス投与中のＨＳＣＴの１ヶ月後に、ＰＩＶに関係するＵＲＴＩ及びＬＲＴＩを発症した。この患者の感染は、リバビリンの投与と同時に５週間以内に症候が消失した。

内因性の免疫もウイルスのクリアランスにおいて役割を果たすかを検討するために、ＰＩＶ反応性のＴ細胞数を経時的にモニターした。図３１Ｂに見られるように、ウイルスのクリアランスは、ＰＩＶ抗原Ｍ、ＨＮ、Ｎ及びＦに特異的なＴ細胞の循環頻度の上昇（ピークは３８ＳＦＣ／５×１０^５ＰＢＭＣ）と同時に起き、この循環頻度はその後ベースラインレベルに戻った。最後に、骨髄破壊的移植前治療とともにＭＲＤ移植を受けた慢性肉芽腫症を有する３歳男性である患者＃５を示す。この患者は、シクロスポリン投与中のＨＳＣＴの４ヶ月後に、ＰＩＶに関係する重症のＵＲＴＩを発症した。この患者は、リバビリンを投与されていたが（評価された最後の時点において）、疾患症状を示し続け、ＰＩＶ特異的Ｔ細胞を示さなかった（図３１Ｃ）。まとめると、これらのデータは、免疫無防備状態患者におけるウイルス感染の制御におけるＣＡＲＶ特異的Ｔ細胞のインビボにおける関連性を示唆している。

本発明者らは、エクスビボで拡大されたＴ細胞を使用して、臨床上問題になる複数の呼吸器系ウイルスを標的とする実現可能性を探索した。本発明者らは、免疫無防備状態の宿主における上気道・下気道感染症に関与する４つの季節性ＣＡＲＶ［インフルエンザ、ＲＳＶ、ｈＭＰＶ及びＰＩＶ］に由来する合計１２個の抗原に対して特異性を有するポリクローナルなＣＤ４＋及びＣＤ８＋Ｔ細胞を迅速に作製できることを示した。ＧＭＰ準拠の方法を用いて作製されるこれらの広範なＶＳＴは、Ｔｈ１に極性化しており、刺激されると複数のエフェクターサイトカインを産生し、自己反応性又は同種反応性なしに、ウイルスに感染した標的を殺傷した。最後に、活動性のＣＡＲＶ感染症の排除に成功した同種異系ＨＳＣＴレシピエントの末梢血中に反応性Ｔ細胞集団が検出されたことから、そのようなマルチ－Ｒ－ＶＳＴの養子移入後の臨床的有用性の可能性が示唆される。

ＣＡＲＶに関連する急性のＵＲＴＩ及びＬＲＴＩは、公衆衛生上の大きな問題であり、低年齢小児、高齢者、及び免疫系が抑制されている又は損なわれている人が最もかかりやすい。これらの感染症は、咳、呼吸困難及び喘鳴をはじめとした症状を伴い、二重／複数の併存感染症が一般的であり、５歳未満の小児では４０％を超え得る頻度であり、罹患及び入院のリスク上昇に関連する。免疫無防備状態の同種異系ＨＳＣＴレシピエントのうち、最大４０％が、軽度（鼻漏、咳及び発熱を含む関連症状）から重度（細気管支炎及び肺炎）まで様々であり得るＣＡＲＶ感染症を経験し、ＬＲＴＩを有するレシピエントでは、関連死亡率が５０％にも達する。治療法の選択肢は限られている。ｈＭＰＶ及びＰＩＶの場合、現在、承認された予防用ワクチンも治療用の抗ウイルス薬も無く、ヌクレオシドアナログＲＢＶの適応外使用及びＤＡＳ－１８１（組換えシアリダーゼ融合タンパク質）の調査的使用の臨床的影響は限定的である。年１回の予防用インフルエンザワクチンは、同種異系ＨＳＣＴレシピエントに対しては移植後少なくとも６ヶ月まで推奨されず（及び強化化学療法又は抗Ｂ細胞抗体のレシピエントでは除外される）、ノイラミニダーゼ阻害剤は、活動性感染症の処置に必ずしも有効ではない。

ＲＳＶについては、エアロゾル化ＲＢＶが、乳児及び小児における重症の細気管支炎を処置するためにＦＤＡの承認を受けており、また、ＵＲＴＩ又はＬＲＴＩを予防するため、及びＨＳＣＴレシピエントにおいてＲＳＶ肺炎を処置するために適応外使用されている。しかしながら、薬物送達のために必要な扱いにくい噴霧化デバイス及び換気システム、並びにかなりの関連コストのせいで、その普及には限界がある。例えば、２０１５年において、エアロゾル化ＲＢＶは、５日間が通常の処置コースで１日あたり２９，９５３ドルのコストがかかる。したがって、承認済みの処置が無いことと、抗ウイルス剤が高コストであることから、本発明者らは養子移入Ｔ細胞を使用して、この患者集団においてＣＡＲＶ感染症を予防及び／又は処置する可能性を探索することにした。

ＣＡＲＶのウイルス制御を媒介する際の機能的なＴ細胞免疫の中心的役割は、ごく最近になって注目を集めるようになった。例えば、ＲＳＶＵＲＴＩを有する１８１名のＨＳＣＴ患者の遡及研究によって、ＬＲＴＩに進行し得る感染症を有する患者を特定する際の鍵となる決定因子としてリンパ球減少症（ＡＬＣ≦１００／ｍｍ^３と定義される）が報告されたが、ＲＳＶ中和抗体レベルは、疾患の進行と有意に関連しなかった。さらに、ＲＳＶＬＲＴＩを処置された、ＨＳＣＴを受けた又は受けていない血液悪性腫瘍を有する１５４名の成人患者の最近の遡及的解析では、リンパ球減少症は、高死亡率と有意に関連した。これらの両研究が、インビボでの防御免疫の媒介における細胞性免疫の重要性を示唆している。

本発明者らのグループは以前に、潜伏ウイルスであるＣＭＶ、ＥＢＶ、ＢＫＶ、ＨＨＶ－６及びＡｄＶをはじめとした一連の臨床上問題になるウイルスを処置するための、エクスビボで拡大されたＶＳＴの実現可能性及び臨床的有用性を実証した。本発明者らの最初の研究（及び他の研究者らの研究）は、ドナー由来のＴ細胞株の安全性及び活性を探索したが、より最近、本発明者らは「既製」のユニバーサルＴ細胞プラットフォームを開発した。これにより、５つすべてのウイルス（ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＢＫＶ、ＨＨＶ－６、ＡｄＶ）に特異的なＶＳＴが、将来を見越して作製され、バンク化されたので、制御されていない感染症を有する免疫無防備状態の患者への投与に直ちに利用可能になることが確実になった。

実際に、本発明者らの最近の第ＩＩ相臨床試験では、従来の抗ウイルス剤に抵抗性であると判明していた合計４５の感染を含む３８名の患者にこれらのＨＬＡ部分適合ＶＳＴを投与したところ、有意な毒性無しに９２％という全奏効率が達成された。養子移入されたＴ細胞を使用した臨床での成功というこの前例、並びに一連のＣＡＲＶに対して有効な治療が無いということから、本発明者らはすぐに、ＶＳＴ治療の治療範囲をＨＳＣＴ後のインフルエンザ、ＲＳＶ、ｈＭＰＶ及びＰＩＶ感染症にまで広げる可能性を探索した。この文脈では、高リスク患者［例えば、低年齢（＜５歳）及び高齢者、免疫系が損なわれている患者］に周期的に予防的にＶＳＴを投与するという選択肢も考慮され得る。

あるいは、これらの細胞は、ＬＲＴへの進行を予防するために、従来の抗ウイルス薬剤が失敗に終わったＵＲＴＩを有する患者において治療的に使用され得る。したがって、本発明者らが確立したＧＭＰ準拠のＶＳＴ製造方法を用いて、本発明者らは、多様なハプロタイプを有する１２名のドナー由来の、Ｔ細胞に対する免疫原性とそれらの配列保存の両方に基づいて選択された一連のＣＡＲＶ由来抗原［インフルエンザ－ＮＰ１及びＭＰ１；ＲＳＶ－Ｎ及びＦ；ｈＭＰＶ－Ｆ、Ｎ、Ｍ２－１及びＭ；ＰＩＶ－Ｍ、ＨＮ、Ｎ及びＦ］に対して反応性であるＶＳＴを作製することの実行可能性を実証した。拡大された細胞は、ポリクローナル（ＣＤ４＋及びＣＤ８＋）であり、Ｔｈ１に極性化しており、多機能であり、感染していない自己又は同種異系の標的は逃れさせるがウイルス抗原を発現している標的は溶解することができたことから、臨床で使用するためのウイルス特異性と安全性の両方が証明された。

最後に、これらの知見の臨床的有意性を評価するために、活動性のＲＳＶ、ｈＭＰＶ及びＰＩＶ感染症を有する５名の同種異系ＨＳＣＴレシピエントの末梢血を調べた。これらの患者のうち４名が１～５週間以内にウイルスの制御に成功し、これは内因性の反応性Ｔ細胞の増幅と同時発生的であり、その後ウイルスがクリアランスされるとベースラインレベルに戻ったが、１名の患者は、感染ウイルスに対する免疫応答を開始せず、現在までに感染は排除されていない。このデータは、エクスビボで拡大された細胞の養子移入が、自身の細胞性免疫が欠けている患者において臨床的に有益であるはずであることを示唆している。

結論として、本発明者らは、インフルエンザ、ＲＳＶ、ｈＭＰＶ及びＰＩＶに対して特異性を有するポリクローナルマルチ呼吸器系（マルチ－Ｒ）ＶＳＴの単一の調製物を、ＧＭＰ準拠の製造方法を用いて臨床的に妥当な数で迅速に作製することが実現可能であることを示した。このデータは、免疫無防備状態の患者においてＣＡＲＶ感染症を予防又は処置するために養子移入されるマルチ－Ｒ－ＶＳＴの将来の臨床試験に対する理論的根拠を提供する。

（実施例３．アロＨＳＣＴ後の感染症を予防及び処置するためのマルチウイルス特異的Ｔリンパ球のドナーミニバンクの作製）
健康個体では、Ｔ細胞免疫がＢＫＶ及び他のウイルスから防御する。アロＨＳＣＴレシピエントでは、強力な免疫抑制性レジメン（及びその後の関連する免疫低下）を使用すると、患者は重症のウイルス感染症にかかりやすくなる。ゆえに、本発明者らのアプローチは、移植患者自身の免疫系が回復するまでの期間にわたってウイルス感染を制御するため及び症状を無くすために、エクスビボで拡大された遺伝的に改変されていないウイルス特異的Ｔ細胞（ＶＳＴ）を投与することによってＴ細胞免疫を回復させることである。この目標を達成するために、本発明者らは将来を見越して、ＨＬＡ部分適合の「既製」品として入手可能である、プレスクリーニングされた（２１ＣＦＲＰａｒｔ１２７１，ｓｕｂｐａｒｔＣによって義務づけられているような感染性物質及び疾患の危険因子について）血清陽性の健康ドナー由来の末梢血単核球（ＰＢＭＣ）からＶＳＴを製造した。

本発明者らのＶＳＴ製品の１つ（Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ）は、５つのウイルス［ＥＢＶ、ＣＭＶ、ＡｄＶ、ＢＫＶ及びヒトヘルペスウイルス６（ＨＨＶ６）］に特異的である。本発明者らはまず、Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ細胞株を作製するために、実施例１に記載されたようなドナーミニバンクを構築しようと試みた。本発明者らの目標は、処置にまわされた同種異系ＨＳＣＴレシピエントの大部分をカバーするのに十分な多様性を有するミニバンクを作製することだった。したがって、上記の実施例におけるように、本発明者らはまず、米国の移植集団の人種的及び民族的多様性を調べ、それをＢａｙｌｏｒＣＣＧＴにおいて同種異系幹細胞移植を受けた患者と比較した（表４及び表５）。これにより、ＢａｙｌｏｒＣＣＧＴ患者集団内の多様性は、米国集団よりもわずかに多様ではないにしても類似していることが実証された。

実施例１に記載された本発明者らのドナー選択モデルを検証するために、本発明者らは、実施例１における方法に従って見込みドナーのＨＬＡ型を同種異系ＨＳＣＴレシピエントと比較し、これにより、標的患者の＞９５％をカバーし得る冗長でない５つのドナーミニバンクに含めるための２５名の個体（ミニバンク１つあたり５名のドナー）を特定するシミュレーションを行った。これらの５つのミニバンクを構築することによって、本発明者らは、各患者に対する冗長性を確保した（すなわち、各患者は、５つの各ミニバンクの中に好適な適合をおそらく有した）。
表６は、この方法に基づいてドナーミニバンクに含めるために特定されたＶｉｒａｌｙｍ－ＭドナーのＨＬＡ型を示している。

シミュレートされた本発明者らのＶｉｒａｌｙｍ－Ｍドナーバンク（表６）が、記載のカバー度を実際に提供し得るかを正式に評価するために、本発明者らはまず、このバンクが、少なくとも２つのＨＬＡアレルにおいて適合した効力のあるＴ細胞製品を用いる本発明者らのＰＯＣ第ＩＩ相試験に登録された患者に対応する能力を評価した。図３２に示されているように、本発明者らは実際に、少なくとも２つのＨＬＡアレルにおいて適合した製品で５４名すべての患者（１００％）に対応することができ、５±１つの共有アレルという平均値を達成した（範囲２～７／８の適合アレル）。さらに、この解析を本発明者らの＞６５０名のＢａｙｌｏｒＣＣＧＴ同種異系ＨＳＣＴ患者集団全体にまで広げたときも、少なくとも２つのＨＬＡアレルにおいて適合した製品ですべての見込み患者の１００％に対応することができ、また、５±１つの共有アレルという平均値も達成した（範囲２～８／８の適合アレル）（図３３）。

まとめると、これらのデータは、本発明者らのドナーミニバンク（慎重に選択されたドナーから作製されたウイルス特異的Ｔ細胞株を含む）が、最低２つのＨＬＡアレルにおいて適合した製品で米国の同種異系ＨＳＣＴ患者集団の少なくとも９５％をカバーできることを裏付けた。

Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ製造プロセスは、本発明者らによってＷＯ２０１３／１１９９４７に、及びＴｚａｎｎｏｕｅｔａｌ．，ＪＣｌｉｎＯｎｃｏｌ．２０１７Ｎｏｖ１；３５（３１：３５４７－３５５７（これらの各々は、その全体が参照により本明細書中に援用され、図１２に概説されている）に、先に記載されたとおりだった。簡潔には、血清陽性の健康ドナーからＰＢＭＣを単離し、２５０×１０^６個のＰＢＭＣを、完全培地、ＶｉｒａｌｙｍＭ抗原をカバーするペプミックス（アデノウイルス、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＢＫＶ及びＨＨＶ６）、ＩＬ－４及びＩＬ－７の存在下、Ｇ－Ｒｅｘ１００Ｍ培養システム（ＷｉｌｓｏｎＷｏｌｆ，ＳａｉｎｔＰａｕｌ，ＭＮ）において、およそ７～１４日間、３７℃、５％ＣＯ_２で培養した（場合によっては培養時間がおよそ１８日間まで延長し得る）。培養の後、ＶｉｒａｌｙｍＭ細胞株を収集し、洗浄し、品質管理の検査において又は治療薬として使用するまで液体窒素中で凍結保存するために分注した。

図１３は、アデノウイルス、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＢＫＶ及びＨＨＶ６に対する抗原特異的Ｔ細胞株のそれぞれの効力を、効力閾値未満のネガティブコントロールと比べて示している。これらのＴ細胞は、特異的なＴ細胞株の合格と不合格とを区別するための閾値である＞３０ＳＦＣ／２×１０^５投入ＶＳＴによって指摘されるように、５つすべてのウイルスに特異的である。＞３０ＳＦＣ／２×１０^５投入ＶＳＴという効力閾値は、内部ネガティブコントロールとして働く、標的ウイルスの１つ以上について血清陰性の（血清学的スクリーニングに基づいて）ドナーから生成されたＴ細胞株を用いた実験データに基づいて確立された（図１４）。

本発明者らは、処置抵抗性感染症を有する５８名の同種異系ＨＳＣＴ患者にＶＳＴを投与した第２相オープンラベル概念実証試験においてＶｉｒａｌｙｍ－Ｍを評価した。本発明者らは、この試験をＣＨＡＲＭＳと呼ぶ。この研究のデータは、（Ｔｚａｎｎｏｕｅｔａｌ，ＪＣＯ，２０１７）に報告している。

ＣＨＡＲＭＳは、優位性又は有意性に対する統計的検出力が不足していたが、その主目的は、５つのウイルスに特異的なＨＬＡ部分適合マルチＶＳＴ治療の実行可能性及びその投与の安全性を、持続的なウイルス再活性化又はウイルス感染を有するＨＳＣＴ患者において判定することだった。患者は、標準的な抗ウイルス治療にもかかわらず、再発性であるか、再活性化されたか又は持続的である、ＢＫＶ、ＣＭＶ、ＡｄＶ、ＥＢＶ、ＨＨＶ－６及び／又はＪＣＶ感染症を有した場合、任意のタイプの同種異系移植後に適格となった。

マルチウイルス特異的Ｔ細胞（Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ細胞）の同種反応性の可能性を評価するために、本発明者らはまず、各ウイルス；Ａｄｖ（ヘキソン及びペントン）、ＣＭＶ（ＩＥ１及びｐｐ６５）、ＥＢＶ（ＬＭＰ２、ＥＢＮＡ１、ＢＺＬＦ１）、ＢＫウイルス（ＶＰ１及びラージＴ）及びＨＨＶ６（Ｕ９０、Ｕ１１及びＵ１４）に由来する免疫原性抗原を網羅するペプチド混合物でＰＢＭＣを直接活性化した。次いで、ＩＬ４＋７（図１２に記載されているように）が補充されたＴ細胞培地が入ったＧ－Ｒｅｘデバイスに細胞を移し、ＨＬＡ不適合の標的に対する細胞傷害活性を評価した。図３４に示されているように、これらの細胞は、最小の／検出不可能な同種反応性しか示さなかったことから、ＨＬＡ部分適合の「既製」品として投与したときのこれらの細胞の潜在的な安全性が裏付けられた。

続いて、同種異系ＨＳＣＴ後の小児及び成人における難治性ウイルス感染症を処置するために、部分的にＨＬＡが適合するＶｉｒａｌｙｍ－Ｍ細胞の安全性及び臨床効果を探索した（Ｔｚａｎｎｏｕｅｔａｌ，ＪＣＯ，２０１７）。

すべての注入が良好な耐容性を示した。注入の２４時間以内に一過性の発熱を呈した３名の患者及びリンパ節疼痛を呈した１名を除いて、急性毒性は観察されなかった。サイトカイン放出症候群（ＣＲＳ）を発症した患者はいなかった。注入後の数週間において、１名の患者が、急速なステロイド漸減の後に反復性のグレードＩＩＩ消化管（ＧＩ）ＧＶＨＤを発症し、８名の患者が、反復性（ｎ＝４）又は新規（ｎ＝４）のグレードＩ～ＩＩ皮膚ＧＶＨＤを発症したが、コルチコステロイドの局所処置（ｎ＝７）及び漸減後の再開（ｎ＝１）を行うことによって消失した。

臨床効果：
評価可能なデータを提供した５２名の処置患者における６０の感染症について、下記に要約されるように、Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ注入後の６週目までの累積臨床奏効率は９３％だった：
・ＢＫＶ：持続的なウイルスＢＫＶ感染及び組織疾患を処置するために、２２名の患者にＶｉｒａｌｙｍ－Ｍを投与した（２０名がＢＫ－出血性膀胱炎を有し、２名がＢＫＶ関連腎炎を有した）。２０名すべてのＢＫ－ＨＣ患者が、Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍを投与された後、臨床症状を消失させ、９名が完全奏効（ＣＲ）、１１名が部分奏効（ＰＲ）で、６週間の累積奏効は１００％だった。
・ＣＭＶ：持続的ＣＭＶに対して２０名の患者にＶｉｒａｌｙｍ－Ｍを投与した。１９名の患者が、Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍに応答し、７名がＣＲ、１２名がＰＲ、１名が非応答者（ＮＲ）で、６週間の累積奏効率は９５％だった。応答者には、大腸炎を有した３名の患者のうちの２名及び脳炎を有した１名の患者が含まれた。
・ＡｄＶ：持続的ＡｄＶに対して１１名の患者にＶｉｒａｌｙｍ－Ｍを投与し、注入によって、７名のＣＲ、２名のＰＲ及び２名のＮＲがもたらされ、６週間の累積奏効率は８１．８％だった。
・ＥＢＶ：持続的ＥＢＶを処置するために、３名の患者にＶｉｒａｌｙｍ－Ｍを投与した。２名の患者がウイルス学的ＣＲを達成し、１名の患者がＰＲを達成した。
・ＨＨＶ６：ＨＨＶ６再活性化を処置するために、難治性脳炎を有する１名の患者を含む４名の患者にＶｉｒａｌｙｍ－Ｍを投与したところ、３名の患者が、注入の６週間以内にＰＲを示した（脳炎を有した患者を含む）が、１名は処置に応答しなかった。
・二重感染：２つのウイルス感染に対して、８名の患者にＶｉｒａｌｙｍ－Ｍを投与したところ、１回の注入後に、全体として１２名のＣＲ及び４名のＰＲが認められた。すべての症例においてＣＭＶ、ＡｄＶ及びＥＢＶが排除され、ＢＫＶＨＣを有したすべての患者が、臨床上の改善（ｎ＝３）又は疾患の消失（ｎ＝２）を示し、ＨＨＶ６脳炎を有した患者も臨床上の改善を示した。

本発明者らは、臨床的有効性に関連するＨＬＡ適合の閾値が存在するかを判断するために、本発明者らの第Ｉ／ＩＩ相Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ研究から入手可能なデータを調べた。本発明者らの臨床試験において、臨床で使用された製品は、１／８（ｎ＝２）、２／８（ｎ＝１０）、３／８（ｎ＝１１）、４／８（ｎ＝１４）、５／８（ｎ＝１４）、６／８（ｎ＝４）又は７／８（ｎ＝５）のＨＬＡアレルにおいて適合した。臨床成績とＨＬＡ適合の程度との間に相関関係があるかを判定するために、患者を完全奏効（ＣＲ）、部分奏効（ＰＲ）及び非応答者（ＮＲ）に区分したが、図３５に要約されているように、結果から、ＨＬＡ適合アレルの数に基づいてはアウトカムに差がなかったと示唆された。

本発明者らは次に、ＨＬＡクラスＩのみ、クラスＩＩのみ又はその両方の組み合わせにおいて適合する株の投与に基づいてアウトカムに差があったかを調べた。著しいことに、患者の大部分が、クラスＩアレルとクラスＩＩアレルの両方において適合する株を投与されており（図３６）、その結果から、この場合もまた、アウトカムはアレルの適合の程度に影響されなかったことが示唆された（図３７）。

上記のように、同種ＨＳＣＴ後のＢＫＶ感染の主要な臨床症状は出血性膀胱炎（ＢＫ－ＨＣ）である。ＣＨＡＲＭＳ研究では、ウイルス誘発性出血性膀胱炎を有する２６名の患者を、上記のようにＶＳＴで処置し、患者を、注入後０、２、４、及び６週目に回出血性膀胱炎について等級分けした。注入前の膀胱炎グレードの平均は２．８１±０．０８であった。膀胱炎グレーディングに適格であった試験の全２４名の患者で、ＢＫ－ＨＣは急速に消散した。消散は≦グレード１と定義した。図３７に示されるように、消散は、注入後２週間までにＶＳＴレシピエント患者の５０名％において、注入後６週間までに患者の７５名％において達成された。図３８は、標準治療を受けた（ＶＳＴなし）グレード３のＢＫ－ＨＣの平均を有する３３名のＨＳＣＴ患者からの履歴データと比較した、２０名の患者における膀胱炎の経時的な迅速な消散を示す。特に、ＶＳＴレシピエントを低レベルＨＬＡ一致群（６つのうちの１～２つ一致）及び高レベルＨＬＡマッチ群（６つの一致うちの３～４つ一致）に分けた場合、平均膀胱炎グレードの低下は、両方の群において同程度であった（図３９）。したがって、ＶＳＴは、低レベルのＨＬＡ一致の設定においても有効である。

さらに、重要なことには、ＣＨＡＲＭＳ研究は、第２の株が高度に不適合であったとしても、１つより多い異なるＶＳＴ製品（ＶｉｒａｌｙｍＭ）の投与が安全であり、効果があることを実証した。例えば、Ｔｚａｎｎｏｕ（２０１７）の表２に報告されているように、数人の患者に２つの別個の細胞株の投与したところ、有益な応答があった：

さらに、下記の表８において改変されたＴｚａｎｎｏｕ（２０１７）の表Ａ７に示されているように、少なくとも２つの細胞株の投与を受けたこれらの患者は、６週目までにａＧＶＨＤを、又は処置の１年以内にｃＧＶＨＤを全く又はほとんど示さなかった。

したがって、この第Ｉ／ＩＩ相のデータからのこれらの結果は、患者の＞９５％が≧２のＨＬＡアレルにおいて適合した製品を投与され、それが臨床的有用性に関連したことを実証した。ＨＬＡクラスＩにおける適合かクラスＩＩにおける適合かは、アウトカムに影響しないとみられ、細胞の安全性プロファイルに影響しなかったし、第２の株が非常に不適合だったときでさえ、所与の患者に１つより多い細胞株を投与することにも影響しなかった。

（実施例４．ユニバーサル細胞療法製品）
上で論じられたように、株選択のための判定基準としてＨＬＡ適合（≧２アレル閾値）を用いて同種異系ＨＳＣＴレシピエントに投与したとき、これらの細胞は、安全であることが判明し、本発明者らのＰＯＣ臨床試験（実施例３及び臨床試験識別子ＮＣＴ０２１０８５２２）における５つすべての標的ウイルスに対して抗ウイルス活性を提供した。さらに、複数の異なる細胞株製品の注入は、その細胞株が高い不適合の程度を有したときでさえ、良好な耐容性を示した（例えば、２つのアレルにおいてしか適合しない第２の細胞株を注入された患者番号３７５５を参照のこと（対５つのアレルにおいて適合する第１の株）。

これらの結果は、アレルの適合の程度が様々である複数の細胞株を１名の患者に投与するリスクがほとんどないか全くないことを示唆している。これらの結果に基づいて、所与のドナーミニバンク内のすべての細胞株をプールすることによってユニバーサル細胞療法製品が調製される。各ミニバンクが、標的患者集団の＞９５％をカバーするので、そのようなユニバーサル細胞療法製品は、見込み患者の＞９５％に適合する細胞療法製品を含む。したがって、場合によっては、ユニバーサル細胞療法製品は、被験体のＨＬＡ型に関係なくそれを必要とする被験体に投与される。場合によっては、ユニバーサル細胞療法製品は、ユニバーサル細胞療法製品内の少なくとも１つの細胞株と少なくとも２つのアレルにおいてＨＬＡが適合している、それを必要とする被験体に投与される。被験体は、ＨＳＣＴレシピエントであり得る。

場合によっては、ドナーミニバンク内の複数の細胞療法製品が被験体に連続的に投与される。例えば、１つの場合においては、ドナーミニバンク内のすべての細胞療法製品がそれを必要とする１名の被験体に投与される。

（実施例５．患者をドナーミニバンク内の最適な細胞株とマッチさせる方法）
ドナーミニバンク内の考えられる最良の細胞療法製品が所与の患者に投与されるのを確実なものにするために、本発明者らは、図１に要約されているような、バンク化されたＶｉｒａｌｙｍ－Ｍ細胞と（ａ）ＨＳＣＴ患者及び（ｂ）幹細胞ドナーとの間でＨＬＡ適合の総合レベルが最も高いものを選択する患者マッチアルゴリズムを開発した。詳細には、このアルゴリズムは、以下の段階的なプロセスを実行する：
工程：１．当該患者のＨＬＡ型を含む文書を入手する；
２．幹細胞ドナーのＨＬＡ型（以後「移植ＨＬＡ」と呼ぶ）を含む文書を入手する；
３．患者のＨＬＡ（工程１）と移植ＨＬＡ（工程２）のタイプを比較し、共有ＨＬＡアレルを特定する；
４．ドナーミニバンクを構成している個別の株（例えば、Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ）のＨＬＡ型にアクセスする；
５．１次スコア：ミニバンク内の各細胞株（例えば、Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ）のＨＬＡ型を工程３において特定された共有ＨＬＡアレルと比較する。共有ＨＬＡアレルの数に基づいて各比較に数値スコアを割り当てる；共有されるアレルが多いほど、スコアが高くなる；
６．２次スコア：ミニバンク内の各細胞株（例えば、Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ）のＨＬＡ型を工程１において特定された患者ＨＬＡ（感染組織に相当する）と比較する。共有ＨＬＡアレルの数に基づいて各比較にスコアを割り当てる。共有されるアレルが多いほど、スコアが高くなる。この２次スコアに１次スコアの５０％の重みを付ける；
７．細胞バンク内の各株に対する１次スコア（工程５）及び２次スコア（工程６）を合算する；
８．次いで、上記の順位（工程７）に基づいて、スコアが最も高い細胞株（例えば、Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ）を当該患者の処置のために選択する。

臨床で適用すると、このアプローチは、許容され得る安全性プロファイル（４例の新規のグレードＩ～ＩＩ皮膚ＧＶＨＤ及び１例のグレード３ＧＩＧＶＨＤ発赤）並びに感染及び疾患の処置に対する概念証明を示し、現在までに処置された５４名の患者において９３％の奏効率が達成された。表９には、本発明者らの第Ｉ／ＩＩ相臨床試験において第三者Ｖｉｒａｌｙｍ－Ｍ細胞で処置された５４名すべての患者の安全性及び臨床成績が要約されている。

このように、これらのデータは、本発明者らのミニバンク由来のＶｉｒａｌｙｍＭ製品が、本発明者らの患者適合アルゴリズムを用いて十分に適合する患者に投与されたとき、良好な耐容性を示し、有効であったことを実証している。

実施例６．ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品の生成及び試験
図４０は、個々の抗原特異的Ｔ細胞療法製品を調製及び使用するための従来の方法と比較した、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品の生成及び使用の概略図を提供する。

異なるＨＬＡ型を有するドナー由来の個々のＶＳＴ製品をプールすることによって、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞製品を調製するための研究を行った。この研究では、プールされた製品（本明細書ではＵＶＳＴと呼ぶ）の効力及び安全性を確立するために実験を行った。例えば、効力は、ＩＦＮγ ＥＬＩＳＰＯＴによって測定した。さらに、ＩＦＮγ ＥＬＩＳＰＯＴを用いて、プールされた製品が、個々の系統に特有のＨＬＡ拘束性エピトープペプチドを認識する個々のＶＳＴ株のそれぞれからの細胞を含有することを確認した。最後に、安全性を、同種反応性の欠如によって測定した。また、自己反応性も測定した。

以下の表１０に示すように、異なるＨＬＡ型を有する３名のドナーについて、個々のドナー製品を調製した。個々の細胞株は、例えば、以前にＷＯ２０１３／１１９９４７及びTzannou et al, J Clin Oncol. Nov 1;35（31:3547-3557）（これらの各々は、その全体が参照により本明細書に組み込まれ、図１２に概説される）に記載されたように調製した。簡単に述べると、ＰＢＭＣを健康な血清陽性ドナーから単離し、２５０×１０⁶ ＰＢＭＣを、完全培地と、アデノウイルス、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＢＫＶ及びＨＨＶ６抗原をカバーするペプミックスと、ＩＬ－４及びＩＬ－７とを含むＧ－Ｒｅｘ１００Ｍ培養系（Wilson Wolf, Saint Paul, ＭＮ）中で、３７℃、５％ＣＯ_２で１４日間培養した。

一旦細胞株がプールされると、各株の追跡を容易にするために、特有の免疫原性ＨＬＡ制限エピトープ（ＵＥ）を各ドナーについて特定した：
ＵＥ１－ＨＨＶ６：Ｕ１１：エピトープペプチド１６８（ＨＬＡ－Ａ１制限－ドナー１に特有）
ＵＥ２－ＨＨＶ６：Ｕ１４：エピトープペプチド１０２（ＨＬＡ－Ａ２－ＤＲ１５制限－ドナー２に特有）
ＵＥ３－ＨＨＶ６：Ｕ１４：エピトープペプチド４０（ＨＬＡ－Ａ２－ＤＲ１１制限－ドナー３に特有）

１５×１０ｅ６ＶＳＴを各ドナー製品からプールし、トータル４５×１０ｅ６ＶＳＴ／バイアル（１：１：１比）でＵＶＳＴ製品として凍結するために組み合わせた。同時に、各ドナーからの個々の細胞株製品を１５×１０ｅ６ＶＳＴ／バイアルで凍結した。

プールしたＵＶＳＴ製品及び個々のＶＳＴ細胞株のバイアルを解凍し、一晩静置し、次いで、ＩＦＮγ ＥＬＩＳｐｏｔによって同一性及び効力について、並びにクロム放出アッセイによって自己反応性及び同種反応性について試験した。

ＩＦＮγ ＥＬＩＳｐｏｔを、解凍された（個体及びプールされた)ＶＳＴに対して行い、以下のウイルス抗原及び特有のエピトープ（ＵＥ）ペプチドに対する効力を評価した：
ウイルス（抗原）－ＡＤＶ、ＢＫＶ、ＣＭＶ、ＥＢＶ、ＨＨＶ６
特有の（トラッキング）エピトープペプチド－ＵＥ１、ＵＥ２、ＵＥ３
コントロール：
無関係な抗原－サバイビン
無関係なペプチド－ペプチド１８３；
陰性対照－培地のみ
陽性対照－ＰＨＡ

ＵＥウェルについては、ＵＶＳＴを６×１０ｅ５／ウェルでプレーティングした。５つのウイルス抗原及び対照について、ＵＶＳＴを２×１０ｅ５／ウェルでプレーティングした。個々のドナー製品の効力を試験するために、個々のドナー製品を、５つのウイルス抗原、対照、及びＵＥのそれぞれについて２×１０ｅ５／ウェルでプレーティングした。スポット形成単位（ＳＦＵ）／２ｘ１０ｅ５ＶＳＴ／ウェルを、ＭａｂｔｅｃｈＩＲＩＳリーダーを用いて定量した。試験の結果を表１１に示す。ＵＶＳＴは、各ウイルス抗原及び各ドナーＵＥに応答してＩＦＮγを産生した。したがって、個々のＶＳＴ細胞株のそれぞれの同一性は、ＩＦＮγ ＥＬＩＳｐｏｔアッセイによってＵＶＳＴ製品中で確認され、ユニバーサルＶＳＴが解凍後に効力を発揮することを示した。

自己ＰＨＡ芽球又は同種ＰＨＡ芽球に対するＵＶＳＴの自己及び同種反応性を評価するために、クロム放出アッセイを実施した。ＰＨＡ芽球を作製するために、ＰＢＭＣをＩＬ－２の存在下でヒトヘマグルチニン（ＰＨＡ）で刺激した。ＵＶＳＴ細胞をエフェクターとして使用した。標的は、各ドナー別々（ドナー１、２、及び３）由来の自己ＰＨＡ芽球、又は非血縁ドナー由来のＰＨＡ芽球（ドナー４、上記で提供された３名のドナーと共に以下の表１２に示される）であった。細胞を、エフェクター対標的比４０：１（６×１０ｅ５ＵＶＳＴエフェクター対５×１０ｅ３標的）でプレーティングした。

結果を図４１に示す。自己芽球に対する自己反応性はなかった。さらに、非血縁ドナーに対する同種反応性はなかった

したがって総合すると、本研究の結果は、ＵＶＳＴが抗原特異性横断的に強力であり、非血縁ドナー細胞を含むドナー細胞に対して同種反応性がなく、したがって、ユニバーサル細胞療法製品としての使用に適していることを実証した。

実施例７．製品の再凍結後のＵＶＳＴの安全性及び効力
解凍されたＵＶＳＴ製品が凍結及び解凍された細胞株からプールされて組み合わされたユニバーサル製品として再凍結した後に、安全かつ有効であるかどうかを決定するために、研究を行った。安全性は、同種反応性によって評価した；そして有効性は製品中のＴ細胞の生存率及び特異性によって評価した。

製品の製造は、表１２に提供されるものと同じドナーを用いて、実施例６に記載されるように行った。３つの個々のＶＳＴ細胞株（ドナー１、２、及び３由来）の作製後、個々の細胞株を１５×１０ｅ６ＶＳＴ／バイアルで凍結保存した。翌日、３つのドナー製品のそれぞれからのバイアルを解凍し、一晩静置した。細胞をＶＳＴ培地に再懸濁し、１０ｎｇ／ｍＬのＩＬ－７及び４００Ｕ／ｍＬのＩＬ－４を添加し、２４ウェルプレートに移して３７℃、５％ＣＯ_２で一晩インキュベートした。静置後、各ドナーからのＶＳＴ（それぞれ５ｘ１０ｅ６細胞）を１：１：１の比率で一緒にプールし、合計１５×１０ｅ６ＶＳＴ／ｓバイアルとした。次いで、プールされた製品を、組み合わせたユニバーサル製品（ＵＶＳＴ）として凍結保存した。

続いて、プールされたＵＶＳＴ製品のバイアル、並びに凍結された個々のＶＳＴを解凍した。効力及び同一性は、ＩＦＮγ ＥＬＩＳＰＯＴによって評価した。ＵＶＳＴを、５つのウイルス抗原（ＡＤＶ、ＢＫＶ、ＣＭＢ、ＥＢＶ、及びＨＨＶ６）、特有のトラッキングエピトープペプチド（ＵＥ１、ＵＥ２、及びＵＥ３）、並びに実施例６で上述したような対照と共にプレーティングした。表１３は、プールされ、再凍結され、解凍されたＵＶＳＴが各ウイルス抗原及び各ドナーＵＥに応答してＩＦＮγを産生したことを示す、研究の結果を提供する。したがって、個々のＶＳＴ株の各々の同一性及び効力は、解凍された個々の細胞株から生成された凍結及び解凍されたＵＶＳＴ製品内で維持された。

本試験の結果は、個々のＶＳＴ株を作製し、同一性、効力、及び／又は他の品質管理パラメーターを確認するために評価し、次いで、プールする前に凍結することができ；その後、個々の細胞株を解凍し、一緒にプールして、ユニバーサルなＶＳＴ製品を作製して、その後これを後の使用のために凍結することができることを示す。したがって、個々のＶＳＴ製品の既存のバンクを解凍し、一緒にプールしてＵＶＳＴを生成することができ、その後、これを後の使用のために凍結保存することができる。

Claims

複数の異なるドナーに由来する複数の抗原特異的Ｔ細胞株を含む抗原特異的Ｔ細胞の集団であって、各ドナーのＨＬＡ型が、少なくとも１つのＨＬＡアレルにおいて少なくとも１名の他のドナーと異なる、集団。
前記抗原特異的Ｔ細胞株が、クローン性、オリゴクローナル、又はポリクローナルである、請求項１に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
各ドナーのＨＬＡ型が、少なくとも２つのＨＬＡアレルにおいて、少なくとも１名の他のドナーと異なる、請求項１又は請求項２に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
各ドナーのＨＬＡ型が、少なくとも３つのＨＬＡアレルにおいて、少なくとも１名の他のドナーと異なる、請求項１～３のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
各ドナーのＨＬＡ型が、１つ以上のクラスＩＨＬＡアレルにおいて、少なくとも１名の他のドナーと異なる、請求項１～４のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
各ドナーのＨＬＡ型が、２つ以上のクラスＩＨＬＡアレルにおいて、少なくとも１名の他のドナーのＨＬＡ型と異なる、請求項５に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
各ドナーのＨＬＡ型が、少なくとも１つのＨＬＡ－Ａ及び１つのＨＬＡ－Ｂアレルにおいて、少なくとも１名の他のドナーと異なる、請求項６に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
各ドナーのＨＬＡ型が、１つ以上のクラスＩＩＨＬＡアレルにおいて、少なくとも１名の他のドナーと異なる、請求項１に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
各ドナーのＨＬＡ型が、ＨＬＡ－ＤＰＡ１、ＨＬＡ－ＤＰＢ１、ＨＬＡ－ＤＱＡ１、ＨＬＡ－ＤＱＢ１、ＨＬＡ－ＤＲＡ、及びＨＬＡ－ＤＲＢ１からなる群から独立して選択される２つ以上のアレルにおいて、少なくとも１名の他のドナーと異なる、請求項８に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
各ドナーのＨＬＡ型が、少なくとも１つのＨＬＡ－ＤＲＢ１アレル及び１つのＨＬＡ－ＤＱＢ１アレルにおいて、少なくとも１名の他のドナーと異なる、請求項９に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記複数のドナーが、少なくとも２つの異なるＨＬＡ－Ａアレル、少なくとも２つの異なるＨＬＡ－Ｂアレル、少なくとも２つの異なるＤＲＢ１アレル、及び／又は少なくとも２つの異なるＤＱＢ１アレルを有する、請求項１～１０のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記複数の抗原特異的Ｔ細胞株が、３名以上の異なるドナーに由来する、請求項１～１１のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記複数の抗原特異的Ｔ細胞株が、５名以上の異なるドナーに由来する、請求項１～１２のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
各ドナーのＨＬＡ型が、少なくとも１つのＨＬＡアレルにおいて、少なくとも２名の他のドナーと異なる、請求項１２又は１３に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
各ドナーのＨＬＡ型が、少なくとも１つのＨＬＡアレルにおいて、それぞれ他のドナーと異なる、請求項１～１４のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記複数の異なるドナーのうちの少なくとも１名が、少なくとも２つのＨＬＡアレルにおいて、見込み患者集団において取り得る最大数の患者と一致する、請求項１～１５のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記複数の異なるドナーのうちの少なくとも１つが、少なくとも４つのＨＬＡアレルにおいて、見込み患者集団において取り得る最大数の患者と一致する、請求項１～１６のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記集団が、各ＨＬＡアレルにおいて見込み患者集団における１名以上の患者と一致するＴ細胞を含む、請求項１～１６のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記複数の抗原特異的Ｔ細胞株が、１５名以下のドナー、１０名以下のドナー、又は５名以下のドナーに由来する、請求項１～１８のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記各ドナー由来の抗原特異的Ｔ細胞株が、各細胞株が生成された後に一緒にプールされた、請求項１～１９のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
各ドナー由来の抗原特異的Ｔ細胞株が、各細胞株が細胞株の同一性、生存率、無菌性、表現型、効力、及び／又は同種反応性について個別に評価された後に一緒にプールされた、請求項１～２０のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
各細胞株の効力が、ＩＦＮγ産生によって評価された、請求項２１に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
ＩＦＮγ産生が、ＩＦＮγ ＥＬＩＳＰＯＴアッセイによって決定された、請求項２２に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
各細胞株の無菌性が、細菌汚染、真菌汚染、マイコプラズマ、及び／又はエンドトキシンレベルについて試験することによって決定された、請求項２１に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
各細胞株が、５ＥＵ／ｍＬ未満のエンドトキシンレベルを有する、請求項２４に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
各細胞株の表現型が、フローサイトメトリーによって評価された、請求項２１に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
各細胞株が、少なくとも９０％のＣＤ３＋細胞を含む、請求項２１に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
非血縁及び／又は部分的にＨＬＡ適合及び／又はＨＬＡ不適合標的細胞に対する各抗原特異的Ｔ細胞株の同種反応性が、クロム放出アッセイによって評価された、請求項２１に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記細胞株のプールが、ＨＬＡ型でタイピングされた、請求項２０に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記細胞株のプールが、ＨＬＡ拘束性エピトープを使用して機能的応答について試験されている、請求項２０に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
各ドナー由来の抗原特異的Ｔ細胞株が、各細胞株を個別に凍結保存してその後解凍した後に一緒にプールされている、請求項１～３０のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記プールされた抗原特異的Ｔ細胞株が凍結保存されている、請求項２０～３１のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記Ｔ細胞株が、約１：１の比で一緒にプールされている、請求項２０～３１のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
約１０×１０^６～約１００×１０^６個のＴ細胞を含む、請求項１～３２のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
約４５×１０^６個のＴ細胞を含む、請求項３４に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記Ｔ細胞が、１つ以上のウイルス抗原又は１つ以上の腫瘍関連抗原に特異的である、請求項１～３５のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
１つ以上のウイルス抗原が、エプスタイン・バーウイルス（ＥＢＶ）、サイトメガロウイルス（ＣＭＶ）、アデノウイルス（ＡｄＶ）、ＢＫウイルス（ＢＫＶ）、ＪＣウイルス、ヒトヘルペスウイルス６（ＨＨＶ６）、呼吸器合胞体ウイルス（ＲＳＶ）、インフルエンザ、パラインフルエンザ、ボカウイルス、コロナウイルス、リンパ球脈絡髄膜炎ウイルス（ＬＣＭＶ）、ムンプス、麻疹、ヒトメタニューモウイルス（ｈＭＰＶ）、パルボウイルスＢ、ロタウイルス、メルケル細胞ウイルス、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）、Ｂ型肝炎ウイルス（ＨＢＶ）、Ｃ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）、Ｄ型肝炎ウイルス（ＨＤＶ）、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、ヒトＴ細胞白血病ウイルス１型（ＨＴＬＶ１）、ヒトヘルペスウイルス８（ＨＨＶ８）、西ナイルウイルス、ジカウイルス、及びエボラウイルスからなる群より選択される１つ以上のウイルスに由来する、請求項３６に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記１つ以上のウイルス抗原が、ＢＫＶ、ＣＭＶ、ＡｄＶ、ＥＢＶ、及びＨＨＶ－６由来の抗原を含む、請求項３６又は３７に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記１つ以上のウイルス抗原が、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ、及びｈＭＰＶ由来の抗原を含む、請求項３６又は３７に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記１つ以上のウイルス抗原が、コロナウイルス由来の抗原を含む、請求項３６、３７、又は３８に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記コロナウイルスが、ＳＡＲＳ－Ｃｏｖ－２である、請求項４０に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記１つ以上のウイルス抗原が、ＨＢＶ由来の抗原を含む、請求項３６又は３７に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記１つ以上のウイルス抗原が、ＨＨＶ－８由来の抗原を含む、請求項３６又は３７に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記１つ以上の腫瘍関連抗原が、ＣＥＡ、ＭＨＣ、ＣＴＬＡ－４、ｇｐ１００、メソテリン、ＰＤ－Ｌ１、ＴＲＰ１、ＣＤ４０、ＥＧＦＰ、Ｈｅｒ２、ＴＣＲα、ｔｒｐ２、ＴＣＲ、ＭＵＣ１、ｃｄｒ２、ｒａｓ、４－１ＢＢ、ＣＴ２６、ＧＩＴＲ、ＯＸ４０、ＴＧＦ－α、ＷＴ１、ＭＵＣ１、ＬＭＰ２、ＨＰＶＥ６Ｅ７、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＨＥＲ－２／ｎｅｕ、ＭＡＧＥＡ３、ｐ５３非変異体、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＳＭＡ、ＧＤ２、ＭｅｌａｎＡ／ＭＡＲＴ１、Ｒａｓ変異体、ｇｐ１００、ｐ５３変異体、プロテイナーゼ３（ＰＲ１）、ｂｃｒ－ａｂｌ、チロシナーゼ、サバイビン、ＰＳＡ、ｈＴＥＲＴ、ＥｐｈＡ２、ＰＡＰ、ＭＬ－ＩＡＰ、ＡＦＰ、ＥｐＣＡＭ、ＥＲＧ（ＴＭＰＲＳＳ２ＥＴＳ融合遺伝子）、ＮＡ１７、ＰＡＸ３、ＡＬＫ、アンドロゲン受容体、サイクリンＢ１、ポリシアル酸、ＭＹＣＮ、ＲｈｏＣ、ＴＲＰ－２、ＧＤ３、フコシルＧＭ１、メソテリン、ＰＳＣＡ、ＭＡＧＥＡ１、ｓＬｅ（ａ）、ＣＹＰ１Ｂ１、ＰＬＡＣ１、ＧＭ３、ＢＯＲＩＳ、Ｔｎ、ＧｌｏｂｏＨ、ＥＴＶ６－ＡＭＬ、ＮＹ－ＢＲ－１、ＲＧＳ５、ＳＡＲＴ３、ＳＴｎ、炭酸脱水酵素ＩＸ、ＰＡＸ５、ＯＹ－ＴＥＳ１、精子タンパク質１７、ＬＣＫ、ＨＭＷＭＡＡ、ＡＫＡＰ－４、ＳＳＸ２、ＸＡＧＥ１、Ｂ７Ｈ３、レグマイン、Ｔｉｅ２、Ｐａｇｅ４、ＶＥＧＦＲ２、ＭＡＤ－ＣＴ－１、ＦＡＰ、ＰＤＧＦＲ－β、ＭＡＤ－ＣＴ－２及びＦｏｓ関連抗原１からなる群から選択される、請求項３６に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記集団中の１つ以上のＴ細胞が、外来性分子を発現する、請求項１～４４のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記外来性分子が治療剤である、請求項４５に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記治療剤が、化学療法薬、サイトカイン、ケモカイン、腫瘍増殖の小分子阻害剤、又は免疫阻害剤分子を隔離する分子である、請求項４６に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記外来性分子が、トランスジェニック分子である、請求項４５～４７のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記トランスジェニック分子が、細胞外結合ドメイン、膜貫通ドメイン及びシグナル伝達ドメインを含む、請求項４８に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記細胞外結合ドメインが、癌抗原に特異的である、請求項４９に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
前記トランスジェニック分子が、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）又はＮＫ細胞受容体である、請求項４８に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団。
請求項１～５１のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞株の集団を含む、組成物。
凍結保存培地を含む、請求項５２に記載の組成物。
前記凍結保存培地が、ヒト血清アルブミン、ハンクス平衡塩類溶液（ＨＢＳＳ）及び約１０％（ｖｖ）ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を含む、請求項５３に記載の組成物。
前記凍結保存培地が、約５０％（ｖ／ｖ）の２５％ヒト血清アルブミン及び約４０％（ｖ／ｖ）のＨＢＳＳを含む、請求項５４に記載の組成物。
請求項１～５１のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞の集団を含むユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品であって、該製品が、部分的にＨＬＡ適合標的細胞及び／又はＨＬＡ不適合標的細胞に対する同種反応性の欠如を示す、製品。
前記複数の抗原特異的Ｔ細胞株が、少なくとも２つのＨＬＡアレルにおいて、見込み患者集団の＞９５％と一致する少なくとも１つの抗原特異的Ｔ細胞株を集合的に提供する、互いに対する十分なＨＬＡ多様性を含む、請求項５６に記載のユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品。
請求項１～５１のいずれか一項に記載の抗原特異的Ｔ細胞株の集団、請求項５２～５５のいずれか一項に記載の組成物、又は請求項５６若しくは５７に記載のユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品を、それを必要とする患者に投与することを含む、疾患又は状態を処置するための方法。
前記集団、組成物、又はＴ細胞療法製品がＴ細胞の混合物を含み、前記Ｔ細胞の混合物が、前記患者のＨＬＡ型と部分的に一致するＴ細胞と、前記患者のＨＬＡ型と完全に不一致であるＴ細胞とを含む、請求項５８に記載の方法。
ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法を、それを必要とする患者に投与することを含む、疾患又は状態を処置するための方法であって、複数の異なるドナー由来の複数の抗原特異的Ｔ細胞株を対象に投与することを含み、各ドナーのＨＬＡ型が、少なくともＨＬＡアレルにおいて少なくとも１名の他のドナーとは異なり、
前記方法が、前記複数の抗原特異的Ｔ細胞株を単回の投与セッションで前記患者に投与することを含む、方法。
単一の投与セッションでの投与が、同じ組成物で前記複数の抗原特異的Ｔ細胞株を同時に患者に投与することを含む、請求項６０に記載の方法。
単一の投与セッションでの投与が、連続的に投与される別々の組成物で前記複数の抗原特異的Ｔ細胞株を患者に投与することを含む、請求項６０に記載の方法。
前記連続投与が、互いに１時間以内に行われる、請求項６２に記載の方法。
前記集団又は複数の抗原特異的Ｔ細胞が、前記患者のＨＬＡ型と部分的に一致するＴ細胞と、前記患者のＨＬＡ型と完全に不一致のＴ細胞とを含むＴ細胞の混合物を含む、請求項５８～６３のいずれか一項に記載の方法。
約１０×１０^６～約１００×１０^６個の抗原特異的Ｔ細胞の用量で患者に投与することを含む、請求項５８～６４のいずれか一項に記載の方法。
約４５×１０^６個のＴ細胞の用量で患者に投与することを含む、請求項６５に記載の方法。
前記疾患が、ウイルス感染症である、請求項５８～６６のいずれか一項に記載の方法。
前記抗原特異的Ｔ細胞が、ウイルス特異的Ｔ細胞（ＶＳＴ）であり、
前記方法が、前記患者におけるウイルス負荷の低減及び／又は前記ウイルス感染に関連する疾患の症状の低減若しくは排除を達成する、請求項６７に記載の方法。
前記抗原特異的Ｔ細胞がＶＳＴであり、
前記方法が、前記ＶＳＴを受けなかった患者と比較して、ウイルス感染のより速い消散を達成する、請求項６７に記載の方法。
患者が免疫無防備状態である、請求項５８～６９のいずれか一項に記載の方法。
前記患者が、前記疾患若しくは状態又は別の疾患若しくは状態を処置するために受けた処置に起因して免疫無防備状態である、請求項７０に記載の方法。
前記患者が、年齢により免疫無防備状態である、請求項７０に記載の方法。
前記患者が、若年又は高齢のために免疫無防備状態である、請求項７２に記載の方法。
前記状態が免疫不全である、請求項７１に記載の方法。
前記免疫不全が、原発性免疫不全である、請求項７４に記載の方法。
前記患者が移植を必要としている状態である、請求項７１に記載の方法。
前記疾患が癌である、請求項７１に記載の方法。
前記癌が、肺癌、腸癌、結腸癌、直腸癌、胆管癌、膵臓癌、精巣癌、前立腺癌、卵巣癌、乳癌、黒色腫、軟部組織肉腫、リンパ腫、白血病、及び多発性骨髄腫からなる群から選択される、請求項７７に記載の方法。
抗原特異的Ｔ細胞の集団を含むユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品を生成するための方法であって、
（ｉ）１つ以上のサイトカイン及び１つ以上の抗原の存在下で複数のドナーの各ドナーに由来する単核細胞を培養して、増殖した抗原特異的Ｔ細胞の複数の個別細胞株を作製すること、及び
（ｉｉ）前記個別細胞株を一緒にプールして、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品を生成すること
を含む、方法。
前記単核細胞が、末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）である、請求項７９に記載の方法。
前記集団が、クローン性、オリゴクローナル、又はポリクローナル集団である、請求項７９に記載の方法。
凍結融解をさらに含み、各細胞株が凍結保存され、次いで（ｉｉ）のプールの前に解凍される、請求項７９に記載の方法。
（ｉｉ）で得られた細胞株の前記プールを凍結することをさらに含む、請求項７９～８２のいずれか一項に記載の方法。
前記細胞株のプールが、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品として凍結保存される、請求項８３に記載の方法。
前記細胞株又はユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品が、凍結保存培地中で凍結保存される、請求項８２～８４のいずれか一項に記載の方法。
前記凍結保存培地が、ヒト血清アルブミン、ハンクス平衡塩類溶液（ＨＢＳＳ）、及び約１０％（ｖｖ）ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）を含む、請求項８５に記載の方法。
前記凍結保存培地が、約５０％（ｖ／ｖ）の２５％ヒト血清アルブミン及び約４０％（ｖ／ｖ）のＨＢＳＳを含む、請求項８６に記載の方法。
濾過工程をさらに含む、請求項７９に記載の方法。
（ｉ）で得られた各細胞株を濾過することを含む、請求項８８に記載の方法。
（ｉｉ）で得られたプールされたユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品を濾過することを含む、請求項８８に記載の方法。
凍結融解工程の前及び／又は後に、各細胞株を濾過すること、及び／又はプールされたユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品を濾過することを含む、請求項８８に記載の方法。
（ｉ）で得られた１つ以上の個別細胞株に導入遺伝子でトランスフェクトすることをさらに含む、請求項７９に記載の方法。
（ｉｉ）で得られたプールされた細胞株を導入遺伝子でトランスフェクトすることをさらに含む、請求項７９に記載の方法。
前記導入遺伝子が、キメラ抗原受容体（ＣＡＲ）、Ｔ細胞受容体（ＴＣＲ）、又はＮＫ細胞受容体をコードする、請求項９３に記載の方法。
前記培養が、ガス透過性培養表面を含む容器中で行われる、請求項７９に記載の方法。
前記容器がＧＲｅｘバイオリアクターである、請求項９５に記載の方法。
前記１つ以上のサイトカインが、ＩＬ４及び／又はＩＬ７である、請求項７９に記載の方法。
前記サイトカインが、ＩＬ４及びＩＬ７を含み、ＩＬ２を含まない、請求項９７に記載の方法。
前記１つ以上の抗原が、（ｉ）全タンパク質、（ｉｉ）各抗原の一部若しくは全配列にわたる一連の重複ペプチドを含むペプミックス、又は（ｉｉｉ）（ｉ）及び（ｉｉ）の組み合わせの形態である、請求項７９に記載の方法。
前記抗原が、少なくとも２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７、１８、１９、２０、又はそれ以上の異なるペプミックスを含む、請求項９９に記載の方法。
前記１つ以上の抗原が、ウイルス抗原又は腫瘍関連抗原である、請求項７９に記載の方法。
前記培養物中の各抗原が、ウイルス抗原である、請求項１００に記載の方法。
前記ウイルス抗原が、ＥＢＶ、ＣＭＶ、アデノウイルス、ＢＫ、ＪＣウイルス、ＨＨＶ６、ＲＳＶ、インフルエンザ、パラインフルエンザ、ボカウイルス、コロナウイルス、ＬＣＭＶ、ムンプス、麻疹、ヒトメタニューモウイルス、パルボウイルスＢ、ロタウイルス、メルケル細胞ウイルス、ＨＳＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ、ＨＤＶ、ＨＰＶ、ＨＩＶ、ＨＴＬＶ１、ＨＨＶ８、西ナイルウイルス、ジカウイルス、及びエボラウイルスから選択される、請求項１０１に記載の方法。
前記培養物中の各抗原が、腫瘍関連抗原である、請求項１００に記載の方法。
前記腫瘍関連抗原が、ＣＥＡ、ＭＨＣ、ＣＴＬＡ－４、ｇｐ１００、メソテリン、ＰＤ－Ｌ１、ＴＲＰ１、ＣＤ４０、ＥＧＦＰ、Ｈｅｒ２、ＴＣＲα、ｔｒｐ２、ＴＣＲ、ＭＵＣ１、ｃｄｒ２、ｒａｓ、４－１ＢＢ、ＣＴ２６、ＧＩＴＲ、ＯＸ４０、ＴＧＦ－α、ＷＴ１、ＭＵＣ１、ＬＭＰ２、ＨＰＶＥ６Ｅ７、ＥＧＦＲｖＩＩＩ、ＨＥＲ－２／ｎｅｕ、ＭＡＧＥＡ３、ｐ５３非変異体、ＮＹ－ＥＳＯ－１、ＰＳＭＡ、ＧＤ２、ＭｅｌａｎＡ／ＭＡＲＴ１、Ｒａｓ変異体、ｇｐ１００、ｐ５３変異体、プロテイナーゼ３（ＰＲ１）、ｂｃｒ－ａｂｌ、チロシナーゼ、サバイビン、ＰＳＡ、ｈＴＥＲＴ、ＥｐｈＡ２、ＰＡＰ、ＭＬ－ＩＡＰ、ＡＦＰ、ＥｐＣＡＭ、ＥＲＧ（ＴＭＰＲＳＳ２ＥＴＳ融合遺伝子）、ＮＡ１７、ＰＡＸ３、ＡＬＫ、アンドロゲン受容体、サイクリンＢ１、ポリシアル酸、ＭＹＣＮ、ＲｈｏＣ、ＴＲＰ－２、ＧＤ３、フコシルＧＭ１、メソテリン、ＰＳＣＡ、ＭＡＧＥＡ１、ｓＬｅ（ａ）、ＣＹＰ１Ｂ１、ＰＬＡＣ１、ＧＭ３、ＢＯＲＩＳ、Ｔｎ、ＧｌｏｂｏＨ、ＥＴＶ６－ＡＭＬ、ＮＹ－ＢＲ－１、ＲＧＳ５、ＳＡＲＴ３、ＳＴｎ、炭酸脱水酵素ＩＸ、ＰＡＸ５、ＯＹ－ＴＥＳ１、精子タンパク質１７、ＬＣＫ、ＨＭＷＭＡＡ、ＡＫＡＰ－４、ＳＳＸ２、ＸＡＧＥ１、Ｂ７Ｈ３、レグマイン、Ｔｉｅ２、Ｐａｇｅ４、ＶＥＧＦＲ２、ＭＡＤ－ＣＴ－１、ＦＡＰ、ＰＤＧＦＲ－β、ＭＡＤ－ＣＴ－２及びＦｏｓ関連抗原１の１つ以上である、請求項１０３に記載の方法。
前記複数のドナーが、以下を含む方法によって選択される、請求項７９～１０４のいずれか一項に記載の方法：
（ａ）第１のドナープールからの第１の複数のドナー候補の各々のＨＬＡ型を、第１の見込み患者集団からの第１の複数の見込み患者の各々と比較する工程；
（ｂ）工程（ａ）における比較に基づいて第１の最適合ドナーを決定する工程であって、前記第１の最適合ドナーが、前記第１の複数の見込み患者における最大数の患者と２以上のＨＬＡアレル一致を有する、第１のドナープールからのドナーとして定義される、工程；
（ｃ）ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品に含めるために、前記第１の最適合ドナーを選択する工程；
（ｄ）前記第１のドナープールから前記第１の最適合ドナーを除去し、それによって、前記第１の最適合ドナーを除く前記第１のドナープールに由来する前記第１の複数のドナー候補の各々からなる、第２のドナープールを生成する工程；
（ｅ）前記第１の複数の見込み患者から、前記第１の最適合ドナーと２つ以上のアレル一致を有する各見込み患者を除去し、それによって、前記第１の最適合ドナーと２つ以上のアレル一致を有する各見込み患者を除く前記第１の複数の見込み患者の各々からなる、第２の複数の見込み患者を生成する工程；及び
（ｆ）工程（ｄ）及び（ｅ）に従って、まだ除去されていないドナー及び見込み患者の全てについて工程（ａ）～（ｅ）を１回以上追加で繰り返す工程であって、
ここで、追加の最適合ドナーが工程（ｃ）に従って選択されるたびに、その追加の最適合ドナーが工程（ｄ）に従ってそれぞれのドナープールから除去され；後続の最適合ドナーがそれぞれのドナープールから除去されるたびに、工程（ｅ）に従って、その後続の最適合ドナーと２つ以上のアレル一致を有する各見込み患者がそれぞれの複数の見込み患者から除去され；それによって、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品に含めるための選択された最適合ドナーの数を、前記方法の各サイクルの後に１つずつ順次増加させ、それによって、前記方法の各サイクルの後に、前記選択された最適合ドナーへのそれらのＨＬＡ一致に従って、前記患者集団における複数の見込み患者の数を減少させ；工程（ａ）～（ｅ）を、前記第１の見込み患者集団の所望の割合が前記複数の見込み患者の中に残るまで、又はドナーがドナープールに残らなくなるまで繰り返す、工程。
請求項７９～１０５のいずれか一項に記載の方法によって製造された、ユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品。
請求項１０に記載のユニバーサル抗原特異的Ｔ細胞療法製品を含む、組成物。