JP2006000113A - 漢方医療の診断に用いる遺伝子およびその利用方法 - Google Patents
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Abstract
【課題】 ヒト・ゲノム配列情報を有効利用することにより、漢方医療において経験則や医師の熟練の度合によらずに、客観的で信頼性および再現性の高い診断を可能にする遺伝子およびその利用技術を提供する。
【解決手段】 漢方医学に基づく特定の「証」の出現・消失、特定の漢方薬の服用および/または特定の漢方薬の効きやすさにより発現変動する遺伝子が、ヒト・ゲノム配列情報を有効利用した網羅的解析法により同定される。これら同定された遺伝子の中から選定された複数の遺伝子を検出用プローブとして被験者の遺伝子の発現変動を測定することにより、漢方医療における「証」の評価および/または漢方薬の選択等の診断を客観的に行う。
【選択図】 なし
【解決手段】 漢方医学に基づく特定の「証」の出現・消失、特定の漢方薬の服用および/または特定の漢方薬の効きやすさにより発現変動する遺伝子が、ヒト・ゲノム配列情報を有効利用した網羅的解析法により同定される。これら同定された遺伝子の中から選定された複数の遺伝子を検出用プローブとして被験者の遺伝子の発現変動を測定することにより、漢方医療における「証」の評価および/または漢方薬の選択等の診断を客観的に行う。
【選択図】 なし
Description
この発明は、漢方医療の診断に用いる遺伝子およびその利用方法に関し、さらに詳細には、漢方医療において、「証」の評価や漢方薬の薬効の評価等の診断に有効な遺伝子技術に関する。
現代医療は、基本的には、西洋において発達した科学をもとに成り立っている医学体系であり、種々の医薬品・医療技術の開発に支えられて、20世紀になって目覚しい発展を遂げてきている。
西洋医学は科学の一分野として、客観性および論理性という2つの要素で問題解決を図ろうとするところに特徴があり、人を精神と身体に分けてこれらを別ものとしてとらえるとともに、体を臓器ごとに区分し、さらにそれを細分化して人の体を細かな部品の集合体と考え、突き詰めると、そこに原因があると考える傾向にある。
そして、人が病気になった場合は、その体の部品である臓器や細胞がどのような障害を受けているか、その障害の原因を究明することに重点がおかれている。
西洋医学における治療法は、細菌に対して抗菌薬を処方するなど、病気の原因となるものを直接攻撃したり、検査値が基準値内に収まるようにコントロールしたり、あるいは癌や腫瘍に対して外科手術を施して病気を取り除くなど、特定の標的に的を絞った治療が行われる。
こうした西洋医学による治療では、患者からの訴えよりも、むしろ検査結果を重視する傾向が強く、患者が体の「つらさ」などを訴えてみても、検査等によりその原因が客観的に突き止められなければ、その問題を解決する手段を見出すことが困難な状況にある。
近年、糖尿病、高血圧、肥満などのような生活習慣病が問題になっている。これらの病気は、原因を一つに特定することができず、病気の原因となるものを直接攻撃したり、西洋医学のように特定の標的に的を絞った治療は難しい。
すなわち、これら生活習慣病などの病気は、人間の体の部品の故障ではなく、人間の体全体つまりシステムの故障と考えられる。このような人間というシステム全体に関わる病気の場合、調子が悪いからといって、システム全体を取り替えることは出来ないのである。
このように、これまでの西洋医学的な考え方だけでは、適切な対応が見出せない疾病構造の時代を迎えている現代社会において、治療の最終目標を「患者が満足する」ことに置いて、西洋医学とは違うアプローチで治療を行う漢方医学が、患者の西洋医学の治療に満足できない分野を広くカバーする治療を行うことができるものとして注目されている。
現在、医師の70%以上が漢方薬を日常的に使い治療している。さらに、国の指導により大学医学部の2002年度入学生からの教育カリキュラム中に漢方の授業が必ず入ることとなった。
漢方医学は、中国から伝来した伝統医学が日本で工夫し改良されて、独特の発展を遂げた医学であり、以下に列挙するように、上述した現代医療の主流となっている西洋医学とは異なる概念や体系を有している。
(1)漢方医学では、西洋医学とは異なり、人間の精神と身体を分けて考えたり、体を部分に分けて考えることはせずに、心を含めた体全体の病態や体質をとらえて、漢方医学独自の診断名・処方の指示を意味する「証」(ショウ)として診断する。
(2)漢方医学では、患者の自覚症状について細かく尋ねて、患者の感じている調子の悪さを改善することが治療目的の大きな部分を占めている。また、診察では、患者の体の症状だけでなく、精神の状態も把握する方法をとる。
(3)漢方医学では、病気を体全体のバランスが崩れた状態ととらえ、治療の基本を体のバランスを調整することに置いて、人間が本来もっている自然治癒力を高めることで、病気からの回復を図る。
(4)昨今のゲノム解析によって、「オーダーメイド医療」あるいは「テーラーメイド医療」ということが言われてきているが、漢方医学では、西洋医学におけるような病名による治療ではなく、つまり、西洋医学的には同じ病名であっても、患者個人個人の「証」に合った漢方薬を選んで処方するという手法をとるため、漢方医学は3千年前から既に「オーダーメイド医療」あるいは「テーラーメイド医療」を行ってきていると言える。
(5)漢方医学では、肩こりや便秘など、病気の前段階といえる半健康状態を「未病」(ミビョウ)ととらえて、この半健康状態の体を改善する治療を行って病気を予防する。病気になってからの対処が中心である西洋医学との根本的かつ大きな相違点の一つである。
(6)漢方医学における医薬である漢方薬(方剤ともいう)は、植物・鉱物・動物性蛋白などのいくつかの生薬を組み合わせてできている、多数の薬効成分を含む複雑な混合物で、これら複数の生薬の作用が体全体に総合して働きかける。
(7)漢方薬は、悲しみ、怒り、憂い、驚き、喜びのなどの感情にも作用すると言われており、西洋医学的な病名であるうつ病や神経症などの精神疾患に効果があるとされる。
このように、漢方医学は、西洋医学の得意とする急性の激しい症状や外科手術を必要とするような状態には不得意であるが、冷え症や疲れやすいなど、西洋医学的には病気としての概念がなく、治療に直結する診断がつけにくいものや、年寄りなど、体力が弱く薬の副作用が出やすい患者の治療、あるいは、複数の病気があって、西洋医学では薬の種類が多くなる患者の治療を得意とし、西洋医学を補完する医療として注目されている。
ところで、このような西洋医学と相互補完作用をなす漢方医学においては、以下に述べるような大きな課題があった。
すなわち、近年、医療の分野において、EBM(Evidence-Based Medicine:根拠に基づいた医療)という考え方、つまり、臨床的な試験・研究によって治療効果を確認して、それを根拠に治療を行うべきであるという考え方が世界的な潮流となってきており、漢方医療もその例外ではない。
漢方医学には、3千年にもおよぶ長い歴史があり、その間、漢方薬は、実際に数え切れないほど多くの患者に使われてきており、その中で副作用が少なくて、効果のある漢方薬だけが受け継がれ、現在まで残っている。しかも、漢方医学は、統計学的に整理されたデータの蓄積こそないが、このような長年の臨床経験に基づいて体系化されてきており、確かな根拠に基づいた医学であるといえるものであり、この意味では漢方医学は科学的ともいえる。
しかしながら、反面、このように膨大な経験的知識の集積ともいえる漢方医学であっても、西洋医学的な統計手法をとった場合、東洋医学的な治療に関しては結果が出ず、つまり、西洋医学的には同じ病気・病名であっても「証」が合わないと漢方薬が効かず、これがため、西洋医学の立場からは、その根拠が有効でないと見なされて、漢方医学には根拠がないとの指摘がなされているのも否定できない事実である。
換言すれば、漢方医療は、上述したように、一つの病態の解消、解決を目標とする西洋医療と異なり、複数の症状を解消する点に特徴がある。漢方の診察は、まず漢方医師が患者の「証」を評価・判定し、それに基づいて適確な漢方薬を処方し、それを投薬スケジュールに従って患者に服用させ、その効果を判定するという手順で行われる。
ここに漢方医学独自の診断名・処方の指示を意味する「証」(ショウ)は、後述するように、患者に現れる徴候パターンであり、遺伝要因と環境要因とから成り立っており、具体的には、脈、舌の状態、顔色、腹部の硬さ等、無数に存在する患者の徴候の総和として現れるものであり、西洋医療における症状のような個別的なものとは異なり、漢方医師がこれを「四診」(シシン)によって総合的に判断している。
「四診」とは、視覚によって、患者の状態を判断する「望診」(ボウシン)、聴覚と嗅覚によって患者の状態を判断する「聞診」(ブンシン)、患者への質問により、患者の状態を判断する「問診」(モンシン)、手で実際に患者の体に触れて、患者の状態を判断する「切診」(セッシン)のことで、その評価基準は、あくまでも漢方医師の主観的な経験則に基づいている。
このように、漢方診断は、漢方医師の主観と経験則とに完全に依存した「証」の評価に基づいており、客観的な数値化は未だ出来ておらず、漢方処方の経験がないか、短い医師は正しい漢方薬の選択ができないことで、漢方医療に対する誤解や不信の原因、および漢方薬の利点を多くの患者に与えるための障害となっており、さらには、上述した漢方医学には根拠がないとの指摘がなされる原因ともなっていた。
したがって、客観的な「証」の評価法の実現および確立は、従来から漢方医療の信頼性・再現性のための最重要課題ともなっており、「証」の客観化の試みは、今日まで幾度となく繰り返されてきた。例えば、脈診においては脈波計や圧式脈診計などを使用したり、腹診においては超音波画像診断装置や振動触覚センサーなどを用いたりすることで、主観性の高い「証」を少しでも客観化しようという試みがなされたが、未だに十分な成果をあげていない。
つまり、「証」は遺伝的要因に環境的要因が加わって非常に多因子(Critical Determinant)の影響を受けているため、従来の体表から行う単一の生理検査や一般の血液検査に普遍性を持たせることは困難ないしは不可能であった。
また、熟練した漢方医師の膨大な知識・経験に基づく評価などを数値化し、データベース化することによって、漢方医療において、非熟練者に利用可能な客観的な診断指標を与えようとする提案もなされているが(特許文献1参照)、この数値化のもとになるのはあくまでも「主観」そのものであって、真の客観性はない。
特開2002−288340号公報
本発明は、かかる従来の問題点に鑑みてなされたものであって、その目的とするところは、ヒト・ゲノム配列情報を有効利用することにより、漢方医療において経験則や医師の熟練の度合によらずに、客観的で信頼性および再現性の高い診断を可能にするための遺伝子およびその利用技術を提供することにある。
上記目的を達成するため、本発明は、
(1)漢方医療の特定の測定基準により発現変動することを特徴とする漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖;
(1)漢方医療の特定の測定基準により発現変動することを特徴とする漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖;
(2)上記測定基準は、漢方医学に基づいて漢方医師が評価・判定した特定の「証」の出現・消失であることを特徴とする上記(1)に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖;
(3)上記「証」は、特定の漢方薬の「証」であることを特徴とする上記(2)に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖;
(4)上記漢方薬の「証」が「香蘇散の証」であることを特徴とする上記(3)に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖;
(5)上記漢方薬の「証」が「半夏厚朴湯の証」であることを特徴とする上記(3)に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖;
(6)上記測定基準は、特定の漢方薬の服用であることを特徴とする上記(1)に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖;
(7)上記測定基準は、特定の漢方薬の効きやすさであることを特徴とする請求項1に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖;
(8)上記漢方薬が香蘇散であることを特徴とする上記(6)または(7)に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖;
(9)上記漢方薬が半夏厚朴湯であることを特徴とする上記(6)または(7)に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖;
(10)上記測定基準は、漢方医学に基づいて評価・判定された特定の「証」の出現・消失、特定の漢方薬の服用および特定の漢方薬の効きやすさの少なくとも2つの組み合せであることを特徴とする上記(1)に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖;
(11)上記遺伝子が、配列表の配列番号1〜配列番号49に記載された塩基配列またはその一部を含む遺伝子ならびにNCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.487001、Hs.436042およびHs.61714に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖であることを特徴とする上記(4)または(8)に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖;
(12)上記遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.180911、Hs.294176、Hs.53250、Hs.282331、Hs.440606、Hs.86538、Hs.61232、Hs.24884、Hs.110299、Hs.303523、Hs.115617、Hs.3321、Hs.334527、Hs.161640、Hs.225943、Hs.323213、Hs.186582、Hs.24583、Hs.234775、Hs.512633、Hs.377022、Hs.29189、Hs.262480、Hs.8852、Hs.527699、Hs.445241、Hs.437457、Hs.436628、Hs.115497、Hs.497707、Hs.150826、Hs.266902、Hs.442801、Hs.8022、Hs.432379、Hs.460471、Hs.434195、Hs.145156、Hs.396566、Hs.367761、Hs.12902、Hs.297997、Hs.183390、Hs.479572、Hs.450425、Hs.283085、Hs.103388、Hs.18213、Hs.378736、Hs.389964、Hs.387258、Hs.355820、Hs.210850、Hs.158318、Hs.157461、Hs.17860、Hs.355711、Hs.74376、Hs.111726、Hs.54468、Hs.75236、Hs.193228、Hs.512660、Hs.130685、Hs.272493、Hs.414091、Hs.113912、Hs.128204、Hs.115181、Hs.86088、Hs.431156、Hs.115830、Hs.37058、Hs.125507、Hs.376586、Hs.97808、Hs.493514、Hs.412355、Hs.97933、Hs.288727、Hs.499520、Hs.53996、Hs.144028、Hs.131555、Hs.232779、Hs.382347、Hs.87224、Hs.382870、Hs.82535、Hs.235498、Hs.438482、Hs.129778、Hs.22575、Hs.98967、Hs.320086、Hs.412022、Hs.259498、Hs.445025、Hs.334022、Hs.51120、Hs.302109、Hs.268744、Hs.152664、Hs.153203、Hs.201269、Hs.448749、Hs.408843、Hs.234790、Hs.147305、Hs.436494、Hs.12840、Hs.158963、Hs.283880、Hs.476396、Hs.148956、Hs.326012、Hs.437137、Hs.406763、Hs.150276、Hs.408195、Hs.496614、Hs.251573、Hs.205457、Hs.132275、Hs.233325、Hs.343666、Hs.49753、Hs.432815、Hs.443683、Hs.143907、Hs.22116、Hs.336224、Hs.22573、Hs.66、Hs.234774、Hs.130310、Hs.25363、Hs.78465、Hs.367888、Hs.127059、Hs.140821、Hs.511968、Hs.432445、Hs.350765、Hs.48695、Hs.430138、Hs.99607、Hs.213493、Hs.8345、Hs.502577、Hs.57876、Hs.100299、Hs.458408、Hs.406639、Hs.512760、Hs.123457、Hs.326561、Hs.446702、Hs.89121、Hs.17681、Hs.148074、Hs.97714、Hs.2936、Hs.158357、Hs.499247、Hs.153692、Hs.406234、Hs.241385、Hs.271809、Hs.278568、Hs.254122、Hs.318791、Hs.189482、Hs.282938、Hs.390808、Hs.2149、Hs.423112、Hs.301715、Hs.55016、Hs.99120、Hs.511985、Hs.359978、Hs.204238、Hs.283506、Hs.447877、Hs.137674、Hs.266738、Hs.302145、Hs.399966、Hs.149098、Hs.431010、Hs.222312、Hs.2207、Hs.25094、Hs.79881、Hs.116651、Hs.25328、Hs.501480、Hs.8346、Hs.157796、Hs.21239、Hs.508901、Hs.144875、Hs.40735、Hs.341806、Hs.125423、Hs.511880、Hs.433827、Hs.307044、Hs.306697、Hs.134807、Hs.387367、Hs.335355、Hs.349109、Hs.418105、Hs.376337、Hs.137574、Hs.44077、Hs.44899、Hs.184945、Hs.114088、Hs.376025、Hs.21258、Hs.207407、Hs.117938、Hs.169071、Hs.385986、Hs.284153、Hs.95582、Hs.21380、Hs.418083、Hs.91625、Hs.397167、Hs.437046、Hs.14468、Hs.26309、Hs.479080、Hs.352530、Hs.73958、Hs.171025、Hs.121001、Hs.11713、Hs.280311、Hs.8535、Hs.283326、Hs.407474、Hs.451697、Hs.14732、Hs.73890、Hs.42650、Hs.7327、Hs.287640、Hs.194659、Hs.191381、Hs.406789、Hs.227098、Hs.7934、Hs.512643、Hs.256583、Hs.408355、Hs.155182、Hs.30340、Hs.178023、Hs.58974、Hs.390568、Hs.185796、Hs.115263、Hs.414251、Hs.119693、Hs.511776、Hs.196530、Hs.157573、Hs.36761、Hs.223581、Hs.511753、Hs.17170、Hs.448823、Hs.102929、Hs.37616、Hs.511824、Hs.354013、Hs.132380、Hs.371496、Hs.458427、Hs.32967、Hs.143751、Hs.253690、Hs.352、Hs.21177、Hs.406681、Hs.435976、Hs.46679、Hs.148101、Hs.9914、Hs.310230、Hs.376590、Hs.458397、Hs.58414、Hs.17165、Hs.407015、Hs.470704、Hs.246914、Hs.15420、Hs.436282、Hs.257368、Hs.512739、Hs.387679、Hs.283078、Hs.516782、Hs.109752、Hs.201667、Hs.149504、Hs.398139、Hs.94367、Hs.112208、Hs.395779、Hs.445563、Hs.65135、Hs.187203、Hs.490216、Hs.487918、Hs.436495、Hs.125571、Hs.519634、Hs.399769、Hs.511987、Hs.26176、Hs.25934、Hs.351825、Hs.283794、Hs.256067、Hs.251699、Hs.436378、Hs.523755、Hs.449884、Hs.41154、Hs.54609、Hs.458291、Hs.408336およびHs.2012に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖であることを特徴とする上記(4)または(8)に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖;
(13)上記遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.372133、Hs.281004、7.59 Hs.420563、Hs.376818、Hs.15780、Hs.493450、Hs.306814、Hs.511810、Hs.143241、Hs.278924、Hs.512632、Hs.367633、Hs.127363、Hs.414110、Hs.434143、Hs.36567、Hs.356605、Hs.414648、Hs.104888、Hs.197435、Hs.410810、Hs.434375、Hs.56279、Hs.125487、Hs.51011、Hs.170953、Hs.66392、Hs.48372、Hs.356664、Hs.420269、Hs.3017、Hs.306811、Hs.93121、Hs.438880、Hs.302029、Hs.463017、Hs.412559、Hs.17518、Hs.2133、Hs.400380、Hs.75813、Hs.287656、Hs.334347、Hs.411572、Hs.6496、Hs.268764、Hs.385496、Hs.410088、Hs.24835、Hs.446504、Hs.7972、Hs.292057、Hs.435775、Hs.78106、Hs.217754、Hs.153704、Hs.341906、Hs.250830、Hs.68846、Hs.438712、Hs.99480、Hs.434418、Hs.171980、Hs.376810、Hs.324335、Hs.37936、Hs.512546、Hs.128836、Hs.406330、Hs.302352、Hs.169825、Hs.522765、Hs.526526、Hs.82002、Hs.526394、Hs.512785、Hs.1937、Hs.105700、Hs.122895、Hs.9589、Hs.99439、Hs.334828、Hs.126161、Hs.465202、Hs.310231、Hs.94875、Hs.203557、Hs.444729、Hs.449965、Hs.122309、Hs.190090、Hs.355714、Hs.153952、Hs.408577、Hs.287370、Hs.185202、Hs.29792、Hs.4845、Hs.27183、Hs.486433、Hs.439463、Hs.194665、Hs.129312、Hs.163682、Hs.73853、Hs.2689、Hs.283900、Hs.162604、Hs.381367、Hs.288218、Hs.203349、Hs.433891、Hs.248065、Hs.440603、Hs.144913、Hs.199316、Hs.221660、Hs.21554、Hs.510244、Hs.436325、Hs.117979、Hs.356888、Hs.306322、Hs.310431、Hs.356501、Hs.444708、Hs.159609、Hs.18069、Hs.373612、Hs.12802、Hs.508901、Hs.504580、Hs.308242、Hs.128580、Hs.112184、Hs.306298、Hs.343800、Hs.50841、Hs.137516、Hs.413095、Hs.105640、Hs.144696、Hs.175411、Hs.207407、Hs.406856、Hs.122959、Hs.143792、Hs.170195、Hs.381715、Hs.443292、Hs.56874、Hs.147096、Hs.521267、Hs.196956、Hs.80720、Hs.440953、Hs.352387、Hs.434107、Hs.112720、Hs.155584、Hs.147352、Hs.146329、Hs.463171、Hs.445445、Hs.156892、Hs.212670、Hs.129895、Hs.356076、Hs.439590、Hs.278613、Hs.54697、Hs.388917、Hs.55923、Hs.460377、Hs.416244、Hs.234786、Hs.129969、Hs.275711、Hs.127842、Hs.302772、Hs.337008、Hs.48480、Hs.121115、Hs.318773、Hs.98564、Hs.276466、Hs.78824、Hs.124502、Hs.325530、Hs.375664、Hs.516311、Hs.367688、Hs.386155、Hs.189174、Hs.159264、Hs.386143、Hs.158446、Hs.209461、Hs.163484、Hs.300559、Hs.155223、Hs.448979、Hs.368420、Hs.289044、Hs.74088、Hs.93907、Hs.408264、Hs.439168、Hs.437433、Hs.448468、Hs.310194、Hs.45152、Hs.283095、Hs.500957、Hs.431156、Hs.511922、Hs.406549、Hs.288731、Hs.123419、Hs.334702、Hs.114172、Hs.408261、Hs.436657、Hs.125300、Hs.203、Hs.287499、Hs.102943、Hs.145949、Hs.248290、Hs.418167、Hs.55481、Hs.434181、Hs.275906、Hs.249126、Hs.147256、Hs.178295、Hs.385890、Hs.201800、Hs.96633、Hs.445489、Hs.449650、Hs.102708、Hs.433381、Hs.27263、Hs.512782、Hs.347537、Hs.124115、Hs.1270、Hs.349121、Hs.293884、Hs.143943、Hs.12742、Hs.166705、Hs.13209、Hs.77719、Hs.129694、Hs.126906、Hs.151414、Hs.212584、Hs.232819、Hs.41324、Hs.140821、Hs.351593、Hs.12248、Hs.434281、Hs.283506、Hs.66412.18 Hs.2115872.17 Hs.427712.17 Hs.447703、Hs.372208、Hs.379010、Hs.437008、Hs.99311、Hs.464896、Hs.323079、Hs.509439、Hs.440088、Hs.34045、Hs.406073、Hs.455335、Hs.175465、Hs.507549、Hs.127775、Hs.132888、Hs.8728、Hs.157231、Hs.62863、Hs.169600、Hs.414332、Hs.259403、Hs.101949、Hs.436339、Hs.128668、Hs.380167、Hs.79340、Hs.43125、Hs.2251、Hs.142296、Hs.288155、Hs.399740、Hs.27524、Hs.165464、Hs.123642、Hs.125156、Hs.58561、Hs.418966、Hs.447121、Hs.24734、Hs.348709、Hs.89436、Hs.2563、Hs.186363、Hs.169470、Hs.6540、Hs.223206、Hs.439169、Hs.133250、Hs.172562、Hs.349705、Hs.405457、Hs.145894、Hs.7360、Hs.163546、Hs.102276、Hs.511781、Hs.283794、Hs.171090、Hs.508459、Hs.276808、Hs.248155、Hs.436042、Hs.371212、Hs.221040およびHs.374990に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖であることを特徴とする上記(4)または(8)に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖;
(14)上記遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.58323、Hs.160373、Hs.334832、Hs.150136、Hs.272385、Hs.382870、Hs.430919、Hs.387551、Hs.194408、Hs.406961、Hs.164021、Hs.24884、Hs.437211、Hs.436628、Hs.283880、Hs.110299、Hs.390242、Hs.113291、Hs.278894、Hs.90221、Hs.24583、Hs.266902、Hs.148956、Hs.162282、Hs.103388、Hs.406300、Hs.382347、Hs.413430、Hs.449884、Hs.24889、Hs.440606、Hs.36069、Hs.131255、Hs.369557、Hs.512660、Hs.359981、Hs.283085、Hs.163546、Hs.117938、Hs.74376、Hs.438482、Hs.482392、Hs.320086、Hs.95990、Hs.9469、Hs.108642、Hs.180016、Hs.479572、Hs.169395、Hs.335319、Hs.442801、Hs.111726、Hs.183390、Hs.449407、Hs.434195、Hs.17546、Hs.127951、Hs.458408、Hs.287374、Hs.150826、Hs.181483、Hs.115467、Hs.232779、Hs.96557、Hs.406722、Hs.201269、Hs.47313、Hs.8852、Hs.283326、Hs.225943、Hs.12902、Hs.500371、Hs.7296、Hs.430854、Hs.278568、Hs.132275、Hs.66392、Hs.437179、Hs.8850、Hs.98967、Hs.57876、Hs.459828、Hs.310230、Hs.25328、Hs.301956、Hs.144875、Hs.110457、Hs.509265、Hs.60339、Hs.511880、Hs.446152、Hs.48100、Hs.247975、Hs.479080、Hs.490096、Hs.8346、Hs.131555、Hs.32967、Hs.307003、Hs.127032、Hs.109268、Hs.80720、Hs.266738、Hs.113912、Hs.175780、Hs.497972、Hs.18213、Hs.152664、Hs.459847、Hs.378736、Hs.458427、Hs.36761、Hs.429531、Hs.149797、Hs.444135、Hs.22575、Hs.272191、Hs.512643、Hs.54713、Hs.820、Hs.77221、Hs.253690、Hs.436282、Hs.181289、Hs.170560、Hs.426734、Hs.334527、Hs.406701、Hs.177434、Hs.511968、Hs.389964、Hs.251699、Hs.207805、Hs.140821、Hs.281004、Hs.435675、Hs.292597、Hs.178715、Hs.161394、Hs.396332、Hs.302109、Hs.86088、Hs.356794、Hs.449392、Hs.134807、Hs.210850、Hs.18705、Hs.326444、Hs.287453、Hs.130522、Hs.234775、Hs.438555、Hs.171532、Hs.54617、Hs.268843、Hs.11713、Hs.5025、Hs.288727、Hs.412022、Hs.78465、Hs.423112、Hs.497707、Hs.235390、Hs.33455、Hs.371278、Hs.237642、Hs.234790、Hs.78792、Hs.115181、Hs.115617、Hs.463017、Hs.406789、Hs.378753、Hs.256583、Hs.99430、Hs.525361、Hs.148559、Hs.249181、Hs.23853、Hs.172052、Hs.90821、Hs.444182、Hs.123474、Hs.284310、Hs.137574、Hs.102929、Hs.511985、Hs.371335、Hs.528103、Hs.355711、Hs.496614、Hs.27621、Hs.183006、Hs.27021、Hs.389571、Hs.227457、Hs.334772、Hs.512760、Hs.53996、Hs.207407、Hs.297997、Hs.512808、Hs.149467、Hs.510932、Hs.272493、Hs.79881、Hs.3052、Hs.415895、Hs.388220、Hs.253193、Hs.124502、Hs.232803、Hs.269777、Hs.12264、Hs.380763、Hs.147595、Hs.411274、Hs.441481、Hs.376025、Hs.250895、Hs.468922、Hs.161427、Hs.385986、Hs.439760、Hs.313413、Hs.408843、Hs.58974、Hs.430755、Hs.99120、Hs.25363、Hs.287405、Hs.131035、Hs.335355、Hs.259471、Hs.235888、Hs.144527、Hs.414091、Hs.480174、Hs.445241、Hs.44888、Hs.382683、Hs.439494、Hs.288520、Hs.234027、Hs.130685、Hs.399966、Hs.434486、Hs.407002、Hs.333958、Hs.238648、Hs.308045、Hs.196470、Hs.144531、Hs.7327、Hs.83916、Hs.169441、Hs.73890、Hs.432374、Hs.143751、Hs.2074、Hs.158278、Hs.158963、Hs.490216、Hs.103422、Hs.133361、Hs.404220、Hs.169071、Hs.288718、Hs.144130、Hs.336224、Hs.112669、Hs.159265、Hs.122110、Hs.7835、Hs.407015、Hs.441708、Hs.452398、Hs.439124、Hs.443020、Hs.499520、Hs.356572、Hs.284200、Hs.78944、Hs.512387、Hs.235498、Hs.133082、Hs.471423、Hs.73625、Hs.9914、Hs.355862、Hs.82120、Hs.443392、Hs.401954、Hs.436140、Hs.461482、Hs.433596、Hs.434103、Hs.385898、Hs.348920、Hs.81848、Hs.432379、Hs.79025、Hs.407162、Hs.197922、Hs.180171、Hs.408200、Hs.444529、Hs.164649、Hs.4224、Hs.460471、Hs.149152、Hs.458397、Hs.124211、Hs.415497、Hs.293917、Hs.253489、Hs.14822、Hs.376590、Hs.179112、Hs.152337、Hs.438300、Hs.344099、Hs.421986、Hs.432458、Hs.351414、Hs.54460、Hs.349227、Hs.47312、Hs.185796、Hs.26981、Hs.267038、Hs.448749、Hs.170114、Hs.95582、Hs.352601、Hs.353001、Hs.352617、Hs.414164、Hs.30340、Hs.359978、Hs.298241、Hs.178292、Hs.156232、Hs.406681、Hs.411644、Hs.97933、Hs.137674、Hs.476396、Hs.388877、Hs.155573、Hs.87、Hs.153203、Hs.458434、Hs.10056、Hs.148074およびHs.377022に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖であることを特徴とする上記(4)または(8)に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖;
(15)上記遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.436450、Hs.278613、Hs.411239、Hs.445072、Hs.123515、Hs.17518、Hs.128668、Hs.280226、Hs.511758、Hs.233437、Hs.187802、Hs.61929、Hs.406741、Hs.245431、Hs.20082、Hs.29798、Hs.222、Hs.162089、Hs.37936、Hs.144913、Hs.166351、Hs.313、Hs.522901、Hs.450230、Hs.89679、Hs.323966、Hs.439168、Hs.159629、Hs.186363、Hs.172052、Hs.250723、Hs.356605、Hs.376407、Hs.188021、Hs.386264、Hs.40510、Hs.408067、Hs.58009、Hs.222909、Hs.113227、Hs.350800、Hs.377070、Hs.178295、Hs.222746、Hs.351811、Hs.440088、Hs.490397、Hs.344400、Hs.361748、Hs.283045、Hs.27258、Hs.25328、Hs.350765、Hs.103665、Hs.194725、Hs.327621、Hs.408629、Hs.411347、Hs.489592、Hs.386236、Hs.446451、Hs.105115、Hs.45207、Hs.91283、Hs.178499、Hs.444882、Hs.381370、Hs.369994、Hs.93883、Hs.306230、Hs.413924、Hs.504809、Hs.84665、Hs.389724、Hs.211587、Hs.1560、Hs.406733、Hs.306812、Hs.348745、Hs.106688、Hs.129895、Hs.388917、Hs.368746、Hs.413525、Hs.166011、Hs.94865、Hs.250472、Hs.434485、Hs.267038、Hs.445426、Hs.154084、Hs.23317、Hs.75360、Hs.127405、Hs.155584、Hs.47504、Hs.90318、Hs.128499、Hs.283082、Hs.449006、Hs.309365、Hs.436602、Hs.324335、Hs.351816、Hs.306992、Hs.512632、Hs.443260、Hs.348709、Hs.426324、Hs.227656、Hs.435092、Hs.272200、Hs.347537、Hs.271269、Hs.424414、Hs.707、Hs.248204、Hs.168355、Hs.58559、Hs.407817、Hs.447162、Hs.144870、Hs.435398、Hs.146025、Hs.406485、Hs.326559、Hs.258536、Hs.169825、Hs.1270、Hs.325335、Hs.335877、Hs.421280、Hs.443120、Hs.389638、Hs.124673、Hs.150138、Hs.476618、Hs.438482、Hs.652、Hs.199372、Hs.493952、Hs.371212、Hs.25156、Hs.301956、Hs.511810、Hs.151408、Hs.157144、Hs.159525、Hs.94327、Hs.449791、Hs.320522、Hs.123114、Hs.446376、Hs.250666、Hs.201554、Hs.351818、Hs.189575、Hs.132270、Hs.36793、Hs.23367、Hs.104613、Hs.254006、Hs.133995、Hs.395205、Hs.476835、Hs.513009、Hs.257584、Hs.5462、Hs.96149、Hs.374720、Hs.46791、Hs.127473、Hs.91813、Hs.271640、Hs.379010、Hs.516739、Hs.376657、Hs.121490、Hs.352240、Hs.203557、Hs.228982、Hs.122115、Hs.112928、Hs.436975、Hs.387258、Hs.433197、Hs.159553、Hs.437、Hs.288911、Hs.440953、Hs.20315、Hs.104859、Hs.38260、Hs.199316、Hs.511791、Hs.282275、Hs.249126、Hs.163484、Hs.297604、Hs.73853、Hs.27335、Hs.26176、Hs.92683、Hs.212584、Hs.372616、Hs.153647、Hs.121115、Hs.87306、Hs.318775、Hs.353114、Hs.167679、Hs.415209、Hs.55209、Hs.143600、Hs.156007、Hs.444960、Hs.234016、Hs.283011、Hs.512778、Hs.37107、Hs.414332、Hs.164680、Hs.74115、Hs.422120、Hs.104133、Hs.21861、Hs.249184、Hs.375054、Hs.436424、Hs.302754、Hs.297452、Hs.165387、Hs.493450、Hs.306094、Hs.414110、Hs.118057、Hs.840、Hs.2207、Hs.343154、Hs.445772、Hs.132272、Hs.59892、Hs.380519、Hs.442936、Hs.274548、Hs.72910、Hs.49433、Hs.26663、Hs.155814、Hs.212892、Hs.408488、Hs.37125、Hs.375870、Hs.440695、Hs.341906、Hs.370622、Hs.314141、Hs.118631、Hs.115365、Hs.238964、Hs.331491、Hs.194714、Hs.434375、Hs.127012、Hs.306622、Hs.211298、Hs.264330、Hs.347534、Hs.148767、Hs.41270、Hs.283096、Hs.110637、Hs.76152、Hs.334、Hs.55412、Hs.497743、Hs.276808、Hs.114599、Hs.461085、Hs.282787、Hs.131834、Hs.21838、Hs.492218、Hs.248114、Hs.501321、Hs.512787、Hs.268700、Hs.313948、Hs.211477、Hs.2053、Hs.21388、Hs.507546、Hs.1501、Hs.248139、Hs.283779、Hs.511992、Hs.406984、Hs.145680、Hs.403836、Hs.287656、Hs.53263、Hs.257541、Hs.413265、Hs.333742、Hs.156346、Hs.441287、Hs.131101、Hs.436983、Hs.256036、Hs.420036、Hs.440387、Hs.122309、Hs.479817、Hs.195614、Hs.355584、Hs.65248、Hs.512782、Hs.363315、Hs.43107、Hs.233950、Hs.445445、Hs.82316、Hs.148990、Hs.158798、Hs.189067およびHs.90797に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖であることを特徴とする上記(4)または(8)に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖;
(16)上記遺伝子が、配列表の配列番号290〜配列番号338に記載された塩基配列またはその一部を含む遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖であることを特徴とする上記(5)または(9)に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖;
(17)上記(1)、(2)、(3)、(6)および(10)のいずれか一つに記載の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖が支持体上に複数固定化されてなることを特徴とする遺伝子発現解析用基盤;
(18)上記遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖が蛍光ディファレンシャルディスプレイ法あるいはDNAマイクロアレイ法を用いて網羅的に解析されて、その発現の変化が認められた少なくとも5以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖であることを特徴とする上記(17)に記載の遺伝子発現解析用基盤;
(19)上記(17)または(18)に記載の遺伝子発現解析用基盤を用いることを特徴とする遺伝子発現解析方法;
(20)上記(1)、(2)、(3)、(6)および(10)のいずれか一つに記載の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖を標的遺伝子として利用して、漢方医療の「証」を評価する方法であって、被験者から得られた測定試料中の標的遺伝子の発現状態を測定し、この測定結果を、評価基準となる比較試料中の標的遺伝子の発現状態と比較することにより、上記被験者の「証」の表出の有無を評価することを特徴とする漢方医療における「証」の評価方法;
(21)上記標的遺伝子が「香蘇散の証」の出現・消失に伴い、香蘇散の服用により、および/または特定の漢方薬の効きやすさにより発現変動することを特徴とする上記(20)に記載の漢方医療における「証」の評価方法;
(22)上記標的遺伝子が、配列表の配列番号1〜配列番号49に記載された塩基配列またはその一部を含む遺伝子ならびにNCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.487001、Hs.436042およびHs.61714に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖であることを特徴とする上記(21)に記載の漢方医療における「証」の評価方法;
(23)上記標的遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.180911、Hs.294176、Hs.53250、Hs.282331、Hs.440606、Hs.86538、Hs.61232、Hs.24884、Hs.110299、Hs.303523、Hs.115617、Hs.3321、Hs.334527、Hs.161640、Hs.225943、Hs.323213、Hs.186582、Hs.24583、Hs.234775、Hs.512633、Hs.377022、Hs.29189、Hs.262480、Hs.8852、Hs.527699、Hs.445241、Hs.437457、Hs.436628、Hs.115497、Hs.497707、Hs.150826、Hs.266902、Hs.442801、Hs.8022、Hs.432379、Hs.460471、Hs.434195、Hs.145156、Hs.396566、Hs.367761、Hs.12902、Hs.297997、Hs.183390、Hs.479572、Hs.450425、Hs.283085、Hs.103388、Hs.18213、Hs.378736、Hs.389964、Hs.387258、Hs.355820、Hs.210850、Hs.158318、Hs.157461、Hs.17860、Hs.355711、Hs.74376、Hs.111726、Hs.54468、Hs.75236、Hs.193228、Hs.512660、Hs.130685、Hs.272493、Hs.414091、Hs.113912、Hs.128204、Hs.115181、Hs.86088、Hs.431156、Hs.115830、Hs.37058、Hs.125507、Hs.376586、Hs.97808、Hs.493514、Hs.412355、Hs.97933、Hs.288727、Hs.499520、Hs.53996、Hs.144028、Hs.131555、Hs.232779、Hs.382347、Hs.87224、Hs.382870、Hs.82535、Hs.235498、Hs.438482、Hs.129778、Hs.22575、Hs.98967、Hs.320086、Hs.412022、Hs.259498、Hs.445025、Hs.334022、Hs.51120、Hs.302109、Hs.268744、Hs.152664、Hs.153203、Hs.201269、Hs.448749、Hs.408843、Hs.234790、Hs.147305、Hs.436494、Hs.12840、Hs.158963、Hs.283880、Hs.476396、Hs.148956、Hs.326012、Hs.437137、Hs.406763、Hs.150276、Hs.408195、Hs.496614、Hs.251573、Hs.205457、Hs.132275、Hs.233325、Hs.343666、Hs.49753、Hs.432815、Hs.443683、Hs.143907、Hs.22116、Hs.336224、Hs.22573、Hs.66、Hs.234774、Hs.130310、Hs.25363、Hs.78465、Hs.367888、Hs.127059、Hs.140821、Hs.511968、Hs.432445、Hs.350765、Hs.48695、Hs.430138、Hs.99607、Hs.213493、Hs.8345、Hs.502577、Hs.57876、Hs.100299、Hs.458408、Hs.406639、Hs.512760、Hs.123457、Hs.326561、Hs.446702、Hs.89121、Hs.17681、Hs.148074、Hs.97714、Hs.2936、Hs.158357、Hs.499247、Hs.153692、Hs.406234、Hs.241385、Hs.271809、Hs.278568、Hs.254122、Hs.318791、Hs.189482、Hs.282938、Hs.390808、Hs.2149、Hs.423112、Hs.301715、Hs.55016、Hs.99120、Hs.511985、Hs.359978、Hs.204238、Hs.283506、Hs.447877、Hs.137674、Hs.266738、Hs.302145、Hs.399966、Hs.149098、Hs.431010、Hs.222312、Hs.2207、Hs.25094、Hs.79881、Hs.116651、Hs.25328、Hs.501480、Hs.8346、Hs.157796、Hs.21239、Hs.508901、Hs.144875、Hs.40735、Hs.341806、Hs.125423、Hs.511880、Hs.433827、Hs.307044、Hs.306697、Hs.134807、Hs.387367、Hs.335355、Hs.349109、Hs.418105、Hs.376337、Hs.137574、Hs.44077、Hs.44899、Hs.184945、Hs.114088、Hs.376025、Hs.21258、Hs.207407、Hs.117938、Hs.169071、Hs.385986、Hs.284153、Hs.95582、Hs.21380、Hs.418083、Hs.91625、Hs.397167、Hs.437046、Hs.14468、Hs.26309、Hs.479080、Hs.352530、Hs.73958、Hs.171025、Hs.121001、Hs.11713、Hs.280311、Hs.8535、Hs.283326、Hs.407474、Hs.451697、Hs.14732、Hs.73890、Hs.42650、Hs.7327、Hs.287640、Hs.194659、Hs.191381、Hs.406789、Hs.227098、Hs.7934、Hs.512643、Hs.256583、Hs.408355、Hs.155182、Hs.30340、Hs.178023、Hs.58974、Hs.390568、Hs.185796、Hs.115263、Hs.414251、Hs.119693、Hs.511776、Hs.196530、Hs.157573、Hs.36761、Hs.223581、Hs.511753、Hs.17170、Hs.448823、Hs.102929、Hs.37616、Hs.511824、Hs.354013、Hs.132380、Hs.371496、Hs.458427、Hs.32967、Hs.143751、Hs.253690、Hs.352、Hs.21177、Hs.406681、Hs.435976、Hs.46679、Hs.148101、Hs.9914、Hs.310230、Hs.376590、Hs.458397、Hs.58414、Hs.17165、Hs.407015、Hs.470704、Hs.246914、Hs.15420、Hs.436282、Hs.257368、Hs.512739、Hs.387679、Hs.283078、Hs.516782、Hs.109752、Hs.201667、Hs.149504、Hs.398139、Hs.94367、Hs.112208、Hs.395779、Hs.445563、Hs.65135、Hs.187203、Hs.490216、Hs.487918、Hs.436495、Hs.125571、Hs.519634、Hs.399769、Hs.511987、Hs.26176、Hs.25934、Hs.351825、Hs.283794、Hs.256067、Hs.251699、Hs.436378、Hs.523755、Hs.449884、Hs.41154、Hs.54609、Hs.458291、Hs.408336およびHs.2012に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖であることを特徴とする上記(21)に記載の漢方医療における「証」の評価方法;
(24)上記標的遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.372133、Hs.281004、7.59 Hs.420563、Hs.376818、Hs.15780、Hs.493450、Hs.306814、Hs.511810、Hs.143241、Hs.278924、Hs.512632、Hs.367633、Hs.127363、Hs.414110、Hs.434143、Hs.36567、Hs.356605、Hs.414648、Hs.104888、Hs.197435、Hs.410810、Hs.434375、Hs.56279、Hs.125487、Hs.51011、Hs.170953、Hs.66392、Hs.48372、Hs.356664、Hs.420269、Hs.3017、Hs.306811、Hs.93121、Hs.438880、Hs.302029、Hs.463017、Hs.412559、Hs.17518、Hs.2133、Hs.400380、Hs.75813、Hs.287656、Hs.334347、Hs.411572、Hs.6496、Hs.268764、Hs.385496、Hs.410088、Hs.24835、Hs.446504、Hs.7972、Hs.292057、Hs.435775、Hs.78106、Hs.217754、Hs.153704、Hs.341906、Hs.250830、Hs.68846、Hs.438712、Hs.99480、Hs.434418、Hs.171980、Hs.376810、Hs.324335、Hs.37936、Hs.512546、Hs.128836、Hs.406330、Hs.302352、Hs.169825、Hs.522765、Hs.526526、Hs.82002、Hs.526394、Hs.512785、Hs.1937、Hs.105700、Hs.122895、Hs.9589、Hs.99439、Hs.334828、Hs.126161、Hs.465202、Hs.310231、Hs.94875、Hs.203557、Hs.444729、Hs.449965、Hs.122309、Hs.190090、Hs.355714、Hs.153952、Hs.408577、Hs.287370、Hs.185202、Hs.29792、Hs.4845、Hs.27183、Hs.486433、Hs.439463、Hs.194665、Hs.129312、Hs.163682、Hs.73853、Hs.2689、Hs.283900、Hs.162604、Hs.381367、Hs.288218、Hs.203349、Hs.433891、Hs.248065、Hs.440603、Hs.144913、Hs.199316、Hs.221660、Hs.21554、Hs.510244、Hs.436325、Hs.117979、Hs.356888、Hs.306322、Hs.310431、Hs.356501、Hs.444708、Hs.159609、Hs.18069、Hs.373612、Hs.12802、Hs.508901、Hs.504580、Hs.308242、Hs.128580、Hs.112184、Hs.306298、Hs.343800、Hs.50841、Hs.137516、Hs.413095、Hs.105640、Hs.144696、Hs.175411、Hs.207407、Hs.406856、Hs.122959、Hs.143792、Hs.170195、Hs.381715、Hs.443292、Hs.56874、Hs.147096、Hs.521267、Hs.196956、Hs.80720、Hs.440953、Hs.352387、Hs.434107、Hs.112720、Hs.155584、Hs.147352、Hs.146329、Hs.463171、Hs.445445、Hs.156892、Hs.212670、Hs.129895、Hs.356076、Hs.439590、Hs.278613、Hs.54697、Hs.388917、Hs.55923、Hs.460377、Hs.416244、Hs.234786、Hs.129969、Hs.275711、Hs.127842、Hs.302772、Hs.337008、Hs.48480、Hs.121115、Hs.318773、Hs.98564、Hs.276466、Hs.78824、Hs.124502、Hs.325530、Hs.375664、Hs.516311、Hs.367688、Hs.386155、Hs.189174、Hs.159264、Hs.386143、Hs.158446、Hs.209461、Hs.163484、Hs.300559、Hs.155223、Hs.448979、Hs.368420、Hs.289044、Hs.74088、Hs.93907、Hs.408264、Hs.439168、Hs.437433、Hs.448468、Hs.310194、Hs.45152、Hs.283095、Hs.500957、Hs.431156、Hs.511922、Hs.406549、Hs.288731、Hs.123419、Hs.334702、Hs.114172、Hs.408261、Hs.436657、Hs.125300、Hs.203、Hs.287499、Hs.102943、Hs.145949、Hs.248290、Hs.418167、Hs.55481、Hs.434181、Hs.275906、Hs.249126、Hs.147256、Hs.178295、Hs.385890、Hs.201800、Hs.96633、Hs.445489、Hs.449650、Hs.102708、Hs.433381、Hs.27263、Hs.512782、Hs.347537、Hs.124115、Hs.1270、Hs.349121、Hs.293884、Hs.143943、Hs.12742、Hs.166705、Hs.13209、Hs.77719、Hs.129694、Hs.126906、Hs.151414、Hs.212584、Hs.232819、Hs.41324、Hs.140821、Hs.351593、Hs.12248、Hs.434281、Hs.283506、Hs.66412.18 Hs.2115872.17 Hs.427712.17 Hs.447703、Hs.372208、Hs.379010、Hs.437008、Hs.99311、Hs.464896、Hs.323079、Hs.509439、Hs.440088、Hs.34045、Hs.406073、Hs.455335、Hs.175465、Hs.507549、Hs.127775、Hs.132888、Hs.8728、Hs.157231、Hs.62863、Hs.169600、Hs.414332、Hs.259403、Hs.101949、Hs.436339、Hs.128668、Hs.380167、Hs.79340、Hs.43125、Hs.2251、Hs.142296、Hs.288155、Hs.399740、Hs.27524、Hs.165464、Hs.123642、Hs.125156、Hs.58561、Hs.418966、Hs.447121、Hs.24734、Hs.348709、Hs.89436、Hs.2563、Hs.186363、Hs.169470、Hs.6540、Hs.223206、Hs.439169、Hs.133250、Hs.172562、Hs.349705、Hs.405457、Hs.145894、Hs.7360、Hs.163546、Hs.102276、Hs.511781、Hs.283794、Hs.171090、Hs.508459、Hs.276808、Hs.248155、Hs.436042、Hs.371212、Hs.221040およびHs.374990に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖であることを特徴とする上記(21)に記載の漢方医療における「証」の評価方法;
(25)上記標的遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.58323、Hs.160373、Hs.334832、Hs.150136、Hs.272385、Hs.382870、Hs.430919、Hs.387551、Hs.194408、Hs.406961、Hs.164021、Hs.24884、Hs.437211、Hs.436628、Hs.283880、Hs.110299、Hs.390242、Hs.113291、Hs.278894、Hs.90221、Hs.24583、Hs.266902、Hs.148956、Hs.162282、Hs.103388、Hs.406300、Hs.382347、Hs.413430、Hs.449884、Hs.24889、Hs.440606、Hs.36069、Hs.131255、Hs.369557、Hs.512660、Hs.359981、Hs.283085、Hs.163546、Hs.117938、Hs.74376、Hs.438482、Hs.482392、Hs.320086、Hs.95990、Hs.9469、Hs.108642、Hs.180016、Hs.479572、Hs.169395、Hs.335319、Hs.442801、Hs.111726、Hs.183390、Hs.449407、Hs.434195、Hs.17546、Hs.127951、Hs.458408、Hs.287374、Hs.150826、Hs.181483、Hs.115467、Hs.232779、Hs.96557、Hs.406722、Hs.201269、Hs.47313、Hs.8852、Hs.283326、Hs.225943、Hs.12902、Hs.500371、Hs.7296、Hs.430854、Hs.278568、Hs.132275、Hs.66392、Hs.437179、Hs.8850、Hs.98967、Hs.57876、Hs.459828、Hs.310230、Hs.25328、Hs.301956、Hs.144875、Hs.110457、Hs.509265、Hs.60339、Hs.511880、Hs.446152、Hs.48100、Hs.247975、Hs.479080、Hs.490096、Hs.8346、Hs.131555、Hs.32967、Hs.307003、Hs.127032、Hs.109268、Hs.80720、Hs.266738、Hs.113912、Hs.175780、Hs.497972、Hs.18213、Hs.152664、Hs.459847、Hs.378736、Hs.458427、Hs.36761、Hs.429531、Hs.149797、Hs.444135、Hs.22575、Hs.272191、Hs.512643、Hs.54713、Hs.820、Hs.77221、Hs.253690、Hs.436282、Hs.181289、Hs.170560、Hs.426734、Hs.334527、Hs.406701、Hs.177434、Hs.511968、Hs.389964、Hs.251699、Hs.207805、Hs.140821、Hs.281004、Hs.435675、Hs.292597、Hs.178715、Hs.161394、Hs.396332、Hs.302109、Hs.86088、Hs.356794、Hs.449392、Hs.134807、Hs.210850、Hs.18705、Hs.326444、Hs.287453、Hs.130522、Hs.234775、Hs.438555、Hs.171532、Hs.54617、Hs.268843、Hs.11713、Hs.5025、Hs.288727、Hs.412022、Hs.78465、Hs.423112、Hs.497707、Hs.235390、Hs.33455、Hs.371278、Hs.237642、Hs.234790、Hs.78792、Hs.115181、Hs.115617、Hs.463017、Hs.406789、Hs.378753、Hs.256583、Hs.99430、Hs.525361、Hs.148559、Hs.249181、Hs.23853、Hs.172052、Hs.90821、Hs.444182、Hs.123474、Hs.284310、Hs.137574、Hs.102929、Hs.511985、Hs.371335、Hs.528103、Hs.355711、Hs.496614、Hs.27621、Hs.183006、Hs.27021、Hs.389571、Hs.227457、Hs.334772、Hs.512760、Hs.53996、Hs.207407、Hs.297997、Hs.512808、Hs.149467、Hs.510932、Hs.272493、Hs.79881、Hs.3052、Hs.415895、Hs.388220、Hs.253193、Hs.124502、Hs.232803、Hs.269777、Hs.12264、Hs.380763、Hs.147595、Hs.411274、Hs.441481、Hs.376025、Hs.250895、Hs.468922、Hs.161427、Hs.385986、Hs.439760、Hs.313413、Hs.408843、Hs.58974、Hs.430755、Hs.99120、Hs.25363、Hs.287405、Hs.131035、Hs.335355、Hs.259471、Hs.235888、Hs.144527、Hs.414091、Hs.480174、Hs.445241、Hs.44888、Hs.382683、Hs.439494、Hs.288520、Hs.234027、Hs.130685、Hs.399966、Hs.434486、Hs.407002、Hs.333958、Hs.238648、Hs.308045、Hs.196470、Hs.144531、Hs.7327、Hs.83916、Hs.169441、Hs.73890、Hs.432374、Hs.143751、Hs.2074、Hs.158278、Hs.158963、Hs.490216、Hs.103422、Hs.133361、Hs.404220、Hs.169071、Hs.288718、Hs.144130、Hs.336224、Hs.112669、Hs.159265、Hs.122110、Hs.7835、Hs.407015、Hs.441708、Hs.452398、Hs.439124、Hs.443020、Hs.499520、Hs.356572、Hs.284200、Hs.78944、Hs.512387、Hs.235498、Hs.133082、Hs.471423、Hs.73625、Hs.9914、Hs.355862、Hs.82120、Hs.443392、Hs.401954、Hs.436140、Hs.461482、Hs.433596、Hs.434103、Hs.385898、Hs.348920、Hs.81848、Hs.432379、Hs.79025、Hs.407162、Hs.197922、Hs.180171、Hs.408200、Hs.444529、Hs.164649、Hs.4224、Hs.460471、Hs.149152、Hs.458397、Hs.124211、Hs.415497、Hs.293917、Hs.253489、Hs.14822、Hs.376590、Hs.179112、Hs.152337、Hs.438300、Hs.344099、Hs.421986、Hs.432458、Hs.351414、Hs.54460、Hs.349227、Hs.47312、Hs.185796、Hs.26981、Hs.267038、Hs.448749、Hs.170114、Hs.95582、Hs.352601、Hs.353001、Hs.352617、Hs.414164、Hs.30340、Hs.359978、Hs.298241、Hs.178292、Hs.156232、Hs.406681、Hs.411644、Hs.97933、Hs.137674、Hs.476396、Hs.388877、Hs.155573、Hs.87、Hs.153203、Hs.458434、Hs.10056、Hs.148074およびHs.377022に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖であることを特徴とする上記(21)に記載の漢方医療における「証」の評価方法;
(26)上記標的遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.436450、Hs.278613、Hs.411239、Hs.445072、Hs.123515、Hs.17518、Hs.128668、Hs.280226、Hs.511758、Hs.233437、Hs.187802、Hs.61929、Hs.406741、Hs.245431、Hs.20082、Hs.29798、Hs.222、Hs.162089、Hs.37936、Hs.144913、Hs.166351、Hs.313、Hs.522901、Hs.450230、Hs.89679、Hs.323966、Hs.439168、Hs.159629、Hs.186363、Hs.172052、Hs.250723、Hs.356605、Hs.376407、Hs.188021、Hs.386264、Hs.40510、Hs.408067、Hs.58009、Hs.222909、Hs.113227、Hs.350800、Hs.377070、Hs.178295、Hs.222746、Hs.351811、Hs.440088、Hs.490397、Hs.344400、Hs.361748、Hs.283045、Hs.27258、Hs.25328、Hs.350765、Hs.103665、Hs.194725、Hs.327621、Hs.408629、Hs.411347、Hs.489592、Hs.386236、Hs.446451、Hs.105115、Hs.45207、Hs.91283、Hs.178499、Hs.444882、Hs.381370、Hs.369994、Hs.93883、Hs.306230、Hs.413924、Hs.504809、Hs.84665、Hs.389724、Hs.211587、Hs.1560、Hs.406733、Hs.306812、Hs.348745、Hs.106688、Hs.129895、Hs.388917、Hs.368746、Hs.413525、Hs.166011、Hs.94865、Hs.250472、Hs.434485、Hs.267038、Hs.445426、Hs.154084、Hs.23317、Hs.75360、Hs.127405、Hs.155584、Hs.47504、Hs.90318、Hs.128499、Hs.283082、Hs.449006、Hs.309365、Hs.436602、Hs.324335、Hs.351816、Hs.306992、Hs.512632、Hs.443260、Hs.348709、Hs.426324、Hs.227656、Hs.435092、Hs.272200、Hs.347537、Hs.271269、Hs.424414、Hs.707、Hs.248204、Hs.168355、Hs.58559、Hs.407817、Hs.447162、Hs.144870、Hs.435398、Hs.146025、Hs.406485、Hs.326559、Hs.258536、Hs.169825、Hs.1270、Hs.325335、Hs.335877、Hs.421280、Hs.443120、Hs.389638、Hs.124673、Hs.150138、Hs.476618、Hs.438482、Hs.652、Hs.199372、Hs.493952、Hs.371212、Hs.25156、Hs.301956、Hs.511810、Hs.151408、Hs.157144、Hs.159525、Hs.94327、Hs.449791、Hs.320522、Hs.123114、Hs.446376、Hs.250666、Hs.201554、Hs.351818、Hs.189575、Hs.132270、Hs.36793、Hs.23367、Hs.104613、Hs.254006、Hs.133995、Hs.395205、Hs.476835、Hs.513009、Hs.257584、Hs.5462、Hs.96149、Hs.374720、Hs.46791、Hs.127473、Hs.91813、Hs.271640、Hs.379010、Hs.516739、Hs.376657、Hs.121490、Hs.352240、Hs.203557、Hs.228982、Hs.122115、Hs.112928、Hs.436975、Hs.387258、Hs.433197、Hs.159553、Hs.437、Hs.288911、Hs.440953、Hs.20315、Hs.104859、Hs.38260、Hs.199316、Hs.511791、Hs.282275、Hs.249126、Hs.163484、Hs.297604、Hs.73853、Hs.27335、Hs.26176、Hs.92683、Hs.212584、Hs.372616、Hs.153647、Hs.121115、Hs.87306、Hs.318775、Hs.353114、Hs.167679、Hs.415209、Hs.55209、Hs.143600、Hs.156007、Hs.444960、Hs.234016、Hs.283011、Hs.512778、Hs.37107、Hs.414332、Hs.164680、Hs.74115、Hs.422120、Hs.104133、Hs.21861、Hs.249184、Hs.375054、Hs.436424、Hs.302754、Hs.297452、Hs.165387、Hs.493450、Hs.306094、Hs.414110、Hs.118057、Hs.840、Hs.2207、Hs.343154、Hs.445772、Hs.132272、Hs.59892、Hs.380519、Hs.442936、Hs.274548、Hs.72910、Hs.49433、Hs.26663、Hs.155814、Hs.212892、Hs.408488、Hs.37125、Hs.375870、Hs.440695、Hs.341906、Hs.370622、Hs.314141、Hs.118631、Hs.115365、Hs.238964、Hs.331491、Hs.194714、Hs.434375、Hs.127012、Hs.306622、Hs.211298、Hs.264330、Hs.347534、Hs.148767、Hs.41270、Hs.283096、Hs.110637、Hs.76152、Hs.334、Hs.55412、Hs.497743、Hs.276808、Hs.114599、Hs.461085、Hs.282787、Hs.131834、Hs.21838、Hs.492218、Hs.248114、Hs.501321、Hs.512787、Hs.268700、Hs.313948、Hs.211477、Hs.2053、Hs.21388、Hs.507546、Hs.1501、Hs.248139、Hs.283779、Hs.511992、Hs.406984、Hs.145680、Hs.403836、Hs.287656、Hs.53263、Hs.257541、Hs.413265、Hs.333742、Hs.156346、Hs.441287、Hs.131101、Hs.436983、Hs.256036、Hs.420036、Hs.440387、Hs.122309、Hs.479817、Hs.195614、Hs.355584、Hs.65248、Hs.512782、Hs.363315、Hs.43107、Hs.233950、Hs.445445、Hs.82316、Hs.148990、Hs.158798、Hs.189067およびHs.90797に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖であることを特徴とする上記(21)に記載の漢方医療における「証」の評価方法;
(27)上記標的遺伝子が「半夏厚朴湯の証」の出現・消失に伴い、半夏厚朴湯の服用により、および/または半夏厚朴湯の効きやすさにより発現変動することを特徴とする上記(20)に記載の漢方医療における「証」の評価方法;
(28)上記標的遺伝子が、配列表の配列番号290〜配列番号338に記載された塩基配列またはその一部を含む遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖であることを特徴とする上記(27)に記載の漢方医療における「証」の評価方法;
(29)上記(1)、(2)、(3)、(6)および(10)のいずれか一つに記載の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖を標的遺伝子として利用して、漢方医療における漢方薬の適応診断を行う方法であって、被験者から得られた測定試料中の標的遺伝子の発現状態を測定し、この測定結果を、評価基準となる比較試料中の標的遺伝子の発現状態と比較することにより、上記被験者について漢方薬特有の遺伝子発現パターンの有無を観察して、被験者の健康状態を評価・判定することを特徴とする漢方医療における漢方薬の適応診断方法;
(30)上記漢方薬が香蘇散であり、上記標的遺伝子が「香蘇散の証」の出現・消失に伴い、香蘇散の服用により、および/または特定の漢方薬の効きやすさにより発現変動することを特徴とする上記(29)に記載の漢方医療における漢方薬の適応診断方法;
(31)上記標的遺伝子が、配列表の配列番号1〜配列番号49に記載された塩基配列またはその一部を含む遺伝子ならびにNCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.487001、Hs.436042およびHs.61714に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖であることを特徴とする上記(30)に記載の漢方医療における漢方薬の適応診断方法;
(32)上記標的遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.180911、Hs.294176、Hs.53250、Hs.282331、Hs.440606、Hs.86538、Hs.61232、Hs.24884、Hs.110299、Hs.303523、Hs.115617、Hs.3321、Hs.334527、Hs.161640、Hs.225943、Hs.323213、Hs.186582、Hs.24583、Hs.234775、Hs.512633、Hs.377022、Hs.29189、Hs.262480、Hs.8852、Hs.527699、Hs.445241、Hs.437457、Hs.436628、Hs.115497、Hs.497707、Hs.150826、Hs.266902、Hs.442801、Hs.8022、Hs.432379、Hs.460471、Hs.434195、Hs.145156、Hs.396566、Hs.367761、Hs.12902、Hs.297997、Hs.183390、Hs.479572、Hs.450425、Hs.283085、Hs.103388、Hs.18213、Hs.378736、Hs.389964、Hs.387258、Hs.355820、Hs.210850、Hs.158318、Hs.157461、Hs.17860、Hs.355711、Hs.74376、Hs.111726、Hs.54468、Hs.75236、Hs.193228、Hs.512660、Hs.130685、Hs.272493、Hs.414091、Hs.113912、Hs.128204、Hs.115181、Hs.86088、Hs.431156、Hs.115830、Hs.37058、Hs.125507、Hs.376586、Hs.97808、Hs.493514、Hs.412355、Hs.97933、Hs.288727、Hs.499520、Hs.53996、Hs.144028、Hs.131555、Hs.232779、Hs.382347、Hs.87224、Hs.382870、Hs.82535、Hs.235498、Hs.438482、Hs.129778、Hs.22575、Hs.98967、Hs.320086、Hs.412022、Hs.259498、Hs.445025、Hs.334022、Hs.51120、Hs.302109、Hs.268744、Hs.152664、Hs.153203、Hs.201269、Hs.448749、Hs.408843、Hs.234790、Hs.147305、Hs.436494、Hs.12840、Hs.158963、Hs.283880、Hs.476396、Hs.148956、Hs.326012、Hs.437137、Hs.406763、Hs.150276、Hs.408195、Hs.496614、Hs.251573、Hs.205457、Hs.132275、Hs.233325、Hs.343666、Hs.49753、Hs.432815、Hs.443683、Hs.143907、Hs.22116、Hs.336224、Hs.22573、Hs.66、Hs.234774、Hs.130310、Hs.25363、Hs.78465、Hs.367888、Hs.127059、Hs.140821、Hs.511968、Hs.432445、Hs.350765、Hs.48695、Hs.430138、Hs.99607、Hs.213493、Hs.8345、Hs.502577、Hs.57876、Hs.100299、Hs.458408、Hs.406639、Hs.512760、Hs.123457、Hs.326561、Hs.446702、Hs.89121、Hs.17681、Hs.148074、Hs.97714、Hs.2936、Hs.158357、Hs.499247、Hs.153692、Hs.406234、Hs.241385、Hs.271809、Hs.278568、Hs.254122、Hs.318791、Hs.189482、Hs.282938、Hs.390808、Hs.2149、Hs.423112、Hs.301715、Hs.55016、Hs.99120、Hs.511985、Hs.359978、Hs.204238、Hs.283506、Hs.447877、Hs.137674、Hs.266738、Hs.302145、Hs.399966、Hs.149098、Hs.431010、Hs.222312、Hs.2207、Hs.25094、Hs.79881、Hs.116651、Hs.25328、Hs.501480、Hs.8346、Hs.157796、Hs.21239、Hs.508901、Hs.144875、Hs.40735、Hs.341806、Hs.125423、Hs.511880、Hs.433827、Hs.307044、Hs.306697、Hs.134807、Hs.387367、Hs.335355、Hs.349109、Hs.418105、Hs.376337、Hs.137574、Hs.44077、Hs.44899、Hs.184945、Hs.114088、Hs.376025、Hs.21258、Hs.207407、Hs.117938、Hs.169071、Hs.385986、Hs.284153、Hs.95582、Hs.21380、Hs.418083、Hs.91625、Hs.397167、Hs.437046、Hs.14468、Hs.26309、Hs.479080、Hs.352530、Hs.73958、Hs.171025、Hs.121001、Hs.11713、Hs.280311、Hs.8535、Hs.283326、Hs.407474、Hs.451697、Hs.14732、Hs.73890、Hs.42650、Hs.7327、Hs.287640、Hs.194659、Hs.191381、Hs.406789、Hs.227098、Hs.7934、Hs.512643、Hs.256583、Hs.408355、Hs.155182、Hs.30340、Hs.178023、Hs.58974、Hs.390568、Hs.185796、Hs.115263、Hs.414251、Hs.119693、Hs.511776、Hs.196530、Hs.157573、Hs.36761、Hs.223581、Hs.511753、Hs.17170、Hs.448823、Hs.102929、Hs.37616、Hs.511824、Hs.354013、Hs.132380、Hs.371496、Hs.458427、Hs.32967、Hs.143751、Hs.253690、Hs.352、Hs.21177、Hs.406681、Hs.435976、Hs.46679、Hs.148101、Hs.9914、Hs.310230、Hs.376590、Hs.458397、Hs.58414、Hs.17165、Hs.407015、Hs.470704、Hs.246914、Hs.15420、Hs.436282、Hs.257368、Hs.512739、Hs.387679、Hs.283078、Hs.516782、Hs.109752、Hs.201667、Hs.149504、Hs.398139、Hs.94367、Hs.112208、Hs.395779、Hs.445563、Hs.65135、Hs.187203、Hs.490216、Hs.487918、Hs.436495、Hs.125571、Hs.519634、Hs.399769、Hs.511987、Hs.26176、Hs.25934、Hs.351825、Hs.283794、Hs.256067、Hs.251699、Hs.436378、Hs.523755、Hs.449884、Hs.41154、Hs.54609、Hs.458291、Hs.408336およびHs.2012に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖であることを特徴とする上記(30)に記載の漢方医療における漢方薬の適応診断方法;
(33)上記標的遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.372133、Hs.281004、7.59 Hs.420563、Hs.376818、Hs.15780、Hs.493450、Hs.306814、Hs.511810、Hs.143241、Hs.278924、Hs.512632、Hs.367633、Hs.127363、Hs.414110、Hs.434143、Hs.36567、Hs.356605、Hs.414648、Hs.104888、Hs.197435、Hs.410810、Hs.434375、Hs.56279、Hs.125487、Hs.51011、Hs.170953、Hs.66392、Hs.48372、Hs.356664、Hs.420269、Hs.3017、Hs.306811、Hs.93121、Hs.438880、Hs.302029、Hs.463017、Hs.412559、Hs.17518、Hs.2133、Hs.400380、Hs.75813、Hs.287656、Hs.334347、Hs.411572、Hs.6496、Hs.268764、Hs.385496、Hs.410088、Hs.24835、Hs.446504、Hs.7972、Hs.292057、Hs.435775、Hs.78106、Hs.217754、Hs.153704、Hs.341906、Hs.250830、Hs.68846、Hs.438712、Hs.99480、Hs.434418、Hs.171980、Hs.376810、Hs.324335、Hs.37936、Hs.512546、Hs.128836、Hs.406330、Hs.302352、Hs.169825、Hs.522765、Hs.526526、Hs.82002、Hs.526394、Hs.512785、Hs.1937、Hs.105700、Hs.122895、Hs.9589、Hs.99439、Hs.334828、Hs.126161、Hs.465202、Hs.310231、Hs.94875、Hs.203557、Hs.444729、Hs.449965、Hs.122309、Hs.190090、Hs.355714、Hs.153952、Hs.408577、Hs.287370、Hs.185202、Hs.29792、Hs.4845、Hs.27183、Hs.486433、Hs.439463、Hs.194665、Hs.129312、Hs.163682、Hs.73853、Hs.2689、Hs.283900、Hs.162604、Hs.381367、Hs.288218、Hs.203349、Hs.433891、Hs.248065、Hs.440603、Hs.144913、Hs.199316、Hs.221660、Hs.21554、Hs.510244、Hs.436325、Hs.117979、Hs.356888、Hs.306322、Hs.310431、Hs.356501、Hs.444708、Hs.159609、Hs.18069、Hs.373612、Hs.12802、Hs.508901、Hs.504580、Hs.308242、Hs.128580、Hs.112184、Hs.306298、Hs.343800、Hs.50841、Hs.137516、Hs.413095、Hs.105640、Hs.144696、Hs.175411、Hs.207407、Hs.406856、Hs.122959、Hs.143792、Hs.170195、Hs.381715、Hs.443292、Hs.56874、Hs.147096、Hs.521267、Hs.196956、Hs.80720、Hs.440953、Hs.352387、Hs.434107、Hs.112720、Hs.155584、Hs.147352、Hs.146329、Hs.463171、Hs.445445、Hs.156892、Hs.212670、Hs.129895、Hs.356076、Hs.439590、Hs.278613、Hs.54697、Hs.388917、Hs.55923、Hs.460377、Hs.416244、Hs.234786、Hs.129969、Hs.275711、Hs.127842、Hs.302772、Hs.337008、Hs.48480、Hs.121115、Hs.318773、Hs.98564、Hs.276466、Hs.78824、Hs.124502、Hs.325530、Hs.375664、Hs.516311、Hs.367688、Hs.386155、Hs.189174、Hs.159264、Hs.386143、Hs.158446、Hs.209461、Hs.163484、Hs.300559、Hs.155223、Hs.448979、Hs.368420、Hs.289044、Hs.74088、Hs.93907、Hs.408264、Hs.439168、Hs.437433、Hs.448468、Hs.310194、Hs.45152、Hs.283095、Hs.500957、Hs.431156、Hs.511922、Hs.406549、Hs.288731、Hs.123419、Hs.334702、Hs.114172、Hs.408261、Hs.436657、Hs.125300、Hs.203、Hs.287499、Hs.102943、Hs.145949、Hs.248290、Hs.418167、Hs.55481、Hs.434181、Hs.275906、Hs.249126、Hs.147256、Hs.178295、Hs.385890、Hs.201800、Hs.96633、Hs.445489、Hs.449650、Hs.102708、Hs.433381、Hs.27263、Hs.512782、Hs.347537、Hs.124115、Hs.1270、Hs.349121、Hs.293884、Hs.143943、Hs.12742、Hs.166705、Hs.13209、Hs.77719、Hs.129694、Hs.126906、Hs.151414、Hs.212584、Hs.232819、Hs.41324、Hs.140821、Hs.351593、Hs.12248、Hs.434281、Hs.283506、Hs.66412.18 Hs.2115872.17 Hs.427712.17 Hs.447703、Hs.372208、Hs.379010、Hs.437008、Hs.99311、Hs.464896、Hs.323079、Hs.509439、Hs.440088、Hs.34045、Hs.406073、Hs.455335、Hs.175465、Hs.507549、Hs.127775、Hs.132888、Hs.8728、Hs.157231、Hs.62863、Hs.169600、Hs.414332、Hs.259403、Hs.101949、Hs.436339、Hs.128668、Hs.380167、Hs.79340、Hs.43125、Hs.2251、Hs.142296、Hs.288155、Hs.399740、Hs.27524、Hs.165464、Hs.123642、Hs.125156、Hs.58561、Hs.418966、Hs.447121、Hs.24734、Hs.348709、Hs.89436、Hs.2563、Hs.186363、Hs.169470、Hs.6540、Hs.223206、Hs.439169、Hs.133250、Hs.172562、Hs.349705、Hs.405457、Hs.145894、Hs.7360、Hs.163546、Hs.102276、Hs.511781、Hs.283794、Hs.171090、Hs.508459、Hs.276808、Hs.248155、Hs.436042、Hs.371212、Hs.221040およびHs.374990に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖であることを特徴とする上記(30)に記載の漢方医療における漢方薬の適応診断方法;
(34)上記標的遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.58323、Hs.160373、Hs.334832、Hs.150136、Hs.272385、Hs.382870、Hs.430919、Hs.387551、Hs.194408、Hs.406961、Hs.164021、Hs.24884、Hs.437211、Hs.436628、Hs.283880、Hs.110299、Hs.390242、Hs.113291、Hs.278894、Hs.90221、Hs.24583、Hs.266902、Hs.148956、Hs.162282、Hs.103388、Hs.406300、Hs.382347、Hs.413430、Hs.449884、Hs.24889、Hs.440606、Hs.36069、Hs.131255、Hs.369557、Hs.512660、Hs.359981、Hs.283085、Hs.163546、Hs.117938、Hs.74376、Hs.438482、Hs.482392、Hs.320086、Hs.95990、Hs.9469、Hs.108642、Hs.180016、Hs.479572、Hs.169395、Hs.335319、Hs.442801、Hs.111726、Hs.183390、Hs.449407、Hs.434195、Hs.17546、Hs.127951、Hs.458408、Hs.287374、Hs.150826、Hs.181483、Hs.115467、Hs.232779、Hs.96557、Hs.406722、Hs.201269、Hs.47313、Hs.8852、Hs.283326、Hs.225943、Hs.12902、Hs.500371、Hs.7296、Hs.430854、Hs.278568、Hs.132275、Hs.66392、Hs.437179、Hs.8850、Hs.98967、Hs.57876、Hs.459828、Hs.310230、Hs.25328、Hs.301956、Hs.144875、Hs.110457、Hs.509265、Hs.60339、Hs.511880、Hs.446152、Hs.48100、Hs.247975、Hs.479080、Hs.490096、Hs.8346、Hs.131555、Hs.32967、Hs.307003、Hs.127032、Hs.109268、Hs.80720、Hs.266738、Hs.113912、Hs.175780、Hs.497972、Hs.18213、Hs.152664、Hs.459847、Hs.378736、Hs.458427、Hs.36761、Hs.429531、Hs.149797、Hs.444135、Hs.22575、Hs.272191、Hs.512643、Hs.54713、Hs.820、Hs.77221、Hs.253690、Hs.436282、Hs.181289、Hs.170560、Hs.426734、Hs.334527、Hs.406701、Hs.177434、Hs.511968、Hs.389964、Hs.251699、Hs.207805、Hs.140821、Hs.281004、Hs.435675、Hs.292597、Hs.178715、Hs.161394、Hs.396332、Hs.302109、Hs.86088、Hs.356794、Hs.449392、Hs.134807、Hs.210850、Hs.18705、Hs.326444、Hs.287453、Hs.130522、Hs.234775、Hs.438555、Hs.171532、Hs.54617、Hs.268843、Hs.11713、Hs.5025、Hs.288727、Hs.412022、Hs.78465、Hs.423112、Hs.497707、Hs.235390、Hs.33455、Hs.371278、Hs.237642、Hs.234790、Hs.78792、Hs.115181、Hs.115617、Hs.463017、Hs.406789、Hs.378753、Hs.256583、Hs.99430、Hs.525361、Hs.148559、Hs.249181、Hs.23853、Hs.172052、Hs.90821、Hs.444182、Hs.123474、Hs.284310、Hs.137574、Hs.102929、Hs.511985、Hs.371335、Hs.528103、Hs.355711、Hs.496614、Hs.27621、Hs.183006、Hs.27021、Hs.389571、Hs.227457、Hs.334772、Hs.512760、Hs.53996、Hs.207407、Hs.297997、Hs.512808、Hs.149467、Hs.510932、Hs.272493、Hs.79881、Hs.3052、Hs.415895、Hs.388220、Hs.253193、Hs.124502、Hs.232803、Hs.269777、Hs.12264、Hs.380763、Hs.147595、Hs.411274、Hs.441481、Hs.376025、Hs.250895、Hs.468922、Hs.161427、Hs.385986、Hs.439760、Hs.313413、Hs.408843、Hs.58974、Hs.430755、Hs.99120、Hs.25363、Hs.287405、Hs.131035、Hs.335355、Hs.259471、Hs.235888、Hs.144527、Hs.414091、Hs.480174、Hs.445241、Hs.44888、Hs.382683、Hs.439494、Hs.288520、Hs.234027、Hs.130685、Hs.399966、Hs.434486、Hs.407002、Hs.333958、Hs.238648、Hs.308045、Hs.196470、Hs.144531、Hs.7327、Hs.83916、Hs.169441、Hs.73890、Hs.432374、Hs.143751、Hs.2074、Hs.158278、Hs.158963、Hs.490216、Hs.103422、Hs.133361、Hs.404220、Hs.169071、Hs.288718、Hs.144130、Hs.336224、Hs.112669、Hs.159265、Hs.122110、Hs.7835、Hs.407015、Hs.441708、Hs.452398、Hs.439124、Hs.443020、Hs.499520、Hs.356572、Hs.284200、Hs.78944、Hs.512387、Hs.235498、Hs.133082、Hs.471423、Hs.73625、Hs.9914、Hs.355862、Hs.82120、Hs.443392、Hs.401954、Hs.436140、Hs.461482、Hs.433596、Hs.434103、Hs.385898、Hs.348920、Hs.81848、Hs.432379、Hs.79025、Hs.407162、Hs.197922、Hs.180171、Hs.408200、Hs.444529、Hs.164649、Hs.4224、Hs.460471、Hs.149152、Hs.458397、Hs.124211、Hs.415497、Hs.293917、Hs.253489、Hs.14822、Hs.376590、Hs.179112、Hs.152337、Hs.438300、Hs.344099、Hs.421986、Hs.432458、Hs.351414、Hs.54460、Hs.349227、Hs.47312、Hs.185796、Hs.26981、Hs.267038、Hs.448749、Hs.170114、Hs.95582、Hs.352601、Hs.353001、Hs.352617、Hs.414164、Hs.30340、Hs.359978、Hs.298241、Hs.178292、Hs.156232、Hs.406681、Hs.411644、Hs.97933、Hs.137674、Hs.476396、Hs.388877、Hs.155573、Hs.87、Hs.153203、Hs.458434、Hs.10056、Hs.148074およびHs.377022に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖であることを特徴とする上記(30)に記載の漢方医療における漢方薬の適応診断方法;
(35)上記標的遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.436450、Hs.278613、Hs.411239、Hs.445072、Hs.123515、Hs.17518、Hs.128668、Hs.280226、Hs.511758、Hs.233437、Hs.187802、Hs.61929、Hs.406741、Hs.245431、Hs.20082、Hs.29798、Hs.222、Hs.162089、Hs.37936、Hs.144913、Hs.166351、Hs.313、Hs.522901、Hs.450230、Hs.89679、Hs.323966、Hs.439168、Hs.159629、Hs.186363、Hs.172052、Hs.250723、Hs.356605、Hs.376407、Hs.188021、Hs.386264、Hs.40510、Hs.408067、Hs.58009、Hs.222909、Hs.113227、Hs.350800、Hs.377070、Hs.178295、Hs.222746、Hs.351811、Hs.440088、Hs.490397、Hs.344400、Hs.361748、Hs.283045、Hs.27258、Hs.25328、Hs.350765、Hs.103665、Hs.194725、Hs.327621、Hs.408629、Hs.411347、Hs.489592、Hs.386236、Hs.446451、Hs.105115、Hs.45207、Hs.91283、Hs.178499、Hs.444882、Hs.381370、Hs.369994、Hs.93883、Hs.306230、Hs.413924、Hs.504809、Hs.84665、Hs.389724、Hs.211587、Hs.1560、Hs.406733、Hs.306812、Hs.348745、Hs.106688、Hs.129895、Hs.388917、Hs.368746、Hs.413525、Hs.166011、Hs.94865、Hs.250472、Hs.434485、Hs.267038、Hs.445426、Hs.154084、Hs.23317、Hs.75360、Hs.127405、Hs.155584、Hs.47504、Hs.90318、Hs.128499、Hs.283082、Hs.449006、Hs.309365、Hs.436602、Hs.324335、Hs.351816、Hs.306992、Hs.512632、Hs.443260、Hs.348709、Hs.426324、Hs.227656、Hs.435092、Hs.272200、Hs.347537、Hs.271269、Hs.424414、Hs.707、Hs.248204、Hs.168355、Hs.58559、Hs.407817、Hs.447162、Hs.144870、Hs.435398、Hs.146025、Hs.406485、Hs.326559、Hs.258536、Hs.169825、Hs.1270、Hs.325335、Hs.335877、Hs.421280、Hs.443120、Hs.389638、Hs.124673、Hs.150138、Hs.476618、Hs.438482、Hs.652、Hs.199372、Hs.493952、Hs.371212、Hs.25156、Hs.301956、Hs.511810、Hs.151408、Hs.157144、Hs.159525、Hs.94327、Hs.449791、Hs.320522、Hs.123114、Hs.446376、Hs.250666、Hs.201554、Hs.351818、Hs.189575、Hs.132270、Hs.36793、Hs.23367、Hs.104613、Hs.254006、Hs.133995、Hs.395205、Hs.476835、Hs.513009、Hs.257584、Hs.5462、Hs.96149、Hs.374720、Hs.46791、Hs.127473、Hs.91813、Hs.271640、Hs.379010、Hs.516739、Hs.376657、Hs.121490、Hs.352240、Hs.203557、Hs.228982、Hs.122115、Hs.112928、Hs.436975、Hs.387258、Hs.433197、Hs.159553、Hs.437、Hs.288911、Hs.440953、Hs.20315、Hs.104859、Hs.38260、Hs.199316、Hs.511791、Hs.282275、Hs.249126、Hs.163484、Hs.297604、Hs.73853、Hs.27335、Hs.26176、Hs.92683、Hs.212584、Hs.372616、Hs.153647、Hs.121115、Hs.87306、Hs.318775、Hs.353114、Hs.167679、Hs.415209、Hs.55209、Hs.143600、Hs.156007、Hs.444960、Hs.234016、Hs.283011、Hs.512778、Hs.37107、Hs.414332、Hs.164680、Hs.74115、Hs.422120、Hs.104133、Hs.21861、Hs.249184、Hs.375054、Hs.436424、Hs.302754、Hs.297452、Hs.165387、Hs.493450、Hs.306094、Hs.414110、Hs.118057、Hs.840、Hs.2207、Hs.343154、Hs.445772、Hs.132272、Hs.59892、Hs.380519、Hs.442936、Hs.274548、Hs.72910、Hs.49433、Hs.26663、Hs.155814、Hs.212892、Hs.408488、Hs.37125、Hs.375870、Hs.440695、Hs.341906、Hs.370622、Hs.314141、Hs.118631、Hs.115365、Hs.238964、Hs.331491、Hs.194714、Hs.434375、Hs.127012、Hs.306622、Hs.211298、Hs.264330、Hs.347534、Hs.148767、Hs.41270、Hs.283096、Hs.110637、Hs.76152、Hs.334、Hs.55412、Hs.497743、Hs.276808、Hs.114599、Hs.461085、Hs.282787、Hs.131834、Hs.21838、Hs.492218、Hs.248114、Hs.501321、Hs.512787、Hs.268700、Hs.313948、Hs.211477、Hs.2053、Hs.21388、Hs.507546、Hs.1501、Hs.248139、Hs.283779、Hs.511992、Hs.406984、Hs.145680、Hs.403836、Hs.287656、Hs.53263、Hs.257541、Hs.413265、Hs.333742、Hs.156346、Hs.441287、Hs.131101、Hs.436983、Hs.256036、Hs.420036、Hs.440387、Hs.122309、Hs.479817、Hs.195614、Hs.355584、Hs.65248、Hs.512782、Hs.363315、Hs.43107、Hs.233950、Hs.445445、Hs.82316、Hs.148990、Hs.158798、Hs.189067およびHs.90797に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖であることを特徴とする上記(30)に記載の漢方医療における漢方薬の適応診断方法;
(36)上記漢方薬が半夏厚朴湯であり、上記標的遺伝子が「半夏厚朴湯の証」の出現・消失に伴い、半夏厚朴湯の服用により、および/または半夏厚朴湯の効きやすさにより発現変動することを特徴とする上記(29)に記載の漢方医療における漢方薬の適応診断方法;および
(37)上記標的遺伝子が、配列表の配列番号290〜配列番号338に記載された塩基配列またはその一部を含む遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖であることを特徴とする上記(36)に記載の漢方医療における漢方薬の適応診断方法;
これら本発明の漢方医療の診断に用いる遺伝子およびその利用技術は、本発明者による種々の度重なる試験研究の成果として生まれた。すなわち、本発明者は、近年、医療の分野において、世界的な潮流となってきているEBM(Evidence-Based Medicine:根拠に基づいた医療)という考え方を、西洋医療の分野と同様に、漢方医療の分野においても実践すべく、ヒト・ゲノム配列情報の有効利用に着眼して、種々の試験研究に鋭意努力してきた。
すなわち、本発明者は、統計学的に整理されたデータの蓄積こそないが、漢方医学には3千年にもおよぶ長い歴史があり、漢方医学がこのような長年の臨床経験に基づいて体系化されてきており、i)同一の「証」は共通の生理的変化を伴うのも事実であること、ii)「証」の評価に基づく漢方治療が同一の「証」においてほぼ共通であること、およびiii)正しく処方された同一の漢方薬の服用は共通の生理的変化を伴うことなどに着目して、ヒト・ゲノム配列情報を有効利用すべく試験研究を行った。
その結果、ヒト・ゲノム配列情報を有効利用して、「証」の出現・消失に伴って発現変動する遺伝子および/または漢方薬の服用により発現変動する遺伝子を同定し、これらの遺伝子の発現状態、つまり遺伝子の発現の有無または量の変化を測定することにより、上述の課題を解決して、漢方医療の診断に用いる遺伝子およびその利用技術の開発に成功し、本発明を完成するに至った。
本発明によれば、ヒト・ゲノム情報を十分に活用した遺伝子発現の網羅的解析を、漢方医療における「証」の評価、漢方薬の選択あるいは漢方薬の服用前の有効性判断のような複雑系の解析に適用することにより、従来はもっぱら経験則に依存してきた漢方医療における診断に、客観性を与えることが可能となる。その結果、漢方医学における診断の信頼性と再現性を著しく向上させることができる。
換言すれば、本発明は、経験豊富で熟練した漢方医師でなくとも、つまり西洋医療および漢方医療を問わず一般の医療現場に従事する医師にとっても、漢方医学独自の診断名・処方の指示である「証」の評価や漢方薬の選択などの診断を、迅速容易かつ確実にすることができる。
さらに、本発明は、漢方医学の特徴である、明らかな西洋医学的な病名がつくまでに至らない時期、つまり病気の前段階といえる半健康状態でも適用可能で、これにより半健康状態の体を改善する治療を行って病気を予防することができる。
また、熟練した漢方医師にあっても診断が困難な症例においても、本発明を補完的に利用することにより、より正確で確実な診断が可能となる。
以下、本発明の実施形態について詳細に説明する。
I.遺伝子の同定:
(A)本発明に係る漢方医療における診断に有用な遺伝子、具体的には、後述する漢方医療の診断において標的遺伝子として使用可能な遺伝子は、漢方医療の特定の測定基準により発現変動する遺伝子である。
(A)本発明に係る漢方医療における診断に有用な遺伝子、具体的には、後述する漢方医療の診断において標的遺伝子として使用可能な遺伝子は、漢方医療の特定の測定基準により発現変動する遺伝子である。
上記測定基準としては、(a)漢方医学における特定の「証」の出現・消失、(b)特定の漢方薬の服用、(c)特定の漢方薬の効きやすさ、または(d)これら(a)から(c)の少なくとも2つの任意の組み合せが採用される。
(a)(i)「証」は、漢方医学における独自の物差しであって、従来、経験豊富な熟練した漢方医師によって、患者の表している症状や所見(精神面の状態、あるいは全身の状態や体質、傾向など)を漢方独自の診療学的な物差しで身体的特徴を評価し、そこから得られる漢方独自の診断名つまり診断結果である。
「証」は患者を診察して得られる様々な身体的特徴を示したものである。これらの証がいくつか組み合わさり、それぞれの漢方薬が効きやすい人の身体的特徴を示す“証の組み合わせ”が存在する。この“証の組み合わせ”をそれぞれの「漢方薬の証」と呼ぶ。
(ii)なお、精神と身体の状態は刻々と変化するものであり、患者の「証」もそのときどきによって経時的に変化していくものである。このように、「証」は、患者が病気になる前の健康な状態から、どのようにずれてしまっているかを示す指標であり、そのずれ方がわかれば、元に戻す方向性もわかる。この意味から、「証」は、上述したような漢方独自の診断名つまり診断結果であると同時に、治療の指示でもある。
したがって、患者の「証」を、処方の名前つまり処方する漢方方剤の名前をとって、「香蘇散(コウソサン)の証」、「半夏厚朴湯(ハンゲコウボクトウ)の証」などといい、漢方薬の「証」として表現する場合もあり、これが上述した薬の「証」である。
漢方医学は「証」の医学とも言われており、漢方医学においては上記「証」を評価・診断することが最重要で、従来は、漢方医師がこれらの「証」を、検査機器等を一切使わず、漢方医師の五感を駆使して、いわゆる「四診」(シシン)によって患者の心身の状態に関する情報を集めて、総合的に判断している。
「四診」は、漢方医師の主観的な経験側に基づいて行われる漢方独自の診察方法で、「望診(ボウシン)」、「聞診(ブンシン)」、「問診(モンシン)」および「切診(セッシン)」の4つの方法からなる。
ここに、「望診」は、視覚によって、患者の顔の表情、顔や皮膚の色艶、動作、舌などを見て判断する診察方法、「聞診」は、聴覚と嗅覚によって、患者の声の質、調子、あるいは呼吸、咳など状態を聞き取って判断する診察方法、「問診」は、患者への質問により、患者の病歴や自覚症状などをたずねて判断する診察方法、および「切診」は、手で実際に患者の体に触れて、患者の脈、胸腹部の硬さ、温冷、弾力等から判断する診察方法である。
(b)漢方薬は、漢方方剤ともいわれ、植物・鉱物・動物性蛋白などの複数の生薬を組み合わせてできている、多数の薬効成分を含む複雑な混合物であり、これら複数の生薬の作用が、体全体に総合して働きかける。
これら漢方薬は、具体的には、上述した各「証」の処方として最適なものが長年の臨床経験に基づいて選別し体系化されてきており、上述した薬の「証」として直接表現される、香蘇散(コウソサン)、半夏厚朴湯(ハンゲコウボクトウ)、抑肝散(ヨクカンサン)および抑肝散加陳皮半夏(ヨクカンサンカチンピハンゲ)等をはじめとして、数多くの漢方薬がある。
しかして、上記標的遺伝子は、これらの「証」の出現・消失、漢方薬の服用、漢方薬の効きやすさ、またはこれらの少なくとも2つの任意の組み合わせをその測定基準として、以下のようにして同定される。
(1)まず、上記特定基準手段に該当する者、つまり、例えばi)経験豊富な漢方医により診断(評価・判定)された特定の「証」が表出している者、ii)特定の漢方薬を服用した者、またはiii)i)およびii)に該当する者から生物学的試料を採取する。
生物学的試料としては、RNA(リボ核酸)が採取できるものであれば特に制限はなく、例えば、組織サンプル、血液(血球)、髄液(髄液細胞)等が用いられる。
(2)採取した生物学的試料からの全RNAの抽出・精製をする。
全RNAの抽出・精製をする方法に関しては特に制限はないが、試料採取後のRNA分解酵素の共雑や試料中のリンパ球、白血球等の有核細胞でDNA(デオキシリボ核酸)から転写されるRNA合成を直ちに停止させるため、AGPC法(酸性グアニジン・フェノール・クロロホルム法)等の蛋白変性剤を用いる方法で処理するのが好ましい。最近は、有機酸系の薬剤が充填されている専用の採血管が市販されているので、これを利用することもできる。
全RNAの抽出・精製をする方法に関しては特に制限はないが、試料採取後のRNA分解酵素の共雑や試料中のリンパ球、白血球等の有核細胞でDNA(デオキシリボ核酸)から転写されるRNA合成を直ちに停止させるため、AGPC法(酸性グアニジン・フェノール・クロロホルム法)等の蛋白変性剤を用いる方法で処理するのが好ましい。最近は、有機酸系の薬剤が充填されている専用の採血管が市販されているので、これを利用することもできる。
(3)全RNAの遺伝子発現状態を解析して、標的遺伝子を同定する。
遺伝子発現解析に際しては、全RNAをそのまま用いるほか、精製した全RNA標品からmRNA(伝令RNA)を単離して用いるが、十分量のmRNA(伝令RNA)が得られない場合は適宜増幅する。
遺伝子発現解析に際しては、全RNAをそのまま用いるほか、精製した全RNA標品からmRNA(伝令RNA)を単離して用いるが、十分量のmRNA(伝令RNA)が得られない場合は適宜増幅する。
また、上記mRNAを試料とした遺伝子発現解析法は網羅的解析ができる方法が好ましく、DNAチップ法やFDD法(蛍光ディファレンシャルディスプレイ法)などが有効に利用できる。
すなわち、DNAチップ法による遺伝子発現解析では、漢方薬の服用前後、あるいは「証」が出ているときと出ていないときのmRNA試料を別々の蛍光色素で標識した後、DNAチップ(不特定多数の遺伝子またはその断片もしくは当該遺伝子上の配列を有する合成オリゴ核酸を探針遺伝子として支持体上に固定化した基盤)上の探針遺伝子に対し特異的な競合結合反応をさせ、蛍光スキャナーで個々の遺伝子の発現量を読み取ることにより遺伝子を同定する。
一方、FDD法による遺伝子発現解析では、漢方薬の服用前後あるいは「証」が出ているときと出ていないときのRNA試料中の全てのmRNAを鋳型にして、蛍光色素を付与したオリゴdTプライマーを用いた逆転写反応によりcDNA(相補DNA)を合成後、このプライマーをアンカープライマーとし、特異性を減じた任意の短鎖混成配列を持つプライマーと共にPCR反応を行い複数の遺伝子増幅産物を得る。引続き、これらの遺伝子増幅産物を電気泳動にかけ、発現量が変化している遺伝子をスクリーニングした後、単離・クローニング・塩基配列あるいは塩基配列の一部を決定して、データベースと照合することにより遺伝子を同定する。
なお、本発明は遺伝子の発現解析法に制限を加えるものでなく、その時点で可能な如何なる方法を採用しても差し支えない。
(B)具体例:
次に、本実施形態の具体例として、精神疾患や人の感情面に作用する漢方薬のうち、特に精神的ストレスに効果の高い各種漢方薬(例えば、香蘇散(コウソサン)、半夏厚朴湯(ハンゲコウボクトウ)など)とこれらの「証」を上記測定基準として、これら測定基準により発現変動する標的遺伝子を同定する場合について、後の実施例にある「香蘇散の証」とその漢方方剤である香蘇散を例にとって説明する。
次に、本実施形態の具体例として、精神疾患や人の感情面に作用する漢方薬のうち、特に精神的ストレスに効果の高い各種漢方薬(例えば、香蘇散(コウソサン)、半夏厚朴湯(ハンゲコウボクトウ)など)とこれらの「証」を上記測定基準として、これら測定基準により発現変動する標的遺伝子を同定する場合について、後の実施例にある「香蘇散の証」とその漢方方剤である香蘇散を例にとって説明する。
(a)まず、「香蘇散の証」とその漢方方剤である香蘇散についての発現遺伝子を同定する。
経験豊富な漢方医師により共通の「香蘇散の証」が表出していると診立てられた被験者100名に、当該「香蘇散の証」を消失させるために有効な方剤として香蘇散を処方し、所定期間、その方剤の用法・容量に従い服用してもらう。服用すべき所定期間は、一般に、表出している「証」と服用する漢方薬の種類により異なるが、「証」の表出に差異が認められる期間服用するのが好ましく、「香蘇散の証」と香蘇散の場合は、2〜4週間程度服用してもらう。
経験豊富な漢方医師により共通の「香蘇散の証」が表出していると診立てられた被験者100名に、当該「香蘇散の証」を消失させるために有効な方剤として香蘇散を処方し、所定期間、その方剤の用法・容量に従い服用してもらう。服用すべき所定期間は、一般に、表出している「証」と服用する漢方薬の種類により異なるが、「証」の表出に差異が認められる期間服用するのが好ましく、「香蘇散の証」と香蘇散の場合は、2〜4週間程度服用してもらう。
被験者から、香蘇散を服用する直前つまり「香蘇散の証」が表出している時点と、「香蘇散の証」が消失した時点で末梢血液を採取する。この場合、「香蘇散の証」が消失した時点での採血が困難な場合は、「香蘇散の証」が消失したと考えられる時点での採血でもよい。さらに、「香蘇散の証」が消失するまでの任意の時点での採血を追加しても良い。
次に、採取した血液から全RNA(全リボ核酸)の抽出・精製をする。この場合の抽出・精製方法は、上述したように、採血後のRNA分解酵素の共雑や採血検体中のリンパ球、白血球等の有核細胞においてDNA(デオキシリボ核酸)から転写されるRNA合成を直ちに停止させるため、AGPC法(酸性グアニジン・フェノール・クロロホルム法)等の蛋白変性剤を用いる方法等で処理する。
「香蘇散の証」の表出している時点と消失した時点で採取した血液、または香蘇散の服用前後に採取してから得た全RNAは、次段階以降の処理および解析に足り得る回収量が得られれば、そのまま解析に供することができるが、mRNA(伝令RNA)を当該標品から単離して用いるのが好ましい。また、十分量のmRNA(伝令RNA)が得られない場合は増幅することもできる。mRNAを増幅する方法としては特に制限はないが、NASBA法(Nucleic Acid Sequence-Based Amplification)、TMA法(Transcription-Mediated Amplification)、TRC法(Transcription-Reverse Transcription Concerted Reaction)、3SR法(Self-Sustained Sequence Replication)などが利用できる。
次に、「香蘇散の証」の表出時および消失時、または香蘇散の服用前および服用後における発現状態、つまり発現の有無またはその量が異なっている遺伝子を同定する。上述のmRNAを試料とした遺伝子発現解析法としては、網羅的解析ができる方法が好ましく、上述したように、例えばDNAチップ法やFDD法などが利用できるが、ここではFDD法を利用する。
つまり、このFDD法による遺伝子発現解析では、「香蘇散の証」の表出している時点と消失した時点、または香蘇散の服用前後で得たRNA試料中の全てのmRNAを鋳型にして、蛍光色素を付与したオリゴdTプライマーを用いた逆転写反応によりcDNAを合成後、このプライマーをアンカープライマーとし、特異性を減じた任意の短鎖混成配列を持つプライマーと共にPCR反応を行い、複数の遺伝子増幅産物を得る。引続き、これらの遺伝子増幅産物を電気泳動にかけ、発現量が香蘇散の服用前後で変化している遺伝子をスクリーニングした後、単離・クローニング・塩基配列の決定を行い、データベースと照合することにより遺伝子を同定する。遺伝子の同定は、上記プライマー配列や数種類の制限酵素消化反応により認識配列の遺伝子上の位置を特定することによっても行うことができる。この方法の特徴としては、未知の遺伝子を発見することができることと、経時的な遺伝子の発現解析が可能なことである。
以上のようにして、「香蘇散の証」の出現・消失に伴ってまたは香蘇散の服用前後において発現変動する遺伝子を同定することができ、これにより、後述する以後の漢方医療の診断、つまり「証」の評価や漢方薬の選択などの診断における標的遺伝子として有効利用できる。
なお、後述する実施例において改めて記載するが、上述したような試験方法をとることにより、「香蘇散の証」に関与して発現変動する遺伝子と、「香蘇散の証」の表出している人に対する香蘇散の薬効に関与して発現変動する遺伝子と、これに加えて、「香蘇散の証」に関係なく、香蘇散服用で発現変動する遺伝子も副次的に同定できる。
(b)同様に、残りの精神的ストレスに対して効果の高い各種漢方薬、つまり後の実施例3にある半夏厚朴湯や、あるいは抑肝散、抑肝散加陳皮半夏、加味逍遥散および桂枝加竜骨牡蛎湯などの各「証」と、これらの「証」に対してそれぞれ処方する半夏厚朴湯、抑肝散、抑肝散加陳皮半夏、加味逍遥散および桂枝加竜骨牡蛎湯についても、これらを測定基準として、上述した「香蘇散の証」とその漢方方剤である香蘇散についての発現遺伝子の同定方法と同じ手順で、これら測定基準により発現変動する標的遺伝子をそれぞれ同定する。
II.遺伝子発現解析用基盤:
(A)以上のようにして同定された遺伝子は、所定の基準(例えば機能等)により分類して、遺伝子発現解析用基盤化させることにより、後述する以後の漢方医療の診断をより容易かつ確実に行える。
(A)以上のようにして同定された遺伝子は、所定の基準(例えば機能等)により分類して、遺伝子発現解析用基盤化させることにより、後述する以後の漢方医療の診断をより容易かつ確実に行える。
すなわち、具体的には図示しないが、本発明に係る遺伝子発現解析用基盤は、従来公知のDNAアレイ技術やDNAチップ技術により、上述した方法で同定された標的遺伝子が支持体上に複数整列して固定化されてなる。上記支持体としては、ガラスやシリコン等からなる平板状の支持基盤が用いられ、その形状寸法は、その上に整列配置される標的遺伝子の数に対応して設定される。また、標的遺伝子数は、検査の精度を上げるためには5以上であることが望ましい。
(B)具体例:
本実施形態の具体例としての遺伝子発現解析用基盤は、ストレスに効果の高い上述した各種漢方薬(香蘇散、半夏厚朴湯、抑肝散、抑肝散加陳皮半夏、加味逍遥散および桂枝加竜骨牡蛎湯など)の「証」および/またはこれらの「証」に対してそれぞれ処方する方剤についての発現遺伝子が、従来公知のDNAアレイ技術やDNAチップ技術により、支持体上に整列して固定化されてなる。
本実施形態の具体例としての遺伝子発現解析用基盤は、ストレスに効果の高い上述した各種漢方薬(香蘇散、半夏厚朴湯、抑肝散、抑肝散加陳皮半夏、加味逍遥散および桂枝加竜骨牡蛎湯など)の「証」および/またはこれらの「証」に対してそれぞれ処方する方剤についての発現遺伝子が、従来公知のDNAアレイ技術やDNAチップ技術により、支持体上に整列して固定化されてなる。
しかして、このように構成された遺伝子発現解析用基盤を用いて、遺伝子発現解析を行うには、被験者から得られた測定対象試料と、予め準備しておいた比較対照者から得た試料から上述したように抽出・精製したmRNA試料を別々の蛍光色素で標識後、上記遺伝子発現解析用基盤上の探針遺伝子に対し特異的な競合結合反応をさせて、蛍光スキャナーで個々の遺伝子の発現量を読み取る。
このように、遺伝子発現解析用基盤を用いた遺伝子発現解析を漢方医療に取り入れることにより、1回の測定で多数の遺伝子の発現パターンについての情報が得られ、各個人の刻々変化する「証」の表出の有無等の診断をより適切かつ迅速に行える。
III.漢方医療の診断:
(A)上記Iにおいて同定された各種遺伝子を標的遺伝子としてそのまま、あるいは上記IIにおける遺伝子発現解析用基盤として利用することにより、以後の漢方医療の診断を客観的にしかも容易かつ確実に行うことができる。
(A)上記Iにおいて同定された各種遺伝子を標的遺伝子としてそのまま、あるいは上記IIにおける遺伝子発現解析用基盤として利用することにより、以後の漢方医療の診断を客観的にしかも容易かつ確実に行うことができる。
(a)例えば、漢方医療の現場において患者の「証」を評価するには、患者から得られた測定試料中の標的遺伝子の発現状態を測定し、この測定結果を、評価基準となる比較試料中の標的遺伝子の発現状態と比較することにより、上記被験者の「証」の表出の有無を評価する。
この場合、患者から得られた測定試料中のRNA抽出、mRNAの精製、必要に応じての増幅など、および標的遺伝子の発現の有無または量を測定する方法については、上記Iにおける標的遺伝子の同定に関して記載した方法と同様である。
また、上記比較試料中の標的遺伝子は、上記Iで得られた標的遺伝子から適宜選択する。選定する遺伝子は所定の基準(例えば機能等)により予め分類しておいた遺伝子群から選定されるのが望ましい。
このようにして行う遺伝子発現解析は、患者の遺伝子発現の程度を、「証」が表出していない比較対照者の遺伝子発現の程度と比較することにより、「証」の表出の有無を客観的に評価できる。また、同一の患者において経日的に採取した測定試料間の遺伝子発現の程度を観察することにより、「証」の表出・消失を客観的に捉えることができる。
なお、上記「証」が表出していない比較対照者の構成方法としては、例えば、薬物療法を受けていない複数の健常者について、その年齢分布および男女構成比を平均的受診患者の年齢分布および男女構成比と同じくして構成したり、あるいは、薬物療法を受けていない複数の健常者について、その年齢範囲および性別で分けて構成する方法があり、正確性を期す上では、後者の構成方法が望ましい。
評価の精度を上げるためには、好ましくは、5以上の遺伝子を選択する。解析対象とする遺伝子数が多くなればなるほど、多因子の影響を受ける「証」の評価がより容易になり、評価の客観性および正確性がより向上する。
さらに、上記測定試料中の標的遺伝子の発現状態の測定結果を、上記比較試料中の標的遺伝子の発現状態と比較するに際して、複数の遺伝子に関して比較を行う場合は、パターンとして比較することも可能である。
また、この場合に、上記IIの遺伝子発現解析用基盤を用いることにより、1回の測定で多数の遺伝子の発現パターンについての情報が得られ、各患者個人の刻々変化する「証」の表出の有無等の診断をより適切かつ迅速に行える。つまり、ある特定の「証」に関連して同定された多数の遺伝子(遺伝子群)が整列して発現パターンとして固定化された遺伝子発現解析用基盤においては、各患者個人の病気のタイプや病気の進行状況を的確に診断して、より適切な治療法の選択が可能になる。
(b)上記(a)に記載する「証」を評価するという本来的な利用方法のほか、漢方薬は副作用がほとんどないという点に着眼して、上記Iで同定された遺伝子を利用することで、漢方薬を一種の試験薬的に用いるつまり漢方薬の適応診断としての途が開ける。
すなわち、例えば、人間ドック等の一般の健康診断において、血液検査等により受診者(被験者)から得られた測定試料中の標的遺伝子の発現状態を測定し、この測定結果を、評価基準となる比較試料中の標的遺伝子の発現状態と比較することにより、各受診者について漢方薬特有の遺伝子発現パターンの有無を観察して、上記受診者の健康状態を評価・判定する。
つまり、ある受診者について特定の漢方薬特有の遺伝子発現パターンの存在が観察されたとすると、この観察された発現パターンの漢方薬がこの受診者に対して効果が有ると予測される漢方薬であり、このことから、上記受診者はこの対応する漢方薬が目標とする身体的、感情的な特徴、症状を持ち合わせていると評価、判断するのである。
この場合、上記受診者から得られた測定試料中のRNA抽出、mRNAの精製、必要に応じての増幅など、および標的遺伝子の発現の有無または量を測定する手法、さらには、この測定結果を、上記比較試料中の標的遺伝子の発現状態と比較するに際して、複数の遺伝子に関して比較を行う方法、あるいは評価基準となる比較試料中の標的遺伝子の同定および選定の方法は、上記(a)に記載の方法と同様である。
(B)具体例:
次に、本実施形態の具体例として上に挙げたストレスに関する各種漢方薬の「証」、および/または、これらの「証」に対して処方する抗ストレスの漢方方剤に関して同定された遺伝子を標的遺伝子としてそのまま、あるいは上記遺伝子発現解析用基盤として利用する漢方医療の診断について説明する。
次に、本実施形態の具体例として上に挙げたストレスに関する各種漢方薬の「証」、および/または、これらの「証」に対して処方する抗ストレスの漢方方剤に関して同定された遺伝子を標的遺伝子としてそのまま、あるいは上記遺伝子発現解析用基盤として利用する漢方医療の診断について説明する。
ここでは、上記(A)の(b)における抗ストレスの漢方薬を人間ドック等の健康診断における一種の試験薬として用いる場合について説明する。
(1)現代医学における精神状態の分類法:
西洋医学を主体とする現代医学では、人の心つまり精神状態を計る方法は、質問紙法により点数化されたものが中心となっている。つまり、患者は自覚症状を医師に申告し、それが医師による診断の根拠となっている。例えば、「うつ病」の診断は、患者のほぼ主訴だけに頼っているのが現状である。また、統合失調症など自傷他害傾向のある重篤な精神疾患でさえ、正確な診断は難しいのが現状である。このため、一見正常に見えた人が急に自殺して周囲の人を驚かせることがしばしば起こる。
西洋医学を主体とする現代医学では、人の心つまり精神状態を計る方法は、質問紙法により点数化されたものが中心となっている。つまり、患者は自覚症状を医師に申告し、それが医師による診断の根拠となっている。例えば、「うつ病」の診断は、患者のほぼ主訴だけに頼っているのが現状である。また、統合失調症など自傷他害傾向のある重篤な精神疾患でさえ、正確な診断は難しいのが現状である。このため、一見正常に見えた人が急に自殺して周囲の人を驚かせることがしばしば起こる。
一般企業でも、最近のストレスに対する関心は非常に大きくなっており、企業の健康管理の中でも、特にストレスに対する管理が重要視されている。ただ、精神疾患は血液検査等の検査データで異常値を呈することは少なく、本人の訴えにかかっているのが実情である。年間の自殺者数が大幅に増加している現代において、精神の簡単な評価方法が求められている。
(2)漢方医学における精神状態の分類法:
漢方薬には気剤という一群の漢方方剤がある。漢方医学では、人の精神状態を気鬱(キウツ)、気逆(キギャク)および気滞(キタイ)等に分類するとともに、五臓の分類における肝(カン)は怒り、心(シン)は喜び、脾(ヒ)は憂い、肺(ハイ)は悲しみ、腎(ジン)は驚きにそれぞれ対応している。このような臓器と感情が対応するシステムが漢方には有り、漢方診断、治療に活用されている。
漢方薬には気剤という一群の漢方方剤がある。漢方医学では、人の精神状態を気鬱(キウツ)、気逆(キギャク)および気滞(キタイ)等に分類するとともに、五臓の分類における肝(カン)は怒り、心(シン)は喜び、脾(ヒ)は憂い、肺(ハイ)は悲しみ、腎(ジン)は驚きにそれぞれ対応している。このような臓器と感情が対応するシステムが漢方には有り、漢方診断、治療に活用されている。
これらの中で、現代のエビデンスに基づき、科学的根拠がある部分のみを参考にし、精神状態についての新しい分類を可能にするのが本発明に係る遺伝子の利用である。
すなわち、精神状態と漢方薬の関係は古来から言い続けられてきた。ただ、これらの関係は、前述したように漢方医師の主観的な診察の手順として使われていたもので、科学的な根拠は無いとされていた。この精神状態の分類は、本発明に係る遺伝子の発現と照らし合わせることで、簡単な血液検査のみでも、人の心(感情、ストレス)を分類することができる。
(3)本発明の遺伝子と漢方薬
本実施形態の具体例として上に挙げた精神的ストレスに関する各種漢方薬の「証」、および/または、これらの「証」に対して処方する抗ストレスの漢方方剤に関して同定された遺伝子を標的遺伝子として利用して、これら漢方薬の適応を見ることで、精神状態の新たな分類ができる。
本実施形態の具体例として上に挙げた精神的ストレスに関する各種漢方薬の「証」、および/または、これらの「証」に対して処方する抗ストレスの漢方方剤に関して同定された遺伝子を標的遺伝子として利用して、これら漢方薬の適応を見ることで、精神状態の新たな分類ができる。
すなわち、この精神状態の分類は、患者から質問紙法といった主観的なものではなく、本実施形態の具体例に係る遺伝子を利用することにより、血液検査を通して遺伝子の発現を診ることで、客観的な評価を初めて行えるのである。
例えば、抑肝散が効く人の特徴は、いつもイライラしている精神状態にある。ある人の血中の遺伝子の発現から、漢方薬を服用前に、抑肝散が効くと分かったとする。このことから、その人のその時点での精神の特徴は抑肝散の特徴であるイライラし易いタイプだと評価するのである。
換言すれば、どのタイプの精神的ストレス、感情がその患者に特有かを、上記漢方薬に試薬のような役目を担ってもらうことで分類するのである。こうすることで、ストレスがかかっているかどうかだけでなく、その種類までも分かるということは、現代医学の常識では考えられなかったことである。さらに、そのストレスに対しての特効薬とも言える漢方方剤を個別に用意することができることで、漢方医療における診断から治療までの流れができるのである。
漢方医学においては、精神的ストレスは細かく分類されている。例えば、同じ精神的圧力(ストレス)がかかっても、鬱へ向かうタイプと、反発するタイプがあり、それに処方する漢方薬の適応も違う。また、患者によって、精神的ストレスがかかることで胃痛の症状が出るタイプ、頭痛になるタイプ、あるいは下痢になるタイプなど、種々のタイプがある。
上述した本実施形態の具体例のように、香蘇散、半夏厚朴湯、抑肝散、抑肝散加陳皮半夏、加味逍遥散および桂枝加竜骨牡蛎湯など、抗ストレスを代表する方剤の予測遺伝子を探査し同定することで、今まで不可能であった精神的ストレスの分類が実現可能である。
そして、この精神的ストレスの分類に基づき、上記抗ストレスの漢方方剤に関して同定された遺伝子を標的遺伝子として、抗ストレスの漢方薬を一種の試験薬として用いることも可能となる。
具体的には、人間ドック等の一般の健康診断において、血液検査等により受診者から得られた測定試料中の標的遺伝子の発現状態を測定し、この測定結果を、評価基準となる上記Iの(B)における抗ストレスの漢方薬について同定された標的遺伝子の発現状態と比較し観察する。
そして、ある受診者について上記抗ストレスの漢方薬に特徴的な遺伝子の発現が観察されたとすると、この観察された遺伝子発現の抗ストレスの漢方薬がこの受診者に対して効果が有ると予測される漢方薬であり、このことから、上記受診者はこの対応する抗ストレス漢方薬が目標とする身体的、感情的な特徴、症状を持ち合わせていると評価、判断するのである。
この場合、上記受診者から得られた測定試料中のRNA抽出、mRNAの精製、必要に応じての増幅など、および標的遺伝子の発現の有無または量を測定する手法、さらには、この測定結果を、上記比較試料中の標的遺伝子の発現状態と比較するに際して、複数の遺伝子に関して比較を行う方法、あるいは評価基準となる比較試料中の標的遺伝子の同定および選定の方法は、上記(a)に記載の方法と同様である。
以下に、実施例を挙げてこの発明をさらに具体的に説明するが、この発明の範囲はこれらの例示に限定されるものではない。
実施例1
この実施例は、「香蘇散の証」の出現・消失に伴い発現変動する遺伝子をFDD法により発現解析して同定したものである。
この実施例は、「香蘇散の証」の出現・消失に伴い発現変動する遺伝子をFDD法により発現解析して同定したものである。
経験豊富な漢方医師による診察により「香蘇散の証」が表出していると判断された被験者30名に、用法・用量に従って香蘇散を2週間にわたり服用してもらった。
香蘇散の服用前後で、被験者からの血液を専用採血管(PAXgene RNA真空採血管」(商品名:QIAGEN社製)に採取し、「PAXgene Blood RNA Kit」(商品名:QIAGEN社製)を用いて、装置マニュアルに従って全RNA標品を調製した。ただし、DNA共雑を回避するため、「PAXgene RNA Spin Column」(商品名:QIAGEN社製)にRNA標品をアプライ後、このスピンカラム(Spin Column)の膜上で「RNase−Free DNase Set」(商品名:QIAGEN社製)によるDNase処理を行った。
香蘇散服用2週間後の漢方医師による四診により、「香蘇散の証」が顕著に消失した被験者18名を反応群(Responder)とし、また「香蘇散の証」の消失が認められなかった被験者12名を非反応群(Non―responder)として、香蘇散の服用前後における全RNA標品それぞれを同一混合比で群毎に混合した。
香蘇散の服用前後で発現変動する遺伝子の同定は、FDD法(蛍光ディファレンシャルディスプレイ法)で行った。
まず、混合した全RNA標品を材料として、オリゴd(T)プライマー(ポリT配列(PolyT配列)の3´末端に、A、CあるいはGを付加したもの)と「SuperScript TMFirst−strand Synthesis System for RT−PCR」(商品名:GIBCO BRL社製)を用いてcDNA合成を行った。つまり、FDD法でのPCR反応は、オリゴd(T)プライマーと10塩基長の既知配列プライマーを用いて、2つのプライマーに挟まれた遺伝子配列を増幅する技術であるところ、ポリT配列の3’末端にAを付加したオリゴd(T)プライマーは、配列表の配列番号50〜129との間でPCRを行い、同じくCを付加したものは、配列表の配列番号130〜209との間でPCRを行い、同じくGを付加したものは、配列表の配列番号210〜289との間でPCRを行った。したがって、合計240組の組合わせのPCR反応を行った。
次に、これらの合成した第一鎖cDNAを鋳型として、テキサスレッド(Texas-Red)により蛍光標識したオリゴd(T)プライマー(日本製粉社製)と既知配列プライマー(OPERON TECHNOLOGY社製)を用いてPCRを行った。PCR用プライマーの配列は、以下の条件を満たすものを用いた。
つまり、i)プライマー間プライマーダイマーが形成されないこと、ii)プライマー内プライマーダイマーが形成されないこと、iii)プライマー内自己相補配列を含まないこと、およびiv)プライマーと鋳型DNAとのDNAが40〜70℃の範囲であることの4つの条件である。
また、一組のプライマーペアにより増幅される遺伝子が100〜200個程度になるように、プライマー鎖長は10塩基程度として特異性を減じさせた。上述したように、本実施例でのそれぞれのプライマー配列を配列表に配列番号50〜289で記す。
PCRは、表1に示した組成の混合液19μLに1μLの第一鎖DNAを加え、1サイクル目は、94℃で3分、40℃で5分、そして72℃で5分、2サイクル目以降は、94℃で20秒、40℃で2分、72℃で1分からなるサイクルを24回行った後、72℃で5分間反応させた。
PCR後、PCR産物標品のうち2.0μLに、等容量のローディング(Loading)緩衝液(98%(V/V)ホルムアミド(formamide)、1.0mM EDTA、0.01%(W/V)メチルバイオレット(Methyl violet) )を加え、80℃で2分間処理し電気泳動用サンプルとした。電気泳動は、日立DNAシーケンサー(商品名:日立製作所社製)を用いて変性アクリルアミドゲル(6%(W/V)「Long Rangar」(商品名:宝酒造社製)、6.1M尿素(Urea)、1.2×TBE)上で行い、サンプルと分子量マーカー(100塩基から1000塩基まで100ベース・ラダーマーカー)を泳動し、分離した。その後、蛍光イメージスキャナー(日立ソフト「FMBIO」(商品名:日立製作所社製))でDNAのバンドを検出した。電気泳動は、その後の解析を容易にするため、香蘇散の服用前後で得た混合全RNA標品から得たPCR産物が隣接する泳動レーンにアプライして行うのが好ましい。
電気泳動後、香蘇散の服用前後で発現に変化があり、かつ反応群/非反応群間でも発現に変化が認められる泳動バンドつまり遺伝子断片を可能な限り選択し、鎖長を分子量マーカーと比較して求めた。選択した遺伝子断片は、泳動後のゲルから切り出し、1.5mLチューブに入れた。このチューブに精製水30.0μLを加え、室内温度が−80℃のフリーザー内に10分間放置した。放置後の上記チューブを取り出して、室温(常温)で、ボルテックスミキサーを用いて10分間撹拌してサンプルを溶解させた。この操作を2回繰り返し、DNAを抽出した。
次に、それぞれの抽出溶液1.0μLを鋳型にして、上記と同様のPCR反応条件を用いてターゲットとする遺伝子断片の再増幅を行った。
引続き、再増幅後の遺伝子断片を制限酵素により切断した。ここで用いる制限酵素は遺伝子上に制限酵素の認識配列が比較的少ないとされるものを選ぶのが好ましい。本実施例においては、AluI、HaeIIIなどの4塩基認識の制限酵素を用いて、それぞれ単独で切断した。切断することによって得られた遺伝子断片を、日立DNAシークエンサーを用いて電気泳動し、蛍光標識された側の断片を視覚化して、分子量マーカーとの相対的泳動距離より切断後の断片長を計算した。オリゴd(T)プライマーと既知配列プライマーにより増幅された鎖長から、この断片長を差し引くことにより、ターゲットとする遺伝子には既知配列プライマー配列とこの制限酵素認識配列が、上記鎖長差の距離をおいて存在することになる。
このようにして得られた塩基配列の位置情報に基づき、既存のデータベース配列中から相同姓を有する遺伝子を検索した。データベースとしては、NCBI Unigene のものとGenbankのものを使用した。これらの検索は、既知配列と相同な遺伝子だけでなく、既知配列と相補の関係にある遺伝子の検索も行った。なぜならば、既知配列の方向が不明であることやデータベースにどのような方向で遺伝子が登録されているか不明であることを考慮する必要があるからである。
また、上記の検索を補完するために最増幅後の遺伝子断片をダイレクトシークエンスすることによって得た配列情報に関してもデータベースと照合し、つまり通常のブラスト(BLAST)検索を行い、ターゲットの遺伝子を同定した。
この結果、相同性のある遺伝子が得られなかった場合、その断片に存在する遺伝子あるいは断片を含む遺伝子は新規である可能性が高い。
以上の過程を経て同定されたUnigene番号(Unigene #)およびGenbank番号(Genbank #)と遺伝子名を表2に示す。
なお、表2の遺伝子リストにおいて、断片名欄の断片名C076−430およびG046−310は、制限酵素の認識配列位置情報から配列予測して特定できたが、ダイレクトシークエンス不可能であった遺伝子である。
また、データベース番号欄において、Hs.で始まる番号がUnigeneの番号(Unigene #)で、それ以外の番号がGenebankの番号(Genbank #)である。
さらに、変動状況欄において、A−down、A−upと表記してある遺伝子は、香蘇散の薬効に関与する遺伝子で、香蘇散の反応群で香蘇散の服用に反応して発現減少したものをdown、発現増加したものをupで表し、B−down、B−upと表記した遺伝子は、香蘇散服用前に香蘇散の証が出ている人(反応群:responder)で多く発現している遺伝子をup、少なく発現している遺伝子をdownと表し、また、C−down、C−upと表記してある遺伝子は香蘇散の証に関係なく、香蘇散服用で発現減少したものをdown、発現増加したものをupで表している。
以上の実験結果から、香蘇散に対して効果を示した反応群と、示さなかった非反応群とに明らかな遺伝子発現の差が認められ、香蘇散に反応良好な反応群の特徴的な遺伝子の発現パターンが見つかった。これにより、香蘇散に反応良好な反応群が前もって分かる可能性が示唆された。
また、特徴的な遺伝子の中には、今まで不明であった香蘇散の作用機序を示す遺伝子が含まれていることも示唆された。さらに遺伝子発現の特徴を示す遺伝子の数も、解析しやすいとされる50〜60個の範囲内の53個となっていた。
実施例2
この実施例は、「香蘇散の証」の出現・消失に伴い発現変動する遺伝子をDNAチップ法により発現解析して同定したものである。
この実施例は、「香蘇散の証」の出現・消失に伴い発現変動する遺伝子をDNAチップ法により発現解析して同定したものである。
経験豊富な漢方医師による診察により「香蘇散の証」が表出していると判断された被験者30名に、用法・用量に従って香蘇散を2週間に渡り服用してもらった。
香蘇散の服用前後で被験者から血液を専用採血管「PAXgene RNA真空採血管」(商品名:QIAGEN社製)に採取し、「PAXgene Blood RNA Kit」(商品名:QIAGEN社製)を用いて、装置マニュアルに従って全RNA標品を調製した。ただし、DNA共雑を回避するため、「PAXgene RNA Spin Column」(商品名:QIAGEN社製)にRNA標品をアプライ後、このスピンカラム(Spin Column)の膜上で「RNase-Free DNase Set」(商品名:QIAGEN社製)によるDNase処理を行った。
香蘇散服用2週間後の漢方医師による四診により、「香蘇散の証」が顕著に消失した被験者18名を反応群(Responder)とし、「香蘇散の証」の消失が認められなかった被験者12名を非反応群(Non-responder)として、反応群の香蘇散服用前と非反応群の香蘇散服用前における全RNA標品、反応群の服用前後における全RNA標品の夫々を同一混合比で群毎に混合した。
反応群の香蘇散服用前/非反応群の香蘇散服用前、あるいは反応群の香蘇散服用前後で発現変動する遺伝子の同定は、DNAチップ法により行った。
まず、混合した全RNA標品5マイクログラムを材料として、T7RNAポリメラーゼのプロモータ配列が付加したオリゴd(T)プライマー(バイオサイエンス社)を用いて、cDNA第1鎖の合成(「SuperScript IIRnaseH-」(商品名:Invitrogen社製))を行った。
次に、これらの合成した第一鎖cDNAから重鎖cDNA(3’末端にT7RNAポリメラーゼのプロモータ配列を有する)を調製し、dUTPのアリルアミン誘導体存在下に、T7RNAポリメラーゼ(「MEGAscript T7」(商品名:Ambion社製))によりcRNAを増幅した。
その後、このcRNAをシアニン色素の「N-サクシニミドエステル「(商品名:Perkin Elmer社製)と反応させて蛍光標識した。標識に供されなかった未反応のシアニン色素は、「QIAquickカラム」(商品名:QIAGEN社製)を用いて分離した。
DNAチップを用いたハイブリダイゼーション反応は2通りの組み合わせで行った。第1の組み合わせは、香蘇散反応群の香蘇散服用前(シアニン色素Cy3で標識)のRNA/香蘇散非反応群の香蘇散服用前(シアニン色素Cy5で標識)のRNAとの組み合わせで行い、第2の組み合わせは、香蘇散反応群の香蘇散服用前(シアニン色素Cy3で標識)のRNA/香蘇散反応群の香蘇散服用後(シアニン色素Cy5で標識)のRNAとの組み合わせで行った。Cy3標識RNAとCy5標識RNAは等量混合し、18,716遺伝子に相当するオリゴDNA(60塩基長)が固定化されたマイクロアレイ(「Whole Human Genome Oligo microarray」(商品名:Agilent社製))に対し、65℃で17時間ハイブリダイゼーション反応を行った。
ハイブリダイゼーション反応の後、洗浄液で未反応物を洗浄除去し、共焦点レーザースキャナー(「Agilent G2565A」(商品名:Agilent社製))でスキャンした。スキャン後の蛍光強度はバックグランド補正、グローバル正規化後解析に供した。
ハイブリダイゼーション反応後、香蘇散非反応群の香蘇散服用前(シアニン色素Cy5で標識)の蛍光強度が香蘇散反応群の香蘇散服用前(シアニン色素Cy3で標識)の蛍光強度の0.5倍以下の遺伝子のUnigene番号を表3に、2倍以上の遺伝子のUnigene番号を表4に記した。
また、香蘇散反応群の香蘇散服用後(シアニン色素Cy5で標識)の蛍光強度が香蘇散反応群の香蘇散服用前(シアニン色素Cy3で標識)の蛍光強度の0.5倍以下の遺伝子のUnigene番号を表5に、2倍以上の遺伝子のUnigene番号を表6に記した。
さらに、これら香蘇散のDNAチップ解析データで、「香蘇散の証」がある被験者(発現が2倍以上)で、香蘇散の服用により発現が減少(発現が0.5倍以下)する遺伝子が70個以上見つかっている。これより、香蘇散の薬効が遺伝子レベルで明らかになるのではないかと期待される。
実施例3
この実施例は、「半夏厚朴湯の証」の出現・消失に伴い発現変動する遺伝子を、実施例1と同様、FDD法により発現解析して同定したものである。
この実施例は、「半夏厚朴湯の証」の出現・消失に伴い発現変動する遺伝子を、実施例1と同様、FDD法により発現解析して同定したものである。
経験豊富な漢方医師による診察により「半夏厚朴湯の証」が表出していると判断された被験者30名に、用法・用量に従って半夏厚朴湯を2週間にわたり服用してもらった。
半夏厚朴湯の服用前後で、被験者からの血液を専用採血管(PAXgene RNA真空採血管」(商品名:QIAGEN社製)に採取し、「PAXgene Blood RNA Kit」(商品名:QIAGEN社製)を用いて、装置マニュアルに従って全RNA標品を調製した。ただし、DNA共雑を回避するため、「PAXgene RNA Spin Column」(商品名:QIAGEN社製)にRNA標品をアプライ後、このスピンカラム(Spin Column)の膜上で「RNase−Free DNase Set」(商品名:QIAGEN社製)によるDNase処理を行った。
半夏厚朴湯服用2週間後の漢方医師による四診により、「半夏厚朴湯の証」が顕著に消失した被験者16名を反応群(Responder)とし、また「半夏厚朴湯の証」の消失が認められなかった被験者14名を非反応群(Non−responder)として、半夏厚朴湯の服用前後における全RNA標品それぞれを同一混合比で群毎に混合した。
半夏厚朴湯の服用前後で発現変動する遺伝子の同定は、FDD法(蛍光ディファレンシャルディスプレイ法)で行った。
まず、混合した全RNA標品を材料として、オリゴd(T)プライマー(ポリT配列(PolyT配列)の3´末端に、A、CあるいはGを付加したもの)と「SuperScript TMFirst−strand Synthesis System for RT−PCR」(商品名、Invitrogen社製)を用いてcDNA合成を行った。つまり、FDD法でのPCR反応は、オリゴd(T)プライマーと10塩基長の既知配列プライマーを用いて、2つのプライマーに挟まれた遺伝子配列を増幅する技術であるところ、ポリT配列の3’末端にAを付加したオリゴd(T)プライマーは、配列表の配列番号339〜418との間でPCRを行い、同じくCを付加したものは、配列表の配列番号419〜498との間でPCRを行い、同じくGを付加したものは、配列表の配列番号499〜578との間でPCRを行った。したがって、合計240組の組合わせのPCR反応を行った。
次に、これらの合成した第一鎖cDNAを鋳型として、テキサスレッド(Texas-Red)により蛍光標識したオリゴd(T)プライマー(日本製粉社製)と既知配列プライマー(OPERON TECHNOLOGY社製)を用いてPCRを行った。PCR用プライマーの配列は、以下の条件を満たすものを用いた。
つまり、i)プライマー間プライマーダイマーが形成されないこと、ii)プライマー内プライマーダイマーが形成されないこと、iii)プライマー内自己相補配列を含まないこと、およびiv)プライマーと鋳型DNAとのDNAが40〜70℃の範囲であることの4つの条件である。
また、一組のプライマーペアにより増幅される遺伝子が100〜200個程度になるように、プライマー鎖長は10塩基程度として特異性を減じさせた。上述したように、本実施例でのそれぞれのプライマー配列を配列表に配列番号339〜578で記す。
PCRは、表1に示した組成の混合液19μLに1μLの第一鎖DNAを加え、1サイクル目は、94℃で3分、40℃で5分、そして72℃で5分、2サイクル目以降は、94℃で20秒、40℃で2分、72℃で1分からなるサイクルを24回行った後、72℃で5分間反応させた。
PCR後、PCR産物標品のうち2.0μLに、等容量のローディング(Loading)緩衝液(98%(V/V)ホルムアミド(formamide)、1.0mM EDTA、0.01%(W/V)メチルバイオレット(Methyl violet) )を加え、80℃で2分間処理し電気泳動用サンプルとした。電気泳動は、日立DNAシーケンサー(商品名:日立製作所社製)を用いて変性アクリルアミドゲル(6%(W/V)「Long Rangar」(商品名:宝酒造社製)、6.1M尿素(Urea)、1.2×TBE)上で行い、サンプルと分子量マーカー(100塩基から1000塩基まで100ベース・ラダーマーカー)を泳動し、分離した。その後、蛍光イメージスキャナー(日立ソフト「FMBIO」(商品名:日立製作所社製))でDNAのバンドを検出した。電気泳動は、その後の解析を容易にするため、半夏厚朴湯の服用前後で得た混合全RNA標品から得たPCR産物が隣接する泳動レーンにアプライして行うのが好ましい。
電気泳動後、半夏厚朴湯の服用前後で発現に変化があり、かつ反応群/非反応群間でも発現に変化が認められる泳動バンドつまり遺伝子断片を可能な限り選択し、鎖長を分子量マーカーと比較して求めた。選択した遺伝子断片は、泳動後のゲルから切り出し、1.5mLチューブに入れた。このチューブに精製水30.0μLを加え、室内温度が−80℃のフリーザー内に10分間放置した。放置後の上記チューブを取り出して、室温(常温)で、ボルテックスミキサーを用いて10分間撹拌してサンプルを溶解させた。この操作を2回繰り返し、DNAを抽出した。
次に、それぞれの抽出溶液1.0μLを鋳型にして、上記と同様のPCR反応条件を用いてターゲットとする遺伝子断片の再増幅を行った。
引続き、再増幅後の遺伝子断片を制限酵素により切断した。ここで用いる制限酵素は遺伝子上に制限酵素の認識配列が比較的少ないとされるものを選ぶのが好ましい。本実施例においては、AluI、HaeIIIなどの4塩基認識の制限酵素を用いて、それぞれ単独で切断した。切断することによって得られた遺伝子断片を、日立DNAシークエンサーを用いて電気泳動し、蛍光標識された側の断片を視覚化して、分子量マーカーとの相対的泳動距離より切断後の断片長を計算した。オリゴd(T)プライマーと既知配列プライマーにより増幅された鎖長から、この断片長を差し引くことにより、ターゲットとする遺伝子には既知配列プライマー配列とこの制限酵素認識配列が、上記鎖長差の距離をおいて存在することになる。
このようにして得られた塩基配列の位置情報に基づき、既存のデータベース配列中から相同姓を有する遺伝子を検索した。データベースとしては、NCBI Unigene のものとGenbankのものを使用した。これらの検索は、既知配列と相同な遺伝子だけでなく、既知配列と相補の関係にある遺伝子の検索も行った。なぜならば、既知配列の方向が不明であることやデータベースにどのような方向で遺伝子が登録されているか不明であることを考慮する必要があるからである。
また、上記の検索を補完するために最増幅後の遺伝子断片をダイレクトシークエンスすることによって得た配列情報に関してもデータベースと照合し、つまり通常のブラスト(BLAST)検索を行い、ターゲットの遺伝子を同定した。
この結果、相同性のある遺伝子が得られなかった場合、その断片に存在する遺伝子あるいは断片を含む遺伝子は新規である可能性が高い。
以上の実験結果から、半夏厚朴湯に対して効果を示した反応群と、示さなかった非反応群とに明らかな遺伝子発現の差が認められ、半夏厚朴湯に反応良好な反応群の特徴的な遺伝子の発現パターンが見つかった。これにより、半夏厚朴湯に反応良好な反応群が前もって分かる可能性が示唆された。
また、特徴的な遺伝子の中には、今まで不明であった半夏厚朴湯の作用機序を示す遺伝子が含まれていることも示唆された。さらに遺伝子発現の特徴を示す遺伝子の数も、解析しやすいとされる50〜60個の範囲に近い49個となっていた。
さらに、西洋医学の立場から、漢方薬がなぜ効くかという作用機序ないしはメカニズムをいくら分析してみても、上記漢方薬と同様な薬効が得られないという事実があり、その原因として考えられることは、漢方薬の処方に際しての煎じた段階で、どういうものが影響しているか分からないが、上記の化学成分だけでは得られない特有の薬効が出てくるのではないか、例えば煎じた段階で生じる何かの成分等が腸の中の細菌で効くなど、現代科学による単純な分析だけでは解明できなかった。しかしながら、今回の香蘇散および半夏厚朴湯についての発現遺伝子の解析結果を発端として、漢方薬全般およびその「証」についての発現遺伝子を網羅的解析法により同定することにより、従来はもっぱら経験則に依存してきた漢方医療における診断に、客観性を与えることが可能となる。その結果、漢方医学における診断の信頼性と再現性を著しく向上させることができるという明るい展望が開けてきた。
しかも、例えば、今回の香蘇散および半夏厚朴湯の結果と併せて、上記した実施形態の具体例に挙げたストレスに関する各種漢方薬(抑肝散、抑肝散加陳皮半夏、加味逍遥散および桂枝加竜骨牡蛎湯など)についての遺伝子発現結果も得られることにより、これら漢方薬を、精神状態を調べるための試験薬として利用することで、西洋医学では無理とされていた医療分野についても、新しい医療方法を確立できる可能性が出てきたといえる。
Claims (37)
- 漢方医療の特定の測定基準により発現変動することを特徴とする漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖。
- 前記測定基準は、漢方医学に基づいて評価・判定された特定の「証」の出現・消失であることを特徴とする請求項1に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖。
- 前記「証」は、特定の漢方薬の「証」であることを特徴とする請求項2に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖。
- 前記漢方薬の「証」が「香蘇散の証」であることを特徴とする請求項3に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖。
- 前記漢方薬の「証」が「半夏厚朴湯の証」であることを特徴とする請求項3に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖。
- 前記測定基準は、特定の漢方薬の服用であることを特徴とする請求項1に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖。
- 前記測定基準は、特定の漢方薬の効きやすさであることを特徴とする請求項1に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖。
- 前記漢方薬が香蘇散であることを特徴とする請求項6または7に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖。
- 前記漢方薬が半夏厚朴湯であることを特徴とする請求項6または7に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖。
- 前記測定基準は、漢方医学に基づいて評価・判定された特定の「証」の出現・消失、特定の漢方薬の服用および特定の漢方薬の効きやすさの少なくとも2つの組み合せである
ことを特徴とする請求項1に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖。 - 前記遺伝子が、配列表の配列番号1〜配列番号49に記載された塩基配列またはその一部を含む遺伝子ならびにNCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.487001、Hs.436042およびHs.61714に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖である
ことを特徴とする請求項4または8に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖。 - 前記遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.180911、Hs.294176、Hs.53250、Hs.282331、Hs.440606、Hs.86538、Hs.61232、Hs.24884、Hs.110299、Hs.303523、Hs.115617、Hs.3321、Hs.334527、Hs.161640、Hs.225943、Hs.323213、Hs.186582、Hs.24583、Hs.234775、Hs.512633、Hs.377022、Hs.29189、Hs.262480、Hs.8852、Hs.527699、Hs.445241、Hs.437457、Hs.436628、Hs.115497、Hs.497707、Hs.150826、Hs.266902、Hs.442801、Hs.8022、Hs.432379、Hs.460471、Hs.434195、Hs.145156、Hs.396566、Hs.367761、Hs.12902、Hs.297997、Hs.183390、Hs.479572、Hs.450425、Hs.283085、Hs.103388、Hs.18213、Hs.378736、Hs.389964、Hs.387258、Hs.355820、Hs.210850、Hs.158318、Hs.157461、Hs.17860、Hs.355711、Hs.74376、Hs.111726、Hs.54468、Hs.75236、Hs.193228、Hs.512660、Hs.130685、Hs.272493、Hs.414091、Hs.113912、Hs.128204、Hs.115181、Hs.86088、Hs.431156、Hs.115830、Hs.37058、Hs.125507、Hs.376586、Hs.97808、Hs.493514、Hs.412355、Hs.97933、Hs.288727、Hs.499520、Hs.53996、Hs.144028、Hs.131555、Hs.232779、Hs.382347、Hs.87224、Hs.382870、Hs.82535、Hs.235498、Hs.438482、Hs.129778、Hs.22575、Hs.98967、Hs.320086、Hs.412022、Hs.259498、Hs.445025、Hs.334022、Hs.51120、Hs.302109、Hs.268744、Hs.152664、Hs.153203、Hs.201269、Hs.448749、Hs.408843、Hs.234790、Hs.147305、Hs.436494、Hs.12840、Hs.158963、Hs.283880、Hs.476396、Hs.148956、Hs.326012、Hs.437137、Hs.406763、Hs.150276、Hs.408195、Hs.496614、Hs.251573、Hs.205457、Hs.132275、Hs.233325、Hs.343666、Hs.49753、Hs.432815、Hs.443683、Hs.143907、Hs.22116、Hs.336224、Hs.22573、Hs.66、Hs.234774、Hs.130310、Hs.25363、Hs.78465、Hs.367888、Hs.127059、Hs.140821、Hs.511968、Hs.432445、Hs.350765、Hs.48695、Hs.430138、Hs.99607、Hs.213493、Hs.8345、Hs.502577、Hs.57876、Hs.100299、Hs.458408、Hs.406639、Hs.512760、Hs.123457、Hs.326561、Hs.446702、Hs.89121、Hs.17681、Hs.148074、Hs.97714、Hs.2936、Hs.158357、Hs.499247、Hs.153692、Hs.406234、Hs.241385、Hs.271809、Hs.278568、Hs.254122、Hs.318791、Hs.189482、Hs.282938、Hs.390808、Hs.2149、Hs.423112、Hs.301715、Hs.55016、Hs.99120、Hs.511985、Hs.359978、Hs.204238、Hs.283506、Hs.447877、Hs.137674、Hs.266738、Hs.302145、Hs.399966、Hs.149098、Hs.431010、Hs.222312、Hs.2207、Hs.25094、Hs.79881、Hs.116651、Hs.25328、Hs.501480、Hs.8346、Hs.157796、Hs.21239、Hs.508901、Hs.144875、Hs.40735、Hs.341806、Hs.125423、Hs.511880、Hs.433827、Hs.307044、Hs.306697、Hs.134807、Hs.387367、Hs.335355、Hs.349109、Hs.418105、Hs.376337、Hs.137574、Hs.44077、Hs.44899、Hs.184945、Hs.114088、Hs.376025、Hs.21258、Hs.207407、Hs.117938、Hs.169071、Hs.385986、Hs.284153、Hs.95582、Hs.21380、Hs.418083、Hs.91625、Hs.397167、Hs.437046、Hs.14468、Hs.26309、Hs.479080、Hs.352530、Hs.73958、Hs.171025、Hs.121001、Hs.11713、Hs.280311、Hs.8535、Hs.283326、Hs.407474、Hs.451697、Hs.14732、Hs.73890、Hs.42650、Hs.7327、Hs.287640、Hs.194659、Hs.191381、Hs.406789、Hs.227098、Hs.7934、Hs.512643、Hs.256583、Hs.408355、Hs.155182、Hs.30340、Hs.178023、Hs.58974、Hs.390568、Hs.185796、Hs.115263、Hs.414251、Hs.119693、Hs.511776、Hs.196530、Hs.157573、Hs.36761、Hs.223581、Hs.511753、Hs.17170、Hs.448823、Hs.102929、Hs.37616、Hs.511824、Hs.354013、Hs.132380、Hs.371496、Hs.458427、Hs.32967、Hs.143751、Hs.253690、Hs.352、Hs.21177、Hs.406681、Hs.435976、Hs.46679、Hs.148101、Hs.9914、Hs.310230、Hs.376590、Hs.458397、Hs.58414、Hs.17165、Hs.407015、Hs.470704、Hs.246914、Hs.15420、Hs.436282、Hs.257368、Hs.512739、Hs.387679、Hs.283078、Hs.516782、Hs.109752、Hs.201667、Hs.149504、Hs.398139、Hs.94367、Hs.112208、Hs.395779、Hs.445563、Hs.65135、Hs.187203、Hs.490216、Hs.487918、Hs.436495、Hs.125571、Hs.519634、Hs.399769、Hs.511987、Hs.26176、Hs.25934、Hs.351825、Hs.283794、Hs.256067、Hs.251699、Hs.436378、Hs.523755、Hs.449884、Hs.41154、Hs.54609、Hs.458291、Hs.408336およびHs.2012に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖である
ことを特徴とする請求項4または8に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖。 - 前記遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.372133、Hs.281004、7.59 Hs.420563、Hs.376818、Hs.15780、Hs.493450、Hs.306814、Hs.511810、Hs.143241、Hs.278924、Hs.512632、Hs.367633、Hs.127363、Hs.414110、Hs.434143、Hs.36567、Hs.356605、Hs.414648、Hs.104888、Hs.197435、Hs.410810、Hs.434375、Hs.56279、Hs.125487、Hs.51011、Hs.170953、Hs.66392、Hs.48372、Hs.356664、Hs.420269、Hs.3017、Hs.306811、Hs.93121、Hs.438880、Hs.302029、Hs.463017、Hs.412559、Hs.17518、Hs.2133、Hs.400380、Hs.75813、Hs.287656、Hs.334347、Hs.411572、Hs.6496、Hs.268764、Hs.385496、Hs.410088、Hs.24835、Hs.446504、Hs.7972、Hs.292057、Hs.435775、Hs.78106、Hs.217754、Hs.153704、Hs.341906、Hs.250830、Hs.68846、Hs.438712、Hs.99480、Hs.434418、Hs.171980、Hs.376810、Hs.324335、Hs.37936、Hs.512546、Hs.128836、Hs.406330、Hs.302352、Hs.169825、Hs.522765、Hs.526526、Hs.82002、Hs.526394、Hs.512785、Hs.1937、Hs.105700、Hs.122895、Hs.9589、Hs.99439、Hs.334828、Hs.126161、Hs.465202、Hs.310231、Hs.94875、Hs.203557、Hs.444729、Hs.449965、Hs.122309、Hs.190090、Hs.355714、Hs.153952、Hs.408577、Hs.287370、Hs.185202、Hs.29792、Hs.4845、Hs.27183、Hs.486433、Hs.439463、Hs.194665、Hs.129312、Hs.163682、Hs.73853、Hs.2689、Hs.283900、Hs.162604、Hs.381367、Hs.288218、Hs.203349、Hs.433891、Hs.248065、Hs.440603、Hs.144913、Hs.199316、Hs.221660、Hs.21554、Hs.510244、Hs.436325、Hs.117979、Hs.356888、Hs.306322、Hs.310431、Hs.356501、Hs.444708、Hs.159609、Hs.18069、Hs.373612、Hs.12802、Hs.508901、Hs.504580、Hs.308242、Hs.128580、Hs.112184、Hs.306298、Hs.343800、Hs.50841、Hs.137516、Hs.413095、Hs.105640、Hs.144696、Hs.175411、Hs.207407、Hs.406856、Hs.122959、Hs.143792、Hs.170195、Hs.381715、Hs.443292、Hs.56874、Hs.147096、Hs.521267、Hs.196956、Hs.80720、Hs.440953、Hs.352387、Hs.434107、Hs.112720、Hs.155584、Hs.147352、Hs.146329、Hs.463171、Hs.445445、Hs.156892、Hs.212670、Hs.129895、Hs.356076、Hs.439590、Hs.278613、Hs.54697、Hs.388917、Hs.55923、Hs.460377、Hs.416244、Hs.234786、Hs.129969、Hs.275711、Hs.127842、Hs.302772、Hs.337008、Hs.48480、Hs.121115、Hs.318773、Hs.98564、Hs.276466、Hs.78824、Hs.124502、Hs.325530、Hs.375664、Hs.516311、Hs.367688、Hs.386155、Hs.189174、Hs.159264、Hs.386143、Hs.158446、Hs.209461、Hs.163484、Hs.300559、Hs.155223、Hs.448979、Hs.368420、Hs.289044、Hs.74088、Hs.93907、Hs.408264、Hs.439168、Hs.437433、Hs.448468、Hs.310194、Hs.45152、Hs.283095、Hs.500957、Hs.431156、Hs.511922、Hs.406549、Hs.288731、Hs.123419、Hs.334702、Hs.114172、Hs.408261、Hs.436657、Hs.125300、Hs.203、Hs.287499、Hs.102943、Hs.145949、Hs.248290、Hs.418167、Hs.55481、Hs.434181、Hs.275906、Hs.249126、Hs.147256、Hs.178295、Hs.385890、Hs.201800、Hs.96633、Hs.445489、Hs.449650、Hs.102708、Hs.433381、Hs.27263、Hs.512782、Hs.347537、Hs.124115、Hs.1270、Hs.349121、Hs.293884、Hs.143943、Hs.12742、Hs.166705、Hs.13209、Hs.77719、Hs.129694、Hs.126906、Hs.151414、Hs.212584、Hs.232819、Hs.41324、Hs.140821、Hs.351593、Hs.12248、Hs.434281、Hs.283506、Hs.66412.18 Hs.2115872.17 Hs.427712.17 Hs.447703、Hs.372208、Hs.379010、Hs.437008、Hs.99311、Hs.464896、Hs.323079、Hs.509439、Hs.440088、Hs.34045、Hs.406073、Hs.455335、Hs.175465、Hs.507549、Hs.127775、Hs.132888、Hs.8728、Hs.157231、Hs.62863、Hs.169600、Hs.414332、Hs.259403、Hs.101949、Hs.436339、Hs.128668、Hs.380167、Hs.79340、Hs.43125、Hs.2251、Hs.142296、Hs.288155、Hs.399740、Hs.27524、Hs.165464、Hs.123642、Hs.125156、Hs.58561、Hs.418966、Hs.447121、Hs.24734、Hs.348709、Hs.89436、Hs.2563、Hs.186363、Hs.169470、Hs.6540、Hs.223206、Hs.439169、Hs.133250、Hs.172562、Hs.349705、Hs.405457、Hs.145894、Hs.7360、Hs.163546、Hs.102276、Hs.511781、Hs.283794、Hs.171090、Hs.508459、Hs.276808、Hs.248155、Hs.436042、Hs.371212、Hs.221040およびHs.374990に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖である
ことを特徴とする請求項4または8に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖。 - 前記遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.58323、Hs.160373、Hs.334832、Hs.150136、Hs.272385、Hs.382870、Hs.430919、Hs.387551、Hs.194408、Hs.406961、Hs.164021、Hs.24884、Hs.437211、Hs.436628、Hs.283880、Hs.110299、Hs.390242、Hs.113291、Hs.278894、Hs.90221、Hs.24583、Hs.266902、Hs.148956、Hs.162282、Hs.103388、Hs.406300、Hs.382347、Hs.413430、Hs.449884、Hs.24889、Hs.440606、Hs.36069、Hs.131255、Hs.369557、Hs.512660、Hs.359981、Hs.283085、Hs.163546、Hs.117938、Hs.74376、Hs.438482、Hs.482392、Hs.320086、Hs.95990、Hs.9469、Hs.108642、Hs.180016、Hs.479572、Hs.169395、Hs.335319、Hs.442801、Hs.111726、Hs.183390、Hs.449407、Hs.434195、Hs.17546、Hs.127951、Hs.458408、Hs.287374、Hs.150826、Hs.181483、Hs.115467、Hs.232779、Hs.96557、Hs.406722、Hs.201269、Hs.47313、Hs.8852、Hs.283326、Hs.225943、Hs.12902、Hs.500371、Hs.7296、Hs.430854、Hs.278568、Hs.132275、Hs.66392、Hs.437179、Hs.8850、Hs.98967、Hs.57876、Hs.459828、Hs.310230、Hs.25328、Hs.301956、Hs.144875、Hs.110457、Hs.509265、Hs.60339、Hs.511880、Hs.446152、Hs.48100、Hs.247975、Hs.479080、Hs.490096、Hs.8346、Hs.131555、Hs.32967、Hs.307003、Hs.127032、Hs.109268、Hs.80720、Hs.266738、Hs.113912、Hs.175780、Hs.497972、Hs.18213、Hs.152664、Hs.459847、Hs.378736、Hs.458427、Hs.36761、Hs.429531、Hs.149797、Hs.444135、Hs.22575、Hs.272191、Hs.512643、Hs.54713、Hs.820、Hs.77221、Hs.253690、Hs.436282、Hs.181289、Hs.170560、Hs.426734、Hs.334527、Hs.406701、Hs.177434、Hs.511968、Hs.389964、Hs.251699、Hs.207805、Hs.140821、Hs.281004、Hs.435675、Hs.292597、Hs.178715、Hs.161394、Hs.396332、Hs.302109、Hs.86088、Hs.356794、Hs.449392、Hs.134807、Hs.210850、Hs.18705、Hs.326444、Hs.287453、Hs.130522、Hs.234775、Hs.438555、Hs.171532、Hs.54617、Hs.268843、Hs.11713、Hs.5025、Hs.288727、Hs.412022、Hs.78465、Hs.423112、Hs.497707、Hs.235390、Hs.33455、Hs.371278、Hs.237642、Hs.234790、Hs.78792、Hs.115181、Hs.115617、Hs.463017、Hs.406789、Hs.378753、Hs.256583、Hs.99430、Hs.525361、Hs.148559、Hs.249181、Hs.23853、Hs.172052、Hs.90821、Hs.444182、Hs.123474、Hs.284310、Hs.137574、Hs.102929、Hs.511985、Hs.371335、Hs.528103、Hs.355711、Hs.496614、Hs.27621、Hs.183006、Hs.27021、Hs.389571、Hs.227457、Hs.334772、Hs.512760、Hs.53996、Hs.207407、Hs.297997、Hs.512808、Hs.149467、Hs.510932、Hs.272493、Hs.79881、Hs.3052、Hs.415895、Hs.388220、Hs.253193、Hs.124502、Hs.232803、Hs.269777、Hs.12264、Hs.380763、Hs.147595、Hs.411274、Hs.441481、Hs.376025、Hs.250895、Hs.468922、Hs.161427、Hs.385986、Hs.439760、Hs.313413、Hs.408843、Hs.58974、Hs.430755、Hs.99120、Hs.25363、Hs.287405、Hs.131035、Hs.335355、Hs.259471、Hs.235888、Hs.144527、Hs.414091、Hs.480174、Hs.445241、Hs.44888、Hs.382683、Hs.439494、Hs.288520、Hs.234027、Hs.130685、Hs.399966、Hs.434486、Hs.407002、Hs.333958、Hs.238648、Hs.308045、Hs.196470、Hs.144531、Hs.7327、Hs.83916、Hs.169441、Hs.73890、Hs.432374、Hs.143751、Hs.2074、Hs.158278、Hs.158963、Hs.490216、Hs.103422、Hs.133361、Hs.404220、Hs.169071、Hs.288718、Hs.144130、Hs.336224、Hs.112669、Hs.159265、Hs.122110、Hs.7835、Hs.407015、Hs.441708、Hs.452398、Hs.439124、Hs.443020、Hs.499520、Hs.356572、Hs.284200、Hs.78944、Hs.512387、Hs.235498、Hs.133082、Hs.471423、Hs.73625、Hs.9914、Hs.355862、Hs.82120、Hs.443392、Hs.401954、Hs.436140、Hs.461482、Hs.433596、Hs.434103、Hs.385898、Hs.348920、Hs.81848、Hs.432379、Hs.79025、Hs.407162、Hs.197922、Hs.180171、Hs.408200、Hs.444529、Hs.164649、Hs.4224、Hs.460471、Hs.149152、Hs.458397、Hs.124211、Hs.415497、Hs.293917、Hs.253489、Hs.14822、Hs.376590、Hs.179112、Hs.152337、Hs.438300、Hs.344099、Hs.421986、Hs.432458、Hs.351414、Hs.54460、Hs.349227、Hs.47312、Hs.185796、Hs.26981、Hs.267038、Hs.448749、Hs.170114、Hs.95582、Hs.352601、Hs.353001、Hs.352617、Hs.414164、Hs.30340、Hs.359978、Hs.298241、Hs.178292、Hs.156232、Hs.406681、Hs.411644、Hs.97933、Hs.137674、Hs.476396、Hs.388877、Hs.155573、Hs.87、Hs.153203、Hs.458434、Hs.10056、Hs.148074およびHs.377022に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖である
ことを特徴とする請求項4または8に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖。 - 前記遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.436450、Hs.278613、Hs.411239、Hs.445072、Hs.123515、Hs.17518、Hs.128668、Hs.280226、Hs.511758、Hs.233437、Hs.187802、Hs.61929、Hs.406741、Hs.245431、Hs.20082、Hs.29798、Hs.222、Hs.162089、Hs.37936、Hs.144913、Hs.166351、Hs.313、Hs.522901、Hs.450230、Hs.89679、Hs.323966、Hs.439168、Hs.159629、Hs.186363、Hs.172052、Hs.250723、Hs.356605、Hs.376407、Hs.188021、Hs.386264、Hs.40510、Hs.408067、Hs.58009、Hs.222909、Hs.113227、Hs.350800、Hs.377070、Hs.178295、Hs.222746、Hs.351811、Hs.440088、Hs.490397、Hs.344400、Hs.361748、Hs.283045、Hs.27258、Hs.25328、Hs.350765、Hs.103665、Hs.194725、Hs.327621、Hs.408629、Hs.411347、Hs.489592、Hs.386236、Hs.446451、Hs.105115、Hs.45207、Hs.91283、Hs.178499、Hs.444882、Hs.381370、Hs.369994、Hs.93883、Hs.306230、Hs.413924、Hs.504809、Hs.84665、Hs.389724、Hs.211587、Hs.1560、Hs.406733、Hs.306812、Hs.348745、Hs.106688、Hs.129895、Hs.388917、Hs.368746、Hs.413525、Hs.166011、Hs.94865、Hs.250472、Hs.434485、Hs.267038、Hs.445426、Hs.154084、Hs.23317、Hs.75360、Hs.127405、Hs.155584、Hs.47504、Hs.90318、Hs.128499、Hs.283082、Hs.449006、Hs.309365、Hs.436602、Hs.324335、Hs.351816、Hs.306992、Hs.512632、Hs.443260、Hs.348709、Hs.426324、Hs.227656、Hs.435092、Hs.272200、Hs.347537、Hs.271269、Hs.424414、Hs.707、Hs.248204、Hs.168355、Hs.58559、Hs.407817、Hs.447162、Hs.144870、Hs.435398、Hs.146025、Hs.406485、Hs.326559、Hs.258536、Hs.169825、Hs.1270、Hs.325335、Hs.335877、Hs.421280、Hs.443120、Hs.389638、Hs.124673、Hs.150138、Hs.476618、Hs.438482、Hs.652、Hs.199372、Hs.493952、Hs.371212、Hs.25156、Hs.301956、Hs.511810、Hs.151408、Hs.157144、Hs.159525、Hs.94327、Hs.449791、Hs.320522、Hs.123114、Hs.446376、Hs.250666、Hs.201554、Hs.351818、Hs.189575、Hs.132270、Hs.36793、Hs.23367、Hs.104613、Hs.254006、Hs.133995、Hs.395205、Hs.476835、Hs.513009、Hs.257584、Hs.5462、Hs.96149、Hs.374720、Hs.46791、Hs.127473、Hs.91813、Hs.271640、Hs.379010、Hs.516739、Hs.376657、Hs.121490、Hs.352240、Hs.203557、Hs.228982、Hs.122115、Hs.112928、Hs.436975、Hs.387258、Hs.433197、Hs.159553、Hs.437、Hs.288911、Hs.440953、Hs.20315、Hs.104859、Hs.38260、Hs.199316、Hs.511791、Hs.282275、Hs.249126、Hs.163484、Hs.297604、Hs.73853、Hs.27335、Hs.26176、Hs.92683、Hs.212584、Hs.372616、Hs.153647、Hs.121115、Hs.87306、Hs.318775、Hs.353114、Hs.167679、Hs.415209、Hs.55209、Hs.143600、Hs.156007、Hs.444960、Hs.234016、Hs.283011、Hs.512778、Hs.37107、Hs.414332、Hs.164680、Hs.74115、Hs.422120、Hs.104133、Hs.21861、Hs.249184、Hs.375054、Hs.436424、Hs.302754、Hs.297452、Hs.165387、Hs.493450、Hs.306094、Hs.414110、Hs.118057、Hs.840、Hs.2207、Hs.343154、Hs.445772、Hs.132272、Hs.59892、Hs.380519、Hs.442936、Hs.274548、Hs.72910、Hs.49433、Hs.26663、Hs.155814、Hs.212892、Hs.408488、Hs.37125、Hs.375870、Hs.440695、Hs.341906、Hs.370622、Hs.314141、Hs.118631、Hs.115365、Hs.238964、Hs.331491、Hs.194714、Hs.434375、Hs.127012、Hs.306622、Hs.211298、Hs.264330、Hs.347534、Hs.148767、Hs.41270、Hs.283096、Hs.110637、Hs.76152、Hs.334、Hs.55412、Hs.497743、Hs.276808、Hs.114599、Hs.461085、Hs.282787、Hs.131834、Hs.21838、Hs.492218、Hs.248114、Hs.501321、Hs.512787、Hs.268700、Hs.313948、Hs.211477、Hs.2053、Hs.21388、Hs.507546、Hs.1501、Hs.248139、Hs.283779、Hs.511992、Hs.406984、Hs.145680、Hs.403836、Hs.287656、Hs.53263、Hs.257541、Hs.413265、Hs.333742、Hs.156346、Hs.441287、Hs.131101、Hs.436983、Hs.256036、Hs.420036、Hs.440387、Hs.122309、Hs.479817、Hs.195614、Hs.355584、Hs.65248、Hs.512782、Hs.363315、Hs.43107、Hs.233950、Hs.445445、Hs.82316、Hs.148990、Hs.158798、Hs.189067およびHs.90797に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖である
ことを特徴とする請求項4または8に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖。 - 前記遺伝子が、配列表の配列番号290〜配列番号338に記載された塩基配列またはその一部を含む遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖である
ことを特徴とする請求項5または9に記載の漢方医療の診断に用いる遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖。 - 請求項1、2、3、6および10のいずれか一つに記載の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖が支持体上に複数固定化されてなることを特徴とする遺伝子発現解析用基盤。
- 前記遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖が蛍光ディファレンシャルディスプレイ法あるいはDNAマイクロアレイ法を用いて網羅的に解析されて、その発現の変化が認められた少なくとも5以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖であることを特徴とする請求項17に記載の遺伝子発現解析用基盤。
- 請求項17または18に記載の遺伝子発現解析用基盤を用いることを特徴とする遺伝子発現解析方法。
- 請求項1、2、3、6および10のいずれか一つに記載の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖を標的遺伝子として利用して、漢方医療の「証」を評価する方法であって、
被験者から得られた測定試料中の標的遺伝子の発現状態を測定し、この測定結果を、評価基準となる比較試料中の標的遺伝子の発現状態と比較することにより、前記被験者の「証」の表出の有無を評価する
ことを特徴とする漢方医療における「証」の評価方法。 - 前記標的遺伝子が「香蘇散の証」の出現・消失に伴い、香蘇散の服用により、および/または香蘇散の効きやすさにより発現変動することを特徴とする請求項20に記載の漢方医療における「証」の評価方法。
- 前記標的遺伝子が、配列表の配列番号1〜配列番号49に記載された塩基配列またはその一部を含む遺伝子ならびにNCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.487001、Hs.436042およびHs.61714に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖である
ことを特徴とする請求項21に記載の漢方医療における「証」の評価方法。 - 前記標的遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.180911、Hs.294176、Hs.53250、Hs.282331、Hs.440606、Hs.86538、Hs.61232、Hs.24884、Hs.110299、Hs.303523、Hs.115617、Hs.3321、Hs.334527、Hs.161640、Hs.225943、Hs.323213、Hs.186582、Hs.24583、Hs.234775、Hs.512633、Hs.377022、Hs.29189、Hs.262480、Hs.8852、Hs.527699、Hs.445241、Hs.437457、Hs.436628、Hs.115497、Hs.497707、Hs.150826、Hs.266902、Hs.442801、Hs.8022、Hs.432379、Hs.460471、Hs.434195、Hs.145156、Hs.396566、Hs.367761、Hs.12902、Hs.297997、Hs.183390、Hs.479572、Hs.450425、Hs.283085、Hs.103388、Hs.18213、Hs.378736、Hs.389964、Hs.387258、Hs.355820、Hs.210850、Hs.158318、Hs.157461、Hs.17860、Hs.355711、Hs.74376、Hs.111726、Hs.54468、Hs.75236、Hs.193228、Hs.512660、Hs.130685、Hs.272493、Hs.414091、Hs.113912、Hs.128204、Hs.115181、Hs.86088、Hs.431156、Hs.115830、Hs.37058、Hs.125507、Hs.376586、Hs.97808、Hs.493514、Hs.412355、Hs.97933、Hs.288727、Hs.499520、Hs.53996、Hs.144028、Hs.131555、Hs.232779、Hs.382347、Hs.87224、Hs.382870、Hs.82535、Hs.235498、Hs.438482、Hs.129778、Hs.22575、Hs.98967、Hs.320086、Hs.412022、Hs.259498、Hs.445025、Hs.334022、Hs.51120、Hs.302109、Hs.268744、Hs.152664、Hs.153203、Hs.201269、Hs.448749、Hs.408843、Hs.234790、Hs.147305、Hs.436494、Hs.12840、Hs.158963、Hs.283880、Hs.476396、Hs.148956、Hs.326012、Hs.437137、Hs.406763、Hs.150276、Hs.408195、Hs.496614、Hs.251573、Hs.205457、Hs.132275、Hs.233325、Hs.343666、Hs.49753、Hs.432815、Hs.443683、Hs.143907、Hs.22116、Hs.336224、Hs.22573、Hs.66、Hs.234774、Hs.130310、Hs.25363、Hs.78465、Hs.367888、Hs.127059、Hs.140821、Hs.511968、Hs.432445、Hs.350765、Hs.48695、Hs.430138、Hs.99607、Hs.213493、Hs.8345、Hs.502577、Hs.57876、Hs.100299、Hs.458408、Hs.406639、Hs.512760、Hs.123457、Hs.326561、Hs.446702、Hs.89121、Hs.17681、Hs.148074、Hs.97714、Hs.2936、Hs.158357、Hs.499247、Hs.153692、Hs.406234、Hs.241385、Hs.271809、Hs.278568、Hs.254122、Hs.318791、Hs.189482、Hs.282938、Hs.390808、Hs.2149、Hs.423112、Hs.301715、Hs.55016、Hs.99120、Hs.511985、Hs.359978、Hs.204238、Hs.283506、Hs.447877、Hs.137674、Hs.266738、Hs.302145、Hs.399966、Hs.149098、Hs.431010、Hs.222312、Hs.2207、Hs.25094、Hs.79881、Hs.116651、Hs.25328、Hs.501480、Hs.8346、Hs.157796、Hs.21239、Hs.508901、Hs.144875、Hs.40735、Hs.341806、Hs.125423、Hs.511880、Hs.433827、Hs.307044、Hs.306697、Hs.134807、Hs.387367、Hs.335355、Hs.349109、Hs.418105、Hs.376337、Hs.137574、Hs.44077、Hs.44899、Hs.184945、Hs.114088、Hs.376025、Hs.21258、Hs.207407、Hs.117938、Hs.169071、Hs.385986、Hs.284153、Hs.95582、Hs.21380、Hs.418083、Hs.91625、Hs.397167、Hs.437046、Hs.14468、Hs.26309、Hs.479080、Hs.352530、Hs.73958、Hs.171025、Hs.121001、Hs.11713、Hs.280311、Hs.8535、Hs.283326、Hs.407474、Hs.451697、Hs.14732、Hs.73890、Hs.42650、Hs.7327、Hs.287640、Hs.194659、Hs.191381、Hs.406789、Hs.227098、Hs.7934、Hs.512643、Hs.256583、Hs.408355、Hs.155182、Hs.30340、Hs.178023、Hs.58974、Hs.390568、Hs.185796、Hs.115263、Hs.414251、Hs.119693、Hs.511776、Hs.196530、Hs.157573、Hs.36761、Hs.223581、Hs.511753、Hs.17170、Hs.448823、Hs.102929、Hs.37616、Hs.511824、Hs.354013、Hs.132380、Hs.371496、Hs.458427、Hs.32967、Hs.143751、Hs.253690、Hs.352、Hs.21177、Hs.406681、Hs.435976、Hs.46679、Hs.148101、Hs.9914、Hs.310230、Hs.376590、Hs.458397、Hs.58414、Hs.17165、Hs.407015、Hs.470704、Hs.246914、Hs.15420、Hs.436282、Hs.257368、Hs.512739、Hs.387679、Hs.283078、Hs.516782、Hs.109752、Hs.201667、Hs.149504、Hs.398139、Hs.94367、Hs.112208、Hs.395779、Hs.445563、Hs.65135、Hs.187203、Hs.490216、Hs.487918、Hs.436495、Hs.125571、Hs.519634、Hs.399769、Hs.511987、Hs.26176、Hs.25934、Hs.351825、Hs.283794、Hs.256067、Hs.251699、Hs.436378、Hs.523755、Hs.449884、Hs.41154、Hs.54609、Hs.458291、Hs.408336およびHs.2012に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖である
ことを特徴とする請求項21に記載の漢方医療における「証」の評価方法。 - 前記標的遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.372133、Hs.281004、7.59 Hs.420563、Hs.376818、Hs.15780、Hs.493450、Hs.306814、Hs.511810、Hs.143241、Hs.278924、Hs.512632、Hs.367633、Hs.127363、Hs.414110、Hs.434143、Hs.36567、Hs.356605、Hs.414648、Hs.104888、Hs.197435、Hs.410810、Hs.434375、Hs.56279、Hs.125487、Hs.51011、Hs.170953、Hs.66392、Hs.48372、Hs.356664、Hs.420269、Hs.3017、Hs.306811、Hs.93121、Hs.438880、Hs.302029、Hs.463017、Hs.412559、Hs.17518、Hs.2133、Hs.400380、Hs.75813、Hs.287656、Hs.334347、Hs.411572、Hs.6496、Hs.268764、Hs.385496、Hs.410088、Hs.24835、Hs.446504、Hs.7972、Hs.292057、Hs.435775、Hs.78106、Hs.217754、Hs.153704、Hs.341906、Hs.250830、Hs.68846、Hs.438712、Hs.99480、Hs.434418、Hs.171980、Hs.376810、Hs.324335、Hs.37936、Hs.512546、Hs.128836、Hs.406330、Hs.302352、Hs.169825、Hs.522765、Hs.526526、Hs.82002、Hs.526394、Hs.512785、Hs.1937、Hs.105700、Hs.122895、Hs.9589、Hs.99439、Hs.334828、Hs.126161、Hs.465202、Hs.310231、Hs.94875、Hs.203557、Hs.444729、Hs.449965、Hs.122309、Hs.190090、Hs.355714、Hs.153952、Hs.408577、Hs.287370、Hs.185202、Hs.29792、Hs.4845、Hs.27183、Hs.486433、Hs.439463、Hs.194665、Hs.129312、Hs.163682、Hs.73853、Hs.2689、Hs.283900、Hs.162604、Hs.381367、Hs.288218、Hs.203349、Hs.433891、Hs.248065、Hs.440603、Hs.144913、Hs.199316、Hs.221660、Hs.21554、Hs.510244、Hs.436325、Hs.117979、Hs.356888、Hs.306322、Hs.310431、Hs.356501、Hs.444708、Hs.159609、Hs.18069、Hs.373612、Hs.12802、Hs.508901、Hs.504580、Hs.308242、Hs.128580、Hs.112184、Hs.306298、Hs.343800、Hs.50841、Hs.137516、Hs.413095、Hs.105640、Hs.144696、Hs.175411、Hs.207407、Hs.406856、Hs.122959、Hs.143792、Hs.170195、Hs.381715、Hs.443292、Hs.56874、Hs.147096、Hs.521267、Hs.196956、Hs.80720、Hs.440953、Hs.352387、Hs.434107、Hs.112720、Hs.155584、Hs.147352、Hs.146329、Hs.463171、Hs.445445、Hs.156892、Hs.212670、Hs.129895、Hs.356076、Hs.439590、Hs.278613、Hs.54697、Hs.388917、Hs.55923、Hs.460377、Hs.416244、Hs.234786、Hs.129969、Hs.275711、Hs.127842、Hs.302772、Hs.337008、Hs.48480、Hs.121115、Hs.318773、Hs.98564、Hs.276466、Hs.78824、Hs.124502、Hs.325530、Hs.375664、Hs.516311、Hs.367688、Hs.386155、Hs.189174、Hs.159264、Hs.386143、Hs.158446、Hs.209461、Hs.163484、Hs.300559、Hs.155223、Hs.448979、Hs.368420、Hs.289044、Hs.74088、Hs.93907、Hs.408264、Hs.439168、Hs.437433、Hs.448468、Hs.310194、Hs.45152、Hs.283095、Hs.500957、Hs.431156、Hs.511922、Hs.406549、Hs.288731、Hs.123419、Hs.334702、Hs.114172、Hs.408261、Hs.436657、Hs.125300、Hs.203、Hs.287499、Hs.102943、Hs.145949、Hs.248290、Hs.418167、Hs.55481、Hs.434181、Hs.275906、Hs.249126、Hs.147256、Hs.178295、Hs.385890、Hs.201800、Hs.96633、Hs.445489、Hs.449650、Hs.102708、Hs.433381、Hs.27263、Hs.512782、Hs.347537、Hs.124115、Hs.1270、Hs.349121、Hs.293884、Hs.143943、Hs.12742、Hs.166705、Hs.13209、Hs.77719、Hs.129694、Hs.126906、Hs.151414、Hs.212584、Hs.232819、Hs.41324、Hs.140821、Hs.351593、Hs.12248、Hs.434281、Hs.283506、Hs.66412.18 Hs.2115872.17 Hs.427712.17 Hs.447703、Hs.372208、Hs.379010、Hs.437008、Hs.99311、Hs.464896、Hs.323079、Hs.509439、Hs.440088、Hs.34045、Hs.406073、Hs.455335、Hs.175465、Hs.507549、Hs.127775、Hs.132888、Hs.8728、Hs.157231、Hs.62863、Hs.169600、Hs.414332、Hs.259403、Hs.101949、Hs.436339、Hs.128668、Hs.380167、Hs.79340、Hs.43125、Hs.2251、Hs.142296、Hs.288155、Hs.399740、Hs.27524、Hs.165464、Hs.123642、Hs.125156、Hs.58561、Hs.418966、Hs.447121、Hs.24734、Hs.348709、Hs.89436、Hs.2563、Hs.186363、Hs.169470、Hs.6540、Hs.223206、Hs.439169、Hs.133250、Hs.172562、Hs.349705、Hs.405457、Hs.145894、Hs.7360、Hs.163546、Hs.102276、Hs.511781、Hs.283794、Hs.171090、Hs.508459、Hs.276808、Hs.248155、Hs.436042、Hs.371212、Hs.221040およびHs.374990に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖である
ことを特徴とする請求項21に記載の漢方医療における「証」の評価方法。 - 前記標的遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.58323、Hs.160373、Hs.334832、Hs.150136、Hs.272385、Hs.382870、Hs.430919、Hs.387551、Hs.194408、Hs.406961、Hs.164021、Hs.24884、Hs.437211、Hs.436628、Hs.283880、Hs.110299、Hs.390242、Hs.113291、Hs.278894、Hs.90221、Hs.24583、Hs.266902、Hs.148956、Hs.162282、Hs.103388、Hs.406300、Hs.382347、Hs.413430、Hs.449884、Hs.24889、Hs.440606、Hs.36069、Hs.131255、Hs.369557、Hs.512660、Hs.359981、Hs.283085、Hs.163546、Hs.117938、Hs.74376、Hs.438482、Hs.482392、Hs.320086、Hs.95990、Hs.9469、Hs.108642、Hs.180016、Hs.479572、Hs.169395、Hs.335319、Hs.442801、Hs.111726、Hs.183390、Hs.449407、Hs.434195、Hs.17546、Hs.127951、Hs.458408、Hs.287374、Hs.150826、Hs.181483、Hs.115467、Hs.232779、Hs.96557、Hs.406722、Hs.201269、Hs.47313、Hs.8852、Hs.283326、Hs.225943、Hs.12902、Hs.500371、Hs.7296、Hs.430854、Hs.278568、Hs.132275、Hs.66392、Hs.437179、Hs.8850、Hs.98967、Hs.57876、Hs.459828、Hs.310230、Hs.25328、Hs.301956、Hs.144875、Hs.110457、Hs.509265、Hs.60339、Hs.511880、Hs.446152、Hs.48100、Hs.247975、Hs.479080、Hs.490096、Hs.8346、Hs.131555、Hs.32967、Hs.307003、Hs.127032、Hs.109268、Hs.80720、Hs.266738、Hs.113912、Hs.175780、Hs.497972、Hs.18213、Hs.152664、Hs.459847、Hs.378736、Hs.458427、Hs.36761、Hs.429531、Hs.149797、Hs.444135、Hs.22575、Hs.272191、Hs.512643、Hs.54713、Hs.820、Hs.77221、Hs.253690、Hs.436282、Hs.181289、Hs.170560、Hs.426734、Hs.334527、Hs.406701、Hs.177434、Hs.511968、Hs.389964、Hs.251699、Hs.207805、Hs.140821、Hs.281004、Hs.435675、Hs.292597、Hs.178715、Hs.161394、Hs.396332、Hs.302109、Hs.86088、Hs.356794、Hs.449392、Hs.134807、Hs.210850、Hs.18705、Hs.326444、Hs.287453、Hs.130522、Hs.234775、Hs.438555、Hs.171532、Hs.54617、Hs.268843、Hs.11713、Hs.5025、Hs.288727、Hs.412022、Hs.78465、Hs.423112、Hs.497707、Hs.235390、Hs.33455、Hs.371278、Hs.237642、Hs.234790、Hs.78792、Hs.115181、Hs.115617、Hs.463017、Hs.406789、Hs.378753、Hs.256583、Hs.99430、Hs.525361、Hs.148559、Hs.249181、Hs.23853、Hs.172052、Hs.90821、Hs.444182、Hs.123474、Hs.284310、Hs.137574、Hs.102929、Hs.511985、Hs.371335、Hs.528103、Hs.355711、Hs.496614、Hs.27621、Hs.183006、Hs.27021、Hs.389571、Hs.227457、Hs.334772、Hs.512760、Hs.53996、Hs.207407、Hs.297997、Hs.512808、Hs.149467、Hs.510932、Hs.272493、Hs.79881、Hs.3052、Hs.415895、Hs.388220、Hs.253193、Hs.124502、Hs.232803、Hs.269777、Hs.12264、Hs.380763、Hs.147595、Hs.411274、Hs.441481、Hs.376025、Hs.250895、Hs.468922、Hs.161427、Hs.385986、Hs.439760、Hs.313413、Hs.408843、Hs.58974、Hs.430755、Hs.99120、Hs.25363、Hs.287405、Hs.131035、Hs.335355、Hs.259471、Hs.235888、Hs.144527、Hs.414091、Hs.480174、Hs.445241、Hs.44888、Hs.382683、Hs.439494、Hs.288520、Hs.234027、Hs.130685、Hs.399966、Hs.434486、Hs.407002、Hs.333958、Hs.238648、Hs.308045、Hs.196470、Hs.144531、Hs.7327、Hs.83916、Hs.169441、Hs.73890、Hs.432374、Hs.143751、Hs.2074、Hs.158278、Hs.158963、Hs.490216、Hs.103422、Hs.133361、Hs.404220、Hs.169071、Hs.288718、Hs.144130、Hs.336224、Hs.112669、Hs.159265、Hs.122110、Hs.7835、Hs.407015、Hs.441708、Hs.452398、Hs.439124、Hs.443020、Hs.499520、Hs.356572、Hs.284200、Hs.78944、Hs.512387、Hs.235498、Hs.133082、Hs.471423、Hs.73625、Hs.9914、Hs.355862、Hs.82120、Hs.443392、Hs.401954、Hs.436140、Hs.461482、Hs.433596、Hs.434103、Hs.385898、Hs.348920、Hs.81848、Hs.432379、Hs.79025、Hs.407162、Hs.197922、Hs.180171、Hs.408200、Hs.444529、Hs.164649、Hs.4224、Hs.460471、Hs.149152、Hs.458397、Hs.124211、Hs.415497、Hs.293917、Hs.253489、Hs.14822、Hs.376590、Hs.179112、Hs.152337、Hs.438300、Hs.344099、Hs.421986、Hs.432458、Hs.351414、Hs.54460、Hs.349227、Hs.47312、Hs.185796、Hs.26981、Hs.267038、Hs.448749、Hs.170114、Hs.95582、Hs.352601、Hs.353001、Hs.352617、Hs.414164、Hs.30340、Hs.359978、Hs.298241、Hs.178292、Hs.156232、Hs.406681、Hs.411644、Hs.97933、Hs.137674、Hs.476396、Hs.388877、Hs.155573、Hs.87、Hs.153203、Hs.458434、Hs.10056、Hs.148074およびHs.377022に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖である
ことを特徴とする請求項21に記載の漢方医療における「証」の評価方法。 - 前記標的遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.436450、Hs.278613、Hs.411239、Hs.445072、Hs.123515、Hs.17518、Hs.128668、Hs.280226、Hs.511758、Hs.233437、Hs.187802、Hs.61929、Hs.406741、Hs.245431、Hs.20082、Hs.29798、Hs.222、Hs.162089、Hs.37936、Hs.144913、Hs.166351、Hs.313、Hs.522901、Hs.450230、Hs.89679、Hs.323966、Hs.439168、Hs.159629、Hs.186363、Hs.172052、Hs.250723、Hs.356605、Hs.376407、Hs.188021、Hs.386264、Hs.40510、Hs.408067、Hs.58009、Hs.222909、Hs.113227、Hs.350800、Hs.377070、Hs.178295、Hs.222746、Hs.351811、Hs.440088、Hs.490397、Hs.344400、Hs.361748、Hs.283045、Hs.27258、Hs.25328、Hs.350765、Hs.103665、Hs.194725、Hs.327621、Hs.408629、Hs.411347、Hs.489592、Hs.386236、Hs.446451、Hs.105115、Hs.45207、Hs.91283、Hs.178499、Hs.444882、Hs.381370、Hs.369994、Hs.93883、Hs.306230、Hs.413924、Hs.504809、Hs.84665、Hs.389724、Hs.211587、Hs.1560、Hs.406733、Hs.306812、Hs.348745、Hs.106688、Hs.129895、Hs.388917、Hs.368746、Hs.413525、Hs.166011、Hs.94865、Hs.250472、Hs.434485、Hs.267038、Hs.445426、Hs.154084、Hs.23317、Hs.75360、Hs.127405、Hs.155584、Hs.47504、Hs.90318、Hs.128499、Hs.283082、Hs.449006、Hs.309365、Hs.436602、Hs.324335、Hs.351816、Hs.306992、Hs.512632、Hs.443260、Hs.348709、Hs.426324、Hs.227656、Hs.435092、Hs.272200、Hs.347537、Hs.271269、Hs.424414、Hs.707、Hs.248204、Hs.168355、Hs.58559、Hs.407817、Hs.447162、Hs.144870、Hs.435398、Hs.146025、Hs.406485、Hs.326559、Hs.258536、Hs.169825、Hs.1270、Hs.325335、Hs.335877、Hs.421280、Hs.443120、Hs.389638、Hs.124673、Hs.150138、Hs.476618、Hs.438482、Hs.652、Hs.199372、Hs.493952、Hs.371212、Hs.25156、Hs.301956、Hs.511810、Hs.151408、Hs.157144、Hs.159525、Hs.94327、Hs.449791、Hs.320522、Hs.123114、Hs.446376、Hs.250666、Hs.201554、Hs.351818、Hs.189575、Hs.132270、Hs.36793、Hs.23367、Hs.104613、Hs.254006、Hs.133995、Hs.395205、Hs.476835、Hs.513009、Hs.257584、Hs.5462、Hs.96149、Hs.374720、Hs.46791、Hs.127473、Hs.91813、Hs.271640、Hs.379010、Hs.516739、Hs.376657、Hs.121490、Hs.352240、Hs.203557、Hs.228982、Hs.122115、Hs.112928、Hs.436975、Hs.387258、Hs.433197、Hs.159553、Hs.437、Hs.288911、Hs.440953、Hs.20315、Hs.104859、Hs.38260、Hs.199316、Hs.511791、Hs.282275、Hs.249126、Hs.163484、Hs.297604、Hs.73853、Hs.27335、Hs.26176、Hs.92683、Hs.212584、Hs.372616、Hs.153647、Hs.121115、Hs.87306、Hs.318775、Hs.353114、Hs.167679、Hs.415209、Hs.55209、Hs.143600、Hs.156007、Hs.444960、Hs.234016、Hs.283011、Hs.512778、Hs.37107、Hs.414332、Hs.164680、Hs.74115、Hs.422120、Hs.104133、Hs.21861、Hs.249184、Hs.375054、Hs.436424、Hs.302754、Hs.297452、Hs.165387、Hs.493450、Hs.306094、Hs.414110、Hs.118057、Hs.840、Hs.2207、Hs.343154、Hs.445772、Hs.132272、Hs.59892、Hs.380519、Hs.442936、Hs.274548、Hs.72910、Hs.49433、Hs.26663、Hs.155814、Hs.212892、Hs.408488、Hs.37125、Hs.375870、Hs.440695、Hs.341906、Hs.370622、Hs.314141、Hs.118631、Hs.115365、Hs.238964、Hs.331491、Hs.194714、Hs.434375、Hs.127012、Hs.306622、Hs.211298、Hs.264330、Hs.347534、Hs.148767、Hs.41270、Hs.283096、Hs.110637、Hs.76152、Hs.334、Hs.55412、Hs.497743、Hs.276808、Hs.114599、Hs.461085、Hs.282787、Hs.131834、Hs.21838、Hs.492218、Hs.248114、Hs.501321、Hs.512787、Hs.268700、Hs.313948、Hs.211477、Hs.2053、Hs.21388、Hs.507546、Hs.1501、Hs.248139、Hs.283779、Hs.511992、Hs.406984、Hs.145680、Hs.403836、Hs.287656、Hs.53263、Hs.257541、Hs.413265、Hs.333742、Hs.156346、Hs.441287、Hs.131101、Hs.436983、Hs.256036、Hs.420036、Hs.440387、Hs.122309、Hs.479817、Hs.195614、Hs.355584、Hs.65248、Hs.512782、Hs.363315、Hs.43107、Hs.233950、Hs.445445、Hs.82316、Hs.148990、Hs.158798、Hs.189067およびHs.90797に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖である
ことを特徴とする請求項21に記載の漢方医療における「証」の評価方法。 - 前記標的遺伝子が「半夏厚朴湯の証」の出現・消失に伴い、半夏厚朴湯の服用により、および/または半夏厚朴湯の効きやすさにより発現変動することを特徴とする請求項20に記載の漢方医療における「証」の評価方法。
- 前記標的遺伝子が、配列表の配列番号290〜配列番号338に記載された塩基配列またはその一部を含む遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖である
ことを特徴とする請求項27に記載の漢方医療における「証」の評価方法。 - 請求項1、2、3、6および10のいずれか一つに記載の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖を標的遺伝子として利用して、漢方医療における漢方薬の適応診断を行う方法であって、
被験者から得られた測定試料中の標的遺伝子の発現状態を測定し、この測定結果を、評価基準となる比較試料中の標的遺伝子の発現状態と比較することにより、前記被験者について漢方薬特有の遺伝子発現パターンの有無を観察して、被験者の健康状態を評価・判定する
ことを特徴とする漢方医療における漢方薬の適応診断方法。 - 前記漢方薬が香蘇散であり、前記標的遺伝子が「香蘇散の証」の出現・消失に伴い、香蘇散の服用により、および/または香蘇散の効きやすさにより発現変動することを特徴とする請求項29に記載の漢方医療における漢方薬の適応診断方法。
- 前記標的遺伝子が、配列表の配列番号1〜配列番号49に記載された塩基配列またはその一部を含む遺伝子ならびにNCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.487001、Hs.436042およびHs.61714に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖である
ことを特徴とする請求項30に記載の漢方医療における漢方薬の適応診断方法。 - 前記標的遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.180911、Hs.294176、Hs.53250、Hs.282331、Hs.440606、Hs.86538、Hs.61232、Hs.24884、Hs.110299、Hs.303523、Hs.115617、Hs.3321、Hs.334527、Hs.161640、Hs.225943、Hs.323213、Hs.186582、Hs.24583、Hs.234775、Hs.512633、Hs.377022、Hs.29189、Hs.262480、Hs.8852、Hs.527699、Hs.445241、Hs.437457、Hs.436628、Hs.115497、Hs.497707、Hs.150826、Hs.266902、Hs.442801、Hs.8022、Hs.432379、Hs.460471、Hs.434195、Hs.145156、Hs.396566、Hs.367761、Hs.12902、Hs.297997、Hs.183390、Hs.479572、Hs.450425、Hs.283085、Hs.103388、Hs.18213、Hs.378736、Hs.389964、Hs.387258、Hs.355820、Hs.210850、Hs.158318、Hs.157461、Hs.17860、Hs.355711、Hs.74376、Hs.111726、Hs.54468、Hs.75236、Hs.193228、Hs.512660、Hs.130685、Hs.272493、Hs.414091、Hs.113912、Hs.128204、Hs.115181、Hs.86088、Hs.431156、Hs.115830、Hs.37058、Hs.125507、Hs.376586、Hs.97808、Hs.493514、Hs.412355、Hs.97933、Hs.288727、Hs.499520、Hs.53996、Hs.144028、Hs.131555、Hs.232779、Hs.382347、Hs.87224、Hs.382870、Hs.82535、Hs.235498、Hs.438482、Hs.129778、Hs.22575、Hs.98967、Hs.320086、Hs.412022、Hs.259498、Hs.445025、Hs.334022、Hs.51120、Hs.302109、Hs.268744、Hs.152664、Hs.153203、Hs.201269、Hs.448749、Hs.408843、Hs.234790、Hs.147305、Hs.436494、Hs.12840、Hs.158963、Hs.283880、Hs.476396、Hs.148956、Hs.326012、Hs.437137、Hs.406763、Hs.150276、Hs.408195、Hs.496614、Hs.251573、Hs.205457、Hs.132275、Hs.233325、Hs.343666、Hs.49753、Hs.432815、Hs.443683、Hs.143907、Hs.22116、Hs.336224、Hs.22573、Hs.66、Hs.234774、Hs.130310、Hs.25363、Hs.78465、Hs.367888、Hs.127059、Hs.140821、Hs.511968、Hs.432445、Hs.350765、Hs.48695、Hs.430138、Hs.99607、Hs.213493、Hs.8345、Hs.502577、Hs.57876、Hs.100299、Hs.458408、Hs.406639、Hs.512760、Hs.123457、Hs.326561、Hs.446702、Hs.89121、Hs.17681、Hs.148074、Hs.97714、Hs.2936、Hs.158357、Hs.499247、Hs.153692、Hs.406234、Hs.241385、Hs.271809、Hs.278568、Hs.254122、Hs.318791、Hs.189482、Hs.282938、Hs.390808、Hs.2149、Hs.423112、Hs.301715、Hs.55016、Hs.99120、Hs.511985、Hs.359978、Hs.204238、Hs.283506、Hs.447877、Hs.137674、Hs.266738、Hs.302145、Hs.399966、Hs.149098、Hs.431010、Hs.222312、Hs.2207、Hs.25094、Hs.79881、Hs.116651、Hs.25328、Hs.501480、Hs.8346、Hs.157796、Hs.21239、Hs.508901、Hs.144875、Hs.40735、Hs.341806、Hs.125423、Hs.511880、Hs.433827、Hs.307044、Hs.306697、Hs.134807、Hs.387367、Hs.335355、Hs.349109、Hs.418105、Hs.376337、Hs.137574、Hs.44077、Hs.44899、Hs.184945、Hs.114088、Hs.376025、Hs.21258、Hs.207407、Hs.117938、Hs.169071、Hs.385986、Hs.284153、Hs.95582、Hs.21380、Hs.418083、Hs.91625、Hs.397167、Hs.437046、Hs.14468、Hs.26309、Hs.479080、Hs.352530、Hs.73958、Hs.171025、Hs.121001、Hs.11713、Hs.280311、Hs.8535、Hs.283326、Hs.407474、Hs.451697、Hs.14732、Hs.73890、Hs.42650、Hs.7327、Hs.287640、Hs.194659、Hs.191381、Hs.406789、Hs.227098、Hs.7934、Hs.512643、Hs.256583、Hs.408355、Hs.155182、Hs.30340、Hs.178023、Hs.58974、Hs.390568、Hs.185796、Hs.115263、Hs.414251、Hs.119693、Hs.511776、Hs.196530、Hs.157573、Hs.36761、Hs.223581、Hs.511753、Hs.17170、Hs.448823、Hs.102929、Hs.37616、Hs.511824、Hs.354013、Hs.132380、Hs.371496、Hs.458427、Hs.32967、Hs.143751、Hs.253690、Hs.352、Hs.21177、Hs.406681、Hs.435976、Hs.46679、Hs.148101、Hs.9914、Hs.310230、Hs.376590、Hs.458397、Hs.58414、Hs.17165、Hs.407015、Hs.470704、Hs.246914、Hs.15420、Hs.436282、Hs.257368、Hs.512739、Hs.387679、Hs.283078、Hs.516782、Hs.109752、Hs.201667、Hs.149504、Hs.398139、Hs.94367、Hs.112208、Hs.395779、Hs.445563、Hs.65135、Hs.187203、Hs.490216、Hs.487918、Hs.436495、Hs.125571、Hs.519634、Hs.399769、Hs.511987、Hs.26176、Hs.25934、Hs.351825、Hs.283794、Hs.256067、Hs.251699、Hs.436378、Hs.523755、Hs.449884、Hs.41154、Hs.54609、Hs.458291、Hs.408336およびHs.2012に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖である
ことを特徴とする請求項30に記載の漢方医療における漢方薬の適応診断方法。 - 前記標的遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.372133、Hs.281004、7.59 Hs.420563、Hs.376818、Hs.15780、Hs.493450、Hs.306814、Hs.511810、Hs.143241、Hs.278924、Hs.512632、Hs.367633、Hs.127363、Hs.414110、Hs.434143、Hs.36567、Hs.356605、Hs.414648、Hs.104888、Hs.197435、Hs.410810、Hs.434375、Hs.56279、Hs.125487、Hs.51011、Hs.170953、Hs.66392、Hs.48372、Hs.356664、Hs.420269、Hs.3017、Hs.306811、Hs.93121、Hs.438880、Hs.302029、Hs.463017、Hs.412559、Hs.17518、Hs.2133、Hs.400380、Hs.75813、Hs.287656、Hs.334347、Hs.411572、Hs.6496、Hs.268764、Hs.385496、Hs.410088、Hs.24835、Hs.446504、Hs.7972、Hs.292057、Hs.435775、Hs.78106、Hs.217754、Hs.153704、Hs.341906、Hs.250830、Hs.68846、Hs.438712、Hs.99480、Hs.434418、Hs.171980、Hs.376810、Hs.324335、Hs.37936、Hs.512546、Hs.128836、Hs.406330、Hs.302352、Hs.169825、Hs.522765、Hs.526526、Hs.82002、Hs.526394、Hs.512785、Hs.1937、Hs.105700、Hs.122895、Hs.9589、Hs.99439、Hs.334828、Hs.126161、Hs.465202、Hs.310231、Hs.94875、Hs.203557、Hs.444729、Hs.449965、Hs.122309、Hs.190090、Hs.355714、Hs.153952、Hs.408577、Hs.287370、Hs.185202、Hs.29792、Hs.4845、Hs.27183、Hs.486433、Hs.439463、Hs.194665、Hs.129312、Hs.163682、Hs.73853、Hs.2689、Hs.283900、Hs.162604、Hs.381367、Hs.288218、Hs.203349、Hs.433891、Hs.248065、Hs.440603、Hs.144913、Hs.199316、Hs.221660、Hs.21554、Hs.510244、Hs.436325、Hs.117979、Hs.356888、Hs.306322、Hs.310431、Hs.356501、Hs.444708、Hs.159609、Hs.18069、Hs.373612、Hs.12802、Hs.508901、Hs.504580、Hs.308242、Hs.128580、Hs.112184、Hs.306298、Hs.343800、Hs.50841、Hs.137516、Hs.413095、Hs.105640、Hs.144696、Hs.175411、Hs.207407、Hs.406856、Hs.122959、Hs.143792、Hs.170195、Hs.381715、Hs.443292、Hs.56874、Hs.147096、Hs.521267、Hs.196956、Hs.80720、Hs.440953、Hs.352387、Hs.434107、Hs.112720、Hs.155584、Hs.147352、Hs.146329、Hs.463171、Hs.445445、Hs.156892、Hs.212670、Hs.129895、Hs.356076、Hs.439590、Hs.278613、Hs.54697、Hs.388917、Hs.55923、Hs.460377、Hs.416244、Hs.234786、Hs.129969、Hs.275711、Hs.127842、Hs.302772、Hs.337008、Hs.48480、Hs.121115、Hs.318773、Hs.98564、Hs.276466、Hs.78824、Hs.124502、Hs.325530、Hs.375664、Hs.516311、Hs.367688、Hs.386155、Hs.189174、Hs.159264、Hs.386143、Hs.158446、Hs.209461、Hs.163484、Hs.300559、Hs.155223、Hs.448979、Hs.368420、Hs.289044、Hs.74088、Hs.93907、Hs.408264、Hs.439168、Hs.437433、Hs.448468、Hs.310194、Hs.45152、Hs.283095、Hs.500957、Hs.431156、Hs.511922、Hs.406549、Hs.288731、Hs.123419、Hs.334702、Hs.114172、Hs.408261、Hs.436657、Hs.125300、Hs.203、Hs.287499、Hs.102943、Hs.145949、Hs.248290、Hs.418167、Hs.55481、Hs.434181、Hs.275906、Hs.249126、Hs.147256、Hs.178295、Hs.385890、Hs.201800、Hs.96633、Hs.445489、Hs.449650、Hs.102708、Hs.433381、Hs.27263、Hs.512782、Hs.347537、Hs.124115、Hs.1270、Hs.349121、Hs.293884、Hs.143943、Hs.12742、Hs.166705、Hs.13209、Hs.77719、Hs.129694、Hs.126906、Hs.151414、Hs.212584、Hs.232819、Hs.41324、Hs.140821、Hs.351593、Hs.12248、Hs.434281、Hs.283506、Hs.66412.18 Hs.2115872.17 Hs.427712.17 Hs.447703、Hs.372208、Hs.379010、Hs.437008、Hs.99311、Hs.464896、Hs.323079、Hs.509439、Hs.440088、Hs.34045、Hs.406073、Hs.455335、Hs.175465、Hs.507549、Hs.127775、Hs.132888、Hs.8728、Hs.157231、Hs.62863、Hs.169600、Hs.414332、Hs.259403、Hs.101949、Hs.436339、Hs.128668、Hs.380167、Hs.79340、Hs.43125、Hs.2251、Hs.142296、Hs.288155、Hs.399740、Hs.27524、Hs.165464、Hs.123642、Hs.125156、Hs.58561、Hs.418966、Hs.447121、Hs.24734、Hs.348709、Hs.89436、Hs.2563、Hs.186363、Hs.169470、Hs.6540、Hs.223206、Hs.439169、Hs.133250、Hs.172562、Hs.349705、Hs.405457、Hs.145894、Hs.7360、Hs.163546、Hs.102276、Hs.511781、Hs.283794、Hs.171090、Hs.508459、Hs.276808、Hs.248155、Hs.436042、Hs.371212、Hs.221040およびHs.374990に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖である
ことを特徴とする請求項30に記載の漢方医療における漢方薬の適応診断方法。 - 前記標的遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.58323、Hs.160373、Hs.334832、Hs.150136、Hs.272385、Hs.382870、Hs.430919、Hs.387551、Hs.194408、Hs.406961、Hs.164021、Hs.24884、Hs.437211、Hs.436628、Hs.283880、Hs.110299、Hs.390242、Hs.113291、Hs.278894、Hs.90221、Hs.24583、Hs.266902、Hs.148956、Hs.162282、Hs.103388、Hs.406300、Hs.382347、Hs.413430、Hs.449884、Hs.24889、Hs.440606、Hs.36069、Hs.131255、Hs.369557、Hs.512660、Hs.359981、Hs.283085、Hs.163546、Hs.117938、Hs.74376、Hs.438482、Hs.482392、Hs.320086、Hs.95990、Hs.9469、Hs.108642、Hs.180016、Hs.479572、Hs.169395、Hs.335319、Hs.442801、Hs.111726、Hs.183390、Hs.449407、Hs.434195、Hs.17546、Hs.127951、Hs.458408、Hs.287374、Hs.150826、Hs.181483、Hs.115467、Hs.232779、Hs.96557、Hs.406722、Hs.201269、Hs.47313、Hs.8852、Hs.283326、Hs.225943、Hs.12902、Hs.500371、Hs.7296、Hs.430854、Hs.278568、Hs.132275、Hs.66392、Hs.437179、Hs.8850、Hs.98967、Hs.57876、Hs.459828、Hs.310230、Hs.25328、Hs.301956、Hs.144875、Hs.110457、Hs.509265、Hs.60339、Hs.511880、Hs.446152、Hs.48100、Hs.247975、Hs.479080、Hs.490096、Hs.8346、Hs.131555、Hs.32967、Hs.307003、Hs.127032、Hs.109268、Hs.80720、Hs.266738、Hs.113912、Hs.175780、Hs.497972、Hs.18213、Hs.152664、Hs.459847、Hs.378736、Hs.458427、Hs.36761、Hs.429531、Hs.149797、Hs.444135、Hs.22575、Hs.272191、Hs.512643、Hs.54713、Hs.820、Hs.77221、Hs.253690、Hs.436282、Hs.181289、Hs.170560、Hs.426734、Hs.334527、Hs.406701、Hs.177434、Hs.511968、Hs.389964、Hs.251699、Hs.207805、Hs.140821、Hs.281004、Hs.435675、Hs.292597、Hs.178715、Hs.161394、Hs.396332、Hs.302109、Hs.86088、Hs.356794、Hs.449392、Hs.134807、Hs.210850、Hs.18705、Hs.326444、Hs.287453、Hs.130522、Hs.234775、Hs.438555、Hs.171532、Hs.54617、Hs.268843、Hs.11713、Hs.5025、Hs.288727、Hs.412022、Hs.78465、Hs.423112、Hs.497707、Hs.235390、Hs.33455、Hs.371278、Hs.237642、Hs.234790、Hs.78792、Hs.115181、Hs.115617、Hs.463017、Hs.406789、Hs.378753、Hs.256583、Hs.99430、Hs.525361、Hs.148559、Hs.249181、Hs.23853、Hs.172052、Hs.90821、Hs.444182、Hs.123474、Hs.284310、Hs.137574、Hs.102929、Hs.511985、Hs.371335、Hs.528103、Hs.355711、Hs.496614、Hs.27621、Hs.183006、Hs.27021、Hs.389571、Hs.227457、Hs.334772、Hs.512760、Hs.53996、Hs.207407、Hs.297997、Hs.512808、Hs.149467、Hs.510932、Hs.272493、Hs.79881、Hs.3052、Hs.415895、Hs.388220、Hs.253193、Hs.124502、Hs.232803、Hs.269777、Hs.12264、Hs.380763、Hs.147595、Hs.411274、Hs.441481、Hs.376025、Hs.250895、Hs.468922、Hs.161427、Hs.385986、Hs.439760、Hs.313413、Hs.408843、Hs.58974、Hs.430755、Hs.99120、Hs.25363、Hs.287405、Hs.131035、Hs.335355、Hs.259471、Hs.235888、Hs.144527、Hs.414091、Hs.480174、Hs.445241、Hs.44888、Hs.382683、Hs.439494、Hs.288520、Hs.234027、Hs.130685、Hs.399966、Hs.434486、Hs.407002、Hs.333958、Hs.238648、Hs.308045、Hs.196470、Hs.144531、Hs.7327、Hs.83916、Hs.169441、Hs.73890、Hs.432374、Hs.143751、Hs.2074、Hs.158278、Hs.158963、Hs.490216、Hs.103422、Hs.133361、Hs.404220、Hs.169071、Hs.288718、Hs.144130、Hs.336224、Hs.112669、Hs.159265、Hs.122110、Hs.7835、Hs.407015、Hs.441708、Hs.452398、Hs.439124、Hs.443020、Hs.499520、Hs.356572、Hs.284200、Hs.78944、Hs.512387、Hs.235498、Hs.133082、Hs.471423、Hs.73625、Hs.9914、Hs.355862、Hs.82120、Hs.443392、Hs.401954、Hs.436140、Hs.461482、Hs.433596、Hs.434103、Hs.385898、Hs.348920、Hs.81848、Hs.432379、Hs.79025、Hs.407162、Hs.197922、Hs.180171、Hs.408200、Hs.444529、Hs.164649、Hs.4224、Hs.460471、Hs.149152、Hs.458397、Hs.124211、Hs.415497、Hs.293917、Hs.253489、Hs.14822、Hs.376590、Hs.179112、Hs.152337、Hs.438300、Hs.344099、Hs.421986、Hs.432458、Hs.351414、Hs.54460、Hs.349227、Hs.47312、Hs.185796、Hs.26981、Hs.267038、Hs.448749、Hs.170114、Hs.95582、Hs.352601、Hs.353001、Hs.352617、Hs.414164、Hs.30340、Hs.359978、Hs.298241、Hs.178292、Hs.156232、Hs.406681、Hs.411644、Hs.97933、Hs.137674、Hs.476396、Hs.388877、Hs.155573、Hs.87、Hs.153203、Hs.458434、Hs.10056、Hs.148074およびHs.377022に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖である
ことを特徴とする請求項30に記載の漢方医療における漢方薬の適応診断方法。 - 前記標的遺伝子が、NCBI Unigeneのデータベースの配列番号Hs.436450、Hs.278613、Hs.411239、Hs.445072、Hs.123515、Hs.17518、Hs.128668、Hs.280226、Hs.511758、Hs.233437、Hs.187802、Hs.61929、Hs.406741、Hs.245431、Hs.20082、Hs.29798、Hs.222、Hs.162089、Hs.37936、Hs.144913、Hs.166351、Hs.313、Hs.522901、Hs.450230、Hs.89679、Hs.323966、Hs.439168、Hs.159629、Hs.186363、Hs.172052、Hs.250723、Hs.356605、Hs.376407、Hs.188021、Hs.386264、Hs.40510、Hs.408067、Hs.58009、Hs.222909、Hs.113227、Hs.350800、Hs.377070、Hs.178295、Hs.222746、Hs.351811、Hs.440088、Hs.490397、Hs.344400、Hs.361748、Hs.283045、Hs.27258、Hs.25328、Hs.350765、Hs.103665、Hs.194725、Hs.327621、Hs.408629、Hs.411347、Hs.489592、Hs.386236、Hs.446451、Hs.105115、Hs.45207、Hs.91283、Hs.178499、Hs.444882、Hs.381370、Hs.369994、Hs.93883、Hs.306230、Hs.413924、Hs.504809、Hs.84665、Hs.389724、Hs.211587、Hs.1560、Hs.406733、Hs.306812、Hs.348745、Hs.106688、Hs.129895、Hs.388917、Hs.368746、Hs.413525、Hs.166011、Hs.94865、Hs.250472、Hs.434485、Hs.267038、Hs.445426、Hs.154084、Hs.23317、Hs.75360、Hs.127405、Hs.155584、Hs.47504、Hs.90318、Hs.128499、Hs.283082、Hs.449006、Hs.309365、Hs.436602、Hs.324335、Hs.351816、Hs.306992、Hs.512632、Hs.443260、Hs.348709、Hs.426324、Hs.227656、Hs.435092、Hs.272200、Hs.347537、Hs.271269、Hs.424414、Hs.707、Hs.248204、Hs.168355、Hs.58559、Hs.407817、Hs.447162、Hs.144870、Hs.435398、Hs.146025、Hs.406485、Hs.326559、Hs.258536、Hs.169825、Hs.1270、Hs.325335、Hs.335877、Hs.421280、Hs.443120、Hs.389638、Hs.124673、Hs.150138、Hs.476618、Hs.438482、Hs.652、Hs.199372、Hs.493952、Hs.371212、Hs.25156、Hs.301956、Hs.511810、Hs.151408、Hs.157144、Hs.159525、Hs.94327、Hs.449791、Hs.320522、Hs.123114、Hs.446376、Hs.250666、Hs.201554、Hs.351818、Hs.189575、Hs.132270、Hs.36793、Hs.23367、Hs.104613、Hs.254006、Hs.133995、Hs.395205、Hs.476835、Hs.513009、Hs.257584、Hs.5462、Hs.96149、Hs.374720、Hs.46791、Hs.127473、Hs.91813、Hs.271640、Hs.379010、Hs.516739、Hs.376657、Hs.121490、Hs.352240、Hs.203557、Hs.228982、Hs.122115、Hs.112928、Hs.436975、Hs.387258、Hs.433197、Hs.159553、Hs.437、Hs.288911、Hs.440953、Hs.20315、Hs.104859、Hs.38260、Hs.199316、Hs.511791、Hs.282275、Hs.249126、Hs.163484、Hs.297604、Hs.73853、Hs.27335、Hs.26176、Hs.92683、Hs.212584、Hs.372616、Hs.153647、Hs.121115、Hs.87306、Hs.318775、Hs.353114、Hs.167679、Hs.415209、Hs.55209、Hs.143600、Hs.156007、Hs.444960、Hs.234016、Hs.283011、Hs.512778、Hs.37107、Hs.414332、Hs.164680、Hs.74115、Hs.422120、Hs.104133、Hs.21861、Hs.249184、Hs.375054、Hs.436424、Hs.302754、Hs.297452、Hs.165387、Hs.493450、Hs.306094、Hs.414110、Hs.118057、Hs.840、Hs.2207、Hs.343154、Hs.445772、Hs.132272、Hs.59892、Hs.380519、Hs.442936、Hs.274548、Hs.72910、Hs.49433、Hs.26663、Hs.155814、Hs.212892、Hs.408488、Hs.37125、Hs.375870、Hs.440695、Hs.341906、Hs.370622、Hs.314141、Hs.118631、Hs.115365、Hs.238964、Hs.331491、Hs.194714、Hs.434375、Hs.127012、Hs.306622、Hs.211298、Hs.264330、Hs.347534、Hs.148767、Hs.41270、Hs.283096、Hs.110637、Hs.76152、Hs.334、Hs.55412、Hs.497743、Hs.276808、Hs.114599、Hs.461085、Hs.282787、Hs.131834、Hs.21838、Hs.492218、Hs.248114、Hs.501321、Hs.512787、Hs.268700、Hs.313948、Hs.211477、Hs.2053、Hs.21388、Hs.507546、Hs.1501、Hs.248139、Hs.283779、Hs.511992、Hs.406984、Hs.145680、Hs.403836、Hs.287656、Hs.53263、Hs.257541、Hs.413265、Hs.333742、Hs.156346、Hs.441287、Hs.131101、Hs.436983、Hs.256036、Hs.420036、Hs.440387、Hs.122309、Hs.479817、Hs.195614、Hs.355584、Hs.65248、Hs.512782、Hs.363315、Hs.43107、Hs.233950、Hs.445445、Hs.82316、Hs.148990、Hs.158798、Hs.189067およびHs.90797に記載された遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖である
ことを特徴とする請求項30に記載の漢方医療における漢方薬の適応診断方法。 - 前記漢方薬が半夏厚朴湯であり、前記標的遺伝子が「半夏厚朴湯の証」の出現・消失に伴い、半夏厚朴湯の服用により、および/または半夏厚朴湯の効きやすさにより発現変動することを特徴とする請求項29に記載の漢方医療における漢方薬の適応診断方法。
- 前記標的遺伝子が、配列表の配列番号290〜配列番号338に記載された塩基配列またはその一部を含む遺伝子のいずれか1または2以上の遺伝子、その断片またはこれらの相補配列鎖である
ことを特徴とする請求項36に記載の漢方医療における漢方薬の適応診断方法。
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