JP2005536467A

JP2005536467A - 選択的ｉＮＯＳ阻害剤を用いる呼吸器の疾患および状態の治療方法

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Publication number: JP2005536467A
Application number: JP2004505156A
Authority: JP
Inventors: パメラ・ティー・マニング
Original assignee: ファルマシア・コーポレーション
Priority date: 2002-05-16
Filing date: 2003-05-16
Publication date: 2005-12-02
Also published as: KR20050004155A; MXPA04011404A; CN1652843A; WO2003097163A3; AU2003234606A1; IL164826A0; WO2003097163A2; US20040077639A1; CA2486061A1; ZA200408905B; EP1506040A2; PL373952A1; BR0311180A

Abstract

呼吸器の疾患または状態を予防または治療する治療方法が記載されており、その方法は、呼吸器の疾患または状態の予防または治療を必要とする患者に患者に呼吸器の疾患または状態に有効な量の誘導型一酸化窒素シンターゼの選択的阻害剤を投与することからなる。

Description

本発明は、一般に、一酸化窒素シンターゼの誘導形態（ｉＮＯＳ）の選択的阻害剤を用いる医学的な治療方法、より具体的には喘息状態および慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）としてひとまとめにして称する肺疾患を含めた呼吸器の疾患および状態の医学的な予防および治療に有用な新規方法に関する。

喘息は、世界的には約１億５千万人の人々に影響を及ぼしており、幼児期において最も一般的な慢性疾患である。ここ１０年の間に観察された小児喘息の高い有病率から、適当な予防措置をとらなければ、近い将来、喘息の有病率が上昇すると予測される。喘息は約１千万人のアメリカ人に影響を及ぼしており、そのうちの約３分の１が１８歳未満の年齢である。米国だけでも、毎年数十億ドルが喘息関連の健康管理に費やされている。喘息の特徴である一時的な呼吸困難は、１) 気管支痙攣、すなわち気道筋収縮による可変性のおよび可逆性の気道障害、２) 気道内層の炎症、および３) 気道において過剰の粘液を生じる気管支の反応亢進：を含めた３つの主要な因子の組み合わせによって生じる。喘息発作のきっかけは、個人によって異なるが、しかしアレルゲン、例えばチリダニおよびカビ、環境汚染物、ウイルス性の作用因子および身体的な激しい活動または運動が含まれる。

ＣＯＰＤの世界的推計は、伝統的には主として死亡率統計に基づいてきた。これでは、ＣＯＰＤが診断されるまでに至らず、多くの場合、死亡の主要なまたは寄与する原因として記載されないため、誤解をまねく数字が提供される。有病率の評価には、気流閉塞症の測定法が必要である。このため、ＣＯＰＤ有病率における人口ベースの良好なデータを有する国は僅かしかない。それにもかかわらず、評価によればＣＯＰＤによる死亡および障害が、男性および女性についてほとんどの地域で増加していることがわかる。Mayo Clinicは、米国では、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、ほとんどは気腫または慢性気管支炎で年に８５,０００人の人々が死亡していると報告している。慢性閉塞性肺疾患は、実際には、喘息性気管支炎、慢性気管支炎（正常な空気流）、慢性閉塞性気管支炎、水疱性疾患および気腫を含めた慢性または進行性のいくつかの肺疾患をひとまとめにして称し、全て炎症を含んでいる。例えば、慢性気管支炎は、慢性の咳、粘液の増加、頻繁な咳払いおよび息切れを含めた症状を生じる気管支内層の炎症および最終的瘢痕化である。気腫は、たばこの煙のような環境汚染物の慢性暴露に対する気道内層の正常な、しかし慢性の炎症性反応によって生じる。

喘息およびＣＯＰＤの薬物治療として、β−アドレナリン作用剤、メチルキサンチンおよび抗コリン作用剤を含めた気管支拡張剤の静脈内、経口、皮下または吸入による投与、そしてまたコルチコステロイド、マスト細胞メディエータ−放出阻害剤（クロモリンおよびチラード（Tilade）として知られている）またはより最近では抗炎症性効果のための抗ロイコトリエンの投与が含まれる。しかし、喘息およびＣＯＰＤの発病および進行に役割を果たす炎症性および免疫性プロセスにおける細胞および分子のメカニズムは、まだよく理解されていない。

一酸化窒素（ＮＯ）は、酵素一酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ）のいくつかのアイソフォームのいずれか一つによって製造される生物活性なフリーラジカルガスである。その生理学的活性は、後にＮＯとして確認されたが、最初は、１９８０年代初期にアセチルコリンによって生じる血管の弛緩が血管内皮の存在に依存することがわかった時に発見された。このような血管の弛緩に介在する、内皮から誘導された、そして内皮由来弛緩因子（ＥＤＲＦ）と称する因子は、現在、ＮＯであることが知られており、これはＮＯＳの一つのアイソフォームによって血管内皮中に生成される。血管拡張剤としてのＮＯの活性は、１００年にわたってよく知られてきた。さらに、ＮＯは、亜硝酸アミルおよびグリセリルトリニトラートを含めた、知られているニトロ血管拡張剤から誘導される活性種である。また、一酸化窒素は、可溶性のグアニル酸シクラーゼの内因性刺激因子であり、このためｃＧＭＰ産生を刺激する。ＮＯＳがＮ−モノメチルアルギニン（Ｌ−ＮＭＭＡ）によって阻害されるとき、ｃＧＭＰ形成は完全に回避される。内皮依存性弛緩に加えて、ＮＯは、食細胞の細胞毒性および中枢神経系における細胞間伝達を含む多くの生物作用に含まれることが知られている。

ＮＯとしてのＥＤＲＦの確認は、ＮＯが酵素ＮＯシンターゼによってアミノ酸Ｌ−アルギニンから合成される生化学的経路の発見と一致する。ＮＯシンターゼには、次のような：(ｉ)受容体または身体的刺激に応答してＮＯを放出する内皮中に存在する構成型Ｃａ⁺⁺／カルモジュリン依存性酵素、(ii)受容体または身体的な刺激に応答してＮＯを放出する脳内に存在する構成型Ｃａ⁺⁺／カルモジュリン依存性酵素、(iii)エンドトキシンおよびサイトカインによる血管の平滑筋、マクロファージ、内皮細胞および多くの他の細胞の活性化後に誘導されるＣａ⁺⁺非依存性酵素、１３０ｋＤタンパク質：の少なくとも３つのタイプがある。一旦発現すると、この誘導型一酸化窒素シンターゼ（以下「ｉＮＯＳ」）は長期間にわたって連続的にＮＯを生成する。

臨床的な研究では、種々の慢性炎症性疾患、例えばリウマチ様および変形性関節症においてＮＯ産生およびｉＮＯＳ発現が増加し、ｉＮＯＳはこれらの慢性の炎症性疾患において主要な病理学的因子として関係していることがわかった。

従って、ｉＮＯＳによる過剰のＮＯ産生を阻害することで、抗炎症性となる可能性がある。しかし、ｅＮＯＳおよびｎＮＯＳからのＮＯの産生は、正常な生理に含まれている。このため、炎症治療に用いるすべてのＮＯＳ阻害剤は、ｅＮＯＳにより生成したＮＯによる血圧の正常な生理学的な調整、およびｎＮＯＳにより生成したＮＯによる非アドレナリン作用性、非コリン作用性ニューロン伝達が全般的に影響を受けないようにｉＮＯＳについては選択的でなければならない。

喘息患者および炎症性気道疾患を有する他の患者では、正常な影響を受けてない者と比べて呼気中のＮＯ濃度の増加が示され、そのため排出されたＮＯは気道炎症のマーカーとして提案されてきた。ｉＮＯＳの発現増加は、喘息患者の上皮および気管支拡張症の肺マクロファージにおいて観察される。例えば、Barnes, P. J. and Liew, F. Y., Immunol. Today 16 (3): 128-30 (1995)を参照のこと。

ｉＮＯＳによるＮＯの過剰生産は、喘息の気道炎症の発病と関係している。例えば、Eissa, N. T. 等, Am. J. Resp. Cell and Mol. Biol. 24 (5) : 616-20 (2001)を参照のこと。アレルギー性喘息のネズミモデルにおいて、ＮＯＳ阻害剤Ｌ−ＮＡＭＥ、Ｓ−エチルイソチオ尿素、または２−アミノ５,６−ジヒドロ６−メチル−４Ｈ−１,３−チアジンの一つを投与するとケモカイン発現のダウンレギュレーションによって気道炎症が抑制される。Trifilieff, A., 等, J. Immunol. 165 (3) 1526-33(2000)を参照のこと。それは、喘息だけでなく鼻炎の治療戦略としてアミノグアニジンによるｉＮＯＳの阻害が含まれることを示唆している。Schapowal, A. G. , and Brunnenkant, W., Allergologie 19(1) : 49 (1996)を参照のこと。ｉＮＯＳにより生成したＮＯの産生が高いレベルで持続すると、気道内皮の破壊、毛様体機能の低下、ＴＨ−１−優位の反応からＴＨ−２−優位の反応へのバランスのシフトの下地になると考えられ、そしてさらに好酸球の化学誘引物質が生じると考えられ、これは喘息においてｉＮＯＳを選択的に阻害すると肺の炎症が減少し、気道機能が改善されることを示唆している。Manning, P. T. 等, Prog. in Resp. Res. 31: 156-59 (2001)を参照のこと。
ＰＣＴ特許出願ＷＯ０１／０５７４８は、自己免疫性または炎症性状態（喘息を含む）の治療のための有用な選択的ｉＮＯＳ阻害剤として新しいオリゴマー性アミノ酸誘導体を開示している。

喘息、糖尿病の血管疾患、心不全および敗血症の治療のための核因子−κＢ（ＮＦ−ｋＢ）活性の阻害も記載されており、ここでは、ヘパリンを患者に投与して細胞の細胞質から核へのＮＦ−ｋＢの転位を阻止し、これによりＮＦ−ｋＢ発現を阻害している。ＰＣＴ公表０１／０１９３７６を参照のこと。ＮＦ−ｋＢ依存性遺伝子発現に起因すると考えられるタンパク質としては、サイトカインＴＨＦ、ＩＬ−１、ＩＬ−２、ＩＬ−６、ＩＬ−８、インターフェロン−β、インターフェロン−γ、組織因子−１、補体およびｉＮＯＳ.Ｉｄが含まれる。

しかし、喘息およびＣＯＰＤの根拠となる細胞および分子のメカニズムは、まだよく理解されてない。このような吸器疾患がＮＯＳ活性を阻害することによって治療されるという示唆とは対照的に、喘息患者および肺疾患を有する患者の呼気中に観察されたＮＯ濃度の増加は、ＮＯＳ活性を伴う代償メカニズムの指標であることも示唆されている。従って、ＮＯＳ活性の阻害を含めた喘息またはＣＯＰＤの提案された治療とは対照的に、代わりに一酸化窒素を提供する、運ぶまたは放出するまたはＮＯの内因性産生を刺激する化合物を投与することからなる治療方法を提示することも示唆されている。例えば、米国特許第ＲＥ３７,１１６および同第６,３３１,５４３号参照のこと。

別の研究では、喘息またはＣＯＰＤをｉＮＯＳ阻害剤で治療することから離れて教示されている。グアニルシクラーゼによるＧＴＰのｃＧＭＰへの転化は、ｉＮＯＳによって刺激されると考えられ、このためｉＮＯＳを選択的に阻害すると、グアニル酸シクラーゼ活性が低下し、ｃＧＭＰレベルが減少するはずである。しかし、米国特許第６,３３３,３５４号は、ＰＤＥ阻害剤とグアニルシクラーゼアゴニストとの組み合わせを用いる急性もしくは慢性の気管支閉塞症または急性もしくは喘息を含む慢性炎症の治療を教示している。グアニルシクラーゼアゴニストは、ｉＮＯＳ阻害剤と反対の効果をもたらし、ｃＧＭＰレベルが低下する代わりにグアニルシクラーゼ活性が増加し、ｃＧＭＰ産生の増加することが期待される。

この背景に対して、過剰のｉＮＯＳ活性と関連がありうる、炎症を含めたさまざまな肺および呼吸器の疾患および状態の治療および予防のための、そしてさらに毒性および有害な副作用が最小限で全体的な治療有効性を改善するための新規な薬剤および方法を見いだすことに関心が高まっている。従って、炎症を伴う肺の疾患および状態を治療および予防するための新しい組成物および治療方法を見いだして記載することは有益である。

本発明は、呼吸器の疾患または状態の治療、予防または抑制を必要とする患者において呼吸器の疾患または状態を治療、予防または抑制する方法であって、該方法は呼吸器の疾患または状態に有効な量の誘導型一酸化窒素シンターゼの選択的阻害剤またはその医薬上許容しうる塩またはそのプロドラッグを患者に投与することからなり、その際、誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤が、式Ｉ

（式中、Ｒ¹は、Ｈ、ハロおよび１個以上のハロによって場合により置換されうるアルキルからなる群より選ばれ；
Ｒ²は、Ｈ、ハロおよび１個以上のハロによって場合により置換されうるアルキルからなる群より選ばれるが；
但し、Ｒ¹またはＲ²の少なくとも一つはハロを含み；
Ｒ⁷は、Ｈおよびヒドロキシからなる群より選ばれ；
Ｊは、ヒドロキシ、アルコキシおよびＮＲ³Ｒ⁴からなる群より選ばれ、その際；
Ｒ³は、Ｈ、低級アルキル、低級アルキレニルおよび低級アルキニルからなる群より選ばれ；

Ｒ⁴は、Ｈおよび複素環式環からなる群より選ばれ、ここで環の少なくとも一つの構成メンバーは、炭素であり、１〜約４個のヘテロ原子は、酸素、窒素および硫黄から独立して選ばれ、そして前記複素環式環はヘテロアリールアミノ、Ｎ−アリール−Ｎ−アルキルアミノ、Ｎ−ヘテロアリールアミノ−Ｎ−アルキルアミノ、ハロアルキルチオ、アルカノイルオキシ、アルコキシ、ヘテロアラルコキシ、シクロアルコキシ、シクロアルケニルオキシ、ヒドロキシ、アミノ、チオ、ニトロ、低級アルキルアミノ、アルキルチオ、アルキルチオアルキル、アリールアミノ、アラルキルアミノ、アリールチオ、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アルキルスルホンアミド、アルキルアミノスルホニル、アミドスルホニル、モノアルキルアミドスルホニル、ジアルキルアミドスルホニル、モノアリールアミドスルホニル、アリールスルホンアミド、ジアリールアミドスルホニル、モノアルキルモノアリールアミドスルホニル、アリールスルフィニル、アリールスルホニル、ヘテロアリールチオ、ヘテロアリールスルフィニル、ヘテロアリールスルホニル、アルカノイル、アルケノイル、アロイル、ヘテロアロイル、アラルカノイル、ヘテロアラルカノイル、ハロアルカノイル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレンジオキシ、ハロアルキレンジオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、低級シクロアルキルアルキル、低級シクロアルケニルアルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヒドロキシハロアルキル、ヒドロキシアラルキル、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシヘテロアラルキル、ハロアルコキシアルキル、アリール、アラルキル、アリールオキシ、アラルコキシ、アリールオキシアルキル、飽和ヘテロシクリル、部分飽和ヘテロシクリル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールオキシアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、アリールアルケニル、ヘテロアリールアルケニル、シアノアルキル、ジシアノアルキル、カルボキシアミドアルキル、ジカルボキシアミドアルキル、シアノカルボアルコキシアルキル、カルボアルコキシアルキル、ジカルボアルコキシアルキル、シアノシクロアルキル、ジシアノシクロアルキル、カルボキシアミドシクロアルキル、ジカルボキシアミドシクロアルキル、カルボアルコキシシアノシクロアルキル、カルボアルコキシシクロアルキル、ジカルボアルコキシシクロアルキル、ホルミルアルキル、アシルアルキル、ジアルコキシホスホノアルキル、ジアラルコキシホスホノアルキル、ホスホノアルキル、ジアルコキシホスホノアルコキシ、ジアラルコキシホスホノアルコキシ、ホスホノアルコキシ、ジアルコキシホスホノアルキルアミノ、ジアラルコキシホスホノアルキルアミノ、ホスホノアルキルアミノ、ジアルコキシホスホノアルキル、ジアラルコキシホスホノアルキル、グアニジノ、アミジノ、およびアシルアミノで場合により置換されてもよい）を有する化合物またはその医薬上許容しうる塩；

式II

（式中、Ｘは、−Ｓ−、−Ｓ(Ｏ)−および−Ｓ(Ｏ)₂−からなる群より選ばれる。好ましくは、Ｘは−Ｓ−である。Ｒ¹²は、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₂−Ｃ₆アルケニル、Ｃ₂−Ｃ₆アルキニル、Ｃ₁−Ｃ₅アルコキシ−Ｃ₁アルキル、およびＣ₁−Ｃ₅アルキルチオ−Ｃ₁アルキルからなる群より選ばれ、その際、これらの基は、それぞれ−ＯＨ、アルコキシおよびハロゲンからなる群より選ばれる１個以上の置換基によって場合により置換されている。好ましくは、Ｒ¹²は、−ＯＨ、アルコキシおよびハロゲンからなる群より選ばれる置換基で場合により置換されたＣ₁−Ｃ₆アルキルである。Ｒ¹³およびＲ¹⁸に関して、Ｒ¹⁸は、−ＯＲ²⁴および−Ｎ(Ｒ²⁵)(Ｒ²⁶)からなる群より選ばれ、そしてＲ¹³は、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃ(Ｏ)−Ｒ²⁷、−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ²⁸および−Ｃ(Ｏ)−Ｓ−Ｒ²⁹からなる群より選ばれるか；またはＲ¹⁸は−Ｎ(Ｒ³⁰)−であり、そしてＲ¹³は−Ｃ(Ｏ)−であり、ここでＲ¹⁸およびＲ¹³は、それらが結合している原子と一緒になって環を形成するか；またはＲ¹⁸は−Ｏ−であり、そしてＲ¹³は−Ｃ(Ｒ³¹)(Ｒ³²)−であり、ここでＲ¹⁸およびＲ¹³は、それらが結合している原子と一緒になって環を形成する。Ｒ¹³が、−Ｃ(Ｒ３²¹)(Ｒ³²)−である場合、Ｒ¹⁴は−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ³³であり、でなければＲ¹⁴は−Ｈである。Ｒ¹¹、Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶、およびＲ¹⁷は、独立して−Ｈ、ハロゲン、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₂−Ｃ₆アルケニル、Ｃ₂−Ｃ₆アルキニルおよびＣ₁−Ｃ₅アルコキシ−Ｃ₁アルキルからなる群より選ばれる。Ｒ¹⁹およびＲ²⁰は、独立して−Ｈ、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₂−Ｃ₆アルケニル、Ｃ₂−Ｃ₆アルキニルおよびＣ₁−Ｃ₅アルコキシ−Ｃ₁アルキルからなる群より選ばれる。Ｒ²¹およびＲ²²に関して、Ｒ²¹は、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ³⁴および−Ｃ(Ｏ)−Ｓ−Ｒ³⁵からなる群より選ばれ、そしてＲ²²は、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ³⁶および−Ｃ(Ｏ)−Ｓ−Ｒ³⁷からなる群より選ばれるか；またはＲ²¹は−Ｏ−であり、そしてＲ²²は−Ｃ(Ｏ)−であり、ここでＲ²¹およびＲ²²は、それらが結合している原子と一緒になって環を形成するか；またはＲ²¹は−Ｃ(Ｏ)−であり、そしてＲ²²は−Ｏ−であり、ここでＲ²¹およびＲ²²は、それらが結合している原子と一緒になって環を形成する。Ｒ²³は、Ｃ₁アルキルである。Ｒ²⁴は、−ＨおよびＣ₁−Ｃ₆アルキルからなる群より選ばれ、その際、Ｒ²⁴がＣ₁−Ｃ₆アルキルである場合、Ｒ²⁴は、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群より選ばれる１個以上の基によって場合により置換されている。Ｒ²⁵およびＲ²⁶に関して、Ｒ²⁵は、−Ｈ、アルキルおよびアルコキシからなる群より選ばれ、そしてＲ²⁶は、−Ｈ、−ＯＨ、アルキル、アルコキシ、−Ｃ(Ｏ)−Ｒ³⁸、−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ³⁹および−Ｃ(Ｏ)−Ｓ−Ｒ⁴⁰からなる群より選ばれ；その際、Ｒ²⁵およびＲ²⁶が独立してアルキルまたはアルコキシである場合、Ｒ²⁵およびＲ²⁶は、独立してシクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群より選ばれる１個以上の基で場合により置換されているか；またはＲ²⁵は−Ｈであり；そしてＲ²⁶はシクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群より選ばれる。Ｒ²⁷、Ｒ²⁸、Ｒ²⁹、Ｒ³⁰、Ｒ³¹、Ｒ³²、Ｒ³³、Ｒ³⁴、Ｒ³⁵、Ｒ³⁶、Ｒ³⁷、Ｒ³⁸、Ｒ³⁹およびＲ⁴⁰は、−Ｈおよびアルキルからなる群より独立して選ばれ、その際、アルキルは、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群より選ばれる１個以上の基によって場合により置換されている。Ｒ¹¹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁷、Ｒ¹⁸、Ｒ19⁹、Ｒ²⁰、Ｒ²¹、Ｒ²²、Ｒ²³、Ｒ²⁴、Ｒ²⁵、Ｒ²⁶、Ｒ²⁷、Ｒ²⁸、Ｒ²⁹、Ｒ³⁰、Ｒ³¹、Ｒ³²、Ｒ³³、Ｒ³⁴、Ｒ³⁵、Ｒ³⁶、Ｒ³⁷、Ｒ³⁸、Ｒ³⁹およびＲ⁴⁰のいずれかが独立してアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルキルチオ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群より選ばれる基である場合、その基は、−ＯＨ、アルコキシおよびハロゲンからなる群より選ばれる１個以上の置換基によって場合により置換されている）に相当する構造を有する化合物またはその医薬上許容しうる塩；

式III

（式中、Ｒ⁴¹は、Ｈまたはメチルであり；そしてＲ⁴²はＨまたはメチルである）によって表される化合物またはその医薬上許容しうる塩；

式IV

の化合物またはその医薬上許容しうる塩；

式Ｖ

（式中、Ｒ⁴³は、水素、ハロ、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル、およびアルコキシまたは１個以上のハロによって置換されたＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群より選ばれ；
Ｒ⁴⁴は、水素、ハロ、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル、およびアルコキシまたは１個以上のハロによ
って置換されたＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群より選ばれ；
Ｒ⁴⁵は、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル、またはアルコキシもしくは１個以上のハロによって置換されたＣ₁−Ｃ₅アルキルである）の化合物またはその医薬上許容しうる塩；

式VI

（式中、Ｒ⁴⁶は、Ｃ₁−Ｃ₅アルキルであり、前記Ｃ₁−Ｃ₅アルキルはハロまたはアルコキシによって場合により置換されており、前記アルコキシは１個以上のハロによって場合により置換されている）の化合物またはその医薬上許容しうる塩；

式VII

（式中、Ｒ⁴⁷は、水素、ハロ、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル、およびアルコキシまたは１個以上のハロによって置換されたＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群より選ばれ；
Ｒ⁴⁸は、水素、ハロ、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル、およびアルコキシまたは１個以上のハロによって置換されたＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群より選ばれ；
Ｒ⁴⁹は、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル、またはアルコキシもしくは１個以上のハロによって置換されたＣ₁−Ｃ₅アルキルである）の化合物またはその医薬上許容しうる塩；

式VIII

（式中、Ｒ⁵⁰は、Ｃ₁−Ｃ₅アルキルであり、前記Ｃ₁−Ｃ₅アルキルはハロまたはアルコキシによって場合により置換されており、前記アルコキシは１個以上のハロによって場合により置換されている）の化合物またはその医薬上許容しうる塩；

式IX

（式中、Ｒ⁵⁰は、水素、ハロおよびＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群から選ばれ、前記Ｃ₁−Ｃ₅アルキルはハロまたはアルコキシによって場合により置換されており、前記アルコキシは１個以上のハロによって場合により置換されており；
Ｒ⁵¹は、水素、ハロおよびＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群より選ばれ、前記Ｃ₁−Ｃ₅アルキルはハロまたはアルコキシによって場合により置換されており、前記アルコキシは１個以上のハロによって場合により置換されており；
Ｒ⁵²は、Ｃ₁−Ｃ₅アルキルであり、前記Ｃ₁−Ｃ₅アルキルはハロまたはアルコキシによって場合により置換されており、前記アルコキシは１個以上のハロによって場合により置換されており；
Ｒ⁵³は、水素、ハロおよびＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群より選ばれ、前記Ｃ₁−Ｃ₅アルキルはハロまたはアルコキシによって場合により置換されており、前記アルコキシは１個以上のハロによって場合により置換されており；そして
Ｒ⁵⁴は、ハロおよびＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群より選ばれ、前記Ｃ₁−Ｃ₅アルキルはハロまたはアルコキシによって場合により置換されており、前記アルコキシは１個以上のハロによって場合により置換されている）の化合物またはその医薬上許容しうる塩；および

式Ｘ

（式中、Ｒ⁵⁵は、Ｃ₁−Ｃ₅アルキルであり、前記Ｃ₁−Ｃ₅アルキルはハロまたはアルコキシによって場合により置換されており、前記アルコキシは１個以上のハロによって場合により置換されている）の化合物またはその医薬上許容しうる塩
からなる群より選ばれる方法に関する。

別の具体的な化合物において、誘導型一酸化窒素シンターゼ選択的阻害剤は、式XIを有する化合物またはその医薬上許容しうる塩である。化合物XIは、以前に国際公開番号ＷＯ
００／２６１９５（２０００年５月１１日公示）に記載されており、これは参照により本明細書に組み込まれている。

２Ｓ−アミノ−６−[(１−イミノエチル）アミノ]−Ｎ−(１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキサンアミド，水和物二塩酸塩

また、本発明は、別の選択的ｉＮＯＳ阻害剤の使用を企図する。例えば、本発明に有用なｉＮＯＳ選択的阻害剤は、２０００年１１月２９日に出願され、２００２年３月１２日に発行された米国特許第６,３５５,６８９号（Beswick等）に記載されており、そしてこれは式XII：

（式中、Ｒ⁷⁹は、Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_3-4シクロアルキル、Ｃ_1-4ヒドロキシアルキルおよびＣ_1-4ハロアルキルより選ばれる）の選択的ｉＮＯＳ阻害剤を記載し、請求している。米国特許第６,３５５,６８９号の説明では、Ｒ⁷⁹が好ましくはＣ_1-4アルキル、最も好ましくはメチルであることが記載されている。米国特許第６,３５５,６８９号に開示され、本方法および組成物における使用に適した具体的な実施態様としては、
Ｓ−((Ｒ)−２−(１−イミノエチルアミノ)プロピル)−Ｌ−システイン；
Ｓ−((Ｓ)−２−(１−イミノエチルアミノ)プロピル)−Ｌ−システイン；
Ｓ−((Ｒ／Ｓ)−２−(１−イミノエチルアミノ)プロピル)−Ｌ−システイン；
Ｓ−((Ｒ)−２−(１−イミノエチルアミノ)プロピル)−Ｄ−システイン；
Ｓ−((Ｓ)−２−(１−イミノエチルアミノ)プロピル)−Ｄ−システイン；
Ｓ−((Ｒ／Ｓ)−２−(１−イミノエチルアミノ)プロピル)−Ｄ−システイン；
Ｓ−((Ｒ／Ｓ)−２−(１−イミノエチルアミノ)ブチル)−Ｌ−システイン；
Ｓ−((Ｒ／Ｓ)−２−(１−イミノエチルアミノ，２−シクロプロピル)エチル)−Ｌ−システイン；および
Ｓ−((Ｒ／Ｓ)−２−(１−イミノエチルアミノ，３−ヒドロキシ)プロピル)−Ｌ−システイン、
または、それらの医薬上許容しうる塩、溶媒和物またはその生理学上機能性の誘導体が含まれる。

上記の選択的ｉＮＯＳ阻害剤は、ｉＮＯＳ酵素の基質としてアルギニンと競合して作用すると考えられる。ｉＮＯＳ阻害についての別の戦略はArnaiz等によって１９９８年８月２７日に公示された国際特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９８／０３１７６、公開番号ＷＯ９８／３７０７９(Berlex Laboratories, Inc. Richmond, CA 94804-0099 and Pharmacopeia, Inc. Princeton, NJ 08540)(Arnaiz)に記載されている。Arnaizの特許は、ｉＮＯＳモノマー二量化の阻害剤を記載している。ｉＮＯＳ酵素は、ホモダイマーであり、それぞれのモノマーは、フラビン補因子（ＦＡＤおよびＦＭＮ)用およびＮＡＤＰＨ用の結合部位を組み込んでいる還元酵素ドメインを有する。還元酵素ドメインは、別のモノマーの酸化酵素ドメインに電子を供給し、ここでＬ−アルギニンはヘム（Ｆｅ)チトクロームＰ−４５０ドメインを取り込んでいる活性部位で酸化される。テトラヒドロビオプテリン（ＢＨ4)は、ホモ二量体化に必要であり、電子移動の際にヘムレドックス状態を調節する。ｉＮＯＳモノマーは不活性であり、活性のためには二量体化が必要である。

従って、本発明の別の実施態様において、選択的ｉＮＯＳ阻害剤は、式XIII、式XIVまたは式XV：

または

〔式中、Ａは、−Ｒ⁵⁶、−ＯＲ⁵⁶、Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷、Ｐ(Ｏ) [Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷]₂、−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｃ(Ｏ)Ｒ⁵⁷、−Ｎ(Ｒ⁷⁶)Ｃ(Ｏ) ＯＲ⁵⁶、−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷⁶、−Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷¹、−Ｓ(Ｏ)_tＲ⁵⁶、−ＳＯ₂ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ⁵⁶、−ＮＨＳＯ₂Ｒ⁷⁷、−ＳＯ₂ＮＨ(Ｒ⁵⁶)Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＨＳＯ₂Ｒ⁷⁷および−ＣＨ＝ＮＯＲ⁵⁶であり；

Ｘ、ＹおよびＺは、それぞれ独立してＮまたはＣ(Ｒ¹⁹)であり；
Ｕは、それぞれＮまたはＣ(Ｒ⁶⁰)であるが、但し、ＸがＮであり、ＺおよびＹがＣＲ⁷⁴である場合のみ、ＵはＮであり；
Ｖは、Ｎ(Ｒ⁵⁹)、Ｓ、ＯまたはＣ(Ｒ⁵⁹)Ｈであり；
Ｗは、それぞれＮまたはＣＨであり；
Ｑは、直接結合、−Ｃ(Ｏ)−、−Ｏ−、−Ｃ(＝Ｎ−Ｒ⁵⁶)−、Ｓ(Ｏ)_tおよび−Ｎ(Ｒ⁶¹)−からなる群より選ばれ；
ｍは、０または１〜４の整数であり；
ｎは、０または１〜３の整数であり；
ｑは、０または１であり；
ｒは、０または１であるが、但し、ＱおよびＶがヘテロ原子である場合、ｍ、ｑおよびｒは、全て０であることはできない；
Ａが−ＯＲ⁵⁶、Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｃ(Ｏ)Ｒ⁵⁷、−Ｎ (Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)ＯＲ⁵⁷、−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷⁶、−Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ) Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷¹、−Ｓ(Ｏ)_tＲ⁵⁶（ここで、ｔは０である)または−ＮＨＳＯ₂Ｒ⁷⁷である場合、ｎ、ｑおよびｒは、すべて０であることはできない；そしてＱがヘテロ原子であり、Ａが−ＯＲ⁵⁶、Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｃ(Ｏ)Ｒ⁵⁷、−Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)ＯＲ⁵⁷、−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷⁶、Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷¹、−Ｓ(Ｏ)_tＲ⁵⁶(ｔが０である場合)または−ＮＨＳＯ₂Ｒ⁷⁷である場合、ｍおよびｎは、両方０であることはできない；
ｔは、０、１または２であり；

は、場合により置換されたＮ−ヘテロシクリルであり；

は、場合により置換されたカルボシクリルまたは場合により置換されたＮ−ヘテロシクリルであり；
Ｒ⁵⁶およびＲ⁵⁷は、それぞれ独立して水素、場合により置換されたＣ₁−Ｃ₂₀アルキル、場合により置換されたシクロアルキル、−[Ｃ₀−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶⁴、−[Ｃ₂−Ｃ₈アルケニル]−Ｒ⁶⁴、−[Ｃ₂−Ｃ₈アルキニル]−Ｒ⁶⁴、−[Ｃ₂−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶⁵（ヒドロキシによって場合により置換されている)、−[Ｃ₁−Ｃ₈]−Ｒ⁶⁶（ヒドロキシによって場合により置換されている)、場合により置換されたヘテロシクリルからなる群より選ばれるか；
またはＲ⁵⁶およびＲ⁵⁷は、それらが結合している窒素原子と一緒になって場合により置換されたＮ−ヘテロシクリルであり；
Ｒ⁵⁸は、水素、アルキル、シクロアルキル、場合により置換されたアリール、ハロアルキル、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶³、−[Ｃ₂−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶⁵、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶⁶、およびヘテロシクリル（ハロ、アルキル、アルコキシおよびイミダゾリルからなる群より選ばれる１個以上の置換基によって場合により置換されている)からなる群より選ばれるか；
またはＱが−Ｎ(Ｒ⁵⁸)−、またはＲ⁵⁸への直接結合である場合、Ｒ⁵⁸は、さらにアミノカルボニル、アルコキシカルボニル、アルキルスルホニル、モノアルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニルおよび−Ｃ(＝ＮＲ⁷³)−ＮＨ₂であってもよく；

または一緒になって−Ｑ−Ｒ⁵⁸は、−Ｃ(Ｏ)ＯＨ、−Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷または

を表し；

Ｒ⁵⁹は、水素、アルキル、アリール、アラルキルおよびシクロアルキルからなる群より選ばれるが；
但し、Ａが−Ｒ⁵⁶または−ＯＲ⁵⁶である場合、Ｒ⁵⁹は水素であることはできず、ＶがＣＨである場合、Ｒ⁵⁹はさらにヒドロキシであってもよく；
Ｒ⁶⁰は、水素、アルキル、アリール、アラルキル、ハロアルキル、場合により置換されたアラルキル、場合により置換されたアリール、−ＯＲ⁷¹、−Ｓ(Ｏ)_t−Ｒ⁷¹、Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｒ⁷⁶、Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷¹、Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)ＯＲ⁷¹、Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)Ｒ⁷¹、−[Ｃ₀−Ｃ₈アルキル]−Ｃ(Ｈ)[Ｃ(Ｏ)Ｒ⁷¹]₂および−[Ｃ₀−Ｃ₈アルキル]−Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷¹からなる群より選ばれ；
Ｒ⁶¹は、水素、アルキル、シクロアルキル、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶³、−[Ｃ₂−Ｃ₈]アルキル]−Ｒ⁶⁵、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶⁶、アシル、−Ｃ(Ｏ)Ｒ⁶³、−Ｃ(Ｏ)−
−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶³、アルコキシカルボニル、場合により置換されたアリールオ
キシカルボニル、場合により置換されたアラルコキシカルボニル、アルキルスルホニル、場合により置換されたアリール、場合により置換されたヘテロシクリル、アルコキシカルボニルアルキル、カルボキシアルキル、場合により置換されたアリールスルホニル、アミノカルボニル、モノアルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニル、場合により置換されたアリールアミノカルボニル、アミノスルホニル、モノアルキルアミノスルホニルジアルキルアミノスルホニル、アリールアミノスルホニル、アリールスルホニルアミノカルボニル、場合により置換されたＮ−ヘテロシクリル、−Ｃ(＝ＮＨ)−Ｎ(ＣＮ)Ｒ⁵⁶、−Ｃ(Ｏ)Ｒ⁷⁸−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷、−Ｃ(Ｏ)−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷⁸−Ｃ(Ｏ)ＯＲ⁵⁶からなる群より選ばれ；
Ｒ⁶³およびＲ⁶⁴は、それぞれ独立してハロアルキル、シクロアルキル(ハロ、シアノ、アルキルまたはアルコキシで場合により置換されている）、カルボシクリル（ハロ、アルキルおよびアルコキシからなる群から選ばれる１個以上の置換基で場合により置換されている）およびヘテロシクリル（アルキル、アラルキルまたはアルコキシで場合により置換されている）からなる群より選ばれ；

Ｒ⁶⁵は、それぞれハロ、アルコキシ、場合により置換されたアリールオキシ、場合により置換されたアラルコキシ、場合により置換されたＳ(Ｏ)_t−Ｒ⁷⁷、アシルアミノ、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、（トリフェニルメチル）アミノ、ヒドロキシ、メルカプト、アルキルスルホンアミドからなる群より独立して選ばれ；
Ｒ⁶⁶は、それぞれ独立してシアノ、ジ（アルコキシ）アルキル、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、モノアルキルアミノカルボニルおよびジアルキルアミノカルボニルからなる群より選ばれ；
Ｒ⁶⁷、Ｒ⁶⁸、Ｒ⁶⁹、Ｒ⁷⁰、Ｒ⁷²およびＲ⁷⁵は、それぞれ独立して水素またはアルキルであり；
Ｒ⁷¹は、それぞれ独立して水素、アルキル、場合により置換されたアリール、場合により置換されたアラルキルまたはシクロアルキルであり；
Ｒ⁷³は、水素、ＮＯ₂またはトルエンスルホニルであり；
Ｒ⁷⁴は、それぞれ独立して水素、アルキル（場合により、ヒドロキシで置換されている）、シクロプロピル、ハロまたはハロアルキルであり；
Ｒ⁷⁶は、それぞれ独立して水素、アルキル、シクロアルキル、場合により置換されたアリール、場合により置換されたアラルキル、−Ｃ(Ｏ)Ｒ⁷⁷または−ＳＯ₂Ｒ⁷⁷であるか；
またはＲ⁷⁶は、Ｒ⁵⁶と共にそれらが結合している窒素と一緒になって場合により置換されたＮ−ヘテロシクリルであるか；
またはＲ⁷⁶は、Ｒ⁷¹と共にそれらが結合している窒素と一緒になって場合により置換されたＮ−ヘテロシクリルであり；
Ｒ⁷⁷は、それぞれ独立してアルキル、シクロアルキル、場合により置換されたアリールまたは場合により置換されたアラルキルであり；
そしてＲ⁷⁸はアミノ酸残基である〕の化合物（単一の立体異性体またはそれらの混合物またはその医薬上許容しうる塩として）によって表される二量化阻害剤である。

別のｉＮＯＳ二量化阻害剤、３−(２,４−ジフルオロフェニル)−６−｛２−[４−(１Ｈ−イミダゾール−１−イルメチル)フェノキシ]エトキシ｝−２−フェニルピリジン（ＰＰＡ２５０）は、Ohtsuka 等, J Phamacol Exp Ther 第303巻, Issue 1,52-57, October 2002に記載されている。ＰＰＡ２５０は、構造：

を有する。したがって、本発明の別の実施態様において、化合物ＰＰＡ２５０は、選択的ｉＮＯＳ阻害剤として使用することができる。

治療する呼吸器の疾患または状態は、例えば、アレルゲン誘発性喘息、運動誘発性喘息、汚染物誘発性喘息、寒冷誘発性喘息、ウイルス誘発性喘息を含めた喘息状態、または正常な気流の慢性気管支炎、気道閉塞を伴う慢性気管支炎（慢性閉塞性気管支炎）、気腫、喘息性気管支炎および水疱性疾患を含めた慢性閉塞性肺疾患、ならびに嚢胞性線維症である。また、呼吸器の疾患または状態は、ハト愛好家病、農夫肺、急性呼吸不全症候群、肺炎、吸引または吸入損傷、肺中の脂肪塞栓症、肺のアシドーシス炎症、急性肺水腫、急性高山病、心臓手術後、急性肺高血圧、新生児持続性肺高血圧、周産期吸引症候群、硝子膜症、急性肺血栓塞栓症、ヘパリン−プロタミン反応、敗血症、喘息発作重積状態および酸素圧低下を含めた肺の炎症を伴う呼吸器の疾患または状態の広域スペクトルのいずれか一つであることができる。

添付図面において：
図１は、ヒト初代気道上皮細胞をＬ−ＮＩＬの存在下または非存在下で５０ｎｇ／ｍｌのＩＬ−１β、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γ（cyt）存在下で２４時間培養した後の培地の硝酸塩含量のグラフである。
図２は、細胞のタンパク質３−８％トリス−アセテートポリアクリルアミドゲルの分解およびｉＮＯＳタンパク質についての免疫ブロットの結果を示している。
図３は、（Ａ）ｉＮＯＳ選択的阻害剤（化合物ＮＮ）２０ｍｇおよび（Ｂ）化合物ＮＮの２００ｍｇを経口投与した後に排出された息の一酸化窒素（ＮＯ）レベルの変化を、軽度〜中程度の喘息患者（黒三角形）とプラシーボ（白三角形）とを比較し、そして健康な被験者（黒丸）とプラシーボ（白丸）とを比較して示している。
そして図４は、ＦＥＶ₁、血圧および心拍数における経口投与化合物ＮＮの効果を示している。

発明の詳述
以下の詳細な説明は、当業者が本発明を実施するのを助けるために提供する。しかし、本明細書に議論された典型的な実施態様における改良およびバリエーションは、添付の請求項の範囲内で当業者によって実施することができるため、この詳述は、本発明を不当に制限するものとして解釈すべきではない。

本明細書に引用された主要な文献の内容は、主要な文献内に引用された文献の内容を含めて、それらの全体として参照により本明細書に組み込まれている。

本発明は、アレルゲン誘発性喘息、運動誘発性喘息、汚染物誘発性喘息、寒冷誘発性喘息およびウイルス誘発性喘息を含めた喘息状態、正常な気流の慢性気管支炎、気道閉塞を伴う慢性気管支炎（慢性閉塞性気管支炎）、気腫、喘息性気管支炎および水疱性疾患を含めた慢性閉塞性肺疾患、ならびに嚢胞性線維症、ハト愛好家病、農夫肺、急性呼吸不全症
候群、肺炎、吸引または吸入損傷、肺中の脂肪塞栓症、肺のアシドーシス炎症、急性肺水腫、急性高山病、心臓手術後、急性肺高血圧、新生児持続性肺高血圧、周産期吸引症候群、硝子膜症、急性肺血栓塞栓症、ヘパリン−プロタミン反応、敗血症、喘息発作重積状態および酸素圧低下を含めた呼吸器の疾患または状態を予防および治療するための医薬品における治療上の使用方法を含めた、呼吸器の疾患または状態を治療または予防するために新規な選択的ｉＮＯＳ阻害剤を用いる治療方法を包含する。

治療方法は、式Ｉ〜XIから選ばれた式を有する誘導型一酸化窒素シンターゼの選択的阻害剤の呼吸器の状態に有効な量を必要な患者に投与することからなる。

ａ．定義
本明細書において相互交換して用いる用語「一酸化窒素シンターゼ」および「ＮＯＳ」は、ｅＮＯＳ、ｎＮＯＳおよびｉＮＯＳを含めた酵素一酸化窒素シンターゼのアイソフォームうちのいずれかのアイソフォームのことである。

本明細書において相互交換して用いる用語「誘導型一酸化窒素シンターゼ」、「ＮＯＳ−２」および「ｉＮＯＳ」は、酵素一酸化窒素シンターゼのＣａ⁺²−非依存性の誘導型アイソフォームのことである。

用語「一酸化窒素シンターゼ阻害剤」および「ＮＯＳ阻害剤」は、酵素一酸化窒素シンターゼの生理学的効果を低下させる化合物のことである。このような阻害剤は、一酸化窒素シンターゼの特定のアイソフォームについて選択的であってもよいし、または実質的に非選択的、すなわち一酸化窒素シンターゼの２以上のアイソフォームにおいてかなりの程度まで有効であってもよい。

用語「選択的一酸化窒素シンターゼ阻害剤」および「選択的ＮＯＳ阻害剤」は、一酸化窒素シンターゼの特定のアイソフォームの生理学的な効果を、一酸化窒素シンターゼの別のアイソフォームより優先的に低下させることができる化合物を表す。

相互交換して用いる用語「選択的誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤」、「選択的ＮＯＳ−２阻害剤」および「選択的ｉＮＯＳ阻害剤」は、一酸化窒素シンターゼのカルシウムイオン非依存性アイソフォームの生理学的な効果を、一酸化窒素シンターゼの別のアイソフォームより優先的に低下させることができる化合物を表す。一実施態様では、選択的ｉＮＯＳ阻害剤は、内皮型ＮＯＳまたは神経型ＮＯＳのいずれかと比較してインビボ投与で１００ｍｇ／ｋｇ未満の有効性（ＥＤ₅₀）が得られるようなｉＮＯＳの選択的阻害をもたらす。別の実施態様では、選択的ｉＮＯＳ阻害剤は、内皮型ＮＯＳまたは神経型ＮＯＳのいずれかと比較して齧歯類エンドトキシンモデルにおいてインビボ投与で１０ｍｇ／ｋｇ未満の有効性（ＥＤ₅₀）が得られるようなｉＮＯＳの選択的阻害をもたらす。さらなる実施態様において、ｉＮＯＳ阻害剤は、平均動脈血圧における上昇によって測定すると、ｅＮＯＳに関して約２０倍の選択性を示す。さらに別の実施態様において、ｉＮＯＳ阻害剤は、平均動脈血圧における上昇によって測定すると、ｅＮＯＳに関して１００倍またはそれより高い選択性を示す。さらに別の実施態様において、ｉＮＯＳ阻害剤は、胃腸通過または陰茎勃起における減少によって測定すると、ｎＮＯＳに関して約２０倍の選択性を示す。別の実施例では、ｉＮＯＳ阻害剤は、胃腸通過または陰茎勃起における減少によって測定すると、ｎＮＯＳに関して約１００倍またはそれより高い選択性を示す。

単独でまたは組み合わせた用語「アルキル」は、直鎖または分枝の、好ましくは１〜約１０個の炭素原子を含む、そしてより好ましくは１〜約６個の炭素原子を含む非環式アルキル基を意味する。また、「アルキル」は、３〜約７個の炭素原子、好ましくは３〜５個の炭素原子を含む環式アルキル基を包含する。前記アルキル基は、下記定義された基で場
合により置換されていてもよい。このような基の例としては、メチル、エチル、クロロエチル、ヒドロキシエチル、ｎ−プロピル、イソプロピル、ｎ−ブチル、シアノブチル、イソブチル、sec−ブチル、tert−ブチル、ペンチル、アミノペンチル、イソ−アミル、ヘキシル、オクチル等が含まれる。

用語「アルケニル」は、少なくとも一つの二重結合を含むような直鎖または分枝の不飽和の非環式炭化水素基のことである。このような基は、２〜約６個の炭素原子、好ましくは２〜約４個の炭素原子、より好ましくは２〜約３個の炭素原子を含む。前記アルケニル基は、下記定義された基で場合により置換されていてもよい。適切なアルケニル基の例としては、プロペニル、２−クロロプロピレニル、ブテン−１−イル、イソブテニル、ペンテン−１−イル、２−メチルブテン−１−イル、３−メチルブテン−１−イル、ヘキセン−１−イル、３−ヒドロキシヘキセン−１−イル、ヘプテン−１−イルおよびオクテン−１−イル等が含まれる。

用語「アルキニル」は、一つ以上の三重の結合を含み、２〜約６個の炭素原子、好ましくは２〜約４個の炭素原子、より好ましくは２〜約３個の炭素原子を含んでなる直鎖または分枝の不飽和の非環式炭化水素基のことである。前記アルキニル基は、下記定義された基で場合により置換されていてもよい。適切なアルキニル基の例としては、エチニル、プロピニル、ヒドロキシプロピニル、ブチン−１−イル、ブチン−２−イル、ペンチン−１−イル、ペンチン−２−イル、４−メトキシペンチン−２−イル、３−メチルブチン−１−イル、ヘキシン−１−イル、ヘキシン−２−イル、ヘキシン−３−イル、３,３−ジメチルブチン−１−イル基等が含まれる。

用語「アルコキシ」は、直鎖または分枝の、それぞれ１〜約６個の炭素原子、好ましくは１〜約３個の炭素原子のアルキル部分を有するオキシ含有基、例えばメトキシ基を包含する。また、用語「アルコキシアルキル」は、アルキル基に結合した一つ以上のアルコキシ基を有する、すなわちモノアルコキシアルキルおよびジアルコキシアルキル基を形成するアルキル基を包含する。このような基の例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、ブトキシおよびtert−ブトキシアルキルが含まれる。「アルコキシ」基は、１個以上のハロ原子、例えばフルオロ、クロロまたはブロモでさらに置換されて「ハロアルコキシ」基となってもよい。このような基の例としては、フルオロメトキシ、クロロメトキシ、トリフルオロメトキシ、ジフルオロメトキシ、トリフルオロエトキシ、フルオロエトキシ、テトラフルオロエトキシ、ペンタフルオロエトキシおよびフルオロプロポキシが含まれる。

用語「アルキルチオ」は、二価の硫黄原子に結合した１〜約６個の炭素原子の直鎖または分枝アルキル基を含む基を包含する。「低級アルキルチオ」の例は、メチルチオ（ＣＨ₃−Ｓ−）である。

用語「アルキルチオアルキル」は、アルキル基に結合したアルキルチオ基を包含する。このような基の例としては、メチルチオメチルが含まれる。用語「ハロ」は、ハロゲン、例えばフッ素、塩素、臭素またはヨウ素原子を意味する。

用語「ヘテロシクリル」は、１個以上の炭素原子がＮ、Ｓ、ＰまたはＯによって置き換えられた飽和または不飽和の単または多環炭素環を意味する。これには、例えば以下の構造：

（式中、Ｚ、Ｚ¹、Ｚ²またはＺ³は、Ｃ、Ｓ、Ｐ、ＯまたはＮであるが、但し、Ｚ、Ｚ¹、Ｚ²またはＺ³の一つは、二重結合によって別のＺ原子に結合する場合、または別のＯまたはＳ原子に結合する場合、炭素以外であるが、ＯまたはＳでない）が含まれる。さらに、任意の置換基は、それぞれＣである場合にしかＺ、Ｚ¹、Ｚ²またはＺ³に結合できないものとして理解される。また、用語「ヘテロシクリル」は、完全に飽和環構造、例えばピペラジニル、ジオキサニル、テトラヒドロフラニル、オキシラニル、アジリジニル、モルホリニル、ピロリジニル、ピペリジニル、チアゾリジニル、その他を含む。また、用語「ヘテロシクリル」は、部分的に不飽和の環構造、例えばジヒドロフラニル、ピラゾリニル、イミダゾリニル、ピロリニル、クロマニル、ジヒドロチオフェニル、その他を含む。

用語「ヘテロアリール」は、完全に不飽和の複素環を意味する。

「複素環」または「ヘテロアリール」のいずれにおいても、興味の分子に対して結合する位置は、環内のヘテロ原子またはなんらかの別の位置であることができる。

用語「シクロアルキル」は、各環が、３〜約７個の炭素原子、好ましくは３〜５個の炭素原子を含む単または多環式の炭素環を意味する。例としては、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロアルケニルおよびシクロヘプチルのような基が含まれる。用語「シクロアルキル」は、さらにシクロアルキル環がベンゾチエピンの７員複素環式環と同じような炭素環原子を有するスピロ系を包含する。

用語「オキソ」は、二重結合した酸素を意味する。

用語「アルコキシ」は、メトキシ基のような、酸素原子に結合したアルキル基を含む基を意味する。より好ましいアルコキシ基は、１〜約１０個の炭素原子を有する「低級アルコキシ」基である。さらにより好ましいアルコキシ基は、１〜約６個の炭素原子を有する。このような基の例としては、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソプロポキシ、ブトキシおよびtert−ブトキシが含まれる。

用語「アリール」は、完全に不飽和の単または多環炭素環を意味し、置換されたまたは非置換のフェニル、ナフチルまたはアントラセニルが含まれるが、これらに限定されない。

成句「場合により置換された」は、指示された基が、水素について置換されていてもよいが、置換されている必要はないことを意味する。従って、成句「１個以上によって場合により置換された」は、指示された基で一置換を行うことを意味するのみなれず、複数の置換が企図されることを意味する。これに関して、場合により複数の置換基が存在する場合、いずれの置換基を選ぶこともできるし、または置換基の組み合わせを選ぶこともできるし、または複数の同じ置換基を選ぶこともできる。例として、これらに限定されないが、成句「１個以上のハロまたはアルコキシによって場合により置換されたＣ₁−Ｃ₅アルキル」は、例えばメチル、エチル、プロピル、ブチルまたはペンチルが、全ての置換可能な位置で水素、フッ素、塩素または他のハロゲン、メトキシ、エトキシ、プロポキシ、イソブトキシ、tert−ブトキシ、ペントキシまたは他のアルコキシ基およびそれらの組み合わせを有することができるとみなされる。非限定的な例としては、プロピル、iso−プロピル、メトキシプロピル、フルオロメチル、フルオロプロピル、１−フルオロ−メトキシメチル等が含まれる。

化合物が構造および名称の両方によって記載される場合、名称は、記載された構造に対応するものであり、同様に、構造は記載された名称に対応するものである。

本明細書に用いる用語「患者」は、動物、一実施態様においては哺乳動物、そして典型的な実施態様においては、特に治療、診察または実験の対象となるヒトのことである。

本明細書に用いる用語「投薬」および「治療」は、患者、特にヒトを、直接または間接的に患者の状態を改善する目的で医学的に助けるすべてのプロセス、作用、適用、治療等のことである。

本明細書に用いる用語「治療化合物」は、呼吸器の疾患または状態の予防にまたは治療に有用な化合物のことである。

本明細書に用いる用語「治療上有効な」は、治療化合物の量の特性、または組合せ治療において組み合わせた治療化合物の量の特性のことである。その量または合わせた量で、呼吸器の疾患または状態を予防し、回避し、緩和しまたは取り除くという目標が達成される。

用語「プロドラッグ」は、患者に投与され、続いて吸収された後にいくつかのプロセス、例えば代謝プロセスを経てインビボで活性種に転化される、薬物前駆体である化合物のことである。転化プロセスからの別の生成物は、身体によって容易に排出される。より好ましいプロドラッグは、一般に安全に許容される生成物を生じる転化プロセスを含むものである。

用語「喘息」は、アレルゲンまたはアレルゲンの組み合わせ、例えばチリダニおよびカビ、ウイルス性または細菌性感染症、特に「風邪」ウイルスによる感染、環境汚染物、例えば化学物質の蒸気または喫煙、運動時のような肉体的に激しい活動、ストレスまたは寒冷空気の吸入にさらされることよって引き起こされる、１）気管支痙攣、すなわち、気道筋収縮による可変性のおよび可逆的な気道閉塞、２）気道内層の炎症、および３）気道中に過剰の粘液を生じる気管支の反応亢進、のいずれか一つまたは三つの主要因子の組み合わせによって生じる一時的な呼吸困難を特徴とする呼吸器障害のことである。

用語「喘息状態」は、個人的ないずれか一つまたは複数の喘息の誘因にさらされて喘息の発作にかかっている人の特徴のことである。個別的には、例えばアレルゲン誘発性喘息、運動誘発性喘息、汚染物誘発性喘息、ウイルス誘発性喘息または寒冷誘発性喘息にかかることを特徴としている。

本明細書において相互交換して用いる用語「慢性閉塞性肺疾患」および「ＣＯＰＤ」は、最大呼気流量が低下する、そして肺を空にするのに時間がかかることを特徴とする慢性障害または障害の組み合わせのことであり、これは数ヶ月にわたってあまり変化せず、従来の気管支拡張剤では可逆性でないかまたは最小限の可逆性しかない。ほとんど一般には、ＣＯＰＤは、慢性気管支炎の組み合わせであり、すなわち、３ヵ月から約２年ほど続く咳および痰、そして気腫、すなわち肺胞の損傷がある。しかし、ＣＯＰＤには、正常な気流の慢性気管支炎、気道閉塞を伴う慢性気管支炎（慢性閉塞性気管支炎）、気腫、喘息性気管支炎および水疱性疾患およびそれらの組み合わせが含まれうる。

用語「呼吸器の」は、鼻、咽喉、喉頭、気管、気管支および肺を含めた身体系を通して酸素を身体に取り込み、二酸化炭素を放出するプロセスのことである。

用語「呼吸器の疾患または状態」は、炎症を伴い特に気管、気管支および肺を含めた呼吸器系の成分に影響を及ぼすいくつかの慢性病のいずれか一つのことである。このような慢性病としては、アレルゲン誘発性喘息、運動誘発性喘息、汚染物誘発性喘息、寒冷誘発性喘息、ストレス誘発性喘息およびウイルス誘発性喘息を含めた喘息状態、正常な気流の慢性気管支炎、気道閉塞を伴う慢性気管支炎（慢性閉塞性気管支炎）、気腫、喘息性気管支炎および水疱性疾患を含めた慢性閉塞性肺疾患、ならびに嚢胞性線維症、ハト愛好家病、農夫肺、急性呼吸不全症候群、肺炎、吸引または吸入損傷、肺中の脂肪塞栓症、肺のアシドーシス炎症、急性肺水腫、急性高山病、心臓手術後、急性肺高血圧、新生児持続性肺高血圧、周産期吸引症候群、硝子膜症、急性の肺血栓塞栓症、ヘパリン−プロタミン反応、敗血症、喘息発作重積状態および酸素圧低下を含めた炎症を伴う他の肺疾患が含まれる。

本明細書に用いる用語「呼吸器の状態に有効な量」は、治療上の化合物の量の特徴、または組み合わせ治療において合わせた治療化合物の量の特徴のことである。その量または合わせた量で、呼吸器の疾患または状態を予防し、回避し、緩和しまたは取り除く目標が達成される。

選択的ｉＮＯＳ阻害剤の一つの具体的な例において、治療は、式Ｉ

Ｒ⁴は、Ｈおよび複素環式環からなる群より選ばれ、ここで環の少なくとも一つの構成メンバーは、炭素であり、そして１〜約４個のヘテロ原子は、酸素、窒素および硫黄から独立して選ばれ、そして前記複素環式環はヘテロアリールアミノ、Ｎ−アリール−Ｎ−アルキルアミノ、Ｎ−ヘテロアリールアミノ−Ｎ−アルキルアミノ、ハロアルキルチオ、アルカノイルオキシ、アルコキシ、ヘテロアラルコキシ、シクロアルコキシ、シクロアルケニルオキシ、ヒドロキシ、アミノ、チオ、ニトロ、低級アルキルアミノ、アルキルチオ、アルキルチオアルキル、アリールアミノ、アラルキルアミノ、アリールチオ、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アルキルスルホンアミド、アルキルアミノスルホニル、アミドスルホニル、モノアルキルアミドスルホニル、ジアルキルアミドスルホニル、モノアリールアミドスルホニル、アリールスルホンアミド、ジアリールアミドスルホニル、モノアルキルモノアリールアミドスルホニル、アリールスルフィニル、アリールスルホニル、ヘテロアリールチオ、ヘテロアリールスルフィニル、ヘテロアリールスルホニル、アルカノイル、アルケノイル、アロイル、ヘテロアロイル、アラルカノイル、ヘテロアラルカノイル、ハロアルカノイル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレンジオキシ、ハロアルキレンジオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、低級シクロアルキルアルキル、低級シクロアルケニルアルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヒドロキシハロアルキル、ヒドロキシアラルキル、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシヘテロアラルキル、ハロアルコキシアルキル、アリール、アラルキル、アリールオキシ、アラルコキシ、アリールオキシアルキル、飽和ヘテロシクリル、部分飽和ヘテロシクリル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールオキシアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、アリールアルケニル、ヘテロアリールアルケニル、シアノアルキル、ジシアノアルキル、カルボキシアミドアルキル、ジカルボキシアミドアルキル、シアノカルボアルコキシアルキル、カルボアルコキシアルキル、ジカルボアルコキシアルキル、シアノシクロアルキル、ジシアノシクロアルキル、カルボキシアミドシクロアルキル、ジカルボキシアミドシクロアルキル、カルボアルコキシシアノシクロアルキル、カルボアルコキシシクロアルキル、ジカルボアルコキシシクロアルキル、ホルミルアルキル、アシルアルキル、ジアルコキシホスホノアルキル、ジアラルコキシホスホノアルキル、ホスホノアルキル、ジアルコキシホスホノアルコキシ、ジアラルコキシホスホノアルコキシ、ホスホノアルコキシ、ジアルコキシホスホノアルキルアミノ、ジアラルコキシホスホノアルキルアミノ、ホスホノアルキルアミノ、ジアルコキシホスホノアルキル、ジアラルコキシホスホノアルキル、グアニジノ、アミジノ、およびアシルアミノで場合により置換されてもよい）を有する化合物またはその医薬上許容しうる塩；

式II

（式中、Ｘは、−Ｓ−、−Ｓ(Ｏ)−および−Ｓ(Ｏ)₂−からなる群より選ばれる。好ましくは、Ｘは−Ｓ−である。Ｒ¹²は、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₂−Ｃ₆アルケニル、Ｃ₂−Ｃ₆アルキニル、Ｃ₁−Ｃ₅アルコキシ−Ｃ₁アルキル、およびＣ₁−Ｃ₅アルキルチオ−Ｃ₁アルキルからなる群より選ばれ、その際、これらの基は、それぞれ−ＯＨ、アルコキシおよびハロゲンからなる群より選ばれる１個以上の置換基によって場合により置換されている。好ましくは、Ｒ¹²は、−ＯＨ、アルコキシおよびハロゲンからなる群より選ばれる置換基で場合により置換されたＣ₁−Ｃ₆アルキルである。Ｒ¹³およびＲ¹⁸に関して、Ｒ¹⁸は、−ＯＲ²⁴および−Ｎ(Ｒ²⁵)(Ｒ²⁶)からなる群より選ばれ、そしてＲ¹³は、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃ(Ｏ)−Ｒ²⁷、−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ²⁸および−Ｃ(Ｏ)−Ｓ−Ｒ²⁹からなる群より選ばれるか；またはＲ¹⁸は−Ｎ(Ｒ³⁰)−であり、そしてＲ¹³は−Ｃ(Ｏ)−であり、ここでＲ¹⁸およびＲ¹³は、それらが結合している原子と一緒になって環を形成するか；またはＲ¹⁸は−Ｏ−であり、そしてＲ¹³は−Ｃ(Ｒ³¹)(Ｒ³²)−であり、ここでＲ¹⁸およびＲ¹³は、それらが結合している原子と一緒になって環を形成する。Ｒ¹³が、−Ｃ(Ｒ３²¹)(Ｒ³²)−である場合、Ｒ¹⁴は−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ³³であり、でなければＲ¹⁴は−Ｈである。Ｒ¹¹、Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶、およびＲ¹⁷は、独立して−Ｈ、ハロゲン、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₂−Ｃ₆アルケニル、Ｃ₂−Ｃ₆アルキニルおよびＣ₁−Ｃ₅アルコキシ−Ｃ₁アルキルからなる群より選ばれる。Ｒ¹⁹およびＲ²⁰は、独立して−Ｈ、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₂−Ｃ₆アルケニル、Ｃ₂−Ｃ₆アルキニルおよびＣ₁−Ｃ₅アルコキシ−Ｃ₁アルキルからなる群より選ばれる。Ｒ²¹およびＲ²²に関して、Ｒ²¹は、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ³⁴および−Ｃ(Ｏ)−Ｓ−Ｒ³⁵からなる群より選ばれ、そしてＲ²²は、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ³⁶および−Ｃ(Ｏ)−Ｓ−Ｒ³⁷からなる群より選ばれるか；またはＲ²¹は−Ｏ−であり、そしてＲ²²は−Ｃ(Ｏ)−であり、ここでＲ²¹およびＲ²²は、それらが結合している原子と一緒になって環を形成するか；またはＲ²¹は−Ｃ(Ｏ)−であり、そしてＲ²²は−Ｏ−であり、ここでＲ²¹およびＲ²²は、それらが結合している原子と一緒になって環を形成する。Ｒ²³は、Ｃ₁アルキルである。Ｒ²⁴は、−ＨおよびＣ₁−Ｃ₆アルキルからなる群より選ばれ、その際、Ｒ²⁴がＣ₁−Ｃ₆アルキルである場合、Ｒ²⁴は、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群より選ばれる１個以上の基によって場合により置換されている。Ｒ²⁵およびＲ²⁶に関して、Ｒ²⁵は、−Ｈ、アルキルおよびアルコキシからなる群より選ばれ、そしてＲ²⁶は、−Ｈ、−ＯＨ、アルキル、アルコキシ、−Ｃ(Ｏ)−Ｒ³⁸、−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ³⁹および−Ｃ(Ｏ)−Ｓ−Ｒ⁴⁰からなる群より選ばれ；その際、Ｒ²⁵およびＲ²⁶が独立してアルキルまたはアルコキシである場合、Ｒ²⁵およびＲ²⁶は、独立してシクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群より選ばれる１個以上の基で場合により置換されているか；またはＲ²⁵は−Ｈであり；そしてＲ²⁶はシクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群より選ばれる。Ｒ²⁷、Ｒ²⁸、Ｒ²⁹、Ｒ³⁰、Ｒ³¹、Ｒ³²、Ｒ³³、Ｒ³⁴、Ｒ³⁵、Ｒ³⁶、Ｒ³⁷、Ｒ³⁸、Ｒ³⁹およびＲ⁴⁰は、−Ｈおよびアルキルからなる群より独立して選ばれ、その際、アルキルは、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群より選ばれる１個以上の基によって場合により置換されている。Ｒ¹¹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁷、Ｒ¹⁸、Ｒ19⁹、Ｒ²⁰、Ｒ²¹、Ｒ²²、Ｒ²³、Ｒ²⁴、Ｒ²⁵、Ｒ²⁶、Ｒ²⁷、Ｒ²⁸、Ｒ²⁹、Ｒ³⁰、Ｒ³¹、Ｒ³²、Ｒ³³、Ｒ³⁴、Ｒ³⁵、Ｒ³⁶、Ｒ³⁷、Ｒ³⁸、Ｒ³⁹およびＲ⁴⁰のいずれかが独立してアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルキルチオ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群より選ばれる部分である場合、その部分は、−ＯＨ、アルコキシおよびハロゲンからなる群より選ばれる１個以上の置換基によって場合により置換されている）に相当する構造を有する化合物またはその医薬上許容しうる塩；

式III

式IV

の化合物またはその医薬上許容しうる塩；

式Ｖ

（式中、Ｒ⁴³は、水素、ハロ、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル、およびアルコキシまたは１個以上のハロによって置換されたＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群より選ばれ；
Ｒ⁴⁴は、水素、ハロ、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル、およびアルコキシまたは１個以上のハロによって置換されたＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群より選ばれ；
Ｒ⁴⁵は、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル、またはアルコキシもしくは１個以上のハロによって置換されたＣ₁−Ｃ₅アルキルである）の化合物またはその医薬上許容しうる塩；

式VI

式VII

式VIII

式IX

式Ｘ

（式中、Ｒ⁵⁵は、Ｃ₁−Ｃ₅アルキルであり、前記Ｃ₁−Ｃ₅アルキルはハロまたはアルコキシによって場合により置換されており、前記アルコキシは１個以上のハロによって場合により置換されている）の化合物またはその医薬上許容しうる塩
により促進される。

別の例示的な化合物において、誘導型一酸化窒素シンターゼ選択的阻害剤は、式XIを有する化合物またはその医薬上許容しうる塩である。化合物XIは、以前に国際公開番号ＷＯ
００／２６１９５（２０００年５月１１日公示）に記載されており、これは参照により本明細書に組み込まれている。

（式中、Ｒ⁷⁹は、Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_3-4シクロアルキル、Ｃ_1-4ヒドロキシアルキルおよびＣ_1-4ハロアルキルより選ばれる）の選択的ｉＮＯＳ阻害剤を記載し、請求している。米国特許第６,３５５,６８９号の説明では、Ｒ⁷⁹が好ましくはＣ_1-4アルキル、最も好ましくはメチルであることが記載されている。米国特許第６,３５５,６８９号に開示され、本方法および組成物における使用に適した具体的な実施態様としては、
Ｓ−((Ｒ)−２−(１−イミノエチルアミノ)プロピル)−Ｌ−システイン；
Ｓ−((Ｓ)−２−(１−イミノエチルアミノ)プロピル)−Ｌ−システイン；
Ｓ−((Ｒ／Ｓ)−２−(１−イミノエチルアミノ)プロピル)−Ｌ−システイン；
Ｓ−((Ｒ)−２−(１−イミノエチルアミノ)プロピル)−Ｄ−システイン；
Ｓ−((Ｓ)−２−(１−イミノエチルアミノ)プロピル)−Ｄ−システイン；
Ｓ−((Ｒ／Ｓ)−２−(１−イミノエチルアミノ)プロピル)−Ｄ−システイン；
Ｓ−((Ｒ／Ｓ)−２−(１−イミノエチルアミノ)ブチル)−Ｌ−システイン；
Ｓ−((Ｒ／Ｓ)−２−(１−イミノエチルアミノ，２−シクロプロピル)エチル)−Ｌ−システイン；および
Ｓ−((Ｒ／Ｓ)−２−(１−イミノエチルアミノ，３−ヒドロキシ)プロピル)−Ｌ−システイン、
または、それらの医薬上許容しうる塩、溶媒和物または生理学上機能性の誘導体が含まれる。

上記の選択的ｉＮＯＳ阻害剤は、ｉＮＯＳ酵素の基質としてアルギニンと競合して作用すると考えられる。ｉＮＯＳ阻害についての別の戦略はArnaiz等によって１９９８年８月２７日に公示された国際特許出願番号ＰＣＴ／ＵＳ９８／０３１７６、公開番号ＷＯ９８／３７０７９(Berlex Laboratories, Inc. Richmond, CA 94804-0099 and Pharmacopeia, Inc. Princeton, NJ 08540)(Arnaiz)に記載されている。Arnaizの出願は、ｉＮＯＳモノマー二量化の阻害剤を記載している。ｉＮＯＳ酵素は、ホモダイマーであり、それぞれのモノマーは、フラビン補因子（ＦＡＤおよびＦＭＮ)用およびＮＡＤＰＨ用の結合部位を組み込んでいる還元酵素ドメインを有する。還元酵素ドメインは、別のモノマーの酸化酵素ドメインに電子を供給し、ここでＬ−アルギニンは、ヘム（Ｆｅ)チトクロームＰ−４５０ドメインを取り込んでいる活性部位で酸化される。テトラヒドロビオプテリン（ＢＨ4)は、ホモ二量体化に必要であり、電子移動の際にヘムレドックス状態を調節する。ｉＮＯＳモノマーは不活性であり、活性のためには二量体化が必要である。

または

〔式中、Ａは、−Ｒ⁵⁶、−ＯＲ⁵⁶、Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷、Ｐ(Ｏ) [Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷]₂、−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｃ(Ｏ)Ｒ⁵⁷、−Ｎ(Ｒ⁷⁶)Ｃ(Ｏ)ＯＲ⁵⁶、−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷⁶、−Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷¹、−Ｓ(Ｏ)_tＲ⁵⁶、−ＳＯ₂ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ⁵⁶、−ＮＨＳＯ₂Ｒ⁷⁷、−ＳＯ₂ＮＨ(Ｒ⁵⁶)Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＨＳＯ₂Ｒ⁷⁷および−ＣＨ＝ＮＯＲ⁵⁶であり；

Ｘ、ＹおよびＺは、それぞれ独立してＮまたはＣ(Ｒ¹⁹)であり；
Ｕは、それぞれＮまたはＣ(Ｒ⁶⁰)であるが、但し、ＸがＮであり、ＺおよびＹがＣＲ⁷⁴である場合のみ、ＵはＮであり；
Ｖは、Ｎ(Ｒ⁵⁹)、Ｓ、ＯまたはＣ(Ｒ⁵⁹)Ｈであり；
Ｗは、それぞれＮまたはＣＨであり；
Ｑは、直接結合、−Ｃ(Ｏ)−、−Ｏ−、−Ｃ(＝Ｎ−Ｒ⁵⁶)−、Ｓ(Ｏ)_tおよび−Ｎ(Ｒ⁶¹)−からなる群より選ばれ；
ｍは、０または１〜４の整数であり；
ｎは、０または１〜３の整数であり；
ｑは、０または１であり；
ｒは、０または１であるが、但し、ＱおよびＶがヘテロ原子である場合、ｍ、ｑおよびｒは、全て０であることはできない；
Ａが−ＯＲ⁵⁶、Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｃ(Ｏ)Ｒ⁵⁷、−Ｎ (Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)ＯＲ⁵⁷、−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷⁶、−Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷¹、−Ｓ(Ｏ)_tＲ⁵⁶（ここで、ｔは０である)または−ＮＨＳＯ₂Ｒ⁷⁷である場合、ｎ、ｑおよびｒは、すべて０であることはできない；そしてＱがヘテロ原子であり、Ａが−ＯＲ⁵⁶、Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｃ(Ｏ)Ｒ⁵⁷、−Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)ＯＲ⁵⁷、−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷⁶、Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷¹、−Ｓ(Ｏ)_tＲ⁵⁶(ｔが０である場合)または−ＮＨ
ＳＯ₂Ｒ⁷⁷である場合、ｍおよびｎは、両方０であることはできない；
ｔは、０、１または２であり；

は、場合により置換されたＮ−ヘテロシクリルであり；

は、場合により置換されたカルボシクリルまたは場合により置換されたＮ−ヘテロシクリルであり；

Ｒ⁵⁶およびＲ⁵⁷は、それぞれ独立して水素、場合により置換されたＣ₁−Ｃ₂₀アルキル、場合により置換されたシクロアルキル、−[Ｃ₀−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶⁴、−[Ｃ₂−Ｃ₈アルケニル]−Ｒ⁶⁴、−[Ｃ₂−Ｃ₈アルキニル]−Ｒ⁶⁴、−[Ｃ₂−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶⁵（ヒドロキシによって場合により置換されている)、−[Ｃ₁−Ｃ₈]−Ｒ⁶⁶（ヒドロキシによって場合により置換されている)、場合により置換されたヘテロシクリルからなる群より選ばれるか；
またはＲ⁵⁶およびＲ⁵⁷は、それらが結合している窒素原子と一緒になって場合により置換されたＮ−ヘテロシクリルであり；
Ｒ⁵⁸は、水素、アルキル、シクロアルキル、場合により置換されたアリール、ハロアルキル、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶³、−[Ｃ₂−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶⁵、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶⁶、およびヘテロシクリル（ハロ、アルキル、アルコキシおよびイミダゾリルからなる群より選ばれる１個以上の置換基によって場合により置換されている)からなる群より選ばれるか；
またはＱが−Ｎ(Ｒ⁵⁸)−、またはＲ⁵⁸への直接結合である場合、Ｒ⁵⁸は、さらにアミノカルボニル、アルコキシカルボニル、アルキルスルホニル、モノアルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニルおよび−Ｃ(＝ＮＲ⁷³)−ＮＨ₂であってもよく；

を表し；

Ｒ⁵⁹は、水素、アルキル、アリール、アラルキルおよびシクロアルキルからなる群より選ばれるが；
但し、Ａが−Ｒ⁵⁶または−ＯＲ⁵⁶である場合、Ｒ⁵⁹は水素であることはできず、ＶがＣＨである場合、Ｒ⁵⁹はさらにヒドロキシであってもよく；
Ｒ⁶⁰は、水素、アルキル、アリール、アラルキル、ハロアルキル、場合により置換されたアラルキル、場合により置換されたアリール、−ＯＲ⁷¹、−Ｓ(Ｏ)_t−Ｒ⁷¹、Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｒ⁷⁶、Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷¹、Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)ＯＲ⁷¹、Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)Ｒ⁷¹、−[Ｃ₀−Ｃ₈アルキル]−Ｃ(Ｈ)[Ｃ(Ｏ)Ｒ⁷¹]₂および−[Ｃ₀−Ｃ₈アルキル]−Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷¹からなる群より選ばれ；
Ｒ⁶¹は、水素、アルキル、シクロアルキル、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶³、−[Ｃ₂−Ｃ₈]アルキル]−Ｒ⁶⁵、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶⁶、アシル、−Ｃ(Ｏ)Ｒ⁶³、−Ｃ(Ｏ)−
−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶³、アルコキシカルボニル、場合により置換されたアリールオキシカルボニル、場合により置換されたアラルコキシカルボニル、アルキルスルホニル、場合により置換されたアリール、場合により置換されたヘテロシクリル、アルコキシカルボニルアルキル、カルボキシアルキル、場合により置換されたアリールスルホニル、アミノカルボニル、モノアルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニル、場合により置換されたアリールアミノカルボニル、アミノスルホニル、モノアルキルアミノスルホニルジアルキルアミノスルホニル、アリールアミノスルホニル、アリールスルホニルアミノカルボニル、場合により置換されたＮ−ヘテロシクリル、−Ｃ(＝ＮＨ)−Ｎ(ＣＮ)Ｒ⁵⁶、−Ｃ(Ｏ)Ｒ⁷⁸−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷、−Ｃ(Ｏ)−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷⁸−Ｃ(Ｏ)ＯＲ⁵⁶からなる群より選ばれ；
Ｒ⁶³およびＲ⁶⁴は、それぞれ独立してハロアルキル、シクロアルキル(ハロ、シアノ、アルキルまたはアルコキシで場合により置換されている）、カルボシクリル（ハロ、アルキルおよびアルコキシからなる群から選ばれる１個以上の置換基で場合により置換されている）およびヘテロシクリル（アルキル、アラルキルまたはアルコキシで場合により置換されている）からなる群より選ばれ；
Ｒ⁶⁵は、それぞれ独立してハロ、アルコキシ、場合により置換されたアリールオキシ、場合により置換されたアラルコキシ、場合により置換されたＳ(Ｏ)_t−Ｒ⁷⁷、アシルアミノ、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、（トリフェニルメチル）アミノ、ヒドロキシ、メルカプト、アルキルスルホンアミドからなる群より選ばれ；
Ｒ⁶⁶は、それぞれ独立してシアノ、ジ（アルコキシ）アルキル、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、モノアルキルアミノカルボニルおよびジアルキルアミノカルボニルからなる群より選ばれ；
Ｒ⁶⁷、Ｒ⁶⁸、Ｒ⁶⁹、Ｒ⁷⁰、Ｒ⁷²およびＲ⁷⁵は、それぞれ独立して水素またはアルキルであり；
Ｒ⁷¹は、それぞれ独立して水素、アルキル、場合により置換されたアリール、場合により置換されたアラルキルまたはシクロアルキルであり；
Ｒ⁷³は、水素、ＮＯ₂またはトルエンスルホニルであり；
Ｒ⁷⁴は、それぞれ独立して水素、アルキル（場合により、ヒドロキシで置換されている）、シクロプロピル、ハロまたはハロアルキルであり；
Ｒ⁷⁶は、それぞれ独立して水素、アルキル、シクロアルキル、場合により置換されたアリール、場合により置換されたアラルキル、−Ｃ(Ｏ)Ｒ⁷⁷または−ＳＯ₂Ｒ⁷⁷であるか；
またはＲ⁷⁶は、Ｒ⁵⁶と共にそれらが結合している窒素と一緒になって場合により置換されたＮ−ヘテロシクリルであるか；
またはＲ⁷⁶は、Ｒ⁷¹と共にそれらが結合している窒素と一緒になって場合により置換されたＮ−ヘテロシクリルであり；
Ｒ⁷⁷は、それぞれ独立してアルキル、シクロアルキル、場合により置換されたアリールまたは場合により置換されたアラルキルであり；
そしてＲ⁷⁸はアミノ酸残基である〕の化合物（単一の立体異性体またはそれらの混合物またはその医薬上許容しうる塩として）によって表される二量化阻害剤である。

を有する。

したがって、本発明の別の実施態様において、化合物ＰＰＡ２５０は、選択的ｉＮＯＳ阻害剤として使用することができる。

具体的な実施例
以下の合成例は、例示的な目的で示しており、決して本発明の範囲を限定しようとするものではない。異性体が定義されてない場合、適当なクロマトグラフィの方法を使用して単一の異性体が得られる。

実施例Ａ

(２Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩，一水和物

ＥＸ−Ａ−１)
トリメチルシリルクロリド(１０７.８ｇ，１.００mol)をメタノール３００ｍＬ中のＬ−グルタミン酸(３０.００ｇ，０.２０mol)の０℃に冷やした溶液に滴加した。生成した無色透明な溶液を室温で撹拌した。１８時間後、薄層クロマトグラフィ(ヘキサン中の３０％酢酸エチル)による分析は出発物質が残っていないことを示した。次いで、反応物を０のＣ℃に冷やし、トリエチルアミン(１３４ｇ，１.３３mol)を加え、そして白色沈殿が形成された。ジ−tert−ブチルジカーボネート(４９ｇ，０.２３mol)を加え、混合物を室温に加温させた。３時間後、溶媒を除去し、ジエチルエーテル７００ｍＬを加えた。溶液を濾過し、濾過ケーキをさらにジエチルエーテル５００ｍＬですすいだ。濾液を濃縮して黄褐色油６０.８ｇ(＞９５％)を得、これをさらに精製することなく次の工程にかけた。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝２９８.１[Ｍ＋Ｎａ]⁺ Ｃ₁₂Ｈ₂₁ＮＯ₆のＨＲＭＳ計算値：２７６.１４４７ [Ｍ＋Ｈ]⁺，実測値：２７６.１４６２ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ 1.45 (s, 9H), 1.95 (m, 1H), 2.50 (m, 1H), 2.40 (m, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.75 (s, 3H), 4.32 (m, 1H), 5.15 (m, 1H)。

ＥＸ−Ａ−２)
室温でアセトニトリル３００ｍＬ中のＥＸ−Ａ−１の粗生成物(６０ｇ，０.２２mol)の溶液に、４−ジメチルアミノピリジン(５.３ｇ，０.４４mol)およびジ−tert−ブチルジカーボネート(７９.２ｇ，０.３６mol)を加えた。生成した混合物を室温で２日撹拌し、その時点で、薄層クロマトグラフィ(ヘキサン中２５％酢酸エチル)による分析は、大部分の出発物質が消費されたことを示した。溶媒を真空下で除去し、赤色の油８５ｇを得た。粗物質を、酢酸エチル／ヘキサン(１：１０)で溶出するシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製し、淡黄色固形物として所望のジ−Ｂｏｃ生成物６６.４ｇ(８１％)を得た。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝３９８.２ [Ｍ＋Ｎａ]⁺ Ｃ₁₇Ｈ₂₉ＮＯ₈のＨＲＭＳ計算値：３９８.１７９１ [Ｍ＋Ｎａ]⁺，実測値：３９８.１７９０ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ 1.48 (s, 18H), 2.19 (m, 1H), 2.41 (m, 2H), 2.46 (m, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.70 (s, 3H), 4.91 (dd, 1H)。

ＥＸ−Ａ−３)
ＤＩＢＡＬ(ヘキサン中１.０Ｍ溶液６４ｍＬ，６３.９mmol)の溶液を無水ジエチルエーテル４００ｍＬ中のＥＸ−Ａ−２(２０ｇ，５３.３mmol)の冷たい溶液に−７８℃で３０分間かけて滴加した。−７８℃でさらに３０分間後、溶液を、水(１２ｍＬ，６６６mmol)でクエンチし、室温に加温させた。濁った混合物を酢酸エチル３５０ｍＬで希釈し、ＭｇＳＯ₄で乾燥、そしてセライトのパッドを通して濾過した。濾液を濃縮して黄色の油にした。粗物質(黄色油１８.９ｇ)を精製し、酢酸エチル／ヘキサン(１:４)で溶出するシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによって透明な油として所望のアルデヒド生成物１３.８ｇ(７５％)を得た。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝３６８.２[Ｍ＋Ｎａ]⁺ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃) δ 1.48 (s, 18H), 2.19 (m, 1H), 2.41 (m, 2H), 2.46 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 4.91 (dd, 1 H), 9.8 (s, 1 H)。

ＥＸ−Ａ−４)
ＴＨＦ２０ｍＬ中のトリエチル２−フルオロホスホノアセテート(４.６７ｇ，１９.３mmol)の冷たい(−７８℃)溶液に、ｎ−ブチルリチウム(１０.９ｍＬ，ヘキサン中１.６Ｍ，１７.５mmol)を加えた。この混合物を−７８℃で２０分間撹拌して明るい黄色溶液を得た。次いで、ＴＨＦ５ｍＬ中のＥＸ−Ａ−３の生成物(６.０ｇ，１７.５mmol)の溶液をシリンジにより加え、得られた混合物を−７８℃で２時間撹拌し、その時点で、薄層クロマトグラフィ(ヘキサン中の３０％酢酸エチル)による分析は出発物質が残っていないことを示した。反応物を、飽和水性ＮＨ₄Ｃｌ(３０ｍＬ)で−７８℃にクエンチした。有機層を集め、水性層をジエチルエーテル(２×５０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機物を、水(１００ｍＬ)およびブライン(１００ｍＬ)で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して濃縮した。黄色油の粗物質８.６ｇを、シリカゲル上で酢酸エチル／ヘキサン(１:４)で溶出するフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して透明な油として所望のフルオロオレフィン生成物６.０５ｇ(７９％)を得た。¹ＨＮＭＲおよび¹⁹ＦＮＭＲからは、単離した生成物がＥ：Ｚの比率９５：５を有することがわかった。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝４５６.２[Ｍ＋Ｎａ]⁺Ｃ₂₀Ｈ₃₂ＮＯ₈ＦのＨＲＭＳ計算値：４５６.２０１０[Ｍ＋Ｎａ]⁺，実測値：４５６.２０９４，¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃) δ1.48 (s, 18H), 2.0 (m,1H), 2.25 (m,1H), 2.6 (m, 2H), 3.7 (s, 3H), 4.25 (m, 2H), 4.9 (m, 1H), 5.9 (dt, ビニル, 1H, J = 20 Hz), 6.2 (dt, ビニル, 1H, J = 30Hz)。 ¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ−129. 12 (d, 0. 09F, J = 31 Hz, 9％ Z-異性体),-121. 6 (d, 0.91 F, J = 20 Hz, 91 ％ E-異性体)

ＥＸ−Ａ−５)
メタノール２０ｍＬ中のＥＸ−Ａ−４(８０５ｍｇ，１.８６mmol)の溶液に、室温で固体ＮａＢＨ₄(８４４ｍｇ，２２.３mmol)を２００ｍｇずつ加えた。反応物を周囲温度で１８時間撹拌し、その時点で、薄層クロマトグラフィ(ヘキサン中の３０％酢酸エチル)による分析は大部分の出発物質が消費されたことを示した。反応物を飽和水性ＮＨ₄Ｃｌ２０ｍＬでクエンチし、そして酢酸エチル(２×３５ｍＬ)で抽出した。有機層を合わせて、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して濃縮した。透明な油の粗物質７００ｍｇを酢酸エチル／ヘキサン(１:４)で溶出するシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して透明な油として所望のアリル型アルコール生成物３５３ｍｇ(４８％)を得、¹⁹ＦＮＭＲによれば、これには主として所望のＥ異性体が含まれていた。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝４１４.２ [ Ｍ＋Ｎａ]⁺ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ 1.48 (s, 18H), 1.95 (m, 1H), 2.1 (m, 1H), 2.2 (m, 1H), 2.35 (t, 1H), 3.7 (s, 3H), 4.25 (m, 2H), 4.8 (m, 1H), 5.15 (dt, 1H, J = 20Hz) ¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃) δ−119. 1 (d, 0.02F, J = 37 Hz, 2％
Z-異性体),-111.8 (d, 0.98F, J = 24 Hz, 98％ E-異性体)。

ＥＸ−Ａ−６)
ＴＨＦ５０ｍＬ中のＥＸ−Ａ−５(１.３７ｇ，３.５mmol)、ポリマー担持されたトリフェニルホスフィン(３mmol／ｇ，１.８６ｇ，５.６mmol)および３−メチル−１,２,４−オキサジアゾリン−５−オン(４５０ｍｇ，４.５５mmol)の混合物に、ジメチルアゾジカルボキシレート(８２０ｍｇ，５.６mmol)を滴加した。反応物を、室温で１時間撹拌し、その時点で、薄層クロマトグラフィ(ヘキサン中の４０％酢酸エチル)による分析は出発物質が残っていないことを示した。セライトを通して混合物を濾過し、濾液を濃縮した。生成した黄色の油を塩化メチレン３０ｍＬと水３０ｍＬとの間で分配した。有機層を分離し、水(１×３０ｍＬ)およびブライン(１×３０ｍＬ)で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して濃縮した。粗物質(黄色油１.８ｇ)を酢酸エチル／ヘキサン(１:４)で溶出するシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製し、透明な油として所望の保護されたＥ−アリル型アミジン生成物６７０ｍｇ(４０％)を得、¹⁹ＦＮＭＲによれば、これには所望のＥ−異性体のみ含まれていた。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝４９６.２ [Ｍ＋Ｎａ]⁺ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ1.48 (s, 18H), 1.85 (m, 1H), 2.2 (m, 3H), 2.25 (s, 3H), 3.64 (s, 3H), 4.25 (m, 2H), 4.8 (m, 1H), 5.3 (dt, 1 H, J = 20Hz)。 ¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ−110.8 (q, 1 F, J = 20Hz)

ＥＸ−Ａ−７)
ＥＸ−Ａ−６の生成物(６７０ｍｇ，１.４mmol)をメタノール２５ｍＬおよび水中２５％酢酸２５ｍＬ中に溶解した。亜鉛粉末(８３０ｍｇ，１２.７mmol)を加え、混合物を超音波処理下で８時間撹拌し、その時点で、ＨＰＬＣ分析により出発物質の２０％しか残っていないことがわかった。Ｚｎ粉末を反応混合物から濾過し、濾液を−２０℃で１２時間保存した。濾液を室温に加温させ、さらに氷酢酸(７ｍＬ)および亜鉛粉末(４００ｍｇ，６.１mmol)を加え、混合物を室温で１時間超音波処理し、その時点でＨＰＬＣ分析は生成物９６％を示した。セライトを通して混合物を濾過し、濾液を濃縮した。粗物質を、２０〜９５％のＡ(Ａ：０.０１％トリフルオロ酢酸入りの１００％アセトニトリル、Ｂ：０.０１％トリフルオロ酢酸入りの１００％Ｈ₂Ｏ)の勾配を用いて８分かけて溶出するYMC Combiprepカラム上の逆相ＨＰＬＣカラムクロマトグラフィによって精製した。生成物を含む画分を合わせて濃縮し、トリフルオロアセテート塩としての所望のアセトアミジン生成物３４４ｍｇ(４５％)を得、¹⁹ＦＮＭＲによれば、これには所望のＥ−異性体しか含まれていなかった。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝４３２.３[Ｍ＋Ｈ]⁺ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ)δ1.52 (s, 18H), 2.9 (m,1H), 2.2 (m, 3H), 2.27 (s, 3H), 4.2 (d,1H), 5.4 (dt, ビニル, 1H, J = 20 Hz)。 ¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ)δ−110.83 (m, 1 F, J = 20 Hz)。

ＥＸ−Ａ−８)
ＥＸ−Ａ−７の生成物の試料を氷酢酸中に溶解した。この撹拌溶液にジオキサン中１Ｎ
ＨＣｌ(１０当量)を加えた。この溶液を室温で１０分間撹拌した後、全ての溶媒を真空下で除去し、記載されたメチルエステル二塩酸塩を生成した。

実施例Ａ)
６.０ＮＨＣｌ(６ｍＬ)中のＥＸ−Ａ−７(３４４ｍｇ，１.４mmol)の溶液を１時間還流した。溶媒を真空下で除去した。生成した固形物をさらに３回水中に溶解して濃縮し、続いて１.０ＮＨＣｌ中で５回濃縮し、すべての残ったＴＦＡ塩を除去した。完了して、所望の(２Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩生成物１６０ｍｇ(３７％)を白色固形物(融点５１.５〜５６.３℃)として得、¹⁹ＦＮＭＲによりこれには所望のＥ異性体しか含まれていなかった。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝２１８.１[Ｍ＋Ｈ]⁺ Ｃ₉Ｈ₁₆ＦＮ₃Ｏ₂のＨＲＭＳ計算値：２１８.１３０５[Ｍ＋Ｈ]⁺，実測値：２１８.１３２５ ¹ＨＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)δ1.8 (m, 2H), 2.05 (m, 2H), 2.1 (s, 3H), 3.7 (t, 1H), 4.00 (d, 2H), 5.3 (dt, ビニル,1 H, J = 21Hz)。 ¹⁹ＦＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)δ−109.9 (m, 1 F, J = 20 Hz)。

実施例Ｂ

(２Ｓ,５Ｅ／Ｚ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩

ＥＸ−Ｂ−１)
Ｈ₂Ｏ／ジオキサン(１：１)４００ｍＬ中のＬ−グルタミン酸５−メチルエステル(５０.００ｇ，０.３１mol)の冷たい(０℃)溶液にトリエチルアミン(３８.３５ｇ，０.３８mol)、続いてジ−tert−ブチルジカーボネート(８０.００ｇ，０.３７mol)を加えた。生成した無色透明な溶液を室温で撹拌した。１８時間後、薄層クロマトグラフィ(ヘキサン中の３０％酢酸エチル)による分析は出発物質が残っていないことを示した。１.０Ｎ水性ＫＨＳＯ₄２００ｍＬを用いて反応混合物をクエンチした。有機層を除去し、水性層を酢酸エチル(３×１００ｍＬ)で抽出した。有機層を合わせてＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して濃縮し、淡黄色の油として所望の生成物７２.００ｇ(８９％)を得た。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝２８４.１[Ｍ＋Ｎａ]⁺ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃) δ1.50 (s, 9H), 2.00 (m, 1H), 2.20 (m, 1H), 2.42 (m, 2H), 3.66 (s, 3H), 4.34 (d, 1H), 5.24 (d, 1H)。

ＥＸ−Ｂ−２)
−１０℃でＴＨＦ３００ｍＬ中のＥＸ−Ｂ−１の生成物(７２.６０ｇ，０.２８mol)の溶液に、４−メチルモルホリン(２８.１１ｇ，０.２８mol)およびイソブチルクロロホルメート(３７.９５ｇ，０.２８mol)を素早く加えた。透明な黄色溶液は、直ちに白色沈殿を形成した。４分後、生成した濁った黄色混合物を濾過し、濾液を−１０℃に冷やしてサブゼロ温度に維持しながらＨ₂Ｏ(２００ｍＬ)中のＮａＢＨ₄(１５.７７ｇ，０.４２mol)の溶液を滴加した。全てのＮａＢＨ₄を加えてから氷浴をはずし、反応物を室温で１.５時間撹拌した。反応混合物をＨ₂Ｏ(２００ｍＬ)でクエンチした。有機層を分離し、水性層を酢酸エチル(３×１００ｍＬ)で抽出した。有機層を合わせてブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して濃縮し、黄色の油として所望の生成物５８ｇ(８５％)を得た。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝２７０.１ [Ｍ＋Ｎａ]⁺ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃) δ1.42 (s, 9H), 1.65 (m, 1 H), 1.85 (m, 2H), 2.42 (t, 2H), 3.66 (s, 3H), 4.8 (d,1 H)。

ＥＸ−Ｂ−３)
ベンゼン１００ｍＬ中のＥＸ−Ｂ−２(３０.９５ｇ，０.１３mol)の溶液に２,２−ジメトキシプロパン(６５.００ｇ，０.６３mol)、続いてｐ−トルエンスルホン酸(２.４０ｇ，１２.５mmol)および３Åモレキュラーシーブ５ｇを加えた。生成した混合物を２時間還流させ、その時点で薄層クロマトグラフィ(ヘキサン中の３０％酢酸エチル)による分析は反応が完了したことを示した。混合物を室温に冷まし、ジエチルエーテル(１５０ｍＬ)で希釈し、飽和水性ＮａＨＣＯ₃(１００ｍＬ)、続いてブライン(１００ｍＬ)で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して濃縮した。粗物質(黄色油３０.５ｇ)を酢酸エチル／ヘキサン(１：１０)で溶出するシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製し、淡黄色の油として所望の生成物１５.４０ｇ(４２％)を得た。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝３１０.１[Ｍ＋Ｎａ]⁺ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ1.42 (s, 12H), 1.56 (d, 3H), 1.85 (m, 2H), 2.38 (m, 2H), 3.66 (s, 3H), 3.7 (d, 1H), 3.95 (m, 2H)。

ＥＸ−Ｂ−４)
ＤＩＢＡＬ(トルエン中の１.０Ｍ溶液６.０ｍＬ)を、塩化メチレン１０ｍＬ中のＥＸ−Ｂ−３の生成物(１.００ｇ，３.００mmol)の冷たい(−７８℃)溶液に滴加した。３０分後、反応物を飽和酒石酸ナトリウムカリウム(ロッシェル塩)５ｍＬでクエンチしてから室温に加温させた。次いで、セライトパッドを通して混合物を濾過し、ＭｇＳＯ₄で乾燥、再濾過して濃縮し、黄色の油を得た。粗物質(黄色の油６１０ｍｇ)を、酢酸エチル／ヘキサン(１：４)で溶出するシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して透明な油として所望の生成物５５０ｍｇ(７１％)を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ 1.50 (s, 12H), 1.58 (d, 3H), 2.00 (m, 2H), 2.5 (m, 2H), 3.7 (d, 1H), 3.95 (m, 2H), 9.8 (s, 1H)。

ＥＸ−Ｂ−５)
塩化メチレン１００ｍＬ中のトリエチル２−フルオロ−ホスホノアセテート(６.７０ｇ，２７.６mmol)の氷冷(０℃)溶液に１,８−ジアザビシクロ[５.４.０]ウンデカ−７−エン(４.７０ｇ，３１.０mmol)を加えた。混合物を０℃で１時間撹拌して橙色溶液を得た。次いで、塩化メチレン１５ｍＬ中のＥＸ−Ｂ−４の生成物(５.７１ｇ，２２.２mmol)の氷冷(０℃)溶液をシリンジにより加え、生成した混合物を周囲温度で１８時間撹拌し、その時点で薄層クロマトグラフィ(ヘキサン中の３０％酢酸エチル)による分析は出発物質が残っていないことを示した。溶媒を真空下で除去し、生成した混合物を酢酸エチル２００ｍＬと水１００ｍＬとの間で分配した。有機層を集め、水層を酢酸エチル(２×５０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層を１.０Ｍ水性ＫＨＳＯ₄(１００ｍＬ)、水(１００ｍＬ)およびブライン(１００ｍＬ)で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して濃縮し、所望のフルオロオレフィン生成物を黄色の油(８.０ｇ)として得た。¹ＨＮＭＲおよび¹⁹ＦＮＭＲから単離した生成物は、およそ７０：３０のＺ：Ｅ比率を有することがわかった。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝３６８.２[Ｍ＋Ｎａ]⁺ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ 5.9-6.0 (dt, 1H, J = 20 Hz), 6.05-6.20 (dt, 1H, J = 33Hz)。 ¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ−129.89 (d, 0.7F, J = 38 Hz, 70％ Z-異性体),-122.05 (d, 0.3F, J = 20 Hz, 30％ E-異性体)。
この混合物をさらに精製することなく粗製のまま使用した。

ＥＸ−Ｂ−６)
ＴＨＦ７０ｍＬ中のＥＸ−Ｂ−５の生成物(８.０ｇ，２３.０mmol)の氷冷(０℃)溶液に、ＬｉＢＨ₄(１２.７ｍＬ，ＴＨＦ中２.０Ｍ，２５.０mmol)をシリンジにより加えた。反応混合物を周囲温度で１８時間撹拌し、その時点で薄層クロマトグラフィ(ヘキサン中の３０％酢酸エチル)による分析は出発物質が残っていないことを示した。ＴＨＦを除去し、生成した混合物を塩化メチレン中に溶解した。０℃に冷やした後、１.０Ｍ水性ＫＨＳＯ₄をゆっくりと加えて反応物をクエンチした。次いで、混合物を酢酸エチル(３×５０ｍＬ)で抽出した。有機層を合わせ、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して濃縮した。粗物質(透明な油８.０ｇ)を酢酸エチル／ヘキサン(１:４)で溶出するシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製し、透明な油として所望の生成物９００ｍｇ(１３％)を得た。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝３２６.２ [Ｍ＋Ｎａ]⁺ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ 4.79-4.94 (dm,1H), 5.10-5.25 (dt,1H)。¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ−119.82 (dt, 0.7F, J = 38 Hz, 70％ Z-異性体),-111.09 (dt, 0.3F, J = 27 Hz, 30％ E-異性体)。

ＥＸ−Ｂ−７)
ピリジン５ｍＬ中のＥＸ−Ｂ−６の生成物(９５０ｍｇ，３.１mmol)の氷冷(０℃)溶液にメタンスルホニルクロリド(３９０ｍｇ，３.４mmol)を加えた。反応物を０℃で５分間撹拌し、次いで室温に加温させて３時間撹拌し、その時点で薄層クロマトグラフィ(ヘキサン中の３０％酢酸エチル)による分析は、出発物質が残っていないことを示した。反応物を、ジエチルエーテル(１０ｍＬ)で希釈し、飽和水性ＮａＨＣＯ₃(２０ｍＬ)、続いて１.０Ｍクエン酸(２０ｍＬ)で洗浄した。有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して濃縮し、白色固形物として所望のアリル型塩化物の生成物５００ｍｇ(５１％)を得た。この生成物をさらに精製することなく次に使用した。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝３４４.１[Ｍ＋Ｎａ]⁺

ＥＸ−Ｂ−８)
ＤＭＦ１０ｍＬ中のＥＸ−Ｂ−７の生成物(４４０ｍｇ，１.３７mmol)の撹拌溶液に、カリウムフタルイミド(２９０ｍｇ，１.５７mmol)を加えた。生成した混合物を還流下で１８時間加熱し、その時点で薄層クロマトグラフィ(ヘキサン中３０％酢酸エチル)による分析は、出発物質が残っていないことを示した。冷ました混合物を、水３０ｍＬで希釈し、酢酸エチル３０ｍＬで２回抽出し、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して濃縮し、黄色油として所望の生成物５４０ｍｇ(９１％)を得た。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝４５５.２[Ｍ＋Ｎａ]⁺ ＨＲＭＳ計算値：４３３.２１３９[Ｍ＋Ｈ]⁺ 実測値：４３３.２１４４ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ1.4 (s, 18H), 1.6 (m, 6H), 2.05 (m, 2H), 3.6-4.42 (m, 4H), 4.9 (dt, ビニル, 1H), 5.2, (m, ビニル, 1H), 7.7 (m, 2H), 7.9 (m, 2H)。¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ−117.09 (m, 0.7F, J = 38 Hz, 70％ Z-異性体),- 111.61 (m, 0.3F, J = 22 Hz, 30％ E-異性体)。

ＥＸ−Ｂ−９)
ＥＸ−Ｂ−８の生成物(６００ｍｇ，１.３８mmol)を酢酸８ｍＬおよび水２ｍＬ中に溶解した。混合物を室温で一夜撹拌し、その時点で、薄層クロマトグラフィ(ヘキサン中３０％酢酸エチル)による分析は、出発物質が残っていないことを示した。溶液を窒素流れ下で濃縮し、粗生成物を、酢酸エチル／ヘキサン(１:２)で溶出するシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製し、白色固形物として所望の生成物２４８ｍｇ(６３％)を得た。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝４１５.１[Ｍ＋Ｎａ]⁺ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ1.41 (s, 9H), 1.56 (m, 2H), 2.15 (m,1H), 3.64 (m, 2H), 4.35 (d, 2H), 4.9 (dt, ビニル,1H, J = 37 Hz), 7.73 (m, 2H), 7.86 (m, 2H)。¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ−116.96 (dt, 0.8F, J = 37 Hz, 80％ Z-異性体),-111.09(dt, 0.2F, J = 22 Hz, 20％ E-異性体)。

ＥＸ−Ｂ−１０)
ＤＭＦ６ｍＬ中のＥＸ−Ｂ−９の生成物(２３７ｍｇ，０.６０５mmol)の撹拌溶液に、ピリジニウムジクロマート(１.１４ｇ，３.０３mmol)を加えた。溶液は暗橙色に変わり、そして室温で１８時間撹拌し、その時点でそれをＨ₂Ｏ(２０ｍＬ)中へ注いだ。混合物を酢酸エチル(４×２５ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層を水性５％ＫＨＣＯ₃(３×２５ｍＬ)で洗浄した。水性層を１.０ＭＫＨＳＯ₄でｐＨ＝３に酸性化し、続いて酢酸エチル(３×５０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層を濃縮して所望のアミノ酸生成物２３５ｍｇ(９５％)を得た。生成した白色固形物をさらに精製することなく粗製のまま使用した。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝４２９.１[Ｍ＋Ｎａ]⁺

ＥＸ−Ｂ−１１)
エタノール７ｍＬ中のＥＸ−Ｂ−１０の生成物(２３０ｍｇ，０.５６mmol)の撹拌溶液にヒドラジン水化物(７０ｍｇ，１.１３mmol)を加え、生成した溶液を２時間還流して白色沈殿を形成した。溶媒を真空下で除去した。生成した白色固形物を水８ｍＬ中で溶解し、氷酢酸でｐＨ＝４に酸性化した。次いで、これを氷浴中で冷やして濾過した。濾液を濃縮して黄色結晶として所望のアリルアミン生成物１３６ｍｇ(８７％)を得、これをさらに精製することなく次の工程にかけた。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝２７７.１ [Ｍ＋Ｈ]⁺

ＥＸ−Ｂ−１２)
ＤＭＦ６ｍＬ中のＥＸ−Ｂ−１１の生成物(１３６ｍｇ，０.５０mmol)の撹拌溶液に１.５時間間隔で３つに分けてエチルアセトイミド(２５２ｍｇ，２.０４mmol)を加えた。添加を完了した後、混合物を室温で一夜撹拌した。桃色溶液を濾過し、濾過ケーキを水で洗浄した。溶媒を真空下で除去し、生成した黄色の油を逆相ＨＰＬＣによりYMC Combiprep ODS-A半分取カラムを用いて１〜５０％のＡ(Ａ：０.０５％ＴＦＡ入りのアセトニトリル１００、Ｂ：０.０５％ＴＦＡ入りの水１００)を７分の勾配で溶出して精製した。生成物を含む画分を合わせて濃縮し、トリフルオロアセテート塩として所望のアセトアミジン生成物約５０ｍｇを得、それを次の工程にかけた。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝３１８.２ [Ｍ＋Ｈ]⁺

実施例Ｂ)
ＥＸ−Ｂ−１２の生成物を６.０ＮＨＣｌ(６ｍＬ)中に溶解し、室温で１時間撹拌した。溶媒を真空下で除去した。生成した固形物をさらに３回水中に溶解して濃縮してＴＦＡ塩を除去した。すべてのＴＦＡが除去されたことを¹⁹ＦＮＭＲが示したときに、生成物を真空下で乾燥して泡状の透明な固形物として所望の(２Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩および(２Ｓ,５Ｚ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩を含むＥ：Ｚ(２０：８０)の混合物３０ｍｇ(２０％、２つの工程を合わせた収率)を得た。Ｃ₉Ｈ₁₆ＦＮ₃Ｏ₂のＨＲＭＳ計算：２１８.１３０５ [Ｍ＋Ｈ]⁺ 実測値：２１８.１３０９ ¹ＨＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)δ2.01 (m, 2H), 2.21 (s, 3H), 2.24 (m, 2H), 3.96 (t, 1H), 4.00 (d, 2H), 5.07 (dt, ビニル, 1H, J = 37 Hz), 5.4 (dt, ビニル, 1H, J = 37Hz)。¹⁹ＦＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)δ−116.8 (m, 0.8F, J = 37 Hz, 80％ Z-異性体),-109.6 (m, 0.2F, J = 21 Hz, 20％ E-異性体)。

実施例Ｃ

(２Ｓ,５Ｚ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩

ＥＸ−Ｃ−１)
トリエチル２−フルオロ−ホスホノアセテート(３.５４ｇ，１４.６mmol)を０℃でＣＨ₂Ｃｌ₂(２０ｍＬ)中に溶解し、１,８−ジアザビシクロ[５.４.０]ウンデカ−７−エン(２.４ｍＬ，１６.４mmol)を加えた。混合物を０℃で２０分間撹拌して橙色溶液を得た。次いで、ＥＸ−Ａ−３のアルデヒド生成物(４.０４ｇ，１１.７mmol)の溶液を０℃で加え、生成した褐色混合物を室温で一夜撹拌し、その時点でＬＣＭＳは出発物質が残っていないことを示した。溶媒を除去し、残留物を水(６０ｍＬ)と酢酸エチル(１２０ｍＬ)との間で分配した。有機層を集め、水性層を酢酸エチル(２×５０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層を水(６０ｍＬ)および１０％水性ＫＨＳＯ₄(６０ｍＬ)で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して濃縮した。粗物質(橙色の油５.７ｇ)をヘキサン中１０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製し、透明な油として所望のフルオロオレフィン生成物３.５ｇ(６９％)を得た。¹ＨＮＭＲおよび¹⁹ＦＮＭＲは、単離した生成物が７０：３０のＺ／Ｅ比率を有することを示した。Ｃ₂₀Ｈ₃₂Ｏ₈ＦＮのＨＲＭＳ計算値：４５６.２０１０ [Ｍ＋Ｎａ]⁺，実測値：４５６. ２０１７ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ1.48 (s, 18H), 2.0 (m, 1H), 2.25 (m, 1H), 2.6 (m, 2H), 3.7 (s, 3H), 4.25 (m, 2H), 4.9 (m, 1H), 5.9 (dt, ビニル, 1H, J = 21.2 Hz), 6.1 (dt, ビニル, 1H, J = 32.4Hz)。¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ：−129.4 (d, 0.7F, J = 34 Hz, 70％ Z異性体),-121.6 (d, 0.3F, J = 22 Hz, 30％ E 異性体)。

ＥＸ−Ｃ−２)
ＥＸ−Ｃ−１のエステル生成物(３.５ｇ，８.１mmol)を室温でメタノール８０ｍＬ中に溶解し、次いで固体ＮａＢＨ₄(３ｇ，８０mmol)を少しずつ加えた。混合物を室温で１８時間撹拌し、その時点でＨＰＬＣ分析は反応が＞９０％完了したことを示した。反応物を飽和ＮＨ₄Ｃｌでクエンチした。生成物を酢酸エチルで抽出し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させた。有機層を蒸発させて無色の油として粗生成物３.２ｇを得、これを、ヘキサン中２０％〜３０％酢酸エチルで溶出するBiotageフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製し、透明な油としてフルオロオレフィン生成物のＺ／Ｅ混合物２.１１ｇ(６７％)を、透明な油として所望の純粋な(¹⁹ＦＮＭＲによりＺ：Ｅ＝９７：３)Ｚ−異性体生成物０.４１ｇ(１３％)と共に得た。Ｃ₁₈Ｈ₃₀ＮＯ₇ＦのＨＲＭＳ計算値：４１４.１９０４[Ｍ＋Ｎａ]⁺，実測値：４１４.１９１１ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ1.48 (s, 18H), 2.0 (m, 1H), 2.2 (m, 3H), 3.7 (s, 3H), 4.1 (dd, 2H, J = 17Hz), 4.8 (dt, 1H, J = 39 Hz), 4.9 (m, 1H)。 ¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ−119.1 (dt, 1F, J= 39 Hz, J= 17 Hz)。

ＥＸ−Ｃ−３)
ＥＸ−Ｃ−２のＺ−アルコール生成物(３９０ｍｇ，１mmol)および３−メチル−１,２,４−オキサジアゾリン−５−オン(１３０ｍｇ，１.３mmol)をＴＨＦ２０ｍＬ中に溶解した。次いで、ポリマーに担持されたＰＰｈ₃を溶液に加え、混合物を１０分間穏やかに撹拌した。次いで、ジエチルアゾジカルボキシレートを滴加し、混合物を室温で１時間撹拌し、その時点でＬＣＭＳ分析は生成物の形成と出発物質が存在しないことを示した。セライトパッドを通してポリマーを濾過し、パッドをＴＨＦで洗浄した。濾液を蒸発させて粗生成物１.０ｇを得、これをヘキサン中２０％〜３０％酢酸エチルで溶出するBiotageフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製し、ヒドラジド副生物で若干汚染された生成物５００ｍｇを得た。この物質を、塩化メチレン：メタノール：水酸化アンモニウム(９８：２：０.０１)で溶出するBiotageフラッシュカラムクロマトグラフィによってさらに精製し、透明な油として所望の保護されたアミジン生成物１８０ｍｇ(３８％)を得、¹⁹ＦＮＭＲにより、これには所望のＺ−異性体しか含まれていなかった。Ｃ₂₁Ｈ₃₂Ｎ₃Ｏ₈ＦのＨＲＭＳ計算値：４９１.２５１７[Ｍ＋ＮＨ₄ ]⁺，実測値：４９１.２５２３ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ1.5 (s, 18H), 1.9 (m,1H), 2.1 (m, 3H), 2.3 (s, 3H), 3.7 (s, 3H), 4.2 (d, 2H), 4.8 (m, 1H), 5.0 (dt, 1H, J = 36Hz)。¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ−116.5 (dt, 1F, J= 38 Hz)。

ＥＸ−Ｃ−４)
メタノール数滴を含む水中の２５％酢酸４ｍＬ中にＥＸ−Ｃ−３の生成物(８８ｍｇ，０.１９mmol)を溶解し、次いで、Ｚｎ粉末(１０９ｍｇ，１.６７mmol)を加えた。混合物を超音波処理下で３時間撹拌した。セライトパッドを通してＺｎを濾過し、パッドを水で洗浄した。濾液を蒸発させて乾燥状態にし、粗生成物を得、これを２０〜８０％のＡ(Ａ：０.０１ＴＦＡ入りの１００％ＡＣＮ、Ｂ：０.０１％ＴＦＡ入りの１００％Ｈ₂Ｏ)の勾配で８分かけて溶出するYMC Combiprepカラム上の逆相ＨＰＬＣカラムクロマトグラフィによって精製した。所望の生成物を２画分に集め、合わせた画分を濃縮した。生成物をトリフルオロアセテート塩の混合物として無色の油として得、¹⁹ＦＮＭＲにより、これには所望のＺ−異性体しか含まれていなかった：３０％はモノＢｏｃ−保護された生成物であった：Ｃ₁₅Ｈ₂₆Ｎ₃Ｏ₄ＦのＨＲＭＳ計算値：３３２.１９８６ [Ｍ＋Ｈ]⁺ 実測値：３３２.２００１；そして７０％はジ−Ｂｏｃ保護された生成物であった：Ｃ₂₀Ｈ₃₄Ｎ₃Ｏ₆ＦのＨＲＭＳ計算値：４３２.２５１０ [Ｍ＋Ｈ]⁺実測値：４３２.２５０３ジ−Ｂｏｃ生成物の¹ＨＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)δ1.3 (s, 18H), 1.8 (m,1H), 2.1 (m, 3H), 2.1 (s, 3H), 3.6 (s, 3H), 3.9 (d, 2H), 4.9 (dt, ビニル, 1H, J = 37Hz)。 ¹⁹ＦＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)-117.3 (dt, 1F, J = 37 Hz)

実施例Ｃ)
ＥＸ−Ｃ−４のモノ−およびジ−ＢＯＣ生成物を合わせて６ＮＨＣｌ(３０ｍＬ)中に溶解し、溶液を４時間還流させ、その時点でＬＣＭＳ分析は反応が完了したことを示した。過剰なＨＣｌおよび水を真空下で除去した。完了して、所望の(２Ｓ,５Ｚ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩生成物９ｍｇ(２工程で合わせた収率４０％)を明るい黄色の非常に吸湿性のフォームとして得、¹⁹ＦＮＭＲにより、これには所望のＺ−異性体しか含まれていなかった。Ｃ₉Ｈ₁₆Ｎ₃Ｏ₂ＦのＨＲＭＳ計算値：２１８.１３０５ [Ｍ＋Ｈ]⁺ 実測値：２１８.１３２０ ¹ＨＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)δ1.3 (s, 18H), 1.9 (m, 2H), 2.1 (m, 2H), 2.1 (s, 3H), 3.8 (t, 1H), 3.9 (d, 2H), 4.9 (dt, ビニル, 1H, J = 37Hz)。 ¹⁹ＦＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)δ-117.3 (dt, 1 F, J = 37 Hz)。

実施例Ｄ

(２Ｓ,５Ｚ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，三塩酸塩，二水和物

ＥＸ−Ｄ−１)
ＥＸ−Ｄ−２の生成物(３.７５ｇ，１０mmol)をメタノール６０ｍＬ中に溶解し、固体ＮａＢＨ₄(４ｇ，１０６mmol)を室温で１０時間かけて少しずつ加え、その時点でＨＰＬＣ分析は約８４％還元されたことを示した。反応混合物を飽和ＮＨ₄Ｃｌでクエンチし、次いで酢酸エチルで３回抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して蒸発させ、黄色の油として粗生成物３.２ｇを得た。Ｃ₁₆Ｈ₂₉ＮＯ₇のＨＲＭＳ計算値：３４８.２０２２ [Ｍ＋Ｈ]⁺ 実測値：３４８.２０３４ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ)δ4.9 (q, 1H), 3.7 (s, 3H), 3.5 (t, 2H), 3.2 (m, 1H), 2.1 (m, 1H), 1.9 (m, 2H), 1.5 (s, 18H)。

ＥＸ−Ｄ−２)
ＥＸ−Ｄ−１のアルコール生成物(３.２ｇ，９.０mmol)をＴＨＦ１００ｍＬ中に溶解し、氷浴中で冷やした。四臭化炭素(４.２７ｇ，１２.９mmol)を加え、生成した溶液を窒素下、０℃で３０分間撹拌した。ポリマーに担持されたＰＰｈ₃を加え、混合物を０℃で１時間、次いで室温で一夜穏やかに撹拌した。セライトを通してポリマーを濾過して除去し、セライトパッドをＴＨＦで洗浄した。濾液を蒸発させて粗生成物を得、これを、酢酸エチル／ヘキサン(１:３)で溶出するBiotageフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製し、無色の油として所望のブロモ生成物２.０ｇ(５４％、２工程を合わせた収率)を得た。Ｃ₁₆Ｈ₂₈ＮＯ₆ＢｒのＨＲＭＳ計算値：４１０.１１７８ [Ｍ＋Ｈ]⁺ 実測値：４１０.１１３７ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ4.9 (q, 1H), 3.7 (s, 3H), 3.4 (m, 2H), 2.2 (m, 2H), 1.9 (m, 2H), 1.5 (s, 18H)。

ＥＸ−Ｄ−３)
エタノール６０ｍＬ中のＮａＯＥｔの溶液(ＥｔＯＨ中２１％，４１.１ｍＬ，０.１１mol)をｐ−メトキシベンゼンチオール(１４.０ｇ，０.１mol)、続いてエチルクロロフルオロアセテート(１８.３ｇ，０.１３mol)で処理した。混合物を室温で２時間撹拌し、ヘキサン／酢酸エチル(１：１)２５０ｍＬで希釈した。有機層を水で３回洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥させた。乾燥した有機層を蒸発させて粗生成物２５ｇを得、これをさらに精製することなく次に使用した。Ｃ₁₁Ｈ₁₃Ｏ₃ＳＦのＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝２６７.１０ [Ｍ＋Ｎａ]⁺ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ7.5 (d, 2H), 6.9 (d, 2H), 6.0 (d, 1H, J = 51.9 Hz), 4.2 (q, 2H), 3.8 (s, 3H), 1.2 (t, 3H)。 ¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ-146.2 (d, 1F, J = 53.6 Hz)

ＥＸ−Ｄ−４)
塩化メチレン２００ｍＬ中のＥＸ−Ｄ−３の粗生成物(２４ｇ，０.１mol)の溶液を−７８℃に冷やし、塩化メチレン２００ｍＬ中の３−クロロ過安息香酸(２７ｇ，０.１２mol)で処理した。反応混合物をゆっくりと室温に加温させて一夜撹拌し、その時点でＬＣＭＳ分析は生成物が形成され、出発物質が残っていないことを示した。固形物を濾過し、濾液を飽和ＮａＨＣＯ₃およびＮＨ₄Ｃｌで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥し、蒸発させて橙色の油３０ｇを得、これをヘキサン／酢酸エチル(２：１)で溶出するBiotageフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製し、オフホワイトの油状物として所望のスルホキシド生成物１７.５ｇ(７０％)を得た。Ｃ₁₁Ｈ₁₃Ｏ₄ＦＳのＨＲＭＳ計算値：２６１.０５９７ [Ｍ＋Ｈ]⁺ 実測値：２６１.０５９８ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ7.6 (m, 2H), 7.0 (m, 2H), 5.6 (d, 1 H, J = 50 Hz 主要なジアステレオマー), 5.4 (d, 1H, J = 49 Hz 少ないジアステレオマー), 4.2 (q, 2H), 3.8 (s, 3H), 1.2 (t, 3H)。 ¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ-194.3 (d, 1F, J = 53.6 Hz 主要なジアステレオマー),-191.7 (d,1F, J = 50.4 Hz 少ないジアステレオマー)

ＥＸ−Ｄ−５)
乾燥ＤＭＦ６ｍＬ中のＮａＨ(鉱油中６０％，２１２ｍｇ，５.３mmol)の懸濁液を窒素下で０℃に冷やし、ＤＭＦ２ｍＬ中のＥＸ−Ｄ−４スルホキシド生成物(１.２５ｇ，４.８mmol)の溶液で処理した。室温で２０分間撹拌した後、混合物を５℃に冷やし、ＥＸ−Ｄ−２ブロモ生成物(２.１７ｇ，５.３mmol)をひとかたまりで加えた。反応物を室温で３時間撹拌し、次いで９５℃で１時間還流に加熱し、その時点でＬＣＭＳ分析は生成物の形成を示した。混合物を氷／水性ＮＨ₄Ｃｌ混合物中へ注いだ。生成物をヘキサン／酢酸エチル(１：１)で抽出した。有機層をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、蒸発させて黄色の粗製油状物３.１７ｇを得、これをヘキサン中１０％酢酸エチルで溶出するBiotageフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製し、無色の油として所望のフルオロオレフィンエステル生成物１.０５ｇ(５０％)を得た。¹⁹ＦＮＭＲは、単離した生成物が所望のＺ−異性体(９５：５)含むことを示した。Ｃ₂₀Ｈ₃₂Ｏ₈ＦＮのＨＲＭＳ計算値：４５６.２０１０[Ｍ＋Ｎａ]⁺，実測値：４５６.２０１７ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ1.5 (s, 18H), 2.0 (m, 1H), 2.3 (m, 4H), 3.7 (s, 3H), 4.3 (m, 2H), 4.9 (m, 1H), 6.1 (dt, ビニル, 1H, J = 32.4 Hz, Z 異性体)。¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ-129.4 (d, 0.95F, J = 34.8 Hz, 95％ Z 異性体),-121.6 (d, 0.05F, J = 21.6 Hz, 5％ E 異性体)。

ＥＸ−Ｄ−６)
ＥＸ−Ｄ−５のエステル生成物(１.０５ｇ，２.４mmol)を室温でメタノール中に溶解し
、固体ＮａＢＨ₄を少しずつ加えた。混合物を室温で１８時間撹拌し、次いで水２ｍＬを加え、混合物をさらに３時間撹拌し、その時点でＨＰＬＣ分析は反応が＞９５％完了したことを示した。反応物を飽和ＮＨ₄Ｃｌでクエンチした。生成物を酢酸エチルで抽出し、有機層をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し、蒸発させて無色の油として粗生成物０.９５ｇを得た。¹⁹ＦＮＭＲは、単離した粗生成物が所望のＺ−異性体しか含まないことを示した。Ｃ₁₈Ｈ₃₀ＮＯ₇ＦのＨＲＭＳ計算値：４１４.１９０４ [Ｍ＋Ｎａ]⁺，実測値：４１４.１９４９ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ1.48 (s, 18H), 2.0 (m, 1H), 2.2 (m, 3H), 3.7 (s, 3H), 4.1 (dd, 2H, J = 17 Hz), 4.8 (dt, 1H, J = 36 Hz), 4.9 (m,1H)。¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ-119.1 (dt, 1F, J= 38 Hz, J = 17 Hz)。

ＥＸ−Ｄ−７)
ＥＸ−Ｄ−６のアルコール生成物(０.９５ｇ，２.４mmol)および３−メチル−１,２,４−オキサジアゾリン−５−オン(２９０ｍｇ，２.９mmol)をＴＨＦ６０ｍＬ中に溶解した。ポリマーに結合したトリフェニルホスフィンを加え、混合物を１０分間穏やかに撹拌した。次いで、ジメチルアゾジカルボキシレートを滴加し、混合物を室温で１時間撹拌し、その時点で、ＬＣＭＳ分析は生成物が形成され、出発物質が残っていないことを示した。セライトパッドを通してポリマーを濾過し、パッドをＴＨＦで洗浄した。濾液を蒸発させ、残留物を得、これを塩化メチレンと水との間で分配した。有機層を水で２回洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、蒸発させて粗生成物１.３ｇを得、これをヘキサン中の２０％〜３０％酢酸エチルで溶出するBiotageフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製し、無色の油として所望の保護されたアミジン生成物３９０ｍｇ(３４％、２工程で合わせた収率)を得た。¹⁹ＦＮＭＲは、単離した生成物が所望のＺ−異性体しか含まないことを示した。Ｃ₂₁Ｈ₃₂Ｎ₃Ｏ₈ＦのＨＲＭＳ計算値：４９１.２５１７[Ｍ＋ＮＨ₄]⁺，実測値：４９１.２５２３ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ1.5 (s, 18H), 1.9 (m, 1H), 2.1 (m, 3H), 2.3 (s, 3H), 3.7 (s, 3H), 4.2 (d, 2H), 4.8 (m, 1H), 5.0 (dt, 1 H, J = 36Hz)。¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ-116.5 (dt, 1 F, J = 38Hz)。

ＥＸ−Ｄ−８)
ＥＸ−Ｄ−７の生成物(３９０ｍｇ，０.８２mmol)をメタノール４ｍＬを含む水中の２５％ＨＯＡｃ２０ｍＬ中に溶解し、Ｚｎ粉末(４８２ｍｇ，７.４２mmol)を２つに分けて加えた。混合物を超音波処理下で３時間撹拌した。セライトパッドを通してＺｎを濾過し、パッドを水で洗浄した。濾液を蒸発させて乾燥状態にし、粗生成物を得、これを逆相ＨＰＬＣによって精製した。所望の生成物を含む画分を集め、合わせて濃縮した。生成物をトリフルオロ酢酸塩の混合物として無色の油状物として得、¹⁹ＦＮＭＲにより、これには所望のＺ−異性体しか含まれていなかった：３０％はモノ−Ｂｏｃ保護された生成物であった：Ｃ₁₅Ｈ₂₆Ｎ₃Ｏ₄ＦのＨＲＭＳ計算値：３３２.１９８６ [Ｍ＋Ｈ]⁺ 実測値：３３２.２００１；７０％はジＢｏｃ保護された生成物であった：Ｃ₂₀Ｈ₃₄Ｎ₃Ｏ₆ＦのＨＲＭＳ計算値：４３２.２５１０ [Ｍ＋Ｈ]⁺，４３２.２５０３ジＢｏｃ生成物の¹ＨＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)δ1.3 (s, 18H), 1.8 (m,1H), 2.1 (m, 3H), 2.1 (s, 3H), 3.6 (s, 3H), 3.9
(d, 2H), 4.9 (dt, ビニル, 1H, J = 37Hz)。 ¹⁹ＦＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)δ-117.3(dt, 1 F, J
= 37 Hz)。

実施例Ｄ)
ＥＸ−Ｄ−８のモノおよびジＢＯＣ生成物を６ＮＨＣｌ(８０ｍＬ)中に溶解し、溶液を還流で１時間加熱し、その時点でＬＣＭＳ分析は反応が完了したことを示した。過剰のＨＣｌおよび水を真空下で除去し、明るい黄色の非常に吸湿性のフォームとして所望の(２Ｓ,５Ｚ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，三塩酸塩，二水和物生成物１５０ｍｇ(２つの工程で合わせた収率５０％)を得た。Ｃ₉Ｈ₁₆Ｎ₃Ｏ₂ＦのＨＲＭＳ計算値：２１８.１３０５ [Ｍ＋Ｈ]⁺ 実測値：２１８.１２９０ ¹ＨＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)δ1.3 (s, 18H), 1.9 (m, 2H), 2.1 (m, 2H), 2.1 (s, 3H), 3.8 (t, 1H), 3.9 (d, 2H), 4.9 (dt, ビニル, 1H, J = 37 Hz)。 ¹⁹ＦＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)δ-117.3 (dt, 1F, J = 37 Hz)。Ｃ₉Ｈ₁₆Ｎ₃Ｏ₂Ｆ・３ＨＣｌ・２Ｈ₂Ｏの分析計算値：C, 29.81 ; H, 6.39 ; N, 11.59；実測値：C, 29.80 ; H, 6.11 ; N, 11.20。

実施例Ｅ

(２Ｒ,５Ｅ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩，一水和物

ＥＸ−Ｅ−１)
トリメチルシリルクロリドを、０℃でメタノール中のＤ−グルタミン酸の冷たい溶液に滴加した。薄層クロマトグラフィによる分析で出発物質が残っていないことがわかるまで、生成した無色透明の溶液を室温で撹拌した。次いで、反応物を０℃に冷やし、トリエチルアミンを加え、そして白色沈殿が形成された。ジ−tert−ブチルジカーボネートを加え、混合物を室温に加温させた。３時間後、溶媒を除去し、ジエチルエーテルを加えた。溶液を濾過し、濾過ケーキをさらにジエチルエーテルですすいだ。濾液を濃縮し、所望のモノＢｏｃジエステル生成物を得、これをさらに精製することなく次の工程にかけた。

ＥＸ−Ｅ−２)
室温でアセトニトリル中のＥＸ−Ｅ−１の粗生成物の溶液に４−ジメチルアミノピリジンおよびジ−tert−ブチルジカーボネートを加えた。薄層クロマトグラフィによる分析でほとんどの出発物質が消費されたことがわかるまで、生成した混合物を室温で撹拌した。溶媒を真空下で除去し、生成した残留物をシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製し、所望のジ−Ｂｏｃ保護されたジエステル生成物を得た。

ＥＸ−Ｅ−３)
ＤＩＢＡＬの溶液を、−７８℃の無水ジエチルエーテル中のＥＸ−Ｅ−２の冷たい溶液に滴加した。−７８℃で３０分後、溶液を水でクエンチし、室温に加温にさせた。生成した濁った混合を、酢酸エチルで希釈し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、セライトパッドを通して濾過した。濾液を濃縮し、残留物をシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して所望のアルデヒド生成物を得た。

ＥＸ−Ｅ−４)
ＴＨＦ中のトリエチル２−フルオロホスホノアセテートの冷たい(−７８℃)溶液にｎ−ブチルリチウムを加えた。この混合物を−７８℃で撹拌して明るい黄色溶液を得た。次いで、ＴＨＦ中のＥＸ−Ｅ−３の生成物の溶液をシリンジにより加え、生成した混合物を、薄層クロマトグラフィによる分析で出発物質が残っていないことが示されるまで−７８℃で撹拌した。反応物を、−７８℃で飽和水性ＮＨ₄Ｃｌを用いて急冷した。有機層を集め、水性層をジエチルエーテルで抽出した。合わせた有機物を水およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して濃縮した。次いで粗物質をシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製し、所望のフルオロオレフィン生成物を得た。

ＥＸ−Ｅ−５)
室温でメタノール中のＥＸ−Ｅ−４の溶液に固体ＮａＢＨ₄を少しずつ加えた。薄層クロマトグラフィによる分析でほとんどの出発物質が消費されたことがわかるまで、反応物を周囲温度で撹拌した。反応物を飽和水性ＮＨ₄Ｃｌでクエンチし、酢酸エチルで抽出した。有機層は合わせ、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して濃縮した。粗物質をシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製し、所望のアリル型アルコール生成物を得た。

ＥＸ−Ｅ−６)
ＴＨＦ中のＥＸ−Ｅ−５、ポリマーに担持されたトリフェニルホスフィンおよび３−メチル−１,２,４−オキサジアゾリン−５−オンの混合物にジメチルアゾジカルボキシレートを滴加した。薄層クロマトグラフィによる分析で出発物質が残っていないことがわかる
まで反応混合物を室温で撹拌した。セライトを通して混合物を濾過し、濾液を濃縮した。生成した黄色の油を塩化メチレンと水との間で分配した。有機層を分離し、水およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して濃縮した。粗物質をシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製し、所望の保護されたＥ−アリル型アミジン生成物を得た。

ＥＸ−Ｅ−７)
ＥＸ−Ｅ−６の生成物を、水中のメタノールおよび酢酸中に溶解した。亜鉛粉末を加え、ＨＰＬＣ分析で出発物質が僅かしか残っていないことがわかるまで混合物を超音波処理下で撹拌した。セライトを通して反応混合物からＺｎ粉末を濾過し、濾液を濃縮した。粗物質を逆相ＨＰＬＣカラムクロマトグラフィによって精製した。生成物を含む画分を合わせて濃縮し、トリフルオロアセテート塩として所望のアセトアミジン生成物を得た。

実施例Ｅ)
６.０ＮＨＣｌ中のＥＸ−Ｅ−７の溶液を１時間還流させた。溶媒を真空下で除去した。生成した固形物を水中に溶解し、１.０ＮＨＣｌから繰り返し濃縮して残っているＴＦＡ塩をすべて除去し、所望の(２Ｒ,５Ｅ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩生成物を得た。

実施例Ｆ

ＥＸ−Ｆ−１)
窒素下でＥＸ−Ａ−３の生成物(５.０ｇ，１１.５mmol)のＴＨＦ(４５ｍｌ)溶液にＴＨＦ５.６ｍＬ中のRed-AI(５.２２ｍＬ，１７.４mmol)の溶液を３０分かけて滴加した。内部温度を、−１０℃より下に保持した。５分後、反応物を１.３ＭＮａ・Ｋ酒石酸塩３３.７ｍｌでクエンチした。トルエン(１１ｍＬ)を混合物に加えて分離を改善した。有機層を１.３ＭＮａ・Ｋ酒石酸塩３３.７ｍｌ、続いてブライン(４０ｍＬ)で洗浄した。有機層を合わせ、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して濃縮した。粗物質、明るい黄色の油３.８ｇ(８４％)を次の工程に直接かけた。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝４１４.２ [Ｍ＋Ｎａ]⁺ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ1.48 (s, 18H), 1.95 (m, 1H), 2.1 (m, 1H), 2.2 (m, 1H), 2.35 (t, 1 H), 3.7 (s, 3H), 4.25 (m, 2H), 4.8 (m, 1H), 5.15 (dt, 1H, J = 20 Hz)。¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ-119.1 (d, 0.02F, J = 37 Hz, 2％ Z-異性体),-111.8 (d, 0.98F, J = 24 Hz, 98％ E-異性体)。

ＥＸ−Ｆ−２)
塩化メチレン５００ｍＬ中のＥＸ−Ｆ−１の生成物(５０.０ｇ，０.１２８mol)の溶液に−１０℃でトリエチルアミン(１８.０ｇ，０.１７９mol)を加えた。塩化メチレン５０ｍＬ中のメタンスルホニルクロリド(１７.５ｇ，０.１５３mol)の溶液をゆっくりと加えて温度を−１０℃で維持した。反応物は、−１０℃で４５分間撹拌し、その時点で薄層クロマトグラフィ(ヘキサン中の５０％酢酸エチル)およびＬＣＭＳによる分析は、ほとんどの出発物質が消費されたことを示した。反応物を１.０Ｍクエン酸６００ｍＬでクエンチし、酢酸エチル(２×４００ｍＬ)で抽出した。有機層を合わせ、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して濃縮した。粗物質(黄色の油７０ｇ)を次の工程に直接かけた。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝４９２.２ [Ｍ＋Ｎａ]

ＥＸ−Ｆ−３)
室温でジメチルホルムアミド４００ｍＬ中のＥＸ−Ｆ−２の生成物(７０.０ｇ，０.１２８mol)の溶液にカリウム３−メチル−１,２,４−オキサジアゾリン−５−オネート(２８.７ｇ，０.１９２mol)を加えた。反応物を室温で２.５時間撹拌し、その時点で薄層クロマトグラフィ(ヘキサン中の３０％酢酸エチル)およびＬＣＭＳによる分析は、出発物質が消費されたことを示した。反応物を水４００ｍＬで希釈し、酢酸エチル(５×４００ｍＬ)で抽出した。有機層を合わせて水４００ｍＬ、ブライン４００ｍＬで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して濃縮した。粗物質(黄色の油７０ｇ)を酢酸エチル／ヘキサン(１：４)で溶出するシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製し、淡黄色の油３８ｇ(６３％)を得た。

ＥＸ−Ｆ−４)
ＥＸ−Ｆ−３を複数回製造した生成物を合わせてMerkシリカゲルMODCOLカラム上５００ｍＬ／分の流量でＭｔＢＥ：ヘプタン(６０：４０)均一でＨＰＬＣカラムクロマトグラフィによって精製した。回収した６３ｇの２回目の精製を、キラルPak-ADカラム上のキラルＨＰＬＣカラムクロマトグラフィにより５５０ｍＬ／分の流量でＡ：Ｂ(１０：９０)(Ａ：１００％エタノール，Ｂ：１００％ヘプタン)均一で行った。生成物を含む画分を合わせて濃縮し、透明な油状物として所望の保護されたＬ,Ｅ−アリル型アミジン生成物４１ｇ(６８％)を得、¹⁹ＦＮＭＲおよびキラルクロマトグラフィにより、これには所望のＬおよびＥ異性体しか含まれなかった。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝４９６.２ [Ｍ＋Ｎａ]⁺ [Ｍ＋ＮＨ₄]⁺ Ｃ₂₁Ｈ₃₂ＦＮ₃Ｏ₈のＨＲＭＳ計算値：４９１.２５０７[Ｍ＋ＮＨ₄]⁺，実測値：４９１.２５１７ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ1.48 (s, 18H), 1.85 (m, 1H), 2.2 (m, 3H), 2.25 (s, 3H), 3.64 (s, 3H), 4.25 (m, 2H), 4.8 (m, 1H), 5.3 (dt, 1H, J = 20Hz)。¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ-110.8 (q, 1 F, J = 20 Hz)。

ＥＸ−Ｆ−５)
ＥＸ−Ｆ−４の生成物(２２.５ｇ，０.０４７mol)をメタノール１１２ｍＬ中に溶解した。激しい撹拌を開始し、水中の４０％酢酸２２５ｍＬ、続いて亜鉛粉末(１１.５ｇ，０.１７７mmol)を加えた。撹拌反応物を還流(約６０℃)下に２.５時間置き、その時点でＨＰＬＣ分析はほとんどの出発物質が消費されたことを示した。反応物を冷まし、セライトを通して反応混合物からＺｎを濾過し、セライトをさらなるメタノールでよく洗浄した。濾液およびメタノール洗浄液を合わせて濃縮した。生成した油性の白色固形物を塩化メチレン(２×５００ｍＬ)で洗浄し、セライトパッドを通して濾過し、さらに塩化メチレン５００ｍＬの洗浄を実施した。濾液を合わせて濃縮し、明るい黄色の油を得た。粗物質(明るい黄色の油３９ｇ)を、メタノール：塩化メチレン：酢酸(８０：１９：１)で溶出する２００ｍＬシリカゲル上のプラグ濾過によって精製して所望の生成物１３ｇ(８３％)を得た。ＬＣＭ：ｍ／ｚ＝４３２.３ [Ｍ＋Ｈ]⁺１[Ｍ＋Ｈ]⁺Ｃ₁₅Ｈ₂₆ＦＮ₃Ｏ₄のＨＲＭＳ計算値：３３２.１９８６ [Ｍ＋Ｈ]⁺ 実測値：３３２.１９８２ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ)δ1.42 (s, 9H), 1.7 (m, 1H), 1.9 (m, 1H), 2.17 (m, 2H), 2.22 (s, 3H), 3.3 (m, 1 H), 3.7 (s, 3H), 4.2 (d, 2H), 5.1 (dt, ビニル, 1H, J = 21 Hz)。¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ)δ-110.83 (m, 1F, J = 21 Hz)。

実施例Ｆ)
６.０ＮＨＣｌ(７５０ｍＬ)中のＥＸ−Ｆ−５の生成物(２２ｇ，０.０６６mol)の溶液を４５分間還流させた。溶媒を真空下で除去した。生成した固形物を、さらに３回水中に溶解して濃縮した。粗物質を、１００％均一なＢで３０分間、続いて０〜１００％Ａの勾配で１０分間そして１００％Ａの洗浄液で２０分間ポンピングして６０分かけて溶出する(Ａ：１００％アセトニトリル、Ｂ：０.００２５％酢酸入り１００％Ｈ₂Ｏ)YMC ODS-AQカラム上の逆相ＨＰＬＣカラムクロマトグラフィによって精製した。生成物を含む画分を合わせて濃縮し、二塩酸塩として所望のアセトアミジン生成物３.５ｇ(６８％)を得、これには、所望の(２Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩生成物のみ含まれており、白色固形物(融点５１.５〜５６.３℃)として得た。¹⁹ＦＮＭＲにより、これには所望のＥ異性体しか含まれていなかった。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝２１８.１ [Ｍ＋Ｈ]⁺ Ｃ₉Ｈ₁₆ＦＮ₃Ｏ₂のＨＲＭＳ計算値：２１８.１３０５ [Ｍ＋Ｈ]⁺ 実測値：２１８.１３２５ ¹ＨＮＭＲ(Ｄ_2O)δ1.8 (m, 2H), 2.05 (m, 2H), 2.1 (s, 3H), 3.7 (t, 1H), 4.00 (d, 2H), 5.3 (dt, ビニル, 1 H, J = 21 Hz)。¹⁹ＦＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)δ−109.9 (m, 1 F, J = 20 Hz)。[δ]₅₈₉＝＋１５.３(Ｃ，０.３３４，(Ｈ₂Ｏ)；)。[δ]₃₆₅＝+５２.８(Ｃ，０.３３４，(Ｈ₂Ｏ)；)

実施例Ｇ

(２Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−ヒドロキシイミノエチル)アミノ]−５−ヘプタン酸

ＥＸ−Ｇ−１)
メタノール１００ｍＬ中のＥＸ−Ｆ−３の生成物(１４ｇ，３０.０mmol)の冷たい(０℃)撹拌溶液にガス状ＨＣｌを５分間バブリングした。生成した暗黄色溶液を、さらに３０分間撹拌し、その時点でＨＰＬＣは出発物質が完全に消費されたことを示した。生成した混合物を飽和ＮａＨＣＯ₃でｐＨ＝８に中和し、生成物をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥、濃縮して暗黄色の油として所望のアミノエステル生成物を得、これを粗製のまま次の工程にかけた。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝２７４[Ｍ＋Ｎａ]⁺ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ1.8 (m, 4H), 2.25 (s, 3H), 3.42 (bm, 1H), 3.80 (s, 3H), 4.4 (dd, 2H), 5.40 (dt, ビニル, 1H, J = 21Hz)。¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ-110.38 (m, 1F, J = 21 Hz)

実施例Ｇ)
２.５ＮＮａＯＨ(７０ｍＬ)中のＥＸ−Ｇ−１の生成物(８ｇ，３０mmol)の溶液を１０分間撹拌し、その時点でＨＰＬＣ分析は出発物質が完全に消費されたことを示した。生成した溶液を１２ＮＨＣｌ(約５０ｍＬ)でｐＨ＝７〜８に中和して濃縮した。生成したスラリーをメタノールで洗浄し、濾過して塩を除去し、濃縮して褐色がかった油を得た。粗物質を、１００％均一なＢで３０分間、続いて０〜１００％のＡの勾配で１０分間そして１００％Ａの洗浄液で２０分間ポンピングして６０分かけて溶出する(Ａ：１００％アセトニトリル、Ｂ：１００％)YMC ODS-AQカラム上の逆相ＨＰＬＣカラムクロマトグラフィによって精製した。生成物を含む画分を合わせて濃縮し、白色固形物として所望の生成物１.０ｇ(１４％)を得た。生成物を熱い水およびイソプロピルアルコールから再結晶し、濾過によって集め、純粋な(２Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−６−フルオロ−７− [(１−ヒドロキシイミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸を白色結晶質固形物として得た。融点：１９８.００〜２００.００℃。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝２３４.１[Ｍ＋Ｈ]⁺ ¹ＨＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)δ1.8 (m, 4H), 2.05 (m, 2H), 3.6 (t, 1H), 3.9 (d, 2H), 5.2 (dt, ビニル, 1H, J = 21 Hz)。 ¹⁹ＦＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)δ-112.1 (m, 1F, J = 20 Hz) Ｃ₉Ｈ₁₆ＦＮ₃Ｏ₃の分析計算値：C, 46.35 ; H, 6.91 ; N, 18.02 ; O, 20.58 実測値：C, 46.44 ; H, 6.95 ; N, 17.94 ; O, 20.78 キラル分析＞９７.７％：CrownPak CR(＋)，０.８ｍＬ／分，１００％Ａで均一(Ａ：水性ＨＣｌＯ₄，ｐＨ＝１.５)

実施例Ｈ

(２Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−Ｎ−(１Ｈ−テトラゾール−５−イル)５−ヘプテンアミド，二塩酸塩

ＥＸ−Ｈ−１)
ＥＸ−Ｆ−３の生成物(６.１ｇ，０.０１３mol)をメタノール４ｍＬ中に溶解した。激しい撹拌を開始し、６ＮＨＣｌ(１０ｍＬ)を加えた。撹拌反応物を還流(約６０℃)下で１８時間置き、その時点でＨＰＬＣ分析はほとんどの出発物質が消費されたことを示した。反応物を冷まし、濃縮して橙色の油３.３ｇ(１００％)を得た。ＬＣＭ：ｍ／ｚ＝２８２[Ｍ＋Ｎａ]⁺

ＥＸ−Ｈ−２)
ＥＸ−Ｈ−１の生成物(３.３ｇ，０.０１３mol)をＨ₂Ｏ：ジオキサン(１：１)１２ｍＬ中に溶解した。撹拌を開始し、トリエチルアミン(１.９５ｇ，０.０１９mol)を加えた。反応物を０℃に冷やし、ジ−tert−ブチルジカーボネート(３.４ｇ，０.０１６mol)を加えた。反応物を室温に加温させ、この時にアセトニトリル(４ｍＬ)を加えて固形物を溶解した。反応物を室温で１８時間撹拌し、この時点で、ＨＰＬＣ分析はほとんどの出発物質が消費されたことを示した。反応物を１.０ＮＫＨＳＯ₄(２５ｍＬ)でクエンチし、酢酸エチル(３×５０ｍＬ)で抽出し、有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥、濃縮した。粗物質(黒ずんだ油３.５ｇ)を、メタノール：塩化メチレン：酢酸(４：９５：１)で溶出するフラッシュクロマトグラフィによって精製し、明るい黄色の油として所望の生成物２.４ｇ(５２％)を得た。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝３８２[Ｍ＋Ｎａ]⁺

ＥＸ−Ｈ−３)
ＥＸ−Ｈ−２の生成物(２.４ｇ，０.００７mol)をＴＨＦ１３ｍＬ中に溶解した。撹拌を開始し、５−アミノテトラゾール一水和物(０.８３ｇ，０.００８mol)、続いて１,３−ジイソプロピルカルボジイミド(１.０ｇ，０.００８mol)を加えた。生成した混合物を室温で３時間撹拌し、その時点で、ＨＰＬＣはほとんどの出発物質が消費されたことを示した。反応物に水１２ｍＬを加え、ＴＨＦを真空蒸留によって除去した。エタノール(３０ｍＬ)を加え、反応物を還流に加熱した。還流で１５分後、反応物を−１０℃に冷やし、この時点で、所望の生成物が溶液から沈殿した。生成物を濾過によって集め、白色固形物１.２５ｇ(５０％)を得た。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝４４９[Ｍ＋Ｎａ]⁺

ＥＸ−Ｈ−４)
ＥＸ−Ｈ−３の生成物(１.０ｇ，０.００２３mol)をメタノール５ｍＬ中に溶解した。激しい撹拌を開始し、水中の４０％酢酸１０ｍＬ、続いて亜鉛粉末(０.５ｇ，０.００８mol)を加えた。撹拌反応物を還流(約６０℃)下に１.５時間置き、その時点で、ＨＰＬＣ分析はほとんどの出発物質が消費されたことを示した。反応物を冷まし、セライトを通して反応混合物からＺｎを濾過し、さらにメタノールでセライトを洗浄した。濾液およびメタノール洗浄液を合わせて濃縮した。生成した油性の白色固形物を１００％均一なＢで３０分間、続いて０〜１００％Ａの勾配で１０分間そして１００％Ａの洗浄液で２０分間ポンピングして６０分かけて溶出する(Ａ：１００％アセトニトリル、Ｂ：０.００２５％酢酸入り１００％Ｈ₂Ｏ)YMC ODS-AQカラム上の逆相ＨＰＬＣカラムクロマトグラフィによって精製した。生成物を含む画分を合わせて濃縮し、白色固形物として所望のアセトアミジン生成物０.３９０ｇ(４４％)を得た。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝４０７.３ [Ｍ＋Ｎａ]

実施例Ｈ)
ＥＸ−Ｈ−４の生成物(０.３０ｇ，０.７８０mmol)を濃ＨＯＡｃ５ｍＬ中に溶解した。これにジオキサン中の４ＮＨＣｌ(１ｍＬ)を加えた。反応物を室温で５分間撹拌した。溶媒を真空下で除去した。生成した固形物を、さらに３回水中に溶解して濃縮した。ＨＰＬＣは出発物質の量を示した。固形物を１ＮＨＣｌ中に溶解して３時間撹拌し、この時点で、ＨＰＬＣはほとんどの出発物質が消費されたことを示した。溶液を濃縮し、二塩酸塩として所望のアセトアミジン生成物２９０ｍｇ(９８％)を得た。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝２８５.１ [Ｍ＋Ｈ]

実施例Ｉ

Ｓ−[２−[(１−イミノエチル)アミノ]エチル)]−２−メチル−Ｌ−システイン，二塩酸
塩

実施例−Ｉ−１)
(２Ｒ，４Ｒ)−メチル−２−tert−ブチル−１,３−チアゾリン−３−ホルミル−４−カルボキシレート
Jeanguenat and Seebach, J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1, 2291 (1991) and Pattenden 等 Tetrahedron, 49,2131 (1993)参照：(Ｒ)−システインメチルエステル塩酸塩(８.５８ｇ，５０mmol)、ピバルアルデヒド(８.６１ｇ，１００mmol)およびトリエチルアミン(５.５７ｇ，５５mmol)を、Dean-Starkトラップを用いて水を連続的に除去しながらペンタン(８００ｍｌ)中で還流させた。混合物を濾過して蒸発させた。得られたチアゾリジン(９.１５ｇ，４５mmol)およびギ酸ナトリウム(３.３７ｇ，４９.５mmol)をギ酸(６８ｍｌ)中で撹拌し、０〜５℃で無水酢酸(１３ｍＬ，１３８mmol)を１時間かけて滴下処理した。溶液を室温に加温させて一夜撹拌した。溶媒を蒸発させて、残留物を水性５％ＮａＨＣＯ₃で中和し、エーテル(３×)で抽出した。合わせた有機層を乾燥(無水ＭｇＳＯ₄)、濾過して蒸発させて標題化合物を得、これをヘキサン−エーテルから結晶化させて白色結晶(８.６５ｇ)(全体として８０％，コンホーマーの８：１混合物)として得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ主要コンホーマー：1.04 (s, 9H), 3.29 (d, 1H), 3.31 (d, 1H), 3.78 (s, 3H), 4.75 (s, 1H), 4.90 (t, 1H), 8.36 (s, 1H)。ＭＳｍ／ｚ(エレクトロスプレー)２３２(Ｍ＋Ｈ)⁺(１００％)，２０４(１０) １６４(２４)

実施例−Ｉ−２)
(２Ｒ,４Ｒ)−メチル−２−tert−ブチル−１,３−チアゾリン−３−ホルミル−４−メチル−４−カルボキシレート
無水テトラヒドロフラン(１３０ｍＬ)中の実施例−Ｉ−１の生成物、(２Ｒ,４Ｒ)−メ
チル−２−tert−ブチル−１,３−チアゾリン−３−ホルミル−４−カルボキシレート(８.６５ｇ，３７.４mmol)の溶液に、Ｎ₂下、−７８℃でＤＭＰＵ(２５ｍＬ)を加え、混合物を５分間撹拌した。テトラヒドロフラン中の１Ｍリチウムビス(トリメチルシリル)アミド(３７.５ｍＬ)を加え、混合物を３０分間撹拌した。ヨウ化メチル(５.８４ｇ，４１.１mmol)を加えた後、混合物を−７８℃で４時間保持し、次いで連続的に撹拌しながら室温に加温させた。溶媒を真空下で蒸発させ、ブラインおよび酢酸エチルを加えた。水性相を３×ＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機層を１０％ＫＨＳＯ₄、水およびブラインで洗浄した。次いで、それを乾燥(無水ＭｇＳＯ₄)、濾過して減圧下で全ての溶媒を除去した。残った油を、１〜１０％ＥｔＯＡｃ／ヘキサンを用いるシリカ上のクロマトグラフィにかけて標題化合物(５.７８ｇ，６３％，コンホーマーの２.４：１混合物)を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ主要コンホーマー，1.08 (s, 9H), 1.77 (s, 3H), 2.72 (d, 1H), 3.31 (d, 1H), 3.77 (s, 3H), 4.63 (s, 1H), 8.27 (s, 1H) ；少ないコンホーマー，0.97 (s, 9H), 1.79 (s, 3H), 2.84 (d, 1H), 3.63 (d, 1H), 3.81 (s, 3H), 5.29 (s, 1H), 8.40 (s, 1H) ; ＭＳｍ／ｚ２４６(エレクトロスプレー)(Ｍ＋Ｈ)⁺(１００％)１８８(５５)１６０(９５)Daicel Chemical Industries Chiracel OASカラム上で１６.５分の保持時間，１０〜４０％ＩＰＡ／ヘキサン０〜２５分，９５％＞ｅｅ

実施例−Ｉ−３)
(２Ｒ)２−メチル−Ｌ−システイン塩酸塩
実施例−Ｉ−２の生成物、(２Ｒ,４Ｒ)−メチル−２−tert−ブチル−１,３−チアゾリン−３−ホルミル−４−メチル−４−カルボキシレート(５.７ｇ，２３.２mmol)をＮ₂下で６ＮＨＣｌ(１００ｍＬ)と共に撹拌し、激しく還流させて２日間保持した。溶液を冷まし、ＥｔＯＡｃで洗浄し、蒸発させて生成物(２Ｒ)２−メチル−システイン塩酸塩(３.７９ｇ，９５％)を明るい黄色粉末として得た。¹ＨＮＭＲ(ＤＭＳＯ−ｄ₆)δ1.48 (s, 3H) 2.82 (t, 1H), 2.96 (bs, 2H), 8.48 (s, 3H) ＭＳｍ／ｚ(エレクトロスプレー)１３６ [Ｍ＋Ｈ⁺]

実施例−Ｉ−４)
Ｓ−[２−[ [(１,１−ジメチルエトキシ)カルボニル]アミノ]エチル]−２−メチル−Ｌシステイントリフルオロアセテート
オーブン乾燥して真空冷却された、酸素を含まない１−メチル−２−ピロリジノン(５ｍＬ)を含むＲＢフラスコに水素化ナトリウム(２.６ｇ，鉱油中６０％，６５mmol)を加えた。混合物を−１０℃に冷やし、Ｎ₂下で撹拌した。酸素を含まない１−メチル−２−ピロリジノン(２５ｍｌ)中に溶解された実施例−Ｉ−３の生成物、２−メチル−Ｌ−システイン塩酸塩(３.６ｇ，２１.０mmol)を少しずつ加えた。すべてのＨ₂発生が終わった後、酸素を含まない１−メチル−２−ピロリジノン(１５ｍＬ)中の２−[(１,１−ジメチルエ
トキシカルボニル)−アミノ]エチルブロミド(４.９４ｇ，２１mmol)を−１０℃で加えた。次いで、反応物を４時間撹拌して室温に加温させた。溶液を１ＮＨＣｌで中和し、１−メチル−２−ピロリジノンを真空下で蒸発させて除去した。０.０５％水性トリフルオロ酢酸溶液中の１−２０％アセトニトリルを用いた逆相クロマトグラフィにかけ、適当な画分を凍結乾燥により回収して標題化合物(５.９ｇ)を得た。¹ＨＮＭＲ(ＤＭＳＯ−ｄ₆／Ｄ₂Ｏ)δ1.31 (s, 9H), 1.39 (s, 3H), 2.55 (m, 2H), 2.78 (d, 1H), 3.04 (d, 1 H), 3.06 (t, 2H)。Ｃ₁₁Ｈ₂₂Ｎ₂Ｏ₄ＳのＨＲＭＳ分析値：２７９.１３７５(Ｍ＋Ｈ⁺)，実測値：２７９.１３７９

実施例−Ｉ−５)
Ｓ−(２−アミノエチル)−２−メチル−Ｌ−システイン塩酸塩
実施例−Ｉ−４の生成物、Ｓ−[ ２−[ [(１,１−ジメチルエトキシ)カルボニル]アミノ]エチル]−２−メチル−Ｌ−システイントリフルオロアセテート(５.５ｇ，１４.０mmol)を１ＮＨＣｌ(１００ｍＬ)中に溶解し、窒素下、室温で一夜撹拌した。凍結乾燥によって溶液を除去し、標題Ｓ−(２−アミノエチル)−２−メチル−Ｌ−システイン塩酸塩を得た。¹ＨＮＭＲ(ＤＭＳＯ−ｄ₆／Ｄ₂Ｏ)δ1.43 (s, 3H), 2.72 (m, 2H), 2.85 (d, 1H), 2.95 (t, 2H), 3.07 (d, 1H) ｍ／ｚ [Ｍ＋Ｈ⁺] １７９

実施例Ｉ)
実施例−Ｉ−５の生成物をＨ₂Ｏ中に溶解し、１ＮＮａＯＨを用いてｐＨを１０に調節し、アセトイミド酸エチル塩酸塩(１.７３ｇ，１４.０mmol)を加えた。反応物を１５〜３０分間撹拌し、ｐＨを１０に高め、この過程を３回繰り返した。ＨＣｌを用いてｐＨを３に調節し、溶液をDOWEX 50WX4-200カラム上に装填した。カラムを、Ｈ₂Ｏおよび０.２５ＭＮＨ₄ＯＨ、続いて０.５ＭＮＨ₄ＯＨで洗浄した。０.５ＭＮＨ₄ＯＨ洗浄液からの画分を直ちに凍結して合わせ、そして凍結乾燥して油を得、これを１ＮＨＣｌ中に溶解して蒸発させ、標題化合物を白色固形物(２.７ｇ)として得た。¹ＨＮＭＲ(ＤＭＳＯ−ｄ₆／Ｄ₂Ｏ)δ1.17 (s, 3H), 2.08 (s, 3H), 2.52 (d, 1H), 2.68 (m, 2H), 2.94 (d, 1H), 3.23 (t, 2H)。Ｃ₈Ｈ₁₈Ｎ₃Ｏ₂ＳのＨＲＭＳ計算値：２２０.１１２０ [Ｍ＋Ｈ⁺]，実測値：２２０.１１３３

実施例Ｊ

２−[ [ [２−[(１−イミノエチル)アミノ]エチル]チオ]メチル]−Ｏ−メチル−Ｄ−セリン，二塩酸塩
本実施例で用いた手順および方法は、実施例−Ｉ−２の工程においてヨウ化メチルの代わりにメトキシメチルヨージドを用いた他は実施例Ｉのものと同じであった。これらの手順により標題生成物を白色固形物(２.７ｇ)として得た。¹ＨＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)δ2.06 (s, 3H), 2.70 (m, 3H), 3.05(d, 1H), 3.23 (s, 3H), 3.32 (t, 2H), 3.46 (d, 1H), 3.62 (d, 1H)。Ｃ₉Ｈ₂₀Ｎ₃Ｏ₃ＳのＨＲＭＳ計算値：２５０.１２２５ [Ｍ＋Ｈ⁺]，実測値：２５０.１２２８

実施例Ｋ

Ｓ−[(１Ｒ)−２−[(１−イミノエチル)アミノ]−１−メチルエチル]−２−メチル−Ｌ−システイン，二塩酸塩

実施例−Ｋ−１)
(Ｓ)−１−[(ベンジルオキシカルボニル)アミノ]−２−プロパノール
０℃の無水ベンゼン(６０ｍＬ)中の（Ｓ）−１−アミノ−２−プロパノール(９.７６ｇ，１３０mmol)の溶液に窒素雰囲気下で激しく撹拌しながら無水ベンゼン(１２０ｍＬ)中のクロロギ酸ベンジル(１０.２３ｇ，６０mmol)を２０分かけて少しずつゆっくりと加えた。混合物を０℃で１時間撹拌し、次いで、室温に加温させてさらに２時間撹拌した。混合物を、水(２×)およびブライン(２×)で洗浄した後、有機層を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥した。全ての溶媒を蒸発させて油として標題生成物を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ 1.22 (d, 3H) 2.40 (bs, 1H), 3.07 (m, 1H), 3.37 (m, 1H)), 3.94 (m, 1H), 5.16 (s, 2H), 5.27 (m, 1H), 7.38 (m, 5H)。ＭＳｍ／ｚ (エレクトロスプレー)２３２[Ｍ＋２３]⁺(１００％)，１６６(９６)

実施例−Ｋ−２)
(Ｓ)−１−[(ベンジルオキシカルボニル)アミノ]−２−プロパノールトシレート
０℃の塩化メチレン(６０ｍＬ)中の実施例−Ｋ−１の生成物、(Ｓ)−１−[(ベンジルオキシカルボニル)アミノ]−２プロパノール(９.７４ｇ，４６.７mmol)およびトリエチルアミン７.２７ｇ，７２mmol)の溶液に、窒素下で激しく撹拌しながら塩化メチレン(１８ｍＬ)中のトルエンスルホニルクロリド(９.１５ｇ，４８mmol)を２０分かけてゆっくりと少しずつ加えた。混合物を室温に加温させて窒素下でさらに３６時間撹拌した。有機層を１ＮＨＣｌ、水、５％ＮａＨＣＯ₃溶液、水およびブラインで洗浄した後、無水ＭｇＳＯ₄で乾燥した。全ての溶媒を蒸発させて白色固形物を得、これを酢酸エチル／ヘキサン(１:４)を用いてシリカプラグを通過させて過剰のトルエンスルホニルクロリドを除去し、次いで酢酸エチル／ヘキサン(１:３)を用いて白色結晶として標題生成物を得た。この物質を、酢酸エチル／ヘキサンから再結晶させて白色の針晶(１０.８ｇ)を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ1.22 (d, 3H) 2.39 (s, 3H), 3.20 (m, 1H), 3.43 (dd, 1H), 4.66 (m, 1H), 5.02 (m, 1H), 5.04 (ABq, 2H), 7.34 (m, 7H), 7.77 (d, 2H)。ＭＳｍ／ｚ(エレクトロスプレー)３８６[Ｍ＋２３]^＋(１００％)，３２０(６６)。 Regis Technologies Inc.Perkle Covalent (R, R)-GEM1 HPLCカラム上でイソプロパノール／ヘキサンの移動層を用い、そして１０％イソプロパノールを５分間、次いで２５分間かけて１０〜４０％イソプロパノールの勾配をかけ、そしてＵＶおよびレーザ旋光分析検出器の両方を用いて生成物を試験した。保持時間の主要ピーク：２２.２分，＞９８％ｅｅ。

実施例−Ｋ−３)
Ｓ−[(１Ｒ)−２−(ベンジルオキシカルボニルアミノ)−１−メチルエチル]−２−メチル−Ｌ−システイントリフルオロアセテート
実施例−Ｉ−３の生成物、２−メチル−Ｌ−システイン塩酸塩(１ｇ，６.５mmol)をオーブン乾燥してＮ₂フラッシュしたＲＢフラスコ中に加え、酸素を含まない１−メチル−２−ピロリジノン(５ｍＬ)中に溶解し、系を０℃に冷やした。水素化ナトリウム(０.８６ｇ，鉱油中６０％，２０.１mmol)を加え、混合物を０℃で１５分間撹拌した。酸素を含まない１−メチル−２−ピロリジノン(１０ｍＬ)中に溶解した実施例−Ｋ−２の生成物、(２Ｓ)−１−[(Ｎ−ベンジルオキシカルボニル)アミノ]−２−プロパノールトシレート(２.５ｇ，７mmol)の溶液を１０分かけて加えた。０℃で１５分後、反応混合物を室温で４.５時間撹拌した。次いで、１ＮＨＣｌを用いて溶液をｐＨ４に酸性化し、１−メチル−２−ピロリジノンを真空下での蒸発によって除去した。０.０５％水性トリフルオロ酢酸溶液中の２０〜４０％アセトニトリルを用いた逆相クロマトグラフィにかけ、凍結乾燥により回収して標題化合物を得た(０.５７ｇ)。¹ＨＮＭＲ(Ｈ₂Ｏ，４００ＭＨｚ)δ1.0 (d, 3H), 1.4 (s, 3H), 2.6 (m, 2H), 2.8 (m, 1H), 3.1 (m, 2H), 3.6 (s, 1H), 5.0 (ABq, 2H), 7.3 (m, 5H)。ＭＳｍ／ｚ(エレクトロスプレー)：３２７ [Ｍ＋Ｈ⁺](１００％)、２３８(２０)、２２４(１０)および１００(２５)

実施例−Ｋ−４)
Ｓ−[(１Ｒ)−２−アミノ−１−メチルエチル]−２−メチル−Ｌ−システイン塩酸塩
実施例−Ｋ−３の生成物、Ｓ−[(１Ｒ)−２−(ベンジルオキシカルボニルアミノ)−１−メチルエチル]−２−メチル−Ｌ−システイントリフルオロアセテート(０.５ｇ，１.１４mmol)を６ＮＨＣｌ中に溶解し、１.５時間還流させた。次いで、混合物を室温に冷ましてＥｔＯＡｃで抽出した。水性層を真空下で濃縮し、標題生成物、(２Ｒ,５Ｒ)−Ｓ−(１−アミノ−２−プロピル)−２−メチル−システイン塩酸塩(０.２９ｇ)を得、これをさらに精製することなく用いた。¹ＨＮＭＲ(４００ＭＨｚ，Ｈ₂Ｏ)δ 1.2 (m, 3H), 1.4 (m, 3H), 2.7 (m, 1H), 2.8-3.2 (m, 2H), 3.4 (m, 1H)。(回転異性形態のためのピークはいくつか重複した)ＭＳｍ／ｚ(エレクトロスプレー)：１９３ [ Ｍ＋Ｈ⁺](６１％)，１７６(５３)，１４２(３４)，１３４(１００)および１０２(１０)

実施例Ｋ)
実施例−Ｋ−４の生成物、Ｓ−[(１Ｒ)−２−アミノ−１−メチルエチル]−２−メチル−Ｌ−システイン塩酸塩(０.２ｇ，０.７６mmol)をＨ₂Ｏ２ｍＬ中に溶解し、１ＮＮａＯＨを用いてｐＨを１０.０に調節し、アセトイミド酸エチル塩酸塩 (０.３８ｇ，３mmol)を４つに分けて１０分かけて加え、必要に応じて１ＮＮａＯＨを用いてｐＨを１０.０に調節した。１時間後、１ＮＨＣｌを用いてｐＨを３に調節した。溶液を、水で洗浄したDOWEX 50WX4-200カラム上に装填した。カラムをＨ₂Ｏおよび０.５ＮＮＨ₄ＯＨで洗浄した。塩基性画分を貯めて真空下で濃縮して乾燥状態にした。残留物を１ＮＨＣｌで酸性化し、濃縮して実施例Ｋの標題生成物(４９ｍｇ)を得た。¹ＨＮＭＲ(Ｈ₂Ｏ，４００ＭＨｚ)δ1.3-1.0 (m, 3H), 1.5 (m, 3H), 2.1-1.8 (m, 3H), 3.4-2.6 (m, 5H), 3.6 (m, 1H)(回転異性体が観察された)。ＭＳｍ／ｚ(エレクトロスプレー)：２３４ [Ｍ＋Ｈ⁺](１００％)，１７６(１０)および１３４(１０)

実施例Ｌ

Ｓ−[(１Ｓ)−２−[(１−イミノエチル)アミノ]−１−メチルエチル]−２−メチル−Ｌ−システイン，二塩酸塩
本実施例で使用する手順および方法は、実施例−Ｋ−１の工程において(Ｓ)−１−アミノ−２−プロパノールの代わりに(Ｒ)−１−アミノ−２−プロパノールを用いて標題物質、Ｓ−[(１Ｓ)−２−[(１−イミノエチル)アミノ]−１−メチルエチル]−２−メチル−Ｌシステイン塩酸塩を得たほかは実施例Ｋのものと同じであった。¹ＨＮＭＲ(Ｈ₂Ｏ，４００ＭＨｚ) δ 3.6 (m,1H), 3.4-2.6 (m, 5H), 2.1-1.8 (m, 3H), 1.5 (m, 3H) および 1.3-1.0 (m, 3H) Ｃ₉Ｈ₁₉Ｎ₃Ｏ₂ＳのＨＲＭＳ計算値 [Ｍ＋Ｈ⁺]：２３４.１２７６実測値：２３４.１２８６

実施例Ｍ

Ｓ−[２−[(１−イミノエチル)アミノ]エチル]−２−エチル−Ｌ−システイン，二塩酸塩
本合成で用いた手順および方法は、実施例−Ｉ−２においてヨウ化メチルの代わりにエチルトリフレートを用いたほかは、実施例Ｉに用いたものと同じものであった。水中の１０〜４０％アセトニトリルの勾配を用いる逆相クロマトグラフィにより標題生成物(収率２０％)を精製した。¹ＨＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)δ0.83 (t, 3H), 1.80 (m, 2H), 2.08 (s, 3H), 2.68 (m, 1H), 2.78 (m, 1H), 2.83 (m, 1H), 3.11 (m, 1H), 3.36 (t, 2H)。Ｃ₉Ｈ₂₀Ｎ₃Ｏ₂ＳのＨＲＭＳ計算値：２３４.１２７６ [Ｍ＋Ｈ⁺]，実測値：２３４.１２８４

実施例Ｎ

２−[ [ [ [２−(１−イミノエチル)アミノ]エチル]チオ]メチル]−Ｄ−バリン，二塩酸塩

実施例−Ｎ−１)
イソプロピルトリフレート
窒素下でジエチルエーテル(３００ｍＬ)中で撹拌された銀トリフレート(２５.２５ｇ，９８.３mmol)をエーテル(２００ｍＬ)中のイソプロピルヨージド(１６.５４ｇ，９８.５mmol)で１５分かけて処理した。混合物を１０分間撹拌してから濾過した。濾液を減圧で蒸留した。蒸留物を大気圧で再蒸留してほとんどのジエチルエーテルを除去すると、無色の液体として標題イソプロピルトリフレート−ジエチルエーテル(重量により８４：１６)の混合物(１５.６４ｇ，補正して７０％)が残った。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，４００ＭＨｚ)δ 1.52 (d, 6H), 5.21 (七重項, 1H)。
本実施例で用いた手順および方法は、実施例−Ｉ−２におけるヨウ化メチルをイソプロピルトリフレートで置き換えたほかは実施例Ｉに用いたものと同じものであった。粗製の標題生成物を、水中１０〜４０％アセトニトリルの勾配溶出を用いる逆相クロマトグラフィによって精製した。¹ＨＮＭＲ(Ｈ₂Ｏ，４００ＭＨｚ)δ 0.94 (dd, 6H), 2.04 (七重項, 1H), 2.10 (s, 3H), 2.65, 2.80 (d m, 2H), 2.85, 3.10 (dd, 2H), 3.37 (t, 2H)。Ｃ₁₀Ｈ₂₂Ｎ₃Ｏ₂ＳのＨＲＭＳ計算値：２４８.１４３３ [Ｍ＋Ｈ⁺]，実測値：２４８.１４５０

実施例Ｏ

Ｓ−[２−(１−イミノエチルアミノ)エチル]−２−メチル−(Ｄ／Ｌ)−システイン，ビストリフルオロアセテート

実施例−Ｏ−１)
Ｓ−(２−アミノエチル)−Ｌ−システイン，メチルエステル
Ｓ−(２−アミノエチル)−Ｌ−システインの試料１０ｇ(５０mmol)をメタノール４００ｍＬ中に溶解した。この冷やした溶液を無水ＨＣｌ中で３０分間バブリングした。室温で一夜撹拌した後、溶液を濃縮して標題化合物１２.７ｇを得た。

実施例−Ｏ−２)
Ｎ−｛４−クロロフェニル)メチレン]−Ｓ−[２−[ [(４−クロロフェニル)メチレン]アミノ]エチル]−Ｌ−システイン，メチルエステル
実施例−Ｏ−１の生成物、Ｓ−(２−アミノエチル)−Ｌ−システインメチルエステルの
試料１２.７ｇ(５０mmol)をアセトニトリル中に溶解した。この溶液に無水ＭｇＳＯ₄(１
２.２ｇ，１００mmol)、４−クロロベンズアルデヒド１４ｇ(１００mmol)およびトリエチルアミン１００mmolを加えた。この混合物を１２時間撹拌し、濃縮して少体積にし、酢酸エチル５００ｍＬで希釈した。有機溶液を、(０. １％)ＮａＨＣＯ₃、(２Ｎ)ＮａＯＨおよびブライン溶液で連続的に洗浄した。有機物を乾燥(無水ＭｇＳＯ₄)、濾過し、濃縮して標題化合物７.５ｇを得た。[Ｍ＋Ｈ⁺]＝１７９

実施例−Ｏ−３)
Ｎ−[４−クロロフェニル)メチレン]−Ｓ−[２−[ [(４−クロロフェニル)メチレン]アミノ]エチル]−２−メチル−Ｄ／Ｌシステインメチルエステル
無水ＴＨＦ中の実施例−Ｏ−２の生成物、Ｎ−[４−クロロフェニル)メチレン]−Ｓ−[２−[ [(４−クロロフェニル)メチレン]アミノ]エチル]−Ｌ−システインメチルエステル(７.５ｇ，１７mmol)の試料を、窒素下−７８℃でナトリウムビス(トリメチルシリル)アミド１７mmol、続いてヨウ化メチル２.４ｇ(１７mmol)で処理した。溶液を−７８℃で４時間保持してから連続的に撹拌して室温に加温させた。溶媒を真空下で蒸発させてブラインおよび酢酸エチルを加えた。水性相を３×ＥｔＯＡｃで抽出し、合わせた有機層を１０％ＫＨＳＯ₄、水およびブラインで洗浄した後、これを乾燥(無水ＭｇＳＯ₄)、濾過し、蒸発させて標題化合物を得た。

実施例−Ｏ−４)
Ｓ−(２−アミノエチル)−２−メチル−Ｄ／Ｌシステイン，塩酸塩
実施例−Ｏ−３の生成物、Ｎ−[ ４−クロロフェニル)メチレン]−Ｓ−[２−[ [(４−クロロフェニル)メチレン]アミノ]エチル]−２−メチル−Ｄ／Ｌシステインメチルエステルの試料(４.３７ｇ，１０mmol)を２ＮＨＣｌと共に一夜撹拌して加熱(６０℃)し、溶液を酢酸エチルで洗浄(３×)した。水溶液を凍結乾燥して標題化合物を得た。

実施例Ｏ)
実施例−Ｏ−４の生成物、Ｓ−(２−アミノエチル)−２−メチル−Ｄ／Ｌ−システイン二塩酸塩の試料(２.５ｇ，１０mmol)をＨ₂Ｏ中に溶解し、１ＮＮａＯＨを用いてｐＨを１０に調節した。次いで、アセトイミド酸エチル塩酸塩(１.２４ｇ，１０.０mmol)を反応混合物に加えた。反応物を１５〜３０分間撹拌し、ｐＨを１０に高め、この過程を３回繰り返した。ＨＣｌ溶液を用いてｐＨを４に下げ、溶液を蒸発させた。残留物を、移動相として０.０５％トリフルオロ酢酸を含むＨ₂Ｏを用いる逆相ＨＰＬＣで精製して実施例Ｏの標題生成物を得た。Ｍ＋Ｈ＝２２０

実施例Ｐ

(２Ｒ)−２−アミノ−３ [ [２−[(１−イミノエチル)アミノ]エチル]スルフィニル]−２−メチルプロパン酸，二塩酸塩
水３ｍＬ中のＳ−[２−[(１−イミノエチル)アミノ]エチル]−２−メチル−Ｌ−システイン，二塩酸塩(実施例Ｉ、０.２ｇ、０.７３mmol)の溶液を撹拌して０℃に冷やし、ギ酸(０.４ｍＬ，０.７３mmol)中の３％Ｈ₂Ｏ₂(０.８ｍＬ，０.７３mmol)の溶液を０.３ｍＬずつ加えた。冷浴をはずし、反応混合物を室温で４８時間撹拌した。溶液を真空下で濃縮し、水(１０ｍＬ)で希釈し、再び濃縮して粗スルホンを得た。この残留物をクロマトグラフ処理(０.０５％トリフルオロ酢酸を含むＨ₂Ｏの移動相を用いるＣ−１８逆相)して純粋なスルホンを得た。スルホンを１ＭＨＣｌ(１０ｍＬ)で処理し、真空下で濃縮してＨＣ
ｌ塩の無色の油として標題化合物の２つのジアステレオマー混合物１４０ｍｇを得た。¹
ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，Ｄ₂Ｏ)δ 1.5 (s, 2H), 1.6 (s,1H), 2.0 (s, 3H), 3.1 (m, 2H), 3.3 (m, 2H) 3.6 (m, 2H)。Ｃ₈Ｈ₁₈Ｎ₃Ｏ₃ＳのＨＲＭＳ計算値：２３６.１０６９ [Ｍ＋Ｈ⁺]，実測値：２３６.１０２４

実施例Ｑ

(２Ｒ)−２−アミノ−３[[２−[(１−イミノエチル)アミノ]エチル]スルホニル]−２−メチルプロパン酸二塩酸塩
水２ｍＬ中のＳ−[２−[(１−イミノエチル)アミノ]エチル]−２−メチル−Ｌ−システイン二塩酸塩、実施例Ｉの生成物(０.１５ｇ，０.５４mmol)の溶液を０℃に冷やし、ギ酸(０.８ｍＬ，１４.６mmol)中の３％Ｈ₂Ｏ₂(１.６ｍＬ，１.４６mmol)の溶液を加えた。冷浴をはずし、反応混合物を室温で１８時間撹拌した。溶液を真空下で濃縮し、水１０ｍＬで希釈し、再び濃縮して粗スルホキシドを得た。残留物を水４ｍＬで希釈し、２.５ＮＮａＯＨでｐＨ９に調節した。アセトン(５ｍＬ)、続いてＢｏｃ₂Ｏ(０.２ｇ)を加え、反応物を室温で４８時間撹拌した。反応混合物を、１ＭＨＣｌを用いてｐＨ６に調節し、真
空下で濃縮した。この残留物をクロマトグラフ処理(Ｃ−１８逆相；４０〜５０％ＡＣＮ：Ｈ₂Ｏ，０.０５％ＴＦＡ)して純粋なＢｏｃ保護された物質を得た。画分を真空下で濃縮し、残留物を１ＮＨＣｌ(３ｍＬ)で１時間処理した。溶液を濃縮して無色の油として標題化合物３０ｍｇを得た。¹ＨＮＭＲ(４００ＭＨｚ，Ｄ₂Ｏ)δ 4.0 (d,1H), 3.7 (d,1H), 3.6 (t, 2H), 3.5 (t, 2H), 2.1 (s, 3H)および1.5 (s, 3H) ppm。Ｃ₈Ｈ₁₈Ｎ₃Ｏ₄ＳのＨＲＭＳ計算値：２５２.１０１８ [Ｍ＋Ｈ⁺]，実測値：２５２.０９９２

実施例Ｒ

(２Ｓ,５Ｚ)−２−アミノ−６−メチル−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩

実施例Ｒ−１)

トルエン(６０ｍＬ)中のトリエチル−２−ホスホノプロピオネート(６.５ｍｇ，２７.１mmol)の溶液を０.５Ｍカリウムビス(トリメチルシリル)アミド(トルエン中５０.０ｍＬ)で処理し、生成したアニオンを実施例Ｕ−４(下の実施例Ｕ参照)の方法によって実施例Ｕ−３のアルデヒド生成物と縮合させた。これにより、クロマトグラフィの後、それぞれ所望のＺおよびＥジエステルの３：７混合物８ｇを得た。(¹Ｈ)ＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃)6.7-6.8 ppm (m,1H), 5.9 ppm (m,1H), 4.9 ppm (m,1H), 4.2 ppm (q, 2H), 3.7 ppm (s, 3H), 2.5 ppm (m, 1H), 2.2-2.3 ppm (m, 2H), 2.0 ppm (m, 1H), 1.9 ppm (s, 3H), 1.8 ppm (s, 3H), 1.5 ppm (s, 18H), 1.3 ppm (t, 3H)。

実施例Ｒ−２)

Ｅｔ₂Ｏ(３０ｍＬ)中の実施例Ｒ−１の生成物の混合物(８５０ｍｇ，２.０mmol)を、実施例Ｕ−５の方法によってジイソブチルアルミニウム／水素化物(ＤＩＢＡＬ)を用いて２０分かけて還元して記載された所望のＥ−アルコールおよび還元されてないＺ−エステルの粗混合物を得た。この混合物を、ｎ−ヘキサン：ＥｔＯＡｃ(９：１)からｎ−ヘキサン：ＥｔＯＡｃ(１：１)で溶出してシリカゲル上でクロマトグラフ処理して所望の物質であるＺ−エステル(５３０ｍｇ)およびＥアルコールの試料を得た。Ｚ−エステル：(¹Ｈ)ＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃)5.9 ppm (m,1H), 4.9 ppm (m,1H), 4.2 ppm (q, 2H), 3.7 ppm (s, 3H), 2.5 ppm (m,1H), 2.2-2.3 ppm (m, 2H), 1.9 ppm (s, 3H), 1.5 ppm (s, 18H), 1.3 ppm (t, 3H)。Ｅ−アルコール：(¹Ｈ)ＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃)5.35 ppm (m, 1H), 4.9 ppm (m, 1H), 3.95 ppm (s, 1H), 3.7 ppm (s, 3H), 1.8-2.2 ppm (m, 6H), 1.6 ppm (s, 3H), 1.5 ppm (s, 18H)。

実施例Ｒ−３)

Ｅｔ₂Ｏ(３０ｍＬ)中の実施例Ｒ−２の生成物Ｚ−エステル(５１０ｍｇ，１.２mmol)を、実施例Ｕ−５の方法によってジイソブチルアルミニウム／水素化物(ＤＩＢＡＬ)を用いて２時間かけて還元して記載した所望の粗Ｚ−アルコールを得た。この物質を、ｎ−ヘキサン：ＥｔＯＡｃ(９：１)〜ｎ−ヘキサン：ＥｔＯＡｃ(８：２)で溶出するシリカゲルにクロマトグラフ処理して所望のＺ−アルコール生成物３４０ｍｇを得た。(¹Ｈ)ＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃)δ5.3 ppm (m, 1H), 4.9 ppm (m, 1H), 4.2 ppm (d, 1H), 4.0 ppm (d, 1H), 2.2 ppm (m, 3H), 1.95 ppm (m, 1H), 1.8 ppm (s, 3H), 1.5 ppm (s, 18H)。

実施例Ｒ−４)

実施例Ｒ−３のアルコール生成物(３４０ｍｇ，０.９mmol)のＣＨ₂Ｃｌ₂溶液(５ｍＬ)を、トリエチルアミン(１５１ｍｇ，１.５mmol)で処理した。氷浴中で冷やしたこの溶液にメタンスルホニルクロリドのＣＨ₂Ｃｌ₂溶液(１.５ｍＬ)を加えた。１５分後、氷浴をはずし、反応物を周囲温度で２０時間撹拌した。次いで、反応混合物を１０％ＫＨＳＯ₄で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥、そして減圧下の全ての溶媒を除去して所望のＺ−アリル型クロリド３５０ｍｇを得た。(¹Ｈ)ＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃)δ 5.4 ppm (m, 1 H), 4.9 ppm (m, 1H), 4.1 ppm (d, 1H), 4.0 ppm (d, 1H), 2.1 ppm (m, 3H), 1.95 ppm (m, 1H), 1.8 ppm (s, 3H), 1.5 ppm (s, 18H)。

実施例Ｒ−５)

下の実施例Ｓ−２の方法によってＤＭＦ中のカリウム３−メチル−１,２,４−オキサ−ジアゾリン−５−オンの懸濁液を、実施例Ｒ−４の生成物のＤＭＦ溶液と反応させて物質を得た。

実施例Ｒ−６)

実施例Ｕ−７の方法によって実施例Ｒ−５の生成物を、ＨＯＡｃ中の亜鉛と反応させてアミジンを得た。

実施例Ｒ−７)

実施例Ｒ−６の生成物を氷ＨＯＡｃ中のジオキサン中の４ＮＨＣｌと反応させてアミジンを得た。

実施例Ｒ)

実施例Ｒ−７の生成物を脱保護してアミノ酸，二塩酸塩を得た。

実施例Ｓ

(２Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−６−メチル−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩

実施例Ｓ−１)

実施例Ｒ−４の方法によって実施例Ｒ−２のＥ−アルコール生成物(１.３ｇ，３.３mmol)をトリエチルアミン(５２５ｍｇ，５.２mmol)およびメタンスルホニルクロリド(５６０ｍｇ，５.２mmol)と反応させて所望のＥ−アリル型クロリド１.４ｇを得た。(¹Ｈ)ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃)δ 5.5 ppm (m, 1H), 4.9 ppm (m, 1H), 4.0 ppm (s, 2H), 3.7 ppm (s, 3H), 2.1-2.3 ppm (m, 3H), 1.9 ppm (m, 1H), 1.7 ppm (s, 3H), 1.5 ppm (s, 18H)。

実施例Ｓ−２)

ＤＭＦ５ｍＬ中のカリウム３−メチル−１,２,４−オキサ−ジアゾリン−５−オン(４６０ｍｇ，３.３５mmol)の懸濁液を実施例Ｓ−１の生成物のＤＭＦ(１５ｍＬ)溶液で処理した。この反応混合物を５０℃で１７時間撹拌した後、さらにジアゾリン−５−オン塩５０ｍｇ(０.０４mmol)を加えた。撹拌した反応物の加熱をさらに３時間続けた後、室温に冷まして水１８０ｍＬで希釈した。この混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、抽出物をｎ−ヘキサン１２０ｍＬで希釈して水で洗浄し、Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥、そして減圧下で全ての溶媒を除去して物質１.３ｇを得た。(¹Ｈ)ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃) 5.5 ppm (m, 1H), 4.9 ppm (m, 1H), 4.2 ppm (s, 3H), 3.7 ppm (s, 3H), 2.2 ppm (m, 3H), 1.95 ppm (m, 1H), 1.8 ppm (s, 3H), 1.5 ppm (s, 18H)。

実施例Ｓ−３)

実施例Ｕ−７(下の実施例Ｕ参照)の方法によって実施例Ｓ−２の生成物(４６０ｍｇ，１.０mmol)をＨＯＡｃ中の亜鉛と反応させてＨＰＬＣ精製後、所望のアミジン３１２ｍｇを得た。

実施例Ｓ)

実施例Ｕの方法によって実施例Ｓ−３の生成物(７７ｍｇ，０.２mmol)を２ＮＨＣｌで脱保護してＥ−アミノ酸，二塩酸塩６３ｍｇを得た。

実施例Ｔ

(２Ｓ,５Ｚ)−２−アミノ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩

実施例Ｔ−１)
メチルビス(トリフルオロエチル)ホスホノアセテート(４.７７ｇ，１５mmol)および１８−クラウン−６の２３.７ｇ(９０mmol)を無水ＴＨＦ８０ｍＬ中に溶解し、−７８℃に冷やした。この溶液にカリウムビス(トリメチルシリル)アミド３０ｍＬ(１５mmol)、続いて実施例Ｕ−３(下の実施例Ｕ参照)からのＮ,Ｎ−ジＢｏｃグルタミン酸アルデヒドメチルエステル５.１ｇ(１４.７mmol)を加えた。−７８℃で３０分間撹拌した後、反応物を水性ＫＨＳＯ₄でクエンチした。反応混合物をＥｔＯＡｃで抽出し、濃縮して所望の化合物２.９５ｇ(４９％)を得た。質量スペクトルＭ＋Ｈ＝４０２

実施例Ｔ−２)
実施例Ｕ−５の方法によって実施例Ｔ−１の生成物を還元して所望の化合物を得た。

実施例Ｔ−３)
実施例Ｕ−６の方法によって実施例Ｔ−２の生成物を３−メチル−１,２,４−オキサジアゾリン−５−オンと反応させて所望の化合物を得た。

実施例Ｔ−４)
実施例Ｕ−７の方法によって実施例Ｔ−３の生成物を脱保護して所望の化合物を得た。

実施例Ｔ)
実施例Ｔ−４の生成物を２ＮＨＣｌ中に溶解し、還流で加熱した。反応混合物を冷まして濃縮し、所望の生成物０.１２ｇを得た。¹Ｈ−ＮＭＲ 1.8-2.0 (m, 2H); 2.05 (s, 3H); 2.15 (q, 2H); 3.75 (d, 2H); 3.9 (t, 1 H) ; 5.45 (m, 1 H) ; 5.6 (m, 1 H)。

実施例Ｕ

(２Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩

実施例Ｕ−１)
Ｌ−グルタミン酸(６.０ｇ，４０.７８mmol)をメタノール(１００ｍＬ)中に溶解した。反応混合物に、トリメチルシリルクロリド(２２.９ｍＬ，１８０mmol)を窒素下、０℃で加えて一夜撹拌した。窒素下０℃の反応混合物にトリエチルアミン(３７ｍＬ，２５６mmol)およびジジ−tert−ブチルカーボネート(９.８ｇ，４４.９mmol)を加え、２時間撹拌した。溶媒を除去して残留物をエーテル(２００ｍＬ)で磨砕した。磨砕した混合物を濾過した。濾液を蒸発させて油状物にし、シリカ上で酢酸エチルおよびヘキサンにより溶出してクロマトグラフ処理し、モノｂｏｃＬ−グルタミン酸ジエステル(１０.９９ｇ，９８％)を得た。

実施例Ｕ−２)
モノｂｏｃＬ−グルタミン酸(１０.９５ｇ，３９.８mmol)をアセトニトリル(１３０ｍＬ)中に溶解した。反応混合物に４−ジメチルアミノピリジン(４５０ｍｇ，３.６８mmol)およびジジ−tert−ブチルカーボネート(１４.４５ｇ，６６.２mmol)を加え、２０時間撹拌した。溶媒を蒸発させて残留物をシリカ上でクロマトグラフ処理し、酢酸エチルおよびヘキサンで溶出してジ−ｂｏｃ−Ｌ−グルタミン酸ジエステル(１４.６３ｇ，９８％)を得た。

実施例Ｕ−３)
実施例Ｕ−２の生成物(１０.７９ｇ，２８.７mmol)をジエチルエーテル(２００ｍＬ)中に溶解し、ドライアイス浴中で−８０℃に冷やした。反応混合物にジイソブチルアルミニウムヒドリド(３２.０ｍＬ，３２.０mmol)を加え、２５分間撹拌した。反応混合物をドライアイス浴からはずし、水(７.０ｍＬ)を加えた。酢酸エチル(２００ｍＬ)を反応混合物に加え、２０分間撹拌した。硫酸マグネシウム(１０ｇ)を反応混合物に加え、１０分間撹拌した。セライトを通して反応混合物を濾過し、濃縮して透明な黄色の油状物(１１.１９ｇ)を得た。黄色の油状物をシリカ上でクロマトグラフ処理して酢酸エチルおよびヘキサ
ンで溶出した。生成物(８.６１，８７％)は透明な明るい黄色の油状物であった。質量分析：Ｍ＋Ｈ３４６，Ｍ＋Ｎａ３７８(¹Ｈ) ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃)9.74 ppm (s, 1H), 4.85 ppm (m, 1H), 3.69 ppm (s, 3H), 2.49 ppm (m, 3H), 2.08 ppm (m, 1H),
1.48 ppm (s, 18H)。

実施例Ｕ−４)
トリエチルホスホノアセテート(６.２ｍＬ，３１.２mmol)をトルエン(３０ｍＬ)中に溶解し、窒素下で氷浴中に置いて０℃に冷やした。反応混合物に、カリウムビス(トリメチルシリル)アミド(７０ｍＬ，３４.９mmol)を加えて９０分間撹拌した。反応混合物に、トルエン(２０ｍＬ)中に溶解した実施例Ｕ−３の生成物(８.５１ｇ，２４.６mmol)を加えて１時間撹拌した。反応混合物を室温に加温させた。反応混合物に硫酸水素カリウム(２５ｍＬ，２５mmol)を加えて２０分間撹拌した。混合物を、酢酸エチル(３×１００ｍＬ)で抽出し、硫酸マグネシウムで乾燥、濃縮して濁った褐色がかった黄色の油状物(１２.１１ｇ)を得た。油状物をシリカ上でクロマトグラフ処理し、酢酸エチルおよびトルエンで溶出して明るい黄色の油状物(７.２１ｇ，７０％)を得た。質量分析：Ｍ＋Ｈ４１６，Ｍ＋ＮＨ₄ ４３３，−ｂｏｃ３１６，−２ｂｏｃ，２１６(¹Ｈ)ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃)6.88 ppm (m, 1H), 5.82 ppm (d, 1H), 4.81 ppm (m, 1H), 5.76 ppm (s, 3H), 2.50ppm (m, 3H), 2.21 ppm (m, 1H), 1.45 ppm (s, 18H)。

実施例Ｕ−５)
実施例Ｕ−４の生成物(５.０ｇ，１２.０３mmol)をジエチルエーテル(１００ｍＬ)中に溶解し、ドライアイス浴中に置いて−８０℃に冷やした。反応混合物にジイソブチルアルミニウムヒドリド(２１.０ｍＬ，２１.０mmol)を加えた。そして３０分間撹拌した。反応混合物に水(１０ｍＬ)を加え、ドライアイス浴をはずして６０分間撹拌した。反応混合物に硫酸マグネシウム(１０ｇ)を加えて１０分間撹拌した。セライト上で反応混合物を濾過し、濃縮して黄色の油状物(５.０ｇ)を得た。油状物をシリカ上でクロマトグラフ処理し、酢酸エチルおよびヘキサンで溶出して明るい黄色の油状物(２.１４ｇ，４７％)を得た。質量分析：Ｍ＋Ｈ３７４，Ｍ＋ＮＨ₄ ３９１(¹Ｈ)ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃)5.63 ppm (m, 2H), 4.88 ppm (m, 1H), 4.02 ppm (s, 2H), 3.68 ppm (s, 3H), 2.12 ppm (m, 4H), 1.47 ppm (s, 18H)。

実施例Ｕ−６)
実施例Ｕ−５の生成物をテトラヒドロフラン(５０ｍＬ)中に溶解した。反応混合物に、ポリマー上のトリフェニルホスフィン(３.００ｇ，８.８４mmol)、オキサジアゾリノン(７２０ｍｇ，７.２３mmol)、およびアゾジカルボン酸ジメチルエステル(１.１７ｇ，３.２１mmol)を加えて室温で６時間撹拌した。反応混合物をセライト上で濾過し、濃縮して濁った黄色の油状物(２.８１ｇ)を得た。油状物をシリカ上でクロマトグラフ処理しヘキサン中酢酸エチルにより溶出して無色透明な油状物(１.６６ｇ，６８％)を得た。質量分析：Ｍ＋Ｈ４５６，Ｍ＋ＮＨ₄ ４７３，−ｂｏｃ３５６、−２ｂｏｃ２５６(¹Ｈ)ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃)5.65 ppm (m, 1H), 5.45 ppm (m, 1H), 4.79 ppm (m, 1H), 4.11 ppm (d, 2H), 3.68 ppm (s, 3H), 2.17 ppm (m, 4H), 1.47 ppm (s, 18 H)。

実施例Ｕ−７)
実施例Ｕ−６の生成物(３００ｍｇ，０.６６mmol)を、亜鉛金属を含む酢酸および水の溶液(１０ｍＬ，２５／７５)中に溶解し、３時間超音波処理した。反応混合物をセライト上で濾過し、逆相ＨＰＬＣでクロマトグラフ処理して無色透明な残留物(１３ｍｇ，４％)を得た。(¹Ｈ)ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃)8.89 ppm (m, 1H), 5.68 ppm (m, 1H), 5.47 ppm (m, 1H), 3.80 ppm (d, 2H), 3.71 ppm (s, 3H), 2.18 ppm (m, 4H), 1.41 ppm
(s, 18 H)。

実施例Ｕ)
実施例Ｕ−７(１３.０ｍｇ，０.０３１mmol)の生成物を、２ＮＨＣｌ(１.２２ｍＬ，２.４４mmol)中に溶解して１時間還流させた。反応混合物を冷まして濃縮し、無色透明な油(６.６ｍｇ，９５％)を得た。質量分析：Ｍ＋Ｈ２００(¹Ｈ)ＮＭＲ(４００ＭＨｚ，Ｄ₂Ｏ)5.65 ppm (m, 1H), 5.47 ppm (m, 1H), 3.80 ppm (t, 1H), 3.72 ppm (d, 2H), 2.0 ppm (m, 5H), 1.87 ppm (m, 2H)。

実施例Ｖ：
(α，２Ｓ)−α−アミノヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−ヘキサン酸，三水和物塩酸塩

実施例Ｖ−１)

３Ｌの三つ口フラスコを窒素でパージした後、シクロヘキサノン(１３２ｍＬ，１.２７mol)およびトルエン５００ｍＬを投入した。この撹拌混合物を０℃に冷やし、カリウムｔ−ブトキシド１５７.２ｇ(１.１当量)を加えた。この混合物を１時間撹拌した後、色および組成の変化がみられ、この後、トルエン１００ｍＬ中の５−ペンテニルブロミド(１３６ｍＬ，１.２７mol)の溶液を１時間かけて滴加し、反応混合物を機械的に撹拌した。反応混合物を２５℃に加温させて一夜撹拌した。次いで、これを１ＮＫＨＳＯ₄(８００ｍＬ)で希釈し、有機相を乾燥(ＭｇＳＯ₄)、濾過し、蒸発させて乾燥状態にし、粗生成物２０８.５ｇを得た。次いで、この物質を減圧蒸留(水アスピレータ圧力下)によって精製して収率４７％で標題生成物を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.0- 2.4 (m, 13H), 4.9-5.1 (m, 2H), 5.7-5.9 (m, 1H)。

実施例Ｖ−２)

実施例Ｖ−１の生成物(９３.６７ｇ，０.５６３mol)をＥｔＯＨ(６００ｍＬ)、水(３００ｍＬ)、ＮａＯＡｃ(１０１.６７ｇ，１.２４mol)およびＮＨ₂ＯＨ・ＨＣｌ(７８.３１ｇ，１.１３mol)と共に３Ｌの三つ口フラスコ中で合わせた。この撹拌反応混合物を１６時間還流させてから、さらに２５℃で２４時間撹拌した。全ての溶媒を減圧下で除去し、残留物をジエチルエーテル(Ｅｔ₂Ｏ，５００ｍＬ)と水(２００ｍＬ)との間で分配した。水層をエーテル３×２００ｍＬで抽出した。合わせた有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過し、真空下で除去して標題オキシム(１２１.３ｇ，粗収率１００％)を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，ppm)：1.2-2.6 (m, 13H), 4.9-5.1 (m, 2H), 5.7-5.9 (m, 1H)。

実施例Ｖ−３)

３Ｌの三つ口フラスコを窒素でパージしてからヘキサメチルジシロキサン(４７１.７ｍ
Ｌ，２.２mol)、トルエン(５００ｍＬ)および五酸化リン(２０３.８８ｇ，１.４mol)を投入した。この不均質混合物を、透明な溶液が得られるまで還流した(約１.５時間)。この混合物を室温に冷ました後、トルエン２００ｍＬ中の実施例Ｖ−１のオキシム生成物(１０２.１ｇ，０.５６３mol)を２５℃で１時間かけて上記の反応混合物に加えた。反応混合物をさらに４〜６時間撹拌した後(ＴＬＣによってチェック：ヘキサン中５０％酢酸エチル，Ｉ₂)、これを氷水へ注いでよく混合した。この氷スラリー混合物にＮａＣｌ(２５０ｇ)を加え、固体炭酸カリウムを加えることによって生成した混合物をｐＨ５に調節した。このスラリーをジエチルエーテル(Ｅｔ₂Ｏ)３×５００ｍＬで抽出し、合わせた有機画分をＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して真空下で除去し、位置異性体のラクタムの粗混合物(８４.６ｇ)を得た。

実施例Ｖ−４)

次いで、精製および位置異性体の分離のため、実施例Ｖ−３の生成物をクロマトグラフィ(シリカ：アセトニトリル)にかけた。粗試料から、７−ペンテニル位置異性体を収率５０％で単離し、そしてキラルクロマトグラフィの後、所望の単一鏡像異性体をそれぞれ収率４３％で単離した。Ｒ−異性体：Ｃ₁₁Ｈ₁₉ＮＯの元素分析計算値：C, 71.99 ; H, 10.57 ; N, 7.63 実測値：C, 71.97 ; H, 10.58 ; N, 7.52 ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.3-1.6 (m, 7H), 1.75-1.9 (m, 2H), 1.95-2.15 (m, 3H), 2.4- 2.5 (m, 2H), 3.25-3.35 (m, 1 H), 4.95-5.05 (m, 2H), 5.7-5.85 (m, 1H)。¹³ＣＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：23.166, 25.169, 29.601, 33.209, 35.475, 35.624, 36.783, 53.600, 114.976, 137.923, 177.703 [α]²⁵＝＋２６.９°(ＣＨＣｌ₃)(３６５ｎｍで) Ｓ−異性体：Ｃ₁₁Ｈ₁₉ＮＯの元素分析計算値：C, 71.99 ; H, 10.57 ; N, 7.63.実測値：C, 72.02 ; H, 10.61 ; N, 7.57 ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.3-1.6 (m, 7H), 1.75-1.9 (m, 2H), 1.95-2.15 (m, 3H), 2.4-2.5 (m, 2H), 3.25-3.35 (m, 1H), 4.95-5.05 (m, 2H), 5.7-5.85 (m, 1H)。¹³ＣＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：23.187, 25.178, 29.630, 33.230, 35.526, 35.653, 36.778, 53.621, 115.032, 137.914, 177.703 [α]²⁵＝−２５.７°(ＣＨＣｌ₃)(３６５ｎｍで)

実施例Ｖ−５)

実施例Ｖ−４のＲ−異性体生成物(１０２.１ｇ，０.５６mol)、乾燥ＴＨＦ(８００ｍＬ)、ＤＭＡＰ(６８.９ｇ，０.５６mol)、ジ−ｔ−ブチルジカーボネート(Ｂｏｃ₂Ｏ，９９ｇ，０.４５mol)をアルゴンでパージした３Ｌの三つ口フラスコ中で合わせた。反応混合物を３０分間以内に７０℃に加温させた後、さらにＢｏｃ₂Ｏ(５２.８ｇ)および乾燥ＴＨＦ２００ｍＬを加えた。３０分後、さらにＢｏｃ₂Ｏ（３２ｇ）を加え、混合物を７０℃で１時間撹拌した。さらにＢｏｃ₂Ｏ(３６ｇ)を加え、混合物を１時間撹拌した。反応混合物を室温に冷まし、減圧下、１８℃〜２０℃でＴＨＦを除去した。沈殿を濾過し、酢酸エチル(ＥＡ)１００ｍＬで洗浄し、そして捨てた(〜４５ｇ)。酢酸エチルの濾液をさらなる酢酸エチル５００ｍＬで希釈した後、１ＮＫＨＳＯ₄ (５００ｍＬ)、飽和水性ＮａＨＣＯ₃ (５００ｍＬ)およびブライン５００ｍＬで洗浄し、次いで、無水Ｎａ₂ＳＯ₄で１２時間乾燥させた。次いで、この酢酸エチル抽出物をＤＡＲＣＯ(２０ｇ)で処理し、ＭｇＳＯ₄を備えたセライトを通して濾過し、真空下で濃縮して暗褐色の油状物として標題生成物１５０ｇを得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，５ppm)：1.3-1.6 (m, 4H), 1.5 (s, 9H), 1.6-1.9 (m, 6H), 1.95-2.05 (m, 2H), 2.5-2.7 (m, 2H), 4.2-4.25 (m, 1H), 4.95-5.05 (m, 2H), 5.7-5.85 (m, 1H)。

実施例Ｖ−６)

ＣＨ₂Ｃｌ₂（３Ｌ）中に溶解した実施例Ｖ−５の生成物(１５０ｇ，０.５３３)を含む３Ｌの三つ口フラスコを−７８℃に冷やした。反応混合物の色が青に変わるまで、Ｏ₃の流れを２.５時間溶液に通過させた。次いで、−６０℃〜−７０℃に維持した溶液に、溶液が透明および無色になるまで(〜３０分間)アルゴンをバブリングした。次いで、ジメチルスルフィド(ＤＭＳ，５００ｍＬ)を加えた後、反応物を還流させ、この還流を２４時間続けた。さらにＤＭＳ１００ｍＬを加え、還流を１２時間続けた。さらにＤＭＳ１００ｍＬを加え、還流をさらに１２時間続けた。次いで、溶媒および過剰ＤＭＳを、ロータリーエバポレーター上２０℃で除去した。得られた黄色の残留油状物をＤＩ水５００ｍＬで希釈し、ＥＡ(３×３００ｍＬ)で抽出した。ＥＡ層を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥し、ＤＡＲＣＯ(２０ｇ)で処理し、無水ＭｇＳＯ₄を備えたセライトの薄層を通して濾過し、減圧下で全ての溶媒を除去し、橙黄色の油状物として粗製の標題生成物１５６ｇを得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.3-1.6 (m, 4H), 1.5 (s, 9H), 1.6-1.9 (m, 6H), 2.45-2.75 (m, 4H), 4.2-4.25 (m, 1H), 9.75 (s, 1H)。

実施例Ｖ−７)

ジクロロメタン(ＣＨ₂Ｃｌ₂)１Ｌ中に溶解して０℃に冷やしたＮ−(ベンジルオキシカルボニル)−アルファ−ホスホノグリシントリメチルエステル(１６０ｇ，０.４８mol)の試料に、ＣＨ₂Ｃｌ₂(１００ｍＬ)中のＤＢＵ(１１０.２９ｇ，０.７２mol)の溶液を加えた。この無色透明な反応混合物を０℃〜６℃で１時間撹拌した後、ＣＨ₂Ｃｌ₂(６００ｍＬ)中の実施例Ｖ−６のＢｏｃ−アルデヒド生成物(１５０ｇ，０.５３mol)を−５℃〜−１℃で滴加した。反応混合物をこの温度で３０分間撹拌した後、約１時間のうちに１０℃にゆっくりと加温させた。反応混合物を１ＮＫＨＳＯ₄(５００ｍＬ)、飽和水性ＮａＨＣＯ₃(２００ｍＬ)および５０水性ＮａＣｌ(２００ｍＬ)で洗浄した。次いで、有機層を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥、ＤＡＲＣＯ(４０ｇ)で処理し、無水ＭｇＳＯ₄を備えたセライトの薄層を通して濾過し、濃縮して黄色の油状物として粗製の標題生成物２５８ｇを得た。この物質をクロマトグラフィ精製して純粋な標題生成物１３０ｇ(５５％)を得た。Ｃ₂₆Ｈ₃₆Ｎ₂Ｏ₇の元素分析計算値：C, 63.96 ; H, 7.42 ; N, 5.77。実測値：C, 63.42 ; H, 8.16 ;
N, 5.31。
¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.25 (m, 2H), 1.5 (s, 9H), 1.51-1.9 (bm, 8H), 2.25
(m, 2H), 2.5 (m, 1H), 2.65 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 4.12 (m, 1H), 5.15 (s, 2H), 6.3 (bs, 1H), 6.55 (t, 1 H), 7.45 (m, 5H)。
¹³ＣＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：14.04, 22.62, 23.46, 24.08, 25.27, 27.89, 27.92, 28.34, 28.95, 31.81, 31.86, 32.05, 39.18, 52.31, 54.65, 67.27, 82.62, 128.07, 128.18, 128.46, 135.98, 136.82, 154.50, 164.92, 176.68。
[α]²⁵＝＋１０.９°(ＣＨＣｌ₃)(３６５ｎｍで)

実施例Ｖ−８)

実施例Ｖ−７の生成物(９１.３ｇ，０.１９mol)のＭｅＯＨ(１Ｌ)溶液に、Ｓ,Ｓ−Ｒｈ−ＤＩＰＡＭＰ触媒２.５ｇ、続いて水素を加えた。水素化は、Parr装置中２５℃で１.５時間実施した。セライトを通して反応混合物を濾過した後、濃縮して褐色の油として粗製の標題生成物(９０ｇ，９８％)を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.35 (m, 4H), 1.5 (s, 9H), 1.55-1.95 (m, 10H), 2.4-2.7 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 4.2 (m, 1H), 4.4
(m, 1H), 5.1 (m, 2H), 5.35 (d,1H), 7.35 (m, 5H)。

実施例Ｖ−９)

氷酢酸２００ｍＬ中の実施例Ｖ−８の生成物(９０ｇ)の溶液にジオキサン中の４ＮＨＣｌ(２００ｍＬ)を加えた。反応混合物を２５℃で２０分間撹拌した後、減圧下、４０℃で全ての溶媒を除去して赤褐色の油を得た。この油性生成物を水５００ｍＬで処理し、ジクロロメタン２×３００ｍＬで抽出した。合わせた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液(１００ｍＬ)で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥、濾過し、全ての溶媒を除去して粗製の標題生成物を得た。この物質をクロマトグラフ処理して純粋な標題生成物４５ｇ(６２％)を得た。Ｃ₂₁Ｈ₃₀Ｎ₂Ｏ₅の元素分析計算値：C, 64.02 ; H, 7.68 ; N, 7.17。実測値：C, 63.10 ; H, 7.88 ; N, 6.60. ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.2-2.0 (m, 14H), 2.45 (t, 2H), 3.25 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 4.38 (m, 1H), 5.1 (s, 2H), 5.3 (d, 1H), 5.45 (bs, 1H), 7.35 (m, 5H)。¹³ＣＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃ ，δppm)：14.09, 23.11, 24.89, 25.41, 29.53, 32.33, 35.52, 35.79, 36.68, 52.26, 53.51, 53.55, 53.60, 60.26, 66.86, 127.97, 128.05, 128.40, 136.18, 155.85, 172.85, 177.80。[α]²⁵＝−９.９°(ＣＨＣｌ₃)(３６５ｎｍで)

実施例Ｖ−１０)

アルゴンでパージしたジクロロメタン３００ｍＬ中の実施例Ｖ−９の生成物の試料４５
.０ｇ(０.１１５mol)にトリエチルオキソニウムテトラフルオロボレート２３.０ｇ(０.１２１mol)を加えた。この混合物を２５℃で１時間撹拌した後、飽和水性炭酸水素ナトリウム溶液１５０ｍＬを加えた。ジクロロメタン層を分離し、５０％水性ＮａＣｌ溶液１５０ｍＬで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥、セライトを通して濾過し２５℃で濃縮して標題生成物の透明な黄色油４７.０ｇ(９７％)を得た。Ｃ₂₃Ｈ₃₄Ｎ₂Ｏ₅の元素分析計算値：C, 60.01 ; H, 8.19 ; N, 6.69.実測値：C, 65.13 ; H, 8.45 ; N, 6.64。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.2 (t, 3H), 1.25-1.74 (m, 12H), 1.75-1.95 (m, 2H), 2.2-2.3 (m, 1H), 2.4-2.5 (m, 1H), 3.1 (m, 1H), 3.7 (s,3H), 3.9-4.0 (m, 2H), 4.35 (m, 1H), 5.1 (s, 2H), 5.25 (d, 1H), 7.35 (m, 5H)。¹³ＣＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：14.23, 23.38, 25.01, 25.21, 26.10, 30.24, 32.16, 32.77, 33.92, 39.15, 52.22, 53.91, 58.05, 60.19, 66.92, 128.11, 128.33, 128.48, 136.27, 155.83, 166.29, 173.11, 177.64。

実施例Ｖ−１１)

メタノール５００ｍＬ中の塩化アンモニウム７.０ｇ(０.１３０mol)に、実施例Ｖ−１０の標題物質(４５.０ｇ，０.１０７mol)３１.２ｇを加えた。反応物を６５℃で５時間還流させた後、全ての溶媒を減圧下で除去し、泡状の粘性塊として粗生成物４０ｇ(８７％)を得た。この物質をカラムクロマトグラフィによって精製し、標題生成物３７ｇ(８１％)を得た。Ｃ₂₁Ｈ₃₁Ｎ₃Ｏ₄の元素分析計算値：C, 59.22 ; H, 7.57 ; N, 9.86 ; Cl, 8.32。Ｃ₂₁Ｈ₃₁Ｎ₃Ｏ₄＋１.２ＨＣｌ＋０.５Ｈ₂Ｏの実測値：C, 57.20 ; H, 7.99 ; N, 9.66 ; Cl, 9.62。ＩＲ(生で、λmax cm^-1)：2935, 1716, 1669。 ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.2-2.0 (m, 13H), 2.5 (t, 1H), 2.95 (m, 1H), 3.4 (bs, 1H), 3.7 (s, 3H), 4.3 (m, 1H), 5.1 (s, 2H), 5.55 (d, 1H), 7.3 (m, 5H), 8.75 (bs, 1H), 8.9 (bs, 1H), 9.5 (s, 1H)。¹³ＣＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：23.20, 24.95, 25.22, 28.94, 31.80, 32.05, 33.75, 34.89, 52.33, 53.76, 56.07, 66.83, 127.93, 128.04, 128.43, 136.26, 156.00, 172.24, 172.87。質量(ＥＳＩ)：Ｍ／Ｚ(３９０) [α]²⁵＝+３１.５°(３６５ｎｍで)

実施例Ｖ)
２.３ＮＨＣｌ(１Ｌ)中の実施例Ｖ−１１の標題生成物(３６.０ｇ，０.０８４mol)を３時間還流した。室温に冷ました後、溶液をＣＨ₂Ｃｌ₂ (２×１５０ｍＬ)で洗浄し、次いで真空下で全ての溶媒を除去し、淡黄色フォームとして標題アミノ酸生成物２５.６ｇ(９６％)を得た。Ｃ₁₂Ｈ₂₃Ｎ₃Ｏ₂.２ＨＣｌの元素分析計算値：C, 46.02; H, 8.01;N, 13.39;Cl 22.45. Ｃ₁₂Ｈ₂₃Ｎ₃Ｏ₂＋２.２ＨＣｌ＋０.１Ｈ₂Ｏの実測値：C, 42.76 ; H, 8.02 ; N, 12.41 ; Cl, 22.79。ＩＲ(生で，λmax cm^-1)：2930, 2861, 1738, 1665. ¹ＨＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ，δppm)：1.3-2.5 (m, 16H), 2.6 (dd, 1H), 2.8 (t, 1H), 3.65 (m, 1H), 4.0 (t, 1H), 7.85 (s, 1H), 8.85 (s, 1H), 8.95 (s, 1H)。 ¹³ＣＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ，δppm)：24.49, 25.67, 26.33, 29.71, 31.26, 32.45, 35.04, 35.87, 53.73, 57.21, 171.77, 173.96。ＵＶ，２８２ｎｍ，ａｂｓ０.０１５。質量(Ｍ⁺¹)＝２４２ [α]²⁵ ＝−４７.４°(ＭｅＯＨ)(３６５ｎｍで) ｅｅ＝９１％(λ＝２１４ｎｍでＣＥにより測定)

実施例Ｗ：
(αＳ,２Ｒ)−α−アミノヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−ヘキサン酸
，三水和物塩酸塩

実施例Ｗ−１)

実施例Ｖ−５の方法によって実施例Ｖ−４のＳ−異性体生成物(５.４５ｇ，０.０３０mol)をそのＢｏｃ誘導体に転化した。クロマトグラフィの後、この反応により所望の標題生成物６.３ｇ(７５％)を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.3-1.6 (m, 4H), 1.5 (s, 9H), 1.6-1.9 (m, 6H), 1.95-2.05 (m, 2H), 2.5-2.7 (m, 2H), 4.2-4.25 (m, 1H), 4.95-5.05 (m, 2H), 5.7-5.85 (m, 1H)。

実施例Ｗ−２)

実施例Ｗ−１(６.３ｇ，０.０２５mol)の生成物を、実施例Ｖ−６の方法によってオゾン化して粗製標題アルデヒド８.０３ｇを得、これをさらに精製することなく用いた。¹Ｈ
ＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.3-1.6 (m, 4H), 1.5 (s, 9H), 1.6-1.9 (m, 6H), 2.45-2.75 (m, 4H), 4.2-4.25 (m, 1H), 9.75 (s, 1H)。

実施例Ｗ−３)

実施例Ｖ−７の手順を用いて実施例Ｗ−２生成物(８.０３ｇ，０.０２４mol)をＮ−(ベンジルオキシカルボニル)−アルファ−ホスホノグリシントリメチルエステル(７.９ｇ，
０.０２４mol)と縮合させ、クロマトグラフィ後、所望の標題生成物４.９ｇ(４４％)を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.25 (m, 2H), 1.5 (s, 9H), 1.51-1.9 (bm, 8H), 2.25 (m, 2H), 2.5 (m, 1H), 2.65 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 4.15-4.25 (m, 1H), 5.15 (s, 2H), 6.3-6.4 (bs, 1H), 6.45-6.55 (t, 1H), 7.3-7.4 (m, 5H)。

実施例Ｗ−４)

実施例Ｗ−３の生成物(４.８ｇ、０.０１０mol)をＲ,Ｒ−Ｒｈ−ＤＩＰＡＭＰ触媒の存在下で還元し、実施例Ｖ−８の方法によってクロマトグラフ処理した後、所望の標題生成物２.９ｇ(６０％)を得た。

実施例Ｗ−５)

実施例Ｖ−９の方法を用いて実施例Ｗ−４の生成物(２.９ｇ，０.００６mol)をＨＣｌで処理して脱保護し、所望の標題生成物２.３ｇ(１００％)を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.3-2.0 (m, 14H), 2.45 (t, 2H), 3.25 (m, 1H), 3.75 (s, 3H), 4.38 (m, 1H), 5.1 (s, 2H), 5.3 (d, 1H), 5.45 (bs, 1H), 7.35 (m, 5H)。

実施例Ｗ−６)

実施例Ｖ−１０の方法を用いて実施例Ｗ−５の生成物(０.５６ｇ，０.００１５mol)を、トリエチルオキソニウムテトラフルオロボレートでアルキル化して所望の標題生成物０.６２ｇ(９８％)を得た。

実施例Ｗ−７)

実施例Ｖ−１１の方法を用いて実施例Ｗ−６の生成物(０.６２ｇ，０.００１５mol)を
メタノール中の塩化アンモニウムで処理してクロマトグラフィ精製後、所望の標題生成物０.５０ｇ(８８％)を得た。

実施例Ｗ−８)

ＭｅＯＨ中に溶解した実施例Ｗ−７の生成物(０.３７ｇ，０.０００９mol)をParr水素化装置に加えた。触媒量の５％Ｐｄ／Ｃをこの容器に加えた。水素を導入し、室温、５psiの圧力で７時間かけて反応を実施した。触媒を濾過により除去し、全ての溶媒を減圧下で濾液から除去して所望の標題生成物０.２６ｇ(定量的)を得た。

実施例Ｗ)
２ＮＨＣｌ(３０ｍＬ)中に溶解した実施例Ｗ−８の生成物の溶液を還流で２時間維持した後、室温に冷ました。全ての溶媒を減圧下で除去し、残留物を水５０ｍＬ中に溶解した。この溶液を、再び減圧下で全ての溶媒を除去した後、再び水１２ｍＬ中に溶解してから凍結乾燥して標題化合物０.２４５ｇ(７１％)を得た。Ｃ₁₂Ｈ₂₃Ｎ₃Ｏ₂.２.３ＨＣｌ.１.９Ｈ₂Ｏの元素分析計算値：C, 40.10 ; H, 8.16 ; N, 11.69 ; Cl 22.69.Ｃ₁₂Ｈ₂₃Ｎ₃Ｏ₂＋２.１ＨＣｌ＋０.７Ｈ₂Ｏの実測値：C, 40.27 ; H, 8.28 ; N, 11.62 ; Cl, 22.70。¹ＨＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ，δppm)：1.4-2.1 (m, 16H), 2.6 (dd, 1H), 2.8 (t, 1H), 3.65 (m, 1H), 4.0 (t, 1H), 7.85 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.9 (s, 1H)。¹³ＣＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ，δppm)：24.46, 25.64, 26.31, 29.69, 31.24, 32.54, 35.00, 35.83, 53.75, 57.20, 171.85, 173.93。 [α]²⁵＝＋２５.７°(ＭｅＯＨ)(３６５ｎｍで)

実施例Ｘ：
(αＳ,２Ｓ)−α−アミノヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−ヘキサン酸，三水和物塩酸塩

実施例Ｘ−１)

オーバーヘッド撹拌機、半月型パドル、加熱マントル、熱電対およびシルバーの真空ジャケット付き蒸留塔(５プレート)を備えた２２Ｌ丸底フラスコにシクロヘキサノン(４５００.０ｇ，４５.８５mol)、アセトンジメチルアセタール(５２５２.６ｇ，５０.４３mol)、アリルアルコール(６３９０.８７ｇ，１１０.０４mol)およびｐ−トルエンスルホン酸(ＰＴＳＡ)(０.２５６ｇ，０.００１mol)を投入した。撹拌(１３７rpm)を開始した後、初期設定値を７０℃にしてゆっくりとポットを加熱した。最終的なポット温度の１５０℃まで段階的に加熱を高めた。反応器の設定値を高める決定は、蒸留速度に基づいて行った。蒸留物の速度が遅いかまたは停止している場合、さらに熱を加えた。１５０℃へさらに加熱することによりクライゼン転位を起こすことができる。ポット温度が１５０℃まで上昇した後、蒸留物は観察されなかった、加熱マントルを下げて反応混合物を１３０℃に冷ました。次いで、ＰＴＳＡを２.５ＮＮａＯＨ３滴で中和した。次いで、加熱マントルをフラスコから下げて離し、真空除去を開始した。気化冷却を用いてポットの温度を下げ、圧力を４０ｍｍＨｇまで徐々に下げた。ポット温度が〜１００℃まで下がった時に、加熱マントルを加熱に適した位置へ高く戻した。未反応のシクロヘキサノンおよび低沸点不純物を留去した。ポット温度をゆっくりと高めた(ポットと蒸気の間の最大温度差は、〜１２℃であった)。生成物を４０mmHgで１０９〜１１２℃で単離した。典型的な収率は、４０〜４５％であった。面積(ＧＣ)が＜９５％であった画分を合わせて再蒸留し、全収率５５％で標題生成物を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：5.8-5.6 (m, 1H), 4.8-5.0 (m, 2H), 2.5-2.4 (m, 1H), 2.3-2.1 (m, 3H), 2.1-1.2 (m, 7H)。¹³ＣＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：212.53, 136.62, 116.32, 50.39, 42.18, 33.91, 33.52, 28.09, 25.10。ＧＣ／ＭＳｍ／ｚ＝１３８

実施例Ｘ−２)

機械的撹拌機、熱電対、０℃に冷却する冷却器および添加漏斗を備えた１Ｌ Bayerフラスコに、酢酸(４７０ｇ)中に溶解したヒドロキシルアミン−Ｏ−スルホン酸(９１.８ｇ)を加え、７０℃に加熱した。７０〜７８℃の間の温度に維持しながらアリルシクロヘキソン(１００ｇ)を、上記溶液に約４０分かけて滴加した。添加中に、反応物の外観は、白色スラリーから透明な橙色溶液に変わった。添加後、反応物を７５℃でさらに５時間加熱撹拌した。ＩＰＣ試料を１時間毎に採取した。反応が完了した後、酢酸をロータリーエバポレーター上で減圧下、５０℃で除去した。次いで、残留物に水(２００ｍＬ)を加え、溶液をトルエン(２×３００ｍＬ)で抽出した。有機層を合わせて水(１５０ｍｌ)で処理し、そして１０分間撹拌した。水性層が塩基性(ｐＨ１２)に変わるまで水酸化ナトリウム溶液(５０溶液７９.４ｇ)を加えた。４０℃より下で温度を制御することによって反応器中で中和を保った。次いで、層を分離し、フィルタを通してトルエン層を通過させてすべての固形物またはタール状物質を除去した。次いで、有機溶液をロータリーエバポレーターで減圧下、５０℃で除去した。残留物をトルエン(５１０ｍＬ)およびヘプタン(２０４０ｍＬ)の混合物中に取り、３Ｌ反応器中で６０℃に加熱した。透明な黄橙色溶液を得た。溶液を撹拌しながらゆっくりと５℃まで冷ますと標題生成物が５３℃で結晶し始めた。固形物を濾過し、ヘプタン(５０ｍＬ)で洗浄し、ハウス真空下、４０℃で一夜乾燥し、オフホワイトの結晶として標題生成物６６.３ｇ(６０％)を得た。この物質の一部をトルエンおよびヘプタンから再結晶して白色結晶質固形物として標題生成物を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：5.8-5.6 (m, 1H), 5.5 (bs, 1H), 4.8-5.0 (m, 2H), 3.4-3.3 (m, 1H), 2.5-2.3 (m, 2H), 2.3-2.1 (m, 2H) 2.0-1.2 (m, 6H)。¹³ＣＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：117.73, 133.83, 119.31, 52.88, 40.95, 37.20, 35.75, 29.96, 23.33。ＧＣ／ＭＳ(ＥＩモード)＝１５３融点＝９７〜９９℃

実施例Ｘ−３)

実施例Ｘ−２のラセミ生成物混合物を１００％アセトニトリルにより溶出するChiralpac AS 20μｍカラム上でのキラルクロマトグラフ分離にかけた。検出器は２２０ｎｍの波長を用いた。０.０８ｇ／ｍＬのアセトニトリルの試料を装填し、それぞれ＞９５％ｅｅを有する分離された異性体を９０％回収した。Ｒ−異性体物質の一部をトルエンおよびヘプタンから再結晶して白色結晶質固形物としてＲ−異性体標題生成物を得た。Ｒ−異性体：融点＝８１〜８２℃

実施例Ｘ−４)

滴下漏斗、温度計および機械的オーバーヘッド撹拌機備えた五つ口平底フラスコを排気して窒素で３時間パージした。実施例Ｘ−３のＲ−異性体生成物ラクタム(１００.０ｇ，０.６５３mol)、ＤＭＡＰ(７.９８ｇ，６５mmol)およびＮ−ジイソプロピルエチルアミン(Hunigs塩基，１１３.３ｇ，０.８７６mol)をトルエン(３５０ｍＬ)中に溶解し、トルエン(１００ｍＬ)中に溶解したジtert−ブチルジカーボネート(１７０.２ｇ，０.７８mol)を加えた。(注：２.０当量のHunigs塩基を用いたときに、反応はより良好に進行する)。混合物を６５℃に加熱した(注：反応中は着実にガス排出が観察された)。１.５時間の後、さらにトルエン(５０ｍＬ)中に溶解したジ−tert−ブチルジカーボネート(０.３９５mol)８６.２５ｇを加えた。加熱を１７時間続け、そしてＨＰＬＣによるＩＰＣは７５％の転化を示した。さらにトルエン(３０ｍＬ)中のジ−tert−ブチルジカーボネート(０.１９６mol)４２.７８ｇを加え、褐色の混合物を５.５時間加熱した。周囲温度に冷ました後、混合物を４ＭＨＣｌ(２１５ｍＬ)で処理し、水性層をトルエン(２×８０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層をＮａＨＣＯ₃(１７０ｍＬ)および水２５０ｍＬで洗浄した(注：クエンチ中の内部温度は、氷／水で外部冷却して制御した)。ガス発生が観察された。有機層を蒸発させて褐色の液体２５７.４ｇを得た。この粗物質を、溶離剤としてトルエン／ＥｔＯＡｃ９／１(６Ｌ)およびトルエン／ＡｃＯＥｔ１／１(０.５Ｌ)を用いてＳｉＯ₂(９５０ｇ)上でプラグ濾過によって精製し、黄色液体の標題生成物１３９.５ｇ(５１％)を得た。

実施例Ｘ−５)

実施例Ｘ−６)

実施例１ｆ
バッフルおよび６枚羽根のガスを分散する軸状の撹拌翼備えた２Ｌステンレス鋼オートクレーブに、Ｒｈ(ＣＯ)₂(acac)(０.２４８ｇ，０.９５９mmol)、BIPHEPHOS(構造は下に示されており、米国特許第４,７６９,４９８号の実施例１３に説明された通り製造される，２.２６５ｇ，２.８７９mmol)、実施例Ｘ４の生成物(Ｎ−(tert−ブトキシカルボニル)−Ｓ−７−アリルカプロラクタム

(２４２.９ｇ，０.９５９mol)およびトルエン(９６５ｇ)を投入した。反応器を密閉し１
００％一酸化炭素(８×５１５ｋＰａ)をパージした。反応器を１００％一酸化炭素で３０８ｋＰａ(３０psig)まで加圧し、次いでＣＯ／Ｈ₂(１：１)気体混合物を加え、全圧を５１５ｋＰａ(６０psig)にした。激しく機械撹拌しながら、混合物を５０℃に加熱して全圧が約５１５ｋＰａ(６０psig)で維持されるようにＣＯ／Ｈ₂(１：１)気体混合物を加えた。２２時間後、混合物を約２５℃に冷まし、圧力を注意深く解放した。生成物の混合物を吸引濾過し、減圧下で濾液を蒸発させて明るい黄色油状物２６７.７ｇを得た。¹ＨＮＭＲによる分析は、出発物質が本質的に定量的に実施例Ｖ−６の対応するアルデヒド生成物へ約９６％の選択率で転化したことを示した。この油状物は、以下の実施例でさらに精製することなく用いた。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ1.47 (s, 9H), 1.6-1.80 (m, 9H), 1.84-1.92 (m, 1H), 2.41-2.58 (m, 3H), 2.61-2.71 (m, 1H), 4.2 (d, J =5.2 Hz, 1H), 9.74 (s, 1H)。

実施例Ｘ−８)

実施例１ｇ
ＣＨ₂Ｃｌ₂中に溶解して０℃に冷やしたＮ−(ベンジルオキシカルボニル)−アルファ−ホスホノグリシントリメチルエステルの試料(９０１.８ｇ，２.７mol)にＣＨ₂Ｃｌ₂中のＤＢＵ(５９７.７ｇ，３.９mol)の溶液を加えた。この無色透明な反応混合物を０℃〜６℃で１時間撹拌した後、ＣＨ₂Ｃｌ₂中の実施例Ｖ−６のＢｏｃ−アルデヒド生成物の試料(８１２.０ｇ，２.９mol)を−５℃〜−１℃で滴加した。反応、処理および精製は、実施例Ｖ−７に説明したように実施して少量のＣＨ₂Ｃｌ₂を含む実施例Ｖ−７の標題生成物１５５０ｇを得た。

実施例Ｘ−９)
実施例Ｖ−７の生成物(１００ｇ，０.２０mol)のＭｅＯＨ溶液(１Ｌ)にRR-Rh-DIPAMP触媒３ｇを加えた。Parr装置中２５℃で１.５時間水素化を実施した。セライトを通して反応混合物を濾過した後、濃縮して褐色の油(１００ｇ)として粗実施例Ｘ−９の標題生成物を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：：1.35 (m, 4H), 1.5 (s, 9H), 1.6-1.9 (m, 10H), 2.5-2.8 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 4.25 (m, 1H), 4.45 (m, 1H), 5.1 (m, 2H), 5.65 (d, 1H), 7.35 (m, 5H)。

実施例Ｘ−１０)

氷酢酸２００ｍＬ中の実施例Ｖ−８の生成物(１００ｇ)の溶液に、ジオキサン中の４Ｎ
ＨＣｌ(２５ｍＬ)を加えた。反応混合物を２５℃で２０分間撹拌した後、減圧下４０℃ですべての溶媒を除去して赤褐色の油１０５ｇを得た。この油性生成物を水５００ｍＬで処理しジクロロメタン２×３００ｍＬで抽出した。合わせた有機層を飽和炭酸水素ナトリウム溶液(１００ｍＬ)で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥、濾過して全ての溶媒を除去して赤褐色の油状物として標題生成物９９.９ｇを得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.25-2.0 (m, 14H), 2.45 (t, 2H), 3.25 (m, 1H), 3.7 (s, 3H), 4.35 (m, 1H), 5.1 (s, 2H), 5.5 (d, 1H), 6.45 (bs, 1H), 7.35 (m, 5H)。ｅｅ＝９５％(キラルＨＰＬＣによって測定)

実施例Ｘ−１１)

アルゴンでパージしたジクロロメタン６００ｍＬ中の実施例Ｘ−１０の生成物の試料３０.０ｇ(０.０７７mol)にトリエチルオキソニウムテトラフルオロポレート１５.７ｇ(０.０８２mol)を加えた。この混合物を２５℃で１時間撹拌した後、飽和水性炭酸水素ナトリウム溶液３００ｍＬを加えた。ジクロロメタン層を分離し、５０％水性ＮａＣｌ溶液３００ｍＬで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥、セライトを通して濾過し、２５℃で濃縮して標題生成物の透明な黄色の油状物３１.２ｇ(〜９７％)を得た。Ｃ₂₃Ｈ₃₄Ｎ₂Ｏ₅の元素分析計算値：C, 60.01 ; H, 8.19 ; N, 6.69.Ｃ₂₃Ｈ₃₄Ｎ₂Ｏ₅＋０.５Ｈ₂Ｏの実測値：C, 64.66 ; H, 8.24 ; N, 6.59。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.25 (t, 3H), 1.28-1.75 (m, 12H), 1.8-1.98 (m, 2H), 2.2-2.3 (m, 1H), 2.4-2.5 (m, 1H), 3.1 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.9-4.0 (m, 2H), 4.35 (m, 1H), 5.1 (s, 2H), 5.25 (d, 1H), 7.35 (m, 5H)。¹³ＣＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：14.27, 23.36, 25.21, 25.53, 26.09, 30.22, 32.15, 32.73, 33.90, 39.14, 52.21, 53.89, 58.04, 60.33, 66.89, 128.11, 128.35, 128.48, 136.29, 155.86, 166.30, 173.14, 177.69。ＩＲ (生で, λmax, cm^-1) ：3295, 2920, 1739, 1680。ＵＶ，２５７ｎｍ，ａｂｓ０.０１５ [α]²⁵＝＋３９.８°(ＣＨＣｌ₃)(３６５ｎｍで)

実施例Ｘ−１２)

メタノール５００ｍＬ中の塩化アンモニウム４.２ｇ(０.０７８mol)に実施例Ｘ−１１の標題物質３１.２ｇを加えた。反応物を６５℃で５時間還流させた後、全ての溶媒を減圧下で除去し、泡状の粘性塊として粗生成物２９ｇ(９２％)を得た。この物質をカラムクロマトグラフィによって精製して標題生成物２３ｇ(７０％)を得た。Ｃ₂₁Ｈ₃₁Ｎ₃Ｏ₄.１ＨＣｌの元素分析計算値)C, 59.28 ; H, 7.57 ; N, 9.89 ; Cl, 8.39。実測値(Ｃ₂₁Ｈ₃₁Ｎ₃Ｏ₄+１ＨＣｌ＋１Ｈ₂Ｏ)：C, 56.73 ; H, 7.74 ; N, 9.40 ; Cl, 8.06。ＩＲ (生で,
λmax cm^-1)：3136, 30348, 2935, 1716, 1669。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.3-2.05 (m, 13H), 2.5 (t, 1H), 2.98 (m, 1H), 3.4 (bs, 1H), 3.75 (s, 3H), 4.35 (m,1H), 5.1 (s, 2H), 5.5 (d, 1H), 7.35 (m, 5H), 8.75 (s, 1H), 9.0 (s, 1H), 9.5(s, 1H)。¹³ＣＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：23.25, 25.01, 25.34, 29.01, 31.88, 32.26, 33.89, 35.06, 52.33, 53.73, 56.20, 66.89, 127.95, 128.06, 128.45, 136.27, 155.93, 172.27, 172.80。ＵＶ，２５７ｎｍ，ａｂｓ０.００９質量(ＥＳＩ)：Ｍ／Ｚ(３９０) [α]²⁵＝−４２.８°(ＭｅＯＨ)(３６５ｎｍで)。ｅｅ＝９６％(キラルＨＰＬＣにより測定)

実施例Ｘ)
２ＮＨＣｌ(５００ｍＬ)中の実施例Ｘ−１２の標題生成物(２３ｇ)を５時間還流させた。次いで、全ての溶媒を真空下で除去し、水中に再溶解した残留物をＣＨ₂Ｃｌ₂(２×３００ｍＬ)で洗浄した。次いで、水性物を真空下で濃縮し、ライトブラウンの吸湿性固形物の標題生成物１７ｇ(１００％)を得た。Ｃ₁₂Ｈ₂₃Ｎ₃Ｏ₂.２ＨＣｌの元素分析計算値：C, 45.86 ; H, 8.02 ; N, 13.37 ; Cl 22.56。Ｃ₁₂Ｈ₂₃ＮＯ₂＋２.１ＨＣｌ＋０.７Ｈ₂Ｏの実測値：C, 43.94 ; H, 8.65 ; N, 12.52 ; Cl, 22.23。ＩＲ (生で, λmax, cm^-1)：2936, 1742, 1669。 ¹ＨＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ，δppm)：1.3-2.1 (m, 16H), 2.6 (dd, 1H), 2.8 (t, 1H), 3.65 (m, 1H), 4.0 (t, 1H), 7.85 (s, 1H), 8.4 (s, 1H), 8.95 (s, 1H)。¹³ＣＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ，δppm)：24.49, 25.67, 26.33, 29.71, 31.26, 32.45, 35.04, 35.87, 53.73, 57.21, 171.77, 173.96。ＵＶ，２０９ｎｍ，ａｂｓ０.３４３。質量(Ｍ⁺¹)＝２４２ [α]²⁵＝＋６０.０°(ＭｅＯＨ)(３６５ｎｍで) ｅｅ＝９２％(λ＝２１０ｎｍでＣＥにより測定)

実施例Ｙ
(αＲ,２Ｓ)−α−アミノヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−ヘキサン酸，三水和物塩酸塩

実施例Ｙ−１)

塩化メチレンおよびメタノール(７５／４５ｍＬ)中の実施例Ｘ−３(３.０ｇ，０.０１５mol)の溶液をドライアイス浴中で−７８℃に冷やした。３ｍｌ／分の流速で溶液にオゾンをバブリングしながら反応物を撹拌した。溶液が深い青色のままであるときは、オゾンを除去して反応物を窒素でパージした。冷たい溶液に水素化ホウ素ナトリウム(２.１４ｇ，０６１mol)を非常にゆっくりと加えて一度に気体が発生するのを最小限にした。反応物に氷酢酸をゆっくりと加えてｐＨを３にした。次いで、反応物を飽和炭酸水素ナトリウムで中和した。それから有機物をブライン３×５０ｍＬで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥し、減圧下で除去した。シリカ(１５ｇ)のプラグを通して淡色の油状物を通過させ、アルコール５.１５ｇ，０.０２６mol(６４％)を得た。Ｃ₉Ｈ₁₄Ｎ₂Ｏ₃。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.18-2.15 (m, 8H), 3.59 (m, 2H), 4.39 (m, 1H)。¹³ＣＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)24.45, 25.71, 26.47, 32.56, 34.67, 51.16, 58.85, 160.66, 160.89。

実施例Ｙ−２)

氷浴中０℃の塩化メチレン(１００ｍＬ)中の実施例Ｙ−１(５.１５ｇ，０.０２６mol)の溶液に四臭化炭素(１０.７８ｇ，０.０３３mol)を加えた。溶液を氷浴中で０℃に冷やした。次いで、温度が３℃より上に上昇しないようにトリフェニルホスフィン(１０.２３ｇ，０.３９mol)を少しずつ加えた。反応物を２時間撹拌し、溶媒を真空下で除去した。粗生物をフラッシュクロマトグラフィによって精製し、収率８７％で臭化物(５.９ｇ，０.０２３mol)を得た。Ｃ₁₀Ｈ₁₆Ｎ₂Ｏ₃の元素分析計算値：C, 41.40 ; H, 5.02 ; N, 10.73 ; Br, 30.60。実測値：C, 41.59 ; H, 5.07 ; N, 10.60, Br, 30.86。 ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.50-2.60 (m, 9H), 2.99 (dd, 1H), 3.35 (m, 2H), 4.41 (m, 1H)。¹³ＣＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：23.89, 25.33, 26.04, 28.06, 31.59, 35.05, 52.79, 159.3, 160.2。

実施例Ｙ−３)

トルエン(２５ｍＬ)中の実施例Ｙ−２(５.７１ｇ，０.０２６mol)の溶液にトリフェニ
ルホスフィン(７.１７ｇ，０.０２７mol)を加えた。反応物を油浴中で１６時間還流させた。冷ました後に、ガラス状固形物からトルエンをデカントした。固形物をジエチルエーテルで一夜磨砕し収率９０％でホスホニウムブロミド(１０.２１ｇ，０.０２０mol)を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.50-2.9 (m, 11H), 3.58 (m, 1H), 4.16 (m, 1H),
4.41 (m, 1H), 7.6-8.0 (m, 15H)。¹³ＣＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：24.43, 24.97, 25.50, 55.08, 55.27, 116.9, 118.1, 130.4, 130.6, 133.5, 135.1, 135.2, 159.4, 160。³¹ＰＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm) 26.0。

実施例Ｙ−４)

１Ｌ丸底フラスコにエタノール(５００ｍＬ)中のＮ−ベンジルオキシカルボニル−Ｄ−ホモセリンラクトン(９７ｇ，０.４４２mol)を加えた。反応物に水酸化ナトリウムの溶液(１Ｍ，５０ｍＬ)を加えた。出発物質が消費されるまで薄層クロマトグラフィによって反応を１２時間モニターした。トルエン(６０ｍＬ)を加えてから溶媒を真空下で除去した。残留物をさらに精製することなく用いた。

実施例Ｙ−５)

実施例Ｙ−４の残留物を１Ｌ丸底フラスコにおいてＤＭＦ中で懸濁した。臭化ベンジル(７６.９ｇ，０.４５mol，５３.５ｍＬ)を懸濁液に加え、混合物を１時間撹拌した。試料をクエンチし、質量分析で分析して出発物質が消費され、ラクトンが再形成されなかったことがわかった。酢酸エチル１Ｌおよびブライン５００ｍＬを反応物に加えた。水層を酢酸エチル５００ｍＬでさらに２回洗浄した。有機物を合わせてＭｇＳＯ₄で乾燥し、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィによりＮ−ベンジルオキシカルボニル−Ｓ−ホモセリンベンジルエステルを白色固形物(８０ｇ)として得た。

実施例Ｙ−６)

２Ｌ丸底フラスコにピリジニウムクロロクロメート(１８７ｇ，０.８６７mol)およびＣＨ₂Ｃｌ₂(６００ｍＬ)中に懸濁したシリカゲル(１９７ｇ)を加えた。スラリーにＣＨ₂Ｃｌ₂(６００ｍＬ)中の実施例Ｙ−５の生成物(８０ｇ，０.２３３mol)の溶液を加えた。混合物を４時間撹拌した。薄層クロマトグラフィは、出発物質が消費されたことを示した。
ジエチルエーテル１Ｌを反応物に加えた。次いで、セライトのパッド、続いてリカゲルのパッドを通して溶液を濾過した。溶媒を真空下で除去し、生成した油状物をシリカゲルクロマトグラフィによって精製して全収率３８％でアルデヒド(５８.８ｇ)を得た。ＭＨ⁺３４２.５，ＭＨ＋ＮＨ₄ ⁺３５９.５ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：3.15 (q, 2H), 4.12 (m, 1H), 5.15 (s, 2H), 5.20 (s, 2H), 7.31 (m, 10H), 9.72 (s, 1H)。

実施例Ｙ−７)

３Ｌの三つ口フラスコに、ＴＨＦ(１Ｌ)中の、真空下Ｐ₂Ｏ₅上で乾燥させた実施例Ｙ−３のホスホニウム塩(５６.８６ｇ，０.１１mol)を加えた。スラリーをドライアイス浴中で−７８℃に冷やした。温度が−７２℃より上に上昇しないように、冷たいスラリーにＫＨＭＤＳ(２２０ｍＬ，０.２２mol)を滴加した。反応物を−７８℃で２０分、次いで−４５℃で２時間撹拌した。次いで、温度を−７８℃に戻してＴＨＦ(５０ｍＬ)中の実施例Ｙ−６のアルデヒド(１５.９ｇ，０.０４７mol)を４５分かけて滴加した。反応物を−７７℃で３０分間撹拌し、次いで−５０℃に１時間加温させた後、４時間かけて室温に加温させた。酢酸エチル(２００ｍＬ)および飽和塩化アンモニウムを反応物に加えた。有機物を集め、ＭｇＳＯ₄で乾燥、そして真空下で濃縮した。粗油状物をシリカクロマトグラフィで精製し、淡黄色粘性油状物として収率８１％でオレフィン化合物(４５.１ｇ)を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.4-2.6 (m, 10H), 2.92 (d, 1H), 4.17 (m, 1H), 4.38 (m, 1H), 5.05 (q, 2H), 5.40 (m, 2H), 7.3 (m, 10H)。 ¹³ＣＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)29.49, 29.64, 31.32, 39.60, 49.56, 53.98, 61.01, 65.25, 124.14, 127.81, 128.20, 128.55, 128.79, 129.30, 130.96, 135.68, 137.31, 152.59, 157.57, 171.61。

実施例Ｙ)
２０ｍＬバイアルにジオキサン(５０ｍＬ)および４Ｎ水性ＨＣｌ(２５０ｍＬ)中の実施例Ｙ−７の生成物(１９.７７ｇ，０.０３９mol)を加えた。この溶液に、水素化フラスコ中で触媒量の炭素上１０％Ｐｄを加えた。フラスコをＨ₂(５０psi)で５時間加圧した。反応を質量分析によってモニターし、出発物質は消費された。セライトのパッドを通して溶液を濾過して水で洗浄した。溶媒を凍結乾燥によって除去し、収率８１％で標題化合物(７.５２ｇ)を得た。ＭＨ⁺２４２.２，ＭＨ＋ＮＨ₄ ⁺２５９.２ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ，δppm)1.2-2.0 (m, 15H), 2.42 (d, 1H), 2.65 (dd, 1H), 3.49 (m, 1H), 3.98 (t, 1H),
7.26 (s), 8.05 (s), 8.35 (s)。¹³ＣＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)24.43, 25.58, 26.00,
26.10, 32.75, 33.45, 35.31, 53.76, 54.55, 157.27, 175.13。

実施例Ｚ
(αＳ,２Ｓ)−α−アミノヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−ヘキサン酸，三水和物塩酸塩

実施例Ｚ−１)

１Ｌ三つ口フラスコにＴＨＦ(２００ｍＬ)中の実施例Ｙ−３のホスホニウム塩(２１.２１ｇ，０.０４１mol)を加えた。スラリーをドライアイス浴中で−７８℃に冷やした。温度が−７２℃より上に上昇しないように、冷たいスラリーにＫＨＭＤＳ(８８ｍＬ，０.０４４mol)を滴加した。反応物を−７８℃で２０分、次いで−４５℃で１時間撹拌した。次いで、温度を−７８℃に戻してアルデヒド(１５.９ｇ，０.０４７mol)(Ｎ−ベンジルオキシカルボニル−Ｌホモセリンラクトンを用いて実施例Ｙ(４−６)で製造)をＴＨＦ(５０ｍＬ)中に４５分かけて滴加した。反応物を−７７℃で３０分間撹拌し、次いで−５０℃に３０分加温させた後、４時間かけて室温に加温させた。酢酸エチル(２００ｍＬ)および飽和塩化アンモニウムを反応物に加えた。有機物を集め、ＭｇＳＯ₄で乾燥、そして真空下で濃縮した。粗油状物をシリカクロマトグラフィで精製し、淡黄色粘性油状物として収率４５％でオレフィン化合物(９.０ｇ)を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.4-2.6 (m, 10H), 2.92 (d, 1H), 4.17 (m, 1H), 4.38 (m, 1H), 5.05 (q, 2H), 5.40 (m, 2H), 7.3 (m, 10H)。¹³ＣＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)29.49, 29.64, 31.32, 39.60, 49.56, 53.98, 61.01, 65.25, 124.14, 127.81, 128.20, 128.55, 128.79, 129.30, 130.96, 135.68, 137.31, 152.59, 157.57, 171.71。

実施例Ｚ)
２０ｍＬバイアルに、ジオキサン(５ｍＬ)および４Ｎ水性ＨＣｌ(１６ｍＬ)中の実施例Ｚ−１の生成物を加えた。水素化フラスコ中で、この溶液に触媒量の炭素上１０％Ｐｄを加えた。フラスコをＨ₂(５０psi)で５時間加圧した。反応は質量分析によってモニターし、出発物質は消費された。セライトのパッドを通して溶液を濾過し、水で洗浄した。溶媒を凍結乾燥によって除去し、収率７９.４％で標題化合物(９８.７ｍｇ)を得た。ＭＨ⁺２４２.２，ＭＨ＋ＮＨ₄ ⁺２５９.２ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ，δppm)1.2-2.0 (m, 15H), 2.42 (d, 1H), 2.6 (dd, 1H), 3.49 (m, 1H), 3.98 (t, 1 H)。¹³ＣＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)24.43, 25.58, 26.00, 26.10, 32.75, 33.45, 35.31, 53.76, 54.55, 157.27, 175.13。

実施例ＡＡ
(２Ｓ,４Ｚ)−２−アミノ−６−[(２Ｒ)−ヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−イル]−４−ヘキセン酸

実施例ＡＡ−１)
(２Ｓ,４Ｚ)−６−[(２Ｒ)−ヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−イル]−２−[ [(フェニルメトキシ)カルボニル]アミノ]−４−ヘキセン酸，フェニルメチルエステル

５０ｍＬフラスコに、メタノール(２５ｍＬ)中の実施例Ｚ−１の試料(１.５ｇ，２.９７mmol)を加えた。次いで、氷酢酸(１６ｍＬ)の６０％溶液を反応混合物に加えた。沈殿が観察された。さらなるメタノールを加えて固形物を溶解した(１ｍＬ)。次いで、亜鉛粉末(０.２００ｇ)を反応物に加えた。反応物を４時間超音波処理し、この間、温度を３７℃に維持した。出発物質が消費され、生成物に相当する質量が観察されるまで、反応をＴＬＣおよびＭＳによってモニターした。溶液を亜鉛からデカントし、アセトニトリル／水(１００ｍＬ)の３０％溶液を濾液に加えた。反応物を、Waters Preparatory HPLC上で５２％アセトニトリル／水を用いて２回実施して精製した[３０分かけて２０％〜７０％アセトニトリルの勾配]。生成した生成物を凍結乾燥して収率７３％で白色固形物として実施例ＡＡ−１の標題物質(１.０１ｇ)を得た。ＭＨ⁺４６４.４，ＭＨ＋Ｎａ⁺４８６.４ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ，δppm)1.2-2.0 (m, 8H), 2.42 (m, 2H), 2.6 (m, 5H), 3.49 (q, 1H), 4.31 (t, 1H), 5.15 (s, 2H), 5.22 (s, 2H), 5.43 (q, 1H), 5.59 (q, 1H), 7.25 (bs, 10H)。 ¹³ＣＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)24.37, 29.61, 30.76, 32.45, 33.73, 34.42, 55.40, 57.09, 68.06, 68.07, 122.3, 124.9, 128.76, 129.09, 129.28, 129.39, 129.51, 129.61, 155.71, 158.35, 173.90。

実施例ＡＡ)
２５０ｍＬフラスコに４ＭＨＣｌ(１００ｍＬ)中の実施例ＡＡ−１の生成物(１.０ｇ，２.２mmol)を加えた。反応物を一夜還流させ、出発物質が消費され、生成物の質量が観察されるまでＭＳでモニターした。反応物を、さらに処理することなく１８％アセトニトリル／水を用いてWater's分取逆相カラム[３０分かけて０％〜３０％アセトニトリル／水]で２回実施して精製した。合わせた画分を凍結乾燥してクリーム色フォームとして収率６４％で標題生成物(０.３４ｇ)を得た。ＭＨ⁺２４０.３，ＭＨ＋Ｎａ⁺４８６.４。 ¹ＨＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ，δppm)1.2-2.0 (m, 6H), 2.35 (m, 2H), 2.45 (dd, 2H), 2.69 (m, 2H), 3.61 (dt, 1H), 3.98 (t, 1H), 5.59 (m, 1H), 5.65 (m, 1H)。¹³ＣＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)23.65, 24.66, 32.51, 32.84, 33.1, 33.25, 54.10, 56.1, 126.80, 129.33, 153.33, 172.52。

実施例ＢＢ
(２Ｓ,４Ｅ)−２−アミノ−６−[(２Ｒ)−ヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−イル]−４−ヘキセン酸

実施例ＢＢ−１)
(２Ｓ,４Ｅ)−２−[ [(フェニルメトキシ)カルボニル]アミノ]−６−[(５Ｒ)−６,７,８,９−テトラヒドロ−３−オキソ−３Ｈ,５Ｈ−[１,２,４]オキサジアゾロ[４,３−ａ]アゼピン−５−イル]−４−ヘキセン酸，フェニルメチルエステル

２５０ｍＬフラスコにシクロヘキサン(７０ｍＬ)／ベンゼン(４０ｍＬ)溶液中の実施例Ｚ−１(２.０ｇ，３.９mmol)およびフェニルジスルフィド(０.８６０ｇ，３.９mmol)を加えた。窒素を溶液中にバブリングして系から酸素をパージした。反応物を週末の間、短波長ＵＶランプに露光させた。反応物を順相ＨＰＬＣ(酢酸エチル／ヘキサン)によって評価した。トランス異性体７１％およびシス異性体２９％が観察された。反応物にさらに３日ＵＶをあてて、出発物質の８４％が、トランス異性体に転化し、出発物の１６％がシス異性体のままであった。クロマトグラフィにより精製して収率４８％で実施例ＢＢ−１(０.９５６ｇ)を得た。ＭＨ⁺５０６.１，ＭＨ＋ＮＨ₄ ⁺５２３.２ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ，δppm)1.2-2.0 (m, 8H), 2.42-2.6 (m, 6H), 2.91 (dd, 1H), 4.19 (m, 1H), 4.31 (dt, 1H), 5.09 (s, 2H), 5.11 (s, 2H), 5.18 (dt, 1H), 5.27 (m, 1H), 7.25 (bs, 1OH)。

実施例ＢＢ−２)
(２Ｓ,４Ｅ)−６−[(２Ｒ)−ヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−イル]−２−[ [(フェニルメトキシ)カルボニル]アミノ]−４−ヘキセン酸，フェニルメチルエステル，一塩酸塩

実施例ＡＡ−１の方法によってＺｎ粉末(１.５ｇ)および６０％ＨＯＡｃ／Ｈ₂Ｏ(４０ｍＬ)を用いてＭｅＯＨ(８０ｍＬ)中の実施例ＢＢ−１の生成物の試料(０.９５６ｇ，１.９mmol)を脱保護した。生成した生成物を逆相クロマトグラフィによって精製して収率２８％で標題物質(０.２４８ｇ)を得た。

実施例ＢＢ)
実施例ＡＡの方法によってＨＣｌ(２ｍＬ)、Ｈ₂Ｏ(２ｍＬ)、ＣＨ₃ＣＮ(４ｍＬ)を用いて実施例ＢＢ−２の生成物(０.２４８ｇ，０.５３mmol)を標題生成物に転化した。粗生成物を逆相クロマトグラフィによって精製して収率５７％で実施例ＢＢの標題生成物(０.０７３ｇ)を得た。ＭＨ⁺２４０.３，ＭＨ＋Ｎａ⁺４８６.４ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ，δppm)1.2-2.0 (m, 6H), 2.35 (t, 2H), 2.55-2.82 (m, 4H), 3.68 (dt, 1H), 4.05 (t, 1H), 5.65 (m, 2H)。

実施例ＣＣ
(Ｅ)−２−アミノ−２−メチル−６−[(１−イミノエチル)アミノ]−４−ヘキセン酸，二塩酸塩

実施例ＣＣ−１)

ＤＬ−アラニンエチルエステル塩酸塩(５ｇ，３２.５mmol)をトルエン(５０ｍＬ)中に懸濁した。トリエチルアミン(４.５ｍＬ，３２.５mmol)続いて無水フタル酸(４.８ｇ，３２.５ｍＬ)を加えた。反応フラスコにDean-Starkトラップおよび還流冷却器を備えて混合物を還流で加熱した。約１０ｍＬのトルエン／水を集めた。反応混合物を室温に冷まし、水性ＮＨ₄ＣｌおよびＥｔＯＡｃで希釈した。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃ(３×)で抽出した。酢酸エチル抽出物を、ブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して真空下で濃縮し、定量的に近い収率で白色結晶質固形物として標題フタリル−保護されたアミノエステルを得た。¹ＨＮＭＲ(４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃, δppm)：1.2 (t, 3H), 1.6 (d, 3H), 4.2 (m, 2H), 4.9 (q, 1H), 7.7 (m, 2H), 7.9 (m, 2H)

実施例ＣＣ−２)

１,４−ブテンジクロリド(２５ｇ，０.２mol)を含む２５０ｍＬ丸底フラスコにカリウムフタルイミド(１８.５ｇ，０.１mol)を加えた。反応混合物を１５０℃に１.５時間加熱した。混合物を室温に冷ましてブラインとＥｔ₂Ｏとの間で分配した。有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して真空下で濃縮した。残留物を熱エタノールから再結晶させて橙色結晶として標題の１−クロロ−４−フタルイミドブテン(８.９ｇ，３９％)を得た。Ｃ₁₂Ｈ₁₀ＣｌＮＯ₂のＨＲＭＳ計算値：ｍ／ｚ＝２３６.０４７８ [Ｍ＋Ｈ] 実測値：２３６.０４４９ ¹ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃，δppm)：4.1 (d, 2H), 4.3 (d, 2H), 5.9 (m, 2H), 7.7 (m, 2H), 7.9 (m, 2H)

実施例ＣＣ−３)

実施例ＣＣ−２の生成物の試料(２.３ｇ，９.８mmol)をアセトン(５０ｍＬ)に溶解した。ＮａＩ(３.２ｇ，２１mmol)を加え、混合物を一夜還流した。室温に冷ました後、Ｅｔ₂Ｏを加え、混合物をチオ硫酸ナトリウムおよびブラインで順次洗浄した。有機層をＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して真空下で濃縮し、明るい黄色固形物として標題ヨージド(２.８ｇ，８７.５％)を得、これをさらに精製することなく用いた。¹ＨＮＭＲ(４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃，δppm)：3.8 (d, 2H), 4.2 (d, 2H), 5.7 (m, 1H), 6.0 (m, 1H), 7.7 (m, 2H), 7.9 (m, 2H) 質量(Ｍ＋1)＝３２８

実施例ＣＣ−４)

ＴＨＦ(５０ｍＬ)中のＫＨＭＤＳ(２.６ｇ，１３.３mmol)の溶液を−７８℃に冷やした。ＴＨＦ(１５ｍＬ)中の実施例ＣＣ−１(２.２ｇ，８.８７mmol)の生成物の溶液を加え、その直後に１,３−ジメチル−３,４,５,６−テトラヒドロ−２(１Ｈ)−ピリミジノン(ＤＭＰＵ，１.０ｍＬ、８.８７ｍＬ)を加えた。溶液を−７８℃で４０分間撹拌し、ＴＨＦ(１５ｍＬ)中の実施例ＣＣ−３の生成物(２.９ｇ，８.８７mmol)の溶液を加えた。フラスコを冷浴からはずし、室温で３時間撹拌した。反応混合物を飽和水性ＮａＨＣＯ₃とＥｔＯＡｃとの間で分配した。有機抽出物をブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して真空下で濃縮し、黄色固形物として所望のビス−フタリル保護されたアミノエステルを得た。この残留物をシリカゲル(ヘキサン：ＥｔＯＡｃ１：１)上でクロマトグラフ処理して白色固形物として標題物質１.４ｇ(３５％)を得た。¹ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.2 (t, 3H), 1.6 (d, 3H), 2.8 (dd, 1H), 3.1 (dd, 1H), 4.2 (m, 4H), 5.6 (m, 1H), 5.8 (m, 1H), 7.6 (m, 4H), 7.7 (m, 2H), 7.9 (m, 2H)。質量(Ｍ＋Ｈ)＝４４７

実施例ＣＣ−５)

実施例ＣＣ−４の生成物(０.７８ｇ，１.７６mmol)を、ギ酸(１０ｍＬ，９５％)およびＨＣｌ(２０ｍＬ，濃ＨＣｌ)の混合物中に溶解し、３日間還流した。反応混合物を０℃に冷やし、濾過して無水フタル酸を除去した。真空下で濃縮(Ｔ＜４０℃)した後、標題不飽和アルファメチルリシンを白色固形物(０.３８ｇ，９５％)として得、これをさらに精製することなく用いた：¹ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，Ｄ₂Ｏ，δppm)：1.4 (s, 3H), 2.4 (dd,1H), 2.6 (dd,1H), 3.5 (d, 2H), 5.7 (m, 2H)。質量(Ｍ＋Ｈ)＝３１７

実施例ＣＣ)
実施例ＣＣ−５の生成物(０.２ｇ，０.８６mmol)をＨ₂Ｏ(８ｍＬ)中に溶解し、２.５Ｎ
ＮａＯＨでｐＨ９にした。エチルアセトイミデート−ＨＣｌ(０.４２ｇ，３.４mmol)を４つにわけて１時間かけて加えた。１時間後、１０％ＨＣｌを用いて混合物をｐＨ４に酸性化し、真空下で濃縮した。次いで、水で洗浄したDOWEX 50WX4-200カラム(Ｈ型、０.５ＮＮＨ₄ＯＨ溶出液)に残留物を通過させた。残留物を真空下で濃縮し、１０％ＨＣｌを用いてｐＨ４に酸性化し、濃縮して油状物として標題生成物(１７ｍｇ，６％)を得た。Ｃ₉Ｈ₁₇Ｎ₃Ｏ₂のＨＲＭＳ計算値：ｍ／ｚ＝２００.１３９９ [Ｍ＋Ｈ] 実測値：２００.１４１７ ¹ＨＮＭＲ(４００ＭＨｚ，Ｄ₂Ｏ，δppm)：1.4 (s, 3H), 2.1 (s, 3H), 2.5 (dd, 1H), 2.6 (dd, 1H), 3.8 (d, 2H), 5.6 (m, 2H)。

実施例ＤＤ
(Ｒ,Ｅ)−２−アミノ−２−メチル−６−[(１−イミノエチル)アミノ]−４−ヘキセン酸，二塩酸塩

実施例ＤＤ−１)

(２Ｓ,４Ｓ)−３−ベンゾイル−２−(tert-ブチル)−４−メチル−１,３−オキサゾリジン−５−オンを、Seebachの手順(Seebach, D.; Fadel, A.Helvetica Chimica Acta 1985, 68, 1243)に従って製造した。

実施例ＤＤ−２)

ＫＨＭＤＳ(０.６５ｇ，３.２４mmol)、ＤＭＰＵ(０.３３ｍＬ，２.７mmol)およびＴＨＦ(４０ｍＬ)の溶液を−７８℃に冷やした。ＴＨＦ(１０ｍＬ)中の(２Ｓ,４Ｓ)−３−ベンゾイル−２−(tert−ブチル)−４−メチル−１,３−オキサゾリジン−５−オン(実施例ＤＤ−１)(０.７０ｇ，２.７mmol)の溶液を滴加した。４５分間後、ＴＨＦ(１０ｍＬ)中の実施例ＣＣ−３の生成物(０.８８ｇ，２.７mmol)の溶液を加えた。反応混合物を室温で２時間撹拌し、飽和水性ＮａＨＣＯ₃でクエンチした。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を合わせてブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して真空下で濃縮した。生成した黄色の油を、シリカゲル(次いで、ヘキサン／酢酸エチル９：１、次いで４：１)上でクロマトグラフ処理して無色の油として標題の保護された不飽和アルファメチルＤ−リシン(０.２６ｇ，２０％)を得た。Ｃ₂₇Ｈ₂₈Ｎ₂Ｏ₅のＨＲＭＳ計算値：ｍ／ｚ＝４６１.２０７６ [Ｍ＋Ｈ] 実測値：４６１.２０３３ ¹ＨＮＭＲ(４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃，δppm)0.9 (s, 9H), 1.5 (s, 3H), 4.3 (m, 2H), 5.5 (m, 2H), 5.6 (m, 2H), 6.1 (m,1H), 7.5 (m, 5H), 7.7 (m, 2H), 7.9 (m, 2H)

実施例ＤＤ−３)

６ＮＨＣｌ(６ｍＬ)およびギ酸(６ｍＬ)中に溶解された実施例ＤＤ−２の生成物(０.２５５ｍｇ，０.５５mmol)を２４時間還流に加熱した。反応混合物を室温に冷まし、真空下で濃縮した。残留物を水中に懸濁し、ＣＨ₂Ｃｌ₂で洗浄した。水性層を濃縮し、水で洗浄したDOWEX 50WX4-200カラム(Ｈ型、０.５ＮＮＨ₄ＯＨ溶出液)を通過させた。残留物を真空下で濃縮し、１０％ＨＣｌを用いてｐＨ４に酸性化して濃縮し、油状物として標題の不飽和Ｄ−リシン(７１ｍｇ，５５％)を得、これをさらに精製することなく用いた：¹ＨＮＭＲ(４００ＭＨｚ，Ｄ₂Ｏ，δppm)：1.4 (s, 3H), 2.5 (dd, 1H), 2.6 (dd, 1H), 3.4 (d, 2H), 5.6 (m, 2H), 5.7 (m, 2H)。

実施例ＤＤ)
実施例ＤＤ−３の生成物(１３ｍｇ，０.０５６mmol)をＨ₂Ｏ(５ｍＬ)中に溶解し、２.
５ＮＮａＯＨを用いてｐＨ９にした。アセトイミド酸エチル−ＨＣｌ(２７ｍｇ，０.２mmol)を４つに分けて２時間かけて加えた。２時間後、１０％ＨＣｌを用いて混合物をｐＨ４に酸性化し、真空下で濃縮した。水で洗浄したDOWEX 50WX4-200カラム(Ｈ型、０.５ＮＮＨ₄ＯＨ溶出液)に残留物を通過させた。残留物を真空下で濃縮し、１０％ＨＣｌを用いてｐＨ４に酸性化して濃縮し、油状物として標題生成物(４５ｍｇ)を得た。Ｃ₉Ｈ₁₇Ｎ₃Ｏ₂のＨＲＭＳ計算値：ｍ／ｚ＝２００.１３９９ [Ｍ＋Ｈ] 実測値：２００.１３８６ ¹ＨＮＭＲ(４００ＭＨｚ，Ｄ₂Ｏ，δppm)：1.4 (s, 3H), 2.1 (s, 3H), 2.5 (dd, 1H), 2.6 (dd, 1H), 3.8 (d, 2H), 5.6 (m, 2H)。

実施例Ｅ
(Ｓ,Ｅ)−２−アミノ−２−メチル−６−[(１−イミノエチル)アミノ]−４−ヘキセン酸，二塩酸塩

実施例ＥＥ−１)

(２Ｒ,４Ｒ)−３−ベンゾイル−２−(tert−ブチル)−４−メチル−１,３−オキサゾリジン−５−オンをSeebachの手順(Seebach, D.; Fadel, A. Helvetica Chimica Acta 1985, 68, 1243)に従って製造した。

実施例ＥＥ−２)

ＴＨＦ(５０ｍＬ)中の実施例ＥＥ−１の生成物、(２Ｒ,４Ｒ)−３−ベンゾイル−２−(tert−ブチル)−４−メチル−１,３−オキサゾリジン−５−オン(２.０ｇ，７.６mmol)の溶液を−７８℃に冷やした。ＴＨＦ(２５ｍＬ)中ＫＨＭＤＳ(０.６５ｇ，３.２４mmol)の−７８℃溶液を滴加した。３０分後、ＴＨＦ中の実施例ＣＣ−３の生成物(２.８ｇ，８.６mmol)の溶液(２５ｍＬ)を加えた。反応混合物を室温で１時間撹拌し、飽和水性ＮａＨＣＯ₃でクエンチした。層を分離し、水層をＥｔＯＡｃで抽出した。有機層を合わせてブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して真空下で濃縮した。生成した橙色の油をシリカゲル(ヘキサン／酢酸エチル９：１、次いで４：１)上でクロマトグラフ処理して白色固形物として保護された標題の不飽和アルファメチルＬ−リシン(０.５ｇ，１５％)を得た。Ｃ₂₇Ｈ₂₈Ｎ₂Ｏ₅のＨＲＭＳ計算値：ｍ／ｚ＝４６１.２０７６ [Ｍ＋Ｈ] 実測値：４６１.２０４３ ¹ＨＮＭＲ(４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃，δppm)：0.9 (s, 9H), 1.5 (s, 3H), 4.3 (m, 2H), 5.5 (m, 2H), 5.6 (m, 2H), 6.1 (m, 1H), 7.5 (m, 5H), 7.7 (m, 2H), 7.9 (m, 2H)

実施例ＥＥ−３)

実施例ＥＥ−２の生成物(０.５ｇ，１mmol)を１２ＮＨＣｌ(１０ｍＬ)およびギ酸(５ｍＬ)中に溶解し、この混合物を１２時間還流に加熱した。反応混合物を冷凍庫中で３時間冷やし、濾過により固形物を除去した。残留物をＣＨ₂Ｃｌ₂およびＥｔＯＡｃで洗浄した。水層を真空下で濃縮し、油状物として標題の不飽和アルファメチルＬ−リシン(０.２６ｇ，９９％)を得、これをさらに精製することなく用いた：¹ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，Ｄ₂Ｏ，δppm)：1.4 (s, 3H), 2.5 (dd, 1H), 2.6 (dd, 1H), 3.4 (d, 2H), 5.7 (m, 2H)

実施例ＥＥ)
実施例ＥＥ−３(０.１３ｇ，０.５６mmol)の生成物をＨ₂Ｏ(１ｍＬ)中に溶解し、２.５ＮＮａＯＨを用いてｐＨ９にした。アセトイミド酸エチル−ＨＣｌ(０.２８ｇ，２.２mmol)を４つにわけて１時間かけて加えた。１時間後、１０％ＨＣｌを用いて混合物をｐＨ４に酸性化して真空下で濃縮した。水で洗浄したDOWEX 50WX4-200カラム(０.５Ｎ，ＮＨ₄ＯＨ溶出液)に残留物を通過させた。残留物を真空下で濃縮して、１０％ＨＣｌを用いてｐＨ４に酸性化して濃縮し、油状物(４０ｍｇ)として標題生成物を得た。Ｃ₉Ｈ₁₇Ｎ₃Ｏ₂のＨＲＭＳ計算値：ｍ／ｚ＝２２２.１２１８ [Ｍ＋Ｎａ] 実測値：２２２.１２１３ ¹ＨＮＭＲ(３００ＭＨｚ，Ｄ₂Ｏ，δppm)：1.4 (s, 3H), 2.1 (s, 3H), 2.4 (dd, 1H), 2.6 (dd, 1H), 3.8 (d, 2H), 5.6 (m, 2H)

実施例ＦＦ
２−アミノ−２−メチル−６−[(１−イミノエチル)アミノ]−４−ヘキシン酸，二塩酸塩

実施例ＦＦ−１)

Ｎ−boc−１−アミノ−４−クロロブタ−２−インをTetrahedron Lett. 21, 4263 (1980)に記載された手順に従って製造した。

実施例ＦＦ−２)

メチルＮ−(ジフェニルメチレン)−Ｌ−アラニネートを、J. Org.Chem., 47, 2663 (1982)に記載された手順に従って製造した。

実施例ＦＦ−３)

アルゴンでパージしたフラスコ中に乾燥ＴＨＦ(１０００ｍＬ)を入れ、鉱油中分散させた６０％ＮａＨ(９.０４ｇ，０.２２７mol)を加えた。実施例ＦＦ−２の生成物(３０.７ｇ，０.１１４mol)をこの混合物に加えた。次いで、反応混合物を１０℃〜１５℃で３０分間撹拌した。ヨウ化カリウム(４ｇ)およびヨウ素(２ｇ)を加え、その直後、実施例ＦＦ−２の生成物(２３ｇ，０.１１３mol，ＴＨＦ中２００ｍＬ)を３０分かけて加えた。そして出発物質が消失するまで(〜２時間)反応混合物を５５℃で撹拌した。次いで、反応混合物を室温に冷まし、溶媒を蒸発させた。酢酸エチル(５００ｍＬ)を加え、混合物を脱イオン水２×２００ｍＬで注意深く洗浄した。有機層を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過し、そして蒸発させて粗生成物４４ｇを得た。ヘキサン中２０％酢酸エチルを用いるクロマトグラフィにより精製して標題の保護された不飽和アルファ−メチルリシン(２８ｇ，５７％)を得た。Ｃ₂₆Ｈ₃₀Ｎ₂Ｏ₄および０.５酢酸エチルの分析計算値：C, 70.42 ; H, 7.14 ; N, 5.91。実測値：C, 70.95 ; H, 7.73 ; N, 6.09 ＩＲ (生で, λmax, cm^-1) ：2981, 1714, 1631 ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)：1.28 (s, 9H), 1.4 (s, 3H), 2.65-2.76 (m, 2H), 3.15 (s, 3H), 3.7 (bs, 2H), 4.6 (bs, 1H), 6.95-7.4 (m, 10H) ¹³ＣＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃，δppm)24.29, 28.33, 28.39, 33.24, 51.60, 53.55, 127.79, 127.97, 128.26, 128.36, 128.43, 128.54, 128.66, 130.05, 130.22, 132.39 質量(Ｍ＋1)＝４３５ＤＳＣ純度：２６１.９５℃

実施例ＦＦ−４)

実施例ＦＦ−３の生成物(１６ｇ，０.０３６８mol)を１ＮＨＣｌ(３００ｍＬ)中に溶解し、２５℃で２時間撹拌した。反応混合物をエーテル(２×１５０ｍＬ)で洗浄し、水層を分離して木炭で脱色した。濃縮して白色泡沫状固形物として〜９ｇ(１００％収率)の脱保護された不飽和アルファメチルリシンエステルＦＦ−４を得た。２.２６ＨＣｌおよび１.１９Ｈ₂Ｏを含むＣ₈Ｈ₁₄Ｎ₂Ｏ₂の分析計算値：C, 35.06 ; H, 6.86 ; N, 10.22 ; Cl,
29.24.実測値：C, 35.31 ; H, 7.38 ; N, 10.70 ; Cl, 29.77 ¹ＨＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ，δppm)：1.56 (s, 3H), 2.8-3.0 (2 dt, 2H), 3.75 (s, 2H), 3.79 (s, 3H) ¹³ＣＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ，δppm)：23.89, 29.81, 32.05, 57.08, 61.90, 79.57, 82.43, 173.92 質量(Ｍ＋1)＝１７１ＤＳＣ純度：１１４.２２℃ ＵＶ＝２０６ｎｍ，ａｂｓ０.０１３
メタノール中の[α]²⁵＝０(３６５ｎｍで)

実施例ＦＦ−５)

実施例ＦＦ−４の生成物(２.４３ｇ，０.０１mol)を脱イオン水(２５ｍＬ)中に溶解した。脱イオン水(２５ｍＬ)中のＮａＯＨ(４００ｍｇ，０.０１mol)の溶液を２５℃で加えてｐＨを−７.９５にし、撹拌をさらに１０分間続けた。アセトイミド酸エチル塩酸塩(９８８ｍｇ，０.００８mol)を反応混合物に加えると同時に、１ＮＮａＯＨを加えてｐＨを〜８.５に調節した。反応混合物をｐＨ８〜８.５で３時間撹拌し、続いてアセトイミデートを加えた。１ＮＨＣｌを反応混合物(ｐＨ４.１)に加えた。溶媒を５０℃で蒸発させて粗製の黄色吸湿性残留物(４ｇ，収率＞１００％)を得た。０.１％ＡｃＯＨ／ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏを用いるGilsonクロマトグラフィ系で精製を実施した。２.２５ＨＣｌおよび１.７Ｈ₂Ｏを含むＣ₁₀Ｈ₁₇Ｎ₃Ｏ₂の分析計算値：C, 37.08 ; H, 7.05 ; N, 12.97 ; Cl, 24.63.実測値：C, 37.01 ; H, 6.79 ; N, 12.76 ; Cl, 24.87 ＩＲ (生で, λmax, cm^-1) ：2953, 2569, 1747, 1681, 1631 ¹ＨＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ，δppm)：1.52 (s, 3H), 2.12 (s, 3H), 2.74-2.96 (2 dt, 2H), 3.75 (s, 3H), 3.95 (t, 2H) ¹³ＣＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ，δppm)：23.89, 29.81, 32.05, 57.08, 61.90, 79.57, 82.43, 173.92 質量(Ｍ＋1)＝２１２

実施例ＦＦ)
実施例ＦＦ−５(１００ｍｇ，０.０００５mol)の生成物を、８ＮＨＣｌ(２０ｍＬ)中に溶解し、還流で１０時間撹拌した。反応混合物を室温に冷まし、水性ＨＣｌを回転蒸発により蒸発させた。残留物を脱イオン水(１０ｍＬ)および水中に溶解し、真空下で再濃縮し、ほとんど定量的収率(８８ｍｇ)で黄色ガラス状固形物として標題生成物を得た。２.４ＨＣｌおよび１.８Ｈ₂Ｏを含むＣ₉Ｈ₁₅Ｎ₃Ｏ₂の分析計算値：C, 34.08 ; H, 6.67 ; N, 13.25 ; Cl, 26.83。実測値：C, 34.32 ; H, 6.75 ; N, 13.63 ; Cl, 26.47 ＩＲ (生で, λmax, cm^-1) ：1738, 1677, 1628, 1587 ¹ＨＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ，δppm)：1.6 (s, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.8-3.0 (2 dt, 2H), 4.1 (s, 2H) ¹³ＣＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ，δppm)：21.22, 24.10, 29.88, 34.58, 80.04, 80.99, 128.39, 168.07, 176.13 質量(Ｍ＋1)＝１９８

実施例ＧＧ

(２Ｒ／Ｓ,４Ｚ)−２−アミノ−２−メチル−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−４−ヘプテン酸，二塩酸塩

実施例ＧＧ−１)
５,６−ジヒドロピラン−２−オン(４９.０５ｇ，０.５mol)を水２００ｍＬ中溶解した。水酸化カリウム(３５ｇ，０.６２５mol)を加え、反応混合物を周囲温度で５時間撹拌した。溶媒を真空下で除去して無色のガラス状固形物(６５ｇ，８４％)を得、これはＮＭＲによって主に標題化合物のシス異性体であると特性評価された。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ2.7 (m, 2H), 3.6 (t, 2H), 5.8-5.85 (m, 1H), 5.9-5.97 (m, 1H)。

実施例ＧＧ−２)
実施例ＧＧ−１の生成物をジメチルホルムアミド１００ｍＬ中に溶解した。次いで、ヨウ化メチル(５２ｍＬ，０.８４mol)を加えると４０℃まで発熱した。反応混合物を室温で１０時間撹拌し、酢酸エチル／ジエチルエーテル(比率２０／８０)１５０ｍＬと氷水との
間で分配した。水層を分離し、ジエチルエーテル１００ｍＬで再抽出した。有機層を合わせて乾燥(Ｎａ₂ＳＯ₄)し、濾過して全ての溶媒を除去して所望のメチルエステル生成物(４０ｇ，７１％)を得た。この物質を塩化メチレン２００ｍＬ中に溶解して０℃に冷やした。第三級ブチルジメチルシリルクロリド、トリエチルアミンおよびジメチルアミノピリジンを加えた。反応混合物をゆっくりと室温に加温し、窒素下で１０時間撹拌した。反応物を１Ｎ水性硫酸水素カリウム溶液１００ｍＬで抽出した。有機層をブライン２×１００ｍＬ、次いで水３×１５０ｍＬで洗浄した。有機層を乾燥(Ｎａ₂ＳＯ₄)、濾過し、ストリッピングして標題物質４２ｇ(５６％)を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃) δ：0.02 (s, 6H), 0.085 (s, 9H), 2.8-2.85 (m, 2H), 3.65 (s, 3H), 3.66-3.7 (m, 2H), 5.8 (m, 1H), 6.3 (m, 1H)

実施例ＧＧ−３)
実施例ＧＧ−２の物質をトルエン２５ｍＬ中に溶解し、０℃に冷やした。温度を５〜−１０℃の間の維持しながらジイソブチルアルミニウムヒドリド(トルエン中１.０Ｍ，３２ｍＬ，４８mmol)を滴加した。反応混合物を６〜８℃の間で１.５時間撹拌した後、−２５℃に冷やした。この混合物に０.５Ｎナトリウムカリウムタータレート１００ｍＬを加えた。反応混合物を室温まで加温させて１時間撹拌した。形成されたゲル状沈殿を濾過した。水性物をＥｔＯＡｃ２×１００ｍＬで抽出した。合わせた有機層を乾燥(硫酸ナトリウム)、濾過して真空下で濃縮し、無色の油として標題生成物(３.４５ｇ，６６％)を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃) δ：0.02 (s, 6H), 0.085 (s, 9H), 2.25-2.32 (m, 2H), 2.6 (bs, 1H), 3.6 (t, 2H), 4.08 (d, 2H), 5.45-5.55 (m, 1H), 5.7-5.75 (m, 1H)

実施例ＧＧ−４)
実施例ＧＧ−３の生成物(８ｇ，３７mmol)を塩化メチレン１００ｍＬ中に溶解し、この溶液を０℃に冷やした。次いで、メタンスルホニルクロリドを加え、この混合物を５分間撹拌した。次いでトリエチルアミンを加えた。前記試薬の添加中は、温度を０〜１０℃の間に維持した。その後、反応混合物を室温まで加温させ、２４時間撹拌した。次いで、５０％水性炭酸水素ナトリウム溶液１００ｍＬを用いて抽出した。有機層を飽和水性ブライン溶液１００ｍＬで洗浄し、乾燥(硫酸ナトリウム)し、濾過し、真空下でストリッピングして標題物質(８.２ｇ，９４％)を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ：0.02 (s, 6H), 0.085 (s, 9H), 2.25-2.32 (m, 2H), 3.6 (t, 2H), 4.08 (d, 2H), 5.6-5.7 (m, 2H)

実施例ＧＧ−５)
テトラヒドロフラン５９ｍＬ中に溶解したＮ−ｐ−クロロフェニルイミンアラニンメチルエステル(８.８５ｇ，３４mmol)の溶液をアルゴンでパージした。ＮａＨ(１.６４ｇ，４１mmol)を加えると、溶液は明るい橙色、続いて濃い赤色に変わった。テトラヒドロフラン４０ｍＬ中の実施例ＧＧ−４の標題物質(８ｇ，３４mmol)の溶液を上記のアニオン溶液に加えた。発熱が観察され、ほとんど４０℃まで温度が上昇した。反応混合物を４８〜５２℃の間で２時間維持した。次いで、室温に冷やして濾過した。濾液を真空下でストリッピングして黄色の油状物として標題物質(８.４ｇ，粗収率５０％)を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ：0.02 (s, 6H), 0.085 (s, 9H), 1.45 (s, 3H), 1.6 (s,1H), 2.2-2.25 (m, 2H), 2.65 (d, 2H), 3.55 (m, 2H), 3.7 (s, 3H), 5.45-5.55 (m, 2H), 7.35-7.7 (m, 4H)

実施例ＧＧ−６)
実施例ＧＧ−５の標題物質(８.４ｇ，１８.２mmol)を１Ｎ塩酸１２５ｍＬで処理し、反応物を室温で１時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル２×７５ｍＬで抽出した後、水層を真空下５６℃でストリッピングして標題物質(粗収率１００％)４ｇを得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ)δ：1.6 (s, 3H), 2.3-2.4 (m, 2H), 2.65-2.8 (m, 2H), 3.6-3.65 (m, 2H),
3.87 (s, 3H), 5.4-5.5 (m, 1H), 5.75-5.85 (m, 1H)

実施例ＧＧ−７)
実施例ＧＧ−６の標題生成物(１.９ｇ，８.５mmol)をジオキサン１５ｍＬおよび水８ｍＬの混合物中に溶解した。次いで、固体炭酸水素カリウムを泡立たないように注意深く加えた。反応混合物を１０分間撹拌した後、第三級ブチルオキシカルボニル無水物を少しずつ加え、反応混合物を周囲温度で２４時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル１００ｍＬおよび水５０ｍＬで希釈した後、これを分液ロートへ注いだ。有機層を分離して乾燥(Ｎａ₂ＳＯ₄)、濾過してストリッピングし、無色の油状物(１.９ｇ，粗収率７８％)として標題物質を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃) δ：1.42 (s, 9H), 1.55 (s, 3H), 2.3-2.36 (m,
2H), 2.58-2.65 (m, 2H), 3.65-3.7 (t, 2H), 3.75 (s, 3H), 5.42-5.5 (m, 1H), 5.55-5.62 (m, 1H)

実施例ＧＧ−８)
実施例ＧＧ−６の標題物質の別の試料１.９ｇを、実施例ＧＧ−７の方法によって実施例ＧＧ−７の標題生成物の粗製Ｚ／Ｅ混合物に転化した。この物質を、さらに酢酸エチル／ヘキサン(２０／８０比率)の溶媒系を用いてシリカ上で精製して少数のＥ異性体および多数のＺ−異性体を得た。

実施例ＧＧ−９)
実施例ＧＧ−８の標題Ｚ−異性体(１.８ｇ，６.２５mmol)をアセトニトリル２０ｍＬ中に溶解し、この溶液を０℃に冷やした。次いでピリジン(０.７６ｇ，９.４mmol)を加え、続いて固体ジブロモトリフェニルホスホラン(３.４６ｇ，８.２mmol)を１０分かけて少しずつ加えた。反応混合物をアルゴン下、室温で２４の時間撹拌した。形成された沈殿を濾過した。濾液を真空下で濃縮し、油状物２.８ｇを得、これを酢酸エチル／ヘキサン(比率６０／４０)の溶媒系を用いてシリカゲル上で精製した。標題物質(５０％)１.１ｇをＮＭＲにより特性評価した。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ：1.44 (s, 9H), 1.55 (s, 3H), 2.6-2.65 (m, 4H), 3.35-3.4 (m, 2H), 3.75 (s, 3H), 5.4-5.45 (m, 1H), 5.55-5.6 (m, 1H)

実施例ＧＧ−１０)
実施例ＧＧ−８の標題物質(３００ｍｇ，０.８６mmol)をジメチルホルムアミド(ＤＭＦ)２５ｍＬ中に溶解した。３−メチル−１,２,４−オキサジアゾリン−５−オン(１３０ｍｇ，０.９４mmol)のカリウム塩を加え、反応混合物を５２℃に加熱し、撹拌しながら１８時間そこで維持した。次いで、室温に冷ました後、ＤＭＦを真空下、６０℃でストリッピングした。残留物を、酢酸エチル／ヘキサン６０／４０〜９０／１０の勾配を用いてシリカゲル上で精製し、標題物質３００ｍｇ(９５％)を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ)δ：1.35 (s, 3H), 1.43 (s, 9H), 2.32 (s, 3H), 2.45-2.55 (m, 4H), 3.65-3.7 (m, 2H), 3.72 (t, 3H), 5.5-5.6 (m, 2H)

実施例ＧＧ−１１)
実施例ＧＧ−１０の生成物(３００ｍｇ)を０.０５Ｎ水性ＨＣｌで処理して、この溶液を３０分間撹拌した。溶媒を真空下で除去してほぼ定量的収率で所望の物質を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ)δ：1.6 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.45-2.55 (m, 2H), 2.7-2.8 (m, 2H), 3.3-3.4 (m, 5H), 5.5-5.6 (m, 1H), 5.7-5.8 (m, 1H)

実施例ＧＧ−１２)
実施例ＧＧ−１１の標題物質(１９８ｍｇ，０.５４mmol)をＭｅＯＨ５０ｍＬ中に溶解した。次いで、ギ酸(４０ｍｇ)、続いて炭酸カルシウム上のパラジウム(４００ｍｇ)を加えた。反応混合物を密閉管中で撹拌しながら６５℃に２４時間加熱した。次いで、室温に冷まして濾過した。濾液を真空下で濃縮し、残留物を逆相ＨＰＬＣによって精製して標題物質１１５ｍｇ(７５％)を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ)δ：1.4 (s, 3H), 1.95 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.4-2.52 (m, 4H), 3.25-3.35 (m, 2H), 3.75 (t, 3H), 5.54-5.62 (m, 2H)

実施例ＧＧ)
実施例ＧＧ−１２の標題物質(７５ｍｇ)を２Ｎ塩酸１５ｍＬ中に溶解した。反応混合物を還流に加熱して６時間撹拌した後、室温に冷ました。溶媒を真空下で除去した。残留物を水２５ｍＬ中に溶解し、およびロータリーエバポレーター上でストリッピングして過剰の塩酸を除去した。残留物を水中に溶解し、凍結乾燥して標題物質７６ｍｇ(〜１００％)を得た。Ｃ₁₀Ｈ₁₉Ｎ₃Ｏ₂＋２.２ＨＣｌ＋２.２Ｈ₂Ｏの元素分析計算値：C, 36.06 ; H, 7.75 ; N, 12.61。Ｃ₁₀Ｈ₁₉Ｎ₃Ｏ₂＋２.２ＨＣｌ＋２.２Ｈ₂Ｏの実測値：C, 35.91 ; H, 7.61 ; N, 12.31 ¹ＨＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ)δ：1.47 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 2.45-2.64 (m, 4H), 2.58-2.65 (m, 2H), 3.65-3.7 (t, 2H), 5.55-5.65 (m, 2H)

実施例ＨＨ

(２Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−２−メチル−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸

実施例−ＨＨ−１)
ＴＨＦ１００ｍＬ中のトリエチル２−フルオロホスホノアセテート(２５.４ｇ，１０５mmol)の冷たい(−７８℃)溶液にｎ−ブチルリチウム(ヘキサン中１.６Ｍ，６３ｍＬ，１０１mmol)を加えた。この混合物を−７８℃で２０分間撹拌して明るい黄色溶液を得た。次いで、ＴＨＦ１２０ｍＬ中の粗製３−[(tert−ブチルジメチルシリル)オキシ]プロパナール(J. Org. Chem., 1994, 59, 1139-1148)(２０.０ｇ，１０５mmol)の溶液を１０分かけて滴加し、混合物を−７８℃で１.５時間撹拌し、その時点で薄層クロマトグラフィ(ヘキサン中の５％酢酸エチル)による分析は、出発物質が残っていないことを示した。飽和水性ＮＨ₄Ｃｌ(１５０ｍＬ)を用いて−７８℃で反応物を急冷した。有機層を集めて、水層をジエチルエーテル(３００ｍＬ)で抽出した。合わせた有機物をブライン(２００ｍＬ)で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過して濃縮した。粗物質を、シリカゲル(１５０ｇ)のプラグを通してヘキサン(２Ｌ)により溶出して濾過して透明な油状物として所望の(２Ｅ)−５−[ [(１,１−ジメチルエチル)ジ−メチルシリル]オキシ]−２−フルオロ−２−ペンテン酸エチルエステル生成物１４.３８ｇ(５２％)を得た。¹ＨＮＭＲおよび¹⁹ＦＮＭＲは、単離された生成物がほぼ９５：５のＥ：Ｚ比率を有することを示した。Ｃ₁₃Ｈ₂₆ＦＯ₃ＳｉのＨＲＭＳ計算値：ｍ／ｚ＝２７７.１６３５ [Ｍ＋Ｈ]⁺，実測値：２７７.１６４５ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃) δ0.06 (s, 6H), 0.94 (s, 9H), 1.38 (t, 3H), 2.74 (m, 2H), 3.70 (m, 2H), 4.31 (q, 2H), 6.0 (dt, ビニル, 1H)。 ¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ-129.78 (d, 0.05 F, J = 35 Hz, 5％ Z-異性体), -121.65 (d, 0.95 F, J = 23 Hz, 95％ E-異性体)。

実施例−ＨＨ−２)
室温でメタノール１００ｍＬ中の実施例−ＨＨ−１(６.７６ｇ，２４.５mmol)の溶液に、固体ＮａＢＨ₄(４.２ｇ，２２０mmol)を１.４ｇずつ３時間かけて加えた。３.５時間後、水(１０ｍＬ)を加えた。さらに固体ＮａＢＨ₄(４.２ｇ，２２０mmol)を、１.４ｇずつ３時間かけて加えた。反応物を飽和水性ＮＨ₄Ｃｌ(１５０ｍＬ)でクエンチし、ジエチルエーテル(２×２５０ｍＬ)で抽出した。有機層を合わせ、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過し、濃縮した。粗物質(透明な油状物４.８１ｇ)を、ヘキサン中１０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して透明な油状物として所望の(２Ｅ)−５−[ [(１,１−ジメチルエチル)ジメチルシリル]オキシ]−２−フルオロ−２−ペンテン−１−オール生成物２.３９ｇ(４２％)を得、¹⁹ＦＮＭＲにより、これには９３：７のＥ：Ｚ比率が含まれていた。Ｃ₁₁Ｈ₂₄ＦＯ₂ＳｉのＨＲＭＳ計算値：ｍ／ｚ＝２３５.１５３０ [Ｍ＋Ｈ]⁺実測値：２３５.１５３６ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ0.06 (s, 6H), 0.88 (s, 9H), 2.35 (m, 2H), 3.62 (t, 2H), 4.19 (dd, 2H), 5.2 (dt, ビニル, 1 H)。¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ−120.0 (dt, 0.07F, 7％ Z-異性体), -109.82 (q, 0.93 F, J = 21 Hz, 93％ E-異性体)。

実施例−ＨＨ−３)
ＴＨＦ６０ｍＬ中の実施例−ＨＨ−２(２.２５ｇ，９.５８mmol)、ポリマーに担持されたトリフェニルホスフィン(３mmol／ｇ，１.８６ｇ，１５mmol)および３−メチル−１,２,４−オキサジアゾリン−５−オン(１.２５ｇ，１２.５ mmol)の混合物に、ジエチルアゾジカルボキシレート(２.３５ｍＬ，１４.７mmol)を滴加した。反応混合物を室温で１時間撹拌し、さらに３−メチル−１,２,４−オキサジアゾリン−５−オン(０.３０ｇ，３.０mmol)を加えた。３０分後、セライトを通して混合物を濾過して濾液を濃縮した。生成した黄色の油状物をジエチルエーテル(３０ｍＬ)で磨砕し、濾過して固形物を除去した。濾液を濃縮し、へキサン(３０ｍＬ)で磨砕して濾過した。濾液を濃縮して油状物にし、これをヘキサン中の１５％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して透明な油状物として所望の４−[(２Ｅ)−５−[ [(１,１−ジメチルエチル)ジメチルシリル]オキシ]−２−フルオロ−２−ペンテニル]−３−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−５(４Ｈ)−オン生成物１.８３ｇ(６０％)を得、¹⁹ＦＮＭＲにより、これには所望のＥ−異性体しか含まれていなかった。Ｃ₁₄Ｈ₂₆ＦＮ₂Ｏ₃ＳｉのＨＲＭＳ計算値：ｍ／ｚ＝３１７.１６９７ [Ｍ＋Ｈ]⁺ 実測値：３１７.１６９９ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ0.04 (s, 6H), 0.85 (s, 9H), 2.28 (s, 3H), 2.37 (m, 2H), 3.64 (t, 2H), 4.32 (d, 2H), 5.4(dt, ビニル, 1H)。 ¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ-110.20 (q, 1F, J = 21 Hz)。

実施例−ＨＨ−４)
酢酸(６ｍＬ)、ＴＨＦ(２ｍＬ)および水(２ｍＬ)の混合物中の実施例−ＨＨ−３(１.８３ｇ，５.７８mmol)の溶液を室温で２.５時間撹拌した。生成した溶液を真空下で濃縮して油状物にし、これをジエチルエーテル(５０ｍＬ)中に溶解した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ₃で洗浄し、水層をジエチルエーテル(２×５０ｍＬ)および酢酸エチル(２×５０ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層を乾燥(ＭｇＳＯ₄)、濾過し、蒸発させて透明な無色の油状物として所望の４−[(２Ｅ)−２−フルオロ−５−ヒドロキシ−２−ペンテニル]−３−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−５(４Ｈ)−オン生成物１.１５ｇ(９８％)を得た。Ｃ₈Ｈ₁₂ＦＮ₂Ｏ₃のＨＲＭＳ計算値：ｍ／ｚ＝２０３.０８３２ [Ｍ＋Ｈ]⁺，実測値：２０３.０８２２ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ2.31 (3H), 2.4 (m, 2H), 3.66 (t, 2H), 4.37 (d, 2H), 5.42 (dt, ビニル, 1H)。¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ-110.20 (q, 1 F, J = 21Hz)。

実施例−ＨＨ−５)
０℃でトリフェニルホスフィン(２３８ｍｇ，０.９１mmol)およびイミダゾール(９２ｍｇ)のＣＨ₂Ｃｌ₂(２ｍＬ)溶液に、固体ヨウ素(２３０ｍｇ，０.９１mmol)を加え、混合物を５分間撹拌した。生成した黄色スラリーに実施例−ＨＨ−４(０.１５ｇ，０.７４mmol)のＣＨ₂Ｃｌ₂(１.５ｍＬ)溶液を加えた。スラリーを室温に加温させて３０分間撹拌した。反応混合物をＣＨ₂Ｃｌ₂(１０ｍＬ)で希釈し、飽和Ｎａ₂Ｓ₂Ｏ₃(５ｍＬ)およびブライン(５ｍＬ)で洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ₄)、濾過して蒸発させて油状物にした。油状物にジエチルエーテル(１０ｍＬ)を加えて白色沈殿を得、これを濾過して除去し、濾液を濃縮して油状物にした。粗物質を、ヘキサン中の３０％酢酸エチルで溶出するシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して透明な油状物として所望の４−[(２Ｅ)−２−フルオロ−５−ヨード−２−ペンテニル]−３−メチル−１,２,４−オキサジアゾール−５(４Ｈ)−オン生成物０.１８ｇ(７８％)を得、これを放置すると凝固した。融点＝５８.１〜５８.６℃ Ｃ₈Ｈ₁₀ＦＩＮ₂Ｏ₂の分析計算値：C, 30.79 ; H, 3.23 ; N, 8.98 実測値：C, 30.83 ; H, 3.11 ; N, 8.85 Ｃ₈Ｈ₁₁ＦＩＮ₂Ｏ₂のＨＲＭＳ計算値：ｍ／ｚ＝３３０.０１１５ [Ｍ＋Ｈ]⁺，実測値：３３０.０１０４ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ2.31 (s, 3H), 2.75 (q, 2H), 3.21 (t, 2H), 4.31 (d, 2H), 5.39 (dt, ビニル, 1H)。¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ−108.21 (q, 1F, J = 21 Hz)。

実施例−ＨＨ−６)
氷浴中の(３Ｓ,６Ｒ)−６−イソプロピル−３−メチル−５−フェニル−３,６−ジヒドロ−２Ｈ−１,４−オキサジン−２−オン(Synthesis, 1999,4, 704-717)(１.１０ｇ，４.７６mmol)、ＬｉＩ(０.６３ｇ，４.７６mmol)および実施例−ＨＨ−５(０.８５ｇ，２.７２mmol)の１−メチル−２−ピロリジノン(１２ｍＬ)溶液に、２−tert−ブチルイミノ−２−ジエチルアミノ−１,３−ジメチルペルヒドロ−１,３,２−ジアザホスホリン(１.３８ｍＬ，４.７６mmol)を加えた。黄色溶液は、塩基を加えると橙色になり、そして生成した溶液を室温で１時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル(１００ｍＬ)で希釈し、水(２×３０ｍＬ)で洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ₄)、濾過し、蒸発させて黄色の油状物にした。粗物質を、ヘキサン中の３０％酢酸エチルにより溶出するシリカゲル上のフラッシュカラムクロマトグラフィによって精製して透明な油状物として所望のアルキル化生成物０.６４ｇ(５７％)を得た。¹ＨＮＭＲ(Ｃ₆Ｄ₆) δ0.57 (d, 3H), 0.89 (d, 3H), 1.30 (s, 3H), 1.65 (s, 3H), 1.8 (m, 2H), 2.0 (m, 2H), 2.1 (m,1H), 3.22 (m, 2H), 4.88 (dt, ビニル, 1H), 5.49 (d, 1H), 7.1 (m, 3H), 7.6 (m, 2H)。¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ−110.37 (q, 1 F, J = 21 Hz)。

実施例−ＨＨ−７)
実施例−ＨＨ−６(０.１３ｇ，０.３１mmol)のメタノール(２０ｍＬ)溶液にリンドラー触媒(１.０ｇ)を加えた。撹拌されたスラリーを６０℃に１時間加熱し、さらにリンドラー触媒(０.３０ｇ)を加えた。スラリーを６０℃でさらに１時間撹拌してから、室温に冷ました。セライトを通して触媒を濾過して除去し、濾液をストリッピングして淡黄色の油状物として所望の脱保護されたアミジン生成物０.５８ｇ(１００％)を得た。ＭＳ：ｍ／ｚ＝３７４.２ [Ｍ＋Ｈ]⁺ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ)δ 0.77 (d, 3H), 1.07 (d, 3H), 1.58 (s, 3H), 2.02 (s, 3H), 1.8-2.2 (m, 5H), 3.83 (d, 2H), 5.20 (dt, ビニル, 1 H), 5.69 (d, 1H), 7.4 (m, 3H), 7.7 m, 2H) ¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ-109.4(m, 1F, J=21Hz)

実施例−ＨＨ)
１.５ＮＨＣｌ(２５ｍＬ)中の実施例−ＨＨ−７の生成物(０.５８ｇ，１.５４mmol)の溶液をジエチルエーテル(２×２０ｍＬ)で洗浄し、１時間還流した。溶媒をストリッピングし、粗製アミノ酸エステルを６ＮＨＣｌ(１５ｍＬ)中に溶解し還流に加熱した。６時間後、溶媒を真空下で除去し、生成したフォームを、０〜４０％ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ(０.２５％酢酸)の３０分の勾配で溶出する逆相ＨＰＬＣによって精製した。生成物を含む画分を合わせて濃縮してフォームを得た。生成物を１ＮＨＣｌ中に溶解し、真空下で溶媒を除去し(２×)、所望の(２Ｓ，５Ｅ)−２−アミノ−２−メチル−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩生成物０.１５ｇ(２９％)を得た。Ｃ₁₀Ｈ₁₉ＦＮ₃Ｏ₂のＨＲＭＳ計算値：ｍ／ｚ＝２３２.１４６１ [Ｍ＋Ｈ]⁺ 実測値：２３２.１４８５ ¹ＨＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)δ1.43 (s, 3H), 2.10 (s, 3H), 1.8-2.1 (m, 4H), 3.98 (d, 2H) 5.29 (dt, ビニル, 1H) ¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ-109.97 (q, 1 F, J = 21 Hz)。

実施例ＩＩ

(２Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−２−メチル−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩

実施例−ＩＩ−１)
窒素下のメチルＮ−[(３,４−ジクロロフェニル)−メチレン]−アラニネート(７４８.５ｇ，２.８８mol)の１−メチル−２−ピロリジノン(７５００ｍＬ)溶液にＬｉＩ(３８５.５ｇ，２.８８mol)を加え、生成したスラリーを約２０分間撹拌して透明な溶液を得た。次いで、実施例−ＨＨ−５の固形物(７５０ｇ，２.４０mol)を加え、生成した溶液を氷浴中で〜０℃に冷やした。内部温度を５℃より下に維持しながら生のＢＴＰＰ(９００ｇ，２.８８mol)を２５分かけて滴加した。５℃でさらに１.５時間撹拌した後、ＨＰＬＣによって反応が完了したことがわかった。この時に、メチルｔ−ブチルエーテル(ＭＴＢＥ)７５００ｍＬ、続いて水／砕氷混合物９７５０ｍＬを加えた。この操作中に温度は２０℃まで上昇した。５〜１０分間激しく撹拌した後、層を分離し、水層をＭＴＢＥ６０００ｍＬで２回洗浄した。ＭＴＢＥ層を合わせて水７５００ｍＬで２回洗浄した。次いで、生成したＭＴＢＥ溶液を濃縮して〜５０００ｍＬにし、１.０ＮＨＣｌ(１１６２５ｍＬ)で処理し、室温で１時間激しく撹拌した。層を分離し、水層をＭＴＢＥ(７５００ｍｌ)で洗浄した。塩化ナトリウム約１ｋｇを水層に加え、生成した混合物を、すべての塩が溶解するまで撹拌した。この時点で、酢酸エチル７５００ｍＬを加え、生成した混合物を１０℃に冷やして、６.０Ｎ水酸化ナトリウム２０２５ｍＬをよく撹拌しながら加えた。得られたｐＨは約９でなければならない。層を分離し、水性層を塩化ナトリウムで飽和させて再び酢酸エチル７５００ｍＬで抽出した。合わせた酢酸エチル抽出物を乾燥(ＭｇＳＯ₄)して濃縮し、軽油にした。酢酸エチルは完全に除去されてないことに留意する必要がある。次いで、撹拌しながら、ヘキサン３０００ｍｌを加えてスラリーを生成し、１０℃に冷やした。粒状の固形物を濾過により集めてヘキサン１５００ｍＬで洗浄した。所望の純粋なアミノエステル約５６４ｇ(収率８２％)(ＨＰＬＣによって＞９５％純粋)を白色固形物(融点８２.９〜８３.０℃)として得た。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝２８８.２ [Ｍ＋Ｈ]⁺ キラルＨＰＬＣ(Chiralpak-AD順相カラム，１００％アセトニトリル，２１０ｎｍ，１ｍＬ／分)：４.７１分および５.３６分で２つの主要ピーク(１：１) ¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)：δ1.40 (s, 3H), 1.7-1.8 (m, 2H), 2.0 (br s, 2H), 2.2 (m, 2H), 2.29 (s, 3H), 3.73 (s, 3H), 4.34 (dd, 2H), 5.33 (dt, 1H)。

実施例−ＩＩ−２)
実施例−ＩＩ−１の生成物の個々の鏡像異性体の分離を分取規模でキラルＨＰＬＣクロマトグラフィ(ChiralPak-AD，順相カラム，１００％アセトニトリル)を用いて実施し、所望の純粋な(２Ｓ)−２−メチルアミノエステル生成物の標題生成物を得た。ChiralPak-AD，順相カラム，１００％アセトニトリル，２１０ｎｍ，１ｍＬ／分)：５.１４分(９９％)

実施例−ＩＩ−３)
０.９９３ＭＮａＯＨ(３０.０ｍＬ，２９.７９mmol)中実施例−ＩＩ−２の生成物(２.３０ｇ，８.０１mmol)のスラリーを室温で２時間撹拌した。生成した無色透明な溶液に１.０２３ＭＨＣｌ(２９.１０ｍＬ，２９.７６mmol)を加えた。生成した透明な溶液を、沈殿が形成し始めるまで濃縮した(約３０ｍＬ)。スラリーを加温して透明な溶液を得、これを室温で一夜放置した。沈殿を濾過により単離した。固形物を、冷水(２×１０ｍＬ)、冷メタノール(２×１０ｍＬ)およびＥｔ₂Ｏ(２×２０ｍＬ)で洗浄した。白色固形物を真空下、４０℃で４時間乾燥し、記載した所望のＮ−ヒドロキシ生成物１.０４ｇ(５３％)を得た。融点＝２４７.２℃ Ｃ₁₀Ｈ₁₈ＦＮ₃Ｏ₃の分析計算値：C, 48.57 ; H, 7.34 ; N, 16.99 ; Cl, 0.0. 実測値：C, 48.49 ; H, 7.37 ; N, 16.91 ; Cl, 0.0。Ｃ₁₀Ｈ₁₉ＦＮ₃Ｏ₃のＨＲＭＳ計算値：ｍ／ｚ＝２４８.１４１０ [Ｍ＋Ｈ]⁺ 実測値：２４８.１３９０ ¹ＨＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)δ 1.35 (s, 3H), 1.81 (s, 3H), 1.7-2.0 (m, 4H), 3.87 (d, 2H) 5.29 (dt, ビニル, 1H)。¹⁹ＦＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ−112.51 (q, 1 F, J = 21 Hz)。

実施例−ＩＩ−４)
メタノール中の実施例−ＩＩ−３の溶液にリンドラー触媒を加えた。撹拌スラリーを２時間還流してから室温に冷ました。セライトを通して濾過することにより触媒を除去し、濾液をストリッピングした。生成した固形物を水中に溶解し、１.０ＮＨＣｌから繰り返し濃縮して所望の(２Ｒ,５Ｅ)−２−アミノ−２−メチル−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩生成物を得た。

実施例−ＩＩ−５)
実施例−ＩＩ−２の生成物７３.５ｇ(０.３mol)の溶液をメタノール３００ｍＬ中に溶
解して、反応温度を２２℃〜２６℃の間に維持しながら、リンドラー触媒１３.７ｇおよびメタノール３１２ｍＬ中のギ酸７３.５ｇ(１.５３mol)の予め形成された混合物に滴加
した。さらに室温で〜１５時間撹拌した後、¹⁹ＦＮＭＲによって反応が完了したことがわかった。生成した反応混合物を、セライトを通して濾過し、セライトをメタノール１２５ｍＬで３回洗浄した。メタノール濾液を合わせて濃縮し、粘性油状物として所望のアミジン標題生成物１１５ｇを得た。ＭＳ：ｍ／ｚ＝２４６(Ｍ＋Ｈ)⁺ ¹ＨＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ)δ1.6(σ, 3H) 2.0-2.2, (μ, 4H) 2.3 (σ, 3H), 3.9(σ, 3H), 4.2(δ, 2H), 5.4(δτ, ビニル), 8.4(σ, 3H)。Ｆ¹⁹ ＮＭＲ(ＣＤ₃ＯＤ)δ−110.4 (θ, J= 21 Hz)-111.7 (θ, J=21 Hz)。

微量の鉛を除去するために、粗生成物をメタノール７５０ｍＬ中に溶解し、チオールベースの樹脂(Deloxan THP 11)１５０ｇを加えた。室温で３時間撹拌した後、樹脂を濾過しメタノール５００ｍＬで２回洗浄した。濾液を集めて濃縮し、粘性油状物として所望のアミジン標題生成物９９ｇを得た。

別法：
実施例−ＩＩ−２の生成物の合計５.０ｇ(０.０１７４mol，１.０当量)を１−ブタノール４０ｍＬおよび酢酸１０ｍＬ中の亜鉛粉末５.０ｇ(０.０７６５mol，４.３９当量)と混合した。５０℃で５時間撹拌した後、ＬＣ分析は反応が完了したことを示した。固形物は、容易に濾過された。濾液を７℃まで氷水中に冷やした後、激しく撹拌しながら６ＮＮａＯＨ(０.１８０mol)３０ｍＬを用いて一度に処理した。反応混合物を２０℃〜３３℃に冷やした後、透明なブタノール層を分離し、水層を１−ブタノール４０ｍＬで再び抽出した。ブタノール抽出物を合わせてブライン３０ｍＬ、続いて６ＮＨＣｌ約１０ｍＬで洗浄した。７０℃で濃縮した後、透明なガラスが生成し、これは所望のアミジン標題生成物として確認された。

実施例−ＩＩ)
６ＮＨＣｌ中の実施例−ＩＩ−５の生成物９９ｇの溶液を１時間還流し、この時点で、ＬＣ分析は反応が完了したことを示した。溶媒を真空下で除去してガラス状の油状物８９.２ｇを得、これをエタノール１４６６ｍＬおよび脱イオン水７.５ｍＬの混合物中に溶解した。曇り点に到達するまで、この撹拌溶液に周囲温度でＴＨＦを加えた(５.５リットル)。さらに脱イオン水３０ｍｌを加えて溶液を室温で一夜撹拌した。生成したスラリーを濾過し、ＴＨＦ２００ｍＬで洗浄して白色固形物６５ｇを得、所望の標題生成物として確認された。[α]²⁵＝+７.２(ｃ＝０.９，Ｈ₂Ｏ)融点＝１２６〜１３０℃ ＭＳ：ｍ／ｚ＝２３２(Ｍ＋Ｈ)⁺。Ｃ₁₀Ｈ₂₂Ｎ₃Ｆ1Ｏ₃Ｃｌ₂の分析計算値：C, 37.28 ; H, 6.88 ; N, 13.04 ; Cl, 22.01。実測値：C, 37.52, H, 6.84, N, 13.21, Cl, 21.81。¹ＨＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)δ1.4 (σ, 3H), 1.8-2.1 (m, 4H), 1.9 (σ, 3H), 4.0 (δ, 2H), 5.3 (δt, ビニル, 1H)。¹⁹F ＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)δ−109.6(θ, J=21 Hz)-112.1(θ, J-21 Hz)。

実施例ＪＪ

(２Ｒ,５Ｅ)−２−アミノ−２−メチル−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)
アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩

実施例−ＪＪ−１)
実施例−ＩＩ−１の生成物の個々の鏡像異性体の分離を、キラルＨＰＬＣクロマトグラフィを用いて分取規模で実施して所望の純粋な(２Ｒ)−２−メチルアミノエステル生成物を得た。

実施例−ＪＪ−２)
実施例−ＪＪ−１の生成物を水および酢酸中に溶解した。亜鉛粉末を加え、ＨＰＬＣ分析で出発物質が僅かしか残っていないことがわかるまで混合物を６０℃で加熱した。セライトを通して反応混合物からＺｎを濾過し、濾液を濃縮した。粗物質を、逆相ＨＰＬＣカラムクロマトグラフィによって精製した。生成物を含む画分を合わせて濃縮し、所望の(２Ｒ)−２−メチルアセトアミジン生成物を得た。

実施例−ＪＪ)
２.０ＮＨＣｌ中の実施例−ＪＪ−２の溶液を２時間還流させた。溶媒を真空下で除去した。生成した固形物を水中に溶解し、１.０ＮＨＣｌから繰り返し濃縮して所望の(２Ｒ,５Ｅ)−２−アミノ−２−メチル−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩生成物を得た。

実施例ＫＫ

(２Ｒ／Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−２−メチル−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩

実施例−ＫＫ−１)
氷浴中のメチルＮ−[(４−クロロフェニル)メチレン]−グリシネート(０.３３ｇ，１.
６mmol)、ＬｉＩ(０.２０ｇ，１.０mmol)および実施例−ＨＨ−５の生成物の試料(０.３０ｇ，０.９６mmol)の１−メチル−２−ピロリジノン(５ｍＬ)溶液に２−tert−ブチルイミノ−２−ジエチルアミノ−１,３−ジメチルペルヒドロ−１,３,２−ジアザホスホリン(０.４３３ｍＬ，１.５mmol)を加えた。溶液を室温で１.５時間撹拌した。反応混合物を酢酸エチル(３０ｍＬ)で希釈し、水(２×２０ｍＬ)で洗浄し、乾燥(ＭｇＳＯ₄)、濾過し、蒸発させて黄色の油として粗製の所望のラセミアルキル化イミンを得た。粗物質を酢酸エチル(１０ｍＬ)中に溶解し、１ＮＨＣｌ(１０ｍＬ)を加えた。混合物を室温で２時間撹拌し、有機層を分離した。水性層を固体ＮａＨＣＯ₃で中和し、酢酸エチル(２×３０ｍＬ)で抽出した。有機層を乾燥(ＭｇＳＯ₄)、濾過して蒸発させ、黄色の油状物として所望の標題ラセミアミノエステル生成物０.１３ｇを得た。この生成物をさらに精製することなく次の工程に用いた。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝２８８.２ [Ｍ＋Ｈ]⁺

実施例−ＫＫ−２)
実施例−ＫＫ−１(１.３６ｇ，４.９８mmol)のＣＨ₂Ｃｌ₂(１５ｍＬ)溶液に４−クロロベンズアルデヒド(０.７０ｇ，５.０mmol)およびＭｇＳＯ₄(〜５ｇ)を加えた。スラリーを室温で１８時間撹拌した。スラリーを濾過して濾液をストリッピングし、淡黄色油状物として所望の標題イミン生成物１.９８ｇ(１００％)を得た。この生成物をさらに精製することなく次の工程に用いた。¹ＨＮＭＲ(Ｃ₆Ｄ₆)δ1.34 (σ, 3H), 2.0 (βρ m, 4H),
3.32 (σ, 3H), 3.42 (m, 2H), 3.83 (t, 1H), 4.98 (δt, ビニル, 1H)。

実施例−ＫＫ−３)
実施例−ＫＫ−２の生成物(０.２５ｇ，０.６３mmol)のＣＨ₂Ｃｌ₂(２ｍＬ)溶液に、ヨウ化メチル(０.２００ｍＬ，３.２３mmol)およびＯ(９)−アリル−Ｎ−(９−アントラセニルメチル)−シンクロニジニウムブロミド(４０ｍｇ，０.０６６mmol)を加えた。溶液を−７８℃に冷やし、生のＢＴＰＰ(０.２８９ｍＬ，０.９５mmol)を加えた。生成した橙色溶液を−７８℃で２時間撹拌し、−５０℃にした。−５０℃で２時間後、溶液をＣＨ₂Ｃｌ₂(１０ｍＬ)で希釈し、水(１０ｍＬ)で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濾過し、蒸発させて黄色油として粗製の所望のラセミアルキル化イミンを得た。粗物質を酢酸エチル(１０ｍＬ)中に溶解し、１ＮＨＣｌ(１０ｍＬ)を加えた。混合物を室温で１時間撹拌し、有機層を分離した。水層を固体ＮａＨＣＯ₃で中和し、酢酸エチル(２×３０ｍＬ)で抽出した。有機層を乾燥(ＭｇＳＯ₄)、濾過し、蒸発させて黄色の油状物として所望のラセミ２−メチルアミノエステル生成物０.１６ｇを得た。生成物をさらに精製することなく次の工程に用いた。ＬＣＭＳ：ｍ／ｚ＝２８８.２[Ｍ＋Ｈ]⁺。

実施例−ＫＫ−４)
実施例−ＫＫ−３のラセミ生成物を水および酢酸中に溶解した。亜鉛粉末を加え、ＨＰＬＣ分析で出発物質がほとんど残っていないことがわかるまで混合物を６０℃で加熱した。セライトを通して反応混合物からＺｎ粉末を濾過し、濾液を濃縮した。粗物質を逆相ＨＰＬＣカラムクロマトグラフィによって精製した。生成物を含む画分を合わせて濃縮し、所望のアセトアミジン生成物を得た。

実施例−ＫＫ)
２.０ＮＨＣｌ中の実施例−ＫＫ−４のラセミ体の溶液を１時間還流した。溶媒を真空下で除去した。生成した固形物を水中に溶解し、１.０ＮＨＣｌから繰り返し濃縮して所望の標題(２Ｒ／Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−２−メチル−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩生成物を得た。

実施例ＬＬ

(２Ｓ,５Ｚ)−２−アミノ−２−メチル−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩

４−[(テトラヒドロピラニル)オキシ]ブチン
実施例ＬＬ−１)
４−ジヒドロ−２Ｈ−ピリジン(２９３.２ｇ，３.５mol)および濃ＨＣｌ(１.１ｍＬ)の混合物を５℃に冷やした。外部から冷やし続けながら、３０分かけて３−ブチン−１−オール(２３１.５ｇ，３.３mol)を加え、温度を５０℃に到達させた。反応物を混合しながら室温で２.５時間保持した後、ＭＴＢＥ(１.０Ｌ)で希釈した。生成した混合物を飽和炭酸水素ナトリウム(２×１５０ｍＬ)で洗浄した。有機相を硫酸ナトリウムで乾燥し、減圧下で濃縮して生成物５００ｇ(粗収率９８％)を得た；ＧＣ面積％９６％。

５−(テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ)−ペンタ−２−イン−１−オール
実施例ＩＩ−２)
窒素雰囲気下でＴＨＦ(１２５ｍＬ)中の実施例ＬＬ−１の４−[(テトラヒドロピラニル
)オキシ]ブチン生成物(５０.０ｇ，０.３３mol)の溶液にＴＨＦ(２４２ｍＬ，０.４８mol)中の２ＮＥｔＭｇＣｌ溶液を３０分かけて加えて温度を４８℃に上昇させた。混合物をさらに６６℃に加熱し、この温度で２時間保持した後、周囲温度に冷ました。パラホルムアルデヒド(１４.５ｇ，０.４８mol)を加え(少し発熱が観察された)、生成した混合物を４５℃に加熱した。４５〜５５℃の間で温度を１時間制御した後、混合物は透明になった。この時点で、混合物を６６℃まで加熱し２.５時間撹拌した。混合物を室温に冷まし、温度を４０℃より下に保持しながら飽和塩化アンモニウム(１２５ｍＬ)を３０分かけてゆっくりと加えた(強い発熱が観察された)。液体相をデカンテーションによって分離し、酢酸エチル(２５０ｍＬ)およびブライン(５０ｍＬ)を加えた。有機相を分離し、ブライン(２×５０ｍＬ)および水(１×５０ｍＬ)で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥、減圧下で濃縮して明るい黄色の油状物(粗収率８５％)５１ｇを得た；ＧＣ面積％＝８８％標題生成物，６％出発物質

５−(テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ)−ペンタ−２−エン−１−オール
実施例ＬＬ−３)
窒素雰囲気下で５００ｍＬ Parrビンに、実施例ＬＬ−２の５−(テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ)−ペンタ−２−イン−１−オールの生成物(４０.２ｇ，０.２２mol)、リンドラー触媒(２.０ｇ)、エタノール(１２０ｍＬ)、ヘキサン(１２０ｍＬ)および２,６−ルチジン(４５７ｍｇ)を投入した。反応混合物を窒素および水素ガスでそれぞれ５回パージした。Parrビンを水素で５psiに加圧し、理論的水素の９８％が消費されるまで振盪した。水素を容器から放出し、反応物を窒素で５回パージした。Solka Flocのパッドを通して混合物を濾過し、触媒をエタノール(２×５０ｍＬ)ですすいだ。濾液およびすすぎ液を合わせて減圧下で濃縮し、黄色の油状物として標題物質４０.３ｇ(収率９９％)を得た(ＧＣ面積％＝９６％)。

３−メチル−４−[ ５−(テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ)−ペンタ−２−エニル]−４Ｈ− [１,２,４]オキサジアゾール−５−オン
実施例ＬＬ−４)
トルエン(４２ｍＬ)中の実施例ＬＬ−３の５−(テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ)−ペンタ−２−エン−１−オール生成物(１１.８ｇ，０.０６３mol)の溶液にトリエチルアミン(６.４ｇ，０.０６３mol)を加えた。混合物を−５℃に冷やし、ポット温度を１０℃より下に保持するような速度でシリンジによりメタンスルホニルクロリド(７.３ｇ，０.６３mol)を加えた。混合物を室温に加温させて２時間撹拌した。混合物を吸引濾過し、トルエン(２×２０ｍＬ)でフィルターをすすいだ。濾液および洗浄液をＤＭＦ(１０ｍＬ)中の３−メチル−１,２,４−オキサジアゾリン−５−オン(８.６ｇ，０.０６３mol)のナトリウム塩の混合物に加えた。混合物を機械撹拌機で撹拌し、４５℃で５時間加熱した。水(４０ｍＬ)を加え、混合物を５分間撹拌してから層を分離した。トルエン層を水(３×２０ｍＬ)で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濃縮して橙色の粗生成物１６.５ｇ(９７.３％)を得た(ＧＣ面積％は、標題生成物７１％、トルエン１８％および不純物４％からなる)。

４−(５−ヒドロキシペンタ−２−エニル)−３−メチル−４Ｈ−[１,２,４]オキサジアゾール−５−オン
実施例ＬＬ−５)
メタノール(４８ｍＬ)中の実施例ＬＬ−４の３−メチル−４−[５−(テトラヒドロ−ピラン−２−イルオキシ)−ペンタ−２−エニル]−４Ｈ−[１,２,４]オキサジアゾール−５−オン生成物(１６ｇ，０.０６mol)の溶液にｐ−トルエンスルホン酸(０.３４ｇ，２.０mmol)を加えた。混合物を室温で４時間撹拌した。炭酸水素ナトリウム(０.２７ｇ，３.０mmol)を加え、混合物をロータリーエバポレーターで濃縮した。残留物を飽和ＮａＨＣＯ₃(２０ｍＬ)で希釈し、生成した混合物を酢酸エチル(２×６０ｍＬ)で抽出した。抽出物を合わせて水(２×２５ｍＬ)で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥、濃縮して粗製の橙色油状物の標題生成物８.４ｇ(ＧＣ面積％＝８０％)を得た。

メタンスルホン酸５−(３−メチル−５−オキソ−[１,２,４]オキサジアゾール−４−イル)−ペンタ−３−エニルエステル
実施例ＬＬ−６)
塩化メチレン(３３ｍＬ)中の実施例ＬＬ−５の４−(５−ヒドロキシ−ペンタ−２−エニル)−３−メチル−４Ｈ−[１,２,４]オキサジアゾール−５−オン生成物(８.２７ｇ，０.０４５mol)の溶液にトリエチルアミン(５.０ｇ，０.４９mol)を加えた。混合物を−５℃に冷やし、温度を８℃より下に保持するような速度でメタンスルホニルクロリド(５.５ｇ，０.０４８mol)を加えた。冷浴をはずし、室温まで加温させながら混合物を３時間撹拌した。水(１５ｍＬ)を加え、混合物を５分間撹拌し、次いで層を分離した。有機相を水(１０ｍＬ)で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、濃縮して明るい琥珀色の残留物を得た。残留物を酢酸エチル(８ｍＬ)中に溶解し、５℃で一夜保持した。沈殿した固形物を吸引濾過して最少体積の酢酸エチルでフィルター上をすすぎ、フィルターを空気乾燥して標題生成物６.８ｇ(収率５８％)を得た。¹ＨＮＭＲ(ＣＤＣｌ₃)δ5.76 (dtt, J=10.9, 7.5, 1.5 Hz, 1H), δ 5.59(dtt, J=10.9, 7.0, 1.5 Hz, 1H), δ 4.31 (t, J=6.3 Hz, 2H), δ 4.27 (dd, J=7.0, 1.5 Hz, 2H),δ 3.04 (σ, 3H), δ 2.67(θ, J=6.7 Hz, 2H),δ 2.28(σ, 3H) ¹³Ｃ(ＣＤＣｌ₃)δ 159.0, 156.3, 129.9, 125.1, 68.4, 38.9, 37.2, 27.5, 10.2。ＩＲ(ｃｍ^-1)1758, 1605, 1342,1320, 1170。Ｃ₉Ｈ₁₄Ｎ₂Ｏ₅Ｓの分析計算値：C, 41.21 ; H, 5.38 ; N, 10.68。実測値：C, 41.15 ; H, 5.41 ; N, 10.51。

４−(５−ヨード−ペンタ−２−エニル)−３−メチル−４Ｈ−[１,２,４]オキサジアゾール−５−オン
実施例ＬＬ−７)
アセトン(１６０ｍｌ)中の実施例ＬＬ−６のメタンスルホン酸５−(３−メチル−５−オキソ−[１,２,４ ]オキサジアゾール−４−イル)−ペンタ−３−エニルエステル生成物(２０.０ｇ，０.０７６mol)の溶液にヨウ化ナトリウム(１７.１５ｇ，０.１１４mol)を加えた。混合物を還流に加熱し、３時間撹拌した。外部からの加熱を停止し、混合物を室温で一夜保持した。固形物を濾過により除去して、フィルターをすすいだ。濾液および洗浄液を合わせて濃縮し、不均質の残留物を酢酸エチル(１２０ｍＬ)で抽出した。有機層を水(６０ｍＬ)、チオ硫酸ナトリウムの１５％水溶液(６０ｍＬ)および水(６０ｍＬ)で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥、減圧下で濃縮して標題の油状生成物２２.１ｇ(収率９８％)を得た。

２−[(３,４−ジクロロ−ベンジリデン)−アミノ]−プロピオン酸メチルエステル
実施例ＬＬ−８)
窒素雰囲気下で塩化メチレン(２.１Ｌ)中のＬ−アラニンメチルエステル塩酸塩(２００.０ｇ，１.４３mol)の機械的に撹拌されたスラリーに１２分かけてトリエチルアミン(１９９.７ｍＬ，１.４３mol)加えた(添加中に固形物は、部分的に溶解し、次いで再沈殿した)。１０分間後、３,４−ジクロロベンズアルデヒド(２２７.５ｇ，１.３０mol)および硫酸マグネシウム(１７３.０ｇ，１.４３mol)を加えた(温度は３０分かけて６℃上昇した)。２.５時間後、混合物を濾過した。濾液を、水(１×１Ｌ)およびブライン(１×５００ｍＬ)で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥、濾過して濃縮し、油状生成物３１３.３ｇ(収率９２.４％)を得た。¹ＨＮＭＲ(４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃)8.25 (s, 1H), 7.91 (d, 1H), 7.58 (dd, 1H), 7.49 (d, 1H), 4.17 (t,1H), 3.76 (s, 3H), 1.53 (d, 3H)。Ｃ₁₁Ｈ₁₁Ｃｌ₂ＮＯ₂の分析計算値：C, 50.79 ; H, 4.26 ; Cl, 27.26 ; N, 5.38。実測値：C, 50.37 ; H, 4.10 ; Cl, 26.87 ; N, 5.38。

Ｒａｃ−２−アミノ−２−メチル−７−(３−メチル−５−オキソ−[１,２,４]オキサジアゾール−４−イル)−ヘプタ−５−エン酸メチルエステル
実施例ＬＬ−９)
方法１
窒素雰囲気下で、ジメチルホルムアミド(１.４Ｌ)中の実施例ＬＬ−７の生成物(１１４.２ｇ，０.３９mol)および実施例ＬＬ−８の生成物(１５１.５ｇ，０.５８mol)の溶液を−８℃に冷やした。次いで、ヨウ化リチウム(７８.１ｇ，０.５８mol)を３等分して１９分間かけて加えた。混合物を−７℃で２０分間撹拌してから(tert−ブチルイミノ)−トリス(ピロリジノ)ホスホラン(１９４.０ｍＬ，０.６２)を３６分かけて加えた(最大温度＝−２.６℃)。１０分後、冷浴をはずし、溶液を周囲温度で１時間撹拌した。次いで、混合物を冷水(１.４Ｌ)中へ注ぎ、酢酸エチル(２×１.０Ｌ)で抽出した。合わせた有機層を水(２×４００ｍＬ)およびブラインで洗浄した。酢酸エチル層を１ＮＨＣｌ(７８０ｍＬ)で処理して１時間撹拌した。水性層を分離し、酢酸エチル(２×４００ｍＬ)で抽出してから炭酸水素ナトリウム(１１０ｇ)で中和した。混合物を酢酸エチル(１×５００ｍＬ)で抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥、濾過して濃縮し、次いでメチルｔ−ブチルエーテルで処理して結晶質生成物を得た：第１収量１４.４ｇ；第２収量６.６ｇ(ＧＣ純度＝それぞれ９６.２％および９１.９％)。水相を塩化ナトリウムで飽和させて酢酸エチル(４×５００ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥、濾過して濃縮し、次いでメチルｔ−ブチルエーテルで処理して結晶質生成物を得た：第１収量３３.４ｇ；第２収量１０.８ｇ(ＧＣ純度＝それぞれ８９.６％および８８.８％），合計の粗収率６５.２ｇ，６２.４％

方法２
窒素雰囲気下でジメチルホルムアミド(２０７ｍＬ)中の実施例ＬＬ−７の生成物(２０.７ｇ，０.０７０mol)および実施例ＬＬ−８の生成物(２２.９ｇ，０.０８８mol)の溶液に炭酸セシウム(２９.８ｇ，０.０９２)を加えた。混合物を室温で１６時間時間撹拌し、次いで水(３００ｍＬ)で希釈し、酢酸エチル(２×２００ｍＬ)で抽出した。合わせた酢酸エチル層を、水(３×１００ｍＬ)およびブラインで洗浄してから１ＮＨＣｌ(１８４ｍＬ)で処理した。１時間後、層を分離し、水層を酢酸エチル(３×１００ｍＬ)で抽出してから炭酸水素ナトリウム(１５.５ｇ)で中和した。混合物を酢酸エチル(１×１５０ｍＬ)で抽出した。水層を塩化ナトリウムで飽和させて酢酸エチル(３×１００ｍＬ)で抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥、濾過して濃縮し、黄色固形物１１.９ｇ(６２.９％)を得た；ＧＣ純度＝９６.６％。粗生成物を、暖かいメチルｔ−ブチルエーテルまたは酢酸エチルから再結晶した。¹ＨＮＭＲ(４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃)δ5.68 (m, 1H), 5.36 (m, 1H), 4.23 (d, 2H), 3.73 (s, 3H), 2.43 (σ, 3H), 2.18 (m, 2H), 1.81 (m, 1H), 1.69 (s, br, 2H), 1.66 (m, 1H), (1.36, 3H) ¹³ＣＮＭＲ(４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃)δ177.60, 159.01, 156.10, 135.12, 121.82, 57.48, 52.29, 40.12, 39.00, 26.62, 22.56, 10.41

Ｒａｃ−２−アミノ−２−メチル−７−(３−メチル−５−オキソ−[１,２,４]オキサジアゾール−４−イル)−ヘプタ−５−エン酸
実施例ＬＬ−１０)
実施例ＬＬ−９の生成物(０.２６９ｇ，１mmol)を２ＮＨＣｌ５ｍＬ中に溶解し、アルゴン下で還流に加熱した。６時間還流し、７２時間室温で撹拌した後、アリコートを除去して¹ＨＮＭＲによって検査した。所望の生成物(ＬＣ−ＭＳによって確認)と共に約６％の未反応の出発エステルが残った。水性部分を真空下で除去すると濃厚な琥珀色の油状物
０.３８ｇが残った。逆相クロマトグラフィ続いて凍結乾燥により精製した後、白色の非潮解性固形物として標題化合物９０.２％、０.２３ｇを得た。Ｃ₁₁Ｈ₁₇Ｎ₃Ｏ₄.０.７７Ｈ₂Ｏの分析計算値：C, 49.09 ; H, 6.94 ; N, 15.61.実測値：C, 48.71 ; H, 6.94 ; N, 15.98 質量分析：Ｍ＋1＝２５６

(２Ｓ,５Ｚ)−２−アミノ−２−メチル−７−(３−メチル−５−オキソ−[１,２,４]オキサジアゾール−４−イル)−ヘプタ−５−エン酸メチルエステル
実施例ＬＬ−１１)
定常状態再循環オプション付きNovaprep 200機器を用いる分取キラルクロマトグラフィによって標題化合物(８２７.３ｇ)を、そのＲ鏡像異性体から分離した。物質を、４０ｍｇ／ｍｌの濃度で無水エタノール中に溶解し、５０×５００ｍｍのプレパックChiral Technologiesステンレス鋼カラムに装填した。吸着剤は、２０μChiralPak ADであった。
移動相はエタノール／トリエチルアミン１００／０.１であり、流速は１２５ｍｌ／分であった。粗溶液(２５ｍＬ)を、１２分毎にカラム上に装填した。定常状態の再循環技術を用いた。溶媒は、回転蒸発機を用いて除去した。最終生成物を金色の油状物として単離し、これを放置すると凝固した；３９９.０ｇ(回収率９６.４％)。¹Ｈ(４００ＭＨｚ，ＣＤ₃ＯＤ)δ5.68 (dtt, 1H, J_{オレフィン系}=107 Hz), 5.43 (dtt, 1H, J_{オレフィン系}=10.7 Hz), 4.82 (s, br, 2H), 4.28 (d, 2H, J=5.5Hz), 3.73 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.26 (m, 1H), 2.14 (m, 1H), 1.82 (ddd, 1H, J=13.6, 11.3, 5.4 Hz), 1.67 (ddd, 1H, J=13.6, 11.2, 5.5 Hz), 1.34 (s, 3H) ¹³ＣＮＭＲ(４００ＭＨｚ，ＣＤ₃ＯＤ)δ178.49, 161.13, 158.70, 135.92, 123.47, 58.55, 52.77, 41.38, 39.96, 26.23, 23.47, 10.23 Ｃ₁₂Ｈ₁₉Ｎ₃Ｏ₄の分析計算値：C, 53.52 ; H, 7.11 ; N, 15.60。実測値：C 52.35 ; H, 7.20 ; N, 15.60。

(２Ｓ,５Ｚ)−７−アセトイミドイルアミノ−２−アミノ−２−メチル−ヘプタ−５−エン酸メチルエステル，二塩酸塩水和物
実施例ＬＬ−１２)
メタノール(２.４Ｌ)中の実施例ＬＬ−１１の生成物(１１４.５ｇ，０.４２５mol)の溶液に周囲温度で固体ジベンゾイル−Ｌ−酒石酸(１５２.５ｇ，０.４２５mol)および８８％ギ酸(１４７ｍＬ，３.４２８mol)加えた。メタノール(２００ｍＬ)中リンドラー触媒、酢酸鉛で効力を減じた炭酸カルシウム上の５重量％パラジウム(３７.９ｇ)のスラリーを窒素下で製造した。次いで、出発物質の溶液を周囲温度で、明るい灰色の触媒スラリー、続いてメタノールリンス(２００ｍＬ)を加えた。不均質の反応混合物を、４５℃で１¹/₂時間加熱した。約４０℃で安定した気体発生の開始が観察され、これは、反応が進行中であることを示す。混合物を氷／水浴中で冷やしてから、Supercell HyFloのプラグを通して濾過した。黄色溶液を真空下で濃縮して粘性油状物を得、これを溶解し、水性２ＮＨＣｌ(２Ｌ)と酢酸エチル(０.８Ｌ)との間で分配した。層を分離し、水層を酢酸エチル(０.８Ｌ)で一回洗浄した。溶媒および揮発性物質を真空下、高められた温度(＝７０℃で除去した。中間生成物を、さらに精製または特性評価することなく次の工程に用いた。ＬＣ−ＭＳ [Ｍ＋Ｈ]⁺＝２２８

実施例ＬＬ)
実施例ＬＬ−１２の粗生成物(１７０ｇ)を水性２ＮＨＣｌ(１Ｌ)中に溶解した。生成した橙色溶液を一夜還流させた後、周囲温度に冷まして戻した。反応混合物の体積を約１／３に濃縮し、酸性溶液を固相抽出カートリッジ(Ｃ18シリカ２５ｇ)に通過させて色および別の不純物を除去した。溶媒を真空下(＝７０℃)で除去し、黄色がかったガムとして粗生成物２０８ｇを得た。粗ガム(３１.３ｇ)を水(２５０ｍＬ)中に取り、物質を陽イオン交換樹脂Dowex 50WX4-400(約６００ｇ)を充填され前処理されたイオン交換カラム上に装填した。まず最初に樹脂を水(１Ｌ)、次いで水性希ＨＣｌ(１０／９０ｖ／ｖ濃ＨＣｌ／水１Ｌ)で洗浄した。より高いイオン濃度の水性ＨＣｌ(２０／９０ｖ／ｖ〜２５／７５ｖ／ｖ濃ＨＣｌ／水１.５Ｌ)を用いて生成物を樹脂で溶出した。水性溶媒を真空下(＝７０℃)で除去し、粘着性の残留物を４体積％の水性トリフルオロ酢酸(１００ｍＬ)中に取った。水性溶媒を真空下(＝７０℃)で除去し、手順をもう一度繰り返した。次いで、残留物を高真空下で乾燥し、トリフルオロ酢酸塩としてガム３２.２ｇを得た。粗製(２Ｓ,５Ｚ)−７−アセトイミドイルアミノ−２−アミノ−２−メチル−ヘプタ−５−エン酸，ジトリフルオロ酢酸塩水和物(３２.２ｇ)を逆相分取クロマトグラフィによって精製した。粗物質を０.１％水性ＴＦＡ(５０ｍｌ)中に溶解し、吸着剤を充填された２インチＩＤ×１メートルステンレス鋼カラム(ＢＨＫ極性Ｗ／Ｓ，５０Ｄ，１.１６ｋｇ)を装填した。０.１％水性ＴＦＡ〜２５／７５／０.１アセトニトリル／水／ＴＦＡの段階的勾配を用いて１２０ｍＬ／分の流速で生成物を溶出した。装填比率は、シリカ対試料３６：１(ｗ／ｗ)であった。溶媒を真空下で除去し、物質を水性希ＨＣｌで繰り返しすすぐことによってＨＣｌ塩に転化し、溶媒を真空下で除去した。高真空下で乾燥して黄色がかったガムとして標題の二塩酸塩水和物２７.４ｇを得た。ＬＣ−ＭＳ[Ｍ＋Ｈ]⁺＝２１４.１６Ｄａ ¹ＨＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ，δ：1.48 (s, 3H), 1.8-1.9 (AB, 2H), 2.10 (s, 3H), 2.01/2.12 (AB, 2H), 3.78 (d, 2H), 回転異性体 3.87 (d, 2H), 5.6/5.5 (dt, 2H, 11 Hz) ¹³ＣＮＭＲ(Ｄ₂Ｏ)δ：18.7, 21.5, 21.6, 36.4, 39.1, 59.8, 122.6, 134.3, 164.5, 173.7 Ｃ₁₀Ｈ₁₉Ｎ₃Ｏ₂・２.２ＨＣｌ・２Ｈ₂Ｏの元素分析計算値：C, 36.21 ; H, 8.33 ; N, 12.67 ; Cl 23.51。実測値：C, 36.03 ; H, 7.72 ; N, 12.67 ; Cl, 23.60。

実施例ＭＭ

(２Ｒ,５Ｚ)−２−アミノ−２−メチル−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩
実施例ＬＬ−１１に記載された分離の際に単離されたＲ−鏡像異性体(１.１３ｇ，４.２mmol)を２５％水性酢酸１１ｍＬ中に溶解し、６０℃に加熱した。次いで、亜鉛粉末(１.１０ｇ)を４等分して３０分間隔で加えた。合計３時間加熱した後、アリコートを採取してＬＣ−ＭＳによって検査し、それは、所望の生成物とともに未反応出発物質が微量しか残っていないことを示した。混合物を室温に冷まして濾過し、真空下でストリッピングするとスラリー状の白色固形物２.３１ｇが残った。メチルエステルを熱希ＨＣｌで加水分解して標題化合物を得た。逆相クロマトグラフィ、続いて凍結乾燥により精製した後、ガラス状固形物として標題化合物０.３１ｇを得た。Ｃ₁₀Ｈ₁₉Ｎ₃Ｏ₂.１.２２ＨＣｌ. １.１５Ｈ₂Ｏの分析計算値：C, 46.13 ; H, 8.15 ; N, 15.09 ; Cl, 15.53。実測値：C, 46.38 ; H, 8.51 ; N, 15.13 ; Cl, 15.80 質量分析：Ｍ＋1＝２１４

実施例ＮＮ

２Ｓ−アミノ−６−[(１−イミノエチル)アミノ]−Ｎ−(１Ｈ−テトラゾール−５−イル)ヘキサンアミド，水和物，二塩酸塩

ＮＮ−１
周囲温度でジメチルホルムアミド(ＤＭＦ)２０ｍＬ中のＢｏｃ−Ｌ−Ｌｙｓ(Ｃｂｚ)ＯＨ(５ｇ，１３.１８mmol)、５−アミノテトラゾール一水和物(１.３６ｇ，１３.１８mmol)およびＮ,Ｎ−ジイソプロピルエチルアミン(ＤＩＰＥＡ)(５.１ｇ，６.９ｍＬ，３９.５４mmol)の撹拌溶液に、ベンゾトリアゾール−１−イル−オキシ−トリス−(ジメチルアミノ)ホスホニウムヘキサフルオロホスフェート(ＢＯＰ)(６.４ｇ，１４.４９mmol)を加えた。１時間撹拌した後、反応混合物を真空下で濃縮した。残留物を酢酸エチル(ＥｔＯＡｃ)６０ｍＬおよび水５０ｍＬとの間で分配した。層を分離した。有機層を１ＭＫＨＳＯ₄溶液５０ｍＬ、そして水５０ｍＬで２回洗浄した。生成物が沈殿し始め、懸濁液を真空下で濃縮して粗化合物９ｇを得た。乾燥後、生成物を塩化メチレン中で沸騰させてから濾過することによって精製し、１Ａを３.７ｇ(６２.７％)得た。化合物を¹ＨＮＭＲによって特性評価した。

ＮＮ−２(２ｇ，４.５mmol)を触媒水素化条件下で５０％ＥｔＯＨ／ＡｃＯＨ溶液中５psiでＰｄブラックを用いて１２時間還元してＮＮ−２を１.５５ｇ(１００％)得た。化合物を¹ＨＮＭＲによって特性評価した。

ＮＮ−３
ＤＭＦ２５ｍＬ中のＮＮ−２(１.５５ｇ，４.１５mmol)およびアセトイミド酸メチル塩酸塩(０.９１ｇ，８.３１mmol)の撹拌溶液にトリエチルアミン(ＴＥＡ)(１.２６ｇ，１.７４ｍＬ，１２.４５mmol)を加えた。周囲温度で１６時間撹拌した後、反応混合物をトリエチルアミン塩酸塩から濾過し、濾液を真空下で濃縮した。残留物を５０％ＡｃＯＨに溶解し、凍結乾燥した。粗生成物(２ｇ)を、Ｃ−１８カラム上の逆相クロマトグラフィを用いて精製し、１Ｃを０.９ｇ(５２.３％)得た。生成物を¹ＨＮＭＲによって特性評価した。ＮＮ−４(０.９ｇ，２.１７mmol)を酢酸３０ｍＬ中に溶解し、４ＮＨＣｌ／ジオキサン３ｍＬを加えた。次いで、反応物を周囲温度で２０分撹拌してからエチルエーテル１５０ｍＬを加えた。２時間後、沈殿を濾過し、エチルエーテルで洗浄し、乾燥して１を０.７８ｇ(９６％)得た。Ｃ₉Ｈ₁₈Ｎ₈Ｏ.２ＨＣｌ.１.２５Ｈ₂Ｏの分析計算値：C, 30.91 ; H, 6.48 ; N, 32.04 ; Cl, 20.27。実測値：C, 31.64 ; H, 6.43 ; N, 32.19 ; Cl, 20.19。ＤＳＣ融点１４４.９℃

実施例ＮＮは、２Ｓ−アミノ−６−[(１−イミノエチル)アミノ]ヘキサンアミド(ＮＩＬアミド)またはＮＩＬジメチルアミドよりもより強いｉ−ＮＯＳ阻害剤であるか、また実施例１はより選択的である。実施例ＮＮは、結晶性の良好な生成物であり、その中間体もすべて同様である。これに対して、ＮＩＬはガラスであり、このため取り扱いが困難となる。

ｃ. 生物学データ
本発明の化合物の一酸化窒素シンターゼ阻害活性を実証するほかに、有用な薬理学的性質を実証するために以下のアッセイのいくつかまたは全てを用いた。

一酸化窒素シンターゼについてのシトルリンアッセイ
一酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ）活性は、Ｌ−[２,３−³Ｈ]−アルギニンのＬ−[２,３−³Ｈ]−シトルリンへの転化をモニターすることによって測定することができる(Bredt and Snyder, Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A., 87,682-685, 1990 および Moore 等, J. Med. Chem., 39, 669-672,1996)。ヒト誘導型ＮＯＳ（ｈｉＮＯＳ）、ヒト内皮構成型ＮＯＳ（ｈｅｃＮＯＳ）およびヒト神経構成型ＮＯＳ（ｈｎｃＮＯＳ）は、それぞれ人体組織から抽出したＲＮＡからクローニングした。ヒト誘導型ＮＯＳ（ｈｉＮＯＳ）のｃＤＮＡは、潰瘍性結腸炎の患者の結腸試料から抽出したＲＮＡにより作成したλｃＤＮＡライブラリから単離した。ヒト内皮構成型ＮＯＳ（ｈｅｃＮＯＳ）のｃＤＮＡは、ヒト臍帯静脈内皮細胞（ＨＵＶＥＣ）から抽出したＲＮＡにより作成したλｃＤＮＡライブラリから単離し、そしてヒト神経構成型ＮＯＳ（ｈｎｃＮＯＳ）のｃＤＮＡは、遺体から得たヒト小脳から抽出したＲＮＡにより作成したλｃＤＮＡライブラリから単離した。組換え型酵素は、バキュロウイルスベクターを用いてＳｆ９昆虫細胞中で発現させた(Rodi 等, The Biology of Nitric Oxide, Pt. 4: Enzymology, Biochemistry and Immunology ; Moncada, S., Feelisch, M., Busse, R., Higgs, E., Eds.; Portland Press Ltd.: London, 1995; 第447-450頁)。酵素活性を可溶性の細胞抽出物から単離し、ＤＥＡＥ−セファロースクロマトグラフィによって部分的に精製した。ＮＯＳ活性を測定するため、試験化合物の存在下または非存在下で酵素１０μＬを５０ｍＭトリス４０μＬ（ｐＨ７.６）に加え、５０ｍＭトリス（ｐＨ７.６）、２.０ｍｇ／ｍｌウシ血清アルブミン、２.０ｍＭＤＴＴ、４.０ｍＭＣａＣｌ₂、２０μＭＦＡＤ、１００μＭテトラヒドロビオプテリン、０.４ｍＭＮＡＤＰＨおよび０.９μＣｉのＬ−[２,３−³Ｈ]−アルギニン入りの６０μＭＬ−アルギニンを含んでなる反応混合物５０μＬを添加することによって反応を開始した。アッセイにおけるＬ−アルギニンの最終濃度は、３０μＭであった。ｈｅｃＮＯＳまたはｈｎｃＮＯＳについて、カルモジュリンは、４０〜１００ｎＭの最終濃度で含まれた。３７℃で１５分間インキュベーションした後、１０ｍＭＥＧＴＡ、１００ｍＭＨＥＰＥＳ、ｐＨ５.５および１ｍＭＬ−シトルリンを含んでなる停止緩衝液中のDowex 50W X-8陽イオン交換樹脂（樹脂１部，緩衝液３部）の懸濁液４００μＬを添加して反応を終了させた。混合した後、樹脂を沈降させ、液体シンチレーションカウンタで上澄液のアリコートをカウントすることによってＬ−[２,３−³Ｈ]−シトルリン形成を測定した。結果は、ｈｉＮＯＳ、ｈｅｃＮＯＳおよびｈｎｃＮＯＳについての化合物のＩＣ₅₀値として表Ｉに報告した。

生の細胞の亜硝酸アッセイ
生の２６４.７細胞を９６穴組織培養プレート上でＬＰＳの存在下で一夜（１７時間）成長させて密生するまで培養してＮＯＳを誘発させた。３〜６穴の列を非処理のままにしておき、非特異的な背景を減算するための対照として用いた。培地を各穴から除去して、細胞を２ｍｇ／ｍｌグルコース入りのKreb- Ringers-Hepes（２５ｍＭ，ｐＨ７.４）で二回洗浄した。次いで、細胞を氷上に置き、Ｌ−アルギニン（３０μＭ）＋／−阻害剤を含んでなる緩衝液５０μＬを用いて１時間インキューベートした。プレートを水浴中３７℃に１時間加温することによってアッセイを開始した。細胞内ｉＮＯＳによる亜硝酸の産生は、時間と共に線形であると考えられる。細胞のアッセイを終了するため、細胞のプレートを氷上に置き、亜硝酸を含んでなる緩衝液を除去し、以前に公示された亜硝酸用の蛍光測定法を用いて亜硝酸について分析した(T. P. Misko 等, Analytical Biochp strv, 214, 11-16 (1993))。

ヒト軟骨組織片アッセイ
骨片を、ダルベッコのリン酸緩衝生理食塩水(GibcoBRL)で２回、そしてダルベッコ改変イーグル培地(GibcoBRL)で１回すすぎ、そしてフェノールレッド不含最小必須培地（ＭＥＭ）入りのペトリ皿(GibcoBRL)に置いた。軟骨を重量約１５〜４５ｍｇの少組織片に切断し、穴当たり１または２つの組織片を、穴当たり培地２００〜５００μＬの入った９６または４８穴培養プレート中に置いた。培地は、Ｌ−アルギニン不含、Ｌ−グルタミン不含およびフェノールレッド不含で製造したEarle's塩(GibcoBRL）入りカスタム改変最小必須培地（イーグル）またはＬ−アルギニン不含、インシュリン不含、アスコルビン酸不含、Ｌ−グルタミン不含およびフェノールレッド不含で製造したカスタム改変無血清Neuman and Tytell (GibcoBRL)培地のいずれかであった。使用前に、両方に１００μＭＬ−アルギニン(Sigma)、２ｍＭＬ−グルタミン、１ＸＨＬ−１サプリメント(BioWhittaker)、５０ｍｇ／ｍｌアスコルビン酸(Sigma)および一酸化窒素シンターゼを誘発する組換え型ヒトＩＬ−１□(RD Systems)１５０ｐｇ／ｍｌを補充した。次いで、化合物をアリコート１０μＬ中に加え、組織片を、５％ＣＯ₂を用いて３７℃で１８〜２４時間インキューベートした。次いで前日の上澄液を捨て、組換え型ヒトＩＬ−１βおよび化合物を含む新たな培地で置き換え、そしてさらに２０〜２４時間インキューベートした。この上澄液を蛍光定量的アッセイで亜硝酸について分析した(Misko 等, Anal. Biochem., 214,11-16, 1993)。全ての試料において四通り実施した。非刺激の対照を、組換え型ヒトＩＬ−１βの存在しない培地中で培養した。ＩＣ₅₀値（表Ｉ）は、阻害剤の６つの異なる濃度で亜硝酸産生のパーセント阻害をプロットすることより決定した。

表Ｉは、本発明のいくつかの化合物について、生物活性の例を示す。

in vivoアッセイ
一酸化窒素シンターゼ阻害剤の経口投与を用いてまたはなしで、エンドトキシン（ＬＰＳ）１〜１２.５ｍｇ／ｋｇの腹腔内投与によりラットを処理した。処置５時間後に、血漿の亜硝酸／硝酸レベルを測定した。結果を用いて、一酸化窒素シンターゼ阻害剤を投与することで、エンドトキシンにより誘発された一酸化窒素産生の信頼できる指標である血漿の亜硝酸／硝酸レベルの上昇が減少したことを示す。表IIに示したように、実施例Ａ（（２Ｓ,５Ｅ）−２−アミノ−６−フルオロ−７−[（１−イミノエチル）アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩）は、観察されたＥＤ₅₀値が＜０.１ｍｇ／ｋｇで、血漿亜硝酸／硝酸レベルにおけるＬＰＳに誘発された上昇を阻害し、インビボで誘導型一酸化窒素シンターゼ活性を阻害する能力が実証された。

時間依存性阻害についてのアッセイ
Ｌ−アルギニンなしのシトルリン酵素アッセイ成分の存在下、３７℃で酵素を用いて０〜６０分の時間範囲で化合物をプレインキュベーションすることによって化合物をヒトＮＯＳアイソフォームの時間依存性阻害について評価した。０、１０、２１および６０分でアリコート（１０μＬ)を取り出し、Ｌ−[２,３−³Ｈ]−アルギニンを含むシトルリンアッセイ酵素反応混合物に直ちに加え、そして最終体積１００μＬ中で最終的なＬ−アルギニン濃度は３０μＭであった。反応を３７℃で１５分間進行させて停止緩衝液の添加によって終了し、シトルリンＮＯＳアッセイで記載したDowex 50W X−8陽イオン交換イオン交換樹脂でクロマトグラフィにかけた。阻害剤によるＮＯＳ活性の％阻害は、阻害剤の非存在下で同じ時間プレインキューベートした対照酵素と比較した活性におけるパーセント阻害とした。表IIIに示したデータは、阻害剤を酵素と共に２１分および６０分プレインキュベーションした後の％阻害である。

気道上皮細胞を用いたin vitro実験
気管支擦過法における免疫細胞化学：
健康な喘息でない被験者から気管支擦過法を経て得た上皮細胞をShandon Cytospin ３遠心分離機を用いて調製した。スライドを空気乾燥し、氷冷アセトン中で１０分間固定した。０.０２％（ｗ／ｖ）アジ化ナトリウムを含むＰＢＳ中１％（ｖ／ｖ）Ｈ₂Ｏ₂にスライドを１時間浸漬することによって内因性過酸化物活性をクエンチした。続いて、スライドをＰＢＳ中で５分間に３回洗浄した。非特異的結合を避けるためスライドを５％（ｖ／ｖ）正常なブタ血清で２０分間インキューベートした。次いで、抗ｉＮＯＳ抗体（ウサギポリクローナル、アフィニティ精製した抗ヒトｉＮＯＳＭｏＡＢ７２０; Pharmacia Corporation, St. Louis, MO）または免疫前のウサギ血清を１:５０の希釈度で、室温で１時間、スライドに適用した。次いで、スライドを洗浄し、ビオチニル化したブタの抗ウサギＩｇＧ（１：２００）を用いて室温で３０分間インキューベートして洗浄した。次いで、スライドをアビジン−ウマラディッシュペルオキシダーゼ（１：５００）中でさらに３０分間インキューベートした。スライドを再び洗浄し、ジアミノベンジジンを用いて抗原を視覚化した。ヘマトキシリンを用いてスライドを１０秒間対比染色し、上昇するアルコール中で脱水し、キシレンを用いて清浄化し、そしてＤＰＸを用いて固定した。次いで、細胞を光学顕微鏡下で観察した。

ヒト初代気道上皮細胞培養：
ヒト初代気道上皮細胞を、以前に記載された（Donnelly, L. E. and Barnes, P. J. Am
J RespirCell Mol. Biol 24: 295-303 (2000) 参照）通り培養し、そしてＮＯの安定な酸化生成物である細胞培地中の亜硝酸の量を、蛍光定量スペクトル法（Misko 等, Anal. Biochem. 4: 11-16 (1993)）を改良して用いて測定した。

培養上皮細胞からのｉＮＯＳのウェスタンブロッティング：
サイトカイン混合物のみ、または種々の濃度のＬ−ＮＩＬと共にインキュベーションした後、上皮細胞を、０.２５ｍＭエチレンジアミノ四酢酸、０.５ｍＭフェニルメチルスルホニルフルオリド、５μｇ／ｍｌアンチパイン、５μｇ／ｍｌロイペプチンおよび５μｇ／ｍｌベンズアミニジンを含む５０ｍＭトリス／ＨＣｌ（ｐＨ７.４）中に溶解した。Bio
Radタンパク質アッセイキットを用いて製造者の使用法に従ってタンパク質濃度を測定した。細胞タンパク質を、ドデシル硫酸ナトリウムポリアクリルアミドゲル電気泳動試料緩衝液（１０％ｖ／ｖグリセロール、１％ｗ／ｖＳＤＳ、１％ｗ／ｖ−メルカプトエタノール、および０.０１％ｗ／ｖブロムフェノールブルーを含む０.０６２５ｍＭトリス／ＨＣｌ，ｐＨ６.８）中で可溶化した。タンパク質（レーン当たり１５μｇ）を、３〜８％（ｗ／ｖ）トリス−アセテートＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル中での電気泳動によって分割し、そしてHybond-Enhanced Chemiluminescence (ECL)ニトロ−セルロース膜へ移した。タンパク質の等しい装填量は、５％（ｖ／ｖ）酢酸中の０.１％（ｗ／ｖ）Ponceau Sでブロットを染色することによって決定した。次いで、ニトロ−セルロースを、３％（ｗ／ｖ）正常ヤギ血清、１％（ｗ／ｖ）ウシ血清アルブミンおよび０.０５％（ｖ／ｖ）Tween-20を含む０.５Ｍトリス−ＨＣｌ（ｐＨ７.４）中、４℃で一夜ブロックした。ブロットを０.０５％（ｖ／ｖ）Tween-20を含むＰＢＳ中で洗浄し、抗ヒトｉＮＯＳ一次抗体（１：１０００）の存在下で１時間インキューベートした。ブロットをよく洗浄してから、抗ウサギＩｇＧ結合ワサビペルオキシダーゼ（１：４０００）を用いて１時間インキューベートした。ブロットを再びよく洗浄し、ＥＣＬ試薬を用いて帯域を視覚化した。

ヒト初代気道上皮細胞におけるｉＮＯＳの活性および発現におけるＬ−ＮＩＬの効果：
採取した正常な個体から誘導された細胞は、ｉＮＯＳを発現することがわかった。タンパク質を、基底細胞中の細胞質の全体にわたって均一に分散させたが、明らかに円柱形の繊毛性細胞の繊毛の下に位置していた。気道上皮細胞を５０ｎｇ／ｍｌのＩＬ−１β、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γ（サイトミックス）で２４時間処理すると、ｉＮＯＳタンパク質が誘発され、細胞培地中での亜硝酸の蓄積が、サイトミックスの非存在下では２.２０±２μＭ、サイトミックスの存在下では３.５０±４μＭ増加した。

ヒト初代気道上皮細胞におけるｉＮＯＳの活性および発現におけるＬ−ＮＩＬの効果を図１および２に示した。培地を収穫し、亜硝酸含量について測定した（図１）。３〜８％トリス−アセテートポリアクリルアミドゲル上で細胞タンパク質を分解し、ｉＮＯＳタンパク質についてイムノブロットした（図２）。

図１は、細胞培地にＬ−ＮＩＬを添加することによって培地中の亜硝酸の増加が用量に依存して阻害されたことを示している（ＩＣ₅₀〜５.７μＭ）。図２は、亜硝酸産生におけるこの減少が、ｉＮＯＳタンパク質発現の阻害に介在しないことを示しており、それは、イムノブロッティングにより検出された通り、Ｌ−ＮＩＬの包含がｉＮＯＳ発現に影響しないからである。むしろ、予想通り、それは酵素活性の阻害から生じると考えられる。

臨床研究
一つの中心となる研究が、ロンドン（ＵＫ）のNational Heart and Lung Institute (NHLI) Clinical Studies Unitで実施された。臨床的なプロトコールが提出され、Ethics Committee of the Royal Brompton Hospital Trustによって認められており、研究はグッドクリニカルプラクティスの規格に従って実施した。それぞれの患者は、書面でインフォームドコンセントを得た。

この研究には、２４人の成人健常ボランティアおよび２４に軽度の喘息患者が参加した。全ての患者は、これまで非喫煙者であった。喘息患者（ｎ＝２４）は、American Thoracic Society Criteriaにより、必要な基準として吸入アルブテロールのみ薬物投与を伴う軽度の喘息を有した。患者は、１秒間の最大努力呼気肺活量（ＦＥＶ₁）≧７０％、短時間作用性のβ₂−アゴニストで実証された＞１５％の可逆性、およびＦＥＶ₁における２０％減少（ＰＣ₂₀）を生じるメタコリンまたはヒスタミンの誘発濃度≦８.０ｍｇ／ｍｌを有した。さらに、喘息患者は実証された皮膚プリックテストを受け、少なくとも一つの一般的な吸入アレルゲン（Dermatophagoides pteronyssinus、混合されたイネ科植物の花粉またはネコのふけ）に対して陽性であり、研究前の４週間は、喘息または気道感染の悪化がなかった。喘息患者は、いずれも呼気ＮＯレベルが＞１５パーツパービリオン（ｐｐｂ）のベースラインを有した。健康な対照（ｎ＝２４）被験者は、年齢および性別が適合し、臨床的に有意な疾患がなかった。健康な被験者は、呼気ＮＯレベル４〜９ｐｐｂのベースラインを有する必要があった。

研究は、無作為二重盲検法で経口用化合物ＮＮまたはプラシーボの一用量を摂取した健常ボランティアおよび喘息患者の２パネルで行った。調査下では化合物ＮＮの用量に従って二段階で研究を実施した。第１のパネルは、化合物ＮＮおよびプラシーボの一用量２０ｍｇを摂取した軽度〜中程度の喘息患者（ｎ＝１２）および健康な被験者（ｎ＝１２）からなり、第２パネルの軽度〜中程度の喘息患者（ｎ＝１２）および健康な被験者（ｎ＝１２）は、化合物ＮＮおよびプラシーボの一用量２００ｍｇを摂取した。患者または被験者が、この研究の両方のパネルに参加することはなかった。第１のパネルの評価は、第２のパネルに移動する前に完了した。研究では、経口投与した化合物ＮＮの許容度および薬理動態を評価し、呼気ＮＯレベルをモニターした。

排出されたＮＯの測定：
排出されたＮＯは、化学発光分析器(Logan 2000, Rochester, UK)およびInternational
Guidelinesに従った方法を用いて測定した。分析器は、５０〜２００ｐｐｂの既知ＮＯ混合物(BOC Special gases, Guildford, UK)を用いて毎日較正し、大気のＮＯ記録を１時間の基準で行った。被験者には、任意の測定前に激しい運動を控えるように求めた。任意の測定を行う前に、各被験者を少なくとも５分間着席させ、実験中も着席させたままにした。被験者に残気容量まで息を吐き出させた後、全肺気容量まで急速に吸入させた。吸息は素早く行い、健康な被験者では＜２.５秒、喘息患者では＜４秒であった。分析器がＮＯについて０に合わせた後、被験者は、全肺気容量から５〜２０秒かけて低い抵抗力（５〜２０ｃｍのＨ₂Ｏ）逆らって２５０ｍｌ／秒の一定の安定した流速で化学発光分析器を備えた広口径テフロン管中に吐き出した。サンプリングは、２５０ｍｌ／分の速度で実施した。ＮＯプラトー反応は、持続期間中に少なくとも１０秒であるものとして判断した。２回の連続した記録を取り、平均値を算出した。

臨床データの統計的方法：
ベースラインからの変化およびパーセンテージ変化を含む排出されたＮＯデータは、シャピロ−ウィルクス検定を用いて正規性について検定した。有意な偏差がみられたため、ノンパラメトリック統計的方法を用いた。ベースラインからの変化は、ウィルコクソン符号順位検定を用いて検定した。ベースラインからの変化およびパーセンテージ変化について曲線より下の面積（ＡＵＣ）および活性成分とプラシーボとの間の差分を算出した。正規性について試験では、有意な偏差が見られたので、ノンパラメトリック統計的方法を用いた。全体的変化の有意性は、ウィルコクソン符号順位検定を用いてＡＵＣをゼロと比較することによって試験した。各パネル内の処置間の差分は、入れ換え研究のノンパラメトリック分析を用いて検定した。２つのパネル（２０ｍｇおよび２００ｍｇ）の２つの活性用量間の差分は、ウィルコクソン順位和検定を用いて検定した。

１秒間の最大努力呼気肺活量（ＦＥＶ₁）および心拍数データは、シャピロ−ウィルクス検定を用いた正規性から有意な偏差がなく、このためパラメトリック統計的方法を用い、ベースラインから変化の有意性は、対応のあるｔ順位検定(paired t-rank test)を用いて検定した。

健康な被験者および喘息患者におけるｉＮＯＳ阻害の効果：
プラシーボおよび化合物ＮＮの２０または２００ｍｇのいずれかの用量を投与した後の健康な被験者および喘息患者において排出されたＮＯレベルを図３に示した。呼気一酸化
窒素（ＮＯ）レベルの変化は、(Ａ)化合物ＮＮ（２０ｍｇ）および（Ｂ）化合物ＮＮ（２００ｍｇ）の経口投与を、軽度〜中程度の喘息患者（黒三角）においてプラシーボ（白三角）とを比較し、そして健康な被験者（黒丸）においてプラシーボ（白丸）と比較して示した。縦の矢は、化合物ＮＮまたはプラシーボの投薬を実施した時間を表す。平均値を示した（ｎ＝１２）。

図３からは、排出されたＮＯの変化におけるＡＵＣでは、プラシーボについて、被験者の４つのグループのすべてにおいてゼロから著しく異なることはなかったことがわかる。化合物ＮＮの両方の用量を投与した後、健常ボランティアおよび喘息患者の両方において７２時間の評価を通して、排出されたＮＯにおいて著しく異なる急激な減少があった。さらに、化合物ＮＮ２００ｍｇを摂取した被験者についてのＮＯ変化のＡＵＣにおける差分は、健常ボランティア（ｐ＜０.００１）および喘息患者（ｐ＝＜０.０１）の両方において化合物ＮＮ２０ｍｇを摂取した被験者のＡＵＣ（ｐ＝０.００４）よりも大きかった。

図４は、ＦＥＶ₁、血圧および心拍数における化合物ＮＮの経口投与効果を示す。化合物ＮＮ（２００ｍｇ）の経口投与後のＦＥＶ₁の変化を(Ａ)軽度の中程度の喘息の患者（黒三角）においてプラシーボ（白三角）と比較し、そして健康な被験者（黒丸）においてプラシーボ（白丸）と比較した。（Ｂ）化合物ＮＮ（２００ｍｇ）（黒四角）の経口投与後の最大血圧の変化をプラシーボ（白四角）と比較して、化合物ＮＮ（２００ｍｇ）（白ひし形）の経口投与後の最小血圧の変化をプラシーボ（黒ひし形）と比較した。(Ｃ)化合物ＮＮ２００ｍｇ（黒三角）を経口投与した後の心拍数における変化をプラシーボ（白三角）と比較した。縦の矢は、化合物ＮＮまたはプラシーボの各用量を投与した時間を表す。平均値を示した（ｎ＝１２）。

図４は、化合物ＮＮが、心拍数、血圧およびＦＥＶ₁における明白な影響を有することなく十分に許容されることを示している。さらに、血液学または血液生化学における影響もなかった。

選択的ｉＮＯＳ阻害剤化合物ＮＮは、全ての被験者において十分に許容され、健常ボランティアおよび喘息患者の両方において経口投与後の呼気ＮＯが急速に減少した。さらに、呼気ＮＯにおける減少は、両方のグループにおいて３日間持続した。肺機能、血圧および心拍数においてまたは実験血液学および生化学パラメータにおいて有意な変化はなかった。Ｌ−ＮＭＭＡ（ＮＯＳの非選択的阻害剤）の静脈内投与の研究では、動物およびヒトの両方で高血圧が生じた。ｅＮＯＳの遺伝子が不足している突然変異体マウスにおける高血圧の説明(Huang, P. L. 等, Nature 377: 239-42 (1995))では、ｅＮＯＳの阻害を通してＬ−ＮＭＭＡが高血圧を引き起こすことが示唆されている。従って、化合物ＮＮの優れた許容度から示唆されるのは、この化合物が試験用量で評価しうるほどにはｅＮＯＳを阻害せず、そして喘息だけでなく他の炎症状態においてｉＮＯＳ阻害剤研究が奨励されることである。

一用量後に排出されるＮＯ減少に関して効果が長く持続することから示唆されるのは、この化合物についての投薬処方計画では投薬を１日１回に調節できるということである。ＮＯにおける効果は、急激に始まり、用量と関係があることがわかった。より高い２００ｍｇの用量は、用量応答曲線のプラトーに位置する最大用量である可能性がある。さらに、２００ｍｇの用量では、喘息において排出されたＮＯの９５％阻害が生じ、これは、高用量の非特異的な阻害剤、例えばＬ−ＮＭＭＡ(Yates, D. H., 等, Am J Respir Crit Care Med 152: 892-896 (1995))およびＬ−ＮＡＭＥ(Gomez, F. P., 等, Eur Respir J 12:865-871 (1998) )ならびに選択的なアミノ−グアニジン(Yates, D. H., 等, Am J Respir Crit Care Med 154: 247-250 1996) )を用いて得られる約７０％の阻害より大きかった。ｉＮＯＳの完全な阻害が選択的に得られたと仮定しても、健常ボランティアおよび喘息患者における排出された残留ＮＯ＜１ｐｐｂは、構成型ｎＮＯＳおよびｅＮＯＳだけでなく外来の大気中の供給源によっても生じることがある。

ヒト喘息におけるＮＯの重要な役割は、研究内容の広がりによって裏づけられている。選択的ｉＮＯＳ阻害剤は、アレルギー性の気道炎症の齧歯類モデルにおいて肺への好酸球浸潤を抑制し(Koarai, A., 等, Pulm. Pharmacol Ther. 13: 267-275 (2000))、肺ケモカイン発現の減少と関係があり(Trifilieff, A., 等, J Immunol 165 : 1526-33 (2000) )、そしてｉＮＯＳの不足したマウスにおいてアレルギー性気道炎症が抑制される(Xiong,
Y., 等, The Journal of Immunology 162: 445-52 (1999) )ことがわかった。気体ＮＯは、喘息患者からの呼気中で高い量で検出可能であり（例えば、Stirling, R. G. 等, Thorax 53: 1030-34 (1998) 参照）、そして過酸化亜硝酸(Sadeghi-Hashjin, G. 等, Clin Exp Allergy 28: 1464-73 (1998) )は、喘息患者の気管支の生検材料で増加している(Saleh, D., 等, FASEB J 12: 929-37 (1998))。さらに、ニトロチロシンは呼気凝縮物中で(Hanazawa, T. 等, Am J Respir Crit Care Med 162: 1273-76 (2000) )、そして喘息で死亡した患者の肺柔組織および気道中(Kaminsky, D. A.等, J. Allergy Clin Immunol 104 : 747-54 (2000) )で増加している。最近では、一酸化窒素シンターゼ（ＮＯＳ）が、ニューロンおよび別の組織中で活性化された時に、Ｓ−ニトロソチオールは、酸素圧低下に対して呼吸反応のシグナルを出し、Ｓ−ニトロソグルタチオンが形成されることがわかった(Lipton, A. J. 等, Nature 413: 171-74 (2001))。

また、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）における選択的ｉＮＯＳ治療の使用には治療上の正当性が存在する（例えば、Barnes, P. J., N Engl J Med 343: 269-80 (2000)参照）。ＣＯＰＤの実用的なマーカーとして排出されたＮＯの使用は、論争中であるが（Maziak, W. 等, Am J Respir Crit Care Med 157: 998-1002 (1998)をCorradi, M. 等, [In Process Citation]. Thorax 54: 572-75 (1999)およびRutgers, S. R. 等, Thorax 54: 576-80 (1999)と比較する）、痰細胞中ではニトロチロシンおよびｉＮＯＳの増加がある(Ichinose, M. 等, Am J Respir Crit Care Med 162: 701-6 (2000))。重度のがんこなＣＯＰＤ患者で、排出されたＮＯレベルの減少が見られる原因となる反応性オキシダント種によってＮＯが消費される可能性は残っている(Clini, E. 等, Thorax 53: 881-3 (1998)。また、ＮＯ吸入は、慢性ＣＯＰＤの治療で使用されてきた(Ashutosh, K. 等, Thorax 55: 109-13 (2000))。

ｃ．用量、処方物および投与経路
本発明の方法に有用なｉＮＯＳ選択的阻害剤化合物の多くは、少なくとも２つの不斉炭素原子を有することができ、したがって、ラセミ体および立体異性体、例えばジアステレオマーおよび鏡像異性体が、両方の純粋な形態で、そして混合物で含まれる。このような立体異性体は、慣用の技術を用いて鏡像異性体の出発物質を反応させるか、または本発明の化合物の異性体を分離することによって製造することができる。異性体には、幾何異性体、例えば二重結合に関するシス異性体またはトランス異性体が含まれうる。全てのこのような異性体は、本発明の方法に有用な化合物として企図される。また、方法では、ｉＮＯＳ選択的阻害剤化合物の互変異性体、塩、溶媒和物およびプロドラッグの使用を企図する。

本発明の方法について、選択的ｉＮＯＳ阻害剤の投与の適切な経路は、これらの化合物を被験者の身体、例えば特に気管、気管支および肺の気道の作用部位と接触させるあらゆる手段が含まれる。より詳しくは、適切な投与経路としては、経口吸入または鼻内吸入を含めた吸入、鼻腔内の粘膜投与、経口、静脈内、皮下、直腸、局所、口腔内（舌下）、筋内および皮内が含まれる。

呼吸器の疾患および状態（状態には、喘息状態、慢性気管支炎および気腫を含めたＣＯ
ＰＤ、および嚢胞性繊維症、ならびに気道または肺の炎症を伴う他の呼吸器または肺の障害が含まれる）の予防または治療のため、方法には、化合物それ自体としてまたはその医薬上許容しうる塩としてｉＮＯＳ選択的阻害剤の使用が含まれる。用語「医薬上許容しうる塩」は、アルカリ金属塩を形成するため、そして遊離酸または遊離塩基の付加塩を形成するために一般に使用される塩を包含する。塩の性質は重要でないが、但し、それは医薬上許容しうるものである。医薬上許容しうる塩は、本発明の方法の生成物として特に有用であり、その理由は、それらの水溶解度が対応する親化合物または中性化合物に比べてより大きいためである。このような塩は、医薬上許容しうるアニオンまたはカチオンを有しなければならない。本発明の化合物の適切な医薬上許容しうる酸付加塩は、無機酸または有機酸から製造することができる。このような無機酸の例は、塩酸、臭化水素酸、ヨウ化水素酸、硝酸、炭酸、硫酸およびリン酸である。適当な有機酸としては、脂肪酸、環式脂肪族酸、芳香族酸、芳香族脂肪族酸、複素環式酸、カルボン酸およびスルホン酸の種類のものが含まれ、これらの例は、ギ酸、酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、グルコン酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、グルコロン酸、マレイン酸、フマル酸、ピルビン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、安息香酸、アントラニル酸、メシル酸、サリチル酸、ｐ−ヒドロキシ安息香酸、フェニル酢酸、マンデル酸、エンボン酸（パモ酸）、メタンスルホン酸、エチルスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、スルファニル酸、ステアリン酸、シクロヘキシルアミノスルホン酸、アルゲン酸、ガラクツロン酸である。本発明の化合物の適切な医薬上許容しうる塩基付加塩には、アルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウムおよび亜鉛から製造された金属塩またはＮ,Ｎ'−ジベンジルエチレンジアミン、コリン、クロロプロカイン、ジエタノールアミン、エチレンジアミン、メグルミン（Ｎ−メチルグルカミン）およびプロカインから製造された有機塩が含まれる。本発明の化合物の適切な医薬上許容しうる酸付加塩には、可能ならば、無機酸、例えば塩酸、臭化水素酸、フッ化水素酸、ホウ酸、フルオロホウ酸、リン酸、メタリン酸、硝酸、炭酸（炭酸および炭酸水素アニオンを含む）、スルホン酸および硫酸、ならびに有機酸、例えば酢酸、ベンゼンスルホン酸、安息香酸、クエン酸、エタンスルホン酸、フマル酸、グルコン酸、グリコール酸、イソチオン酸、乳酸、ラクトビオン酸、マレイン酸、リンゴ酸、メタンスルホン酸、トリフルオロメタンスルホン酸、コハク酸、トルエンスルホン酸、酒石酸およびトリフルオロ酢酸から誘導されたものが含まれる。塩化物の塩は、特に医学目的に好まれしい。適切な医薬上許容しうる塩基性塩としては、アンモニウム塩、アルカリ金属塩、例えばナトリウムおよびカリウム塩およびアルカリ土類塩、例えばマグネシウムおよびカルシウム塩が含まれる。これらの塩は、すべて慣用の手段によってそれぞれ適当な酸または塩基を化合物の共役塩基または共役酸と反応させることによって本発明の化合物の対応する共役塩基または共役酸から製造することができる。

一実施態様では、本発明の方法に有用なｉＮＯＳ選択的阻害剤は、許容しうる担体と共に医薬の組み合わせ形態で提示される。担体は、医薬の組み合わせの他の成分と適合しうるという意味において許容されなければならず、そして被験者に有害であってはならない。担体に適切な形態は、固体または液体または両方が含まれ、そして典型的な実施態様において、担体は治療化合物と共に単位用量の組み合わせとして、例えば活性化合物約０.０５％〜約９５重量％を含む錠剤として処方される。また、別の実施態様において、本発明の別の化合物を含めた他の薬理学的活性物質も存在する。本発明の医薬化合物は、本質的に成分を混合することからなる薬学の周知技術のいずれかによって製造される。

好ましい単位用量処方物は、本明細書に下で記載したような有効用量、または組み合わせのうちの一つまたはそれ以上の治療化合物の有効用量の適当な画分を含むものである。

一般に、ｉＮＯＳ選択的阻害剤の全日用量は、約０.００１ｍｇ／ｋｇ体重／日〜約２
５００ｍｇ／ｋｇ体重／日の範囲である。ヒト成人の用量範囲は、一般に１日当たり約０
.００５ｍｇ〜約１０ｇである。錠剤または個別的な単位で提供される別の形態は、このような用量でまたは同じ用量で複数回で有効な量の治療化合物を含むことが好都合である。例えば、本発明に使用する選択的ｉＮＯＳ阻害性化合物は、５ｍｇ〜５００ｍｇ、そして典型的には約１０ｍｇ〜約２００ｍｇを含んでなる単位で提示することができる。

治療化合物の医薬上許容しうる塩の場合、上で示した重量は、塩から誘導された治療化合物と同等の酸または塩基の重量に相当する。

本明細書に記載された方法について、所望の生物学的効果を得るために必要な選択的ｉＮＯＳ阻害性化合物の量は、選ばれた具体的な個々の化合物または複数の化合物、具体的な使用、投与経路、被験者の臨床状態、ならびに被験者の年齢、体重、性別および食事を含めた多くの因子に左右されることは、理解すべきである。

さまざまな治療化合物について前記段落に記載された日用量は、一用量でまたは相応の複数の下位用量で投与する。下位用量は、１日当たり２〜６回投与する。一実施態様において、用量を、所望の生物学的効果を得るため有効な持続放出形態で投与する。

口または鼻からの吸入にかかわらず、本発明の方法の吸入による供給には、吸入による供給のためエアロゾル化されることができる当分野でよく知られた処方物が含まれる。計量された用量の吸入器または噴霧器からエアゾル剤を供給する。両デバイスは、約１ミクロン〜約５ミクロンの好ましい範囲の粒子を含めた粒径範囲で供給することができる。約１０ミクロンより大きい粒子は、主に口やのどに付着し、その一方で、約０.５ミクロンより小さい粒子は、肺胞に吸入されてから肺中にあまり付着することなく排出される。
吸入剤治療の代替デバイスは、例えば、治療上化合物を担持するためラクトースまたはグルコース粉末を用いる乾燥粉末吸入器である。吸入剤治療の全ての形態では、一回呼吸量、呼吸速度および息こらえを含めた、粒径やデバイスタイプ以外の因子も肺中の付着量に影響を与える。従って、また本発明の方法による吸入治療を指示されている人は、ゆっくりとした深い呼吸を行い、呼吸のたびに数秒間、好ましくは約５〜１０秒間息をこらえるように指示されるはずである。典型的には、本発明の方法による治療化合物の全日用量は、b. i. d-q. i. d.基準で１〜４パフとして（１日２回、１日３回または１日４回）、そして必要に応じてまたは必要に応じた基準として単独で投与する。

本発明の方法による経口供給には、多くのメカニズムによって呼吸器系に薬物を長い間または持続的に供給する、当分野でよく知られている処方物が含まれる。これらには、少腸のｐＨ変化に基づく剤形からのｐＨ感受性放出、錠剤またはカプセルのゆっくりとした侵食、処方物の物理特性に基づく胃中での停留、腸管の粘膜内層への剤形の生体付着、または剤形からの活性薬物の酵素による放出が含まれるが、これらに限定されるものではない。

本発明の方法による経口供給は、固体、半固体または液体の剤形を用いて実施することができる。例えば、適切な半固体および液体形態には、ゲルカプセル中に含まれたシロップまたは液体が含まれる。

本発明の方法を実施するため、経口投与に適した医薬組成物は、個別的な単位、例えばカプセル剤、カシェ剤、トローチ剤または錠剤で提示することができ、それぞれは、本発明の方法に有用な少なくとも一つの治療化合物の所定量を、散剤としてまたは顆粒剤中に；水性または非水性液体中の液剤または懸濁剤として；または水中油または油中水型乳剤として含んでなる。

ｄ．実施態様の実施例
以下の非限定的な実施例は、本発明の治療方法の実施に適したさまざまな医薬組成物を説明するのに役立つ。

実施例１医薬組成物
経口投与のための表IVに記載された組成物の１００ｍｇ錠剤を、湿式造粒法を用いて製造した：
〔表IV〕
成分重量（ｍｇ）
化合物ＮＮ２５
ラクトース５４
微晶質セルロース１５
ヒドロキシプロピルメチルセルロース３
クロスカルメロースナトリウム２
ステアリン酸マグネシウム１
合計錠剤重量１００

実施例２の医薬組成物
表Ｖに記載された組成物の１００ｍｇ錠剤を、直接圧縮技術を用いて製造した。
〔表Ｖ〕
成分重量（ｍｇ）
化合物Ｉ２５
微晶質セルロース６９.５
コロイド状二酸化ケイ素０.５
タルク２.５
クロスカルメロースナトリウム０.５
ステアリン酸マグネシウム１
合計錠剤重量１００

本明細書に記載された実施例は、前記実施例に使用されたものの代わりに一般的にまたは具体的には記載された治療化合物または不活性成分を用いて実施することができる。

本明細書に記載した説明および図解は、本発明、その原理およびその実用的な適用を他の当業者に知らせることを意図している。当業者は、特定の使用条件に最適となるように本発明をその多くの形態に適応および適用することができる。従って、前記の本発明の具体的な実施態様は、本発明を網羅または限定しようとするものではない。

ヒト初代気道上皮細胞をＬ−ＮＩＬの存在下または非存在下で５０ｎｇ／ｍｌのＩＬ−１β、ＴＮＦ−αおよびＩＦＮ−γ（cyt）存在下で２４時間培養した後の培地の硝酸塩含量のグラフである。細胞のタンパク質３−８％トリス−アセテートポリアクリルアミドゲルの分解およびｉＮＯＳタンパク質についての免疫ブロットの結果を示す。（Ａ）ｉＮＯＳ選択的阻害剤（化合物ＮＮ）２０ｍｇおよび（Ｂ）化合物ＮＮの２００ｍｇを経口投与した後に排出された息の一酸化窒素（ＮＯ）レベルの変化を、軽度〜中程度の喘息患者（黒三角形）とプラシーボ（白三角形）とを比較し、そして健康な被験者（黒丸）とプラシーボ（白丸）とを比較して示す。ＦＥＶ₁、血圧および心拍数における経口投与化合物ＮＮの効果を示す。

Claims

呼吸器の疾患または状態の治療、予防または抑制を必要とする患者において呼吸器の疾患または状態を治療、予防または抑制する方法であって、呼吸器の疾患または状態に有効な量の誘導型一酸化窒素シンターゼの選択的阻害剤またはその医薬上許容しうる塩またはそのプロドラッグを患者に投与することからなり、その際、誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤が、
式Ｉ

（式中、Ｒ¹は、Ｈ、ハロおよび１個以上のハロによって場合により置換されてもよいアルキルからなる群より選ばれ；
Ｒ²は、Ｈ、ハロおよび１個以上のハロによって場合により置換されてもよいアルキルからなる群より選ばれるが；
但し、Ｒ¹またはＲ²の少なくとも一つはハロを含み；
Ｒ⁷は、Ｈおよびヒドロキシからなる群より選ばれ；
Ｊは、ヒドロキシ、アルコキシおよびＮＲ³Ｒ⁴からなる群より選ばれ、その際；
Ｒ³は、Ｈ、低級アルキル、低級アルキレニルおよび低級アルキニルからなる群より選ばれ；
Ｒ⁴は、Ｈおよび複素環式環からなる群より選ばれ、ここで該環の少なくとも一つの構成メンバーは、炭素であり、そして１〜約４個のヘテロ原子は、酸素、窒素および硫黄から独立して選ばれ、そして該複素環式環はヘテロアリールアミノ、Ｎ−アリール−Ｎ−アルキルアミノ、Ｎ−ヘテロアリールアミノ−Ｎ−アルキルアミノ、ハロアルキルチオ、アルカノイルオキシ、アルコキシ、ヘテロアラルコキシ、シクロアルコキシ、シクロアルケニルオキシ、ヒドロキシ、アミノ、チオ、ニトロ、低級アルキルアミノ、アルキルチオ、アルキルチオアルキル、アリールアミノ、アラルキルアミノ、アリールチオ、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アルキルスルホンアミド、アルキルアミノスルホニル、アミドスルホニル、モノアルキルアミドスルホニル、ジアルキルアミドスルホニル、モノアリールアミドスルホニル、アリールスルホンアミド、ジアリールアミドスルホニル、モノアルキルモノアリールアミドスルホニル、アリールスルフィニル、アリールスルホニル、ヘテロアリールチオ、ヘテロアリールスルフィニル、ヘテロアリールスルホニル、アルカノイル、アルケノイル、アロイル、ヘテロアロイル、アラルカノイル、ヘテロアラルカノイル、ハロアルカノイル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレンジオキシ、ハロアルキレンジオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、低級シクロアルキルアルキル、低級シクロアルケニルアルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヒドロキシハロアルキル、ヒドロキシアラルキル、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシヘテロアラルキル、ハロアルコキシアルキル、アリール、アラルキル、アリールオキシ、アラルコキシ、アリールオキシアルキル、飽和ヘテロシクリル、部分飽和ヘテロシクリル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールオキシアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、アリールアルケニル、ヘテロアリールアルケニル、シアノアルキル、ジシアノアルキル、カルボキシアミドアルキル、ジカルボキシアミドアルキル、シアノカルボアルコキシアルキル、カルボアルコキシアルキル、ジカルボアルコキシアルキル、シアノシクロアルキル、ジシアノシクロアルキル、カルボキシアミドシクロアルキル、ジカルボキシアミドシクロアルキル、カルボアルコキシシアノシクロアルキル、カルボアルコキシシクロアルキル、ジカルボアルコキシシクロアルキル、ホルミルアルキル、アシルアルキル、ジアルコキシホスホノアルキル、ジアラルコキシホスホノアルキル、ホスホノアルキル、ジアルコキシホスホノアルコキシ、ジアラルコキシホスホノアルコキシ、ホスホノアルコキシ、ジアルコキシホスホノアルキルアミノ、ジアラルコキシホスホノアルキルアミノ、ホスホノアルキルアミノ、ジアルコキシホスホノアルキル、ジアラルコキシホスホノアルキル、グアニジノ、アミジノ、およびアシルアミノで場合により置換されてもよい）を有する化合物；
式II

［式中、Ｘは、−Ｓ−、−Ｓ(Ｏ)−および−Ｓ(Ｏ)₂−からなる群より選ばれ、Ｒ¹²は、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₂−Ｃ₆アルケニル、Ｃ₂−Ｃ₆アルキニル、Ｃ₁−Ｃ₅アルコキシ−Ｃ₁アルキル、およびＣ₁−Ｃ₅アルキルチオ−Ｃ₁アルキルからなる群より選ばれ、その際、これらの基は、それぞれ−ＯＨ、アルコキシおよびハロゲンからなる群より選ばれる１個以上の置換基によって場合により置換されており、Ｒ¹⁸は、−ＯＲ²⁴および−Ｎ(Ｒ²⁵)(Ｒ²⁶)からなる群より選ばれ、そしてＲ¹³は、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃ(Ｏ)−Ｒ²⁷、−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ²⁸および−Ｃ(Ｏ)−Ｓ−Ｒ²⁹からなる群より選ばれるか；またはＲ¹⁸は−Ｎ(Ｒ³⁰)−であり、そしてＲ¹³は−Ｃ(Ｏ)−であり、ここでＲ¹⁸およびＲ¹³は、それらが結合している原子と一緒になって環を形成するか；またはＲ¹⁸は−Ｏ−であり、そしてＲ¹³は−Ｃ(Ｒ³¹)(Ｒ³²)−であり、ここでＲ¹⁸およびＲ¹³は、それらが結合している原子と一緒になって環を形成し、その際、Ｒ¹³が、−Ｃ(Ｒ³¹)(Ｒ³²)−である場合、Ｒ¹⁴は−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ³³であり、さもなければＲ¹⁴は−Ｈであり、Ｒ¹¹、Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶、およびＲ¹⁷は、独立して−Ｈ、ハロゲン、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₂−Ｃ₆アルケニル、Ｃ₂−Ｃ₆アルキニルおよびＣ₁−Ｃ₅アルコキシ−Ｃ₁アルキルからなる群より選ばれ、Ｒ¹⁹およびＲ²⁰は、独立して−Ｈ、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₂−Ｃ₆アルケニル、Ｃ₂−Ｃ₆アルキニルおよびＣ₁−Ｃ₅アルコキシ−Ｃ₁アルキルからなる群より選ばれ、Ｒ²¹は、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ³⁴および−Ｃ(Ｏ)−Ｓ−Ｒ³⁵からなる群より選ばれ、そしてＲ²²は、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ³⁶および−Ｃ(Ｏ)−Ｓ−Ｒ³⁷からなる群より選ばれるか；またはＲ²¹は−Ｏ−であり、そしてＲ²²は−Ｃ(Ｏ)−であり、ここでＲ²¹およびＲ²²は、それらが結合している原子と一緒になって環を形成するか；またはＲ²¹は−Ｃ(Ｏ)−であり、そしてＲ²²は−Ｏ−であり、ここでＲ²¹およびＲ²²は、それらが結合している原子と一緒になって環を形成し、Ｒ²³は、Ｃ₁アルキルであり、Ｒ²⁴は、−ＨおよびＣ₁−Ｃ₆アルキルからなる群より選ばれ、その際、Ｒ²⁴がＣ₁−Ｃ₆アルキルである場合、Ｒ²⁴は、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群より選ばれる１個以上の基によって場合により置換されており、Ｒ²⁵は、−Ｈ、アルキルおよびアルコキシからなる群より選ばれ、そしてＲ²⁶は、−Ｈ、−ＯＨ、アルキル、アルコキシ、−Ｃ(Ｏ)−Ｒ³⁸、−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ³⁹および−Ｃ(Ｏ)−Ｓ−Ｒ⁴⁰からなる群より選ばれ；その際、Ｒ²⁵およびＲ²⁶が独立してアルキルまたはアルコキシである場合、Ｒ²⁵およびＲ²⁶は、独立してシクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群より選ばれる１個以上の基で場合により置換されているか；またはＲ²⁵は−Ｈであり；そしてＲ²⁶はシクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群より選ばれ、Ｒ²⁷、Ｒ²⁸、Ｒ²⁹、Ｒ³⁰、Ｒ³¹、Ｒ³²、Ｒ³³、Ｒ³⁴、Ｒ³⁵、Ｒ³⁶、Ｒ³⁷、Ｒ³⁸、Ｒ³⁹およびＲ⁴⁰は、独立して−Ｈおよびアルキルからなる群より選ばれ、その際、アルキルは、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群より選ばれる１個以上の基によって場合により置換されており、ここでＲ¹¹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁷、Ｒ¹⁸、Ｒ¹⁹、Ｒ²⁰、Ｒ²¹、Ｒ²²、Ｒ²³、Ｒ²⁴、Ｒ²⁵、Ｒ²⁶、Ｒ²⁷、Ｒ²⁸、Ｒ²⁹、Ｒ³⁰、Ｒ³¹、Ｒ³²、Ｒ³³、Ｒ³⁴、Ｒ³⁵、Ｒ³⁶、Ｒ³⁷、Ｒ³⁸、Ｒ³⁹およびＲ⁴⁰のいずれかが独立してアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルキルチオ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群より選ばれる基である場合、その基は、−ＯＨ、アルコキシおよびハロゲンからなる群より選ばれる１個以上の置換基によって場合により置換されている］に相当する構造を有する化合物；
式III

（式中、Ｒ⁴¹は、Ｈまたはメチルであり；そしてＲ⁴²はＨまたはメチルである）によって表される化合物；
式IV

の化合物；
式Ｖ

（式中、Ｒ⁴³は、水素、ハロ、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル、およびアルコキシまたは１個以上のハロによって置換されたＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群より選ばれ；
Ｒ⁴⁴は、水素、ハロ、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル、およびアルコキシまたは１個以上のハロによって置換されたＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群より選ばれ；
Ｒ⁴⁵は、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル、またはアルコキシもしくは１個以上のハロによって置換さ
れたＣ₁−Ｃ₅アルキルである）の化合物；
式VI

（式中、Ｒ⁴⁶は、Ｃ₁−Ｃ₅アルキルであり、該Ｃ₁−Ｃ₅アルキルはハロまたはアルコキシによって場合により置換されており、該アルコキシは１個以上のハロによって場合により置換されている）の化合物；
式VII

（式中、Ｒ⁴⁷は、水素、ハロ、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル、およびアルコキシまたは１個以上のハロによって置換されたＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群より選ばれ；
Ｒ⁴⁸は、水素、ハロ、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル、およびアルコキシまたは１個以上のハロによって置換されたＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群より選ばれ；
Ｒ⁴⁹は、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル、またはアルコキシもしくは１個以上のハロによって置換されたＣ₁−Ｃ₅アルキルである）の化合物；
式VIII

（式中、Ｒ⁵⁰は、Ｃ₁−Ｃ₅アルキルであり、該Ｃ₁−Ｃ₅アルキルはハロまたはアルコキシによって場合により置換されており、該アルコキシは１個以上のハロによって場合により置換されている）の化合物；
式IX

（式中、Ｒ⁵⁰は、水素、ハロおよびＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群から選ばれ、該Ｃ₁−Ｃ₅アルキルはハロまたはアルコキシによって場合により置換されており、該アルコキシは１個以上のハロによって場合により置換されており；
Ｒ⁵¹は、水素、ハロおよびＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群より選ばれ、該Ｃ₁−Ｃ₅アルキルはハロまたはアルコキシによって場合により置換されており、該アルコキシは１個以上のハロによって場合により置換されており；
Ｒ⁵²は、Ｃ₁−Ｃ₅アルキルであり、該Ｃ₁−Ｃ₅アルキルはハロまたはアルコキシによって場合により置換されており、該アルコキシは１個以上のハロによって場合により置換されており；
Ｒ⁵³は、水素、ハロおよびＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群より選ばれ、該Ｃ₁−Ｃ₅アルキルはハロまたはアルコキシによって場合により置換されており、該アルコキシは１個以上のハロによって場合により置換されており；そして
Ｒ⁵⁴は、ハロおよびＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群より選ばれ、該Ｃ₁−Ｃ₅アルキルはハロまたはアルコキシによって場合により置換されており、該アルコキシは１個以上のハロによって場合により置換されている）の化合物；
式Ｘ

（式中、Ｒ⁵⁵は、Ｃ₁−Ｃ₅アルキルであり、該Ｃ₁−Ｃ₅アルキルはハロまたはアルコキシによって場合により置換されており、該アルコキシは１個以上のハロによって場合により置換されている）の化合物；
式XI

を有する化合物；
２Ｓ−アミノ−６−[(１−イミノエチル）アミノ]−Ｎ−(１Ｈ−テトラゾール−５−イル）ヘキサンアミド，水和物，二塩酸塩；
式XII

（式中、Ｒ⁷⁹は、Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_3-4シクロアルキル、Ｃ_1-4ヒドロキシアルキルおよびＣ_1-4ハロアルキルより選ばれる）の化合物；
式XIII、式XIVまたは式XV：

または

｛式中、Ａは、−Ｒ⁵⁶、−ＯＲ⁵⁶、Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷、Ｐ(Ｏ) [Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷]₂、−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｃ(Ｏ)Ｒ⁵⁷、−Ｎ(Ｒ⁷⁶)Ｃ(Ｏ)ＯＲ⁵⁶、−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷⁶、−Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷¹、−Ｓ(Ｏ)_tＲ⁵⁶、−ＳＯ₂ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ⁵⁶、−ＮＨＳＯ₂Ｒ⁷⁷、−ＳＯ₂ＮＨ(Ｒ⁵⁶)Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＨＳＯ₂Ｒ⁷⁷および−ＣＨ＝ＮＯＲ⁵⁶であり；
Ｘ、ＹおよびＺは、それぞれ独立してＮまたはＣ(Ｒ¹⁹)であり；
Ｕは、それぞれＮまたはＣ(Ｒ⁶⁰)であるが、但し、ＸがＮであり、ＺおよびＹがＣＲ⁷⁴である場合のみ、ＵはＮであり；
Ｖは、Ｎ(Ｒ⁵⁹)、Ｓ、ＯまたはＣ(Ｒ⁵⁹)Ｈであり；
Ｗは、それぞれＮまたはＣＨであり；
Ｑは、直接結合、−Ｃ(Ｏ)−、−Ｏ−、−Ｃ(＝Ｎ−Ｒ⁵⁶)−、Ｓ(Ｏ)_tおよび−Ｎ(Ｒ⁶¹)−からなる群より選ばれ；
ｍは、０または１〜４の整数であり；
ｎは、０または１〜３の整数であり；
ｑは、０または１であり；
ｒは、０または１であるが、但し、ＱおよびＶがヘテロ原子である場合、ｍ、ｑおよびｒは、全て０であることはできず；
Ａが−ＯＲ⁵⁶、Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｃ(Ｏ)Ｒ⁵⁷、−Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)ＯＲ⁵⁷、−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷⁶、−Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷¹、−Ｓ(Ｏ)_tＲ⁵⁶（ここで、ｔは０である)または−ＮＨＳＯ₂Ｒ⁷⁷である場合、ｎ、ｑおよびｒは、すべて０であることはできない；そしてＱがヘテロ原子であり、Ａが−ＯＲ⁵⁶、Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｃ(Ｏ)Ｒ⁵⁷、−Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)ＯＲ⁵⁷、−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷⁶、Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷¹、−Ｓ(Ｏ)_tＲ⁵⁶(ｔが０である場合)または−ＮＨＳＯ₂Ｒ⁷⁷である場合、ｍおよびｎは、両方０であることはできない；
ｔは、０、１または２であり；

は、場合により置換されたＮ−ヘテロシクリルであり；

は、場合により置換されたカルボシクリルまたは場合により置換されたＮ−ヘテロシクリルであり；
Ｒ⁵⁶およびＲ⁵⁷は、それぞれ独立して水素、場合により置換されたＣ₁−Ｃ₂₀アルキル、場合により置換されたシクロアルキル、−[Ｃ₀−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶⁴、−[Ｃ₂−Ｃ₈アルケニル]−Ｒ⁶⁴、−[Ｃ₂−Ｃ₈アルキニル]−Ｒ⁶⁴、−[Ｃ₂−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶⁵（ヒドロキシによって場合により置換されている)、−[Ｃ₁−Ｃ₈]−Ｒ⁶⁶（ヒドロキシによって場合により置換されている)、場合により置換されたヘテロシクリルからなる群より選ばれるか；
またはＲ⁵⁶およびＲ⁵⁷は、それらが結合している窒素原子と一緒になって場合により置換されたＮ−ヘテロシクリルであり；
Ｒ⁵⁸は、水素、アルキル、シクロアルキル、場合により置換されたアリール、ハロアルキル、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶³、−[Ｃ₂−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶⁵、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶⁶、およびヘテロシクリル（ハロ、アルキル、アルコキシおよびイミダゾリルからなる群より選ばれる１個以上の置換基によって場合により置換されている)からなる群より選ばれるか；
またはＱが−Ｎ(Ｒ⁵⁸)−、またはＲ⁵⁸への直接結合である場合、Ｒ⁵⁸は、さらにアミノカルボニル、アルコキシカルボニル、アルキルスルホニル、モノアルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニルおよび−Ｃ(＝ＮＲ⁷³)−ＮＨ₂であってもよく；
または−Ｑ−Ｒ⁵⁸は一緒になって、−Ｃ(Ｏ)ＯＨ、−Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷または

を表し；
Ｒ⁵⁹は、水素、アルキル、アリール、アラルキルおよびシクロアルキルからなる群より選ばれるが；
但し、Ａが−Ｒ⁵⁶または−ＯＲ⁵⁶である場合、Ｒ⁵⁹は水素であることはできず、ＶがＣＨである場合、Ｒ⁵⁹はさらにヒドロキシであってもよく；
Ｒ⁶⁰は、水素、アルキル、アリール、アラルキル、ハロアルキル、場合により置換されたアラルキル、場合により置換されたアリール、−ＯＲ⁷¹、−Ｓ(Ｏ)_t−Ｒ⁷¹、Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｒ⁷⁶、Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷¹、Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)ＯＲ⁷¹、Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)Ｒ⁷¹、−[Ｃ₀−Ｃ₈アルキル]−Ｃ(Ｈ)[Ｃ(Ｏ)Ｒ⁷¹]₂および−[Ｃ₀−Ｃ₈アルキル]−Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷¹からなる群より選ばれ；
Ｒ⁶¹は、水素、アルキル、シクロアルキル、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶³、−[Ｃ₂−Ｃ₈]アルキル]−Ｒ⁶⁵、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶⁶、アシル、−Ｃ(Ｏ)Ｒ⁶³、−Ｃ(Ｏ)−−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶³、アルコキシカルボニル、場合により置換されたアリールオキシカルボニル、場合により置換されたアラルコキシカルボニル、アルキルスルホニル、
場合により置換されたアリール、場合により置換されたヘテロシクリル、アルコキシカルボニルアルキル、カルボキシアルキル、場合により置換されたアリールスルホニル、アミノカルボニル、モノアルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニル、場合により置換されたアリールアミノカルボニル、アミノスルホニル、モノアルキルアミノスルホニルジアルキルアミノスルホニル、アリールアミノスルホニル、アリールスルホニルアミノカルボニル、場合により置換されたＮ−ヘテロシクリル、−Ｃ(＝ＮＨ)−Ｎ(ＣＮ)Ｒ⁵⁶、−Ｃ(Ｏ)Ｒ⁷⁸−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷、−Ｃ(Ｏ)−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷⁸−Ｃ(Ｏ)ＯＲ⁵⁶からなる群より選ばれ；
Ｒ⁶³およびＲ⁶⁴は、それぞれ独立してハロアルキル、シクロアルキル(ハロ、シアノ、アルキルまたはアルコキシで場合により置換されている）、カルボシクリル（ハロ、アルキルおよびアルコキシからなる群から選ばれる１個以上の置換基で場合により置換されている）およびヘテロシクリル（アルキル、アラルキルまたはアルコキシで場合により置換されている）からなる群より選ばれ；
Ｒ⁶⁵は、それぞれハロ、アルコキシ、場合により置換されたアリールオキシ、場合により置換されたアラルコキシ、場合により置換されたＳ(Ｏ)_t−Ｒ⁷⁷、アシルアミノ、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、（トリフェニルメチル）アミノ、ヒドロキシ、メルカプト、アルキルスルホンアミドからなる群より独立して選ばれ；
Ｒ⁶⁶は、それぞれ独立してシアノ、ジ（アルコキシ）アルキル、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、モノアルキルアミノカルボニルおよびジアルキルアミノカルボニルからなる群より選ばれ；
Ｒ⁶⁷、Ｒ⁶⁸、Ｒ⁶⁹、Ｒ⁷⁰、Ｒ⁷²およびＲ⁷⁵は、それぞれ独立して水素またはアルキルであり；
Ｒ⁷¹は、それぞれ独立して水素、アルキル、場合により置換されたアリール、場合により置換されたアラルキルまたはシクロアルキルであり；
Ｒ⁷³は、水素、ＮＯ₂またはトルエンスルホニルであり；
Ｒ⁷⁴は、それぞれ独立して水素、アルキル（場合により、ヒドロキシで置換されている）、シクロプロピル、ハロまたはハロアルキルであり；
Ｒ⁷⁶は、それぞれ独立して水素、アルキル、シクロアルキル、場合により置換されたアリール、場合により置換されたアラルキル、−Ｃ(Ｏ)Ｒ⁷⁷または−ＳＯ₂Ｒ⁷⁷であるか；
またはＲ⁷⁶は、Ｒ⁵⁶と共にそれらが結合している窒素と一緒になって場合により置換されたＮ−ヘテロシクリルであるか；
またはＲ⁷⁶は、Ｒ⁷¹と共にそれらが結合している窒素と一緒になって場合により置換されたＮ−ヘテロシクリルであり；
Ｒ⁷⁷は、それぞれ独立してアルキル、シクロアルキル、場合により置換されたアリールまたは場合により置換されたアラルキルであり；
そしてＲ⁷⁸はアミノ酸残基である｝の化合物；および
ＰＰＡ２５０

からなる群より選ばれる上記の方法。
呼吸器の疾患または状態が喘息状態およびＣＯＰＤからなる群より選ばれる、請求項１に記載の方法。
呼吸器の疾患または状態が、アレルゲン誘発性喘息、運動誘発性喘息、汚染物誘発性喘息、寒冷誘発性喘息、ウイルス誘発性喘息、正常な気流の慢性気管支炎、慢性閉塞性気管支炎、気腫、喘息性気管支炎、水疱性疾患、嚢胞性線維症、ハト愛好家病、農夫肺、急性呼吸不全症候群、肺炎、吸引または吸入損傷、肺中の脂肪塞栓症、肺のアシドーシス炎症、急性肺水腫、急性高山病、心臓手術後、急性肺高血圧、新生児持続性肺高血圧、周産期吸引症候群、硝子膜症、急性肺血栓塞栓症、ヘパリン−プロタミン反応、敗血症、喘息発作重積状態および酸素圧低下からなる群より選ばれる、請求項１に記載の方法。
呼吸器の状態が喘息状態である、請求項１に記載の方法。
喘息状態がアレルゲン誘発性喘息である、請求項４に記載の方法。
喘息状態が汚染物誘発性喘息である、請求項４に記載の方法。
喘息状態が運動誘発性喘息である、請求項４に記載の方法。
喘息状態がウイルス誘発性喘息である、請求項４に記載の方法。
喘息状態が寒冷誘発性喘息である、請求項４に記載の方法。
呼吸器の状態が慢性閉塞性肺疾患である、請求項１に記載の方法。
呼吸器の状態が気腫である、請求項１に記載の方法。
呼吸器の状態が慢性気管支炎である、請求項１に記載の方法。
呼吸器の状態が正常な気流の慢性気管支炎である、請求項１２に記載の方法。
呼吸器の状態が慢性閉塞性気管支炎である、請求項１２に記載の方法。
呼吸器の状態が喘息性気管支炎である、請求項１に記載の方法。
呼吸器の状態が水泡性疾患である、請求項１に記載の方法。
呼吸器の状態が嚢胞性線維症である、請求項１に記載の方法。
呼吸器の状態が気管支拡張症である、請求項１に記載の方法。
誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤が、式Ｉ

（式中、Ｒ¹は、Ｈ、ハロおよび１個以上のハロによって場合により置換されうるアルキルからなる群より選ばれ；
Ｒ²は、Ｈ、ハロおよび１個以上のハロによって場合により置換されうるアルキルからなる群より選ばれるが；
但し、Ｒ¹またはＲ²の少なくとも一つはハロを含み；
Ｒ⁷は、Ｈおよびヒドロキシからなる群より選ばれ；
Ｊは、ヒドロキシ、アルコキシおよびＮＲ³Ｒ⁴からなる群より選ばれ、その際；
Ｒ³は、Ｈ、低級アルキル、低級アルキレニルおよび低級アルキニルからなる群より選ばれ；
Ｒ⁴は、Ｈおよび複素環式環からなる群より選ばれ、ここで該環の少なくとも一つの構成メンバーは、炭素であり、そして１〜約４個のヘテロ原子は、酸素、窒素および硫黄から独立して選ばれ、そして該複素環式環はヘテロアリールアミノ、Ｎ−アリール−Ｎ−アルキルアミノ、Ｎ−ヘテロアリールアミノ−Ｎ−アルキルアミノ、ハロアルキルチオ、アルカノイルオキシ、アルコキシ、ヘテロアラルコキシ、シクロアルコキシ、シクロアルケニルオキシ、ヒドロキシ、アミノ、チオ、ニトロ、低級アルキルアミノ、アルキルチオ、アルキルチオアルキル、アリールアミノ、アラルキルアミノ、アリールチオ、アルキルスルフィニル、アルキルスルホニル、アルキルスルホンアミド、アルキルアミノスルホニル、アミドスルホニル、モノアルキルアミドスルホニル、ジアルキルアミドスルホニル、モノアリールアミドスルホニル、アリールスルホンアミド、ジアリールアミドスルホニル、モノアルキルモノアリールアミドスルホニル、アリールスルフィニル、アリールスルホニル、ヘテロアリールチオ、ヘテロアリールスルフィニル、ヘテロアリールスルホニル、アルカノイル、アルケノイル、アロイル、ヘテロアロイル、アラルカノイル、ヘテロアラルカノイル、ハロアルカノイル、アルキル、アルケニル、アルキニル、アルキレンジオキシ、ハロアルキレンジオキシ、シクロアルキル、シクロアルケニル、低級シクロアルキルアルキル、低級シクロアルケニルアルキル、ハロ、ハロアルキル、ハロアルコキシ、ヒドロキシハロアルキル、ヒドロキシアラルキル、ヒドロキシアルキル、ヒドロキシヘテロアラルキル、ハロアルコキシアルキル、アリール、アラルキル、アリールオキシ、アラルコキシ、アリールオキシアルキル、飽和ヘテロシクリル、部分飽和ヘテロシクリル、ヘテロアリール、ヘテロアリールオキシ、ヘテロアリールオキシアルキル、アリールアルキル、ヘテロアリールアルキル、アリールアルケニル、ヘテロアリールアルケニル、シアノアルキル、ジシアノアルキル、カルボキシアミドアルキル、ジカルボキシアミドアルキル、シアノカルボアルコキシアルキル、カルボアルコキシアルキル、ジカルボアルコキシアルキル、シアノシクロアルキル、ジシアノシクロアルキル、カルボキシアミドシクロアルキル、ジカルボキシアミドシクロアルキル、カルボアルコキシシアノシクロアルキル、カルボアルコキシシクロアルキル、ジカルボアルコキシシクロアルキル、ホルミルアルキル、アシルアルキル、ジアルコキシホスホノアルキル、ジアラルコキシホスホノアルキル、ホスホノアルキル、ジアルコキシホスホノアルコキシ、ジアラルコキシホスホノアルコキシ、ホスホノアルコキシ、ジアルコキシホスホノアルキルアミノ、ジアラルコキシホスホノアルキルアミノ、ホスホノアルキルアミノ、ジアルコキシホスホノアルキル、ジアラルコキシホスホノアルキル、グアニジノ、アミジノ、およびアシルアミノで場合により置換されてもよい）を有する化合物またはその医薬上許容しうる塩である、請求項１に記載の方法。
誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤が、

(２Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプ
テン酸，二塩酸塩，一水和物；

(２Ｓ,５Ｅ／Ｚ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩；

(２Ｓ,５Ｚ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩；

(２Ｓ,５Ｚ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩，二水和物；

(２Ｒ,５Ｅ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩，一水和物；

(２Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩，一水和物；および

(２Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−ヒドロキシイミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸、
または、それらの医薬上許容しうる塩からなる群より選ばれる、請求項１９に記載の方法。
誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤が、

(２Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−Ｎ−（１Ｈ−テトラゾール−５−イル）５−ヘプテンアミド，二塩酸塩、
または、その医薬上許容しうる塩である、請求項１に記載の方法。
誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤が、式II

［式中、Ｘは、−Ｓ−、−Ｓ(Ｏ)−および−Ｓ(Ｏ)₂−からなる群より選ばれ、Ｒ¹²は、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₂−Ｃ₆アルケニル、Ｃ₂−Ｃ₆アルキニル、Ｃ₁−Ｃ₅アルコキシ−Ｃ₁アルキル、およびＣ₁−Ｃ₅アルキルチオ−Ｃ₁アルキルからなる群より選ばれ、その際、これらの基は、それぞれ−ＯＨ、アルコキシおよびハロゲンからなる群より選ばれる１個以上の置換基によって場合により置換されており、Ｒ¹⁸は、−ＯＲ²⁴および−Ｎ(Ｒ²⁵)(Ｒ²⁶)からなる群より選ばれ、そしてＲ¹³は、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃ(Ｏ)−Ｒ²⁷、−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ²⁸および−Ｃ(Ｏ)−Ｓ−Ｒ²⁹からなる群より選ばれるか；またはＲ¹⁸は−Ｎ(Ｒ³⁰)−であり、そしてＲ¹³は−Ｃ(Ｏ)−であり、ここでＲ¹⁸およびＲ¹³は、それらが結合している原子と一緒になって環を形成するか；またはＲ¹⁸は−Ｏ−であり、そしてＲ¹³は−Ｃ(Ｒ³¹)(Ｒ³²)−であり、ここでＲ¹⁸およびＲ¹³は、それらが結合している原子と一緒になって環を形成し、その際、Ｒ¹³が、−Ｃ(Ｒ³¹)(Ｒ³²)−である場合、Ｒ¹⁴は−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ³³であり、さもなければＲ¹⁴は−Ｈであり、Ｒ¹¹、Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶、およびＲ¹⁷は、独立して−Ｈ、ハロゲン、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₂−Ｃ₆アルケニル、Ｃ₂−Ｃ₆アルキニルおよびＣ₁−Ｃ₅アルコキシ−Ｃ₁アルキルからなる群より選ばれ、Ｒ¹⁹およびＲ²⁰は、独立して−Ｈ、Ｃ₁−Ｃ₆アルキル、Ｃ₂−Ｃ₆アルケニル、Ｃ₂−Ｃ₆アルキニルおよびＣ₁−Ｃ₅アルコキシ−Ｃ₁アルキルからなる群より選ばれ、Ｒ²¹は、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ³⁴および−Ｃ(Ｏ)−Ｓ−Ｒ³⁵からなる群より選ばれ、そしてＲ²²は、−Ｈ、−ＯＨ、−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ³⁶および−Ｃ(Ｏ)−Ｓ−Ｒ³⁷からなる群より選ばれるか；またはＲ²¹は−Ｏ−であり、そしてＲ²²は−Ｃ(Ｏ)−であり、ここでＲ²¹およびＲ²²は、それらが結合している原子と一緒になって環を形成するか；またはＲ²¹は−Ｃ(Ｏ)−であり、そしてＲ²²は−Ｏ−であり、ここでＲ²¹およびＲ²²は、それらが結合している原子と一緒になって環を形成し、Ｒ²³は、Ｃ₁アルキルであり、Ｒ²⁴は、−ＨおよびＣ₁−Ｃ₆アルキルからなる群より選ばれ、その際、Ｒ²⁴がＣ₁−Ｃ₆アルキルである場合、Ｒ²⁴は、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群より選ばれる１個以上の基によって場合により置換されており、Ｒ²⁵は、−Ｈ、アルキルおよびアルコキシからなる群より選ばれ、そしてＲ²⁶は、−Ｈ、−ＯＨ、アルキル、アルコキシ、−Ｃ(Ｏ)−Ｒ³⁸、−Ｃ(Ｏ)−Ｏ−Ｒ³⁹および−Ｃ(Ｏ)−Ｓ−Ｒ⁴⁰からなる群より選ばれ；その際、Ｒ²⁵およびＲ²⁶が独立してアルキルまたはアルコキシである場合、Ｒ²⁵およびＲ²⁶は、独立してシクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群より選ばれる１個以上の基で場合により置換されているか；またはＲ²⁵は−Ｈであり；そしてＲ²⁶はシクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群より選ばれ、Ｒ²⁷、Ｒ²⁸、Ｒ²⁹、Ｒ³⁰、Ｒ³¹、Ｒ³²、Ｒ³³、Ｒ³⁴、Ｒ³⁵、Ｒ³⁶、Ｒ³⁷、Ｒ³⁸、Ｒ³⁹およびＲ⁴⁰は、独立して−Ｈおよびアルキルからなる群より選ばれ、その際、アルキルは、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群より選ばれる１個以上の基によって場合により置換されており、ここでＲ¹¹、Ｒ¹²、Ｒ¹³、Ｒ¹⁴、Ｒ¹⁵、Ｒ¹⁶、Ｒ¹⁷、Ｒ¹⁸、Ｒ¹⁹、Ｒ²⁰、Ｒ²¹、Ｒ²²、Ｒ²³、Ｒ²⁴、Ｒ²⁵、Ｒ²⁶、Ｒ²⁷、Ｒ²⁸、Ｒ²⁹、Ｒ³⁰、Ｒ³¹、Ｒ³²、Ｒ³³、Ｒ³⁴、Ｒ³⁵、Ｒ³⁶、Ｒ³⁷、Ｒ³⁸、Ｒ³⁹およびＲ⁴⁰のいずれかが独立してアルキル、アルケニル、アルキニル、アルコキシ、アルキルチオ、シクロアルキル、ヘテロシクリル、アリールおよびヘテロアリールからなる群より選ばれる基である場合、その基は、−ＯＨ、アルコキシおよびハロゲンからなる群より選ばれる１個以上の置換基によって場合により置換されている］に相当する構造を有する化合物またはその医薬上許容しうる塩である、請求項１に記載の方法。
誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤が、

Ｓ−[２−[(１−イミノエチル)アミノ]エチル]−２−メチル−Ｌ−システイン；

２−[[[２−[(１−イミノエチル)アミノ]エチル]チオ]メチル]−Ｏ−メチル−Ｄ−セリン，二塩酸塩；

Ｓ−[(１Ｒ)−２−[(１−イミノエチル)アミノ]−１−メチルエチル]−２−メチル−Ｌ−システイン，二塩酸塩；

Ｓ−[(１Ｓ)−２−[(１−イミノエチル)アミノ]−１−メチルエチル]−２−メチル−Ｌ−システイン，二塩酸塩；

Ｓ−[２−[(１−イミノエチル)アミノ]エチル]−２−エチル−Ｌ−システイン，二塩酸塩；

２−[[[[２−(１−イミノエチル)アミノ]エチル]チオ]メチル]−Ｄ−バリン，二塩酸塩；

Ｓ−[２−(１−イミノエチルアミノ)エチル]−２−メチル−(Ｄ／Ｌ)−システイン，ビストリフルオロアセテート；

(２Ｒ)−２−アミノ−３[[２−[(１−イミノエチル)アミノ]エチル]スルフィニル]−２−メチルプロパン酸，二塩酸塩；および

(２Ｒ)−２−アミノ−３[[２−[(１−イミノエチル)アミノ]エチル]スルホニル]−２−メチルプロパン酸，二塩酸塩；
または、それらの医薬上許容しうる塩からなる群より選ばれる、請求項２２に記載の方法。
誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤が、式III

（式中、Ｒ⁴¹は、Ｈまたはメチルであり；そしてＲ⁴²はＨまたはメチルである）によって表される化合物である、請求項１に記載の方法。
誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤が、

(２Ｓ,５Ｚ)−２−アミノ−６−メチル−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプタン酸，二塩酸塩；

(２Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−６−メチル−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプタン酸，二塩酸塩；

(２Ｓ,５Ｚ)−２−アミノ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプタン酸，二塩酸塩；および

(２Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプタン酸，二塩酸塩；
または、それらの医薬上許容しうる塩からなる群より選ばれる、請求項２４に記載の方法。
誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤が式IV

の化合物またはその医薬上許容しうる塩である、請求項１に記載の方法。
誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤が

(αＲ,２Ｓ)−α−アミノヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−ヘキサン酸，三水和物，塩酸塩；

(αＳ,２Ｒ)−α−アミノヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−ヘキサン酸，三水和物，塩酸塩；

(αＳ,２Ｓ)−α−アミノヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−ヘキサン酸，三水和物，塩酸塩；

(αＲ,２Ｓ)−α−アミノヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−ヘキサン酸，三水和物，塩酸塩；

(αＳ,２Ｓ)−α−アミノヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−ヘキサン酸，三水和物，塩酸塩；

(２Ｓ,４Ｚ)−２−アミノ−６−[(２Ｒ)−ヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−イル]−４−ヘキサン酸、および

(２Ｓ,４Ｅ)−２−アミノ−６−[(２Ｒ)−ヘキサヒドロ−７−イミノ−１Ｈ−アゼピン−２−イル]−４−ヘキサン酸、
または、それらの医薬上許容しうる塩からなる群より選ばれ
る、請求項２６に記載の方法。
誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤が、式Ｖ

（式中、Ｒ⁴³は、水素、ハロ、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル、およびアルコキシまたは１個以上のハロによって置換されたＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群より選ばれ；
Ｒ⁴⁴は、水素、ハロ、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル、およびアルコキシまたは１個以上のハロによって置換されたＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群より選ばれ；
Ｒ⁴⁵は、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル、またはアルコキシもしくは１個以上のハロによって置換されたＣ₁−Ｃ₅アルキルである）の化合物またはその医薬上許容しうる塩である、請求項１に記載の方法。
誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤が、

(Ｅ)−２−アミノ−２−メチル−６−[(１−イミノエチル)アミノ]−４−ヘキサン酸，二塩酸塩；

(Ｒ,Ｅ)−２−アミノ−２−メチル−６−[(１−イミノエチル)アミノ]−４−ヘキサン酸，二塩酸塩；および

(Ｓ,Ｅ)−２−アミノ−２−メチル−６−[(１−イミノエチル)アミノ]−４−ヘキサン酸，二塩酸塩；
または、それらの医薬上許容しうる塩からなる群より選ばれる、請求項２８に記載の方法。
誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤が、式VI

（式中、Ｒ⁴⁶は、Ｃ₁−Ｃ₅アルキルであり、該Ｃ₁−Ｃ₅アルキルはハロまたはアルコキシによって場合により置換されており、該アルコキシは１個以上のハロによって場合により置換されている）の化合物またはその医薬上許容しうる塩である、請求項１に記載の方法。
誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤が、

２−アミノ−２−メチル−６−[(１−イミノエチル)アミノ]−４−ヘキサン酸，二塩酸塩または、それらの医薬上許容しうる塩である、請求項３０に記載の方法。
誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤が、式VII

（式中、Ｒ⁴⁷は、水素、ハロ、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル、およびアルコキシまたは１個以上のハロによって置換されたＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群より選ばれ；
Ｒ⁴⁸は、水素、ハロ、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル、およびアルコキシまたは１個以上のハロによって置換されたＣ₁−Ｃ₅アルキルからなる群より選ばれ；
Ｒ⁴⁹は、Ｃ₁−Ｃ₅アルキル、またはアルコキシもしくは１個以上のハロによって置換されたＣ₁−Ｃ₅アルキルである）の化合物またはその医薬上許容しうる塩である、請求項１に記載の方法。
誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤が、

(２Ｒ／Ｓ,４Ｚ)−２−アミノ−２−メチル−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−４−ヘ
キサン酸，二塩酸塩；

(２Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−２−メチル−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩；

(２Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−２−メチル−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩；

(２Ｒ,５Ｅ)−２−アミノ−２−メチル−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩；

(２Ｒ／Ｓ,５Ｅ)−２−アミノ−２−メチル−６−フルオロ−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩；

(２Ｓ,５Ｚ)−２−アミノ−２−メチル−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩；および

(２Ｒ,５Ｚ)−２−アミノ−２−メチル−７−[(１−イミノエチル)アミノ]−５−ヘプテン酸，二塩酸塩；
または、それらの医薬上許容しうる塩からなる群より選ばれる、請求項３２に記載の方法。
誘導型一酸化窒素シンターザ阻害剤が、式Ｘ

（式中、Ｒ⁵⁵は、Ｃ₁−Ｃ₅アルキルであり、該Ｃ₁−Ｃ₅アルキルはハロまたはアルコキシによって場合により置換されており、該アルコキシは１個以上のハロによって場合により置換されている）の化合物またはその医薬上許容しうる塩である、請求項１に記載の方法。
誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤が、式XII

（式中、Ｒ⁷⁹は、Ｃ_1-4アルキル、Ｃ_3-4シクロアルキル、Ｃ_1-4ヒドロキシアルキルおよびＣ_1-4ハロアルキルより選ばれる）の化合物、またはその医薬上許容しうる塩である、請求項１に記載の方法。
誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤が、
Ｓ−((Ｒ)−２−(１−イミノエチルアミノ)プロピル)−Ｌ−システイン；
Ｓ−((Ｓ)−２−(１−イミノエチルアミノ)プロピル)−Ｌ−システイン；
Ｓ−((Ｒ／Ｓ)−２−(１−イミノエチルアミノ)プロピル)−Ｌ−システイン；
Ｓ−((Ｒ)−２−(１−イミノエチルアミノ)プロピル)−Ｄ−システイン；
Ｓ−((Ｓ)−２−(１−イミノエチルアミノ)プロピル)−Ｄ−システイン；
Ｓ−((Ｒ／Ｓ)−２−(１−イミノエチルアミノ)プロピル)−Ｄ−システイン；
Ｓ−((Ｒ／Ｓ)−２−(１−イミノエチルアミノ)ブチル)−Ｌ−システイン；
Ｓ−((Ｒ／Ｓ)−２−(１−イミノエチルアミノ，２−シクロプロピル)エチル)−Ｌ−システイン；および
Ｓ−((Ｒ／Ｓ)−２−(１−イミノエチルアミノ，３−ヒドロキシ)プロピル)−Ｌ−システイン、
または、それらの医薬上許容しうる塩からなる群より選ばれる、請求項３５に記載の方法。
誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤が、式XIII、式XIVまたは式XV：

または

〔式中、Ａは、−Ｒ⁵⁶、−ＯＲ⁵⁶、Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷、Ｐ(Ｏ) [Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷]₂、−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｃ(Ｏ)Ｒ⁵⁷、−Ｎ(Ｒ⁷⁶)Ｃ(Ｏ)ＯＲ⁵⁶、−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷⁶、−Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷¹、−Ｓ(Ｏ)_tＲ⁵⁶、−ＳＯ₂ＮＨＣ(Ｏ)Ｒ⁵⁶、−ＮＨＳＯ₂Ｒ⁷⁷、−ＳＯ₂ＮＨ(Ｒ⁵⁶)Ｈ、−Ｃ(Ｏ)ＮＨＳＯ₂Ｒ⁷⁷および−ＣＨ＝ＮＯＲ⁵⁶であり；
Ｘ、ＹおよびＺは、それぞれ独立してＮまたはＣ(Ｒ¹⁹)であり；
Ｕは、それぞれＮまたはＣ(Ｒ⁶⁰)であるが、但し、ＸがＮであり、ＺおよびＹがＣＲ⁷⁴である場合のみ、ＵはＮであり；
Ｖは、Ｎ(Ｒ⁵⁹)、Ｓ、ＯまたはＣ(Ｒ⁵⁹)Ｈであり；
Ｗは、それぞれＮまたはＣＨであり；
Ｑは、直接結合、−Ｃ(Ｏ)−、−Ｏ−、−Ｃ(＝Ｎ−Ｒ⁵⁶)−、Ｓ(Ｏ)_tおよび−Ｎ(Ｒ⁶¹)−からなる群より選ばれ；
ｍは、０または１〜４の整数であり；
ｎは、０または１〜３の整数であり；
ｑは、０または１であり；
ｒは、０または１であるが、但し、ＱおよびＶがヘテロ原子である場合、ｍ、ｑおよびｒは、全て０であることはできない；
Ａが−ＯＲ⁵⁶、Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｃ(Ｏ)Ｒ⁵⁷、−Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)ＯＲ⁵⁷、−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷⁶、−Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ) Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷¹、−Ｓ(Ｏ)_tＲ⁵⁶（ここで、ｔは０である)または−ＮＨＳＯ₂Ｒ⁷⁷である場合、ｎ、ｑおよびｒは、すべて０であることはできない；そしてＱがヘテロ原子であり、Ａが−ＯＲ⁵⁶、Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｃ(Ｏ)Ｒ⁵⁷、−Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)ＯＲ⁵⁷、−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷⁶、Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷¹、−Ｓ(Ｏ)_tＲ⁵⁶(ｔが０である場合)または−ＮＨＳＯ₂Ｒ⁷⁷である場合、ｍおよびｎは、両方０であることはできない；
ｔは、０、１または２であり；

は、場合により置換されたＮ−ヘテロシクリルであり；

は、場合により置換されたカルボシクリルまたは場合により置換されたＮ−ヘテロシクリルであり；
Ｒ⁵⁶およびＲ⁵⁷は、それぞれ独立して水素、場合により置換されたＣ₁−Ｃ₂₀アルキル、場合により置換されたシクロアルキル、−[Ｃ₀−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶⁴、−[Ｃ₂−Ｃ₈アルケニル]−Ｒ⁶⁴、−[Ｃ₂−Ｃ₈アルキニル]−Ｒ⁶⁴、−[Ｃ₂−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶⁵（ヒドロキシによって場合により置換されている)、−[Ｃ₁−Ｃ₈]−Ｒ⁶⁶（ヒドロキシによって場合により置換されている)、場合により置換されたヘテロシクリルからなる群より選ばれるか；
またはＲ⁵⁶およびＲ⁵⁷は、それらが結合している窒素原子と一緒になって場合により置換されたＮ−ヘテロシクリルであり；
Ｒ⁵⁸は、水素、アルキル、シクロアルキル、場合により置換されたアリール、ハロアルキル、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶³、−[Ｃ₂−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶⁵、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶⁶、およびヘテロシクリル（ハロ、アルキル、アルコキシおよびイミダゾリルからなる群より選ばれる１個以上の置換基によって場合により置換されている)からなる群より選ばれるか；
またはＱが−Ｎ(Ｒ⁵⁸)−、またはＲ⁵⁸への直接結合である場合、Ｒ⁵⁸は、さらにアミノカルボニル、アルコキシカルボニル、アルキルスルホニル、モノアルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニルおよび−Ｃ(＝ＮＲ⁷³)−ＮＨ₂であってもよく；
または−Ｑ−Ｒ⁵⁸は一緒になって、−Ｃ(Ｏ)ＯＨ、−Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷または

を表し；
Ｒ⁵⁹は、水素、アルキル、アリール、アラルキルおよびシクロアルキルからなる群より
選ばれるが；
但し、Ａが−Ｒ⁵⁶または−ＯＲ⁵⁶である場合、Ｒ⁵⁹は水素であることはできず、そしてＶがＣＨである場合、Ｒ⁵⁹はさらにヒドロキシであってもよく；
Ｒ⁶⁰は、水素、アルキル、アリール、アラルキル、ハロアルキル、場合により置換されたアラルキル、場合により置換されたアリール、−ＯＲ⁷¹、−Ｓ(Ｏ)_t−Ｒ⁷¹、Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｒ⁷⁶、Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷¹、Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)ＯＲ⁷¹、Ｎ(Ｒ⁷¹)Ｃ(Ｏ)Ｒ⁷¹、−[Ｃ₀−Ｃ₈アルキル]−Ｃ(Ｈ)[Ｃ(Ｏ)Ｒ⁷¹]₂および−[Ｃ₀−Ｃ₈アルキル]−Ｃ(Ｏ)Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷¹からなる群より選ばれ；
Ｒ⁶¹は、水素、アルキル、シクロアルキル、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶³、−[Ｃ₂−Ｃ₈]アルキル]−Ｒ⁶⁵、−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶⁶、アシル、−Ｃ(Ｏ)Ｒ⁶³、−Ｃ(Ｏ)−−[Ｃ₁−Ｃ₈アルキル]−Ｒ⁶³、アルコキシカルボニル、場合により置換されたアリールオキシカルボニル、場合により置換されたアラルコキシカルボニル、アルキルスルホニル、場合により置換されたアリール、場合により置換されたヘテロシクリル、アルコキシカルボニルアルキル、カルボキシアルキル、場合により置換されたアリールスルホニル、アミノカルボニル、モノアルキルアミノカルボニル、ジアルキルアミノカルボニル、場合により置換されたアリールアミノカルボニル、アミノスルホニル、モノアルキルアミノスルホニルジアルキルアミノスルホニル、アリールアミノスルホニル、アリールスルホニルアミノカルボニル、場合により置換されたＮ−ヘテロシクリル、−Ｃ(＝ＮＨ)−Ｎ(ＣＮ)Ｒ⁵⁶、−Ｃ(Ｏ)Ｒ⁷⁸−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁵⁷、−Ｃ(Ｏ)−Ｎ(Ｒ⁵⁶)Ｒ⁷⁸−Ｃ(Ｏ)ＯＲ⁵⁶からなる群より選ばれ；
Ｒ⁶³およびＲ⁶⁴は、それぞれ独立してハロアルキル、シクロアルキル(ハロ、シアノ、アルキルまたはアルコキシで場合により置換されている）、カルボシクリル（ハロ、アルキルおよびアルコキシからなる群から選ばれる１個以上の置換基で場合により置換されている）およびヘテロシクリル（アルキル、アラルキルまたはアルコキシで場合により置換されている）からなる群より選ばれ；
Ｒ⁶⁵は、それぞれハロ、アルコキシ、場合により置換されたアリールオキシ、場合により置換されたアラルコキシ、場合により置換されたＳ(Ｏ)_t−Ｒ⁷⁷、アシルアミノ、アミノ、モノアルキルアミノ、ジアルキルアミノ、（トリフェニルメチル）アミノ、ヒドロキシ、メルカプト、アルキルスルホンアミドからなる群より独立して選ばれ；
Ｒ⁶⁶は、それぞれ独立してシアノ、ジ（アルコキシ）アルキル、カルボキシ、アルコキシカルボニル、アミノカルボニル、モノアルキルアミノカルボニルおよびジアルキルアミノカルボニルからなる群より選ばれ；
Ｒ⁶⁷、Ｒ⁶⁸、Ｒ⁶⁹、Ｒ⁷⁰、Ｒ⁷²およびＲ⁷⁵は、それぞれ独立して水素またはアルキルであり；
Ｒ⁷¹は、それぞれ独立して水素、アルキル、場合により置換されたアリール、場合により置換されたアラルキルまたはシクロアルキルであり；
Ｒ⁷³は、水素、ＮＯ₂またはトルエンスルホニルであり；
Ｒ⁷⁴は、それぞれ独立して水素、アルキル（場合により、ヒドロキシで置換されている）、シクロプロピル、ハロまたはハロアルキルであり；
Ｒ⁷⁶は、それぞれ独立して水素、アルキル、シクロアルキル、場合により置換されたアリール、場合により置換されたアラルキル、−Ｃ(Ｏ)Ｒ⁷⁷または−ＳＯ₂Ｒ⁷⁷であるか；
またはＲ⁷⁶は、Ｒ⁵⁶と共にそれらが結合している窒素と一緒になって場合により置換されたＮ−ヘテロシクリルであるか；
またはＲ⁷⁶は、Ｒ⁷¹と共にそれらが結合している窒素と一緒になって場合により置換されたＮ−ヘテロシクリルであり；
Ｒ⁷⁷は、それぞれ独立してアルキル、シクロアルキル、場合により置換されたアリールまたは場合により置換されたアラルキルであり；
そしてＲ⁷⁸はアミノ酸残基である〕
の化合物、またはそれらの医薬上許容しうる塩である、請求項１に記載の方法。
誘導型一酸化窒素シンターゼ阻害剤が、ＰＰＡ２５０

またはその医薬上許容しうる塩である、請求項１に記載の方法。