JP2005511540A - インドリノン化合物を用いる急性骨髄性白血病の治療 - Google Patents

Abstract

ＦＬＴ−３−ＩＴＤがポジティブである患者において急性骨髄性白血病を治療する方法が記載される。治療は，本明細書において定義される式ＩまたはＩＩの化合物を投与することにより行う。

Description

関連出願
本出願は，米国特許仮出願６０／３３０，６２３に基づく優先権を主張し，この出願はその全体を本明細書の一部としてここに引用する。

発明の分野
本発明は，インドリノン化合物を投与することにより急性骨髄性白血病を治療する方法に関する。急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）は，血液および骨髄中で癌性細胞が発生する疾病である。治療されないＡＭＬは不治の疾病であり，生存期間の中央値は３ヶ月である。ＦＬＴ−３−ＩＴＤ（内部タンデム重複）ポジティブのＡＭＬを有する患者は，典型的には伝統的な化学療法に対して低い応答を示す。本発明は，式ＩまたはＩＩのインドリノン化合物を投与することにより，ＡＭＬ患者，および好ましくはＦＬＴ−３−ＩＴＤがポジティブであるがＦＬＴ−３−ＩＴＤに限定されない患者を治療することに関する。本発明はまた，ＦＬＴ−３のリン酸化を阻害する方法に関する。

急性骨髄性白血病は，急性非リンパ性白血病とも称され，血液および骨髄中に非常に多くの未成熟白血球が見いだされる癌の一種である。これらの未成熟細胞は，芽球とも称され，感染と戦う成熟した細胞に発生することができなかったものである。

ＡＭＬの治療法の進歩により，完全緩解率が実質的に改良されている。部分緩解は実質的な生存の利点を提供しないため，治療は完全な緩解を達成するよう積極的に行う。ＡＭＬを有する成人の約６０％−７０％が，適切な誘導療法の後に完全な緩解状態を獲得すると予測することができる。ＡＭＬを有する成人の１５％以上（完全な緩解を獲得した者の約２５％）が３年またはそれ以上生存し，おそらくは治癒すると予測することができる。成人ＡＭＬにおける緩解率は年齢と逆相関し，６０歳より若い者については，予測緩解率は６５％より高い。データによれば，一旦獲得した後の緩解の持続は，より高齢の患者においてはより短いかもしれないことが示唆される。誘導の間の罹患率および死亡率の上昇は，年齢と直接関係しているようである。他の有害な予後因子には，中枢神経系の白血病への関与，診断時における全身感染，白血球数の上昇（＞１００，０００／ｍｍ³），治療誘導性ＡＭＬ，および脊髄形成異常症候群の病歴が含まれる。造血幹細胞移植を受けていない再発患者の５年無病生存率は５％より低い。

ヒト白血病において，レセプターチロシンキナーゼ（ＲＴＫ），例えば，ｃＫＩＴ，ＰＤＧＦＲβおよびＦＬＴ−３の変異が見いだされている。ＦＬＴ−３の変異には，任意のＦＬＴ−３遺伝子配列への任意の変化が含まれ，例えば，点突然変異，欠失，挿入，内部タンデム重複，多型などがある。ＦＬＴ−３における既知の変異の一例は，ヒトＦＬＴ−３中のアミノ酸残基８３５における点突然変異であり，Ａｂｕ−Ｄｕｈｉｅｒらの報告（Ｂｒ Ｊ Ｈａｅｍａｔｏｌ ２００１ Ｊｕｎ；１１３（４）：９８３−８，Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ ｎｏｖｅｌ ＦＬＴ−３ Ａｓｐ８３５ ｍｕｔａｔｉｏｎｓ ｉｎ ａｄｕｌｔ ａｃｕｔｅ ｍｙｅｌｏｉｄ ｌｅｕｋａｅｍｉａ，Ａｂｕ−ＤｕｈｉｅｒＦＭ，Ｇｏｏｄｅｖｅ ＡＣ，Ｗｉｌｓｏｎ ＧＡ，Ｃａｒｅ ＲＳ，Ｐｅａｋｅ ＩＲ，Ｒｅｉｌｌｙ ＪＴ）によれば，これは約７％の患者で同定されている。この変異は，ＦＬＴ−３の活性化ループ中にあり，他のチロシンキナーゼレセプター，例えばｃ−ｋｉｔとのホモロジーに基づいて，構成的活性化を引き起こすようである。

ＦＬＴ−３遺伝子の傍膜（ＪＭ）ドメインコーディング配列の内部タンデム重複（ＩＴＤ）は，最も頻繁に生ずる変異の１つである（ＡＭＬ患者の２５％−３０％）。ＩＴＤは内部タンデム重複であり，傍膜ドメインにおいて見いだされる変異であり，反復のサイズはさまざまであるが，重複配列は常にインフレームで現れる。ＦＬＴ−３変異体は，急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を有する患者の一部，および脊髄形成異常症候群の症例の３％において見いだされるが，慢性骨髄性白血病およびリンパ性悪性腫瘍においてはよりまれなようである。ＦＬＴ−３遺伝子の変異の存在は，高い末梢白血球数と相関している。ＦＬＴ−３遺伝子のＩＴＤはしばしば，ＭＤＳの進行の間に，または最初の診断においてはＩＴＤを有していないＡＭＬの再発の際に出現する。このことは，ＦＬＴ−３変異が白血病の進行を促進することを示唆する。Ｚｈａｏら（Ｌｅｕｋｅｍｉａ，ｖｏｌ．１４，ｐａｇｅｓ ３７４−３７８（２０００））を参照。

ＦＬＴ−３（ｆｍｓ様チロシンキナーゼ３）は，クラスＩＩＩレセプターチロシンキナーゼのメンバーである。当業者は，ＦＬＴ−３が科学文献中では“ｆｌｋ２”とも称されていることを理解するであろう。本明細書において用いる場合，“ＦＬＴ−３”とは，例えば，受託番号ｇｉ｜４７５８３９６｜ｒｅｆ｜ＮＰ＿００４１１０．１｜ｆｍｓ−ｒｅｌａｔｅｄ ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ ３［Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ］，またはｇｉ｜５４４３２０｜ｓｐ｜Ｐ３６８８８｜ＦＬＴ−３＿ＨＵＭＡＮ ＦＬ ＣＹＴＯＫＩＮＥ ＲＥＣＥＰＴＯＲ ＰＲＥＣＵＲＳＯＲ（ＴＹＲＯＳＩＮＥ−ＰＲＯＴＥＩＮＫＩＮＡＳＥ ＲＥＣＥＰＴＯＲ ＦＬＴ−３）（ＳＴＥＭ ＣＥＬＬ ＴＹＲＯＳＩＮＥ ＫＩＮＡＳＥ １）（ＳＴＫ−１）（ＣＤ１３５ ＡＮＴＩＧＥＮ），またはｇｉ｜４０９５７３｜ｇｂ｜ＡＡＡ１８９４７．１｜（Ｕ０２６８７）ｓｅｒｉｎｅ／ｔｈｒｅｏｎｉｎｅ ｐｒｏｔｅｉｎ ｋｉｎａｓｅ［Ｈｏｍｏ ｓａｐｉｅｎｓ］に記載される配列を有するポリペプチドを表す。最初の２つの配列についての対応するｍＲＮＡの受託番号は，ｇｉ｜４７５８３９５｜ｒｅｆ｜ＮＭ＿００４１１９．１｜Ｈｏｍｏｓａｐｉｅｎｓｆｍｓ−ｒｅｌａｔｅｄ ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ ３（ＦＬＴ−３），ｍＲＮＡｇｉ｜４０６３２２｜ｅｍｂ｜Ｚ２６６５２．１｜ＨＳＦＬＴ−３ＲＴＫ Ｈ．ｓａｐｉｅｎｓＦＬＴ−３ ｍＲＮＡ ｆｏｒ ＦＬＴ−３ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅである。ＦＬＴ−３の概説については，Ｇｉｌｌｉｌａｎｄ，Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｏｐｉｎ．Ｈｅｍａｔｏｌ．９（４）２７６−２８１ Ｊｕｌｙ ２００２を参照。

Ｚｈａｏら（Ｌｅｕｋｅｍｉａ（２０００））はさらに，変異体ＦＬＴ−３でトランスフォームしたネズミ白血病のチロシンキナーゼ阻害剤を用いるインビボ治療を開示する。治療プロトコルの開発において，Ｚｈａｏは，トランスフォームした３２Ｄ細胞（ＩＬ−３依存性ネズミ細胞株）のインビトロ成長抑制におけるチロシンキナーゼ阻害剤の使用を研究した。

レセプターチロシンキナーゼＦＬＴ−３の内部タンデム重複（ＩＴＤ）変異は，急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を有する患者の２０−３０％に見いだされている。例えば，Ｌｅｖｉｓ ｅｔ ａｌ．，Ｂｌｏｏｄ，ｖｏｌ．９８，ｐａｇｅｓ ８８５−８８７（２００１）を参照。当業者は，ＡＭＬ患者からのゲノムＤＮＡのＰＣＲおよびゲル電気泳動試験を用いて，ＦＬＴ−３−ＩＴＤポジティブの患者を診断することが容易であることを理解するであろう。Ａｂｕ−Ｄｕｈｉｅｒ ｅｔ ａｌ．，Ｂｒｉｔｉｓｈ Ｊ．ｏｆ Ｈｅａｍｏｔｏｌｏｇｙ，Ｖｏｌ．１１，ｐａｇｅｓ １９０−１９５（２０００）を参照。ＦＬＴ−３遺伝子は，造血幹細胞の増殖および分化を制御するチロシンキナーゼレセプターをコードする。Ｌｅｖｉｓは，これらの変異体がレセプターを構成的に活性化し，化学療法に対する応答の低さと関連するようであることを開示する。証拠によれば，この構成的活性化は白血病誘発性であり，このためこのレセプターは特異的治療法のための潜在的標的であることが示唆される。

ＩＴＤ変異体ＦＬＴ−３を有する患者は，非ＩＴＤ変異体患者と比較して，予後が悪く，再発率が高く，慣用的な治療の後の全体の生存が低いことが知られている。ＡＭＬの現在の治療法は，患者の応答率が低く，毒性プロファイルも低い。治療法は一般に非特異的であり，疾病細胞または悪性度を推進するメカニズムのみを標的とするものではない。細胞生存および増殖シグナルを媒介するＦＬＴ−３の阻害は，白血病性細胞を直接標的とし，シグナリングを阻害し，その結果，白血病性細胞集団を排除するであろう。

ＩＴＤ−ＡＭＬに悩む患者における改良された予後の必要性に基づいて，本発明者らは，有効量の式ＩまたはＩＩのチロシンキナーゼ阻害剤を投与することにより急性骨髄性白血病を治療する方法を開発した。

本発明の１つの態様は，急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を治療する方法に関し，該方法は，有効量の式Ｉ：

［式中，
Ｒは，独立して，Ｈ，ＯＨ，アルキル，アリール，シクロアルキル，ヘテロアリール，アルコキシ，複素環およびアミノであり；
各Ｒ₁は，独立して，アルキル，ハロ，アリール，アルコキシ，ハロアルキル，ハロアルコキシ，シクロアルキル，ヘテロアリール，複素環，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈，−ＮＲ₉Ｒ₁₀，−ＮＲ₉Ｃ（Ｏ）−Ｒ₁₂および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ₉Ｒ₁₀からなる群より選択され；
各Ｒ₂は，独立して，アルキル，アリール，ヘテロアリール，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈，およびＳＯ₂Ｒ"からなる群より選択され，Ｒ"は，アルキル，アリール，ヘテロアリール，ＮＲ₉Ｎ₁₀またはアルコキシであり；
各Ｒ₅は，独立して，水素，アルキル，アリール，ハロアルキル，シクロアルキル，ヘテロアリール，複素環，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈および（ＣＨＲ）_rＲ₁₁からなる群より選択され；
ＸはＯまたはＳであり；
ｊは０−１であり；
ｐは０−３であり；
ｑは０−２であり；
ｒは０−３であり；
Ｒ₈は，−ＯＨ，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択され；
Ｒ₉およびＲ₁₀は，独立して，Ｈ，アルキル，アリール，アミノアルキル，ヘテロアリール，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択されるか，または，Ｒ₉およびＲ₁₀は，Ｎと一緒になって環を形成してもよく，環原子はＣ，Ｎ，ＯおよびＳからなる群より選択され；
Ｒ₁₁は，−ＯＨ，アミノ，一置換アミノ，二置換アミノ，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択され；
Ｒ₁₂は，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択され；
Ｚは，
−ＯＨ；
−Ｏ−アルキル；
−ＮＲ₃Ｒ₄（Ｒ₃およびＲ₄は，独立して，水素，アルキル，アリール，ヘテロアリール，シクロアルキル，および複素環からなる群より選択されるか，または，Ｒ₃およびＲ₄は，Ｎと一緒になって環を形成してもよく，環原子は，ＣＨ₂，Ｎ，ＯおよびＳからなる群より選択される）；または

［式中，
Ｙは，独立して，ＣＨ₂，Ｏ，ＮまたはＳであり；
ＱはＣまたはＮであり；
ｎは，独立して，０−４であり；および
ｍは，０−３である］
である］
の化合物またはその塩を，そのような治療を必要とする患者に投与することを含む。

本発明の１つの態様においては，治療を必要とする患者に投与される式ＩまたはＩＩの化合物において，Ｒ₁は，ハロ（例えば，ＦおよびＣｌ）であり，ｐは１である。

別の態様においては，式ＩまたはＩＩのＺは−ＮＲ₃Ｒ₄であり，ここで，Ｒ₃およびＲ₄はモルホリン環を形成する。

別の態様においては，式ＩまたはＩＩのＺは以下の基：

［式中，各ＹはＣＨ₂であり，各ｎは２であり，ｍは０であり，Ｒ₃およびＲ₄はモルホリン環を形成する］
である。

先に記載された態様の任意のものにおいて，Ｒ₂はメチルであり，ｑは２であり，ここで，メチルは式ＩまたはＩＩの３位および５位で結合している。

好ましい態様においては，患者に投与される化合物は，式ＩＩ：

［式中，変数は上で定義したとおりである］
の化合物である。

本発明の特定の態様においては，投与される化合物は，以下の群：

［式中，ＸはＦ，Ｃｌ，ＩまたはＢｒである］
からなる群より選択される。好ましい態様においては，ＸはＦである。

本発明の１つの態様においては，患者集団は，ＦＬＴ−３−ＩＴＤポジティブまたはＦＬＴ−３野生型ポジティブまたは他のＦＬＴ−３変異のヒト患者を含む。

本発明の特定の態様においては，式Ｉの化合物は，以下の群：

からなる群より選択される。

本発明の別の態様は，ＦＬＴ−３のリン酸化を阻害する方法に関し，該方法は，阻害量の式Ｉ：

［式中，
Ｒは，独立して，Ｈ，ＯＨ，アルキル，アリール，シクロアルキル，ヘテロアリール，アルコキシ，複素環およびアミノであり；
各Ｒ₁は，独立して，アルキル，ハロ，アリール，アルコキシ，ハロアルキル，ハロアルコキシ，シクロアルキル，ヘテロアリール，複素環，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈，−ＮＲ₉Ｒ₁₀，−ＮＲ₉Ｃ（Ｏ）−Ｒ₁₂および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ₉Ｒ₁₀からなる群より選択され；
各Ｒ₂は，独立して，アルキル，アリール，ヘテロアリール，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈，およびＳＯ₂Ｒ"からなる群より選択され，Ｒ"は，アルキル，アリール，ヘテロアリール，ＮＲ₉Ｎ₁₀またはアルコキシであり；
各Ｒ₅は，独立して，水素，アルキル，アリール，ハロアルキル，シクロアルキル，ヘテロアリール，複素環，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈および（ＣＨＲ）_rＲ₁₁からなる群より選択され；
Ｘは，ＯまたはＳであり；
ｊは０−１であり；
ｐは０−３であり；
ｑは０−２であり；
ｒは０−３であり；
Ｒ₈は，−ＯＨ，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択され；
Ｒ₉およびＲ₁₀は，独立して，Ｈ，アルキル，アリール，アミノアルキル，ヘテロアリール，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択され，またはＲ₉およびＲ₁₀は，Ｎと一緒になって環を形成してもよく，環原子は，Ｃ，Ｎ，ＯおよびＳからなる群より選択され；
Ｒ₁₁は，−ＯＨ，アミノ，一置換アミノ，二置換アミノ，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択され；
Ｒ₁₂は，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択され；
Ｚは，
−ＯＨ；
−Ｏ−アルキル；
−ＮＲ₃Ｒ₄（Ｒ₃およびＲ₄は，独立して，水素，アルキル，アリール，ヘテロアリール，シクロアルキル，および複素環からなる群より選択され，またはＲ₃およびＲ₄は，Ｎと一緒になって環を形成してもよく，環原子は，ＣＨ₂，Ｎ，ＯおよびＳからなる群より選択される）；または

［式中，
Ｙは，独立して，ＣＨ₂，Ｏ，ＮまたはＳであり；
Ｑは，ＣまたはＮであり；
ｎは，独立して，０−４であり；および
ｍは０−３である］
である］
の化合物またはその塩を，そのような治療を必要とする患者に投与することを含む。

本発明の１つの態様においては，ＦＬＴ−３は変異体ＦＬＴ−３または野生型ＦＬＴ−３である。特に，ＦＬＴ−３変異体はＦＬＴ−３−ＩＴＤである。

図面の簡単な説明
図１は，カスパーゼ３で染色した細胞株のＦＡＣＳプロファイルである。

図２は，ＰＡＲＰ切断のウエスタンブロットを示し，ＦＬＴ−３−ＩＴＤ変異体の細胞が化合物１に誘導されるアポトーシスに対して野生型よりも影響を受けやすいことが示される。

図３は，ＦＬＴ−３免疫沈殿後のホスホチロシンのウエスタンブロットを示し，化合物１が野生型および変異体−ＩＴＤ ＦＬＴ−３の両方を阻害することが示される。

図４ａは，ＦＬＴ−３免疫沈殿後のホスホチロシンのウエスタンブロットを示し，化合物１が異種移植片モデルにおいてＦＬＴ−３−ＩＴＤのリン酸化を阻害することが示される。図４ｂは，薬剤治療後の時間に対する腫瘍サイズを示すグラフである。

図５は，化合物１を種々の投与量で与えた後の生存のパーセントを示す。

発明の詳細な説明
式ＩおよびＩＩの化合物は，ＡＭＬを有する患者の治療に有用である。特に，これらは，ＡＭＬを有しＦＬＴ−３−ＩＴＤポジティブである患者の治療に有用である。さらに，式ＩまたはＩＩの化合物を投与することにより，肉腫，黒色腫，および固体腫瘍であると診断され，病態生理学によりＦＬＴ−３−ＩＴＤまたはＦＬＴ−３が悪性度に関連することが示されている患者を治療することができる。

本発明の１つの態様は，急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を治療する方法に関し，該方法は，有効量の式Ｉ：

［式中，
Ｒは，独立して，Ｈ，ＯＨ，アルキル，アリール，シクロアルキル，ヘテロアリール，アルコキシ，複素環およびアミノであり；
各Ｒ₁は，独立して，アルキル，ハロ，アリール，アルコキシ，ハロアルキル，ハロアルコキシ，シクロアルキル，ヘテロアリール，複素環，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈，−ＮＲ₉Ｒ₁₀，−ＮＲ₉Ｃ（Ｏ）−Ｒ₁₂および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ₉Ｒ₁₀からなる群より選択され；
各Ｒ₂は，独立して，アルキル，アリール，ヘテロアリール，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈およびＳＯ₂Ｒ"からなる群より選択され，Ｒ"は，アルキル，アリール，ヘテロアリール，ＮＲ₉Ｎ₁₀またはアルコキシであり；
各Ｒ₅は，独立して，水素，アルキル，アリール，ハロアルキル，シクロアルキル，ヘテロアリール，複素環，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈および（ＣＨＲ）_rＲ₁₁からなる群より選択され；
ＸはＯまたはＳであり；
ｊは０−１であり；
ｐは０−３であり；
ｑは０−２であり；
ｒは０−３であり；
Ｒ₈は，−ＯＨ，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択され；
Ｒ₉およびＲ₁₀は，独立して，Ｈ，アルキル，アリール，アミノアルキル，ヘテロアリール，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択されるか，またはＲ₉およびＲ₁₀は，Ｎと一緒になって環を形成してもよく，環原子は，Ｃ，Ｎ，ＯおよびＳからなる群より選択され；
Ｒ₁₁は，−ＯＨ，アミノ，一置換アミノ，二置換アミノ，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択され；
Ｒ₁₂は，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択され；
Ｚは，
−ＯＨ；
−Ｏ−アルキル；
−ＮＲ₃Ｒ₄（式中，Ｒ₃およびＲ₄は，独立して，水素，アルキル，アリール，ヘテロアリール，シクロアルキル，および複素環からなる群より選択されるか，またはＲ₃およびＲ₄は，Ｎと一緒になって環を形成してもよく，ここで，環原子は，ＣＨ₂，Ｎ，ＯおよびＳからなる群より選択される）；または

［式中，
Ｙは，独立して，ＣＨ₂，Ｏ，ＮまたはＳであり；
ＱはＣまたはＮであり；
ｎは，独立して，０−４であり；および
ｍは０−３である］
である］
の化合物またはその塩を，そのような治療を必要とする患者に投与することを含む。

本発明の別の態様においては，ＡＭＬの治療を必要とする患者に式Ｉの化合物を投与するが，ただし，化合物は３−［２，４−ジメチル−５−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピオン酸ではない。

本発明の別の態様においては，治療方法は，有効量の，以下の化合物：
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジエチルアミノ−エチル）−アミド（化合物１）；
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−アミド（化合物２）；
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミド（化合物３）；
（Ｓ）−５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド（化合物４）；
（Ｒ）−５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド（化合物５）；
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド（化合物６）；
５−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド（化合物７）；
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−エチルアミノ−エチル）−アミド（化合物８）；
３−［３，５−ジメチル−４−（４−モルホリン−４−イル−ピペリジン−１−カルボニル）−１Ｈ−ピロール−２−メチレン］−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オン（化合物９）；および
３−［５−メチル−２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピオン酸（化合物１０）
からなる群より選択される化合物をＡＭＬ患者に投与することを含む。

本発明の方法において有用な式ＩおよびＩＩの化合物を明確に記載するために，以下の定義が提供される。

"アルキル"とは，１−２０個の炭素原子（本明細書において数値範囲，例えば，"１−２０"という場合，基（この場合にはアルキル基）が，１個の炭素原子，２個の炭素原子，３個の炭素原子，以下同様に２０個までの炭素原子を含んでいてもよいことを意味する）の飽和脂肪族炭化水素ラジカルを表し，直鎖および分枝鎖の基を含む。１−４個の炭素原子を含むアルキル基は低級アルキル基と称される。前記低級アルキル基が置換基を有しない場合，これらは未置換低級アルキル基と称される。より好ましくは，アルキル基は，１−１０個の炭素原子を有する中程度の大きさのアルキル，例えば，メチル，エチル，プロピル，２−プロピル，ｎ−ブチル，イソブチル，ｔｅｒｔ−ブチル，ペンチル等である。最も好ましくは，これは１−４個の炭素原子を有する低級アルキル，例えば，メチル，エチル，プロピル，２−プロピル，ｎ−ブチル，イソブチル，またはｔｅｒｔ−ブチル等である。アルキル基は置換されていても置換されていなくてもよい。置換されている場合，置換基は，好ましくは，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルコキシ；互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基である１またはそれ以上の基，好ましくは，１，２または３個の基で任意に置換されていてもよいアリール；互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基である１またはそれ以上の基，好ましくは，１，２または３個の基で任意に置換されていてもよいアリールオキシ；環中に１−３個の窒素原子を有し，環中の炭素は，互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基である１またはそれ以上の基，好ましくは，１，２または３個の基で任意に置換されていてもよい６員のヘテロアリール；窒素，酸素およびイオウからなる群より選択される１−３個の複素原子を有し，基中の炭素および窒素原子は，互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基である１またはそれ以上の基，好ましくは，１，２または３個の基で任意に置換されていてもよい５員のヘテロアリール；窒素，酸素およびイオウからなる群より選択される１−３個の複素原子を有し，基中の炭素および窒素（存在する場合）原子は，互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基である１またはそれ以上の基，好ましくは，１，２または３個の基で任意に置換されていてもよい５員または６員の複素環；メルカプト；（未置換低級アルキル）チオ；互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたはアルコキシ基である１またはそれ以上の基，好ましくは，１，２または３個の基で任意に置換されていてもよいアリールチオ；シアノ，アシル，チオアシル，Ｏ−カルバミル，Ｎ−カルバミル，Ｏ−チオカルバミル，Ｎ−チオカルバミル，Ｃ−アミド，Ｎ−アミド，ニトロ，Ｎ−スルホンアミド，Ｓ−スルホンアミド，ＲＳ（Ｏ）−，ＲＳ（Ｏ）₂−，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ，ＲＣ（Ｏ）Ｏ−，および−ＮＲ₁₃Ｒ₁₄（Ｒ₁₃およびＲ₁₄は，独立して，水素，未置換低級アルキル，トリハロメチル，シクロアルキル，複素環および，互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基である１またはそれ以上，好ましくは，１，２または３個の基で任意に置換されていてもよいアリールからなる群より選択される）からなる群より独立して選択される１またはそれ以上，より好ましくは，１−３個，さらに好ましくは，１または２個の置換基である。

好ましくは，アルキル基は，ヒドロキシ；窒素，酸素およびイオウからなる群より選択される１−３個の複素原子を有し，基中の炭素および窒素（存在する場合）原子は，互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基である１またはそれ以上の基，好ましくは，１，２または３個の基で任意に置換されていてもよい５員または６員の複素環基；窒素，酸素およびイオウからなる群より選択される１−３個の複素原子を有し，基中の炭素および窒素原子は，互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基である１またはそれ以上の基，好ましくは，１，２または３個の基で任意に置換されていてもよい５員のヘテロアリール；環中に１−３個の窒素原子を有し，環中の炭素は，互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基である１またはそれ以上の基，好ましくは，１，２または３個の基で任意に置換されていてもよい６員のヘテロアリール；または−ＮＲ₁₃Ｒ₁₄（Ｒ₁₃およびＲ₁₄は，独立して，水素およびアルキルからなる群より選択される）からなる群より独立して選択される１または２個の置換基で置換されている。さらに好ましくは，アルキル基は，互いに独立して，ヒドロキシ，ジメチルアミノ，エチルアミノ，ジエチルアミノ，ジプロピルアミノ，ピロリジノ，ピペリジノ，モルホリノ，ピペラジノ，４−低級アルキルピペラジノ，フェニル，イミダゾリル，ピリジニル，ピリダジニル，ピリミジニル，オキサゾリル，トリアジニル等の１または２個の置換基で置換されている。

"シクロアルキル"とは，３−８員の全炭素単環，全炭素５員／６員または６員／６員縮合二環または縮合多環（“縮合”環系とは，系中の各環が系中の他の環と隣接する炭素原子の対を互いに共有することを意味する）基を表し，環の１またはそれ以上が１またはそれ以上の二重結合を含んでいてもよいが，完全に共役したπ電子系を有しない。

シクロアルキル基の例は，限定されないが，シクロプロパン，シクロブタン，シクロペンタン，シクロペンテン，シクロヘキサン，シクロヘキサジエン，アダマンタン，シクロヘプタン，シクロヘプタトリエン等である。シクロアルキル基は置換されていても置換されていなくてもよい。置換されている場合，置換基は，好ましくは，未置換低級アルキル，トリハロアルキル，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルコキシ；互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基の１またはそれ以上，好ましくは，１または２個の基で任意に置換されていてもよいアリール；互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基の１またはそれ以上，好ましくは，１または２個の基で任意に置換されていてもよいアリールオキシ；環中に１−３個の窒素原子を有し，環中の炭素は，互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基の１またはそれ以上，好ましくは，１または２個の基で任意に置換されていてもよい６員のヘテロアリール；窒素，酸素およびイオウからなる群より選択される１−３個の複素原子を有し，基の炭素および窒素原子は，互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基の１またはそれ以上，好ましくは，１または２個の基で任意に置換されていてもよい５員のヘテロアリール；窒素，酸素およびイオウからなる群より選択される１−３個の複素原子を有し，基の炭素および窒素（存在する場合）原子は，互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基の１またはそれ以上，好ましくは，１または２個の基で任意に置換されていてもよい５員または６員の複素環；メルカプト，（未置換低級アルキル）チオ；互いに独立して，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルキルまたは未置換低級アルコキシ基の１またはそれ以上，好ましくは，１または２個の基で任意に置換されていてもよいアリールチオ；シアノ，アシル，チオアシル，Ｏ−カルバミル，Ｎ−カルバミル，Ｏ−チオカルバミル，Ｎ−チオカルバミル，Ｃ−アミド，Ｎ−アミド，ニトロ，Ｎ−スルホンアミド，Ｓ−スルホンアミド，ＲＳ（Ｏ）−，ＲＳ（Ｏ）₂−，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ，ＲＣ（Ｏ）Ｏ−，および−ＮＲ₁₃Ｒ₁₄（上で定義したとおりである）からなる群より独立して選択される１またはそれ以上，より好ましくは，１または２個の置換基である。

"アルケニル"とは，少なくとも２個の炭素原子および少なくとも１個の炭素−炭素二重結合からなる，本明細書において定義される低級アルキル基を表す。代表的例には，限定されないが，エテニル，１−プロペニル，２−プロペニル，１−，２−，または３−ブテニル等が含まれる。

"アルキニル"とは，少なくとも２個の炭素原子および少なくとも１個の炭素−炭素三重結合からなる，本明細書において定義される低級アルキル基を表す。代表的例には，限定されないが，エチニル，１−プロピニル，２−プロピニル，１−，２−，または３−ブチニル等が含まれる。

"アリール"とは，完全に共役したπ電子系を有する，１−１２個の炭素原子の全炭素単環または縮合多環（すなわち，隣接する炭素原子の対を共有する環）基を表す。アリール基の例は，限定されないが，フェニル，ナフタレニルおよびアントラセニルである。アリール基は置換されていても置換されていなくてもよい。置換されている場合，置換基は，好ましくは，未置換低級アルキル，トリハロアルキル，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルコキシ，メルカプト，（未置換低級アルキル）チオ，シアノ，アシル，チオアシル，Ｏ−カルバミル，Ｎ−カルバミル，Ｏ−チオカルバミル，Ｎ−チオカルバミル，Ｃ−アミド，Ｎ−アミド，ニトロ，Ｎ−スルホンアミド，Ｓ−スルホンアミド，ＲＳ（Ｏ）−，ＲＳ（Ｏ）₂−，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ，ＲＣ（Ｏ）Ｏ−，および−ＮＲ₁₃Ｒ₁₄（Ｒ₁₃およびＲ₁₄は上で定義したとおりである）からなる群より独立して選択される，１またはそれ以上，より好ましくは，１，２，または３個，さらに好ましくは，１または２個の基である。好ましくは，アリール基は，ハロ，未置換低級アルキル，トリハロアルキル，ヒドロキシ，メルカプト，シアノ，Ｎ−アミド，モノまたはジアルキルアミノ，カルボキシ，またはＮ−スルホンアミドから独立して選択される１または２個の置換基で任意に置換されていてもよい。

"ヘテロアリール"とは，Ｎ，Ｏ，またはＳから選択される１，２，または３個の環複素原子を含み，残りの環原子はＣであり，さらに，完全に共役したπ電子系を有する５−１２個の環原子の単環または縮合環（すなわち，隣接する原子の対を共有する環）基を表す。未置換ヘテロアリール基の例は，限定されないが，ピロール，フラン，チオフェン，イミダゾール，オキサゾール，チアゾール，ピラゾール，ピリジン，ピリミジン，キノリン，イソキノリン，プリンおよびカルバゾールである。ヘテロアリール基は置換されていても置換されていなくてもよい。置換されている場合，置換基は，好ましくは，未置換低級アルキル，トリハロアルキル，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルコキシ，メルカプト，（未置換低級アルキル）チオ，シアノ，アシル，チオアシル，Ｏ−カルバミル，Ｎ−カルバミル，Ｏ−チオカルバミル，Ｎ−チオカルバミル，Ｃ−アミド，Ｎ−アミド，ニトロ，Ｎ−スルホンアミド，Ｓ−スルホンアミド，ＲＳ（Ｏ）−，ＲＳ（Ｏ）₂−，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ，ＲＣ（Ｏ）Ｏ−，および−ＮＲ₁₃Ｒ₁₄（Ｒ₁₃およびＲ₁₄は上で定義したとおりである）からなる群より独立して選択される１またはそれ以上，より好ましくは，１，２，または３個，さらに好ましくは，１または２個の基である。好ましくは，ヘテロアリール基は，ハロ，未置換低級アルキル，トリハロアルキル，ヒドロキシ，メルカプト，シアノ，Ｎ−アミド，モノまたはジアルキルアミノ，カルボキシ，またはＮ−スルホンアミドから独立して選択される１または２個の置換基で任意に置換されていてもよい。

"複素環"とは，環中に５−９個の環原子を有し，１または２個の環原子はＮ，Ｏ，またはＳ（Ｏ）ｎ（ｎは０−２の整数である）から選択される複素原子であり，残りの環原子はＣである単環または縮合環基を表す。環はまた１またはそれ以上の二重結合を有していてもよい。しかし，環は，完全に共役したπ電子系を有しない。未置換複素環の例は，限定されないが，ピロリジノ，ピペリジノ，ピペラジノ，モルホリノ，チオモルホリノ，ホモピペラジノ等である。複素環は，置換されていても置換されていなくてもよい。置換されている場合，置換基は，好ましくは，未置換低級アルキル，トリハロアルキル，ハロ，ヒドロキシ，未置換低級アルコキシ，メルカプト，（未置換低級アルキル）チオ，シアノ，アシル，チオアシル，Ｏ−カルバミル，Ｎ−カルバミル，Ｏ−チオカルバミル，Ｎ−チオカルバミル，Ｃ−アミド，Ｎ−アミド，ニトロ，Ｎ−スルホンアミド，Ｓ−スルホンアミド，ＲＳ（Ｏ）−，ＲＳ（Ｏ）₂−，−Ｃ（Ｏ）ＯＲ，ＲＣ（Ｏ）Ｏ−，および−ＮＲ₁₃Ｒ₁₄（Ｒ₁₃およびＲ₁₄は上で定義したとおりである）からなる群より独立して選択される１またはそれ以上，より好ましくは，１，２または３個，さらに好ましくは，１または２個の基である。

好ましくは，複素環基は，ハロ，未置換低級アルキル，トリハロアルキル，ヒドロキシ，メルカプト，シアノ，Ｎ−アミド，モノまたはジアルキルアミノ，カルボキシ，またはＮ−スルホンアミドから独立して選択される１または２個の置換基で任意に置換されていてもよい。

好ましくは，複素環基は，ハロ，未置換低級アルキル，トリハロアルキル，ヒドロキシ，メルカプト，シアノ，Ｎ−アミド，モノまたはジアルキルアミノ，カルボキシ，またはＮ−スルホンアミドから独立して選択される１または２個の置換基で任意に置換されていてもよい。

"ヒドロキシ"とは，−ＯＨ基を表す。

"アルコキシ"とは，−Ｏ−（未置換アルキル）および−Ｏ−（未置換シクロアルキル）基の両方を表す。代表的例には，限定されないが，例えば，メトキシ，エトキシ，プロポキシ，ブトキシ，シクロプロピルオキシ，シクロブチルオキシ，シクロペンチルオキシ，シクロヘキシルオキシ等が含まれる。

"アリールオキシ"とは，本明細書において定義される−Ｏ−アリールおよび−Ｏ−ヘテロアリール基の両方を表す。代表的例には，限定されないが，フェノキシ，ピリジニルオキシ，フラニルオキシ，チエニルオキシ，ピリミジニルオキシ，ピラジニルオキシ等，およびその誘導体が含まれる。

"メルカプト"とは，−ＳＨ基を表す。

"アルキルチオ"とは，−Ｓ−（未置換アルキル）および−Ｓ−（未置換シクロアルキル）基の両方を表す。代表的例には，限定されないが，例えば，メチルチオ，エチルチオ，プロピルチオ，ブチルチオ，シクロプロピルチオ，シクロブチルチオ，シクロペンチルチオ，シクロヘキシルチオ等が含まれる。

"アリールチオ"とは，本明細書において定義される−Ｓ−アリールおよび−Ｓ−ヘテロアリール基の両方を表す。代表的例には，限定されないが，フェニルチオ，ピリジニルチオ，フラニルチオ，チエニルチオ，ピリミジニルチオ等，およびその誘導体が含まれる。

"アシル"とは，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ"基（Ｒ"は，水素，未置換低級アルキル，トリハロメチル，未置換シクロアルキル；未置換低級アルキル，トリハロメチル，未置換低級アルコキシ，ハロおよび−ＮＲ₁₃Ｒ₁₄基からなる群より選択される１またはそれ以上，好ましくは，１，２または３個の置換基で任意に置換されていてもよいアリール；未置換低級アルキル，トリハロアルキル，未置換低級アルコキシ，ハロおよび−ＮＲ₁₃Ｒ₁₄基からなる群より選択される１またはそれ以上，好ましくは，１，２，または３個の置換基で任意に置換されていてもよいヘテロアリール（環炭素を介して結合）；および未置換低級アルキル，トリハロアルキル，未置換低級アルコキシ，ハロおよび−ＮＲ₁₃Ｒ₁₄基からなる群より選択される１またはそれ以上，好ましくは，１，２，または３個の置換基で任意に置換されていてもよい複素環（環炭素を介して結合）からなる群より選択される）を表す。代表的なアシル基には，限定されないが，アセチル，トリフルオロアセチル，ベンゾイル等が含まれる。

"アルデヒド"とは，Ｒ"が水素であるアシル基を表す。

"チオアシル"とは，−Ｃ（Ｓ）−Ｒ"基を表し，Ｒ"は本明細書において定義されるとおりである。

"エステル"とは，−Ｃ（Ｏ）Ｏ−Ｒ"基を表し，Ｒ"は本明細書において定義されるとおりであるが，ただし，Ｒ"は水素ではありえない。

"アセチル"基とは−Ｃ（Ｏ）ＣＨ₃基を表す。

"ハロ"基とは，フッ素，塩素，臭素またはヨウ素を表し，好ましくはフッ素または塩素を表す。

"トリハロメチル"基とは，−ＣＸ₃基を表し，ここで，Ｘは，本明細書において定義されるハロ基である。

"メチレンジオキシ"とは，−ＯＣＨ₂Ｏ−基を表し，ここで，２つの酸素原子は隣接する炭素原子と結合している。

"エチレンジオキシ"基とは，−ＯＣＨ₂ＣＨ₂Ｏ−を表し，ここで２つの酸素原子は隣接する炭素原子と結合している。

"Ｓ−スルホンアミド"とは，−Ｓ（Ｏ）₂ＮＲ₁₃Ｒ₁₄基を表し，Ｒ₁₃およびＲ₁₄は本明細書において定義されるとおりである。

"Ｎ−スルホンアミド"とは，−ＮＲ₁₃Ｓ（Ｏ）₂Ｒ基を表し，Ｒ₁₃およびＲは本明細書において定義されるとおりである。

"Ｏ−カルバミル"基とは，−ＯＣ（Ｏ）ＮＲ₁₃Ｒ₁₄基を表し，Ｒ₁₃およびＲ₁₄は本明細書において定義されるとおりである。

"Ｎ−カルバミル"とは，ＲＯＣ（Ｏ）ＮＲ₁₄−基を表し，ＲおよびＲ₁₄は本明細書において定義されるとおりである。

"Ｏ−チオカルバミル"とは，−ＯＣ（Ｓ）ＮＲ₁₃Ｒ₁₄基を表し，Ｒ₁₃およびＲ₁₄は本明細書において定義されるとおりである。

"Ｎ−チオカルバミル"とは，ＲＯＣ（Ｓ）ＮＲ₁₄−基を表し，ＲおよびＲ₁₄は本明細書において定義されるとおりである。

"アミノ"とは，Ｒ₁₃およびＲ₁₄が両方とも水素である−ＮＲ₁₃Ｒ₁₄を表す。

"Ｃ−アミド"とは，−Ｃ（Ｏ）ＮＲ₁₃Ｒ₁₄基を表し，Ｒ₁₃およびＲ₁₄は本明細書において定義されるとおりである。

"Ｎ−アミド"とは，ＲＣ（Ｏ）ＮＲ₁₄−基を表し，ＲおよびＲ₁₄は本明細書において定義されるとおりである。

"ニトロ"とは，−ＮＯ₂基を表す。

"ハロアルキル"とは，１またはそれ以上の同じまたは異なるハロ原子で置換された上述した未置換アルキル，好ましくは未置換低級アルキルを意味し，例えば，−ＣＨ₂Ｃｌ，−ＣＦ₃，−ＣＨ₂ＣＦ₃，−ＣＨ₂ＣＣｌ₃等である。

"アラルキル"とは，上で定義したアリール基で置換されている，上で定義した未置換アルキル，好ましくは未置換低級アルキルを意味し，例えば，−ＣＨ₂フェニル，−（ＣＨ₂）₂フェニル，−（ＣＨ₂）₃フェニル，ＣＨ₃ＣＨ（ＣＨ₃）ＣＨ₂フェニル等，およびその誘導体である。

"ヘテロアラルキル"基とは，ヘテロアリール基で置換されている，上で定義した未置換アルキル，好ましくは未置換低級アルキルを意味し，例えば，−ＣＨ₂ピリジニル，−（ＣＨ₂）₂ピリミジニル，−（ＣＨ₂）₃イミダゾリル等，およびその誘導体である。

"モノアルキルアミノ"とは，ラジカル−ＮＨＲ’（Ｒ’は上で定義した未置換アルキルまたは未置換シクロアルキル基である）を意味し，例えば，メチルアミノ，（１−メチルエチル）アミノ，シクロヘキシルアミノ等である。

"ジアルキルアミノ"とは，ラジカル−ＮＲ’Ｒ’（各Ｒ’は，独立して，上で定義した未置換アルキルまたは未置換シクロアルキル基である）を意味し，例えば，ジメチルアミノ，ジエチルアミノ，（１−メチルエチル）−エチルアミノ，シクロヘキシルメチルアミノ，シクロペンチルメチルアミノ等である。

"シアノアルキル"とは，１または２個のシアノ基で置換されている，上で定義した未置換アルキル，好ましくは未置換低級アルキルを意味する。

"任意"または"任意に"とは，次に記載されている事象または状況が生じてもよいがその必要はなく，その記述がその事象または状況が生じる場合および生じない場合を含むことを意味する。例えば，"アルキル基で任意に置換されていてもよい複素環基"とは，アルキルが存在してもよいがその必要はなく，この記述が，複素基がアルキル基で置換されている状況および複素環基がアルキル基で置換されていない状況を含むことを意味する。

"医薬組成物"とは，本明細書に記載される１またはそれ以上の化合物またはその生理学的に／薬学的に許容しうる塩またはプロドラッグと，他の化学成分，例えば，生理学的に／薬学的に許容しうる担体および賦形剤との混合物を表す。医薬組成物の目的は，化合物の生物への投与を容易にすることである。

式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物はまたプロドラッグとしても作用することができる。"プロドラッグ"とは，インビボで親薬剤に変換される薬剤を表す。プロドラッグは，場合により，親薬剤より投与が容易であるかもしれないため，しばしば有用である。例えば，プロドラッグは経口投与により生物学的に利用可能であるが，親薬剤はそうではない。プロドラッグはまた，親薬剤よりも医薬組成物中で改良された溶解性を有するかもしれない。プロドラッグの例は，限定されないが，エステル（"プロドラッグ"）として投与されて，水溶性であることが移動に不利である細胞膜の通過を容易にし，次に，水溶性であることが有利である細胞内に入った後，代謝的に加水分解されて活性種のカルボン酸となるような，本発明の化合物であろう。

プロドラッグのさらに別の例は，短いポリペプチド，例えば，限定されないが，末端アミノ基を介して本発明の化合物のカルボキシ基に結合した２−１０アミノ酸のポリペプチドであり，ポリペプチドはインビボで加水分解されるかまたは代謝されて活性分子を放出する。式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物のプロドラッグは本発明の範囲内である。

さらに，式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物が生物，例えばヒトの体内で酵素により代謝されて，代謝産物を生成し，これが蛋白質キナーゼの活性を調節しうることが企図される。そのような代謝産物は本発明の範囲内である。

本明細書において用いる場合，"生理学的に／薬学的に許容しうる担体"とは，生物に有意な刺激を引き起こさず，投与された化合物の生物学的活性および特性を排除しない担体または希釈剤を表す。

"薬学的に許容しうる賦形剤"とは，医薬組成物に添加して化合物の投与をさらに容易にする不活性物質を表す。賦形剤の例には，限定されないが，炭酸カルシウム，リン酸カルシウム，種々の糖および各種のデンプン，セルロース誘導体，ゼラチン，植物油およびポリエチレングリコールが含まれる。

本明細書において用いる場合，"薬学的に許容しうる塩"との用語は，親化合物の生物学的効力および特性を保持している塩を表す。そのような塩には，以下のものが含まれる：（ｉ）親化合物の遊離塩基を，例えば塩酸，臭化水素酸，硝酸，リン酸，硫酸，および過塩素酸等の無機酸と，または酢酸，シュウ酸，（Ｄ）または（Ｌ）リンゴ酸，マレイン酸，メタンスルホン酸，エタンスルホン酸，ｐ−トルエンスルホン酸，サリチル酸，酒石酸，クエン酸，コハク酸またはマロン酸等の有機酸と，好ましくは，塩酸または（Ｌ）−リンゴ酸と反応させることにより得られる酸付加塩，例えば，５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジエチルアミノエチル）アミドのＬ−リンゴ酸塩；または（２）親化合物中に存在する酸性プロトンが，金属イオン，例えば，アルカリ金属イオン，アルカリ土類イオンで置き換えられているか；または有機塩基，例えば，エタノールアミン，ジエタノールアミン，トリエタノールアミン，トロメタミン，Ｎ−メチルグルタミン等と配位している場合に形成される塩。

"方法"とは，所与の作業を遂行するための様式，手段，技術，および手順を表し，限定されないが，化学，薬理学，生物学，生化学，および医学的技術の従業者には周知の，あるいは該従業者によって既知の様式，手段，技術，および手順から容易に開発される様式，手段，技術，および手順を含む。

"インビボ"とは，生きている生物，例えば，限定されないが，マウス，ラットまたはウサギの中で行われる手順を表す。

"治療する"，"治療すること"および"治療"とは，急性骨髄性白血病，他の白血病，ＦＬＴ−３関連癌および／またはそれらに伴う症状を緩和または排除する方法を表す。式ＩまたはＩＩの化合物を用いて治療しうる白血病には，急性骨髄性白血病（ＡＭＬ），急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ），慢性骨髄性白血病（ＣＬＬ），慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ），脊髄形成異常症候群（ＭＤＳ），急性骨髄性単芽球白血病（ＡＭＭＯＬ），および急性単芽球白血病（ＡＭＯＬ）が含まれる。さらに，ＦＬＴ−３に関連する他のタイプの癌，例えば，限定されないが，白血病，リンパ腫，癌腫，骨髄腫，神経堤由来癌，肉腫および神経膠腫は，式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物を投与することにより治療することができるであろう。“治療する”との用語は，単に，ＡＭＬまたはＦＬＴ−３関連癌に罹患した固体の予測生存率が増加するか，または疾病の１またはそれ以上の症状が軽減することを意味する。

“ＦＬＴ−３関連癌”とは，急性骨髄性白血病（ＡＭＬ），急性リンパ球性白血病（ＡＬＬ），慢性骨髄性白血病（ＣＬＬ），慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ），脊髄形成異常症候群（ＭＤＳ），急性骨髄性単芽球白血病（ＡＭＭＯＬ），および急性単芽球白血病（ＡＭＯＬ）を含むが，これらに限定されない。

"患者"とは，少なくとも１つの細胞から構成される任意の生きた物体を表す。生きた生物は，例えば，単一の真核生物細胞程度の単純なものであってもよく，またはヒト等の哺乳動物程度の複雑なものであってもよい。

"治療上有効量"とは，治療される疾患の１またはそれ以上の症状をある程度予防，軽減，改善または緩和するであろう，投与される化合物の量を表す。癌の治療に関しては，治療上有効量は，腫瘍の大きさを減少させる；腫瘍の転移を阻害する（すなわち速度をある程度減じる，好ましくは停止する）；腫瘍の成長をある程度阻害する（すなわち速度をある程度減じる，好ましくは停止する）；芽球数を減少させる；および／または癌に関連する１またはそれ以上の症状をある程度緩和する（または，好ましくは除去する）という効果を有する量を表す。

投与および医薬組成物
本発明の方法は，式ＩまたはＩＩの化合物またはその薬学的に許容しうる塩をヒト患者に投与することを含む。あるいは，式ＩまたはＩＩの化合物は，上述の物質が適当な担体または賦形剤と混合されている医薬組成物中で投与することができる。薬剤の処方および投与の手法は，"Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，"Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．，Ｅａｓｔｏｎ，ＰＡ．，の最新版に見いだすことができる。

本明細書において用いる場合，"投与する"または"投与"とは，本発明の式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物またはその薬学的に許容しうる塩，または式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物またはその薬学的に許容しうる塩を含む医薬組成物を，ＡＭＬの治療の目的で生物にデリバリーすることを表す。

適当な投与経路には，限定されないが，経口，直腸内，経粘膜，または腸内投与，または筋肉内，皮下，骨髄内，髄腔内，直接心室内，静脈内，硝子体内，腹腔内，鼻腔内，または眼内注射が含まれる。好ましい投与経路は経口および非経口である。

あるいは，化合物は，全身的方法ではなく局所に，例えば化合物を固形腫瘍内に直接，しばしばデポ剤または持続放出処方中で注射することにより投与してもよい。

さらに，薬物はターゲティングされたドラッグデリバリーシステムにおいて，例えば腫瘍特異的抗体により被覆されたリポソーム中で投与してもよい。リポソームは腫瘍にターゲティングされ，選択的に取り込まれるであろう。

本発明の医薬組成物は，当該技術分野においてよく知られる方法，例えば，慣用の混合，溶解，顆粒化，糖衣作成，研和，乳化，カプセル封入，捕捉，または凍結乾燥により製造することができる。

本発明にしたがって使用するための医薬組成物は，活性化合物を薬剤として使用することができる製剤に加工することを容易にする賦形剤および補助剤を含む，１またはそれ以上の生理学的に許容しうる担体を用いて，慣用の方法で処方することができる。適切な処方は，選択される投与経路に依存する。

注射用には，本発明の化合物を水性溶液，好ましくはハンクス溶液，リンゲル溶液，または生理的食塩緩衝液等の生理学的に適合性の緩衝液中で処方することができる。経粘膜投与用には，浸透すべき障壁に適した浸透剤が処方に用いられる。そのような浸透剤は当該技術分野において一般に知られている。

経口投与のためには，活性化合物を当該技術分野においてよく知られる薬学的に許容しうる担体と混合することにより化合物を処方することができる。そのような担体は，本発明の化合物を，治療すべき患者による経口摂取のための錠剤，丸薬，糖衣剤，カプセル，液体，ゲル，シロップ，スラリー，懸濁液等として処方することを可能とする。経口で使用するための医薬製剤は，固体賦形剤を用いて，得られた混合物を任意にすりつぶし，所望の場合には適当な助剤を加えた後に，顆粒の混合物を加工して，錠剤または糖衣錠コアを得ることができる。適当な賦形剤には，特に，ラクトース，ショ糖，マンニトール，またはソルビトール等の糖類；トウモロコシデンプン，小麦デンプン，米デンプン，およびジャガイモデンプン等のセルロース製品，ゼラチン，トラガカントゴム，メチルセルロース，ヒドロキシプロピルメチルセルロース，カルボキシメチルセルロースナトリウム，および／またはポリビニルピロリドン（ＰＶＰ）等の増量剤などの賦形剤が含まれる。所望の場合には，架橋されたポリビニルピロリドン，寒天，またはアルギン酸等の崩壊剤を加えてもよい。アルギン酸ナトリウム等の塩を用いることもできる。

糖衣剤のコアは，適当なコーティングとともに供給される。この目的のためには，濃縮された糖溶液を用いることができる。これは，アラビアゴム，タルク，ポリビニルピロリドン，カルボポールゲル，ポリエチレングリコール，および／または二酸化チタン，ラッカー溶液，および適当な有機溶媒または溶媒混合物を任意に含むことができる。識別のため，あるいは活性化合物の用量の異なる組合せを特徴づけるため，染料または色素を錠剤または糖衣剤コーティングに添加してもよい。

経口で使用することができる医薬組成物は，ゼラチンから作成されるプッシュフィットカプセル，ならびにゼラチンおよびグリセロール，ソルビトール等の可塑剤から作成される密封軟カプセルを含む。プッシュフィットカプセルは，活性成分を，ラクトース等の増量剤，デンプン等の結合剤，および／またはタルクおよびステアリン酸マグネシウム等の潤滑剤，さらに任意に安定剤との混合物中に含むことができる。軟カプセルにおいては，活性化合物は脂肪油，流動パラフィン，または液体ポリエチレングリコール等の適当な液体中に溶解または懸濁することができる。これらの処方にはさらに安定剤を添加してもよい。

用いることができる医薬組成物にはまた，硬ゼラチンカプセルが含まれる。非限定的例として，カプセル経口薬剤製品処方中の化合物１は，５０および２００ｍｇの用量強度であることができる。２つの用量強度は，同じ顆粒から，異なるサイズの硬ゼラチンカプセルに，すなわち，５０ｍｇカプセル用にはサイズ３に，２００ｍｇカプセル用にはサイズ０に充填することにより，製造する。

カプセルは，褐色のガラスまたはプラスチック瓶中に包装して，活性化合物を光から保護することができる。活性化合物のカプセル処方を含む容器は調節された室温（１５−３０℃）で保存しなければならない。

吸入による投与用には，本発明に従って用いられる化合物は，噴射剤，例えば，ジクロロジフルオロメタン，トリクロロフルオロメタン，ジクロロテトラフルオロエタン，二酸化炭素または他の適当な気体を用いて，加圧されたパックまたはネブライザーからエアーゾルスプレイの形状で便利に輸送される。加圧されたエアーゾルの場合，用量単位は計量された量を送達するべく備えられたバルブにより調節することができる。例えば吸入器または注入器において使用するためのゼラチン製のカプセルおよびカートリッジは，化合物の粉末混合物と，ラクトースまたはデンプン等の適当な粉末基剤とを含むよう処方することができる。

化合物は，例えばボーラス注射または連続注入による非経口投与用に処方することができる。注射用の処方は，単位用量にて，例えばアンプルにて，あるいは添加された保存料と共に多用量容器中で提供することができる。組成物は油性または水性のベヒクル中で，懸濁液，溶液，または乳濁液等の形状をとることができ，懸濁剤，安定剤および／または分散剤等の製剤物質を含んでいてもよい。

非経口投与用の薬剤処方は，水溶性の形態の活性化合物の水性溶液を含む。さらに，活性化合物の懸濁液は，親油性ベヒクル中に製造することができる。適切な親油性ベヒクルには，ゴマ油等の脂肪油，オレイン酸エチルまたはトリグリセリド等の合成脂肪酸エステル，またはリポソーム等を含む。水性の注射用懸濁液は，カルボキシメチルセルロースナトリウム，ソルビトール，またはデキストラン等の，懸濁液の粘度を増加させる物質を含んでいてもよい。任意に，懸濁液はまた，高度に濃縮された溶液の調製を可能にする，当該化合物の溶解性を増加させる適当な安定剤および／または薬剤を含んでいてもよい。

あるいは，活性成分は粉体の形態であって，使用前に適当なベヒクル，例えば発熱物質を含まない滅菌水を用いて構成することができる。

化合物はまた，例えばカカオバターまたは他のグリセリド等の慣用の坐剤基剤を用いて，坐剤または停留浣腸等の直腸用組成物に処方することができる。

上述した処方に加えて，化合物はまたデポ製剤として処方することができる。そのような長時間作用性の処方は，埋込み（例えば皮下または筋肉内への）によるか，または筋肉内注射により投与することができる。本発明の化合物は，この投与経路用に，適当な高分子性または疎水性物質と共に（例えば許容される油剤中の乳濁液として），イオン交換樹脂と共に，溶けにくい塩等の溶けにくい誘導体として，処方することができる。

本発明の疎水性化合物のための薬学的担体の非限定的例は，ベンジルアルコール，非極性界面活性剤，水混和性有機ポリマーおよび水性相を含む共溶媒系，例えばＶＰＤ共溶媒系である。ＶＰＤは，３％（ｗ／ｖ）ベンジルアルコール，８％（ｗ／ｖ）非極性界面活性剤ポリソルベート８０，および６５％（ｗ／ｖ）ポリエチレングリコール３００を純粋エタノール中に作成した溶液である。ＶＰＤ共溶媒系（ＶＰＤ：Ｄ５Ｗ）は，ＶＰＤを５％デキストロースの水溶液中に１：１で希釈したものである。この共溶媒系は疎水性化合物をよく溶解し，それ自体，全身投与に際して低い毒性を示す。本来，そのような共溶媒系の比率は，その溶解性および毒性特性を破壊することなく相当変化させることができる。さらに，共溶媒成分の種類も変化させることができる。例えば，他の低毒性非極性界面活性剤をポリソルベート８０の代わりに用いることができ，ポリエチレングリコールの分画サイズは様々でありうる。他の生体適合性ポリマー，例えばポリビニルピロリドンをポリエチレングリコールの代わりに用いることができ，他の糖または多糖類をデキストロースの代わりに用いることができる。

あるいは，疎水性の医薬化合物のための他のデリバリー系を用いてもよい。リポソームおよび乳剤は，疎水的薬剤のためのデリバリー用ベヒクルまたは担体の例としてよく知られている。さらに，ある種の有機溶媒，例えばジメチルスルホキシドもまた用いることができるが，しばしば毒性がより高くなる。

さらに，化合物は，持続放出系，例えば治療薬剤を含む固体疎水性ポリマーの準透過性マトリックスを用いてデリバリーすることができる。種々の持続放出材料が確立されており，当業者にはよく知られている。持続放出カプセルはその化学的性質に応じて，数週間から１００日を越える期間，化合物を放出する。治療薬剤の化学的性質および生物学的安定性に応じて，さらに別の蛋白質安定化戦略を用いてもよい。

本明細書に記載される医薬組成物は，適当な固体またはゲル相の担体または賦形剤を含んでいてもよい。そのような担体または賦形剤の例には，限定されないが，炭酸カルシウム，リン酸カルシウム，種々の糖，デンプン，セルロース誘導体，ゼラチン，およびポリエチレングリコールなどのポリマーが含まれる。

本発明において用いるための処方の例は，米国特許出願１０／２３７，９６６（２００２年９月１０日出願；その全体を本明細書の一部としてここに引用する）に見られる表１−３に示される：

式（Ｉ）および（ＩＩ）の化合物の多くは，化合物が負にまたは正に荷電した種を形成する，生理学的に許容しうる塩として提供することができる。化合物が正に荷電した成分を形成する塩の例には，限定されないが，四級アンモニウム，四級アンモニウム基の窒素原子が適切な酸と反応させた本発明の選択された化合物の窒素である塩，例えば，塩酸，硫酸，炭酸，乳酸，酒石酸，マレイン酸，コハク酸の塩が含まれる。本発明の化合物が負に荷電した種を形成している塩には，限定されないが，化合物中のカルボン酸基を適当な塩基（例えば水酸化ナトリウム（ＮａＯＨ），水酸化カリウム（ＫＯＨ），水酸化カルシウム（Ｃａ（ＯＨ）₂）等）と反応させることにより形成されるナトリウム，カリウム，カルシウムおよびマグネシウム塩が含まれる。

本発明において使用するのに適した医薬組成物には，活性成分がその意図される目的，例えば，ＦＬＴ−３−ＩＴＤポジティブ患者におけるＡＭＬの治療を達成するのに有効な量で含まれている組成物が含まれる。

より詳細には，治療上有効量とは，ＡＭＬの症状を予防，緩和または改善するのに，または治療している被験者の生存を長くするのに有効な化合物の量を意味する。

治療上有効量の決定は，特に本明細書に提供される詳細な開示に鑑みて，十分に当業者の能力の範囲内である。

本発明の方法において用いられる任意の化合物について，治療上有効な量または用量は，最初は細胞培養アッセイから見積もることができる。次に，動物モデルにおいて，培養細胞において決定されたＩＣ₅₀（すなわちＦＬＴ−３のリン酸化の最大阻害の半分を達成する試験化合物の濃度）を含む循環濃度範囲を達成するような用量を処方することができる。次にそのような情報を用いてヒトにおける有用な用量をさらに正確に決定することができる。

本明細書に記載される化合物の毒性および治療有効性は，培養細胞または実験動物における標準的な薬理学的方法により，例えば対象化合物についてＩＣ₅₀およびＬＤ₅₀（ＬＤ₅₀とは，被検化合物について，死亡率の最大阻害の半分を達成する試験化合物の濃度である）を決定することにより，決定することができる。これらの培養細胞アッセイおよび動物研究から得られるデータは，ヒトにおいて用いるためのある範囲の投与量を処方するために用いることができる。投与量は，用いる投与形態および用いる投与経路により様々でありうる。正確な処方，投与経路，および投与量は，個々の医師が，患者の状態を考慮して選択することができる（例えば，Ｆｉｎｇｌ ｅｔ ａｌ．１９７５，"Ｔｈｅ Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ Ｂａｓｉｓ ｏｆ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ"，Ｃｈ．１，ｐ．１を参照）。

投与量および間隔は，個々に，活性成分がキナーゼ調節効果を維持するのに十分な血漿レベルを与えるよう調節することができる。このような血漿レベルは最小有効濃度（ＭＥＣ）と称される。ＭＥＣは，各化合物について異なるが，インビトロのデータ，例えば，本明細書に記載されるアッセイを用いて，キナーゼの５０−９０％の阻害を達成するのに必要な濃度から見積もることができる。ＭＥＣを達成するのに必要な投与量は，個々の特性および投与経路に依存するであろう。しかし，血漿濃度はＨＰＬＣアッセイまたはバイオアッセイを用いて決定することができる。

投与間隔もまた，ＭＥＣ値を用いて決定することができる。化合物は，１０−９０％の時間，好ましくは３０−９０％の時間，最も好ましくは５０−９０％の時間，ＭＥＣより高い血漿レベルを維持する投与計画を用いて投与すべきである。

現在のところ，式（Ｉ）または（ＩＩ）の化合物の治療上有効量は，１日あたり約２５ｍｇ／ｍ²−１５００ｍｇ／ｍ²の範囲内であり，好ましくは約３ｍｇ／ｍ²／ｄａｙである。さらにより好ましくは５０ｍｇ／ｑｍ ｑｄから４００ｍｇ／ｑｄである。

局所投与または選択的取り込みの場合には，薬剤の有効な局所濃度は血漿濃度とは関係ないであろう。当該技術分野において知られる他の方法を用いて，正確な投与量および間隔を決定することができる。

投与される組成物の量は，もちろん，治療中の患者，苦痛の激しさ，投与方法，および担当医師の判断に依存するであろう。

本発明の方法は，他の抗癌療法，例えば，放射線治療および骨髄移植と組み合わせて用いることができることが企図される。

最後に，本発明の化合物の組み合わせは，固形癌または白血病，例えば，限定されないが，ＡＭＬの治療のために，ＥＮＤＯＳＴＡＴＩＮ（登録商標），ＧＬＥＥＶＥＣ（登録商標），ＣＡＭＰＴＯＳＡＲ（登録商標），ＨＥＲＣＥＰＴＩＮ（登録商標）ＩＭＣＬＯＮＥＣ２２５（登録商標），ミトキサントロン，ダウノルビシン，シタラビン，メトトレキセート，ビンクリスチン，６−チオグアニン，６−メルカプトプリンまたはパクリタキセルとの組み合わせにおいて有効であろうことも企図される。さらに，本発明の方法は，抗血管新生剤，例えば，限定されないが，セレコキシブ等のシクロオキシゲナーゼ阻害剤との併用療法を含むことができる。

本明細書に記載の併用療法および医薬組成物に関して，異常な細胞成長を阻害するのに有用な本発明の化合物および化学療法薬または他の薬剤(たとえば他の抗増殖性薬，抗血管形成薬，シグナル伝達阻害剤または免疫系促進剤)の有効量は，本明細書に記載の化合物および，公知のものまたは化学療法薬若しくは他の薬剤に関して記載の有効量に基づいて，当業者により決定することができる。そのような治療および組成物の製剤および投与経路は，単独の活性剤として本発明の化合物を含む組成物および治療に関して本明細書に記載の情報と，これらと組み合わせる化学療法薬または他の薬剤に関して提供された情報とに基づくことができる。

一般的合成方法
以下の一般的方法論を用いて本発明の化合物を製造することができる：
適切に置換された２−オキシインドール（１当量），適切に置換されたアルデヒド（１．２当量）および塩基（０．１当量）を溶媒（１−２ｍｌ／ｍｍｏｌ２−オキシインドール）中で混合し，次に混合物を約２から約１２時間加熱する。冷却した後，形成する沈澱物を濾過し，冷エタノールまたはエーテルで洗浄し，真空乾燥して，固体生成物を得る。沈澱物が形成しない場合には，反応混合物を濃縮し，残渣をジクロロメタン／エーテル中で砕き，得られる固体を濾過により回収し，次に乾燥する。生成物は任意にクロマトグラフィーによりさらに精製してもよい。

塩基は有機塩基でも無機塩基でもよい。有機塩基を用いる場合には，好ましくはこれは窒素塩基である。有機窒素塩基の例には，限定されないが，ジイソプロピルアミン，トリメチルアミン，トリエチルアミン，アニリン，ピリジン，１，８−ジアザビシクロ［５．４．１］ウンデセ−７−エン，ピロリジンおよびピペリジンが含まれる。

無機塩基の例としては，限定されないが，アンモニア，アルカリ金属またはアルカリ土類金属の水酸化物，リン酸塩，炭酸塩，重炭酸塩，酢酸塩，重硫酸塩およびアミドが挙げられる。アルカリ金属には，リチウム，ナトリウムおよびカリウムが含まれ，アルカリ土類金属にはカルシウム，マグネシウムおよびバリウムが含まれる。

本発明の現在好ましい態様においては，溶媒がプロトン性溶媒，例えば水またはアルコールであるとき，塩基はアルカリ金属またはアルカリ土類の無機塩基，好ましくは，アルカリ金属またはアルカリ土類の水酸化物である。

当業者には，有機合成の既知の一般原則と本明細書の記載の両方に基づいて，意図される反応にはいずれの塩基が最も適当であるかが明らかであろう。

反応を実施する溶媒は，プロトン性溶媒であっても非プロトン性溶媒であってもよい。好ましくは，プロトン性溶媒である。"プロトン性溶媒"は，酸素または窒素原子に共有結合した水素原子を有する溶媒であり，これは水素原子をかなり酸性にし，このため水素結合を介して溶質と"共有"されることができる。プロトン性溶媒の例としては，限定されないが，水およびアルコールが挙げられる。

"非プロトン性溶媒"は，極性であっても非極性であってもよいが，いずれの場合も，酸性水素を含まず，したがって，溶質と水素結合を形成することができない。非極性非プロトン性溶媒の例としては，限定されないが，ペンタン，ヘキサン，ベンゼン，トルエン，塩化メチレンおよび四塩化炭素が挙げられる。極性非プロトン性溶媒の例は，クロロホルム，テトラヒドロフラン，ジメチルスルホキシドおよびジメチルホルムアミドである。

本発明の現在好ましい態様においては，溶媒はプロトン性溶媒，好ましくは，水またはエタノール等のアルコールである。

反応は，室温より高い温度で行う。温度は一般に約３０℃−約１５０℃，好ましくは，約８０℃−約１００℃，最も好ましくは約７５℃−約８５℃であり，これはおよそエタノールの沸点である。"約"とは，温度範囲が，好ましくは示される温度の１０℃以内，より好ましくは示される温度の５℃以内，最も好ましくは示される温度の２℃以内であることを意味する。すなわち，例えば，"約７５℃"とは，７５℃±１０℃，好ましくは７５℃±５℃，最も好ましくは７５℃±２℃である。

２−オキシインドールおよびアルデヒドは，化学の技術分野においてよく知られる手法を用いて容易に合成することができる。当業者には，本発明の化合物を形成するための他の合成経路が利用可能であり，以下の記載は例示のためにのみ提供されるものであって限定ではないことが理解されるであろう。

本発明の化合物は，以下の方法論にしたがって，および，例えば，米国特許出願０９／７８３，２６４およびＷＯ０１／６０８１４，ＷＯ００／０８２０２，米国特許仮出願６０／３１２，３５３（２００１年８月１５日出願，現在，米国特許出願１０／２８１，９８５（２００２年８月１３日出願）），米国特許仮出願６０／４１１，７３２（２００２年９月１８日出願），米国特許仮出願６０／３２８，２２６（２００１年１０月１０日出願，現在，米国特許出願（２００２年１０月１０日出願）），および米国特許出願１０／０７６，１４０（２００２年２月１５日出願）に記載されるように製造する（これらはすべて本明細書の一部としてここに引用する）。

合成の方法論
方法Ａ：ピロールのホルミル化
ＰＯＣｌ₃（１．１当量）を−１０℃でジメチルホルムアミド（３当量）に滴加し，次にジメチルホルムアミドに溶解した適当なピロールを加える。２時間撹拌した後，反応混合物をＨ₂Ｏで希釈し，１０ＮＫＯＨでｐＨ１１に塩基性にする。形成した沈殿物を濾過により回収し，Ｈ₂Ｏで洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，所望のアルデヒドを得る。

方法Ｂ：ピロールカルボン酸エステルのサポニン化
ＥｔＯＨ中のピロールカルボン酸エステルおよびＫＯＨ（２−４当量）の混合物を，薄層クロマトグラフィー（ＴＬＣ）により反応の完了が示されるまで還流する。冷却した反応混合物を１Ｎ ＨＣｌでｐＨ３に酸性にする。形成した沈殿物を濾過により回収し，Ｈ₂Ｏで洗浄し，真空オーブン中で乾燥して，所望のピロールカルボン酸を得る。

方法Ｃ：アミド化
ジメチルホルムアミド中に溶解したピロールカルボン酸（０．３Ｍ）の撹拌溶液に，１−エチル−３−（３−ジメチルアミノ−プロピル）カルボジイミド（１．２当量），１−ヒドロキシベンゾトリアゾール（１．２当量），およびトリエチルアミン（２当量）を加える。適当なアミンを加え（１当量），反応液をＴＬＣにより完了が示されるまで撹拌する。次に酢酸エチルを反応混合物に加え，溶液を飽和ＮａＨＣＯ₃およびブライン（過剰の塩を含む）で洗浄し，無水ＭｇＳＯ₄で乾燥し，濃縮して，所望のアミドを得る。

方法Ｄ：アルデヒドとカルボン酸置換基を含むオキシインドールとの縮合
エタノール中のオキシインドール（１当量），１当量のアルデヒドおよび１−３当量のピペリジン（またはピロリジン）の混合物（０．４Ｍ）を９０−１００℃でＴＬＣにより反応の完了が示されるまで撹拌する。次に混合物を濃縮し，残渣を２ＮＨＣｌで酸性にする。形成した沈殿物をＨ₂ＯおよびＥｔＯＨで洗浄し，次に真空オーブン中で乾燥して，生成物を得る。

方法Ｅ：アルデヒドとカルボン酸置換基を含まないオキシインドールとの縮合
エタノール中のオキシインドール（１当量），１当量のアルデヒドおよび１−３当量のピペリジン（またはピロリジン）の混合物（０．４Ｍ）を９０−１００℃でＴＬＣにより反応の完了が示されるまで撹拌する。混合物を室温に冷却し，形成した固体を真空濾過により回収し，エタノールで洗浄し，乾燥して，生成物を得る。反応混合物を冷却したときに沈殿物が形成されない場合には，混合物を濃縮して，カラムクロマトグラフィーにより精製する。

以下の実施例は本発明を例示するために与えられる。しかし，本発明はこれらの実施例に記載される特定の条件または詳細に限定されるものではないことが理解されるべきである。明細書の全体を通して，公に入手可能な文献へのいずれかのおよびすべての参照は，本明細書の一部として明確に引用される。

合成実施例
実施例１
（３Ｚ）−３−｛［３，５−ジメチル−４−（モルホリン−４−イル）ピペリジン−１−イルカルボニル］−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン｝−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オン（化合物９）の合成

工程１
５０℃に加熱した４−アミノ−１−ベンジルピペリジン（Ａｌｄｒｉｃｈ，１．５３ｍＬ，７．５ｍｍｏｌ），Ｋ₂ＣＯ₃（２．２８ｇ，１６．５ｍｍｏｌ），およびＤＭＦ（１５ｍＬ）の撹拌混合物に，６０分間かけてビス（２−ブロモエチル）エーテル（Ａｌｄｒｉｃｈ，ｔｅｃｈ．９０％，０．９６２ｍＬ，７．６５ｍｍｏｌ）を滴加した。８０℃で６時間撹拌した後，ＴＬＣ（９０：１０：１クロロホルム／ＭｅＯＨ／ａｑ．濃ＮＨ₄ＯＨ）は新たなスポットの形成を示した。窒素流を吹き込むことにより溶媒を蒸発させながら２時間加熱を続けた。粗物質は比較的純粋であったが，比較的短いシリカゲルカラム（１％−６％の勾配，９：１ＭｅＯＨ／ａｑ．ＮＨ₄ＯＨ／クロロホルム）に供した。純粋な画分を蒸発させて，約１．７ｇのジアミン４−（モルホリン−４−イル）−１−ベンジルピペリジンをワックス状固体として得た。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ₆−ＤＭＳＯ）δ７．３１（ｍ，４Ｈ），７．２６（ｍ１Ｈ），３．７２（ｔ，Ｊ＝４．７Ｈｚ，４Ｈ），３．４９（ｓ，２Ｈ），２．９４（ｂｒｄ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，２Ｈ），２．５４（ｔ，Ｊ＝４．７Ｈｚ，４Ｈ），２．１９（ｔｔ，Ｊ＝１１．５，３．９Ｈｚ，１Ｈ），１．９６（ｔｄ，Ｊ＝１１．７，２．２Ｈｚ，２Ｈ），１．７８（ｂｒｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，２Ｈ），１．５５（ｍ，２Ｈ）

工程２
Ｐｄ（ＯＨ）₂（２０％，炭素上（＜５０％湿潤），３９０ｍｇ，２５ｗｔ％），メタノール（５０ｍＬ），および１．７Ｍ以下のＨＣｌ（３当量，約１０．６ｍＬ，後に沈殿が認められたときに加えた水を含む）の撹拌混合物を，窒素風船を容器内に入れ，オイルバブラーを通して出すことによりフラッシング（約２０秒間）して，窒素下で１ａｔｍの水素雰囲気に交換した。２０分後，水素下の反応混合物を５０℃に加熱し，メタノール（８ｍＬ）中の４−（モルホリン−４−イル）−１−ベンジルピペリジン（１．５６ｇ，６．０ｍｍｏｌ）を３０分間かけて滴加した。１０時間後，ｔｌｃは，すべての出発アミンが消費されてより極性の高いスポット（ニンヒドリン活性）となったことを示した。次に，反応混合物をセライトを通して濾過し，蒸発させて，４−（モルホリン−４−イル）ピペリジン二塩酸塩を灰白色固体として得た。この物質を過剰の塩基性樹脂（＞１６ｇ，Ｂｉｏ−Ｒａｄ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，ＡＧ１−Ｘ８，２０−５０メッシュ，水酸化物型，２回メタノール洗浄）およびアミン塩酸塩のメタノール混合物を用いて遊離塩基とした。樹脂とともに３０分間渦巻回転させた後，メタノール溶液をデカントし，蒸発させて，９３２ｍｇの４−（モルホリン−４−イル）ピペリジン遊離塩基をワックス状結晶固体として得た。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ₆−ＤＭＳＯ）δ３．５３（ｂｒｓ，４Ｈ），３．３０（ｖｂｒｓ，１Ｈ（＋Ｈ₂Ｏ）），２．９２（ｂｒｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，１Ｈ），２．４１（ｓ，４Ｈ），２．３５（〜ｏｂｓｃｄ ｔ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，２Ｈ），２．１２（ｂｒｔ，１Ｈ），１．６５（ｂｒｄ，Ｊ＝１１．７Ｈｚ，２Ｈ），１．１８（ｂｒｑ，Ｊ＝１０．９Ｈｚ，２Ｈ）；ＬＣＭＳ−ＡＰＣＩｍ／ｚ１７１［Ｍ＋１］⁺

工程３
（３Ｚ）−３−（３，５−ジメチル−４−カルボキシ−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オン（１２０ｍｇ，０．４０ｍｍｏｌ）（国際公開０１／６０８１４に記載されるようにして製造），ＢＯＰ（２２１ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）を室温でＤＭＦ（５ｍＬ）によく撹拌しながら懸濁し，トリエチルアミン（１３４μＬ，０．９６ｍｍｏｌ）を加えた。１０−１５分後，均一な反応混合物に４−（モルホリン−４−イル）ピペリジン（８５ｍｇ，０．５０ｍｍｏｌ）を一度に加えた。反応混合物を４８時間撹拌し（はるかに早く行ってもよい），次にクロロホルム−イソプロパノール（５／１）および５％水性ＬｉＣｌを含む漏斗に移した。濁った橙色の有機相を分離し，追加の５％水性ＬｉＣｌ（２Ｘ），１Ｍ水性ＮａＯＨ（３Ｘ），飽和水性ＮａＣｌ（１Ｘ）で洗浄し，次に乾燥し（Ｎａ₂ＳＯ₄），蒸発させて，粗生成物（９６．３％の純度；¹ＨＮＭＲにより痕跡量のＨＭＰＡ）を得た。次にこの粗生成物を，シリカゲル（ＭｅＯＨ／ＤＣＭの５−１５％勾配）の非常に短いカラム（３ｃｍ）を通すことにより精製して，より早く移動する痕跡量の３Ｅ−異性体を除去した。純粋な画分を蒸発させ，飽和ＥｔＯＡｃ溶液から一晩再結晶させ，これをＥｔ₂Ｏ（約３倍）で希釈し，０℃に冷却した。母液をデカントして，完全真空とした後に，所望の化合物を橙色結晶として得た（１５３ｍｇ，８５％）。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ₆−ＤＭＳＯ）δ１３．６０（ｓ，１Ｈ），１０．８７（ｓ，１Ｈ），７．７２（ｄｄ，Ｊ＝９．４，２．７Ｈｚ，１Ｈ），７．６８（ｓ，１Ｈ），６．９１（ｔｄ，Ｊ＝９．３，２．６Ｈｚ，１Ｈ），６．８２（ｄｄ，Ｊ＝８．６，４．７Ｈｚ，１Ｈ），３．５４（ａｐｐ ｂｒ ｔ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，４Ｈ），３．３１（２ｘｓ，３Ｈ＋３Ｈ），２．４３（ｂｒｓ，４Ｈ），２．３６（ｍ，１Ｈ），２．２５（ｂｒｍ，６Ｈ），１．７９（ｂｒｓ，２Ｈ），１．２２（ｂｒｓ，２Ｈ）；ＬＣＭＳｍ／ｚ４５３［Ｍ＋１］⁺

上述の実施例１に記載されるようにして，ただし，（３Ｚ）−３−（３，５−ジメチル−４−カルボキシ−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンの代わりに（３Ｚ）−３−（３，５−ジメチル−４−カルボキシ−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン）−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを用いて，（３Ｚ）−３−｛［３，５−ジメチル−４−（モルホリン−４−イル）ピペリジン−１−イルカルボニル］−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン｝−，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを得た。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ₆−ＤＭＳＯ）δ１３．５５（ｓ，１Ｈ），１０．８７（ｓ，１Ｈ），７．７４（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．５９（ｓ，１Ｈ），７．１１（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．９７（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．８６（ｄ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，１Ｈ），３．５４（ａｐｐｂｒｔ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，４Ｈ），３．３１（２ｘｓ，３Ｈ＋３Ｈ），２．４３（ｂｒｓ，４Ｈ），２．３５（ｍ，１Ｈ），２．２８（ｂｒｍ，６Ｈ），１．７９（ｂｒｓ，２Ｈ），１．２２（ｂｒｓ，２Ｈ）；ＬＣＭＳｍ／ｚ４３５［Ｍ＋１］⁺

上述の実施例１に記載されるようにして，ただし，（３Ｚ）−３−（３，５−ジメチル−４−カルボキシ−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンの代わりに（３Ｚ）−３−（３，５−ジメチル−４−カルボキシ−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン）−５−クロロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを用いて，（３Ｚ）−３−｛［３，５−ジメチル−４−（モルホリン−４−イル）ピペリジン−１−イルカルボニル］−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン｝−５−クロロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを得た。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ₆−ＤＭＳＯ）δ３．５６（ｓ，１Ｈ），１０．９７（ｓ，１Ｈ），７．９５（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７４（ｓ，１Ｈ），７．１１（ｄｄ，Ｊ＝８．２，２．０Ｈｚ，１Ｈ），６．８５（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），３．５４（ａｐｐ ｂｒ ｔ，Ｊ＝〜４Ｈｚ，４Ｈ），３．３１（２ｘｓ，３Ｈ＋３Ｈ），２．４３（ｂｒｓ，４Ｈ），２．３７（ｍ，１Ｈ），２．２５（ｂｒｍ，６Ｈ），１．７９（ｂｒｓ，２Ｈ），１．２３（ｂｒｓ，２Ｈ）；ＬＣＭＳｍ／ｚ４７０［Ｍ＋１］⁺

上述の実施例１に記載されるようにして，ただし，４−（モルホリン−４−イル）−ピペリジンの代わりに市販の４−（１−ピロリジニル）−ピペリジンを用いて，（３Ｚ）−３−｛［３，５−ジメチル−４−［４−（ピロリジン−１−イル）ピペリジン−１−イルカルボニル］−１Ｈ−ピロール−２−イル）メチリデン］−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを得た。
１ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ６−ＤＭＳＯ）δ Ｅ／Ｚ異性体混合物；ＬＣＭＳｍ／ｚ４３７［Ｍ＋１］⁺

上述の合成は，米国特許仮出願６０／３２８，２２６（２００１年１０月１０日出願）および米国特許出願（２００２年１０月１０日出願，その全体を本明細書の一部としてここに引用する）の方法にしたがって行うことができる。

実施例２
（３Ｚ）−３−｛［３，５−ジメチル−４−（モルホリン−４−イル）アゼチジン−１−イルカルボニル］−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン｝−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンの合成
工程１
１−アザビシクロ［１．１．０］ブタン（２，３−ジブロモプロピルアミンヒドロブロミド（５８．８ｍｍｏｌ）からＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔｅｒｓ ４０（１９９９）３７６１−６４に記載される既知の方法にしたがって製造）の溶液を，無水無変性エタノール（２５０ｍｌ）中のモルホリン（１５．７ｍｌ；１８０ｍｍｏｌ）および硫酸（３．３ｇ，９６％溶液）の溶液に０℃でゆっくり加えた。反応混合物を氷浴上で３０分間，次に室温で８時間撹拌した。水酸化カルシウム（５．５ｇ）および１００ｍｌの水を加え，得られたスラリーを１時間撹拌し，次にセライトのパッドを通して濾過した。濾液を濃縮し，減圧下で（２０ｍｍＨｇ）蒸留して水および過剰のモルホリンを除去した。蒸留残渣をクーゲロー装置を用いて高真空下で再蒸留して，純粋な４−（アゼチジン−３−イル）モルホリンを３３％の収率（２．７５９ｇ）で無色油状液体として得た。
¹³Ｃ−ＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃，１００ＭＨｚ）：６６．７１（２Ｃ），５９．３７（１Ｃ），５１．４６（２Ｃ），４９．９５（２Ｃ）¹Ｈ（ＣＤＣｌ₃，４００ＭＨｚ）：３．７２７（ｔ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，４Ｈ），３．６１９（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），３．５６６（ｔ，Ｊ＝８Ｈｚ，２Ｈ），３．２２７（ｍ，Ｊ＝７Ｈｚ，１Ｈ），２．８９５（ｂｒｓ，１Ｈ），２．３２９（ｂｒｓ，４Ｈ）

工程２
（３Ｚ）−３−（｛３，５−ジメチル−４−カルボキシ］１−Ｈ−ピロール−２−イル｝メチレン）−５−フルオロ−１．３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オン（０．５ｍｍｏｌ，２１０ｍｇ）の１−（８−アザベンゾトリアゾリル）−エステル［（３Ｚ）−３−（３，３−ジメチル−４−カルボキシ−１−Ｈ−ピロール−２−イルメチレン）−５−フルオロ−１．３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オン（４８０ｍｇ；１．６ｍｍｏｌ）を，ＤＭＦ（５ｍｌ）でヒューニッヒ塩基（３．０ｍｍｏｌ，０．５２５ｍｌ）の存在下でＨＡＴＵ試薬（５７０ｍｇ，１．５ｍｍｏｌ）で活性化させ，クロロホルム（５ｍｌ）で沈殿させ，高真空下で乾燥することにより９２％の収率で（５７９ｍｇ）製造した］を無水ＤＭＡ（１．０ｍｌ）に懸濁した。無水ＤＭＡ（１．０ｍｌ）中の４−（アゼチジン−３−イル）−モルホリン（１４２．５ｍｇ，１ｍｍｏｌ）の溶液を一度に加え，得られた溶液を室温で２０分間撹拌した。反応混合物を室温でオイルポンプを用いて蒸発させ，粘稠な残渣を６ｍｌのメタノールとジエチルアミンとの混合物（２０：１；ｖ／ｖ）で希釈し，機械的に接種し，冷蔵庫（＋３℃）に８時間放置した。沈殿物を濾過し（氷冷メタノールで軽く洗浄），高真空下で乾燥して，所望の生成物を得た。７１．５％収率（１５２ｍｇの橙色固体）。
ＬＣ／ＭＳ：＋ＡＰＣＩ：Ｍ＋１＝４２５；−ＡＰＣＩ：Ｍ−１＝４２３，¹⁹Ｆ−ＮＭＲ（ｄ−ＤＭＳＯ，３７６．５ＭＨｚ）：−１２２．９４（ｍ，１Ｆ），¹Ｈ（ｄ−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）：１３．６５１（ｓ，１Ｈ），１０．９０７（ｓ，１Ｈ），７．７５４（ｄｄ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．７００（ｓ，１Ｈ），６．９３５（ｄｔ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，Ｊ＝２．４Ｈｚ，１Ｈ），６．８４１（ｄｄ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，Ｊ＝３．９Ｈｚ；１Ｈ），３．９６３（ｂｒｓ，２Ｈ），３．７９３（ｂｒｓ，２Ｈ），３．５８１（ｂｒｔ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，４Ｈ），３．１３３（ｍ，１Ｈ），２．３６７（ｓ，３Ｈ），２．３４０（ｓ，３Ｈ），２．２９５（ｂｒｓ，４Ｈ）

上述の実施例２に記載されるようにして，ただし，（３Ｚ）−３−（３，５−ジメチル−４−カルボキシ−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンの代わりに（３Ｚ）−３−（３，５−ジメチル−４−カルボキシ−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン）−５−クロロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを用いて（３Ｚ）−３−｛［３，５−ジメチル−４−（モルホリン−４−イル）アゼチジン−１−イルカルボニル］−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン｝−５−クロロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを橙色固体として得た。
ＬＣ／ＭＳ：＋ＡＰＣＩ：Ｍ＋１＝４４１；−ＡＰＣＩ：Ｍ−１＝４４０，４４１，¹Ｈ（ｄ−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）：１３．６０７（ｓ，１Ｈ），１１．００６（ｓ，１Ｈ），７．９７６（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７５６（ｓ，１Ｈ），７．１３６（ｄｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），６．８６９（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），３．９６４（ｂｒｓ，２Ｈ），３．７９３（ｂｒｓ，２Ｈ），３．５８２（ｂｒｔ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，４Ｈ），３．１３４（ｍ，１Ｈ），２．３６９（ｓ，３Ｈ），２．３４７（ｓ，３Ｈ），２．２９６（ｂｒｓ，４Ｈ）

上述の実施例２に記載されるようにして，ただし，４−（アゼチジン−３−イル）モルホリンの代わりに４−（アゼチジン−３−イル）−ｃｉｓ−３，５−ジメチルモルホリン［４−（アゼチジン−３−イル）−モルホリンの製造と同様の方法で，ただしモルホリンの代わりに）ｃｉｓ−３，５−ジメチルモルホリン（２０．７ｇ；１８０ｍｍｏｌ）を用いて製造した］を用いて，（３Ｚ）−３−｛［３，５−ジメチル−４−（２，５−ジメチルモルホリン−４−イル）アゼチジン−１−イルカルボニル］−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン｝−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを橙色固体として得た。
ＬＣ／ＭＳ：＋ＡＰＣＩ：Ｍ＋１＝４５３；−ＡＰＣＩ：Ｍ−１＝４５１，¹⁹Ｆ−ＮＭＲ（ｄ−ＤＭＳＯ，３７６．５ＭＨｚ）：−１２２．９４（ｍ，１Ｆ）¹Ｈ（ｄ−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）：１３．６５１（ｓ，１Ｈ），１０．９０７（ｓ；１Ｈ），７．７５８（ｄｄ，Ｊ＝９．４Ｈｚ，Ｊ＝２．３Ｈｚ；１Ｈ），７．７００（ｓ，１Ｈ），６．９３５（ｄｔ，Ｊ＝８．６Ｈｚ，Ｊ＝２．７Ｈｚ，１Ｈ），６．８４２（ｄｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，Ｊ＝４．３Ｈｚ，１Ｈ），３．９６１（ｂｒｓ，２Ｈ），３．７９０（ｂｒｓ，２Ｈ），３．５４６（ｂｒｍ，２Ｈ），３．０９２（ｍ，１Ｈ），２．６９０（ｂｒｓ；２Ｈ），２．３６４（ｓ，３Ｈ），２．３３８（ｓ，３Ｈ），１．４９２（ｂｒｍ，２Ｈ），１．０３８（ｂｒｓ，６Ｈ）

上述の実施例２に記載されるようにして，ただし，（３Ｚ）−３−（３，５−ジメチル−４−カルボキシ−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン）−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンの代わりに（３Ｚ）−３−（３，５−ジメチル−４−カルボキシ−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン）−５−クロロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを，４−（アゼチジン−３−イル）モルホリンの代わりに４−（アゼチジン−３−イル）−ｃｉｓ−３，５−ジメチルモルホリンを用いて，（３Ｚ）−３−｛［３，５−ジメチル−４−（３，５−ジメチルモルホリン−４−イル）アゼチジン−１−イルカルボニル］−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン｝−５−クロロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを橙色固体として得た。
ＬＣ／ＭＳ：＋ＡＰＣＩ：Ｍ＋１＝４６９，４７０；−ＡＰＣＩ：Ｍ−１＝４６８，４６９，¹Ｈ（ｄ−ＤＭＳＯ，４００ＭＨｚ）：１３．６０６（ｓ，１Ｈ），１１．００８（ｓ，１Ｈ），７．９７９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７５８（ｓ，１Ｈ），７．１３８（ｄｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），６．８７０（ｄ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），３．９６４（ｂｒｓ，２Ｈ），３．７９０（ｂｒｓ，２Ｈ），３．５４７（ｂｒｍ，２Ｈ），３．０９５（ｍ，１Ｈ），２．６９１（ｂｒｓ，２Ｈ），２．３６６（ｓ，３Ｈ），２．３４５（ｓ，３Ｈ），１．４９４（ｂｒｍ，２Ｈ），１．０３９（ｂｒｓ，６Ｈ）

上述の実施例１に記載されるようにして，ただし４−（モルホリン−４−イル）−ピペリジンの代わりに，以下に記載されるようにして製造した２−（Ｒ）−ピロリジン−１−イルメチルピロリジンを用いて，（３Ｚ）−３−｛［３，５−ジメチル−２Ｒ−（ピロリジン−１−イルメチル）ピロリジン−１−イルカルボニル］−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン｝−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを得た。

２（Ｒ）−ピロリジン−１−イルメチルピロリジンの合成
工程１
ＤＭＦ（２０ｍｌ）中の（＋）−カルボベンジルオキシ−Ｄ−プロリン（１．５ｇ，６．０ｍｍｏｌ），ＥＤＣ（２．３ｇ，１２．０ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（８００ｍｇ，１２．９ｍｍｏｌ）の溶液に，トリエチルアミン（１．５ｍｌ）およびピロリジン（１．０ｍｌ，１２．０ｍｍｏｌ）を加えた。これを室温で１８時間撹拌した。飽和ＮａＨＣＯ₃を加え，ＣＨ２ＣＬ２（３回）で抽出した。有機層を分離し，Ｎａ₂ＳＯ₄で乾燥した。溶媒を除去し，残渣をシリカゲルクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ）で精製して，１−（Ｒ）−［Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）−ピロリル］ピロリジンを白色固体として得た（９４％）。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ₃，すべての回転異性体）δ１．５７−１．６６（ｍ，１Ｈ），１．７１−２．０２（ｍ，５Ｈ），２．０４−２．１９（ｍ，２Ｈ），３．２６−３．４３（ｍ，３Ｈ），３．４４−３．７８（ｍ，３Ｈ），４．４１（ｄｄ，Ｊ＝４．５，７．６Ｈｚ，０．５Ｈ），４．５２（ｄｄ，Ｊ＝３．７，７．６Ｈｚ，０．５Ｈ），４．９９（ｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，０．５Ｈ），５．０５（ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，０．５Ｈ），５．１３（ｄ，Ｊ＝１２．１Ｈｚ，０．５Ｈ），５．２０（ｄ，Ｊ＝１２．５Ｈｚ，０．５Ｈ），７．２７−７．３８（ｍ，５Ｈ）

工程２
メタノール（１５ｍｌ）中の１−（Ｒ）−［Ｎ−（ベンジルオキシカルボニル）プロリル］ピロリジン（２．７ｇ，８．９ｍｍｏｌ）および５％Ｐｄ−Ｃ触媒（２７０ｍｇ）の混合物を水素雰囲気下で２０時間撹拌した。反応混合物をセライトを通して濾過し，溶媒を除去して，２（Ｒ）−プロリルピロリジンを粘稠な油状物として得て（８０％），これをさらに精製することなく次の工程で用いた。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ₆−ＤＭＳＯ）δ１．５２−１．７８（ｍ，５Ｈ），１．８２−１．８９（ｍ，２Ｈ），１．９７−２．０４（ｍ，１Ｈ），２．６３−２．７１（ｍ，１Ｈ），２．９７−３．０２（ｍ，１Ｈ），３．２２−３．３５（ｍ，３Ｈ），３．４８−３．５４（ｍ，１Ｈ），３．７２（ｄｄ，Ｊ＝６．１，８．０Ｈｚ，１Ｈ）

工程３
２−（Ｒ）−プロリルピロリジン（１．２ｇ，７．１ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍｌ）に溶解した。反応混合物を０℃に冷却し，ＢＨ₃（１Ｍ，ＴＨＦ中（１０ｍｌ，１０ｍｍｏｌ））を０℃で滴加した。反応混合物を１６時間還流し，３ＭＨＣｌ（４．７ｍｌ）。ｐＨ１０となるまで２ＭＮａＯＨ溶液を加えた。生成物を５％ＭｅＯＨ／ＣＨ₂Ｃｌ₂（３回）で抽出した。有機層をＮａ₂ＳＯ₄で乾燥し，溶媒を除去して，標題化合物をわずかに黄色の液体（７３％）として得，これをさらに精製することなく次の工程で用いた。
¹ＨＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ｄ₆−ＤＭＳＯ）δ１．２２−１．３０（ｍ，１Ｈ），１．５５−１．６９（ｍ，６Ｈ），１．７１−１．７９（ｍ，１Ｈ），２．２６−２．３０（ｍ，１Ｈ），２．３３−２．３８（ｍ，１Ｈ），２．４０−２．４５（ｍ，４Ｈ），２．６５−２．７１（ｍ，１Ｈ），２．７８−２．８４（ｍ，１Ｈ），３．０２−３．０９（ｍ，１Ｈ）

上述の実施例１と同様にして，ただし４−（モルホリン−４−イル）−ピペリジンの代わりに２−（Ｓ）−ピロリジン−１−イルメチルピロリジン（上述のように，ただし，（＋）−カルボベンジルオキシ−Ｄ−プロリンの代わりにカルボベンジルオキシ−Ｌ−プロリンを用いて製造），（３Ｚ）−３−｛［３，５−ジメチル−２Ｓ−（ピロリジン−１−イルメチル）ピロリジン−１−イルカルボニル］−１Ｈ−ピロール−２−イルメチリデン｝−５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−２Ｈ−インドール−２−オンを得た。

実施例３
５−［５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデン−メチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸の合成
工程１
ジメチルホルムアミド（２５ｍＬ，３ｅｑ．）を氷浴中で撹拌しながら冷却した。これにＰＯＣｌ₃（１．１ｅｑ．，１０．８ｍＬ）を加えた。３０分後，ＤＭＦ（２Ｍ，４０ｍＬ）中の３，５−ジメチル−４−エチルエステルピロール（１７．７ｇ，１０５．８ｍｍｏｌ）の溶液を反応液に加え，撹拌を続けた。２時間後，反応液を水（２５０ｍＬ）で希釈し，１Ｎ水性ＮａＯＨでｐＨ＝１１に塩基性にした。白色固体を濾過により除去し，水，次にヘキサンですすぎ，乾燥して，５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル（１９．７５ｇ，９５％）を褐色固体として得た。
¹Ｈ ＮＭＲ（３６０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．１１（ｂｒｓ，１Ｈ，ＮＨ），９．５９（ｓ，１Ｈ，ＣＨＯ），４．１７（ｑ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，２Ｈ，ＯＣＨ ₂ＣＨ₃），２．４４（ｓ，３Ｈ，ＣＨ ₃），２．４０（ｓ，３Ｈ，ＣＨ ₃），１．２６（ｄ，Ｊ＝６．７Ｈｚ，３Ｈ，ＯＣＨ₂ＣＨ ₃）

工程２
５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル（２ｇ，１０ｍｍｏｌ）をメタノール（３ｍＬ）および水（１０ｍＬ）に溶解した水酸化カリウム（３ｇ，５３ｍｍｏｌ）の溶液に加えた。混合物を３時間還流し，室温に冷却し，６Ｎ塩酸でｐＨ３に酸性にした。固体を濾過により回収し，水で洗浄し，真空オーブン中で一夜乾燥して，５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１．６ｇ，９３％）を得た。
¹Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１２．０９（ｓ，ｂｒ，２Ｈ，ＮＨ＆ＣＯＯＨ），９．５９（ｓ，１Ｈ，ＣＨＯ），２．４４（ｓ，３Ｈ，ＣＨ₃），２．４０（ｓ，３Ｈ，ＣＨ₃）

工程３
５−フルオロイサチン（８．２ｇ，４９．７ｍｍｏｌ）を５０ｍＬのヒドラジン水和物に溶解し，１時間還流した。次に反応混合物を氷水に注加した。次に沈殿物を濾過し，水で洗浄し，真空オーブンで乾燥して，５−フルオロ−２−オキシインドール（７．５ｇ）を得た。

工程４
エタノール（３ｍＬ）中の５−フルオロオキシインドール（１００ｍｇ，０．６６ｍｍｏｌ），５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１３３ｍｇ，０．７９ｍｍｏｌ），および１０滴のピペリジンの反応混合物を６０℃で一夜撹拌し，濾過した。固体を１Ｍの水性塩酸溶液，水で洗浄し，乾燥して，５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２０１ｍｇ，定量的）を黄色固体として得た。
ＭＳ ｍ／ｚ（相対強度，％）２９９（［Ｍ−１］⁺，１００）

実施例４
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデン−メチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（３−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシ−プロピル）−アミドの合成
工程１
２−クロロメチルオキシラン（９５ｇ，１．０３ｍｏｌｅ）に３０℃で水（３．０８ｇ，０．１７ｍｏｌｅ）およびジエチルアミン（１０６．２ｍＬ，１．０３ｍｏｌｅ）の混合物を加えた。次に反応混合物を２８−３５℃で６時間撹拌し，２０−２５℃に冷却して，１−クロロ−３−ジエチルアミノ−プロパン−２−オールを得た。

工程２
７８ｍＬの水中の水酸化ナトリウム（４７．９ｇ，１．２ｍｏｌｅ）の溶液に１−クロロ−３−ジエチルアミノ−プロパン−２−オールを加えた。生成物を２０−２５℃で１時間撹拌し，１７８ｍＬの水で希釈し，エーテルで２回抽出した。合わせたエーテル溶液を固体水酸化カリウムで乾燥し，蒸発させて，１３５ｇの粗生成物を得，これを分留して，純粋なグリシジルジエチルアミン（９８ｇ，７６％）を油状物として得た。

工程３
２５％（ｗ／ｗ）の水酸化アンモニウム（２５ｍＬ，１５９ｍｍｏｌｅ）の氷冷溶液にグリシジルジエチルアミン（３．２ｇ，２４．８ｍｍｏｌ）を１０分間かけて滴加した。反応混合物を０−５℃で１時間撹拌し，次に室温で１４時間撹拌した。得られた反応混合物を蒸発させ，蒸留（８４−９０℃，５００−６００ｍＴ）して，１−アミノ−３−ジエチルアミノ−プロパン−２−オール（３．３ｇ，９２％）を得た。
ＭＳ ｍ／ｚ１４７（［Ｍ＋１］⁺）

工程４
１．０ｍＬのＤＭＦ中の５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１００ｍｇ，０．４３ｍｍｏｌ），ＥＤＣ（１２２．７ｍｇ，０．６４ｍｍｏｌ）およびＨＯＢｔ（８６．５ｍｇ，０．６４ｍｍｏｌ）の溶液に１−アミノ−３−ジエチルアミノ−プロパン−２−オール（９３．２ｍｇ，０．６４ｍｍｏｌ）を加えた。得られた反応溶液を室温で一夜撹拌し，蒸発させた。残渣を１０ｍＬの水に懸濁し，濾過した。固体を飽和炭酸水素ナトリウムおよび水で洗浄し，高真空オーブンで一夜乾燥して，粗生成物を得，これをカラムクロマトグラフィーで精製し，トリエチルアミンを含む６％メタノール−ジクロロメタン（２滴／１００ｍＬの６％メタノール−ジクロロメタン）で溶出して，５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（３−ジエチルアミノ−２−ヒドロキシ−プロピル）−アミド（６２ｍｇ，３４％）を黄色固体として得た。
¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１３．７０（ｓ，１Ｈ，ＮＨ−１’），１０．９０（ｓ，１Ｈ，ＮＨ−１），７．７６（ｄｄ，Ｊ＝２．３８，９．３３Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−４），７．７２（ｓ，１Ｈ，ビニル−Ｈ），７．６０（ｍ，ｂｒ．，１Ｈ，ＣＯＮＨＣＨ₂ＣＨ（ＯＨ）−ＣＨ₂Ｎ（Ｃ₂Ｈ₅）₂−４’），６．９３（ｄｔ，Ｊ＝２．３８，８．９９Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−５），６．８５（ｄｄ，Ｊ＝４．５５，８．９９Ｈｚ，１Ｈ，Ｈ−６），３．８３（ｍ，ｂｒ，１Ｈ，ＯＨ），３．３３（ｍ，４Ｈ），２．６７（ｍ，ｂｒ，５Ｈ），２．４６（ｓ，３Ｈ，ＣＨ₃），２．４４（ｓ，３Ｈ，ＣＨ₃），１．０４（ｍ，ｂｒ，６Ｈ，ＣＨ₃ｘ２）．ＭＳ ｍ／ｚ（相対強度，％）４２７（［Ｍ＋１］⁺，１００）

実施例５
５−［５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデン−メチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド（Ｒ），（Ｓ）および（Ｒ／Ｓ）（化合物４，５および６）の合成
工程１
エタノール（５０ｍＬ）中のモルホリン（２．６ｍＬ，３０ｍｍｏｌ）およびエピクロロヒドリン（２．３５ｍｌ，３０ｍｍｏｌ）の混合物を７０℃で一夜撹拌した。溶媒を除去した後，残渣を塩化メチレン（５０ｍＬ）で希釈した。沈殿した透明固体を真空濾過により回収して，１−クロロ−３−モルホリン−４−イル−プロパン−２−オール（２．０ｇ，３７％）を得た。
¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ３．４９（ｔ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，２Ｈ），３．６０（ｔ，Ｊ＝４．６Ｈｚ，２Ｈ），３．７５（ｍ，４Ｈ，２ｘＣＨ₂），４．２０（ｄｄ，Ｊ＝５．２，１２Ｈｚ，２Ｈ），４．５４（ｍ，２Ｈ），４．６２（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），６．６４（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ，ＯＨ）．ＭＳ（ｍ／ｚ）１８０．２（Ｍ＋１）

工程２
１−クロロ−３−モルホリン−４−イル−プロパン−２−オール（２．０ｇ，１１ｍｍｏｌ）をメタノール中ＮＨ₃（２５重量％，２０ｍＬ）の溶液で室温で処理した。窒素を反応混合物中に吹き込んでアンモニアを除去した。溶媒を蒸発させて，１−アミノ−３−モルホリン−４−イル−プロパン−２−オール（２．０ｇ，９１％）の塩酸塩を得た。
¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ２．３０（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，２Ｈ），２．３６（ｍ，４Ｈ，ＮＣＨ₂），２．６５（ｄｄ，Ｊ＝８．４，１２．８Ｈｚ，１Ｈ），２．９１（ｄｄ，Ｊ＝３．６，１２．８Ｈｚ，１Ｈ），３．５２（ｍ，４Ｈ，ＯＣＨ₂），３．８７（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），５．３２（ｓ，１Ｈ，ＯＨ），８．０２（ｂｒｓ．，３Ｈ，ＮＨ₃ ⁺）．ＭＳ（ｍ／ｚ）１６１．１（Ｍ＋１）

工程３
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１２０ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ）を１−アミノ−３−モルホリン−４−イル−プロパン−２−オール（７４ｍｇ，０．４８ｍｍｏｌ）と縮合させて，５−［５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド（６５ｍｇ，３６％）を沈殿させた。母液を蒸発乾固させ，残渣をフラッシュクロマトグラフィーにより精製して，追加の２Ｎ（７０ｍｇ，３９％）を得た。
¹Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ２．２８（ｍ，１Ｈ），２．３２（ｍ，１Ｈ），２．４０（ｍ，４Ｈ），２．４０，２．４２（２ｘｓ，６Ｈ，２ｘＣＨ₃），３．１５（ｓ，１Ｈ），３．３１（ｍ，１Ｈ），３．５５（ｍ，４Ｈ），３．７８（ｍ，１Ｈ），４．７３（ｂｒｓ，１Ｈ，ＯＨ），６．８２（ｄｄ，Ｊ＝４．５，８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９０（ｔｄ，²Ｊ＝２．８，³Ｊ＝１０．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５３（ｍ，１Ｈ），７．７０（ｓ，１Ｈ），７．７４（ｄｄ，Ｊ＝２．０，９．６Ｈｚ，１Ｈ）（芳香族およびビニル），１０．８７（ｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），１３．６６（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４４１．４（Ｍ−１）

塩化２−ヒドロキシ−７−オキサ−４−アゾニアスピロ［３．５］ノナンの合成

熱電対，窒素入口および２５０ｍｌの滴下漏斗を備えた１Ｌの３ツ口丸底フラスコに，モルホリン（９１．５ｇ，９１．５ｍｌ，１．０５ｍｏｌｅ，１．０ｅｑ．）および１００ｍｌのエタノールを入れた。エピクロロヒドリン（１００ｇ，８４．５ｍｌ，１．０８ｍｏｌｅ，１．０３ｅｑ．）を滴下漏斗から約３０分間かけて加えながら溶液を急速に撹拌した。温度をモニターし，フラスコの温度が２７℃に達したときに，反応液を氷水浴で冷却した。透明溶液を１８時間撹拌した。反応はＧＣにより測定した（５滴の反応混合物を１ｍｌのエタノールで希釈し，１５ｍＤＢ−５キャピラリーＧＣカラムに注入し，以下のパラメータで運転した：インジェクター２５０℃，検出器２５０℃，初期オーブン温度２８℃，１０℃／分で２５０℃に加熱）。反応が完了したとき，３％未満のモルホリンが残存していた。反応液を５０℃の浴およびフルハウスバキュームを用いて回転蒸発器で蒸発物が凝縮しなくなるまで濃縮した。得られた油状物を室温で２４−４８時間，または有意な量の結晶が観察されるまで保存した（種晶を入れることにより工程を加速することができる）。スラリーを２５０ｍｌのアセトンで希釈し，濾過した。固体を真空オーブン中で６０℃で１８−２４時間乾燥した。８４ｇの結晶生成物が得られた。母液を濃縮し，結晶化工程を繰り返すことにより，回収率を増加することができる。
¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ６．５５（ｄ，１Ｈ），４．６４（ｍ，１Ｈ），４．５３（ｍ，２Ｈ），４．１８（ｍ，２Ｈ），３．７４（ｍ，４Ｈ），３．６０（ｍ，２Ｈ），３．４８（ｍ，２Ｈ）．¹³Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ７０．９，６１．３９，６１．０４，６０．２５，５８．５４，５７．８０

１−アミノ−３−（４−モルホリニル）−２−プロパノール（ラセミ体）の合成

機械的撹拌子を備えた３Ｌの１ツ口丸底フラスコに塩化２−ヒドロキシ−７−オキサ−４−アゾニアスピロ［３．５］ノナン（１５０ｇ，８３５ｍｍｏｌｅ）を入れ，次にメタノール中２３重量％の無水アンモニア（２１２０ｍｌ）を加えた。フラスコに栓をし，得られた透明溶液を２０−２３℃で１８時間撹拌した。上述の条件のＧＣは，出発物質が残存していないことを示した。栓をはずし，アンモニアを溶液から３０分間曝気した。次にフラスコを回転蒸発器に移し，４５℃の油浴中でフルハウスバキュームで濃縮して，白色固体を得た。
¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ３．５７（ｄｄ，２Ｈ），３．３−３．５（ｍ，６Ｈ），２．５９（ｍ，２Ｈ），２．２−２．４（ｍ，６Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ７０．８，６７．１，６０．１，５３．８，４８．１

上述の実施例３に記載される方法にしたがって，２−（ＲＳ）−１−アミノ−３−モルホリン−４−イル−プロパン−２−オールを２−（Ｓ）−１−アミノ−３−モルホリン−４−イル−プロパン−２−オール（以下に記載されるようにして製造）で置き換えて，所望の化合物５−［５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−（Ｓ）−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミドを得た。

１−アミノ−３−（４−モルホリニル）−２−プロパノール（非ラセミ体）の合成

機械的撹拌，熱電対および滴下漏斗を備えた１Ｌの３ツ口丸底フラスコにモルホリン（９１．５ｇ，９１．５ｍｌ，１．０５ｍｏｌｅ，１．０ｅｑ．）および４５ｍｌのｔ−ブタノールを入れた。Ｒ−エピクロロヒドリン（１００ｇ，８４．５ｍｌ，１．０８ｍｏｌｅ．１．０３ｅｑ．）を滴下漏斗から約３０分間かけて加えながら溶液を急速に撹拌した。温度をモニターし，フラスコの温度が２７℃に達したときに，反応液を氷水浴で冷却した。透明溶液を１８時間撹拌した。反応はＧＣにより測定した（５滴の反応混合物を１ｍｌのエタノールで希釈し，１５ｍＤＢ−５キャピラリーＧＣカラムに注入し，以下のパラメータで運転した：インジェクター２５０℃，検出器２５０℃，初期オーブン温度２８℃，１０℃／分で２５０℃に加熱）。反応が完了したとき，３％未満のモルホリンが残存していた。溶液を１０℃に冷却し，温度を１５℃未満に保持しながらＴＨＦ（５７６ｇ）中のカリウムｔ−ブトキシドの２０重量％溶液を滴加した。得られた白色スラリーを１０−１５℃で２時間撹拌し，上述の条件を用いてＧＣで調べた。クロロヒドリンは認められなかった。混合物を５０℃の浴およびフルハウスバキュームを用いて回転蒸発器で濃縮した。得られた混合物を水（５００ｍｌ）および塩化メチレンで希釈した。相を分離し，水性相を塩化メチレン（５００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮して，透明無色油状物を得た。１４５ｇ（収率９７％）のエポキシドが得られた。
¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨ_z，ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ３．３（ｄｄ，４Ｈ），３．１（ｍ，１Ｈ），２．６（ｄｄ，１Ｈ），２．５（ｄｄ，１Ｈ），２．４（ｍ，４Ｈ），２．２（ｄｄ，２Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨ_z，ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ６５．４，６０．１，５３．１，４８．９，４３．４

上述の粗エポキシドを機械的撹拌子を備えた３Ｌの１ツ口丸底フラスコに入れた。メタノール中の無水アンモニア（２４％ｗ／ｗ２．５Ｌ）を加え，フラスコに蓋をして，混合物を室温で２４時間撹拌した。上述の条件でのＧＣは，出発物質が残存していないことを示した。蓋をはずし，３０分間アンモニアを溶液から曝気した。次に，フラスコから回転蒸発器に移し，４５℃の浴およびフルハウスバキュームを用いて濃縮して，透明無色油状物を得た。１２４ｇの生成物が得られた。
¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨ_z，ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ３．５７（ｄｄ，２Ｈ），３．３−３．５（ｍ，６Ｈ），２．５９（ｍ，２Ｈ），２．２−２．４（ｍ，６Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨ_z，ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ７０．８，６７．１，６０．１，５３．８，４８．１

１−アミノ−３−（４−モルホリニル）−２−（Ｓ）−プロパノールの合成
機械的撹拌，熱電対および滴下漏斗を備えた１Ｌの３ツ口丸底フラスコに，モルホリン（９１．５ｇ，９１．５ｍｌ，１．０５ｍｏｌｅ，１．０ｅｑ．）および２００ｍｌのメタノールを入れた。Ｒ−エピクロロヒドリン（１００ｇ，８４．５ｍｌ，１．０８ｍｏｌｅ，１．０３ｅｑ．）を滴下漏斗から約３０分間かけて加えながら溶液を急速に撹拌した。温度をモニターし，フラスコの温度が２７℃に達したときに，反応液を氷水浴で冷却した。透明溶液を１８時間撹拌した。反応はＧＣにより測定した（５滴の反応混合物を１ｍｌのエタノールで希釈し，１５ｍＤＢ−５キャピラリーＧＣカラムに注入し，以下のパラメータで運転した：インジェクター２５０℃，検出器２５０℃，初期オーブン温度２８℃，１０℃／分で２５０℃に加熱）。反応が完了したとき，３％未満のモルホリンが残存していた。溶液を１０℃に冷却し，温度を１５℃未満に保持しながらメタノール（２３３ｇ，１．０８ｍｏｌｅ，２４７ｍｌ）中のナトリウムメトキシドの２５重量％溶液を滴加した。得られた白色スラリーを１０−１５℃で２時間撹拌し，ＧＣにより上述の条件を用いて調べた。クロロヒドリンは認められなかった。混合物を５０℃の浴およびフルハウスバキュームを用いて回転蒸発器で濃縮した。得られた混合物を水（５００ｍｌ）および塩化メチレンで希釈した。相を分離し，水性相を塩化メチレン（５００ｍｌ）で洗浄した。合わせた有機層を硫酸ナトリウムで乾燥し，濃縮して，透明な無色油状物を得た。これにより，１４５ｇ，収率９７％の１，２−エポキシ−３−モルホリン−４−イルプロパンを得た。
¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ３．３（ｄｄ，４Ｈ），３．１（ｍ，１Ｈ），２．６（ｄｄ，１Ｈ），２．５（ｄｄ，１Ｈ），２．４（ｍ，４Ｈ），２．２（ｄｄ，２Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ６５．４，６０．１，５３．１，４８．９，４３．４

上述の粗１，２−エポキシ−３−モルホリン−４−イルプロパンを磁気撹拌子を有する３Ｌの１ツ口丸底フラスコに入れた。メタノール（２４％ｗ／ｗ２．５Ｌ）中の無水アンモニアを加え，フラスコに栓をし，混合物を室温で２４時間撹拌した。上述の条件のＧＣは，出発物質が残存していないことを示した。栓をはずし，アンモニアを３０分間溶液から曝気した。次にフラスコから回転蒸発器に移し，４５℃の浴でフルハウスバキュームで濃縮して，透明無色油状物を得た。１２４ｇの１−アミノ−３−（４−モルホリニル）−２−（Ｓ）−プロパノールが得られた。
¹Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ３．５７（ｄｄ，２Ｈ），３．３−３．５（ｍ，６Ｈ），２．５９（ｍ，２Ｈ），２．２−２．４（ｍ，６Ｈ）；¹³Ｃ ＮＭＲ（１００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ７０．８，６７．１，６０．１，５３．８，４８．１

イミダゾールアミド（７．０ｇ，３２．３ｍｍｏｌ），アミン（１５．０ｇ，６４．６ｍｍｏｌ），５−フルオロオキシインドール（４．９３ｇ，３２．６ｍｍｏｌ），トリエチルアミン（９．７９ｇ，９６．９ｍｍｏｌ），およびＴＨＦ（８８ｍｌ）を混合し，６０℃に加熱した。茶色溶液が形成した。６０℃で２４時間撹拌した後，黄色スラリーを室温に冷却し，濾過した。ケークを８０ｍｌのＴＨＦで洗浄し，５０℃でハウスバキュームで一夜乾燥した。茶色固体（２３．２ｇ）が得られた。固体を３５０ｍｌの水中で室温で５時間スラリー化し，濾過した。ケークを１００ｍｌの水で洗浄し，５０℃でハウスバキュームで一夜乾燥した。８．３１ｇが得られ，化学収率は５６％であった。

温度計，凝縮器，磁気撹拌，および窒素入口を備えた０．２５Ｌフラスコに４．９２ｇの５−フルオロオキシインドール，７．０ｇのイミダゾールアミド，１５．５ｇの（Ｒ）−１−アミノ−３−（４−モルホリニル）−２−プロパノール，９．７８ｇのトリエチルアミンおよび８８ｍｌのテトラヒドロフランを入れた。混合物を６０℃で１６．５時間加熱した。反応液を周囲温度に冷却し，濾過した。得られた固体をアセトニトリル中で１１ｍｌ／ｇで３回連続してスラリー化し，真空下で乾燥して，３．６ｇ（２５．２５％）を得た［ＨＰＬＣ，ＨｙｐｅｒｓｉｌＢＤＳ，Ｃ−１８，５μ，（６：４），アセトニトリル：０．１Ｍ塩化アンモニウム，ＰＨＡ−５７１４３７＝４．０５分間］。Ｈ¹ＮＭＲ（ＤＭＳＯ）：δ１０．８６（１Ｈ，ｂｓ）；７．７５（１Ｈ，ｄ）；７．７０（１Ｈ，ｓ）；７．５０（１Ｈ，ｍ）；６．８８（２Ｈ，ｍ）；４．７２（１Ｈ，ｂｓ）；３．７８（１Ｈ，ｂｓ）；３．５６（４Ｈ，ｍ）；３．３２（６Ｈ，ｍ）；３．１５（１Ｈ，ｍ）；２．４３（８Ｈ，ｂｍ）

実施例６
２，４−ジメチル−５−［２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミドの合成
５−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１１３ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ）を１−アミノ−３−モルホリン−４−イル−プロパン−２−オール（７４ｍｇ，０．４８ｍｍｏｌ）と縮合させて，２，４−ジメチル−５−［２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド（７７ｍｇ，４５．３％）を沈殿させた。
¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ２．２７（ｍ，１Ｈ），２．３２（ｍ，１Ｈ），２．４０（ｍ，４Ｈ），２．４０，２．４２（２ｘｓ，６Ｈ，２ｘＣＨ₃），３．１５（ｓ，１Ｈ），３．３２（ｍ，１Ｈ），３．５５（ｍ，４Ｈ），３．７７（ｍ，１Ｈ），４．７４（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ，ＯＨ），６．８６（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），６．９６（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，１Ｈ），７．１０（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．４９（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），７．６１（ｓ，１Ｈ），７．７７（ｄ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ）（芳香族およびビニル），１０．８８（ｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），１３．６２（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４２５．４（Ｍ＋１）

実施例７
５−［５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデン−メチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド（化合物７）の合成
５−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１２６．６ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ）を１−アミノ−３−モルホリン−４−イル−プロパン−２−オール（７４ｍｇ，０．４８ｍｍｏｌ）と縮合させて，５−［５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド（１０７ｍｇ，５８％）を沈殿させた。
¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ２．２９（ｍ，１Ｈ），２．３３（ｍ，１Ｈ），２．３９（ｍ，４Ｈ），２．４０，２．４２（２ｘｓ，６Ｈ，２ｘＣＨ₃），３．１５（ｓ，１Ｈ），３．３７（ｍ，１Ｈ），３．５５（ｍ，４Ｈ），３．７７（ｍ，１Ｈ），４．７４（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ，ＯＨ），６．８５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１１（ｄｄ，Ｊ＝２．０，８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５３（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），７．７５（ｓ，１Ｈ），７．９７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）（芳香族およびビニル），１０．９９（ｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），１３．６２（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４５７．４（Ｍ−１）

実施例８
５−［５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデン−メチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミドの合成
５−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（７２．２ｍｇ，０．２ｍｍｏｌ）を１−アミノ−３−モルホリン−４−イル−プロパン−２−オール（３８ｍｇ，０．２４ｍｍｏｌ）と縮合させて，５−［５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−アミド（５５ｍｇ，５５％）を沈殿させた。
¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ２．２７（ｍ，１Ｈ），２．３２（ｍ，１Ｈ），２．３９（ｍ，４Ｈ），２．４１，２．４２（２ｘｓ，６Ｈ，２ｘＣＨ₃），３．１３（ｓ，１Ｈ），３．３５（ｍ，１Ｈ），３．５５（ｍ，４Ｈ），３．７７（ｍ，１Ｈ），４．７４（ｄ，Ｊ＝４．４Ｈｚ，１Ｈ，ＯＨ），６．８０（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．２４（ｄｄ，Ｊ＝２．０，８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５１（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），７．７６（ｓ，１Ｈ），８．０９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ）（芳香族およびビニル），１０．９９（ｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），１３．６２（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）５０３．４（Ｍ−１）

実施例９
２，４−ジメチル−５−［２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデン−メチル］−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−［１，２，３］トリアゾール−１−イル−プロピル）−アミドの合成
工程１
エタノール（５０ｍＬ）中の３−［１，２，３］トリアゾール（２．０ｇ，２９ｍｍｏｌ），エピクロロヒドリン（３．４ｍｌ，４３．５ｍｍｏｌ）およびＮ，Ｎ−ジイソプロピル−エチルアミン（２．６ｍＬ，１５ｍｍｏｌ）の混合物を室温で一晩撹拌した。溶媒を除去した後，残渣をフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ₂Ｃｌ₂／ＣＨ₃ＯＨ＝１００／１−１００／２−１００／４）により精製して，１−クロロ−３−（１，２，３）−トリアゾール−２−イルプロパン−２−オール（２．１ｇ，４５％）［¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ３．５２（ｍ，２Ｈ，ＯＨおよびＣＨ₂），３．６０（ｄｄ，Ｊ＝５．２，１１．２Ｈｚ，１Ｈ），４．３６（ｍ，１Ｈ，ＣＨ），４．６８（ｍ，２Ｈ），７．６７（ｓ，２Ｈ）．ＭＳ（ｍ／ｚ）１６２．１（Ｍ＋１）］，および１−クロロ−３−（１，２，３）トリアゾール−１−イルプロパン−２−オール（２．３ｇ，４９％）［¹ＨＮＭＲ（ＣＤＣｌ₃）δ３．５６（ｓ，１Ｈ），３．５７（ｓ，１Ｈ），４．３５（ｍ，１Ｈ），４．５３（ｄｄ，Ｊ＝７．２，１４Ｈｚ，１Ｈ），４．６７（ｄｄ，Ｊ＝３．８，１４Ｈｚ，１Ｈ），７．６７（ｓ，１Ｈ），７．７１（ｓ，１Ｈ）．ＭＳ（ｍ／ｚ）１６２．１（Ｍ＋１）］を得た。

工程２
１−クロロ−３（１，２，３）トリアゾール−１−イルプロパン−２−オール（２．３ｇ，１３ｍｍｏｌ）を，密封圧力容器中で６０℃で一晩メタノール（２５重量％，２０ｍＬ）中のＮＨ₃の溶液で処理した。室温に冷却した後，窒素を反応混合物に吹き込んでアンモニアを除去した。溶媒を蒸発させて，１−アミノ−３−（１，２，３）トリアゾール−１−イルプロパン−２−オール（２．５７ｇ，１００％）の塩酸塩を得た。
¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ２．６８（ｄｄ，Ｊ＝８．８，１２．８Ｈｚ，１Ｈ），２．９７（ｄｄ，Ｊ＝３．６，１２．８Ｈｚ，１Ｈ），４．１５（ｍ，１Ｈ），４．４４（ｄｄ，Ｊ＝６．４，１４Ｈｚ，１Ｈ），４．５７（ｄｄ，Ｊ＝４．６，１４Ｈｚ，１Ｈ），５．９５（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ，ＯＨ），７．７７（ｓ，１Ｈ），８．０１（ｂｒｓ．，３Ｈ，ＮＨ₃ ⁺），８．１２（ｓ，１Ｈ）．ＭＳ（ｍ／ｚ）１４３．１（Ｍ＋１）

工程３
５−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１１３ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ）を１−アミノ−３（１，２，３）トリアゾール−１−イル−プロパン−２−オール（８５ｍｇ，０．４８ｍｍｏｌ）と縮合させて，２，４−ジメチル−５−［２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−［１，２，３］トリアゾール−１−イル−プロピル）−アミド（７０ｍｇ，４１％）を沈殿させた。
¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ２．４５，２．４８（２ｘｓ，６Ｈ，２ｘＣＨ₃），３．３５（ｍ，２Ｈ），４．０２（ｍ，１Ｈ），４．３２（ｄｄ，Ｊ＝７．６，１４Ｈｚ，１Ｈ），４．５３（ｄｄ，Ｊ＝３．４，１４Ｈｚ，１Ｈ），５．４３（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ，ＯＨ），６．９１（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．０１（ｔ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），７．１５（ｔ，Ｊ＝８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．６６（ｓ，１Ｈ），７．１２（ｔ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ），７．７４（ｓ，１Ｈ），７．７７（ｄ，Ｊ＝７．６Ｈｚ，１Ｈ），８．１１（ｓ，１Ｈ），１０．９３（ｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），１３．６８（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４０５．４（Ｍ−１）

実施例１０
５−［５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデン−メチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−［１，２，３］トリアゾール−１−イル−プロピル）−アミドの合成
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１２０ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ）を１−アミノ−３（１，２，３）トリアゾール−１−イル−プロパン−２−オール（８５ｍｇ，０．４８ｍｍｏｌ）と縮合させて，５−［５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−［１，２，３］トリアゾール−１−イル−プロピル）−アミド（１００ｍｇ，６２％）を沈殿させた。
¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ２．４２，２．４４（２ｘｓ，６Ｈ，２ｘＣＨ₃），３．２７（ｍ，２Ｈ），３．９８（ｍ，１Ｈ），４．２７（ｄｄ，Ｊ＝７．６，１４Ｈｚ，１Ｈ），４．５０（ｄｄ，Ｊ＝３．４，１３．６Ｈｚ，１Ｈ），５．３８（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ，ＯＨ），６．８２（ｄｄ，Ｊ＝４．４，８．４Ｈｚ，１Ｈ），６．９１（ｔｄ，²Ｊ＝２．４，³Ｊ＝９．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｍ，３Ｈ），７．７５（ｄｄ，Ｊ＝２．４，９．２Ｈｚ，１Ｈ），８．１１（ｓ．１Ｈ），１０．９３（ｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），１３．７３（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４２３．４（Ｍ−１）

実施例１１
５−［５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデン−メチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−［１，２，３］トリアゾール−１−イル−プロピル）−アミドの合成
５−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１２６．６ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ）を，１−アミノ−３（１，２，３）トリアゾール−１−イル−プロパン−２−オール（８５ｍｇ，０．４８ｍｍｏｌ）と縮合させて，５−［５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−［１，２，３］トリアゾール−１−イル−プロピル）−アミドを沈殿させた（４８ｍｇ，２７％）。
¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ２．４２，２．４４（２ｘｓ，６Ｈ，２ｘＣＨ₃），３．２７（ｍ，２Ｈ），３．９９（ｍ，１Ｈ），４．２８（ｄｄ，Ｊ＝７．８，１４Ｈｚ，１Ｈ），４．５１（ｄｄ，Ｊ＝３．２，１４Ｈｚ，１Ｈ），５．３９（ｄ，Ｊ＝６．０Ｈｚ，１Ｈ，ＯＨ），６．８５（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．１２（ｄｄ，Ｊ＝２．０，８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｍ，２Ｈ），７．７４（ｓ，１Ｈ），７．９７（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．０７（ｓ，１Ｈ），１０．９９（ｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），１３．６５（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４３９．４（Ｍ−１）

実施例１２
５−［５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデン−メチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−［１，２，３］トリアゾール−１−イル−プロピル）−アミドの合成
５−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１４４．４ｍｇ，０．４ｍｍｏｌ）を，１−アミノ−３（１，２，３）トリアゾール−１−イル−プロパン−２−オール（８５ｍｇ，０．４８ｍｍｏｌ）と縮合させて，５−［５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ヒドロキシ−３−［１，２，３］トリアゾール−１−イル−プロピル）−アミド（１３０ｍｇ，６７％）を沈殿させた。
¹ＨＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ２．４１，２．４４（２ｘｓ，６Ｈ，２ｘＣＨ₃），３．２７（ｍ，２Ｈ），３．９９（ｍ，１Ｈ），４．２８（ｄｄ，Ｊ＝７．６，１４Ｈｚ，１Ｈ），４．５０（ｄｄ，Ｊ＝３．６，１４Ｈｚ，１Ｈ），５．４０（ｄ，Ｊ＝５．６Ｈｚ，１Ｈ，ＯＨ），６．８１（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．２４（ｄｄ，Ｊ＝２．０，８．０Ｈｚ，１Ｈ），７．７０（ｍ，２Ｈ），７．７７（ｓ，１Ｈ），８．０７（ｓ．１Ｈ），８．１０（ｄ，Ｊ＝１．６Ｈｚ，１Ｈ），１１．０（ｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），１３．６４（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＬＣ−ＭＳ（ｍ／ｚ）４８５．４（Ｍ−１）

実施例１３
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジエチルアミノ−エチル）アミド（化合物１）の合成
５−フルオロ−１，３−ジヒドロインドール−２−オン（０．５４ｇ，３．８ｍｍｏｌ）を，５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジエチルアミノエチル）アミドと縮合させて，０．８３ｇ（５５％）の標題化合物を黄緑色固体として得た。
¹ＨＮＭＲ（３６０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ₆）δ１３．６６（ｓ，１Ｈ，ＮＨ），１０．８３（ｓ，ｂｒ，１Ｈ，ＮＨ），７．７３（ｄｄ，Ｊ＝２．５＆９．４Ｈｚ，１Ｈ），７．６９（ｓ，１Ｈ，Ｈ−ビニル），７．３７（ｔ，１Ｈ，ＣＯＮＨＣＨ₂ＣＨ₂），６．９１（ｍ，１Ｈ），６．８１−６．８５（ｍ，１Ｈ），３．２７（ｍ，２Ｈ，ＣＨ₂），２．５１（ｍ，６Ｈ，３ｘＣＨ₂），２．４３（ｓ，３Ｈ，ＣＨ₃），２．４１（ｓ，３Ｈ，ＣＨ₃），０．９６（ｔ，Ｊ＝６．９Ｈｚ，６Ｈ，Ｎ（ＣＨ₂ＣＨ₃）₂）．ＭＳ−ＥＩｍ／ｚ３９８［Ｍ＋］

５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジエチルアミノ−エチル）アミドの合成の別法
ヒドラジン水和物（５５％，３０００ｍＬ）および５−フルオロイサチン（３００ｇ）を１００℃に加熱した。撹拌しながら１２０分間かけて追加の５−フルオロ−イサチン（５００ｇ）を少しずつ（１００ｇ）加えた。混合物を１１０℃に加熱し，４時間撹拌した。混合物を室温に冷却し，固体を真空濾過により回収して，粗（２−アミノ−５−フルオロ−フェニル）−酢酸ヒドラジド（７４８ｇ）を得た。ヒドラジドを水（７００ｍＬ）に懸濁し，１２Ｎ塩酸で混合物のｐＨを＜ｐＨ３に調節した。混合物を室温で１２時間撹拌した。固体を真空濾過により回収し，水で２回洗浄した。生成物を真空下で乾燥して，５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オン（６００ｇ，７３％収率）を褐色粉体として得た。
¹Ｈ−ＮＭＲ（ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ３．４６（ｓ，２Ｈ，ＣＨ₂），６．７５，６．９５，７．０５（３ｘｍ，３Ｈ，芳香族），１０．３５（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＭＳｍ／ｚ１５２［Ｍ＋ｌ］

３，５−ジメチル−１Ｈ−ピロール−２，４−ジカルボン酸２−ｔｅｒｔ−ブチルエステル４−エチルエステル（２６００ｇ）およびエタノール（７８００ｍＬ）を激しく撹拌しながら１０Ｎ塩酸（３６５０ｍＬ）をゆっくり加えた。温度は２５℃から３５℃に上昇し，ガスが発生し始めた。混合物を５４℃に暖め，さらに加熱しながら１時間撹拌し，このとき温度は６７℃であった。混合物を５℃に冷却し，３２Ｌの氷および水を撹拌しながらゆっくり加えた。固体を真空濾過により回収し，水で３回洗浄した。固体を恒量となるまで風乾して，２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル（１４１８ｇ，８７％収率）をピンク色がかった固体として得た。
¹Ｈ−ＮＭＲ（ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ２．１０，２．３５（２ｘｓ．２ｘ３Ｈ，２ｘＣＨ₃），４．１３（ｑ，２Ｈ，ＣＨ₂），６．３７（ｓ，１Ｈ，ＣＨ），１０．８５（ｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＭＳｍ／ｚ１６７［Ｍ＋ｌ］

ジメチルホルムアミド（３２２ｇ）およびジクロロメタン（３７００ｍＬ）を氷浴中で４℃に冷却し，オキシ塩化リン（６８４ｇ）を撹拌しながら加えた。固体の２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル（６７０ｇ）を１５分間かけて少しずつゆっくり加えた。到達した最高温度は１８℃であった。混合物を１時間加熱還流し，氷浴中で１０℃に冷却し，激しく撹拌しながら１．６Ｌの氷水を急速に加えた。温度は１５℃に上昇した。激しく撹拌しながら１０Ｎ塩酸（１．６Ｌ）を加えた。温度は２２℃に上昇した。混合物を３０分間放置し，層を分離させた。温度は最高４０℃に達した。水性層を１０Ｎ水酸化カリウム（３．８Ｌ）で添加の間に温度が５５℃に達しこの温度で保たれるような速度でｐＨ１２−１３に調節した。添加が完了した後，混合物を１０℃に冷却し，１時間撹拌した。固体を真空濾過により回収し，水で４回洗浄して，５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル（７７８ｇ，１００％収率）を黄色固体として得た。
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ１．２５（ｔ，３Ｈ，ＣＨ₃），２．４４，２．４８（２ｘｓ，２ｘ３Ｈ，２ｘＣＨ₃），４．１６（ｑ，２Ｈ，ＣＨ₂），９．５９（ｓ，１Ｈ，ＣＨＯ），１２．１５（ｂｒｓ，１Ｈ，ＮＨ）．ＭＳｍ／ｚ１９５［Ｍ＋１］

５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸エチルエステル（８０６ｇ），水酸化カリウム（５４８ｇ），水（２４００ｍＬ）およびメタノール（３００ｍＬ）を撹拌しながら２時間還流し，次に８℃に冷却した。混合物をジクロロメタンで２回抽出した。温度を１５℃以下に保ちながら水性層を１０００ｍＬの１０Ｎ塩酸でｐＨ４に調節した。水を加えて撹拌を容易にした。固体を真空濾過により回収し，水で３回洗浄し，真空下で５０℃で乾燥して，５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（６４５ｇ，９３．５％収率）を黄色固体として得た。
¹Ｈ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６）δ２．４０，２．４３（２ｘｓ，２ｘ３Ｈ，２ｘＣＨ₃），９．５７（ｓ，１Ｈ，ＣＨＯ），１２．０７（ｂｒｓ，２Ｈ，ＮＨ＋ＣＯＯＨ）．ＭＳｍ／ｚ１６８［Ｍ＋１］

５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（１２０４ｇ）および６０２０ｍＬのジメチルホルムアミドを室温で撹拌し，その間に１−（３−ジメチル−アミノプロピル−３−エチルカルボジイミド塩酸（２０７１ｇ），ヒドロキシベンゾトリアゾール（１４６０ｇ），トリエチルアミン（２０１６ｍＬ）およびジエチルエチレンジアミン（１２１５ｍＬ）を加えた。混合物を室温で２０時間撹拌した。混合物を３０００ｍＬの水，２０００ｍＬのブラインおよび３０００ｍＬの飽和炭酸水素ナトリウム溶液で希釈し，１０Ｎ水酸化ナトリウムでｐＨを１０より高く調節した。混合物を各５０００ｍＬのジクロロメタン中１０％メタノールで２回抽出し，抽出物を合わせ，無水硫酸マグネシウムで乾燥し，回転蒸発乾固させた。混合物を１９５０ｍＬのトルエンで希釈し，再び回転蒸発乾固させた。残渣を３：１ヘキサン：ジエチルエーテル（４０００ｍＬ）中で破砕した。固体を真空濾過により回収し，４００ｍＬの酢酸エチルで２回洗浄し，真空下で３４℃で２１時間乾燥して，５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジエチルアミノ−エチル）−アミド（８１９ｇ，４３％収率）を淡褐色固体として得た。
¹Ｈ−ＮＭＲ（ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ０．９６（ｔ，６Ｈ，２ｘＣＨ₃），２．３１，２．３８（２ｘｓ，２ｘＣＨ₃），２．５１（ｍ，６Ｈ，３ｘＣＨ₂），３．２８（ｍ，２Ｈ，ＣＨ₂），７．３４（ｍ，１Ｈ，アミドＮＨ），９，５６（ｓ，１Ｈ，ＣＨＯ），１１．８６（ｓ，１Ｈ，ピロールＮＨ）．ＭＳｍ／ｚ２６６［Ｍ＋１］

５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジエチルアミノエチル）−アミド（８０９ｇ），５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−インドール−２−オン（４３８ｇ），エタノール（８０００ｍＬ）およびピロリジン（１３ｍＬ）を７８℃で３時間加熱した。混合物を室温に冷却し，固体を真空濾過により回収し，エタノールで洗浄した。固体をエタノール（５９００ｍＬ）とともに７２℃で３０分間撹拌した。混合物を室温に冷却した。固体を真空濾過により回収し，エタノールで洗浄し，真空下で５４℃で１３０時間乾燥して，５−［５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル］−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジエチルアミノ−エチル）−アミド（１０１３ｇ，８８％収率）を橙色固体として得た。
¹Ｈ−ＮＭＲ（ジメチルスルホキシド−ｄ６）δ０．９８（ｔ，６Ｈ，２ｘＣＨ₃），２．４３，２．４４（２ｘｓ，６Ｈ，２ｘＣＨ₃），２．５０（ｍ，６Ｈ，３ｘＣＨ₂），３．２８（ｑ，２Ｈ，ＣＨ₂），６．８４，６．９２，７．４２，７．７１，７．５０（５ｘｍ，５Ｈ，芳香族，ビニル，ＣＯＮＨ），１０．８８（ｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），１３．６８（ｓ，１Ｈ，ピロールＮＨ）．ＭＳｍ／ｚ３９７［Ｍ−１］

５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ジエチルアミノ−エチル）アミドのリンゴ酸塩は，米国特許出願１０／２８１，９８５（８月１３日出願２００２年，米国特許仮出願６０／３１２，３５３（２００１年８月１５日出願）に基づく優先権を主張する，その全体を本明細書の一部としてここに引用する）の開示にしたがって製造することができる。

５−（５−ブロモ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸，５−（５−クロロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸，５−（２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸の合成は，米国特許出願０９／７８３，２６４（２００１年２月１４日出願，標題“ＰＹＲＲＯＬＥ ＳＵＢＳＴＩＴＵＴＥＤ ２−ＩＮＤＯＬＩＮＯＮＥ−−ＰＲＯＴＥＩＮ ＫＩＮＡＳＥ ＩＮＨＩＢＩＴＯＲＳ”，その全体を本明細書の一部としてここに引用する）に記載されている。

実施例１４
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−アミド（化合物２）
５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−インドリン−２−オンを５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−ピロリジン−１−イル−エチル）−アミドと縮合させて，標題化合物を得た。
ＭＳ＋ｖｅＡＰＣＩ３９７［Ｍ＋１］

実施例１５
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−エチルアミノ−エチル）−アミド（化合物８）
５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−エチルアミノ−エチル）−アミド（９９ｇ），エタノール（４００ｍｌ），５−フルオロ−２−オキシインドール（３２ｇ）およびピロリジン（１．５ｇ）を撹拌しながら３時間還流した。混合物を室温に冷却し，固体を真空濾過により回収した。固体をエタノール中で６０℃で撹拌し，室温に冷却し，真空濾過により回収した。生成物を真空下で乾燥して，５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−（３Ｚ）−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−エチルアミノ−エチル）−アミド（７５ｇ，９５％収率）を得た。
¹Ｈ−ＮＭＲ（ジメチルスルホキシド−ｄ₆）(１．０３（ｔ，３Ｈ，ＣＨ₃），２．４２，２．４４（２ｘｓ，６Ｈ，２ｘＣＨ₃），２．５６（ｑ，２Ｈ，ＣＨ₂），２．７０，３．３０（２ｘｔ，４Ｈ，２ｘＣＨ₂），６．８５，６．９２，７．５８，７．７２，７．７６（５ｘｍ，５Ｈ，芳香族，ビニル，およびＣＯＮＨ），１０．９０（ｂｒｓ，１Ｈ，ＣＯＮＨ），１３．６５（ｂｒｓ，１Ｈ，ピロールＮＨ）．ＭＳｍ／ｚ３６９［Ｍ−１］

実施例１６
３−［５［メチル−２−（２−オキソ−１，２−ジヒドロインドール−３−イリデンメチル）−１Ｈ−ピロール−３−イル］−プロピオン酸（化合物１０）
１，３−ジヒドロインドール−２−オンを３−（２−ホルミル−５−メチル−１Ｈ−ピロール−３−イル）−プロピオン酸と縮合させて，標題化合物を得た。

実施例１７
５−（５−フルオロ−２−オキソ−１，２−ジヒドロ−インドール−３−イリデンメチル）−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−モルホリン−４−イル−エチル）−アミド（化合物３）
５−フルオロ−１，３−ジヒドロ−インドリン−２−オンを５−ホルミル−２，４−ジメチル−１Ｈ−ピロール−３−カルボン酸（２−モルホリン−１−イル−エチル）−アミドと縮合させて，標題化合物を得た。

生物学的実施例
最初に用いた細胞株は，ＦＬＴ−３チロシンキナーゼを発現することが知られているＯＣ１−ＡＭＬ５細胞株であった。この細胞株は，液体培地における成長を維持するために，サイトカインを含有する慣用的な培地で維持した。この細胞株は，ＦＬＴ−３リガンドおよびＦＬＴ−３を阻害する可能性のある化合物によるＦＬＴ−３シグナリングの活性化および阻害を評価するモデルを提供する。この細胞株を用いてＦＬＴ−３の生物学的意義を評価することができる。

実施例１
ＦＬＴ−３シグナリングの評価
細胞をＦＬＴ−３リガンドで刺激し，溶解した。市販の抗体を用いて溶解物からＦＬＴ−３を免疫沈殿させた。蛋白質をＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動で分離し，膜に移し，ウエスタンブロッティングにより，ホスホチロシンについて，次に対照として総ＦＬＴ−３蛋白質について分析した。

ＦＬＴ−３−野生型を発現するＯＣ１−ＡＭＬ５細胞株を入手した（Ｐｈａｒｍａｃｉａ）。まず，ＦＬＴ−３リガンドがＦＬＴ−３を介する生物学的応答を刺激し，化合物がこれを阻害する能力を，細胞生存能力（トリパンブルーアッセイ）および細胞増殖（アラマーブルーアッセイ）の分析により評価した。データは，ＦＬＴ−３リガンドは細胞数を増加させたが，化合物１に応答したある程度の阻害が明らかであることを示唆した。このことは，化合物１がＦＬＴ−３を阻害することを示唆する。

実施例２
免疫沈殿／ウエスタン分析によるＦＬＴ−３発現およびリン酸化
（ｉ）ＯＣ１−ＡＭＬ５細胞
ＯＣ１−ＡＭＬ５細胞を用いて，ＦＬＴ−３リガンドがＦＬＴ−３のリン酸化を刺激することが観察された。リン酸化は化合物１により減少し，このことから，化合物１がＦＬＴ−３レセプターを阻害することが確認された。

また，ＦＬＴ−３リガンドによる下流の経路の活性化，特にＳｔａｔ５およびｅｒｋも調べた。Ｓｔａｔ５およびＥｒｋは，ＲＴＫシグナリングの下流のメディエータであり，ＦＬＴ−３シグナリングの情報を提供することができる。Ｓｔａｔ５は，細胞生存および増殖に関与する多くの遺伝子を制御する転写因子である。Ｅｒｋ１／２は，Ｒａｆシグナリング経路上のキナーゼである。３つの方法，すなわち，ＩＰ／ウエスタン，ホスホ特異的抗体を用いる直接ウエスタンおよびゲルシフト分析により，ＦＬＴ−３リガンドに応答したＳｔａｔ５の活性化が観察された。Ｓｔａｔ５の活性は，化合物１により阻害された。ｅｒｋ１／２のリン酸化もまたＦＬＴ−３リガンドにより活性化され，化合物１により阻害された。一方，ＩＬ−３依存性ｅｒｋ活性化は阻害されず，このことは，化合物１の効果が特異的であることを示唆する。

（ｉｉ）正常ＰＢＭＣ
正常血液細胞におけるＦＬＴ−３シグナリングを調べるために，正常ドナー血液から末梢血単核細胞（ＰＢＭＣ）を単離し，ＦＬＴ−３シグナリングの分析に用いた。ＰＢＭＣにおいてＦＬＴ−３リガンドはＳｔａｔ５リン酸化を刺激し，活性化ＦＬＴ−３が弱く検出された。

実施例３
化合物１がインビトロで増殖に及ぼす影響を調べるための別の細胞株の使用；ＭＶ４１１（ＩＴＤ変異体ＦＬＴ−３）およびＲＳ４１１（野生型ＦＬＴ−３）
この実施例は，ＯＣ１−ＡＭＬ５細胞株において認められる化合物１によるＦＬＴ−３シグナリングの阻害が，野生型（ＲＳ４１１）または変異体ＦＬＴ−３（ＭＶ４１１）においても認められるか否かを判定するために行った。

細胞株はＡＴＣＣから入手した。細胞増殖の分析は，化合物１がＲＳ４１１（野生型ＦＬＴ−３）およびＭＶ４１１の両方について拡張を阻害することを示した。このことは，化合物１が，野生型ＦＬＴ−３を標的とすることに加えて，白血病におけるＩＴＤ変異体ＦＬＴ−３をも標的としうるかもしれないことを示す。

ＩＴＤ−変異体細胞が化合物１に対する増加した感受性を示すか否かを調べるために，追加の実験を行った。アポトーシスは，ＰＡＲＰ切断の分析により，およびカスパーゼ３染色により測定した。いずれの方法も，化合物１がアポトーシスを引き起こし，ＩＴＤ−変異体細胞は野生型細胞より感受性が高いことを示した。図１および２を参照。

実施例４
ＭＶ４１１（ＩＴＤ変異体ＦＬＴ−３）およびＲＳ４１１（野生型ＦＬＴ−３）において化合物１がＦＬＴ−３リン酸化に及ぼす影響
市販の抗体を用いてＦＬＴ−３を溶解物から沈殿させた。蛋白質をＳＤＳ−ポリアクリルアミドゲル電気泳動で分離し，膜に移し，ホスホチロシンについて，次に対照として総ＦＬＴ−３蛋白質について，ウエスタンブロッティングにより分析した。

ＩＰ／Ｗ分析は，ＭＶ４１１（ＩＴＤ変異体ＦＬＴ−３）およびＲＳ４１１（野生型ＦＬＴ−３）細胞株の両方において，化合物１がＦＬＴ−３リン酸化を阻害することを示した。ＷＴおよびＩＴＤ変異体ＦＬＴ−３に対する化合物１のおよそのＩＣ₅₀は，それぞれ２５０ｎＭおよび５０ｎＭであり，このことは，ＩＴＤ変異体が化合物１に対して増加した感受性を有する可能性を支持する。図３を参照。比較例は，次式：

を有する既知の蛋白質キナーゼ阻害剤である。比較化合物は野生型ＦＬＴ−３または変異体ＦＬＴ−３のいずれの阻害も示さなかった。

実施例５
化合物１のインビトロでの効果を調べるための，ＭＶ４１１（ＩＴＤ変異体ＦＬＴ−３）およびＲＳ４１１（野生型ＦＬＴ−３）を用いる血液スパイクモデルの確立
血液スパイクモデルは，インビトロモデルを用いる前臨床所見から臨床の状況を解釈することを助けるために開発されたエクスビボモデルである。血液細胞上で標的が発現される白血病を有する患者においては，血液細胞または全血における標的（例えばＦＬＴ−３）のリン酸化の分析により薬剤の効果をモニターすることが望ましい。血液スパイクモデルにおいては，目的とするレセプターを発現する細胞を，正常ヒト血液ドナー血液（正常血液は高レベルの標的蛋白質を発現しない）中に加える（スパイクする）。必要に応じて化合物およびリガンドを加え，細胞を溶解し，免疫沈殿およびウエスタンブロット分析により蛋白質のリン酸化および発現を分析する。これは臨床状況を模倣し，標的を阻害するために必要な化合物の時間および用量依存性を予測することを可能とする。

化合物１が白血病におけるＦＬＴ−３のリン酸化を阻害する能力を予測するために，ＦＬＴ−３を発現する細胞株を正常ヒトドナー血液に加え，リン酸化の阻害の速度論および用量依存性を測定した。この方法は，合成培地中で行われる慣用の生化学または細胞アッセイよりも，標的リン酸化の阻害に必要な化合物曝露のより正確な判定を提供するはずである。

実施例６
ＭＶ４１１およびＲＳ４１１細胞を用いるインビボモデルの確立および腫瘍発生性に及ぼす化合物１の影響
示される例においては，腫瘍細胞ＭＶ４１１を無胸腺マウスの後側腹部の皮下に移植した。腫瘍が特定のサイズに達したときに化合物またはベヒクル対照による処置を開始した。効力の測定のためには，種々の時点でベニエカリパスを用いて腫瘍成長を測定した。リン酸化の分析のためには，投与後に（この場合には４時間）腫瘍を切除し，液体窒素中で微粉状とし，溶解緩衝液中で均質化した。免疫沈殿およびウエスタンブロット分析によりＦＬＴ−３およびＳｔａｔ５のリン酸化を測定した。

無胸腺マウスにＭＶ４１１およびＲＳ４１１細胞を皮下注射して腫瘍形成を引き起こした。ＭＶ４１１は急速な腫瘍形成を引き起こす。一方，ＲＳ４１１細胞もまた腫瘍を形成するが，より遅い。化合物１で処置すると，腫瘍サイズが劇的に減少し，４日間の処置の間にほとんど検出不可能となった。さらに，未処置腫瘍においては活性化ＦＬＴ−３が検出可能であり，化合物１による４時間の処置により完全に阻害された。図４ａおよび４ｂを参照。このデータは，化合物がインビボでＦＬＴ−３推進性腫瘍に対する効果を有することの証拠を提供し，このことは，ＦＬＴ−３のリン酸化の阻害と一致する。

実施例７
ＶＥＧＦ産生のインビボ骨髄モデル
ＮＯＤ−ＳＣＩＤマウスをシクロホスファミド（Ｎｅｏｓａｒ，Ｐｈａｒｍａｃｉａ，Ｋａｌａｍａｚｏｏ，ＭＩ）を１５０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙで２日間腹腔内注入することにより前処置し（４６），２４時間休ませた後，５Ｘ１０⁶個の細胞を尾部静脈から静脈内（ｉ．ｖ．）注射した。実験の終了時に，マウスを麻酔し，心臓内穿刺により血液を回収した。骨髄細胞懸濁物は，マウス大腿骨に冷滅菌ＰＢＳを流すことにより調製した。図および表の注記に示されるように，所定の用量範囲の化合物１またはベヒクルを１日に１回経口投与した。すべての実験について，一対スチューデントｔ検定を用いて，処置群と対照群との間の差異を評価した（Ｐ＜０．０５が有意であると考えられた）。

上述のデータは，化合物１を用いる治療により，用量依存的様式で生存が長くなり，２０ｍｇ／ｋｇ／ｄａｙの化合物１の場合に最高の効力であったことを示す。

実施例８
ＮＯＤ−ＳＣＩＤマウスにおけるＶＥＧＦの検出
上述したＮＯＤ−ＳＣＩＤマウスからの血漿を，市販のキットを用いてＥＬＩＳＡによりＶＥＧＦ蛋白質レベルについて分析した。ＦＬＴ−３の活性化（野生型またはＩＴＤ）がＶＥＧＦ分泌と相関しており（上述の表に示される），これが化合物１により阻害されることを示すインビトロデータと一致して，化合物１処置マウスにおいて，疾病マウス（平均４９ｐｇ／ｍｌ）の血漿中でＶＥＧＦが検出可能であることが示された。このデータは，ＶＥＧＦがＦＬＴ−３シグナリングの標的であり，ＦＬＴ−３活性のバイオマーカーであるかもしれないことを示唆する。

実施例９
ヒトにおけるインビボでのＦＬＴ−３のリン酸化の阻害の実験
ＡＭＬ患者において第Ｉ相単回投与臨床試験を行った。主な目的はＦＬＴ−３リン酸化の調節（阻害）を評価することであった。また，すべての患者について相関的薬物動態学およびＦＬＴ−３ジェノタイピングを行った。ＦＬＴ−３リン酸化は，投与前，および化合物１の投与の４，６，８，１０，１２，２４，４８時間後に分析した。方法の開発から，ＦＬＴ−３リン酸化分析を可能とする最適な方法はＡＭＬ患者から採取した全血を溶解緩衝液に直接加え，その後にドライアイスで凍結することであることが示された。次に，サンプルを溶解し，ビーズコンジュゲート化抗ＦＬＴ−３抗体を用いる免疫抑制により，次に血液スパイクモデル（実施例５）と同様にホスホチロシンおよびＦＬＴ−３についてのウエスタンブロッティングにより，ＦＬＴ−３リン酸化について分析した。最初のエンドポイントである３／６患者におけるＦＬＴ−３リン酸化の＞５０％阻害は，ＷＴおよび変異体ＦＬＴ−３患者の両方を含む３名の患者において＞２００ｍｇの各用量レベルで達成された。２名の患者が示されている。この実験で得られたデータは，前臨床のインビトロおよびインビボ腫瘍モデルのデータと一致し，化合物１がヒトにおいてＦＬＴ−３を阻害することが確認された。全末梢血分析を用いるこの新規な単回投与実験は，化合物１が，インビボでＡＭＬ芽球の生存および増殖を媒介するＦＬＴ−３および下流のシグナリング経路を調節することを示した。

レセプター標的調節実験のための血液収集のプロトコル
溶解緩衝液はＳｕｇｅｎにより提供される（２０ｍｌ凍結アリコート，１．５ｘストック，以下に詳細に記載されるようにして調製する）：
ｉ） 溶解緩衝液（１．５Ｘストック，プロテアーゼ／ホスファターゼ阻害剤を含む）を室温で融解する。１０ｍｌの血液あたり２０ｍｌの溶解緩衝液が必要である。
ｉｉ） 融解した溶解緩衝液を氷上で保存する。
ｉｉｉ） 血液を採取し，１０ｍｌの血液を２０ｍｌの溶解緩衝液に加える。
ｉｖ） 数回反転させることにより混合し，速やかにドライアイス上または−７０℃に置く。
ｖ） −７０℃で保存し，ドライアイス上で輸送する。

（ｉ）溶解緩衝液組成物
以下の組成から５００ｍｌの１．５ｘストックを作成する

脱イオン水を加えて５００ｍｌとする。次に，混合物を０．２μＭのフィルターを通して濾過する。混合物は４℃で保存するか，またはプロテアーゼ阻害剤を加えた場合にはアリコート中で−２０℃で保存する。

（ｉｉ）プロテアーゼ阻害剤の添加
９ｍｌの１．５ｘ溶解緩衝液に以下を加える：

血液におけるＦＬＴ−３リン酸化の分析方法
凍結サンプルは使用するまで７０℃で保存した。白血球溶解物を３７℃で急速に融解し，２倍容量の溶解緩衝液（２０ｍＭ Ｔｒｉｓ，ｐＨ７．５，１３７ｍＭ ＮａＣｌ，１０％グリセロール，１％ＮＰ−４０，０．１％ＳＤＳ，２ｍＭ ＥＤＴＡ，５０ｍＭ ＮａＦ，１ｍＭ Ｎａ₃ＶＯ₄，２ｍＭ Ｐｅｆａｂｌｏｃ，２μｇ／ｍＬアプロトニン，３．５μｇ／ｍＬベスタチン，０．５μｇ／ｍｌ Ｅ−６４，０．５μｇ／ｍｌロイペプチンおよび０．７μｇ／ｍｌペプスタチンＡ）中で溶解させた。各溶解物中の蛋白質の量は，ＢＣＡ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ａｓｓａｙ（Ｐｉｅｒｃｅ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，Ｉｌ）を用いて測定した。各サンプルからの約３５ｍｇの溶解物をＦＬＴ−３，ｃ−ｋｉｔまたはＳｔａｔ５について免疫沈殿した。

免疫沈殿およびウエスタンブロット（ＩＰ／Ｗ）分析
細胞を，プロテアーゼおよびホスファターゼ阻害剤（５０ｍＭ フッ化ナトリウム，１ｍＭ オルトバナジン酸ナトリウム，２ｍＭ Ｐｅｆａｂｌｏｃ，１．２ｍＭ アプロチニン，４０ｍＭ ベスタチン，５．６ｍＭ Ｅ−６４，４ｍＭ ロイペプチン，および４ｍＭ ペプスタチンＡ）を含む溶解緩衝液（２０ｍＭ Ｔｒｉｓ，ｐＨ７．５；１３７ｍＭ ＮａＣｌ；１０％グリセロール；１％ＮＰ−４０；０．１％ＳＤＳ；２ｍＭ ＥＤＴＡ）中で溶解した。等量の蛋白質をＳＤＳ−ＰＡＧＥにより分離し，次にニトロセルロース膜に移した。ＦＬＴ３リン酸化の分析のためには，各サンプルからの等量の蛋白質をアガロース−コンジュゲート化抗ＦＬＴ３抗体（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ，ＣＡ）で４℃で一晩免疫沈殿させた。免疫複合体を洗浄し（１５０ｍＭ ＮａＣｌ，１．５ｍＭ ＭｇＣｌ₂，５０ｍＭ ＨＥＰＥＳ，ｐＨ７．５，１０％グリセロール，０．１％ＴｒｉｔｏｎＸ−１００，および１ｍＭ ＥＧＴＡ），ＳＤＳ−ＰＡＧＥを行った後，蛋白質をニトロセルロース膜に移した。膜を抗ホスホチロシン抗体（Ｕｐｓｔａｔｅ，Ｌａｋｅ Ｐｌａｃｉｄ，ＮＹまたはＴｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ，Ｌｅｘｉｎｇｔｏｎ，ＫＹ）で探索し，次にＲｅｓｔｏｒｅ Ｗｅｓｔｅｒｎ Ｂｌｏｔ Ｓｔｒｉｐｐｉｎｇ Ｂｕｆｆｅｒ（Ｐｉｅｒｃｅ，Ｒｏｃｋｆｏｒｄ，ＩＬ）で剥がした。膜を抗ＦＬＴ３抗体（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ）で再探索した。免疫沈殿およびウエスタンブロット分析用のＳｔａｔ５抗体は，それぞれＵｐｓｔａｔｅ ＢｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙおよびＴｒａｎｓｄｕｃｔｉｏｎ ｌａｂｓから入手した。

当業者には，本発明の精神および範囲から逸脱することなく本発明の方法および組成物において種々の改変および変更をなすことができることが明らかであろう。すなわち，本発明の改変および変更は，特許請求の範囲およびその均等物の範囲内にある限り，本発明によりカバーされることが意図される。

図１は，カスパーゼ３で染色した細胞株のＦＡＣＳプロファイルである。 図２は，ＰＡＲＰ切断のウエスタンブロットを示す。 図３は，ＦＬＴ−３免疫沈殿後のホスホチロシンのウエスタンブロットを示す。 図４は，ＦＬＴ−３免疫沈殿後のホスホチロシンのウエスタンブロットおよび薬剤治療後の時間に対する腫瘍サイズを示す。 図５は，化合物１を種々の投与量で与えた後の生存のパーセントを示す。

Claims (24)

1. 急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）を治療する方法であって，有効量の式Ｉ：
   

   

   ［式中，
   Ｒは，独立して，Ｈ，ＯＨ，アルキル，アリール，シクロアルキル，ヘテロアリール，アルコキシ，複素環およびアミノであり；
   各Ｒ₁は，独立して，アルキル，ハロ，アリール，アルコキシ，ハロアルキル，ハロアルコキシ，シクロアルキル，ヘテロアリール，複素環，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈，−ＮＲ₉Ｒ₁₀，−ＮＲ₉Ｃ（Ｏ）−Ｒ₁₂および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ₉Ｒ₁₀からなる群より選択され；
   各Ｒ₂は，独立して，アルキル，アリール，ヘテロアリール，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈およびＳＯ₂Ｒ"からなる群より選択され，Ｒ"は，アルキル，アリール，ヘテロアリール，ＮＲ₉Ｎ₁₀またはアルコキシであり；
   各Ｒ₅は，独立して，水素，アルキル，アリール，ハロアルキル，シクロアルキル，ヘテロアリール，複素環，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈および（ＣＨＲ）_rＲ₁₁からなる群より選択され；
   ＸはＯまたはＳであり；
   ｊは０−１であり；
   ｐは０−３であり；
   ｑは０−２であり；
   ｒは０−３であり；
   Ｒ₈は，−ＯＨ，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択され；
   Ｒ₉およびＲ₁₀は，独立して，Ｈ，アルキル，アリール，アミノアルキル，ヘテロアリール，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択されるか，またはＲ₉およびＲ₁₀は，Ｎと一緒になって環を形成してもよく，ここで，環原子は，Ｃ，Ｎ，ＯおよびＳからなる群より選択され；
   Ｒ₁₁は，−ＯＨ，アミノ，一置換アミノ，二置換アミノ，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択され；
   Ｒ₁₂は，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択され；
   Ｚは，
   −ＯＨ；
   −Ｏ−アルキル；
   −ＮＲ₃Ｒ₄（Ｒ₃およびＲ₄は，独立して，水素，アルキル，アリール，ヘテロアリール，シクロアルキル，および複素環からなる群より選択されるか，またはＲ₃およびＲ₄は，Ｎと一緒になって環を形成してもよく，環原子は，ＣＨ₂，Ｎ，ＯおよびＳからなる群より選択される）；または
   

   

   ［式中，Ｙは，独立して，ＣＨ₂，Ｏ，ＮまたはＳであり；
   ＱはＣまたはＮであり；
   ｎは，独立して，０−４であり；および
   ｍは０−３である］
   である］
   の化合物またはその塩を，そのような治療を必要とする患者に投与することを含む方法。
2. Ｒ₁がハロであり，ｐが１である，請求項１記載の方法。
3. ハロが，ＦおよびＣｌから選択される，請求項２記載の方法。
4. Ｚが−ＮＲ₃Ｒ₄であり，Ｒ₃およびＲ₄がモルホリン環を形成する，請求項２記載の方法。
5. Ｚが：
   

   

   ［式中，各ＹはＣＨ₂であり，各ｎは２であり，ｍは０であり，Ｒ₃およびＲ₄はモルホリン環を形成する］
   である，請求項１記載の方法。
6. Ｒ₂がメチルであり，ｑが２であり，メチルが３位および５位に結合している，請求項１−４のいずれかに記載の方法。
7. 投与される化合物が，式ＩＩ：
   

   

   の化合物である，請求項１記載の方法。
8. Ｒ₅がＨである，請求項７記載の方法。
9. Ｒ₂がメチルであり，ｑが２であり，メチルが３位および５位に結合している，請求項７記載の方法。
10. 投与される化合物が，以下の化合物：
    

    

    からなる群より選択される，請求項１記載の方法。
11. 患者がＦＬＴ−３−ＩＴＤポジティブである，請求項８記載の方法。
12. 患者がＦＬＴ−３野生型ポジティブである，請求項９記載の方法。
13. 式Ｉの化合物が，以下の化合物：
    

    

    からなる群より選択される，請求項１記載の方法。
14. 患者がヒトである，請求項１記載の方法。
15. 末梢血溶解物におけるＦＬＴ−３のリン酸化の阻害を検出し，リン酸化を分析する方法であって，
    阻害量の式Ｉ：
    

    

    ［式中，
    Ｒは，独立して，Ｈ，ＯＨ，アルキル，アリール，シクロアルキル，ヘテロアリール，アルコキシ，複素環およびアミノであり；
    各Ｒ₁は，独立して，アルキル，ハロ，アリール，アルコキシ，ハロアルキル，ハロアルコキシ，シクロアルキル，ヘテロアリール，複素環，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈，−ＮＲ₉Ｒ₁₀，−ＮＲ₉Ｃ（Ｏ）−Ｒ₁₂および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ₉Ｒ₁₀からなる群より選択され；
    各Ｒ₂は，独立して，アルキル，アリール，ヘテロアリール，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈およびＳＯ₂Ｒ"からなる群より選択され，Ｒ"は，アルキル，アリール，ヘテロアリール，ＮＲ₉Ｎ₁₀またはアルコキシであり；
    各Ｒ₅は，独立して，水素，アルキル，アリール，ハロアルキル，シクロアルキル，ヘテロアリール，複素環，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈および（ＣＨＲ）_rＲ₁₁からなる群より選択され；
    ＸはＯまたはＳであり；
    ｊは０−１であり；
    ｐは０−３であり；
    ｑは０−２であり；
    ｒは０−３であり；
    Ｒ₈は，−ＯＨ，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択され；
    Ｒ₉およびＲ₁₀は，独立して，Ｈ，アルキル，アリール，アミノアルキル，ヘテロアリール，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択され，またはＲ₉およびＲ₁₀は，Ｎと一緒になって環を形成してもよく，環原子は，Ｃ，Ｎ，ＯおよびＳからなる群より選択され；
    Ｒ₁₁は，−ＯＨ，アミノ，一置換アミノ，二置換アミノ，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択され；
    Ｒ₁₂は，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択され；
    Ｚは，
    −ＯＨ；
    −Ｏ−アルキル；
    −ＮＲ₃Ｒ₄（Ｒ₃およびＲ₄は，独立して，水素，アルキル，アリール，ヘテロアリール，シクロアルキル，および複素環からなる群より選択され，またはＲ₃およびＲ₄は，Ｎと一緒になって環を形成してもよく，環原子は，ＣＨ₂，Ｎ，ＯおよびＳからなる群より選択される）；または
    

    

    ［式中，Ｙは，独立して，ＣＨ₂，Ｏ，ＮまたはＳであり；
    ＱはＣまたはＮであり；
    ｎは，独立して，０−４であり；および
    ｍは０−３である］
    である］
    の化合物を，そのような治療を必要とする患者に投与することを含む方法。
16. ＦＬＴ−３が変異体ＦＬＴ−３である，請求項１５記載の方法。
17. ＦＬＴ−３が野生型ＦＬＴ−３である，請求項１５記載の方法。
18. ＦＬＴ−３がＦＬＴ−３−ＩＴＤである，請求項１６記載の方法。
19. 化合物を投与する前に，急性骨髄性白血病がＦＬＴ−３−ＩＴＤ ＡＭＬである，請求項１記載の方法。
20. ＶＥＧＦ蛋白質の発現の増加を測定することによりＦＬＴ−３のリン酸化を検出する，請求項１５記載の方法。
21. ＦＬＴ−３のリン酸化を阻害する方法であって，阻害量の式Ｉ：
    

    

    ［式中，
    Ｒは，独立して，Ｈ，ＯＨ，アルキル，アリール，シクロアルキル，ヘテロアリール，アルコキシ，複素環およびアミノであり；
    各Ｒ₁は，独立して，アルキル，ハロ，アリール，アルコキシ，ハロアルキル，ハロアルコキシ，シクロアルキル，ヘテロアリール，複素環，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈，−ＮＲ₉Ｒ₁₀，−ＮＲ₉Ｃ（Ｏ）−Ｒ₁₂および−Ｃ（Ｏ）ＮＲ₉Ｒ₁₀からなる群より選択され；
    各Ｒ₂は，独立して，アルキル，アリール，ヘテロアリール，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈およびＳＯ₂Ｒ"からなる群より選択され，Ｒ"は，アルキル，アリール，ヘテロアリール，ＮＲ₉Ｎ₁₀またはアルコキシであり；
    各Ｒ₅は，独立して，水素，アルキル，アリール，ハロアルキル，シクロアルキル，ヘテロアリール，複素環，ヒドロキシ，−Ｃ（Ｏ）−Ｒ₈および（ＣＨＲ）_rＲ₁₁からなる群より選択され；
    ＸはＯまたはＳであり；
    ｊは０−１であり；
    ｐは０−３であり；
    ｑは０−２であり；
    ｒは０−３であり；
    Ｒ₈は，−ＯＨ，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択され；
    Ｒ₉およびＲ₁₀は，独立して，Ｈ，アルキル，アリール，アミノアルキル，ヘテロアリール，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択されるか，または，Ｒ₉およびＲ₁₀は，Ｎと一緒になって環を形成してもよく，環原子は，Ｃ，Ｎ，ＯおよびＳからなる群より選択され；
    Ｒ₁₁は，−ＯＨ，アミノ，一置換アミノ，二置換アミノ，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択され；
    Ｒ₁₂は，アルキル，アリール，ヘテロアリール，アルコキシ，シクロアルキルおよび複素環からなる群より選択され；
    Ｚは，
    −ＯＨ；
    −Ｏ−アルキル；
    −ＮＲ₃Ｒ₄（Ｒ₃およびＲ₄は，独立して，水素，アルキル，アリール，ヘテロアリール，シクロアルキル，および複素環からなる群より選択されるか，または，Ｒ₃およびＲ₄は，Ｎと一緒になって環を形成してもよく，環原子は，ＣＨ₂，Ｎ，ＯおよびＳからなる群より選択される）；または
    

    

    ［式中，Ｙは，独立して，ＣＨ₂，Ｏ，ＮまたはＳであり；
    ＱはＣまたはＮであり；
    ｎは，独立して，０−４であり；および
    ｍは０−３である］
    である］
    の化合物を，そのような治療を必要とする患者に投与することを含む方法。
22. ＦＬＴ−３が変異体ＦＬＴ−３である，請求項２１記載の方法。
23. ＦＬＴ−３が野生型ＦＬＴ−３である，請求項２１記載の方法。
24. ＦＬＴ−３がＦＬＴ−３−ＩＴＤである，請求項２２記載の方法。
    
    
    

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