JP2005068130A - 肺疾患治療剤 - Google Patents

Abstract

【課題】 好中球性炎症を伴う肺疾患、例えば慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、肺気腫、慢性気管支炎、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、急性肺損傷（ＡＬＩ）などの治療および／または予防剤を提供すること。
【解決手段】 一般式（Ｉ）
【化５】

（式中、ｍは０〜４を表し、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^４は同一または異なって水素原子、低級アルキルなどを表し、Ｒ^５は低級アルコキシなどを表し、Ｒ^６は水素原子などを表し、Ｙは４−カルボキシフェニルなどを表す）で表される含酸素複素環化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する好中球性炎症を伴う肺疾患、例えばＣＯＰＤ、肺気腫、慢性気管支炎、ＡＲＤＳ、ＡＬＩなどの治療および／または予防剤を提供する。
【選択図】 なし

Description

本発明は、含酸素複素環化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤に関する。

気流閉塞をともなった慢性気管支炎、肺気腫などの慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）、急性肺損傷（ＡＬＩ）などは、慢性的な好中球性炎症を発症することを特徴とする肺疾患である［アメリカン・レビュー・オブ・レスピラトリー・ディジィズ（Ａｍ．Ｒｅｖ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｄｉｓ．）、１９８９年、第１４０巻、ｐ．１５２７；アメリカン・ジャーナル・オブ・レスピラトリー・アンド・クリティカル・ケア・メディシン（Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ Ｍｅｄ．）、１９９６年、第１５３巻、ｐ．５３０；カレント・オピニオン・イン・クリティカル・ケア（Ｃｕｒｒ．Ｏｐｉｎ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ）、２００1年、第7巻、ｐ．１］。このうち、ＣＯＰＤの薬物療法には、β刺激剤、抗コリン剤、テオフェリンなどの気管支拡張剤などが用いられているが抜本的な治療には繋がっていない［アメリカン・ジャーナル・オブ・レスピラトリー・アンド・クリティカル・ケア・メディシン（Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ Ｍｅｄ．）、２００１年、第１６３巻、ｐ．１２５６］。近年、ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ）−ＩＶ阻害剤によるＣＯＰＤの薬物療法が注目されている［クリニカル・アンド・エクスペリメンタル・アレルギー（Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ａｌｌｅｒｇｙ）、１９９９年、第２９巻、ｐ．９９；ランセット（Ｌａｎｃｅｔ）、２００１年、第３５８巻、ｐ．２６５］。一方、ＡＲＤＳおよびＡＬＩは、肺毛細血管、肺胞などの損傷に基づく、炎症病変として捉えられており、その治療法としてはもっぱら原因療法と呼吸不全対策、その他ステロイド投与などの対症療法が用いられている［アメリカン・ジャーナル・オブ・レスピラトリー・アンド・クリティカル・ケア・メディシン（Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ Ｍｅｄ．）、１９９４年、第１４９巻、ｐ．８１８；ニュー・イングランド・ジャーナル・オブ・メディシン（Ｎ．Ｅｎｇｌ．Ｊ．Ｍｅｄ．）、２０００年、第３４２巻、ｐ．１３３４］。

従来、一般式（Ｉ）で表される含酸素複素環化合物またはその薬理学的に許容される塩をＰＤＥ−ＩＶ阻害剤として用いることが知られている（特許文献１、２参照）。
アイソザイム選択的なＰＤＥ−ＩＶ阻害剤が、炎症の治療において、また気管支拡張薬として有用であることが知られているが、これまでに知られているＰＤＥ−ＩＶ阻害剤は、例えば、抗鬱作用や催吐作用をも発現すると報告されている［ＣＮＳ ドラッグ・レビューズ（ＣＮＳ Ｄｒｕｇ Ｒｅｖｉｅｗｓ）、２００１年、第７巻、ｐ．３８７；カレント・ファーマシューティカル・デザイン（Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｄｅｓｉｇｎ）、２００２年、第８巻、ｐ．１２５５］。ＰＤＥ−ＩＶは、炎症性細胞や気管支平滑筋のみならず、中枢神経系においても分布することが知られていることから［ジーン（Ｇｅｎｅ）、１９９４年、第１４９巻、ｐ．２３７］、これらＰＤＥ−ＩＶ阻害剤の多様な薬理作用は、中枢のまたは末梢のＰＤＥ−ＩＶを阻害することにより、発現したと考えられる。

末梢における疾患の治療を目的とする薬物にとっては、中枢神経系に対する薬理作用は、少なからず副作用に繋がる懸念があり、末梢選択的なＰＤＥ−ＩＶ阻害剤が望まれる。
国際公開第９８／２２４５５号パンフレット 国際公開第００／１４０８５号パンフレット

本発明の目的は、含酸素複素環化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する好中球性炎症を伴う肺疾患、例えばＣＯＰＤ、肺気腫、慢性気管支炎、ＡＲＤＳ、ＡＬＩなどの治療および／または予防剤を提供することにある。

本発明は、以下の（１）〜（１１）に関する。
（１） 一般式（Ｉ）

｛式中、ｍは０〜４の整数を表し、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^４は同一または異なって、水素原子、低級アルキル、シクロアルキル、低級アルケニル、シクロアルケニル、アリールまたはアラルキルを表すか、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^４の中で同一炭素原子上に存在する２つの基がその炭素原子と一緒になってスピロ飽和炭素環を形成するか、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^４の中で隣接する炭素原子上に存在する２つの基が該隣接する２つの炭素原子と一緒になって飽和炭素環を形成するか、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^４の中で隣接する炭素原子上に存在する２つの基が一緒になって結合を表し（既に存在する結合と一緒になって二重結合を形成する）、Ｒ^５は非置換またはハロゲン置換の低級アルコキシを表し、Ｒ^６は水素原子またはハロゲンを表し、Ｙは式（ＩＩ）

［式中、Ｒ^７はシアノ、エチニルまたはカルバモイルを表し、Ｒ^８は水素原子を表すか、またはＲ^７とＲ^８が一緒になって結合を表し（既に存在する結合と一緒になって二重結合を形成する）］または４−カルボキシフェニルを表す｝で表される含酸素複素環化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。
（２） ｍが０〜２の整数であり、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^４が水素原子であるか、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^４の中で同一炭素原子上に存在する２つの基がその炭素原子と一緒になってスピロ飽和炭素環を形成し、Ｒ^６が水素原子である（１）記載の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。
（３） ｍが１であり、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^４が水素原子である（１）または（２）記載の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。
（４） Ｒ^５がメトキシである（１）〜（３）のいずれかに記載の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。
（５） Ｙが式（ＩＩ）である（１）〜（４）のいずれかに記載の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。
（６） Ｙが４−カルボキシフェニルである（１）〜（４）のいずれかに記載の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。
（７） Ｒ^７がシアノであり、Ｒ^８が水素原子である（１）〜（５）のいずれかに記載の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。
（８） 好中球性炎症を伴う肺疾患が慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）である（１）〜（７）のいずれかに記載の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。
（９） 好中球性炎症を伴う肺疾患が肺気腫または慢性気管支炎である（１）〜（７）のいずれかに記載の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。
（１０） 好中球性炎症を伴う肺疾患が急性肺損傷（ＡＬＩ）である（１）〜（７）のいずれかに記載の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。
（１１） 好中球性炎症を伴う肺疾患が急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）である（１）〜（７）のいずれかに記載の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。

以下、一般式（Ｉ）で表される化合物を化合物（Ｉ）という。

本発明により、含酸素複素環化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する好中球性炎症を伴う肺疾患（例えば、ＣＯＰＤ、肺気腫、慢性気管支炎、ＡＲＤＳ、ＡＬＩなど）の治療および／または予防剤が提供される。

一般式（Ｉ）の各基の定義において、低級アルキルおよび低級アルコキシの低級アルキル部分としては、例えば直鎖または分岐状の炭素数１〜８のアルキル、具体的にはメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチル、イソブチル、ｓｅｃ−ブチル、ｔｅｒｔ−ブチル、ペンチル、ヘキシル、ヘプチル、オクチルなどがあげられる。
シクロアルキルとしては、例えば炭素数３〜１０のシクロアルキル、具体的にはシクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチル、シクロヘキシル、シクロヘプチル、シクロオクチル、シクロノニル、シクロデシルなどがあげられる。

低級アルケニルとしては、例えば直鎖または分岐状の炭素数２〜８のアルケニル、具体的にはビニル、１−プロペニル、アリル、メタクリル、１−ブテニル、クロチル、ペンテニル、イソプレニル、ヘキセニル、ヘプテニル、オクテニルなどがあげられる。
シクロアルケニルとしては、例えば炭素数４〜１０のシクロアルケニル、具体的にはシクロブテニル、シクロペンテニル、シクロヘキセニル、シクロヘプテニル、シクロオクテニル、シクロノネニル、シクロデセニルなどがあげられる。

アリールとしては、例えば炭素数６〜１８のアリール、具体的にはフェニル、ナフチル、アントラニルなどがあげられ、アラルキルとしては、例えば炭素数７〜１５のアラルキル、具体的にはベンジル、フェネチル、ベンズヒドリル、ナフチルメチルなどがあげられる。
同一炭素原子上に存在する２つの基がその炭素原子と一緒になって形成するスピロ飽和炭素環および隣接する炭素原子上に存在する２つの基が該隣接する２つの炭素原子と一緒になって形成する飽和炭素環としては、例えば炭素数３〜１０の飽和炭素環、具体的にはシクロプロパン、シクロブタン、シクロペンタン、シクロヘキサン、シクロヘプタン、シクロオクタン、シクロノナン、シクロデカンなどがあげられる。

ハロゲンおよびハロゲン置換の低級アルコキシにおけるハロゲンは、フッ素、塩素、臭素、ヨウ素の各原子を意味する。
化合物（Ｉ）の薬理学的に許容される塩は、薬理学的に許容される酸付加塩、金属塩、アンモニウム塩、有機アミン付加塩、アミノ酸付加塩などを包含する。
化合物（Ｉ）の薬理学的に許容される酸付加塩としては、塩酸塩、硫酸塩、硝酸塩、リン酸塩などの無機酸塩、酢酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、クエン酸塩などの有機酸塩があげられ、薬理学的に許容される金属塩としては、ナトリウム塩、カリウム塩、リチウム塩などのアルカリ金属塩、マグネシウム塩、カルシウム塩などのアルカリ土類金属塩、アルミニウム塩、亜鉛塩などがあげられ、薬理学的に許容されるアンモニウム塩としては、アンモニウム、テトラメチルアンモニウムなどの塩があげられ、薬理学的に許容される有機アミン付加塩としては、モルホリン、ピペリジンなどの付加塩があげられ、薬理学的に許容されるアミノ酸付加塩としては、グリシン、フェニルアラニン、リジン、アスパラギン酸、グルタミン酸などの付加塩があげられる。

次に、化合物（Ｉ）の製造方法について説明する。
化合物（Ｉ）は、国際公開第９８／２２４５５号パンフレットもしくは国際公開第００／１４０８５号パンフレットに記載の方法またはそれらに準じて製造することができる。
化合物（Ｉ）には、互変異性体などの立体異性体が存在し得るが、本発明の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤には、これらを含め、全ての可能な異性体およびそれらの混合物を使用することができる。

化合物（Ｉ）の塩を取得したいとき、化合物（Ｉ）が塩の形で得られるときはそのまま精製すればよく、また、遊離の形で得られるときは、化合物（Ｉ）を適当な溶媒に溶解または懸濁し、酸または塩基を加えて単離、精製すればよい。
また、化合物（Ｉ）およびその薬理学的に許容される塩は、水または各種溶媒との付加物の形で存在することもあるが、これらの付加物も本発明の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤に使用することができる。

化合物（Ｉ）の具体例を第１表に示す。

次に、化合物（Ｉ）の薬理作用について試験例により具体的に説明する。
試験例１：中枢移行性試験
９週齢のＳＤ系雄性ラット（日本チャールス・リバー、神奈川）を試験に供した。試験は非絶食下で行い、例数はｎ＝２とした。
化合物２を０．５重量／容量％メチルセルロース水溶液 ４００（メチルセルロース４００ｃＰ、和光純薬工業、大阪）に３ｍｇ／ｍＬの濃度になるよう懸濁させ、１０ｍＬ／ｋｇの用量で直接ラットの胃内に投与した（投与量：３０ｍｇ／ｋｇ）。

投与後０．５、１および２時間の各時点にラット尾静脈を剃刀で切傷後、ヘパリン処理したキャピラリーチューブ（Ｄｒｕｍｍｏｎｄ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ Ｃｏ．、Ｂｒｏｏｍａｌｌ、ＰＡ、ＵＳＡ）を用いて約３００μＬの血液を採取した。血液を遠心分離（９，１７０ｘｇ、１０分、４℃）することで血漿を得、得られた血漿サンプルを測定まで−２０℃で冷凍保存した。

最終採血時点での採血終了後、ラット大腿部動静脈を切開し、ヘパリンを少量添加したポリプロピレン製テストチューブに血液を採取してラットを放血死させた後、脳を摘出した。摘出した脳は生理食塩水で洗浄し、分析時まで−８０℃で冷凍保存した。
各時点で得られた血漿サンプル１００μＬにそれぞれ内部標準物質を含むメタノール溶液２００μＬを加えて攪拌し、氷中で２０分間放置後、遠心分離（２０，６００×ｇ、１０分、４℃）して、上清をＬＣ／ＭＳに注入し、化合物２の血漿中濃度を求めた。その結果、化合物２は、投与後２時間まで、持続的な血漿中濃度推移を示した。

摘出した脳を秤量後、脳重量と等量（１ｍＬ／ｇ脳）の精製水を添加し、ホモジナイザー［約１０００ｒｐｍで約３分間（５〜６回）粉砕、ホモジナイザー攪拌装置（１６−８０、池本理化学工業、東京）］を用いて氷冷下でホモジナイズした。さらに、内部標準物質を含む脳重量の２倍量（２ｍＬ／ｇ脳）のメタノール溶液を添加して再度氷冷下ホモジナイズし、脳のホモジネート液とした。得られた脳のホモジネート液を氷中で２０分間放置後、その４００μＬをマイクロチューブに分注し遠心分離（２０，６００ｘｇ、１０分、４℃）して、上清をＬＣ／ＭＳに注入し、化合物２の脳中濃度を求めた。

投与後２時間時点での化合物２の脳中濃度は１８９ｎｇ／ｍＬ（平均値、ｎ＝２）、血漿中濃度は６７９０ｍｇ／ｍＬ（平均値、ｎ＝２）であった。これより化合物２の脳中濃度／血漿中濃度の比は０．０２８１（２．８％）と算出された。脳の血管容積が脳の全組織量の約２％を占めることを考慮すれば、化合物２の脳内移行量は、無視できるレベルにあると考えられる（杉山 雄一 編集、ファーマコキネティクス研究の方法と技術 −前臨床から臨床第１相へ−、１９９３年、ｐ．２２７、日本薬物動態学会）。したがって、化合物（Ｉ）またはその薬理学的に許容される塩は末梢選択的なＰＤＥ−ＩＶ阻害剤であると考えられる。
試験例２：ラットリポポリサッカライド（ＬＰＳ）誘発肺障害モデルにおける化合物２の気管内投与による好中球増加抑制作用
化合物２は、２５％アレベール［２５容量／容量％の呼吸器官用吸入剤アレベール（登録商標：株式会社アズウェル、大阪）を含む生理食塩水溶液］の懸濁液として、０．６ｍｇ／ｍＬおよび２．０ｍｇ／ｍＬの濃度で調製し、それぞれ試験に用いた。

８週齡の雄性ＣＤラット（日本チャールス・リバー、神奈川）に、２５％アレベールまたは０．６ｍｇ／ｍＬもしくは２．０ｍｇ／ｍＬの化合物２の懸濁液をそれぞれ体重１ｋｇあたり０．５ｍＬ気管内投与した。１時間後、生理食塩水または生理食塩水に溶解した５μｇ／ｍＬのＬＰＳ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、ＭＯ、ＵＳＡ）を１５分間、噴霧全身曝露した。噴霧には超音波ネブライザー（ＮＥ−Ｕ１２型、オムロン、東京)を使用した。

２５％アレベールを投与し生理食塩水を噴霧曝露した群を溶媒群、２５％アレベールを投与しＬＰＳを噴霧曝露した群をＬＰＳ群、化合物２を投与しＬＰＳを噴霧曝露した群を化合物２投与群とした。
噴霧曝露終了４時間後にハンクス液［Ｈａｎｋ’ｓ Ｂａｌａｎｃｅｄ Ｓａｌｔ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、ＣＡ、ＵＳＡ）］で気管支肺胞洗浄を行った（４ｍＬ×３回）。気管支肺胞洗浄液（ＢＡＬＦ）を全量回収し、それぞれ２００×ｇ、１０分間、４℃で遠心分離した後、上清を除き、ペレットを得た。ペレットを０．５ｍＬのハンクス液に再懸濁し、全自動血球計数器セルタックα（日本光電、東京）を用いて総白血球細胞数を計数した。再懸濁液の一部は、サイトスピン３（Ｓｈａｎｄｏｎ、Ｐｉｔｔｓｂｕｒｇｈ、ＰＡ、ＵＳＡ）を用いて塗沫標本にした。塗沫標本を自動染色装置（オムロン、京都）でライト染色（ＭＩＣＲＯＸ用染色液、オムロン）した後、顕微鏡下（４００倍）で細胞数を計数した。細胞数は、マクロファージ、好中球およびリンパ球を区別して合計３００個まで計数し、それぞれの細胞の割合を式１により算出した。

好中球数は、上記で算出した好中球の割合と総白血球細胞数から式２により求めた。

化合物（Ｉ）の好中球数の増加抑制率は、式３により求めた。

本試験では、全ての個体においてＢＡＬＦ中の細胞は、マクロファージ、好中球およびリンパ球で構成されており、好酸球、好塩基球およびその他の細胞はほとんど観察されなかった。
好中球数に関する結果を第２表に示す。

本試験の結果は、溶媒群と比較してＬＰＳ群では、ＢＡＬＦ中の好中球数が顕著に増加し、化合物２投与群では、ＬＰＳ群における好中球数の増加が抑制されたことを示している。すなわち、化合物２を気管内に投与することにより、気管支肺胞への好中球の浸潤を抑制できることが示された。
試験例３：ラットＬＰＳ誘発肺障害モデルにおける化合物２の経口投与による好中球増加抑制作用
化合物２は、０．５重量／容量％のメチルセルロース（和光純薬工業、大阪）水溶液の懸濁液として、０．３ｍｇ／ｍＬおよび１．０ｍｇ／ｍＬの濃度で調製し、それぞれ試験に用いた。

７〜８週齡の雄性ＣＤラット（日本チャールス・リバー、神奈川）に、０．５％メチルセルロース（和光純薬工業、大阪）水溶液または０．３ｍｇ／ｍＬもしくは１．０ｍｇ／ｍＬの化合物２の懸濁液をそれぞれ体重１ｋｇあたり１０ｍＬ経口投与した。１時間後、生理食塩水または生理食塩水に溶解した５μｇ／ｍＬのＬＰＳ（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ、ＭＯ、ＵＳＡ）を１５分間、噴霧全身曝露した。噴霧には超音波ネブライザー（ＮＥ−Ｕ１２型、オムロン、東京)を使用した。

０．５重量／容量％メチルセルロース水溶液を投与し、生理食塩水を噴霧曝露した群を溶媒群、ＬＰＳを噴霧曝露した群をＬＰＳ群とし、化合物２を投与しＬＰＳを噴霧曝露した群を化合物２投与群とした。
噴霧曝露終了４時間後にハンクス液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、ＣＡ、ＵＳＡ）で気管支肺胞洗浄を行った（４ｍＬ×３回）。ＢＡＬＦを全量回収し、試験例２と同様に処理し、好中球数を求めた。結果を第３表に示す。なお、本試験でも、全ての個体において、ＢＡＬＦ中の細胞は、マクロファージ、好中球およびリンパ球で構成されており、好酸球、好塩基球およびその他の細胞はほとんど観察されなかった。

本試験の結果は、溶媒群と比較してＬＰＳ群では、ＢＡＬＦ中の好中球数が顕著に増加し、化合物２投与群では、ＬＰＳ群における好中球数の増加が抑制されたことを示している。すなわち、化合物２を経口投与することによっても、気管支肺胞への好中球の浸潤を抑制できることが示された。
試験例４：マウスＬＰＳ誘発肺障害モデルにおける化合物２の経口投与による好中球増加抑制作用
化合物２は、０．５重量／容量％のメチルセルロース（和光純薬工業、大阪）水溶液の懸濁液として、０．３ｍｇ／ｍＬおよび１．０ｍｇ／ｍＬの濃度で調製し、それぞれ試験に用いた。

７〜８週齡の雄性ＢＡＬＢ／ｃマウス（日本チャールス・リバー、神奈川）に、０．５％メチルセルロース（和光純薬工業、大阪）水溶液または０．３ｍｇ／ｍＬもしくは１．０ｍｇ／ｍＬの化合物２の懸濁液をそれぞれ体重１ｋｇあたり１０ｍＬ経口投与した。１．５時間後、生理食塩水または生理食塩水に溶解した３０ｎｇ／ｍＬのＬＰＳ（ＤＩＦＣＯ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ、ＭＩ、ＵＳＡ）を１匹あたり０．１ｍＬ気管内に投与した。

０．５重量／容量％メチルセルロース水溶液を投与し、生理食塩水を投与した群を溶媒群、ＬＰＳを投与した群をＬＰＳ群とし、化合物２を投与しＬＰＳを投与した群を化合物２投与群とした。
気管内投与６時間後に生理食塩水で気管支肺胞洗浄を行った（０．８ｍＬ×３回）。ＢＡＬＦを全量回収し、試験例２と同様に処理し、好中球数を求めた。結果を第４表に示す。なお、本試験でも、全ての個体において、ＢＡＬＦ中の細胞は、マクロファージ、好中球およびリンパ球で構成されており、好酸球、好塩基球およびその他の細胞はほとんど観察されなかった。

本試験の結果は、溶媒群と比較してＬＰＳ群では、ＢＡＬＦ中の好中球数が顕著に増加し、化合物２投与群では、ＬＰＳ群における好中球数の増加が抑制されたことを示している。すなわち、マウスにおいても化合物２を経口投与することによって、気管支肺胞への好中球の浸潤を抑制できることが示された。
試験例５：ラットタバコ主流煙誘発肺障害モデルにおける化合物２および３の経口投与による好中球増加抑制作用
化合物２および３は、それぞれ０．５重量／容量％のメチルセルロース（和光純薬工業、大阪）水溶液の懸濁液として、１．０ｍｇ／ｍＬの濃度で調製し、試験に用いた。

８週齡の雄性ＣＤラット（日本チャールス・リバー、神奈川）に、０．５％メチルセルロース（和光純薬工業、大阪）水溶液または１．０ｍｇ／ｍＬの化合物２もしくは３の懸濁液を体重１ｋｇあたり１０ｍＬ経口投与した。１時間後、喫煙曝露システム（Ｍ・Ｉ・Ｐ・Ｓ、大阪）を用いてタバコの主流煙［ハイライト（日本タバコ産業、東京）］を全身曝露した。曝露は、５分間のタバコ主流煙曝露を１５分毎に８回繰り返すことにより行った。

０．５重量／容量％メチルセルロース水溶液を投与し、大気のみ曝露した群を溶媒群、タバコ主流煙を曝露した群を喫煙群とし、化合物２または３を投与しタバコ主流煙を曝露した群をそれぞれ化合物２投与群および化合物３投与群とした。
曝露終了６時間後にハンクス液（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ、ＣＡ、ＵＳＡ）で気管支肺胞洗浄を行った（４ｍＬ×２回）。ＢＡＬＦを全量回収し、試験例２と同様に処理し、好中球数を求めた。結果を第５表および第６表に示す。なお、本試験でも、全ての個体において、ＢＡＬＦ中の細胞は、マクロファージ、好中球およびリンパ球で構成されており、好酸球、好塩基球およびその他の細胞はほとんど観察されなかった。

本試験の結果は、溶媒群と比較して喫煙群では、ＢＡＬＦ中の好中球数が顕著に増加し、化合物２投与群および化合物３投与群では、喫煙群における好中球数の増加が抑制されたことを示している。すなわち、化合物２または３を経口投与することにより、気管支肺胞への好中球の浸潤を抑制できることが示された。
試験例２、３および４に示されるＬＰＳ誘発肺障害モデルはＣＯＰＤの動物モデルとして有効であると考えられている［メディエーターズ・オブ・インフラメーション（Ｍｅｄｉａｔｏｒｓ Ｉｎｆｌａｍｍ．）、２０００年、第９巻、ｐ．１５］。

また、ＣＯＰＤが喫煙によって引き起こされることが指摘されており［アメリカン・ジャーナル・オブ・レスピラトリー・アンド・クリティカル・ケア・メディシン（Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｒｉｔ．Ｃａｒｅ Ｍｅｄ．）、２００１年、１６３巻、ｐ．１２５６］、タバコの煙に含有されるＬＰＳが、ＣＯＰＤ発症に関与していることも示唆されている［チェスト（Ｃｈｅｓｔ）、１９９９年、１１５巻、ｐ．８２９］。すなわち、タバコ主流煙曝露により気道への好中球浸潤を惹起する上記試験例５のような肺障害モデルは、ＣＯＰＤ治療薬の評価に有用であると考えられている［レスピラトリー・リサーチ（Ｒｅｓｐｉｒ．Ｒｅｓ．）、２００１年、第２巻、ｐ．Ｅ００３；チェスト（Ｃｈｅｓｔ）、２００２年、第１２１巻、ｐ．１９２Ｓ］。したがって、化合物（Ｉ）またはその薬理学的に許容される塩はＣＯＰＤに対する治療および／または予防薬として有用であると考えられる。

また、慢性気管支炎患者のＢＡＬＦ中には、多くの好中球が認められること［アメリカン・レビュー・オブ・レスピラトリー・ディジィズ（Ａｍ．Ｒｅｖ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｄｉｓ．）、１９８９年、第１４０巻、ｐ．１５２７］、肺気腫の発症には、好中球が放出するエラスターゼが重要な役割を担っていること［ユーロピアン・レスピラトリー・ジャーナル（Ｅｕｒ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｊ．）、１９８５年、第１３２巻、ｐ．１１５５］から、化合物（Ｉ）またはその薬理学的に許容される塩は慢性気管支炎や肺気腫に対する治療および／または予防薬としても有用であると考えられる。

さらに、ＬＰＳ誘発肺障害モデルは好中球性の炎症を発症することからＡＲＤＳまたはＡＬＩの動物モデルとしても有効であると考えられている［ラボラトリー・アニマルズ（Ｌａｂ．Ａｎｉｍ．）、１９９２年、第２６巻、ｐ．２９；アメリカン・ジャーナル・オブ・レスピラトリー・セル・アンド・モレキュラー・バイオロジー（Ａｍ．Ｊ．Ｒｅｓｐｉｒ．Ｃｅｌｌ Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．）、１９９７年、第１６巻、ｐ．２６７；インフラメーション（Ｉｎｆｌａｍｍａｔｉｏｎ）、１９９９年、第２３巻、ｐ．２６３］。したがって、化合物（Ｉ）またはその薬理学的に許容される塩はＡＲＤＳもしくはＡＬＩの治療および／または予防薬としても有用であると考えられる。

化合物（Ｉ）またはその薬理学的に許容される塩は、そのまま単独で投与することも可能であるが、通常各種の医薬製剤として提供するのが望ましい。また、それら医薬製剤は、動物および人に使用されるものである。
本発明に係わる医薬製剤は、活性成分として化合物（Ｉ）またはその薬理学的に許容される塩を単独で、あるいは任意の他の治療のための有効成分との混合物として含有することができる。また、それら医薬製剤は、活性成分を薬理学的に許容される一種もしくはそれ以上の担体と一緒に混合し、製剤学の技術分野においてよく知られている任意の方法により製造される。

投与経路としては、治療に際し最も効果的なものを使用するのが望ましく、経口または、例えば静脈内、気管内、経皮などの非経口をあげることができる。
投与形態としては、例えば錠剤、注射剤、吸入剤、外用剤などがあげられる。徐放的な適応もまた利用できる。
経口投与に適当な、例えば錠剤などは、乳糖、マンニットなどの賦形剤、澱粉などの崩壊剤、ステアリン酸マグネシウムなどの滑沢剤、ヒドロキシプロピルセルロースなどの結合剤、脂肪酸エステルなどの界面活性剤、グリセリンなどの可塑剤、安息香酸、ｐ−ヒドロキシ安息香酸エステル類などの防腐剤などを用いて製造できる。

非経口投与に適当な、例えば注射剤は、好ましくは受容者の血液と等張である活性化合物を含む滅菌水性剤からなり、例えば、塩溶液、ブドウ糖溶液または塩水とブドウ糖溶液の混合物からなる担体などを用いて注射用の溶液を調製する。
吸入剤は、活性成分を粉末または液状にして、吸入噴霧剤または担体中に配合し、例えば、定量噴霧式吸入器、ドライパウダー吸入器などの吸入容器に充填することにより製造される。吸入噴射剤としては、従来公知のものを広く使用することができ、例えばフロン−１１、フロン−１２、フロン−２１、フロン−２２、フロン−１１３、フロン−１１４、フロン−１２３、フロン−１４２ｃ、フロン−１３４ａ、フロン−２２７、フロン−Ｃ３１８、１，１，１，２−テトラフルオロエタンなどのフロン系ガス、ＨＦＡ−２２７、ＨＦＡ−１３４ａなどの代替フロンガス、プロパン、イソブタン、ｎ−ブタンなどの炭化水素系ガス、ジエチルエーテル、窒素ガス、炭酸ガスなどがあげられる。担体としては、従来公知のものを広く使用でき、例えば糖類、糖アルコール類、アミノ酸類などがあげられ、乳糖、Ｄ−マンニトールなどが好ましい。

外用剤としては、特に限定されるものではないが、例えば基剤に活性成分を溶解または混合分散しクリーム状、ペースト状、ゼリー状、ゲル状、乳液状、液状などの形状になされたもの（軟膏剤、ローション剤など）、基剤に活性成分および経皮吸収促進剤を溶解または混合分散させたものを例えばポリエチレンなどの支持体上に展延したもの（パップ剤、テープ剤など）などがあげられる。上記基剤としては、薬理学的に許容しうるものであればいずれでもよく、軟膏剤、リニメント剤、ローションなどの基剤として従来公知のものを用いることができ、例えば、アルギン酸ナトリウム；ゼラチン、コーンスターチ、トラガントガム、メチルセルロース、キサンタンガム、デキストリン、ポリビニルアルコールなどのポリマー；オリーブ油、ラノリンなどの油脂類；白色ワセリン；パラフィン；ステアリン酸などの高級脂肪酸；セチルアルコールなどの高級アルコール；ポリエチレングリコール；水などがあげられる。上記経皮吸収促進剤としては、薬理学的に許容しうるものであればいずれでもよく、例えばエタノール、ジエチレングリコールなどのアルコール類；ドデシルピロリドンなどの極性溶剤；尿素；ラウリル酸エチル；エイゾン；オリーブ油などがあげられる。さらに必要に応じて、カオリン、ベントナイト、酸化亜鉛、酸化チタンなどの無機充填剤；粘度調節剤；老化防止剤；ｐＨ調節剤；グリセリン、プロピレングリコールなどの保湿剤などを添加してもよい。

また、これら非経口剤においても、経口剤で例示した賦形剤、崩壊剤、滑沢剤、結合剤、界面活性剤、可塑剤、防腐剤などから選択される１種もしくはそれ以上の補助成分を添加することもできる。
化合物（Ｉ）またはその薬理学的に許容される塩の投与量および投与回数は、投与形態、患者の年齢、体重、治療すべき症状の性質もしくは重篤度などにより異なるが、通常経口の場合、成人一人当り０．０１ｍｇ〜１ｇ、好ましくは０．０５〜５０ｍｇを一日１回ないし数回投与する。静脈内投与などの非経口投与の場合、成人一人当り０．００１〜１００ｍｇ 、好ましくは０．０１〜５０ｍｇを一日１回ないし数回投与する。気管内投与（吸入剤）の場合、成人一人当たり、０．００１ｍｇ〜１ｇ、好ましくは０．０１〜１００ｍｇ、より好ましくは０．５ｍｇ〜２０ｍｇを一日１回ないし数回投与する。しかしながら、これら投与量および投与回数に関しては、前述の種々の条件により変動する。

以下に、本発明の態様を実施例で説明する。

錠剤（化合物１）
常法により、次の組成からなる錠剤を調製する。化合物１ ４０ｇ、乳糖２８６．８ｇおよび馬鈴薯澱粉６０ｇを混合し、これにヒドロキシプロピルセルロースの１０％水溶液１２０ｇを加える。この混合物を常法により練合し、造粒して乾燥させた後、整粒し打錠用顆粒とする。これにステアリン酸マグネシウム１．２ｇを加えて混合し、径８ｍｍの杵をもった打錠機（菊水社製ＲＴ−１５型）で打錠を行って、錠剤（１錠あたり活性成分２０ｍｇを含有する）を得る。
処方 化合物１ ２０ ｍｇ
乳糖 １４３．４ｍｇ
馬鈴薯澱粉 ３０ ｍｇ
ヒドロキシプロピルセルロース ６ ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ０．６ｍｇ
２００ ｍｇ

錠剤（化合物２）
化合物２ ４０ｇを用い、実施例１と同様にして、標記錠剤（１錠あたり活性成分２０ｍｇを含有する）を得る。
処方 化合物２ ２０ ｍｇ
乳糖 １４３．４ｍｇ
馬鈴薯澱粉 ３０ ｍｇ
ヒドロキシプロピルセルロース ６ ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ０．６ｍｇ
２００ ｍｇ

注射剤（化合物３）
常法により、次の組成からなる注射剤を調製する。化合物３ １ｇを精製大豆油に溶解させ、精製卵黄レシチン１２ｇおよび注射用グリセリン２５ｇを加える。この混合物を常法により注射用蒸留水で１０００ｍｌとして練合・乳化する。得られた分散液を０．２μｍのディスポーザブル型メンブランフィルターを用いて無菌濾過後、ガラスバイアルに２ｍｌずつ無菌的に充填して、注射剤（１バイアルあたり活性成分２ｍｇを含有する）を得る。
処方 化合物３ ２ ｍｇ
精製大豆油 ２００ ｍｇ
精製卵黄レシチン ２４ ｍｇ
注射用グリセリン ５０ ｍｇ
注射用蒸留水 １．７２ｍＬ
２．００ｍＬ

ドライパウダー吸入剤（化合物４）
ジェットミル（Ａ−０ＪＥＴ；セイシン企業）を用いて、化合物４ １０ｇを空気圧５ｋｇ／ｃｍ^２で１．５ｇ／分間の送り速度で粉砕する（体積平均粒子径：５．７μｍ）。得られる化合物４の粉砕物と乳糖（Ｐｈａｒｍａｔｏｓｅ３２５Ｍ；ＤＭＶ社製）とを重量比１：５で混合し、ドライパウダー製剤を得る。
処方 化合物４ １６．７ ｍｇ
乳糖 ８３．３ ｍｇ
１００ ｍｇ

Claims (11)

1. 一般式（Ｉ）
   

   

   
   ｛式中、ｍは０〜４の整数を表し、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^４は同一または異なって、水素原子、低級アルキル、シクロアルキル、低級アルケニル、シクロアルケニル、アリールまたはアラルキルを表すか、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^４の中で同一炭素原子上に存在する２つの基がその炭素原子と一緒になってスピロ飽和炭素環を形成するか、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^４の中で隣接する炭素原子上に存在する２つの基が該隣接する２つの炭素原子と一緒になって飽和炭素環を形成するか、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^４の中で隣接する炭素原子上に存在する２つの基が一緒になって結合を表し（既に存在する結合と一緒になって二重結合を形成する）、Ｒ^５は非置換またはハロゲン置換の低級アルコキシを表し、Ｒ^６は水素原子またはハロゲンを表し、Ｙは式（ＩＩ）
   

   

   
   ［式中、Ｒ^７はシアノ、エチニルまたはカルバモイルを表し、Ｒ^８は水素原子を表すか、またはＲ^７とＲ^８が一緒になって結合を表し（既に存在する結合と一緒になって二重結合を形成する）］または４−カルボキシフェニルを表す｝で表される含酸素複素環化合物またはその薬理学的に許容される塩を有効成分として含有する好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。
2. ｍが０〜２の整数であり、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^４が水素原子であるか、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^４の中で同一炭素原子上に存在する２つの基がその炭素原子と一緒になってスピロ飽和炭素環を形成し、Ｒ^６が水素原子である請求項１記載の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。
3. ｍが１であり、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^４が水素原子である請求項１または２記載の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。
4. Ｒ^５がメトキシである請求項１〜３のいずれかに記載の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。
5. Ｙが式（ＩＩ）である請求項１〜４のいずれかに記載の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。
6. Ｙが４−カルボキシフェニルである請求項１〜４のいずれかに記載の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。
7. Ｒ^７がシアノであり、Ｒ^８が水素原子である請求項１〜５のいずれかに記載の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。
8. 好中球性炎症を伴う肺疾患が慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）である請求項１〜７のいずれかに記載の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。
9. 好中球性炎症を伴う肺疾患が肺気腫または慢性気管支炎である請求項１〜７のいずれかに記載の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。
10. 好中球性炎症を伴う肺疾患が急性肺損傷（ＡＬＩ）である請求項１〜７のいずれかに記載の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。
11. 好中球性炎症を伴う肺疾患が急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）である請求項１〜７のいずれかに記載の好中球性炎症を伴う肺疾患の治療および／または予防剤。