【０００１】
（発明の分野）
本発明は自己免疫疾患を含む免疫媒介性疾患の治療に関する。より詳細には、本発明は、関節リューマチ（多関節性若年性関節リューマチを含む）、スティル病、シェーグレン症候群、全身性エリテマトーデスを含む脈管炎、末梢神経障害、レーノー現象、知覚神経聴覚損失（メニエール病）、線維筋痛の治療に関する。本発明はまた、炎症性腸炎（潰瘍性大腸炎、クローン病及びムチン性大腸炎）、関節症性感染、ライター症候群、及び強直性脊椎炎を含む脊椎関節症、一時性動脈炎、リウマチ性多発性筋痛、無ガンマグロブリン血症及び免疫抑制された患者の治療に関する。本発明に従えば、免疫媒介性疾患は、コーン画分ＩＩ、コーン画分ＩＩＩ、またはコーン画分ＩＩ及びＩＩＩを含んでなる薬学的組成物を経口投与することによって治療される。
【０００２】
（発明の背景）
本発明は、実質的にヒトイムノグロブリンＧを強化したヒト血漿画分、例えば、コーン画分ＩＩ＋ＩＩＩを含んでなる薬学的組成物を投与することにより、免疫媒介性疾患を治療するための方法に関する。コーン画分ＩＩ＋ＩＩＩは、プールされたヒト血漿に由来するものであり、主としてＩｇＧ，ＩｇＡ及びＩｇＭを含む。コーン画分ＩＩ＋ＩＩＩは、通常はコーン法６（Ｃｏｈｎ Ｅ．Ｊ．，ら（１９４６），Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，６８：４５９から４７５頁、及びＷ．Ｈ．Ｏ Ｔｅｃｈｎｉｃａｌ Ｒｅｐｏｒｔ Ｓｅｒｉｅｓ ７８６（１９８９）。これらは参照により本願に組み込まれる）に従って調製される。コーン画分ＩＩ＋ＩＩＩは、アルブミン、α及びβグロブリン、グリシン、血液凝固因子ＩＩ、ＶＩＩ、ＩＸ及びＸ及びデキストロースも含む。
【０００３】
胃腸管の微生物フローラは、免疫系の発現と自己免疫疾患発症の素因に重大な影響を及ぼしていると考えられている。腸の微生物汚染は、胃腸管の抗原に対する全身免疫耐性及び外来移植臓器への拒絶反応の発現に必要不可欠である。Ｇａｂｏｒｉａｕ−Ｒｏｕｔｈｉａｕら（１９９６），Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ Ｒｅｓ．，３９（４）（１）：６２５−６２９；Ｓｕｄｏら（１９９７），Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１５９（４）：１７３９−１７４５。成人及び若年性関節リウマチを非限定的に含む免疫媒介性疾患の発症における微生物の重要性は、微生物抗原への暴露と、ヒトにおけるＨＬＡ−Ｂ２７反応性関節炎の発症との関係によって実証された。タウログ（Ｔａｕｒｏｇ）らによる最近の研究［（１９９４），Ｊ．Ｅｘｐ．Ｍｅｄ．，１８０（６）：２３５９−２３６４］では、ＨＬＡ−Ｂ２７トランスジェニックマウスは関節炎を発症するが、無菌動物では発症しないことが示された。反応性関節炎に関与する微生物には、胃腸管内で見つけられるものが含まれる。同様に、何人かの研究者によれば、関節リウマチは、Ｅ．ｃｏｌｉ，Ｐ．ｍｉｒａｂｉｌｉｓ及びＥｐｓｔｅｉｎ Ｂａｒｒ Ｖｉｒｕｓなどの腸内微生物に由来する抗原上に存在する共通エピトープによって定義されるＨＬＡ−ＤＲ４に顕著な関連性を有している［Ａｌｂａｎｉら（１９９２），Ｃｌｉｎ Ｂｉｏｃｈｅｍ．，２５（３）：２０９−２１２；Ｔｉｗａｎａら（１９９９），Ｉｎｆｅｃｔ．Ｉｍｍｕｎ．，６７（６）：２７６９−２７７５；Ｒｏｕｄｉｅｒ，Ｊ．ら（１９８９），Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，８６（１３）：５１０４−５１０８］。
【０００４】
成人関節リウマチは、通常は特に手及び足の関節に影響を及ぼす全身性の炎症性疾患である。関節リウマチの発病は数週間から数ヶ月にわたってゆっくりと起こることもあれば、状態が急性的に急激に表面化することもある。ＨＬＡ−Ｂ２７は脊椎関節症に関連している。［Ｓｃｈｗｉｍｍｂｅｃｋら（１９８８），Ａｍ．Ｊ．Ｍｅｄ．，８５（６Ａ）：５１−５３；Ｌａｈｅｓｍａら（１９９１），Ｃｌｉｎ．Ｅｘｐ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，８６（３）：３９９−４０４；Ｆｉｅｌｄｅｒら（１９９５），ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔ．３６９（２−３）：２４３−２４８；Ｅｒｂｉｎｇｅｒら（１９９６），Ｃｌｉｎ．Ｒｈｅｕｍ．１５５０ Ｓｕｐｐｌ．１：５７−６１］。
【０００５】
今日、米国内だけでも２５０万人以上（人口の１％）の人々が成人関節リウマチと診断されており、６５０万人から８００万人の成人がこの疾患に潜在的に悩まされているという統計もある。女性の罹患率は男性の２倍から３倍となっている。成人関節リウマチは青年においても起こることがあり、典型的には加齢とともに発生率は上昇する。
【０００６】
成人関節リウマチの伝統的な初期症状としては、硬直、圧痛、発熱、皮下結節、関節痛、及び倦怠感があげられる。手、足、膝及び手首の関節は最も影響を受けやすく、結果的には股関節部、肘及び肩も含まれる。関節が硬直して膨れると、あらゆる動きが非常に苦痛を伴い困難なものとなる。成人関節リウマチのさらに重篤なケースでは、激痛が起こり最終的に関節の破壊に至る。米国においては、関節炎に関係した関節破壊による苦痛と運動性の損失を緩和する努力として、年間３００，０００件程度の骨及び関節を交換する外科手術が実施されている。
【０００７】
成人関節リウマチ及び若年性関節リウマチは異なる２つの疾患である。若年性関節リウマチは小児においてよく見られ、８つの異なる疾患型が含まれる。若年性関節リウマチの１つの型であるＲｆ陽性多関節性若年性関節リウマチは、成人関節リウマチといくつかの類似性を有している。しかしながら、多関節性のものは、若年性関節リウマチの全ケースのわずか約４０％にすぎず、リウマチ因子（Ｒｆ）陽性のものは約５から１０％にすぎない。したがって、若年性関節リウマチ患者のわずか約２から４％だけが、Ｒｆ陽性多関節性若年性関節リウマチに苦しんでいることになる。
【０００８】
若年性関節リウマチは、異常なＴ及びＢ細胞機能及び選択的ＩｇＡ欠損を特徴とする。成人関節リウマチは、特定の特徴的なリウマチ因子を含む自己抗体の存在によって確認される疾患である。若年性関節リウマチの免疫遺伝学的関係、臨床経過及び機能的結果は、成人で発症した関節リウマチの場合とはかなり異なっている。Ｐｅｄｉａｔｒｉｃ Ｒｈｅｕｍａｔｉｃ Ｄｉｓｅａｓｅｓ Ｉｎ：Ｐｒｉｍｅｒ ｏｎ ｔｈｅ Ｒｈｅｕｍａｔｉｃ Ｄｉｓｅａｓｅｓ，第１１版、１９９７年（参照により本願に組み込まれる）。
【０００９】
成人関節リウマチは、リウマチ因子自己抗体が存在することを特徴とする。リウマチ因子を産生するように遺伝学的に素因を与えた無菌マウスは、微生物に暴露するまでは上記自己抗体を生産しない。無菌状態の終了後、まず最初に胃腸管のリンパ系によってリウマチ因子が産生された。Ｃｏｕｔｅｌｉｅｒら（１９８６），Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．，１３７（１）：３３７−３４０。これらの観察結果は、患者によっては、関節リウマチが、胃腸管内の微生物抗原によって誘導される反応性関節炎であることを示唆するものである。
【００１０】
胃腸管は分泌免疫系によって保護されている。微生物抗原に応答してＩｇＡ抗体が腸内に分泌される。ＩｇＡを欠損した患者では、反応性関節炎を含む自己免疫疾患の発症率が高い。これらの観察結果は、腸内に分泌されるイムノグロブリンが自己免疫に対しての防護を行うこと示唆するものである。自己免疫疾患の発症に対する防護を行う抗体を生産できない個体に対して、腸内の正常な抗体を回復させると、自己免疫疾患を有した患者の症状を改善することができる。今日までに、成人関節リウマチなどの自己免疫疾患の有効な治療では、一般に投薬、運動、休養及び適切な関節保護治療を組み合わせて利用していた。個々の患者に対する治療は、疾患の程度や関与している関節に応じて異なる。痛みや炎症を軽減するためにアスピリンが広く用いられている。中程度または進行した場合においては、アスピリンに加えて、非ステロイド性抗炎症薬、コルチコステロイド、金塩類、抗マラリア薬及び免疫抑制剤も広く用いられている。しかしながら、ステロイド及び免疫抑制剤の使用は、感染や悪性腫瘍などの潜在的な致死的状態に対する毒性と脆弱性の両側面において、著しい危険性と副作用を有している。したがって、上述の治療に付随する潜在的に不都合な副作用を伴わない免疫媒介性疾患の治療方法が望まれている。
【００１１】
「超抗原」が、関節リウマチを含む様々な自己免疫疾患における免疫系の刺激剤であると考えられている。Ｈｅｒｍａｎ，Ａ．ら（１９９１）Ａｎｎｕ．Ｒｅｖ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．９：７４５−７７２；Ｄｒａｋｅ，Ｃ．Ｇ．及びＫｏｔｚｉｎ，Ｂ．Ｌ．（１９９２）Ｊ．Ｃｌｉｎ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．１２：１４９−１６２（参照により本願に組み込まれる）。胃腸管は、超抗原による免疫学的刺激部位であると考えられる。成人関節リウマチを患った患者には、正常な中和特異性を有した抗体を産生する能力が欠損していると考えられている。関節リウマチを治療する１つのアプローチとしては、患者に牛乳を経口投与することがある。米国特許第４，７３２，７５７号（ストーレ（Ｓｔｏｌｌｅ）ら）を参照のこと。ストーレらは、大量の精製抗体で能動的かつ人工的に免疫しブーストを行った動物からの高い力価の特異的抗体を含む超免疫化乳が、関節リウマチの治療に有用であることを開示している。このアプローチに対する欠点は数倍に及ぶ。ウシドナープールを小サブセットの抗原に対して特異的かつ能動的に免疫しなければならない。さらに、牛乳の摂取に対する拒絶反応を有する患者もいる。さらに、牛乳はヒトに存在する全ての抗体スペクトルを含んでいない。さらに、超免疫乳が関節リウマチなどの炎症プロセスに及ぼす影響については大幅に捨て去られている。ＯｒｍｒｏｄとＭｉｌｌｅｒ（１９９１） Ａｇｅｎｔｓ ａｎｄ Ａｃｔｉｏｎｓ，３２（３／４）：１６０−１６６を参照のこと。
【００１２】
関節リウマチを一例とする免疫媒介性疾患の治療に対する別のアプローチは、免疫媒介性疾患に苦しむ患者を該疾患に関与する特定の自己抗原に対して寛容化することである。ヴァイナー（Ｗｅｉｎｅｒ）らによるＳｃｉｅｎｃｅ ２５９：１３２１−１３２４（１９９３）（ここで参照により本願に組み込まれる）においては、多発性硬化症患者に２種の多発性硬化症自己抗原を含むウシミエリンタンパク質を経口投与している。トレンタム（Ｔｒｅｎｔｈａｍ）らによるＳｃｉｅｎｃｅ ２６１：１７２７−１７３０（１９９３）においては、関節リウマチ患者に、自己抗原と予想されるコラーゲンを経口投与している。寛容化に対する１つの欠点は、寛容性を誘導すべき適切な自己抗原の同定が難しいことである。
【００１３】
上記不全を治療するために現在用いられている様式の上記不備及び欠点に鑑みて、引き続き免疫媒介性疾患の治療のための効果的な方法及び組成物を開発することが望まれている。
【００１４】
（発明の要約）
本発明は、ヒトイムノグロブリンＧを強化した、コーン画分ＩＩ、コーン画分ＩＩＩまたはコーン画分ＩＩ＋ＩＩＩ、及びその組み合わせなどのヒト血漿画分を含んでなる組成物を、制酸薬とともに、あるいは制酸薬なしで、患者の状態において臨床的に観察しうる改善を与えるのに十分な量で経口投与することにより、免疫媒介性疾患を治療するための方法に向けられている。本発明は、イムノグロブリンＧを含む組成物を、随意で制酸薬と併用して、免疫媒介性疾患患者に経口投与することにより、患者の状態に顕著な臨床的改善がもたらされるという驚くべき発見に基づいている。本発明は、例えばγ照射したイムノグロブリンＧ強化組成物を経口投与しても何ら毒性効果が認められないという知見にも基づいている。
【００１５】
（発明の詳細な説明）
本発明は免疫媒介性疾患に苦しむ患者を治療するための方法を提供する。「免疫媒介性」疾患とは、リンパ球、抗原提示細胞、及び前記細胞によって産生される可溶性メディエータまたはサイトカインを含む細胞による特徴的免疫反応を誘発する病原性疾患を意味する。免疫媒介性疾患は、痛み、炎症、硬直、聴覚損失などの症状を示し、その例としては、関節リウマチ、スティル病、シェーグレン症候群、全身性エリテマトーデスなどがあげられる。本発明の方法は、ヒトイムノグロブリンＧを含むヒト血漿画分を、当該血漿画分を必要としている対象に経口投与することによって利用される。
【００１６】
ヒトイムノグロブリンＧを含む好ましいヒト血漿画分は、コーン画分ＩＩである。ヒトイムノグロブリンＧを含む他の好ましいヒト血漿画分は、コーン画分ＩＩＩである。ヒトイムノグロブリンＧを含むさらに他の好ましいヒト血漿画分は、コーン画分ＩＩ＋ＩＩＩである。ヒト血漿画分は、本発明に従って随意で制酸薬と併用して投与される。コーン画分ＩＩ、コーン画分ＩＩＩ、及びコーン画分ＩＩ＋ＩＩＩは、プールされたヒト血漿に由来するものであり、主にＩｇＧ，ＩｇＡ及びＩｇＭを含む。コーン画分ＩＩ、コーン画分ＩＩＩ、及びコーン画分ＩＩ＋ＩＩＩは、それぞれ従来的な方法で調製され、本発明に従えば、プールされたヒトイムノグロブリン組成物であると理解すべきである。
【００１７】
ヒトの胃の酸性環境中に導入されたイムノグロブリンは不活性化されるおそれがある。そのような不活性化を緩和して治療効果を高めるために、本発明の方法において使用するヒト血漿画分は、随意で制酸薬と併用して投与される。特定の機構に結びつけられることを望んでいないが、酸遮断薬が腸の酸性を中和することにより、イムノグロブリンが胃内で消化されないようにするのかもしれない。あるいは、酸遮断薬及びイムノグロブリンは相乗的に作用して、炎症性メディエータまたは免疫媒介性炎症を抑制することにより、疾患の症状を改善しているのかもしれない。
【００１８】
本発明は、コーン画分ＩＩ、コーン画分ＩＩＩまたはコーン画分ＩＩ＋ＩＩＩ、及びその組み合わせなどのヒト血漿画分を、制酸薬とともに、あるいは制酸薬なしで含んでなる薬学的組成物も包含する。
【００１９】
本明細書で用いる「プールされたヒトイムノグロブリン」という用語は、何千人ものヒトドナーの血漿から得られたポリクローナル抗体を含むイムノグロブリン組成物のことをいう。ポリクローナル抗体には、ＩｇＧ、ＩｇＡ、ＩｇＭなど、またはそれらの断片が含まれていてもよい。好ましいポリクローナル画分は、例えば関節リウマチを含む免疫媒介性疾患を治療するためのＩｇＧを含んでいる。好ましいイムノグロブリン組成物であるコーン画分ＩＩ＋ＩＩＩは、少なくとも約３０％から約８５％のＩｇＧポリクローナル抗体と、約５％から約３０％のＩｇＡ及び約１％から約２５％のＩｇＭと、微量の他の成分、例えば、凝固因子ＩＩ，ＶＩＩ，ＩＸ，Ｘや、α及びβグロブリンを含んでいる。他の好ましいイムノグロブリン組成物であるコーン画分ＩＩは、約９５％から約９９％のＩｇＧポリクローナル抗体と、少なくとも０．０１％から約２％のＩｇＭと、微量の塩とを含んでいる。さらに他の好ましいイムノグロブリン組成物であるコーン画分ＩＩＩは、少なくとも約２５％のＩｇＧポリクローナル抗体と、少なくとも約５％から約３０％のＩｇＡと、約１％から約２５％のＩｇＭとを、微量の凝固因子ＩＩ，ＶＩＩ，ＩＸ，α及びβグロビン及び脂質とともに含んでいる。
【００２０】
本発明に従って有用な好ましいプールされたヒトイムノグロブリン組成物はコーン画分ＩＩを含む。本発明に従って有用な他の好ましいヒトイムノグロブリン組成物は、コーン画分ＩＩＩを含む。本発明による有用なさらに他の好ましいプールされたヒトイムノグロブリン組成物はコーン画分ＩＩ＋ＩＩＩを含む。
【００２１】
本明細書中の「制酸薬」とは、Ｈ２遮断薬または酸遮断薬、あるいは腸内の酸含量を中和する、及び／または有意に低減する他の酸中和剤をさす。本発明の教示に従って有用な好ましい制酸薬は、シメチジンである。
【００２２】
本明細書中で用いる「臨床的に観察可能な改善」とは、患者の免疫媒介性状態に伴う症状の有意な主観的改善のことをさす。例えば、関節リウマチに苦しむ患者の場合、主観的改善は、本発明に従えば、非限定的に、圧痛のある関節、肥大した関節及び硬直の軽減または改善の評価などによって特徴付けられる。症状の有意な主観的改善とは、患者の自己評価または医師による硬直性、関節圧痛、肥大などの評価のことをいう。例えば、同一の関節炎の関節においても肥大または圧痛における観察可能な相違は大きい。以前に罹患した関節において肥大または圧痛がないことが最も顕著である。同様に、以前に免疫媒介性疾患に苦しめられた関節においては運動の自由度が大きく更新されている。
【００２３】
本発明の他の態様は、コーン画分ＩＩ、コーン画分ＩＩＩまたはコーン画分ＩＩ＋ＩＩＩと、随意で制酸薬と薬学的に許容される担体とを含んでなる薬学的組成物を提供する。好ましい実施形態において、上記組成物は、コーン画分ＩＩ＋ＩＩＩ及び薬学的に許容される担体とを含んでなる。
【００２４】
本明細書中で用いる「薬学的に許容される担体」には、あらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗菌及び抗真菌剤、等張及び吸収遅延剤などが含まれる。薬学的に許容される担体として機能する物質としては、例えば、ラクトース、グルコース及びスクロース等の糖類；コーンスターチやポテトスターチなどの澱粉類；セルロースとその誘導体、例えばカルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース及び酢酸セルロースなど；粉末トラガカント；麦芽；ゼラチン；タルク；ステアリン酸；ステアリン酸マグネシウム；硫酸カルシウム；落花生油、綿実油、ゴマ油、オリーブ油、コーン油及びカカオ油などの植物油；プロピレングリコール、グリセリン、ソルビトール、マンニトール及びポリエチレングリコールなどの多価アルコール；寒天；アルギン酸；パイロジェン非含有水；等張生理食塩水；及びリン酸緩衝溶液；粉末スキムミルク；ならびに薬学製剤において用いられる例えばビタミンＣやエストロゲンやエキナシア等の他の非毒性適合性物質が挙げられる。ラウリル硫酸ナトリウムなどの湿潤剤や潤滑剤、ならびに着色剤、着香剤、潤滑剤、賦形剤、打錠用剤、安定剤、抗酸化剤、保存剤などを用いることもできる。上記のような薬学的に活性な物質のための媒体及び物質の使用は技術上周知である。従来の媒体または物質が有効成分に対して不適合である場合を除いては、薬学的組成物における上記使用も含意される。
【００２５】
したがって、免疫媒介性疾患の治療の好ましい形態において、患者に治療上有効な量のコーン画分ＩＩ、コーン画分ＩＩＩまたはコーン画分ＩＩ＋ＩＩＩ及びその組み合わせと、薬学的に許容される担体とを経口投与する。免疫媒介性疾患の治療における別の好ましい形態において、患者に治療上有効な量のコーン画分ＩＩと薬学的に許容される担体とを経口投与する。免疫媒介性疾患の治療のさらに別の好ましい形態において、患者に治療上有効な量のコーン画分ＩＩＩと薬学的に許容される担体とを経口投与する。
【００２６】
本明細書で用いる「治療する」または「治療」は、関節リウマチなどの自己免疫疾患の発症後における臨床症状（すなわち臨床症状）を改善、抑制、軽減または除去することを意味する。有効または成功治療は臨床的に観察可能な改善をもたらす。
【００２７】
本明細書中で用いる「経口」投与には、経口、経腸または胃内投与が含まれる。
【００２８】
本明細書中で用いる「〜と併用して」とは、制酸薬の投与前、実質的には同時に、あるいは制酸薬の投与後に、ということを意味する。勿論、コーン画分ＩＩ＋ＩＩＩなどの組成物の投与は、制酸薬の投与の前後に、先に投与された物質の関連効果が切れてしまうほど長い間を空けることなく行われなければならない。したがって、イムノグロブリン組成物は、通常は治療上有効な時間内に投与すべきである。本明細書中で用いる「治療上有効な時間」とは、制酸薬またはイムノグロブリン組成物（例えば、コーン画分ＩＩ＋ＩＩＩまたはコーン画分ＩＩ）が患者内でまだ有効である時間枠のことをいう。
【００２９】
好ましい実施形態において、イムノグロブリン組成物（すなわち、コーン画分ＩＩ、コーン画分ＩＩＩ及びコーン画分ＩＩ＋ＩＩＩ）は、約１０００から約３０００人のヒトボランティアの血漿から冷アルコール（例えばエタノール）分画により、コーン法６（画分ＩＩ＋ＩＩＩ）（前掲）、及びオンクレイ（Ｏｎｃｌｅｙ）ら（コーン画分ＩＩ及び画分ＩＩＩ）（後掲）の方法に従って製造した。上記文献は参照により本願に組み入れる。
【００３０】
治療患者における導入したイムノグロブリンの有効性を高めるため、また、臨床的に観察可能な改善を与えるために、随意で制酸薬をコーン画分ＩＩ、コーン画分ＩＩＩ、及び／またはコーン画分ＩＩ＋ＩＩＩ組成物と併用して投与する。好ましい実施形態において、イムノグロブリン組成物及び制酸薬は、単一の薬学的組成物として同時に投与される。別の好ましい実施形態において、イムノグロブリン組成物は、制酸薬投与後の治療上有効な時間に投与される。好ましくは、制酸薬は、市販されているＭａａｌｏｘ（商標）、Ｍｙｌａｎｔａ（商標）またはＴａｇａｍｅｔ（商標）などの、水酸化アルミニウムまたは水酸化マグネシウムである。最も好ましくは、制酸薬は、シメチジンやラニチジンなどのＨ２遮断薬である。
【００３１】
イムノグロブリン組成物と併用して投与される制酸薬の用量は、使用するＨ２遮断薬の種類によって異なる。制酸薬がＭｙｌａｎｔａ（商標）の場合、１５ｍＬから３０ｍＬが好ましい。最も好ましくは、Ｍｙｌａｎｔａ（商標）の用量は１５ｍＬである。シメチジンＨ２遮断薬を用いる場合には、好ましい用量は１日あたり４００ｍｇから８００ｍｇである。
【００３２】
患者に投与される本発明のイムノグロブリン組成物の用量は、患者の状態の程度や他の臨床的要素によって変化させることができる。用量は、臨床的に観察可能かつ治療上有効な結果を与える最小限の量であることが好ましい。最も好ましくかつ治療上有効な用量は、痛みを含む患者の疾患の状態を軽減する点において最大の効果を有するような用量である。コーン画分ＩＩ、コーン画分ＩＩＩ及び／またはコーン画分ＩＩ＋ＩＩＩ組成物の治療上有効な用量は、１日あたりわずか５ｍｇ／ｋｇ、多くとも５ｇ／ｋｇである。例えば、若年性関節リウマチに対する本発明の組成物の適切な用量は、１日あたり、約５ｍｇ／体重から約３０ｍｇ／ｋｇ体重である。
【００３３】
好ましい用量は何回かに分けて投与しても単回投与してもよい。さらに、イムノグロブリン組成物の用量は一日の間における任意の時間に投与できるが、患者の活動が開始する前の午前中に投与することが好ましい。
【００３４】
コーン画分ＩＩ、コーン画分ＩＩＩ、またはコーン画分ＩＩ＋ＩＩＩによる関節リウマチの治療において、患者の関節の状態を、例えば、患者自身による痛み、硬直などの自己評価によって調べることができる。患者の関節の状態を調べる他の方法としては、医師による患者の関節の圧痛及び肥大の診断がある。
【００３５】
本発明の明らかな実用上の利点は、ヒトイムノグロブリンＧを強化した、例えば、コーン画分ＩＩ＋ＩＩＩなどのヒト血漿画分を含む組成物を経口経路などの都合の良い方法によって投与できることにある。本発明は上記経口投与だけでなく、クレームされた組成物を静脈注射、エアロゾルまたは坐剤経路によって投与することも包含する。経口投与が最も好ましい。投与の経路によっては、前記画分を活性画分に悪影響を与えうる酵素、酸及び他の自然条件から保護するために、必要なイムノグロブリン組成物（すなわち、コーン画分ＩＩ、コーン画分ＩＩＩまたはコーン画分ＩＩ＋ＩＩＩ）を含む有効成分をコーティングする必要があるかもしれない。開示した組成物を経口投与するために、当該組成物は、不活性化を阻害する材料でコーティングするか、あるいはこの材料とともに投与することができる。例えば、腸溶性組成物は、コーン画分ＩＩ＋ＩＩＩを胃腸管に輸送するように特別に設計されている。腸溶コーティング技術は製薬技術においては従来からあるもので、当業者の知識を用いて本発明に従って容易に実施される。
【００３６】
活性化合物は、例えば、不活性希釈剤とともに、あるいは吸収可能な可食担体とともに投与してもよく、あるいは、前記活性化合物は、硬または軟ゼラチンカプセル内に包装してもよいし、あるいは胃を通過するように設計された（すなわち腸溶コーティングされた）錠剤に圧縮してもよく、あるいは、食事の食品に直接組み入れてもよい。経口治療投与のために、コーン画分ＩＩ、コーン画分ＩＩＩまたはコーン画分ＩＩ＋ＩＩＩは賦形剤に組み込んで、摂取可能な錠剤、舌下錠、トローチ、カプセル、エリキシル剤、懸濁剤、シロップ剤、ウェハースなどの形態で用いることができる。
【００３７】
上述の錠剤、トローチ、丸剤、カプセル剤などは以下のものを含んでいてもよい。トラガカントゴム、アカシア、コーンスターチまたはゼラチンなどの結合剤；リン酸二カルシウムなどの賦形剤；コーンスターチ、ポテトスターチ、アルギン酸などの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウムなどの潤滑剤；及びスクロース、ラクトースまたはサッカリンなどの湿潤剤を添加してもよく、あるいはペパーミント、ウィンターグリンオイルまたはチェリー香料などの着香剤を添加してもよい。単位剤形がカプセル剤である場合には、上記の種類の材料に加えて、液体担体を含んでいてもよい。コーティングとして、あるいは単位剤形の物理的形状を変えるために様々な他の材料が存在していてもよい。例えば、錠剤、丸剤またはカプセル剤をセラック、糖、またはその両方でコーティングしてもよい。シロップ剤またはエリキシル剤は、活性化合物と、湿潤剤としてのスクロースと、保存剤としてのメチル及びプロピルパラベンと、染料と、チェリーまたはオレンジ香料などの香料とを含んでいてもよい。勿論、どの単位剤形を調製するためのどの材料も、薬学的に純粋であり、その使用量では実質的に無毒でなければならない。さらに、コーン画分ＩＩ、コーン画分ＩＩＩ及び／またはコーン画分ＩＩ＋ＩＩＩを徐放性調製物または製剤に組み込むこともできる。
【００３８】
本発明のイムノグロブリン組成物を投与の容易性と用量の均一性のために単位剤形で調合すると特に有益である。本明細書中で用いる「単位剤形」とは、治療対象者に対する単一用量として適した物理的に分離された単位のことをいい、各単位は、必要な薬学的担体と関連して所望の治療効果を提供するように計算された、所定量のコーン画分ＩＩ、コーン画分ＩＩＩまたはコーン画分ＩＩ＋ＩＩＩを制酸薬とともに、あるいは制酸薬なしで含んでいる。本発明の単位剤形に対する要件は、（ａ）選択されたイムノグロブリン組成物独自の特性、制酸剤、及び達成すべき薬学的治療効果、及び（ｂ）本明細書中で詳細に開示する自己免疫疾患治療に対するイムノグロブリン分画などの配合技術に固有の制限によって指示されるか、これらに直接依存する。
【００３９】
制酸薬含有または制酸薬非含有のイムノグロブリン組成物は、適切な薬学的に許容される担体とともに上述の単位剤形で有効な量で好都合かつ有効な投与を行えるように配合される。単位剤形は、例えば、コーン画分ＩＩ、コーン画分ＩＩＩまたはコーン画分ＩＩ＋ＩＩＩを約５ｍｇ／ｋｇから約５ｇ／ｋｇの範囲の量で含み、必要に応じてシメチジンなどの制酸薬を約２００から約１０００ｍｇの範囲の量で含んでいる。
【００４０】
コーン画分ＩＩ、コーン画分ＩＩＩまたはコーン画分ＩＩ＋ＩＩＩを制酸薬と併用して投与することにより得られる臨床的に観察可能な結果は、即座にあるいは２週間以内に観察してもよい。しかしながら、測定可能な便益を得るためには６週間以上かかるかもしれない。治療の最初の数週間のあいだの初期用量は、臨床的改善が観察された時点で低減してもよい。最初の数週間後に用量は最大９０％まで低減してもよい。
【００４１】
別の実施形態において、イムノグロブリン組成物は最終的に滅菌される。すなわち、コーン画分ＩＩ＋ＩＩＩなどのヒト血漿画分を、治療用にコーン画分ＩＩ＋ＩＩＩを滅菌するのに十分な速度の制御γ線で照射する。照射は１時間あたり約２から約３ＫＧｙの速度で全線量が約２０から約５０ＫＧｙとなるように行った。γ照射をコーン画分ＩＩ＋ＩＩＩ沈殿物を含むカプセルにあて、固有のウィルス及び細菌混入物を破壊もしくは不活性化する。コーン画分ＩＩ＋ＩＩＩカプセルを約２５から約５０ＫＧｙの全線量で照射することにより、約１０−６の無菌性保証水準（ＳＡＬ）が達成されるが、そこに含まれるイムノグロブリン組成物を不安定化されることはない。驚いたことに、イムノグロブリン画分の生物学的活性は、高線量の照射にもかかわらず維持されていた（表１）。
【００４２】
【表１】
＊データはＥＬＩＳＡによる光学密度（Ａ４０５ｎｍ）で表されている。この結果は、表示した抗原（ワクチン及び皮膚試験試薬）に対する反応からヒト血清アルブミンに対する反応を差し引いた差を示している。すべての反応は２回の測定の平均である。アルブミンに対する反応は０．１３から０．２０であった。
【００４３】
別の実施形態において、ヒト血漿イムノグロブリン組成物は、加熱によって最終的に滅菌して、固有のウィルスまたは細菌の混入物を破壊もしくは不活性化する。加熱滅菌、例えば湿式加熱滅菌は、従来利用されている、イムノグロブリン組成物の組成物を約１５０℃から約３５０℃の温度範囲かつ５ｂａｒまでの圧力の飽和蒸気に直接接触させることによるものである。しかしながら、加熱滅菌に変更を加えることは、本発明に従って従来的に実現されることを理解するであろう。
【００４４】
本発明に従う経口治療方法は、関節リューマチ（多関節性若年性関節リューマチを含む）、及び他の関連した免疫媒介性疾患、例えば、スティル病、シェーグレン症候群、全身性エリテマトーデス（ＳＬＥ）を含む脈管炎、末梢神経障害、レーノー現象、知覚神経聴覚損失（メニエール病）、線維筋痛など、炎症性腸炎（潰瘍性大腸炎、クローン病及びムチン性大腸炎）、関節症性感染、ライター症候群、及び強直性脊椎炎を含む脊椎関節症、一時性動脈炎、リウマチ性多発性筋痛、無ガンマグロブリン血症を治療するために用いることができる。本発明に従う脊椎関節症の治療は、関節リウマチの場合と同じ用量及び同じ治療プロトコールを利用するものとする。
【００４５】
以下に本発明を非限定的な実施例によってさらに説明する。
【００４６】
（実施例１）
ヒトコーン血漿画分ＩＩ＋ＩＩＩの調製
米国のドナーから得た血漿をスクリーニングして、ＦＤＡ及びｃＧＭＰの要件に従って伝染病マーカで試験した。各血液試料を抗ＨＩＶ−１／ＨＩＶ−２及びＨＩＶ−１ｐ２４、抗ＨＩＶ−１１９８５、ＨＩＶ−２１９９２、ＨＩＶ抗原１９９６；Ｂ型肝炎表面抗原及びＢ型肝炎コア抗体１９７１／１９８７；Ｃ型肝炎、抗ＨＣＶ１９９Ｄ；アラニンアミノトランスフェラーゼ肝酵素１９８６；シフィルスに対する血清試験及びＨＴＬＶ−Ｉ／ＩＩ１９８８に対してのスクリーニングを行った。
【００４７】
−１８℃以下で保存しておいた新鮮な及び／または回収した凍結血清を解凍し、０から２℃にした。プールした後、冷エタノールを最終濃度が８％（体積／体積）になるように添加した。混合物を−１℃から−３℃に保ち、ｐＨを７．２から７．３に調整した。得られた沈殿（画分Ｉ）を、ＳｈａｒｐｌｅｓＡＳ１６を用いて、１分間あたり６００から７５０ｍＬの流速で遠心分離により除去した。
【００４８】
上清を−５℃まで冷却し、クエン酸を用いてｐＨを６．７から６．９に調整した。冷エタノールを最終濃度が２５％（体積／体積）になるように再度加えた。このエタノール濃度でＩｇＧ、ＩｇＡ及びＩｇＭの回収量が最も多く、遠心分離によって得られた画分ＩＩ＋ＩＩＩ沈殿中に含まれるアルブミン、α及びβグロブリンの量も最も多かった。
【００４９】
画分ＩＩ＋ＩＩＩ沈殿を、１％グリシン及び２％デキストロース（最終濃度）を含有する０℃から５℃の注射用水（ＷＦＩ）中に懸濁した。０．１Ｍのクエン酸によりｐＨを６．０に調整した。画分ＩＩ＋ＩＩＩ溶液のタンパク質濃度は２．５〜０．５％であった。
【００５０】
画分ＩＩ＋ＩＩＩ溶液（０℃から１０℃）を、容器中の０．７０〜０．２インチの深さを有する溶液層に入れた。次に溶液を凍結乾燥し、密閉プラスチック容器内に１から１０℃で保存した。
【００５１】
密閉プラスチック容器内の凍結乾燥した画分ＩＩ＋ＩＩＩ粉末を制御γ線に照射した。照射は全線量が２５から５０ＫＧｙとなるように１時間あたり２から３ＫＧｙで行った。
【００５２】
（実施例２）
ヒトコーン血漿画分ＩＩ及びコーン血漿画分ＩＩＩの調製
実施例１において前述のように調製した画分ＩＩ＋ＩＩＩ沈殿を、−５℃の十分な注射用水中に溶解して１％のタンパク質濃度とした。ｐＨを７．２に調整し、冷エタノールを最終濃度が２０％から２５％（体積／体積）となるように添加した。混合物を−５℃で２〜２４時間放置した。沈殿の画分ＩＩをろ液から遠心分離により除去した。（Ｏｎｃｌｅｙら（１９４９），Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，７１：５４１−５５０を参照のこと。この文献を参照により本願に組み込まれる）。得られた上清は画分ＩＩＩを含んでいる。上清のｐＨを５．７に調整し、冷エチルアルコールを最終濃度が２５％（体積／体積）となるように添加した。混合物を−５℃で２から２４時間放置した。沈殿の画分ＩＩＩをろ液から遠心分離により除去した（前掲のＯｎｃｌｅｙらを参照のこと）。
【００５３】
画分ＩＩ及び／または画分ＩＩＩを注射に適した水に再溶解し、１％から５％のタンパク質と約１５％のグリシンの溶液を得た。生成物は、−３０℃から−３５℃で４時間凍結することにより、凍結乾燥した。棚の温度を２時間かけて−３０℃から−１０℃に上げた。その後、棚の温度を０℃に上げた。最初の乾燥は熱電対が０℃になるまで、あるいは０℃で実施した（サイクルの開始から約２０時間）。２回目は棚の温度を３０℃にして約６時間実施した。[0001]
(Field of the Invention)
The present invention relates to the treatment of immune-mediated diseases, including autoimmune diseases. More specifically, the present invention relates to rheumatoid arthritis (including rheumatoid arthritis), Still's disease, Sjogren's syndrome, vasculitis including systemic lupus erythematosus, peripheral neuropathy, Lenneau's phenomenon, sensory nerve hearing loss ( Meniere's disease), treatment of fibromyalgia. The invention also includes spondyloarthritis, including inflammatory bowel disease (ulcerative colitis, Crohn's disease and mucinous colitis), arthritic infections, Reiter's syndrome, and ankylosing spondylitis, transient arteritis, rheumatic polyps. The present invention relates to the treatment of myalgia, agammaglobulinemia and immunosuppressed patients. According to the present invention, the immune-mediated disease is treated by oral administration of corn fraction II, corn fraction III, or a pharmaceutical composition comprising corn fractions II and III.
[0002]
(Background of the Invention)
The present invention relates to a method for treating an immune-mediated disease by administering a pharmaceutical composition comprising a human plasma fraction substantially enriched in human immunoglobulin G, for example, cone fractions II + III. . Cone fraction II + III is derived from pooled human plasma and contains mainly IgG, IgA and IgM. The corn fraction II + III is usually prepared by the method described in Cohn Method 6 (Cohn EJ, et al. (1946), J. Am. Chem. Soc., 68: 459-475, and WHO Technical Report Series 786 (Cohn). 1989), which are incorporated herein by reference). Cohn fraction II + III also contains albumin, α and β globulin, glycine, blood clotting factors II, VII, IX and X and dextrose.
[0003]
The microbial flora of the gastrointestinal tract is thought to have a significant effect on the development of the immune system and predisposition to the development of autoimmune diseases. Intestinal microbial contamination is essential for the development of systemic immune tolerance to gastrointestinal tract antigens and rejection of foreign transplanted organs. Gaboriau-Routhiau et al. (1996) Pediatric Res. , 39 (4) (1): 625-629; Sudo et al. (1997), J. Am. Immunol. 159 (4): 1739-1745. The importance of microorganisms in the development of immune-mediated diseases, including but not limited to adult and juvenile rheumatoid arthritis, has been demonstrated by the relationship between exposure to microbial antigens and the development of HLA-B27 responsive arthritis in humans. A recent study by Taurog et al. [(1994), J. et al. Exp. Med. , 180 (6): 2359-2364] showed that HLA-B27 transgenic mice develop arthritis but do not develop in germ-free animals. Microorganisms involved in reactive arthritis include those found in the gastrointestinal tract. Similarly, according to some investigators, rheumatoid arthritis is a disease of E. coli. coli, p. It has a prominent relevance to HLA-DR4, defined by a common epitope present on antigens from intestinal microorganisms such as mirabilis and Epstein Barr Virus [Albani et al. (1992), Clin Biochem. , 25 (3): 209-212; Tiwana et al. (1999), Infect. Immun. , 67 (6): 2769-2775; Roudier, J. et al. (1989), Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 86 (13): 5104-5108].
[0004]
Adult rheumatoid arthritis is a systemic inflammatory disease that usually affects especially the joints of the hands and feet. The onset of rheumatoid arthritis can occur slowly over weeks to months, or the condition can surface rapidly and acutely. HLA-B27 is associated with spondyloarthropathy. [Schwimmbeck et al. (1988), Am. J. Med. , 85 (6A): 51-53; Lahesma et al. (1991), Clin. Exp. Immunol. , 86 (3): 399-404; Fielder et al. (1995), FEBS Lett. 369 (2-3): 243-248; Erbinger et al. (1996), Clin. Rheum. 1550 Suppl. 1: 57-61].
[0005]
Today, more than 2.5 million people (1% of the population) are diagnosed with adult rheumatoid arthritis in the United States alone, with 6.5 to 8 million adults potentially afflicted with the disease. There is also. The prevalence of women is two to three times higher than that of men. Adult rheumatoid arthritis can also occur in adolescents, and the incidence typically increases with age.
[0006]
Traditional early symptoms of adult rheumatoid arthritis include stiffness, tenderness, fever, subcutaneous nodules, joint pain, and malaise. Hand, foot, knee and wrist joints are the most susceptible, and consequently also include the hip, elbow and shoulder. When a joint becomes stiff and swells, any movement becomes very painful and difficult. In more severe cases of adult rheumatoid arthritis, severe pain occurs, eventually leading to joint destruction. In the United States, around 300,000 bone and joint replacement surgeries are performed annually in an effort to alleviate the pain and loss of mobility due to joint destruction associated with arthritis.
[0007]
Adult rheumatoid arthritis and juvenile rheumatoid arthritis are two different diseases. Juvenile rheumatoid arthritis is common in children and includes eight different disease types. One type of juvenile rheumatoid arthritis, Rf-positive polyarticular rheumatoid arthritis, has some similarities to adult rheumatoid arthritis. However, polyarticular is only about 40% of all cases of juvenile rheumatoid arthritis, and only about 5 to 10% of rheumatoid factor (Rf) positive. Thus, only about 2 to 4% of patients with juvenile rheumatoid arthritis will suffer from Rf-positive polyarticular juvenile rheumatoid arthritis.
[0008]
Juvenile rheumatoid arthritis is characterized by abnormal T and B cell function and selective IgA deficiency. Adult rheumatoid arthritis is a disease that is confirmed by the presence of autoantibodies containing certain characteristic rheumatoid factors. The immunogenetic relationships, clinical course, and functional consequences of juvenile rheumatoid arthritis are quite different from those of adult-onset rheumatoid arthritis. Pediatric Rheumatic Diseases In: Primer on the Rheumatic Diseases, 11th Edition, 1997 (incorporated herein by reference).
[0009]
Adult rheumatoid arthritis is characterized by the presence of rheumatoid factor autoantibodies. Germ-free mice genetically predisposed to produce rheumatoid factor do not produce the autoantibodies until they are exposed to microorganisms. After the end of sterility, rheumatoid factor was first produced by the lymphatic system of the gastrointestinal tract. Coutelier et al. (1986), J. Mol. Immunol. , 137 (1): 337-340. These observations suggest that in some patients, rheumatoid arthritis is reactive arthritis induced by microbial antigens in the gastrointestinal tract.
[0010]
The gastrointestinal tract is protected by the secretory immune system. IgA antibodies are secreted into the intestine in response to microbial antigens. Patients deficient in IgA have a high incidence of autoimmune diseases, including reactive arthritis. These observations suggest that immunoglobulins secreted in the intestine protect against autoimmunity. Restoring normal antibodies in the intestine of an individual who cannot produce antibodies that protect against the development of an autoimmune disease can improve the symptoms of patients with the autoimmune disease. To date, the effective treatment of autoimmune diseases such as adult rheumatoid arthritis has generally utilized a combination of medication, exercise, rest and appropriate joint protection treatment. Treatment for individual patients will vary depending on the extent of the disease and the joint involved. Aspirin is widely used to reduce pain and inflammation. In moderate or advanced cases, in addition to aspirin, nonsteroidal anti-inflammatory drugs, corticosteroids, gold salts, antimalarials and immunosuppressants are also widely used. However, the use of steroids and immunosuppressants has significant risks and side effects, both in terms of toxicity and vulnerability to potentially lethal conditions such as infections and malignancies. Therefore, there is a need for a method of treating immune-mediated diseases without the potentially adverse side effects associated with the treatments described above.
[0011]
"Superantigens" are considered to be stimulants of the immune system in various autoimmune diseases, including rheumatoid arthritis. Herman, A .; (1991) Annu. Rev .. Immunol. 9: 745-772; Drake, C.I. G. FIG. And Kotzin, B .; L. (1992) J.I. Clin. Immunol. 12: 149-162 (incorporated herein by reference). The gastrointestinal tract is considered to be the site of immunological stimulation by the superantigen. It is believed that patients suffering from adult rheumatoid arthritis lack the ability to produce antibodies with normal neutralizing specificity. One approach to treating rheumatoid arthritis involves orally administering milk to the patient. See U.S. Pat. No. 4,732,757 (Stolle et al.). Stole et al. Disclose that hyperimmunized milk containing high titers of specific antibodies from animals boosted actively and artificially with large amounts of purified antibodies is useful for the treatment of rheumatoid arthritis are doing. The disadvantages to this approach are several-fold. The bovine donor pool must be specifically and actively immunized against a small subset of antigens. In addition, some patients have rejection of milk consumption. In addition, milk does not contain all the antibody spectra present in humans. Furthermore, the effects of hyperimmune milk on inflammatory processes such as rheumatoid arthritis have been largely discarded. See Ormrod and Miller (1991) Agents and Actions, 32 (3/4): 160-166.
[0012]
Another approach to the treatment of immune-mediated diseases, such as rheumatoid arthritis, is tolerizing patients suffering from immune-mediated diseases to certain self-antigens involved in the disease. In Science 259: 1321-1324 (1993) by Weiner et al. (1993), incorporated herein by reference, multiple sclerosis patients were given oral bovine myelin proteins containing two multiple sclerosis autoantigens. Is being administered. In Science 261: 1727-1730 (1993) by Trentham et al., Rheumatoid arthritis patients are orally administered collagen, which is expected to be an autoantigen. One drawback to tolerization is that it is difficult to identify appropriate self-antigens to induce tolerance.
[0013]
In view of the above deficiencies and disadvantages of the modes currently used to treat the above disorders, it is desirable to continue to develop effective methods and compositions for the treatment of immune mediated diseases.
[0014]
(Summary of the Invention)
The present invention provides a composition comprising a human plasma fraction, such as corn fraction II, corn fraction III or corn fraction II + III, and combinations thereof, enriched with human immunoglobulin G, together with an antacid, or It is directed to methods for treating immune mediated diseases by oral administration without antacids in an amount sufficient to provide a clinically observable improvement in the condition of the patient. The present invention is surprising in that oral administration of a composition comprising immunoglobulin G to an immune-mediated disease patient, optionally in combination with an antacid, results in significant clinical improvement in the patient's condition. Based on discovery. The present invention is also based on the finding that, for example, oral administration of a gamma-irradiated immunoglobulin G-enhancing composition has no toxic effect.
[0015]
(Detailed description of the invention)
The present invention provides a method for treating a patient suffering from an immune mediated disease. By “immune-mediated” disease is meant a pathogenic disease that elicits a characteristic immune response by lymphocytes, antigen-presenting cells, and cells containing soluble mediators or cytokines produced by said cells. Immune-mediated diseases exhibit symptoms such as pain, inflammation, stiffness, and hearing loss, and include rheumatoid arthritis, Still's disease, Sjogren's syndrome, systemic lupus erythematosus, and the like. The method of the present invention is utilized by orally administering a human plasma fraction containing human immunoglobulin G to a subject in need of the plasma fraction.
[0016]
A preferred human plasma fraction containing human immunoglobulin G is Cohn fraction II. Another preferred human plasma fraction containing human immunoglobulin G is Cohn fraction III. Yet another preferred human plasma fraction containing human immunoglobulin G is Cohn fraction II + III. The human plasma fraction is administered according to the present invention, optionally in combination with an antacid. Cone Fraction II, Cone Fraction III, and Cone Fraction II + III are derived from pooled human plasma and mainly include IgG, IgA and IgM. Corn fraction II, corn fraction III, and corn fraction II + III are each prepared by conventional methods and should be understood to be pooled human immunoglobulin compositions according to the present invention.
[0017]
Immunoglobulins introduced into the acidic environment of the human stomach can be inactivated. To alleviate such inactivation and enhance the therapeutic effect, the human plasma fraction used in the methods of the present invention is optionally administered in combination with an antacid. Although not wanting to be tied to a particular mechanism, acid blockers may neutralize intestinal acidity, preventing immunoglobulins from being digested in the stomach. Alternatively, acid blockers and immunoglobulins may act synergistically to improve disease symptoms by suppressing inflammatory mediators or immune-mediated inflammation.
[0018]
The invention also encompasses a pharmaceutical composition comprising a human plasma fraction, such as corn fraction II, corn fraction III or corn fraction II + III, and combinations thereof, with or without antacids. I do.
[0019]
As used herein, the term "pooled human immunoglobulin" refers to an immunoglobulin composition comprising polyclonal antibodies obtained from the plasma of thousands of human donors. Polyclonal antibodies may include IgG, IgA, IgM, etc., or fragments thereof. Preferred polyclonal fractions include IgG for treating immune mediated diseases including, for example, rheumatoid arthritis. A preferred immunoglobulin composition, corn fraction II + III, comprises at least about 30% to about 85% IgG polyclonal antibody, about 5% to about 30% IgA and about 1% to about 25% IgM, with trace amounts of It contains other components such as coagulation factors II, VII, IX, X and α and β globulin. Another preferred immunoglobulin composition, corn fraction II, comprises about 95% to about 99% IgG polyclonal antibody, at least 0.01% to about 2% IgM, and trace salts. Still another preferred immunoglobulin composition, corn fraction III, comprises at least about 25% IgG polyclonal antibody, at least about 5% to about 30% IgA, and about 1% to about 25% IgM. Includes trace amounts of coagulation factors II, VII, IX, α and β globin and lipids.
[0020]
A preferred pooled human immunoglobulin composition useful according to the invention comprises corn fraction II. Another preferred human immunoglobulin composition useful according to the invention comprises corn fraction III. Yet another preferred pooled human immunoglobulin composition useful according to the invention comprises Cohn fractions II + III.
[0021]
As used herein, “antacid” refers to H 2 Refers to blockers or acid blockers or other acid neutralizing agents that neutralize and / or significantly reduce intestinal acid content. A preferred antacid useful according to the teachings of the present invention is cimetidine.
[0022]
As used herein, “clinically observable improvement” refers to a significant subjective improvement in the symptoms associated with the patient's immune-mediated condition. For example, in patients suffering from rheumatoid arthritis, the subjective improvement is characterized according to the present invention, such as but not limited to tender joints, hypertrophied joints, and an assessment of the reduction or improvement of stiffness. A significant subjective improvement in symptoms refers to the patient's self-assessment or assessment by a physician for stiffness, tender joints, hypertrophy and the like. For example, even in the same arthritic joint, the observable differences in hypertrophy or tenderness are large. Most notably, there is no hypertrophy or tenderness in previously affected joints. Similarly, freedom of movement has been greatly updated in joints that have previously suffered from immune-mediated diseases.
[0023]
Another aspect of the present invention provides a pharmaceutical composition comprising corn fraction II, corn fraction III or corn fraction II + III, and optionally an antacid and a pharmaceutically acceptable carrier. In a preferred embodiment, the composition comprises corn fraction II + III and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0024]
As used herein, "pharmaceutically acceptable carrier" includes any and all solvents, dispersion media, coatings, antibacterial and antifungal agents, isotonic and absorption delaying agents and the like. Substances that function as pharmaceutically acceptable carriers include, for example, sugars such as lactose, glucose and sucrose; starches such as corn starch and potato starch; cellulose and its derivatives such as sodium carboxymethylcellulose, ethylcellulose and cellulose acetate; Powdered tragacanth; malt; gelatin; talc; stearic acid; magnesium stearate; calcium sulfate; vegetable oils such as peanut oil, cottonseed oil, sesame oil, olive oil, corn oil and cocoa oil; propylene glycol, glycerin, sorbitol, mannitol and polyethylene glycol. Polyhydric alcohols; agar; alginic acid; pyrogen-free water; isotonic saline; and phosphate buffered solutions; powdered skim milk; Vitamin C and other non-toxic compatible substances such as estrogen and echinacea, and the like. Wetting agents and lubricants such as sodium lauryl sulfate, as well as coloring agents, flavoring agents, lubricants, excipients, tabletting agents, stabilizers, antioxidants, preservatives, and the like can also be used. The use of vehicles and substances for pharmaceutically active substances as described above is well known in the art. Unless conventional media or materials are incompatible with the active ingredient, the above uses in pharmaceutical compositions are also implied.
[0025]
Thus, in a preferred form of treatment of an immune-mediated disease, a patient is provided with a therapeutically effective amount of corn fraction II, corn fraction III or corn fraction II + III and a combination thereof and a pharmaceutically acceptable carrier. Administer. In another preferred form in the treatment of an immune-mediated disease, a patient is orally administered a therapeutically effective amount of Cohn Fraction II and a pharmaceutically acceptable carrier. In yet another preferred form of treatment of an immune-mediated disease, a patient is orally administered a therapeutically effective amount of Cohn Fraction III and a pharmaceutically acceptable carrier.
[0026]
As used herein, "treating" or "treatment" refers to ameliorating, suppressing, reducing or eliminating the clinical symptoms (ie, clinical symptoms) after the onset of an autoimmune disease such as rheumatoid arthritis. An effective or successful treatment results in a clinically observable improvement.
[0027]
"Oral" administration, as used herein, includes oral, enteral or intragastric administration.
[0028]
As used herein, "in combination with" means before, substantially simultaneously with, or after administration of the antacid. Of course, the administration of the composition, such as the corn fraction II + III, must be performed before and after administration of the antacid without leaving the associated effect of the previously administered substance so long as to be lost. Thus, the immunoglobulin composition should be administered usually within a therapeutically effective time. As used herein, “therapeutically effective time” refers to the time frame during which an antacid or immunoglobulin composition (eg, Cohn Fraction II + III or Cohn Fraction II) is still effective in a patient. Say.
[0029]
In a preferred embodiment, the immunoglobulin composition (ie, corn fraction II, corn fraction III and corn fraction II + III) is obtained by cold alcohol (eg, ethanol) fractionation from the plasma of about 1000 to about 3000 human volunteers. Cohn Method 6 (Fraction II + III) (supra), and the method of Onclay et al. (Corn fractions II and III) (later). The above references are incorporated herein by reference.
[0030]
Optionally, an antacid is added to corn fraction II, corn fraction III, and / or corn fraction to increase the efficacy of the introduced immunoglobulin in the treated patient and to provide a clinically observable improvement. Administered in combination with the II + III composition. In a preferred embodiment, the immunoglobulin composition and the antacid are administered simultaneously as a single pharmaceutical composition. In another preferred embodiment, the immunoglobulin composition is administered at a therapeutically effective time after administration of the antacid. Preferably, the antacid is aluminum or magnesium hydroxide, such as commercially available Maalox ™, Mylanta ™ or Tagame ™. Most preferably, the antacid is H such as cimetidine or ranitidine. 2 It is a blocker.
[0031]
The dose of the antacid administered in combination with the immunoglobulin composition depends on the H 2 Depends on the type of blocker. When the antacid is Mylanta ™, 15 mL to 30 mL is preferred. Most preferably, the dose of Mylanta ™ is 15 mL. Cimetidine H 2 If a blocker is used, the preferred dose is 400 mg to 800 mg per day.
[0032]
The dose of the immunoglobulin composition of the present invention administered to a patient can vary depending on the degree of the condition of the patient and other clinical factors. Preferably, the dose is the smallest amount that gives a clinically observable and therapeutically effective result. The most preferred and therapeutically effective dose is the dose that has the greatest effect in alleviating the patient's disease state, including pain. The therapeutically effective dose of corn fraction II, corn fraction III and / or corn fraction II + III composition is only 5 mg / kg, at most 5 g / kg per day. For example, a suitable dose of a composition of the present invention for juvenile rheumatoid arthritis is from about 5 mg / kg to about 30 mg / kg of body weight per day.
[0033]
The preferred dose may be administered in divided doses or a single dose. Further, the dose of the immunoglobulin composition can be administered at any time during the day, but is preferably administered in the morning before the patient's activity begins.
[0034]
In the treatment of rheumatoid arthritis with corn fraction II, corn fraction III, or corn fraction II + III, the patient's joint condition can be determined, for example, by self-assessment of pain, stiffness, etc. by the patient himself. Another method of examining the condition of a patient's joint is by a physician diagnosing tenderness and hypertrophy of the patient's joint.
[0035]
A clear practical advantage of the present invention is that a composition comprising a human plasma fraction enriched with human immunoglobulin G, eg, Cohn fractions II + III, can be administered by any convenient method, such as the oral route. The invention encompasses not only the oral administration described above, but also the administration of the claimed composition by intravenous injection, aerosol or suppository route. Oral administration is most preferred. Depending on the route of administration, the immunoglobulin composition required to protect the fraction from enzymes, acids and other natural conditions that can adversely affect the active fraction (ie, corn fraction II, corn fraction III) Or it may be necessary to coat the active ingredient comprising the corn fractions II + III). For oral administration of the disclosed compositions, the compositions can be coated with or administered with a material that inhibits inactivation. For example, enteric compositions are specifically designed to deliver corn fraction II + III to the gastrointestinal tract. Enteric coating techniques are conventional in the pharmaceutical art and are readily implemented in accordance with the present invention using the knowledge of those skilled in the art.
[0036]
The active compound may be administered, for example, with an inert diluent or with an assimilable edible carrier, or the active compound may be packaged in hard or soft gelatin capsules, It may be compressed into tablets designed to pass through (ie, enteric coated) or may be incorporated directly into the food of the meal. For oral therapeutic administration, corn fraction II, corn fraction III or corn fraction II + III can be incorporated into excipients and taken into ingestible tablets, sublingual tablets, troches, capsules, elixirs, suspensions, syrups. It can be used in the form of agents, wafers and the like.
[0037]
The tablets, troches, pills, capsules, and the like described above may include the following. A binder such as tragacanth gum, acacia, corn starch or gelatin; an excipient such as dicalcium phosphate; a disintegrant such as corn starch, potato starch and alginic acid; a lubricant such as magnesium stearate; and a wetting agent such as sucrose, lactose or saccharin. A flavoring agent such as peppermint, wintergreen oil or cherry flavor may be added. When the unit dosage form is a capsule, it may contain, in addition to materials of the above type, a liquid carrier. Various other materials may be present as coatings or to modify the physical form of the dosage unit. For example, tablets, pills, or capsules may be coated with shellac, sugar, or both. A syrup or elixir may contain the active compound, sucrose as a wetting agent, methyl and propylparabens as preservatives, a dye and a flavoring such as cherry or orange flavor. Of course, any material for preparing any unit dosage form should be pharmaceutically pure and substantially non-toxic in the amounts used. In addition, corn fraction II, corn fraction III and / or corn fraction II + III can be incorporated into a sustained release preparation or formulation.
[0038]
It is especially advantageous to formulate the immunoglobulin compositions of the present invention in unit dosage form for ease of administration and uniformity of dosage. As used herein, "unit dosage form" refers to physically discrete units suitable as a single dose for the subject to be treated, each unit being associated with a desired pharmaceutical carrier. A predetermined amount of corn fraction II, corn fraction III or corn fraction II + III, calculated to provide a therapeutic effect of with or without an antacid. The requirements for the unit dosage form of the present invention include (a) the unique properties of the selected immunoglobulin composition, the antacid, and the pharmaceutical therapeutic effect to be achieved, and (b) the details disclosed herein. It is dictated by, or directly dependent on, the limitations inherent in formulation techniques, such as immunoglobulin fractionation for the treatment of autoimmune diseases.
[0039]
The antacid-containing or antacid-free immunoglobulin composition is formulated in a unit dosage form as described above, together with a suitable pharmaceutically acceptable carrier, in an effective amount and for convenient and effective administration. The unit dosage form can contain, for example, corn fraction II, corn fraction III, or corn fraction II + III in an amount ranging from about 5 mg / kg to about 5 g / kg, optionally with an antacid such as cimetidine. It contains in amounts ranging from 200 to about 1000 mg.
[0040]
Clinically observable results obtained by administering corn fraction II, corn fraction III or corn fraction II + III in combination with an antacid may be observed immediately or within two weeks. However, it may take more than six weeks to obtain measurable benefits. The initial dose during the first few weeks of treatment may be reduced when clinical improvement is observed. After the first few weeks the dose may be reduced by up to 90%.
[0041]
In another embodiment, the immunoglobulin composition is terminally sterilized. That is, a human plasma fraction, such as corn fraction II + III, is irradiated with a control gamma ray at a rate sufficient to sterilize corn fraction II + III for treatment. Irradiation was performed at a rate of about 2 to about 3 KGy per hour with a total dose of about 20 to about 50 KGy. Gamma irradiation is applied to capsules containing the corn fraction II + III precipitate to destroy or inactivate intrinsic viral and bacterial contaminants. Irradiating the corn fraction II + III capsules with a total dose of about 25 to about 50 KGy gives about 10 -6 , But does not destabilize the immunoglobulin composition contained therein. Surprisingly, the biological activity of the immunoglobulin fraction was maintained despite high doses of irradiation (Table 1).
[0042]
[Table 1]
* Data are expressed as optical density (A405 nm) by ELISA. The results show the difference between the response to the indicated antigens (vaccine and skin test reagent) minus the response to human serum albumin. All reactions are the average of two measurements. The response to albumin was between 0.13 and 0.20.
[0043]
In another embodiment, the human plasma immunoglobulin composition is terminally sterilized by heating to destroy or inactivate native viral or bacterial contaminants. Heat sterilization, for example wet heat sterilization, is by direct contact of a conventionally utilized composition of the immunoglobulin composition with saturated steam at a temperature in the range of about 150 ° C. to about 350 ° C. and a pressure of up to 5 bar. . However, it will be appreciated that modifications to heat sterilization are conventionally realized according to the present invention.
[0044]
Oral treatment methods according to the present invention include rheumatoid arthritis (including polyarticular juvenile rheumatoid arthritis) and other related immune-mediated diseases, such as vasculature including Still's disease, Sjogren's syndrome, systemic lupus erythematosus (SLE). Inflammatory bowel disease (ulcerative colitis, Crohn's disease and mucinous colitis), inflammation, peripheral neuropathy, Raynaud's phenomenon, sensorineural hearing loss (Ménière's disease), fibromyalgia, arthritic infection, Reiter's syndrome, and It can be used to treat spondyloarthritis, including ankylosing spondylitis, transient arteritis, polymyalgia rheumatica, agammaglobulinemia. The treatment of spondyloarthropathy according to the present invention will utilize the same dose and the same treatment protocol as for rheumatoid arthritis.
[0045]
The invention is further described below by way of non-limiting examples.
[0046]
(Example 1)
Preparation of human corn plasma fraction II + III
Plasma from US donors was screened and tested for infectious disease markers according to FDA and cGMP requirements. Each blood sample was tested for anti-HIV-1 / HIV-2 and HIV-1 p24, anti-HIV-11985, HIV-21992, HIV antigen 1996; hepatitis B surface antigen and hepatitis B core antibody 1971/1987; Serum tests for HCV 199D; Alanine aminotransferase liver enzyme 1986; S. typhi and screening against HTLV-I / II1988.
[0047]
Fresh and / or collected frozen serum stored below -18 ° C was thawed and brought to 0-2 ° C. After pooling, cold ethanol was added to a final concentration of 8% (vol / vol). The mixture was kept at -1 ° C to -3 ° C and the pH was adjusted from 7.2 to 7.3. The resulting precipitate (Fraction I) was removed by centrifugation at a flow rate of 600 to 750 mL per minute using Sharples AS16.
[0048]
The supernatant was cooled to −5 ° C. and the pH was adjusted from 6.7 to 6.9 using citric acid. Cold ethanol was added again to a final concentration of 25% (vol / vol). At this ethanol concentration, the recovered amounts of IgG, IgA and IgM were the largest, and the amounts of albumin, α and β globulin contained in the fraction II + III precipitate obtained by centrifugation were also the largest.
[0049]
Fraction II + III precipitate was suspended in water for injection (WFI) containing 0% to 5 ° C containing 1% glycine and 2% dextrose (final concentration). The pH was adjusted to 6.0 with 0.1 M citric acid. The protein concentration of the fraction II + III solution was 2.5-0.5%.
[0050]
The fraction II + III solution (0 ° C. to 10 ° C.) was placed in a solution layer having a depth of 0.70 to 0.2 inches in a container. The solution was then lyophilized and stored at 1-10 ° C. in a closed plastic container.
[0051]
Lyophilized Fraction II + III powder in a closed plastic container was irradiated with control gamma rays. Irradiation was performed at 2 to 3 KGy per hour so that the total dose was 25 to 50 KGy.
[0052]
(Example 2)
Preparation of human corn plasma fraction II and corn plasma fraction III
Fraction II + III precipitate prepared as described above in Example 1 was dissolved in sufficient water for injection at -5 ° C to a protein concentration of 1%. The pH was adjusted to 7.2 and cold ethanol was added to a final concentration of 20% to 25% (vol / vol). The mixture was left at −5 ° C. for 2 to 24 hours. Fraction II of the precipitate was removed from the filtrate by centrifugation. (See Oncley et al. (1949), J. Am. Chem. Soc., 71: 541-550, which is incorporated herein by reference). The resulting supernatant contains fraction III. The pH of the supernatant was adjusted to 5.7 and cold ethyl alcohol was added to a final concentration of 25% (vol / vol). The mixture was left at -5 ° C for 2 to 24 hours. Fraction III of the precipitate was removed from the filtrate by centrifugation (see Oncley et al., Supra).
[0053]
Fraction II and / or Fraction III were redissolved in water suitable for injection to give a solution of 1% to 5% protein and about 15% glycine. The product was lyophilized by freezing at -30 ° C to -35 ° C for 4 hours. The shelf temperature was increased from -30C to -10C over 2 hours. Thereafter, the temperature of the shelf was raised to 0 ° C. The first drying was performed until the thermocouple reached 0 ° C or at 0 ° C (about 20 hours from the start of the cycle). The second time was carried out for about 6 hours at a shelf temperature of 30 ° C.