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JP2003516761A - ヒトｆｓｈ受容体の遺伝子変異体および配偶子形成におけるその影響 - Google Patents

ヒトｆｓｈ受容体の遺伝子変異体および配偶子形成におけるその影響

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JP2003516761A
JP2003516761A JP2001545579A JP2001545579A JP2003516761A JP 2003516761 A JP2003516761 A JP 2003516761A JP 2001545579 A JP2001545579 A JP 2001545579A JP 2001545579 A JP2001545579 A JP 2001545579A JP 2003516761 A JP2003516761 A JP 2003516761A
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fsh
receptor
fsh receptor
determining
dna
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マヌエラ・シモーニ
エバーハルト・ニーシュラーク
ヘルマン・ベーレ・エム
マリトサ・ペレス
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    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
    • C12Q1/6858—Allele-specific amplification
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis

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Abstract

(57)【要約】 本発明は、治療を受ける女性のＦＳＨ受容体変異体の決定を特徴とする女性の不妊症の治療におけるＦＳＨの用量の決定方法、ＦＳＨ受容体変異体の決定を特徴とする女性における不妊症を治療する方法およびＦＳＨ受容体変異体の決定を行うためのキットを提供する。

Description

【発明の詳細な説明】
【０００１】 本発明は、治療を受ける女性のＦＳＨ受容体変異体の決定を特徴とする女性の
不妊症の治療におけるＦＳＨの用量の決定方法、ＦＳＨ受容体変異体の決定を特
徴とする女性における不妊症を治療する方法およびＦＳＨ受容体変異体の決定を
行うためのキットを提供する。
【０００２】 援助生殖手順の過程におけるコントロールされた排卵誘発の成功は、ホルモン
ＦＳＨの投与に依存する。残念ながら、ＦＳＨの投与に対する患者の反応も、ど
れくらいのホルモン用量が必要なのかも、治療の開始時には予測することができ
ない。予測に役立つパラメーターがないので、排卵誘発のためにＩＶＦ（体外受
精）クリニックにおいて大量の高価なＦＳＨアンプルが用いられているが、これ
は過剰刺激およびそれがもたらす臨床的結果という危険を生み出す治療養生法で
ある。 濾胞刺激ホルモン（follicle-stimulating hormone：ＦＳＨ）は、男性および
女性の両方において生殖細胞の成熟（配偶子形成）にとって必須のファクターで
ある。ＦＳＨは、卵巣の顆粒膜細胞および精巣のセルトリ細胞に本質的に位置す
るＦＳＨ受容体を介してその作用を発揮する。ＦＳＨとその受容体間の相互作用
の動揺はどのようなものであっても、配偶子形成不全をもたらす。ＦＳＨ受容体
突然変異をもつ女性は、原発性無月経に代表される臨床像を示し、ＦＳＨ受容体
突然変異をもつ男性は、一般に受精能力が正常より下である。これらの観察から
、卵母細胞ならびに精子の正常な生理的成熟のためのＦＳＨおよびその受容体の
主要な役割が予告される[Nieschlagら、Clin.Endoclinol.、５１：１３９−１４
６（１９９９）]。
【０００３】 ＦＳＨ受容体は、細胞膜上に存在し、細胞外ドメイン、膜貫通ドメインおよび
細胞内ドメインからなる。ＦＳＨ受容体遺伝子は、染色体２ｐ２１に位置し、１
０個のエクソンからなる。エクソン１から９は細胞外ドメインをコードするが、
エクソン１０は膜貫通ドメインおよび細胞内ドメインをコードする。全遺伝子は
、６９５アミノ酸の成熟タンパク質をコードする５４ｋｂｐにわたる領域に広が
る[Gromollら、Genomics、３５、３０８−３１１（１９９６）]。 我々の最近の研究は、ＦＳＨ受容体が２つの遺伝子変異体として存在すること
を明らかにしている。第３０７位のアミノ酸がアラニンまたはトレオニンのいず
れかであり、第６８０位がセリンまたはアスパラギンのいずれかであることがわ
かっている。第３０７位のアミノ酸は、細胞外ドメインに位置するが、第６８０
位のアミノ酸は、細胞内ドメインの部分にある。我々は、両方の位置が遺伝子的
に互いに関連していることを明らかにしている。そのことによって、２つの別々
のＦＳＨ受容体変異体が、３０７トレオニンおよび６８０アラニン、または３０
７アラニンおよび６８０セリンのいずれかからなることが通常見出される（図１
）。両方の受容体変異体は、統計的に等しく分布している。さらに、Simoniら、
J.Clin.Endocrinol.Metab.、８４：７５１−７５５（１９９９）およびConwayら
、Clinical Endocrinology、vol.５１、９７−９９（１９９９）には、ＦＳＨ受
容体変異体が制限酵素分析によって分析できることが記載されている。
【０００４】 機能的な研究に関する限りでは、２つの受容体変異体の間には、ホルモンの結
合またはシグナルトランスダクションについて、どのような有意な差異も見出さ
れない。しかし、機能的な研究に関して用いたモデル系が、ＦＳＨ−ＦＳＨ受容
体相互作用および受容体活性化における微妙な差異を検出するのに十分なほどは
敏感ではないことに留意すべきである。生殖力のない男性と生殖力のある男性を
比較する最初の臨床実験において、受容体変異体分布の有意な差異は検出されな
かった[Simoniら、J.Clin.Endocrinol.Metab.、８４：７５１−７５５（１９９
９）]。
【０００５】 最近完了したさらなる研究において、我々は、援助生殖手順の過程においてＦ
ＳＨを処置された正常な女性を調査している。ＦＳＨの投与により、患者から卵
母細胞を得ることを可能にする、コントロールされた排卵誘発がもたらされる。
次いで、卵母細胞を精子とともにインビトロでインキュベートし、新生接合体を
患者の子宮に再着床させる。ＦＳＨ処置の目的は、十分な数の受精能力のある卵
母細胞を得ることである。しかし、臨床経験からは、患者がＦＳＨによる刺激に
対し、異なる反応を示すことがわかっている。十分な数の卵母細胞を得るために
比較的低用量のＦＳＨしか必要としない患者もあれば、十分な数の卵母細胞とい
う点で同じ結果に到達するために高用量のＦＳＨで刺激しなければならない患者
もある。必要なＦＳＨの量に応じて、良好応答者（ＦＳＨの必要な用量が低い）
と不良応答者（ＦＳＨの必要な用量が高い）に、患者を分類することができる。
ＦＳＨによる刺激に対する感受性の差異が生じる理由は、これまでにわかってい
ない。過剰刺激を引き起こすことなく十分な数の卵母細胞を生じさせるために、
刺激相中の時間の過程にわたってＦＳＨ用量を調節する必要性は、ＩＶＦ治療に
おける大きな問題である。援助生殖手順を受けている患者におけるＦＳＨに対す
る感受性の差異の臨床像が、我々の調査の出発点であり、我々は、相異するＦＳ
Ｈ受容体変異体がＦＳＨ感受性における差異の原因であるという仮説を試験した
。
【０００６】 我々は、我々のＩＶＦ部門からの１６０名の患者をスクリーニングしたところ
、ホモ接合ＦＳＨ受容体変異体３０７アラニン／６８０セリンをもつ患者の方が
、ホモ接合ＦＳＨ受容体変異体３０７トレオニン／６８０アスパラギンをもつ患
者よりも卵母細胞成熟の刺激のために、有意により多くのＦＳＨを必要とするこ
とがわかった。さらに、ヘテロ接合状態のＦＳＨ受容体変異体をもつ患者におい
ては、ＦＳＨの中間の用量が排卵誘発に必要であることも明らかになった（図２
）。さらに、ホモ接合ＦＳＨ受容体変異体３０７アラニン／６８０セリンをもつ
患者が、７．９ＩＵ／Ｌという平均基礎ＦＳＨレベルを示すのに対し、ヘテロ接
合受容体変異体をもつ患者およびホモ接合ＦＳＨ受容体変異体３０７トレオニン
／６８０アスパラギンをもつ患者においては、平均基礎ＦＳＨレベルがそれぞれ
７．０ＩＵ／Ｌおよび６．３ＩＵ／Ｌであるので（図３）、受容体変異体はＦＳ
Ｈの基礎血清レベルを調節すると思われる。
【０００７】 したがって、ＦＳＨによる刺激に対する患者の応答が、ＦＳＨ受容体の対立遺
伝子変異体によるものであることがわかった。ＦＳＨ受容体のどの特定の変異体
が、ある患者に存在するのかを決定するために、血液細胞から抽出したＤＮＡの
簡単な分析を行わなければならない。投与されるＦＳＨの個々の量は、患者がど
のＦＳＨ受容体をもっているかによって決定することができた。これらの発見に
よって、将来、変異体を決定するＦＳＨ受容体領域の遺伝子分析が、排卵誘発治
療のプランニングにとって重要な役割を演じることが予測できる。換言すれば、
ＦＳＨ受容体変異体がＦＳＨに対する感受性の差異を決定するということが見出
されたといえる。ある患者に存在するＦＳＨ受容体変異体に応じて調節されたＦ
ＳＨ刺激プロトコルを可能にするので、この発見は援助生殖手順の過程における
ＦＳＨ療法に大きな影響を与える。このような調節されたＦＳＨ刺激療法の潜在
的利点は、奥深いものである。このアプローチは、ＦＳＨによる危険な過剰刺激
を回避することによって臨床的安全性を改善するのみならず、ＦＳＨは非常に高
価なので治療コストを大いに低減化するのに役立つであろう。 最後に、ＦＳＨ受容体変異体は、男性および女性における生殖能力の低減化に
も関与することができ、このような変異体の分析は、ＦＳＨによる低減化された
生殖能力の治療にも大きな影響を与える。
【０００８】 したがって、本発明は、 （１）治療を受ける女性のＦＳＨ受容体変異体の決定を特徴とする女性の不妊症
の治療における濾胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）の用量を決定、すなわち予測する方
法； （２）上記（１）に記載したように、治療を受ける女性においてＦＳＨ受容体変
異体を決定することを特徴とする女性における不妊症の治療方法； （３）上記（１）および（２）に記載したように、女性においてＦＳＨ受容体変
異体の決定を行うためのキット；および （４）高用量、中用量または低用量治療のための毎日用量として適した特定量の
ＦＳＨを特徴とするＦＳＨ製剤 を提供する。
【０００９】 本発明の方法（１）について、以下にさらに詳細に記載する。まず第１に、Ｆ
ＳＨ受容体変異体の決定をインビトロで行うのが好ましい。 第２に、ＦＳＨ受容体変異体において多形サイトは遺伝子的に連結されるので
、１つの変異体サイトの配列分析で十分である。“制限断片長さ多形”（ＲＦＬ
Ｐ）法によって分析を行うのが好ましい。該方法の第１ステップは、患者の血液
サンプルからゲノムＤＮＡを単離すること、およびＰＣＲによってＦＳＨの特定
の部分を増幅することである。ＰＣＲで得られる増幅物を、ＢｓｒＩなどの６８
０位のアミノ酸配列を特異的に認識する制限酵素で切断する。増幅物の完全な切
断は、ホモ接合セリンの存在を示し、不完全な切断の場合、ヘテロ接合受容体状
態が存在し、増幅物の切断がないことは、ホモ接合アスパラギンを示す（図４）
。ＰＣＲ反応のための適当なプライマーを図６に示す。
【００１０】 変異体の決定は、“一本鎖コンホメーション多形”（ＳＳＣＰ）法および／ま
たは“対立遺伝子特異的増幅”法によって行うこともできる。ＲＦＬＰ、ＳＳＣ
Ｐおよび“対立遺伝子特異的増幅”は、当業界で一般に公知である[Oldenburg,M
.C.およびSiebert,M.の「新規な断片長さ多形法は、突然変異検出アッセイを改
善する」、Biotechniques、２０００年２月、２８（２）：３５１およびShi,M.M
.らの「薬ゲノム学における遺伝子多形検出のためのテクノロジー」、Mol.Diagn
.Dec.（１９９９）、４（４）：３４３−５１など；これらは全体を参考文献と
して本発明に援用される。]。 アミノ酸交換を起こす単一ヌクレオチドの変更の検出は、ＦＳＨ受容体変異体
の検出が容易かつ迅速になるであろう特定のキットの発達に理想的に適している
。このようなキットは、ＦＳＨ療法に先立って、患者をスクリーニングするため
に用いるのが理想的であろう。
【００１１】 ＦＳＨ療法において、ＦＳＨ受容体の決定後、ホモ接合ＦＳＨ受容体変異体Ａ
ｌａ３０７／Ｓｅｒ６８０をもつ女性には、高用量のＦＳＨ、すなわち、１４日
間の治療期間中に１日用量２２５ＩＵ（国際単位）以上、好ましくは２３０〜２
５０ＩＵのＦＳＨに相当する４２〜４８アンプルのＦＳＨを投与し；ホモ接合Ｆ
ＳＨ受容体変異体Ｔｈｒ３０７／Ａｓｎ６８０をもつ女性には、低用量のＦＳＨ
、すなわち、１４日間の治療期間中に１日用量１５０±２０ＩＵのＦＳＨに相当
する３０〜３５アンプルのＦＳＨを投与し；ヘテロ接合状態をもつ女性には、中
用量のＦＳＨ、すなわち、１４日間の治療期間中に１日用量２００±２０ＩＵの
ＦＳＨに相当する３６〜４１アンプルのＦＳＨを投与する。ＦＳＨは、皮下投与
するのが好ましい。 先に詳述したように、本発明の具体例（４）のＦＳＨ製剤は、高用量、中用量
または低用量のＦＳＨを含む。製剤は、注射可能形態であるのが好ましく、当業
界で公知の適当な添加剤（緩衝液、生理的食塩水など）を含むことができる。 以下の非制限的実施例によって本発明をさらに詳しく説明する。
【００１２】 実施例１：制限断片長さ多形の決定（Ａｓｎ６８０Ｓｅｒ、ｈＦＳＨ受容体） Ａ．ＰＣＲ：プライマーＥ１およびＧ２（ＦＳＨ受容体のエクソン１０）を用
いる増幅 各サンプルをピペットで取る： オートクレーブ処理した蒸留水３６μｌ Thermo-Buffer１０×（プロメガ）５μｌ ＭｇＣｌ２（２５ｍＭ、プロメガ）３μｌ ｄＮＴＰ溶液（１ｍＭ、ファルマシア）２．５μｌ プライマーＥ１（５'−CCTTGTGCTAATGTCCTGG；０．１μｇ／μｌ）１μｌ プライマーＧ２（５'−TGTAGAAGCACTGTCAGCTC；０．１μｇ／μｌ）１μｌ ＤＮＡ（５〜１０ｍｌから抽出し、５０μｌの蒸留水に溶解したＤＮＡ）１μｌ ＰＣＲプログラム： ９４℃ ４分 １サイクル ９４℃ １分；５８℃ ３０秒；７２℃ ５０秒 ３５サイクル ７２℃ １０分；３０℃ ３０分 １サイクル ＰＣＲ産物を２％ＴＡＥアガロースゲル上でチェックする。所望のバンドのサ
イズは５８０ｋｂｐである。 続いて、フェノール−クロロホルム清浄を２回行い、得られるＤＮＡを０．５
サンプル体積の７．５Ｍ酢酸アンモニウムおよび２．５体積の無水エタノールで
沈澱させ、７０％エタノールで洗浄し、風乾する。最後に、１７μｌの水に再溶
解する。 Ｂ．切断： 緩衝液ＮＥＢ（バイオラブス）２μｌおよびＢｓｒＩ（バイオラブス）１μｌ
をサンプルに加え、得られる混合物を鉱物油２滴で覆い、６５℃にて１．５時間
切断する。２〜２．５％のＴＡＥアガロースゲル上にて切断をチェックする。 酵素ＢｓｒＩの制限サイトは、ＴＧＡＣＣである。もし、ＦＳＨ受容体が５番
目の膜貫通ドメインの６８０位にアミノ酸セリンを含むなら、ＢｓｒＩは、ＰＣ
Ｒ産物を２つのバンド（４４３ｂｐおよび１３６ｂｐ）に切断する。もし、６８
０位のアミノ酸がアスパラギンなら、酵素はＰＣＲ産物を切断することができな
い。ゲル上のシングルバンドの大きさは５７９ｂｐである（図４参照）。 Ｃ．結果： １つのバンドサイズ５７９ｂｐ→アスパラギン、ホモ接合 ２つのバンドサイズ４４３および１３６ｂｐ→セリン、ホモ接合 ３つのバンドサイズ５７９、４４３および１３６ｂｐ→アスパラギン／セリン
、ヘテロ接合
【００１３】 実施例２：我々は、ＦＳＨ処置を開始する前に、ＦＳＨ受容体変異体について女
性をスクリーニングする予想的実験を開始した。ホモ接合ＦＳＨ受容体変異体を
６８０位にもつ女性のみを実験に参加させ、予め決定された固定用量のＦＳＨを
ランダムに与えた。３２サイクル行った予備実験の結果から、Ｓｅｒ６８０変異
体は、ＦＳＨ刺激に対して感受性が小さく（エストラジオール生成の点から見て
）、Ａｓｎ変異体をもつ女性に見られる程度の刺激を誘発するにはより多くのＦ
ＳＨが必要であることが確認された。 これらの結果は、ＦＳＨ受容体変異体の分析がＦＳＨ用量の決定に有用である
ことを裏付けるものである。 添付した図１から６は、以下の内容を描いたものである。
【配列表】
【図面の簡単な説明】
【図１】 ２つのＦＳＨ受容体変異体を示す。
【図２】 援助生殖プログラムにて正常排卵女性における排卵誘発および卵
母細胞回収を達成するのに必要とされるＦＳＨアンプル（７５ＩＵ／アンプル）
の数を示す。（データ：平均±ＳＥＭ）、＊ｐ＜０．０５対Ａ／Ａ（クルスカル
・ウォーリス・テスト）
【図３】 ＦＳＨ受容体遺伝子型にしたがって分類した正常排卵女性におけ
る基礎ＦＳＨレベル（第３日）を示す。（データ：平均±ＳＥＭ）、＊ｐ＜０．
０５対Ａ／Ａ（クルスカル・ウォーリス・テスト）
【図４】 ＦＳＨ受容体のＡｓｎ６８０Ｓｅｒの制限断片長さの多形を示す
。
【図５】 ＦＳＨ受容体遺伝子のエクソン１０のＤＮＡ配列を示す（ＥＭＢ
Ｌ受託番号Ｘ９１７４７）。
【図６】 ＦＳＨ受容体のエクソン１０を示す。適当なプライマーに下線を
引いている。この図面において、逆プライマーＡ２−Ｇ２は、それぞれ下線を引
いた配列に対して相補的である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ， ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，Ｉ Ｔ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ，ＴＲ)，ＡＵ，Ｃ Ａ，ＪＰ，ＵＳ (72)発明者 エバーハルト・ニーシュラーク ドイツ連邦共和国デー−48167ミュンスタ ー、グレメンドルファー・ヴェーク91番 (72)発明者 ヘルマン・ベーレ・エム ドイツ連邦共和国デー−48155ミュンスタ ー、ヴォルベッカー・シュトラーセ100番 (72)発明者 マリトサ・ペレス ドイツ連邦共和国デー−48129ミュンスタ ー、ドマグクシュトラーセ11番、インステ ィトゥート・フューア・レプロデュクティ オンスメディツィン・デア・ヴェストフェ リシェン・ヴィルヘルム−ウニヴェルジテ ート Ｆターム(参考） 4B024 AA01 AA11 CA04 HA11 4B063 QA19 QQ08 QQ43 QR14 QR62 QS02 QS25 QX02 4C084 AA02 BA01 BA08 BA23 CA18 DB10 NA14 ZA812

Claims (11)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項１】 治療を受ける女性の濾胞刺激ホルモン（ＦＳＨ）受容体変異
    体の決定を特徴とする女性の不妊症の治療におけるＦＳＨの用量の決定方法。
  2. 【請求項２】 ＦＳＨ受容体変異体の決定が、 （ａ）治療を受ける女性の血液サンプルからゲノムＤＮＡを単離し；次いで （ｂ）単離されたＤＮＡがＦＳＨ受容体変異体Ａｌａ３０７／Ｓｅｒ６８０ま
    たはＴｈｒ３０７／Ａｓｎ６８０のどちらをコードするかを決定する ステップを特徴とする請求項１記載の方法。
  3. 【請求項３】 ＦＳＨ受容体変異体の決定のステップ（ｂ）が、 （ｂ１）ＦＳＨ受容体タンパク質のアミノ酸３０７および／または６８０をコ
    ードするＦＳＨ受容体ＤＮＡの変異体領域に隣接する１対のプライマーの使用に
    よるＦＳＨ受容体ＤＮＡの部分増幅； （ｂ２）ＦＳＨ受容体変異体の１つのＤＮＡのみを切断する制限酵素で、増幅
    されたＤＮＡを切断すること； （ｂ３）制限断片長さ多形によってＦＳＨ受容体変異体を決定すること によって行われる請求項２記載の方法。
  4. 【請求項４】 プライマーの長さが、１２〜３０ヌクレオチド、好ましくは
    １７〜２５ヌクレオチドであり、３０７位または６８０位のアミノ酸をコードす
    るヌクレオチドまでの距離が、２０〜１５００ｂｐ、好ましくは１００〜１００
    ０ｂｐである請求項３記載の方法。
  5. 【請求項５】 プライマーが、ＦＳＨ受容体タンパク質の６８０位のアミノ
    酸のＤＮＡ配列に隣接し、制限酵素がＢｓｒＩである請求項３または４記載の方
    法。
  6. 【請求項６】 １対のプライマーが、 Ａ１：５'−ＧＣＴＡＴＡＣＴＧＧＡＴＣＴＧＡＧＡＴＧ Ｂ１：５'−ＴＴＧＡＣＡＴＧＡＣＧＴＡＣＡＣＴＧＡＧ Ｃ１：５'−ＣＴＧＡＴＣＴＣＴＧＣＡＴＴＧＧＡＡＴＣ Ｄ１：５'−ＡＧＣＴＧＧＡＣＴＧＣＡＡＧＧＴＧＣＡＧ Ｅ１：５'−ＣＣＴＴＧＴＧＣＴＣＡＡＴＧＴＣＣＴＧＧ Ｆ１：５'−ＣＣＡＴＴＴＣＴＧＣＣＴＣＣＣＴＣＡＡＧ Ｇ１：５'−ＧＡＧＣＡＡＧＴＧＴＧＧＣＴＧＣＴＡＴＧ から選ばれる上流プライマーおよび Ａ２：５'−ＡＣＣＡＣＴＴＣＡＴＴＧＣＡＴＡＡＧＴＣ Ｂ２：５'−ＣＡＡＣＴＧＡＴＧＣＡＡＴＧＡＧＣＡＧＣ Ｃ２：５'−ＡＴＣＣＡＧＣＣＣＡＴＣＡＣＣＡＴＧＡＣ Ｄ２：５'−ＧＧＴＴＣＣＧＣＡＣＴＧＴＧＡＧＧＴＡＧ Ｅ２：５'−ＧＣＴＴＴＧＧＡＣＡＣＡＧＴＧＡＴＧＡＧ Ｆ２：５'−ＴＧＧＡＴＧＧＧＴＧＴＴＧＴＧＧＡＣＡＧ Ｇ２：５'−ＴＧＴＡＧＡＡＧＣＡＣＴＧＴＣＡＧＣＴＣ から選ばれる逆プライマーからなり、好ましくは１対のプライマーが上記Ｅ１と
    Ｇ２である請求項３〜５記載の方法。
  7. 【請求項７】 請求項１〜６に記載したように治療を受ける女性においてＦ
    ＳＨ受容体変異体を決定することを特徴とする女性における不妊症の治療方法。
  8. 【請求項８】 女性に適当量のＦＳＨを投与することをさらに特徴とする請
    求項７記載の方法。
  9. 【請求項９】 請求項１〜８に記載したように女性においてＦＳＨ受容体変
    異体の決定を行うためのキット。
  10. 【請求項１０】 請求項３〜６に記載した１対のプライマー、Ｔａｑポリメ
    ラーゼおよび制限酵素を含む請求項９記載のキット。
  11. 【請求項１１】 高用量、中用量または低用量治療のための毎日用量として
    適した特定量のＦＳＨを含むＦＳＨ製剤。
JP2001545579A 1999-12-16 2000-12-18 ヒトｆｓｈ受容体の遺伝子変異体および配偶子形成におけるその影響 Pending JP2003516761A (ja)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP99125148.9 1999-12-16
EP99125148A EP1108791A1 (en) 1999-12-16 1999-12-16 Genetic variants of the human FSH receptor and the influence thereof on gametogenesis
US18567000P 2000-02-29 2000-02-29
US60/185,670 2000-02-29
PCT/EP2000/012886 WO2001044502A2 (en) 1999-12-16 2000-12-18 Genetic variants of the human fsh receptor and the influence thereof on gametogenesis

Publications (1)

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