JP2003066041A - プローブ溶解液およびプローブの固定化方法 - Google Patents
プローブ溶解液およびプローブの固定化方法Info
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Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【課題】Ｓ／Ｎ比が高く精度の良い解析を実現するため
に、核酸プローブの基板への固定に際し、均一なスポッ
トを形成し、核酸プローブの固定化を均一に行い得るプ
ローブ溶解液および核酸プローブ固定化方法を提供する
ことである。 【解決手段】プローブの固定化に使用するプローブ溶解
液に、フルクトース、トレハロース、シュークロース、
シクロデキストリン、ラクツロース、ラフィノース、ラ
クトース、キシリトール、マンニトール、イノシトー
ル、またはキシロースのいずれか１または２以上を含有
させる。
に、核酸プローブの基板への固定に際し、均一なスポッ
トを形成し、核酸プローブの固定化を均一に行い得るプ
ローブ溶解液および核酸プローブ固定化方法を提供する
ことである。 【解決手段】プローブの固定化に使用するプローブ溶解
液に、フルクトース、トレハロース、シュークロース、
シクロデキストリン、ラクツロース、ラフィノース、ラ
クトース、キシリトール、マンニトール、イノシトー
ル、またはキシロースのいずれか１または２以上を含有
させる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、プローブを基板上に固
定化する方法、プローブマイクロアレイの製造方法に関
し、その際のプローブ溶解液の液体組成物に関する。
定化する方法、プローブマイクロアレイの製造方法に関
し、その際のプローブ溶解液の液体組成物に関する。
【０００２】
【従来の技術】核酸の塩基配列の決定やサンプル中の標
的核酸の検出、各種細菌の同定を迅速かつ正確に行ない
得る技術の一つとして、例えば該標的核酸と特異的に結
合し得る物質、いわゆるプローブを固相上に多数並べた
プローブアレイの使用が提案されている。また、多数の
プローブを基板上に固定化したマイクロアレイは、遺伝
子の多型解析、遺伝子の発現解析などの目的で利用され
る。
的核酸の検出、各種細菌の同定を迅速かつ正確に行ない
得る技術の一つとして、例えば該標的核酸と特異的に結
合し得る物質、いわゆるプローブを固相上に多数並べた
プローブアレイの使用が提案されている。また、多数の
プローブを基板上に固定化したマイクロアレイは、遺伝
子の多型解析、遺伝子の発現解析などの目的で利用され
る。
【０００３】基板上へのプローブ（例えばＤＮＡプロー
ブ）を固定化あるいは結合は、プローブと結合反応を起
こしうる適当な官能基を導入した基板上へ、ピンあるい
はバブルジェット（登録商標）を用いてプローブ溶解液
をスポッティングすることによって行われる。
ブ）を固定化あるいは結合は、プローブと結合反応を起
こしうる適当な官能基を導入した基板上へ、ピンあるい
はバブルジェット（登録商標）を用いてプローブ溶解液
をスポッティングすることによって行われる。
【０００４】基板と例えばＤＮＡプローブとの結合反応
には、アミノ基を導入したガラス基板とＤＮＡとをイオ
ン結合させる方法、アルデヒド基を導入したガラス基板
とアミノ化したＤＮＡとを共有結合させる方法、また架
橋剤を用いて、基板上の官能基とＤＮＡプローブに修飾
した官能基とを結合させる方法などが知られている。該
架橋剤としては、N-(6-マレイミドカプロイロキシ)スク
シンイミドなど、マレイミド基とN-ヒドロキシスクシン
イミドをその両端に持つものが知られ、基板上のアミノ
基とチオール化したＤＮＡとを架橋することができる。
には、アミノ基を導入したガラス基板とＤＮＡとをイオ
ン結合させる方法、アルデヒド基を導入したガラス基板
とアミノ化したＤＮＡとを共有結合させる方法、また架
橋剤を用いて、基板上の官能基とＤＮＡプローブに修飾
した官能基とを結合させる方法などが知られている。該
架橋剤としては、N-(6-マレイミドカプロイロキシ)スク
シンイミドなど、マレイミド基とN-ヒドロキシスクシン
イミドをその両端に持つものが知られ、基板上のアミノ
基とチオール化したＤＮＡとを架橋することができる。
【０００５】これらいずれの結合方法においても、プロ
ーブを適当な水溶液に溶解し、基板上へスポットした微
小な液滴中で結合反応を進行させた後、水洗浄によって
余剰のプローブを除去してマイクロアレイを作製する。
該プローブ溶解液は、基板上にスポットした時に均一な
形状の液滴を呈し、水洗浄によって容易に除去され、蛍
光を発することなく、プローブと基盤上の官能基との結
合反応を阻害しないなどの性能が求められる。
ーブを適当な水溶液に溶解し、基板上へスポットした微
小な液滴中で結合反応を進行させた後、水洗浄によって
余剰のプローブを除去してマイクロアレイを作製する。
該プローブ溶解液は、基板上にスポットした時に均一な
形状の液滴を呈し、水洗浄によって容易に除去され、蛍
光を発することなく、プローブと基盤上の官能基との結
合反応を阻害しないなどの性能が求められる。
【０００６】該プローブ溶解液に使用される液体組成物
として、現在では、ＳＳＣ緩衝液やＨＥＰＥＳ緩衝液あ
るいは、これらに尿素、グリセリン、界面活性剤、エチ
レングリコールなどを添加したものを用いた例が報告さ
れている（Nature Biotech.18, 438-441, 2000、Nuclei
c Acid Res. 24(15), 3031-3039, 1996、J. Clin.Micro
biol. 39(2), 696-704, 2001）。また、プローブをイン
クジェット法で吐出させるための液体組成物についても
報告されている（特開2001-66305号公報）。
として、現在では、ＳＳＣ緩衝液やＨＥＰＥＳ緩衝液あ
るいは、これらに尿素、グリセリン、界面活性剤、エチ
レングリコールなどを添加したものを用いた例が報告さ
れている（Nature Biotech.18, 438-441, 2000、Nuclei
c Acid Res. 24(15), 3031-3039, 1996、J. Clin.Micro
biol. 39(2), 696-704, 2001）。また、プローブをイン
クジェット法で吐出させるための液体組成物についても
報告されている（特開2001-66305号公報）。
【０００７】しかしながら、これまでのプローブ溶解液
ではスポットが円形にならない、スポットのＤＮＡの固
定化量が一定しない、または固定化量が低いなどの問題
点があった。スポットの均一性は、精度の高い解析にと
って不可欠であるので、均一なスポットを形成させうる
プローブ溶解液の開発が望まれている。
ではスポットが円形にならない、スポットのＤＮＡの固
定化量が一定しない、または固定化量が低いなどの問題
点があった。スポットの均一性は、精度の高い解析にと
って不可欠であるので、均一なスポットを形成させうる
プローブ溶解液の開発が望まれている。
【０００８】
【発明が解決しようとする課題】本発明が解決しようと
する課題は、Ｓ／Ｎ比が高く精度の良い解析を実現する
ために、プローブの基板への固定に際し、均一なスポッ
トを形成し、プローブの固定化を均一に行い得るプロー
ブ溶解液およびプローブ固定化方法を提供することであ
る。
する課題は、Ｓ／Ｎ比が高く精度の良い解析を実現する
ために、プローブの基板への固定に際し、均一なスポッ
トを形成し、プローブの固定化を均一に行い得るプロー
ブ溶解液およびプローブ固定化方法を提供することであ
る。
【０００９】
【課題を解決するための手段】本発明らは鋭意検討した
結果、プローブの固定化に使用するプローブ溶解液に、
フルクトース、トレハロース、シュークロース、シクロ
デキストリン、ラクツロース、ラフィノース、ラクトー
ス、キシリトール、マンニトール、イノシトール、また
はキシロースのいずれか１または２以上を含有させるこ
とにより、上記課題が達成されることを見出し、本発明
を完成した。
結果、プローブの固定化に使用するプローブ溶解液に、
フルクトース、トレハロース、シュークロース、シクロ
デキストリン、ラクツロース、ラフィノース、ラクトー
ス、キシリトール、マンニトール、イノシトール、また
はキシロースのいずれか１または２以上を含有させるこ
とにより、上記課題が達成されることを見出し、本発明
を完成した。
【００１０】すなわち本発明は、
１．標的物質に対して特異的に結合可能なプローブを基
板上へ固定化するためのプローブ溶解液であって、フル
クトース、トレハロース、シュークロース、シクロデキ
ストリン、ラクツロース、ラフィノース、ラクトース、
キシリトール、マンニトール、イノシトール、またはキ
シロースのいずれか１または２以上を含有することを特
徴とする液体組成物、 ２．前項１に記載の液体組成物を使用することを特徴と
するプローブの基板上への固定化方法、 ３．前項２に記載の方法で、プローブが基板上に固定化
されたマイクロアレイ、 ４．前項３に記載のマイクロアレイの製造方法、からな
る。
板上へ固定化するためのプローブ溶解液であって、フル
クトース、トレハロース、シュークロース、シクロデキ
ストリン、ラクツロース、ラフィノース、ラクトース、
キシリトール、マンニトール、イノシトール、またはキ
シロースのいずれか１または２以上を含有することを特
徴とする液体組成物、 ２．前項１に記載の液体組成物を使用することを特徴と
するプローブの基板上への固定化方法、 ３．前項２に記載の方法で、プローブが基板上に固定化
されたマイクロアレイ、 ４．前項３に記載のマイクロアレイの製造方法、からな
る。
【００１１】
【発明の実施の形態】（プローブ溶解液）本発明におけ
るプローブ溶解液とは、プローブアレイの作製の際に使
用されるプローブを含む液体組成物をいう。本液体組成
物は、フルクトース、トレハロース、シュークロース、
シクロデキストリン、ラクツロース、ラフィノース、ラ
クトース、キシリトール、マンニトール、イノシトー
ル、またはキシロースのいずれか１または２以上を含有
することを特徴とする。上記物質は、各々０．１〜３０
％、好ましくは１〜２０％、より好ましくは５〜１０％
の濃度で添加される。
るプローブ溶解液とは、プローブアレイの作製の際に使
用されるプローブを含む液体組成物をいう。本液体組成
物は、フルクトース、トレハロース、シュークロース、
シクロデキストリン、ラクツロース、ラフィノース、ラ
クトース、キシリトール、マンニトール、イノシトー
ル、またはキシロースのいずれか１または２以上を含有
することを特徴とする。上記物質は、各々０．１〜３０
％、好ましくは１〜２０％、より好ましくは５〜１０％
の濃度で添加される。
【００１２】プローブ分子として、ＲＮＡ、ＤＮＡ、ｃ
ＤＮＡ、オリゴヌクレオチド等の核酸または転写因子、
制限酵素を含むＤＮＡ結合タンパク等のＤＮＡの対応す
る配列に特異的に結合しうる分子を用いることができ
る。プローブ溶解液に含有されるプローブは、例えば
０．１〜１００pmol/μL、好ましくは０．５〜２０pmol
/μLの濃度となるように添加される。
ＤＮＡ、オリゴヌクレオチド等の核酸または転写因子、
制限酵素を含むＤＮＡ結合タンパク等のＤＮＡの対応す
る配列に特異的に結合しうる分子を用いることができ
る。プローブ溶解液に含有されるプローブは、例えば
０．１〜１００pmol/μL、好ましくは０．５〜２０pmol
/μLの濃度となるように添加される。
【００１３】本発明のプローブ溶解液の組成は、上記の
他は特に限定されるものでなく、例えば公知のプローブ
溶解液、具体的にはＳＳＣ緩衝液やＨＥＰＥＳ緩衝液、
あるいは、これらに尿素、グリセリン、界面活性剤、エ
チレングリコールなどを添加したものや特開2001-66305
号公報に記載の組成物等を含むものであっても良い。
他は特に限定されるものでなく、例えば公知のプローブ
溶解液、具体的にはＳＳＣ緩衝液やＨＥＰＥＳ緩衝液、
あるいは、これらに尿素、グリセリン、界面活性剤、エ
チレングリコールなどを添加したものや特開2001-66305
号公報に記載の組成物等を含むものであっても良い。
【００１４】（プローブの基板への固定化方法）プロー
ブの基板への固定化方法は、特に限定されるものではな
く、公知の方法、あるいは今後開発される方法に従うこ
とができる。例えば、プローブと結合反応を起こしうる
適当な官能基を導入した基板上へ、ピンあるいはバブル
ジェットを用いてプローブ溶解液をスポッティングする
ことにより行われる。バブルジェットによるスポッティ
ングは、例えば特開平11-187900号公報に記載の方法に
よって行うことができる。また、ピンによるスポッティ
ングは、例えば、アフィメトリックス社、日本レーザー
電子社等のＤＮＡマイクロアレイ作製装置によって行う
ことができる。
ブの基板への固定化方法は、特に限定されるものではな
く、公知の方法、あるいは今後開発される方法に従うこ
とができる。例えば、プローブと結合反応を起こしうる
適当な官能基を導入した基板上へ、ピンあるいはバブル
ジェットを用いてプローブ溶解液をスポッティングする
ことにより行われる。バブルジェットによるスポッティ
ングは、例えば特開平11-187900号公報に記載の方法に
よって行うことができる。また、ピンによるスポッティ
ングは、例えば、アフィメトリックス社、日本レーザー
電子社等のＤＮＡマイクロアレイ作製装置によって行う
ことができる。
【００１５】本発明に使用される基板は、プローブマイ
クロアレイ等の作製に通常使用される基板であれば良
く、特に限定されるものではない。
クロアレイ等の作製に通常使用される基板であれば良
く、特に限定されるものではない。
【００１６】
【実施例】以下に、実施例により具体的に説明するが、
これらは単なる例示であって本発明を限定するものでは
ない。
これらは単なる例示であって本発明を限定するものでは
ない。
【００１７】
【実施例１】（プローブ溶解液の調製）１％〜２０％の
グルコース、フルクトース、トレハロース、シュークロ
ース、マルトース、ソルビトール、グリセロールをそれ
ぞれ含む50mM Tris-HCl緩衝液（pH7.0）に、５’端をCy
5ラベル、３’端をチオール修飾した２pmol/μLの合成
ＤＮＡプローブ（Cy5-TGGCAGCTTAAGTTTGAA-SH）を溶解
し、プローブ溶解液を調製した。対照として、50mM Tri
s-HCl緩衝液（pH7.0）に上記ＤＮＡプローブを溶解した
ものを調製した。
グルコース、フルクトース、トレハロース、シュークロ
ース、マルトース、ソルビトール、グリセロールをそれ
ぞれ含む50mM Tris-HCl緩衝液（pH7.0）に、５’端をCy
5ラベル、３’端をチオール修飾した２pmol/μLの合成
ＤＮＡプローブ（Cy5-TGGCAGCTTAAGTTTGAA-SH）を溶解
し、プローブ溶解液を調製した。対照として、50mM Tri
s-HCl緩衝液（pH7.0）に上記ＤＮＡプローブを溶解した
ものを調製した。
【００１８】（スポッティング）N-(6-マレイミドカプ
ロイロキシ)スクシンイミド処理によって表面にマレイ
ミド基を導入したガラス基板に、上記の各プローブ溶解
液をスリットピン方式のＤＮＡマイクロアレイ作製装置
を用いてスポッティングした。なお、対照として、50mM
Tris-HCl緩衝液（pH7.0）に溶解したＤＮＡプローブも
同様にスポッティングした。
ロイロキシ)スクシンイミド処理によって表面にマレイ
ミド基を導入したガラス基板に、上記の各プローブ溶解
液をスリットピン方式のＤＮＡマイクロアレイ作製装置
を用いてスポッティングした。なお、対照として、50mM
Tris-HCl緩衝液（pH7.0）に溶解したＤＮＡプローブも
同様にスポッティングした。
【００１９】（結果）スポット後、室温、湿度50％、遮
光の条件下で１６時間保持し、ＤＮＡプローブとガラス
基板との結合反応を進行させた。１６時間経過後、２％
ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）中で軽く振とうさせるこ
とにより未反応のマレイミド基をブロッキングした後、
蛍光スキャナーで読み取り、形状を確認した。
光の条件下で１６時間保持し、ＤＮＡプローブとガラス
基板との結合反応を進行させた。１６時間経過後、２％
ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）中で軽く振とうさせるこ
とにより未反応のマレイミド基をブロッキングした後、
蛍光スキャナーで読み取り、形状を確認した。
【００２０】各溶解液を用いたときのスポットの形状を
図１にした。その結果、グルコース、フルクトース、ト
レハロース、シュークロース、マルトース、ソルビトー
ル、グリセロールを含む溶解液を用いてスポッティング
したとき、そのスポット形状は円形を呈し、かつスポッ
トの蛍光強度も対照と比べて高く、結合したＤＮＡ量が
多いことが示された。
図１にした。その結果、グルコース、フルクトース、ト
レハロース、シュークロース、マルトース、ソルビトー
ル、グリセロールを含む溶解液を用いてスポッティング
したとき、そのスポット形状は円形を呈し、かつスポッ
トの蛍光強度も対照と比べて高く、結合したＤＮＡ量が
多いことが示された。
【００２１】
【実施例２】（プローブ溶解液の調製）以下に示す各添
加物をそれぞれ５％含む50mM Tris-HCl緩衝液（pH7.0）
に、実施例１に記載のＤＮＡプローブを溶解し、プロー
ブ溶解液を調製した。対照として50mM Tris-HCl緩衝液
（pH7.0）に上記ＤＮＡプローブを溶解したものを調製
した。
加物をそれぞれ５％含む50mM Tris-HCl緩衝液（pH7.0）
に、実施例１に記載のＤＮＡプローブを溶解し、プロー
ブ溶解液を調製した。対照として50mM Tris-HCl緩衝液
（pH7.0）に上記ＤＮＡプローブを溶解したものを調製
した。
【００２２】（添加物）
ウレア
ＰＥＧ６０００
ＰＥＧ２００００
グリセロール
界面活性剤（ＴｒｉｔｏｎＸ−１００）
界面活性剤（Ｔｗｅｅｎ２０）
グルコース
フルクトース
マンノース
ガラクトース
キシロース
イノシトール
ソルビトール
マンニトール
キシリトール
マルトース
セロビオース
シュークロース
ラクトース
トレハロース
ラフィノース
ラクツロース
シクロデキストリン
ゼラチン
【００２３】（スポッティング）実施例１に記載の方法
で、スポッティングした。
で、スポッティングした。
【００２４】（結果）スポット後、室温、湿度50％、遮
光の条件下で１６時間保持し、ＤＮＡプローブとガラス
基板との結合反応を進行させた。１６時間経過後、２％
ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）中で軽く振とうさせるこ
とにより未反応のマレイミド基をブロッキングした後、
スポットの蛍光強度を蛍光スキャナーで読み取った。ま
た、Ｓ／Ｎ比はスポット内の蛍光強度の平均値をスポッ
ト周囲のバックグラウンドの蛍光強度の平均値で除する
ことにより計算した。
光の条件下で１６時間保持し、ＤＮＡプローブとガラス
基板との結合反応を進行させた。１６時間経過後、２％
ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）中で軽く振とうさせるこ
とにより未反応のマレイミド基をブロッキングした後、
スポットの蛍光強度を蛍光スキャナーで読み取った。ま
た、Ｓ／Ｎ比はスポット内の蛍光強度の平均値をスポッ
ト周囲のバックグラウンドの蛍光強度の平均値で除する
ことにより計算した。
【００２５】各溶解液を用いたときのスポットの蛍光強
度を図２に、スポットのＳ／Ｎ比を図３に示した。その
結果、蛍光強度が対照と比べて高く、結合したＤＮＡ量
が多かったのは、ウレア、ＰＥＧ６０００、ＰＥＧ２０
０００、グリセロール、グルコース、フルクトース、マ
ンノース、ガラクトース、キシロース、イノシトール、
ソルビトール、マンニトール、キシリトール、マルトー
ス、セロビオース、シュークロース、ラクトース、トレ
ハロース、ラフィノース、ラクツロースまたはシクロデ
キストリンを含む溶解液を用いてスポッティングしたと
きであった。また、Ｓ／Ｎ比がグリセロールより高い値
を示したのは、フルクトース、トレハロース、シューク
ロース、シクロデキストリン、ラクツロース、ラフィノ
ース、ラクトース、キシリトール、マンニトール、イノ
シトール、またはキシロースを含む溶解液を用いてスポ
ッティングしたときであった。
度を図２に、スポットのＳ／Ｎ比を図３に示した。その
結果、蛍光強度が対照と比べて高く、結合したＤＮＡ量
が多かったのは、ウレア、ＰＥＧ６０００、ＰＥＧ２０
０００、グリセロール、グルコース、フルクトース、マ
ンノース、ガラクトース、キシロース、イノシトール、
ソルビトール、マンニトール、キシリトール、マルトー
ス、セロビオース、シュークロース、ラクトース、トレ
ハロース、ラフィノース、ラクツロースまたはシクロデ
キストリンを含む溶解液を用いてスポッティングしたと
きであった。また、Ｓ／Ｎ比がグリセロールより高い値
を示したのは、フルクトース、トレハロース、シューク
ロース、シクロデキストリン、ラクツロース、ラフィノ
ース、ラクトース、キシリトール、マンニトール、イノ
シトール、またはキシロースを含む溶解液を用いてスポ
ッティングしたときであった。
【００２６】
【発明の効果】以上説明したように、本発明のプローブ
溶解液を用いてスポッティングを行うことで、均一でプ
ローブ固定化効率の高いプローブマイクロアレイを作製
することができ、核酸の塩基配列の決定やサンプル中の
標的核酸の検出等について、Ｓ／Ｎ比が高く精度の良い
解析が達成される。
溶解液を用いてスポッティングを行うことで、均一でプ
ローブ固定化効率の高いプローブマイクロアレイを作製
することができ、核酸の塩基配列の決定やサンプル中の
標的核酸の検出等について、Ｓ／Ｎ比が高く精度の良い
解析が達成される。
【図１】各種添加物を添加したプローブ溶解液を用いて
スポットしたときのスポットの形状を示す図である。
（実施例１）
スポットしたときのスポットの形状を示す図である。
（実施例１）
【図２】各種添加物を添加したプローブ溶解液を用いて
スポットしたときの蛍光強度を示す図である。（実施例
２）
スポットしたときの蛍光強度を示す図である。（実施例
２）
【図３】各種添加物を添加したプローブ溶解液を用いて
スポットしたときのＳ／Ｎ比を示す図である。（実施例
２）
スポットしたときのＳ／Ｎ比を示す図である。（実施例
２）
（図１について）
１ 無添加（50mM Tris-HCl緩衝液（pH7.0））
２ グルコース添加（右から1%, 5%, 10%, 20%）
３ フルクトース添加（右から1%, 5%, 10%, 20%）
４ トレハロース添加（右から1%, 5%, 10%, 20%）
５ シュークロース添加（右から1%, 5%, 10%, 20%）
６ グリセロール添加（右から1%, 5%, 10%, 20%）
７ マルトース添加（右から1%, 5%, 10%, 20%）
８ ソルビトール添加（右から1%, 5%, 10%, 20%）
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
(72)発明者 萩原 靖子
兵庫県神戸市西区室谷１丁目１−２ 国際
試薬株式会社研究開発センター内
Ｆターム(参考） 4B024 AA11 BA80 CA09 HA12
4B029 AA07 BB20 CC03 CC08 FA12
4B063 QA01 QA18 QQ42 QQ52 QR08
QR42 QR55 QR62 QR82 QS25
QS34 QS36 QX02
Claims (4)
- 【請求項１】 標的物質に対して特異的に結合可能なプ
ローブを基板上へ固定化するためのプローブ溶解液であ
って、フルクトース、トレハロース、シュークロース、
シクロデキストリン、ラクツロース、ラフィノース、ラ
クトース、キシリトール、マンニトール、イノシトー
ル、またはキシロースのいずれか１または２以上を含有
することを特徴とする液体組成物。 - 【請求項２】 請求項１に記載の液体組成物を使用する
ことを特徴とするプローブの基板上への固定化方法。 - 【請求項３】 請求項２に記載の方法で、プローブが基
板上に固定化されたマイクロアレイ。 - 【請求項４】 請求項３に記載のマイクロアレイの製造
方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001245971A JP2003066041A (ja) | 2001-08-14 | 2001-08-14 | プローブ溶解液およびプローブの固定化方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001245971A JP2003066041A (ja) | 2001-08-14 | 2001-08-14 | プローブ溶解液およびプローブの固定化方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2003066041A true JP2003066041A (ja) | 2003-03-05 |
Family
ID=19075619
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2001245971A Withdrawn JP2003066041A (ja) | 2001-08-14 | 2001-08-14 | プローブ溶解液およびプローブの固定化方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP2003066041A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006018899A1 (ja) * | 2004-08-17 | 2006-02-23 | Bml, Inc. | 検出用器具を用いた検出方法 |
-
2001
- 2001-08-14 JP JP2001245971A patent/JP2003066041A/ja not_active Withdrawn
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006018899A1 (ja) * | 2004-08-17 | 2006-02-23 | Bml, Inc. | 検出用器具を用いた検出方法 |
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