JP2003063974A

JP2003063974A - 抗酸化剤、一酸化窒素産生抑制剤、抗潰瘍剤およびその薬剤成分を含有する加工食品

Info

Publication number: JP2003063974A
Application number: JP2001255981A
Authority: JP
Inventors: Masayuki Yoshikawa; 雅之吉川; Sadao Kageura; 禎士蔭浦; Konpiriyadecha Yuttana; コンピリヤデチャユッタナ
Original assignee: NIPPON BIO KK
Current assignee: NIPPON BIO KK
Priority date: 2001-08-27
Filing date: 2001-08-27
Publication date: 2003-03-05

Abstract

(57)【要約】【課題】天然植物由来のものであって、抗酸化作用と
一酸化窒素産生抑制作用を有し、抗潰瘍剤として幅広い
薬効を有する薬剤を提供する。【解決手段】サラシア・キネンシス、サラシア・オブ
ロンガおよびサラシア・レティキュラータからなる群よ
り選ばれた一種以上の植物体又はこれからの抽出物を有
効成分とする抗酸化剤、一酸化窒素産生抑制剤又は抗潰
瘍剤。また、その薬剤成分を含有する加工食品。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は、天然の植物由来の
組成物を有効成分とする抗酸化剤、一酸化窒素産生抑制
剤および抗潰瘍剤とその薬剤成分を含有する加工食品に
関する。

【０００２】

【従来の技術】近年、胃等の消化器の粘膜疾患に、活性
酸素や過酸化脂質が密接な関係を有することが見出さ
れ、抗酸化剤の経口摂取が消化器の潰瘍性疾患の治療又
は予防に有効なことが明らかになってきた。

【０００３】従来から、食品の酸化の抑制や生体内のフ
リーラジカルの消去を目的とする抗酸化剤として、化学
合成物や天然物由来の組成物が多数提案されているが、
合成組成物は副作用が懸念されるため、抗酸化効果が緩
やかであっても、長期間経口摂取しても副作用のない天
然物由来のものが強く望まれている。

【０００４】そのため、主として天然物由来の組成物で
あって、抗酸化作用と抗潰瘍剤としての効果を併せ持つ
ものが種々提案されている。例えば、「カカオ豆原料か
ら抽出した抗酸化物質を含有する胃潰瘍予防飲食品」
（特開平７−２７４８９４号公報）、「納豆菌、乳酸菌
等からなる抗酸化性組成物及び抗潰瘍剤」（特開平９−
１５４５３５号公報）、「主として微生物の培養物から
採取された、新規イソフラボン誘導体またはその塩を有
効成分とする医薬及び抗酸化剤」（特開平１０−５９９
５６号公報）や「主として甜菜種子から抽出される、Ｎ
−トランス−フェルロイルホモバニリルアミン等を有効
成分とする植物性抗酸化剤及び胃潰瘍等治療薬」（特開
２０００−１２９２５７号公報）などがあげられる。

【０００５】一方、生体内において、一酸化窒素（以
下、ＮＯと略記することがある）が循環器系、神経系、
免疫系等の生理活性物質として多様な作用を有すること
が知られるようになり、ＮＯが種々の炎症に密接なかか
わりを持つことが明らかになってきた。

【０００６】生体内において、ＮＯは一酸化窒素合成酵
素（ＮＯＳ）により、Ｌ−アルギニンを酸化して産生さ
れる。ＮＯＳには非誘導型と誘導型のアイソザイムが存
在し、誘導型のＮＯＳ（ｉＮＯＳ）はマクロファージ、
内皮細胞、平滑筋細胞等に多く存在するが、ｉＮＯＳの
活性を阻害して、ＮＯの産生を抑制することにより、種
々の炎症において治療効果が得られることが明らかにな
ってきている。

【０００７】そのため、近年合成物や天然物由来の一酸
化窒素産生抑制剤が多数提案されているが、天然物由来
ものとしては、例えば「ヒュウガトウキ含有成分である
ポリアセチレン系化合物を含む、抗炎症剤等の医薬組成
物」（特開平１１−３１０５２７号公報）や「学名 And
rographis paniculataの全草からなる群より選ばれた少
なくとも一種の植物体又はその抽出物を有効成分として
含有する一酸化窒素産生抑制剤」（特開２０００−３４
２３３号公報）などがあげられる。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】そこで本発明は、長期
間服用しても副作用のない天然の植物由来のものであっ
て、抗酸化作用と一酸化窒素産生抑制作用を有し、抗潰
瘍剤として幅広い薬効を有する薬剤を提供することを目
的とする。

【０００９】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、上記課題
を解決すべく鋭意研究を重ねた結果、ニシキギ科又はデ
チンムル科に属するサラシア属の植物、とくにサラシア
・キネンシス(Salaciachinensis)、サラシア・オブロン
ガ（Salacia oblonga）、サラシア・レティキュラ−タ
(Salacia reticulata)に、抗酸化作用、ＮＯ産生抑制作
用及び抗潰瘍作用において、優れた薬効を示す成分が含
まれることを知見した。これらの植物は、インド又はタ
イの伝承医学において古来から生薬として用いられてき
たもので、長期間服用しても副作用がないことが保証さ
れている。

【００１０】この知見に基づく本発明は、サラシア・キ
ネンシス、サラシア・オブロンガおよびサラシア・レテ
ィキュラータからなる群より選ばれた一種以上の植物体
又はこれからの抽出物を有効成分とする抗酸化剤であ
る。

【００１１】また、サラシア・キネンシス、サラシア・
オブロンガおよびサラシア・レティキュラータからなる
群より選ばれた一種以上の植物体又はこれからの抽出物
を有効成分とする一酸化窒素産生抑制剤である。

【００１２】また、サラシア・キネンシス、サラシア・
オブロンガおよびサラシア・レティキュラータからなる
群より選ばれた一種以上の植物体又はこれからの抽出物
を有効成分とする抗潰瘍剤である。

【００１３】さらに、サラシア・キネンシス、サラシア
・オブロンガおよびサラシア・レティキュラータからな
る群より選ばれた一種以上の植物体粉末又はこれからの
抽出物を含有する加工食品である。

【００１４】なお、上記の「抽出物」は、上記の植物群
のうちの１種から抽出されたものであっても、これらの
抽出物の２種以上の混合物であってもよく、あるいは上
記植物群のうちの２種以上から同時に抽出されたもので
あってもよい。

【００１５】

【発明の実施の形態】サラシア・キネンシス（以下、Ｓ
Ｃと略記する）は、東南アジア（タイ・マレーシア・中
国南部等）、インド、スリランカなどに自生する蔓性の
潅木（高さ５ｍ以下）で、葉は長さ４〜８ｃｍ程度の楕
円形、黄色又は緑黄色の花を咲かせ、熟すと赤くなる１
〜２ｃｍの小球状の実を付ける植物である。

【００１６】サラシア・オブロンガ（以下、ＳＯと略記
する）及びサラシア・レティキュラータ（以下、ＳＲと
略記する）は、インド、スリランカなどに多く自生し、
ＳＣと類似した植物であるが、樹高がＳＣよりも低く、
実は３〜５ｃｍとＳＣよりも大きい点が相違する。Ｓ
Ｃ，ＳＯ，ＳＲのいずれも、タイ、インド等の伝承医学
において、種々の薬効を有する生薬として、古来から広
く用いられてきたものである。

【００１７】本発明において、上記のいずれの植物にお
いても、地上部（樹皮、木質部、葉部など）や地下部
（根皮、根茎）のいずれをも用いることができるが、薬
効成分を多く含むという点から、樹皮又は木質部を用い
ることが好ましい（以下、とくに言及しない限り、発明
の実施の形態に関する記述は、ＳＣ，ＳＯ，ＳＲのいず
れにも共通するものである）。また、植物体自体若しく
はこれを乾燥、粉砕したものを用いてもよく、これから
水又は有機溶媒で抽出した抽出物を用いてもよい。

【００１８】有機溶媒としては、例えばエタノール、メ
タノール、プロパノール、ブタノール等の低級アルコー
ルや、酢酸エチル等のエステル類が挙げられるが、これ
らに限定されるものではない。なお、経済性と安全性の
点からは、水及び／又はエタノールで抽出することが好
ましい。

【００１９】水で抽出する場合は、植物体の乾燥物又は
その粉砕物をその容積の２〜５倍程度の熱水（６０〜９
０℃）中に１〜５時間程度浸漬して抽出すれば良い。常
温の水中に長時間（１〜５日間）浸漬して抽出してもよ
い。抽出液又はその濃縮エキスをそのまま服用してもよ
いが、通常はこれの乾燥粉末を使用する。

【００２０】エタノールで抽出する場合は、植物体又は
その粉砕物を２〜５倍程度の量の常温又は低温加熱（３
０〜８０℃）されたエタノール中に１〜５時間程度浸漬
して抽出すればよい。抽出液は比較的低温（５０℃以
下）で、必要に応じて減圧下でエタノールを揮散させれ
ば、乾燥粉末を得ることができる。抽出物の収率（抽出
物乾量／植物体乾量×１００）は、水抽出の場合１５〜
２５％程度、エタノール抽出の場合２５〜３５％程度で
ある。

【００２１】本発明の薬剤は、抗酸化剤、一酸化窒素産
生抑制剤又は抗潰瘍剤として用いるいずれの場合におい
ても、植物体の粉砕物又は抽出物の乾燥粉末をそのまま
服用してもよいが、これに賦形剤（乳糖、でん粉、デキ
ストリン、ゼラチン、セルロース類など）を添加して、
錠剤、顆粒、カプセル剤等の固形剤として服用してもよ
い。また、植物体の粉砕物、抽出物の乾燥粉末や濃縮エ
キスを茶剤として服用してもよい。

【００２２】経口投与量は、１回の服用につき抽出物乾
量で１〜５００ｍｇ／体重ｋｇ程度とし、植物体粉砕物
の場合は、この５倍量程度にすればよい。服用回数はと
くに限定を要しないが、１日１〜５回程度とすればよ
い。なお、消化器系の潰瘍の予防又は治療という観点か
らは、１日３回程度食後に服用することが好ましい。

【００２３】さらに、本発明においては、上記の植物体
の粉砕物又は抽出物を各種の加工食品に含有させて経口
摂取してもよい。この目的に使用する加工食品の例とし
て、炭水化物を主成分とする加工食品（パン類、めん類
など）、加工魚肉製品、加工乳製品、各種の菓子製品な
どがあげられる。

【００２４】上記のような食品の加工過程、とくに原料
配合工程において、上記の植物体の粉砕物又は抽出物を
適量添加し、混合撹拌して原料を調整することにより、
通常の製造工程と同一に、本発明の薬剤を含有する加工
食品を得ることができる。その添加量は、前記の経口投
与量を目安として、食品の風味を悪化させない範囲内で
その一部を置換するように適宜選択すればよい。

【００２５】なお、生体におけるＮＯの作用は多様であ
り、例えば血管弛緩作用、血小板凝集抑制作用、白血球
粘着・遊走抑制作用、交感神経活動抑制作用、神経細胞
間の情報伝達物質としての作用等の種々の生理作用を有
しているが、生体内でＮＯが過剰に産生されると障害性
物質として働く。そのため、本発明の一酸化窒素産生抑
制剤は、抗炎症剤としてのみならず、例えば敗血性ショ
ック、低血圧症、虚血性疾患、アレルギー性疾患、自己
免疫疾患、慢性関節リューマチ、インスリン依存性糖尿
病等の予防又は治療に、幅広い薬効が期待される。

【００２６】

【実施例】実施例の被験物質として、下記の方法で調製
したＳＣ，ＳＯおよびＳＲの抽出エキスを用い、抗酸化
活性としてのＤＰＰＨ（1,1-diphenyl-2-picryl hydraz
yl）ラジカル及びスーパーオキシドの消去作用、マクロ
ファージ由来の一酸化窒素産生抑制活性、および抗潰瘍
剤としての効果を下記の評価方法で調査した。

【００２７】被験物質の調製方法乾燥したＳＣ、ＳＯ及びＳＲの地上部を１００メッシュ
以下に粉砕し、それぞれについて粉砕物１００ｇを約１
リットルの７０％エタノール中に浸漬して抽出物を得
た。エタノールの温度を７０〜８０℃に保持して、３時
間抽出した後、この抽出液を濾過し、瀘液を３０℃で減
圧下でエタノールを揮散させて、抽出物粉末を得た。抽
出率は１５〜２５％（抽出物粉末重量／粉砕物重量×１
００）であった。この抽出物粉末をさらにジメチルスル
ホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解して、所定濃度の抽出エキ
スを調製し、これを被験物質とした。

【００２８】評価方法ＤＰＰＨラジカル消去作用：所定濃度の被験物質と４
０μＭのＤＰＰＨラジカルを含む６０％エタノール／４
０ｍＭ酢酸緩衝液（ｐＨ５．５）を調製し、これを室温
にて３０分間放置して、被験物質によるＤＰＰＨラジカ
ルの消去反応を進行させた後、５１７ｎｍにおける吸光
度を測定（Beckman社製、ＤＵ５３０）して、残存する
ＤＰＰＨラジカル量を求めた。被験物質の濃度を数段階
に変えて上記の測定を行ない、消去量が５０％となる５
０％捕捉濃度ＳＣ₅₀（抽出物粉末μｇ／緩衝液ｍｌ）を
求めた。

【００２９】スーパーオキシド消去作用：所定濃度の
被験物質、１００μＭのキサンチン、１００μＭのＥＤ
ＴＡ、０．００５％の牛血清アルブミン、２５μＭのＮ
ＢＴ（ニトロブルーテトラゾリューム）及び０．０１５
３Ｕ／ｍｌのキサンチンオキシダーゼを含む４０ｍＭの
炭酸ナトリウム緩衝液（ｐＨ１０．２）を調製し、これ
を２５℃で２０分間保温して、スーパーオキシドの生成
と被験物質によるその消去の反応を進行させた後、発色
させるため６ｍＭの塩化銅試薬を添加し、５６０ｎｍに
おける吸光度を測定（Beckman社製、ＤＵ５３０）し
て、残存するスーパーオキシドの量を求めた。被験物質
の濃度を数段階に変えて上記の測定を行ない、消去量が
５０％となる５０％捕捉濃度ＳＣ₅₀（抽出物粉末μｇ／
緩衝液ｍｌ）を求めた。

【００３０】マクロファージ由来の一酸化窒素産生抑
制活性ｄｄＹ系雄性マウス（体重３０ｇ前後）を頸椎脱臼し、
腹腔内に５〜６ｍｌのリン酸緩衝生理食塩液（１３７ｍ
ＭＮａＣｌ、２．７ｍＭＫＣｌ、１．５ｍＭＫＨ₂Ｐ
Ｏ₄、８．１ｍＭＮａ₂ＨＰＯ₄、ｐＨ７．４）を入れ、
洗浄液を回収してマクロファージを得た。これをＲＰＭ
Ｉ１６４０培地（５％ウシ胎児血清、１００Ｕ／ｍｌペ
ニシリン、１００μｇ／ｍｌストレプトマイシン含有）
で細胞を懸濁させ、９６穴マイクロプレート（５×１０
⁵cells/well/200μl）に播種した。

【００３１】１時間培養した後に、所定濃度の被験物質
と、マクロファージを刺激してＮＯを産生させるリポポ
リサッカライド（ＬＰＳ）１０μｇ／ｍｌを含有するＲ
ＰＭＩ１６４０培地に移し変え、２０時間培養した。そ
の後、培地中に蓄積したＮＯ ^2-量をグリース試薬（５８
ｍＭスルファニルアミド、３．９ｍＭＮ−１ナフチルエ
チレンジアミン、２５５ｍＭリン酸）で発色させて吸光
度を測定し（Biorad社Model 550 microplate reader、
測定波長：５７０ｎｍ、参照波長：６５５ｎｍ）、一酸
化窒素（ＮＯ）産生量を求めた。また、基準値として、
被験物質を含有せず、ＬＰＳを含有する場合と含有しな
い場合について、上記と同じ方法でＮＯ産生量を求め
た。

【００３２】エタノール誘発胃粘膜の損傷抑制作用ＳＤ系ラット（体重２５０ｇ前後）を２４時間絶食させ
た後、５％アラビアゴム溶液に懸濁した被験物質０〜２
００ｍｇ／ｋｇを経口投与し、１時間後に９９．５％エ
タノールをラット１匹当たり１．５ｍｌ経口投与した。
投与の１時間後に胃を抽出し、１．５％ホルマリンで固
定し、損傷部位の長さ（Lesion index，mm）を求め、抑
制率を算出した。

【００３３】なお、上記〜の評価方法において、ラ
ット及びマウスは紀和実験動物研究所より入手し、ＬＰ
Ｓ及びＲＰＭＩ１６４０培地は Sigma 社より、その他
の試薬は試薬特級を用い和光純薬(株)より購入した。ま
た、〜についてはＳＣ、ＳＯ及びＳＲを被験物質と
して上記の評価を行なったが、はＳＣのみについて評
価した。

【００３４】表１に、ＳＣ、ＳＯ及びＳＲについての、
ＤＰＰＨラジカル又はスーパーオキシドを５０％消去す
る被験物質濃度ＳＣ₅₀を示す。この結果から、本発明の
抗酸化剤は、緑茶やポリフェノールと同等以上の抗酸化
作用を有するものと考えられる。

【００３５】

【表１】

【００３６】表２に、ＳＣ、ＳＯ及びＳＲについての、
マクロファージ由来の一酸化窒素産生抑制活性の評価結
果を示す。同表中には、被験物質濃度が、それぞれ３，
１０，３０，１００，３００（抽出物粉末μｇ／緩衝液
ｍｌ）である場合のＮＯ産生抑制率の平均値と分散、こ
れらのデータから求めた５０％ＮＯ産生抑制濃度（μｇ
／ｍｌ）及び基準値である被験物質無添加の場合のＮＯ
産生量（ＬＰＳ添加及び無添加の場合）を示している。

【００３７】この結果から、本発明の一酸化窒素産生抑
制剤は、従来の天然植物由来のものと同等若しくはそれ
以上のＮＯ産生抑制効果を有するものと考えられる。な
お、表中▼印は、細胞損傷が認められる場合を示し、Ｓ
Ｏ及びＳＲでは、被験物質濃度が過大になると細胞障害
性が懸念されるので、投与量について考慮が必要であ
る。

【００３８】表３に、ＳＣについての胃粘膜の損傷抑制
作用の評価結果を示す。経口投与量５０〜１００（抽出
物粉末ｍｇ／体重ｋｇ）で、６０％程度の抑制効果があ
ることが明らかになった。

【００３９】

【表２】

【００４０】

【表３】

【００４１】

【発明の効果】本発明により、天然植物由来の組成物で
あるため長期間服用しても副作用の懸念がなく、抗酸化
作用と一酸化窒素産性抑制作用に優れ、抗潰瘍剤として
幅広い薬効を有する薬剤を提供することが可能になっ
た。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者蔭浦禎士東京都渋谷区神南１丁目５番13号ローズベイ神南３階日本バイオ株式会社内 (72)発明者ユッタナコンピリヤデチャ京都府京都市山科区御陵四丁野町１京都薬科大学内Ｆターム(参考） 4B018 MD61 ME06 ME08 ME14 MF01 4C088 AB12 AC01 BA07 BA08 NA14 ZA66 ZA68 ZB01 ZC41

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】サラシア・キネンシス、サラシア・オブ
ロンガおよびサラシア・レティキュラータからなる群よ
り選ばれた一種以上の植物体又はこれからの抽出物を有
効成分とする抗酸化剤。
【請求項２】サラシア・キネンシス、サラシア・オブ
ロンガおよびサラシア・レティキュラータからなる群よ
り選ばれた一種以上の植物体又はこれからの抽出物を有
効成分とする一酸化窒素産生抑制剤。
【請求項３】サラシア・キネンシス、サラシア・オブ
ロンガおよびサラシア・レティキュラータからなる群よ
り選ばれた一種以上の植物体又はこれからの抽出物を有
効成分とする抗潰瘍剤。
【請求項４】サラシア・キネンシス、サラシア・オブ
ロンガおよびサラシア・レティキュラータからなる群よ
り選ばれた一種以上の植物体粉末又はこれからの抽出物
を含有する加工食品。