JP2002518000A

JP2002518000A - 血清アルブミンの除去／精製のための方法およびその方法に使用する手段

Info

Publication number: JP2002518000A
Application number: JP2000554768A
Authority: JP
Inventors: ハンス・ヨハンソン
Original assignee: Amersham Bioscience AB
Current assignee: Cytiva Sweden AB
Priority date: 1998-06-18
Filing date: 1999-05-25
Publication date: 2002-06-25
Also published as: SE9802213D0; AU4809499A; WO1999065943A1; EP1086133A1; US6613884B1

Abstract

(57)【要約】ａ)血清アルブミンに親和性があり、血清アルブミンに選択的に結合可能であり、そしてｂ)使用する水性媒体に不溶なベースマトリクスに結合するか、または血清アルブミンと結合した後にそのようなマトリクスに結合することが可能である、リガンドと当該混合物を接触させることによって、血清アルブミンを他の化合物の混合物から除去する方法であって当該リガンドがアルブミン結合細菌細胞表面レセプターから誘導されること、および当該リガンドがこれらの型の細菌レセプターの天然形で見られるＩｇＧ-結合および／またはα₂-マクログロブリン結合能を欠くことを特徴とする、当該方法。また、細胞表面細菌レセプターから誘導され、担体マトリクスに共有結合するアルブミン結合リガンドであって、当該リガンドが血清アルブミンとの結合能に関して一価であることを特徴とする、アルブミン結合リガンド。非血清アルブミン成分をアッセイすべきサンプルから血清アルブミンを除去する方法。その特徴は、アルブミン結合細菌レセプターから誘導されるアルブミン結合リガンドにより、サンプルを親和性吸着させることである。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】技術分野本発明は、実質的に血清アルブミンの含まれない溶液／製剤を得るため、タン
パク質混合物を含む溶液から哺乳類の血清アルブミンを分離／精製するための方
法に関係する。当該発明は、１つまたはそれ以上の血清アルブミンに結合し得る
天然型細菌レセプターから誘導される新規固定型アルブミン結合リガンドにも関
係する。

【０００２】背景技術長期間、哺乳類の血清アルブミン、例えば、ヒトまたはウシの血清アルブミン
(それぞれ、ＨＳＡおよびＢＳＡ)の大きな需要があった。ＨＳＡの場合、血漿体
積増量剤として主に治療的に使用されている。元来、血清アルブミンは、適当な
種源の血清／血漿から得られた。ここ数年間、組換え血清アルブミン、特にＨＳ
Ａの製造が注目されて来た。細菌により産生された組換え型の場合、インビボに
おいて哺乳類を危険にさらすため宿主細胞の混入物の除去が緊急の問題であった
。最近、トランスジェニック動物、例えばトランスジェニックウシにおけるＨＳ
Ａ産生は有利であることが判明した。しかし、この変法は、ＨＳＡが宿主動物の
ＨＳＡ類似体と混合して存在するという欠点を有している(例えば、ウシでＨＳ
Ａを産生する場合、ＢＳＡと混在する)。これにより、新規な精製の問題、例え
ば、ＨＳＡからＢＳＡの特異的除去という問題が生じた。

【０００３】インビボの使用を目的とした血清アルブミン製剤は、許容される実施において
、製剤が投与される種とは異種のタンパク質を０．０１％未満、例えば０．００
１％未満含むものでなければならない。例えば、ヒトにおいて使用されるＨＳＡ
製剤は、ＢＳＡを０．０１％未満、例えば０．００１％未満含むものでなければ
ならない。パーセンテージはすべてｗ／ｗである。

【０００４】血清アルブミンの除去は、血清アルブミンを含むサンプルを他の成分について
アッセイする際にも重要である。全血液、血清および血漿のような血液由来サン
プルが典型的な例である。この種のサンプルにおいて、血清アルブミンは、最も
豊富に含まれる物質の１つであり、より少量存在する他の物質のアッセイを妨害
し得る。例えば、二次元ゲル電気泳動または断片マススペクトロメトリーによる
タンパク質成分分析において、血清アルブミンは、容易に妨害する。

【０００５】様々の型のアフィニティークロマトグラフィーおよび／またはイオン交換クロ
マトグラフィーは、血清アルブミン精製の初期に適用された。アフィニティーク
ロマトグラフィーの場合、一般的な目的は、十分な特異性を提供するグロマトグ
ラフィー媒体(クロマトグラフィーのベースマトリクスに結合するリガンド)の発
見である。それは、事前に決定された混入物質、または複合混合物からの最終産
物として望ましい血清アルブミンの何れかを除去するためである。

【０００６】従来から使用されており、血清アルブミンに対し選択性を有するリガンドの実
例は、Theodore PetersらによってAll about Alubumin-Biochemistry, Genetics
and Medical Applicationから得られる(Ed. Theodore Peters, Jr., Academic
Press (1996) pages 77-126)。種々の理由により血清アルブミンの選択的／特異
的および／または精製に使用されなかった。種特異性さえも備えた血清アルブミ
ン結合性の他の化合物もまた知られている。実例は、ある細菌、典型的には連鎖
球菌の細胞表面に存在するアルブミン結合レセプター(タンパク質)である。例え
ば、Nygren et al., Eur. J. Biochem. 193 (1990) 143-148(プロテインＧ)、Gu
ss et al., WO9507300(プロテインＭＡＧ)、Jonsson et al., Infect. Immun. 6
3 (1955) 2968-2975 (プロテインＺＡＧ)参照。これら細菌レセプターは、他の
タンパク質、例えば、プロテインＧはＩｇＧに、プロテインＭＡＧおよびＺＡＧ
はＩｇＧおよびα₂-マクログロブリンにもしばしば結合する。これらタンパク質
の種々の特定結合能により、それらは、複合タンパク質混合物から血清アルブミ
ンの選択的／特異的除去用のリガンドとして適さなくなる。アルブミン結合断片
の主な使用は、融合パートナーとしての使用である。それは、例えば、精製すべ
きタンパク質に親和性ハンドルを与えるためである。固定化型が製造されたのは
、種々の哺乳類種の血清アルブミンに関係する結合性試験をするためであった。
更に、Nygren et al., (Eur. J. Biochem. 193 (1990) 143-148)参照。Guss et
al (WO9507300)は、特許の中で、哺乳類血液からアルブミンを大雑把に精製する
試みおいて、未処理プロテインＭＡＧの使用例について概説している。しかし、
ＩｇＧおよびα₂-マクログロブリンもまたアルブミンに結合するという結果がGu
ssらにより明らかとされた。

【０００７】血清アルブミンに結合する既知細菌レセプターの更なる例は、プロテインＨお
よびＭプロテインであり、両方とも連鎖球菌由来である。

【０００８】この種のレセプターの天然型は、アルブミンまたはＩｇＧへの結合に応答する
１を超える部分配列を典型的に有する。当該レセプターは、１、２または３のア
ルブミン結合および／またはＩｇＧ結合領域を含み得る。機能的に類似する領域
は配列が異なり得る。

【０００９】本発明の目的本発明の第一の目的は、タンパク質の混合物から血清アルブミンを除去する改
善された親和性方法を提供することである。純粋型の血清アルブミンまたは除去
血清アルブミンを実質的に含まない製品をつくるためである。

【００１０】第二の目的は、上記定義されるような親和性方法であって、１つまたはそれ以
上の他の血清アルブミンと混合して存在する血清アルブミンに対する改善された
選択性を有する親和性方法を提供することである。

【００１１】第三の目的は、血清アルブミンに対する選択性を改善したアルブミン結合リガ
ンドを有する新規親和性マトリクスを提供することである。

【００１２】第四の目的は、１つまたはそれ以上の非血清アルブミン成分をアッセイするサ
ンプルにおける血清アルブミンの除去方法を改善することである。

【００１３】血清アルブミンの除去方法は、アルブミン結合リガンドを有するマトリクスに
基く。

【００１４】本発明上記細菌細胞表面レセプター型のアルブミン結合能を、血清アルブミンの選択
的除去および／または精製に有利にも利用し得ることであることが今回驚くべき
ことに明らかとなった。

【００１５】発明の方法には、(ａ)ある哺乳類種から誘導される血清アルブミンおよび(ｂ)
他の成分、特にタンパク質を含む混合物を、血清アルブミンをリガンドに結合(
吸着)し得る条件下、リガンドと接触させることが含まれる。当該リガンドは、
血清アルブミンに親和性のあるものを事前に選び、ベースマトリクスに結合させ
、または血清アルブミンに結合した後ベースマトリクスに結合することができる
。当該リガンドが、血清アルブミンに対し親和性のある細菌レセプターのアルブ
ミン結合型(当該型は、これら種類のレセプターの天然型のＩｇＧ-またはα₂-マ
クログロブリン結合能を含まない)から誘導されることを本発明の特徴とする。
当該型は、典型的には、ＩｇＧ-および／またはα₂-マクログロブリンに対する
結合能に応答するアミノ酸配列を含まない断片である。

【００１６】リガンドアルブミン結合断片が上記細菌細胞表面レセプター、例えば、プロテインＧ、
ＭＡＧおよびＺＡＧおよびプロテインＨおよびＭ-プロテインから得ることがで
きることが従来から知られていた。現在の知識では、リガンドとして使用する最
も好ましい断片は、アルブミン結合に関して一価である、例えば、１つを除くす
べてのアルブミン結合領域が中和されている天然レセプターの形態である。これ
は、他の結合能阻害が存在しない限り、二価、三価および他の多数価断片をも使
用され得ることを排除するものではない。組換え技術により、任意の数のアルブ
ミン結合領域を互いに連続して結合させることが原理的に可能である。

【００１７】連鎖球菌のプロテインＧ(ＳＰＧ)では、様々な領域が株Ｇ１４８で述べられて
いるように配置されている。例えば、Nygren et al., J. Mol. Recognit.1(1988
) 69-によるSjoelander et al., J. Immunol. Meth. 201 (1997) 115-123中の図
１：

【化１】参照。ａｌｂ１、ａｌｂ２およびａｌｂ３は、株Ｇ１４８由来ＳＰＧの３つのア
ルブミン結合領域に相当する。アルブミン結合領域の数は、株によって異なる。

【００１８】純粋な断片に加えて、天然型およびそのアルブミン結合断片から誘導された様
々な組換え構成もまた使用し得る。アルブミン結合能は保持するが、ＩｇＧおよ
び／またはα₂-マクログロブリンへの結合能を欠く変異型、および担体マトリク
スへの共有結合を促進する１つまたはそれ以上のアミノ酸、例えばシステインが
付加または挿入された型が実例である。アミノ酸残基の付加／挿入は、好ましく
は、アルブミン結合部位の外側、例えば、カルボキシおよび／またはアミノ末端
で生じる。当該変化が、アルブミン結合部位内で生じ、かつ、当該部位の結合能
が保持される場合、置換するアミノ酸残基は、置換される残基に関連して保存さ
れている。

【００１９】除去／精製されるべき血清アルブミンを含むサンプル除去および／または精製されるべき血清アルブミンは、典型的に、他のタンパ
ク質および／または生体分子を伴う混合物中に存在する。当該サンプルは、(ａ)
血液製剤(血漿および血清のような)、(ｂ)血清アルブミンを発現するように形質
転換された培養宿主細胞から得られる発酵液(fermentaion liquid)、(ｃ)他の種
の血清アルブミンを生ずるように形質転換されたトランスジェニック哺乳類から
得られた体液、および(ｄ)これらの型の液体の何れかから得られた処理(working
up)物等である。液体がトランスジェニック動物から得られる場合、当該液体は
、しばしば、その種に関係する通常の血清アルブミンも含む。

【００２０】マトリクスおよびリガンドによるそのマトリクスへの結合本発明の好ましい形式では、当該リガンドは、使用する水性媒体に不溶なベー
スマトリクスに結合する。そのマトリクスは、しばしば、使用する水性媒体に親
水性表面を呈示する、すなわち、外側表面および存在するならば内側表面におい
て、ヒドロキシ(-ＯＨ)、カルボキシ(-ＣＯＯＨ)、カルボキシアミド(-ＣＯＮＨ ₂ 、あるいはＮ-置換型)、アミノ(-ＮＨ₂、あるいは置換型)、オリゴ-またはポリ
エチレンオキシ基を呈示するポリマーをベースとする。典型的に、当該マトリク
スは、クロマトグラフィーマトリクスとして通常使用するもと同じ種類のもので
ある。例えば、当該ポリマーは、デキストラン、デンプン、セルロース、プルラ
ン、アガロース等のようなポリサッカライドをベースとし、必要ならば、例えば
、ビスエポキシド、エピハロヒドリン、１,２,３-トリハロ置換低級炭化水素と
架橋し、適当な多孔性および剛性を供与する。当該マトリクスはまた、ポリビニ
ルアルコール、ポリヒドロキシアルキルアクリレート、ポリヒドロキシアルキル
メタクリレート、ポリアクリルアミド、ポリメタクリルアミド等のような合成ポ
リマーをベースとする。ジビニルおよびモノビニル置換ベンゼンをベースとする
疎水性ポリマーのようなものの場合、当該マトリクスの表面を、上記のような親
水性基を周囲の水性溶液に呈示させるために、しばしば親水性とする。

【００２１】当該マトリクスは、無機化学的性質、例えば、シリカ、酸化ジルコニウム等で
もある。

【００２２】物理的に不溶なマトリクスは、多孔性モノリス型であるか、または多孔性もし
くは非多孔性であるビーズ／粒子型であり得る。ビーズ／粒子型のマトリクスは
、充填ベッドまたは懸濁型として使用し得る。懸濁型には、分級拡張型ベッド(c
lassified expanded bed)および粒子／ビーズが円運動する純粋懸濁型が含まれ
る。モノリス、充填ベッドおよび分級拡張型ベッドの場合、分離操作は、流向に
そって生ずる吸着分子の濃度勾配による通常のクロマトグラフィーとして分類さ
れる。純粋懸濁の場合、当該分離操作は、回分型である。

【００２３】懸濁の場合、ビーズ／粒子には、分級拡張型ベッドとしたときに流速を増加で
きるように高密度充填物質(densifying filler material)を加えることができ、
親和性結合(吸着)の後ビーズ／粒子の沈降が促進される。例えば、WO-A-9717132
(Amersham Pharmacia Biotech AB)およびWO-A-9200799(Upfront Chromatography
)参照。

【００２４】当該リガンドをマトリクスに、通常のカップリング技術を利用して、例えば、
リガンドに存在するアミノおよび／またはカルボキシル基を介して結合させ得る
。システイン残基が存在する場合、同様に利用され得る(チオエーテルまたはジ
スルフィド結合)。ビスエポキシド、エピクロロヒドリン、ＣＮＢｒ、Ｎ-ヒドロ
キシスクシンイミド(ＮＨＳ)等が典型的な結合剤である。

【００２５】ベースマトリクスとリガンドの間には、リガンドの有用性が改善され、かつ、
マトリクスに対するリガンドの化学結合が促進される導入スペーサーがしばしば
存在する。一般的に、当該スペーサーは、１-５０原子の長さの炭化水素鎖であ
る。炭化水素鎖は、直線状、分枝状、または環状であり、所望により、１つまた
はそれ以上のエーテル酸素原子またはアミノ窒素原子が介在し、および／または
所望により１つまたはそれ以上のヒドロキシ、低級アルコキシ、またはアミノ基
で置換されている(-ＮＨ₂／ＮＨ₃ ⁺、各水素は、低級アルキルまたは低級アシル
基で置換され得る)。低級アルキルまたはアシル基は、主として、Ｃ₁−Ｃ₁₀アル
キル／アシルを意味する。当該スペーサー基はまた、結合方法論に依存し、重要
な加水分解安定性を有するエステル、アミド、チオエーテル基等を含む。

【００２６】当該スペーサーはまた、スペーサーあたり幾つかのリガンドによる結合を重合
的に供与し得る。この型のスペーサーは、しばしば、親水性であり、エクステン
ダー、テンタクル(tentacle)等と呼ばれている。例えば、国際特許出願PCT/SE98
/00189(Amersham Pharmacia Biotech AB)参照。

【００２７】当該リガンドはまた、物理的吸着または生物特異的吸着のような非共有結合に
よりマトリクスに結合し得ると考えられる。後者の結合型の場合、ビオチン-ス
トレプトアビジンシステムを使用し得る。

【００２８】可能性ある変形として、当該リガンドは、可溶性型であって、血清アルブミン
に結合した後に不溶性となるものであってもよい。これは、例えば、リガンドを
ビオチンに結合させることにより、およびストレプトアビジンマトリクスを伴う
可溶性リガンドビオチン結合体と血清アルブミンとの間で形成される複合体を接
触させることによる不溶性化により、達成し得る。

【００２９】操作段階吸着段階の間、当該条件は、リガンドと目的の血清アルブミンとの間の結合を
促進するように選択する。ｐＨは、典型的には、４-８の間から選択され、イオ
ン強度は、０-３ＭＮａＣｌの間であり、温度は０-４０℃の間、好ましくは４-
３７℃である。正確な値は、除去／精製されるべき血清アルブミンおよびマトリ
クスに結合するリガンドの種類に依存する。

【００３０】吸着後、リガンドに結合する血清アルブミンは、例えば、結合血清アルブミン
を第一に吸着し、例えば、イオン交換体において、続けてそれを吸着させること
により、更に処理し得る。適当な吸着条件には、ｐＨ、イオン強度、温度の変化
および／または結合により阻害する化合物の添加を含み得る。主な規則は、もち
ろん、血清アルブミンが不可逆的に変性する条件に変化させないことである。

【００３１】血清アルブミンのリガンドへの結合は、他の吸着段階の前に行い得る。その段
階は、例えば、イオン交換または免疫リガンドに基づき得る。

【００３２】出発混合物が２つの血清アルブミンを含む場合、一方はリガンドに吸着し、他
方は液体中に残存する。液体中に残存する血清アルブミンを精製するため、処理
を当該液体において続け得る。

【００３３】アッセイ目的で血清アルブミン中のサンプルを低く調整するため、血清アルブ
ミンを除去する場合、その後、所望により、１つまたはそれ以上の付加的なコン
ディショニング段階後、当該サンプルをアッセイする。上記参照。

【００３４】本発明の別の態様は、細胞表面細菌レセプターから誘導され、担体マトリクス
に共有結合したアルブミン結合リガンドである。この態様は、当該リガンドが血
清アルブミン結合能に関し一価であることを特徴とする。優先日における最も好
ましい形式では、当該リガンドは、実質的にＳＰＧの領域Ａ３に相当する。上記
参照。

【００３５】更なる本発明の態様は、上記細菌レセプターおよび／または血清アルブミンで
はない少なくとも１つの他の成分を検定すべき生体サンプルから血清アルブミン
を除去するためのアルブミン結合修飾または断片の何れかの使用である。レセプ
ターのＩｇＧ結合および／またはα₂-マクログロブリン部分配列をも含むことに
より、ＩｇＧおよび／またはα₂-マクログロブリンもまた除去される。マトリク
スの選択、結合技術、結合段階の条件等は、実質的に上記と同一である。血清ア
ルブミン除去後、可能ならば、ＩｇＧおよび／またはα₂-マクログロブリンの除
去、および望ましいならば１つまたはそれ以上の付加的コンディショニング段階
と組合せて、当該サンプルに目的のアッセイを行う。典型的なアッセイには、二
次元ゲル電気泳動および／またはマススペクトロメトリー破砕および個々タンパ
ク質および／もしくはその断片パターンの最終アナライトが含まれる。原理的に
、任意のタンパク質は、上記前処理の後アッセイし得る。除外は血清アルブミン
であり、リガンドさらにＩｇＧおよび／またはα₂-マクログロブリンに依存する
。

【００３６】当該発明は、更に添付の特許請求の範囲により特定され、最も好ましい部分に
関する実験的支持により記載されている。

【００３７】実験部分固定化：本試験で使用するタンパク質は、完全アルブミン結合ドメインＡ３を含
む連鎖球菌プロテインＧの７．１ｋＤａ断片であった(Kraulis et al., FEBS le
tter 378 (1996) 190-194中の断片ＳＰＧ−ＡＢＤ３、ａａ２５４−２９９)。約
２ｍｇの断片を、製造者説明書に従い１ｍｌＮＨＳ活性化カラム、ＨｉＴｒａｐ
(Amersham Pharmacia Biotech AB, Uppsala, Sweden)に固定した。(ＮＨＳ＝Ｎ-
ヒドロキシ-スクシンイミド)

【００３８】クロマトグラフィーの条件：全サンプルをｐＨ７．０に調整し、その後、カラム
にロードした。２０ｍＭリン酸ナトリウムおよび１５０ｍＭ塩化ナトリウム、
ｐＨ７．０からなる緩衝液(緩衝液Ａ)を平衡化に用い、カラムにサンプルをロー
ドした後洗浄する。

【００３９】溶出は、２０ｍＭクエン酸、１５０ｍＭ塩化ナトリウム緩衝液、ｐＨ２．７
(緩衝液Ｂ)を用いることにより、ｐＨを２．７に低下させ行った。

【００４０】サンプル：緩衝液Ａ中のヒト血清アルブミンＨＳＡ(Sigma, St Louis, MO, U.S.
A.)２ｍｇ/ｍｌおよび緩衝液Ａ中のウシ血清アルブミンＢＳＡ(Sigma, St Louis
, Mo, U.S.A.)２ｍｇ／ｍｌおよび酸処理したウシ乳清、単味またはＢＳＡまた
はＨＳＡでスパイクしたもの。全サンプルをｐＨ７．０に調整し、45μl depth
フィルターで濾過した後、適用した。

【００４１】クロマトグラフィーの操作：当該カラムを約５カラム体積(Ｃｖ)の緩衝液Ａで平
衡化した。その後、２ｍｌのサンプルを適用し、更に当該カラムを更なる６Ｃｖ
の緩衝液Ａで洗浄し、その後、溶出は、５Ｃｖの緩衝液Ｂを適用することにより
行った。その操作の後、２８０ｎｍのオンラインＵＶ検出を行った。緩衝液Ｂに
よって妨害されないか、または溶出する、カラムを通過するＵＶ吸着(adsorbing
)物質を回収し、更にタンパク質検出用のＳＤＳ-ＰＡＧＥおよび銀染色により分
析した。

【００４２】結果：ＨＳＡがサンプル中に存在するとき、ＨＳＡは、カラムに量的に結合し、
その後、緩衝液Ｂで溶出した。ＢＳＡがサンプル中に存在するとき、ＢＳＡはブ
レイクスルーで検出され、ＢＳＡは溶出液中では検出されなかった。ウシ無添加
乳清(plain bovine whey)の場合、ＳＤＳ-ＰＡＧＥ／銀染色によりサンプル中で
検出される全タンパク質はブレイクスルー中で検出され、その一方、溶出液中で
はタンパク質は全く見られなかった。その結果が示すのは、アルブミン結合細菌
細胞表面レセプターの断片は、ＨＳＡおよびＢＳＡの両方を含む混合物から吸着
するＨＳＡに対し極度に高い選択性を有し得ることである。

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ａ)血清アルブミンに親和性があり、血清アルブミンに選択
的に結合可能であり、そしてｂ)使用する水性媒体に不溶なベースマトリクスに結合するか、または血清アル
ブミンと結合した後にそのようなマトリクスに結合することが可能である、リガンドと当該混合物を接触させることによって、血清アルブミンを他の化合物
の混合物から除去する方法であって、当該リガンドがアルブミン結合細菌細胞表面レセプター、好ましくは連鎖球菌
表面レセプターから誘導されること、および当該リガンドがこれらの型の細菌レ
セプターの天然形で見られるＩｇＧ-結合および／またはα₂-マクログロブリン
結合能を欠くことを特徴とする、当該方法。
【請求項２】当該混合物がトランスジェニック哺乳類、好ましくはウシか
ら誘導され、当該哺乳類は形質転換されて、トランスジェニック哺乳類以外の他
の種、好ましくはヒトの哺乳類の血清アルブミンを発現することを特徴とする、
請求項１に記載の方法。
【請求項３】当該リガンドには、１つまたはそれ以上の個々のサブユニッ
トが含まれ、それぞれが血清アルブミンと結合することができることを特徴とす
る、請求項１−２の何れかに記載の方法。
【請求項４】当該リガンドには、１つのみの血清アルブミン結合サブユニ
ットが含まれることを特徴とする、請求項３に記載の方法。
【請求項５】当該アルブミン結合細菌レセプターがプロテインＧであるこ
とを特徴とする、請求項１−４の何れかに記載の方法。
【請求項６】当該血清アルブミンを異種性タンパク質として発現し、当該
血清アルブミンが好ましくはヒト血清アルブミンである、宿主から当該混合物を
誘導することを特徴とする、請求項１−５の何れかに記載の方法。
【請求項７】当該リガンドが当該マトリクスに共有結合していることを特
徴とする、請求項１−６の何れかに記載の方法。
【請求項８】当該リガンドにアミノ酸配列が含まれ、当該共有結合がアミ
ノ基および／またはカルボキシル基および／またはメルカプト基を利用しており
、当該基がリガンドのアミノ酸配列中のアミノ酸中に存在することを特徴とする
、請求項７に記載の方法。
【請求項９】吸着段階後、当該血清アルブミンを当該親和性吸着剤から溶
出させ、所望により更なる処理を行うことを特徴とする、請求項１−８の何れか
に記載の方法。
【請求項１０】細胞表面細菌レセプターから誘導され担体マトリクスに共
有結合するアルブミン結合リガンドであって、血清アルブミン結合能に関し一価
であることを特徴とする、アルブミン結合リガンド。
【請求項１１】当該リガンドがＳＰＧの領域Ａ３に実質的に相当すること
を特徴とする、請求項１０に記載のアルブミン結合リガンド。
【請求項１２】非血清アルブミン成分をアッセイするサンプルから血清ア
ルブミンを除去する方法であって、当該サンプルが、アルブミン結合細菌レセプ
ターから誘導されるアルブミン結合リガンドによる親和性吸着処理に付されるこ
とを特徴する、当該方法。