JP2001523666A

JP2001523666A - 金属タンパク質分解酵素阻害剤

Info

Publication number: JP2001523666A
Application number: JP2000521077A
Authority: JP
Inventors: ベケット，レイモンド，ポール; ウィッタカー，マーク; ミラー，アンドリュー; マーティン，フィオナ，ミッチェル
Original assignee: ブリティッシュバイオテックファーマシューティカルズリミテッド
Priority date: 1997-11-13
Filing date: 1997-11-13
Publication date: 2001-11-27
Also published as: ES2195122T3; DE69720554D1; NO315702B1; CA2310593C; AU740420B2; NO20002480D0; EP1030842B1; BR9714934A; KR100485479B1; RU2198164C2; AU4958497A; PL189542B1; EP1030842A1; PL340494A1; WO1999025693A1; GB9816317D0; HUP0002811A2; GB2333524A; IL135210A0; TW474919B

Abstract

(57)【要約】化合物 N¹-[2,2-ジメチル-1S-(ピリジン-2-イルカルバモイル)-プロピル]-N⁴-ヒドロキシ-2R-イソブチル-3S-メトキシ-スクシンアミドはマトリクス金属タンパク質分解酵素阻害剤である。

Description

【発明の詳細な説明】

この発明は、N¹-[2,2-ジメチル-1S-(ピリジン-2-イルカルバモイル)-プロピル
]-N⁴-ヒドロキシ-2R-イソブチル-3S-メトキシ-スクシンアミド、ならびにその医
薬的に許容な塩、水和物および溶媒和物に関する。

【０００１】（発明の背景）国際特許出願第ＷＯ９５／１９９５６号(ブリティッシュバイオテックファ
ーマシューティカルズリミテッド)には、マトリクス金属タンパク質分解酵素(
MMP) 阻害剤および細胞からの腫瘍壊死因子(TNF-α)の遊離の阻害剤である一群の化合物が記載され、請求されている。特に、この出願は一般式 (I)

【０００２】

【化２】

【０００３】［式中、Ｘは−ＣＯ₂Ｈまたは−ＣＯＮＨＯＨ基であり；Ｒ₁は水素；（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル；（Ｃ₂−Ｃ₆）アルケニル；フェニル；置換されたフェニル；フェニル（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル）；置換されたフェニル（Ｃ₁ −Ｃ₆）アルキル；ヘテロサイクリル；置換されたヘテロサイクリル；ヘテロサイクリル（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル；置換されたヘテロサイクリル（Ｃ₁−Ｃ₆）アル
キル；ＢＳＯ_nＡ基−［ここで、ｎは０、１または２であり、Ｂは水素もしくは（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、フェニル、置換されたフェニル、ヘテロサイクリル、（
Ｃ₁−Ｃ₆）アシル、フェナシルもしくは置換されたフェナシル基であり、Ａは（
Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルを意味する］；アミノ；保護されたアミノ；アシルアミノ；
ＯＨ；ＳＨ；（Ｃ₁−Ｃ₆）アルコキシ；（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルアミノ；ジ−（Ｃ ₁ −Ｃ₆）アルキルアミノ；（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルチオ；アリール（Ｃ₁−Ｃ₆）ア
ルキル；アミノ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル；ヒドロキシ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、メル
カプト（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルまたはカルボキシ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル［ここで、
アミノ−、ヒドロキシ−、メルカプト−またはカルボキシル−基は任意に保護さ
れるかまたはカルボキシル基はアミド化されてもよい］；カルバモイル、モノ（
低級アルキル）カルバモイル、ジ（低級アルキル）カルバモイル、ジ（低級アル
キル）アミノまたはカルボキシ−低級アルカノイルアミノで置換された低級アル
キル；であり、Ｒ₂は（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、（Ｃ₂−Ｃ₆）アルケニル、（Ｃ₂−Ｃ₆）アルキニル、フェニル（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、ヘテロアリール（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、シ
クロアルキル（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルまたはシクロアルケニル（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキ
ル基であり、それらのどの一つも（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、−Ｏ（Ｃ₁−Ｃ₆）アル
キル、−Ｓ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、ハロおよびシアノ（−ＣＮ）から選択される
１以上の置換基で任意に置換されてもよい；Ｒ₃はいずれかの官能基が保護されていてもよい天然または非天然のαアミノ酸の特徴的な基であり；Ｒ₄はフェニルまたは５−もしくは６−員のヘテロアリール環であり、いずれの環窒素原子はＮ−オキシドとして酸化されてもよく、ベンゼン環または５−、６
−もしくは７−員のヘテロ環式環と任意に縮合してもよく、環のいずれも、：（ａ）ヒドロキシル、ハロゲン、−ＣＮ、−ＣＯ₂Ｈ、−ＣＯ₂（Ｃ₁−Ｃ₆）アル
キル、−（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル−ＣＯ₂（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、−ＣＯＮＨ₂、−
ＣＯＮＨ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、−ＣＯＮ（（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル）₂、−ＣＨＯ、−ＣＨ₂ＯＨ、−（Ｃ₁−Ｃ₄）ペルフルオロアルキル、−Ｏ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、−Ｓ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、−ＳＯ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、−ＳＯ₂（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、−ＮＯ₂、−ＮＨ₂、−ＮＨ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、−Ｎ（
（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル）₂および−ＮＨＣＯ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルから独立して選択される１以上の置換基、または（ｂ）（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、（Ｃ₂−Ｃ₆）アルケニル、（Ｃ₂−Ｃ₆）アルキニ
ル、（Ｃ₃−Ｃ₈）シクロアルキル、（Ｃ₄−Ｃ₈）シクロアルケニル、フェニル、
ベンジル、ヘテロアリールまたはヘテロアリールメチルから選択される基［いず
れの基もハロゲン、ヒドロキシル、アミノ、カルボキシル、（Ｃ₁−Ｃ₄）ペルフ
ルオロアルキル、（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル、−Ｏ（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルまたは−Ｓ
（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキルから選択される１以上の置換基で任意に置換されていても
よい］で任意に置換されていてもよい；Ｒ₅は水素または（Ｃ₁−Ｃ₆）アルキル基である］の化合物またはその塩、水和物もしくは溶媒和物を請求している。

【０００４】（発明の簡単な記述）Ｎ¹−［２，２−ジメチル−１Ｓ−（ピリジン−２−イルカルバモイル）−プロピル］−Ｎ⁴−ヒドロキシ−２Ｒ−イソブチル−３Ｓ−メトキシ−スクシンアミドは、第ＷＯ９５／１９９５６号において一般的に記載され、請求された群の
一員であるが、そのものも、その特性のいずれもその他の点では詳細に述べられ
ていない。

【０００５】第ＷＯ９５／１９９５６号は、開示した群の化合物の中で、芳香族またはヘテ
ロアリール R₄ 置換基は通常、そのような公知化合物中に異なる(通常メチル) R ₄ 置換基が存在するが、他は類似の構造の公知化合物に対して、ストロメリシン
に対する活性が増大するという予期せぬ、望ましい効果を有し、一方コラゲナー
ゼおよびゼラチナーゼに対する活性を維持していることを述べている。この群の
一員として、ここに選択された化合物 N¹-[2,2-ジメチル-1S-(ピリジン-2-イルカルバモイル)-プロピル]-N⁴-ヒドロキシ-2R-イソブチル-3S-メトキシ-スクシン
アミドは、これらの特性を有する。

【０００６】しかし、ある MMP 阻害剤の副作用は、多量および／または長期の投薬後に、ある動物および患者において、関節、例えば肩、における筋肉-骨格痛(時には「
腱炎」とも呼ばれる)を誘因することが知られている。この副作用は投薬の中止において実質的に可逆的であると考えられているが、それにもかかわらず望まし
くない。疼痛の生じるメカニズムは現在分かっておらず、疼痛を誘因する化合物
の傾向と、特定な構造的特徴または分子の酵素阻害プロフィールを相関させる可
能性はこれまでには証明されていなかった。従って、所定の MMP 阻害剤のいずれがこの副作用を生じるか、もし生じたときにはその副作用のつらさは、現在の
ところ予想することができず、経験的に試験されなければならない。

【０００７】選択された N¹-[2,2-ジメチル-1S-(ピリジン-2-イルカルバモイル)-プロピル]
-N⁴-ヒドロキシ-2R-イソブチル-3S-メトキシ-スクシンアミドが、筋肉-骨格痛副
作用を誘因する傾向が非常に減少されていることがここに見出される。これに関
して、密接な構造類似体、例えば副作用を誘因する傾向がより強いN¹-[2,2-ジメ
チル-1S-(ピリジン-3-イルカルバモイル)-プロピル]-N⁴-ヒドロキシ-2R-イソブチル-3S-ヒドロキシ-スクシンアミドと異なる。

【０００８】国際公開第ＷＯ９５／１９９５６号にもまた、開示された群のアリールアミド MMP 阻害剤には、経口的に生物学的利用可能な化合物があることを記載している。例えば、薬物を経口投与した動物の血中の薬物に起因する MMP 阻害活性のピークレベルまたは経時的な活性のレベル(「血中濃度−時間曲線下面積」)によ
り証明される。

【０００９】国際公開第WO 95/19956 号の開示に含まれる化合物の全てではないが、有用な
程度に経口的に生物学的利用可能であり、これは、本発明により選択された化合
物、N¹-[2,2-ジメチル-1S-(ピリジン-2-イルカルバモイル)-プロピル]-N⁴-ヒドロキシ-2R-イソブチル-3S-メトキシ-スクシンアミドは、ヒトおよび他の哺乳動物において経口的に生物学的利用可能であることが見出されている。

【００１０】経口的に生物学的利用可能であることおよび腱炎という副作用に対する負担が
減少することというこの組み合わせは、この発明の化合物が MMP 阻害剤の中程度または長期間の全身投与を必要とする疾患の治療のための比較的広範な治療窓
口を提供することを意味する。従って、この化合物は、例えば、慢性関節リュー
マチ、癌、多発性硬化症 (MS)、ギラン-バレー症候群(GBS)および乾癬の治療が
適応される。

【００１１】（発明の詳細な記述）従ってこの発明は、式（II)

【００１２】

【化３】

【００１３】のN¹-[2,2-ジメチル-1S-(ピリジン-2-イルカルバモイル)-プロピル]-N⁴-ヒドロキシ-2R-イソブチル-3S-メトキシ-スクシンアミド、ならびにその医薬的に許容な塩、水和物および溶媒和物を提供する。

【００１４】この発明の化合物は３つの不斉炭素原子を有し、これらの立体化学配置を化合
物名に明記し、式（II）中に示している。しかし、もし特定の鏡像異性体が優勢
であるならば、この発明は化合物（II）の鏡像異性体の混合物を含むことを理解
すべきである。そのような鏡像異性体の混合物の90重量%以上が特定された鏡像異性体であるのが好ましい。

【００１５】この発明はまた、N¹-[2,2-ジメチル-1S-(ピリジン-2-イルカルバモイル)-プロ
ピル]-N⁴-ヒドロキシ-2R-イソブチル-3S-メトキシ-スクシンアミドまたはその医
薬的に許容な塩、水和物もしくは溶媒和物、ならびに医薬的に許容な担体と共に
なる医薬組成物を含む。この発明の好ましい組成物は、経口投与用に適応された
ものである。

【００１６】この発明は更に、ヒトを含む哺乳類における慢性関節リューマチ、癌、多発性
硬化症 (MS)、ギラン-バレー症候群 (GBS)または乾癬の治療のための医薬組成物の製造における、N¹-[2,2-ジメチル-1S-(ピリジン-2-イルカルバモイル)-プロ
ピル]-N⁴-ヒドロキシ-2R-イソブチル-3S-メトキシ-スクシンアミドまたはその医
薬的に許容な塩、水和物もしくは溶媒和物の使用を含む。

【００１７】この発明はまた、これら疾患の症候学および／または病理学上徴候を減少させ
るのに有効な量のN¹-[2,2-ジメチル-1S-(ピリジン-2-イルカルバモイル)-プロピ
ル]-N⁴-ヒドロキシ-2R-イソブチル-3S-メトキシ-スクシンアミドまたはその医薬
的に許容な塩、水和物もしくは溶媒和物を哺乳動物に投与することからなる、ヒ
トを含む哺乳類における慢性関節リューマチ、癌、多発性硬化症 (MS)、ギラン-
バレー症候群 (GBS)または乾癬の管理の方法も含む。

【００１８】この発明の化合物の塩には、生理学的に許容な酸付加塩、例えば塩酸塩、臭酸
塩、硫酸塩、メタンスルホン酸塩、p-トルエンスルホン酸塩、リン酸塩、酢酸塩
、クエン酸塩、コハク酸塩、乳酸塩、酒石酸塩、フマル酸塩およびマレイン酸塩
が含まれる。塩としては、塩基と形成されてもよく、例えばナトリウム、カリウ
ム、マグネシウムおよびカルシウム塩である。

【００１９】この発明の選択された化合物は、この中の実施例中に記載されたルートにより
製造でき、薬物動態学的特性と両立するいずれのルートでの投与用に提供できる
。経口投与可能な組成物は、錠剤、カプセル剤、散剤、顆粒剤、トローチ剤、経
口、局所のような液剤またはゲル製剤、もしくは滅菌水剤または懸濁剤の形態で
あってもよい。経口投与用の錠剤およびカプセル剤は、単位用量製剤形態であっ
てもよく、結着剤;充填剤;錠剤化滑沢剤;崩壊剤；または許容される湿潤剤のような通常の賦形剤を含んでもよい。錠剤は通常の製剤技術において公知の方法に
従い、コーティングをされてもよい。経口の液剤は例えば、水性もしくは油性懸
濁剤、水剤、乳剤、シロップ剤、エリキシル剤の形態にあってもよく、または使
用前に水もしくは適当なビヒクルで再組成するための乾燥製品として存在しても
よい。そのような液体製剤は懸濁化剤; 乳化剤;非水性ビヒクル(食用油を含んで
もよい); 保存剤;のような通常の添加剤、もし所望ならば通常の矯味・矯臭また
は着色剤を含んでもよい。

【００２０】有効成分はまた、滅菌媒体中で非経口的に投与されてもよい。使用するビヒク
ルおよび濃度により、薬物はビヒクル中に懸濁または溶解されてもよい。局所麻
酔薬のようなアジュバント、保存剤および緩衝剤はビヒクル中に溶解させること
ができる。

【００２１】所定のルートの投与によるいかなる所定の臨床的症例用の本発明の化合物の用
量は、関連当局の規定の認可を得る標準的な実験に従う臨床実験により決定でき
る。通常、化合物はヒトに１日あたり２または３回経口的に5〜100 mg の単位用
量で投与されるであろうと、現在予想される。

【００２２】以下の実施例は本発明の化合物の製造を記述する。出発原料2R-(2,2-ジメチル
-5-オキソ-[1,3]ジオキソラン-4S-イル)-4-メチル-ペンタン酸および L-tert-ロ
イシン-N-(2-ピリジル)アミドは、国際特許出願公開第WO 95/19961 号に記載のように製造した。

【００２３】以下の略語を実施例にて使用した。 DMF N,N-ジメチルホルムアミド EDC N-エチル-N'-(3-ジメチルアミノプロピル)カルボジイミド塩酸塩 HOBt 1-ヒドロキシベンゾトリアゾール NMM N-メチルモルホリン THF テトラヒドロフラン

【００２４】実施例 N¹-[2,2-ジメチル-1S-(ピリジン-2-イルカルバモイル)-プロピル]-N⁴-ヒドロキシ-2R-イソブチル-3S-メトキシ-スクシンアミド

【００２５】

【化４】

【００２６】工程 A: 2S-ヒドロキシ-3R-イソブチル-コハク酸ジメチルエステル 2R-(2,2-ジメチル-5-オキソ-[1,3]ジオキソラン-4S-イル)-4-メチル-ペンタン
酸(75.0 g, 0.326 mmol)をメタノール (500 ml)中に溶解させ、0℃に冷却し、生じた溶液を塩化水素ガスで飽和させた。反応混合物を室温まで温め、終夜攪拌
した。溶媒を減圧下に除去し、残渣をジクロロメタン中に溶解させ、連続的に飽
和炭酸水素ナトリウムおよびブラインで洗浄した。有機層を無水硫酸マグネシウ
ムで乾燥し、ろ過して減圧下に蒸発乾固させ、表題化合物を黄色油として得た (
53 g, 75%)。

【００２７】¹ H-NMR; δ (CDCl₃), 4.10 (1H, d, J = 4.0 Hz), 3.60 (3H, s), 3.50 (3H, s)
, 3.18 (br s), 2.78 (1H, m), 1.61 - 1.40 (2H, m), 1.28 (1H, m) および 0.
76 - 0.73 (6H, m).

【００２８】工程 B: 2R-イソブチル-3S-メトキシ-コハク酸ジメチルエステル

【００２９】 2S-ヒドロキシ-3R-イソブチル-コハク酸ジメチルエステル (23.9 g, 110 mmo
l)をDMF (200 ml) 中に溶解させ、蒸留したヨードメタン(8.2 ml, 132 mmol) を
加え、次いで、酸化銀(I) (27.95 g, 121 mmol)を加えた。反応物を７日間室温で遮光下に攪拌した。溶媒を減圧下に除去し、残渣をカラムクロマトグラフィー
(シリカゲル、溶離液としてジクロロメタン)により精製して表題化合物を粘稠な
黄色油として得た(19.16 g. 75%)。

【００３０】¹ H-NMR; δ (CDCl₃), 3.83 (1H, d, J = 7.5 Hz), 3.71 (3H, s), 3.62 (3H, s)
, 3.30 (3H, s), 2.85 (1H, m), 1.65 - 1.39 (2H, m), 1.10 (1H, m) および 0
.83 - 0.81 (6H, m).

【００３１】工程 C: 2R-イソブチル-3S-メトキシ-コハク酸ジリチウム塩

【００３２】水酸化リチウム(1.76 g, 42.0 mmol)を2R-イソブチル-3S-メトキシ-コハク酸ジメチルエステル(4.70 g, 20.0 mmol)のメタノール(30 ml)および水(30 ml)中溶液に加えた。反応混合物を室温で２時間攪拌し、その後溶媒を減圧下に除去し
て表題化合物を黄色固体として得た(4.40 g, 定量的)。

【００３３】¹ H-NMR; δ (CD₃OD), 3.52 (1H, d, J = 5.1 Hz), 3.27 (3H, s), 2.65 (1H, m)
, 1.56 - 1.53 (2H, m), 1.31 (1H, m) および 0.82 - 0.78 (6H, m).

【００３４】工程 D: 2R-イソブチル-3S-メトキシ-コハク酸4-メチルエステル

【００３５】 2R-イソブチル-3S-メトキシ-コハク酸ジリチウム塩 (25.14 g, 116 mmol)を無
水THF (150 ml)中に溶解させ、溶液を０℃に冷却した。無水トリフルオロ酢酸(3
0 ml)を加え、その混合物を０℃でさらに４時間攪拌した。溶媒を減圧下に除去し、残渣を０℃で無水メタノール(200 ml)中に溶解させ、溶液を室温で終夜攪拌
した。溶媒を減圧下に除去して表題化合物を黄色油として得(54.3 g, ２等量のトリフルオロ酢酸リチウム塩を含む)、それをさらに精製しないで工程 Eで使用した。

【００３６】¹ H-NMR; δ (CD₃OD), 7.71 (1H, d, J = 7.5 Hz), 3.65 (3H, s), 3.24 (3H, s)
, 2.72 (1H, m), 1.56 - 1.42 (2H, m), 1.06 (1H, m)および 0.81 - 0.79 (6H,
m).

【００３７】工程 E: 3R-[2,2-ジメチル-1S-(ピリジルカルバモイル)-プロピルカルバモイル]-2S-メト
キシ-5-メチル-ヘキサン酸メチルエステル.

【００３８】工程 Dの生成物 (25.06 g, 53.7 mmolの2R-イソブチル-3S-メトキシ-コハク酸
４-メチルエステルに等しい)をDMF (200 ml)中に溶解させ、溶液をHOBt (8.70 g
, 53.7 mmol)、続いて EDC (12.35 g, 64.4 mmol)の添加の間０℃に冷却した。
混合物を攪拌し、２時間にわたって室温に温めた。そのようにして形成した活性
エステルの溶液を０℃に冷却し、L-tert-ロイシン-N-(2-ピリジル)アミド (11.1
1 g, 53.7 mmol)を加え、その混合物を室温で終夜攪拌した。溶媒を減圧下に除去し、残渣を酢酸エチル中に溶解させた。溶液を連続的に1M 炭酸ナトリウム溶液、次いでブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥して、ろ過して蒸発
乾固させた。残渣をカラムクロマトグラフィー (シリカゲル, ジクロロメタン中
0 〜5% メタノール)で精製して、表題化合物を白色固体(13.41 g, 61%)として得
た。

【００３９】¹ H-NMR; δ (CDCl₃), 9.61 (1H, s), 8.47 (1H, m), 8.24 (1H, d, J = 8.4 Hz)
, 7.74 (1H, m), 7.07 (1H, m), 6.97 (1H, d, J = 8.9 Hz), 4.64 (1H, d, J =
8.9 Hz), 4.01 (1H, d, J = 7.6 Hz), 3.76 (3H, s), 3.41 (3H, s), 2.75 (1H
, m), 1.79 (1H, m), 1.51 (1H, m), 1.11 (1H, m), 1.02 (9H, s), 0.84 (3H,
d, J = 6.3 Hz), および 0.82 (3H, d, J = 6.3 Hz).

【００４０】工程 F: 3R-[2,2-ジメチル-1S-(ピリジン-2-イルカルバモイル)-プロピルカルバモイル]-
2S-メトキシ-5-メチル-ヘキサン酸リチウム塩

【００４１】 3R-[2,2-ジメチル-1S-(ピリジン2-イルカルバモイル)-プロピルカルバモイル]
-2S-メトキシ-5-メチル-ヘキサン酸メチルエステル (13.4 g, 32.9 mmol)をTHF
(265 ml)と水 (65 ml)の混合物中に溶解させ、水酸化リチウム１水和物(1.396 g
, 33.3 mmol)を加えた。溶液を室温で２時間攪拌し、次いで減圧下に蒸発させて
黄色油を得、それをさらにトルエンで共沸させることにより乾燥させた。生成物
(13.4 g, 残存する溶媒を含有する)をさらなる精製を行わずに直ちに使用した。

【００４２】¹ H-NMR; δ (CD₃OD,ジアステレオマーの3.5:1混合物), 8.31 (1H, m), 7.99 (1H
, d, J = 8.3 Hz), 7.66 (1H, m), 7.00 (1H, m), 4.49 (0.23H, s; 少量のジア
ステレオマー), 4.37 (0.77H, s, 主要なジアステレオマー), 3.68 (0.23H, d,
J = 7.6 Hz; 少量のジアステレオマー), 3.52 (0.77H, d, J = 7.6 Hz; 主要なジアステレオマー), 3.21 (0.69H, s; 少量のジアステレオマー), 3.20 (2.31H,
s, 主要なジアステレオマー), 2.64 (1H, m), 1.53 (2H, br m), 1,18 (1H, m)
, 1.01 (9H, s), 0.85 (3H, d, J = 6.4 Hz) および 0.81 (3H, d, J = 6.3 Hz)
.

【００４３】工程 G: N⁴-ベンジルオキシ-N¹-[2,2-ジメチル-1S-(ピリジン-2-イルカルバモイル)-プロ
ピル]-2R-イソブチル-3S-メトキシ-スクシンアミド

【００４４】工程 F の生成物(13.4 g, 約33 mmol)を無水DMF (250 ml)中に溶解させ、アル
ゴン雰囲気下に置き、攪拌しながら -10℃に冷却した。クロロギ酸エチル(3.47
ml, 36 mmol)を滴下して加え、次いで NMM (1.8 ml, 16.5 mmol)を加えた。DMF
(10ml)中のO-ベンジルヒドロキシルアミン (6 g, 49 mmol)を滴下して加える前に混合物を30分間攪拌した。反応混合物を室温に温め、次いで終夜攪拌した。溶
媒を減圧下に除去し、残渣を酢酸エチルおよびブラインに分配した。有機層を1M 炭酸ナトリウム溶液で洗浄し、硫酸マグネシウムで乾燥し、ろ過して蒸発させた。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル,ジクロロメタン中5% メタノール)で精製した。所望の生成物を含む画分をプールし、蒸発させた。生成物をジエチルエーテルで粉砕し、わずかに着色した不純物を除いた。収量: 9.44 g (58%, ＞10:1 ジアステレオマーの混合物)

【００４５】¹ H-NMR; δ (CDCl₃, 主要なジアステレオマー), 10.26 (1H, s), 9.93 (1H, s),
8.32 (1H, m), 8.23 (1H, d, J = 8.2 Hz), 7.63 (1H, m), 7.25 (5H, m), 7.1
2 (1H, d, J = 9.2 Hz), 7.02 (1H, m), 4.94 (1H, d, J = 10.8 Hz), 4.76 (2H
, d, J = 3.8 Hz), 3.88 (1H, d, J = 5.5 Hz), 3.32 (3H, s), 2.91 (1H, m),
1.72 (1H, m), 1.55 (1H, m), 1.35 (1H, m), 1.02 (9H, s), 0.89 (3H, d, J =
6.5 Hz) および 0.85 (3H, d, J = 6.5Hz).

【００４６】工程 H: N¹-[2,2-ジメチル-1S-(ピリジン-2-イルカルバモイル)-プロピル]-N⁴-ヒドロキシ-2R-イソブチル-3S-メトキシ-スクシンアミド

【００４７】 N⁴-ベンジルオキシ-N¹-[2,2-ジメチル-1S-(ピリジン-2-イルカルバモイル)-プ
ロピル]-2R-イソブチル-3S-メトキシ-スクシンアミドをメタノール(75 ml)とエタノール(75 ml)の混合物中に溶解させ、アルゴン雰囲気下に置いた。木炭上の1
0%パラジウムを加え、水素ガスを２時間溶液中へ泡立たせ、そのときにはTLC分析により全ての出発物質は消費されたことを示した。システムをアルゴンで一掃
し、触媒をろ過して除去した。溶媒を減圧下に除去して表題化合物を白色固体と
して得た(8.8 g, 定量的;ジアステレオマーの12:1混合物)。

【００４８】 m.p. 163 - 164 ℃¹ H-NMR; δ ((CD₃)₂SO), 10.67 (1H, s), 10.13 (1H, s), 8.90 (1H, s), 8.15
(1H, m), 7.89 (1H, d, J = 8.4 Hz), 7.81 (1H, d, J = 8.8 Hz), 7.60 (1H, m
), 6.93 (1H, m), 4.53 (0.12H, d, J = 9.4 Hz), 4.43 (0.88H, d, J = 8.8 Hz
), 3.74 (0.12H, d, J = 10.0 Hz), 3.32 (0.88H, d, J = 9.8 Hz), 2.98 (0.3H
, s), 2.96 (2.64H, s), 2.78 (1H, m), 1.23 (2H, m), 0.84 (10H, s および m
), 0.65 (3H, d, J = 6.4 Hz) および 0.56 (3H, d, J = 6.3 Hz).

【００４９】¹³ C-NMR; δ (CD₃OD), 172.6, 170.0, 166.0, 151.5, 147.9, 136.0, 119.5, 11
3.6, 61.2, 60.6, 56.7, 46.2, 37.0, 34.0, 26.5, 25.2, 23.7 および 21.7. IR; v_max (KBr), 3255, 2957, 1700, 1645, 1524, 1467, 1435, 1370, 1301, 12
13 および 1152 cm^-1. 実測値: C 58.40, H 7.92, N 13.61%; C₂₀H₃₂N₄O₅ ・ 0.2H₂O での計算値 C 58.2
9, H 7.92, N 13.60%.

【００５０】生物学的実施例 A 間質性コラゲナーゼの阻害剤としての本発明の化合物の効力を、Cawston およ
び Barrett, (Anal. Biochem., 99, 340-345, 1979)の方法により測定した。それによれば、試験される化合物の 1mM 溶液、またはその希釈溶液を、37℃で16 時間、コラーゲンとコラゲナーゼと共に ( 25mM ヘペスで緩衝化された、 pH 7.
5、5mM CaCl₂、 0.05% ブリージ 35 および 0.02% NaN₃ を含む) インキュベートした。コラーゲンは、Cawston および Murphy, (Methods in Enzymology, 80,
711, 1981)［ここに参照として取りこむ］、の方法により調製されたアセチル化された ¹⁴C コラーゲンであった。サンプルを遠心分離して、消化されていないコラーゲン、および加水分解の基準としての、シンチレーションカウンターに
よるアッセイのために除かれた放射性の上澄みのアリコートを沈殿させた。試験
化合物の1mM、またはその希釈溶液の存在下におけるコラゲナーゼ活性を、阻害剤を欠くコントロール中の活性と比較し、その結果を、コラゲナーゼ活性 (IC₅₀ )の50% 阻害を引き起こす阻害剤濃度として、以下に示した。

【００５１】ストロメリシン−１の阻害剤としての本発明の化合物の効力は、Cawston ら (
Biochem. J., 195, 159-165, 1981)の方法により測定した。それによれば、試験
される化合物の1mM 溶液またはその希釈溶液を37℃で16時間、ストロメリシンと
¹⁴C アセチレートカゼインと共に(25mM ヘペスで緩衝化された、pH 7.5、5mM C
aCl₂, 0.05% ブリージ 35 および 0.02% NaN₃ を含む)インキュベートした。カゼインは、 Cawston ら (同じ引例)の方法により調製されたアセチル化された ¹ ⁴ C カゼインであった。試験化合物の 1mM 、またはその希釈溶液の存在下におけ
るストロメリシン活性を、阻害剤を欠くコントロール中の活性と比較し、その結
果を、ストロメリシン活性 (IC₅₀) の50% 阻害を引き起こす阻害剤濃度として、
以下に示した。

【００５２】 72 kDa ゼラチナーゼの阻害剤としての本発明の化合物の効力を、Sellers ら,
Biochem. J., 171, 493-496 (1979) の方法を基にした方法により測定した。72
kDa ゼラチナーゼはRPMI-7951 細胞由来であり、ゼラチン-アガロースクロマト
グラフィーにより精製した。酵素をアミノフェニル酢酸水銀と共にインキュベー
トして活性化し、約 0.05 単位を 50μg [¹⁴C]-放射能標識されたゼラチンと共に、適当な緩衝液中で16 時間37℃でインキュベートした。インキュベートの終末に、50μg ウシ血清アルブミンを、トリクロロ酢酸(最終濃度 16%) と共に、反応を終結させるために加え、未分解基質を沈殿させた。反応チューブを、10,0
00g で15 分間遠心分離する前に15分間氷上に置き、沈殿した基質を沈殿させた。反応上澄み液の200μl のアリコートを除去し、放射能活性を液体シンチレーションカウントにより測定した。阻害剤の効果を用量−応答曲線を参照にして決
定した。IC₅₀ (酵素活性において50% 減少を引き起こすのに必要な阻害剤濃度) を、データにカーブを合わせ、酵素の50% 阻害を達するのに必要な阻害剤濃度を
見積もることにより、得た。各々の IC₅₀ 決定のために、阻害剤の少なくとも８
つの濃度のゼラチナーゼ活性に関する効果を試験した。阻害剤をDMSO中に溶解さ
せ、希釈した。

【００５３】本発明の化合物の上記試験の結果は以下の通りである。

【表１】

【００５４】生物学的実施例 B 試験化合物の投与後の実験動物の血中の本発明の化合物の経時的濃度を測定し
た。

【００５５】化合物を処置群ごとに6匹のオスのラット(300g)に胃管栄養により投与した。血液サンプルを、投与後0.5、1.0、2.0、6.0 および 24 時間に、尾の静脈穿刺により除去した。 0.4 ml の血液を、抗凝結剤として0.1ml クエン酸デキストロ
ース (ACD)を含有する4.5ml チューブ中に置いた。抽出のため、3ml メタノール
を加え、沈殿した血液を遠心分離 (3000 rpmで30 分)により小さく丸めた。上澄
みの 2ml アリコートを除去し、凍結乾燥により濃縮した。抽出物を200μl のDM
SOと、コラゲナーゼ阻害活性をアッセイするための10μlのアリコート中に再溶解させた。抽出物における阻害活性は、上記の生物学的実施例Ａ中で記載したコ
ラゲナーゼアッセイを使用して測定し、阻害剤濃度(すなわち、薬物プラス活性代謝物)を標準カーブと比較して得た。その結果を ng/mlのピーク濃度として、0
.5〜24時間に渡る、ng/ml ×時間の血中濃度−時間曲線下面積 (AUC)として、IC ₅₀ の数 ×時間のAUCとして表した。結果

【００５６】

【表２】

【００５７】本発明の化合物はまた、キヌザルおよび健康なヒト有志者に経口投与して試験
し、著しいレベルの阻害活性がそのような投与の後でそれら被験者の血中におい
て検出された。

【００５８】生物学的実施例 C 本発明の化合物を癌の動物モデル２つにおいて試験し、活性であることが判明
した。

【００５９】 B16 マウス黒色腫モデルこのモデルにおいて、C57/BL6J マウスを、10⁵ B16 マウス黒色腫細胞で皮下接種した。腫瘍を18 日間成長させ、腫瘍の重量をカリパス測定および以下の式:
重量 (mg)− 長さ(mm)×広さ(mm)÷４により計算した。化合物を与えられるマウス(n=19)の一群に、 B16 腫瘍の逆の側面上に皮下に差し込んだミニ-浸透圧ポ
ンプにより投与した。ポンプを腫瘍接種の前日に差し込み、化合物を 360 μg/ 日の用量で与えた。対照群 (n=17)には、同一の差し込みポンプから適当な量の賦形剤を与えた。

【００６０】１８日後の対照腫瘍の平均重量は、1145±97 mg (図 15)であった。化合物で処理した腫瘍の重量は、774 ±50 mgであった。この減少(試験化合物について32
%)は著しかった(p＜0.005)。研究の終末におけるサンプルの評価は、血漿レベル
が試験化合物について26.8±3.2 ng/ml であったことを示している。

【００６１】 MDA-435 乳癌モデルこのモデルにおいて、動物にMDA-435 細胞(10⁶ 細胞/マウス)を接種し、腫瘍を４日間成長させ、次いで動物を腫瘍重量により３つの処理群(一群につきn=15)
に無作為化した。賦形剤または15 mg/ml もしくは60 mg/ml (それぞれ180 もしくは720 μg/マウス/日を与える)試験化合物のいずれかを含むミニ-ポンプを、５日目に手術して差し込んだ。ポンプを19日目に置き換え、研究を32日目に終了
した。180 μg/マウス/日で19% 阻害、720 μg/マウス/日で33%阻害という、腫瘍成長の用量-関連の阻害があった。より高用量での阻害は統計学的に著しかった(p＜0.005)。研究の終わりにおけるサンプルの評価は、血漿レベルが、それぞ
れ低用量および高用量群に対して99 ± 6 ng/mlおよび 136 ± 42 ng/mlであったことを示していた。

【００６２】生物学的実施例 D 本発明の化合物を、ラットにおける腱炎の観察可能な徴候を誘導する傾向を試
験した。本発明の化合物(「化合物A」) のラットにおける腱炎効果を、近い構造
の異性体、すなわち N¹-[2,2-ジメチル-1S-(ピリジン-3-イルカルバモイル)-プロピル]-N⁴-ヒドロキシ-2R-イソブチル-3S-ヒドロキシ-スクシンアミド(「化合物 B」)の効果と比べた。

【００６３】オスのルイスラットを使用した。各研究において、30匹までのラットを検量し
、体重に応じて群配分、n=6/群を無作為化した。各研究において、対応するビヒ
クル群を各処理した群との比較のために実施した。

【００６４】化合物A をそのメシレート塩として処方し、一方化合物 Bを遊離の塩基として
処方した。化合物 A ＠ 15mg/ml に対し、ビイヒクルは50% DMSO、37% 0.1M メタンスルホン酸、13% 滅菌水であった; ＠ 30mg/ml に対しては、ビヒクルは50%
DMSO、37% 0.2M メタンスルホン酸、13% 滅菌水であった。化合物 B ＠ 15mg/mlに対し、ビヒクルは50% DMSO/水であった。

【００６５】アルツェット（Alzet）(商標)浸透圧ミニポンプ(Alza Corp., Palo Alto CA 9
4303から、2ML2、 14 日、5μl/時間)を空の状態と満ちた状態で検量し、正確な
満ちた状態の用量の確認をした。注入の前に、満たされたポンプを37℃のインキ
ュベーター中に置いた。全ラットをハロタンで麻酔した。一度麻酔をかけると、
首筋を剃って消毒した。縦の皮膚切開を約 2 cm 長さで準備した部位に作り、皮
下ポケットを皮膚の下に一対の止血性鉗子を使用して作った。ミニポンプを傷か
ら遠ざけてポンプの出口に挿入した。切開傷を縫合で閉じ、傷の周りの領域を再
消毒した。手術の後、直ぐに全ラットに、横腹に鎮痛薬0.1mg/kg s.c.を投与した(テムジェニック（Temgesic）-商標- Reckitt and Colman)。麻酔から回復する際に、動物を、治癒する前に傷が塵のない状態を確かに保てるように乾燥した
寝藁のあるカゴに戻した。手術の次の日、全ラットを標準の寝藁に戻し、腱炎の
徴候をより正確に観察できるように、３つの群に収容した。

【００６６】ミニポンプの差し込みの後、ラットを検量し、腱炎の開始の可能性を監視した
。腱炎の開始および苦しさを得点システムを基に観察して測定した(以下参照)。
ラットを１６日間毎日観察した。平均得点＞２を著しいとみなした。使用した得
点システムは以下のとおりである:

【００６７】休息している：正常 0 １本足で休息している 1 足で休息していない 2

【００６８】動物の動きを刺激したときに示す：正常な動き 0 動くのをしぶる 1 不承不承動く 2 非常に不承不承動く 3

【００６９】足取り: 正常 0 1本の後ろ足の使用を避ける 1 両方の後ろ足の使用を避ける 2

【００７０】その結果、化合物Ａ(15mg/ml および 30mg/mlの両方で)およびビヒクルのみを
投与されたラットは、腱炎の著しい徴候を示さず、ところが化合物Ｂを投与した
ものは８日め以降著しい徴候を示した(８日めの＞２の平均スコアから１５日めおよび１６日めの約６に上昇）。

【００７１】上記の試験で化合物ＡとＢを投与されたラットは、ミニポンプからその化合物
の血漿暴露を受けていたことが確認された。血液サンプルを、ハロタンで尾血管
によって軽く麻酔されたラットからミニポンプ挿入後３日めおよび１０日めに得
た。血液サンプル(0.5ml)を3.0ml メタノール含有のチューブ内に入れ、遊離および結合した化合物を抽出した。化合物Ａまたは化合物Ｂの血液濃度を、クマリ
ンペプチド基質 Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH₂ (Mca = (7-メトキシクマリン-4-イル)アセチル、Dpa = N-3-(2,4-ジニトロフェニル)-L-2,3-ジアミノプロピル)(Knight ら、 FEBS Lett. 1992, 296, 263-266参照)を用いた蛍光分析
により測定した。挿入後１６または１７日のいずれかに、試験を終了し、ラット
をハロタンで末端麻酔をかけ、血液サンプル(0.5ml)を心臓穿刺により取り、化合物Ａまたは化合物Ｂの血液濃度を測定した。

【００７２】生物学的実施例 E 本発明の化合物の効果をGBSの動物モデルにおいてテストした。実験的自己免疫性神経炎(EAN)は、T 細胞媒介性であり、末梢神経系の自己免疫性障害である。モデルは、GBSの病理学的特徴である、失調症、虚弱および麻痺の徴候を示した。EAN は、動物に、末梢神経からミエリンまたは、補助剤中に
、プロテイン 0のようなミエリンのタンパク質成分を注入されたとき、誘発され
うる。EAN 障害は脊髄根および末梢神経中で起こり、脈管周囲の単核細胞湿潤、
軸索の髄鞘脱落および神経伝達不足を特徴とする。TNFαは、GBS および EANの症状に関与している；TNFαレベルはGBS 患者の血液中において高くなり、抗-TN
Fα抗体がEAN中の疾患のつらさを減少させる (Hartung HP. Annals of Neurolog
y 1993;33:563-567.)。

【００７３】本発明の化合物をラット EANモデルにおいてテストした。その際、疾患の症状
が補助剤中の末梢神経性ミエリンを注入することにより誘導された。

【００７４】化合物を15 または30 mg/mlで、5 μl/時間(生物学的実施例 D参照)の速度で、それぞれ７および１４mg/kg/日で運んで、外科的に挿入したミニポンプから投
与した。１〜１５日の実験のクールの間中にわたるその化合物での処理により、
用量依存性な様式で臨床的症状の発生が著しく減じられた。その化合物はまた、
EAN モデルにおいても、8-15 日めに、15 または30 mg/ml で、10 μl/時間の速
度で治療的に与えられ、それぞれ14および28 mg/kg/日で届けたときに、用量依存性な様式で臨床的症状を減じた。

【００７５】生物学的実施例 F MSの実験モデルにおける本発明の化合物の活性: 方法 Matyszak およびPerryにより記載されたＭＳの遅延型過敏症モデルを使用した
(Matyszak MK & Perry VH. 1995、Demyelination in the central nervous syst
em following a delayed type hypersensitivity response to bacillus Calmet
te-Guerin. Neuroscience 64:967-977)。オスのルイスラットを麻酔し、10⁵の熱
殺傷した杆菌カルメット-ゲラン(BCG)生物を含むリン酸緩衝塩水溶液 1μl を、
左半球の線条に注入した。BCG を27G、10μl 容量シリンジを用いて、定位的に注入した。注入のコーディネートは；前頂＋1.2mm、側面 +3.0mm および深さ
4.5mmであった。４週間後、10⁷ の熱殺傷した BCG 生物を完全なフロイントアジ
ュバント中に含む200μlの溶液を内皮的に後ろ肢に注入した。さらなる15日の後
、ラットにタイプIIホースラディッシュペルオキシダーゼ(HRP) 2750Uを静注した。３０分後、ラットをペントバルビトンナトリウムで深く麻酔をかけ、5000U/
L ヘパリン含有100ml の0.9% (w/v) NaClで、次いで２％パラホルムアルデヒドおよび０．０５％グルタルアルデヒドを含有するパラホルムアルデヒド-リジン-
過ヨウ素酸塩固定液(PLP) 200mlでトランスカジュアル（transcardially）に灌流された。脳は、ティシュ-テック O.C.T. (miles inc Elkhart USA)中に固定さ
れ、液体窒素中で冷凍される前に、除去され、さらに４時間PLP中で後固定し、３０％ショ糖中で終夜４℃で浸漬することにより凍結防止された。冠状の流動性
50um の厚い切片をHanker-Yates 法 (Perry VH ら、1992)のHRP 定位用に切断した。

【００７６】この方法では、BCGの定位注入部位で遅延型過敏症反応を生じ、特徴としては：HRPの血管外の存在による染色により示される血液-脳関門の局所的損傷;高分子量型の白血球共通抗原に特異的な抗体 OX-22で染色されることにより示される
リンパ球の浸潤; クラスII主要組織適合抗原に特異的な抗体 OX-6で染色されることにより示される白血球の活性化;およびミエリン塩基性タンパク質への抗体で染色されることにより示されるミエリン損傷である。これら特徴は、ＭＳを有
する患者の中枢神経系に見られる活性な障害または溶血班の顕著な特徴である。

【００７７】リンパ球を、染色の最も激しい部位中の OX-22 陽性細胞の数を数えることにより、数え上げた。画一的な視野中の細胞の数を記録し、細胞/mm² で表した。M
HC クラス II 発現の面積、血液脳関門漏出および髄鞘脱落を、画像解析補助されたコンピューターを用いて計算し、mm²として表わされたデータを出力した。

【００７８】ラットを、ＢＣＧの第２の注入後５日から始まり、１５日まで連続して30mg/k
gで１日２回経口投与処理して、本発明の化合物の効果を評価した。本発明の化合物を、0.01% Tween 80を含むリン酸緩衝塩水ビヒクル中に処方した。対照の動
物にはビヒクルのみを与えた。

【００７９】本発明の化合物で処理した動物中の血管-脳関門漏出、MHCクラスII 発現、髄鞘脱落の面積およびＴ細胞の数を、スチューデントのｔ検定を用い、ビヒクル処
理した対照と比較した。

【００８０】結果賦形剤処理した動物において、DTH 応答は、血液-脳関門の破損、リンパ球の浸潤、MHCクラスII発現および髄鞘脱落が特徴である。本発明の化合物で処理した動物中では、血液-脳関門漏出(p＜0.05)の面積およびＴ細胞の浸潤(p＜0.0001
)の数に著しい減少があった。髄鞘脱落およびMHC クラスII発現の面積における減少が見られ、しかし統計学的な有意性には達しなかった。

【００８１】ＭＳのＤＴＨモデルにおける本発明の化合物の効果:

【表３】

【００８２】価は平均±平均の標準偏差である。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号ＦＩテーマコート゛(参考）Ａ６１Ｐ 25/02 Ａ６１Ｐ 25/02 29/00 １０１ 29/00 １０１ 35/00 35/00 (72)発明者ウィッタカー，マークイギリス国、オーエックス４５エルワイオックスフォード、カウリー、ウォトリントンロード（番地なし）ブリティッシュバイオテックファーマシューティカルズリミテッド (72)発明者ミラー，アンドリューイギリス国、オーエックス４５エルワイオックスフォード、カウリー、ウォトリントンロード（番地なし）ブリティッシュバイオテックファーマシューティカルズリミテッド (72)発明者マーティン，フィオナ，ミッチェルイギリス国、オーエックス４５エルワイオックスフォード、カウリー、ウォトリントンロード（番地なし）ブリティッシュバイオテックファーマシューティカルズリミテッドＦターム(参考） 4C055 AA01 BA53 BB10 CA01 DA01 FA01 FA32 4C086 BC17 MA01 MA04 MA52 NA06 NA14 ZA02 ZA20 ZA89 ZB02 ZB15 ZB26 ZC20

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】式(II) 【化１】のN¹-[2,2-ジメチル-1S-(ピリジン-2-イルカルバモイル)-プロピル]-N⁴-ヒドロキシ-2R-イソブチル-3S-メトキシ-スクシンアミドまたはその医薬的に許容な塩、水和物もしくは溶媒和物。
【請求項２】 N¹-[2,2-ジメチル-1S-(ピリジン-2-イルカルバモイル)-プロ
ピル]-N⁴-ヒドロキシ-2R-イソブチル-3S-メトキシ-スクシンアミドまたはその医
薬的に許容な塩、水和物もしくは溶媒和物、医薬的に許容な担体とからなる医薬
組成物。
【請求項３】経口投与用に適用される請求項２で請求された組成物。
【請求項４】ヒトを含む哺乳動物における、慢性関節リューマチ、癌、多
発性硬化症、ギラン-バレー症候群または乾癬の治療のための医薬組成物の製造における、N¹-[2,2-ジメチル-1S-(ピリジン-2-イルカルバモイル)-プロピル]-N⁴ -ヒドロキシ-2R-イソブチル-3S-メトキシ-スクシンアミドまたはその医薬的に許
容な塩、水和物もしくは溶媒和物の使用。
【請求項５】下記疾患の症候学および／または病理学上徴候を減少させる
ために有効な量のN¹-[2,2-ジメチル-1S-(ピリジン-2-イルカルバモイル)-プロピ
ル]-N⁴-ヒドロキシ-2R-イソブチル-3S-メトキシ-スクシンアミドまたはその医薬
的に許容な塩、水和物もしくは溶媒和物を哺乳動物に投与することからなる、ヒ
トを含む哺乳動物における、慢性関節リューマチ、癌、多発性硬化症、ギラン- バレー症候群または乾癬の治療方法。