JP2000506152A - ポリキラント類、金属イオン類とのそれらの錯体類、それらの製造法及びそれらの用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 本発明は、新しいクラスのポリキラント類、金属イオン類とのそれらのキレート及び生理学的に許容されるそれらの塩類に関し、特殊な組織類、器官類又は体画分類のための一般的又は特異な造影剤として、診断画像化のために、そのまま、又は他の成分と組合せて若しくは配合してのいずれかで用いられる。

Description

【発明の詳細な説明】 ポリキラント類、金属イオン類とのそれらの錯体類、 それらの製造法及びそれらの用途 本発明は、新しいクラスのポリキラント類、それらの金属イオン類とのキレー ト類及びそれらの生理学的に許容される塩類に関し、これらは、特別な組織、器 官又は体区画のための一般的又は特異な造影剤として、診断画像化用に単独、又 は他の成分と組み合わせて若しくは配合物としてのいずれかで用いられる。 この新しいクラスの造影剤は、キラント又は金属イオンのキレートを、該キラ ント／キレートがアルキレン架橋を経て一つ以上の第一級アミノ基を有する有機 の「骨格」よりなる「担体」に共有結合することによって得られる分子又は高分 子によって構成される。このクラスは、「担体」の少なくとも一つ、又は、好適 には、二つ以上の第一級アミノ基が、該キラント又は金属キレート又はこれらの 塩を有するアルキレン残基によって二官能基化され、他方、残りのいずれかの第 一級アミノ基は、遊離の形（塩化されているか、若しくは塩化されないていない ）又は該キラント／キレート残基で一官能基化されている事実によって特徴付け られている。このクラスの造影剤は、一般に、担体に存在する第一級アミノ基に 結合している、一分子当たり高い数のキラント／キレートを有している。実際に 、この担体の構造及び該アミノ基の反応性により異なるが、２個までのキラント ／キレート残基は、それぞれの第一級アミノ基に結合することができる。 この発明は、該分子の製造法、及びそれらの用途にも関する。 キレート化剤及び適切な金属イオンから形成される錯体は、核医学及び磁気共 鳴画像化（ＭＲＩ）の両者に使用される。核医学において、放射性金属キレート は、診断（シンチグラフィー、ＰＥＴ又は陽電子放出断層撮影法）及び治療の両 者に用いられる。核医学において、例えば抗体のような高い生物特異性を有する 高分子及び、比較的最近では、ポリペプチドが広く使用されている。この後者の 場合、ポリペプチドは、生物学的に活性なポリペプチドの類似化合物（アゴニス ト及びアンタゴニストの両者）である。この研究方法の一例は、オクトレオスカ ン（Octreoscan）、及び神経内分泌起源の腫瘍を可視化及び局在化するために開 発された¹¹¹Ｉｎ⁽⁺³⁾の錯体を含むソマトスタチン誘導体である。これらの誘 導体によって提起される問題は、担体（アドレスとも言われる）高分子の本来の 生物活性に関し、その用量は、認め得る薬理作用を呈することなしに、調査して いる器官の改良された可視化を提供するようなものでなければならない。担体分 子に、診断的に有効な部位数を増加させる可能性は、同じ診断効果を得るのに要 求される用量の低下、したがって、その分子の薬理学的活性に関連した望ましく ない作用の可能性を低下させる。この問題は、アミノ基、特に受容体認識又は生 物学的活性に要求されるアミノ基の数を変更しないことが必要な場合に、比較的 重要になる。例えば、インスリンのＢ２９位にあるリシンのε−アミノ基は、生 物学的活性を弱めることなしに改質されるが、α−アミノ基は、活性を変更する ことなしには改質されないことが知られている。本発明は、アミノ基置換の度合 いを最大して、この問題を回避することができ、かくして、例えばＭＲＩのよう な、低い感度によって特徴付けられている診断技術に非常に有利である。 ＭＲＩのための生物特異性の造影剤の製造において、最も一般的な研究方法は 、第一に、蛋白及びポリリシンのような高分子を、リシンのε−アミノ基と抱合 し得る官能基を有するキレート化剤と反応させ、好適にはアミド又は類似の結合 を形成させ、次いで生成した化合物をガドリニウムと錯体化することである（例 えば、Ogan et al.，Invest．Radiol.，1987，22，665-671）。しかしながら、 この研究方法では、担体のアミノ基当り１個以上のキラント単位を結合すること は可能でなかった。実際に、蛋白当りのキラント基の総数は、分子上での理論的 に官能基化され得るアミノ基の総数と比較した場合に、一般に極端に低い。例え ば、ルイスら（Lewis et al.）は、Ｎ−ヒドロキシスルホスクシンイミドによる 活性化を経て、シトクロムｃへの造影剤ＤＯＴＡ(１，４，７，１０−テトラア ザシクロドデカン−Ｎ,Ｎ’,Ｎ”,Ｎ”’−四酢酸)の抱合を報告している（Bioc onj.Chem.，1994，5，565-576）。ＤＯＴＡの活性エステルとシトクロムｃとの モル比を１０：１から１００：１に増加すると、１９個の利用できる第一級アミ ノ基の総数の、キレート化される蛋白に結合した基の平均数は２．６４から８． ７９に増加することになる。 更に、ガドリウムと引き続く錯体形成は、同じことが定量的に起こることを保 証しない。全体の結果は、全部ではなく、アミノ基がキレート化される基で官能 基化されること、及び全部ではないが導入されたキレート化される基がガドリニ ウムで飽和されることである。この技術分野の状態は、いずれも、可能な最大の キレート化を得るような方法で、形成されたキレート又はそれらの塩で、問題の 高分子の遊離アミノ基を直接結合することを教示していない。この点で、例えば 、以下の資料を引用することが可能である：米国特許第4,855,353号、欧州特許 第Ａ-481526号、欧州特許第Ａ-243929号、欧州特許第Ａ-255471号、ＷＯ第95144 91号、英国特許第Ｂ2169598号、欧州特許第Ａ-038546号、ＷＯ第9014881号。結 果として、該造影剤の診断的に至適な用量は多量の高分子担体を含み、その結果 、望ましくない生物学的作用が起こり得る。実質的に低い用量の高分子担体を有 する金属キレートの有効な用量を輸送できることが強く望まれている。 本発明は、担体構造上に存在する第一級アミノ基のそれぞれに、キラントの２ 単位まで、又は、より良好には、その金属錯体を直接に結合させることによって 、この問題を解決する。この構造は、例えば、蛋白のような高分子、ポリマー又 はペプチド、アミノ酸又は単純なアミン又はポリアミンでさえあり得る。この発 明のこの点は、アドレス分子の一つ以上の第一級アミノ基が、生物活性又は組織 器官特異性を保持するように（例えば、適切で容易に除去される保護によって） 維持されなければならない場合に、特に有用である（上記で引用したインスリン の場合を参照）。これらの場合においても、適切なキラント／キレート基を有す る担体の他の第一級アミノ基の、本発明の教示によるジアルキル化は、この技術 分野の現在の状態によって得られるそれよりも大きく、分子当り多数の診断的又 は治療的活性部位を生じる。 同じことはポリアミノ担体にも言われ、この場合、例えば、第一級アミノ基は 等しく立体的に受け入れられないので、それらは、全部ではないが改質される。 この場合にも、また、反応性の第一級アミノ基当りの二つのキラント／キレート 残基を結合する可能性は、現在の既知の方法によって得られるものよりも効果的 に、最終生成物が得られるようになる。この技術状態からの一例は、上記で引用 した特許出願ＷＯ第9514491号によって与えられ、この特許は内皮構造を選択的 に可視化できるように１：１イオン対のＧｄ−ＤＴＰＡ−リシン及びデルマタン 硫酸（ページ７７の実施例において）に基づいた診断薬の製造を報告している。 この場合にも、キラント／キレート残基及びリシン上のアミノ基の間の比は１よ りも大きい（二つのリシンの第一級アミノ基に対して、実際に唯一つのキレート 基が存在する）。対照的に、本発明の方法により、少なくとも二つのアミノ基の 一つに、二つのキラント／キレート残基、又は第一級アミノ基のそれぞれ一つに 、二つのキラント／キレート残基（２個のアミノ基に対して総計４個のキラント ／キレート基、下記の実施例３〜６を参照）を有するリシン誘導体を得ることが 可能であり、次のような利点がある： ａ）同じ診断効果を得るために必要なデルマタン硫酸の量は、少なくとも半分で あり、したがって、その抗凝血作用も半分であり、 ｂ）生成したイオン対は、この場合、アミノ基が(ＷＯ第9514491号におけるよう に)アシル化されず、アルキル化されるので、リシン誘導体の高い陽電荷によっ て安定化される。 更に、本発明は、Ｇｄイオン数に基づいて計算した場合にも、一重キレートの 値よりも増加した緩和度ｒ₁を有する多重Ｇｄキレートへの利用を許す。キレー トが高分子にグラフトされる場合に、ｒ₁における増加が期待される；例えば、 ガドリニウム基準当りｒ₁＝１９mM^-1ｓ^-1を有する、実施例１２のミオグロビン 抱合体は、Ｇｄ−ＤＯＴＡのｒ₁値（文献上で３．４mM^-1ｓ^-1：例えば、Lauffer R.B．（1990）Magn．Reson．Quart．2，65-84）と比較される。しかしながら、 本発明者は、緩和性が大きく、比較的低分子量の多重Ｇｄキレートを調製すこと も可能であることを示す（参照：実施例６のリシン誘導体、その緩和性は、ガド リニウム基準当りＧｄ−ＤＯＴＡの３．４から８．３５mM^-1ｓ^-1に２倍以上であ る）。この効果は、キレート化したＧｄイオンの増加数と組み合わせる時、非常 に高い分子の緩和性が得られ、効果的な用量の必然的な実質的低下を伴う。 したがって、本発明の目的は、ｍ個（ｍは１〜１，０００の数である）の第一 級アミノ基を有する有機の骨格から誘導される新しいクラスのポリキラント／ポ リキレート及び、それらの生物学的に適合し得る塩であり、該アミノ基は、ｎ個 （ｎは２〜２ｍの数である）のキラント／キレート残基でアルキル化され、該キ ラント／キレート残基は、脂肪族鎖によって該アミノ基に共有結合され、この鎖 は、Ｏ、Ｎ、Ｓから選ばれるヘテロ原子、又は、カルボニル、チオカルボニル、 アミド、エステル、チオウレア及びチオアミドから選ばれる基又は芳香族基で中 断されているか又は中断されておらず、ｐ個（ｐは、０〜ｍ−１の数である）の 該アミノ基は官能基化されず、該化合物は、該第一級アミノ基の少なくとも一つ が、２個の該キラント／キレート残基でジアルキル化される事実によって特徴付 けられる。 結果として、分子上のキラント／キレート残基の数（ｎ）は、アルキル化され た第一級アミノ基（ｍ−ｐに相当する）よりも常に大きい。数式で、この状態は 、次の不等式： ｎ＞ｍ−ｐ、 （式中、ｍ、ｎ及びｐは、上記の意義を有する）によって表される。 換言すれば、「担体」に挿入されたキラント／キレート残基の数及びアルキル化 （モノ及びジアルキル化）された第一級アミノ基の総数との間の比としてρを定 義すると、該比は１よりも常に大きくなければならない、すなわち： ρ＝ｎ／（ｍ−ｐ）＞１。 更に、第一級アミノ基当りのキラント／キレート基の最大の可能な数は２であ るので、ρも、また、この値より大きくはあり得〜たがって、次のようになる： このパラメーターρは、キラント／キレート残基を担体の第一級アミノ基に結 合させる化学結合の型と一緒に、この発明の主要な特性値であり、ρが常に１で ある技術状態から同じものを区別する。 ２０〜３１、又は３９、４２、４３、４４、４９、又は５７〜８３の原子番号 を有する元素の２価又は３価のイオンと、各種キラントの錯体、及びそれらの生 理学的に適合し得る塩も本発明の一部である。特に、Ｆｅ⁽²⁺⁾、Ｆｅ⁽³⁺⁾、Ｃｕ⁽²⁺⁾ 、Ｃｒ⁽³⁺⁾、Ｇｄ⁽³⁺⁾、Ｅｕ⁽³⁺⁾、Ｄｙ⁽³⁺⁾、Ｌａ⁽³⁺⁾、Ｙｂ⁽³⁺⁾若しくは Ｍｎ⁽²⁺⁾、又は以下の放射性同位元素⁵¹Ｃｒ、⁶⁷Ｇａ、⁶⁸Ｇａ、¹¹¹Ｉn、^99mＴ ｃ、¹⁴⁰Ｌａ、¹⁷⁵Ｙｂ、¹⁵³Ｓｍ、¹⁶⁶Ｈｏ、⁹⁰Ｙ、¹⁴⁹Ｐｍ、¹⁷⁷Ｌｕ、⁴⁷Ｓｃ、¹⁴² Ｐｒ、¹⁵⁹Ｇｄ、²¹²Ｂｉは好ましい。 したがって、本発明の目的は、下記式：〔式中、Ｌは、有機の骨格であり、 Ｆは、−(ＣＨ₂)_q−Ｔ−Ｋ残基（ここで、Ｔは、単結合、又は、Ｏ、Ｎ、Ｓか ら選ばれる一つ以上のヘテロ原子、又はカルボニル、チオカルボニル、アミド、 エステル、チオウレア若しくはチオアミド基から選ばれる官能基又は芳香族残基 で中断されているか、又は中断されていない脂肪族鎖であり、該鎖は、残基Ｋの Ｃ、Ｏ、Ｎ又はＰ原子に共有結合され、 Ｋは、直鎖状又は環状のポリアミノポリカルボン酸若しくはポリアミノポリホ スホン酸若しくはポリアミノポリリン酸若しくはポリアミノポリホスフィン酸の キラントの残基、又はその金属キレートの残基若しくはその塩の残基であり、 ｑは、１〜１０の整数である）であり、 ｐは、０〜ｍ−１の数であり、 ｚは、０〜ｍ−１の数であり、 ｘは、１〜ｍの数であり（ここで、ｍは、１〜１，０００の数であり、ｍは、 Ｌに由来する第一級アミノ基の総数であるが、但し、ｐ＋ｘ＋ｚ＝ｍである）で あり、そして キレート化金属イオンは、２価又は３価の常磁性イオン又は放射性同位元素で ある〕のポリキラント又はポリキレート及び生物学的に許容される塩である。 好ましい化合物の第一のクラスは： Ｌが、スペルミジン、スペルミン、ノルスペルミジン、４，９−ジオキサドデ カンジアミン、３，６−ジオキサオクタンジアミン、エタノールアミン及びその 同族体類、ホスファチジル−エタノールアミン及びその同族体類、スフィンゴジ ン、アルキルアミン類、アルキレンジアミン類、ジエチレントリアミン、トリエ チレンテトラミン、トリス（２−アミノエチル）アミン、ジェファミン、Ｎ−グ ルコサミン、リシン及び誘導体類、オルニチン、グリシン、アミノ酪酸、アミノ カプロン酸、タウリン及びその誘導体類、〔Ｌｙｓ³〕−ボンベシン、インスリ ン、キモトリプシノーゲンＡ、ミオグロビン、アルブミン、シトクロムｃ、分岐 状及び直鎖状のポリリシン、分岐状及び直鎖状のポリオルニチン、アミノ糖類、 ポリペプチド類、ホルモン類、成長因子類、抗体によりなる群から選ばれ； Ｔは、単結合、又は、エステル、アミド若しくはカルボニルアミノ基を含む脂 肪族基であり、該鎖は、 Ｋ残基の窒素又は炭素原子に共有結合され； Ｋは、ＥＤＴＡ、ＤＴＰＡ、ＢＯＰＴＡ、ＥＯＢ−ＤＴＰＡ、ＤＯＴＡ、それ らの誘導体類、それらの金属キレート類又は塩類よりなる群から選ばれるポリア ミノポリカルボン酸の残基である、化合物よりなり、 −金属イオンキレートは、２０〜３１、又は３９、４２、４３、４４、４９、又 は５７〜８３の原子番号を有する元素の２−又は３価のイオン、又は、以下の同 位元素：⁵¹Ｃｒ、⁶⁷Ｇａ、⁶⁸Ｇａ、 ¹¹¹Ｉn、^99mＴｃ、 ¹⁴⁰Ｌａ、¹⁷⁵Ｙｂ、¹⁵³ Ｓｍ、¹⁶⁶Ｈｏ、⁹⁰Ｙ、¹⁴⁹Ｐｍ、¹⁷⁷Ｌｕ、⁴⁷Ｓｃ、¹⁴²Ｐｒ、¹⁵⁹Ｇｄ、²¹²Ｂｉ のイオンから選ばれる。 第二のクラスの好ましい化合物は、Ｆが、式（Ｉ）： 又は式（II）： 〔式中、 Ａは、単結合、又は、−(ＣＨ₂)_SＲ₁−基（ここで、ｓは、１〜５の整数であ り、Ｒ₁は、単結合、又は、ＣＯＮＨ、ＮＨＣＯ、ＮＨＣＳＮＨ、 Ｃ₆Ｈ₄ＮＨＣＳＮＨ、ＣＯＯ、ＯＣＯ、Ｏ、Ｓに等しい）に相当し、 Ｂは、−Ｄ−(ＣＨ₂)_t−（ここで、ｔは、１〜９の整数であり、Ｄは、単結合 、又は、−Ｏ−、−ＮＨ−に等しい）に相当し、 各々の化合物におけるＲは、Ｈ若しくはＣＨ₃若しくはＣＨ₂−Ｏ−Ｂｚ又は下 記式： の基若しくはそれらのいずれかの組合せであってもよい〕のキラント残基である 化合物、並びに、それらの金属キレート又はそれらの塩である。 第三のクラスの好ましい化合物は、式（III）若しくは（IV）： は式（Ｖ）若しくは（VI）：又はそれらの塩の残基である。 第四のクラスの好ましい化合物は、以下の化合物： （上記式中、 Ｆは、式（III）：のキラント残基、又は式（IV）： のキレート、又はそれらの塩である）である。その他の好ましい化合物は、Ｆが 式（III）又は（IV）の残基であり、Ｌが、〔Ｌｙｓ³〕−ボンベシン、インスリ ン、ミオグロビン、アルブミン、シトクロムｃ、キモトリプシノーゲンＡ、ポリ リシンによりなる群から選ばれる化合物である。 この発明の化合物の構造を明らかにするために、例として、下記の式（Ａ）： （式中、Ｌ、Ｋ、Ｔは、上記と同義である）において、本発明の目的であるポリ キラント／ポリキレート誘導体の構造が図式化される。式（Ａ）で図式化された 生成物は、２個の第一級アミノ基を有し（ｍ＝２）、その一つは２個のＫ−Ｔ− ＣＨ₂−残基でジアルキル化された有機の骨格（Ｌ）から出発して得られる。し たがって、得られた化合物は、窒素原子上に二つのキラント／キレート部分（ｎ ＝２）及び一つの遊離アミノ基（ｐ＝１）を有している。ｍ−ｐは１に等しいの で、したがってｎ＞ｍ−ｐである。結果として、ρ＝２である。この型の生 成物は、実施例４に記載されている。 同様にして、下記の式（Ｂ）： において、本発明の目的であるポリキラント／ポリキレートの構造が、図式化さ れ、１９個の第一級アミノ基を有する（ｍ＝１９）ポリアミンの有機の骨格（Ｌ ）から出発して得られる。 該骨格（Ｌ）は、１５個のＫ−Ｔ−ＣＨ₂−残基でアルキル化された。得られ た化合物は、９個の遊離アミノ基（ｐ＝９）及び総計で１５個のアルキレン基（ ｎ＝１５）を有する。ｍ−ｐは１０に等しいので、したがってｎ＞ｍ−ｐ及びρ ＝１．５、すなわち＞１である。この型の生成物は、実施例１０に記載されてい る。 本発明の化合物は、例えば、この技術分野に精通している技術者に既知である いずれかの合成法によって、アルキルハロゲン化物によるアルキル化のような第 一級アミンのアルキル化で得られる。それにもかかわらず、本発明者は、驚くべ きことであるが、この技術分野の状態で広く行われている教義とは対照的に、還 元アルキル化も有用な方法であり、この発明の目的である第三級アミンの製造に 特に有効であることを発見した。実際、膨大な文献が存在し(G.E.Meares & R.E. Feeney，Anal．Biochem．224，1-16，1995）、その中に、適切な還元剤の存在下 に、各種のアルデヒドと蛋白との結合に還元的アルキル化の使用が記載されてい る。しかしながら、一般的には、ホルムアルデヒドの唯一の例外はあるが、第三 級アミンの形成は観察されていない。これは、アミンとアルデヒドの間の相互の 立体障害に起因するものである。最近、グリシンのような余り立体障害を受けて いないアミンでは、第三級アミンの形成が反応の副生成物として起こり得るが、 非常に低い率であることが報告されている(J.-P.Sanietal.,Tetrahedron Lett.3 5，1181-1184，1994）。キレート化剤のアルデヒド誘導体による蛋白の還元アル キル化が記載されている極く最近の論文においてさえも、各種の実験パラメータ ーの注意深い至適化にも拘らず、二重のアルキル化は報告されていない（V.V.So mayaji et al.，Appl．Radiat．Isot．47(1)，71-77，1996）。これに反して、 本発明者は、驚くべきことであるが、特別な実験条件の下では、二つの試薬の立 体障害は、もはや制限因子でないことを発見した。すなわち、第三級アミンは、 大きなアルデヒドが原料として用いられ、第一級アミノ基が高分子に属している 場合にも好収率で得られる。 一般に、上記のような脂肪族鎖によって、キラント残基、又はそのキレートの 一つ、若しくは塩に結合されたアルデヒドは、第一級アミノ基の数の３〜４０倍 の過剰モルであることが重要である。 特に、本発明の方法は、式（VII）： （式中、 Ｋ、Ｔ、ｑは、上記と同義である）のキラント化合物、又はそのキレート又は 塩の一つと、式（VIII）： （式中、 Ｌ及びｍは、上記と同義である）のポリアミノ化合物との反応であり、反応媒 体中、ｉ）式（VII）の化合物が、ｍ個の第一級アミノ基に関して３〜４０倍の 過剰モルであり、ii）反応が、イミン結合に特異的であるが、アルデヒドには特 異的でない還元剤の存在下で行われる事実によって特徴付けられる還元アミノ化 の条件下に行われ、還元剤は、原料の第一級アミノ基に関して３〜６０倍の過剰 である。 好適には、該反応媒体は、以下の媒体：pH５〜１０の緩衝水溶液、低分子量ア ルコール、非プロトン性双極性溶媒、又はこれらの混合溶媒から選ばれ、反応温 度は、２〜１７０時間の長さにより異なるが、−５〜６０℃である。 本発明の方法の、第一の特に好ましい実態は、 −第一級アミノ基の総数に関して、約１０〜３５倍の過剰モルでの式（VII）の 金属キレート化合物、又はその塩の一つの使用； −反応媒体は、pH７〜９の緩衝水溶液、又はメタノール、又はこの二つの混合溶 媒である； −還元剤は、水素化シアノホウ素ナトリウムである； −温度は、１５〜３０℃の間で変わる； −反応時間は、１０〜７２時間である。 本発明の方法の、第二の特に好ましい実態において、還元アルキル化反応は、 上記のように、式（VII）のキラントと式（VIII）のポリアミノ化合物との間で 起こり、次いで、関連する金属錯体及び／又はその塩の一つが形成する。 本発明の化合物の製造に好ましい中間体のアルデヒドは、下記の式（Ｉａ）又 は式（IIａ）： 〔式中、 Ａは、単結合、又は−（ＣＨ₂）_sＲ₁−基（ここで、ｓは、１〜５の整数 であり、Ｒ₁は、単結合であるか又はＣＯＮＨ、ＮＨＣＯ、ＮＨＣＳＮＨ、Ｃ₆Ｈ₄ ＮＨＣＳＮＨ、ＣＯＯ、ＯＣＯ、Ｏ、Ｓに等しい）に相当し、 Ｂは、−Ｄ−(ＣＨ₂)_t−（ここで、ｔは、１〜９の整数であり、Ｄは、単結合 であるか又は−Ｏ−、−ＮＨ−に等しい）に相当し、 Ｒは、Ｈ、又は、−ＣＨ−Ｏ−Ｂｚ若しくは下記式： の基であるが、但し、Ｒ置換基の一つだけは水素でなくてもよい〕の化合物であ り、該化合物（Ｉａ）及び（IIａ）は、上記の金属イオンから選ばれる２価又は ３価の金属イオンを有するキラント又は錯体としてのいずれか、又はそれらの塩 の一つである。 式（IIIａ）〜（VIａ）の以下の中間体は特に好ましい： １０−〔２−オキソ−２−〔（３−オキソプロピル）アミノ〕エチル〕−１，４ ，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸（IIIａ）： 及びその関連する式（IVａ）： のガドリニウム錯体、３，６，９，１２−テトラアザ−１１，１５−ジオキソ− ３，６，９−トリス（カルボキシメチル）ペンタデカン酸（Ｖａ）：及びその関連する式（VIａ）： のガドリニウム錯体、及びそれらの塩。 式（Ｉａ）、（IIａ）のキラント類、又はそれらの金属錯体類が挿入される、 特に好ましい担体は、アミノ誘導体類、例えば、第一級アミン類及びポリアミン 類、アミノ酸類、ポリペプチド類、ポリアミノ酸類、蛋白類、抗体類、アミノ糖 類及び第一級アミノ基類又はそれらの誘導体類を含む直鎖状又は分岐状のポリマ ー類である。 特に好ましいアミン類は、例えば、スペルミジン、スペルミン、エタノールア ミン、ホスファチジル−エタノールアミン及びその誘導体類、スフィンゴシン、 ジエチレントリアミン、アルキルアミン類、アルキレンジアミン類、トリス（２ −アミノエチル）アミン、ジェファミン、Ｎ−グルコサミンである。 特に好ましいアミノ酸類は、リシン、オルニチン、グリシン、４−アミノ酪酸 、アミノカプロン酸、タウリンである。 特に好ましい高分子は、〔Ｌｙｓ³〕−ボンベシン、インスリン、キモトリプ シノーゲンＡ、ミオグロビン、アルブミン、シトクロムｃ、分岐状及び直鎖状の ポリリシン類、分岐状及び直鎖状のポリオルニチン、ホルモン類、成長因子類で ある。 式（IVａ）及び（VIａ）の化合物類と、上記で定義されたアミノ誘導体類との 反応によって得られる生成物類は、特に好ましい。 この発明の好ましい中間体類の製造は、以下のスキーム１及び２に略記され、 これらの場合、式（Ｉａ）及び（IIａ）の化合物において、Ｒ基はＨに等しく、 基Ａは、それぞれ、−ＣＨ₂ＣＯＮＨ−（１ｂを経て）及び単結合（１ａを経て ）に相当し、Ｂは、式（Ｉａ）及び（IIａ）で上記に定義されたものである。 スキーム１ スキーム１に示した方法は、以下のように要約される： −式Ｘ−Ａ−Ｂ−Ｙ〔式中、Ａは、不存在（図式１ａ、Ａ＝単結合）であるか又 は存在（図式１ｂ、Ａ＝ＣＨ₂ＣＯＮＨ）し、Ｘは、脱離基、好適には、ハロゲ ン、ＯＴｓ、ＯＭｓ、ＯＴｆによりなる群から選ばれ、そしてＹは、酸性のｐＨ で不安定な保護基から好適に選ばれる保護基、特に１，３−ジオキソラン及び１ ，３−ジオキサンの誘導体で保護されたアルデヒドである〕に相当する、遮蔽さ れたアルデヒド構築単位の製造、 −ＴＡＺＡ（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン）及び上記で製した アルデヒド基礎単位との反応で、１：１アルキル化生成物の生成、 −ブロモ酢酸との反応及び保護されたアルデヒドの同時的な脱保護を行い式（Ｉ ａ）（式中、Ｒ＝Ｈ）のキラント剤の生成、 −塩又はオキシド型のいずれかで、多分、中和に必要な塩基又は酸の存在下、金 属イオンのキレート化によって、好適には、式（Ｉａ）のキラント剤を金属と反 応させて、所望の金属錯体及び／又はそれらの塩を形成させ、関連する金属錯体 の生成。 スキーム２ スキーム２に示した方法は、以下のように要約される： −式Ｘ−Ｂ−Ｙ（ここで、Ｘは、ハロゲン、ＯＴｓ、ＯＭｓ、ＯＴｆによりなる 群から好適に選ばれる脱離基であり、Ｙは、酸性のｐＨで不安定な保護基から好 適に選ばれる保護基、特に１，３−ジオキソラン及び１，３−ジオキサンの誘導 体で保護されたアルデヒドであり、そしてＢは、上記と同義である）に相当する 、遮蔽されたアルデヒド構築単位の製造； −Ｘをアミンに変換し、カルボニルが保護されたＨ₂Ｎ−Ｂ−ＣＨＯ−保護基の 生成； −市販で入手されるＤＴＰＡ（ジエチレントリアミン五酢酸）の二無水物と、上 記で製したアルデヒド単位との縮合； −保護されたアルデヒドを脱保護して式（IIａ）（式中、Ｒ＝Ｈ）のキラント化 剤の生成； −スキーム１に記載と同様に、錯体及びそれらの塩の可能な形成。 この技術状態の一般化された教示とは異なり、驚くべきことであるが、それぞ れのキラントでよりも、式（Ｉａ）及び（IIa）のキラントの金属錯体で、上記 のアミノ又はポリアミノ担体を直接に高収率で抱合することが可能であるばかり でなく、実際に好都合であることが分かった。これは、得られた生成物が次の錯 体化の段階を必要としないので、特に有利である。この方法で、錯体への不完全 なそして／又は非特異的な取込みは避けられる。更に、潜在的に分解の可能性が ある生成物は、錯体化に要求される往々にして非常に激烈な条件を受ける必要が ない。最終的に、最終生成物の精製を実施するのが遥かに簡単である。 本発明の目的であるポリキラント／ポリキレートの製造のための還元アルキル 化反応は、以下の指標によって起こる： −問題の担体の第一級アミノ基の総数に関して３〜４０倍、好適には１０〜３５ 倍の過剰で、アミノ担体又はその塩の一つと、式（Ｉａ）又は（IIa）のキラン ト又はそれらの金属錯体の一つの反応； −反応媒体は、一般に、リン酸塩、ホウ酸塩、重炭酸塩、炭酸塩、酢酸塩などの ようなｐＨが５〜１０である水性緩衝液；又は、例えば、メタノール、エタノー ル、プロパノール類、ブタノール類のような低分子量のアルコール；又は、例え ば、ＤＭＦ、ＤＭＳＯ、ＤＭＡのような非プロトン性双極性溶媒よりなり；上記 の溶液のような緩衝水溶液との混合媒体も可能であり、場合によっては好ましい ； −反応は、イミン結合に特異的であるが、アルデヒドには特異的でない還元剤の 存在下、原料のアミノ担体のアミノ基に関して３〜６０倍の過剰で起こり、しか るに、該還元剤の好ましい例は、水素化シアノホウ素ナトリウム(ＮａＣＮＢＨ₃ )、ピリジンボラン、トリメチルアミンボラン及び類似化合物である； −反応温度は、−５〜６０℃、好適には１５〜３０℃である； −反応時間は、２〜１７０時間と異なるが、好適には１０〜７２時間である。 特に好ましい緩衝液は、ｐＨ値が７〜９であるリン酸及びホウ酸の緩衝液であ る。好ましい溶媒類は、メタノール、ＤＭＦ及びＤＭＳＯである。反応媒体中の アミノ担体の濃度は、０．１〜４０％（w/v）である。好ましい還元剤は、水素 化シアノホウ素ナトリウムである。 明らかに、還元アルキル化反応が、アミノ担体と共に式（Ｉａ）又は（IIａ） のキラントを原料として行われる場合、次の段階は、既知の方法及び技術による 、関連する金属錯体の形成である。 アルキル化の他の方法と対照して、還元アルキル化の更に予想外の利点は、別 の反応性基を含む蛋白及びアミノ誘導体に応用される反応の特異性に関する。こ の反応の特異性は、例えば、蛋白で確かめられている。 全ての場合に、改質された蛋白のアミノ酸の分析は、リシン残基及び、場合に よっては、アミノ末端を有するアミノ酸を除いて原料の蛋白のそれと同一である ことが示された。式（Ｉａ）及び（IIａ）の化合物又はそれらの金属錯体が、他 のアミノ酸の側鎖と反応し、加水分解生成物（これはアミノ酸分析に際して同定 ができない）を生ずる可能性は排除される。 実際、式（IVａ）のガドリニウム錯体は、例えば、遊離の第一級アミノ基のな いペプチドモデルと反応しなかった。この実験は、ｐＧｌｕ−Ｈｉｓ−Ｔｒｐ− Ｓｅｒ−Ｔｙｒ−Ｇｌｙ−Ｌｅｕ−Ａｒｇ−Ｐｒｏ−Ｇｌｙ−アミドの配列順序 及び分子量１１８２．３を有する、アミノ末端基が保護されたペプチド、黄体形 成ホルモン（ＬＨＲＨ）で行われた。質量分析は、蛋白の改質に用いた条件下、 式（IVａ）のガドリニウム錯体との反応後に質量が変化しないことを示した。 対照的に、本発明のために選ばれた蛋白と、式（IVａ）のガドリニウム錯体の 反応によってられる生成物は、理論的に得られるアミノ基（α及びε）の数より も大きい多数の錯体残基を含んでいる。 したがって、（α及びε）アミノ基の大部分は、二重のアルキル化を受ける。 例えば、式（IVａ）のガドリニウム錯体と、リシンのε−アミノ基の反応は、 式（IX）及び（Ｘ）： の改質されたリシン残基を生成する。 このような改質された残基の加水分解は、置換の型を確認するのに利用される Ｎ^ε−（３−アミノプロピル）リシン及びＮ^ε，Ｎ^ε−ビス（３−アミノプロピ ル）リシンを生成する。 追加の例証として、下記の表１は、本発明の特別な有利性を例示し、得られた 生成物は、常に１より大きいパラメーターρによって特徴付けられる。 表は、この技術状態の教示によって得られた生成物がρ＝１によって特徴付け られるのに対し、本発明のそれはρ＞１を有することを明らかに示している（幾 つかの場合には、可能な極大値、すなわち２に近く、担体の第一級アミノ基の完 全な二置換が得られたことを意味する）。更に、担体分子当りのＧｄの重量％含 量は、同じ担体で比較した時、平均して、本発明の化合物が非常に高かった。実 際に、この値は、例えば、完全な錯体化を仮定した場合、ルイスらが記載してい る（ＤＯＴＡ）_8.79シトクロムｃ生成物では８．１％に等しい（Lewis et al.,B ioconj．Chem．1994，5，565-576）、他方、本発明の実施例１１に記載したシト クロムｃの誘導体では、この値は１０．９％である。ＭＲＩ検査にＧｄの１００ μmol/kg用量の投与を仮定すると、ルイスらの生成物の場合には、総計で生成物 １１．４μmol/kgが投与されるべきであるが、本発明の生成物では６．８μmol/ kg（すなわち、約半分）だけが必要である。事実、同じ著者（Lewis et al.）は 、金属イオンによるキレート化の効率は８４．５〜９７．７％で異なることを立 証している（Bioconj．Chem．1994，5，565-576，pg．567の表１）。本発明の生 成物では、この値が１００％であることを考慮すると、最終的な利点は明らかに 非常に大きい。 本発明の目的である化合物は広い応用分野を有する。特に、磁気共鳴に基づい た診断法の全部で、適切に配合される場合、常磁性金属を含む錯体が使用される 。 本発明の目的であるキレートは、核医学においても用いられる。しかしながら 、この場合、キレート化される金属イオンは、粒子を放出する放射性同位体、例 えば、⁵¹Ｃｒ、⁶⁷Ｇａ、⁶⁸Ｇａ、 ¹¹¹ＮＩ、^99mＴｃ、¹⁴⁰Ｌａ、¹⁷⁵Ｙｂ、¹⁵³Ｓ ｍ、¹⁶⁶Ｈｏ、⁹⁰Ｙ、¹⁴⁹Ｐｍ、¹⁷⁷Ｌｕ、⁴⁷Ｓｃ、¹⁴²Ｐｒ、¹⁵⁹Ｇｄ、²¹²Ｂｉで ある。 本発明の目的である金属錯体は、リポソームに入れてカプセルに包まれ、単層 又は多層状の小胞として用いられ、又はアニオン性、親水性で水溶性の「担体」 と組み合わせて使用される。この「担体」は、例えば、ヘパリン硫酸、コンドロ イチン硫酸、デルマタン硫酸のような硫酸エステル基類を含む糖、オリゴ糖、多 糖又はグリコサミノグリカンであり得る。 実験の部において、本発明の幾つかの化合物の製造法を報告する。 実施例１−方法 合成化合物確認のための分析法： 質量分析： 本発明の生成物の質量値は、金属錯体の分析が可能である電子スプレーイオン 化（ＥＳＩ−ＭＳ）法を用いて測定した。高分子型生成物は、Lasermat 2000（F innigan Mat）装置及びマトリックスとしてα−シアノ−４−ヒドロキシケイ皮 酸（ＡＣＨ）又はシナピン酸を使用し、Matrix Assisted Laser Desorption Ion isation飛行時間法（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ）と称する技術を用いて分析した。 元素分析： Ｃ、Ｈ及びＮの百分率を標準法によって得た。ガドリニウム含量は、発光分光 法（ＩＣＰ−ＥＳ）又はＸ−線蛍光法（ＸＲＦ）によって測定した。分析を実施 する前、試料をマイクロ波装置で完全に鉱化した。 アミノ酸分析： 蛋白を原料にして得られた化合物の場合、アミノ酸の定量分析によって蛋白含 量を測定した。生成物を６N塩酸中１１０℃で、２０〜４８時間加水分解した後 に分析を行った。カラムの後にニンヒドリン検出器を備えたCarlo Erba 3A-29分 析装置で加水分解物を分析した。 遊離アミノ基の測定： 高分子型の生成物には、“ｐ”パラメーター（抱合後に残っている遊離アミノ 基）は、Stocks S.J.,Andrew J.M.，Ramey C.W.，Brooks D.E.，Anal．Biochem. 1986,154(1),232-234に記載の方法により、フルオレスカミン(fluorescamine)に 基づいた評価法を用いて測定した。分析を行っている化合物の反応を、相当する 非改質高分子のそれと比較した。蛋白を原料として得られた化合物の場合、アミ ノ酸の定量分析によって蛋白含量を測定した。非改質蛋白の濃度は、インスリン （ε_277.5nm＝０．９５７ml・mg^-1・cm^-1）及びキモトリプシノーゲンＡ（ε_{277 .5nm} ＝２．０３ml・mg^-1・cm^-1）の場合の吸収係数を基礎にして測定し、ミオグ ロビン及びシトクロムｃには、ピリジンヘモクロモゲン法を用いた(Riggs A.，M ethods in Enzymol.，1981，76，20-21)。 サイズ排除クロマトグラフィー： 蛋白を原料として得られた化合物の場合、生成物の均質性をサイズ排除クロマ トグラフィーによって確証した。それぞれの化合物試料を、０．２MのＮＨ₄ＨＣ Ｏ₃溶液で平衡させたSuperdex 75-HR 10/30カラム（Pharmacia社の製品）上に注 入（２５μｌ）した。クロマトグラフィーを低温室（６〜７℃）で０．５ml/min の流速で行い、２８０nmの分光測定で検出した。 緩和度測定： 幾つかのＧｄ−含有生成物では、Bruker Minispec 120を用い、０．５T及び３ ９℃で測定した。 実施例２： １０−〔２−オキソ−２−〔（３−オキソプロピル）アミノ〕エチル〕−１，４ ，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸のガドリニウム錯 体 Ａ）１０−〔２−オキソ−２−〔（３−オキソプロピル）アミノ〕エチル〕−１ ，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸〔式（IIIａ ）の化合物〕 特許出願の実施例４に記載の方法に準じて（ＷＯ第95/32741号、ページ４９９ ）、標題の化合物を製造した。製造した。 ¹Ｈ−ＮＭＲ、¹³Ｃ−ＮＭＲ、ＩＲ及びＭＳスペクトルは、表示した構造に一 致した。 Ｂ）１０−〔２−オキソ−２−〔（３−オキソプロピル）アミノ〕エチル〕−１ ，４，７，１０−テトラアザシクロドデカン−１，４，７−三酢酸〔式（IVａ） の化合物〕のガドリニウム錯体 水３，０００mlに溶解した化合物Ａ）の２．９ｇ（０．００６３mol）の溶液 に、酸化ガドリニウム１．１４ｇ（０．００３１５mol）を加え、反応混合物を ５０℃で２０時間加熱し、反応の経過をＨＰＬＣでモニターした。反応混合物を Millipore（０．４５μm）を通して濾過し、濾液を濃縮乾固して、所望の生成物 ３．８５ｇ（０．００６２７mol）を定量的な収率で得た。m.p．：＞２８０℃。 エチレングリコールの定量（ＧＣ）：１．３５％（外部標準）。 ＨＰＬＣ力価（titre）：９４％（面積における％）。 Ｋ．Ｆ．力価：９．２５％。 元素分析（Ｃ₁₉Ｈ₃₀ＧｄＮ₅Ｏ₈・３．１８Ｈ₂Ｏとして）： 実験値：Ｃ，３３．３６；Ｈ，５．６７；Ｇｄ，２３．３０；Ｎ，１０．１６。 計算値：Ｃ，３３．７４；Ｈ，５．５１；Ｇｄ，２３．２５；Ｎ，１０．３６。 ＩＲ及びＭＳは、表示した構造に一致した。 実施例３： Ｎ^α−カルボベンジルオキシ−Ｎ^α，Ｎ^α−ビス〔４−アザ−５−オキソ−６− （１，４，７，１０−テトラアザシクロドデシル−４，７，１０−三酢酸）ヘキ シル〕−Ｌ−リシンのガドリニウム錯体 実施例２Ｂで得られた化合物（IVａ）の４ｇ（６．５mmol）を、窒素ガスの雰 囲気下、メタノール１０mlに溶解して−５℃に冷却した。別に、Ｎ^α−カルボベ ンジルオキシ−Ｌ−リシン（Ｚ−リシン）の０．４５ｇ（１．６mmol）及び ＫＯＨの０．１ｇをＭｅＯＨの４mlに溶解した溶液を調製し、これを、フラスコ に入れた実施例２Ｂで得られた化合物（IVａ）の溶液に加えた。最後に、ＮａＣ ＮＢＨ₃の０．６ｇ（９．５mmol）を加えた。この混合物を、−５℃で１８時間 絶えず撹拌した。次いで、溶媒を留去し、残渣をＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ／トリフルオ ロ酢酸（ＴＦＡ）（１０：９０：０．１）の混合溶媒１０mlに溶解し、不溶性物 質を濾去し、LiChrosorb RP-18 25x250mmカラム（E．Merck社の製品）を用いて 製造した。純粋な化合物を、同じＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ／ＴＦＡ混合溶媒を用いて溶 出した。分析用カラムを用いて同一条件で行った分析に基づいて、均一な画分を 併せ、濃縮乾固した。残渣をエーテルで洗い、減圧下に乾燥し、痕跡量のＴＦＡ を含む所望の生成物の約１．９grを得た。 Ｋ．Ｆ．力価：３．４３％(w/w)。 ＨＰＬＣ力価：９８％（面積における％）： カラム：LiChrospher 100 RP-18（5mm）；250x4mm（E．Merck社の製品）、 溶出液Ａ：５mMリン酸緩衝液(pH3)、 溶出液Ｂ：ＣＨ₃ＣＮ、 １０分間１０％Ｂ；１０分間に１０〜３０％Ｂの勾配溶離、 流速:１ml/min。 元素分析： 実験値：Ｃ，３３．２２；Ｈ，３．８８；Ｎ，７．２８；Ｇｄ，１２．１５。 計算値：Ｃ，３３．０３；Ｈ，３．９７；Ｎ，６．８０；Ｇｄ，１２．７2。 ＥＳＩ−ＭＳ：１，４７６（ＭＨ⁺）。 生成物の構造を証明するために、生成物を６N塩酸中１１０℃で２０時間加水 分解した。加水分解生成物が、Ｎ^ε，Ｎ^ε−ビス（３−アミノプロピル）リシン であることを、質量分析(ＭＨ⁺:２６１)及びＮＭＲ分析で確認した。LiChrosorb RP-18(25x250mm)カラムを用いたクロマトグラフィーの間に、モノアルキル化生 成物を含む画分も採取した。 収率：１４％（２００μg）。 ＥＳＩ−ＭＳ：８７９（ＭＨ⁺）。 この実施例に記載した生成物のρ比は２であった。 実施例４： Ｎ^ε，Ｎ^ε−ビス〔４−アザ−５−オキソ−６−（１，４，７，１０−テトラア ザシクロドデシル-４，７，１０−三酢酸）ヘキシル〕−Ｌ−リシンのガドリニ ウム錯体 実施例３で得られた化合物０．５ｇをメタノール５０mlに溶解し、この溶液に 、２０％Ｐｄ(ＯＨ)₂／の０．２５ｇを加えて、大気圧下に室温で１０分間水素 化した。次いで、窒素ガスをフラスコ中に通気し、形成したＣＯ₂を駆逐した。 更に１０分間、水素化を続けてから、反応混合物を濾過し、濾液を濃縮した。残 渣をエチルエーテルに懸濁し、濾取して乾燥し、４００mg（８８％）の収量を得 た。 ＥＳＩ−ＭＳ：１，３４２（ＭＨ⁺） この実施例に記載した生成物のρ比は２であった。 実施例５： Ｎ^α，Ｎ^ε，Ｎ^ε(α)ートリス〔４−アザ−５−オキソ−６−（１，４，７，１ ０−テトラアザシクロドデシル−４，７，１０−三酢酸）ヘキシル〕−Ｌ−リシ ンのガドリニウム錯体 実施例２Ｂで得られた化合物(IVａ)の２ｇ(３．２５mmol)をメタノール１０ml に溶解し、−５℃に冷却した。この溶液に、メタノール４mlに溶解したリシン塩 酸塩１００mg（０．５５mmol）及びＬｉＯＨの２６mg（１．１mmol)の溶液、そ して最後にＮａＣＮＢＨ₃の３１０mg（４．９３mmol）を加えた。反応混合物を −５℃で６０時間撹拌し、この時点で溶媒を留去した。残渣を水５mlに溶解して 濾過し０．１Mピリジン／酢酸（pH５．６）で平衡させたイオン交換樹脂(AG-50W -X4、Bio-Rad社の製品)を用いて精製造した。余分の生成物（IVａ）及び反応の 副生成物を除去した後、問題の生成物を１Ｍピリジン／酢酸（pH５．６）で溶離 した。生成物（ＴＬＣ：Silica 60-F254、展開溶媒：エタノール／２５％アンモ ニア（１：１）；Ｒｆ＝０．３６）を含む画分を併せ、乾燥し、水に溶解して、 徹底的に凍結乾燥した。生成物４２５mg（リシンに基づいて４０％）を得た。 ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦＭＳ：１，９４３（計算したＭＨ⁺＝１，９４０）。 ガドリニウム基準当りの緩和度ｒ₁＝５．２５ｓ^-1mM^-1。 この実施例における生成物のρ比は１．５であった。 実施例６： Ｎ^α,Ｎ^α,Ｎ^ε,Ｎ^ε−テトラキス〔４−アザ-５−オキソ−６−(１,４，７，１ ０−テトラアザシクロドデシル−４，７，１０−三酢酸）ヘキシル〕−Ｌ−リシ ンのガドリニウム錯体 実施例２Ｂに記載の方法で得られた化合物（IVａ）の２ｇ（３．２５mmol）を 、還流冷却器を備えたフラスコ中でメタノール１０mlに溶解し、−５℃に冷やし た。この溶液に、メタノール３mlに溶解したリシン塩酸塩７５mg(０．４１mmol) 及びＬｉＯＨの２０mg（０．８２mmol）、次いでＮａＣＮＢＨ₃の３１０mg（４ ．９３mmol）を加え、この混合物を−５℃で４時間撹拌した後、更に４０時間室 温（２１℃）で撹拌を続けた。その後、メタノール２mlに溶解した化合物(IVａ) の０．５ｇ（０．８２mmo1）及びＮａＣＮＢＨ₃の７７mg(１．２３mmol)を加え 、この混合物を２時間５０℃に加熱してから、室温に１７時間放置した。形成し た析出物を溶解するために水３mlを加え、この混合物を３時間５０℃に再び加熱 してから、室温に１８時間放置した。溶媒を留去し、残渣を水５mlに溶解して濾 過した。濾液を０．１MのＮＨ₄ＨＣＯ₃溶液で平衡させたイオン交換樹脂（AG-5O W-X4、Bio-Rad社の製品）で精製造した。過剰の生成物（IVａ）及び反応の副生 成物をカラムから除去した後、０．１〜２MのＮＨ₄ＨＣＯ₃の勾配溶液で問題の 生成物を溶出した。 トリ−及びテトラ−アルキル化生成物（ＴＬＣ：Silica 60-F254、展開剤：エ タノール／２５％アンモニア（１：１）；Ｒｆ＝０．３６）を含む画分を併せ、 乾燥してから水３mlに溶解した。これを、LiChrosorb RP-18カラム(250x25mm)を 用いた分取用ＨＰＬＣに付し、０．１％ＴＦＡを含む５〜２０％アセトニトリル の勾配溶媒で溶出して精製した。三置換生成物を含む僅かな画分の後、所望の生 成物を含む画分を集め、乾燥してから水に溶解し、徹底的に凍結乾燥した。収量 ：９０mg。 ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳ＝２，５４３（ＭＨ⁺、計算値：２，５３８）。 ガドリニウム基準当りの緩和度ｒ₁＝８．３５ｓ^-1mM^-1。 この実施例に記載した生成物のρ比は２であった。 実施例７： Ｎ^α−カルボベンジルオキシ−Ｎ^ε，Ｎ^ε−ビス−〔４−アザ−５−オキソ−６ −（１，４，７，１０−テトラアザシクロドデシル−４，７，１０−三酢酸）ヘ キシル〕−Ｌ−リシン 実施例２Ａに記載の方法で得られた化合物（IIIａ）の３ｇ（６．５mmol）及 びトリエチルアミン２ｇを、窒素ガスの雰囲気下、メタノール１０mlに溶解して −５℃に冷却した。別に、Ｎ^α−カルボベンジルオキシ−Ｌ−リシン（Ｚ−リシ ン）の０．４５ｇ（１．６mmol）及びＫＯＨの０．１ｇを、ＭｅＯＨの４mlに溶 解した溶液を製し、これを、反応フラスコに加え、最後にＮａＣＮＢＨ₃の０． ６ｇ（９．５mmol）を加えた。この混合物を、絶えず撹拌しながら、−５℃に１ ８時間維持した。溶媒を留去し、残渣をＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ／トリフルオロ酢酸（ ＴＦＡ）（１０：９０：０．１）の混合溶媒１０mlに溶解した。不溶物を濾去し 、濾液をLiChrosorb RP-18カラム（250x25mm、E．Merck社の製品）を用い、同じ ＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ／ＴＦＡの混合溶媒で生成物を溶出して精製した。分析用カラ ムを用いて同じ条件下で行った分析を基礎にして均質な画分を集め、濃縮乾固し た。残渣をエーテルで洗い、減圧下に乾燥して、痕跡量のＴＦＡを含む所望の生 成物１．３ｇを得た。 Ｋ．Ｆ．力価：４．８５％(w/w)。 ＨＰＬＣ力価：９６％（面積における％）（実施例３に記載の方法）。 ＥＳＩ−ＭＳスペクトル：１，１６８（ＭＨ⁺）。 同様な方法で、以下の誘導体を得た： −Ｎ^α，Ｎ^ε，Ｎ^ε(α)−トリス〔４−アザ−５−オキソ−６−（１，４，７， １０−テトラアザシクロドデシル−４，７，１０−三酢酸）ヘキシル］−Ｌ−リ シン、−Ｎ^α，Ｎ^α，Ｎ^ε，Ｎ^ε−テトラキス〔４−アザ−５−オキソ−６−（ １，４，７，１０−テトラアザシクロドデシル−４，７，１０−三酢酸）ヘキシ ル〕−Ｌ−リシン。 この実施例に記載した生成物を水素化して、次の化合物を得た： Ｎ^ε，Ｎ^ε−ビス〔４−アザ−５−オキソ−６−（１，４，７，１０−テトラア ザシクロドデシル−４，７，１０−三酢酸）へキシル〕−Ｌ−リシン。 実施例８： １，１，４，７，７−ペンタキス〔４−アザ−５−オキソ−６−（１,４，７， １０−テトラアザシクロドデシル−４，７，１０−三酢酸）ヘキシル〕−１，４ ，７−トリアザヘプタン 実施例２Ｂに記載の方法で得られた化合物（IVａ）の１．５ｇ(２．４４mmol) を、０．１Mホウ酸溶液１０mlに溶解し、次いで、ジエチレントリアミン１１μl （０．１mmol）を加えた；この溶液の最終ｐＨは８．５であり、更に調整するこ とを要しなかった。次いで、水素化シアノホウ素ナトリウム３００mg（４．８mm ol）を加え、この混合物を、窒素ガスの雰囲気下、室温で６時間、次いで３７℃ で６０時間撹拌した。この時点で、濁った反応混合物を透析膜(Cellusep H1)公 称分離1000、Membrane Filtration Products社の製品）に移し、水に対して徹底 的に透析した。質量分析は、それぞれジエチレントリアミン−(化合物IV)₄及び ジエチレントリアミン−(化合物IV)。に相当する約２，５００及び３，１００に ２個の主ピークの存在を示した。透析した反応混合物を凍結乾燥し、pH５．５の ５０mMリン酸緩衝液、０．１MのＮａ₂ＳＯ₄溶液の１mlに溶解し、同じ緩衝液で 平衡させたSephadex G-25のカラム(2.2x120cm)載せた。最初のピークを集め、凍 結乾燥によって濃縮し、水に対して透析し、最後に凍結乾燥して、十分にアルキ ル化された誘導体（ＭＨ⁺、実験値及び計算値＝３，０９２）９０mgを得た。 実施例９： Ｎ，Ｎ−ビス−〔４−アザ−５−オキソ−６−（１，４，７，１０−テトラアザ シクロドデシル−４，７，１０−三酢酸）ヘキシル〕ドデシルアミンのガドリニ ウム錯体 実施例２Ｂに記載した方法で得られた化合物(IVａ)２ｇ（３．２５mmol）を、 窒素ガスの雰囲気下、メタノール１０mlに溶解して−５℃に冷却した。これに、 メタノール２mlに溶解したドデシルアミンの１２５μｌ（１００mg；０．５４mm ol）の溶液、次いで水素化シアノホウ素ナトリウム３１０mg（４．９mmol）を加 え、窒素ガスの雰囲気下、反応混合物を室温で６時間、次いで３７℃で６０時間 撹拌した。溶媒を留去し、残渣をＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ／トリフルオロ酢酸（ＴＦＡ ）（２０：８０：０．１）の混合溶媒１０mlに溶解し、この溶液を濾過して不溶 物質を除去し、LiChrosorb RP-18のカラム（25x250mm、E．Merck社の製品）を用 いて同じＣＨ₃ＣＮ／Ｈ₂Ｏ／ＴＦＡの混合溶媒で生成物を溶出した。生成物は、 約４カラム容量の溶出後に純粋な形で溶出したが、不純物も遅れていなかった。 溶媒を濃縮乾固し、残渣をエーテルで洗い、減圧下に乾燥した。痕跡量のＴＦＡ を含む所望の生成物４５０mgを得た。 Ｋ．Ｆ．力価：３．９７％(w/w)。 ＨＰＬＣ力価：９２％（面積％）（実施例３に記載の方法、傾斜溶媒１０〜５ ０％Ｂ液）。 ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ−ＭＳスペクトル：１，３８４（計算したＭＨ⁺：１，３ ８２）。 実施例１０： 〔Ｌｙｓ³〕−ボンベシンと化合物（IVａ）の抱合体の製法 pH８の０．１Mホウ酸緩衝液５mlに溶解した〔Ｌｙｓ³〕−ボンベシン（Sigma 社の製品、B1647、M_r：1591.8）の５mgの溶液に、実施例２Ｂに記載の方法で得 られた化合物（IVａ）の３０mg及びＮａＣＮＢＨ₃の５mgを加えた。この混合物 を室温で４時間撹拌した後、更に、化合物（IVａ）の３０mg及びＮａＣＮＢＨ₃ の５mgを加えた。更に２０時間撹拌した後、反応混合物を、Cellusep H1膜（公 称分離：１，０００）に入れ、水に対して透析した。得られた溶液を部分的な凍 結乾燥によって濃縮し、質量分析によって分析し、化合物 （IVａ）による単一ペプチドのアミノ基の二重アルキル化に相当する強いシグナ ルの存在を２，７９０（計算したＭＨ⁺＝２，７８８）に示した。 実施例１１： インスリンと化合物（IVａ）の抱合体の製法 pH８の０．１Mホウ酸緩衝液１３mlに溶解したブタのインスリンナトリウム塩( Calbiochemの製品、407696、M_r：5778;１０μmolアミノ基）２０mgの溶液に、実 施例２Ｂに記載した方法で得られた化合物（IVａ）の９５mg及びＮａＣＮＢＨ₃ の１５mgを加えた。この混合物を２０℃で４時間撹拌した後、更に化合物（IVａ ）の９５mg及びＮａＣＮＢＨ₃の１５mgを加えた。 抱合反応は、存在するアミノ基に対して化合物（IVａ）を３０：１、ＮａＣＮ ＢＨ₃と化合物（IVａ）を１．５：１の総モル比で行った。室温で１６時間放置 後、Sephacryl S-I00HRカラム（Pharmacia社の製品）を用いたサイズ排除クロマ トグラフィーによって、過剰の試薬及び反応の副生成物から抱合体を分離した。 このカラム（45x8.9cm）を、０．１５MのＮＨ₄ＨＣＯ₃溶液により２０ml/minの 流速で溶出した。最終生成物を濃縮し、限外濾過／Amicon YM-3膜による透析濾 過によって脱塩した。 サイズ排除クロマトグラフィーによって分析し、生成物は均質であった（ｔ_R ：２４．９９分）。フルオレスカミンによる処理は、蛋白１mol当り０．１molＮ Ｈ₂基のみの存在を示した。Ｇｄ含量は、蛋白１mol当り４．６molであった。質 量分析は、インスリンの質量プラス化合物（IVａ）の、それぞれ、２、３、４及 び５残基の質量を示した。アミノ酸分析は（参照：表２）、１単位が少ないアミ ノ酸リシン、グリシン及びフェニルアラニンを除いて、非改質インスリンの組成 との極めてよい一致を示した。後者の二つのアミノ酸は、インスリンの二つの鎖 のアミノ末端であるので、これは、α−及びε−アミノ基の両方が反応に関与す ることを確証した。僅かな量のシステインが観察されたが、このアミノ酸の加水 分解の条件下での典型的な不安定性によるものであり、考慮しなかった。 表2.インスリン化合物(IVa)抱合体のアミノ酸分析 この実施例に記載された生成物のρ比は１．５９であった。 実施例１２： ミオグロビンと化合物（IVａ）の抱合体の製法 ウマの心臓ミオグロビン(Sigma社の製品、M-1882、M_r=17567)及びpH８．５の ホウ酸緩衝液を用い、実施例１１と同様に製造した。使用した量は： 緩衝液１００mlに溶解したミオグロビン（０．５６mmol ＮＨ₂）０．５ｇ、実 施例２Ｂで得た化合物（IVａ）１０．３７ｇ（１６．９mmol）を２回に分けて添 加、 ＮａＣＮＢＨ₃の１．６ｇ（２５．４mmol）を２回に分けて添加。 生成物は、サイズ排除クロマトグラフィー（ｔ_R：１９．５８分）により均質 であることを示した。フルオレスカミンによる処理は、蛋白１mol当り０．５mol ＮＨ₂基のみの存在を示した。Ｇｄ含量は、蛋白１mol当り２７．９molであった 。質量分析は、ミオグロビンの質量プラス化合物（IVａ）の、それぞれ、２９〜 ３３残基の質量を示した。 合成した化合物の蛋白含量を測定するのに用いたアミノ酸分析は、１９個の残 基がある代わりに、ゼロに近いことが示されたリシンを除いて、処理されたミオ グロビンの組成が非改質ミオグロビンの組成との極めてよい一致を示した。 ガドリニウム基準当りの緩和度r₁＝１９ｓ^-1６mM^-1。 この実施例に記載された生成物のρ比は１．４３であった。 実施例１３： キモトリプシノーゲンＡと化合物（IVａ）の抱合体の製法 ウシの膵臓キモトリプシノーゲンＡ（E．Merck社の製品、2306、M_r=25656)及 びpH９のホウ酸緩衝液を用い、実施例１１と同様に製造した。使用した量は： 緩衝液１００mlに溶解したキモトリプシノーゲンＡ（０．２９mmol ＮＨ₂)の ０．５ｇ、実施例２Ｂで得た化合物（IVａ）の５．３８ｇ（８．７７mmol）を２ 回に分けて添加、 ＮａＣＮＢＨ₃の０．８２ｇ（１３．２mmol）を２回に分けて添加。 生成物は、サイズ排除クロマトグラフィー（ｔ_R：１９．５５分）により均質 であることを示した。フルオレスカミンによる処理は、蛋白１mol当り０．２mol ＮＨ₂基のみの存在を示した。Ｇｄ含量は、蛋白１mol当り２８．２molであった 。質量分析は、キモトリプシノーゲンＡプラス化合物（IVａ）の２６．６残基の 質量を示した。 合成した化合物の蛋白含量を測定するのに用いたアミノ酸分析は、１４残基が ある代わりに、ゼロに近いことが示されたリシンを除いて、処理されたキモトリ プシノーゲンＡの組成が非改質キモトリプシノーゲンＡの組成との極めてよい一 致を示した。 この実施例に記載された生成物のρ比は１．９１であった。 実施例１４： シトクロムｃと化合物（IVａ）の抱合体の製法 ウマの心臓シトクロムｃ（Sigma社の製品、C-7752、Ｍ_r=12360）を用い、実施 例１１と同様に製造した。使用した量は： 緩衝液１０mlに溶解したシトクロムｃ（３２μmol ＮＨ₂）の２０mg、実施例 ２Ｂで得た化合物（IVａ）０．５５ｇ（０．９mmol）を２回に分けて添加、 ＮａＣＮＢＨ₃の１００mg（１．６mmol）を２回に分けて添加。 カラムによる精製に先立ち、最初に、反応混合物をホウ酸緩衝液に対して透析 し、未反応のＮａＣＮＢＨ₃を除き、次いで、フェリシアン化カリウム（最終濃 度５mM）で処理し、ヘム基のフェロイオンを再酸化した。 生成物は、立体排除クロマトグラフィーにより均質であることを示した。フル オレスカミンで生成物を処理することは、ヘム基の部分での障害のために不可能 であったので、遊離アミノ基をＴＮＢＳ（Habeeb A.F.S.A.Anal.Biochem.,1966, 14，328-336）で測定し、蛋白１mol当り９molＮＨ₂基の値を示した。Ｇｄ含量は 、蛋白１mol当り１４．６molであった。質量分析は、範囲の広いシグナルを示し 、その中でシトクロムｃプラス化合物（IVａ）の１５、１６及び１７残基の質量 に相当する３ピークを認めた。 この実施例に記載された生成物のρ比は１．４６であった。 実施例１５： インスリンと化合物２Ａ）の抱合体の製法 pH８の０．１Mホウ酸緩衝液７mlに溶解したブタのインスリンナトリウム塩(Ca lbiochem社の製品、407696、M_r:5778:５．２μmolアミノ基)の１０mgの溶液に、 化合物２Ａ）の７０mg（０．１５５mmol）を加え、１N水酸化ナトリウム溶液で ｐＨを８に維持した。次いで、ＮａＣＮＢＨ₃の１５mgを加え、この混合物を室 温で２０時間絶えず撹拌した。 反応混合物を限外濾過（Amicon YM-3膜）して濃縮し、Sephacryl S-100HRカラ ム(Pharmacia社の製品)に載せ、０.１５MのＮＨ₄ＨＣＯ₃溶液を用い、１ml/min の流速で溶出した。最終生成物の画分を濃縮し、Amicon YM-3膜を用いた限外濾 過／透析濾過により脱塩した。 生成物を、立体排除クロマトグラフィーによって分析し、均質であることを示 した。フルオレスカミンによる処理は、蛋白１mol当り０．３molＮＨ₂基のみの 存在を示した。 質量分析は、インスリンプラス化合物２Ａ）の、それぞれ、２、３及び４の残 基の質量に相当するシグナルを示した。 このシグナルを積分することによって、置換の平均数は３．４であると算定し た。この実施例に記載した生成物のρ比は１．２６であった。 同様な方法を用いて、次の誘導体を製造した： −〔式III〕ミオグロビン、 −〔式III〕シトクロムｃ、 −〔式III〕キモトリプシノーゲンＡ。 実施例１６： ポリリシンと化合物２Ａ）の抱合体の製法 pH８の０．１Mホウ酸緩衝液７mlに溶解したポリリシンブロモヒドラート(Sigm a社の製品、P0879、M_r:1000-4000;平均１０個のＬｙｓ残基及びM_r:2108と仮定し て、５２μmolアミノ基）の１０mgの溶液に、化合物２Ａ）の１ｇ（１．６mmol ）を加え、１N水酸化ナトリウム溶液でｐＨを８に維持した。次いで、ＮａＣＮ ＢＨ₃の１５０mgを加え、この混合物を室温で７２時間絶えず撹拌した。 反応混合物を、Sephacryl S-100HRカラム（Pharmacia社の製品）に載せ、この カラム（8.9x45cm）を、０．１５MのＮＨ₄ＨＣＯ₃溶液を用い、２0ml/minの流速 で溶出した。最初のピークを含む画分を濃縮し、次いで、凍結乾燥した（５２mg ）。 質量分析（ＭＡＬＤＩ−ＴＯＦ）は、ポリリシンプラス化合物２Ａ）１４単位 の平均質量に相当する約９，６００を中心として、７，０００〜１３，０００の 領域に広く分布したシグナルを示した。 フルオレスカミンによる処理は、Ｍ_r＝９，６００と仮定して、蛋白１mol当り １．２mol ＮＨ₂基のみの存在を示した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.⁷ 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ０７Ｄ 257/02 Ｃ０７Ｆ 5/00 Ｄ Ｃ０７Ｆ 5/00 Ａ６１Ｋ 49/02 Ｃ (81)指定国 ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＤＥ， ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，Ｌ Ｕ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ， ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，Ｓ Ｄ，ＳＺ，ＵＧ)，ＵＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ， ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，Ｇ Ｂ，ＧＥ，ＧＨ，ＨＵ，ＩＬ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ， ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，Ｎ Ｏ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ ，ＳＩ，ＳＫ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ， ＵＳ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １． ポリキラント／ポリキレート化合物及びそれらの生理学的に適合し得る塩 であって、 “ｍ”個（ここで、ｍは、１〜１，０００の数である）の第一級アミノ基を有 する有機骨格よりなり、該アミノ基類は、“ｎ”個（ここで、ｎは、２〜２ｍの 数である）のキラント／キレート残基類でアルキル化され、該キラント／キレー ト残基類は、脂肪族鎖によって該アミノ基類に共有結合で結合され、この鎖は、 Ｏ、Ｎ、Ｓから選ばれるヘテロ原子及び／又はカルボニル、チオカルボニル、ア ミド、エステル、チオウレア及びチオアミド基から選ばれる基又は芳香族基で中 断されているか、又は中断されておらず、そして該アミノ基の数“ｐ”（ここで 、ｐは０〜ｍ−１の数である）はアルキル化されておらず、該化合物は、該第一 級アミノ基の少なくとも一つが該キラント／キレート残基の二つでジアルキル化 され、該結合したキラント／キレート残基の数ｎ及びアルキル化されたアミノ基 の数ｍ−ｐとの間の数の比を表すパラメーターρは、１より大きく２より大きく ない、すなわち、 １＜ρ≦２ であることを特徴とする、化合物及びそれらの生理学的に適合し得る塩。 ２． 一般式： 〔式中、 Ｌは、有機の骨格であり、 Ｆは、−(ＣＨ₂)_q−Ｔ−Ｋ残基（ここで、Ｔは、単結合であるか、又は、Ｏ、 Ｎ、Ｓから選ばれるヘテロ原子の一つ以上、又はカルボニル、チオカルボニル、 アミド、エステル、チオウレア及びチオアミド基から選ばれる官能基、又は芳香 族残基により中断されているか、又は中断されていない脂肪族鎖であり、そして 該鎖は、残基ＫのＣ、Ｏ、Ｎ又はＰの原子に共有結合されており、 Ｋは、直鎖状若しくは環状の、ポリアミノポリカルボン酸若しくはポリアミノ ポリホスホン酸若しくはポリアミノポリリン酸若しくはポリアミノポリホスフィ ン酸のキラント、又はそれらの金属キレートの一つ、又はそれらの塩の一つの残 基であり、ｑは、１〜１０の整数である）であり、 ｐは、０〜ｍ−１の数であり、 ｚは、０〜ｍ−１の数であり、 ｘは、１〜ｍの数（ここで、ｍは、１〜１，０００の数、そしてｍは、Ｌに最 初に存在する第一級アミノ基の総数である）であるが、但し、ｐ＋ｘ＋ｚ＝ｍで あり、そして、キレート化した金属イオンは、２価又は３価の常磁性イオン類又 は放射性同位元素類である〕で示される化合物。 ３． Ｌが、スペルミジン、ノルスペルミジン、スペルミン、４，９−ジオキサ ドデカンジアミン、３，６−ジオキサオクタンジアミン、エタノールアミン及び 同族体類、ホスファチジルエタノールアミン及びその誘導体類、スフィンゴシン 、アルキルアミン類、アルキレンジアミン類、ジエチレントリアミン、トリエチ レンテトラミン、トリス（２−アミノエチル）アミン、ジェファミン、Ｎ−グル コサミン、リシン及び誘導体類、オルニチン、グリシン、アミノ酪酸、アミノカ プロン酸、タウリン及びその誘導体類、〔Ｌｙｓ³〕−ボンベシン、インスリン 、キモトリプシノーゲンＡ、ミオグロビン、アルブミン、シトクロムｃ、分岐状 及び直鎖状のポリリシン、分岐状及び直鎖状のポリオルニチン、アミノ糖類、ポ リペプチド類、ホルモン類、成長因子類、抗体類より構成される群から選ばれ； Ｔは、単結合、又は、エステル、アミド又はカルボニルアミノ基を含む脂肪族 鎖であり、該鎖は、Ｋ残基の窒素又は炭素原子に共有結合で結合し、 Ｋは、ＥＤＴＡ、ＤＴＰＡ、ＢＯＰＴＡ、ＥＯＢ−ＤＴＰＡ、ＤＯＴＡ、それ らの誘導体類、金属キレート類又は塩類よりなる群から選ばれるポリアミノポリ カルボン酸の残基であり、 金属イオンキレート類は、原子番号２０〜３１、又は３９、４２、４３、４４ 、４９、又は５７〜８３を有する元素の２価又は３価のイオン類、又は次の放射 性同位元素類：⁵¹Ｃｒ、⁶⁷Ｇａ、⁶⁸Ｇａ、 ¹¹¹Ｉｎ、^99mＴｃ、 ¹⁴⁰Ｌａ、¹⁷⁵Ｙ ｂ、¹⁵³Ｓｍ、¹⁶⁶Ｈｏ、⁹⁰Ｙ、¹⁴⁹Ｐｍ、¹⁷⁷Ｌｕ、⁴⁷Ｓｃ、¹⁴²Ｐｒ、¹⁵⁹Ｇｄ、²¹² Ｂｉのイオン類から選ばれる、請求項２記載の化合物。 ４． 該金属イオン類が、Ｍｎ⁽²⁺⁾、Ｆｅ⁽³⁺⁾、Ｇｄ⁽⁺³⁾、Ｅｕ⁽⁺³⁾、 Ｄｙ⁽⁺³⁾、¹¹¹Ｉｎ⁽³⁺⁾、^99mＴｅ⁽⁺³⁾から選ばれる、請求項３記載の化合物。 ５． Ｆが、式（Ｉ）： 又は式（II）： 〔式中、 Ａは、単結合又は−(ＣＨ₂)_sＲ₁−（ここで、ｓは、１〜５の整数であり、そ してＲ₁は、単結合、又は、ＣＯＮＨ、ＮＨＣＯ、ＮＨＣＳＮＨ、Ｃ₆Ｈ₄ＮＨＣ ＳＮＨ、ＣＯＯ、ＯＣＯ,Ｏ若しくはＳに等しい）の基に相当し、 Ｂは、−Ｄ−(ＣＨ₂)_t、−（ここで、ｔは、１〜９の整数であり、そしてＤは 、単結合、又は−Ｏ−若しくは−ＮＨ−に等しい）に相当し、 各々の化合物におけるＲは、Ｈ又はＣＨ₃又はＣＨ₂−Ｏ−Ｂｚ又は下記式： の基又はそれらのいずれかの組合せであってもよい〕のキラント残基、並びに、 それらの金属キレート又は塩である、請求項２〜４記載の化合物。 ６． Ｆが、式（III）又は（IV)：の残基、又は式（Ｖ）又は（VI）： の残基、又はそれらの塩の一つの残基である、請求項５記載の化合物。 ７． 以下の式：（式中、Ｆは、式（III）： のキラント残基、又は式（IV）： のキレートである）の化合物、又はそれらの塩よりなる群から選ばれる、請求項 ６記載の化合物。 ８． Ｆが、式（III）又は式（IV）の残基であり、Ｌが、〔Ｌｙｓ³〕−ボンベ シン、インスリン、ミオグロビン、アルブミン、シトクロムｃ、キモトリプシノ ーゲンＡ、ポリリシンよりなる群から選ばれる、請求項３及び６記載の化合物。 ９． 請求項１記載の化合物を製造する方法であって、 請求項１で定義された脂肪族鎖によって、キラント残基、又はそのキレート、 又は塩に結合したアルデヒドで、有機骨格の第一級アミノ基の一つ以上の還元ア ルキル化による官能基化を含み、アルデヒドが第一級アミノ基の総数に対して３ 〜４０倍の過剰モルであることを特徴とする方法。 １０． 請求項１記載の化合物を製造する方法であって、 請求項１で定義された脂肪族鎖によって、キラント残基、又はそのキレート、 又は塩に結合したアルキレンハロゲン化物で、有機骨格の第一級アミノ基の一つ 以上をアルキル化することを含む方法。 １１． 請求項２〜６記載の化合物を製造する方法であって、 式（VII)： （式中、Ｋ、Ｔ、ｑは、上記と同義である）のキラント化合物、又はキレート、 又はそれらの塩と、反応媒体中で還元アルキル化の条件下に、式（VIII）： （式中、Ｌ及びｍは、上記と同義である）のポリアミノ化合物との反応を含み、 式（VII）の化合物は、第一級アミノ基の数ｍに対して３〜４０倍の過剰モルで あり、イミン結合には特異的であるが、アルデヒドには特異的でない還元剤の存 在下に起こり、そして該還元剤は、第一級アミノ基の総数に関して３〜６０倍の 過剰であることを特徴とする方法。 １２． 該反応媒体が、pH５〜１０の緩衝水溶液、低分子量アルコール類、非プ ロトン性双極性溶媒、又はこれらの混合溶媒から選ばれる、請求項１１記載の方 法。 １３． 反応温度が、２〜１７０時間中、−５〜６０℃である、請求項１１又は １２記載の方法。 １４． 式（VII）のキレート、又はその塩の一つが、アミノ基の総数に関して 約１０〜３５倍の過剰モルで用いられ； 反応媒体が、pH７〜９の緩衝水溶液、又はメタノール、又はこの二つの混合溶 媒であり； 還元剤が、水素化シアノホウ素ナトリウムであり； 温度が、１５〜３０℃の間で可変であり； 反応時間が、１０〜７２時間である、請求項１１〜１３記載の方法。 １５． 還元アルキル化反応が、式（VII）のキラント及びポリアミノ残基Ｌ(Ｎ Ｈ₂)_m'の間で起こり、次いで、関連する金属錯体及び/又はその塩類の一つを形 成する、請求項１１〜１３記載の方法。 １６． 式（Ｉａ）： 〔式中、 Ａは、単結合又は−（ＣＨ₂）_sＲ₁−基（ここで、ｓは、１〜５の整数であり 、そしてＲ₁は、単結合、又は、ＣＯＮＨ、ＮＨＣＯ、ＮＨＣＳＮＨ、Ｃ₆Ｈ₄Ｎ ＨＣＳＮＨ、ＣＯＯ、ＯＣＯ、Ｏ若しくはＳに等しい）に相当し、 Ｂは、−Ｄ−(ＣＨ₂)_t−にこで、ｔは、１〜９の整数であり、そしてＤは、単 結合、又は−Ｏ−、−ＮＨ−に等しい）に相当し、 各々の化合物におけるＲは、Ｈ又はＣＨ₃又はＣＨ₂−Ｏ−Ｂｚ又は下記式： の基又はそれらのいずれかの組合せであってもよい〕の中間体及びそれらの金属 キレート類及びそれらの塩の製造法であって、以下の工程： −保護されたアルデヒドＸ−Ａ−Ｂ−Ｙ（ここで、Ａ及びＢは、上記と同義であ り、Ｘは、ハロゲン、ＯＴｓ、ＯＭｓ、ＯＴｆから選ばれる脱離基であり、そし てＹは、酸の環境で脱離しやすい保護基、例えば、１，３−ジオキソラン及び１ ，３−ジオキサンで保護されたアルデヒドである）の製造工程； −ＴＡＺＡと該保護されたアルデヒドのＸ基とを反応させて、相当する１：１の 縮合生成物を生成させる工程； −α−Ｒ−ブロモ酢酸（ここで、Ｒは、上記と同義である）との縮合、次いでア ルデヒド官能基の脱保護工程； −上記の工程で得られた式（Ｉａ）のキラントと、塩又は酸化物の形態における 金属との、かつ中性塩を得るために必要な量の塩基又は酸の存在下又は不存在下 における反応による、金属錯体及び／又はその塩の形成工程； を含むことを特徴とする方法。 １７.式（IIa）： 〔式中、 Ｂは、−Ｄ−(ＣＨ₂）_t、−（ここで、ｔは、１〜９の整数であり、そしてＤ は、単結合、又は−Ｏ−若しくは−ＮＨ−に等しい）に相当し、 各々の化合物におけるＲは、Ｈ又はＣＨ₃又はＣＨ₂−Ｏ−Ｂｚ又は下記式： の基又はそれらのいずれかの組合せであってもよい〕の中間体及びそれらの金属 キレート及びそれらの塩を製造する方法であって、 以下の工程： −保護されたアルデヒドＸ−Ｂ−Ｙ（式中、Ｘは、脱離基を表し、Ｙは、保護さ れたアルデヒドであり、そして、Ｂは、上記と同義である）の製造工程； −保護されたアルデヒドＨ₂Ｎ−Ｂ−Ｙを与える、Ｘのアミンへの変換工程； −ジエチレントリアミン五酢酸のＲ誘導体の二無水物と、上記で製した保護され たアルデヒドとの間の縮合工程； −保護されたアルデヒドの脱保護工程； −錯体の形成工程、を含むことを特徴とする方法。 １８． 請求項１〜８記載の化合物の少なくとも一つ、又はそれらの生理学的に 適合し得る塩の一つを、活性成分として含む、薬学及び／又は診断用配合物。 １９． 放射線療法で使用する薬学組成物を製造するたための、生理学的に適合 し得るキレート又は塩の形態での、請求項１〜８記載の化合物の用途。 ２０． ＮＭＲ画像化用造影剤を製造するための、生理学的に適合し得るキレー ト又は塩の形態での、請求項１〜８記載の化合物の用途。 ２１． シンチグラフィー用造影剤を製造するための、請求項１〜８記載の化合 物の用途。 ２２． 請求項５〜８記載の化合物を製造するための中間体としての用途のため の、式（Ｉａ）： 〔式中、 Ａは、単結合又は−(ＣＨ₂)_sＲ₁−（ここで、ｓは、１〜５の整数である）基 に相当し、 Ｒ₁は、単結合、又は、ＣＯＮＨ、ＮＨＣＯ、ＮＨＣＳＮＨ、Ｃ₆Ｈ₄ＮＨＣＳ ＮＨ、ＣＯＯ、ＯＣＯ、Ｏ若しくはＳに等しく、 Ｂは、−Ｄ−(ＣＨ₂)_t、−（ここで、ｔは、１〜９の整数であり、そしてＤは 、 単結合又は−Ｏ−若しくは−ＮＨ−に等しい）に相当し、 各々の化合物におけるＲは、Ｈ又はＣＨ₃又はＣＨ₂−Ｏ−Ｂｚ又は下記式： の基又はそれらのいずれかの組合せであってもよい〕の化合物。 ２３． 請求項５〜８記載の化合物を製造するための中間体としての用途のため の、式（IIa）： 〔式中、 Ｂは−Ｄ−(ＣＨ₂)_t−（ここで、ｔは、１〜９の整数であり、そしてＤは、単 結合又は−Ｏ−、−ＮＨ−に等しい）に相当し、 各々の化合物におけるＲは、Ｈ又はＣＨ₃又はＣＨ₂−Ｏ−Ｂｚ又は下記式： の基又はそれらのいずれかの組合せであってもよい〕の化合物。