ITMI20091122A1 - Formulazioni farmaceutiche per uso intravaginale nella prevenzione e terapia delle vulvo vaginiti e nel ripristino della fisiologia vaginale - Google Patents

Description

Le vaginiti o vulvovaginiti sono le patologie ginecologiche più diffuse, tra queste la vaginosi batterica (VB) à ̈ considerata la più frequente e rientra in maniera determinante nel novero delle infezioni urogenitali, che si stima colpiscano almeno 1 miliardo di individui ogni anno, VB insieme ai classici sintomi di tutte le vulvo-vaginiti si caratterizza per la presenza di un elevato pH delle secrezioni vaginali e per la deplezione della flora vaginale ed in particolare di Lactobacilli (Bacilli di Doderlein). Tale condizione à ̈ considerata la causa principale che determina la crescita abnorme di batteri patogeni. Le riacutizzazioni e recidive sono inoltre un’altra costante di questa patologia. L’alta incidenza di questa patologia, l’alta frequenza di recidive determinano l’urgenza di identificare nuove strategie terapeutiche per queste patologie ed in particolare per VB, adatte alla loro prevenzione compresa quella delle recidive, infatti, VB à ̈ associata a complicanze della gravidanza, infezioni del tratto genitale superiore, infiammazioni pelviche, endometriosi, infezioni post-chirurgiche, cerviciti, infezioni urinarie, neoplasie ed aumentati rischi di contrarre per via sessuale il virus HIV ( Cauci S. et al J. Clin. Microbiol. 2002: 40: 2147-52), Il ruolo cruciale dellecosistema vaginale ed in particolare della presenza di Lactobacillus acidophilus nella prevenzione di malattie ginecologiche ed in particolare della VB sembra trovare attualmente un largo supporto nella comunità scientifica (Vasquez A et al. J. Clin, Microbiol. 2002; 40: 2746-9). La capacità della flora vaginale di proteggere da sovra-infezioni batteriche e fungine sembra essere essenzialmente legata alla capacità di Lactobacillus acidophilus di produrre sostanze acide, in particolare acido lattico, che mantenendo l' intorno vaginale ad un pH acido ( pH ~ 4) previene la colonizzazione di batteri patogeni.

Alio scopo di favorire la colonizzazione dei Lactobacillus vaginali sono stati effettuati alcuni studi clinici utilizzando la somministrazione orale di specie selezionate di Lactobacillus (Reid G et al. FEMS Immunol. Med. Mìcrobiol.

2003; 35: 131-4). Analogamente l' instillazione vaginale di alcuni ceppi dì Lactobacillus ha determinato una riduzione delle iniezioni urinarie con un miglioramento della flora batterica (Reid G and Burton, 1. Microbes. Infect.

2002; 4: 319-24). In questo contesto à ̈ imperativo stabilire l’identità dei vari ceppi di Lactobacillus in grado di colonizzare la vagina. Tuttavia sono emerse notevoli discrepanze legate a differenze tra razze o tra organi colonizzati (Velasquez A et al. J. Gin. Microbiol. 2002; 40:2746-9). Questa problematica à ̈ stata superata dalle domande di breveto (MI2003A000915 e FR2874825-A1) che rivendicano l’uso di oligosaccaridi prebiotici somministrati localmente nella vagina per ripristinare o mantenere la correta omeostasi della flora vaginale. E’ infatti noto nell’arte come tali oligosaccaridi prebiotìci siano in grado di favorire in modo selettivo la crescita dei Lattobacilli endogeni inibendo conseguentemente la crescita dì bateri patogeni (Rousseau V et al. Anaerobi 2005; 11: 145-53). Scopo della presente invenzione à ̈ quello di associare l’azione degli oligosaccaridi prebiotici, per favorire la crescita della flora vaginale autoctona, con agenti antibatterici in grado di ridurre seletivamente la carica batterica patogena qualora necessario. Tale potenziate combinazione e già nota nell'arte e à domanda dì brevetto MI2003A000915 riporta ad esempio fuso di oligosaccaridi prebiotici con farmaci antibiotici ed agenti naturali antibatterici, citando altresì l’uso di vari farmaci antibiotici ed oli essenziali come il TTO. Tuttavia la combinazione tra oligosaccaridi prebiotici e composti antibatterici potrebbe avere almeno 2 tipi di limitazioni. Una prima limitazione à ̈ costituita dal fatto che agenti antibatterici non selettivi potrebbero agire indiscriminatamente sia contro i Lattobacilli endogeni che contro i batteri patogeni con la conseguenza di eliminare non solo quest'ultimi ma anche la flora batterica endogena e ridurre ovviamente l'efficacia terapeutica degli oligosaccaridi prebiotici. Ad esempio à ̈ consuetudine consolidata prescrivere o consigliare fuso di Lattobacilli durante la terapia antibiotica sistemica allo scopo di ripristinare la flora batterica intestinale. Inoltre, tale eventualità à ̈ specificatamente avvalorata a livello vaginale anche nella domanda di brevetto FR2874825-A1. Un secondo ordine di limitazioni proviene dalla ben nota capacità dei farmaci antibiotici ed in generale di tutti i composti antibatterici di ingenerare resistenze nei batteri. Infatti si consiglia di non prolungare in modo arbitrario la terapia antibatterica perché questa favorisce l’insorgenza di ceppi di batteri patogeni resistenti (Guida all’uso dei farmaci. Agenzia Italiana del Farmaco, 2007 4, 7.1 pag 234). Ne risulta pertanto che un uso prolungato di agenti antibatterici à ̈ altamente sconsigliato in preparati che debbano essere utilizzati in modo continuativo per la prevenzione delle VB, così come per altre patologie caratterizzate da frequenti recidive. Per superare queste limitazioni la presente invenzione prevede l' uso di oligosaccaridi prebiotici in associazione a sostanze antibatteriche naturali fisiologicamente presenti a livello vaginale. I polipeptidi endogeni ad attività antimicrobica presenti nei fluidi vaginali sono numerosi, tra gli altri ricordiamo: Lisozima. Lattoferrina, SLP1 (secretory leukocyte protease inhibitor), HNP-1 -2 -3 (human neutrophil peptides) e HBDs (human β-defensin), Calgranulin A e B, Histone H2A family . Tra tali sostanze quelle che sono particolarmente preferite per un utilizzo nella presente invenzione sono: Lisozima e Lattoferrina in quanto disponibili commercialmente come principi attivi e che presentano una attività biologica analoga a quella espressa dal composto endogeno. Lisozima umano à ̈ una proteina basica con una catena polipeptidica di 130 aminoacidi avente un peso molecolare di circa 15000 dalton (Salton MRJ Bacteriol Rev, 1957; 21; 82-99). Questa proteina à ̈ naturalmente presente in alte concentrazioni nelle secrezioni vaginali umane in condizioni fisiologiche e determina, almeno in parte, la ben documentata attività antimicrobica del muco cervicale (Eggert-Kruse W et al. Human Reproduction 2000; 15(4): 778-84). La Lattoferrina à ̈ una glicoproteina basica con 703 residui amminoacidici e con un’alta capacità di legare ioni ferro. La Lattoferrina ha un ruolo essenzialmente difensivo nell’organismo umano, infatti oltre ad essere un potente agente batteriostatico ha anche un’attività battericida e può interferire nella proliferazione di funghi e virus (Levay PF et al. Haematologica 1995; 80: 252-67). La presenza di Lattoferrina nel muco vaginale à ̈ ben documentata e non solo risente del ciclo ormonale nella donna ma risulta anche evidente una consecutività cranio-caudale (utero, cervice, vagina) delle sue concentrazioni dipendendo dalle fluttuazioni ormonali (Newbold RR et al Biol Reproduct. 1992; 47: 903-15). E’ del tuto evidente che l’associazione di agenti prebiotici con sostanze antibatteriche naturali e già endogenamente presenti e livello vaginale; 1) riduce grandemente la possibilità di interferenza di queste con i lattobacilli endogeni, 2) ripristina il potenziale antibatterico endogeno la cui riduzione à ̈ una potenziale causa delle infezioni patogene. Pertanto le quantità in peso di Lisozima e Lattoferrina particolarmente preferite nella presente invenzione atte alla somministrazione topica intravaginale sono quelle che mediamente risultano essere presenti in maniera fisiologica a livello endo-vaginale. In particolare la quantità dì Lisozima à ̈ compresa tra 6.4 Î1⁄4g/ml e 391.4 gg/ml con una media di 33.0 Î1⁄4g/ml (Eggert-Kruse W et al. Human Reproduction 2000; 15(4): 778-84), Analogamente la concentrazione di Lattoferrina à ̈ compresa tra 3.8 Î1⁄4g/g proteine e 218 Î1⁄4g/g proteine ( Levay PF et al. Haematologica 1995; 80; 252-67). Lattoferrina e Lisozima possono essere utilizzate singolarmente od in associazione tra di loro o con altri peptidi antibatterici naturali. Ad ulteriore miglioramento dell' efficacia dell’associazione tra agenti prebiotici e peptidi antibatterici naturali, la presente invenzione prevede l’uso di Ac. Ialuronico che, sebbene già utilizzato a livello vaginale per le sue ben note attività idratanti e cicatrizzanti, sorprendentemente à ̈ in grado di potenziarne le azioni terapeutiche di detta associazione. Inoltre, sorprendentemente il Polivinilpirrolidone (PVP) può vantaggiosamente sostituire in toto od in parte l’Ac. Ialuronico nella sua efficacia nella presente invenzione. Se richiesto l'Ac. laluronico può essere vantaggiosamente sostituito in toto od in parte con Chitosano,

Per agenti prebiotici si intendono nella presente invenzione tutte quelle sostanze in grado di favorire la crescita di lactobacilli e bifidoba ed in generale della flora microbica endogena, cosi come ad esempio sono definiti da Cummings JH et al Am, J. din. Nutr. 2001 73 (suppl). 415S-20S. Nella presente invenzione sono stati studiati più in particolare inulina e una serie di oligosaccaridi ad attività prebiotica come ad esempio i frutto-oligosaccaridi (FOS), xylo-oligosaccaridi, Polydextrose, Raffiline, Oligomate, Palatinose, Pyrodextrin. gluco-oligosaccaridi, galacto-oligosaccaridi e oligoglucosammine meglio conosciuti come Chitosano oligosaccaridi e miscele degli stessi. Per peptidi antibatterici naturali ed altre terminologie analoghe si intendono nella presente invenzione: Lisozima e Lattoferrina, e quanti riportati nella tabella 1 in Venkataraman N, et al. J. Immimol. 2005; 175: 7560-67 con la specìfica dizione antibatterica ovvero Neutrophil Gelatinase Associated Lipocafin, Histone-H2B -H2A Family — H4 Family, Calgranulin, HNP-1 -2 -3, inoltre SLPI (secretory leukocyte protease inbibitor e HBDs (human β-defensin) non riportati in tale tabella. Inoltre le concentrazioni fisiologiche di tali polipeptide si riferiscono a quelle riportate in tabella II della stessa pubblicazione, ad eccezione di Lattoferrina (3.8 Î1⁄4g/g proteine e 218 Î1⁄4g/g proteine) in quanto non riportata in tale tabella e Lisozima (6.4Î1⁄4 pg/ml e 391.4 Î1⁄4g/ml) in quanto le presenti concentrazioni sono state calcolate in base alla specifica attività antibatterica del composto in commercio (Eggert-Kruse W et al. Human Reproduction 2000; 15(4); 778-84). L’acido Ialutonico utilizzabile nella presente invenzione ha un peso molecolare compreso tra 5000 e 15.000.000 dalton e può essere di origine animale o preferibilmente fermentativa ad alto peso molecolare, ovvero superiore a 800.000 dalton. Le formulazioni farmaceutiche utili per somministrare trovato della presente invenzione sono quelle adatte per la somministrazione di farmaci intravaginali topici e comprendono, senza esclusione di altre formulazioni farmaceuticamente accettabili, ad esempio; gel e creme vaginali, lavande, ovuli e candelette, capsule molli, schiume vaginali ecc.

Esempio 1 Gel vaginale. Composizione quali-quantitativa per 100 g di formulato: Lisozima 0.2g; Actilight 950P 8g; Ialuronico sale sodico 0.2g; Idrossietilcellulosa 50HHX Pharma 1.8g; Glicol propilenico 4,0g; Glicerina 2g; Nipaguard MPA 0.3g; Allantoina 0.2g; BHA 0.01g; Ac. Lattico q.b. pH 4.5; Η2O depurata q.b. 100g. Dosaggio consigliato per singola applicazione tramite cannula intravaginale 2.5 g.

Esempio 2 Gel vaginale. Composizione quali-quantitativa per 100 g di formulato; Lisozima 0.2g; Lattoferrina 0.2g; Actilight 950P 8g; ialuronico sale sodico 0.2g; PVP K29/32 2g; idrossietilcellulosa 50HHX Pharma 1,8-2.0g; Glicol propilenico 4,0g; Glicerina 2g; Camomilla distillato acquoso 8g; Nipaguard MPA 0.3g; Allantoina 0.2g; BHA 0.01 g; Ac. q.b. pH 4.5; depurata q.b. 100g. Dosaggio consigliato come nell' esempio precedente

Esempio 3 Lavanda vaginale. Composizione quali-quantitativa per 100 g di formulato; Lisozima 0.2g; Actilight 950P 8g; PVP K29/32 2g: Glicol propilenico 4,0g; Glicerina 2g; Camomilla distillato acquoso 8g; Nipaguard MPA 0.3g; Allantoina 0.2g; BHA 0.01 g; Ac. q.b. pH 4,5; H2O depurata q.b. 100g. Dosaggio consigliato per singola applicazione tramite cannula vaginale 150 ml

Esempio 4 Ovuli vaginali. Composizione quali-quantitativa per 1 ovulo da 2g: Lisozima 5mg; Actilight 950P 200mg; Ialuronico sale sodico 5mg; Suppocire S2X q.b 2g. Dosaggio consigliato 1 ovulo vaginale 2 volte al di.

Claims (7)

1. RIVENDICAZIONI 1. Formulazioni farmaceutiche per somministrazione vaginale contente oligosaccaridi prebiotici in associazione a polipeptidi antibatterici endogenamente presenti nei fluidi vaginali e acido ialuronico nella prevenzione e terapia delle vulvo-vaginiti e nel ripristino della fisiologia vaginale.
2. 2. Formulazioni farmaceutiche secondo la rivendicazione 1 dove il polivinilpirrolidone (PVP) può essere sostituito all’ac. ialuronico.
3. 3. Formulazioni farmaceutiche secondo la rivendicazione 1 dove lacido ialuronico à ̈ sostituito da una miscela di acido ialuronico e polivinilpirrolidone (PVP).
4. 4. Formulazioni farmaceutiche secondo la rivendicazione 1 dove l’acido ialuronico può essere sostituito in toto od in parte con chitosano.
5. 5. Formulazioni farmaceutiche secondo la rivendicazione 1 dove gli oligosaccaridi prebiotici sono sostanze in grado di favorire la crescita della flora batterica endogena ed in particolare di Lactobacillus acidophilus.
6. 6. Formulazioni farmaceutiche secondo la rivendicazione 2 dove gli oligosaccaridi prebiotici sono frutto-oligosaccaridi (FOS), xylooligosaccaridi. oligo-glucosammine meglio conosciute come Chitosano-oligosaccaridi, gluco-oligosaccaridi, galactooligosaccaridi e loro miscele.
7. 7. Formulazioni farmaceutiche secondo le rivendicazioni precedenti dove i polipeptidi antibatterici sono: Lisozima e La , Neutrophil Gelatinase Associated Lipocal Htstone-H2B -H2A family -H4 family , Calgranulin, HNP-1 -2 -3, inoltre SLPI (secretory leukocyte protease inhibitor) e HBDs (human β-defensin) e loro associazioni, 8 Formulazioni farmaceutiche secondo le rivendicazioni precedenti dove i polipeptidi antibatterici naturali sono presenti in quantità adatte a determinare concentrazioni fisiologiche quando somministrate intravaginalmcnte. 9 Formulazioni farmaceutiche secondo le rivendicazioni precedenti in cui i polipeptidi antibatterici naturali sono Lisozima e Lattoferrina commercialmente disponibili e loro eventuali associazioni, 10 Formulazioni farmaceutiche secondo tutte le rivendicazioni precedenti adatti alla somministrazione topica vaginale e comprendenti, lavande in soluzione pronte all’uso e da ricostituirsi mediante acqua od altro liquido farmaceuticamente accettabile, gel, lozioni, ovuli, candelette e supposte, compresse, capsule e capsule in gelatina molle, schiume addizionate a gas o senza gas propellenti, sospensioni ed emulsioni.