[go: up one dir, main page]

HUP0000497A2 - C, D, E és F epotilon, alkalmazásuk és e vegyületeket tartalmazó készítmények - Google Patents

C, D, E és F epotilon, alkalmazásuk és e vegyületeket tartalmazó készítmények

Info

Publication number
HUP0000497A2
HUP0000497A2 HU0000497A HUP0000497A HUP0000497A2 HU P0000497 A2 HUP0000497 A2 HU P0000497A2 HU 0000497 A HU0000497 A HU 0000497A HU P0000497 A HUP0000497 A HU P0000497A HU P0000497 A2 HUP0000497 A2 HU P0000497A2
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
epothilone
culture
biotransformed
adsorbent resin
methanol
Prior art date
Application number
HU0000497A
Other languages
English (en)
Inventor
Klaus Gerth
Gerhard Höfle
Hans Reichenbach
Heinrich Steinmetz
Original Assignee
Gesellschaft für Biotechnologische Forschung mbH.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=26031383&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=HUP0000497(A2) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Gesellschaft für Biotechnologische Forschung mbH. filed Critical Gesellschaft für Biotechnologische Forschung mbH.
Publication of HUP0000497A2 publication Critical patent/HUP0000497A2/hu
Publication of HUP0000497A3 publication Critical patent/HUP0000497A3/hu
Publication of HU229833B1 publication Critical patent/HU229833B1/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/06—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing only aliphatic carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
    • A01N43/72—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with nitrogen atoms and oxygen or sulfur atoms as ring hetero atoms
    • A01N43/74—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with nitrogen atoms and oxygen or sulfur atoms as ring hetero atoms five-membered rings with one nitrogen atom and either one oxygen atom or one sulfur atom in positions 1,3
    • A01N43/78—1,3-Thiazoles; Hydrogenated 1,3-thiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
    • A01N43/90—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having two or more relevant hetero rings, condensed among themselves or with a common carbocyclic ring system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/20—Bacteria; Substances produced thereby or obtained therefrom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/04—Antineoplastic agents specific for metastasis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
    • C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D493/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/16—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing two or more hetero rings
    • C12P17/167—Heterorings having sulfur atoms as ring heteroatoms, e.g. vitamin B1, thiamine nucleus and open chain analogs
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/18—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms containing at least two hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system, e.g. rifamycin
    • C12P17/181—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring heteroatoms in the condensed system, e.g. Salinomycin, Septamycin

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Silicon Polymers (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Epoxy Compounds (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)

Abstract

A találmány C D, E és F epőtilőn előállítására vőnatkőzik. A találmánytárgya tővábbá e vegyületek felhasználása gyógyászati készítmények,valamint növényvédő szerek előállítása céljára. (a) Sőrangiűmcellűlősűm DSM 6773 jelű törzset önmagában ismert módőn tenyésztikadszőrbens gyanta jelenlétében, eltávőlítják az adszőrbens gyantától,és amennyiben helyénvaló, az elkülönített tenyészet teljes mennyiségétvagy egy részét A vagy B epőtilőn metanőlős őldatával kezelik, (b) azepőtilőnnal kezelt tenyészetet inkűbálják, majd adszőrbens gyantávalkezelik, (c) az adszőrbens gyantát a tenyészettől elkülönítik,metanőllal elűálják, és az elűátűmőt betöményítve nyers extraktűmőtkapnak, (d) a nyers extraktűmőt etil-acetát és víz között megősztják,az etil-acetátős fázist leválasztják és betöményítése űtán őlajatkapnak, (e) az őlajat reverz fázisú őszlőpőn krőmatőgrafálják azalábbi körülmények között: az őszlőp anyaga: Nűcleősil 100 C-18 7 mmőszlőpméretek: 250 x 4 mm elűálószer: metanől/víz = 60 : 40 áramlásisebesség: 1, 2 ml/perc és azőkat a frakciókat, amelyekbiőtranszfőrmált főrmát tartalmaznak, és amelyek UV extinkcióval 254nm-nél detektálhatók és Rt értékük 5,0 perc, leválasztják, és abiőtranszfőrmált főrmákat izőlálják. ŕ

Description

KÖZZÉTÉTELI PÉLDÁNY
C, D, E ÉS F EPOTILON, ALKALMAZÁSUK ÉS E VEGYÜLETEKET TARTALMAZÓ KÉSZÍTMÉNYEK
A találmány C, D, E és F epotilon előállítására vonatkozik. A találmány tárgya továbbá e vegyületek felhasználása gyógyászati készítmények, valamint növényvédőszerek előállítása céljára.
A találmány - egyik megvalósítási módja szerint epotilonokra (C és D) vonatkozik, melyeket oly módon állítunk elő, hogy (a) Sorangium cellulosum DSM 6773 jelű törzset önmagában ismert módon adszorbens gyanta jelenlétében tenyésztünk, (b) az adszorbens gyantát a tenyészetből eltávolítjuk és víz/metanol eleggyel mossuk, (c) a mosott adszorbens gyantát metanollal eluáljuk, és az eluátumot betöményítve nyers extraktumot kapunk, (d) a kapott koncentrátumot etil-acetáttal extraháljuk, az extraktumot betöményítjük és metanol és hexán között megosztjuk, (e) a metanolos fázist betöményítve raffinátumot kapunk, és a koncentrátumot Sephadex oszlopon frakciónáljuk, (f) az alkalmazott mikroorganizmus által termelt metabolitokát tartalmazó frakciót megkapjuk, (g) a kapott frakciót C18 típusú reverz fázisú oszlopon metanol/víz eleggyel kromatografáljuk, és ezt követően
- egy A epotilont tartalmazó első frakciót
- egy B epotilont tartalmazó második frakciót
- egy első további epotilont tartalmazó harmadik frakciót és egy második további epotilont tartalmazó negyedik frakciót kapunk, és (hl) az első további frakció epotilonját és/vagy (h2) a második további frakció epotilonját elkülönítjük.
A találmány tárgya továbbá C26H39NOsS tapasztalati képletű epotilon [C], amelyet az 1. Táblázat szerinti XH- és 13C-NMR-spektrum jellemez.
A találmány tárgya továbbá az alábbi képletű C epotilon:
C epotilon C R = H
A találmány tárgya továbbá C27H4iNOsS tapasztalati képletű epotilon [D], amelyet az 1. Táblázat szerinti XH- és 13C-NMR-spektrum jellemez.
A találmány tárgya továbbá az alábbi képletű D epotilon:
D epotilon R = CH3
A C és D epotilon felhasználható az alábbi 1 képletű vegyületek előállításához, melyek a WO-A-97/19 086 sz. szabadalmi leírásban ismertetett módszerrel állíthatók elő.
A fenti 1. képletben:
R = H, Ci-4-alkil;
R1, R2, R3, R4, Rs = H, Ci-6-alkil, .
Ci-6-acil-benzoil,
Ci-4-trialkil-szilil, benzil, fenii,
Ci-6-alkoxi-,
C6-alkil-, hidroxi- és halogénnel helyettesített benzil vagy fenii;
ahol az R1 - Rs gyökök közül kettő ~(CH2)n- csoportot is alkothat, amelyben n jelentése 1 és 6 közötti szám, és a gyökökben lévő alkil- vagy acil-csoportok egyenes vagy elágazó láncúak;
Y és Z jelentése azonos vagy különböző lehet és egymástól függetlenül hidrogénatomot, halogénatomot (pl. F, Cl, Br vagy I), pszeudohalogént (pl. -NCO, -NCS vagy -N3csoportot) , OH-, O-( Ci-6)-acil-, 0-( Ci-6)-alkil- vagy 0benzoil-csoportot képviselhet. Y és Z jelentheti egy epoxid oxigénatomját is, mivel oltalmi igényünk az A és B epotilonra nem terjed ki, vagy egy C=C kettős kötés egyik C-C kötését alkotják.
A 12,13-kettős kötés szelektíven
- hidrogénezhető, például katalitikusán vagy diiminnel, ily módon olyan 1 képletű vegyületet kapunk, amelynek képletében Y = Z = H; vagy
- ’epoxiddá alakítható, például dimetil-dioxiránnal vagy egy persavval, ily módon olyan 1 képletű vegyületet kapunk, amelynek képletében Y = Z = -0-; vagy dihalidokká, dipszeudohalidokká vagy diazidokká alakítható, ily módon olyan 1 képletű vegyületet kapunk, amelynek képletében Y és Z = Hal, pszeudo-hal vagy N3. E és F epotilon
A találmány továbbá A epotilonnak egy biotranszformált formájára vonatkozik, amelyet úgy állíthatunk elő, hogy (a) Sorangium cellulosum DSM 6773 jelű törzset önmagában ismert módon tenyésztünk adszorbens gyanta jelenlétében, eltávolítjuk az adszorbens gyantától, és amennyiben helyénvaló, az elkülönített tenyészet teljes mennyiségét vagy egy részét A epotilon metanolos oldatával kezeljük, (b) az A epotilonnal kezelt tenyészetet inkubáljuk, majd adszorbens gyantával kezeljük, (c) az adszorbens gyantát a tenyészettől elkülönítjük, metanollal eluáljuk, és az eluátumot betöményítve nyers extraktumot kapunk, (d) a nyers extraktumot etil-acetát és víz között megosztjuk, az etil-acetátos fázist leválasztjuk és betömény!tése után olajat kapunk, (e) az olajat reverz fázisú oszlopon kromatografáljuk az alábbi körülmények között:
az oszlop anyaga: Nucleosil 100 C-18 7 pm ' oszlop-méretek: 250 x 16 mm eluálószer: metanol/víz =60 : 40 áramlási sebesség: 10 ml/perc és azokat a frakciókat, amelyek biotranszformált formát tartalmaznak, és amelyek UV extinkcióval 254 nm-nél detektálhatok és Rt értékük 20 perc, leválasztjuk, és a biotranszformált formákat izoláljuk.
A találmány tárgya továbbá ilyen típusú A epotilon biotranszformált formája, amelyet úgy állíthatunk elő, hogy az (a) szakaszban három, négy vagy több napos tenyészetet választunk le.
A találmány tárgya továbbá ilyen típusú A epotilon biotranszformált formája, amelyet úgy állíthatunk elő, hogy a (b) szakaszban az inkubálást egy, két vagy több napig végezzük.
A találmány tárgya továbbá C26H39NO7S tapasztalati képletű vegyület, amely az alábbi 1H-NMR-spektrummal jellemezhető: (300 MHz, CDC13) : delta = 2,38 (2-HJ ,2,51 (2-Hb) , 4,17 (3-H) , 3,19 (6-H), 3,74 (7-H) , 1,30 - 1,70 (8-H, 9-H2, 10-H2, 11-H2) , 2,89 (12-H) , 3,00 (13-H) , 1,88 (14-HJ, 2,07 (14-Hb) , 5,40 (15-H) , 6,57 (17-H) ,7,08 (19-H) , 4,85 (21-H2) , 1,05 (22-H3) , 1,32 (23-H3) ,1,17 (24-H3) , 0,97 (25-H3) , 2,04 (27-H3) .
A találmány tárgya továbbá az alábbi képletű vegyület (E epotilon ):
O . OH 0
E epotilon R = H
A találmány tárgya továbbá B epotilon egy biotranszformált formája, melyet úgy állíthatunk elő, hogy (a) Sorangium céllulosum DSM 6773 jelű törzset önmagában ismert módon tenyésztünk adszorbens gyanta jelenlétében, eltávolítjuk az adszorbens gyantától, és amennyiben helyénvaló, az elkülönített tenyészet teljes mennyiségét vagy egy részét B epotilon metanolos oldatával kezeljük, (b) a B epotilonnal kezelt tenyészetet inkubáljuk, majd adszorbens gyantával kezeljük, (c) az adszorbens gyantát a tenyészettől elkülönítjük, metanollal eluáljuk, és az eluátumot betöményítve nyers extraktumot kapunk, (d) a nyers extraktumot etil-acetát és víz között megosztjuk, az etil-acetátos fázist leválasztjuk és betöményitése után olajat kapunk, (e) az olajat reverz fázisú oszlopon kromatografáljuk az alábbi körülmények között:
az oszlop anyaga: Nucleosil 100 C-18 7 pm oszlop-méretek: 50 x 16 mm eluálószer: etanol/víz = 60 : 40 áramlási sebesség: 10 ml/perc és azokat a frakciókat, amelyek biotranszformált formát tartalmaznak, és amelyek UV extinkcióval 254 nm-nél detektálhatok és Rt értékük 24,5 perc, leválasztjuk, és a biotranszformált formákat izoláljuk.
A találmány tárgya továbbá ilyen típusú B epotilon biotranszformált formája, amelyet úgy állíthatunk elő, hogy az (a) szakaszban három, négy vagy több napos tenyészetet választunk le.
A találmány tárgya továbbá ilyen típusú B epotilon biotranszformált formája, amelyet úgy állíthatunk elő, hogy a (b) szakaszban az inkubálást egy, két vagy több napig végezzük.
A találmány tárgya továbbá C27H41NO7S tapasztalati képletű vegyület, amely az alábbi 1H-NMR-spektrummal jellemezhető: (300 MHz, CDC13) : delta = 2,37 (2-HJ , 2,52 (2-Hb) , 4,20 (3-H) , 3,27 (6-H), 3,74 (7-H) , 1,301,70 (8-H, 9-H2, 10-H2, 11-H2) , 2,78 (13-H), 1,91 (14-H),
2,06 (14-Hb) , 5,42 (15-H), 6,58 (17-H) , 7,10 (19-H),
4,89 (21-H2) , 1,05 (22-H3) , 1,26 (23-H3) , 1,14 (24-H3) ,
0,98 (25-H3) , 1,35 (26-H3) , 2,06 (27-H3) .
A találmány tárgya továbbá az alábbi képletű vegyület (F epotilon):
F epotilon
R = C H3
Előállítás és készítmények
A találmány szerinti vegyületek vagy epotilonok a fent ismertetett módszerekkel állíthatók elő.
A találmány továbbá a mezőgazdaságban, az erdészetben és/vagy a kertészetben növényvédelem céljára szolgáló készítményekre vonatkozik, amelyek egy vagy több, a fentiekben említett C, D, E és F epotilont, vagy egy vagy több, a fentiekben említett C, D, E és F epotilont és amellett egy vagy több szokásosan alkalmazott hordozóanyagot és/vagy hígítószert tartalmaznak.
A találmány végül gyógyászati készítményekre is vonatkozik, amelyek egy vagy több fent említett vegyületet, vagy egy vagy több fent említett vegyületet és amellett egy vagy több szokásosan alkalmazott hordozóanyagot és/vagy hígítószert tartalmaznak. Közelebbről, ezek a készítmények citotoxikus hatást tanúsítanak és/vagy immunszuppressziót idéznek elő és/vagy rosszindulatú daganatok megfékezésére alkalmazhatók. Különösen előnyösen használhatók citosztatikumokként.
A találmányt az alábbi kiviteli példákkal részletesebben is bemutatjuk.
Példák .' Példa
C és D epotilon
A. Az előállításhoz használt baktérium-törzs és a tenyésztési feltételek az epotilon alapszabadalmában, a DEB-41 38 042 sz. szabadalomban leírtaknak felelnek meg.
B. Előállítás DSM 6773 törzzsel
1 tenyészetet az alapszabadalomban ismertetett módon tenyésztünk, és egy gyártó fermentálóberendezésben elhelyezett, 700 1 térfogatú előállító közeget oltunk be vele. A közeg összetétele az alábbi: 0,8 % keményítő, 0,2 % szőlőcukor, 0,2 % szójaliszt, 0,2 % élesztőkivonat, 0,1 % CaCl2 x 2H2O, 0,1 % MgSO4 x 7 H20, 8 mg/l Fe-EDTA, pH = 7,4 és kívánt esetben 15 1 Ambrelite XAD-16 adszorber gyanta. A fermentálás 30 °C hőmérsékleten 7-10 napig tart, a levegőztetést 0,1 NL/m3 -rel végezzük. A rotáció sebességének kontrollálásával a pO2-t 30 %-on tartjuk.
C. Izolálás
Az adszorbens gyantát a tenyészettől 0,7 m2, 100 mesh lyukméretű szűrő alkalmazásával elválasztjuk, és az ágy térfogatára számítva háromszoros mennyiségű, 2:1 arányú víz/metanol eleggyel mosássuk, hogy megszabadítsuk a poláros szennyeződésektől. Az ágy térfogatára számítva négyszeres mennyiségű metanollal történő eluálást követően nyers extraktumot kapunk, amelyet vákuumban a vizes fázis megjelenéséig bepárolunk. Ezt háromszor ugyanolyan mennyiségű etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist bepárolva 240 g nyers extraktumot kapunk, amelyet a lipofil szennyeződések leválasztása céljából metanol és heptán között megosztunk. Az elegyet vákuumban bepároljuk, ily módon 180 g raffinátumot kapunk a metanolos fázisból, amit Sephadex LH-20 jelű oszlopon (20 x 100 cm, 20 ml/perc metanol) három részre frakcionálunk. Az epotilonokat a 240 - 300 perc retenciós idővel kioldódó frakció tartalmazza, melynek össz-mennyisége 72 g. Az epotilonok szétválasztása céljából a frakciót három részletben kromatografáljuk Lichrosorb RP-18 oszlopon (15 pm, 10 x 40 cm-es oszlop, eluálószer: 180 ml/perc sebességgel átfolyatott, 65:35 arányú metanol/víz elegy) . Először az A és B, majd a C epotilon oldódik ki (Rt = 90-95 perc), majd pedig a D epotilon 100-110 perc retenciós idővel. Vákuumban történő bepárlás után valamennyi terméket színtelen olaj formájában kapjuk, 0,3 g hozammal.
D. Fizikai tulajdonságok:
C epotilon R = H
D epotilon R = CH3
C epotilon
C26H39NO5S [477]
ESI-MS: (pozitív ionok): 478,5 [M+H]+-ra XH- és 13C lásd az NMR táblázatot
TLC: Rf = 0,82
TLC alumínium fólia 60 F 254 Merck, eluálószer:
diklór-metán/metanol = 9:1
Detektálás: UV extinkció 254 nm-nél. Permetezés vanillinkénsav reagenssel, kék-szürke elszíneződés 120 °C-ra történő felmelegítés hatására.
HPLC: Rt = 11,5 perc
Oszlop: Nucleosil 100 C-18 7 pm, 125 x 4 nm
Eluálószer: metanol/víz = 65:35
Áramlási sebesség: 1 ml/perc
Detektálás: diódasor
D epotilon
C27H41NO5S [491]
ESI-MS: (pozitív ionok): 492,5 [M+H]+-ra XH- és 13C : lásd az NMR táblázatot
TLC: Rf = 0,82
TLC alumínium fólia 60 F 254 Merck, eluálószer: diklór-metán/metanol = 9:1
Detektálás: UV extinkció 254 nm-en. Permetezés vanillinkénsavas reagenssel, kék-szürke elszíneződés 120°C-ra történő hevítésnél.
HPCL:. Rt = 15,3 perc
Oszlop: Nucleosil 100 C-18 7 pm, 125 x 4 mm
Eluálószer: metanol/víz = 65 : 35
Áramlási sebesség: 1 ml/perc
Detektálás: diódasor
1. Táblázat: C epotilon és D epotilon 1H- és 13C-NMR adatai [D6] DMSO-ban, 300 MHz-en
C epotilon D epotilon
H atom 6 C atom δ δ C atom δ
(ppm) (ppm) (ppm) (ppm)
1 170,3 1 170,1
2-Ha 2,38 2 38,4 2,35 2 39,0
2-Hb 2,50 3 71,2 2,38 3 70,8
3-H 3,97 4 53,1 4,10 4 53,2
3-OH 5,12 5 217,1 5,08 5 217,4
6-H 3,07 6 45,4 3,11 6 44,4
7-H 3,49 7 75,9 3,48 7 75,5
7-OH 4,46 8 35,4 4,46 8 36,3
8-H 1,34 9 27,6 1,29 9 29,9
9-Ha 1,15 10 30,0 1,14 10 25,9
9-Hb 1,40 11 27,6 1,38 11 31,8*
10-Ha 1,15* 12 124,6 1,14* 12 138,3
10-Hb 1,35* 13 133,1 1,35* 13 120,3
11,-Ha 1,90 14 31,1 1,75 14 31,6*
11-Hb 2,18 15 76,3 2,10 15 76,6
12-H 5,38** 16 137,3 16 137,2
13-H 5,44** 17 119,1 5,08 17 119,2
14-Ha 2,35 18 152,1 ' 2,30 18 152,1
14-Hb 2,70 19 117,7 2,65 19 117,7
15-H 5,27 20 164,2 5,29 20 164,3
17-H 6,50 21 18,8 6,51 21 18,9
19-H 7,35 22 20,8 7,35 22 19,7
21-H3 2,65 23 22,6 2,65 23 22,5
22-H3 0,94 24 16,7 0,90 24 16,4
23-H3 1,21 25 18,4 1,19 25 18,4
24-H3 1,06 27 14,2 1,07 26 22,9
25-H3 0,90 0,91 27 14,1
26-H3 1,63
27-H3 2,10 2,11
*, ** felcserélhető asszignáció
2. Példa
A epotilon és 12,13-bisepi- A epotilon előállítása C epotilonból mg C epotilont feloldunk 1,5 1 ace tonban, és az oldatot dimetil-dioxirán 0,07 mólos acetonos oldatának 1,5 ml-ével kezeljük. Az elegyet 6 órán át szobahőmérsékleten állni hagyjuk, majd vákuumban bepároljuk, és a maradékot preparatív HPLC segítségével szilikagélen (eluálószer: metil-tert. butil-éter/petróleuméter/metanol 33 : 66 : 1 arányú elegye) elkülönítjük. Kitermelés:
mg A epotilon, Rt = 3,5 perc (analit. HPLC, 7 pm, oszlop 4 x 250 mm, eluálószer : lásd fent, áramlási sebesség 1,5 ml/perc) és mg 12,13-bisepi-A-epotilon, Rt = 3,7 perc, ESI-MS (póz. ionok) m/e = 494 [M+H]+-ra 1HNMR [D4] metanolban, választott jelek: delta = 4,32 (3-H), 3,79 (7
-H), 3,06 (12-H), 3,16 (13-H),
5,54 (15-H), 6,69 (17-H), 1,20 (22-H), 1,45 (23-H) .
12,13-bisepi-A-epotilon R = Η
3. Példa
E és F epotilon, az A és B epotilon új biotranszformált termékei
Az előállításhoz használt baktérium-törzs:
Az előállításhoz használt Sorangium cellulosum So ce90 törzset 1985-ben izolálták a Ges. fúr Biotechnologische Forschung mbH-nál a Zambezi partjáról származó talajmintából, és 1991. október 28-án helyezték letétbe a ♦
Mikroorganizmusok Németországi Gyűjteményében DSM 6773 számon.
Az előállítóra és a tenyésztési feltételekre vonatkozó adatok az alábbi irodalmi helyen találhatók: Höfle, G. ; N. Bedorf, K. Gerth and H. Reichenbach: Epotilonok, eljárás előállításukra és azokat tartalmazó készítmények. DE 41 38 042 A1, közrebocsátva 1993. május 27.-én.
E és F epotilon előállítása fermentálással:
Egy tipikus fermentálás! eljárást végzünk az alábbiak szerint: Egy 100 1-es bioreaktort megtöltünk 60 1 közeggel (0,8 % keményítő, 0,2 % szőlőcukor, 0,2 % szójaliszt, 0,2 % élesztőkivonat, 0,1 % CaCl2 x 2H2O, 0,1 % MgSO4 x 7 H2O, 8 mg/1 Fe-EDTA, pH = 7,4) . Az elegyhez 2 % adszorbens gyantát (XAD-16, Rohm and Haas) adunk. A közeget autoklávban 2 órán át 120 °C-on kezelve sterilizáljuk. A beoltást rázóedényben (160 rpm, 30 °C), 10 1 előtenyészettel végezzük, amelyet ugyanabban a közegben tenyésztettünk (50 mM HEPES puffer hozzáadásával a pH-t 7,4-en tartva). A fermentálást 32 °C-on hajtjuk végre 500 rpm keverési sebességnél és óránként 0,2 Nl/m3 levegő beáramoltatásával, a pH-t kálium-hidroxid hozzáadásával 7,4-en tartva. A fermentálás 7-10 napig tart. A fermentálás folyamán képződött epotilqnokat folyamatosan megkötjük az adszorbens gyantán. A tenyészoldat leválasztása után, ami t pl’, szűréssel végezhetünk, a gyantát az ágy térfogatára számítva háromszoros mennyiségű vízzel mossuk, és négyszeres mennyiségű metanollal eluáljuk. Az eluátumot szárazra betöményítjük és 700 ml metanolban felvesszük.
A XAD eluátum HPLC analízise:
A reaktor kiindulási térfogatára (70 1) vonatkoztatva az eluátumot 100:1 arányúra betöményítjük. Az analízist Hewlett PackardlOOO HPLC egység alkalmazásával végezzük. Az alkotórészek szétválasztása céljából MacheryNagel (Düren) típusú mikroszemcsés oszlopot (125/2 Nucleosil 120-5 C18) alkalmazunk. Az eluálást gradiens módszerrel végezzük, változó arányú víz/acetonitril elegy alkalmazásával (kezdetben 75 : 25 , 5,5 perc elteltével 50 : 50) . Ezt az arányt a 7. percig fenntartjuk, majd a 10. percig 100 % acetonitrilre növeljük.
A mérést 250 nm hullámhosszon, 4 nm sáv-szélességnél végezzük. A diódasoros spektrumot 200 - 400 nm hullámhossztartományban mérjük. A XAD eluátumban két új anyag mutatkozik Rt = 5,29 és Rt = 5,91 retenciós idővel, melyeknek adszorpciós spekrumai azonosak az A és B epotilon adszorpciós spektrumaival (1. ábra, E megfelel A-nak, F megfelel B-nek). Az adott fermentálás! körülmények között ezek az anyagok csak nyomokban keletkeznek.
A és B epotilon biotranszformálása E és F epotilonná:
A specifikus biotranszformációhoz 500 ml 4 napos, adszorbens gyantával fenntartott So Ce90 tenyészetet használunk. Ennek 250 ml-ét 1 1-es steril Erlenmeyerlőmbikba tesszük, a XAD-gyantát hátrahagyva. Ezután 36 mg A epotilon + 14 mg B epotilon keverékének metanolos oldatát adjuk hozzá, és a lombikot rázóállványon, 200 rpm-nél két napon át 30 °C-on inkubáljuk. A képződő E és F epotilont közvetlenül a centrifugált tenyészet felülúszójának 10 μΐéből analizáljuk (2. ábra). Az átalakulás csak a sejtek jelenlétében megy végbe, és függ az alkalmazott sejtsűrűségtől és az időtől. Az átalakulás kinetikáját A epotilonra nézve a 3. ábrán mutatjuk be.
E és F epotilon izolálása
E és F epotilon izolálása érdekében a fenti biotranszformációs elegyből három rázólombiknyi mennyiséget összeöntünk, és 20 ml XAD-16 gyantával 1 órán át rázzuk. A
XAD gyantát kiszűrjük és 200 ml metanollal eluáljuk. Az eluátumot vákuumban bepároljuk Ily módon 1.7 g nyers extraktumot kapunk. Ezt 30 ml etil-acetát és 100 ml víz között megosztjuk. Vákuumban történő bepárlást követően 330 mg olajos maradékot kapunk az etil-acetátos fázisból, amelyet öt menetben kromatorgafálunk egy 250 x 20 mm-es RP18 oszlopon (eluálószer : metanol/víz 58 : 42, detektálás 254 nm-nél).
Kitermelés: E epotilon 50 mg
F epotilon 10 mg
Az E epotilon biológiai hatása:
Sejt-tenyészetekben azt a koncentrációt határoztuk meg, amely 50 %-kal csökkenti a növekedést (IC5o) / és összehasonlítottuk az A epotilonra kapott értékekkel.
Sej tvonal IC5o (ng/ml)
E epotilon A epotilon HeLa.KB-3,1 (humán) 5 1
Egér kötőszöveti sejtek, L929 20 4
E epotilon C26H39HO7S [509] ESI-MS: (pozitív ionok): 510,3 [M+H]+-ra TLC: Rf = 0,58
TLC alumínium fólia 60 F 254 Merck, eluálószer: diklór-metán/metanol =9:1
Detektálás: UV extinkció 254 nm-nél. Permetezés vanillin kénsavas reagenssel, kék-szürke elszíneződés 120°C-ra történő hevítésnél.
HPCL: Rt = 5,0 perc
Oszlop: Nucleosil 100 C-18 7 pm, 250 x 4 mm
Eluálószer: metanol/víz = 60 : 40
Áramlási sebesség: 1,2 ml/perc
Detektálás: diódasor XH-NMR (300 MHz, CDC13) : delta = 2,38 (2-Ha) , 2,51 (2Hb) , 4,17 (3-H), 3,19 (6-H) , 3,74 (7-H) , 1,30-1,70 (8-H, 9-H2, 10-H2, 11-H2) , 2,89 (12-H) , 3,00 (13-H) ,
1,88 (14-HJ, 2,07 (14-Hb) , 5,40 (15-H) , 6,57 (17-H) , 7,08 (19-H) , 4,85 (21-H2) , 1,05 (22-H3) , 1,32 (23-H3) , 1,17 (24-H3) , 0,97 (25-H3) , . 2,04 (27-H3) .
F epotilon
C27H4iNO7S [523]
ESI-MS: (pozitív ionok): 524,5 [M+H]+-ra TLC: Rf = 0,58
TLC alumínium fólia 60 F 254 Merck, eluálószer: diklór-metán/metanol = 9:1
Detektálás: UV extinkció 254 nm-nél. Permetezés vanillinkénsavas reagenssel, kék-szürke elszíneződés 120°C-ra történő hevítésnél.
HPCL:. Rt = 5,4 perc
Oszlop: Nucleosil 100 C-18 7 pm, 250 x 4 mm
Eluálószer: metanol/víz = 60 : 40
Áramlási sebesség: 1,2 ml/perc
Detektálás: diódasor XH-NMR (300 MHz CDC13) : delta = 2,37 (2-HJ , 2,52 (2Hb), 4,20 (3-H), 3,27 (6-H), 3,74 (7-H), 1,30 - 1,70 (8H, 9-H2, 10-H2, 11-H2) , 2,78 (13-H) , 1,91 (14-H) , 2,06 (14-Hb) , 5,42 (15-H), 6,58 (17-H), 7,10 (19-H), 4,89 (21H2) , 1,05 (22-H3) , 1,26 (23-H3) , 1,14 (24-H3) , 0,98 (25-H3) , 1,35 (26-H3) , 2,06 (27-H3) .
4. Példa
E és F epotilon előállítása Sorangium cellulosum So ce90 törzzsel végrehajtott biotranszformációval
1) A biotranszformáció végrehajtása:
A biotranszformációhoz Sorangium cellulosum So ce90 tenyészetet használunk, amit 4 napon át ráztunk 2 % XAD 16 adszorbens gyanta (Rohm and Haas, Frankfurt/M.) jelenlétében, 30 °C-on, 160 rpm-mel. A tenyész-közeg összetétele grammonként, 1 1 desztillált vízben az alábbi. : burgonyakéményítő (Maizena), 8; szőlőcukor (Maizena), 8; zsírtalanított szójaliszt, 2; élesztőkivonat (Marcor), 2; etilén-diamin-tetraecetsav, vas (III) nátrium-só, 0,008; MgSO4 x 7 H20, 1; CaCl2 x 2 H2O, 1; HEPES 11,5. A pH-t a kálium-hidroxiddal végzett autoklávos kezelést megelőzően 7,4-re állítjuk be. A XAD gyantát a tenyészettől rozsdamentes acél szűrőn (200 μπι lyukméret) végrehajtott szűréssel elkülönítjük. A baktériumokat 10 percen át 10 000 rpm fordulatszámmal végzett centrifugálással leülepítjük, és a pelletet a tenyészet felülúszójának egyötöd részéban újra szuszpendáljuk. A tömény baktériumos szuszpenzióhoz ezután A és B epotilon metanolos oldatát adjuk 0,5 g/1 koncentrációban. A tenyészetet a fentiek szerint tovább tenyésztjük. A biotranszformáció elemzése érdekében a kívánt időpontokban 1 ml mintát kiveszünk, 0,1 ml XAD gyantát adunk hozzá, és 30 °C-on 30 percen át rázzuk. A XAD gyantát metanollal eluáljuk. Az eluátumot szárazra betöményitjük, és 0,2 ml metanolban ismét felvesszük. Ezt a mintát HPLC segítségével analizáljuk.
4) Ábra A epotilon E epotilonná történő biotranszformálásának kinetikája
5) Ábra B epotilon F epotilonná történő biotranszformálásának kinetikája
2) E epotilon előállítása 1 g A epotilon biotranszformálásával
Sorangium cellulosum So ce90 törzset négy napon át tenyésztünk a fenti közeg 8,5 1-ében (de XAD gyanta hozzáadása nélkül) egy 10 literes bioreaktorban, 30 °C hőmérsékleten, 150 rpm rotációs sebességnél és 0,1 vvm levegő bevezetése mellett.
A tenyészetet ezután keresztáramú szűréssel 3 1re tömény!tjük be. Erre a célra 0,6 m2 membránt használunk, melynek pórus-mérete 0,3 pm.
A tömény tenyészetet áttesszük egy 4 literes bioreaktorba, és 1 g A epotilon 10 ml metanollal készült oldatát adjuk hozzá. A tenyészetet ezután 21,5 órán át tovább tenyésztjük. A hőmérséklet 32 °C, a keverési sebesség 455 rpm, és percenként 6 1 levegőt vezetünk be. A és azt további 1 órán át inkubáljuk. A XAD gyantát a sejtektől szűréssel elkülönítjük és metanollal alaposan eluáljuk. A tömény eluátumot HPLC segítségével analizáljuk. A biotranszformáció mérlege:
Alkalmazott A epotilon 1000 mg = 100 %
21,5 óra után visszanyert A epotilon 53,7 mg = 5,4 %
21,5 óra után képződött E epotilon 661, 4 mg = 66,1 %
Teljesen lebomlott A epotilon = 28,5 %
5. Kísérlet:
A találmány szerinti epotilonokat sejtvonalakkal szembeni viselkedésük (2. Táblázat) és a polimerizációt elősegítő hatásuk szempontjából (3. Táblázat) vizsgáltuk.
2. Táblázat:
Epotilon tesztek sejtkultúrákkal
Epotilon A B C D E F
493 507 477 491 509 523
IC-50 [ng/ml]
Egér kötöszöveti sejt L 929 4 1 100 20 20 1,5
Humán daganatos sejtvonalak:
HL-60 (leukémia) 0,2 0,2 10 3 1 0,3
K-562 (leukémia) 0,3 0,3 20 10 2 0,5
U-937 (lymphoma) 0,2 0,2 10 3 1 0,2
KB-3,1 (méhnyakrák) 1 0,6 20 12 5 0,5
KB-V1 (cervix multirez rák) 0,3 0,3 15 3 5 0,6
A-498 (veserák) - 1,5 150 20 20 3
A-549 (tüdőrák) 0,7 0,1 30 10 3 0,1
3. Táblázat:
3. Táblázat:
Polimerizációs teszt epotilonokkal Paraméter: A kontroll fél-maximális polimerizációjáig eltelt idő
Mérés: w X y z Reagens Reagens
[s] [%]
Kontroll 200 170 180 210 190 100
Epotilon A 95 60 70 70 74 39
Epotilon B 23 25 30 26 14
Epotilon C 125 76 95 80 94 49
Epotilon D 125 73 120 106 56
Epotilon E 80 60 50 45 59 31
Epotilon F 80 40 30 50 50 26
Standard teszt 0,9 mg tubulin/ml és 1 μΜ minta
koncentrációval
A polimerizációs kísérlet in vitro kísérlet, melynek során sertés agyából származó tisztított tubulint használunk. A kiértékelést fotometriásan végezzük. A polimerizációt elősegítő anyagok, mint pl. az epotilonok, csökkentik azt az időt, amely alatt a fél-maximális polimerizáció végbemegy, vagyis minél rövidebb az idő, annál aktívabb a vegyület. W, x, y és z négy önálló kísérlet, a relatív aktivitást az utolsó oszlopban a kontroll %-ában fejezzük ki; a legjobb hatékonyságot itt is a legalacsonyabb értékek jelzik. A hatás-erősség sorrendje meglehetősen pontos egyezést mutat a sejtvonalakkal végzett kísérlet során tapasztaltakkal.

Claims (16)

  1. módosított oldalak
    1998. december 14.
    Szabadalmi igénypontok:
    1. Az alábbi képletű C epotilon:
  2. 2. C26H39NOsS tapasztalati képletű epotilon, amelyet az 1.
    Táblázat szerinti 1H- és 13C-NMR-spektrum jellemez.
  3. 3. Az alábbi képletű D epotilon:
  4. 4. C27H41NO5S tapasztalati képletű epotilon, amelyet az 1.
    Táblázat szerinti XH- és 13C-NMR-spektrum jellemez.
  5. 5. Az alábbi képletű vegyület (E epotilon):
    E epotilon, R = H
  6. 6. C26H39NO7S tapasztalati képletű vegyület, amelyet az alábbi XH-NMR-spektrum jellemez: (300 MHz, CDC13) : delta = 2,38 (2-HJ , 2,51 (2-Hb) , 4,17 (3-H) , 3,19 (6-H), 3,74 (7H) , 1,30 - 1,70 (8-H, 9-H2, 10-H2, 11-H2) , 2,89 (12-H) , 3,00 (13-H), 1,88 (14-HJ , 2,07 (14-Hb) , 5,40 (15-H), 6,57 (17H) , 7,08 (19-H) , 4,85 (21-H2) , 1,05 (22-H3) , 1,32 (23-H3) , 1,17 (24-H3) , 0,97 (25-H3) , 2,04 (27-H3) .
  7. 7. Az A epotilon biotranszforrnált formája, amelyet úgy állítunk elő, hogy (a) Sorangium cellulosum DSM 6773 jelű törzset önmagában ismert módon tenyésztünk adszorbens gyanta jelenlétében, eltávolítjuk az adszorbens gyantától, és amennyiben helyénvaló, az elkülönített tenyészet teljes mennyiségét vagy egy részét A epotilon metanolos oldatával kezeljük, (b) az A epotilonnal kezelt tenyészetet inkubáljuk, majd adszorbens gyantával kezeljük, (c) az adszorbens gyantát a tenyészettől elkülönítjük, metanollal eluáljuk, és az eluátumot betöményítve nyers extraktumot kapunk, (d) a nyers extraktumot etil-acetát és viz között megosztjuk, az etil-acetátos fázist leválasztjuk és betöményítése után olajat kapunk, (e) az olajat reverz fázisú oszlopon kromatografáljuk az alábbi körülmények között:
    az oszlop anyaga: Nucleosil 100 C-18 7 μη oszlop-méretek: 250 x 4 mm eluálószer: metanol/viz = 60 : 40 áramlási sebesség: 1,2 ml/perc és azokat a frakciókat, amelyek biotranszformált formát tartalmaznak, és amelyek UV extinkcióval 254 nm-nél detektálhatok és Rt értékük 5,0 perc, leválasztjuk, és a biotranszformált formákat izoláljuk. »
  8. 8. Az A epotilon 7. igénypont szerinti biotranszformált formája, azzal jellemezve, hogy az (a) szakaszban három, négy vagy több napos tenyészetet választunk le.
  9. 9. Az A epotilon 7. vagy 8. igénypont szerinti biotranszformált formája, melyet úgy állíthatunk elő, hogy a (b) szakaszban az inkubálást egy, két vagy több napig végezzük.
  10. 10. Az alábbi képletű vegyület (F epotilon):
    HOCH2
    F epotilon R = CH3
  11. 11. C27H41NO7S tapasztalati képletű vegyület, amely az alábbi 1H-NMR-spektrummal jellemezhető: (300 MHz, CDC13) : delta = 2,37 (2-Ha) , 2,52 (2-Hb) , 4,20 (3-H), 3,27 (6-H), 3,74 (7-H) , 1,30 - 1,70 (8-H, 9-H2, 10-H2, 11-H2) , 2,78 (13H) , 1,91 (14-H), 2,06 (14-Hb) , 5,42 (15-H) , 6,58 (17-H) , 7,10 (19-H), 4,89 (21-H2) ,. 1,05 (22-H3) , 1,26 (23-H3) , 1,14 (24-H3) , 0,98 (25-H3) , 1,35 (26-H3) , 2,06 (27-H3) .
  12. 12. B epotilon biotranszformált formája, melyet úgy állítunk elő, hogy (a) Sorangium cellulosum DSM 6773 jelű törzset önmagában ismert módon tenyésztünk adszorbens gyanta jelenlétében, eltávolítjuk az adszorbens gyantától, és amennyiben ' helyénvaló, az elkülönített tenyészet teljes mennyiségét vagy egy részét B epotilon metanolos oldatával kezeljük, (b) a B epotilonnal kezelt tenyészetet inkubáljuk, majd adszorbens gyantával kezeljük, (c) az adszorbens gyantát a tenyészettől elkülönítjük, metanollal eluáljuk, és az eluátumot betöményítve nyers extraktumot kapunk.
    (d) a nyers extraktumot etil-acetát és víz között megosztjuk, az etil-acetátos fázist leválasztjuk és betöményítése után olajat kapunk, (e) az olajat reverz fázisú oszlopon kromatografáljuk az alábbi körülmények között:
    az oszlop anyaga: Nucleosil 100 C-18 7 pm oszlop-méretek: 250 x 4 mm eluálószer: etanol/víz = 60 : 40 áramlási sebesség: 1,2 ml/perc és azokat a frakciókat, amelyek biotranszformált formát tartalmaznak, és amelyek UV extinkcióval 254 nm-nél detektálhatok és Rt értékük 5,4 perc, leválasztjuk, és a bi'otranszformált formákat izoláljuk.
  13. 13. A 12. igénypont szerinti biotranszformált forma, azzal jellemezve, hogy az (a) szakaszban három, négy vagy több napos tenyészetet választunk le.
  14. 14. Az A epotilon 12. vagy 13. igénypont szerinti biotranszformált formája, melyet úgy állíthatunk elő, hogy a (b) szakaszban az inkubálást egy, két vagy több napig végezzük.
  15. 15. A mezőgazdaságban, az erdészetben és/vagy a kertészetben növényvédelem céljára szolgáló készítmények, azzal jellemezve, hogy egy vagy több előző igénypont szerinti egy vagy több vegyületet, vagy egy vagy több említett vegyületet, és amellett egy vagy több szokásosan alkalmazott hordozóanyagot és/vagy hígítószert tartalmaznak.
  16. 16. Gyógyászati készítmények, elsősorban citosztatikumok, azzal jellemezve, hogy egy vagy több előző igénypont szerinti egy vagy több vegyületet, vagy egy vagy több előző igénypont szerinti egy vagy több vegyületet és amellett egy vagy több szokásosan alkalmazott hordozóanyagot és/vagy hígítószert tartalmaznak.
    ADVOPATENT ^SZABADALMI ÉS VÉDJEGY IRODA V KŐVÁRI GYÖRGY i ügyvivő l(/íl Budapest, Fő u. 19.
HU0000497A 1996-11-18 1997-11-18 Epothilone d production process, and its use as cytostatic as well as phytosanitary agents HU229833B1 (en)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE19647580 1996-11-18
DE19707506 1997-02-25
PCT/EP1997/006442 WO1998022461A1 (de) 1996-11-18 1997-11-18 Epothilone c, d, e und f, deren herstellung und deren verwendung als cytostatische mittel bzw. als pflanzenschutzmittel

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HUP0000497A2 true HUP0000497A2 (hu) 2000-06-28
HUP0000497A3 HUP0000497A3 (en) 2001-10-29
HU229833B1 HU229833B1 (en) 2014-09-29

Family

ID=26031383

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU0000497A HU229833B1 (en) 1996-11-18 1997-11-18 Epothilone d production process, and its use as cytostatic as well as phytosanitary agents

Country Status (23)

Country Link
US (6) US7067544B2 (hu)
EP (2) EP0941227B2 (hu)
JP (1) JP4274583B2 (hu)
KR (1) KR100538095B1 (hu)
CN (2) CN1196698C (hu)
AT (2) ATE408612T1 (hu)
AU (1) AU753546B2 (hu)
BR (1) BR9713363B1 (hu)
CA (1) CA2269118C (hu)
CY (1) CY2542B1 (hu)
CZ (2) CZ303422B6 (hu)
DE (2) DE59711647D1 (hu)
DK (2) DK1367057T3 (hu)
ES (2) ES2312695T3 (hu)
HU (1) HU229833B1 (hu)
IL (1) IL129558A (hu)
NO (1) NO319984B1 (hu)
NZ (1) NZ335383A (hu)
PL (1) PL193229B1 (hu)
PT (2) PT941227E (hu)
RU (1) RU2198173C2 (hu)
TW (1) TW408119B (hu)
WO (1) WO1998022461A1 (hu)

Families Citing this family (183)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6288237B1 (en) 1995-11-17 2001-09-11 Gesellschaft Fur Biotechnologische Forschung Mbh (Gbf) Epothilons C and D, preparation and compositions
US5969145A (en) * 1996-08-30 1999-10-19 Novartis Ag Process for the production of epothilones and intermediate products within the process
KR100538095B1 (ko) * 1996-11-18 2005-12-21 게젤샤프트 퓌어 비오테크놀로기쉐 포르슝 엠베하(게베에프) 에포틸론 씨, 디, 이 및 에프, 그 제조방법 및 세포증식 억제제와 식물 위생제로서의 이들의 용도
US6242469B1 (en) 1996-12-03 2001-06-05 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of epothilones, intermediates thereto, analogues and uses thereof
US6867305B2 (en) 1996-12-03 2005-03-15 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues thereof
US6204388B1 (en) 1996-12-03 2001-03-20 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues thereof
US6660758B1 (en) 1996-12-13 2003-12-09 The Scripps Research Institute Epothilone analogs
US6380394B1 (en) 1996-12-13 2002-04-30 The Scripps Research Institute Epothilone analogs
US6441186B1 (en) 1996-12-13 2002-08-27 The Scripps Research Institute Epothilone analogs
US6605599B1 (en) 1997-07-08 2003-08-12 Bristol-Myers Squibb Company Epothilone derivatives
US6320045B1 (en) 1997-12-04 2001-11-20 Bristol-Myers Squibb Company Process for the reduction of oxiranyl epothilones to olefinic epothilones
US6365749B1 (en) 1997-12-04 2002-04-02 Bristol-Myers Squibb Company Process for the preparation of ring-opened epothilone intermediates which are useful for the preparation of epothilone analogs
US6683100B2 (en) 1999-01-19 2004-01-27 Novartis Ag Organic compounds
US6194181B1 (en) 1998-02-19 2001-02-27 Novartis Ag Fermentative preparation process for and crystal forms of cytostatics
FR2775187B1 (fr) 1998-02-25 2003-02-21 Novartis Ag Utilisation de l'epothilone b pour la fabrication d'une preparation pharmaceutique antiproliferative et d'une composition comprenant l'epothilone b comme agent antiproliferatif in vivo
US6498257B1 (en) 1998-04-21 2002-12-24 Bristol-Myers Squibb Company 2,3-olefinic epothilone derivatives
US6380395B1 (en) 1998-04-21 2002-04-30 Bristol-Myers Squibb Company 12, 13-cyclopropane epothilone derivatives
DE19820599A1 (de) 1998-05-08 1999-11-11 Biotechnolog Forschung Gmbh Epothilonderivate, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
DE19826988A1 (de) * 1998-06-18 1999-12-23 Biotechnolog Forschung Gmbh Epothilon-Nebenkomponenten
NZ508326A (en) * 1998-06-18 2003-10-31 Novartis Ag A polyketide synthase and non ribosomal peptide synthase genes, isolated from a myxobacterium, necessary for synthesis of epothiones A and B
DE19846493A1 (de) * 1998-10-09 2000-04-13 Biotechnolog Forschung Gmbh DNA-Sequenzen für die enzymatische Synthese von Polyketid- oder Heteropolyketidverbindungen
US6410301B1 (en) 1998-11-20 2002-06-25 Kosan Biosciences, Inc. Myxococcus host cells for the production of epothilones
WO2000031247A2 (en) * 1998-11-20 2000-06-02 Kosan Biosciences, Inc. Recombinant methods and materials for producing epothilone and epothilone derivatives
KR20010092453A (ko) * 1998-12-23 2001-10-25 스티븐 비. 데이비스 에포틸론 제조를 위한 미생물적 전환 방법
US6780620B1 (en) 1998-12-23 2004-08-24 Bristol-Myers Squibb Company Microbial transformation method for the preparation of an epothilone
US6596875B2 (en) 2000-02-07 2003-07-22 James David White Method for synthesizing epothilones and epothilone analogs
HK1038923B (en) 1999-02-22 2004-03-19 Helmholtz-Zentrum Fur Infektionsforschung Gmbh C-21 modified EPOTHILONES
US6291684B1 (en) 1999-03-29 2001-09-18 Bristol-Myers Squibb Company Process for the preparation of aziridinyl epothilones from oxiranyl epothilones
ES2391550T3 (es) 1999-04-15 2012-11-27 Bristol-Myers Squibb Company Inhibidores cíclicos de la proteína tirosina quinasa
US7125875B2 (en) 1999-04-15 2006-10-24 Bristol-Myers Squibb Company Cyclic protein tyrosine kinase inhibitors
EP2289549A3 (en) 1999-10-01 2011-06-15 Immunogen, Inc. Immunoconjugates for treating cancer
US6518421B1 (en) * 2000-03-20 2003-02-11 Bristol-Myers Squibb Company Process for the preparation of epothilone analogs
US6593115B2 (en) 2000-03-24 2003-07-15 Bristol-Myers Squibb Co. Preparation of epothilone intermediates
US6998256B2 (en) 2000-04-28 2006-02-14 Kosan Biosciences, Inc. Methods of obtaining epothilone D using crystallization and /or by the culture of cells in the presence of methyl oleate
WO2001083800A2 (en) * 2000-04-28 2001-11-08 Kosan Biosciences, Inc. Heterologous production of polyketides
US6589968B2 (en) 2001-02-13 2003-07-08 Kosan Biosciences, Inc. Epothilone compounds and methods for making and using the same
UA75365C2 (en) * 2000-08-16 2006-04-17 Bristol Myers Squibb Co Epothilone analog polymorph modifications, a method for obtaining thereof (variants), a pharmaceutical composition based thereon
GB0029895D0 (en) * 2000-12-07 2001-01-24 Novartis Ag Organic compounds
KR100851719B1 (ko) 2001-01-25 2008-08-11 브리스톨-마이어스스퀴브컴파니 암 치료용 에포틸론 유사체의 투여 방법
WO2002058699A1 (en) * 2001-01-25 2002-08-01 Bristol-Myers Squibb Company Pharmaceutical forms of epothilones for oral administration
JP2004521122A (ja) 2001-01-25 2004-07-15 ブリストル−マイヤーズ　スクイブ　カンパニー エポチロン類似体の非経口製剤
US6893859B2 (en) 2001-02-13 2005-05-17 Kosan Biosciences, Inc. Epothilone derivatives and methods for making and using the same
IL156988A0 (en) 2001-02-20 2004-02-08 Bristol Myers Squibb Co Pharmaceutical compositions containing epothilone derivatives
EP1368030A1 (en) 2001-02-20 2003-12-10 Bristol-Myers Squibb Company Epothilone derivatives for the treatment of refractory tumors
DE60232719D1 (de) 2001-02-27 2009-08-06 Novartis Ag Kombination enthaltend einen inhibitor der signaltransduktion und ein epothilonderivat
IL157312A0 (en) 2001-02-27 2004-02-19 Biotechnolog Forschung Gmbh Processes for the preparation of epothilone derivatives and compounds produced thereby
SK11082003A3 (sk) 2001-03-14 2004-08-03 Bristol-Myers Squibb Company Kombinácia analógov epotilónu a chemoterapeutických činidiel na liečenie proliferatívnych ochorení
MXPA03010909A (es) 2001-06-01 2004-02-17 Bristol Myers Squibb Co Derivados de epotilona.
TWI315982B (en) 2001-07-19 2009-10-21 Novartis Ag Combinations comprising epothilones and pharmaceutical uses thereof
DE10138347A1 (de) * 2001-08-03 2003-02-27 Schering Ag Geschützte 3,5-Dihydroxy-2,2-dimethyl-valeronitrile für die Synthese von Epothilonen- und Derivaten und Verfahren zur Herstellung
TWI287986B (en) * 2001-12-13 2007-10-11 Novartis Ag Use of Epothilones for the treatment of the carcinoid syndrome
US6884608B2 (en) 2001-12-26 2005-04-26 Bristol-Myers Squibb Company Compositions and methods for hydroxylating epothilones
WO2003057217A1 (en) 2002-01-14 2003-07-17 Novartis Ag Combinations comprising epothilones and anti-metabolites
TW200303202A (en) 2002-02-15 2003-09-01 Bristol Myers Squibb Co Method of preparation of 21-amino epothilone derivatives
ATE452896T1 (de) 2002-03-12 2010-01-15 Bristol Myers Squibb Co C3-cyanoepothilonderivate
AU2003218107A1 (en) 2002-03-12 2003-09-29 Bristol-Myers Squibb Company C12-cyano epothilone derivatives
TW200403994A (en) 2002-04-04 2004-03-16 Bristol Myers Squibb Co Oral administration of EPOTHILONES
TW200400191A (en) 2002-05-15 2004-01-01 Bristol Myers Squibb Co Pharmaceutical compositions and methods of using C-21 modified epothilone derivatives
US7405234B2 (en) 2002-05-17 2008-07-29 Bristol-Myers Squibb Company Bicyclic modulators of androgen receptor function
AU2003243561A1 (en) 2002-06-14 2003-12-31 Bristol-Myers Squibb Company Combination of epothilone analogs and chemotherapeutic agents for the treatment of proliferative diseases
PT1539977E (pt) * 2002-07-29 2015-01-14 Optimer Pharmaceuticals Inc Produção de tiacumicina
KR101173510B1 (ko) * 2002-08-23 2012-08-21 슬로안-케테링인스티튜트퍼캔서리서치 에포틸론, 이의 중간물질과 유사체의 합성 및 이들의 용도
US6921769B2 (en) 2002-08-23 2005-07-26 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues thereof
TWI291464B (en) 2002-09-23 2007-12-21 Bristol Myers Squibb Co Methods for the preparation, isolation and purification of epothilone B, and X-ray crystal structures of epothilone B
SI1553938T1 (sl) * 2002-10-15 2007-06-30 Univ Louisiana State Uporaba epotilonskih derivatov za zdravljenje hiperparatiroidizma
EP1567487A4 (en) 2002-11-15 2005-11-16 Bristol Myers Squibb Co OPEN-CHAINED, PROLYL-FROSTED MODULATORS OF ANDROGEN RECEPTOR FUNCTION
CN101177425B (zh) * 2003-01-28 2012-07-18 北京华昊中天生物技术有限公司 一类新型埃坡霉素化合物及其制备方法和用途
US20050171167A1 (en) 2003-11-04 2005-08-04 Haby Thomas A. Process and formulation containing epothilones and analogs thereof
EP1559447A1 (en) 2004-01-30 2005-08-03 Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale (Inserm) Use of epothilones in the treatment of neuronal connectivity defects such as schizophrenia and autism
US7820702B2 (en) 2004-02-04 2010-10-26 Bristol-Myers Squibb Company Sulfonylpyrrolidine modulators of androgen receptor function and method
US7378426B2 (en) 2004-03-01 2008-05-27 Bristol-Myers Squibb Company Fused heterotricyclic compounds as inhibitors of 17β-hydroxysteroid dehydrogenase 3
US7625923B2 (en) 2004-03-04 2009-12-01 Bristol-Myers Squibb Company Bicyclic modulators of androgen receptor function
US7696241B2 (en) 2004-03-04 2010-04-13 Bristol-Myers Squibb Company Bicyclic compounds as modulators of androgen receptor function and method
PE20110102A1 (es) 2004-04-07 2011-02-07 Novartis Ag Derivados de n-(2-oxo-2-pirrolidinil-1-il)etil-2-amino-acetamida como inhibidores de proteinas de apoptosis (iap)
US10675326B2 (en) 2004-10-07 2020-06-09 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Compositions comprising cupredoxins for treating cancer
EP1958625A1 (en) * 2004-11-18 2008-08-20 Brystol-Myers Squibb Company Enteric coate bead comprising ixabepilone and preparation thereof
WO2006055742A1 (en) * 2004-11-18 2006-05-26 Bristol-Myers Squibb Company Enteric coated bead comprising epothilone or epothilone analog, and preparation and administration thereof
US20060121511A1 (en) 2004-11-30 2006-06-08 Hyerim Lee Biomarkers and methods for determining sensitivity to microtubule-stabilizing agents
GB0510390D0 (en) 2005-05-20 2005-06-29 Novartis Ag Organic compounds
BRPI0616755A2 (pt) 2005-09-27 2011-06-28 Novartis Ag compostos de carboxiamina e métodos de uso dos mesmos
CA2629245C (en) 2005-11-21 2016-07-12 Novartis Ag Neuroendocrine tumor treatment
GB0605120D0 (en) 2006-03-14 2006-04-26 Novartis Ag Organic Compounds
US20110104664A1 (en) 2006-03-31 2011-05-05 Bristol-Myers Squibb Company Biomarkers and methods for determining sensitivity to micortubule-stabilizing agents
EP2004163B1 (en) 2006-04-05 2014-09-17 Novartis Pharma AG Combination of everolimus and vinorelbine
BRPI0709749A2 (pt) 2006-04-05 2011-07-26 Novartis Ag combinaÇÕes de agentes terapÊuticos para tratamento de cÂncer
JP2009536180A (ja) 2006-05-09 2009-10-08 ノバルティス アクチエンゲゼルシャフト 鉄キレート剤と抗新生物剤を含む組合せ剤およびそれらの使用
MX2009003185A (es) 2006-09-29 2009-04-03 Novartis Ag Pirazolopirimidinas como inhibidores de lipido cinasa pi3k.
MX2009005849A (es) 2006-12-04 2009-08-12 Univ Illinois Composiciones y metodos para tratar cancer con adn rico en cpg y cupredoxinas.
KR20090114414A (ko) 2007-02-08 2009-11-03 더 보드 오브 트러스티즈 오브 더 유니버시티 오브 일리노이 쿠프레독신으로 암을 예방하는 조성물과 방법
CA2677651A1 (en) 2007-02-15 2008-08-21 Novartis Ag Combinations of therapeutic agents for treating cancer
BRPI0908603A2 (pt) 2008-03-24 2020-08-18 Novartis Ag inibidores de metaloprotease de matriz com base em arilsulfonamida.
EP2260020B1 (en) 2008-03-26 2014-07-23 Novartis AG Hydroxamate-based inhibitors of deacetylases b
CN101362784A (zh) * 2008-10-06 2009-02-11 山东大学 埃博霉素苷类化合物和以其为活性成分的组合物及其应用
WO2010083617A1 (en) 2009-01-21 2010-07-29 Oncalis Ag Pyrazolopyrimidines as protein kinase inhibitors
PL2391366T3 (pl) 2009-01-29 2013-04-30 Novartis Ag Podstawione benzimidazole do leczenia gwiaździaków
AU2010264698C1 (en) 2009-06-26 2013-05-16 Novartis Ag 1, 3-disubstituted imidazolidin-2-one derivatives as inhibitors of CYP 17
US8389526B2 (en) 2009-08-07 2013-03-05 Novartis Ag 3-heteroarylmethyl-imidazo[1,2-b]pyridazin-6-yl derivatives
EP2464649A1 (en) 2009-08-12 2012-06-20 Novartis AG Heterocyclic hydrazone compounds and their uses to treat cancer and inflammation
BR112012008061A2 (pt) 2009-08-20 2016-03-01 Novartis Ag compostos de oxima heterocíclica
CA2771936A1 (en) 2009-08-26 2011-03-03 Novartis Ag Tetra-substituted heteroaryl compounds and their use as mdm2 and/or mdm4 modulators
JP5466767B2 (ja) 2009-11-04 2014-04-09 ノバルティス アーゲー Ｍｅｋ阻害剤として有用なヘテロ環式スルホンアミド誘導体
ES2484171T3 (es) 2009-12-08 2014-08-11 Novartis Ag Derivados de sulfonamidas heterocíclicas
CU24130B1 (es) 2009-12-22 2015-09-29 Novartis Ag Isoquinolinonas y quinazolinonas sustituidas
US8440693B2 (en) 2009-12-22 2013-05-14 Novartis Ag Substituted isoquinolinones and quinazolinones
EP2571525A4 (en) 2010-05-18 2016-04-27 Cerulean Pharma Inc Compositions and methods for treating autoimmune and other diseases
UA112517C2 (uk) 2010-07-06 2016-09-26 Новартіс Аг Тетрагідропіридопіримідинові похідні
EP2627648A1 (en) 2010-09-16 2013-08-21 Novartis AG 17aHYDROXYLASE/C17,20-LYASE INHIBITORS
CA2824521C (en) 2011-01-20 2016-06-28 Board Of Regents, The University Of Texas System Mri markers, delivery and extraction systems, and related methods
EP2673277A1 (en) 2011-02-10 2013-12-18 Novartis AG [1, 2, 4]triazolo [4, 3 -b]pyridazine compounds as inhibitors of the c-met tyrosine kinase
MX359399B (es) 2011-04-28 2018-09-27 Novartis Ag Inhibidores de 17alfa-hidroxilasa/c17-20-liasa.
KR20140034898A (ko) 2011-06-09 2014-03-20 노파르티스 아게 헤테로시클릭 술폰아미드 유도체
TWI597065B (zh) 2011-06-10 2017-09-01 梅爾莎納醫療公司 蛋白質－聚合物－藥物共軛體
US8859535B2 (en) 2011-06-20 2014-10-14 Novartis Ag Hydroxy substituted isoquinolinone derivatives
WO2012175487A1 (en) 2011-06-20 2012-12-27 Novartis Ag Cyclohexyl isoquinolinone compounds
PH12013502524A1 (en) 2011-06-27 2014-01-27 Novartis Ag Solid forms and salts of tetrahydro-pyrido-pyrimidine derivatives
CN102863474A (zh) 2011-07-09 2013-01-09 陈小平 一类治疗细胞增殖性疾病的铂化合物、其制备方法和应用
WO2013038362A1 (en) 2011-09-15 2013-03-21 Novartis Ag 6 - substituted 3 - (quinolin- 6 - ylthio) - [1,2,4] triazolo [4, 3 -a] pyradines as tyrosine kinase
CN102993239A (zh) 2011-09-19 2013-03-27 陈小平 离去基团含氨基或烷胺基的丁二酸衍生物的铂类化合物
WO2013080141A1 (en) 2011-11-29 2013-06-06 Novartis Ag Pyrazolopyrrolidine compounds
US20150148377A1 (en) 2011-12-22 2015-05-28 Novartis Ag Quinoline Derivatives
SI2794600T1 (en) 2011-12-22 2018-03-30 Novartis Ag 2,3-Dihydro-benzo (1,4) oxazine derivatives and related compounds as phosphoinositide-3 kinase inhibitors (PI3K) for the treatment, e.g. rheumatoid arthritis
KR20140107573A (ko) 2011-12-23 2014-09-04 노파르티스 아게 Bcl2와 결합 파트너의 상호작용을 억제하기 위한 화합물
WO2013096055A1 (en) 2011-12-23 2013-06-27 Novartis Ag Compounds for inhibiting the interaction of bcl2 with binding partners
US20140350014A1 (en) 2011-12-23 2014-11-27 Novartis Ag Compounds for inhibiting the interaction of bcl2 with binding partners
EA201491264A1 (ru) 2011-12-23 2014-11-28 Новартис Аг Соединения для ингибирования взаимодействия bcl-2 с партнерами по связыванию
AU2012355624A1 (en) 2011-12-23 2014-07-17 Novartis Ag Compounds for inhibiting the interaction of BCL2 with binding partners
KR101372563B1 (ko) 2011-12-26 2014-03-14 주식회사 삼양바이오팜 에포틸론 함유물질로부터 에포틸론 ａ와 ｂ의 추출 및 정제 방법
UY34591A (es) 2012-01-26 2013-09-02 Novartis Ag Compuestos de imidazopirrolidinona
CN104379574B (zh) 2012-05-15 2017-03-01 诺华股份有限公司 用于抑制abl1、abl2和bcr‑abl1的活性的苯甲酰胺衍生物
KR20150008406A (ko) 2012-05-15 2015-01-22 노파르티스 아게 Abl1, abl2 및 bcr-abl1의 활성을 억제하기 위한 벤즈아미드 유도체
HRP20180695T1 (hr) 2012-05-15 2018-06-01 Novartis Ag Derivati benzamida za inhibiranje aktivnosti od abl1, abl2 i bcr-abl1
EA026559B1 (ru) 2012-05-15 2017-04-28 Новартис Аг Соединения и композиции для ингибирования активности abl1, abl2 и bcr-abl1
EP2855483B1 (en) 2012-05-24 2017-10-25 Novartis AG Pyrrolopyrrolidinone compounds
US9789193B2 (en) 2012-06-15 2017-10-17 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Compositions for treating cancer and methods for making the same
DK2903968T3 (en) 2012-10-02 2017-01-30 Gilead Sciences Inc INHIBITORS OF HISTON DEMETHYLASES
EP2924044B1 (en) 2012-11-17 2018-10-31 Beijing Shuobai Pharmaceutical Co., LTD Platinum compound of malonic acid derivative having leaving group containing amino or alkylamino
TW201422625A (zh) 2012-11-26 2014-06-16 Novartis Ag 二氫－吡啶并－□衍生物之固體形式
JP6334553B2 (ja) 2012-12-10 2018-05-30 メルサナ セラピューティクス，インコーポレイティド タンパク質−高分子−薬剤コンジュゲート
EP2931316B1 (en) 2012-12-12 2019-02-20 Mersana Therapeutics, Inc. Hydroxyl-polymer-drug-protein conjugates
JO3464B1 (ar) 2013-01-15 2020-07-05 Astellas Pharma Europe Ltd التركيبات الخاصة بمركبات التياكوميسين
WO2014115077A1 (en) 2013-01-22 2014-07-31 Novartis Ag Substituted purinone compounds
WO2014115080A1 (en) 2013-01-22 2014-07-31 Novartis Ag Pyrazolo[3,4-d]pyrimidinone compounds as inhibitors of the p53/mdm2 interaction
WO2014128612A1 (en) 2013-02-20 2014-08-28 Novartis Ag Quinazolin-4-one derivatives
EP3170811A1 (en) 2013-02-27 2017-05-24 Gilead Sciences, Inc. Ethyl pyridine-4-carboxylate compound as inhibitor of histone demethylases
US20150018376A1 (en) 2013-05-17 2015-01-15 Novartis Ag Pyrimidin-4-yl)oxy)-1h-indole-1-carboxamide derivatives and use thereof
US20160128988A1 (en) 2013-06-11 2016-05-12 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Combinations for the treatment of cancer comprising a mps-1 kinase inhibitor and a mitotic inhibitor
UY35675A (es) 2013-07-24 2015-02-27 Novartis Ag Derivados sustituidos de quinazolin-4-ona
WO2015022663A1 (en) 2013-08-14 2015-02-19 Novartis Ag Compounds and compositions as inhibitors of mek
US9227969B2 (en) 2013-08-14 2016-01-05 Novartis Ag Compounds and compositions as inhibitors of MEK
WO2015022664A1 (en) 2013-08-14 2015-02-19 Novartis Ag Compounds and compositions as inhibitors of mek
KR20160058889A (ko) 2013-09-22 2016-05-25 칼리토르 사이언시즈, 엘엘씨 치환된 아미노피리미딘 화합물 및 이용 방법
CN105979970B (zh) 2013-10-11 2019-09-10 梅尔莎纳医疗公司 蛋白质-聚合物-药物共轭物
CN105813655B (zh) 2013-10-11 2022-03-15 阿萨纳生物科技有限责任公司 蛋白-聚合物-药物缀合物
EP3122728A4 (en) 2014-03-28 2017-10-25 Calitor Sciences, LLC Substituted heteroaryl compounds and methods of use
AR099890A1 (es) 2014-03-31 2016-08-24 Epitherapeutics Aps Inhibidores de histona demetilasas
KR20160132496A (ko) 2014-04-03 2016-11-18 인빅터스 온콜로지 피비티. 엘티디. 초분자 조합 치료제
CN107074807A (zh) 2014-08-27 2017-08-18 吉利德科学公司 用于抑制组蛋白脱甲基酶的组合物和方法
EP3347097B1 (en) 2015-09-11 2021-02-24 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Substituted aminopyrimidine derivatives as modulators of the kinases jak, flt3 and aurora
WO2018004338A1 (en) 2016-06-27 2018-01-04 Tagworks Pharmaceuticals B.V. Cleavable tetrazine used in bio-orthogonal drug activation
US11135307B2 (en) 2016-11-23 2021-10-05 Mersana Therapeutics, Inc. Peptide-containing linkers for antibody-drug conjugates
CN111315414A (zh) 2017-06-22 2020-06-19 梅尔莎纳医疗公司 产生载药聚合物支架和蛋白-聚合物-药物缀合物的方法
WO2019099311A1 (en) 2017-11-19 2019-05-23 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Substituted heteroaryl compounds and methods of use
EP3740468B1 (en) 2018-01-20 2025-12-31 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Substituted Aminopyrimidine Compounds and Methods of Use
AU2019262520B2 (en) 2018-05-04 2025-07-10 Tagworks Pharmaceuticals B.V. Tetrazines for high click conjugation yield in vivo and high click release yield
DK3788032T3 (da) 2018-05-04 2024-04-15 Tagworks Pharmaceuticals B V Forbindelser omfattende en linker til øgning af transcyklooctenstabilitet
CA3117050A1 (en) 2018-10-29 2020-05-07 Mersana Therapeutics, Inc. Cysteine engineered antibody-drug conjugates with peptide-containing linkers
FR3087650B1 (fr) 2018-10-31 2021-01-29 Bio Even Flavine adenine dinucleotide (fad) pour son utilisation pour la prevention et/ou le traitement de cancer
IL289094A (en) 2019-06-17 2022-02-01 Tagworks Pharmaceuticals B V Tetrazines for increasing the speed and yield of the "click release" reaction
CA3143925A1 (en) 2019-06-17 2020-12-24 Tagworks Pharmaceuticals B.V. Compounds for fast and efficient click release
KR20240099150A (ko) 2021-09-06 2024-06-28 베락사 바이오테크 게엠베하 진핵생물에서의 유전자 코드 확장을 위한 신규 아미노아실-tRNA 합성효소 변이체
ES3039688T3 (en) 2021-11-25 2025-10-23 Veraxa Biotech Gmbh Improved antibody-payload conjugates (apcs) prepared by site-specific conjugation utilizing genetic code expansion
CA3238627A1 (en) 2021-11-25 2023-06-01 Christine Kohler Improved antibody-payload conjugates (apcs) prepared by site-specific conjugation utilizing genetic code expansion
EP4444356A1 (en) 2021-12-08 2024-10-16 European Molecular Biology Laboratory Hydrophilic tetrazine-functionalized payloads for preparation of targeting conjugates
EP4372000A3 (en) 2022-02-15 2024-07-17 Tagworks Pharmaceuticals B.V. Masked il12 protein
AU2023306656A1 (en) 2022-07-15 2025-01-23 Pheon Therapeutics Ltd Antibody drug conjugates that bind cdcp1 and uses thereof
WO2024080872A1 (en) 2022-10-12 2024-04-18 Tagworks Pharmaceuticals B.V. Strained bicyclononenes
WO2024153789A1 (en) 2023-01-20 2024-07-25 Basf Se Stabilized biopolymer composition, their manufacture and use
CN121100004A (zh) 2023-03-10 2025-12-09 泰克沃尔科斯制药有限公司 具有改进的t-连接子的反式-环辛烯
WO2025021929A1 (en) 2023-07-27 2025-01-30 Veraxa Biotech Gmbh Hydrophilic trans-cyclooctene (hytco) compounds, constructs and conjugates containing the same
EP4512395A1 (en) 2023-08-21 2025-02-26 Bio Even Composition comprising flavin adenine dinucleotide (fad), l-gsh, atp and myristic acid, alone or with a drug
WO2025056807A1 (en) 2023-09-15 2025-03-20 Basf Se Stabilized biopolymer composition, their manufacture and use
WO2025149667A1 (en) 2024-01-12 2025-07-17 Pheon Therapeutics Ltd Antibody drug conjugates and uses thereof
WO2025174248A1 (en) 2024-02-16 2025-08-21 Tagworks Pharmaceuticals B.V. Trans-cyclooctenes with "or gate" release

Family Cites Families (55)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0358606A3 (de) 1988-09-09 1990-10-31 Gesellschaft für Biotechnologische Forschung mbH (GBF) Mikrobiologisches Verfahren zur Herstellung agrarchemisch verwendbarer mikrobizider makrozyklischer Lactonderivate
GB8909737D0 (en) * 1989-04-27 1989-06-14 Shell Int Research Thiazole derivatives
DE4138042C2 (de) * 1991-11-19 1993-10-14 Biotechnolog Forschung Gmbh Epothilone, deren Herstellungsverfahren sowie diese Verbindungen enthaltende Mittel
RU2143896C1 (ru) * 1993-03-05 2000-01-10 Хексаль Аг Кристаллический комплекс циклодекстрина с гидрохлоридом ранитидина, способ его получения и содержащие его фармацевтические составы
AU698382B2 (en) * 1994-01-11 1998-10-29 Scripps Research Institute, The Chemical switching of taxo-diterpenoids between low solubility active forms and high solubility inactive forms
US6288237B1 (en) 1995-11-17 2001-09-11 Gesellschaft Fur Biotechnologische Forschung Mbh (Gbf) Epothilons C and D, preparation and compositions
DE19542986A1 (de) * 1995-11-17 1997-05-22 Biotechnolog Forschung Gmbh Epothilon-Derivate und deren Verwendung
DE19639456A1 (de) 1996-09-25 1998-03-26 Biotechnolog Forschung Gmbh Epothilon-Derivate, Herstellung und Mittel
DE19636343C1 (de) 1996-08-30 1997-10-23 Schering Ag Zwischenprodukte innerhalb der Totalsynthese von Epothilon A und B
DE19645362A1 (de) 1996-10-28 1998-04-30 Ciba Geigy Ag Verfahren zur Herstellung von Epothilon A und B und Derivaten
EP0923583A1 (de) 1996-08-30 1999-06-23 Novartis AG Verfahren zur herstellung von epothilonen und zwischenprodukte innerhalb des verfahrens
US5969145A (en) * 1996-08-30 1999-10-19 Novartis Ag Process for the production of epothilones and intermediate products within the process
DE19645361A1 (de) 1996-08-30 1998-04-30 Ciba Geigy Ag Zwischenprodukte innerhalb der Totalsynthese von Epothilon A und B, Teil II
KR100538095B1 (ko) 1996-11-18 2005-12-21 게젤샤프트 퓌어 비오테크놀로기쉐 포르슝 엠베하(게베에프) 에포틸론 씨, 디, 이 및 에프, 그 제조방법 및 세포증식 억제제와 식물 위생제로서의 이들의 용도
US6515016B2 (en) 1996-12-02 2003-02-04 Angiotech Pharmaceuticals, Inc. Composition and methods of paclitaxel for treating psoriasis
US6204388B1 (en) * 1996-12-03 2001-03-20 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues thereof
US6242469B1 (en) * 1996-12-03 2001-06-05 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of epothilones, intermediates thereto, analogues and uses thereof
US6441186B1 (en) * 1996-12-13 2002-08-27 The Scripps Research Institute Epothilone analogs
US6660758B1 (en) * 1996-12-13 2003-12-09 The Scripps Research Institute Epothilone analogs
US6380394B1 (en) 1996-12-13 2002-04-30 The Scripps Research Institute Epothilone analogs
DE19701758A1 (de) 1997-01-20 1998-07-23 Wessjohann Ludgar A Dr Epothilone-Synthesebausteine
CZ298027B6 (cs) * 1997-02-25 2007-05-30 Gesellschaft Fuer Biotechnologische Forschung Mbh(Gbf) Zpusob prípravy epothilon-N-oxidu a N-oxidy epothilonu
US5828449A (en) 1997-02-26 1998-10-27 Acuity Imaging, Llc Ring illumination reflective elements on a generally planar surface
DE19713970B4 (de) 1997-04-04 2006-08-31 R&D-Biopharmaceuticals Gmbh Epothilone-Synthesebausteine II - Prenylderivate
ATE225783T1 (de) 1997-04-18 2002-10-15 Studiengesellschaft Kohle Mbh Selektive olefinmetathese von bi- oder polyfunktionellen substraten in komprimiertem kohlendioxid als reaktionsmedium
DE19720312A1 (de) 1997-05-15 1998-11-19 Hoechst Ag Zubereitung mit erhöhter in vivo Verträglichkeit
DE19821954A1 (de) 1997-05-15 1998-11-19 Biotechnolog Forschung Gmbh Verfahren zur Herstellung eines Epothilon-Derivats
DE19726627A1 (de) 1997-06-17 1998-12-24 Schering Ag Zwischenprodukte, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung zur Herstellung von Epothilon
US6605599B1 (en) * 1997-07-08 2003-08-12 Bristol-Myers Squibb Company Epothilone derivatives
PT1001951E (pt) 1997-07-16 2003-02-28 Schering Ag Derivados de tiazolo, processo para a sua preparacao e utilizacao
JP2001512723A (ja) 1997-08-09 2001-08-28 シエーリング アクチエンゲゼルシヤフト 新規エポチロン誘導体、その製法およびその薬学的使用
TR200002299T2 (tr) 1998-02-05 2000-11-21 Novartis Ag Epotilon kompozisyonları.
US6194181B1 (en) 1998-02-19 2001-02-27 Novartis Ag Fermentative preparation process for and crystal forms of cytostatics
FR2775187B1 (fr) 1998-02-25 2003-02-21 Novartis Ag Utilisation de l'epothilone b pour la fabrication d'une preparation pharmaceutique antiproliferative et d'une composition comprenant l'epothilone b comme agent antiproliferatif in vivo
AU758526B2 (en) 1998-02-25 2003-03-20 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues therof
DE19826988A1 (de) * 1998-06-18 1999-12-23 Biotechnolog Forschung Gmbh Epothilon-Nebenkomponenten
AU5036999A (en) 1998-06-30 2000-01-17 Schering Aktiengesellschaft Epothilon derivatives, their preparation process, intermediate products and their pharmaceutical use
WO2000031247A2 (en) 1998-11-20 2000-06-02 Kosan Biosciences, Inc. Recombinant methods and materials for producing epothilone and epothilone derivatives
US6410301B1 (en) * 1998-11-20 2002-06-25 Kosan Biosciences, Inc. Myxococcus host cells for the production of epothilones
DE69910831T2 (de) 1998-12-22 2004-07-15 Novartis Ag Epothilonderivate und ihre verwendung als antitumormittel
US6780620B1 (en) * 1998-12-23 2004-08-24 Bristol-Myers Squibb Company Microbial transformation method for the preparation of an epothilone
US6596875B2 (en) * 2000-02-07 2003-07-22 James David White Method for synthesizing epothilones and epothilone analogs
NZ513268A (en) 1999-02-18 2004-05-28 Schering Ag 16-halogen-epothilone derivatives, method for producing them and their pharmaceutical use
HK1038923B (en) * 1999-02-22 2004-03-19 Helmholtz-Zentrum Fur Infektionsforschung Gmbh C-21 modified EPOTHILONES
US6211412B1 (en) * 1999-03-29 2001-04-03 The University Of Kansas Synthesis of epothilones
PE20010116A1 (es) 1999-04-30 2001-02-15 Schering Ag Derivados de 6-alquenil-, 6-alquinil- y 6-epoxi-epotilona, procedimientos para su preparacion
TWI310684B (en) * 2000-03-27 2009-06-11 Bristol Myers Squibb Co Synergistic pharmaceutical kits for treating cancer
US6489314B1 (en) * 2001-04-03 2002-12-03 Kosan Biosciences, Inc. Epothilone derivatives and methods for making and using the same
US6589968B2 (en) * 2001-02-13 2003-07-08 Kosan Biosciences, Inc. Epothilone compounds and methods for making and using the same
US6906188B2 (en) * 2001-04-30 2005-06-14 State Of Oregon Acting By And Through The State Board Of Higher Education On Behalf Of Oregon State University Method for synthesizing epothilones and epothilone analogs
WO2003029195A1 (en) * 2001-09-28 2003-04-10 Sumika Fine Chemicals Co., Ltd. Intermediates for epothilone derivative and process for producing these
US6884608B2 (en) * 2001-12-26 2005-04-26 Bristol-Myers Squibb Company Compositions and methods for hydroxylating epothilones
TW200303202A (en) 2002-02-15 2003-09-01 Bristol Myers Squibb Co Method of preparation of 21-amino epothilone derivatives
US6921769B2 (en) * 2002-08-23 2005-07-26 Sloan-Kettering Institute For Cancer Research Synthesis of epothilones, intermediates thereto and analogues thereof
TWI291464B (en) 2002-09-23 2007-12-21 Bristol Myers Squibb Co Methods for the preparation, isolation and purification of epothilone B, and X-ray crystal structures of epothilone B

Also Published As

Publication number Publication date
KR100538095B1 (ko) 2005-12-21
NO319984B1 (no) 2005-10-10
PT941227E (pt) 2004-08-31
ATE267197T1 (de) 2004-06-15
US20050090535A1 (en) 2005-04-28
EP0941227B9 (de) 2005-05-04
EP0941227A1 (de) 1999-09-15
JP4274583B2 (ja) 2009-06-10
PL333435A1 (en) 1999-12-06
CN1237970A (zh) 1999-12-08
US20110136185A1 (en) 2011-06-09
PL193229B1 (pl) 2007-01-31
US20060264482A1 (en) 2006-11-23
HK1022314A1 (en) 2000-08-04
CY2542B1 (en) 2006-06-28
JP2001504474A (ja) 2001-04-03
PT1367057E (pt) 2008-12-04
CZ296164B6 (cs) 2006-01-11
WO1998022461A1 (de) 1998-05-28
ES2312695T3 (es) 2009-03-01
US7846952B2 (en) 2010-12-07
CZ303422B6 (cs) 2012-09-05
HK1083832A1 (zh) 2006-07-14
NO992338L (no) 1999-05-14
US7759375B2 (en) 2010-07-20
EP1367057B1 (de) 2008-09-17
ES2221692T5 (es) 2009-12-14
RU2198173C2 (ru) 2003-02-10
CA2269118A1 (en) 1998-05-28
KR20000053308A (ko) 2000-08-25
EP0941227B1 (de) 2004-05-19
CZ175099A3 (cs) 1999-09-15
DK0941227T4 (da) 2008-05-19
IL129558A0 (en) 2000-02-29
TW408119B (en) 2000-10-11
US7067544B2 (en) 2006-06-27
DK0941227T3 (da) 2004-06-28
NO992338D0 (no) 1999-05-14
EP0941227B2 (de) 2009-10-14
IL129558A (en) 2001-10-31
BR9713363B1 (pt) 2011-02-08
ES2221692T3 (es) 2005-01-01
BR9713363A (pt) 2000-01-25
DE59711647D1 (de) 2004-06-24
AU753546B2 (en) 2002-10-24
CN100344627C (zh) 2007-10-24
ATE408612T1 (de) 2008-10-15
HU229833B1 (en) 2014-09-29
NZ335383A (en) 2000-10-27
DE59712968D1 (de) 2008-10-30
US20080293784A1 (en) 2008-11-27
DK1367057T3 (da) 2009-01-19
US20090247592A1 (en) 2009-10-01
CA2269118C (en) 2012-05-29
HUP0000497A3 (en) 2001-10-29
AU5483798A (en) 1998-06-10
CN1196698C (zh) 2005-04-13
DK0941227T5 (da) 2009-10-05
US20090270466A1 (en) 2009-10-29
EP1367057A1 (de) 2003-12-03
ES2221692T4 (es) 2005-10-01
US8076490B2 (en) 2011-12-13
CN1680370A (zh) 2005-10-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CA2269118C (en) Epothilone c, d, e and f, production process, and their use as cytostatic as well as phytosanitary agents
Gerth et al. Epothilons A and B: antifungal and cytotoxic compounds from Sorangium cellulosum (Myxobacteria) production, physico-chemical and biological properties
Sasse et al. Archazolids, new cytotoxic macrolactones from archangium gephyra (Myxobacteria) production, isolation, physico-chemical and biological properties
Maul et al. Biomolecular-chemical screening: a novel screening approach for the discovery of biologically active secondary metabolites III. New DNA-binding metabolites
US5021406A (en) 2-pyranone derivative and process for production thereof
KR0177839B1 (ko) 신규 티오마리놀 유도체 및 그의 제조방법
EP0329361B1 (en) 2-pyranone derivatives and process for production thereof
PL163447B1 (pl) Sposób wytwarzania makrocyklicznych zwiazków PL PL
MXPA99004471A (en) Epothilone c, d, e and f, production process, and their use as cytostatic as well as phytosanitary agents
KR20050019892A (ko) 에포틸론 씨, 디, 이 및 에프, 그 제조방법 및 세포증식억제제와 식물 위생제로서의 이들의 용도
DE4303513A1 (de) Oasomycine mit pharmakologischer Wirkung, Verfahren zu ihrer Herstellung und Verwendung derselben
HK1022314B (en) Epothilone d, e and f, production process,and their use as cytostatic as well as phytosanitary agents
JPH06293755A (ja) アミノ配糖体生理活性物質、その製造法及びそれを有効成分として含有する殺虫・殺ダニ剤