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FR3114027A1 - Cosmetic active ingredient comprising an extract of bran and germ of Oryza sativa. - Google Patents

Cosmetic active ingredient comprising an extract of bran and germ of Oryza sativa. Download PDF

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FR3114027A1
FR3114027A1 FR2009232A FR2009232A FR3114027A1 FR 3114027 A1 FR3114027 A1 FR 3114027A1 FR 2009232 A FR2009232 A FR 2009232A FR 2009232 A FR2009232 A FR 2009232A FR 3114027 A1 FR3114027 A1 FR 3114027A1
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cosmetic
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Jean Paufique
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Societe Industrielle Limousine dApplication Biologique SA SILAB
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Abstract

La présente invention concerne un principe actif cosmétique spécifique obtenu à partir de son et de germe d’Oryza sativa utile en cosmétique en particulier pour un effet anti-âge et notamment un effet anti-rides et/ou pour améliorer l’éclat du teint. The present invention relates to a specific cosmetic active ingredient obtained from bran and Oryza sativa germ useful in cosmetics in particular for an anti-aging effect and in particular an anti-wrinkle effect and/or for improving the radiance of the complexion.

Description

Principe actif cosmétique comprenant un extrait de son et de germe d’Oryza sativa.Cosmetic active ingredient comprising an extract of bran and germ of Oryza sativa.

L’invention concerne un principe actif cosmétique spécifique obtenu à partir de son et de germed’ Oryza sativa, utile en cosmétique, en particulier pour obtenir un effet anti-rides et pour améliorer l’éclat du teint.The invention relates to a specific cosmetic active ingredient obtained from bran and Oryza sativa germ, useful in cosmetics, in particular for obtaining an anti-wrinkle effect and for improving the radiance of the complexion.

Art antérieurPrior art

Au cours du vieillissement, ou après l’exposition à un stress tel que les UV, le métabolisme cellulaire ralentit progressivement. Parmi les molécules affectées, les protéines, composants indispensables de notre organisme et représentant plus de 25% des constituants de notre peau, sont particulièrement concernées. En effet, ces dernières voient leur renouvellement profondément altéré. A la fois moins bien synthétisées et conformées, elles ne peuvent plus assurer leurs fonctions et deviennent même néfastes pour la peau en favorisant l’apparition de rides et l’installation d’un teint terne.During aging, or after exposure to stress such as UV, cellular metabolism gradually slows down. Among the molecules affected, proteins, essential components of our body and representing more than 25% of the constituents of our skin, are particularly concerned. Indeed, the latter see their renewal profoundly altered. Both less well synthesized and shaped, they can no longer perform their functions and even become harmful to the skin by promoting the appearance of wrinkles and the installation of a dull complexion.

Les protéines sont des molécules biologiques qui assurent plusieurs rôles indispensables au bon fonctionnement de notre organisme. Pour être fonctionnelle, chaque protéine doit acquérir un repliement spécifique. A l’échelle de la peau, on retrouve des protéines de structure, des enzymes, des hormones, des protéines de signalisation ou encore des protéines de transport. L’ensemble des voies biologiques contrôlant la biogenèse, le repliement, le trafic et la dégradation des protéines participent au maintien de l’homéostasie protéique, ou protéostasie.Proteins are biological molecules that perform several essential roles for the proper functioning of our body. To be functional, each protein must acquire a specific fold. At the skin level, there are structural proteins, enzymes, hormones, signaling proteins and transport proteins. All of the biological pathways controlling the biogenesis, folding, trafficking and degradation of proteins participate in the maintenance of protein homeostasis, or proteostasis.

Il est donc indispensable de préserver l’activité métabolique des cellules cutanées et de maintenir la protéostasie au cours du vieillissement.It is therefore essential to preserve the metabolic activity of skin cells and to maintain proteostasis during aging.

L’industrie cosmétique s’est longuement intéressée aux mitochondries, usines fournissant l’énergie dont la cellule a besoin pour fonctionner. Au-delà des mitochondries, d’autres organites participent activement au métabolisme cellulaire. C’est notamment au cœur du réticulum endoplasmique (RE) que plusieurs mécanismes permettent d’aboutir à la production de protéines correctement repliées et fonctionnelles.The cosmetics industry has long been interested in mitochondria, factories providing the energy the cell needs to function. Beyond the mitochondria, other organelles actively participate in cellular metabolism. It is in particular at the heart of the endoplasmic reticulum (ER) that several mechanisms lead to the production of correctly folded and functional proteins.

Le RE est localisé dans le cytoplasme des cellules eucaryotes et est formé d’un réseau tubulaire. Sa lumière constitue un environnement favorable à la synthèse protéique. Le RE assure d’une part la synthèse et la maturation des protéines et d’autre part, contrôle la qualité des protéines néo-synthétisées en assurant un repliement et une conformation 3D correcte.The ER is located in the cytoplasm of eukaryotic cells and is formed by a tubular network. Its light constitutes a favorable environment for protein synthesis. The ER ensures on the one hand the synthesis and the maturation of proteins and on the other hand, controls the quality of the neo-synthesized proteins by ensuring a folding and a correct 3D conformation.

Le RE, est donc un organite indispensable à la protéostasie, équilibre nécessaire pour garder une peau ferme et éclatante. Or, de nombreuses situations de stress peuvent interférer avec la maturation protéique. Les protéines nouvellement synthétisées dans la lumière du RE ne sont alors plus correctement repliées, ce qui bloque leur sécrétion hors de l’organite. Produites en excès, les protéines mal conformées s’accumulent dans la lumière du RE et ce dernier se retrouve alors en situation de stress. De plus, l’accumulation délétère d’espèces réactives de l’oxygène (ROS) conduit à l’oxydation des protéines.The ER is therefore an organelle essential for proteostasis, the balance necessary to keep skin firm and radiant. However, many stressful situations can interfere with protein maturation. The newly synthesized proteins in the lumen of the ER are then no longer correctly folded, which blocks their secretion out of the organelle. Produced in excess, the malformed proteins accumulate in the lumen of the ER and the latter then finds itself in a situation of stress. In addition, the deleterious accumulation of reactive oxygen species (ROS) leads to protein oxidation.

En réponse à cette situation de stress, la cellule est capable d’enclencher l’UPR (« Unfolded Protein Response » signifiant réponse de la protéine dépliée) qui a pour but d’améliorer le fonctionnement du RE et sa santé en augmentant ses capacités et maintenir ainsi, la protéostasie cellulaire. Au niveau moléculaire, trois voies de signalisations impliquant trois protéines transmembranaires (ATF6, IRE-1α et PERK) permettent d’enclencher l’UPR.In response to this stressful situation, the cell is able to trigger the UPR ("Unfolded Protein Response" meaning unfolded protein response) which aims to improve the functioning of the ER and its health by increasing its capacities and thus maintaining cellular proteostasis. At the molecular level, three signaling pathways involving three transmembrane proteins (ATF6, IRE-1α and PERK) trigger the UPR.

La protéostasie cellulaire a été étudiée dans différentes conditions telles que les maladies rénales, le diabète ou certaines pathologies neurodégénératives. Néanmoins, ces études ont principalement été réalisées dans des conditions de stress aigus impliquant une issue fatale pour la cellule. Peu d’études se sont intéressées à la protéostasie cellulaire suite au stress du RE dans la peau et aucune au cours du vieillissement cutané.Cellular proteostasis has been studied in different conditions such as kidney disease, diabetes or certain neurodegenerative pathologies. Nevertheless, these studies were mainly carried out under acute stress conditions involving a fatal outcome for the cell. Few studies have focused on cellular proteostasis following ER stress in the skin and none during skin aging.

Or, il a été découvert que le vieillissement cutané s’accompagne d’une altération de la réponse UPR et d’une augmentation du stress du RE. L’absence de réponse UPR impacte significativement le métabolisme des fibroblastes altérant la dynamique matricielle. Ainsi, l’inventeur a découvert que le maintien de la protéostasie est important pour assurer la dynamique matricielle et obtenir ainsi, une peau ferme et un teint éclatant.However, it has been discovered that skin aging is accompanied by an alteration of the UPR response and an increase in ER stress. The absence of UPR response significantly impacts fibroblast metabolism, altering matrix dynamics. Thus, the inventor discovered that maintaining proteostasis is important to ensure matrix dynamics and thus obtain firm skin and a radiant complexion.

L’objectif de l'invention est par conséquent de proposer une solution cosmétique permettant de réguler la protéostasie cellulaire de la peau, en particulier chez des sujets âgés ou ayant été photoexposés.The objective of the invention is therefore to propose a cosmetic solution making it possible to regulate the cellular proteostasis of the skin, in particular in elderly subjects or having been photoexposed.

Pour répondre à cet objectif, l’invention propose d’utiliser un actif ciblant le RE permettant d’améliorer le métabolisme des fibroblastes âgés et ainsi fournir un actif anti-ride et améliorant l’éclat du teint, la qualité et l’épaisseur du derme.To meet this objective, the invention proposes to use an active targeting the ER making it possible to improve the metabolism of aged fibroblasts and thus provide an anti-wrinkle active and improving the radiance of the complexion, the quality and the thickness of the dermis.

A cet effet, il a été identifié par l’inventeur un actif spécifique issu des enveloppes extérieures (son et germe)d’ Oryza sativapermettant de restaurer la réponse UPR, réduire le stress du RE, limiter le processus d’« inflammaging » (expression des voies d’inflammation et de dégradation matricielle), restaurer la dynamique matricielle et ainsi réduire les rides et améliorer l’éclat du teint.To this end, the inventor has identified a specific active ingredient from the outer envelopes (bran and germ) of Oryza sativa , which restores the UPR response, reduces ER stress, limits the "inflammaging" process ( expression of inflammation and matrix degradation pathways), restore matrix dynamics and thus reduce wrinkles and improve the radiance of the complexion.

Le riz,Oryza sativaest une espèce de plante semi-aquatique annuelle herbacée de la famille des Poaceae, sous famille des Oryzoideae, originaire des régions tropicales d’Asie.Oryza sativaest la troisième culture la plus produite au monde et pousse au niveau de la mer et jusqu’à 2000 mètres d’altitude. Des extraitsd’Oryza sativaen cosmétique sont déjà connus, y compris pour des effets anti-âges et anti-vieillissement.Rice, Oryza sativa is a species of herbaceous annual semi-aquatic plant of the Poaceae family, subfamily Oryzoideae, native to tropical regions of Asia. Oryza sativa is the third most produced crop in the world and grows at sea level and up to 2000 meters above sea level. Extracts of Oryza sativa in cosmetics are already known, including for anti-aging and anti-aging effects.

La plupart des extraits connus sont issus de riz, c’est-à-dire de grainsd’Orysa sativadécortiqués, sans l’enveloppe, excluant donc le son de la plante.Most of the known extracts come from rice, that is to say shelled Orysa sativa grains, without the envelope, thus excluding the bran of the plant.

Or, de façon surprenante, un extraitd’Oryza sativaissu spécifiquement du son et du germe, utilisé seul et appliqué sur la peau de personnes saines, permet de maintenir la protéostasie cellulaire et d’obtenir un effet anti-rides important et d’améliorer efficacement l’éclat du teint.However, surprisingly, an extract of Oryza sativa derived specifically from the bran and the germ, used alone and applied to the skin of healthy people, makes it possible to maintain cellular proteostasis and to obtain a significant anti-wrinkle effect and effectively improve the radiance of the complexion.

L’invention a donc pour objet un principe actif cosmétique comprenant au moins un extrait de son et de germed’ Oryza sativa, ainsi que ses utilisations cosmétiques en application topique pour améliorer l’éclat du teint et réduire les rides.A subject of the invention is therefore a cosmetic active principle comprising at least one extract of bran and germ of Oryza sativa , as well as its cosmetic uses in topical application for improving the radiance of the complexion and reducing wrinkles.

L’invention a également pour objet un procédé d’obtention d’un tel principe actif ainsi que les compositions cosmétiques adaptées à une application topique l’incluant.A subject of the invention is also a process for obtaining such an active ingredient as well as cosmetic compositions suitable for topical application including it.

D’autres caractéristiques et avantages ressortiront de la description détaillée de l’invention, des exemples et des figures qui vont suivre.Other characteristics and advantages will emerge from the detailed description of the invention, the examples and the figures which follow.

Brève description des FiguresBrief Description of Figures

représente l’aspect de la matrice dermique du volontaire, à JO, c’est à dire avant l’application biquotidienne du principe actif selon l’invention, à une profondeur de 20 µm. represents the appearance of the dermal matrix of the volunteer, at D0, that is to say before the twice-daily application of the active principle according to the invention, to a depth of 20 μm.

représente l’aspect de la matrice dermique du volontaire, après 56 jours d’application biquotidienne du principe actif selon l’invention, à une profondeur de 20 µm. represents the appearance of the dermal matrix of the volunteer, after 56 days of twice-daily application of the active principle according to the invention, at a depth of 20 μm.

représente le stade de rides de la patte d’oie du volontaire, avant et après 56 jours d’application biquotidienne du principe actif selon l’invention. represents the stage of crow's feet wrinkles in the volunteer, before and after 56 days of twice-daily application of the active principle according to the invention.

Description détaillée de l’inventionDetailed description of the invention

DéfinitionDefinition

Par « actif cosmétique » ou « principe actif cosmétique » au sens de l’invention, on entend un ensemble de molécules présentant un effet cosmétique sur la peau.By “cosmetic active ingredient” or “cosmetic active ingredient” within the meaning of the invention, is meant a set of molecules having a cosmetic effect on the skin.

Par « extrait » d’une matière première X au sens de l’invention on entend un ensemble de molécules extraites de X, natives ou issues de la transformation (par exemple par hydrolyse) des molécules natives de X. Ainsi un extrait de son et de germed’Oryza sativaest un ensemble de molécules natives et/ou issues de la transformation (par exemple par hydrolyse) du son et du germed’Oryza sativa.By "extract" of a raw material X within the meaning of the invention is meant a set of molecules extracted from X, native or resulting from the transformation (for example by hydrolysis) of the native molecules of X. Thus an extract of its and of Oryza sativa germ is a set of molecules native and/or resulting from the transformation (for example by hydrolysis) of the bran and of the germ of Oryza sativa .

Par « hydrolysat » de son ou de germe d’Oryza sativaau sens de l’invention, on entend tout extrait obtenu à partir de son et de germed’Oryza sativapar un procédé comprenant au moins une étape d’hydrolyse enzymatique ou chimique.By “hydrolyzate” of Oryza sativa bran or germ within the meaning of the invention, is meant any extract obtained from bran and Oryza sativa germ by a process comprising at least one enzymatic or chemical hydrolysis step. .

Par « hydrolysat enzymatique » de son ou de germe d’Oryza sativaau sens de l’invention, on entend tout extrait obtenu à partir de son et de germed’ Oryza sativapar un procédé comprenant au moins une hydrolyse enzymatique, préférentiellement par un procédé comprenant au moins deux hydrolyses enzymatiques avec deux protéases différentes.By "enzymatic hydrolyzate" of bran or germ of Oryza sativa within the meaning of the invention, is meant any extract obtained from bran and germ of Oryza sativa by a process comprising at least one enzymatic hydrolysis, preferably by a process comprising at least two enzymatic hydrolyses with two different proteases.

Principe actif cosmétiqueCosmetic active ingredient

L’invention vise donc un principe actif spécifique, particulièrement utile en cosmétique.The invention therefore relates to a specific active principle, which is particularly useful in cosmetics.

Le principe actif selon l’invention est un principe actif cosmétique comprenant au moins un extrait obtenu à partir des enveloppes extérieures c’est-à-dire du son et du germe d’Oryza sativa, à l’exclusion de toute autre partie du grain de riz.The active principle according to the invention is a cosmetic active principle comprising at least one extract obtained from the outer envelopes, that is to say from the bran and from the germ of Oryza sativa , excluding any other part of the grain. rice.

Préférentiellement, l’extrait obtenu à partir de son et de germe d’Oryza sativaest un hydrolysat de son et de germe d’Oryza sativa,encore plus préférentiellement un hydrolysat enzymatique de son et de germe d’Oryza sativa. Selon un mode de réalisation particulièrement adapté, l’extrait de son et de germe d’Oryza sativaest un hydrolysat enzymatique obtenu par un procédé comprenant au moins deux hydrolyses enzymatiques successives. Préférentiellement, la ou les enzyme(s) utilisée(s) pour la ou les hydrolyse(s) sont des protéases.Preferably, the extract obtained from bran and Oryza sativa germ is a hydrolyzate of bran and Oryza sativa germ, even more preferably an enzymatic hydrolyzate of bran and Oryza sativa germ. According to a particularly suitable embodiment, the extract of bran and germ of Oryza sativa is an enzymatic hydrolyzate obtained by a process comprising at least two successive enzymatic hydrolyses. Preferably, the enzyme(s) used for the hydrolysis(s) are proteases.

De façon préférée, l’extrait de son et de germe d’Oryza sativa, et par conséquent le principe actif, comprend des peptides. L’extrait comprend entre 12% et 36% de peptides en poids de matières sèches de l’extrait. La répartition et la quantité des peptides peut être déterminée par un dosage spectrophotométrique selon la méthode de Lowry (Lowry et al., Protein measurement with the Folin reagent, J. Biol. Chem., 193, 265-275, 1951). La caractérisation et la quantification des acides aminés présents dans l’extrait et donc dans le principe actif selon l’invention peuvent être réalisées par chromatographie liquide après hydrolyse totale de l’échantillon.Preferably, the extract of the bran and germ of Oryza sativa , and consequently the active principle, comprises peptides. The extract comprises between 12% and 36% of peptides by weight of dry matter of the extract. The distribution and the quantity of the peptides can be determined by a spectrophotometric assay according to the method of Lowry (Lowry et al., Protein measurement with the Folin reagent, J. Biol. Chem., 193, 265-275, 1951). The characterization and quantification of the amino acids present in the extract and therefore in the active principle according to the invention can be carried out by liquid chromatography after total hydrolysis of the sample.

Préférentiellement, les peptides constituant le principe actif selon l’invention ont une masse molaire inférieure à 2000 Da. Ces peptides comprennent au moins les acides aminés suivants : l’acide aspartique, la glutamine, la leucine ainsi que la valine et la glycine.Preferably, the peptides constituting the active principle according to the invention have a molar mass of less than 2000 Da. These peptides include at least the following amino acids: aspartic acid, glutamine, leucine as well as valine and glycine.

De façon particulièrement préférée, les peptides ont une masse molaire comprise entre 500 et 1100 Da. Ceci correspond à des peptides comprenant entre 5 et 10 acides aminés. Dans ce cas particulier, les peptides présents dans l’extrait et donc dans le principe actif cosmétique selon l’invention comprennent majoritairement les acides aminés suivants : la glycine, la glutamine, la leucine et la valine.Particularly preferably, the peptides have a molar mass of between 500 and 1100 Da. This corresponds to peptides comprising between 5 and 10 amino acids. In this particular case, the peptides present in the extract and therefore in the cosmetic active principle according to the invention mainly comprise the following amino acids: glycine, glutamine, leucine and valine.

Le principe actif selon l’invention comprend également des sucres. La teneur en sucres totaux (carbohydrates) dans le principe actif peut être déterminée par la méthode de DUBOIS (Dubois M. etal.,Analytical chemistry, 28, 3, 350-356, 1956). La teneur en sucres totaux dans le principe actif est exprimée en pourcentage par rapport à la matière sèche. Le principe actif contient entre 24% et 56% de sucres en poids par rapport à la matière sèche. La composition en sucres simples de la fraction glucidique du principe actif est déterminée par chromatographie liquide ionique et la taille des masses molaires par HPLC avec détection RI. La fraction glucidique du principe actif selon l’invention est préférentiellement majoritairement composée de saccharose et de glucose sous forme d’oligosaccharides avec une masse molaire moyenne de 540 Da.The active principle according to the invention also comprises sugars. The content of total sugars (carbohydrates) in the active ingredient can be determined by the DUBOIS method (Dubois M. et al ., Analytical chemistry , 28, 3, 350-356, 1956). The content of total sugars in the active ingredient is expressed as a percentage relative to the dry matter. The active principle contains between 24% and 56% of sugars by weight relative to the dry matter. The composition in simple sugars of the carbohydrate fraction of the active principle is determined by ionic liquid chromatography and the size of the molar masses by HPLC with RI detection. The carbohydrate fraction of the active ingredient according to the invention is preferably mainly composed of sucrose and glucose in the form of oligosaccharides with an average molar mass of 540 Da.

La teneur en cendres minérales peut être déterminée par la pesée des résidus issus de l’incinération des échantillons du principe actif selon l’invention à 550°C dans un four à moufle électrique. Préférentiellement, le principe actif selon l’invention présente une teneur en cendres comprise entre 20% et 52% en poids de matières sèches du principe actif.The mineral ash content can be determined by weighing the residues resulting from the incineration of the samples of the active principle according to the invention at 550° C. in an electric muffle furnace. Preferably, the active principle according to the invention has an ash content of between 20% and 52% by weight of dry matter of the active principle.

Le principe actif cosmétique selon l’invention peut se présenter sous forme liquide ou sous forme solide.The cosmetic active principle according to the invention can be in liquid form or in solid form.

Lorsqu’il se présente sous forme liquide, le principe actif selon l’invention est exclusivement constitué par l’extrait de son et de germe d’Oryza sativaaccompagné de stabilisant et/ou système de conservation.When it is in liquid form, the active principle according to the invention consists exclusively of the extract of bran and germ of Oryza sativa accompanied by stabilizer and/or preservative system.

L’extrait sous forme liquide se présente préférentiellement sous forme d’une solution aqueuse liquide limpide, avec une faible odeur et une couleur jaune très clair. Il peut toutefois être plus coloré et/ou être décoloré par tout procédé connu de l’homme du métier.The extract in liquid form is preferably in the form of a clear liquid aqueous solution, with a weak odor and a very light yellow color. It can however be more colored and/or be discolored by any method known to those skilled in the art.

Préférentiellement, l’extrait selon l’invention sous forme liquide a une teneur en matières sèches de : 10 g/L à 90 g/L, encore plus préférentiellement de 17 g/L à 32g/L.Preferably, the extract according to the invention in liquid form has a dry matter content of: 10 g/L to 90 g/L, even more preferably from 17 g/L to 32 g/L.

Lorsque le principe actif selon l’invention se présente sous forme solide, il est préférentiellement sous forme de poudre avec ou sans support. Le support peut être, par exemple choisi parmi les maltodextrines. Dans ce cas, préférentiellement, l’extrait représente au moins 10% en poids et le support au plus 90% en poids.When the active principle according to the invention is in solid form, it is preferably in powder form with or without support. The support may, for example, be chosen from maltodextrins. In this case, preferably, the extract represents at least 10% by weight and the support at most 90% by weight.

Selon un mode de réalisation particulièrement préféré, l’extrait du principe actif cosmétique selon l’invention est susceptible d’être obtenu par un procédé d’extraction comprenant au moins deux hydrolyses enzymatiques de son et de germe d’Oryza sativa, le son et le germe ayant été préalablement solubilisés dans l’eau. Préférentiellement les deux hydrolyses enzymatiques, successives, sont réalisées avec deux protéases différentes. Le procédé comprend préférentiellement ensuite un tri des molécules présentes dans la phase soluble sélectionnée après hydrolyses, pour purifier les peptides de tailles inférieures à 2000 Da.According to a particularly preferred embodiment, the extract of the cosmetic active principle according to the invention is capable of being obtained by an extraction process comprising at least two enzymatic hydrolyses of bran and Oryza sativa germ, bran and the germ having been dissolved beforehand in water. Preferably, the two successive enzymatic hydrolyses are carried out with two different proteases. The process preferably then comprises a sorting of the molecules present in the soluble phase selected after hydrolysis, to purify the peptides of sizes less than 2000 Da.

Selon un mode de réalisation, l’extrait du principe actif selon l’invention est susceptible d’être obtenu par un procédé tel que décrit ci-après.According to one embodiment, the extract of the active principle according to the invention can be obtained by a process as described below.

ProcédéProcess d’obtention du principe actif cosmétiqueobtaining the cosmetic active ingredient

Le principe actif selon l’invention peut être obtenu par tout moyen.The active principle according to the invention can be obtained by any means.

Selon un mode de réalisation particulièrement adapté, le principe actif selon l’invention est obtenu par la mise en œuvre des étapes suivantes :
- Solubilisation de son et germe d’Oryza sativadans l’eau, préférentiellement de poudre de son et de germe d’Oryza sativa,préférentiellement à raison d’au moins 100g de son et germe d’Oryza sativapar litre d’eau,
- au moins deux hydrolyses enzymatiques, successives, préférentiellement au moins deux hydrolyses enzymatiques réalisées à l’aide d’au moins deux protéases différentes,
- séparation des phases soluble et insoluble, par tout moyen permettant de séparer une phase insoluble de la phase soluble, par exemple par centrifugation, filtration ou décantation,
- récupération de la phase soluble,
- inactivation enzymatique par tout moyen permettant l’inactivation des activités enzymatiques, par exemple par traitement thermique,
- tri moléculaire des molécules de la phase soluble pour récupérer les molécules de tailles inférieures à 2000 Da et notamment des peptides de tailles inférieures à 2000 Da,
- éventuellement désodorisation ou décoloration par ajout d’adjuvant de procédé permettant la désodorisation ou la décoloration,
- préférentiellement filtration et
- filtration stérilisante.
According to a particularly suitable embodiment, the active principle according to the invention is obtained by implementing the following steps:
- Solubilization of Oryza sativa bran and germ in water, preferably bran powder and Oryza sativa germ, preferably at the rate of at least 100g of Oryza sativa bran and germ per liter of water,
- at least two successive enzymatic hydrolyses, preferably at least two enzymatic hydrolyses carried out using at least two different proteases,
- separation of the soluble and insoluble phases, by any means making it possible to separate an insoluble phase from the soluble phase, for example by centrifugation, filtration or decantation,
- recovery of the soluble phase,
- enzymatic inactivation by any means allowing the inactivation of enzymatic activities, for example by heat treatment,
- molecular sorting of the molecules of the soluble phase to recover molecules with sizes less than 2000 Da and in particular peptides with sizes less than 2000 Da,
- optionally deodorization or discoloration by adding a process adjuvant allowing deodorization or discoloration,
- preferentially filtration and
- sterilizing filtration.

Lors du blanchiment du riz complet en riz blanc, le son (couches externes du grain de riz) et le germe (embryon) sont retirés mécaniquement. Ce processus est usuel dans le domaine de l’industrie agroalimentaire. Ces co-produits sont ensuite réduits en poudre. Ainsi seules les molécules du son et du germe combinées constituent la matière première de départ.When blanching brown rice into white rice, the bran (outer layers of the rice grain) and the germ (embryo) are mechanically removed. This process is common in the food industry. These co-products are then reduced to powder. Thus only the molecules of the bran and the germ combined constitute the starting raw material.

Le tri moléculaire est préférentiellement réalisé par ultrafiltration.Molecular sorting is preferably carried out by ultrafiltration.

Une étape supplémentaire pour sécher l’hydrolysat peut être ajoutée de façon à ce qu’il se présente sous forme solide, préférentiellement sous forme de poudre. Il peut s’agir d’une étape d’atomisation ou de lyophilisation par exemple. Dans ce cas un support comme par exemple une maltodextrine peut être utilisée.An additional step to dry the hydrolyzate can be added so that it is in solid form, preferably in powder form. This can be an atomization or freeze-drying step, for example. In this case, a support such as, for example, a maltodextrin can be used.

Les étapes des procédés décrits ci-avant, prises individuellement, sont usuelles dans le domaine des extractions d’actifs à partir de matières premières naturelles et l’homme du métier est à même d’en ajuster les paramètres réactionnels sur la base de ses connaissances générales, et de façon à obtenir les caractéristiques du principe actif objet de l’invention.The steps of the processes described above, taken individually, are usual in the field of extractions of active ingredients from natural raw materials and the person skilled in the art is able to adjust the reaction parameters on the basis of his knowledge. general, and so as to obtain the characteristics of the active ingredient object of the invention.

UtilisationUse

Le principe actif selon l’invention présente des caractéristiques qui permettent son utilisation en cosmétique et en particulier pour limiter les effets naturels liés au vieillissement et améliorer l’éclat du teint. En effet, il permet d’améliorer la qualité de la matrice dermique chez des sujets sains âgés photoexposés d’origine caucasienne ou asiatique.The active principle according to the invention has characteristics which allow its use in cosmetics and in particular to limit the natural effects linked to aging and to improve the radiance of the complexion. In fact, it improves the quality of the dermal matrix in healthy, photo-exposed elderly subjects of Caucasian or Asian origin.

En particulier le principe actif selon l’invention est capable de maintenir la protéostasie cellulaire en préservant la santé du RE. Appliqué sur une peau saine, en particulier au cours du vieillissement cutané (naturel ou stress extérieur tel qu’un stress UVA), il agit notamment :
- en augmentant la réponse UPR, en particulier en restaurant cette réponse affaiblie au cours du vieillissement cutané : notamment le principe actif selon l’invention permet d’augmenter la synthèse d’ATF6 et de IRE-1α,
- en diminuant le stress du RE,
- en limitant le processus d’ « inflammaging » : notamment le principe actif selon l’invention diminue la dégradation matricielle par les MMP-1 et l’inflammation médiée par les IL-1α, IL-1β et IL-8,
- en augmentant la dynamique matricielle : notamment le principe actif selon l’invention augmente l’expression des marqueurs clés de la matrice extracellulaire : notamment le principe actif selon l’invention augmente l’expression du collagène IV, de la fibronectine, et favorise la synthèse de perlécan et la formation du réseau de collagène.
In particular, the active principle according to the invention is capable of maintaining cellular proteostasis while preserving the health of the ER. Applied to healthy skin, in particular during skin aging (natural or external stress such as UVA stress), it acts in particular:
- by increasing the UPR response, in particular by restoring this weakened response during skin aging: in particular the active principle according to the invention makes it possible to increase the synthesis of ATF6 and of IRE-1α,
- by reducing the stress of the RE,
- by limiting the "inflammaging" process: in particular the active ingredient according to the invention reduces matrix degradation by MMP-1 and inflammation mediated by IL-1α, IL-1β and IL-8,
- by increasing the matrix dynamics: in particular the active principle according to the invention increases the expression of the key markers of the extracellular matrix: in particular the active principle according to the invention increases the expression of collagen IV, of fibronectin, and promotes the synthesis of perlecan and the formation of the collagen network.

En agissant sur ces différents marqueurs, le principe actif selon l’invention a une action rééquilibrante et améliore significativement la qualité et l’épaisseur du derme. Par conséquent, la beauté et la qualité de la peau sont sublimées, les rides sont significativement réduites, la peau est plus ferme et l’éclat du teint ravivé. Il est particulièrement adapté aux peaux saines matures.By acting on these different markers, the active ingredient according to the invention has a rebalancing action and significantly improves the quality and thickness of the dermis. Consequently, the beauty and quality of the skin are enhanced, wrinkles are significantly reduced, the skin is firmer and the radiance of the complexion revived. It is particularly suitable for mature healthy skin.

Le principe actif comprenant au moins un extrait de son et germe d’Oryza sativa, peut ainsi être utilisé pour des utilisations cosmétiques en application topique sur la peau de personnes saines pour améliorer la qualité de la peau, son épaisseur et ainsi améliorer l’éclat du teint et réduire les rides.The active principle comprising at least one extract of bran and germ of Oryza sativa , can thus be used for cosmetic uses in topical application on the skin of healthy people to improve the quality of the skin, its thickness and thus improve the radiance. complexion and reduce wrinkles.

Par contre, le principe actif ne présente pas la caractéristique souvent revendiquée par les extraits de riz, à savoir le principe actif selon l’invention ne présente pas un effet anti-oxydant et/ou un effet anti radicalaire.On the other hand, the active principle does not have the characteristic often claimed by rice extracts, namely the active principle according to the invention does not have an antioxidant effect and/or an anti-radical effect.

Ainsi, l’extrait selon l’invention ne présente pas d’activité anti radicalaire selon le test DPPH comme présenté dans le tableau 1 ci-après.Thus, the extract according to the invention does not exhibit any anti-radical activity according to the DPPH test as presented in Table 1 below.

Le diphényl-picrylhydrazylhydrate (DPPH) est un radical libre, absorbant dans le violet à 517nm. Un produit anti-radicalaire entraine une disparition de la coloration violette. L'activité anti-radicalaire d'une substance est exprimée en pourcentage d'inhibition de I ‘absorbance du DPPH.Diphenyl-picrylhydrazylhydrate (DPPH) is a free radical, absorbing in the violet at 517 nm. An anti-radical product leads to a disappearance of the purple color. The anti-radical activity of a substance is expressed as a percentage of inhibition of the absorbance of DPPH.

Pourcentage d’inhibition de l’absorbance du DPPHPercentage inhibition of DPPH absorbance Principe actif purPure active ingredient 10%10% 50% de principe actif50% active ingredient 4%4% 10% de principe actif10% active ingredient 0%0%

A la dose maximale recommandée c’est-à-dire 10% de principe actif, le pourcentage d’inhibition de l’absorbance du DPPH est nul. Ainsi, l’extrait selon l’invention ne présente pas d’activité anti radicalaire.At the maximum recommended dose, i.e. 10% of active ingredient, the percentage inhibition of the absorbance of DPPH is nil. Thus, the extract according to the invention does not exhibit any anti-radical activity.

Compositions cosmétiquesCosmetic compositions

Les principes actifs selon l’invention, sont de préférence utilisés dans des compositions cosmétiques comprenant un milieu cosmétiquement acceptable. Il s’agit de compositions dans différentes formes galéniques, adaptées à une application par voie topique sur la peau.The active principles according to the invention are preferably used in cosmetic compositions comprising a cosmetically acceptable medium. These are compositions in different galenic forms, suitable for topical application to the skin.

Ces compositions peuvent se présenter notamment sous forme d’émulsions huile-dans-eau, émulsions eau-dans-huile, émulsions multiples (Eau/Huile/Eau ou Huile/Eau/Huile) qui peuvent être éventuellement des microémulsions ou des nanoémulsions, ou sous forme de solutions, suspensions, hydrodispersions, gels aqueux ou poudres. Elles peuvent être plus ou moins fluides et avoir l’aspect de crèmes, émulsions ou gels ou tous autres aspects des cosmétiques de soin de la peau saine.These compositions may in particular be in the form of oil-in-water emulsions, water-in-oil emulsions, multiple emulsions (Water/Oil/Water or Oil/Water/Oil) which may optionally be microemulsions or nanoemulsions, or in the form of solutions, suspensions, hydrodispersions, aqueous gels or powders. They can be more or less fluid and have the appearance of creams, emulsions or gels or any other aspect of healthy skin care cosmetics.

Il peut s’agir de compositions comprenant au moins 0,1% du principe actif liquide selon l’invention, préférentiellement entre 0,5 et 10% ou comprenant au moins 0,01% d’un principe actif poudre selon l’invention.They may be compositions comprising at least 0.1% of the liquid active principle according to the invention, preferably between 0.5 and 10% or comprising at least 0.01% of a powder active principle according to the invention.

Ces compositions comprennent, outre le principe actif, un milieu physiologiquement acceptable et de préférence cosmétiquement acceptable, c'est-à-dire qui ne provoque pas de sensations d’inconfort pour l’utilisateur telles que des rougeurs, tiraillements ou picotements.These compositions comprise, in addition to the active principle, a physiologically acceptable and preferably cosmetically acceptable medium, that is to say which does not cause feelings of discomfort for the user such as redness, tightness or tingling.

Les compositions selon l’invention peuvent contenir comme adjuvant au moins un composé choisi parmi :
- les huiles, qui peuvent être choisies notamment parmi les huiles de silicone, linéaires ou cycliques, volatiles ou non volatiles ;
- les cires, telles que l’ozokérite, la cire de polyéthylène, la cire d’abeille ou la cire de carnauba,
- les élastomères de silicone,
- les tensioactifs, de préférence émulsionnants, qu’ils soient non ioniques, anioniques, cationiques ou amphotères,
- les co-tensioactifs, tels que les alcools gras linéaires,
- les épaississants et/ou gélifiants,
- les humectants, tels que les polyols comme la glycérine,
- les colorants, les conservateurs, les charges,
- les tenseurs,
- les séquestrants,
- les parfums,
- et leurs mélanges, sans que cette liste soit limitative.
Des exemples de tels adjuvants sont cités notamment dans le Dictionnaire CTFA (International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook publié par le Personal Care Product Council).
The compositions according to the invention may contain, as adjuvant, at least one compound chosen from:
- oils, which can be chosen in particular from silicone oils, linear or cyclic, volatile or non-volatile;
- waxes, such as ozokerite, polyethylene wax, beeswax or carnauba wax,
- silicone elastomers,
- surfactants, preferably emulsifiers, whether nonionic, anionic, cationic or amphoteric,
- co-surfactants, such as linear fatty alcohols,
- thickeners and/or gelling agents,
- humectants, such as polyols such as glycerin,
- colorants, preservatives, fillers,
- the tensors,
- sequestrants,
- the perfumes,
- and mixtures thereof, without this list being exhaustive.
Examples of such adjuvants are cited in particular in the CTFA Dictionary (International Cosmetic Ingredient Dictionary and Handbook published by the Personal Care Product Council).

Bien entendu, l’homme du métier veillera à choisir les éventuels composés complémentaires, actifs ou non-actifs, et leur quantité, de telle sorte que les propriétés avantageuses du mélange ne soient pas, ou sensiblement pas, altérées par l’adjonction envisagée.Of course, the person skilled in the art will take care to choose the possible additional compounds, active or non-active, and their quantity, so that the advantageous properties of the mixture are not, or substantially not, altered by the addition envisaged.

Ces compositions sont destinées à être utilisées sur des peaux saines, notamment des peaux matures ou des peaux photo exposées, en particulier pour améliorer l’éclat du teint et réduire les rides. L’invention a donc également pour objet un procédé cosmétique de traitement de la peau pour un effet éclat du teint et/ou anti-rides, qui consiste en l’application topique sur la peau d’une personne saine d’une telle composition.These compositions are intended for use on healthy skin, in particular mature skin or photo-exposed skin, in particular to improve the radiance of the complexion and reduce wrinkles. A subject of the invention is therefore also a cosmetic process for treating the skin for a complexion radiance and/or anti-wrinkle effect, which consists of the topical application to the skin of a healthy person of such a composition.

Afin d’illustrer les effets cosmétiques sur la peau saine de principes actifs comprenant au moins un extrait de son et germe d’Oryza sativa, des exemples et résultats d’essais sont présentés ci-après.In order to illustrate the cosmetic effects on healthy skin of active principles comprising at least one extract of bran and germ of Oryza sativa , examples and test results are presented below.

ExemplesExamples

Exemple 1 : exemple de principe actif selon l’invention sous forme liquide
Le principe actif est obtenu par la mise en œuvre des étapes suivantes :
- solubilisation dans l’eau de son et de germe d’Oryza sativaà raison de 100 g/L,
- deux hydrolyses réalisées avec deux protéases différentes,
- une étape de tri moléculaire, destiné à sélectionner les molécules, notamment des peptides, de tailles inférieures à 2000 Da,
- inactivation enzymatique par traitement thermique,
- désodorisation,
- filtrations et filtration stérilisante.
Example 1: example of active principle according to the invention in liquid form
The active ingredient is obtained by implementing the following steps:
- solubilization in water of bran and germ of Oryza sativa at a rate of 100 g/L,
- two hydrolyses carried out with two different proteases,
- a molecular sorting step, intended to select molecules, in particular peptides, of sizes less than 2000 Da,
- enzymatic inactivation by heat treatment,
- deodorization,
- filtrations and sterilizing filtration.

Le principe actif obtenu présente les caractéristiques analytiques suivantes :
- un taux de matière sèche : 22,2 g/L
- une teneur en protéine : 4,1 g/L (18,5%)
- une teneur en sucres totaux : 8,8 g/L (39%)
- un pH : 5,1
- un taux de cendres : 6,3 g/L (28%).
- aucune activité anti radicalaire (test DPPH).
The active ingredient obtained has the following analytical characteristics:
- a dry matter content: 22.2 g/L
- protein content: 4.1 g/L (18.5%)
- a total sugar content: 8.8 g/L (39%)
- pH: 5.1
- an ash content: 6.3 g/L (28%).
- no anti-radical activity (DPPH test).

La caractérisation et la quantification des acides aminés du principe actif selon l’exemple 1 ont été réalisées par chromatographie liquide après hydrolyse de l’échantillon. La répartition des différents acides aminés est présentée dans le tableau 2.The characterization and quantification of the amino acids of the active principle according to example 1 were carried out by liquid chromatography after hydrolysis of the sample. The distribution of the different amino acids is shown in Table 2.

Nom de l’acide aminéAmino acid name Répartition (%)Distribution (%) AlanineAlanine 9,69.6 ArginineArginine 9,69.6 Acide aspartiqueAspartic acid 13,513.5 Acide glutamiqueGlutamic acid 15,415.4 Cystinecystine 0,00.0 Glycinewisteria 5,85.8 HistidineHistidine 0,00.0 IsoleucineIsoleucine 5,85.8 LeucineLeucine 15,415.4 LysineLysine 7,77.7 PhénylalaninePhenylalanine 0,00.0 ProlineProline 0,00.0 SerineSerine 7,77.7 ThréonineThreonine 5,85.8 TyrosineTyrosine 0,00.0 ValineValine 3,83.8

Exemple 2 : e xemple de principe actif selon l’invention sous forme liquide
Le principe actif est obtenu par un procédé identique à celui de l’exemple 1
Example 2: example of active ingredient according to the invention in liquid form
The active ingredient is obtained by a process identical to that of Example 1

Le principe actif obtenu présente les caractéristiques analytiques suivantes :
- un taux de matière sèche : 28,2 g/L
- une teneur en protéine : 5,5 g/L (19,5%)
- une teneur en sucres totaux : 10,2 g/L (36%)
- un pH : 5.
The active ingredient obtained has the following analytical characteristics:
- a dry matter rate: 28.2 g/L
- protein content: 5.5 g/L (19.5%)
- a total sugar content: 10.2 g/L (36%)
- a pH: 5.

La caractérisation peptidique du principe actif ainsi obtenu a été réalisée.The peptide characterization of the active principle thus obtained was carried out.

Les peptides présents dans cette fraction purifiée ont une masse molaire comprise entre 500 et 1100 Da. Ceci correspond à des peptides comprenant entre 5 et 10 acides aminés.The peptides present in this purified fraction have a molar mass of between 500 and 1100 Da. This corresponds to peptides comprising between 5 and 10 amino acids.

Ces peptides comprennent préférentiellement au moins les acides aminés suivants : la glycine, la glutamine, la leucine et la valine.These peptides preferably comprise at least the following amino acids: glycine, glutamine, leucine and valine.

Exemple 3 : exemple de composition selon l’inventionExample 3: example of composition according to the invention

Un exemple de formulation contenant un principe actif selon l’invention sous forme de crème onctueuse est présenté dans le tableau 3 suivant :An example of a formulation containing an active principle according to the invention in the form of a creamy cream is presented in the following table 3:

IngrédientsIngredients %% AAT EauWater qsp 100qsp 100 Butylene glycolButylene glycol 5,005.00 BB Cetearyl alcohol & Ceteareth-33Cetearyl alcohol & Ceteareth-33 5,005.00 Isocetyl stearoyl stearateIsocetyl stearoyl stearate 3,003.00 Caprylic/capric triglycerideCaprylic/capric triglyceride 7,007.00 Coco-caprylate/caprateCoco-caprylate/caprate 4,004.00 DimethiconeDimethicone 2,002.00 CVS Hydroxyethyl Acrylate/Sodium Acryloyldimethyl Taurate CopolymerHydroxyethyl Acrylate/Sodium Acryloyldimethyl Taurate Copolymer DD Principe actif selon l’invention (exemple 1)Active principle according to the invention (example 1) 2,502.50

La composition de l’exemple 3 peut notamment être obtenue par le procédé suivant :
- placer les ingrédients A sous agitation modéré et chauffage à 80°C
- placer les ingrédients B sous agitation magnétique et chauffage à 80°C
- Sous rotor-stator, émulsionner les ingrédients B dans les ingrédients A pendant 10min,
- A 40°C, sous agitation modérée, ajouter les ingrédients C puis le principe actif selon l’invention.
The composition of Example 3 can in particular be obtained by the following process:
- place ingredients A with moderate stirring and heating to 80°C
- place ingredients B under magnetic stirring and heating to 80°C
- Under rotor-stator, emulsify ingredients B in ingredients A for 10min,
- At 40° C., with moderate stirring, add the ingredients C then the active principle according to the invention.

La composition est alors sous forme d’une émulsion épaisse, blanche et brillante avec un pH compris entre 5,4 et 5,5 et une viscosité comprise entre 55 000 et 65 000 cP.The composition is then in the form of a thick, white and shiny emulsion with a pH of between 5.4 and 5.5 and a viscosity of between 55,000 and 65,000 cP.

Exemple 4 : exemple de composition selon l’inventionExample 4: example of composition according to the invention

Un exemple de formulation contenant un principe actif selon l’invention sous forme de crème douceur est présenté dans le tableau 4 suivant :An example of a formulation containing an active principle according to the invention in the form of a gentle cream is presented in the following table 4:

IngrédientsIngredients %% A1A1 EauWater qsp 100qsp 100 Sucrose StearateSucrose Stearate 2,502.50 A2A2 Butylene GlycolButylene Glycol 3,003.00 GlycerinGlycerine 2,002.00 Xanthan GumXanthan Gum 0,300.30 BB Sucrose DistearateSucrose Distearate 2,502.50 Glyceryl StearateGlyceryl Stearate 1,001.00 Hydrogenated Coconut OilHydrogenated Coconut Oil 2,002.00 Isononyl IsononanoateIsononyl Isononanoate 3,003.00 Isocetyl IsostearateIsocetyl Isostearate 3,003.00 Dicaprylyl CarbonateDicaprylyl Carbonate 3,003.00 DimethiconeDimethicone 1,001.00 CVS Hydroxyethyl Acrylate/Sodium Acryloyldimethyl Taurate Copolymer & Polyisobutene & PEG-7 Trimethylolpropane Coconut EtherHydroxyethyl Acrylate/Sodium Acryloyldimethyl Taurate Copolymer & Polyisobutene & PEG-7 Trimethylolpropane Coconut Ether 1,001.00 DD Principe actif selon l’invention (exemple 1)Active principle according to the invention (example 1) 0,500.50 EE Solution Acide Citrique 10%Citric Acid Solution 10% qsp pHqsp pH Eau & Acide CitriqueWater & Citric Acid qsp pHqsp pH

La composition selon l’exemple 4 peut être obtenue après les étapes suivantes :
- Placer A1 sous agitation modérée et chauffer à 80°C.
- Ajouter A2 dans A1 sous agitation soutenue et agiter jusqu’à obtention d’un gel homogène.
- Placer B sous agitation magnétique et chauffer à 80°C.
- Sous rotor-stator, émulsionner B dans A pendant 5min.
- A 35°C, sous agitation douce, ajouter C puis D.
- Homogénéiser sous forte agitation pendant 1min.
- Ajuster le pH entre 4,8 et 5,2 avec E.
The composition according to Example 4 can be obtained after the following steps:
- Place A1 under moderate agitation and heat to 80°C.
- Add A2 to A1 under sustained agitation and agitate until a homogeneous gel is obtained.
- Place B under magnetic stirring and heat to 80°C.
- Under rotor-stator, emulsify B in A for 5 min.
- At 35°C, with gentle stirring, add C then D.
- Homogenize with vigorous stirring for 1 min.
- Adjust the pH between 4.8 and 5.2 with E.

La composition est alors sous forme d’une émulsion souple, blanche et brillante avec un pH égal à 5 et une viscosité comprise entre 27 000 et 28 500cP.The composition is then in the form of a flexible, white and shiny emulsion with a pH equal to 5 and a viscosity of between 27,000 and 28,500cP.

ExempleExample 55 : exemple de composition selon l’invention: example of composition according to the invention

Un exemple de formulation contenant un principe actif selon l’invention sous forme de fluide de teint est présenté dans le tableau 5 suivant :An example of a formulation containing an active principle according to the invention in the form of a foundation fluid is presented in the following table 5:

IngrédientsIngredients %% A1

A1

IsododecaneIsododecane 10,0010.00
Isododecane & Disteardimonium Hectorite & Propylene CarbonateIsododecane & Disteardimonium Hectorite & Propylene Carbonate 8,008.00 A2A2 Lauryl peg-10 tris(trimethylsiloxy)silylethyl dimethiconeLauryl peg-10 tris(trimethylsiloxy)silylethyl dimethicone 6,006.00 DimethiconeDimethicone 7,207.20 Diphenyl Dimethicone/Vinyl Diphenyl Dimethicone/Silsesquioxane CrosspolymerDiphenyl Dimethicone/Vinyl Diphenyl Dimethicone/Silsesquioxane Crosspolymer 2,002.00 BB Lauryl peg-10 tris(trimethylsiloxy)silylethyl dimethiconeLauryl peg-10 tris(trimethylsiloxy)silylethyl dimethicone 0,500.50 Caprylyl MethiconeCaprylyl Methicone 4,004.00 DimethiconeDimethicone 4,004.00 Ci 77891 (Titanium Dioxide) & MethiconeCi 77891 (Titanium Dioxide) & Methicone 6,506.50 Ci 77499 (Iron Oxides) & MethiconeCi 77499 (Iron Oxides) & Methicone 0,100.10 Ci 77492 (Iron Oxides) & MethiconeCi 77492 (Iron Oxides) & Methicone 1,001.00 Ci 77491 (Iron Oxides) & Methicone & Ci 77499 (Iron Oxides)Ci 77491 (Iron Oxides) & Methicone & Ci 77499 (Iron Oxides) 0,300.30 CVS EauWater q.s. 100q.s. 100 GlycerinGlycerine 5,005.00 Pentylene GlycolPentylene Glycol 2,002.00 Sodium ChlorideSodium Chloride 1,001.00 Principe actif selon l’invention (exemple 1)Active principle according to the invention (example 1) 10,0010.00

La composition selon l’exemple 5 peut être obtenu après les étapes suivantes :
- Homogénéiser A1 sous agitation vive.
- Ajouter A2 et agiter jusqu’à homogénéité.
- Broyer les pigments de B à la tricylindre et transférer dans A. Agiter jusqu’à homogénéité.
- Ajouter C dans AB très lentement sous agitation vive.
- Homogénéiser pendant 5min sous agitation cisaillante.
The composition according to Example 5 can be obtained after the following steps:
- Homogenize A1 with vigorous stirring.
- Add A2 and stir until homogeneous.
- Grind the pigments from B using a three-cylinder machine and transfer to A. Shake until homogeneous.
- Add C to AB very slowly with vigorous stirring.
- Homogenize for 5 min under shearing agitation.

La composition est alors sous forme d’une émulsion fluide, beige moyen avec une viscosité comprise entre 8 000 et 15 000 cP.The composition is then in the form of a fluid emulsion, medium beige with a viscosity of between 8,000 and 15,000 cP.

Exemple 6 : exemple comparatif avec des compositions hors invention (HI)Example 6: comparative example with compositions outside the invention (HI)

Les produits suivants sont obtenus à partir de son et germe de riz de la même façon que pour l’exemple 1 à l’exception des étapes d’hydrolyse.The following products are obtained from rice bran and germ in the same way as for example 1 with the exception of the hydrolysis steps.

Le produit HI 1 est obtenu avec le même procédé que l’exemple 1 mais sans hydrolyse.The product HI 1 is obtained with the same process as example 1 but without hydrolysis.

Le produit obtenu, présente les caractéristiques analytiques suivantes :
- Une teneur en matière sèche de 13,4 g/L
- Une teneur en carbohydrates de 6,4 g/L (48%)
- 1,1 g/L de protéines en poids de matière sèche (8%)
- 6,3 g/L de cendres (47%)
The product obtained has the following analytical characteristics:
- A dry matter content of 13.4 g/L
- A carbohydrate content of 6.4 g/L (48%)
- 1.1 g/L of protein by weight of dry matter (8%)
- 6.3 g/L of ash (47%)

Le produit HI 2 est obtenu de la même façon que pour l’exemple 1 à l’exception de l’hydrolyse qui est réalisée avec une seule protéase.The product HI 2 is obtained in the same way as for example 1 with the exception of the hydrolysis which is carried out with a single protease.

Le produit obtenu, présente les caractéristiques analytiques suivantes :
- Une teneur en matière sèche de 13,9 g/L
- Une teneur en carbohydrates de 6 g/L (43%)
- 2,3 g/L de protéines en poids de matière sèche (16%)
- 4,8 g/L de cendres (34%).
The product obtained has the following analytical characteristics:
- A dry matter content of 13.9 g/L
- A carbohydrate content of 6 g/L (43%)
- 2.3 g/L of protein by weight of dry matter (16%)
- 4.8 g/L of ash (34%).

Le produit HI 3 est obtenu de la même façon que pour l’exemple 1 à l’exception de l’hydrolyse qui est réalisée avec une protéase et une carbohydrase.The product HI 3 is obtained in the same way as for example 1 with the exception of the hydrolysis which is carried out with a protease and a carbohydrase.

Le produit obtenu, présente les caractéristiques analytiques suivantes :
- Une teneur en matière sèche de 24,6 g/L
- Une teneur en carbohydrates de 11,3 g/L (46%)
- 3,1 g/L de protéines en poids de matière sèche (13%)
- 7,2 g/L de cendres (29%).
The product obtained has the following analytical characteristics:
- A dry matter content of 24.6 g/L
- A carbohydrate content of 11.3 g/L (46%)
- 3.1 g/L of protein by weight of dry matter (13%)
- 7.2 g/L of ash (29%).

Le produit HI 4 est obtenu de la même façon que pour l’exemple 1 à l’exception de l’hydrolyse qui est réalisée avec une carbohydrase.The product HI 4 is obtained in the same way as for example 1 with the exception of the hydrolysis which is carried out with a carbohydrase.

Le produit obtenu, présente les caractéristiques analytiques suivantes :
- Une teneur en matière sèche de 22,9 g/L
- Une teneur en carbohydrates de 11,3 g/L (50%)
- 1,4 g/L de protéines en poids de matière sèche (6%)
- 6,5 g/L de cendres (28%).
The product obtained has the following analytical characteristics:
- A dry matter content of 22.9 g/L
- A carbohydrate content of 11.3 g/L (50%)
- 1.4 g/L of protein by weight of dry matter (6%)
- 6.5 g/L of ash (28%).

Le produit HI 5 est obtenu de la même façon que pour l’exemple 1 à l’exception de l’hydrolyse qui est réalisée avec deux protéases et une carbohydrase.The product HI 5 is obtained in the same way as for example 1 with the exception of the hydrolysis which is carried out with two proteases and a carbohydrase.

Le produit obtenu, présente les caractéristiques analytiques suivantes :
- Une teneur en matière sèche de 32,9 g/L
- Une teneur en carbohydrates de 13,7 g/L (42%)
- 6 g/L de protéines en poids de matière sèche (18%)
- 6,7 g/L de cendres (20%).
The product obtained has the following analytical characteristics:
- A dry matter content of 32.9 g/L
- A carbohydrate content of 13.7 g/L (42%)
- 6 g/L of protein by weight of dry matter (18%)
- 6.7 g/L of ash (20%).

Le produit HI 6 est obtenu de la même façon que pour l’exemple 1 à l’exception de la matière première qui est de la farine de riz complet.The product HI 6 is obtained in the same way as for example 1 with the exception of the raw material which is brown rice flour.

Le produit obtenu, présente les caractéristiques analytiques suivantes :
- Une teneur en matière sèche de 10 g/L
- Une teneur en carbohydrates de 4,8 g/L (48%)
- 2,4 g/L de protéines en poids de matière sèche (24%)
- 3,9 g/L de cendres (39%).
The product obtained has the following analytical characteristics:
- A dry matter content of 10 g/L
- A carbohydrate content of 4.8 g/L (48%)
- 2.4 g/L of protein by weight of dry matter (24%)
- 3.9 g/L of ash (39%).

Le produit HI 7 est obtenu de la même façon que pour l’exemple 1 à l’exception de la matière première qui est un isolat protéique de riz.The product HI 7 is obtained in the same way as for example 1 with the exception of the starting material which is a rice protein isolate.

Le produit obtenu, présente les caractéristiques analytiques suivantes :
- Une teneur en matière sèche de 35,3 g/L
- Une teneur en carbohydrates de 0,77 g/L (2%)
- 28,7 g/L de protéines en poids de matière sèche (81%)
- 7,8 g/L de cendres (22%).
The product obtained has the following analytical characteristics:
- A dry matter content of 35.3 g/L
- A carbohydrate content of 0.77 g/L (2%)
- 28.7 g/L of protein by weight of dry matter (81%)
- 7.8 g/L of ash (22%).

Evaluation de l’effet cosmétique du principe actif selon l’inventionEvaluation of the cosmetic effect of the active ingredient according to the invention

EE ffet du principe actif selon l’invention sureffect of the active principle according to the invention on la réponse UPRthe UPR response

L’objectif de cette étude est d’évaluer la capacité du principe actif selon l’invention à maintenir une réponse UPR (Unfolded Protein Response) fonctionnelle en stimulant la synthèse d’IRE-1α (endoribonuclease inositol-requiring enzyme 1-alpha) et d’ATF6 (activating transcription factor 6).The objective of this study is to evaluate the ability of the active ingredient according to the invention to maintain a functional UPR (Unfolded Protein Response) response by stimulating the synthesis of IRE-1α (endoribonuclease inositol-requiring enzyme 1-alpha) and ATF6 (activating transcription factor 6).

La réponse UPR est une réponse adaptative initiée à la suite d’un stress du réticulum endoplasmique. Elle se met en place à partir de trois transducteurs principaux situés sur la membrane du RE :
- IRE-1α (endoribonuclease inositol-requiring enzyme 1-alpha) ;
- ATF6 (activating transcription factor 6) ;
- PERK (protein kinase RNA-like-ER kinase).
The UPR response is an adaptive response initiated as a result of endoplasmic reticulum stress. It is set up from three main transducers located on the membrane of the RE:
- IRE-1α (endoribonuclease inositol-requiring enzyme 1-alpha);
- ATF6 (activating transcription factor 6);
- PERK (protein kinase RNA-like-ER kinase).

L’activation de ces voies de signalisation vise à réduire temporairement la synthèse des protéines de novo et à augmenter les capacités de repliement et de maturation du réticulum endoplasmique.Activation of these signaling pathways aims to temporarily reduce de novo protein synthesis and increase the folding and maturation capacities of the endoplasmic reticulum.

La réponse UPR (ATF6 clivé et IRE-1α) a été évaluée par Western blot capillaire sur des fibroblastes humains issus de donneurs jeunes (≤30 ans) et âgés (≥ 60 ans) et soumis à des irradiations par des UVA.The UPR response (cleaved ATF6 and IRE-1α) was evaluated by capillary Western blot on human fibroblasts from young (≤30 years old) and old (≥60 years old) donors and subjected to UVA irradiation.

Le protocole est le suivant. A J0, les fibroblastes humains sont ensemencés et incubés à 37°C. A J1, les fibroblastes sont traités pendant 24 heures avec le principe actif selon l’invention. A J2, les fibroblastes sont irradiés par des UVA à l’aide d’un système d’irradiations Bio-sun (Vilber-Lourmat). Après irradiation, les fibroblastes sont traités de nouveau pendant 24 heures avec le principe actif selon l’invention. A J3, les extraits cellulaires sont récupérés, puis stockés à -80°C. L’expression des protéines est quantifiée grâce au système de Western Blot capillaire Simple Western™ JESS et analysée à l’aide du logiciel Compass. Les protéines totales dans chaque échantillon sont quantifiées à l’aide d’un marqueur fluorescent. Le taux de protéine d’intérêt correspond au ratio protéine intérêt / protéines totales et est exprimé en unités arbitraires (UA).The protocol is as follows. On D0, the human fibroblasts are seeded and incubated at 37°C. On D1, the fibroblasts are treated for 24 hours with the active principle according to the invention. On D2, the fibroblasts are irradiated by UVA using a Bio-sun irradiation system (Vilber-Lourmat). After irradiation, the fibroblasts are treated again for 24 hours with the active ingredient according to the invention. On D3, the cell extracts are recovered, then stored at -80°C. Protein expression is quantified using the Simple Western™ JESS Capillary Western Blot System and analyzed using Compass software. Total protein in each sample is quantified using a fluorescent marker. The rate of protein of interest corresponds to the ratio protein of interest / total proteins and is expressed in arbitrary units (AU).

Les résultats sont donnés dans le tableau ci-après.The results are given in the table below.

Taux de
IRE-1α (UA)
Rate
IRE-1α (UA)
Induction de la synthèse de IRE-1α
/ témoin irradié (%)
Induction of IRE-1α synthesis
/ control irradiated (%)
Taux ATF6 clivé
(UA)
Cleaved ATF6 rate
(AU)
Induction de la synthèse de ATF6 clivé
/ témoin irradié (%)
Induction of cleaved ATF6 synthesis
/ control irradiated (%)
Fibroblastes issus de donneurs jeunesFibroblasts from young donors Non irradiés TémoinNon-irradiated Control 2,942.94 3,413.41 Irradiés TémoinIrradiated Witness 7,527.52 4,544.54 Fibroblastes issus de donneurs âgésFibroblasts from aged donors Non irradiés TémoinUnirradiated Control 3,513.51 2,512.51 Irradiés TémoinIrradiated Witness 6,176.17 3,073.07 Irradiés + Principe Actif 0,1%Irradiated + Active Principle 0.1% 7,227.22 +17+17 3,873.87 +26+26 Irradiés + Principe Actif 0,5%Irradiated + Active Principle 0.5% 8,258.25 +34+34 4,054.05 +32+32

Testé à 0,5% sur des fibroblastes issus de donneurs âgés et soumis à des irradiations UVA, le principe actif selon l’invention induit significativement la synthèse de : IRE-1α de plus de 34% et ATF6 clivé de plus de 32%.Tested at 0.5% on fibroblasts from aged donors and subjected to UVA irradiation, the active principle according to the invention significantly induces the synthesis of: IRE-1α by more than 34% and ATF6 cleaved by more than 32%.

Le principe actif selon l’invention permet ainsi de réactiver la réponse UPR au cours du vieillissement.The active principle according to the invention thus makes it possible to reactivate the UPR response during ageing.

La seconde étude permet de comparer le principe actif selon l’invention et les produits hors invention issus de matières premières différentes du son et germe de riz ou produits par d’autres procédés de fabrication. Pour cela la capacité de ces différents produits à maintenir une réponse UPR fonctionnelle en stimulant la synthèse d’IRE-1α est évaluée. Cette étude a été réalisée sur des fibroblastes humains issus de donneurs âgés (≥ 60 ans) et soumis à des irradiations par des UVA.The second study makes it possible to compare the active ingredient according to the invention and the products outside the invention derived from raw materials other than rice bran and germ or produced by other manufacturing processes. For this, the ability of these different products to maintain a functional UPR response by stimulating the synthesis of IRE-1α is evaluated. This study was carried out on human fibroblasts from elderly donors (≥ 60 years old) and subjected to UVA irradiation.

Le protocole est similaire à celui précédemment décrit. A J0, les fibroblastes humains sont ensemencés et incubés à 37°C. A J1, les fibroblastes sont traités pendant 24 heures avec le principe actif selon l’invention ou avec les produits HI. A J2, les fibroblastes sont irradiés par des UVA à l’aide d’un système d’irradiations Bio-sun (Vilber-Lourmat). Après irradiations, les fibroblastes sont traités de nouveau pendant 24 heures avec le principe actif selon l’invention ou les produits HI. A J3, les extraits cellulaires sont récupérés, puis stockés à -80°C. L’expression des protéines est quantifiée grâce au système de Western Blot capillaire Simple Western™ JESS et analysée à l’aide du logiciel Compass. Les protéines totales dans chaque échantillon sont quantifiées à l’aide d’un marqueur fluorescent. Le taux de protéine d’intérêt correspond au ratio protéine intérêt / protéines totales et est exprimé en unités arbitraires (UA).The protocol is similar to that previously described. On D0, the human fibroblasts are seeded and incubated at 37°C. On D1, the fibroblasts are treated for 24 hours with the active principle according to the invention or with the HI products. On D2, the fibroblasts are irradiated by UVA using a Bio-sun irradiation system (Vilber-Lourmat). After irradiation, the fibroblasts are treated again for 24 hours with the active principle according to the invention or the HI products. On D3, the cell extracts are recovered, then stored at -80°C. Protein expression is quantified using the Simple Western™ JESS Capillary Western Blot System and analyzed using Compass software. Total protein in each sample is quantified using a fluorescent marker. The rate of protein of interest corresponds to the ratio protein of interest / total proteins and is expressed in arbitrary units (AU).

Les résultats sont donnés dans le tableau 7 ci-après.The results are given in Table 7 below.

Induction de la synthèse de IRE1α
/ témoin irradié (%)
Induction of IRE1α synthesis
/ control irradiated (%)
Témoin âgé irradiéIrradiated elderly witness Principe actif selon l’invention 0,5%Active ingredient according to the invention 0.5% +29+29 Produit HI 1 0,5%HI product 1 0.5% -5-5 Produit HI 3 0,5%Product HI 3 0.5% -37-37 Produit HI 4 0,5%HI product 4 0.5% -13-13 Produit HI 5 0,5%Product HI 5 0.5% +36+36 Produit HI 6 0,5%Product HI 6 0.5% -5-5 Produit HI 7 0,5%Product HI 7 0.5% -5-5

Ces résultats montrent que testés à 0,5% sur des fibroblastes issus de donneurs âgés et soumis à des irradiations UVA, seul le principe actif selon l’invention et le produit HI 5 c’est-à-dire issu du procédé impliquant deux protéases et une carbohydrase à partir de son et germe de riz induisent significativement la synthèse de IRE-1α.These results show that tested at 0.5% on fibroblasts from aged donors and subjected to UVA irradiation, only the active principle according to the invention and the product HI 5, that is to say from the process involving two proteases and a carbohydrase from rice bran and germ significantly induce IRE-1α synthesis.

Le produit HI 1, c’est-à-dire réalisé en absence d’hydrolyse enzymatique n’induit pas la synthèse de IRE-1α. Donc l’hydrolyse enzymatique est nécessaire pour obtenir les molécules agissant sur la synthèse de IRE-1α.The HI 1 product, i.e. produced in the absence of enzymatic hydrolysis, does not induce the synthesis of IRE-1α. So enzymatic hydrolysis is necessary to obtain the molecules acting on the synthesis of IRE-1α.

Le produit HI 2, c’est-à-dire réalisé en présence d’une seule protéase à partir de son et germe de riz n’a pu être utilisé pour réaliser l’étude. L’hydrolyse enzymatique en présence d’une seule protéase n’est donc pas suffisante pour obtenir le principe actif selon l’invention.The HI 2 product, i.e. produced in the presence of a single protease from rice bran and germ, could not be used to carry out the study. Enzymatic hydrolysis in the presence of a single protease is therefore not sufficient to obtain the active ingredient according to the invention.

Le produit HI 3, c’est-à-dire réalisé en présence d’une protéase et d’une carbohydrase à partir de son et germe de riz n’induit pas la synthèse de IRE-1α. Donc l’hydrolyse enzymatique doit être réalisée avec deux protéases pour obtenir les molécules agissant sur la synthèse de IRE-1α.The HI 3 product, i.e. produced in the presence of a protease and a carbohydrase from rice bran and germ, does not induce the synthesis of IRE-1α. Therefore, enzymatic hydrolysis must be carried out with two proteases to obtain the molecules acting on the synthesis of IRE-1α.

Le produit HI 4, c’est-à-dire réalisé en présence d’une carbohydrase à partir de son et germe de riz n’induit pas la synthèse de IRE-1α. Donc l’hydrolyse enzymatique doit être réalisée en présence de protéases pour obtenir les molécules agissant sur la synthèse de IRE-1α.The HI 4 product, i.e. produced in the presence of a carbohydrase from rice bran and germ, does not induce the synthesis of IRE-1α. Therefore, enzymatic hydrolysis must be carried out in the presence of proteases to obtain the molecules acting on the synthesis of IRE-1α.

Le produit HI 5, c’est-à-dire réalisé en présence de deux protéases et d’une carbohydrase à partir de son et germe de riz induit la synthèse de IRE-1α. L’hydrolyse enzymatique doit donc être réalisée en présence d’au moins deux protéases et les carbohydrates présents dans le principe actif selon l’invention ne sont donc pas les molécules agissant sur la synthèse de IRE-1α.The HI 5 product, i.e. produced in the presence of two proteases and a carbohydrase from rice bran and germ, induces the synthesis of IRE-1α. The enzymatic hydrolysis must therefore be carried out in the presence of at least two proteases and the carbohydrates present in the active principle according to the invention are therefore not the molecules acting on the synthesis of IRE-1α.

Le produit HI 6 issu de farine de riz et HI 7 issu d’un isolat protéique de riz n’induisent pas la synthèse de IRE-1α. Donc les molécules agissant sur la synthèse de IRE-1α sont spécifiques du son et du germe de riz.HI 6 from rice flour and HI 7 from rice protein isolate do not induce IRE-1α synthesis. Therefore, the molecules acting on the synthesis of IRE-1α are specific to rice bran and germ.

EE ffet du principe actif selon l’invention sur le réticulum endoplasmiqueeffect of the active principle according to the invention on the endoplasmic reticulum

L’objectif de cette étude est d’évaluer la capacité du principe actif selon l’invention à limiter le stress du réticulum endoplasmique (RE) dans des fibroblastes humains âgés suite à des irradiations par des UVA.The objective of this study is to evaluate the capacity of the active principle according to the invention to limit the stress of the endoplasmic reticulum (ER) in aged human fibroblasts following irradiation by UVA rays.

Le stress du RE a été évalué par marquage du RE avec une sonde fluorescente sur des fibroblastes humains issus âgés (≥ 60 ans) et soumis à des irradiations par des UVA.ER stress was assessed by labeling the ER with a fluorescent probe on aged human fibroblasts (≥ 60 years old) and subjected to UVA irradiation.

Le protocole est le suivant. A J0, les fibroblastes humains sont ensemencés et incubés à 37°C. A J1, les fibroblastes sont traités pendant 24 heures avec le principe actif selon l’invention. A J2, les fibroblastes sont irradiés par des UVA à l’aide d’un système d’irradiations Bio-sun (Vilber-Lourmat). Après irradiations, les fibroblastes sont traités de nouveau pendant 24 heures avec le principe actif selon l’invention. A J3, les fibroblastes sont récupérés et marqués avec la sonde ER-Tracker Blue-White DPX (Invitrogen) selon les instructions du fournisseur. La visualisation est réalisée à l’aide d’un microscope confocal LSM700 (Zeiss), couplé à un système d’analyse d’images Zen Blue (Zeiss).The protocol is as follows. On D0, the human fibroblasts are seeded and incubated at 37°C. On D1, the fibroblasts are treated for 24 hours with the active principle according to the invention. On D2, the fibroblasts are irradiated by UVA using a Bio-sun irradiation system (Vilber-Lourmat). After irradiation, the fibroblasts are treated again for 24 hours with the active principle according to the invention. On D3, the fibroblasts are recovered and labeled with the ER-Tracker Blue-White DPX probe (Invitrogen) according to the supplier's instructions. Visualization is performed using a confocal microscope LSM700 (Zeiss), coupled to a Zen Blue image analysis system (Zeiss).

Le niveau de stress du RE est proportionnel à l’intensité de la fluorescence présente dans les cellules. Une analyse quantitative des images a été réalisée à l’aide du logiciel Matlab®. L’intensité moyenne de fluorescence par cellule est exprimée en unité arbitraire (UA).The level of ER stress is proportional to the intensity of fluorescence present in the cells. Quantitative image analysis was performed using Matlab® software. The average fluorescence intensity per cell is expressed in arbitrary units (AU).

Les résultats sont donnés dans le tableau 8 ci-après.The results are given in Table 8 below.

Stress du RE
(x 103UA)
ES stress
(x 10 3 AU)
Capacité à limiter le stress du RE (%)Ability to limit ER stress (%)
Fibroblastes issus de donneurs âgés non irradiésFibroblasts from aged non-irradiated donors TémoinWitness 4040 Fibroblastes issus de donneurs âgés irradiésFibroblasts from irradiated aged donors TémoinWitness 202202 Principe actif selon l’invention 0,1%Active ingredient according to the invention 0.1% 184184 -11-11 Principe actif selon l’invention 0,5%Active ingredient according to the invention 0.5% 155155 -29-29 Principe actif selon l’invention 1,0%Active ingredient according to the invention 1.0% 148148 -33-33

Testé à 0,5% et 1,0% sur fibroblastes issus de donneurs âgés, le principe actif selon l’invention réduit respectivement de 29% et de 33% le stress du RE induit par des irradiations UVA. Le principe actif selon l’invention préserve ainsi la santé du réticulum endoplasmique au cours du vieillissement.Tested at 0.5% and 1.0% on fibroblasts from aged donors, the active principle according to the invention reduces by 29% and 33% respectively the stress of the ER induced by UVA irradiation. The active principle according to the invention thus preserves the health of the endoplasmic reticulum during ageing.

EE ffet du principe actif selon l’invention sur l’inflammationeffect of the active ingredient according to the invention on inflammation

L’objectif de cette étude est d’évaluer la capacité du principe actif selon l’invention à limiter l’inflammation suite à des irradiations UVA.The objective of this study is to evaluate the ability of the active ingredient according to the invention to limit inflammation following UVA irradiation.

Pour cette étude, les paramètres suivants ont été analysés sur des fibroblastes humains issus de donneurs âgés (≥60 ans) et soumis à des irradiations UVA :
- l’expression des interleukines IL-1α et IL-1β et de l’IL-8 a été évaluée par PCR quantitative ;
- la sécrétion d’IL-8 a été évaluée par dosage ELISA.
For this study, the following parameters were analyzed on human fibroblasts from elderly donors (≥60 years old) and subjected to UVA irradiation:
- the expression of the interleukins IL-1α and IL-1β and of IL-8 was evaluated by quantitative PCR;
- IL-8 secretion was evaluated by ELISA assay.

A. Analyse de l’expression de l’IL-1 α , de l’IL-1 β et de IL8 par les fibroblastes humains A. Analysis of the expression of IL-1α , IL-1β and IL8 by human fibroblasts

Le protocole d’étude est le suivant. A J0, les fibroblastes humains sont ensemencés et incubés à 37°C. A J1, les fibroblastes sont traités pendant 24 heures avec le principe actif selon l’invention. A J2, les fibroblastes sont irradiés par des UVA à l’aide d’un système d’irradiations Bio-sun (Vilber-Lourmat). Après irradiations, les fibroblastes sont traités de nouveau avec le principe actif selon l’invention. A J3, les fibroblastes sont récupérés et les ARN totaux extraits.The study protocol is as follows. On D0, the human fibroblasts are seeded and incubated at 37°C. On D1, the fibroblasts are treated for 24 hours with the active ingredient according to the invention. On D2, the fibroblasts are irradiated by UVA using a Bio-sun irradiation system (Vilber-Lourmat). After irradiation, the fibroblasts are treated again with the active ingredient according to the invention. On D3, the fibroblasts are recovered and the total RNA extracted.

Les ARN ont été reverse-transcrits et les ADN complémentaires obtenus ont été analysés par la technique de PCR quantitative. Les ARNm des protéines témoins de référence, ont été analysés en parallèle des ARNm de IL1A (interleukine 1α), IL1B (interleukine 1β) et CXCL8 (interleukine 8).The RNAs were reverse-transcribed and the complementary DNAs obtained were analyzed by the quantitative PCR technique. The mRNAs of the reference control proteins were analyzed in parallel with the mRNAs of IL1A (interleukin 1α), IL1B (interleukin 1β) and CXCL8 (interleukin 8).

L’incorporation de fluorescence est mesurée en continu à l’aide d’un thermocycleur. L’analyse des Ct (quantification relative) est réalisée à l’aide du logiciel.Fluorescence incorporation is measured continuously using a thermal cycler. Ct (relative quantification) analysis is performed using the software.

B.B. Analyse de la sécrétion d’IL-8 par les fibroblastes humainsAnalysis of IL-8 secretion by human fibroblasts

A J0, les fibroblastes humains sont ensemencés et incubés à 37°C. A J1, les fibroblastes sont traités pendant 24 heures avec le principe actif selon l’invention. A J2, les fibroblastes sont irradiés par des UVA à l’aide d’un système d’irradiations Bio-sun (Vilber-Lourmat). Après irradiations, les fibroblastes sont traités de nouveau avec le principe actif selon l’invention. A J4, les surnageants de culture sont récupérés et le dosage de l’IL-8 est réalisé à l’aide d’un kit ELISA (R&D Systems).On D0, the human fibroblasts are seeded and incubated at 37°C. On D1, the fibroblasts are treated for 24 hours with the active ingredient according to the invention. On D2, the fibroblasts are irradiated by UVA using a Bio-sun irradiation system (Vilber-Lourmat). After irradiation, the fibroblasts are treated again with the active principle according to the invention. On D4, the culture supernatants are recovered and the IL-8 assay is performed using an ELISA kit (R&D Systems).

Les résultats de l’étude de l’expression de l’IL-1A IL1-B et de CXCL8 sont donnés dans le tableau ci-après.The results of the study of the expression of IL-1A IL1-B and CXCL8 are given in the table below.

Expression de IL-1A (%)Expression of IL-1A (%) Capacité à limiter l’expression d’IL-1A (%)Ability to limit IL-1A expression (%) Expression de IL-1B (%)Expression of IL-1B (%) Capacité à limiter l’expression d’IL-1B (%)Ability to limit IL-1B expression (%) Expression de CXCL8 (%)Expression of CXCL8 (%) Capacité à limiter l’expression de CXCL8 (%)Ability to limit CXCL8 expression (%) Fibroblastes issus de donneurs âgés non irradiésFibroblasts from aged non-irradiated donors TémoinWitness 100100 100100 100100 Fibroblastes issus de donneurs âgés irradiésFibroblasts from irradiated aged donors TémoinWitness 457457 372372 10901090 Principe actif selon l’invention 0,1%Active ingredient according to the invention 0.1% 310310 -41-41 296296 -28-28 591591 -50-50 Principe actif selon l’invention 0,5%Active ingredient according to the invention 0.5% 249249 -58-58 240240 -49-49 382382 -72-72

Les résultats de l’étude de la sécrétion d’IL-8 sont donnés dans le tableau ci-après.The results of the IL-8 secretion study are given in the table below.

Taux d’IL-8
(pg/mg protéines)
IL-8 level
(pg/mg protein)
Capacité à limiter la sécrétion d’IL-8 (%)Ability to limit IL-8 secretion (%)
Fibroblastes issus de donneurs âgés non irradiésFibroblasts from aged non-irradiated donors TémoinWitness 19781978 Fibroblastes issus de donneur âgés irradiésFibroblasts from irradiated aged donors TémoinWitness 40724072 Principe actif selon l’invention 0,5%Active principle according to the invention 0.5% 28072807 -60-60 Principe actif selon l’invention 1,0%Active ingredient according to the invention 1.0% 24962496 -75-75

Testé à 0,5% sur fibroblastes issus de donneurs âgés et soumis à des irradiations UVA, le principe actif selon l’invention réduit significativement l’expression des gènes codant pour l’IL-1α et β et l’IL-8 de respectivement 58%, 49% et 72%. Le principe actif selon l’invention réduit également significativement la sécrétion d’IL-8 de 75%. Le principe actif selon l’invention limite ainsi l’inflammation générée par les irradiations UVA.Tested at 0.5% on fibroblasts from aged donors and subjected to UVA irradiation, the active principle according to the invention significantly reduces the expression of the genes coding for IL-1α and β and IL-8 of respectively 58%, 49% and 72%. The active principle according to the invention also significantly reduces the secretion of IL-8 by 75%. The active principle according to the invention thus limits the inflammation generated by UVA radiation.

EE ffet du principe actif selon l’invention sur la matrice extracellulaireeffect of the active principle according to the invention on the extracellular matrix

L’objectif de cette étude est d’évaluer la capacité du principe actif selon l’invention à favoriser la production d’un réseau matriciel fonctionnel.The objective of this study is to evaluate the ability of the active ingredient according to the invention to promote the production of a functional matrix network.

Pour cette étude, les paramètres suivants ont été analysés sur des fibroblastes humains issus de donneurs âgés (≥60 ans) et soumis à des irradiations UVA :
- l’expression du collagène IV (COL4A1) et de la fibronectine (FN1) a été évaluée par PCR quantitative ;
- la sécrétion de pro-métalloprotéinase (pro-MMP-1) a été évaluée par dosage ELISA ;
- la synthèse de perlécan et du réseau de collagène I a été étudiée par immunofluorescence.
For this study, the following parameters were analyzed on human fibroblasts from elderly donors (≥60 years old) and subjected to UVA irradiation:
- the expression of collagen IV (COL4A1) and fibronectin (FN1) was evaluated by quantitative PCR;
- the secretion of pro-metalloproteinase (pro-MMP-1) was evaluated by ELISA assay;
- the synthesis of perlecan and of the collagen I network was studied by immunofluorescence.

A.AT. Analyse de l’expression de COL4A1 et FN1 par les fibroblastes humainsAnalysis of the expression of COL4A1 and FN1 by human fibroblasts

Le protocole est le suivant. A J0, Les fibroblastes humains sont ensemencés et incubés à 37°C. A J1, les fibroblastes sont traités pendant 24 heures avec le principe actif selon l’invention. A J2, les fibroblastes sont irradiés par des UVA (15J/cm2) à l’aide d’un système d’irradiations Bio-sun (Vilber-Lourmat). Après irradiation, les fibroblastes sont traités de nouveau avec le principe actif selon l’invention. Ensuite, les fibroblastes sont récupérés et les ARN totaux extraits.The protocol is as follows. On D0, the human fibroblasts are seeded and incubated at 37°C. On D1, the fibroblasts are treated for 24 hours with the active ingredient according to the invention. On D2, the fibroblasts are irradiated by UVA rays (15J/cm2) using a Bio-sun irradiation system (Vilber-Lourmat). After irradiation, the fibroblasts are treated again with the active principle according to the invention. Then, the fibroblasts are recovered and the total RNAs extracted.

Les ARN ont été reverse-transcrits et les ADN complémentaires obtenus ont été analysés par la technique de PCR quantitative. Les ARNm des protéines, témoins de référence, ont été analysés en parallèle des ARNm des marqueurs étudiés. L’incorporation de fluorescence est mesurée en continu à l’aide d’un thermocycleur. L’analyse des Ct (quantification relative) est réalisée à l’aide du logiciel.The RNAs were reverse-transcribed and the complementary DNAs obtained were analyzed by the quantitative PCR technique. The mRNAs of the proteins, reference controls, were analyzed in parallel with the mRNAs of the markers studied. Fluorescence incorporation is measured continuously using a thermal cycler. Ct (relative quantification) analysis is performed using the software.

B.B. Etude de la synthèse de perlécan et du réseau de collagène I par les fibroblastes humainsStudy of the synthesis of perlecan and of the collagen I network by human fibroblasts

A J0, les fibroblastes humains sont ensemencés et incubés à 37°C. A J1, les fibroblastes sont traités pendant 24 heures avec le principe actif selon l’invention. A J2, les fibroblastes sont irradiés par des UVA à l’aide d’un système d’irradiations Bio-sun (Vilber-Lourmat). Après irradiation, les fibroblastes sont traités de nouveau avec le principe actif selon l’invention. A J4, la synthèse de perlécan et la formation du réseau de collagène I sont analysées par immunofluorescence.On D0, the human fibroblasts are seeded and incubated at 37°C. On D1, the fibroblasts are treated for 24 hours with the active ingredient according to the invention. On D2, the fibroblasts are irradiated by UVA using a Bio-sun irradiation system (Vilber-Lourmat). After irradiation, the fibroblasts are treated again with the active ingredient according to the invention. On D4, the synthesis of perlecan and the formation of the collagen I network are analyzed by immunofluorescence.

La visualisation est réalisée à l’aide d’un microscope couplé à une caméra et à un système d’analyse d’images. La synthèse de perlécan ou la formation du réseau de collagène I sont proportionnelles à l’intensité de fluorescence présente sur les images. Une analyse quantitative des images a été réalisée à l’aide du logiciel Matlab®. Les résultats sont exprimés en unités arbitraires (UA).Visualization is carried out using a microscope coupled to a camera and an image analysis system. The synthesis of perlecan or the formation of the collagen I network is proportional to the intensity of fluorescence present on the images. Quantitative image analysis was performed using Matlab® software. The results are expressed in arbitrary units (AU).

C.vs. Analyse de la sécrétion de pro-MMPAnalysis of pro-MMP secretion -- 1 par les fibroblastes humains1 by human fibroblasts

A J0, les fibroblastes humains sont ensemencés et incubés à 37°C. A J1, les fibroblastes sont traités pendant 24 heures avec le principe actif selon l’invention. A J2, les fibroblastes sont irradiés par des UVA à l’aide d’un système d’irradiations Bio-sun (Vilber-Lourmat). Après irradiation, les fibroblastes sont traités de nouveau avec le principe actif selon l’invention. A J4, les surnageants de culture sont récupérés et le dosage de pro-MMP-1 est réalisé à l’aide d’un kit ELISA.On D0, the human fibroblasts are seeded and incubated at 37°C. On D1, the fibroblasts are treated for 24 hours with the active ingredient according to the invention. On D2, the fibroblasts are irradiated by UVA using a Bio-sun irradiation system (Vilber-Lourmat). After irradiation, the fibroblasts are treated again with the active ingredient according to the invention. On D4, the culture supernatants are recovered and the pro-MMP-1 assay is carried out using an ELISA kit.

Les résultats de l’étude de l’expression de COL4A1 et de FN1 sont donnés dans le tableau ci-après.The results of the study of the expression of COL4A1 and FN1 are given in the table below.

Expression de COL4A1 (%)Expression of COL4A1 (%) Capacité à maintenir l’expression de COL4A1(%)Ability to maintain COL4A1 expression (%) Expression de FN1 (%)Expression of FN1 (%) Capacité à maintenir l’expression de FN1 (%)Ability to maintain FN1 expression (%) Fibroblastes issus de donneurs âgés non irradiésFibroblasts from aged non-irradiated donors TémoinWitness 100100 100100 Fibroblastes issus de donneurs âgés non irradiésFibroblasts from aged non-irradiated donors TémoinWitness 4545 3030 Principe actif selon l’invention 0,1%Active ingredient according to the invention 0.1% 6262 +31+31 4747 +24+24 Principe actif selon l’invention 0,5%Active ingredient according to the invention 0.5% 6666 +38+38 6161 +44+44

Testé à 0,5% sur fibroblastes issus de donneurs âgés et soumis à des irradiations UVA, le principe actif selon l’invention restaure significativement l’expression du collagène IV (COL4A1) de plus de 38% et la fibronectine (FN1) de plus de 44%.Tested at 0.5% on fibroblasts from aged donors and subjected to UVA irradiation, the active principle according to the invention significantly restores the expression of collagen IV (COL4A1) by more than 38% and fibronectin (FN1) by more by 44%.

Les résultats de l’étude de la synthèse du perlécan et de la formation du réseau de collagène I sont donnés dans les tableaux 12 et 13 ci-après.The results of the study of the synthesis of perlecan and the formation of the collagen I network are given in tables 12 and 13 below.

Synthèse de perlécan
(x 103UA)
Synthesis of perlecan
(x 10 3 AU)
Capacité à stimuler la synthèse de perlécan (%)Ability to stimulate perlecan synthesis (%)
Fibroblastes issus de donneurs âgés non irradiésFibroblasts from aged non-irradiated donors TémoinWitness 47164716 Fibroblastes issus de donneurs âgés irradiésFibroblasts from irradiated aged donors TémoinWitness 20082008 Principe actif selon l’invention 0,1%Active ingredient according to the invention 0.1% 27752775 +38+38 Principe actif selon l’invention 0,5%Active principle according to the invention 0.5% 28452845 +42+42

Synthèse du réseau de collagène I
(x 104UA)
Synthesis of collagen network I
(x 10 4 AU)
Capacité à stimuler la synthèse du réseau de collagène I (%)Ability to stimulate the synthesis of collagen I network (%)
Fibroblastes issus de donneurs âgés non irradiésFibroblasts from aged non-irradiated donors TémoinWitness 28052805 Fibroblastes issus de donneurs âgés irradiésFibroblasts from irradiated aged donors TémoinWitness 12521252 Principe actif selon l’invention 0,1%Active ingredient according to the invention 0.1% 17181718 +37+37

Les résultats de l’étude de la sécrétion de pro-MMP-1 sont donnés dans le tableau 14.The results of the pro-MMP-1 secretion study are given in Table 14.

Taux de pro-MMP-1
(ng/mg protéines)
Pro-MMP-1 level
(ng/mg protein)
Capacité à limiter la sécrétion de
pro-MMP-1 (%)
Ability to limit the secretion of
pro-MMP-1 (%)
Fibroblastes issus de donneurs âgés non irradiésFibroblasts from aged non-irradiated donors TémoinWitness 100100 Fibroblastes issus de donneurs âgés irradiésFibroblasts from irradiated aged donors TémoinWitness 833833 Principe actif selon l’invention 0,5%Active principle according to the invention 0.5% 632632 -27-27 Principe actif selon l’invention 1,0%Active ingredient according to the invention 1.0% 4747 -48-48

Le principe actif selon l’invention augmente également de manière significative la production de perlécan (+42%) et la formation du réseau de collagène I (+37%) et limite la sécrétion de pro-MMP-1 (-48%).The active ingredient according to the invention also significantly increases the production of perlecan (+42%) and the formation of the collagen I network (+37%) and limits the secretion of pro-MMP-1 (-48%).

Le principe actif selon l’invention préserve ainsi le derme des effets délétères du vieillissement.The active principle according to the invention thus preserves the dermis from the deleterious effects of ageing.

EE ffet du principe actif selon l’invention sur l’éclat du teinteffect of the active principle according to the invention on the radiance of the complexion

L'objectif de cette étude est d’évaluer in vivo, en comparaison à un placebo, l’effet du principe actif selon l’invention formulé à 2,5% en émulsion, sur l’éclat du teint de la peau chez des volontaires asiatiques.The objective of this study is to evaluate in vivo, in comparison with a placebo, the effect of the active principle according to the invention formulated at 2.5% in emulsion, on the radiance of the complexion of the skin in volunteers. Asians.

Le panel est composé de 65 volontaires sains, de sexe féminin, âgés de 49 à 61 ans (âge moyen 54 ± 3ans), photoexposés et présentant un stade de rides compris entre 3 et 5. Cette étude a été réalisée sur deux groupes de volontaires l’un ayant appliqué le principe actif selon l’invention et l’autre, le placebo en visage entier.The panel is made up of 65 healthy volunteers, female, aged 49 to 61 (average age 54 ± 3 years), photoexposed and presenting a wrinkle stage between 3 and 5. This study was carried out on two groups of volunteers one having applied the active principle according to the invention and the other, the placebo on the entire face.

L’éclat du teint a été évalué avant et après 28 et 56 jours d’applications biquotidiennes.The radiance of the complexion was evaluated before and after 28 and 56 days of twice-daily applications.

Les résultats correspondant à l’effet du principe actif selon l’invention sur l’éclat du teint évalué par un dermatologue sont présentés dans le tableau 15The results corresponding to the effect of the active principle according to the invention on the radiance of the complexion evaluated by a dermatologist are presented in table 15

Variation / J0 (%)Variation / D0 (%) Variation / Placebo (%)Change/Placebo (%) J28D28 PlaceboPlacebo +9+9 Principe actif selon l’inventionActive principle according to the invention +37+37 +27+27 J56J56 PlaceboPlacebo +22+22 Principe actif selon l’inventionActive principle according to the invention +54+54 +32+32

Ainsi, dans les conditions de cette étude, après 28 et 56 jours d'applications biquotidiennes et en comparaison au placebo, le principe actif selon l’invention formulé à 2,5% en émulsion améliore significativement l’éclat du teint de 27%. Cet effet se poursuit et s’intensifie après 56 jours de traitement pour atteindre une amélioration significative de 32% de l’éclat du teint. Le résultat a été observé chez 91% des volontaires ayant utilisé le principe actif selon l’invention.Thus, under the conditions of this study, after 28 and 56 days of twice-daily applications and in comparison with the placebo, the active principle according to the invention formulated at 2.5% in emulsion significantly improves the radiance of the complexion by 27%. This effect continues and intensifies after 56 days of treatment to achieve a significant improvement of 32% in the radiance of the complexion. The result was observed in 91% of the volunteers who used the active principle according to the invention.

Les résultats correspondant à l’effet du principe actif selon l’invention sur la brillance de la peau mesurée à l’aide d’un Skin-glossymeter sont présentés dans le tableau 16The results corresponding to the effect of the active principle according to the invention on the shine of the skin measured using a Skin-glossymeter are presented in table 16

Variation / J0 (%)Variation / D0 (%) Variation / Placebo (%)Change/Placebo (%) J28D28 PlaceboPlacebo +4+4 Principe actif selon l’inventionActive principle according to the invention +8+8 +4+4 J56J56 PlaceboPlacebo +4+4 Principe actif selon l’inventionActive principle according to the invention +15+15 +10+10

Après 28 jours d'applications biquotidiennes et en comparaison au placebo, le principe actif selon l’invention formulé à 2,5% en émulsion améliore significativement la brillance de la peau mesurée à l’aide d’un skin-glossymeter de 4%. Cet effet se prolonge et s’intensifie après 56 jours de traitement, où une amélioration significative de 10% est observée. Le résultat a été observé chez 97% des sujets du groupe ayant testé le principe actif selon l’invention.After 28 days of twice-daily applications and in comparison with the placebo, the active principle according to the invention formulated at 2.5% in emulsion significantly improves the shine of the skin measured using a skin-glossymeter by 4%. This effect is prolonged and intensified after 56 days of treatment, where a significant improvement of 10% is observed. The result was observed in 97% of the subjects of the group having tested the active principle according to the invention.

Dans les conditions de cette étude, après 56 jours d'applications biquotidiennes et en comparaison au placebo, le principe actif selon l’invention formulé à 2,5% en émulsion améliore donc significativement l’éclat du teint des peaux asiatiques.Under the conditions of this study, after 56 days of twice-daily applications and in comparison with the placebo, the active principle according to the invention formulated at 2.5% in emulsion therefore significantly improves the radiance of the complexion of Asian skin.

Effet du principe actif selon l’invention sur la qualité de la matrice dermiqueEffect of the active principle according to the invention on the quality of the dermal matrix

L'objectif de cette étude est d’évaluerin vivo, l’effet du principe actif selon l’invention formulé à 2,5% en émulsion, sur la qualité de la matrice dermique, en comparaison au placebo, chez des volontaires caucasiens.The objective of this study is to evaluate in vivo , the effect of the active principle according to the invention formulated at 2.5% in emulsion, on the quality of the dermal matrix, in comparison with the placebo, in Caucasian volunteers.

Le panel est composé de 18 volontaires sains, de sexe féminin, âgés de 60 à 78 ans (âge moyen 69 ± 4 ans), photoexposés et présentant une matrice dermique altérée au niveau du visage. Cette étude a été réalisée sur des volontaires ayant appliqué le principe actif selon l’invention et le placebo en hémi-visage, de façon biquotidienne pendant 56 jours.The panel is composed of 18 healthy volunteers, female, aged 60 to 78 years (mean age 69 ± 4 years), photoexposed and presenting an altered dermal matrix on the face. This study was carried out on volunteers who had applied the active principle according to the invention and the placebo on the half-face, twice daily for 56 days.

L’état du derme a été étudié au niveau des joues par LC-OCT (Damae Medical, France), avant et après 56 jours d’applications biquotidiennes. Cet appareil fournit des images qui révèlent en temps réel et de manière non invasive une organisation structurelle globale des tissus cutanés vivants à l’échelle cellulaire. A partir des acquisitions 3D en face, un sous volume de 70 images consécutives à partir de la Jonction dermo-épidermique (JDE) a été sélectionné et analysé par la suite.The state of the dermis was studied in the cheeks by LC-OCT (Damae Medical, France), before and after 56 days of twice-daily applications. This device provides images that reveal in real time and non-invasively a global structural organization of living skin tissues at the cellular level. From the 3D acquisitions in front, a sub-volume of 70 consecutive images from the dermal-epidermal junction (DEJ) was selected and subsequently analyzed.

Au préalable, une étude de modélisation a été mise en place afin d’appréhender l’évolution de la qualité de la matrice dermique au cours du vieillissement et du photovieillissement. Cette modélisation a permis d’établir statistiquement le volume de derme impacté chez les sujets âgés photoexposés.Beforehand, a modeling study was set up to understand the evolution of the quality of the dermal matrix during aging and photoaging. This modeling made it possible to establish statistically the volume of dermis impacted in photoexposed elderly subjects.

A.AT. Etude de l’impact du vieillissement et de la photoexposition sur la qualité de la matrice dermiqueStudy of the impact of aging and photoexposure on the quality of the dermal matrix

Cette étude a été réalisée sur 3 groupes de volontaires (jeunes, âgés non photoexposés, âgés photoexposés). Un modèle de réseaux de neurones convolutifs a été développé pour prédire le score de qualité du derme à partir des images sélectionnées. Ces scores de qualité de la matrice ont été analysés pour chacun des 3 groupes sur les différentes couches du derme.This study was carried out on 3 groups of volunteers (young, elderly not photoexposed, elderly photoexposed). A convolutional neural network model was developed to predict the dermis quality score from the selected images. These matrix quality scores were analyzed for each of the 3 groups on the different layers of the dermis.

La comparaison du stade moyen de qualité de la matrice entre les 3 groupes est présentée le tableau 17.The comparison of the average quality stage of the matrix between the 3 groups is presented in Table 17.

Score moyenAverage score Variation / Groupe A (%)Variation / Group A (%) Variation / Groupe B (%)Variation / Group B (%) Groupe A
Sujets jeunes
Group A
Young subjects
2,622.62
Groupe B
Sujets âgés non photoexposés
Group B
Elderly subjects not photoexposed
2,162.16 -18-18
Groupe C
Sujets âgés photoexposés
Group C
Photoexposed aged subjects
1,801.80 -17-17

Cette étude montre que le groupe âgé non photoexposé présente une diminution significative de 18% de la qualité de la matrice dermique par rapport au groupe jeune.This study shows that the non-photoexposed elderly group presents a significant decrease of 18% in the quality of the dermal matrix compared to the young group.

De plus, le groupe âgé photoexposé présente une diminution significative de 17% de la qualité de la matrice par rapport au groupe âgé non photoexposé. Ces données confirment ainsi l’impact du vieillissement chronologique et celui du photovieillissement sur la qualité de la matrice dermique.In addition, the photoexposed elderly group showed a significant decrease of 17% in matrix quality compared to the non-photoexposed elderly group. These data thus confirm the impact of chronological aging and that of photoaging on the quality of the dermal matrix.

B.B. Etude du niveau d’altération de la matrice dermique chez les sujets âgés photoexposés.Study of the level of alteration of the dermal matrix in photoexposed elderly subjects.

Le but de cette seconde étape de la modélisation a été de déterminer statistiquement chez les sujets âgés photoexposés, une zone d’altération au sein des 70 microns afin d’observer avec précision le volume impacté par le photovieillissement.The purpose of this second stage of modeling was to statistically determine in photoexposed elderly subjects, an alteration zone within 70 microns in order to accurately observe the volume impacted by photoaging.

La délimitation entre la zone altérée et non altérée a été obtenue en appliquant la méthode par fenêtre glissante sur chaque profil de la matrice dermique. Cela consiste à comparer statistiquement une fenêtre fixe de scores composée des 10 dernières couches par rapport à une fenêtre glissante démarrant à la JDE (profondeur 0) et glissant tous les microns. Le volume de la fenêtre glissante est considéré altéré tant que la différence avec celui de la fenêtre fixe est significative.The delimitation between the altered and unaltered zone was obtained by applying the sliding window method to each profile of the dermal matrix. This consists of statistically comparing a fixed window of scores made up of the last 10 layers with a sliding window starting at the JDE (depth 0) and sliding every micron. The volume of the sliding window is considered altered as long as the difference with that of the fixed window is significant.

Les résultats de cette analyse sont présentés dans le tableau 16The results of this analysis are presented in Table 16

Variation / J0 (%)Variation / D0 (%) Variation / Placebo (%)Change/Placebo (%) PlaceboPlacebo 00 Principe actif selon l’inventionActive principle according to the invention 2020 +20+20

Cette analyse a mis en évidence un volume moyen d’épaisseur de 53 µm sous la JDE où le derme est significativement plus altéré. L’effet du principe actif selon l’invention est donc testé sur cette épaisseur de 50 µm.This analysis revealed an average thickness volume of 53 µm under the JDE where the dermis is significantly more altered. The effect of the active principle according to the invention is therefore tested on this thickness of 50 μm.

EffetEffect du principe actif selon l’inventionof the active ingredient according to the invention sur la qualité de la matrice dermique sur panel caucasienon the quality of the dermal matrix on a Caucasian panel

Un résumé des résultats correspondant à l’effet du principe actif selon l’invention, sur la qualité de la matrice dermique mesurée par LC-OCT, est présenté sur la Figure 1.A summary of the results corresponding to the effect of the active principle according to the invention, on the quality of the dermal matrix measured by LC-OCT, is presented in Figure 1.

L’illustration présente l’aspect de la matrice dermique du volontaire, avant et après 56 jours d’application biquotidienne du principe actif selon l’invention, à une profondeur de 20 µm sous la JDE est présenté en (J0, avant traitement) et (J56, après 56 jours de traitement).The illustration shows the appearance of the dermal matrix of the volunteer, before and after 56 days of twice-daily application of the active principle according to the invention, at a depth of 20 μm under the JDE is presented in (D0, before treatment) and (D56, after 56 days of treatment).

Après 56 jours d’application biquotidienne, le principe actif selon l’invention formulé à 2,5%, améliore significativement la qualité du derme des volontaires caucasiens de 20% en comparaison au placebo.After 56 days of twice-daily application, the active principle according to the invention, formulated at 2.5%, significantly improves the quality of the dermis of Caucasian volunteers by 20% in comparison with the placebo.

Une amélioration a été observée chez l’ensemble des volontaires. Le derme ainsi renforcé, limite le relâchement de la peau.An improvement was observed in all volunteers. The dermis thus reinforced, limits the slackening of the skin.

Effets anti-ridesAnti-wrinkle effects du principe actif selon l’inventionof the active ingredient according to the invention

L'objectif de cette étude est d’évaluer in vivo, l’effet anti-rides du principe actif selon l’invention formulé à 2,5% en émulsion, en comparaison à un placebo, chez des volontaires caucasiens et asiatiques dont le panel est identique à celui précédemment décrit pour l’évaluation du principe actif sur la qualité de la matrice dermique.The objective of this study is to evaluate in vivo, the anti-wrinkle effect of the active principle according to the invention formulated at 2.5% in emulsion, in comparison with a placebo, in Caucasian and Asian volunteers whose panel is identical to that previously described for the evaluation of the active ingredient on the quality of the dermal matrix.

A.AT. Etude par scorage visuel sur photographies numériques sur panel caucasienStudy by visual scoring on digital photographs on a Caucasian panel

Un résumé des résultats correspondant à l’effet du principe actif selon l’invention sur l’évolution du stade de rides évalué sur la zone de la patte d’oie par scorage visuel sur photographies numériques, en comparaison au placebo, est présenté dans le tableau 17 et la .A summary of the results corresponding to the effect of the active principle according to the invention on the evolution of the stage of wrinkles evaluated on the crow's feet area by visual scoring on digital photographs, in comparison with the placebo, is presented in the table 17 and the .

Variation / J0 (%)Variation / D0 (%) Variation / Placebo (%)Change/Placebo (%) PlaceboPlacebo +3+3 Principe actif selon l’inventionActive principle according to the invention -9-9 -12-12

Dans les conditions de cette étude, après 56 jours d'application biquotidienne en hémi-visage et en comparaison au placebo, le principe actif selon l’invention formulé à 2,5% en émulsion diminue significativement le stade de rides de la patte d’oie des volontaires caucasiens de 12%.Under the conditions of this study, after 56 days of twice-daily application on the half-face and in comparison with the placebo, the active principle according to the invention formulated at 2.5% in emulsion significantly reduces the stage of wrinkles on the paws of goose of 12% Caucasian volunteers.

Ce résultat a été observé chez 67% des volontaires.This result was observed in 67% of the volunteers.

B.B. Etude par scorage visuel sur photographies numériques sur panel asiatiqueStudy by visual scoring on digital photographs on an Asian panel

Un résumé des résultats correspondant à l’effet du principe actif selon l’invention sur l’évolution du stade de rides évalué sur la zone du sillon naso-génien par scorage visuel sur photographies numériques, en comparaison au placebo, est présenté dans le tableau 18 et le tableau 19A summary of the results corresponding to the effect of the active principle according to the invention on the evolution of the stage of wrinkles evaluated on the area of the nasolabial fold by visual scoring on digital photographs, in comparison with the placebo, is presented in the table 18 and Table 19

Variation / J0 (%)Variation / D0 (%) Variation / Placebo (%)Change/Placebo (%) J28D28 PlaceboPlacebo -4-4 Principe actif selon l’inventionActive principle according to the invention -10-10 -6-6 J56J56 PlaceboPlacebo -5-5 Principe actif selon l’inventionActive principle according to the invention -14-14 -9-9

Pas d’améliorationNo improvement AméliorationImprovement J28D28 PlaceboPlacebo 8888 1212 Principe actif selon l’inventionActive principle according to the invention 6161 3939 J56J56 PlaceboPlacebo 7575 2525 Principe actif selon l’inventionActive principle according to the invention 4242 5858

Dans les conditions de cette étude, dès 28 jours d'application biquotidienne sur l’ensemble du visage des volontaires asiatiques, en comparaison au placebo, le principe actif selon l’invention formulé à 2,5% en émulsion diminue significativement le stade de rides du sillon naso-génien de 6%.Under the conditions of this study, from 28 days of twice-daily application to the entire face of Asian volunteers, in comparison with the placebo, the active principle according to the invention formulated at 2.5% in emulsion significantly reduces the stage of wrinkles of the nasolabial fold by 6%.

Cet effet se prolonge après 56 jours de traitement pour atteindre une diminution significative de 9%. Ce résultat a été observé chez 67% des volontaires.This effect continues after 56 days of treatment to reach a significant reduction of 9%. This result was observed in 67% of the volunteers.

Claims (14)

Principe actif cosmétique comprenant au moins un extrait d’Oryza sativa, caractérisé en ce que ledit extrait est obtenu à partir de son et de germe d’Oryza sativa.Cosmetic active principle comprising at least one extract of Oryza sativa , characterized in that the said extract is obtained from bran and germ of Oryza sativa . Principe actif cosmétique selon la revendication précédente, caractérisé en ce que ledit extrait comprend entre 12% et 36% de peptides en poids de matières sèches de l’extrait.Cosmetic active principle according to the preceding claim, characterized in that the said extract comprises between 12% and 36% of peptides by weight of dry matter of the extract. Principe actif cosmétique selon la revendication précédente, caractérisé en ce que lesdits peptides ont une masse molaire inférieure à 2000 Da.Cosmetic active principle according to the preceding claim, characterized in that the said peptides have a molar mass of less than 2000 Da. Principe actif cosmétique selon la revendication précédente, caractérisé en ce que lesdits peptides ont une masse molaire comprise entre 500 et 1100 Da.Cosmetic active principle according to the preceding claim, characterized in that the said peptides have a molar mass of between 500 and 1100 Da. Principe actif cosmétique selon la revendication précédente, caractérisé en ce que les peptides présents dans l’extrait comprennent entre 5 et 10 acides aminés.Cosmetic active principle according to the preceding claim, characterized in that the peptides present in the extract comprise between 5 and 10 amino acids. Principe actif cosmétique selon la revendication précédente, caractérisé en ce que lesdits peptides comprennent majoritairement la glycine, la glutamine, la leucine et la valine.Cosmetic active principle according to the preceding claim, characterized in that the said peptides mainly comprise glycine, glutamine, leucine and valine. Principe actif selon l’une des revendications précédentes, caractérisé en ce que l’extrait est un hydrolysat.Active principle according to one of the preceding claims, characterized in that the extract is a hydrolyzate. Principe actif selon l’une des revendications précédentes, caractérisé en ce que l’extrait est un hydrolysat enzymatique.Active principle according to one of the preceding claims, characterized in that the extract is an enzymatic hydrolyzate. Principe actif cosmétique selon l’une des revendications précédentes, caractérisé en ce que ledit extrait est susceptible d’être obtenu par un procédé d’extraction comprenant au moins deux hydrolyses enzymatiques de son et de germe d’Oryza sativa.Cosmetic active principle according to one of the preceding claims, characterized in that the said extract is capable of being obtained by an extraction process comprising at least two enzymatic hydrolyses of bran and Oryza sativa germ. Principe actif cosmétique selon l’une des précédentes revendications, caractérisé en ce qu’il se présente sous forme liquide ou sous forme solide.Cosmetic active principle according to one of the preceding claims, characterized in that it is in liquid form or in solid form. Composition cosmétique pour une application topique comprenant au moins un principe actif selon l’une des revendications précédentes et un milieu physiologiquement acceptable.Cosmetic composition for topical application comprising at least one active principle according to one of the preceding claims and a physiologically acceptable medium. Composition cosmétique selon la revendication précédente, dans laquelle le principe actif représente au moins 0,5% en poids du poids total de la composition.Cosmetic composition according to the preceding claim, in which the active principle represents at least 0.5% by weight of the total weight of the composition. Utilisation cosmétique d’un principe actif selon l’une des revendications 1 à 10 ou d’une composition cosmétique selon l’une des revendications 11 ou 12, pour un effet anti-âge.Cosmetic use of an active principle according to one of Claims 1 to 10 or of a cosmetic composition according to one of Claims 11 or 12, for an anti-aging effect. Utilisation cosmétique selon la revendication précédente pour un effet anti-rides et/ou pour améliorer l’éclat du teint.
Cosmetic use according to the preceding claim for an anti-wrinkle effect and/or for improving the radiance of the complexion.
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