FR3036956A1

FR3036956A1 - Methode de stimulation de la synthese de l'acide hyaluronique

Info

Publication number: FR3036956A1
Application number: FR1555116A
Authority: FR
Inventors: Bertrand Thomas; Mathilde Thomas; David Sinclair
Original assignee: Caudalie Ip Ltd; Harvard University
Current assignee: Caudalie Group Ltd; Harvard University
Priority date: 2015-06-05
Filing date: 2015-06-05
Publication date: 2016-12-09
Anticipated expiration: 2035-06-05
Also published as: FR3036956B1

Abstract

Compositions permettant la stimulation de la synthèse de l'acide hyaluronique via une augmentation de l'expression de has-2 et leur utilisation dans le traitement des affections liées à une diminution de la synthèse de l'acide hyaluronique.

Description

1 METHODE DE STIMULATION DE LA SYNTHESE DE L'ACIDE HYALURONIQUE La présente invention se rapporte à un nouveau procédé de stimulation de la synthèse d'acide hyaluronique, à des compositions stimulant la synthèse d'acide hyaluronique et à leur utilisation en cosmétologie, en médecine humaine ou vétérinaire, ainsi que dans le domaine alimentaire. L'acide hyaluronique est un polysaccharide naturel ubiquitaire qui est formé d'unités disaccharidiques répétitives d'acide D-glucuronique et de N-acétyl-D-glucosamine, liées entre-elles par des liaisons glycosidiques alternées [3-1,4 et p-1,3. Il est réparti largement dans divers tissus du corps, comme les tissus conjonctifs, épithéliaux et nerveux. Il est donc adapté aux applications biomédicales visant ces tissus et est par exemple utilisé pour traiter l'arthrose du genou. L'acide hyaluronique est souvent Utilisé sous forme d'injections intra-articulaires, car il protégerait les articulations en augmentant la viscosité du liquide synovial et en rendant le cartilage plus élastique. L'acide hyaluronique est naturellement présent dans la peau où il joue un rôle important dans l'hydratation et dans les propriétés biomécaniques de la peau. L'acide hyaluronique diminue cependant en quantité et en qualité avec l'âge, entraînant un dessèchement de la peau et une diminution de ses propriétés biomécaniques donc l'apparition de rides. L'acide hyaluronique est métaboliquement extrêmement actif. La dégradation de l'acide hyaluronique est catalysée en premier lieu par des hyaluronidases. Par ailleurs, l'acide hyaluronique polymérique peut être dégradé de manière non-enzymatique par les radicaux libres.

3036956 2 Les enzymes responsables de la synthèse de l'acide hyaluronique sont les hyaluronane synthases HAS-1, HAS-2 et HAS-3. L'HAS-2 semble jouer un rôle primordial au cours du développement puisque la délétion du gène has-2 chez la souris est létale à mi-gestation en raison de nombreuses 5 malformations cardiovasculaires (Camenisch TD. et al., J. Clin. Invest., 2000, 106(3):349-60). L'acide hyaluronique est largement utilisé en dermatologie et en dermoesthétique pour traiter les signes du vieillissement. Il est injecté dans le derme pour combler les rides comme décrit dans le document 10 Kogan, G. et al. (Biotechno. Letter, 2007, 29 :17-25). Il présente l'avantage d'être résorbable en cas de mauvaise injection et sans effet secondaire, même en cas de traitement sur plusieurs années. Le traitement nécessite des injections répétées à intervalles réguliers, généralement de 6 à 12 mois, afin de maintenir une action de 15 comblement. Le resvératrol (3, 5, 4'-trihydroxystilbène) existe sous deux formes isomères, les formes cis et trans, et se présente sous forme monomère, ou comme oligomère renfermant plusieurs motifs monomères. L'étude des propriétés du resvératrol a permis de mettre en évidence de 20 multiples activités biologiques d'intérêt. Ainsi, le resvératrol est un puissant antioxydant et un agent anti-inflammatoire et présente des effets cardiovasculaires et anti cancérigènes. L'une de ses actions les plus prometteuses est son action anti vieillissement de par sa capacité à augmenter l'activité des sirtuines qui sont des gènes de longévité 25 capables de prolonger la durée de vie des cellules et des organismes (Sinclair D. et al., Nature, 2003, 425:191-196; Steegborn C. et al., PLoS One, 2012, 7(11) ; Wood J.G. et al. Nature 430: 686-689).

3036956 3 Les études menées par la demanderesse ont démontré que le resvératrol extrait de sarments de vigne intensifie naturellement la fermeté et la jeunesse de la peau. Du resvératrol issu de sarments de vigne, suractivé par alkylation fait 5 l'objet de la demande internationale WO 9903816. Dans cette demande, les inventeurs décrivent des méthodes d'extraction conduisant à des extraits enrichis en resvératrol monomère et/ou oligomère, utilisant des groupements protecteurs des fonctions phénoliques, plus particulièrement des groupements ester, permettant de conférer une 10 stabilité à l'air et à la lumière au resvératrol monomère et oligomère et de les rendre liposolubles. Ces groupements protecteurs peuvent être éliminés dans des conditions déterminées, ce qui permet d'exploiter les propriétés du resvératrol de façon contrôlée. La demande internationale W02009/063440 concerne notamment le 15 resvératrol-Oleyl, resvératrol alkylé stabilisé par l'adjonction d'une chaîne d'acides gras capable de contrer la formation de molécules glyquées. Le resvératrol-Oleyl a non seulement un effet protecteur contre le stress carbonylé (un type de modification de protéines qui intervient pendant le vieillissement) mais présente également une biodisponibilité 20 cutanée améliorée grâce à sa stabilisation et sa solubilisation par l'acide oléique. A ce jour, différents travaux ont été rapportés concernant des associations de resvératrol et d'acide hyaluronique. La demande internationale W02014210308 décrit l'utilisation de 25 resvératrol en association avec de l'acide hyaluronique de haut poids moléculaire pour la cicatrisation de plaies. La demande internationale W02012116391 décrit une formulation cosmétique ou pharmaceutique comprenant un polymère réticulé de 3036956 4 hyaluronate et un ou plusieurs composés sélectionnés dans un groupe comprenant notamment le resvératrol ou l'un de ses dérivés. Ces compositions stimulent la formation du collagène dans le derme et régulent le turnover cellulaire. Elles peuvent être utilisées contre les 5 dommages oxydatifs du derme et les problèmes de pigmentation. La demande US2014363502 concerne des compositions contenant du resvératrol et leur utilisation pour moduler, de manière plus significative que le resvératrol seul, l'expression de certains gènes impliqués notamment dans le vieillissement. Elle décrit notamment une 10 combinaison de resvératrol et d'acide hyaluronique. Selon ce document, l'effet plus significatif des compositions selon l'invention serait imputé à une meilleure stabilité du resvératrol combiné comparé au resvératrol seul. Ces compositions peuvent être utiles dans le traitement et la prévention des cancers, et les maladies associées à l'âge, notamment la 15 dégénérescence maculaire. Malgré l'existence de nombreuses compositions cosmétiques et pharmaceutiques contenant du resvératrol seul ou en association avec de l'acide hyaluronique, il reste néanmoins un besoin de disposer de compositions aptes à stimuler la production d'acide hyaluronique en vue 20 de restaurer ou de maintenir les propriétés biologiques et biomécaniques des tissus et présentant des propriétés améliorées pour le traitement des dysfonctionnements liés à un déficit de la synthèse d'acide hyaluronique, en particulier pour le traitement et la protections des tissus contenant de l'acide hyaluronique (peau, cartilage..), encore plus particulièrement pour 25 le traitement, le ralentissement et la prévention du vieillissement cutané. Or les inventeurs ont découvert un lien surprenant entre le resvératrol et la synthèse d'acide hyaluronique. En effet, les inventeurs ont démontré pour la première fois un effet du resvératrol sur la production d'acide hyaluronique dans une cellule ou un tissu de mammifère. De plus, ils ont 3036956 5 montré qu'il existait un effet synergique entre le resvératrol et l'acide hyaluronique sur la synthèse de l'acide hyaluronique. Ainsi, la présente invention a pour objet l'utilisation d'une composition comprenant une quantité efficace de resvératrol ou de ses analogues et 5 de ses dérivés pour stimuler la synthèse de l'acide hyaluronique. Plus précisément elle concerne l'utilisation d'une telle composition pour modifier l'expression de has-2. L'invention a également pour objet un procédé de stimulation in vitro ou in vivo de la production d'acide hyaluronique comprenant une étape de 10 mise en contact de cellules ou de tissu de mammifère, en particulier de fibroblastes, de kératinocytes ou de cellules épithéliales de la cornée, avec une quantité appropriée de resvératrol. Au sens de la présente invention on entend par mammifère, un mammifère humain ou non.

15 Au sens de la présente invention on entend par resvératrol ses monomères, oligomères et dérivés, notamment le cis-resvératrol, le trans-resvératrol, l'E-viniférine, les esters de resvératrol, monomères et oligomères, notamment le resvératrol méthylé ou acétylé et les monomères comportant au moins un groupe ester de formule -O-CO-A, 20 et les oligomères étant formés de motifs monomères réunis par des liaisons carbone-carbone, ou éther, et/ou de monomères réticulés par des groupes -0-CO-R-00-0-, - A représentant un radical alkyle d'au moins deux atomes de carbone, linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, un radical aryle, aralkyle ou aralkylène, et -R représentant un radical 25 alkylène de 0 à 10 atomes de carbone, saturé ou insaturé, et/ou 1 radical arylène ayant 1 à 3 cycles et/ou un radical hétérocyclique, et les diastéréoisomères de ces motifs. De tels dérivés sont décrits dans le brevet FR2766176.

3036956 6 Les monomères et/ou oligomères de resvératrol peuvent être synthétisés chimiquement ou obtenus à partir de diverses sources végétales sélectionnées parmi le groupe suivant : les Vitacées, Umbellifères, Myrtacées, Di ptérocarpacées, Cypéracées, Gnétacées, Légumineuses, 5 Graminées, Séricées, Haemodoracées, Musacées, Polygonacées, Pinacées, Cupressacées, Césalpiniacées, Poacées, et Solanacées. Dans un mode de réalisation avantageux de l'invention, le resvératrol est utilisé sous forme d'une fraction riche en resvératrol issu de la vigne (OR).

10 De manière avantageuse, on utilise des monomères et/ou oligomères de resvératrol obtenus par extraction à l'aide d'eau et/ou d'un solvant organique, à partir de rafles de vigne selon des techniques connues de l'homme du métier, notamment celles décrites dans la littérature. Le resvératrol peut également être obtenu par l'emploi de 15 microorganismes modifiés génétiquement, à partir de tissu animaux ou par bioproduction à partir de végétaux, notamment à partir de suspensions de cellules de vigne (Etude de la synthèse du resvératrol et de ses dérivés par des suspensions de cellules de vigne et optimisation de la production en bioréacteur, Thomas Chastang 23 juillet 2014 20 https://tel.archives-ouvertes.fr/tel-01037913/document). Selon un mode de réalisation particulièrement avantageux, la composition comprend en outre comme principe actif de l'acide hyaluronique ou l'un de ses sels. Conformément à la présente invention, le terme "acide hyaluronique " 25 (ou hyaluronane) se réfère à un polymère linéaire constitué de la répétition des disaccharides de l'acide D-glucuronique et N-acétyl-Dglucosamine, reliés entre eux par l'intermédiaire d'une alternance [3-1,4 et [3-1,3 glycosidiques ([-13(1,4)-GlcUA-[3(1,3)-GIcNAcqn). L'acide 3036956 7 hyaluronique est largement disponible dans le commerce ou peut-être préparé ou extrait par toute technique connue de l'homme du métier. Ce polymère peut-être naturel ou synthétique. Au sens de la présente invention, on entend par acide hyaluronique (ou 5 hyaluronane) l'acide hyaluronique lui-même, ses homologues, analogues, dérivés, complexes, esters, fragments et sous unités. L'acide hyaluronique existe naturellement sous la forme de disaccharides insaturés (Acta Vet Scand.

2015 Mar 4;57(1):12) et peut aussi être modifié chimiquement de manière à améliorer ses caractéristiques 10 d'absorption, comme par exemple par des modifications des groupes hydroxyles par une liaison éther pour obtenir une liaison éther pour obtenir un cojugué cystéine-acide hyaluronique (Chem Commun (Camb). 2015 51(47):9662-5) ou la formation d'un éthyl éther de 1-cysteine (C) via une liaison amide (3 Pharm Sci.

2015 Apr 21. doi: 15 10.1002/1p5.24456). La composition peut comprendre en outre comme principe actif de l'acide hyaluronique fixé de manière covalente à des monomères ou des oligomères de resvératrol via des liaisons carbone-carbone, ou éther ou ester, comme par exemple des modifications des groupes hydroxyles de 20 l'acide hyaluronique. Dans un mode de réalisation avantageuse de l'invention, l'acide hyaluronique est lié de manière covalente à des monomères ou des oligomères de resvératrol via des liaisons carbone-carbone, éther ou ester en position C6 de l'acide hyaluronique.

25 L'acide hyaluronique et le resvératrol peuvent aussi être administrés par des transporteurs comme par exemple des liposomes, des peptides capables de pénétrer dans la peau, des complexes polyélectrolyte complexes nanotransporteurs (Biomed Nanotechnol.

2014 Dec;10(12):3658-73), des microparticules à base d'alginate de sodium 3036956 8 (Surg Today.

2015 May 20), de poly-l-lysine, ou des micelles polymériques chargés de triamcinolone Ont] Pharm.

2015 May 5;489(1- 2):218-225) Conformément à l'invention, le poids moléculaire moyen de l'acide 5 hyaluronique utilisé varie en fonction du mode d'administration. Ainsi, pour l'administration par voie topique, le poids moléculaire moyen de l'acide hyaluronique est avantageusement inférieur à 100 kDa, encore plus avantageusement compris entre 5 kDa and 100 kDa, et encore plus avantageusement compris entre 50 kDa and 100 kDa. Pour 10 l'administration par voie orale ou parentérale, de l'acide hyaluronique de haut poids moléculaire peut être utilisé. Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, la composition est une composition cosmétique à usage topique comprenant une quantité efficace de resvératrol ou de l'un de ses dérivés, seul ou en combinaison 15 avec une quantité efficace d'acide hyaluronique, et comprenant en outre au moins un excipient cosmétiquement acceptable choisi parmi les huiles, les cires, les émollients, les solvants, les pigments, les colorants, les polymères, les tensio-actifs, les agents rhéologiques, les parfums, les électrolytes, les ajusteurs de pH, les agents anti-oxydants et les 20 conservateurs. Ainsi conformément à l'invention, les compositions peuvent contenir soit du resvératrol seul, ou au moins un de ses dérivés seul, ou du resvératrol et au moins un de ses dérivés, ou du resvératrol seul associé avec de l'acide hyaluronique, ou au moins un de ses dérivés seul associé 25 avec de l'acide hyaluronique ou du resvératrol et au moins un de ses dérivés associés avec de l'acide hyaluronique. Au sens de la présente invention, on entend par sel de l'acide hyaluronique, en particulier les sels de sodium et de potassium. D'autres sels connus de l'acide 3036956 9 hyaluroniques qui peuvent être cités incluent les sels de magnésium, aluminium, ou d'ammonium. Selon un mode de réalisation particulièrement préféré, la composition cosmétique est un produit de soin de la peau ou de maquillage et se 5 présente par exemple sous la forme d'un gel, d'une crème, d'une lotion, d'un lait, d'une huile, d'un onguent, d'une mousse, d'un sérum, d'une pommade, ou bien encore d'un hydrogel, notamment un masque, ou se présente sous la forme d'un stick, par exemple pour un rouge à lèvre, ou encore d'un patch.

10 Selon encore un autre aspect, l'invention vise une méthode de soin cosmétique, caractérisée en ce qu'elle comprend l'application topique sur la peau d'une quantité efficace d'une composition cosmétique selon l'invention, notamment pour maintenir ou rétablir l'hydratation de la peau et les propriétés biomécaniques de la peau et/ou pour prévenir ou 15 retarder l'apparition des signes du vieillissement de la peau, notamment l'apparition des rides et la perte de la fermeté de la peau ou à en ralentir les effets. Selon une variante particulièrement avantageuse de l'invention, cette méthode de soin cosmétique est caractérisée en ce que l'on effectue un 20 soin cosmétique destiné à prévenir, à ralentir ou à corriger le vieillissement cutané, en particulier destiné à raffermir la peau, et/ou à favoriser l'atténuation ou la résorption des rides. Selon un autre aspect de l'invention, ladite composition peut se présenter sous forme d'une composition pharmaceutique pour une application 25 topique (on parle de composition dermatologique) ou pour une administration orale ou parentérale. Elle peut également se présenter sous forme d'une composition alimentaire, notamment d'un complément alimentaire. Toutes ces formes renferment en association 3036956 10 avec un véhicule physiologiquement acceptable, une quantité efficace de resvératrol seul ou combiné à une quantité efficace d'acide hyaluronique. Toutes les compositions selon l'invention, qu'elles soient cosmétiques, pharmaceutiques ou alimentaires peuvent en outre contenir d'autres 5 principes actifs, en particulier des produits à effet antioxydant comme le 6-carotène, la vitamine E ou la vitamine C, des Oligo-ProanthoCyanidines (OPC), du rétinol et leurs mélanges. Les quantités de resvératrol et d'acide hyaluronique seront déterminées par l'homme du métier à la lumière de ses connaissances générales.

10 A titre d'exemple, pour l'administration par voie orale la composition peut être formulée pour que le resvératrol soit administré à une dose comprise entre 10 mg/j et 5g/j ; lorsqu'il est associé à de l'acide hyaluronique, celui-ci est présent à une concentration permettant l'administration d'une dose comprise entre 10 mg/j et 5g/j. Ces doses 15 peuvent être administrées en une ou plusieurs prises journalières. Pour l'administration topique, la composition cosmétique ou dermatologique peut être formulée de manière à ce que le resvératrol représente de 0,01 à 1 % en poids de la composition et l'acide hyaluronique 0 à 0,4 % en poids de la composition. L'administration peut se faire en une ou 20 plusieurs applications. Pour la voie parentérale, la composition peut être formulée sous forme d'une solution aqueuse comprenant entre 1 pg/ml et 100 mg/mi de resvératrol et entre O pg/ml et 100 mg/mi d'acide hyaluronique. Ces doses peuvent être administrées en une ou plusieurs fois par jour.

25 Pour l'administration topique, les compostions pharmaceutiques peuvent se présenter sous toutes formes couramment utilisées comme par exemple un gel, une crème, une lotion, un lait, une huile, un onguent, une mousse, un sérum, une pommade, un hydrogel, un patch.

3036956 11 Pour l'administration orale, les compositions pharmaceutiques ou alimentaires se présentent sous toute forme couramment utilisées et de manière préférée sous la forme de comprimés, de gélules, de poudres, de granulés, de lyophilisats, de solutés, de suspensions, de sirops, de 5 boissons, de pâtes, de gommes à mâcher ou de bonbons. Lorsque l'administration est de type parentéral, la composition selon la présente invention est de préférence formulée sous la forme d'une solution stérile injectable. Elle peut aussi se présenter sous la forme d'une poudre lyophilisée, le solvant étant ajouté extemporanément au 10 moment de l'utilisation. Les compositions pharmaceutiques, vétérinaires ou alimentaires selon l'invention sont plus particulièrement adaptées pour le traitement ou la prévention de l'arthrose et du vieillissement cutané. Elles peuvent en outre être utilisées pour la prévention et/ou le traitement de pathologies 15 touchant les muqueuses des voies respiratoires, telles que l'asthme, les allergies respiratoires, le syndrome de détresse respiratoire, ou de troubles digestifs, en particulier gastro-entérites, nécroses ischémiques et ulcérations de la muqueuse intestinale. Les compositions selon l'invention peuvent être destinées à une 20 utilisation dans le cadre de traitements de troubles oculaires, en particulier de la sècheresse de des lésions de la cornée et des kératopathies. Aussi la présente invention a également pour objet une méthode de traitement thérapeutique de dysfonctionnements liés à une diminution de 25 l'acide hyaluronique, ladite méthode comprenant l'administration à un sujet qui en a besoin d'une quantité efficace de resvératrol seul ou associé à de l'acide hyaluronique.

3036956 12 L'invention a également pour objet une composition comportant, dans un milieu physiologiquement acceptable : i) du resvératrol monomère ou oligomère et ses dérivés notamment le c/s-resvératrol, le trans-resvératrol, l'E-viniférine, 5 les esters de resvératrol, monomères et oligomères, notamment le resvératrol méthyle ou acétyle et les monomères comportant au moins un groupe ester de formule -O-CO-A, et les oligomères étant formés de motifs monomères réunis par des liaisons carbone-carbone, ou éther, et/ou de monomères 10 réticulés par des groupes -0-CO-R-00-0-, - A représentant un radical alkyle d'au moins deux atomes de carbone, linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, un radical aryle, aralkyle ou aralkylène, et - R représentant un radical alkylène de 0 à 10 atomes de carbone, saturé ou insaturé, et/ou 1 radical arylène 15 ayant 1 à 3 cycles et/ou un radical hétérocyclique, et les diastéréoisomères de ces motifs et ii) de l'acide hyaluronique ou un de ses sels de poids moléculaire moyen compris entre 50 kDa et 100 kDa, avantageusement égal à 50 kDa, 20 ledit acide hyaluronique étant lié de manière covalente à des monomères ou des oligomères de resvératrol ou à un de leurs dérivés, en particulier le c/s-resvératrol, le trans-resvératrol, l'Eviniférine, via une liaison carbone-carbone, ou éther, ou ester sur les hydroxyles de l'acide hyalironique.

25 L'invention est illustrée par les exemples 1 et 2 et les Figures 1 et 2 qui suivent. Figure 1 : elle illustre l'effet du resvératrol (RSV) et des oligomères de resvératrol (OR) sur l'expression de has-2 observée après 6 heures 3036956 13 d'incubation. «Non traité» correspond aux fibroblastes incubés en l'absence de produits à tester. Les résultats sont exprimés en moyenne ± déviation standard de quatre échantillons par traitement. Figure 2 : elle illustre l'effet des oligomères de resvératrol (OR), de 5 l'acide hyaluronique (HA) et de la combinaison d'oligomères de resvératrol et d'acide hyaluronique (OR + HA) sur l'expression de has-2 observée après 23 heures d'incubation. La colonne OR+HA hachurée correspond à la valeur théorique s'il y avait un effet additif entre OR et HA. La colonne noire OR + HA correspond à l'effet synergique mesuré. 10 «Non traité» correspond aux fibroblastes incubés en l'absence de produits à tester. Les résultats sont exprimés en moyenne ± déviation standard de quatre échantillons par traitement. Exemple 1: Effet du resvératrol et des oligomères de resvératrol sur l'expression de has-2 dans des fibroblastes 15 1.1. Mode opératoire Des cellules de fibroblastes dermiques humains sont étalées dans du milieu DMEM contenant 10% de sérum bovin foetal (FBS) et des antibiotiques (pénicilline/streptomycine) et incubées jusqu'à atteindre une confluence de 90%. Le milieu est éliminé et remplacé par du milieu 20 frais comprenant respectivement du resvératrol (RSV) ou des oligomères de resvératrol (OR). Le tableau 1 ci-dessous indique les différentes conditions testées et les concentrations utilisées. Tableau 1 No Type de traitement 1 non traitées 2 Resvératrol (RSV) 2 pM 3 Oligomères de resvératrol (OR) 2 pM 3036956 14 Les cellules de fibroblastes dermiques humains sont incubées pendant 6 heures à 37°C sous 5% de CO2. L'extraction des ARN est réalisée en utilisant le kit d'extraction d'ARN Omega. 1pg d'ARN est utilisé et 5 retranscrit en ADN complémentaire en utilisant le kit de synthèse d'ADNc Bio-Rad iScriptTM suivi d'une quantification par PCR quantitative en temps réel. Les réactions de PCR ont été effectuées à l'aide du FastStartTM DNA Master SYBR Green I real-time PCR kit (Roche Molecular Biochemicals). Chaque PCR a été effectuée dans un volume final de 20p1 10 contenant 10 pI de SYBR Green mix 2X (Fast start DNA master SYBR green + Taq DNA polymerase), 2 pI du mélange d'amorces à lOpM (1pM final) et 8 pl de solution d'ADNc (50ng). Les amorces utilisées sont décrites dans le tableau 2 ci-dessous. Tableau 2 Oli o Name Se - uence Descri - tion f-- PCR-185 185 rRNA r- PCR-185 185 rRNA f- PCR-hHAS2 H aluronan s nthase 2 r-.PCR-hHAS2 AGGGTAGGTTAGCC 1111 CACA H aluronan s nthase 2 15 2.2. Résultats Les résultats sont présentés dans la Figure 1. Ces résultats montrent qu'après 6h d'incubation, le resvératrol et l'oligoresvératrol (OR) induisent de manière significative l'expression de has-2 20 par les fibroblastes d'un facteur 1,18 (+18% ; p<0,043) et d'un facteur 1,29 (+29% ; p<0,0045) respectivement. Dans ces conditions, le resvératrol et les oligomères de resvératrol ont une activité sensiblement égale.

3036956 15 Exemple 2: Effet des oli: r res de resvératrol seul ou associé à de l'acide hyaluronique sur l'expressio - de has-7 dans des fibroblastes 2.1. Mode opératoire 5 Des cellules de fibroblastes dermiques humains sont étalées dans du milieu DMEM contenant 10% de sérum bovin foetal (FBS) et des antibiotiques (pénicilline/streptomycine) et incubées jusqu'à atteindre une confluence de 60%. La suite du mode opératoire est identique à celui décrit ci-avant à l'exception du temps d'incubation qui est de 23 heures.

10 Le tableau 3 ci-dessous indique les différentes conditions testées et les concentrations utilisées. Tableau 3 No Type de traitement 1 non traitées 3 Oligomères de resvératrol (OR) 2 pM 4 HA 150 pg/ml 6 HA 150 pg/ml + OR 2 pM 2.2. Résultats 15 Les résultats sont présentés dans la Figure 2. Ces résultats montrent que les oligomères de resvératrol (OR) augmentent d'un facteur 1,3 (+29%) l'expression de has-2 par les fibroblastes. L'expression de has-2 est augmentée d'un facteur 2 (+104%) par le HA. Grâce à un mélange d'OR et d'HA, un simple effet 20 additif des deux activités permettrait d'obtenir théoriquement un facteur d'induction de 2,3 (+133%) (barre rayée sur le graphe). En pratique, lorsque les fibroblastes sont traités avec un mélange HA/OR pendant 23 3036956 16 heures, on observe une augmentation significative de l'expression de has-2 correspondant à un facteur de 3,25 (+226%). Ainsi l'effet de HA +OR est synergique comparé au traitement avec HA seul d'une part et OR seul d'autre part.

5 Ainsi ces résultats montrent pour la première fois que le resvératrol et l'oligomère de resvératrol augmentent l'expression du gène has-2, stimulant ainsi la production d'acide hyaluronique par des fibroblastes humains. De plus, ces résultats montrent que le resvératrol agit en synergie avec l'acide hyaluronique, la combinaison de ces composés 10 augmentant de façon significative l'expression de has-2. Ces résultats confirment que la composition selon l'invention peut être utilisée en tant que composition cosmétique, pharmaceutique et/ou alimentaire pour traiter des dysfonctionnements et/ou conditions sensibles à une augmentation de la synthèse d'acide hyaluronique.

Claims

REVENDICATIONS1. Utilisation d'une composition cosmétique ou alimentaire comprenant une quantité efficace de resvératrol ou l'un de ses dérivés en association avec un excipient cosmétiquement acceptable, le resvératrol, ses dérivés ou la composition les contenant étant utilisés pour stimuler la production d'acide hyaluronique dans une cellule ou un tissu de mammifère, notamment d'un mammifère humain.
2. Utilisation selon la revendication 1, caractérisée en ce que le resvératrol est choisi parmi le cis-resvératrol, le trans-resvératrol et les esters de resvératrol, monomères et oligomères, les monomères comportant au moins un groupe ester de formule -O-CO-A, et les oligomères étant formés de motifs monomères réunis par des liaisons carbone-carbone, ou éther, et/ou de monomères réticulés par des groupes -0-CO-R-00-0- avec -A représentant un radical alkyle d'au moins deux atomes de carbone, linéaire ou ramifié, saturé ou insaturé, un radical aryle, aralkyle ou aralkylène, et - R représentant un radical alkylène de 0 à 10 atomes de carbone, saturé ou insaturé, et/ou 1 radical arylène ayant 1 à 3 cycles et/ou un radical hétérocyclique, et les diastéréoisomères de ces motifs.
3. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la composition comprend en outre comme principe actif de l'acide hyaluronique ou l'un de ses sels. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la composition comprend en outre comme 3036956 22 principe actif de l'acide hyaluronique ou l'un de ses sels et du resvératrol administré dans des transporteurs choisis dans le groupe comprenant les liposomes, les microparticules ou les micelles. 5 5. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la composition comprend en outre comme principe actif de l'acide hyaluronique lié de manière covalente à des monomères ou des oligomères de resvératrol via des liaisons carbone-. carbone, éther ou ester en position C6 de l'acide hyaluronique. 10 6. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que la composition est une composition alimentaire est adaptée pour une administration orale ou parentérale ou une composition cosmétique adaptée pour une administration topique. 15 7. Utilisation selon la revendication 6, caractérisée en ce que la composition pour application topique se présente sous la forme d'un gel, d'une crème, d'une lotion, d'une émulsion, d'un hydrogel, de masque, d'un lait, d'une huile, d'un onguent, d'une mousse, d'un sérum, d'une 20 pommade, d'un aérosol, d'un stick ou d'un patch. 8. Utilisation selon la revendication 6, caractérisée en ce que la composition pour administration orale se présente sous la forme de comprimés, de gélules, de poudres, de granulés, de lyophilisats, de 25 solutés, de suspensions, de sirops, de boissons, de pâtes, de gommes à mâcher ou de bonbons. 3036956 23 9. Utilisation selon la revendication 6, caractérisée en ce que la composition pour administration parentérale se présente sous la forme d'une solution aqueuse ou d'une poudre lyophilisée. 5 10. Composition comportant, dans un milieu physiologiquement acceptable : i) du resvératrol monomère ou oligomère ou un de ses dérivés choisi parmi le cis-resvératrol, le trans-resvératrol, les esters de resvératrol, monomères et oligomères, notamment le resvératrol méthylé ou acétylé et les monomères 10 comportant au moins un groupe ester de formule -O-CO-A, et les oligomères étant formés de motifs monomères réunis par des liaisons carbone-carbone, ou éther, et/ou de monomères réticulés par des groupes -O-CO-R-00-0-, - A représentant un radical alkyle d'au moins deux atomes de carbone, linéaire ou 15 ramifié, saturé ou insaturé, un radical aryle, aralkyle ou araikylène, et - R représentant un radical alkylène de 0 à 10 atomes de carbone, saturé ou insaturé, et/ou 1 radical arylène ayant 1 à 3 cycles et/ou un radical hétérocyclique, et les diastéréoisomères de ces motifs et 20 ii) de l'acide hyaluronique ou un de ses sels de poids moléculaire moyen compris entre 50 kDa et 100 kDa. ledit acide hyaluronique étant lié de manière covalente à des monomères ou des oligomères de resvératrol ou à un de leurs dérivés, en particulier le cis-resvératrol, le trans-resvératrol, l'a- 25 viniférine, via une liaison carbone-carbone, ou éther, ou ester sur les hydroxyles de l'acide hyaluronique. 11.Méthode de soin cosmétique, caractérisée en ce qu'elle comprend l'application topique d'une quantité efficace d'une composition la revendication 10 pour maintenir ou rétablir l'hydratation de la peau et 3036956 24 les propriétés bio mécaniques ou pour prévenir ou retarder l'apparition des signes du vieillissement de la peau ou à en ralentir les effets. 12. Composition selon la revendication 10 caractérisée en ce qu'elle est 5 choisie dans le groupe comprenant une composition cosmétique, une composition alimentaire, une composition pharmaceutique et une composition vétérinaire. 13. Composition selon la revendication 10 pour son utilisation dans les dysfonctionnements liés à une diminution de l'acide hyaluronique.