FR3034869A1 - Dispositif, kit et procede de calibration de fluorescence - Google Patents

Abstract

Un aspect de l'invention concerne un dispositif (10) de calibration de fluorescence pour une sonde asymétrique de mesure de fluorescence, le dispositif comportant : - un élément support (13) présentant une ouverture (13-0) s'étendant entre une première extrémité (13-1) et une deuxième extrémité (13-2) ; - un capuchon (11) réalisé dans un matériau ayant une fluorescence de référence, présentant une cavité (11 -C) ayant une symétrie de révolution et s'emboîtant de manière amovible dans la première extrémité (13-1) de l'élément support (13) ; - un élément de centrage (12) s'insérant dans l'ouverture (13-0) de l'élément support (13), l'élément de centrage (12) étant apte à centrer une extrémité de la sonde asymétrique de mesure de fluorescence au sein de la cavité (11-C) du capuchon (11), lorsque le capuchon (11) est emboîté autour de l'extrémité de la sonde asymétrique de mesure de fluorescence.

Description

1 DISPOSITIF, KIT ET PROCEDE DE CALIBRATION DE FLUORESCENCE DOMAINE TECHNIQUE DE L'INVENTION Le domaine technique de l'invention est celui de la calibration, ou étalonnage, de la sensibilité des sondes de mesure de la fluorescence d'une substance. L'invention concerne ainsi un dispositif, un kit et un procédé de calibration de fluorescence. Les termes « calibration » et « étalonnage » sont indifféremment employés dans le présent document. Un premier aspect de la présente invention concerne un dispositif de calibration de la sensibilité d'une sonde de mesure de fluorescence, et en particulier pour une sonde asymétrique de mesure de fluorescence comportant une fibre optique agencée dans une aiguille creuse. Une telle sonde asymétrique est typiquement stérilisée, pour un usage médical. Un deuxième aspect de la présente invention concerne un kit de calibration de fluorescence, comportant un dispositif de calibration de fluorescence selon le premier aspect de l'invention et une sonde de mesure de fluorescence. Un troisième aspect de la présente invention concerne un procédé de calibration de fluorescence, mettant en oeuvre un kit de calibration de fluorescence selon le deuxième aspect de l'invention.

ARRIERE-PLAN TECHNOLOGIQUE DE L'INVENTION Deux appareils de mesure, même s'ils sont de même conception, ne réagissent et ne se comportent pas, a priori, exactement de la même manière. Les techniques de calibration des appareils de mesure visent à remédier à ce constat et à s'assurer qu'à partir d'une même situation initiale, un même résultat sera obtenu, quel que soit l'appareil de mesure utilisé. La calibration d'un appareil de mesure est donc une étape particulièrement importante pour garantir la fiabilité et la reproductibilité des mesures réalisées. Une méthode générale de calibration d'un appareil de mesure d'une grandeur physique consiste à utiliser l'appareil de mesure sur un étalon, l'étalon ayant une valeur de référence connue pour la grandeur physique à mesurer. On vérifie alors 3034869 2 si la mesure produite par l'appareil de mesure correspond bien à la valeur de référence attendue, et on procède à une correction de l'appareil de mesure le cas échéant.

5 Afin de réaliser une calibration de la fluorescence, par exemple d'une sonde de mesure de fluorescence, deux techniques sont actuellement connues. - Une première technique consiste à utiliser une solution de calibration ayant une fluorescence de référence connue. Une telle technique est par exemple décrite dans le document EP 2295953A1. Une sonde de mesure de 10 fluorescence est plongée dans une solution de calibration, et une mesure est réalisée au moyen de la sonde de mesure. La mesure produite par la sonde de mesure est alors comparée avec la fluorescence de référence de la solution de calibration. Il existe toutefois un risque qu'une partie de la solution de calibration, par exemple une goutte de la solution de calibration, 15 demeure accrochée sur la sonde de mesure ou l'imprègne après que la sonde de mesure ait été retirée de la solution de calibration. Dans ce cas, les mesures qui sont ensuite effectuées avec la sonde de mesure sont faussées par la présence de résidus de liquide fluorescent sur la sonde de mesure. Dans le cas où la sonde de mesure est stérile avant calibration, la 20 première technique présente généralement l'inconvénient de faire perdre le caractère stérile de la sonde de mesure, en la plongeant dans la solution de calibration qui n'est typiquement pas stérile. Il faudrait alors envisager une solution de calibration stérile, ou bien renouveler la stérilisation de la sonde de mesure après calibration. Ces deux solutions seraient toutefois 25 complexes à mettre en pratique. - Une deuxième technique consiste à utiliser une plaque de calibration ayant une fluorescence de référence connue. Une telle technique est mise en oeuvre par exemple dans le document US 2013/0206971 Al. La sonde de 30 mesure de fluorescence est positionnée à une distance connue de la plaque de calibration. On compare la mesure produite par la sonde de mesure avec une valeur théorique, qui est fonction du type de matériau 3034869 3 fluorescent de la plaque de calibration et de la position de la sonde de mesure de fluorescence par rapport à la plaque de calibration. Cette technique nécessite donc un système de positionnement précis et reproductible de la sonde de mesure par rapport à la plaque de calibration.

5 L'indice optique du milieu dans lequel la mesure de calibration est effectuée est en outre le même que celui dans lequel les mesures sont effectuées : calibration dans l'air pour une mesure dans l'air. Par rapport à la première technique, la deuxième technique présente certes l'avantage de ne pas polluer la sonde de mesure avec de la matière fluorescente. Toutefois, la 10 deuxième technique, qui ne contrôle pas l'orientation de la sonde de mesure par rapport à la plaque de calibration, n'est notamment pas adaptée à la calibration d'une sonde asymétrique de mesure de fluorescence. Un tel contrôle de l'orientation est d'autant plus difficile à obtenir qu'on ne souhaite pas de contact entre la sonde de mesure et 15 l'étalon fluorescent. Une problématique de la présente invention est de calibrer une sonde asymétrique de mesure fluorescence. La sonde asymétrique de mesure fluorescence peut notamment comporter une aiguille creuse dans laquelle est insérée une fibre 20 optique. L'aiguille creuse présente typiquement un profil biseauté, donc asymétrique, et l'extrémité de la fibre optique épouse le profil de l'aiguille creuse. Une telle sonde asymétrique de mesure de fluorescence est typiquement destinée à explorer une tumeur sous la peau, comme décrit par exemple dans le brevet WO 2011/010063 Al. Dans une telle application, on souhaite que la sonde 25 asymétrique de mesure de fluorescence, qui est stérilisée avant calibration, demeure stérile pendant et après la calibration, jusqu'à pénétration dans un tissu. Une autre problématique de la présente invention est donc de calibrer une sonde stérile asymétrique de mesure de fluorescence tout en conservant la stérilité de ladite sonde.

30 Un objectif de la présente invention est ainsi de permettre une calibration de fluorescence reproductible, simple et rapide à mettre en oeuvre d'une sonde 3034869 4 asymétrique de mesure de fluorescence, et en particulier d'une sonde asymétrique de mesure de florescence stérile. RESUME DE L'INVENTION 5 L'invention offre une solution aux problèmes évoqués précédemment, en proposant un dispositif, un kit et un procédé de calibration de fluorescence pour une sonde asymétrique de mesure de fluorescence. Un premier aspect de l'invention concerne ainsi un dispositif de calibration de 10 fluorescence pour une sonde asymétrique de mesure de fluorescence, le dispositif de calibration de fluorescence comportant : - un élément support présentant une ouverture s'étendant entre une première extrémité et une deuxième extrémité, l'élément support étant apte à être agencé de manière amovible autour de la sonde asymétrique de 15 mesure de fluorescence ; - un capuchon réalisé dans un matériau ayant une fluorescence de référence, présentant une cavité ayant une symétrie de révolution et s'emboîtant de manière amovible dans la première extrémité de l'élément support, le capuchon étant apte à être agencé de manière amovible autour 20 d'une extrémité de la sonde asymétrique de mesure de fluorescence sans être en contact avec ladite sonde asymétrique de mesure de fluorescence ; - un élément de centrage s'insérant dans l'ouverture de l'élément support, l'élément de centrage étant apte à centrer l'extrémité de la sonde asymétrique de mesure de fluorescence au sein de la cavité du capuchon, 25 lorsque le capuchon est emboîté autour de l'extrémité de la sonde asymétrique de mesure de fluorescence. Grâce au dispositif selon le premier aspect de l'invention, l'élément de centrage s'insère dans l'ouverture de l'élément support et le capuchon fluorescent 30 s'emboîte de manière amovible dans la première extrémité de l'élément support. Le dispositif de calibration de fluorescence permet la calibration d'une sonde asymétrique de mesure de fluorescence, la sonde asymétrique étant insérée dans 3034869 5 l'ouverture de l'élément support et l'extrémité de la sonde asymétrique étant centrée au sein de la cavité du capuchon fluorescent grâce à l'élément de centrage. La cavité du capuchon fluorescent est à symétrie de révolution, donc lorsque l'extrémité de la sonde asymétrique est centrée au sein de la cavité du 5 capuchon fluorescent, cela signifie que l'extrémité de la sonde asymétrique est sensiblement alignée suivant l'axe de symétrie de révolution de la cavité du capuchon fluorescent. Toute éventuelle rotation de l'extrémité de la sonde asymétrique suivant l'axe de symétrie de révolution de la cavité du capuchon fluorescent est alors sans influence sur la distance séparant l'extrémité de la 10 sonde asymétrique de la cavité du capuchon fluorescent. Le dispositif de calibration de fluorescence selon le premier aspect de l'invention permet donc de contrôler précisément la distance séparant l'extrémité de la sonde asymétrique de la cavité du capuchon fluorescent, indépendamment de l'orientation de ladite extrémité au sein de la cavité, et donc de réaliser une calibration de fluorescence 15 reproductible, simple et rapide à mettre en oeuvre de la sonde asymétrique de mesure de fluorescence. Outre les caractéristiques qui viennent d'être évoquées dans le paragraphe précédent, le dispositif de calibration de fluorescence selon le premier aspect de 20 l'invention peut présenter une ou plusieurs caractéristiques complémentaires parmi les suivantes, considérées individuellement ou selon toutes les combinaisons techniquement possibles : - L'élément support est préférentiellement réalisé dans un matériau non fluorescent. 25 - L'élément support est avantageusement réalisé dans un matériau opaque présentant une transmittance inférieure à 0,1 % pour les longueurs d'ondes visibles comprises entre 400 nm et 800 nm. L'élément support est ainsi apte à protéger au moins partiellement la sonde asymétrique de mesure de 30 fluorescence de toute lumière issue d'une source extérieure, comme par exemple la lumière issue de l'éclairage d'une pièce dans laquelle le dispositif est utilisé. 3034869 6 - L'ouverture de l'élément support présente avantageusement une symétrie de rotation. L'ouverture de l'élément support présente alors une section qui est par exemple un triangle équilatéral, un carré, un hexagone régulier, un octogone régulier, etc. L'ouverture de l'élément support présente 5 préférentiellement une symétrie de révolution. L'ouverture de l'élément support peut par exemple être tronconique ou cylindrique. - Le capuchon comporte un corps principal et un rebord faisant saillie du corps principal, le corps principal s'emboîtant de manière amovible dans la 10 première extrémité de l'élément support et le rebord formant une butée de positionnement du corps principal dans la première extrémité de l'élément support. On permet ainsi un positionnement maîtrisé et reproductible du capuchon dans la première extrémité de l'élément support. Le rebord du capuchon facilite également la préhension du capuchon, notamment lors de 15 manipulations d'insertion ou de retrait. - La cavité du capuchon comporte avantageusement une paroi latérale sensiblement cylindrique. La paroi latérale de la cavité est alors sensiblement parallèle à l'axe de symétrie de révolution de la cavité. On 20 entend par « sensiblement parallèle » le fait qu'un angle p, mesuré entre une direction longitudinale de la paroi latérale et l'axe de symétrie de révolution de la cavité, est inférieur à 3°. Ainsi, le capuchon est emboîté dans la première extrémité de l'élément support et lorsque la sonde asymétrique est insérée dans l'ouverture de l'élément support et centrée au 25 sein de la cavité du capuchon, la distance entre l'extrémité de la sonde asymétrique et la paroi latérale de la cavité du capuchon varie très peu en fonction de la longueur de la sonde asymétrique. On contribue donc à rendre le dispositif de calibration selon le premier aspect de l'invention insensible à une fluctuation de longueur de la sonde asymétrique. Des 30 fluctuations de longueur de l'ordre de quelques dixièmes de millimètre peuvent typiquement être observées sur des sondes asymétriques. - L'élément de centrage est avantageusement une bague percée d'un trou circulaire en son centre. La sonde asymétrique peut ainsi être insérée dans 3034869 7 le trou circulaire de l'élément de centrage. - L'élément de centrage est avantageusement réalisé dans un matériau biocompatible. En effet, l'élément de centrage étant susceptible d'être en 5 contact avec la sonde asymétrique de mesure de fluorescence, on évite ainsi une éventuelle « pollution » de la sonde asymétrique par un matériau non biocompatible, par exemple pour un usage intradermique. L'élément de centrage est avantageusement réalisé dans un matériau non fluorescent afin de ne pas perturber une mesure de fluorescence de la sonde 10 asymétrique, notamment lorsque la sonde asymétrique est agencée dans la cavité du capuchon. - L'élément de centrage et le capuchon s'agencent à proximité immédiate l'un de l'autre ou en contact l'un avec l'autre. 15 - Préférentiellement, la cavité du capuchon comporte une première partie ayant un premier diamètre et une deuxième partie ayant un deuxième diamètre supérieur au premier diamètre, et l'élément de centrage présente à une extrémité une protubérance, la protubérance de l'élément de 20 centrage s'emboîtant dans la deuxième partie de la cavité du capuchon. - Le capuchon présente un trou de ventilation, dit « premier trou de ventilation », le premier trou de ventilation communiquant avec la cavité du capuchon. Le premier trou de ventilation permet la mise en oeuvre d'une 25 stérilisation du dispositif de calibration de fluorescence selon le premier aspect de l'invention. - L'élément support présente un trou de ventilation, dit « deuxième trou de ventilation ». Le deuxième trou de ventilation facilite la mise en oeuvre 30 d'une stérilisation, au moyen d'un gaz de stérilisation, du dispositif de calibration de fluorescence selon le premier aspect de l'invention. - Avantageusement, le dispositif de calibration de fluorescence selon le premier aspect de l'invention comporte le premier trou de ventilation et le deuxième trou de ventilation. Les premier et deuxième trous de ventilation 3034869 8 permettent une meilleure circulation d'un gaz de stérilisation, lors d'une stérilisation du dispositif de calibration de fluorescence selon le premier aspect de l'invention.

5 Un deuxième aspect de l'invention concerne un kit de calibration de fluorescence comprenant une sonde asymétrique de mesure de fluorescence ayant un diamètre extérieur, et un dispositif de calibration de fluorescence de la sonde asymétrique selon le premier aspect de l'invention.

10 Outre les caractéristiques qui viennent d'être évoquées dans le paragraphe précédent, le kit de calibration de fluorescence selon le deuxième aspect de l'invention peut présenter une ou plusieurs caractéristiques complémentaires parmi les suivantes, considérées individuellement ou selon toutes les combinaisons techniquement possibles : 15 - La sonde asymétrique comprend une aiguille creuse et une fibre optique agencée dans l'aiguille creuse. L'aiguille creuse présente un profil asymétrique et l'extrémité de la fibre optique épouse le profil de l'aiguille creuse. L'aiguille creuse présente typiquement un profil biseauté. 20 - La sonde asymétrique repose sur une embase, la sonde asymétrique s'introduisant de manière amovible dans l'ouverture de l'élément support, l'embase formant une butée de positionnement de la sonde asymétrique dans l'ouverture de l'élément support ; le capuchon comporte un corps principal et un rebord faisant saillie du corps principal, le 25 corps principal s'emboîtant de manière amovible dans la première extrémité de l'élément support et le rebord formant une butée de positionnement du corps principal dans la première extrémité de l'élément support ; les dimensions de l'élément support et du capuchon sont choisies telles que, la sonde asymétrique étant introduite dans l'ouverture de 30 l'élément support et le capuchon étant emboîté dans la première extrémité de l'ouverture de l'élément support, une distance supérieure ou égale à trois fois le diamètre extérieur de la sonde asymétrique sépare l'extrémité de la sonde asymétrique de la cavité du capuchon, la distance étant 3034869 9 mesurée selon une direction longitudinale. Autrement dit, le capuchon comportant une paroi latérale et un fond, ladite distance mesurée suivant une direction longitudinale sépare l'extrémité de la sonde asymétrique du fond de la cavité du capuchon.

5 Ainsi, lors d'une mesure de fluorescence réalisée au moyen de la sonde asymétrique, la contribution du fond du capuchon à ladite mesure est négligeable devant la contribution de la paroi latérale. On contribue également à rendre le dispositif de calibration selon le premier aspect de l'invention insensible à une fluctuation de longueur de la sonde 10 asymétrique. - La première extrémité de l'ouverture de l'élément support présente un diamètre au moins cinq fois supérieur au diamètre extérieur de la sonde asymétrique. 15 - La cavité du capuchon présente un diamètre au moins deux fois supérieur au diamètre extérieur de la sonde asymétrique. - L'élément de centrage est percé en son centre d'un trou circulaire de 20 diamètre supérieur au diamètre extérieur de la sonde asymétrique, et inférieur à deux fois le diamètre extérieur de la sonde asymétrique. - La sonde asymétrique est assemblée avec un manchon, et la deuxième extrémité de l'élément support présente un évasement, l'évasement de la 25 deuxième extrémité de l'élément support coopérant avec le manchon de manière que, la sonde asymétrique étant introduite dans l'ouverture de l'élément support, l'élément support se trouve en appui stable sur le manchon. Typiquement, lorsque l'évasement coopère avec le manchon, une surface d'appui de l'évasement se trouve sensiblement parallèle et au 30 moins partiellement en contact avec une surface d'appui du manchon. On entend alors par « appui stable » le fait que la surface d'appui de l'évasement présente avec la surface d'appui du manchon un angle a inférieur à 2°.

3034869 10 Un troisième aspect de l'invention concerne un procédé de calibration de fluorescence d'une sonde asymétrique de mesure de fluorescence au moyen d'un dispositif de calibration de fluorescence selon le premier aspect de l'invention, le 5 procédé comportant les étapes suivantes : - insertion de l'élément de centrage dans la première extrémité de l'ouverture de l'élément support ; - insertion de la sonde asymétrique dans la deuxième extrémité de l'ouverture de l'élément support ; 10 - emboîtement du capuchon dans la première extrémité de l'ouverture de l'élément support ; le capuchon étant alors agencé de manière amovible autour de l'extrémité de la sonde asymétrique sans être en contact avec ladite sonde asymétrique et l'extrémité de la sonde asymétrique étant centrée au sein de la cavité du 15 capuchon grâce à l'élément de centrage. Outre les caractéristiques qui viennent d'être évoquées dans le paragraphe précédent, le procédé de calibration de fluorescence selon le troisième aspect de l'invention peut comporter en outre les étapes suivantes : 20 - fixation de la sonde asymétrique sur un manchon de manière que la deuxième extrémité de l'élément support repose en appui stable sur le manchon ; - réalisation, au moyen de la sonde asymétrique, d'une mesure d'un signal de fluorescence, le capuchon étant agencé autour de l'extrémité de la 25 sonde asymétrique ; - retrait du capuchon de la première extrémité de l'ouverture de l'élément support dans laquelle il se trouvait précédemment emboîté ; - réalisation, au moyen de la sonde asymétrique, d'une mesure d'un signal de fond ; 30 - soustraction, au moyen d'un calculateur, de la mesure du signal de fond à la mesure du signal de fluorescence, pour l'obtention d'une valeur de fluorescence dans l'air ; 3034869 11 - association, au moyen du calculateur, d'une valeur de fluorescence dans une solution fluorescente de référence à la valeur de fluorescence dans l'air, en fonction d'une courbe d'étalonnage. La courbe d'étalonnage permet de faire le lien entre la valeur de fluorescence 5 dans l'air, réalisée au sein de la cavité du capuchon, et de futures mesures réalisées dans un milieu d'indice différent de l'air, comme une solution ou un tissu biologique. On utilise une solution fluorescente de référence dont l'indice optique est, à mieux de 20% près, celui du milieu dans lequel on souhaite réaliser des mesures ultérieures, et dont la valeur de fluorescence est de l'ordre de grandeur 10 de la médiane des valeurs de mesures que l'on souhaite réaliser dans le milieu. La courbe d'étalonnage est par exemple obtenue au moyen d'une série de mesures effectuée sur un lot de sondes asymétriques de test, en mettant en abscisse la valeur de fluorescence dans l'air du capuchon et en ordonnée la valeur de la fluorescence dans la solution de référence. L'interpolation de la 15 courbe d'étalonnage fournit une équation corrective. Cette équation corrective est appliquée à la valeur de fluorescence dans l'air, afin d'obtenir la valeur de fluorescence prévisionnelle correspondante dans le milieu de référence. Un facteur correctif est ensuite appliqué à la valeur de fluorescence prévisionnelle dans le milieu de référence, afin qu'elle ait toujours la même valeur, quelle que 20 soit la sensibilité de la sonde asymétrique. On garantit ainsi que toutes les sondes asymétriques calibrées au moyen du dispositif de calibration ont la même sensibilité pour la solution de référence considérée. Le calculateur est typiquement compris dans un spectrofluorimètre, ou fluorimètre. En pratique : 25 - soit S la valeur de fluorescence dans l'air, réalisée au sein du capuchon, - soit P la valeur de fluorescence prévisionnelle de la solution de référence, correspondant à la valeur S, obtenue en appliquant l'équation corrective à la valeur S, et - soit R la sensibilité souhaitée du fluorimètre pour la solution fluorescente de 30 référence, indépendamment d'éventuels aléas de sensibilité de la sonde asymétrique ; le calculateur multiplie toutes les mesures de la sonde asymétrique réalisées dans 3034869 12 le milieu d'indice différent de l'air par le rapport R/P. Un quatrième aspect de l'invention concerne un procédé de calibration de fluorescence d'une sonde asymétrique de mesure de fluorescence au moyen d'un 5 dispositif de calibration de fluorescence selon le premier aspect de l'invention et comportant le premier trou de ventilation et/ou le deuxième trou de ventilation, le procédé comportant les étapes suivantes : - insertion de l'élément de centrage dans la première extrémité de l'ouverture de l'élément support ; 10 - insertion de la sonde asymétrique dans la deuxième extrémité de l'ouverture de l'élément support ; - emboîtement du capuchon dans la première extrémité de l'ouverture de l'élément support, le capuchon étant alors agencé de manière amovible autour de l'extrémité de la sonde asymétrique sans être en contact avec 15 ladite sonde asymétrique et l'extrémité de la sonde asymétrique étant centrée au sein de la cavité du capuchon grâce à l'élément de centrage, l'élément support et le capuchon formant une enceinte ; - stérilisation de la sonde asymétrique et de l'élément de centrage agencés dans ladite enceinte au moyen d'un gaz de stérilisation introduit dans ladite 20 enceinte. Outre les caractéristiques qui viennent d'être évoquées dans le paragraphe précédent, le procédé de calibration de fluorescence selon le quatrième aspect de l'invention peut comporter en outre les étapes suivantes : 25 - fixation de la sonde asymétrique sur un manchon de manière que la deuxième extrémité de l'élément support repose en appui stable sur le manchon ; - réalisation, au moyen de la sonde asymétrique, d'une mesure d'un signal de fluorescence, le capuchon étant agencé autour de l'extrémité de la 30 sonde asymétrique ; - retrait du capuchon de la première extrémité de l'ouverture de l'élément support dans laquelle il se trouvait précédemment emboîté ; 3034869 13 - réalisation, au moyen de la sonde asymétrique, d'une mesure d'un signal de fond ; - soustraction, au moyen d'un calculateur, de la mesure du signal de fond à la mesure du signal de fluorescence, pour l'obtention d'une valeur de 5 fluorescence dans l'air au sein du capuchon ; - association, au moyen du calculateur, d'une valeur de fluorescence dans une solution fluorescente de référence à la valeur de fluorescence dans l'air au sein du capuchon, en fonction d'une courbe d'étalonnage, et application d'un facteur correctif à ladite valeur de fluorescence dans la solution 10 fluorescente de référence, afin que ladite valeur de fluorescence dans la solution fluorescente de référence, qui est associée à la valeur de fluorescence dans l'air au sein du capuchon, soit indépendante de la sensibilité de la sonde asymétrique.

15 Dans le procédé de calibration de fluorescence selon troisième ou selon le quatrième aspect de l'invention, lorsqu'un élément support non fluorescent et opaque est utilisé, la mesure du signal de fond est préférentiellement réalisée en ayant préalablement dirigé la sonde asymétrique équipée du dispositif de calibration dans une direction opposée aux éventuelles sources de lumière 20 ambiante, c'est-à-dire typiquement vers le sol, afin d'éviter l'entrée de lumière externe dans la direction de l'axe de la sonde asymétrique. En effet, l'élément support présentant une ouverture, il ne peut notamment pas protéger la sonde asymétrique contre la lumière extérieure dans la direction de l'axe de la sonde asymétrique.

25 Alternativement, l'étape de mesure du signal de fond par la sonde asymétrique comporte les sous-étapes suivantes : - emboîtement d'un deuxième capuchon dans la première extrémité de l'ouverture de l'élément support, le deuxième capuchon étant alors agencé 30 de manière amovible autour de l'extrémité de la sonde asymétrique sans être en contact avec ladite sonde asymétrique, le deuxième capuchon étant réalisé en un matériau non fluorescent ; 3034869 14 - réalisation, au moyen de la sonde asymétrique, d'une mesure d'un signal de fond ; - retrait du deuxième capuchon de la première extrémité de l'ouverture de l'élément support dans laquelle il se trouvait précédemment emboîté. Cette alternative est préférentiellement choisie lorsque l'élément support est réalisé dans un matériau fluorescent et/ou transparent. Toutefois, cette alternative peut également être employée lorsque l'élément support est réalisé dans un matériau non fluorescent et opaque. L'invention et ses différentes applications seront mieux comprises à la lecture de la description qui suit et à l'examen des figures qui l'accompagnent. BREVE DESCRIPTION DES FIGURES 15 Les figures sont présentées à titre indicatif et nullement limitatif de l'invention. - La figure 1 montre schématiquement une vue éclatée d'un dispositif de calibration de fluorescence selon le premier aspect de l'invention. - La figure 2 montre schématiquement une première vue, en coupe, d'un kit de calibration de fluorescence selon le deuxième aspect de l'invention. 20 - La figure 3 montre schématiquement une deuxième vue, en transparence, du kit de calibration de fluorescence selon le deuxième aspect de l'invention. - La figure 4 montre schématiquement un élément support d'un dispositif de calibration de fluorescence selon le premier aspect de l'invention en appui 25 stable sur un manchon d'une sonde asymétrique de mesure de fluorescence. - La figure 5 montre schématiquement une paroi latérale sensiblement cylindrique d'une cavité d'un capuchon d'un dispositif de calibration de fluorescence selon le premier aspect de l'invention. 30 - La figure 6 montre un diagramme schématique des différentes étapes d'un procédé de calibration de fluorescence selon un autre aspect de l'invention.

5 10 3034869 15 DESCRIPTION DETAILLEE D'AU MOINS UN MODE DE REALISATION DE L'INVENTION Sauf précision contraire, un même élément apparaissant sur des figures différentes présente une référence unique.

5 Un premier aspect de l'invention concerne un dispositif de calibration de fluorescence. Un deuxième aspect de l'invention concerne un kit de calibration de fluorescence.

10 Les figures 1, 2, 3, 4 et 5 sont décrites conjointement. La figure 1 montre schématiquement une vue éclatée d'un dispositif 10 de calibration de fluorescence selon le premier aspect de l'invention. La figure 2 montre schématiquement une première vue, en coupe, d'un kit 20 de calibration de fluorescence selon le deuxième aspect de l'invention. La figure 3 montre 15 schématiquement une deuxième vue, en transparence, du kit 20 de calibration de fluorescence selon le deuxième aspect de l'invention. La figure 4 montre schématiquement un élément support 13 du dispositif 10 de calibration de fluorescence selon le premier aspect de l'invention en appui stable sur un manchon 3 d'une sonde asymétrique 1 de mesure de fluorescence. La figure 5 20 montre schématiquement une paroi latérale sensiblement cylindrique d'une cavité 11-C d'un capuchon 11 du dispositif 10 de calibration de fluorescence selon le premier aspect de l'invention. Le dispositif 10 de calibration de fluorescence selon le premier mode de 25 réalisation de l'invention comporte : - l'élément support 13, qui présente une ouverture 13-0 s'étendant entre une première extrémité 13-1 et une deuxième extrémité 13-2 ; - le capuchon 11, qui est réalisé dans un matériau ayant une fluorescence de référence et présente une cavité 11-C ayant une symétrie de révolution 30 autour d'un axe Z et s'emboîtant de manière amovible dans la première extrémité 13-1 de l'élément support 13 ; 3034869 16 - un élément de centrage 12, qui s'insère dans l'ouverture 13-0 de l'élément support 13. L'élément support 13 est apte à être agencé de manière amovible autour de la sonde asymétrique 1 de mesure de fluorescence. Le capuchon 11 est apte à être 5 agencé de manière amovible autour d'une extrémité 2 de la sonde asymétrique 1 de mesure de fluorescence sans être en contact avec ladite sonde asymétrique 1 de mesure de fluorescence. L'élément de centrage 12 est apte à centrer l'extrémité 2 de la sonde asymétrique 1 de mesure de fluorescence au sein de la cavité 11-C du capuchon 11 lorsque le capuchon 11 est emboîté autour de 10 l'extrémité 2 de la sonde asymétrique 1 de mesure de fluorescence. Le capuchon 11 peut notamment être réalisé en un matériau choisi parmi la liste suivante : - Zytel 70G2OHSL NO10 ; 15 - Makrolon 6555 White ; - Moplen RP348R ; - PP7064 L1 ; - Exxon Mobil HMA016 ; - Ramofin PPH300G4 ; 20 - Bayblend T65XF. D'une manière générale, on choisit comme matériau du capuchon 11 un matériau ayant une fluorescence significative par rapport aux signaux à mesurer par la sonde 1 de mesure de fluorescence. A titre d'exemple non limitatif, si on souhaite 25 mesurer avec la sonde 1 de mesure de fluorescence des signaux à environ 1000 ua (unités arbitraires), on peut choisir pour le capuchon 11 un matériau ayant une fluorescence de référence à environ 2000 ua. L'élément de centrage 12 est, dans un mode de réalisation de l'invention, une 30 bague de centrage ayant un trou 12-T ajusté permettant le passage de l'extrémité 2 de la sonde asymétrique 1 de mesure de fluorescence. L'élément de centrage 12 est préférentiellement réalisé dans un matériau non fluorescent et 3034869 17 biocompatible. Le trou 12-T de la bague de centrage 12 est avantageusement tronconique afin de guider l'extrémité 2 de la sonde asymétrique 1. Le trou 12-T de la bague de centrage 12 présente donc avantageusement un premier diamètre à une première extrémité et un deuxième diamètre à une deuxième extrémité, le 5 trou 12-T s'étendant entre la première extrémité et la deuxième extrémité, et le premier diamètre étant inférieur au deuxième diamètre. Le deuxième diamètre, ou grand diamètre, permet avantageusement de faciliter l'introduction de l'extrémité 2 de la sonde asymétrique 1 à travers la bague de centrage 12. Le premier diamètre, ou petit diamètre, contribue avantageusement à positionner précisément 10 l'extrémité 2 de la sonde asymétrique 1 au sein de la cavité 11-C du capuchon 11, lorsque le capuchon 11 est emboîté dans la première extrémité 13-1 de l'élément support 13. L'élément de centrage 12 est avantageusement agencé à proximité de 15 l'extrémité 2 de la sonde asymétrique 1. En effet, plus l'élément de centrage 12 est proche de l'extrémité 2 de la sonde asymétrique 1, meilleur est le contrôle du positionnement et de l'orientation de l'extrémité 2 de la sonde asymétrique 1. La bague de centrage 12 est avantageusement apte à être emboîtée avec le 20 capuchon 11. On permet ainsi un meilleur contrôle du positionnement du capuchon 11 par rapport à l'extrémité 2 de la sonde asymétrique 1. Pour permettre l'emboitement du capuchon 11 avec la bague de centrage 12, la cavité 11-C du capuchon 11 comporte avantageusement une première partie 11-Cl ayant un premier diamètre et une deuxième partie 11-C2 ayant un deuxième 25 diamètre supérieur au premier diamètre ; et la bague de centrage 12 comporte avantageusement à sa deuxième extrémité une protubérance 16 qui s'emboîte dans la deuxième partie 11-C2 de la cavité 11-C du capuchon 11. Selon une alternative non illustrée, le capuchon 11 peut présenter une protubérance à une extrémité et la bague de centrage 12 peut présenter une cavité à sa deuxième 30 extrémité, la protubérance du capuchon 11 s'emboîtant dans la cavité de la bague de centrage 12.

3034869 18 L'élément de centrage 12 présente avantageusement une symétrie de révolution autour du même axe Z que la cavité 11-C du capuchon 11. Dans le cas où la cavité 11-C du capuchon 11 comporte la deuxième partie 11-C2 et où l'élément de centrage 12 comporte la protubérance 16, la deuxième partie 11-C2 de la 5 cavité 11-C du capuchon 11 et la protubérance 16 de l'élément de centrage 12 présentent donc avantageusement une symétrie de révolution autour de l'axe Z. Une telle symétrie de révolution autour de l'axe Z permet de faciliter la détection d'un éventuel défaut de dimensionnement de la cavité 11-C du capuchon 11 et/ou de l'élément de centrage 12.

10 L'élément de centrage 12 a pour fonction de positionner de manière précise et reproductible l'extrémité 2 de la sonde 1 de mesure de fluorescence au sein de la cavité 11-C du capuchon 11, lorsque le capuchon 11 est emboîté dans la première extrémité 13-1 de l'élément support 13 et lorsque la sonde asymétrique 1 est 15 agencée dans l'ouverture 13-0 de l'élément support 13. L'élément support 13 est avantageusement apte à être assemblé avec la sonde asymétrique 1 de mesure de fluorescence de manière à former une enceinte autour de ladite sonde asymétrique 1, le capuchon 11 pouvant être agencé au 20 moins partiellement dans l'élément support 13. Le capuchon 11 présente ainsi un corps principal 18 qui peut être agencé dans l'élément support 13. Avantageusement, le capuchon 11 peut également comporter un rebord 19 faisant saillie du corps principal 18. Les dimensions du rebord 19 sont choisies telles que le rebord 19 ne peut pas être inséré dans l'élément support 13. Ainsi, lorsque le 25 corps principal 18 du capuchon 11 est agencé dans l'élément support 13, le rebord 19 du capuchon 11 forme une butée de positionnement. On peut ainsi contrôler exactement et simplement la manière dont le capuchon 11 est inséré dans l'élément support 13, et le capuchon 11 peut être inséré dans l'élément support 13 d'une manière reproductible. Le rebord 19 présente également une 30 fonction de préhension qui permet de faciliter l'insertion du capuchon 11 dans l'élément support 13 et le retrait du capuchon 11 de l'élément support 13.

3034869 19 La cavité 11-C du capuchon 11 présente préférentiellement une paroi latérale sensiblement cylindrique, c'est-à-dire sensiblement parallèle à l'axe Z. On entend par « sensiblement parallèle » le fait qu'un angle p, mesuré entre une direction longitudinale de la paroi latérale et l'axe Z de symétrie de révolution de la 5 cavité 11-C, est inférieur à 3°. L'angle p est idéalement nul, mais typiquement non nul en raison des contraintes de démoulage en production du capuchon 11. Plus la paroi latérale de la cavité 11-C est parallèle à l'axe Z, moins une fluctuation de la longueur de la sonde asymétrique 1 affecte la distance qui sépare l'extrémité 2 de la sonde asymétrique 1 de ladite paroi latérale. Dans la cavité 11-C qui 10 comprend ladite paroi latérale et un fond, c'est la paroi latérale qui est responsable de l'essentiel de la fluorescence mesurée par la sonde asymétrique 1, et la fluorescence émise par le fond de la cavité est négligeable. Plus la distance entre la paroi latérale de la cavité 11-C et l'axe Z, mesurée suivant une direction perpendiculaire à l'axe Z, est grande, moins le dispositif 10 de calibration est 15 sensible à un éventuel défaut résiduel de désaxement de la sonde asymétrique 1 au sein de la cavité 11-C. Cependant si cette distance est trop grande, le signal de fluorescence du capuchon 11 mesuré par la sonde asymétrique 1 sera trop faible, ce qui impose un compromis. Une distance entre l'axe Z et la paroi latérale du capuchon 11, mesurée suivant une direction perpendiculaire à l'axe Z, de l'ordre 20 de deux fois le diamètre de la sonde asymétrique 1 est un compromis possible. Lorsque la sonde asymétrique 1 est alignée suivant l'axe Z, le diamètre de la sonde asymétrique 1 est mesuré suivant une direction perpendiculaire à l'axe Z. Lorsque le capuchon 11 est emboîté dans la première extrémité 13-1 de l'élément 25 support 13 et que la sonde asymétrique 1 est agencée dans l'ouverture 13-0 de l'élément support 13, le fond de la cavité 11-C est à suffisamment grande distance de l'extrémité 2 de la sonde asymétrique 1, afin de rendre négligeable la contribution à la fluorescence du fond de la cavité 11-C. Ainsi, des éventuelles fluctuations de la longueur de la sonde asymétrique 1 n'influencent pas l'intensité 30 du signal de fluorescence mesuré par la sonde asymétrique 1 agencée dans la cavité 11-C. En pratique, on choisit une distance de plus de 3 fois, et préférentiellement plus de 5 fois le diamètre de la sonde asymétrique 1 entre 3034869 20 l'extrémité 2 de la sonde asymétrique de fluorescence et le fond de la cavité 11-C du capuchon 11, lorsque la sonde asymétrique est agencée dans la cavité 11-C.

5 Le capuchon 11 comporte préférentiellement un trou de ventilation 17, dit « premier trou de ventilation ». Le premier trou de ventilation 17 est préférentiellement agencé à l'extrémité de la cavité 11-C du capuchon 11, le premier trou de ventilation 17 communiquant avec le fond de la cavité 11-C. Le premier trou de ventilation 17 permet l'introduction d'un gaz de stérilisation au sein 10 de la cavité 11-C du capuchon 11 et/ou l'évacuation dudit gaz de stérilisation de la cavité 11-C du capuchon 11. L'élément support 13 comporte préférentiellement un trou de ventilation 14, dit « deuxième trou de ventilation ». Le deuxième trou de ventilation 14 est 15 préférentiellement agencé du côté de la deuxième extrémité 13-2 de l'élément support 13, à distance de la première extrémité 13-1 de l'élément support 13. Le deuxième trou de ventilation 14 permet l'introduction du gaz de stérilisation au sein de l'ouverture 13-0 de l'élément support 13 et/ou l'évacuation dudit gaz de stérilisation de l'ouverture 13-0 de l'élément support 13.

20 Le gaz de stérilisation est par exemple de l'oxyde d'éthylène. Un autre aspect de l'invention concerne un procédé 100 de calibration de fluorescence d'une sonde de mesure de fluorescence. La figure 6 est un 25 diagramme schématique des différentes étapes du procédé 100 de calibration de fluorescence. Lors d'une première étape 101, l'élément de centrage 12 est inséré dans la première extrémité 13-1 de l'ouverture 13-0 de l'élément support 13. L'élément de 30 centrage est bloqué par frottement dans l'ouverture 13-0 de l'élément support 13. Lors d'une deuxième étape 102, la sonde asymétrique 1 est insérée dans la 3034869 21 deuxième extrémité 13-2 de l'ouverture 13-0 de l'élément support 13. Lors d'une troisième étape 103, le capuchon 11 est emboîté dans la première extrémité 13-1 de l'ouverture (13-0) de l'élément support 13. Le capuchon 11 5 vient typiquement repousser le moyen de centrage 12. Le capuchon 11 et le moyen de centrage demeurent typiquement en contact l'un avec l'autre. A l'issue de la troisième étape 103, le capuchon 11 est agencé de manière amovible autour de l'extrémité 2 de la sonde asymétrique 1 sans être en contact 10 avec ladite sonde asymétrique 1, et l'extrémité 2 de la sonde asymétrique 1 est centrée au sein de la cavité 11-C du capuchon 11 grâce à l'élément de centrage 12. Les première, deuxième et troisième étapes 101, 102 et 103 sont typiquement réalisées en usine. Lors de l'assemblage de la sonde asymétrique 1 et du dispositif 10 de calibration de fluorescence, un contrôle qualité est 15 typiquement réalisé, par des moyens connus. L'ensemble formé par la sonde asymétrique 1 et le dispositif 10 de calibration de fluorescence est un kit 20 de calibration de fluorescence. A l'issue de la troisième étape 103, le kit 20 est typiquement placé dans un sachet de stérilisation afin 20 d'effectuer une stérilisation à l'oxyde d'éthylène, selon une quatrième étape 104 de stérilisation de la sonde asymétrique 1 et de l'élément de centrage 12 agencés dans ladite enceinte au moyen d'un gaz de stérilisation. Le sachet de stérilisation permet de déplacer et stocker le kit 20 tout en le conservant dans un état stérile.

25 Le procédé 100 de calibration de fluorescence comporte ensuite préférentiellement une cinquième étape 105 de fixation de la sonde asymétrique 1 sur un manchon 3 de manière que la deuxième extrémité 13-2 de l'élément support 13 repose en appui stable sur le manchon 3. La réalisation de la cinquième étape 105 implique, le cas échéant, d'ouvrir le sachet de stérilisation.

30 Puis, lors d'une sixième étape 106, une mesure d'un signal de fluorescence est réalisée au moyen de la sonde asymétrique 1, le capuchon 11 étant agencé autour de l'extrémité 2 de la sonde asymétrique 1.

3034869 22 Lors d'une septième étape 107, le capuchon 11 est retiré de la première extrémité 13-1 de l'ouverture 13-0 de l'élément support 13 dans laquelle il se trouvait précédemment emboîté.

5 Lors d'une huitième étape 108, une mesure d'un signal de fond est réalisée au moyen de la sonde asymétrique 1. Lors d'une neuvième étape 109, la mesure du signal de fond est soustraite à la 10 mesure du signal de fluorescence, grâce à un calculateur, pour l'obtention d'une valeur de fluorescence dans l'air au sein du capuchon 11. Lors d'une dixième étape 110, une valeur de fluorescence dans une solution fluorescente de référence est associée, au moyen du calculateur, à la valeur de 15 fluorescence dans l'air réalisée au sein du capuchon 11, en fonction d'une courbe d'étalonnage. Un facteur correctif est ensuite appliqué à ladite valeur de fluorescence dans la solution fluorescente de référence, afin que ladite valeur de fluorescence dans la solution fluorescente de référence, qui est associée à la valeur de fluorescence dans l'air au sein du capuchon 11, soit indépendante de la 20 sensibilité de la sonde asymétrique 1. Ainsi, la valeur de fluorescence dans la solution fluorescente de référence est identique, quelle que soit la sensibilité de la sonde asymétrique 1. Les étapes 105 à 110 qui viennent d'être décrites sont typiquement réalisées juste 25 avant l'utilisation de la sonde asymétrique 1, par exemple pour une mesure de fluorescence d'un tissu biologique. Autrement dit, les étapes 105 à 110 qui viennent d'être décrites sont typiquement réalisées dans un endroit différent des étapes 101 à 104.

Claims (3)

1. REVENDICATIONS1. Dispositif (10) de calibration de fluorescence pour une sonde asymétrique (1) de mesure de fluorescence, le dispositif (10) de calibration de fluorescence étant caractérisé en ce qu'il comporte : - un élément support (13) présentant une ouverture (13-0) s'étendant entre une première extrémité (13-1) et une deuxième extrémité (13-2), l'élément support (13) étant apte à être agencé de manière amovible autour de la sonde asymétrique (1) de mesure de fluorescence ; - un capuchon (11) réalisé dans un matériau ayant une fluorescence de référence, présentant une cavité (11-C) ayant une symétrie de révolution et s'emboîtant de manière amovible dans la première extrémité (13-1) de l'élément support (13), le capuchon (11) étant apte à être agencé de manière amovible autour d'une extrémité (2) de la sonde asymétrique (1) de mesure de fluorescence sans être en contact avec ladite sonde asymétrique (1) de mesure de fluorescence ; - un élément de centrage (12) s'insérant dans l'ouverture (13-0) de l'élément support (13), l'élément de centrage (12) étant apte à centrer l'extrémité (2) de la sonde asymétrique (1) de mesure de fluorescence au sein de la cavité (11-C) du capuchon (11), lorsque le capuchon (11) est emboîté autour de l'extrémité (2) de la sonde asymétrique (1) de mesure de fluorescence.
2. 2. Dispositif (10) de calibration de fluorescence selon la revendication précédente caractérisé en ce que l'élément support (13) est réalisé dans un matériau non fluorescent.
3. 3. Dispositif (10) de calibration de fluorescence selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que l'élément support (13) est réalisé dans un matériau opaque présentant une transmittance inférieure à 0,1 % pour les longueurs d'ondes visibles comprises entre 400 nm et 800 nm. 3034869 24 54. 5. 10 6. 15 7. 20 - - 25 8. 30 9. Dispositif (10) de calibration de fluorescence selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que le capuchon (11) comporte un corps principal (18) et un rebord (19) faisant saillie du corps principal (18), le corps principal (18) s'emboîtant de manière amovible dans la première extrémité (13-1) de l'élément support (13) et le rebord (19) formant une butée de positionnement du corps principal (18) dans la première extrémité (13-1) de l'élément support (13). Dispositif (10) de calibration de fluorescence selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que la cavité (11-C) du capuchon (11) comporte une paroi latérale sensiblement cylindrique. Dispositif (10) de calibration de fluorescence selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que l'élément de centrage (12) est une bague biocompatible percée d'un trou circulaire (12T) en son centre. Dispositif (10) de calibration de fluorescence selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que : la cavité (11-C) du capuchon (11) comporte une première partie (11-C1) ayant un premier diamètre et une deuxième partie (11-C2) ayant un deuxième diamètre supérieur au premier diamètre, et l'élément de centrage (12) présente à une extrémité une protubérance (16), la protubérance (16) de l'élément de centrage (12) s'emboîtant dans la deuxième partie (11-C2) de la cavité (11-C) du capuchon (11). Dispositif (10) de calibration de fluorescence selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que le capuchon (11) présente un trou de ventilation (17), dit « premier trou de ventilation », le premier trou de ventilation communiquant avec la cavité (11-C) du capuchon (11). Dispositif (10) de calibration de fluorescence selon l'une quelconque des revendications précédentes caractérisé en ce que l'élément support (13) présente un trou de ventilation (14), dit « deuxième trou de ventilation ». 3034869 25 10. Kit (20) de calibration de fluorescence comprenant une sonde asymétrique (1) de mesure de fluorescence ayant un diamètre extérieur, et un dispositif (10) de calibration de fluorescence de la sonde asymétrique (1) 5 selon l'une quelconque des revendications précédentes, le kit (20) étant caractérisé en ce que : - la sonde asymétrique (1) repose sur une embase (5), la sonde asymétrique (1) s'introduisant de manière amovible dans l'ouverture (13-0) de l'élément support (13), l'embase (5) formant une butée de 10 positionnement de la sonde asymétrique (1) dans l'ouverture (13-0) de l'élément support (13) ; - le capuchon (11) comporte un corps principal (18) et un rebord (19) faisant saillie du corps principal (18), le corps principal (18) s'emboîtant de manière amovible dans la première extrémité (13-1) de l'élément support (13) et le 15 rebord (19) formant une butée de positionnement du corps principal (18) dans la première extrémité (13-1) de l'élément support (13) ; les dimensions de l'élément support (13) et du capuchon (11) étant choisies telles que, la sonde asymétrique (1) étant introduite dans l'ouverture (13-0) de l'élément support (13) et le capuchon (11) étant emboîté dans la 20 première extrémité (13-1) de l'ouverture (13-0) de l'élément support (13), une distance (D) supérieure ou égale à trois fois le diamètre extérieur de la sonde asymétrique (1) sépare l'extrémité (2) de la sonde asymétrique (1) de la cavité (11-C) du capuchon (11), la distance (D) étant mesurée selon une direction longitudinale (Z). 25 11. Kit (20) de calibration de fluorescence selon la revendication précédente caractérisé en ce que : - la première extrémité (13-1) de l'ouverture (13-0) de l'élément support (13) présente un diamètre au moins cinq fois supérieur au diamètre extérieur de 30 la sonde asymétrique (1) ; - la cavité (11-C) du capuchon (11) présente un diamètre au moins deux fois supérieur au diamètre extérieur de la sonde asymétrique (1) ; - l'élément de centrage (12) est percé en son centre d'un trou circulaire (12- 3034869 26 T) de diamètre supérieur au diamètre extérieur de la sonde asymétrique (1), et inférieur à deux fois le diamètre extérieur de la sonde asymétrique (1). 5 12. Kit (20) de calibration de fluorescence selon l'une quelconque des revendications 10 ou 11 caractérisé en ce que la sonde asymétrique (1) est assemblée avec un manchon (3), et en ce que la deuxième extrémité (132) de l'élément support (13) présente un évasement (13-E), l'évasement de la deuxième extrémité (13-2) de l'élément support (13) coopérant avec le 10 manchon (3) de manière que, la sonde asymétrique (1) étant introduite dans l'ouverture (13-0) de l'élément support (13), l'élément support (13) se trouve en appui stable sur le manchon (3). 13. Procédé (100) de calibration de fluorescence d'une sonde asymétrique (1) 15 de mesure de fluorescence au moyen d'un dispositif (10) de calibration de fluorescence selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, le procédé comportant les étapes suivantes : - insertion (101) de l'élément de centrage (12) dans la première extrémité (13-1) de l'ouverture (13-0) de l'élément support (13) ; 20 - insertion (102) de la sonde asymétrique (1) dans la deuxième extrémité (13-2) de l'ouverture (13-0) de l'élément support (13) ; - emboîtement (103) du capuchon (11) dans la première extrémité (13-1) de l'ouverture (13-0) de l'élément support (13) ; le capuchon (11) étant alors agencé de manière amovible autour de 25 l'extrémité (2) de la sonde asymétrique (1) sans être en contact avec ladite sonde asymétrique (1) et l'extrémité (2) de la sonde asymétrique (1) étant centrée au sein de la cavité (11-C) du capuchon (11) grâce à l'élément de centrage (12). 30 14. Procédé (100) de calibration de fluorescence d'une sonde asymétrique (1) de mesure de fluorescence au moyen d'un dispositif (10) de calibration de fluorescence selon l'une quelconque des revendications 8 ou 9, le procédé comportant les étapes suivantes : - insertion (101) de l'élément de centrage (12) dans la première 3034869 27 extrémité (13-1) de l'ouverture (13-0) de l'élément support (13) ; - insertion (102) de la sonde asymétrique (1) dans la deuxième extrémité (13-2) de l'ouverture (13-0) de l'élément support (13) ; - emboîtement (103) du capuchon (11) dans la première extrémité (13-1) de 5 l'ouverture (13-0) de l'élément support (13), le capuchon (11) étant alors agencé de manière amovible autour de l'extrémité (2) de la sonde asymétrique (1) sans être en contact avec ladite sonde asymétrique (1) et l'extrémité (2) de la sonde asymétrique (1) étant centrée au sein de la cavité (11-C) du capuchon (11) grâce à l'élément de centrage (12), 10 l'élément support (13) et le capuchon (11) formant une enceinte ; - stérilisation (104) de la sonde asymétrique (1) et de l'élément de centrage (12) agencés dans ladite enceinte au moyen d'un gaz de stérilisation introduit dans ladite enceinte. 15 15. Procédé (100) de calibration de fluorescence d'une sonde asymétrique (1) de mesure de fluorescence selon l'une quelconque des revendications 13 ou 14 caractérisé en ce qu'il comporte en outre les étapes suivantes : - fixation (105) de la sonde asymétrique (1) sur un manchon (3) de manière que la deuxième extrémité (13-2) de l'élément support (13) repose en appui 20 stable sur le manchon (3) ; - réalisation (106), au moyen de la sonde asymétrique (1), d'une mesure d'un signal de fluorescence, le capuchon (11) étant agencé autour de l'extrémité (2) de la sonde asymétrique (1) ; - retrait (107) du capuchon (11) de la première extrémité (13-1) de 25 l'ouverture (13-0) de l'élément support (13) dans laquelle il se trouvait précédemment emboîté ; - réalisation (108), au moyen de la sonde asymétrique (1), d'une mesure d'un signal de fond ; - soustraction (109), au moyen d'un calculateur, de la mesure du signal de 30 fond à la mesure du signal de fluorescence, pour l'obtention d'une valeur de fluorescence dans l'air au sein du capuchon (11) ; - association (110), au moyen du calculateur, d'une valeur de fluorescence dans une solution fluorescente de référence à la valeur de fluorescence 3034869 28 dans l'air au sein du capuchon (11), en fonction d'une courbe d'étalonnage, et application d'un facteur correctif à ladite valeur de fluorescence dans la solution fluorescente de référence, afin que ladite valeur de fluorescence dans la solution fluorescente de référence, qui est associée à la valeur de fluorescence dans l'air au sein du capuchon (11), soit indépendante de la sensibilité de la sonde asymétrique (1).