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FR2997705B1 - Nucleotide 3' bloquant la traduction des proteines (sasb) - Google Patents

Nucleotide 3' bloquant la traduction des proteines (sasb)

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FR2997705B1
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peptide
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Arnaud Tupinier
Caroline Falck
Sylvie Chevillard
Emilie Lefevre
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Abstract

Cette invention décrit un procédé permettant de bloquer réversiblement la synthèse d'une protéine cible dans un système eucaryote ou procaryote en ciblant l'ARNm de du gène correspondant. Elle permet également de bloquer réversiblement la synthèse de toutes les protéines dans un système en bloquant au moins un gène spécifiquement exprimé dans ledit système sous sa forme d'ARN messager. Le procédé consiste en au moins un acide nucléique dit bloquant (1), ou séquence anti-sens bloquant (SASB) ou une combinaison quelconque de SASB, un SASB donné présentant d'une taille N comprise entre 3 à 50 nucléotides, tel que chaque acide nucléique bloquant présente à l'extrémité 3', trois nucléotides formant un anti-codon de terminaison (2) de la traduction (« anti-ter ») de séquence complémentaire à un codon de terminaison de traduction (3) («codon ter ») et plus particulièrement complémentaire au codon ter de son ARNm cible, les N-3 nucléotides restant (5), dudit acide nucléique bloquant, étant complémentaires des N-3 acides nucléiques suivant le codon stop de l'ARNm cible. Un Acide nucléique bloquant, en s'hybridant sur son ARNm cible, va bloquer l'action des facteurs de relargage du ribosome, interrompant la synthèse protéique en séquestrant le ribosome dans un complexe ARNm/acide nucléique bloquant/peptide en cours de synthèse. Lorsque suffisamment de SASB sont présents dans le système, le blocage de tous les ribosomes conduit à l'arrêt de la synthèse protéique. Le ribosome et le peptide bloqués pourront être relargués par l'action de la puromycine. La puromycine, étant intégrée en C terminal du peptide au moment du relargage permet d'intégrer au peptide un insert présentant différents types de fonctions et notamment des fonctions de toxicité, de contraste pour l'imagerie ou d'inhibition.
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