FR2990208A1 - Derives de nucleosides, produits et compositions les comprenant, leurs utilisations therapeutiques et leurs procedes de synthese - Google Patents

Abstract

L'invention concerne des dérivés analogues de nucléosides à titre de médicament, ainsi que lesdits dérivés pour le traitement d'infections virales et notamment pour le traitement du virus de l'hépatite B (VHB), du virus de l'hépatite C (VHC), du virus de la Dengue (VD) et du virus de la diarrhée bovine virale (VDBV). L'invention concerne également un produit contenant lesdits dérivés et au moins un deuxième actif comme produit de combinaison pour une administration simultanée, séparée ou étalée dans le temps, dans le traitement d'infections virales, ainsi qu'une composition pharmaceutique comprenant lesdits dérivés et un support pharmaceutiquement acceptable. Enfin, l'invention concerne des procédés de synthèse desdits dérivés.

Description

Dérivés de nucléosides, produits et compositions les comprenant, leurs utilisations thérapeutiques et leurs procédés de synthèse L'invention concerne des dérivés analogues de nucléosides, dans le domaine de la chimie du médicament. Plus particulièrement, l'invention concerne des dérivés 5 analogues de nucléosides pour leur application comme médicaments dans les traitements antiviraux. Plus particulièrement encore, l'invention concerne des dérivés analogues de nucléosides pour leur application comme médicaments dans le traitement des infections virales 10 telles que notamment le virus du Nil occidental, le virus de l'hépatite C (VHC), le virus de la Dengue (VD) et le virus de la diarrhée bovine virale (VDBV). Le virus de l'hépatite C (VHC) est classé dans la famille Flaviviridae, dans le genre Hepacivirus. Il s'agit 15 d'un brin d'ARN monocaténaire linéaire à polarité positive qui code pour une polyprotéine d'environ 3010 résidus d'acides aminés. Les infections par le VHC sévissent dans le monde entier. D'après l'OMS, le VHC montre une prévalence 20 mondiale élevée qui dépasse les 10% dans certains pays d'Afrique. Il existe donc à ce jour un besoin urgent de développer de nouvelles molécules actives qui peuvent être utilisées seules, en adaptant les traitements, ou en 25 association avec le ou les médicaments existants afin de minimiser les problèmes de résistance. La découverte de nouveaux médicaments dans le traitement du VHC reste donc une priorité mondiale. Les systèmes les plus utilisés pour la recherche de 30 nouveaux médicaments à potentiel antiviral restent les virus analogues de la famille des Flaviviridae. Parmi ces virus, le BVDV (Bovine viral diarrhea virus) est le plus utilisé. Il appartient au genre Pestivirus. Comme tous les membres de la famille des Flaviviridae, VHC et BVDV partagent des similarités au niveau structural, génomique et très certainement au niveau de leur cycle viral. L'organisation structurale des génomes des 2 virus est représentée ci-dessous : p7 NS2 NS4A NS4B HM/ El E2 NS3 NS5A NS5B NprO c P7 NS4A NS4B BVDV E0 El E2 NS2 NS3 NS5A NS5B La similarité de la séquence en acides aminés est de l'ordre de 20%. Néanmoins, la concordance des profils hydropathiques suggère que les deux virus codent pour des protéines de fonctions équivalentes. En effet, les deux virus utilisent des protéases NS3 15 et NS3 hélicase/NTPase similaires, et des ARN polymérases ARN dépendantes NS5B très proches. Ces deux protéines sont des cibles majeures d'agents antiviraux. En outre, les 2 virus apparaissent utiliser le récepteur au LDL pour leur entrée dans la cellule, et 20 présenteraient des mécanismes de maturation et d'assemblage proches. Les caractéristiques de l'infection sont également similaires puisque Pestivi rus et Hepaci virus sont à l'origine d'infections à long terme, au cours desquelles 25 les virus développent la capacité d'échapper au système immunitaire. Les similarités structurales, génomiques et les similitudes des cycles viraux que partagent ces deux virus, ainsi que la capacité du BVDV à réaliser des cycles de 30 réplication complets in vitro, font du BVDV un modèle de substitution majeur au virus de l'hépatite C (Victor E. Buckwold, Brigitte E. Beer and Ruben O. Donis, Bovine viral diarrhea virus as a surrogate model of hepatitis C virus for the evaluation of antiviral agents. Antivir. Res., 2003. 60 (1-15)). Un certain nombre de molécules actuellement testées en clinique sont, en effet, issues de criblage BVDV. Enfin, étant non infectieux pour l'Homme, le virus peut être cultivé en zone de confinement P2.

La ribavirine et l'interféron a présentent tous deux des activités in vitro sur le BVDV. La ribavirine est un anti-métabolite nucléosidique antiviral qui bloque la synthèse des acides aminés. Elle peut être utilisée à la fois contre les virus à ADN et à ARN. Elle est actuellement le seul médicament actif contre le virus de l'hépatite C, utilisée en association avec l'interféron a-pégylé. Cependant, cette bithérapie présente une certaine toxicité et un nombre considérable, entre environ 40% à 50% des patients, ne répondent pas à cette thérapie. Il existe également des cas de rechute lorsque l'administration du traitement est arrêtée. Le virus de l'hépatite C est également devenu une cause majeure du cancer du foie et est l'une des plus principales indications de transplantation hépatique (Leonard B. Seeff Natural History of Chronic Hepatitis C Hepathology, 2002,36, 35-46). Cependant, la transplantation hépatique n'est pas un remède pour l'hépatite C. En effet, lors d'une transplantation, le virus reste présent dans le corps du 30 patient et favorise le rejet du greffon ; La dengue ou fièvre de la dengue (ET), la plus fréquente des arboviroses humaines, est transmise par des moustiques du genre Aedes, et sévit dans toutes les régions tropicales et subtropicales du globe. La FD est considérée 35 actuellement comme une maladie émergente fortement préoccupante du fait de son extension géographique spectaculaire et de sa mortalité en hausse ces dernières années. On estime à plusieurs millions le nombre de cas annuels d'infections, dont 500 000 formes graves et 30 000 décès. La FD représente la première cause virale de mortalité émergente dans le monde, et en particulier dans les départements d'outre-mer. En Europe, la FD est non seulement devenue la deuxième cause de fièvre du voyageur, mais sa réimplantation constitue une réelle menace. En l'absence de traitement spécifique et de vaccin, le seul recours réside dans la prévention collective par la lutte anti-vectorielle, l'assainissement et les précautions sanitaires. Compte tenu de ce qui précède, il existe à ce jour un 15 besoin urgent d'investir dans de nouvelles pistes thérapeutiques tout en développant de nouveaux composés proposant une alternative aux traitements antiviraux existants, afin de permettre notamment le traitement de patients résistants aux thérapies existantes. Il existe 20 également un besoin de développer de nouveaux composés permettant de répondre au problème de l'échappement thérapeutique. L'échappement thérapeutique ou tachyphylaxie désigne le ralentissement de l'effet thérapeutique après une période d'utilisation de médicaments. Enfin, il existe 25 à ce jour un besoin de développer de nouveaux composés présentant une toxicité inférieure aux composés actuellement disponibles. La solution au problème posé a pour objet des composés de formule générale : 30 dans laquelle : - X est choisi parmi N ou CH ; - le groupement aryle Ar est choisi parmi : - un groupement phényle ; ou - un hétérocycle à 5 atomes choisi parmi furane, thiophène, pyrole, imidazole, pyrazole, oxazole, thiazole ; ou - un hétérocycle à 6 atomes choisi parmi pyridine, pyrimidine, pyridazine ; ou - une combinaison sous forme fusionnée de ceux- ci, sous forme de cycles accolés 5/6 ; - R1 est choisi parmi : - un groupement pentose cyclique sous forme furanique présentant des groupements OH libres ou substitués sous forme de dérivés d'esters, d'amides, de sulfonamides ou par des groupements mono-, bi- ou triphosphate ; ou - un groupement hexose sous forme pyranique présentant des groupements OH libres ou substitués sous forme de dérivés d'esters, d'amides, de sulfonamides ou par des groupements mono-, bi- ou triphosphate ; - R2, R3 et R4 sont choisis parmi : - un atome d'hydrogène ; - une chaine alkyle linéaire ou ramifiée ayant de 3 à 10 atomes de carbone ; ou - une chaine alkyle linéaire ou ramifiée ayant de 3 à 10 atomes de carbone, substituée par un groupement halogène, -OH, -NH2, -CONH2, -CO2H, -0O2Me, -0O2Et, -ON, -C(NH2)NH, -C(NHMe)NH, -C(NHEt)NH ; ou - un halogène choisi parmi Cl, Br, I et F ; ou - un groupement -OH, -NH2, -CONH2, -CO2H, -0O2Me, -0O2Et, -ON, -C(NH2)NH, -C(NHMe)NH, -C(NHEt)NH, ou - une combinaison de ceux-ci ; leurs pro-drogues, racémiques, énantiomères, diastéréoisomères et leurs mélanges, leurs tautomères et leurs sels pharmaceutiquement acceptables, à titre de médicament.

Le Demandeur a pu mettre en évidence que les composés selon l'invention permettent de diminuer la multiplication des virus, notamment le virus de l'hépatite C (VHC), le virus de la Dengue (VD), le virus du Nil occidental et le virus de la diarrhée bovine virale (VDBV) dans des lignées cellulaires FT313, MK2 et MDBK. Ceci est notamment démontré aux exemples 1 à 4. En outre, le Demandeur a pu mettre en évidence que les composés selon l'invention ont une action sur différents virus à ARN.

Comme cela est démontré dans l'exemple 1, les composés selon l'invention ne montrent pas de toxicité apparente sur les cellules humaines non infectées (Hep G2, MK2). De plus, comme cela est démontré aux exemples 2 et 3, les composés selon l'invention sont des inhibiteurs de l'effet cytopathogène du virus de la dengue et/ou du virus de la diarrhée bovine virale. Ce sont donc des agents potentiels pour lutter contre ces virus et contre le virus de l'hépatite VHC, comme démontré avec le génome viral JFH1 génotype 2a.

La présente invention a également pour deuxième objet un produit contenant un composé selon l'invention et au moins un deuxième actif comme produit de combinaison pour une administration simultanée, séparée ou étalée dans le temps, dans le traitement d'infections virales.

Elle a également pour troisième objet une composition pharmaceutique comprenant un composé selon l'invention et un support physiologiquement acceptable. Enfin, elle a pour quatrième objet des procédés de synthèse des composés selon l'invention.

Selon l'invention, les différents composés précédemment décrits peuvent notamment être synthétisés selon les différents procédés décrits ci-dessous. Dans ces procédés, les groupements X et R1 sont tels que précédemment définis. Le groupement R2, quant à lui correspond au groupement : = L'invention sera mieux comprise à la lecture de la 10 description non limitative qui suit, rédigée au regard des dessins annexés, dans lesquels : - les figures 1 et 2 représentent les résultats d'analyse par RT-qPCR sélectionnés (tests anti-VHC, génome JFH1) ayant pour but de montrer que certains 15 composés sont actifs avec des 1050 inférieurs à 5 pM. Les composés selon l'invention sont des composés de formule générale : 20 dans laquelle : X est choisi parmi N ou CH ; - le groupement aryle Ar est choisi parmi : - un groupement phényle ; ou - un hétérocycle à 5 atomes choisi parmi furane, 25 thiophène, pyrole, imidazole, pyrazole, oxazole, thiazole ; ou un hétérocycle à 6 atomes choisi parmi pyridine, pyrimidine, pyridazine ; ou - une combinaison sous forme fusionnée de ceux-ci, sous forme de cycles accolés 5/6 ; - R1 est choisi parmi : - un groupement pentose cyclique sous forme furanique présentant des groupements OH libres ou substitués sous forme de dérivés d'esters, d'amides, de sulfonamides ou par des groupements mono-, bi- ou triphosphate ; ou - un groupement hexose sous forme pyranique présentant des groupements OH libres ou substitués sous forme de dérivés d'esters, d'amides, de sulfonamides ou par des groupements mono-, bi- ou triphosphate ; - R2, R3 et R4 sont choisis parmi : - un atome d'hydrogène ; - une chaine alkyle linéaire ou ramifiée ayant de 3 à 10 atomes de carbone ; ou - une chaine alkyle linéaire ou ramifiée ayant de 3 à 10 atomes de carbone, substituée par un groupement halogène, -OH, -NH2, -CONH2, -CO2H, -0O2Me, -0O2Et, -CN, -C(NH2)NH, -C(NHMe)NH, -C(NHEt)NH ; ou - un halogène choisi parmi Cl, Br, I et F ; ou - un groupement -OH, -NH2, -CONH2, -CO2H, -0O2Me, -0O2Et, -ON, -C(NH2)NH, -C(NHMe)NH, -C(NHEt)NH, ou - une combinaison de ceux-ci ; leurs pro-drogues, racémiques, énantiomères, diastéréoisomères et leurs mélanges, leurs tautomères et 30 leurs sels pharmaceutiquement acceptables, à titre de médicament. Les sels pharmaceutiquement acceptables sont des sels d'addition avec des acides inorganiques tels que chlorhydrate, bromhydrate, iodhydrate, sulfate, phosphate, 35 diphosphate et nitrate ou avec des acides organiques tels que acétate, maléate, fumarate, tartrate, succinate, citrate, lactate, méthanesulfonate, p-toluène sulfonate, pamoate et stéarate. Entrent également dans le champ de la présente invention, lorsqu'ils sont utilisables, les sels formés à partir de bases telles que l'hydroxyde de sodium ou de potassium. Selon l'invention, les différents composés précédemment décrits peuvent notamment être synthétisés selon les différents procédés décrits ci-dessous.

Selon une première alternative, les composés de l'invention, lorsque X est N sont obtenus par une réaction en one-pot, dans laquelle un azide (R1N3) réagit avec un alcyne (R2,-CEC-H) en présence de cuivre (catalyseur) pour conduire aux composés triazoles di-substitués, selon le schéma réactionnel suivant : ; Ri= R2 N3 R1/ Selon une seconde alternative, les composés de l'invention, lorsque X est CH, sont obtenus par une succession de réactions avec deux étapes clés : une glycosylation pour introduire le groupement R1 et une réaction de couplage au palladium pour introduire le groupement R2, en présence de catalyseurs pour conduire aux composés imidazoles di-substitués, selon le schéma réactionnel suivant : Br ou I Br ou I ;R2= H De préférence, les composés selon l'invention sont des composés de formule générale : dans laquelle : X est choisi parmi N ou CH ; - le groupement aryle Ar est choisi parmi : - un groupement phényle ; ou un hétérocycle à 5 atomes choisi parmi furane, thiophène, pyrole, imidazole, pyrazole, oxazole, thiazole ; ou un hétérocycle à 6 atomes choisi parmi pyridine, pyrimidine, pyridazine ; R1 est choisi parmi les groupements : HOY° fi-D-Ribose HO HO OH p-L-Ribose 0 HO/Ç NCA Hd OH p-D-Arabinose H0/1'5 HO 0H 13-L-Arabinose OU OU OU 0 H0/0;', Hd. 3-D-2-désoxyRibose OU OU FICr" y HO 13-L-2-désoxyRibose ou , L^CH3 Nd 2'-methyl-p-D-2'-désoxyRibose HO/i'S HO --CH3 2'-methyl-3-L-2'-désoxyRibose HO.\ F 2'-fluoro-3-D-2'-désoxyRibose H0/1'5 ).'\ HO F 2'-fluoro-p-L-2'-désoxyRibose OU OU OU OU HO/ee*-0Nr'..'2, . 4-CH3 HO'' 2'-methyl-f3-D-Ribose 0 HO5 ,CH3 HO OH 2'-methyl-p-L-Ribose HO/***.1(0 Hd 2'-fluor-2-methyl-f3-D-Ribose HO F 2'-fluor-2'-methyl-f3-L-Ribose HO H00._\)' HO HO Glucose 10 éventuellement substitués sous forme de dérivés d'esters, d'amides, de sulfonamides ou par des groupements mono-, bi- ou triphosphate ; - R2, R3 et R4 sont choisis parmi : - un atome d'hydrogène ; 15 - une chaine alkyle linéaire ou ramifiée ayant de 3 à 10 atomes de carbone ; ou - une chaine alkyle linéaire ou ramifiée ayant de 3 à 10 atomes de carbone, substituée par un groupement halogène, -OH, -NH2 r ou ou OU OU -CONH2, -CO2H, -0O2Me, -0O2Et, -ON, -C(NH2)NH, -C(NHMe)NH, -C(NHEt)NH ; ou - un halogène choisi parmi Cl, Br, I et F ; ou - un groupement -OH, -NH2, -CONH2, -CO2H, -0O2Me, -0O2Et, -CN, -C(NH2)NH, -C(NHMe)NH, -C(NHEt)NH, ou - une combinaison de ceux-ci ; leurs pro-drogues, racémiques, énantiomères, diastéréoisomères et leurs mélanges, leurs tautomères et 10 leurs sels pharmaceutiquement acceptables, à titre de médicament. De préférence encore, les composés selon l'invention sont des composés de formule générale : 15 dans laquelle : - X est N ; - le groupement aryle Ar est choisi parmi : - un groupement phényle ; ou - un hétérocycle à 5 atomes choisi parmi furane, 20 thiophène, pyrole, imidazole, pyrazole, oxazole, thiazole ; ou - un hétérocycle à 6 atomes choisi parmi pyridine, pyrimidine, pyridazine ; - R1 est choisi parmi les groupements : 25 p-D-Ribose OU HO/'', HO OH I3-L-Ribose ou 13-D-Arabinose ou H0/1.5 HO -OH 13-L-Arabinose ou 0 \ 3-D-2-désoxyRibose HO5 HO 13-L-2-désoxeibose ou ou 0 HO Y??, -CH3 HOs- 2'-methyl-p-D-2'-désoxeibose 0 HO/"1 s\ HO -CH3 2'-methyl-p-L-2'-désoxyRibose ou 0 HO HO' 2'-fluoro-p-D-2'-désoxyRibose HO/5 HO 2'-fluoro-3-L-2'-désoxyRibose OU OU ou H0o)A, Hd -OH 2'-methyl-3-D-Ribose HO/I ,CH3 HO OH 2'-methyl-p-L-Ribose 0 HO Hd 2'-fluor-2'-methyl-3-D-Ribose 2'-fluor-2'-methyl-p-L-Ribose OU OU OU OU HO HO HO HO Glucose éventuellement substitués sous forme de dérivés d'esters, d'amides, de sulfonamides ou par des groupements mono-, bi- ou triphosphate ; - R2, R3 et R4 sont choisis parmi : - un atome d'hydrogène ; - une chaine alkyle linéaire ou ramifiée ayant de 3 à 10 atomes de carbone ; ou - une chaine alkyle linéaire ou ramifiée ayant de 3 à 10 atomes de carbone, substituée par un groupement halogène, -OH, -NH2, -CONH2, -CO2H, -0O2Me, -0O2Et, -CN, -C(NH2)NH, -C(NHMe)NH, -C(NHEt)NH ; ou - un halogène choisi parmi Cl, Br, I et F ; ou - un groupement -OH, -NH2, -CONH2, -CO2H, -0O2Me, -0O2Et, -CN, -C(NH2)NH, -C(NHMe)NH, -C(NHEt)NH, ou - une combinaison de ceux-ci ; leurs pro-drogues, racémiques, énantiomères, diastéréoisomères et leurs mélanges, leurs tautomères et leurs sels pharmaceutiquement acceptables, à titre de médicament. Plus préférentiellement encore, les composés selon l'invention sont des composés de formule générale : dans laquelle : - X est N ; - le groupement aryle Ar est un groupement phényle ; - R1 est choisi parmi : 0 Hd. p-D-Ribose HO OH p-L-Ribose HO/Ç0 Hd OH f3-D-Arabinose HO;2' 0 p-D-2-désoxyRibose HO/1'1 HO 13-L-2-désoxyRibose - R2 et R3 sont des atomes d'hydrogène ; et - R4 est un atome d'hydrogène ou une chaine alkyle 15 linéaire ou ramifiée ayant 3, 4, 5 ou 6 atomes de carbone ; leurs pro-drogues, racémiques, énantiomères, diastéréoisomères et leurs mélanges, leurs tautomères et ou OU OU OU leurs sels pharmaceutiquement acceptables, à titre de médicament. A titre d'exemples non limitatifs de composés particulièrement préférés selon l'invention, on peut citer 5 les composés : (2R,3S,4R,5R)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-pheny1-1H1,2,3-triazol-1-yl) tetrahydrofuran-3,4-diol ; (2S,3R,4S,5S)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-pheny1-1H1,2,3-triazol-1-yl) tetrahydrofuran-3,4-diol; 10 - (2R,3S,4R,5R)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-(4- propyl pheny1)-1H-1,2,3-triazol-1-y1)tetrahydrofuran- 3,4- diol; - (2S,3R,4S,5S)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-(4- propyl pheny1)-1H-1,2,3-triazol-1-y1)tetrahydrofuran- 3,4- 15 diol; (2R,3S,5R)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-(4-propyl pheny1)-1H-1,2,3-triazol-1-y1)tetrahydrofuran-3-ol; (2S,3R,5S)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-(4-propyl pheny1)- 1H-1,2,3-triazol-1-yl)tetrahydrofuran-3- 20 ol; (2R,3S,5S)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-(4-propyl pheny1)- 1H-1,2,3-triazol-1-yl)tetrahydrofuran-3- ol; (2S,3R,5R)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-(4-propyl 25 pheny1)- 1H-1,2,3-triazol-1-yl)tetrahydrofuran-3- ol; (2R,3R,4R,5R)-5-(hydroxymethyl)-3-methy1-2-(4-ptoly1-1H-1,2, 3-triazol-1-yl)tetrahydrofuran-3,4- diol; 30 (2S,3S,4S,5S)-5-(hydroxymethyl)-3-methy1-2-(4-p- toly1-1H-1,2,3-triazol-1-yl)tetrahydrofuran-3,4- diol; - (2R,3S,4S,5R)-2-(hydroxymethyl)-4-methy1-5-(4-(4- propylpheny1)-1H-1,2,3-triazol-1- 35 y1)tetrahydrofuran-3-ol; - 2S,3R,4R,5S)-2-(hydroxymethyl)-4-methy1-5-(4-(4- propylpheny1)-1H-1,2,3-triazol-1- yl)tetrahydrofuran-3-ol; (2R,3R,4R,5R)-5-(hydroxymethyl)-3-methy1-2-(4-p- toly1-1H-imidazol-1-yl)tetrahydrofuran-3,4-diol; (2S,3S,4S,5S)-5-(hydroxymethyl)-3-methy1-2-(4-p- toly1-1H-imidazol-1-yl)tetrahydrofuran-3,4-diol; - (2R,3S,4S,5R)-2-(hydroxymethyl)-4-methy1-5-(4-(4- propylpheny1)-1H-imidazol-1-y1)tetrahydrofuran-3- ol; - (2S,3R,4R,5S)-2-(hydroxymethyl)-4-methy1-5-(4-(4- propylpheny1)-1H-imidazol-1-y1)tetrahydrofuran-3- ol; (2R,3R,4R,5R)-5-(hydroxymethyl)-3-methy1-2-(4- pheny1-1H-1,2,3-triazol-1-yl)tetrahydrofuran-3,4- diol; (2S,3S,4S,5S)-5-(hydroxymethyl)-3-methy1-2-(4- pheny1-1H-1,2,3-triazol-1-yl)tetrahydrofuran-3,4- diol; (2R,3S,4S,5R)-2-(hydroxymethyl)-4-methy1-5-(4- pheny1-1H-1,2,3-triazol-1-y1)tetrahydrofuran-3-ol; (2S,3R,4R,5S)-2-(hydroxymethyl)-4-methy1-5-(4- pheny1-1H-1,2,3-triazol-1-y1)tetrahydrofuran-3-ol; (2R,3R,4R,5R)-5-(hydroxymethyl)-3-methy1-2-(4- pheny1-1H-imidazol-1-y1)tetrahydrofuran-3,4-diol; (2S,3S,4S,5S)-5-(hydroxymethyl)-3-methy1-2-(4- pheny1-1H-imidazol-1-y1)tetrahydrofuran-3,4-diol; (2R,3S,4S,5R)-2-(hydroxymethyl)-4-methy1-5-(4- pheny1-1H-imidazol-1-y1)tetrahydrofuran-3-ol; et (2S,3R,4R,5S)-2-(hydroxymethyl)-4-methy1-5-(4- pheny1-1H-imidazol-1-yl)tetrahydrofuran-3-ol; De façon particulièrement avantageuse, les composés selon l'invention sont choisis parmi : (2R,3S,4R,5R)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-pheny1-1H- 1,2,3-triazol-1-yl)tetrahydrofuran-3,4-diol ; (2S,3R,4S,5S)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-pheny1-1H1,2,3-triazol-1-yl) tetrahydrofuran-3,4-diol; - (2R,3S,4R,5R)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-(4- propyl pheny1)-1H-1,2,3-triazol-1-y1)tetrahydrofuran- 3,4- diol; - (2S,3R,4S,5S)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-(4- propyl pheny1)-1H-1,2,3-triazol-1-y1)tetrahydrofuran- 3,4- diol; (2R,3S,5R)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-(4-propyl pheny1)-1H-1,2,3-triazol-1-y1)tetrahydrofuran-3-ol; (2S,3R,5S)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-(4-propyl pheny1)- 1H-1,2,3-triazol-1-yl)tetrahydrofuran-3- ol; (2R,3S,5S)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-(4-propyl pheny1)- 1H-1,2,3-triazol-1-yl)tetrahydrofuran-3- 01; et (2S,3R,5R)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-(4-propyl pheny1)- 1H-1,2,3-triazol-1-yl)tetrahydrofuran-3- ol.

Selon l'invention, les composés peuvent se présenter sous forme de pro-drogues. On entend par pro-drogue, une substance pharmacologique (un médicament) qui est administrée sous une forme inactive (ou beaucoup moins active que son métabolite). Une fois administrée, la pro- drogue est métabolisée in vivo en un métabolite actif. Plus particulièrement, les pro-drogues peuvent être classées en deux catégories basées sur leurs sites de conversion dans leur forme active définitive. Les pro-drogues de type I sont celles où la conversion 30 est intracellulaire. Les pro-drogues de type II sont celles qui sont converties extracellulairement, notamment dans les sucs digestifs ou la circulation systémique. Les deux types peuvent être encore subdivisés en sous-type A ou B, basés sur des critères supplémentaires. Ceux 35 de type IA et 13 se distinguent par le site d'activation qui est le site d'action thérapeutique ou non. Pour le type IIA et IIB, ils sont classés selon que la conversion a lieu dans le tractus gastro-intestinal ou la circulation systémique.

Avantageusement, les composés selon l'invention peuvent comprendre des groupements permettant d'augmenter leur solubilité, leur pénétration cellulaire et leur biodisponibilité, préférentiellement en substitution des groupements OH du groupement R1 décrit ci-dessus, par des substituants R6, R7 et/ou R8 définis ci-après. Aussi, à titre d'exemples non limitatifs de pro-drogues des composés selon l'invention, on peut citer, dans le cas ou 1<1= Ribose : - les prodrogues dans lesquelles les groupements OH de 15 R1 sont substitués par des groupements R6, R7 et R8 de formule générale: /R2 R4 1117,Ate Contenant des groupements R6, R7 ou R8, ou une combinaison de ceux-ci de type acide aminés ou analogues, 20 sulfates, sulfoniums ou phosphoniums dans laquelle : - R6 est préférentiellement un acide aminé, un dérivé sulfonium ou phosphonium ; - R7 et R8 sont préférentiellement des acides aminés identiques ou différents tels que 25 glycine, valine ou leucine. - les pro-drogues dans lesquelles le groupement OH en position 5' de R1 est substitué par un groupement de formule générale suivante, dans le cas ou R1 = Ribose : c'est-à-dire des pro-drogues de phosphate ou monophosphates comme les phosphoramidates contenant des groupements R9 et R10, ou une combinaison de ceux-ci-de type acide aminés ou analogues amines, alcools, ou soufrés dans laquelle : - R9 est préférentiellement un acide aminé tel que l'alanine, la leucine ou la valine ou des analogues d'amine ; - R10 est un phényle ou un analogue de phényle tel que CH3Ph ou CH3OPh. A titre d'exemple non limitatif de maladies virales pour lesquelles les composés selon l'invention apparaissent adaptés, on peut citer les infections virales telles que notamment le virus du Nil occidental et le virus de l'hépatite C (VHC), le virus de la Dengue (VD). De façon préférentielle, les composés selon l'invention sont adaptés aux traitements des virus de l'hépatite C (VHC), de la Dengue (VD) et de la diarrhée 20 bovine virale (VDBV). A titre d'exemples non limitatifs de traitements pour lesquels les composés sont adaptés, on peut citer le traitement des pestivirus et herpesvirus. Un autre objet de l'invention concerne un produit 25 contenant un composé selon l'invention et au moins un deuxième actif comme produit de combinaison pour une administration simultanée, séparée ou étalée dans le temps, dans le traitement d'infections virales. Avantageusement, le deuxième principe actif est un 30 agent antiviral direct ou indirect ou un agent diminuant les effets secondaires liés aux composés selon l'invention.

De préférence, le deuxième actif est un agent antiviral choisi parmi les composés selon l'invention ou parmi la ribavirine, le télaprevir, le bocéprevir, le PSI-7977 ou le IDX184.Par utilisation thérapeutique simultanée, au sens de la présente invention, on entend une administration d'au moins deux principes actifs par la même voie et au même moment ou sensiblement au même moment. Par utilisation thérapeutique séparée, au sens de la présente invention, on entend notamment une administration 10 d'au moins deux principes actifs au même moment ou sensiblement au même moment par des voies différentes. Par utilisation thérapeutique étalée dans le temps, on entend une administration d'au moins deux principes actifs à des moments différents, la voie d'administration étant 15 identique ou différente. Plus particulièrement, on entend un mode d'administration selon lequel l'ensemble de l'administration de l'un des principes actifs est effectué avant que l'administration de l'autre ou des autres ne 20 commence. On peut ainsi administrer l'un des principes actifs pendant plusieurs mois avant d'administrer l'autre ou les autres principes actifs. Il n'y a pas de traitement simultané dans ce cas. On peut aussi envisager une 25 administration alternée de chaque principe actif pendant plusieurs semaines. Un autre objet de l'invention concerne une composition pharmaceutique comprenant un composé selon l'invention et un support pharmaceutiquement acceptable. 30 La voie d'administration de la composition selon l'invention peut être par voie orale, parentérale, topique, oculaire. De préférence, la composition pharmaceutique est conditionnée sous une forme convenant à une application par voie orale.

Ainsi, par voie orale, la composition, peut se présenter sous forme de comprimés, de gélules, de dragées, de sirops, de suspensions, de solutions, de poudres, de granulés, d'émulsions, de suspensions de microsphères ou nanosphères ou de vésicules lipidiques ou polymériques permettant une libération contrôlée. De façon alternative, lorsque la composition selon l'invention est administrée par voie parentérale, elle peut se présenter sous forme de solutions ou suspensions pour perfusion ou pour injection intramusculaire, intraveineuse ou sous-cutanée. De façon alternative encore, lorsque la composition selon l'invention est administrée par voie topique, la composition pharmaceutique selon l'invention est plus particulièrement destinée au traitement de la peau et des muqueuses et peut se présenter sous forme liquide, pâteuse, ou solide, et plus particulièrement sous forme d'onguents, de solutions aqueuses, hydroalcooliques ou huileuses, de dispersions du type lotion, de gels aqueux, anhydres ou lipophiles, de poudres, de tampons imbibés, de syndets, de lingettes, de sprays, de mousses, de sticks, de shampoings, de compresses, de bases lavantes, d'émulsions de consistance liquide ou semi-liquide du type lait, obtenues par dispersion d'une phase grasse dans une phase aqueuse (HIE) ou inversement (E/H), ou de suspensions ou émulsions de consistance molle, semi-liquide ou solide du type crème, gel ou pommade. Elle peut également se présenter sous forme de suspensions de microsphères ou nanosphères ou de vésicules lipidiques ou polymériques ou de patchs polymériques ou gélifiés permettant une libération contrôlée. Selon l'invention, le sujet à traiter est préférentiellement un mammifère. Préférentiellement encore, il s'agit d'un humain, d'un équin, d'un bovin, d'un ovin, 35 d'un caprin, d'un canin ou d'un félin. Plus préférentiellement encore, le patient à traiter est un humain ou un bovin. - Exemples - Exemple 1 : Test de toxicité cellulaire des analogues des 5 nucléosides étudiés sur des cellules de foie FT313 Dans cet exemple, quatre composés dérivés de nucléosides ont été évalués sur des cellules humaines d'hépatocytes FT313 isolées d'une pièce de lobectomie et infectées par la souche virulente JFH1 du virus de 10 l'hépatite C (VHC). Il s'agit des composés repris dans le tableau 1 suivant : Tableau 1 : Code Formule chimique de la Nom chimique de la molécule molécule molécule Ek26 N=N (2R,3S,4R,5R)-2- HO 0).....iN' y to (hydroxymethyl)-5-(4-(4- propylpheny1)-1H-1,2,3- triazol-1- yl)tetrahydrofuran-3,4-diol Hd --OH Rb2a N=N ' (2R,3R,4R,5R)-2- (acetoxymethyl)-5-(4-(4- propylpheny1)-1H-1,2,3- triazol-1- yl)tetrahydrofuran-3,4-diy1 diacetate Ac0 °)......N y 110 . Ac d 0Ac BA1 N=N (2S,3R,4S,5S)-2- (hydroxymethyl)-5-(4- pheny1-1H-1,2,3-triazol-1- yl)tetrahydrofuran-3,4-diol ' HO/i,..5°'-N y - HO OH BA2 N=N (2S,3R,4S,5S)-2- ' (hydroxymethyl)-5-(4-(4- propylpheny1)-1H-1,2,3- triazol-1- yl)tetrahydrofuran-3,4-diol HO5°,.-N y . HO OH 15 Afin de tester l'action des quatre composés Ek26, Rb2a, BA1 et BA2 explicités ci-dessus sur la réplication de l'ADN viral de la souche JFH1 du VHC, les cellules FT313 sont incubées pendant 4 jours avec et sans lesdits composés à différentes concentrations allant de 5pM à 30uM. La 20 ribavirine, médicament actuel contre le VHC, est utilisée comme contrôle positif.

L'expérience a été réalisée comme suit. Le matin 165pL de la solution stock contenant la souche virulente JFH1 du VHC ont été ajoutées à 11mL de milieu, ce qui représente environ 0,12 Génome équivalent 5 par cellule (Geq / cellule). Cette infection est faite par virions produits en culture. Il s'agit de virions JFH1 de génotype 2a à 0,12 Geq / cellule. Un volume total (Vt) de 500pL de solution a été 10 déposé dans chaque puits. Le soir les cellules ont été lavées trois fois au Williams' Medium E (WME) et lmL de milieu contenant un des composés à tester a été ajouté. Le tableau 2 ci-dessous récapitule les concentrations 15 utilisées pour chacun des composés. Tableau 2 : NT Inf RBV (pM) 5 30 Ek26 (pM) 5 20 RB2a (pM) 5 30 BA1 (pM) 5 30 BA2 (pM) 5 30 Les expériences ont été réalisées en duplicate. Ici, le terme « NT » signifie « Non transfectées » et désigne 20 que les cellules étudiées n'ont pas été transfectées et qu'elles ne sont donc pas infectées. Le terme « RBV » signifie Ribavirine, qui est le contrôle positif. Il s'agit donc de cellules saines non infectées. Le terme « Inf » désigne quant à lui les cellules infectées par le virus. 25 Trois jours après l'infection les cellules ont été lysées et leurs ARNs ont été extraits par précipitation. Cette expérience a été réalisée en doublon. Le tableau 3 ci-dessous reprend les résultats obtenus. Les termes A260 et A280 correspondent aux valeurs des longueurs d'ondes auxquels les absorbances ont été mesurées. Les résultats dans ces colonnes correspondent à des densités optiques des produits à 260 et 280 nm. Tableau 3 : ng/ul 260 nia 280 nia 260/280 260/230 NINT 430,79 10,77 5,603 1,92 1,98 NINT 611,85 15,296 7,556 2,02 2,06 Inf 448,45 11,211 5,819 1,93 1,91 Inf 379,87 9,497 4,886 1,94 1,99 RBV 5gm 618,56 15,464 7,824 1,98 2 RBV 5#M 385,58 9,639 4,903 1,97 1,93 RBV 30#M 405,66 10,142 5,235 1,94 1,98 RBV 30#M 587,09 14,677 7,295 2,01 1,99 ek26 5#M 634,13 15,853 7,856 2,02 2,03 ek26 5#M 451,51 11,288 5,849 1,93 1,95 ek26 20gm 441,25 11,031 5,693 1,94 1,96 ek26 15gm 450,76 11,269 5,858 1,92 1,94 RB2a 51.iM 588,85 14,721 7,358 2 2 RB2a 5#M 578,29 14,457 7,173 2,02 2 RB2a 30gm 634,21 15,855 7,937 2 2,05 R32a 30#M 591,7 14,792 7,423 1,99 2,03 BA1 5#M 659,59 16,49 8,286 1,99 1,99 BAI. 5#M 464,49 11,612 5,889 1,97 2,05 BA1 30#1i 630,18 15,754 7,905 1,99 2,07 BA1 30gM 428,49 10,712 5,621 1,91 1,95 BA2 5#M 639,19 15,98 7,915 2,02 2,02 BA2 5gm 428,07 10,702 5,573 1,92 1,94 BA2 30gm 423,51 10,588 5,525 1,92 1,97 BA2 30gm 588,89 14,722 7,345 2 2 Les résultats ci-dessus démontrent que les composés testés ne montrent pas de toxicité apparente. Exemple 2 : Test d'inhibition de la réplication par les 10 analogues des nucléosides étudiés dans des cellules de foie FT313 Avec les ARN extraits lors de l'expérience décrite à l'exemple 1, une RT-qPCR quantitative est réalisée avec des 1 2 3 4 6 7 8 9 11 12 13 14 16 17 18 19 21 22 23 24 5 amorces spécifiques du brin d'ARN génomique du VHC, également appelé brin négatif ou réplicatif. Les résultats de ces expériences sont illustrés dans la figure 1. Les données sont exprimées en pourcentage 5 d'inhibition d'ARN du VHC dans les cellules traitées par rapport aux cellules non traitées. Ces données montrent que tous les composés sont actifs avec des IC50 inférieurs à 5 pM. L'IC50 correspond à la concentration inhibitrice médiane et permet de mesurer 10 l'efficacité d'un composé donné pour inhiber une fonction biologique ou biochimique spécifique. La figure 2 décrit les résultats issus d'une RT-PCR en une étape ou « RT-PCR one step » qui utilise comme amorces les deux brins d'ARN positif et négatif, sans 15 distinction entre les brins positif et négatif. Les profils obtenus par les deux techniques sont équivalents. Aussi, il apparait que les composés testés ont un effet sur la réplication de l'ARN viral dans les conditions 20 expérimentales décrites ci-dessus. Exemple 3 : Test d'activité antivirale L'activité antivirale des composés est déterminée par l'inhibition de l'effet cytopathique induit par le virus 25 dans des cellules MK2 (tableau 5 colonne 2) dans le cas du virus de la dengue de type 2 (VD), ou dans les cellules MDBK (tableau 5 colonne 3) dans le cas du virus de la diarrhée bovine (VDBV). Les cellules MDBK (Madin-Darby bovine kidney) sont 30 des cellules épithéliales bovines, provenant de lignées continues et fournies par ATCC (American Type Culture Collection). Elles sont maintenues en culture dans un milieu composé de MEM (pour « milieu essentiel minimum »), 10% de HS (Horse Serum), 1% de Glutamine et 50ug/m1 de 35 gentamycine. Elles sont repiquées deux fois par semaine.

Cette lignée est utilisée pour tester l'activité antivirale des composés (cf. test d'activité antivirale). Les cellules LLC-MK2 sont des cellules épithéliales extraites de reins de singes et provenant de lignées 5 continues. Celles-ci en plus d'être très proches du point de vue génétique des cellules humaines, sont aussi connues dans la littérature comme étant sensible à l'infection par de nombreux virus et particulièrement par celui de la dengue. 10 Les cellules LLC-MK2 sont utilisées lors des tests d'activité anti-cytopathogènes contre le virus de la dengue, mais également pour évaluer la toxicité des drogues. Le virus de la diarrhée bovine virale (VDBV) est 15 utilisé comme modèle in vitro du virus de l'hépatite C (VHC). Il n'est infectieux que chez les bovins et ne nécessite donc qu'un confinement de type P2. Le virus existe sous 2 types de souches différentes : cytopathique et non cytopathique. Dans les expériences réalisées, la 20 souche cytopathique est utilisée, qui est propagée dans la lignée MDBK. La production des virus nécessite l'infection d'une flasque de 75cm3 contenant des cellules à confluence : LLC-MK2 pour le virus de la dengue (Le virus est 25 produit à partir de deux échantillons du virus de la Dengue de sérotype 2). - MDBK pour le VDBV. Avant d'effectuer cette infection, le tapis cellulaire est lavé au PBS, puis du milieu dépourvu de 30 sérum est rajouté dans la flasque. Cette étape de lavage est indispensable, elle permet de retirer toute trace de sérum contenant des substances capables d'inhiber le virus. Le virus est par la suite introduit dans la flasque 35 et ainsi placé au contact des cellules. La durée d'infection doit être au minimum de 2 heures. Une fois ce laps de temps dépassé, le milieu est remplacé par du milieu supplémenté. Les cellules infectées vont alors se détacher de leur support. Le milieu contenant les cellules et le virus sera centrifugé afin de récupérer les particules virales présentes dans le surnageant. Celui-ci est aliquoté et congelé à -80°C avant d'être titré. Pour la titration, une plaque 24 puits est ensemencée avec 2.105 cellules par puits, pendant 24h à 37°C. Les cellules sont infectées avec différentes dilutions de virus stock, pendant 2h. Les cellules sont ensuite fixées avec du milieu complet contenant 0,75% de méthylcellulose et incubées 2 jours à 37°C. La coloration est réalisée avec 0,2 ml par puits d'une solution de cristal violet 0,1%, éthanol 20%. Après 5 min d'incubation, le milieu est aspiré et les cellules sont lavées au PBS. La comptabilisation du nombre de plaques de lyse permet la détermination de la PFU/ml (« Plaque Forming Unit » pour « unité de plaque-formation »). Cette valeur est ramenée au nombre de cellules pas puits : le titre est alors exprimé en MOI (« multiplicity of infection », ou nombre de particules virales par cellule). Dans cet exemple 3, les composés repris dans le tableau 4 ci-dessous ont été testés : Tableau 4: Code Formule chimique de la Nom chimique de la molécule molécule molécule BG1 N=N (2R,3S,5S)-2-(hydroxymethyl)-5- (4-octy1-1H-1,2,3-triazol-1-y1) tetrahydrofuran-3-ol HO "Ç7'' 0 ^;N),..i.$)CH3 7 Hd BG2 N=N (2R,3S,5R)-2-(hydroxymethyl)-5- (4-octy1-1H-1,2,3-triazol-1-y1) tetrahydrofuran-3-ol 0 iiN744CH3 H0 ri V 7 HO" BG3 N=N (2R,3S,5S)-5-(4-hexy1-1H-1,2,3- triazol-1-y1)-2-(hydroxymethyl) tetrahydrofuran-3-ol 0 .,,isi,CH3 HO N 5 - HO' BG4 N=N (2R,3S,5R)-5-(4-hexy1-1H-1,2,3- triazol-1-y1)-2-(hydroxymethyl) tetrahydrofuran-3-ol 0 isi......(...)),CH3 H0/444- 5 HO' BG5 N=N (2R,3S,5S)-2-(hydroxymethyl)-5- (4-pheny1-1H-1,2,3-triazol-1- yl) 0 ' tetrahydrofuran-3-ol HO "'Ç) y 1110 HCi BG6 NN (2R,3S,5R)-2-(hydroxymethyl)-5- (4-pheny1-1H-1,2,3-triazol-1- yl) 0 hi tetrahydrofuran-3-ol HO 110 HO' BG7 N=N , Ile(4-(4-propylpheny1)-1H-1,2,3- (2R,3S,5S)-2-(hydroxymethyl)-5- triazol-1-yl)tetrahydrofuran-3- ol HO y Hd BG7b N=N (2R,3S,5R)-2-(hydroxymethyl)-5- (4-(4-propylpheny1)-1H-1,2,3- triazol-1-yl)tetrahydrofuran-3- ol ' HO 0).....N y to HO' BG8 N=N 1-((2S,4S,5R)-4-hydroxy-5- (hydroxymethyl)tetrahydrofuran2-y1)-1H-1,2,3-triazole-4- carboxamide NH2 HO 0 HO BG9 N=N methyl 1-((2R,4S,5R)-4-hydroxy5-(hydroxymethyl) tetrahydrofuran-2-y1)-1H-1,2,3- triazole-4-carboxylate H0"14 0 N' y OMe 0 Hd BG10 N=N (2R,3S,5S)-2-(hydroxymethyl)-5- (4-(hydroxymethyl)-1H-1,2,3- triazol-1-yl)tetrahydrofuran-3- ol ..,14,----..'/OH HO Hd BG11 N=N (2R,3S,5S)-5-(4-(1- 0 ' hydroxyhexyl)-1H-1,2,3-triazol1-y1)-2- (hydroxymethyl)tetrahydrofuran3-al HO OH Hd Ek19 N=N (2R,3R,4S,5R)-2-(4-hexy1-1H1,2,3-triazol-1-y1)-5- (hydroxymethyl)tetrahydrofuran3,4-diol CH3 Ho/rsiNY5 HO' -OH Ek20 N=N (2R,3S,4R,5R)-2- 0 hi_CH3 (hydroxymethyl)-5-(4-octy1-1H1,2,3-triazol-1- H0/...-- N.-1-/17 yl)tetrahydrofuran-3,4-diol Hd --OH Ek21 N=N 1-((2R,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy5- (hydroxymethyl)tetrahydrofuran2-y1)-1H-1,2,3-triazole-4- carboxamide 0 ' NH2 HCr4.1 NireaN 7 ' 0 HO' 'OH BE11 Ek23 = (2R,3S,4R,5R)-2- N=N (hydroxymethyl)-5-(4-pheny1-1H1,2,3-triazol-1- HO yl)tetrahydrofuran-3,4-diol / 11. H0 'OH Ek24 N=N (2R,3R,4S,5R)-2-(4-(1- 0 ' hydroxyethyl)-1H-1,2,3-triazol1-y1)-5- (hydroxymethyl)tetrahydrofuran3,4-diol HO OH " HO' 'OH Ek25 N=N (2R,3R,4S,5R)-2-(4-(1- 0 ' hydroxyhexyl)-1H-1,2,3-triazol1-y1)-5- (hydroxymethyl)tetrahydrofuran3,4-diol HO ,r....hi OH Hd 'OH Ek26 N=N (2R,3S,4R,5R)-2- 0 hi (hydroxymethyl)-5-(4-(4- propylpheny1)-1H-1,2,3-triazol1-yl)tetrahydrofuran-3,4-diol HO . ' Hd 'OH Ek27 1-((2R,4S,5R)-4-hydroxy-5- (hydroxymethyl)tetrahydrofuran2-y1)-1H-1,2,3-triazole-4- carboxamide N=N 0 N' NH2 0 HO'' BE12 N---r-N (2R,3S,4S,5R,6R)-2- (acetoxymethy1)-6-(4-(4- propylpheny1)-1H-1,2,3-triazol1-yl)tetrahydro-2H-pyran-3,4,5- triyl triacetate ACOC) / lei - AcCie "OAc OAc BE13 N=N (2R,3R,4R,5R)-2- Ac0 0 Ni y te (acetoxymethyl)-5-(4-(4- propylpheny1)-1H-1,2,3-triazol1-yl)tetrahydrofuran-3,4-diy1 diacetate ' ACO' 0AC BE14 N=N (2R,3R,4S,5R,6R)-2- (hydroxymethyl)-6-(4-(4- propylpheny1)-1H-1,2,3-triazol1-yl)tetrahydro-2H-pyran-3,4,5- triol HO° rs/j / liee OH BE15 N=N (2S,3R,4S,5S)-2- ' (hydroxymethyl)-5-(4-(4- propylpheny1)-1H-1,2,3-triazol1-yl)tetrahydrofuran-3,4-diol HO /,, s0 N(N . HO OH BE16 N=N (2R,3R,4S,5R)-2-(4-(furan-2- y1)-1H-1,2,3-triazol-1-y1)-5- (hydroxymethyl)tetrahydrofuran3,4-diol 0 ' y , HO ) / 0 HO'. -0H BE17 N=N ' (2R,3S,4R,5R)-2- H0 7 7/ (hydroxymethyl)-5-(4-(thiophen2-y1)-1H-1,2,3-triazol-1- yl)tetrahydrofuran-3,4-diol S HO's 'OH BE18 N=N (2R,3S,4R,5R)-2- 0 N (hydroxymethyl)-5-(4-(4- (trifluoromethyl)pheny1)-1H1,2,3-triazol-1- yl)tetrahydrofuran-3,4-diol HO 11, ' CF3 HO' OH Ek23P N=N (2R,3R,4R,5R)-2- 0 0 N y (isobutyryloxymethyl)-5-(4-(4- propylpheny1)-1H-1,2,3-triazol1-yl)tetrahydrofuran-3,4-diy1 bis(2-methylpropanoate) "?--Cree4I 110 oo byo Ek26P N=N (2R,3R,4R,5R)-2- 0 0 ' (isobutyryloxymethyl)-5-(4- pheny1-1H-1,2,3-triazol-1- yl)tetrahydrofuran-3,4-diy1 bis(2-methylpropanoate) 0 N y . - -. 0 d o Ribavirine [=N 1-((2R,3R,4S,5R)-3,4-dihydroxy5- (hydroxymethyl)tetrahydrofuran2-y1)-1H-1,2,4-triazole-3- carboxamide 0 NH2 HO N".....N,N, I O Nd -0H Les composés testés sont généralement dissous dans le DMSO (diméthyl sulfoxide) à une concentration minimum de 10mM. Les solutions stock sont conservées à -20°C avant 5 utilisation. Le test d'activité antivirale est réalisé sur plaque 96 puits, ensemencées avec 5. 104 cellules MDBK (pour le VDBV) ou MK2 (pour le virus de la dengue de type 2) par puits (environ 70% de confluence), 24h à 37°C. Les cellules 10 sont infectées avec une MOI de 0,1 (valeur préalablement déterminée), 2h à 37°C. Le milieu est alors remplacé par du milieu complet contenant les composés à tester jusqu'à une concentration maximale de 50pM. 15 Un contrôle positif (cellules non infectées, sans les composés) et un contrôle négatif (cellules infectées, sans les composés) sont également réalisés.

Après 72h d'incubation à 37°C, la viabilité cellulaire est mesurée par le test MTT qui est une méthode rapide de numération des cellules vivantes. Dans les cellules viables, le MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-y1)-2,5- diphenyl tetrazolium bromide) est clivé par les déshydrogénases mitochondriales, en formazan, absorbant à 570nm. Après ajout de lOilL de MTT (2,5mq/rd), les cellules sont incubées 3h à 37°C, puis solubilisées par 100tIL de SDS 10%. La DO est mesurée à 570nm.

De ces résultats ont été déduites les valeurs EC50 correspondant aux concentrations des composés qui inhibent de 50% l'effet cytopathogène du virus dans les cellules MK2, dans le cas du virus de la dengue, ou dans les cellules MDBK, dans le cas du virus de la diarrhée bovine, par rapport à un contrôle non traité. La concentration efficace médiane (EC50) est une mesure de la concentration d'un composé induisant une réponse à mi-chemin (médiane) entre la ligne de base et l'effet maximum après un certain temps d'exposition à celui-ci. Elle est couramment utilisée comme mesure de l'efficacité d'un médicament. Ces données concernant l'EC50 sont reprises dans le tableau 3 pour les virus de la Dengue (VD) et de la diarrhée bovine virale (VDBV), respectivement aux colonnes 25 2 et 3 du tableau 5 ci-dessous. Tableau 5 : , Virus de la dengue Virus de la Composes diarrhée bovine virale ECKt(i.tM) ECSO(I.LM) BG1 >50 >50 BG2 >50 >50 BG3 >50 >50 BG4 >50 >50 BG5 >50 >50 BG6 >50 >50 BG7 50 30 BG8 >50 >50 BG9 >50 >50 BG10 >50 >50 BG11 >50 >50 Ek19 >100 >100 Ek20 >100 >100 Ek21 >100 >100 Ek23 = 50 35 BE11 Ek24 >100 >100 Ek25 >100 >100 Ek26 25 10 Ek27 >100 >100 BE12 N.D. >100 BE13 N.D 40 BE14 N.D >100 BE15 N.D >100 BE16 N.D >100 BE17 N.D >100 BE18 N.D >100 Ek23P N.D 32 Ek26P N.D 10 Ribavirine >50 45 Ces résultats exposé dans le tableau 5 ci-dessus démontrent que les composés BG7 ((2R,3S,5S)-2- (hydroxymethyl)-5-(4-(4-propylpheny1)-1H-1,2,3-triazol-1- yl)tetrahydrofuran-3-ol), Ek23=BG11 ((2R,3S,4R,5S)-2- (hydroxymethyl)-5-(4-pheny1-1H-1,2,3-triazol-1- yl)tetrahydrofuran-3,4-diol) et Ek26 (2R,3S,4R,5R)-2- (hydroxymethyl)-5-(4-(4-propylpheny1)-1H-1,2,3-triazol-1- yl)tetrahydrofuran-3,4-diol) ont un EC50 inférieur à celui de la ribavirine dans les cellules MK2 infectées par le virus de la dengue de type 2 et que les composés BG7, Ek23=BG11, Ek26, 3E13, Ek23P et Ek26P (formes pro-drogues de eK23 et eK26, respectivement) ont un EC50 inférieur à celui de la ribavirine dans les cellules MBDK infectées par le virus de la diarrhée bovine virale.

Aussi, il en ressort que les composés BG7, Ek23 et Ek26 sont des inhibiteurs de l'effet cytopathogène du virus de la dengue dans les cellules MK2 et sont donc des agents potentiels pour lutter contre ce virus. De même, les composés BG7, Ek23, Ek26, BE13, Ek23P et Ek26P (formes prodrogues d'eK23 et eK26, respectivement) sont inhibiteurs de l'effet cytopathogène du virus de la diarrhée bovine virale et sont donc des agents potentiels pour lutter contre ce virus et contre le virus de l'hépatite VHC.

Exemple 4 : Test de cytotoxicité En parallèle des tests réalisés pour l'exemple 3, la toxicité cellulaire induite par les composés est testée sur la lignée humaine HepG2.

Les cellules HepG2 sont issues d'une lignée immortelle de cellules épithéliales humaines, elles-mêmes issues d'un hépatocarcinome. Fournies par l'ATCC (American Type Culture Collection), elles sont maintenues en culture dans un milieu composé de DMEM (+ glutamax, - sodium pyruvate), 10% de FBS (Foetal Bovine Serum), 1% de pyruvate de sodium et 50pg/m1 de gentamycine. Elles sont repiquées une fois par semaine. Le test de toxicité est réalisé sur plaque 96 puits, ensemencée avec 105 cellules par puits et laissée 24h à 25 37°C. Le milieu est alors remplacé par du milieu complet contenant les composés à tester jusqu'à une concentration maximale de 100pM. Un contrôle positif (cellules sans composés) est réalisé. 30 Après 72h d'incubation à 37°C, la viabilité cellulaire est mesurée par le test MTT, selon les modalités citées à l'exemple 3. Dans cet exemple, les mêmes composés que ceux exemplifiés à l'exemple 3 ont été testés (cf. tableau 5 ci-35 dessus).

Les résultats des tests de toxicité sont repris dans le tableau 6 ci-dessous. Tableau 6 : Produits Hep-G2 CCSO(I.LM) BG1 100 BG2 100 BG3 >100 BG4 >100 BG5 >100 BG6 >100 BG7 >100 BG8 >100 BG9 >100 BG10 >100 BG11 >100 Ek19 >100 Ek20 >100 Ek21 >100 Ek23 = BEll >100 Ek24 >100 Ek25 >100 Ek26 >100 Ek27 >100 BE12 >100 BE13 >100 BE14 >100 BE15 >100 BE16 >100 BE17 >100 BE18 >100 Ek23P >100 Ek26P >100 Ek28P >100 Ek29P >100 Ribavirine >100 De ces résultats ont été déduites les valeurs C050 correspondant aux concentrations du composé qui inhibent de5 0% la prolifération des cellules Hep-G2 par rapport à un contrôle non traité.

Claims (9)

1. REVENDICATIONS1. Composés de formule générale : dans laquelle : - X est choisi parmi N ou CH ; - le groupement aryle Ar est choisi parmi : - un groupement phényle ; ou - un hétérocycle à 5 atomes choisi parmi furane, thiophène, pyrole, imidazole, pyrazole, oxazole, thiazole ; ou - un hétérocycle à 6 atomes choisi parmi pyridine, pyrimidine, pyridazine ; ou - une combinaison sous forme fusionnée de ceux-ci, sous forme de cycles accolés 5/6 ; - R1 est choisi parmi : - un groupement pentose cyclique sous forme furanique présentant des groupements OH libres ou substitués sous forme de dérivés d'esters, d'amides, de sulfonamides ou par des groupements mono-, bi- ou triphosphate ; ou - un groupement hexose sous forme pyranique présentant des groupements OH libres ou substitués sous forme de dérivés d'esters, d'amides, de sulfonamides ou par des groupements mono-, bi- ou triphosphate ; - R2, R3 et R4 sont choisis parmi : - un atome d'hydrogène ; - une chaine alkyle linéaire ou ramifiée ayant de 3 à 10 atomes de carbone ; ou- une chaine alkyle linéaire ou ramifiée ayant de 3 à 10 atomes de carbone, substituée par un groupement halogène, -OH, -CONH2, -002H, -0O2Me, -0O2Et, -ON, C(NH2)NH, -C(NHMe)NH, -C(NHEt)NH ; ou un halogène choisi parmi Cl, Br, I et F ; ou un groupement -OH, -NH2, -CONH2, -CO2H, -0O2Me, -0O2Et, -ON, -C(NH2)NH, -C(NHMe)NH, -C(NHEt)NH, ou une combinaison de ceux-ci ; leurs pro-drogues, racémiques, énantiomères, diastéréoisomères et leurs mélanges, leurs tautomères et leurs sels pharmaceutiquement acceptables, à titre de médicament.
2. 2. Composés selon la revendication 1, dans lesquels : X est choisi parmi N ou CH ; - le groupement aryle Ar est choisi parmi : - un groupement phényle ; ou - un hétérocycle à 5 atomes choisi parmi furane, thiophène, pyrole, imidazole, pyrazole, oxazole, thiazole ; ou - un hétérocycle à 6 atomes choisi parmi pyridine, pyrimidine, pyridazine ; R1 est choisi parmi les groupements : 0 HO/Ç Y5"e' Hd 13-D-Ribose OUHO HO OH p-L-Ribose HO Hd OH 13-D-Arabinose HO/5 HO 13-L-Arabinose HO°Y\
3. 3-D-2-désoxyRibose OU OU OU OU H0/1'1 ) ":\ HO 13-L-2-désoxyRibose ou HOo , CH3 Hd 2'-methyl-3-D-2'-désoxyRibose HO/ 5/ HO -CH3 2'-methyl-3-L-2'-désoxyRibose OU0 2'-fluoro-3-D-2'-désoxyRibose H0/5 HO 2'-fluoro-3-L-2'-désoxyRibose OU OU ou 4,--CH3 Hd -OH 2'-methyl-3-D-Ribose 2'-methyl-3-L-Ribose 2'-fluor-2'-methyl-p-D-Ribose OU OU OU HO/1',5° ,CH3 HO F 2'-fluor-2'-methyl-p-L-Ribose OUHO HO HO Glucose éventuellement substitués sous forme de dérivés d'esters, d'amides, de sulfonamides ou par des groupements mono-, bi- ou triphosphate ; - R2, R3 et R4 sont choisis parmi : - un atome d'hydrogène ; - une chaine alkyle linéaire ou ramifiée ayant de 3 à 10 atomes de carbone ; ou - une chaine alkyle linéaire ou ramifiée ayant de 3 à 10 atomes de carbone, substituée par un groupement halogène, -OH, -NH2, -CONH2, -002H, -0O2Me, -0O2Et, -ON, -C(NH2)NH, -C(NHMe)NH, -C(NHEt)NH ; ou - un halogène choisi parmi Cl, Br, I et F ; ou - un groupement -OH, -NH2, -CONH2, -CO2H, -0O2Me, -0O2Et, -ON, -C(NH2)NH, -C(NHMe)NH, -C(NHEt)NH, ou - une combinaison de ceux-ci ; leurs pro-drogues, racémiques, énantiomères, diastéréoisomères et leurs mélanges, leurs tautomères et leurs sels pharmaceutiquement acceptables, à titre de médicament. 3. Composés selon la revendication 2, dans 25 lesquels : - X est N ; - le groupement aryle Ar est choisi parmi : - un groupement phényle ; ou - un hétérocycle à 5 atomes choisi parmi 30 furane, thiophène, pyrole, imidazole, pyrazole, oxazole, thiazole ; ouun hétérocycle à 6 atomes choisi parmi pyridine, pyrimidine, pyridazine ; - R1 est choisi parmi les groupements : OU OU OU HOC:1 f3-D-Ribose HO5 HO OH p-L-Ribose HO Hd OH p-D-Arabinose HO',5°) HO --OH p-L-Arabinose Ho"-Lr'1/4 Hd. 3-D-2-désoxyRibose 10 OU 15 ou 0 H0/1'5 )."\ HO 3-L-2-désoxyRibose OU46 , LCH3 2'-methyl-3-D-2'-désoxyRibose 0 HO/"5 HO --CH3 2'-methyl-f3-L-2t-désoxyRibose H0°))' . F H6 2'-fluoro-3-D-2'-désoxyRibose OU OU HO/",5 OU HO -F 2'-fluoro-3-L-2'-désoxyRibose 0 HO CH3 Hd -OH 2'-methyl-3-D-Ribose OU 10 ou 2.-methyl-p-L-Ribose OUHO/Ç 0 Hd 2'-fluor-2'-methy1-13-D-Ribose OU HO/''S ,CH3 HO F 2'-fluor-2'-methyl-3-L-Ribose éventuellement substitués sous forme de dérivés d'esters, d'amides, de sulfonamides ou par des groupements mono-, bi- ou triphosphate ; - R2, R3 et R4 sont choisis parmi : 10 - un atome d'hydrogène ; - une chaine alkyle linéaire ou ramifiée ayant de 3 à 10 atomes de carbone ; ou - une chaine alkyle linéaire ou ramifiée ayant de 3 à 10 atomes de carbone, substituée par 15 un groupement halogène, -OH, -NH2, -CONH2, -CO2H, -0O2Me, -0O2Et, -CN, - C(NH2)NH, -C(NHMe)NH, -C(NHEt)NH ; ou - un halogène choisi parmi Cl, Br, I et F ; ou un groupement -OH, -NH2, -CONH2, -CO2H, 20 -0O2Me, -0O2Et, -CN, -C(NH2)NH, -C(NHMe)NH, -C(NHEt)NH, ou - une combinaison de ceux-ci ; leurs pro-drogues, racémiques, énantiomères, diastéréoisomères et leurs mélanges, leurs tautomères et 25 leurs sels pharmaceutiquement acceptables, à titre de médicament. HO HO HO HO Glucose OU5
4. 4. Composés selon la revendication 3, dans lesquels : - X est N ; - le groupement aryle Ar est un groupement phényle ; - R1 est choisi parmi : H -OH p-D-Ribose HO/ 1 HO OH p-L-Ribose HO 0 Eld OH p-D-Arabinose H0/1(0 Hd. 13-D-2-désoxyRibose 15 ou HO 13-L-2-désoxyRibose - R2 et R3 sont des atomes d'hydrogène ; et - R4 est un atome d'hydrogène ou une chaine alkyle linéaire ou ramifiée ayant 3, 4, 5 ou 6 atomes de 20 carbone ; OU OU OU HO/,5 leurs pro-drogues, racémiques, énantiomères, diastéréoisomères et leurs mélanges, leurs tautomères et leurs sels pharmaceutiquement acceptables, à titre de médicament.
5. 5. Composés selon la revendication 4, choisis parmi : - (2R,3S,4R,5R)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-pheny1-1H- 1,2,3-triazol-1-yl)tetrahydrofuran-3,4-diol ; 10 - (2S,3R,4S,5S)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-pheny1-1H- 1,2,3-triazol-1-yl)tetrahydrofuran-3,4-diol - (2R,3S,4R,5R)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-(4- propyl pheny1)-1H-1,2,3-triazol-1-y1)tetrahydrofuran3,4-diol 15 - (2S,3R,4S,5S)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-(4- propyl pheny1)-1H-1,2,3-triazol-1-y1)tetrahydrofuran3,4-diol (2R,3S,5R)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-(4-propyl pheny1)-1H-1,2,3-triazol-1-y1)tetrahydrofuran-3- 20 ol (2S,3R,5S)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-(4-propyl pheny1)- 1H-1,2,3-triazol-1-yl)tetrahydrofuran-3- ol (2R,3S,5S)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-(4-propyl 25 pheny1)- 1H-1,2,3-triazol-1-yl)tetrahydrofuran-3- ol (2S,3R,5R)-2-(hydroxymethyl)-5-(4-(4-propyl pheny1)- 1H-1,2,3-triazol-1-yl)tetrahydrofuran-3- ol 30
6. 6. Composés selon l'une des revendications précédentes, pour le traitement d'infections virales.
7. 7. Composés selon la revendication 6, pour le 35 traitement du virus du Nil occidental, du virus del'hépatite B (VHB), du virus de l'hépatite C (VHC), du virus de la Dengue (VD) et du virus de la diarrhée bovine virale (VDBV).
8. 8. Composés selon la revendication 7, pour le traitement du virus de l'hépatite C (VHC).
9. 9. Composition pharmaceutique comprenant un composé selon l'une des revendications 1 à 8 et un support 10 physiologiquement acceptable.