FR2987371A1 - Methode d'identification in vitro de composes modulateurs de la differenciation cellulaire par dosage du micro-arn mir-203 - Google Patents
Methode d'identification in vitro de composes modulateurs de la differenciation cellulaire par dosage du micro-arn mir-203 Download PDFInfo
- Publication number
- FR2987371A1 FR2987371A1 FR1200541A FR1200541A FR2987371A1 FR 2987371 A1 FR2987371 A1 FR 2987371A1 FR 1200541 A FR1200541 A FR 1200541A FR 1200541 A FR1200541 A FR 1200541A FR 2987371 A1 FR2987371 A1 FR 2987371A1
- Authority
- FR
- France
- Prior art keywords
- keratinocytes
- compound
- mir
- expression
- differentiation
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 210000002510 keratinocyte Anatomy 0.000 title claims abstract description 83
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 title claims abstract description 56
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 41
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 33
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 title claims abstract description 15
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 title claims abstract description 7
- 108091028141 MiR-203 Proteins 0.000 claims abstract description 53
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 13
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims abstract description 4
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 claims description 34
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims description 11
- 230000003540 anti-differentiation Effects 0.000 claims description 5
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 claims description 2
- 238000006116 polymerization reaction Methods 0.000 claims description 2
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 claims 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000002682 anti-psoriatic effect Effects 0.000 abstract 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 abstract 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 abstract 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 abstract 1
- 230000001777 nootropic effect Effects 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 25
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 19
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 12
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 10
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 10
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 9
- 108700011259 MicroRNAs Proteins 0.000 description 7
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 7
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 6
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 5
- OBMZMSLWNNWEJA-XNCRXQDQSA-N C1=CC=2C(C[C@@H]3NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](NC(=O)N(CC#CCN(CCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](CC4=CC=CC=C4)NC3=O)C(=O)N)CC=C)NC(=O)[C@@H](N)C)CC3=CNC4=C3C=CC=C4)C)=CNC=2C=C1 Chemical compound C1=CC=2C(C[C@@H]3NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](NC(=O)N(CC#CCN(CCCC[C@H](NC(=O)[C@@H](CC4=CC=CC=C4)NC3=O)C(=O)N)CC=C)NC(=O)[C@@H](N)C)CC3=CNC4=C3C=CC=C4)C)=CNC=2C=C1 OBMZMSLWNNWEJA-XNCRXQDQSA-N 0.000 description 4
- 208000005623 Carcinogenesis Diseases 0.000 description 4
- 101710176384 Peptide 1 Proteins 0.000 description 4
- 210000004504 adult stem cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000036952 cancer formation Effects 0.000 description 4
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 4
- 210000002514 epidermal stem cell Anatomy 0.000 description 4
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 description 4
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 4
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 4
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 4
- 108020004463 18S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 3
- 102000011782 Keratins Human genes 0.000 description 3
- 108010076876 Keratins Proteins 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 3
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 3
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 3
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 3
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 3
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 3
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 3
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 102100028314 Filaggrin Human genes 0.000 description 2
- 101710088660 Filaggrin Proteins 0.000 description 2
- 102100031784 Loricrin Human genes 0.000 description 2
- 230000032683 aging Effects 0.000 description 2
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- GEHJBWKLJVFKPS-UHFFFAOYSA-N bromochloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)Br GEHJBWKLJVFKPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000011712 cell development Effects 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 210000000736 corneocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 2
- 230000036074 healthy skin Effects 0.000 description 2
- 108010079309 loricrin Proteins 0.000 description 2
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 2
- 210000002752 melanocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000000434 stratum corneum Anatomy 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 2
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108700041153 Filaggrin Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000005777 Lupus Nephritis Diseases 0.000 description 1
- 238000011529 RT qPCR Methods 0.000 description 1
- 108060008539 Transglutaminase Proteins 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 1
- 229930003316 Vitamin D Natural products 0.000 description 1
- QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N Vitamin D3 Natural products C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C/C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C QYSXJUFSXHHAJI-XFEUOLMDSA-N 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 1
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 1
- 230000019552 anatomical structure morphogenesis Effects 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 238000012733 comparative method Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 230000001934 delay Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001339 epidermal cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 210000003780 hair follicle Anatomy 0.000 description 1
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 1
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 1
- 230000036571 hydration Effects 0.000 description 1
- 238000006703 hydration reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 102000007236 involucrin Human genes 0.000 description 1
- 108010033564 involucrin Proteins 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 102000042567 non-coding RNA Human genes 0.000 description 1
- 108091027963 non-coding RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000037311 normal skin Effects 0.000 description 1
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000001124 posttranscriptional effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 239000012474 protein marker Substances 0.000 description 1
- 230000001185 psoriatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000754 repressing effect Effects 0.000 description 1
- 239000012679 serum free medium Substances 0.000 description 1
- 239000004017 serum-free culture medium Substances 0.000 description 1
- 230000009759 skin aging Effects 0.000 description 1
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000013517 stratification Methods 0.000 description 1
- 210000005127 stratified epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 210000000106 sweat gland Anatomy 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 102000003601 transglutaminase Human genes 0.000 description 1
- 230000007704 transition Effects 0.000 description 1
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 1
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 1
- 235000019166 vitamin D Nutrition 0.000 description 1
- 239000011710 vitamin D Substances 0.000 description 1
- 150000003710 vitamin D derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 1
- 229940046008 vitamin d Drugs 0.000 description 1
- -1 which are small Proteins 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
- C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
- C12Q1/6881—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for tissue or cell typing, e.g. human leukocyte antigen [HLA] probes
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/136—Screening for pharmacological compounds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/148—Screening for cosmetic compounds
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/158—Expression markers
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
- C12Q2600/178—Oligonucleotides characterized by their use miRNA, siRNA or ncRNA
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pathology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
L'invention concerne une méthode in vitro permettant d'identifier ou d'évaluer l'efficacité de composés modulateurs de la différenciation cellulaire. Cette méthode met en oeuvre la mesure de l'expression du micro-ARN miR-203 exprimé dans des kératinocytes en culture, en particulier lors de la différenciation kératinocytaire.
Description
Domaine de l'invention La présente invention se situe dans le domaine des composés biologiques à action thérapeutique ou non thérapeutique ayant une action sur la différenciation cellulaire. L'invention concerne une méthode in vitro permettant d'identifier ou d'évaluer l'efficacité de composés modulateurs de la différenciation cellulaire. Cette méthode met en oeuvre la mesure de l'expression du micro-ARN miR-203 exprimé dans des kératinocytes en culture, en particulier lors de la différenciation kératinocytaire. Arrière-plan de l'invention L'épiderme, épithélium stratifié kératinisé auquel sont appendus des annexes, follicules pilosébacés et glandes sudorales, est constitué en majorité (90%) de cellules épithéliales d'origine ectodermique, les kératinocytes. C'est un tissu en renouvellement permanent, dans lequel le nombre de cellules reste relativement constant. L'équilibre entre prolifération et différenciation kératinocytaire est fondamental, pour assurer une architecture correcte à l'épiderme et lui conférer une fonction barrière protectrice en maintenant une hydratation satisfaisante de la peau. L'épiderme se régénère continuellement et ce renouvellement constant est réalisé à partir de cellules de la couche basale comprenant des cellules souches épidermiques qui présentent un haut potentiel prolifératif, une grande capacité à s'auto-renouveler et à générer des cellules filles ou cellules à amplification transitoire. Après quelques cycles de division, les cellules à amplification transitoire entament un processus de différenciation terminale, dénommé différenciation kératinocytaire. Les cellules à amplification transitoire arrêtent alors de se diviser pour se différencier progressivement en cornéocytes au cours de leur migration vers les couches externes de l'épiderme. Lors du processus normal de différenciation, les kératinocytes des couches épineuse et granuleuse ont perdu leur potentiel prolifératif mais sont encore vivants et fonctionnels. Le passage des kératinocytes de la couche basale à la couche épineuse est caractérisé par un changement d'expression des kératines de la couche basale (K5, K14, K15) vers celles de kératines épidermiques suprabasales, les kératines K1 et K10, et par la production de l'involucrine, marqueur précoce de la différenciation, et de granules lamellaires dans ses couches supérieures. La couche granuleuse est caractérisée par la présence des grains de kératohyaline et l'expression de marqueurs tardifs de différenciation, tels que la loricrine et la filaggrine. La différenciation des cellules granuleuses résulte dans la formation d'une zone de transition qui sépare les couches -2- épidermiques vivantes de celles dites « mortes » de la couche cornée. C'est dans cette zone que les constituants de la cellule granuleuse sont profondément remodelés, pour finalement aboutir à la formation des cornéocytes de la couche cornée. Cet équilibre est conditionné par un grand nombre de facteurs diffusibles (facteurs de croissance et de différenciation, calcium extracellulaire, cytokines, hormones, vitamine A, vitamines D, etc.) produits par les cellules épidermiques elles mêmes, mais aussi par les interactions entre kératinocytes et cellules dermiques, pouvant agir en synergie ou de manière antagoniste. L'étude de la différenciation des kératinocytes permet une meilleure compréhension du renouvellement de l'épiderme et des pathologies liées à la différenciation de ces cellules, telles que par exemple le psoriasis. Cette différenciation kératinocytaire peut ainsi être mise en évidence grâce au suivi de l'expression de marqueurs spécifiques de la différenciation tels que l'involucrine, la loricrine et la profilaggrine/filaggrine ou encore la transglutaminase.
A cet effet, on peut utiliser des anticorps ou des tests enzymatiques sur coupe pour déterminer la présence de ces marqueurs lors de la différenciation (FM Watt, J Invest Dermatol. 1983 Jul; 81(1 Suppl):100s-3s Involucrin and other markers of keratinocyte terminal differentiation). Toutefois, de telles méthodes peuvent s'avérer peu sensibles et difficilement 20 quantifiables. On connaît également les micro-ARN qui sont des ARN non-codants de petite taille, qui régulent l'expression génique post-transcriptionnelle et qui jouent un rôle important dans divers processus biologiques normaux, y compris le développement de l'épiderme et la morphogenèse du follicule pileux (Aberdam et al.Trends in Biochemical Sciences Vol.33 25 No.12, 2008 ; Rui Yil et al. Nature Vol 452, 13 March 2008, A skin microRNA promotes differentiation by repressing `stemness'), et dans des pathologies spécifiques de la peau, telles que le psoriasis, le lupus érythémateux systémique, et la carcinogenèse de la peau (Lerman G et al. (2011) MiRNA Expression in Psoriatic Skin: Reciprocal Regulation of hsa-miR-99a and IGF-1R. PLoS ONE 6(6): e20916. ; Te JL et al. (2010) Identification of 30 Unique MicroRNA Signature Associated with Lupus Nephritis. PLoS ONE 5(5): e10344). MiR-203 est plus particulièrement décrit comme un micro-ARN spécifique de la peau et des kératinocytes, et peut être considéré comme un des acteurs clé dans le contrôle du basculement entre la prolifération et la différenciation au sein des kératinocytes Ainsi, des études in vitro sur des kératinocytes humains et de souris montrent que MiR203 n'est pas -3- exprimé dans des cellules souches épidermiques adultes, et que son expression signerait la sortie de l'état purement prolifératif (D. Aberdam et al.Trends in Biochemical Sciences Vol.33 No.12, 2008). D'autres études ont montré que l'expression de miR-203 est fortement induite au cours de la différenciation kératinocytaire induite par le calcium (Declan J McKenna et al.; Journal of virology; Volume: 84, 10644-10652. 2010 Oct; MicroRNA 203 expression in keratinocytes is dependent on regulation of p53 levels by E6). Le problème plus particulièrement visé par la présente invention est de disposer d'une méthode rapide et simple pour quantifier la différenciation kératinocytaire, et dont la mise en oeuvre permet d'identifier de nouveaux composés ou d'évaluer l'efficacité de composés modulateurs de la différenciation cellulaire. De tels composés peuvent jouer un rôle dans la prévention et/ou le traitement ultérieur des pathologies spécifiques de la peau, telles que par exemple le psoriasis, le lupus érythémateux systémique, et la carcinogenèse de la peau. Dans le domaine de la cosmétique, de tels composés peuvent également jouer un rôle dans le bon fonctionnement de la peau saine, et la lutte contre le vieillissement. Exposé de l'invention La présente invention a pour objet une méthode in vitro pour identifier ou évaluer l'efficacité d'un composé sur la modulation de la différenciation cellulaire, comprenant les étapes suivantes: a) mettre en culture des kératinocytes ; b) mettre en contact ledit composé avec les kératinocytes obtenus à l'étape a) ; c) procéder en parallèle à des cultures de référence dans les mêmes conditions qu'aux étapes a) et b) sauf que ces kératinocytes ne sont pas mis en contact avec ledit composé ; d) mesurer les taux d'expression de miR-203 dans les kératinocytes respectivement obtenus aux étapes b) et c) ; et e) comparer le taux d'expression de miR-203 obtenu dans les kératinocytes de l'étape b) par rapport au taux d'expression obtenu à l'étape c). L'invention et les avantages qui en découlent seront mieux compris à la lecture de la description et des modes de réalisation non limitatifs qui suivent, au regard des figures annexées dans lesquelles : - la figure 1 est un graphique représentant le taux d'expression basal de miR-203 par réaction de polymérisation en chaine quantitative ou en temps réel (QPCR) dans différents types cellulaires ; -4- - la figure 2 est un graphique représentant l'activité pro-différenciation du calcium utilisé comme contrôle positif sur des kératinocytes ; - la figure 3 est un graphique représentant l'activité pro-différenciation d'un composé sur des kératinocytes traités ; - la figure 4 est un graphique représentant l'activité anti-différenciation d'un composé sur des kératinocytes traités dont la différenciation a été stimulée ou non par du calcium ; et - la figure 5 est un graphique représentant l'activité anti-différenciation d'un composé sur des kératinocytes enrichis en cellules souches adultes épidermiques (RA) traités.
De façon avantageuse, l'évaluation de la différenciation cellulaire selon l'invention est ainsi réalisée par le dosage de miR-203. MiR-203 est un micro-ARN utilisé comme marqueur non protéique de la différenciation cellulaire dont la surexpression inhibe la prolifération et favorise la différenciation des kératinocytes. Le dosage de l'expression de miR-203 de kératinocytes traités avec des composés à tester dans la méthode selon l'invention permet d'identifier ou d'évaluer l'efficacité de composés modulateurs de la différenciation kératinocytaire, préférentiellement de nouveaux composés, de tels composés nouvellement identifiés pouvant jouer un rôle dans la prévention et/ou le traitement ultérieur des pathologies spécifiques de la peau, telles que par exemple le psoriasis, le lupus érythémateux systémique, et la carcinogenèse de la peau ou encore le bon fonctionnement de la peau saine, et la lutte contre le vieillissement. L'expression de miR-203 dans la méthode selon l'invention est avantageusement quantifiée et mesurée par la technique de PCR quantitative en temps réel ou QPCR, cette méthode étant sensible et précise et les ARN étant facilement quantifiables. Selon l'invention, les étapes a) et c), qui consistent à mettre en culture des kératinocytes dans les mêmes conditions, visent un ensemble de techniques utilisées, connues de l'homme du métier, pour faire proliférer des kératinocytes à l'état isolé (in vitro), dans un but d'expérimentation scientifique. Les kératinocytes en culture selon l'invention sont préférentiellement des kératinocytes humains normaux.
Selon un mode avantageux de réalisation de la méthode selon l'invention, les kératinocytes sont cultivés dans un milieu de culture comprenant un agent favorisant la différenciation cellulaire, préférentiellement dans un milieu de culture comprenant entre 0,5 mM et 1 mM de CaC12 pendant 48 heures. -5- Les kératinocytes de l'étape b) selon l'invention sont cultivés et traités avec le composé à tester au moins une fois pendant un temps compris entre 1 minute et 5 jours, préférentiellement cultivés et traités 1 à 2 fois par jour avec le composé à tester pendant environ 48 heures.
Les ARN totaux sont ensuite extraits par une méthode classiquement utilisée et servent de matrice pour la réaction de transcription inverse de miR-203. Un contrôle endogène de l'expression des ARN est réalisé en parallèle pour constituer une référence interne. Les taux d'expression de miR-203 ont enfin été mesurés par QPCR, à l'aide de sondes et d'amorces spécifiques permettant l'amplification de miR-203. Il s'agit d'une méthode comparative, dans laquelle la quantité du gène cible miR-203 est normalisée par rapport à un gène de référence. De préférence, c'est l'ARN 18S qui est choisi comme référence. Exemple 1 : mesure du taux d'expression basal de miR-203 dans différents types de cellules de peau Tel qu'illustré à la figure 1, le taux d'expression basal de miR-203 a été mesuré dans différents types de cellules présentes dans la peau normale par QPCR, et plus particulièrement dans des cellules NHK (kératinocytes humains normaux), Fibroblastes et NHEM (mélanocytes épidermiques humains normaux). Des cellules transformées ont également été testées dans les mêmes conditions : les cellules HaCat (kératinocytes humains transformés) et A431 (cellules de carcinome épidermoïde humain). Les cellules extraites de peau humaine ont respectivement également été cultivées dans des conditions standard. En particulier, les NHK ont été cultivées pendant 48 heures dans le milieu de culture Keratinocyte Serum Free Medium (KSFM) (17005-075, Gibco).
Les ARN totaux ont ensuite été extraits à l'aide du kit d'extraction mirVanaTM (AM1560, Ambion) suivant les recommandations du fournisseur et ont servi de matrice pour la réaction de reverse transcription de miR-203 et du contrôle endogène en utilisant le kit TaqMane MicroRNA Reverse Transcription Kit (4366596, Applied Biosystems). Les taux d'expression de miR-203 ont enfin été mesurés par QPCR pour chaque lignée cellulaire. Les réactions de QPCR ont été réalisées à l'aide du TaqMane universal master mix (4369514, Applied Biosystems), de sondes ainsi que des amorces spécifiques de miR203 (Assay ID 000507, Applied Biosystems) et l'ARN 18S (Assay No. Hs99999901_s1, Applied Biosystems). Les quantités relatives d'ADNc dans les différents échantillons ont -6- été estimées en appliquant la technique du TaqMane à l'aide d'un StepOneplusTM (Applied Biosystems). Celle-ci est basée sur la méthode de calcul des AACt, la quantité du gène cible est normalisée par rapport à un gène de référence. L'expression de l'ARN 18S a constitué la référence pour toutes les analyses.
Résultat : On observe que miR-203 est significativement exprimé dans les cellules NHK alors qu'il n'est pas exprimé dans les fibroblastes ou les NHEM. Ces résultats sont en accord avec la littérature (Mc Kenna et al, J. of Virol. Oct. 2010, p. 10644-10652 Vol. 84, No. 20). D'autre part, miR-203 est très faiblement exprimé dans les lignées transformées A431 et HaCaT. Si l'on prend comme référence les kératinocytes humains normaux, les résultats (quantification relative RQ) sont les suivants : NHK : 100%, HaCaT : 1,5%, A431 : 0,3%, Fibroblastes : 0%, Mélanocytes : 0%, tels qu'illustrés à la figure 1.
Exemple 2 : préparation de fractions cellulaires et quantification de l'expression de miR-203 dans la fraction enrichie en cellules souches adultes Afin d'étudier l'expression de miR-203 dans les cellules souches adultes épidermiques, plusieurs fractions de cellules primaires d'épiderme humain sont préparées. Le fractionnement est basé sur le temps d'adhésion des cellules sur du Collagène IV : en moins de 20 minutes, adhésion rapide (fraction RA), en moins de 5 heures, adhésion lente n°1 (fraction SA1), en moins de 16 heures, adhésion lente n°2 (fraction SA2), et finalement les kératinocytes non adhérents (fractions NA). La fraction cellulaire RA est une fraction enrichie en cellules souches adultes épidermiques. Par contre, les fractions SA1, SA2 et NA sont celles qui contiennent respectivement de moins en moins de cellules souches.
L'extraction des ARN totaux et le dosage du taux d'expression de miR-203 sont ensuite réalisés comme dans l'exemple 1. Résultat : A l'issue de cette caractérisation, on constate que miR-203 n'est que très peu exprimé dans la fraction RA des kératinocytes par rapport aux autres fractions cellulaires.
Si l'on prend comme référence les kératinocytes humains normaux non fractionnés, les résultats sont les suivants (non représentés) : NHK : 100%, fraction RA 2 %, fraction SA1/SA2 164%. -7- Exemple 3: induction de l'expression de miR-203 lors de la différenciation kératinocytaire Des kératinocytes humains normaux (NHK) sont extraits de peau humaine par les techniques classiquement utilisées, ensemencés dans des boites 100 mm de diamètre puis 5 cultivés 48 heures dans un milieu de culture standard sans sérum et (KSFM) (17005-075, Gibco), contenant 0,09 mM de CaC12. Dans ces conditions de cultures, les kératinocytes prolifèrent sans stratifier ni différencier. Des cultures en présence de 0,5 mM CaCl2 et 1 mM de CaCl2 sont également réalisées. En effet le CaC12 est un inducteur de la différenciation kératinocytaire bien décrit dans la littérature (Pillai S et al. (1990) J Cell 10 Physiol 143:294-302). Lorsque la concentration calcique augmente brutalement, les NHK recouvrent leur aptitude à stratifier et à différencier. Ce phénotype de différenciation cellulaire est caractérisé par une augmentation de l'expression de miR-203. L'extraction des ARN totaux et le dosage du taux d'expression de miR-203 sont ensuite réalisés comme dans l'exemple 1. 15 Résultat On observe que l'induction de la différenciation kératinocytaire par une brusque augmentation de la concentration de calcium de 0,5 mM et 1 mM provoque une augmentation de l'expression de miR-203 respectivement de 210% et 300%, telle qu'illustrée à la figure 2. 20 Conclusion L'augmentation dose-dépendante de l'expression de miR-203 dans les kératinocytes normaux au cours de l'induction de la différenciation par le calcium confirme que miR-203 est un marqueur adapté pour identifier et évaluer l'efficacité de composés modulateurs de la différenciation cellulaire. 25 Exemple 4 : évaluation des propriétés pro-différenciantes d'un composé connu Le taux d'expression de miR-203 a été mesuré dans des kératinocytes humains normaux en culture et traités avec un composé à tester. Le taux d'expression de miR-203 obtenu à l'étape b) a ensuite été comparé avec celui obtenu dans des conditions de référence 30 selon l'étape c). Des kératinocytes extraits de peau humaine préalablement isolées ont été cultivés en présence d'une concentration de calcium de 0,09 mM, pendant 24 heures puis selon l'étape -8- b) de la méthode selon l'invention, traités deux fois par jour pendant 48 heures avec une dilution à 1% d'une solution mère à 10-4 M d'un peptide de synthèse (peptide divulgué dans la demande de brevet FR2949782 sous le numéro SEQ ID n°5, nommé ci après Peptide 1) ayant des propriétés pro-différenciantes, soit au final 10-6 M.
Une culture de référence dans les mêmes conditions a été réalisée en parallèle selon l'étape c), dans laquelle des kératinocytes extraits et isolés identiques ne sont pas mis en contact avec le Peptide 1. Les ARN totaux obtenus aux étapes b) et c) ont ensuite été extraits, puis l'expression de miR-203 dosé, comme décrit dans l'exemple 1.
Selon l'étape e), on compare le taux d'expression de miR-203 obtenu dans les kératinocytes traités de l'étape b) traités par rapport à celui obtenu dans des conditions de référence selon l'étape c). Enfin, on identifie ou on évalue l'efficacité du composé testé sur la modulation de la différenciation cellulaire en tenant compte du rapport du taux d'expression de miR-203 obtenu dans l'étape e). Selon l'invention, lorsque le rapport du taux d'expression de miR-203 obtenu dans l'étape e) est supérieur à 1, le composé testé présente une activité pro-différenciation. En revanche, lorsque le rapport du taux d'expression de miR-203 obtenu dans l'étape e) est inférieur à 1, le composé testé présente une activité anti-différenciation.
Résultats On observe qu'un traitement des kératinocytes cultivés avec 1% de Peptide 1 (soit 10- 6 M) provoque une augmentation de l'expression de miR-203 de 46%. Ces résultats sont illustrés à la figure 3. Conclusion La méthode selon l'invention permet de mettre en évidence l'activité pro- différenciation du Peptide 1, à savoir une activité qui favorise la différenciation des kératinocytes. Le dosage comparatif de l'expression de miR-203 selon la méthode selon l'invention permet ainsi de mesurer l'efficacité de composés actifs sur la différenciation kératinocytaire, de tels composés nouvellement identifiés pouvant plus particulièrement jouer un rôle dans la prévention et/ou le traitement ultérieur des pathologies spécifiques de la peau, telles que par exemple le psoriasis, le lupus érythémateux systémique, et la -9- carcinogenèse de la peau, peau ou encore le bon fonctionnement de la peau saine, et la lutte contre le vieillissement cutané. Exemple 5 : évaluation des propriétés anti-différenciantes d'un composé connu Le taux d'expression de miR-203 a été mesuré dans des kératinocytes humains normaux en culture et traités avec un composé à tester, sous la forme d'un peptide de synthèse ayant des propriétés anti-différenciantes, peptide divulgué dans la demande de brevet FR2955112 sous le numéro SEQ ID n°2, nommé ci après Peptide 2. Le taux d'expression de miR-203 obtenu à l'étape b) a ensuite été comparé avec celui obtenu dans des conditions de référence selon l'étape c). Protocole 1 Des kératinocytes extraits de peau humaine préalablement isolés ont été cultivés en présence d'une concentration de calcium de 0,09 mM, pendant 24 heures puis selon l'étape b) de la méthode selon l'invention, traités deux fois par jour pendant 48 heures avec une dilution à 1% d'une solution mère à 104 M du Peptide 2, de façon à obtenir une concentration finale de 10-6 M. Des cultures de NHK en présence de 0,5 mM et 1 mM de calcium ont également été réalisées. Une culture de référence dans les mêmes conditions a été réalisée en parallèle selon l'étape c), dans laquelle des kératinocytes extraits et isolés identiques ne sont pas mis en contact avec le Peptide 2. Les ARN totaux obtenus aux étapes b) et c) ont ensuite été extraits, puis l'expression de miR-203 dosé, comme décrit dans l'exemple 1. Selon l'étape e), on compare le taux d'expression de miR-203 obtenu dans les kératinocytes traités de l'étape b) traités par rapport à celui obtenu dans des conditions de référence selon l'étape c). Enfin, on identifie ou on évalue l'efficacité du composé testé sur la modulation de la différenciation cellulaire en tenant compte du rapport du taux d'expression de miR-203 obtenu dans l'étape e). Résultats 1 On observe que lorsque les NHK sont cultivés dans des conditions standard de 0,09 mM de CaC12 ou des conditions différenciantes de 0,5 mM et 1 mM de CaC12, la diminution de l'expression de miR-203 dans des kératinocytes cultivés avec 1% de Peptide -10- 2 (soit 10-6 M) est respectivement de 10 %, 7% et de 18 %. Ces résultats sont illustrés à la figure 4. Protocole 2 La fraction RA (kératinocytes enrichis en cellules souches adultes épidermiques) extraite de peau humaine a été isolée selon le protocole de l'exemple 2. Les cellules RA attachées au support recouvert de collagène IV sont ensuite cultivées 1 à 2 jours puis ensemencées en boite 100 mm, et traitées 2 fois par jour pendant 48 heures avec une dilution à 1% et 3 % d'une solution mère à 104 M de Peptide 2, de façon à obtenir une concentration finale respectivement de 10-6 M et 3 * 10-6 M). Une culture de référence dans les mêmes conditions a été réalisée en parallèle dans chaque cas selon l'étape c), dans laquelle les kératinocytes ainsi extrait et isolés ne sont pas mis en contact avec le Peptide 2. Les ARN obtenus aux étapes b) et c) ont ensuite été extraits et mesurés, comme indiqués dans l'exemple 1 l'étape d). Enfin, selon l'étape e), on compare le taux d'expression de miR-203 obtenu dans les kératinocytes traités de l'étape b) traités par rapport à celui obtenu dans des conditions de référence selon l'étape c). Résultats 2 On observe qu'un traitement des kératinocytes enrichis en cellules souches adultes épidermiques ainsi cultivés avec 1% et 3% (10-6 M et 3 * 10-6 M) de Peptide 2 provoquent 20 une diminution de l'expression de miR-203 de respectivement 37,1% et 48,6%, tel qu'illustré à la figure 5. Conclusion La méthode selon l'invention permet de mettre en évidence l'activité antidifférenciation du Peptide 2; à savoir une activité qui inhibe ou retarde la différenciation 25 des kératinocytes. Cette inhibition de la différenciation est mise en évidence par la méthode selon l'invention à la fois sur des kératinocytes différenciés et sur des kératinocytes enrichis en cellules souches adultes épidermiques.
Claims (9)
- REVENDICATIONS1. Méthode in vitro pour identifier ou évaluer l'efficacité d'un composé sur la modulation de la différenciation cellulaire, comprenant les étapes suivantes: a) mettre en culture des kératinocytes ; b) mettre en contact ledit composé avec les kératinocytes obtenus à l'étape a) ; c) procéder en parallèle à des cultures de référence dans les mêmes conditions qu'aux étapes a) et b) sauf que ces kératinocytes ne sont pas mis en contact avec ledit composé ; d) mesurer les taux d'expression de miR-203 dans les kératinocytes respectivement obtenus aux étapes b) et c) ; et e) comparer le taux d'expression de miR-203 obtenu dans les kératinocytes de l'étape b) par rapport au taux d'expression obtenu à l'étape c).
- 2. Méthode selon la revendication 1, dans laquelle les kératinocytes en culture sont des kératinocytes humains normaux.
- 3. Méthode selon l'une des revendications 1 ou 2, dans laquelle les kératinocytes sont cultivés dans un milieu de culture comprenant un agent favorisant la différenciation 20 cellulaire.
- 4. Méthode selon la revendication 3, dans laquelle les kératinocytes sont cultivés dans un milieu de culture comprenant entre 0,5 mM et 1 mM de CaC12 pendant 48 heures. 25
- 5. Méthode selon l'une des revendications précédentes, dans laquelle les kératinocytes de l'étape b) sont cultivés et traités avec le composé à tester pendant un temps compris entre 1 minute et 5 jours.
- 6. Méthode selon la revendication 5, dans laquelle les kératinocytes de l'étape b) sont 30 traités 1 ou 2 fois par jour avec le composé à tester et cultivés pendant 48 heures.
- 7. Méthode selon l'une des revendications précédentes, dans laquelle les taux d'expression de miR-203 sont mesurés à l'étape d) par réaction de polymérisation en chaine quantitative (QPCR).-12-
- 8. Méthode selon l'une des revendications précédentes, dans laquelle le rapport du taux d'expression de miR-203 obtenu dans l'étape e) est supérieur à 1 pour un composé présentant une activité pro-différenciation.
- 9. Méthode selon l'une des revendications 1 à 7, dans laquelle le rapport du taux d'expression de miR-203 obtenu dans l'étape e) est inférieur à 1 pour un composé présentant une activité anti-différenciation.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR1200541A FR2987371B1 (fr) | 2012-02-24 | 2012-02-24 | Methode d'identification in vitro de composes modulateurs de la differenciation cellulaire par dosage du micro-arn mir-203 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR1200541A FR2987371B1 (fr) | 2012-02-24 | 2012-02-24 | Methode d'identification in vitro de composes modulateurs de la differenciation cellulaire par dosage du micro-arn mir-203 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FR2987371A1 true FR2987371A1 (fr) | 2013-08-30 |
| FR2987371B1 FR2987371B1 (fr) | 2016-01-01 |
Family
ID=46044832
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FR1200541A Expired - Fee Related FR2987371B1 (fr) | 2012-02-24 | 2012-02-24 | Methode d'identification in vitro de composes modulateurs de la differenciation cellulaire par dosage du micro-arn mir-203 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| FR (1) | FR2987371B1 (fr) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3124620A1 (fr) * | 2015-07-27 | 2017-02-01 | Chanel Parfums Beauté | Activateurs de uc. 291 destiné à être utilisé pour améliorer la fonction barrière de la peau et/ou pour prévenir et/ou atténuer le vieillissement de la peau et/ou pour hydrater la peau |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008142567A2 (fr) * | 2007-05-18 | 2008-11-27 | Karolinska Institutet Innovations Ab | Molécules de micro arn associées à des troubles inflammatoires de la peau |
| WO2011026909A1 (fr) * | 2009-09-02 | 2011-03-10 | L'oreal | SIGNATURE microARN DE LA DIFFÉRENCIATION ÉPIDERMIQUE ET UTILISATIONS |
| EP2395086A1 (fr) * | 2010-06-09 | 2011-12-14 | Chanel Parfums Beauté | Inhibiteurs de micro-ARN pour une utilisation dans la prévention et/ou l'atténuation du vieillissement de la peau et/ou pour hydrater la peau |
-
2012
- 2012-02-24 FR FR1200541A patent/FR2987371B1/fr not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008142567A2 (fr) * | 2007-05-18 | 2008-11-27 | Karolinska Institutet Innovations Ab | Molécules de micro arn associées à des troubles inflammatoires de la peau |
| WO2011026909A1 (fr) * | 2009-09-02 | 2011-03-10 | L'oreal | SIGNATURE microARN DE LA DIFFÉRENCIATION ÉPIDERMIQUE ET UTILISATIONS |
| EP2395086A1 (fr) * | 2010-06-09 | 2011-12-14 | Chanel Parfums Beauté | Inhibiteurs de micro-ARN pour une utilisation dans la prévention et/ou l'atténuation du vieillissement de la peau et/ou pour hydrater la peau |
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| HILDEBRAND JANOSCH ET AL: "A comprehensive analysis of microRNA expression during human keratinocyte differentiation in vitro and in vivo.", THE JOURNAL OF INVESTIGATIVE DERMATOLOGY JAN 2011 LNKD- PUBMED:20827281, vol. 131, no. 1, January 2011 (2011-01-01), pages 20 - 29, XP002685547, ISSN: 1523-1747 * |
| JOYCE CAILIN E ET AL: "Deep sequencing of small RNAs from human skin reveals major alterations in the psoriasis miRNAome", HUMAN MOLECULAR GENETICS, vol. 20, no. 20, October 2011 (2011-10-01), pages 4025 - 4040, XP002685548 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP3124620A1 (fr) * | 2015-07-27 | 2017-02-01 | Chanel Parfums Beauté | Activateurs de uc. 291 destiné à être utilisé pour améliorer la fonction barrière de la peau et/ou pour prévenir et/ou atténuer le vieillissement de la peau et/ou pour hydrater la peau |
| WO2017017094A1 (fr) * | 2015-07-27 | 2017-02-02 | Chanel Parfums Beaute | Activateurs de uc.291 destinés à être utilisés pour améliorer la fonction barrière de la peau et/ou pour prévenir et/ou atténuer le vieillissement de la peau et/ou pour hydrater la peau |
| JP2018526985A (ja) * | 2015-07-27 | 2018-09-20 | シャネル パフュームズ ビューテ | 皮膚バリア機能を改善するため、ならびに／または皮膚の老化を予防および／もしくは軽減するため、ならびに／または皮膚を保湿するのに使用するためのｕｃ．２９１の活性化因子 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FR2987371B1 (fr) | 2016-01-01 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP2473627B1 (fr) | SIGNATURE microARN DE LA DIFFÉRENCIATION ÉPIDERMIQUE ET UTILISATIONS | |
| Törmä et al. | Skin barrier disruption by sodium lauryl sulfate-exposure alters the expressions of involucrin, transglutaminase 1, profilaggrin, and kallikreins during the repair phase in human skin in vivo | |
| Choudhery et al. | Donor age negatively impacts adipose tissue-derived mesenchymal stem cell expansion and differentiation | |
| US10054582B2 (en) | Compositions and methods for inhibiting HMGB1 activation of melanocytes | |
| JP2013503613A5 (fr) | ||
| CA2878971A1 (fr) | Procede d'identification de marqueurs moleculaires de la peau d'enfant | |
| Moers et al. | Substrate elasticity as biomechanical modulator of tissue homeostatic parameters in corneal keratinocytes | |
| EP2618808B1 (fr) | Utilisation cosmétique de la dermcidine ou fragments de celle-ci | |
| EP2699221A1 (fr) | Signature moléculaire des taches pigmentaires cutanées, associée à la matrice extracellulaire | |
| FR3045669A1 (fr) | Procedes d'evaluation des effets de la deshydratation sur la peau d'enfant | |
| JP6223960B2 (ja) | 細胞外マトリックスの組織化に関連した皮膚色素斑の分子シグネチャー | |
| JP2024038101A (ja) | ヒト真皮線維芽細胞の単離方法 | |
| FR2968560A1 (fr) | Utilisation de l'ide comme biomarqueur d'un etat du cuir chevelu | |
| FR2987371A1 (fr) | Methode d'identification in vitro de composes modulateurs de la differenciation cellulaire par dosage du micro-arn mir-203 | |
| FR3071512A1 (fr) | Signatures moleculaires de trois sous-populations de fibroblastes dermiques et equivalent de derme comprenant une de ces sous-populations | |
| EP3027731B1 (fr) | Reactif de stimulation, substitut cutane, explant cutane et procede pour reproduire la physiopathologie de la dermatite atopique | |
| FR2938762A1 (fr) | Utilisation cosmetique de proteines de type dj-1 pour le traitement de la secheresse cutanee | |
| FR2965357A1 (fr) | Utilisation cosmetique de la dermcidine, analogues ou fragments de celle-ci | |
| WO2014199106A2 (fr) | Utilisation cosmétique de la dermicidine, analogues ou fragments de celle-ci pour la prévention et/ou le traitement et le diagnostic de la peau grasse et des désordres esthétiques cutanés qui y sont associés | |
| FR2983868A1 (fr) | Klk6 comme biomarqueur du cuir chevelu | |
| FR2929517A1 (fr) | Utilisation cosmetique de proteines de type annexine ii pour le traitement de la secheresse cutanee | |
| Cappello et al. | 187 Extracellular serine requirement identifies a therapeutic target for psoriasis | |
| Ramos et al. | 188 CD44 functions as a novel interacting partner of Aquaporin 5 in keratinocytes | |
| Ruebsam et al. | 185 aPKC is a rheostat that controls basal junctional dynamics and suprabasal cytoskeletal organization essential for epidermal dynamics and integrity | |
| FR3071511A1 (fr) | Signatures moleculaires du vieillissement de fibroblastes dermiques et equivalent de derme comprenant ces fibroblastes ages |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 4 |
|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 5 |
|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 6 |
|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 7 |
|
| PLFP | Fee payment |
Year of fee payment: 9 |
|
| ST | Notification of lapse |
Effective date: 20211005 |