FR2985182A1

FR2985182A1 - COMPOSITION BASED ON PAPAYER LEAVES INHIBITING THE GROWTH OF BACTERIA IN ORAL SPHERE.

Info

Publication number: FR2985182A1
Application number: FR1162541A
Authority: FR
Inventors: Christophe Binachon
Original assignee: GENCIX
Current assignee: GENCIX
Priority date: 2011-12-29
Filing date: 2011-12-29
Publication date: 2013-07-05
Anticipated expiration: 2031-12-29
Also published as: WO2013098413A3; FR2985182B1; WO2013098413A2

Abstract

L'invention concerne une composition à base de décoction de feuilles de papayer dépourvue de produits chimiques et d'antibiotiques, utilisée comme agent bactériostatique, c'est-à-dire permettant de limiter la prolifération bactérienne, notamment celle de la sphère buccale.The invention relates to a composition based on a decoction of papaya leaves devoid of chemicals and antibiotics, used as a bacteriostatic agent, that is to say to limit bacterial proliferation, particularly that of the oral sphere.

Description

La présente invention concerne une composition inhibitrice de croissance bactérienne et l'utilisation de cette composition. ARRIERE PLAN DE L'INVENTION Les infections gingivales et parodontales sont fréquentes dans la population. Elles sont la principale cause du déchaussement des dents. Des études récentes montrent que les parodontites seraient en plus, associées à d'autres pathologies telles que des endocardites infectieuses, des maladies coronariennes, des accouchements prématurés, des pathologies pulmonaires, voire même certains cancers... Une flore bactérienne est toujours présente dans la sphère buccale. Une alimentation équilibrée, une hygiène bucco-dentaire régulière et un bon état de santé général permettent à cette flore de rester stable. Dès lors que l'équilibre est rompu, suite, par exemple, à des modifications hormonales (adolescence, grossesse, ménopause...), à une détérioration de l'état de santé général, une baisse du système immunitaire ou à une mauvaise hygiène bucco-dentaire, certaines espèces bactériennes vont proliférer et provoquer des inflammations des gencives puis du parodonte. Elles vont également être responsables d'halitose (mauvaise haleine) et être associées à la présence d'aphtes. Socransky et al (1998, J. of Clinical Periodontology ; 25 : 134-144) ont démontré que la prolifération des espèces bactériennes du complexe orange et du complexe rouge, telles que Porphyromonas gingivalls (bactérie du complexe rouge) ou Fusobacterium nucleatum (bactérie du complexe orange), était systématiquement corrélée à la présence de parodontites chroniques. De plus, elles favorisent l'apparition et la prolifération des bactéries du complexe violet telles que Aggregatibacter actinomycetemcomitans, systématiquement impliquées dans les gingivites et parodontites aigües. The present invention relates to a bacterial growth inhibitory composition and the use of this composition. BACKGROUND OF THE INVENTION Gingival and periodontal infections are common in the population. They are the main cause of tooth loosening. Recent studies show that periodontitis is also associated with other pathologies such as infectious endocarditis, coronary heart disease, premature births, pulmonary pathologies, and even certain cancers ... A bacterial flora is always present in the body. mouth sphere. A balanced diet, regular oral hygiene and good general health allow this flora to remain stable. As soon as the balance is broken, following, for example, hormonal changes (adolescence, pregnancy, menopause ...), a deterioration of the general state of health, a fall of the immune system or poor hygiene Oral, some bacterial species will proliferate and cause inflammation of the gums and periodontium. They will also be responsible for halitosis (bad breath) and be associated with the presence of canker sores. Socransky et al (1998, J. of Clinical Periodontology: 25: 134-144) demonstrated that the proliferation of bacterial species of the orange complex and the red complex, such as Porphyromonas gingivalls (red complex bacterium) or Fusobacterium nucleatum (bacterium orange complex), was systematically correlated with the presence of chronic periodontitis. In addition, they promote the appearance and proliferation of purple complex bacteria such as Aggregatibacter actinomycetemcomitans, systematically involved in acute gingivitis and periodontitis.

Lorsque les recommandations d'hygiène (alimentation équilibrée, brossage dentaire et inter-dentaire régulier...) ne suffisent plus, les traitements qui sont alors proposés consistent en l'utilisation de bains de bouche antiseptiques, souvent à base d'alcool ou de chlorhexidine, et, dans certains cas, la prise d'antibiotiques. Cependant, les traitements prolongés à base d'antiseptiques et/ou d'antibiotiques, bien qu'efficaces, risquent de provoquer un déséquilibre profond de la flore bactérienne orale, ce qui génère d'autres problèmes comme des mycoses buccales ou l'apparition de lichen plan. Par ailleurs, les populations des pays industrialisés apparaissent comme les plus concernées par ces problèmes de gingivite et parodontite, de mauvaise haleine et d'aphtes, essentiellement dus à une hygiène de vie et une alimentation déséquilibrées. Ces populations sont de plus en plus réticentes à utiliser des produits chimiques ou des antibiotiques pour des problèmes souvent considérés comme mineurs. When hygiene recommendations (balanced diet, regular dental and dental brushing, etc.) are no longer sufficient, the treatments that are proposed are the use of antiseptic mouthwashes, often based on alcohol or alcohol. chlorhexidine, and, in some cases, antibiotics. However, prolonged antiseptic and / or antibiotic treatments, while effective, may cause a profound imbalance of the oral bacterial flora, which generates other problems such as oral fungal infections or the appearance of lichen plan. Moreover, the populations of the industrialized countries appear to be the most concerned by these problems of gingivitis and periodontitis, bad breath and canker sores, mainly due to an unbalanced lifestyle and diet. These populations are increasingly reluctant to use chemicals or antibiotics for problems that are often considered minor.

OBJET DE L'INVENTION Un but de l'invention est de proposer une composition bactériostatique, c'est-à-dire permettant de limiter la prolifération bactérienne, notamment celle de la sphère buccale, sans produits chimiques ni antibiotiques. OBJECT OF THE INVENTION An object of the invention is to provide a bacteriostatic composition, that is to say, to limit bacterial proliferation, particularly that of the oral sphere, without chemicals or antibiotics.

RESUME DE L'INVENTION En vue de la réalisation de ce but, on propose selon l'invention une composition sans produits chimiques ni antibiotiques à base de décoction de feuilles de papayer utilisée comme agent bactériostatique. SUMMARY OF THE INVENTION In view of the achievement of this object, it is proposed according to the invention a composition without chemicals or antibiotics based on a decoction of papaya leaves used as a bacteriostatic agent.

Il a en effet été découvert qu'une décoction de feuilles de papayer a un effet bactériostatique et équilibrant qui permet notamment de limiter la prolifération d'au moins une bactérie de la flore bactérienne buccale. It has indeed been discovered that a decoction of papaya leaves has a bacteriostatic and balancing effect which makes it possible in particular to limit the proliferation of at least one bacterium of the oral bacterial flora.

La composition objet de l'invention peut en particulier être utilisée pour limiter la prolifération d'au moins une bactérie du complexe rouge ou du complexe orange. La composition, objet de l'invention, est particulièrement efficace pour limiter la prolifération de Porphyromonas gingivalls ou celle de Fusobacterium nucleatum. La composition peut être une solution aqueuse. En particulier, la composition peut être une solution composée exclusivement d'eau et d'extrait de feuille de papayer. L'invention concerne également l'utilisation de la composition objet de l'invention pour limiter la prolifération bactérienne de la sphère buccale. L'invention concerne l'utilisation de la composition pour prévenir ou limiter l'apparition de la mauvaise haleine. L'invention concerne aussi l'utilisation de la composition pour prévenir ou limiter l'apparition des aphtes ou en favoriser la disparition. The composition which is the subject of the invention may in particular be used to limit the proliferation of at least one bacterium of the red complex or of the orange complex. The composition, which is the subject of the invention, is particularly effective in limiting the proliferation of Porphyromonas gingivalls or that of Fusobacterium nucleatum. The composition may be an aqueous solution. In particular, the composition may be a solution composed exclusively of water and papaya leaf extract. The invention also relates to the use of the composition that is the subject of the invention for limiting the bacterial proliferation of the oral sphere. The invention relates to the use of the composition for preventing or limiting the appearance of bad breath. The invention also relates to the use of the composition to prevent or limit the appearance of aphthae or to promote its disappearance.

DESCRIPTION DETAILLEE DE L'INVENTION Le papayer (Carica papaya L.) est une plante connue pour ces nombreux bienfaits nutritionnels et thérapeutiques apportés principalement par sa richesse en vitamines A et E et en enzymes protéolytiques. DETAILED DESCRIPTION OF THE INVENTION The papaya (Carica papaya L.) is a plant known for its many nutritional and therapeutic benefits brought mainly by its richness in vitamins A and E and proteolytic enzymes.

Ce sont les propriétés protéolytiques des enzymes, en particulier celles de la papaïne et de la chymopapaïne présentes dans le fruit et dans les feuilles fraîches de papayer qui sont utilisées dans les médecines traditionnelles. It is the proteolytic properties of enzymes, especially those of papain and chymopapain present in the fruit and in fresh papaya leaves that are used in traditional medicines.

La composition selon l'invention est une décoction de feuilles de papayer utilisée comme agent bactériostatique. Les feuilles de papayer peuvent être fraîches, mais sont de manière préférentielle préalablement séchées. Les feuilles, qu'elles soient fraîches ou sèches sont broyées dans de l'eau. Une décoction à 95°C est ensuite réalisée, ce qui a pour effet de détruire les enzymes protéolytiques, les rendant ainsi inactives. On qualifie de « bactériostatique », une composition ou un agent capable d'inhiber la multiplication des bactéries sans les tuer. On définit l'effet bactériostatique d'une composition par la mesure de la concentration minimale inhibitrice (CMI), c'est-à-dire la concentration la plus basse d'une composition considérée requise pour inhiber la croissance d'une souche bactérienne in vitro. Les inventeurs ont découvert que l'utilisation d'une décoction de feuilles de papayer sur la flore bactérienne buccale avait pour effet de limiter la prolifération de certaines au moins des bactéries présentes. En effet, la sphère buccale abrite naturellement de nombreuses espèces de bactéries commensales. Des études récentes ont permis de dénombrer près de 700 espèces différentes. Ces bactéries forment une matrice très collante, le biofilm, qui peut notamment adhérer sur les dents ou les gencives. Ce biofilm va parfois se calcifier et former ce qui est appelé le tartre dentaire, mais ce biofilm va le plus souvent se coller sur les surfaces des dents et des gencives et former une sorte de réseau qui va permettre à de nouvelles espèces de bactéries de se développer. Ces bactéries pourront alors être responsables de maladies telles gingivites, parodontites, de manière plus fréquente d'halitose ou d'aphtes. Socransky et al (J Periodontal Res. 2011, Sep 5) a récemment établi que la colonisation bactérienne se faisait toujours dans un ordre identique et préétabli. Cette dernière étude conforte son modèle expliquant la succession des différentes étapes : de l'apparition du biofilm à l'apparition et à la prolifération des bactéries pathogènes, s'il n'y a pas d'hygiène bucco-dentaire suffisante. Ce modèle est représenté sous forme de pyramide colorée. La base de la pyramide est constituée des bactéries commensales non pathogènes du complexe ou groupe pourpre telles que par exemple Veillonela parvula, du complexe bleu telles que Actinomyces sp., du complexe vert telles que Capnocytophage sp. et du complexe jaune telles que Streptococcus sp.. Le milieu de la pyramide constitué par le complexe orange comprend des bactéries pouvant être impliquées dans certaines pathologies. Ainsi, les souches bactériennes du complexe orange sont parodontopathogènes lorsqu'elles atteignent une concentration élevée. Par exemple, pour Fusobacterium nucleatum, la pathogénicité a été établie à 107 CFU/mL. Si la colonisation par ces bactéries n'est pas interrompue par l'hygiène bucco-dentaire ou par un traitement, des bactéries du complexe rouge (représentant le sommet de la pyramide) se mettent à proliférer. Les bactéries du complexe rouge sont systématiquement associées aux gingivites et parodontites chroniques. Parmi celles-ci, on peut citer Porphyromonas gingivalls, qui devient pathogène dès que sa concentration dépasse 103 CFU/pL. Enfin l'extrême pointe du sommet de la pyramide, le complexe violet, comprend des bactéries telles que Aggregatibacter actinomycetemcomitans ou Bacteroides forsythus, systématiquement impliquées dans les gingivites et parodontites agressives. L'homme du métier connaît parfaitement les différentes souches bactériennes de la sphère buccale et saura les identifier (par exemple par analyse par PCR) et déterminer quel est leur complexe d'appartenance. The composition according to the invention is a decoction of papaya leaves used as a bacteriostatic agent. The papaya leaves may be fresh, but are preferably dried beforehand. The leaves, whether fresh or dried, are ground in water. A decoction at 95 ° C is then performed, which has the effect of destroying the proteolytic enzymes, thus rendering them inactive. A "bacteriostatic" is a composition or an agent capable of inhibiting the multiplication of bacteria without killing them. The bacteriostatic effect of a composition is defined by the measurement of the minimum inhibitory concentration (MIC), that is to say the lowest concentration of a composition considered required to inhibit the growth of a bacterial strain. vitro. The inventors have discovered that the use of a decoction of papaya leaves on the oral bacterial flora has the effect of limiting the proliferation of at least some of the bacteria present. Indeed, the oral sphere is home to many species of commensal bacteria. Recent studies have counted nearly 700 different species. These bacteria form a very sticky matrix, the biofilm, which can especially adhere to the teeth or gums. This biofilm will sometimes calcify and form what is called dental calculus, but this biofilm will most often stick on the surfaces of the teeth and gums and form a kind of network that will allow new species of bacteria to grow. develop. These bacteria may then be responsible for diseases such as gingivitis, periodontitis, more frequently halitosis or canker sores. Socransky et al (J Periodontal Res 2011, Sep 5) recently established that bacterial colonization was always in an identical and pre-established order. This latest study confirms its model explaining the succession of different stages: from the appearance of the biofilm to the appearance and proliferation of pathogenic bacteria, if there is no sufficient oral hygiene. This model is represented in the form of a colored pyramid. The base of the pyramid consists of non-pathogenic commensal bacteria of the purple complex or group such as for example Veillonela parvula, blue complex such as Actinomyces sp., Green complex such as Capnocytophage sp. and the yellow complex such as Streptococcus sp. The middle of the pyramid constituted by the orange complex comprises bacteria that may be involved in certain pathologies. Thus, bacterial strains of the orange complex are periodontopathogenic when they reach a high concentration. For example, for Fusobacterium nucleatum, the pathogenicity was set at 107 CFU / mL. If colonization by these bacteria is not interrupted by oral hygiene or treatment, bacteria of the red complex (representing the top of the pyramid) begin to proliferate. Bacteria in the red complex are consistently associated with chronic gingivitis and periodontitis. Among these, we can mention Porphyromonas gingivalls, which becomes pathogenic as soon as its concentration exceeds 103 CFU / pL. Finally the extreme tip of the top of the pyramid, the purple complex, includes bacteria such as Aggregatibacter actinomycetemcomitans or Bacteroides forsythus, systematically involved in aggressive gingivitis and periodontitis. Those skilled in the art are perfectly familiar with the various bacterial strains of the oral sphere and will be able to identify them (for example by PCR analysis) and determine their complex of membership.

La composition selon l'invention a pour effet de désorganiser la constitution du biofilm agressif et d'équilibrer la flore non agressive. Cet effet sur le biofilm a comme conséquence de limiter la prolifération de certaines espèces bactériennes et ainsi d'empêcher l'apparition des troubles liées tels que l'halitose, les aphtes, les gingivites ou les parodontites. La composition de l'invention est particulièrement efficace à l'encontre des bactéries des complexes orange et rouge. Ainsi, selon l'invention, la composition à base de décoction de feuilles de papayer est utilisée pour limiter la prolifération d'au moins une bactérie du complexe orange ou d'au moins une bactérie du complexe rouge. Porphyromonas gingivalls, souche bactérienne du complexe rouge est particulièrement sensible à la composition de l'invention. Ainsi, ladite composition est avantageusement utilisée pour limiter la prolifération de Porphyromonas gingivalls. Les inventeurs ont montré que la composition mise en suspension dans une solution aqueuse avec une concentration finale de 10% avait un effet inhibiteur sur la prolifération de cette bactérie. La plus petite concentration de la composition conduisant à une totale inhibition de croissance (ou CMI) est de 1% (soit lg de composition pour 100 mL de milieu gélosé). Les inventeurs ont également montré en particulier que la prolifération de Fusobacterium nucleatum, bactérie du complexe orange, était stoppée par la composition. La CMI de la composition, mise en solution aqueuse à 10%, pour cette souche bactérienne est de 1%. La composition objet de l'invention est une décoction de feuilles de papayer fraîches ou sèches. Elle peut prendre différents aspects, de telle sorte qu'elle soit en contact avec la zone à traiter, ici la sphère buccale. A titre d'exemple, la composition à base de décoction de feuilles de papayer peut se présenter sous forme de poudre. Par exemple, après l'étape de décoction à 95°C, il est possible de concentrer et atomiser la décoction afin d'obtenir une poudre. Cette poudre peut ensuite être mise en gélule ou compactée pour former des comprimés. De manière préférée, la poudre pourra être compactée pour réaliser des comprimés dispersibles (hydrodispersibles ou orodispersibles), ce qui facilitera la mise en contact de la composition avec les bactéries de la sphère buccale. L'homme du métier sera à même de choisir l'agent désintégrant le plus adapté. A titre d'exemple, il pourra choisir parmi le glycolat d'amidon sodique, l'amidon de blé ou de maïs, l'amidon prégélatinisé_ La poudre pourra également être conditionnée sous forme de spray, nébullisateur ou aérosol pour une meilleure application et répartition dans la bouche ou la gorge. De manière préférée, la composition prendra la forme de poudre mise en suspension dans une solution liquide. La solution peut être constituée d'eau ou d'alcool ou d'un mélange des deux. L'homme du métier saura parfaitement adapter les concentrations relatives de poudre de feuilles de papayer, d'eau et d'alcool ou ajouter d'autres composés, telles que des arômes ou des colorants. Toutefois, de manière préférée, la composition est une suspension de poudre dans une solution aqueuse. L'homme du métier saura adapter la concentration à l'utilisation et à l'environnement à stabiliser. De manière tout à fait préférée, la solution comprend exclusivement de l'eau et de l'extrait de feuilles de papayer. La concentration qui peut être utilisée de façon standard est de 0,1 gramme de poudre pour 5 cL d'eau environ. Cette solution pourra ensuite être utilisée, par exemple comme bain de bouche ou gargarisme. De manière non limitative, la composition pourra également se présenter sous forme de pastille à sucer ou de gomme à mâcher ou de gel à appliquer sur les gencives. L'invention concerne également l'utilisation de la composition objet de l'invention pour limiter la prolifération bactérienne de la sphère buccale. 35 L'utilisation de la composition de l'invention en désorganisant le biofilm, rendra les dents lisses et nettes et assainira la gencive. L'invention concerne l'utilisation de la composition objet de l'invention pour prévenir et traiter la mauvaise haleine. L'invention concerne l'utilisation de la composition objet de l'invention pour prévenir l'apparition d'aphtes ou les traiter. The composition according to the invention has the effect of disrupting the constitution of the aggressive biofilm and balancing the non-aggressive flora. This effect on the biofilm has the effect of limiting the proliferation of certain bacterial species and thus preventing the occurrence of related disorders such as halitosis, canker sores, gingivitis or periodontitis. The composition of the invention is particularly effective against orange and red complex bacteria. Thus, according to the invention, the composition based on decoction of papaya leaves is used to limit the proliferation of at least one bacterium of the orange complex or at least one bacterium of the red complex. Porphyromonas gingivalls, bacterial strain of the red complex is particularly sensitive to the composition of the invention. Thus, said composition is advantageously used to limit the proliferation of Porphyromonas gingivalls. The inventors have shown that the composition suspended in an aqueous solution with a final concentration of 10% had an inhibitory effect on the proliferation of this bacterium. The smallest concentration of the composition leading to a total inhibition of growth (or MIC) is 1% (ie 1 g of composition per 100 ml of agar medium). The inventors have also shown in particular that the proliferation of Fusobacterium nucleatum, a bacterium of the orange complex, was stopped by the composition. The MIC of the composition, dissolved in aqueous solution at 10%, for this bacterial strain is 1%. The composition object of the invention is a decoction of fresh or dried papaya leaves. It can take different aspects, so that it is in contact with the area to be treated, here the oral sphere. For example, the composition based on a decoction of papaya leaves may be in the form of powder. For example, after the decoction step at 95 ° C, it is possible to concentrate and atomize the decoction to obtain a powder. This powder can then be gelatinized or compacted to form tablets. Preferably, the powder can be compacted to produce dispersible tablets (water-dispersible or orodispersible), which will facilitate contacting the composition with the bacteria of the oral sphere. The skilled person will be able to choose the most suitable disintegrating agent. By way of example, it may choose from sodium starch glycolate, wheat or maize starch, pregelatinized starch. The powder may also be packaged in the form of a spray, a nebulizer or an aerosol for better application and distribution. in the mouth or throat. Preferably, the composition will take the form of powder suspended in a liquid solution. The solution may be water or alcohol or a mixture of both. Those skilled in the art will be able to perfectly adapt the relative concentrations of papaya leaf powder, water and alcohol or add other compounds, such as flavorings or dyes. However, preferably, the composition is a suspension of powder in an aqueous solution. Those skilled in the art will be able to adapt the concentration to the use and the environment to be stabilized. Most preferably, the solution comprises exclusively water and papaya leaf extract. The concentration that can be used as standard is 0.1 gram of powder to about 5 ml of water. This solution can then be used, for example as a mouthwash or gargle. Without limitation, the composition may also be in the form of a lozenge or chewing gum or gel to be applied to the gums. The invention also relates to the use of the composition that is the subject of the invention for limiting the bacterial proliferation of the oral sphere. The use of the composition of the invention by disorganizing the biofilm will make the teeth smooth and clean and will clean the gingiva. The invention relates to the use of the composition object of the invention for preventing and treating bad breath. The invention relates to the use of the composition object of the invention to prevent the appearance of canker sores or treat them.

EXEMPLES 1-Obtention de la composition à base de décoction de feuilles de papayer utilisée comme agent bactériostatique. On fait tremper 5 kg de feuilles de papayer séchées et broyées dans 150 L d'eau. Cette solution est ensuite chauffée pendant 1 heure à 95°C puis filtrée à 100 pm. Le filtrat ainsi obtenu est concentré afin d'obtenir une teneur en matière sèche comprise entre 25 et 30% puis atomisé dans un évaporateur à buses avec comme température d'entrée 300°C et comme température de sortie 105°C. On obtient un peu plus d'un kilogramme de la composition de l'invention sous forme de poudre. 2- Mesure de l'activité bactériostatique in vitro La composition sous forme de poudre obtenue à l'exemple 1 est remise en suspension en solution aqueuse à 10% (10g de poudre pour 100 ml d'eau). Une gamme de dilutions en cascade au est réalisée et chaque dilution est incorporée à hauteur de 1/10ème dans un milieu gélosé coulé en boîtes de Pétri. La surface de la gélose est ensemencée avec un inoculum des souches à étudier, selon les indications du NCCLS (Clinical and Laboratory Standards Institue) et du CASFM (Comité de l'antibiogramme de la Société Française de Microbiologie) (2010). a- Souches à étudier Porphyromonas gingivalls Souche AIP bactérie du complexe rouge 103683 Fusobacterium nucleatum Souche CIP 101130T bactérie du complexe orange Actinomyces naeslundii Souche CIP 103128T bactérie du complexe bleu Veillonella sp. Souche AIP 4468 bactérie du complexe pourpre Streptococcus mutans Souche CIP 103220T bactérie du complexe jaune Les suspensions d'inoculation sont à une concentration de 108 bactéries/mL. b- Méthode Les dilutions de la solution ont été préparées extemporanément, selon les indications du NCCLS. Le produit a été testé à partir de la concentration de 10% (P/V), après remise en suspension en solution aqueuse contenant 0,1% de Tween 80. Quinze concentrations à tester (10x) sont directement incluses, sous un volume de 2 mL à 18 mL de milieu gélosé test maintenu en surfusion (gélose Brucella supplémenté en hémine, vitamine K1 et sang laqué). Après solidification, les géloses sont inoculées. Dans ces conditions, la concentration maximale testée est de 1% (P/V). Les suspensions bactériennes sont préparées 20 extemporanément à environ 108 bactéries/mL. Des dénombrements sont réalisés en parallèle. L'inoculation est réalisée à l'aide d'un ensemenceur multipoint sous forme de spots de 1 à 3 pL (soit environ 106 bactéries/spot). Les géloses sont incubées sous anaérobiose à 37 ± 2°C. Des témoins en absence de produit sont réalisés en début et en fin de test et sont incubés en anaérobiose et aérobiose (témoin permettant de vérifier l'absence de contamination) à 37 ± 2°C. Les CMI sont déterminées visuellement comme la plus petite concentration avec absence de croissance visible, par comparaison aux témoins. c- Résultats Les valeurs des CMI sont indiquées dans le tableau ci-dessous en pourcentage poids/volume. Par définition (O.M.S.), la CMI est la plus faible concentration d'un produit donné capable de provoquer une inhibition complète de la croissance d'une bactérie donnée, appréciable à l'oeil nu, après une période d'incubation donnée. Souches bactériennes Dénombrement des suspensions test (UFC/mL) CMI de la composition testée Porphyromonas gingivalls 2,8 x 108 1% Fusobacterium nucleatum 1,1 x 108 1% Actinomyces naeslundii 1,7 x 108 >1% Veillonella sp. 3,0 x 108 >1% Streptococcus mutans 2,8 x 108 >1% Les croissances de Porphyromonas gingivalis et de Fusobacterium nucleatum sont totalement inhibées en présence de la composition à 1% (1 g pour 100 ml de milieu gélosé). De fait, la CMI de la composition vis-à-vis de ces deux souches est de 1 %. A cette même concentration, les inhibitions de croissance de Actinomyces naeslundii, de Veillonella sp. et de Streptococcus mutans ne sont que partielles, la CMI de la composition vis-à-vis de ces souches est supérieure à 1 % . 3- Mesure de l'activité bactériostatique in vivo a- Effet sur le biofilm et la gingivite Une personne présentant un biofilm très collant et agressif, c'est-à-dire un biofilm visible à l'oeil nu sur la surface dentaire et provoquant une inflammation de la gencive (gencives rouges) utilise pendant 1 mois en bain de bouche et solution dentaire, la composition de l'invention telle qu'obtenue à l'exemple 1 diluée dans de l'eau à raison de 0,1 gramme de poudre dans 5 cL d'eau. Au bout de 15 jours, la surface des dents couvertes par le biofilm a visiblement diminué, l'inflammation des gencives est également en nette diminution : la gencive est moins rouge. Au bout d'un mois, la surface des dents apparait lisse et nette. L'inflammation de la gencive a complètement disparu. b- Effet sur les aphtes et la mauvaise haleine. EXAMPLES 1-Obtaining the composition based on a decoction of papaya leaves used as a bacteriostatic agent. Soak 5 kg of papaya leaves dried and crushed in 150 L of water. This solution is then heated for 1 hour at 95 ° C. and then filtered at 100 μm. The filtrate thus obtained is concentrated in order to obtain a solids content of between 25 and 30% and then atomized in a nozzle evaporator with an inlet temperature of 300 ° C. and an outlet temperature of 105 ° C. A little more than one kilogram of the composition of the invention is obtained in the form of a powder. 2- Measurement of In Vitro Bacteriostatic Activity The powder composition obtained in Example 1 is resuspended in 10% aqueous solution (10 g of powder per 100 ml of water). A range of cascade dilutions is made and each dilution is incorporated at a level of 1 / 10th in an agar medium poured into Petri dishes. The surface of the agar is inoculated with an inoculum of the strains to be studied, according to the indications of the NCCLS (Clinical and Laboratory Standards Institute) and the CASFM (Committee of the antibiogram of the French Society of Microbiology) (2010). a- Study strains Porphyromonas gingivalls AIP strain Red complex bacterium 103683 Fusobacterium nucleatum CIP strain 101130T Orange complex bacterium Actinomyces naeslundii CIP strain 103128T Blue complex veillonella sp. AIP strain 4468 Purple complex bacterium Streptococcus mutans CIP strain 103220T Yellow complex bacterium Inoculation suspensions are at a concentration of 108 bacteria / mL. b- Method The dilutions of the solution were prepared extemporaneously, according to the indications of the NCCLS. The product was tested from the concentration of 10% (W / V), after resuspension in aqueous solution containing 0.1% Tween 80. Fifteen test concentrations (10x) are directly included, in a volume of 2 mL to 18 mL of test medium maintained in supercooling (Brucella agar supplemented with hemin, vitamin K1 and lacquered blood). After solidification, the agar plates are inoculated. Under these conditions, the maximum concentration tested is 1% (W / V). The bacterial suspensions are prepared extemporaneously at about 108 bacteria / ml. Counts are made in parallel. Inoculation is carried out using a multipoint seedling in the form of spots of 1 to 3 μL (ie about 106 bacteria / spot). The agar plates are incubated under anaerobiosis at 37 ± 2 ° C. Controls in the absence of product are performed at the beginning and end of the test and are incubated anaerobically and aerobically (control to verify the absence of contamination) at 37 ± 2 ° C. MICs are visually determined as the lowest concentration with no visible growth compared to controls. c- Results The MIC values are given in the table below in weight / volume percentage. By definition (O.M.S.), the MIC is the lowest concentration of a given product capable of causing a complete inhibition of the growth of a given bacterium, appreciable to the naked eye, after a given incubation period. Bacterial strains Enumeration of test suspensions (CFU / mL) MIC of test composition Porphyromonas gingivalls 2.8 x 108 1% Fusobacterium nucleatum 1.1 x 108 1% Actinomyces naeslundii 1.7 x 108> 1% Veillonella sp. 3.0 x 108> 1% Streptococcus mutans 2.8 x 108> 1% The growths of Porphyromonas gingivalis and Fusobacterium nucleatum are totally inhibited in the presence of the 1% composition (1 g per 100 ml of agar medium). In fact, the MIC of the composition vis-à-vis these two strains is 1%. At this same concentration, inhibitions of growth of Actinomyces naeslundii, Veillonella sp. and Streptococcus mutans are only partial, the MIC of the composition vis-à-vis these strains is greater than 1%. 3- Measurement of bacteriostatic activity in vivo a- Effect on biofilm and gingivitis A person with a very sticky and aggressive biofilm, that is to say a biofilm visible to the naked eye on the dental surface and causing inflammation of the gum (red gums) used for 1 month in mouthwash and dental solution, the composition of the invention as obtained in Example 1 diluted in water at a rate of 0.1 gram of powder in 5 cc of water. After 15 days, the surface of the teeth covered by the biofilm has visibly decreased, inflammation of the gums is also down sharply: the gum is less red. After one month, the surface of the teeth appears smooth and clean. Inflammation of the gums has completely disappeared. b- Effect on canker sores and bad breath.

Une personne se plaignant régulièrement d'aphtes et de mauvaise haleine malgré une hygiène buccale biquotidienne par brossage et bain de bouche est traitée avec la composition de l'invention. Un bactériogramme réalisé sur un échantillon de biofilm montre la présence de Porphyromonas gingivalls à une concentration supérieure à 103 CFU/pL. La poudre obtenue dans l'exemple 1 est diluée à raison de 0,1 gramme de poudre dans 5cL d'eau et utilisée comme solution dentaire et bain de bouche. Après 15 jours d'utilisation biquotidienne, la 35 personne voit disparaître la gêne occasionnée par la présence d'aphtes et la mauvaise haleine. Une nouvelle analyse bactériologique révèle une diminution significative de la quantité de Porphyromonas gingivalls en dessous du seuil de pathogénicité. A person regularly complaining of canker sores and bad breath despite oral hygiene twice daily by brushing and mouthwash is treated with the composition of the invention. A bacteriogram performed on a biofilm sample shows the presence of Porphyromonas gingivalls at a concentration greater than 103 CFU / pL. The powder obtained in Example 1 is diluted with 0.1 gram of powder in 5cL of water and used as a dental solution and mouthwash. After 15 days of twice-daily use, the person sees the discomfort caused by the presence of canker sores and bad breath disappear. A new bacteriological analysis reveals a significant decrease in the amount of Porphyromonas gingivalls below the threshold of pathogenicity.

L'utilisation de la composition à base de décoction de feuilles de papayer perturbe l'organisation du biofilm agressif selon le schéma de Socransky par inhibition du développement de Fusobacterium nucleatum et par conséquent, celui de Porphyromonas gingivalls. Le développement de cette dernière souche bactérienne étant non seulement limité par la faible concentration de Fusobacterium nucleatum mais aussi directement par la préparation objet de l'invention. Bien entendu, l'invention n'est pas limitée à ce qui vient d'être décrit, mais au contraire englobe toute variante entrant dans le cadre défini par les revendications. Bien que l'invention ait été décrite en relation avec la sphère buccale, l'invention est applicable à 20 d'autre partie du corps pour prévenir d'éventuels déséquilibres de la flore commensale. The use of the papaya leaf decoction composition disrupts the organization of the aggressive biofilm according to the Socransky scheme by inhibiting the development of Fusobacterium nucleatum and therefore that of Porphyromonas gingivalls. The development of this latter bacterial strain is not only limited by the low concentration of Fusobacterium nucleatum but also directly by the preparation object of the invention. Of course, the invention is not limited to what has just been described, but on the contrary encompasses any variant within the scope defined by the claims. Although the invention has been described in relation to the oral sphere, the invention is applicable to other parts of the body to prevent possible imbalances in the commensal flora.

Claims

REVENDICATIONS1. Composition 13 leaves of 1, used papaya CLAIMS1. Composition 13 sheets of 1, used papaya used as

2. Composition based on decoction of bacteriostatic agent. according to the claim for limiting the proliferation of at least one bacterium of the oral bacterial flora.

3. A composition according to claim 2, used to limit the proliferation of at least one bacterium of the red complex or orange complex. 1, used gingivalis

4. Composition according to the claim for limiting the proliferation of Porphyromonas 1, used nucleatum

5. Composition according to the claim for limiting the proliferation of fusobacterium

6. Composition according to claim 1, in the form of an aqueous solution.

7. A composition according to claim 6, containing exclusively water and extract of papaya leaves.

8. Use of a composition according to claims 1 to 7 for obtaining a product for limiting the bacterial proliferation of the oral sphere

9. Use of a composition according to claims 1 to 7 for obtaining a product for limiting the occurrence of halitosis.

10. Use of a composition according to claims 1 to 7 for obtaining a product intended to limit the appearance of canker sores.