FR2897778A1 - Procede d'obtention d'un actif cosmetique pour amiliorer l'etat des peaux a tendance grasse et/ou acneique, principe actif obtenu et compositions associees - Google Patents
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Abstract
L'objet de l'invention est un procédé d'obtention d'un principe actif pour améliorer l'état des peaux à tendance grasse et/ou acnéique, caractérisé en ce qu'il comprend la succession des étapes suivantes :- solubilisation de poudre de Reine des prés,- élimination sélective d'une partie des polyphénols,- séparation des phases solubles et insolubles,- purification de la fraction active,- filtration, et- filtration stérilisante.L'invention couvre le produit obtenu, les utilisations et la composition cosmétique incluant ce principe actif.
Description
PROCEDE D'OBTENTION D'UN ACTIF COSMETIQUE POUR AMELIORER L'ETAT DES PEAUX
A TENDANCE GRASSE ET/OU ACNEIQUE, PRINCIPE ACTIF OBTENU ET COMPOSITIONS ASSOCIEES
La présente invention a trait à un procédé d'obtention d'un principe actif issu de Reine des prés pour améliorer l'état des peaux à tendance grasse et/ou acnéique. L'invention se rapporte également au principe actif susceptible d'être obtenu par ce procédé et aux compositions cosmétiques associées.
L'acné est un problème de peau très fréquent qui se trouve particulièrement accentué entre 12 et 25 ans. Il se manifeste notamment par une peau grasse accompagnée d'imperfections difficiles à masquer et à assumer. Ce caractère inesthétique a généralement des répercussions psychologiques, et beaucoup de gens souhaitent vivement remédier à cette situation d'inconfort.
L'apparition des manifestations cutanées acnéiques est notamment liée à un développement bactérien à la surface de la peau. C'est pourquoi le principe actif selon la présente invention se propose d'améliorer l'état des peaux grasses et/ou acnéiques en prévenant la prolifération des bactéries à la surface de la peau.
La peau est naturellement colonisée par une microflore dont l'équilibre assure un rôle de barrière en limitant l'invasion et la croissance des bactéries pathogènes à la surface cutanée. Un changement de l'environnement cutané, un manque temporaire d'hygiène, un changement de statut hormonal peut bouleverser cet équilibre permettant ainsi une contamination de la couche cornée par des germes pathogènes.
La cause initiale de l'acné est l'obstruction du canal pilo-sébacé par kératinisation anormale des parois du follicule et par hypersécrétion de sébum. Cette occlusion entraîne la formation d'une lésion rétentionnelle sous forme de comédon ouvert, dit point noir, ou de microkyste fermé, dit point blanc. Les germes pathogènes de la peau, tels que Propionibactérium acnes (P. acnes) et Staphylococcus aureus (S. aureus), sont alors dans des conditions idéales pour proliférer et entraîner une réaction inflammatoire à l'intérieur du follicule se traduisant par l'apparition de papules, pustules ou nodules. Pour éviter les désordres cutanés acnéiques et limiter les complications, il est 10 important d'agir directement sur les bactéries pathogènes responsables des processus inflammatoires. De fait, la présente invention a pour objectif de lutter directement contre les bactéries présentes à la surface des peaux à tendance acnéique en réduisant la prolifération de P. acnes et en inhibant la croissance de S. aureus. 15 Pour lutter contre les infections microbiennes, la peau est équipée d'un système de défense naturelle. Certaines cellules épithéliales, notamment les kératinocytes, produisent et sécrètent des peptides anti-microbiens naturels, en particulier les cathélicidines, qui limitent la prolifération des germes pathogènes. Les cathélicidines sont capables de désorganiser la membrane bactérienne en la 20 perméabilisant et peuvent également induire une réponse immunitaire indirecte grâce à leur propriété chimiotactique vis-à-vis des cellules immunitaires. Dans le cas des peaux à tendance acnéique, les défenses naturelles sont souvent déréglées ou dépassées. Il est donc nécessaire de les stimuler pour lutter contre les germes pathogènes cutanés et limiter les réactions inflammatoires impliquées 25 dans l'apparition des imperfections de la peau liées à l'acné. Ainsi, la présente invention a également pour objectif de favoriser le retour de l'écosystème cutané pour lutter contre la prolifération des bactéries présentes à la surface des peaux à tendance grasse et/ou acnéique en stimulant les fonctions naturelles de défense de la peau. En particulier, la présente invention se propose d'augmenter la synthèse des cathélicidines, anti-microbiens naturels impliqués dans la réponse immunitaire innée de la peau. Un autre facteur important impliqué dans l'acné est la sécrétion sébacée.
Le sébum résulte de la sécrétion holocrine des glandes sébacées et se forme par la désintégration de leurs cellules glandulaires à contenu lipidique. L'hyper-séborrhée favorise la prolifération bactérienne cutanée impliquée dans l'apparition des imperfections de l'acné. La sécrétion excessive de sébum se manifeste par une peau brillante, irritée et une sensation d'inconfort typique des peaux grasses et/ou acnéiques. Aussi, la présente l'invention se propose de limiter les conséquences de l'hyperséborrhée sur les peaux à tendance grasse et/ou acnéique en régulant la sécrétion de sébum à la surface de la peau. Le principe actif selon la présente invention améliore donc l'état des peaux à 15 tendance grasse et/ou acnéique en limitant la prolifération de bactéries pathogènes à la surface de la peau par : - stimulation des fonctions naturelles de défenses de la peau, en particulier par augmentation de la synthèse des cathélicidines, - inhibition de la prolifération des germes directement impliqués dans 20 l'apparition des désordres cutanés, notamment P. acnes et S. aureus, et - diminution de la sécrétion de sébum à la surface de la peau. Ainsi le principe actif selon l'invention permet d'améliorer toutes les manifestations caractéristiques des peaux à tendance grasse et/ou acnéique. Il limite le nombre de lésions et améliore l'homogénéité du grain de la peau. 25 La présente invention est maintenant décrite en détail pour permettre de mieux appréhender les résultats obtenus regroupés en tableaux. 1/ PROCEDE D'OBTENTION DU PRINCIPE ACTIF SELON L'INVENTION : Le procédé d'obtention du principe actif selon l'invention comprend la succession des étapes suivantes : - solubilisation de poudre de Reine des prés dans un mélange hydroalcoolique constitué d'eau et de butylène glycol, - élimination sélective d'une partie des polyphénols par adsorption, - séparation des phases solubles et insolubles par centrifugation, décantation, filtration, - purification de la fraction active, - filtration, et - filtration stérilisante. 2/ CARACTERISATION DU PRINCIPE ACTIF SELON L'INVENTION : 2-1/ Matières sèches : On mesure le taux de matières sèches par passage à l'étuve à 105 C en présence de sable d'un échantillon de poids initial donné jusqu'à obtention d'un poids constant. Le taux de matières sèches est compris entre 6 et 40 g/I, plus particulièrement entre 15 et 23 g/I. 2-2/ Mesure du pH : Le pH mesuré par la méthode potentiométrique à température ambiante conduit à des valeurs comprises entre 3,5 et 6,5, plus particulièrement entre 4,5 et 5,5. 2-3/ Dosage des composés phénoliques Le dosage est réalisé par lecture de l'intensité de coloration en présence de ferricyanure de potassium, intensité détectable à 715 nm et comparée à une gamme étalon d'acide gallique. Le taux de polyphénol est compris entre 0,3 et 1,8 g/I, plus particulièrement entre 0,6 à 1 g/I. 2-4/ Caractérisation des composés phénoliques La caractérisation et la quantification des composés phénoliques du principe actif selon l'invention sont réalisées par HPLC (High Performance Liquid Chromatography).
Le chromatogramme du principe actif selon l'invention montre la présence de composés hydroxycinnamiques, hydroxybenzoïques, de flavone et de flavonol, les proportions étant sensiblement de l'ordre des valeurs données dans le tableau suivant : Famille de polyphénols Concentration identifiée Flavonol 65% Hydroxycinnamiques 18,8% Hydroxybenzoïques 15,4% Flavone 0, 8% 2-5/ Identification de la fraction active Pour déterminer la ou les fractions actives, on utilise du polyvinylpolypyrolidone (PVPP) de façon à éliminer la totalité des polyphénols du principe actif selon l'invention. On compare ensuite la capacité d'inhibition de prolifération bactérienne de la fraction privée des polyphénols à celle du principe actif selon l'invention. Testés à la même concentration, le principe actif selon l'invention présente une activité inhibitrice de la prolifération bactérienne alors que la fraction privée des polyphénols n'a plus cette activité. Par conséquent, ce sont les composés phénoliques qui confèrent au principe 20 actif selon l'invention son activité d'inhibition de la prolifération bactérienne. 3/EVALUATION DE L'EFFET DU PRINCIPE ACTIF SELON L'INVENTION 3-1/ Evaluation de l'effet sur la synthèse des cathélicidines Cette étude a pour objectif d'évaluer l'effet du principe actif selon l'invention sur l'expression des ARNm codant pour les cathélicidines, peptides anti-microbiens synthétisés par les kératinocytes humains, essentiels pour la défense contre les infections de la peau. Elle est réalisée sur des kératinocytes humains normaux selon le protocole qui suit. A JO les cellules sont ensemencées puis incubées dans une étuve à 37 C.
A J1 et à J4 le milieu de culture est renouvelé. A J5, les kératinocytes sont traités avec le principe actif selon l'invention à 0,2%, 0,4% et 1,0%, puis sont de nouveau incubés à 37 C. A J6, les cellules sont récupérées et on extrait les ARN totaux qui sont reverses-transcripts. Les ADN complémentaires obtenus sont ensuite analysés par PCR (Polymerase Chain Reaction) quantitative. Les résultats obtenus, exprimés en pourcentage par rapport au témoin de référence, sont présentés dans le tableau suivant : Taux d'ARNm des cathélicidines / Témoin (%) Principe actif selon l'invention 0,2% + 12 Principe actif selon l'invention 0,4% + 55 Principe actif selon l'invention 1% + 130 On constate que le principe actif selon l'invention augmente la synthèse des ARNm des cathélicidines, cet effet étant dose-dépendant. Testé à 1% sur kératinocytes humains normaux, il augmente de 130% la synthèse des ARNm des cathélicidines.
Le principe actif selon l'invention permet donc d'augmenter la synthèse d'anti-microbiens par les kératinocytes et par conséquent la défense contre les infections de la peau. 3-2/ Evaluation de l'effet sur la prolifération bactérienne Le but de cette étude est d'évaluer l'activité antimicrobienne directe du principe actif selon l'invention. Cette étude est réalisée par mise en contact du principe actif selon l'invention avec une suspension bactérienne de Staphylococcus aureus (S. aureus) ou de Propionibacterium acnes (P. acnes).
Le principe actif selon l'invention dosé à 2,5% et 5% est mis en contact avec la suspension microbienne à 10' germes/ml dans les proportions 9 volumes de principe actif pour 1 volume de suspension. L'incubation est réalisée à 30 C pendant 12 heures pour S. aureus et à 30 C en milieu anaérobie pendant 7 jours pour P. acnes.
Après incubation on dénombre les germes. Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau qui suit en pourcentage d'inhibition de la croissance du germe % d'inhibition de la /G d'inhibition de la croissance de S. aureus croissance de P. acnes Principe actif 2,5% -60,6 -58,0 Principe actif 5,0% -81,6 -92,0 Ces résultats montrent que le principe actif selon l'invention inhibe la croissance de S. aureus et de P. acnes, ces effets étant dose-dépendants. Lorsqu'il est dosé à 5% le principe actif selon l'invention inhibe de 82% la croissance de S. aureus et de 92% celle de P. acnes.
Le principe actif selon l'invention présente donc une effet anti-microbien direct. 3-3/ Etude des propriétés anti-séborrhéiques Le but de cette étude est de quantifier in vivo l'efficacité anti-séborrhée du principe actif selon l'invention formulé à 4% en émulsion contre placebo. L'étude est réalisée sur des volontaires sains d'âge compris entre 21 et 64 ans, avec un taux de sébum supérieur à 190. Elle consiste à la fois à mesurer l'indice lipidique et à visualiser et quantifier les lipides épidermiques, avant et après 28 jours d'applications biquotidiennes du principe actif selon l'invention et du placebo. La mesure du sébum est réalisée à l'aide d'un Sébumètre, dispositif qui permet une mesure directe de la sécrétion sébacée en pg de sébum / cm2 de peau. La visualisation et la quantification du sébum sont réalisées au moyen d'un patch (Sebutape), constitué d'une bandelette particulièrement sensible aux sécrétions sébacées. La bandelette est ensuite analysée à l'aide d'un logiciel d'analyse d'images pour apprécier le nombre et l'importance des taches dont la surface est proportionnelle à la quantité de lipides excrétés. Le protocole opératoire est décrit ci-dessous.
A JO, on détermine deux zones cutanées symétriques au niveau du front, une destinée à être traitée par le principe actif selon l'invention, l'autre par le placebo. Sur chacune de ces zones on effectue trois mesures de l'indice lipidique puis on applique un patch (Sebutape) pendant 30 minutes sur la peau préalablement dégraissée à l'alcool.
Entre JO et J27, le principe actif selon l'invention et le placebo sont appliqués bi quotidiennement.
A J28, on effectue à nouveau sur chacune des zones trois mesures de l'indice lipidique et on applique un patch Sebutape pendant 30 minutes sur la peau préalablement dégraissée à l'alcool.
a - Mesure de l'indice lipidique Les résultats en pg de sébum / cm2 de peau relatifs à la sébumétrie sont présentés dans le tableau qui suit : JO J28 Placebo 254 195 Principe actif selon l'invention 4% 263 179 Variation / Placebo (%) -12 On constate que le principe actif selon l'invention formulé à 4% en 10 émulsion, diminue de 12% l'indice lipidique après 28 jours d'applications biquotidiennes. b - Visualisation et quantification des lipides épidermiques Les paramètres étudiés sont le nombre de spots lipidiques par cm2 de peau et la surface totale occupée par les spots lipidiques. 15 Les résultats sont présentés dans le tableau suivant : Variation / Placebo (%) Nombre de spots / cm2 -10 Surface totale occupée -12 Ces résultats montrent que le principe actif selon l'invention formulé à 4% en émulsion, après 28 jours d'applications biquotidiennes, entraîne une diminution du nombre de spots de 10% et de la surface totale occupée de 12%. Le principe actif selon l'invention diminue donc la sécrétion de sébum au niveau de la peau. 3-4/ Effet astringent Cette étude a pour objectif de visualiser in vivo l'effet astringent du principe actif selon l'invention formulé à 4% en émulsion. L'étude est réalisée sur des volontaires sains d'âge compris entre 21 et 40 10 ans par visualisation des pores sur les ailes du nez à l'aide d'une caméra noir et blanc et d'un éclairage UVA. A t0, on récupère les images des pores au niveau de 2 zones sur les ailes du nez. On applique ensuite 15 pl du principe actif selon l'invention ou du placebo. 15 Après 15 minutes on récupère à nouveau les images des pores au niveau des deux zones. On étudie le diamètre de trois pores choisis de manière aléatoire sur chaque zone. Les résultats sur le diamètre des pores en millimètres sont présentés dans 20 le tableau suivant : TO T15 Placebo 0,35 0,35 Principe actif selon l'invention 4% 0,38 0,36 Variation / Placebo (%) -5 Ces résultats montrent qu'après une application unique et en comparaison au placebo, le principe actif selon l'invention formulé à 4% dans une émulsion diminue le diamètre des pores de la peau de 5%. 3-5/ Evaluation dermatologique de l'effet anti-acnéique Cette étude a pour objectif d'évaluer in vivo l'effet du principe actif selon l'invention formulé à 4% en émulsion contre placebo sur les peaux à tendance acnéique. Elle est réalisée sur 22 volontaires sains, d'âge compris entre 23 et 32 ans.
L'étude, qui consiste à effectuer une évaluation dermatologique et à prendre des photographies de haute résolution pour compter les lésions, est réalisée selon le protocole opératoire qui suit. A JO, on effectue une évaluation dermatologique et on prend des photographies haute résolution sur chacun des hémi-visages des volontaires.
Entre JO et J27, le principe actif selon l'invention et le placebo sont appliqués deux fois par jour. A J28, on réalise à nouveau une évaluation dermatologique et on prend des photographies haute résolution sur chacun des hémi-visages des volontaires. a - Evaluation dermatologique L'évaluation est basée sur un examen clinique réalisé sur les deux hémivisages. Les points étudiés sont : - Al : peau à tendance séborrhéique (brillance) - A2 : présence de lésions rétentionnelles (comédons fermés et ouverts) - A3 : présence de lésions inflammatoires (papules et pustules) -A4 : Infiltration des lésions - A5 : présence de macrocystes ou abcès A6 : évaluation de la dilatation des pores - A7 : évaluation de l'homogénéité du grain de la peau (lissage) - A8 : score de l'acné. Les résultats sont présentés ci-dessous : Variation / placebo (%) Al -3 A2 -2 A3 -20 A4 -22 A 5 -40 A6 -5 A7 + 21 A8 -7 On constate qu'après 28 jours d'applications biquotidiennes et en comparaison au placebo, le principe actif selon l'invention améliore les différents items étudiés par évaluation clinique. b - comptage des lésions Les résultats relatifs à l'étude des photographies, présentés dans le tableau qui suit, montrent qu'après 28 jours d'applications biquotidiennes, le principe actif selon l'invention entraîne une diminution de 20% du nombre de lésions permanentes au niveau du visage. Placebo Principe actif 4% JO J28 JO J28 Moyenne 10 11 12 10 Variation / placebo (%) -20 Après 28 jours d'applications biquotidiennes, le principe actif selon l'invention permet donc d'améliorer toutes les manifestations caractéristiques des peaux à tendance acnéique. 4/ COMPOSITION COSMETIQUE INCLUANT LE PRINCIPE ACTIF SELON L'INVENTION : La présente invention couvre aussi les compositions cosmétiques incluant le principe actif selon la présente invention dans différentes formes galéniques, notamment gel, solution, émulsion, crème.... Il convient alors d'analyser la stabilité des formes galéniques incluant le principe actif selon l'invention, ceci dans des proportions comprises entre 1 et 5 %. La stabilité est caractérisée par une absence de précipitation de l'actif, une absence de crémage et une absence de déphasage. On peut citer des formulations ayant montré une stabilité physique incluant 5% de principe actif selon l'invention. - Carbopol : 0,5% avec Triéthanolamine qsp pl-I=6,5 - Phénonip : 0,7% - Principe actif 5,0% - Eau:93,8% - Sépigel 305: 2,0% - Phénonip : 0,7% - Principe actif : 5,0% - Eau:92,3% - Montanov 202: 3,0% - Isopropyl palmitate : 12,0% Phénonip : 0,7% - Viscolam AT 64 : 2,0% - Principe actif : 5,0% Gel limpide : Gel opaque : Gel émulsionné : 5 10 15 20 - Eau : 77,3% Emulsion non ionique : - Montanov 202 : 3,0% -Simulsol 165: 2,0% - Isopropyl palmitate : 20,0% - Phénonip : 0,7% -Principe actif : 5,0% - Eau : 69,3% Emulsion anionique : - Acide stéarique : 7,0% - Triethanolamine : 3,5% Isopropyl palmitate : 20,0% - Phénonip : 0,7% - Principe actif 5,0% Eau:63,8% Emulsion cationique : -Quaternium-82 : 5,0% - Alcool cétylique : 2,0% - Isopropyl palmitate : 15,0% - Alcool cétéarylique : 1% - PEG 100 stéarate : 1% - Phénonip : 0,7% - Principe actif 5,0% - Eau : 71,3% De plus, des tests ont montré la compatibilité du principe actif avec les matières premières utilisées en cosmétique.
Claims (9)
1. Procédé d'obtention d'un principe actif pour améliorer l'état des peaux à tendance grasse et/ou acnéique, caractérisé en ce qu'il comprend la succession des étapes suivantes : - solubilisation de poudre de Reine des prés dans un mélange hydroalcoolique, - élimination sélective d'une partie des polyphénols, - séparation des phases solubles et insolubles, -purification de la fraction active, - filtration, et - filtration stérilisante.
2. Procédé d'obtention d'un principe actif selon la revendication 1, caractérisé en ce qu'il comprend la succession des étapes suivantes : -solubilisation de poudre de Reine des prés dans de l'eau et du butylène glycol, - élimination sélective d'une partie des polyphénols par adsorption, - séparation des phases solubles et insolubles par centrifugation, décantation, filtration, - purification de la fraction active, - filtration, et - filtration stérilisante.
3. Principe actif obtenu par la mise en oeuvre du procédé selon l'une des revendication 1 ou 2, caractérisé par : - un taux de matières sèches compris entre 6 et 40 g/I, - un pH compris entre 3,5 et 6,5, - une teneur en composés phénoliques comprise entre 0,3 et 1,8 g/I.
4. Principe actif obtenu par la mise en oeuvre du procédé selon l'une des revendication 1 ou 2, caractérisé par : - un taux de matières sèches compris entre 15 et 23 g/I, - un pH compris entre 4,5 et 5,5, - une teneur en composés phénoliques comprise entre 0,6 et 1,0 g/I.
5. Utilisation du principe actif selon l'une des revendications 3 ou 4 pour incorporation à une composition cosmétique, caractérisée en ce qu'il stimule les fonctions de défenses naturelles cutanées par augmentation de la synthèse d'anti-microbiens naturels notamment des cathélicidines.
6. Utilisation du principe actif selon l'une des revendications 3 ou 4 pour incorporation à une composition cosmétique, caractérisée en ce qu'il inhibe la prolifération des germes pathogènes impliqués dans l'apparition des désordres cutanés acnéiques, notamment P. acnes et S. aureus.
7. Utilisation du principe actif selon l'une des revendications 3 ou 4 pour incorporation à une composition cosmétique, caractérisée en ce qu'il présente un effet anti-séborrhéique.
8. Utilisation du principe actif selon l'une des revendications 3 ou 4 pour incorporation à une composition cosmétique, caractérisée en ce qu'il améliore la qualité des peaux à tendance acnéique par diminution du nombre de lésions, diminution de la brillance de la peau et amélioration de l'homogénéité du grain de la peau.
9. Composition cosmétique incluant le principe actif selon l'une des revendications 3 ou 4, caractérisée en ce qu'elle est constituée d'un gel limpide, d'un gel opaque, d'un gel émulsionné, d'une émulsion non ionique, d'une émulsion anionique ou d'une émulsion cationique.
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