FR2879446A1 - Composition comprenant un extrait de cyclopia sp - Google Patents
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Abstract
L'invention concerne une composition cosmétique à base d'un extrait de parties aériennes de Cyclopia sp., utile notamment pour protéger la peau des agressions extérieures et lutter contre le vieillissement cutané, assurer le blanchiment de la peau, et générer une action amincissante.
Description
La présente invention concerne une composition cosmétique à base d'un
extrait de parties aériennes de Cyclopia sp., utile notamment pour protéger la peau des agressions extérieures et lutter contre le vieillissement cutané, assurer le blanchiment de la peau, et générer une action amincissante.
Le genre Cyclopia sp., endémique de la région du Fynbos d'Afrique du Sud (province du Cape), regroupe environ 24 espèces appartenant à la famille des Fabacées. II est représenté par des arbustes pouvant atteindre 1 m de hauteur, dont les tiges sont vertes à jaune doré selon l'espèce considérée. Les feuilles sont invariablement divisées en trois folioles fines et allongées et les fleurs, très odorantes, sont de couleur jaune vif.
Plusieurs espèces de Cyclopia ont été décrites pour contenir principalement de nombreux composés polyphénoliques. Parmi les flavonoïdes présents, les constituants majoritaires sont des xanthones-C- glycosylées telles que la mangiférine et l'isomangiférine, ainsi que des flavanones comme l'hespérétine, l'isosakuranétine, et leurs formes glycosylées (Joubert et al., Eur Food Res Technol, 216: 270-273; 2003, De Nysschen et al., Biochemical Systematics and Ecology, 24 (3) : 243-246; 1996).
Les parties aériennes fermentées de plusieurs espèces du genre Cyclopia sp., notamment Cyclopia intermedia, C. genistoides, C. subternata et C. sessiliflora, sont utilisées traditionnellement en infusion pour obtenir un thé ayant une odeur caractéristique de miel: le "honeybush tea". Beaucoup de propriétés bénéfiques pour la santé sont associées à la consommation régulière de ce thé. II ne contient pas de caféine et présente une teneur en tanins très basse, bien inférieure à celle des thés orientaux. De ce fait il est particulièrement intéressant pour les enfants et les personnes ayant des problèmes cardiaques ou digestifs, pour lesquelles les stimulants et les tanins sont à éviter.
L'utilisation d'un extrait du genre Cyclopia sp. dans l'art antérieur concerne uniquement le domaine alimentaire. La demande de brevet WO 03/092413 décrit en effet des compléments alimentaires comprenant un extrait de Cyclopia intermedia, associé ou non à un extrait de Aspalathus linearis, destinés à apporter des polyphénols aux propriétés anti-oxydantes.
Les inventeurs ont maintenant mis en évidence qu'un extrait de parties aériennes de Cyclopia sp. présentait des propriétés cosmétiques particulièrement intéressantes.
La présente invention a donc pour objet une composition cosmétique destinée à un usage topique comprenant, outre un véhicule cosmétiquement acceptable, un extrait de parties aériennes de Cyclopia sp.
Par véhicule cosmétiquement acceptable , on entend un véhicule adapté pour une utilisation en contact avec des cellules humaines et animales, en particulier les cellules de l'épiderme, sans toxicité, irritation, réponse allergique indue et similaire, et proportionné à un rapport avantage/risque raisonnable.
Les parties aériennes comprennent notamment les branches feuillées, les feuilles, ou l'écorce des arbustes.
Par Cyclopia sp. , on entend toutes les espèces du genre Cyclopia, à savoir notamment Cyclopia sessiliflora, Cyclopia subternata, Cyclopia intermedia et Cyclopia genitoides.
L'extrait de parties aériennes de Cyclopia sp. peut être obtenu par extraction par un solvant choisi parmi le méthanol, l'éthanol, l'eau, l'acétate d'éthyle et un mélange de ces solvants ou parmi le propylène glycol, le butylène glycol mélangé ou non avec de l'eau. Les mélanges de solvants peuvent être réalisés dans toutes les proportions possibles.
Selon un mode de réalisation de l'invention, l'extrait de parties aériennes de Cyclopia sp. est obtenu après broyage des parties aériennes dans un solvant et extraction à chaud, entre 40 et 60 C, dans le même solvant pendant une à deux heures. L'extrait est ensuite filtré et séché, par exemple par atomisation ou lyophilisation.
II est à noter que l'extrait peut être concentré par évaporation sous vide ou bien qu'une fraction particulière de l'extrait peut être purifiée ou concentrée notamment par extraction liquide/liquide ou par chromatographie préparative.
Selon un mode préféré de l'invention, l'extrait de parties aériennes de Cyclopia sp. peut être obtenu par extraction hydroalcoolique, de préférence dans un mélange éthanol/eau dans des proportions de 60/40 en poids.
De manière préférentielle, les compositions selon l'invention peuvent comprendre de 0,0001 à 2 % dudit extrait exprimé en poids par rapport au poids total de la composition.
L'application d'une composition selon l'invention est effectuée par voie topique.
La composition est destinée plus particulièrement au traitement de la 10 peau, des muqueuses ou des cheveux, et peut se présenter sous forme d'onguent, de crème, d'huile, de lait, de pommade, de poudre, de tampon imbibé, de solution, de gel, de spray, de lotion, de suspension, de savon ou de shampooing.
De manière encore plus préférée, les compositions de l'invention sont des compositions cosmétiques sous la forme d'émulsion huile dans eau ou eau dans huile, ou d'émulsion multiple, de microémulsion, de gel aqueux, ou hydroalcoolique, de crème, d'huile, de lotion aqueuse ou hydroalcoolique.
Ces compositions sont particulièrement avantageuses pour lutter contre le vieillissement cutané, notamment le photovieillissement, pour blanchir la peau et pour produire un amincissement.
Le vieillissement cutané est provoqué par une diminution de la synthèse de collagène, par une dégradation de la matrice dermique due à l'augmentation de l'induction des MMP ou métalloprotéases de la matrice et par l'exposition aux rayonnements solaires. Ces métalloprotéases sont des enzymes de plus en plus exprimées au cours du vieillissement et au cours d'exposition à certains stress, notamment les rayonnements UV ou les polluants.
Il existe plusieurs métalloprotéases matricielles bien distinctes. Entres autres: - la MMP 1 ou collagénase-1 agit au niveau du derme profond et dégrade les collagènes 1 et III, - la MMP 2 ou gélatinase A est présente aussi au niveau de la jonction dermo-épidermique et dégrade les collagènes I, III et VII, ainsi que l'élastne.
- On peut citer également la MMP 3 et l'élastase qui sont des enzymes de dégradation de composants de la matrice extracellulaire dermique.
L'extrait de parties aériennes de Cyclopia sp est utile pour lutter contre le vieillissement cutané. En particulier, lors de stress UV, cet extrait végétal est capable de stimuler la viabilité des cellules dermiques et de les protéger vis à vis des différentes métalloprotéases matricielles en réduisant de manière notable leur induction et donc leur activité.
Un objet de l'invention est donc l'utilisation d'une composition cosmétique comprenant un extrait de parties aériennes de Cyclopia sp pour lutter contre le vieillissement cutané, notamment le photovieillissement, et protéger la peau des agressions extérieures.
L'extrait de parties aériennes de Cyclopia sp. est également utile en tant qu'agent blanchissant et dépigmentant. Le soleil est l'un des principaux facteurs de vieillissement prématuré de la peau. Le vieillissement provoqué par l'exposition aux rayons solaires, appelé vieillissement actinique, est essentiellement dû aux agressions des rayonnements ultraviolets. Les conséquences sont intimement liées à la durée cumulée des expositions au soleil et au degré de pigmentation naturelle de la peau. Le rayonnement solaire augmente la production de radicaux libres qui altèrent les éléments cellulaires de la peau que sont les kératinocytes, les fibroblastes et les mélanocytes. La mélanogenèse est alors influencée par des facteurs extérieurs qui entraînent une augmentation de la production de mélanines et par voie de conséquence, une coloration localisée plus importante. C'est ainsi que les gènes, le soleil, les hormones de grossesse et le vieillissement cutané sont les principaux facteurs qui influent sur l'hyperpigmentation.
II a ainsi été montré que l'extrait de parties aériennes de Cyclopia sp. inhibait la synthèse de mélanine par les mélanocytes en diminuant l'activité d'une enzyme, la tyrosinase, indispensable à la synthèse de ce pigment.
Un objet de l'invention est donc l'utilisation d'une composition cosmétique comprenant un extrait de parties aériennes de Cyclopia sp en tant que composition cosmétique blanchissante ou dépigmentante pour la peau.
L'extrait de parties aériennes de Cyclopia sp. est également utile en tant qu'agent amincissant. Les inventeurs ont mis en évidence l'inhibition de l'activité de la phosphodiestérase 1 par l'extrait de parties aériennes de Cyclopia sp. La phosphodiestérase est une enzyme présente dans les adipocytes, impliquée dans le processus de la lipolyse (dégradation des triglycérides) et de lipogenèse (synthèse et stockage des triglycérides).
Elle inhibe l'AMPc qui favorise la lipolyse et défavorise la lipogénèse. Par son activité d'inhibition de la phosphodiestérase 1, l'extrait de parties aériennes de Cyclopia sp. possède donc une activité lipolytique.
EXEMPLE 1:
Préparation d'un extrait de feuilles de Cvclopia sessiliflora.
Dans les exemples ci-dessous, on utilise comme extrait de parties aériennes de Cyclopia sp., un extrait préparé de la façon suivante. Des feuilles de Cyclopia sessiliflora sont broyées et mélangées à un mélange solvant éthanol/eau, dans des proportions 60/40 p/p. L'extraction est réalisée à chaud entre 40 et 60 C pendant 1 à 2 heures. L'extrait obtenu est ensuite filtré et séché.
Cette extraction permet d'obtenir un extrait dont l'efficacité a été testée vis à vis de différentes propriétés cosmétiques.
EXEMPLE 2:
Protection du derme / Prévention et lutte anti-âqe A) Tests enzymatiques 1. Inhibition de la MMP3 L'extrait de feuilles de C. sessiliflora a été testé selon la méthode modifiée de Nagase et Fields (J Biol Chem 269 (33) : 20952-57; 1994).
Dans cette technique, le substrat NFF2 (Mca-Arg-Pro-Lys-Pro-TyrAla-Nva-Trp-Met-Lys (Dnp)-NH2) est mis en contact avec la métalloprotéase matricielle de type 3 et transformé en un motif peptidique reconnaissable en fluorométrie. Cette formation dépendante de l'activité de l'enzyme est suivie en fonction de l'extrait à tester.
(Mca = 7-amino-méthyl-coumarine; Nva = norvaline; Dnp = 2,4 dinitrophénol) Les résultats de ces expériences montrent que l'extrait de feuilles de C. sessiliflora permet d'inhiber jusqu'à 28% l'activité de dégradation de la MMP 3 et possède donc une activité de protection vis à vis des dégradations du derme dues à la MMP 3.
2. Inhibition de l'élastase L'extrait de feuilles de C. sessiliflora a été testé selon la méthode 15 adaptée et fournie par SANOFI PHARMA (J Pharmacol Exp Ther., 260 (2) : 809-16; 1992).
Dans cette technique, le substrat, la N-succinyl-ala-ala-pro-leu-p. nitroanilide est mis en contact avec l'élastase et forme un acyl-enzyme en libérant la p. nitroaniline qui absorbe à 386 nm. L'activité enzymatique est définie par rapport à la pente de la cinétique de libération de la p. nitroaniline.
L'extrait de feuilles de C. sessiliflora est actif dans l'inhibition de l'élastase. La CI50 de l'extrait est de 1,7129 mg/ml. L'extrait possède donc une activité de protection du derme vis à vis des dégradations qui peuvent être occasionnées par l'élastase.
B) Tests cellulaires: stimulation de la prolifération des fibroblastes et inhibition de l'induction des MMP 1 et 2 a) matériels et méthodes L'essai est réalisé à partir de culture de fibroblastes dermiques humains normaux. L'extrait à tester est mis au contact des fibroblastes avant, pendant et après un stress UV. Après 24 heures d'incubation suite au stress UV (20J/cm2), les surnageants cellulaires sont récupérés et centrifugés. Les MMP 1 et 2 sont dosées via une technique ELISA (Tableaux 1 et 2) et la viabilité cellulaire est estimée par un dosage colorimétrique au MTT (Tableau 3).
b) résultats Tableau 1: Dosage de MMP 1 (ng /unité cellulaire/ml) Traitement Stress de % d'inhibition Stress de % d'inhibition O J/cm2 à OJ/cm2 20 J/cm2 à 20 J/cmz Extrait de feuilles de C. 6 +/_ 0 42 9 +/- 1 39 sessiliflora à 0,002 % p/v Sans traitement 10 +/- 1 15 +/- 2 (=100%) (=100%) Tableau 2: Dosage de MMP 2 (ng /unité cellulaire/ml) Traitement Stress de % d'inhibition Stress de % d'inhibition O J/cm2 à OJ/cm2 20 J/cm2 à 20J/cm2 Extrait de feuilles de C. 68 +/_ 5 33 79 +/- 9 29 sessiliflora à 0,002 % p/v Sans traitement 101 +/- 5 111 +/- 10 (=100%) (=100%) L'ajout de l'extrait de feuilles de C. sessiliflora, à 0,002 % p/v, a une influence significative sur l'inhibition des MMP 1 et MMP 2 relarguées lors d'un stress UV. On peut aussi remarquer qu'à cette même concentration, il est capable de limiter le taux basal des deux MMPs étudiées.
Tableau 3: Viabilité cellulaire sur fibroblastes humains dermiques Traitement Stress de 0 J/cm2 Stress de 20 J/cm2 Extrait de feuilles de C. 112 % 144 % sessiliflora à 0,002 % p/v Sans traitement 100% 100% L'ajout de l'extrait, à 0,002 % p/v, dans le milieu de culture des fibroblastes humains, avant, pendant et après le stress UV, permet 20 d'augmenter de 44% la viabilité des cellules.
L'extrait de feuilles de C. sessiliflora, à 0,002 (Yo p/v, permet d'une part de stimuler la prolifération des fibroblastes dermiques et de limiter leur production de MMP 1 et 2 en condition de stress UV.
EXEMPLE 3:
Inhibition de la mélanogénèse - Blanchiment A) Tests enzymatiques: activité anti-tyrosinase L'extrait de feuilles de C. sessiliflora a été testé selon la méthode modifiée de Hamada et Mishima (British Journal of Dermatology, 86: 385; 1972).
Dans cette technique, la dopamine est mise en contact avec de la tyrosinase en milieu tamponné à pH 7 et transformée en dopachrome. Le dopachrome est une molécule colorée qui absorbe les rayonnements à 475 nm. La formation du dopachrome peut être ainsi suivie dans le temps à 475 nm. L'activité de la tyrosinase est traduite par la vitesse de formation du dopachrome. On détermine la concentration en extrait suffisante pour diminuer la vitesse de 50 % (CI50).
La Cl 50 de l'extrait de feuilles de C. sessiliflora est de 1,2167 mg/ml. Cet extrait présente donc une activité anti-tyrosinase comparativement à l'acide kojique (1 mg/ml) considéré comme la référence.
B) Tests sur cellules: inhibition de la synthèse de la mélanine a) matériels et méthodes Les cellules utilisées sont issues d'une lignée S91 de mélanocytes murins, et sont ensemencées (passage 41) dans des plaques à 12 puits à raison de 50 000 cellules/puits et incubées dans un incubateur à 37 C, 5% de CO2 et 95% d'humidité pendant 72 heures. Le milieu de culture est composé du milieu de base Ham F10 (invitrogen, réf. 31550023) contenant 2,5% de sérum de veau foetal (SVF) (invitrogen, réf. 10270098), 15% de sérum de cheval (invitrogen, réf. 16050122), 100pg/ml de penicilline (invitrogen, réf. 15140122), 100U/ml de streptomycine (invitrogen, réf. 15140122) et 2mM de L-glutamine (invitrogen, réf. 25030024). Des plaques supplémentaires sont réalisées afin d'évaluer la viabilité cellulaire.
Les cellules S91 sont traitées pendant 4 jours avec l'extrait de feuilles de C. sessiliflora solubilisé puis dilué dans le milieu de culture à 0,001 % p/v. Un témoin de milieu de culture est aussi réalisé. Afin de valider l'étude, un témoin positif, l'acide kojique (Sigma, K3125) , inhibiteur de la synthèse des mélanines, est testé dans les mêmes conditions à la concentration de 1 mM.
Les différents milieux et traitements sont renouvelés tous les jours.
D'une part, les milieux de culture sont éliminés à la fin du traitement et la mélanine est extraite par une solution de NaOH à 1 N. La densité optique est lue à 475nm, contre une gamme de mélanine de synthèse (10 -100 pg/ml) (Sigma, M0418).
D'autre part, la viabilité des cellules est évaluée par un test au WST-1 (Roche, 1644807), après avoir établi une corrélation de l'activité mitochondriale en fonction du nombre de cellules. La densité optique est lue à 465nm avec une correction à 650nm.
b) résultats Le témoin négatif est fixé à 100% de synthèse des mélanines et donc à 0% d'inhibition. L'acide kojique à 1 mm permet d'inhiber la synthèse des mélanines de 31%.
Dans les conditions expérimentales, l'extrait de feuilles de C. sessiliflora testé à 0,001 % p/v a provoqué une diminution de la quantité de mélanine présente dans les cultures de cellules S91, puisque la synthèse des mélanines est inhibée de 24% par rapport au témoin négatif fixé à 0%.
Une inhibition de la synthèse des mélanines est obtenue pour la concentration 0,001 % testée pour l'extrait de feuilles de C. sessiliflora.
L'extrait de feuilles de C. sessiliflora présente donc une action inhibitrice de la synthèse mélanique.
Tableau 4: inhibition de la synthèse de mélanine production mélanines inhibition mélanines (%) (%) Témoin 100 0 Ac. kojique 1 mM 69 31 Extrait de feuilles de C. 76 24 sessiliflora à 0,001 % p/v
EXEMPLE 5:
Minceur - tests enzymatiques: inhibition de la phosphodiestérase L'extrait de feuilles de C. sessiliflora a été testé selon la méthode modifiée de Nicholson et Jackman (Brit. J. Pharmacol., 97 (3), 889-897; 1989).
Dans cette technique, l'AMP cyclique tritiée est mis en contact avec la phosphodiesterase 1 et on peut observer une modification conformationnelle, qui est détectable par quantification de la radioactivité. Cette transformation dépendante de l'activité de l'enzyme est suivie en fonction de la concentration de l'extrait.
Les résultats de ces expériences montrent que l'extrait de feuilles de C. sessiliflora permet d'inhiber jusqu'à 97% de l'activité de la phosphodiestérase 1 et possède donc une activité inhibitrice très importante de cette enzyme, donc une activité lipolytique.
EXEMPLE 6:
Exemple 6: Formulations Exemple de composition sous forme d'émulsion (% en poids de la composition) Eau: QSP Extrait sec de Cyclopia sessiliflora: 0,1 % Mélange de conservateurs: 1,50 % Propylène glycol: 5,00 % Gomme xanthane: 0,30 % Copolymère acrylique / acrylate: 0, 50 % Acide stéarique polyéthoxylé 100 OE: 3,00 % Stéarate de sorbitan: 2, 00 % Sorbitan lauréate polyéthoxylé 20 OE: 3,00 % Alcool Cétylstéarique: 1,50% Cire d'abeille: 1,00 % Huile de germe de blé : 5,00 0/0 Diméthicone: 2,00 Cyclométhicone: 5,00 Gel de polyacrylamide: 2,00 % Parfum: 0,10% crème (% en poids de la composition) Eau: QSP Extrait sec de Cyclopia sessiliflora: 0,1 0/0 Gomme xanthane: 0,30 Séquestrants: 0,05 % Conservateurs: 1,50% Acide palmitique: 2,50 % Acide stéarique: 2,50 % Trilaurine: 1,00 % Beurre de karité : 0,05 % Acétate de tocophérol: 0,05 0/0 Bêta bisabolol: 0,05 % Huile de germe de blé : 5,00 % Diméthicone: 2, 00 % Acide polyacrylique: 1,50% TEA (triéthanolamine) : 1,50 % Parfum: 0, 10 % Exemple de composition sous forme de 15 25
Claims (11)
1. Composition cosmétique destinée à un usage topique, 5 comprenant un extrait de parties aériennes de Cyclopia sp., et un véhicule cosmétiquement acceptable.
2. Composition cosmétique selon la revendication 1, l'extrait étant un extrait de branches feuillées.
3. Composition selon l'une quelconque des revendications précédentes, l'extrait de Cyclopia sp. étant un extrait de parties aériennes de Cyclopia sessiliflora, Cyclopia subternata, Cyclopia intermedia et Cyclopia genitoides.
4. Composition cosmétique selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle ledit extrait est obtenu par extraction hydroalcoolique.
5. Composition cosmétique selon l'une quelconque des revendications précédentes, dans laquelle l'extrait est obtenu par extraction dans un mélange éthanol/eau dans des proportions 60 / 40 en poids.
6. Composition cosmétique selon la revendication 5, se présentant sous la forme d'émulsion simple huile dans eau ou eau dans huile, d'émulsion multiple, de microémulsion, de gel aqueux ou hydroalcoolique, de crème, d'huile, de lotion aqueuse ou hydroalcoolique.
7. Utilisation d'une composition cosmétique telle que définie dans l'une des revendications 1 à 6, pour lutter contre le vieillissement cutané.
8. Utilisation d'une composition cosmétique telle que définie dans l'une des revendications 1 à 6, pour protéger la peau des agressions extérieures.
9. Utilisation d'une composition cosmétique selon les revendications 8 ou 9, pour lutter contre le photovieillissement.
10. Utilisation d'une composition cosmétique telle que définie dans l'une des revendications 1 à 6, pour le blanchiment et/ou la dépigmentation de la peau.
11. Utilisation d'une composition cosmétique telle que définie dans l'une des revendications 1 à 6, en tant que composition cosmétique amincissante.
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