FR2770844A1 - Inhibiteurs de toxines clostridiales et compositions pharmaceutiques les contenant - Google Patents
Inhibiteurs de toxines clostridiales et compositions pharmaceutiques les contenant Download PDFInfo
- Publication number
- FR2770844A1 FR2770844A1 FR9714104A FR9714104A FR2770844A1 FR 2770844 A1 FR2770844 A1 FR 2770844A1 FR 9714104 A FR9714104 A FR 9714104A FR 9714104 A FR9714104 A FR 9714104A FR 2770844 A1 FR2770844 A1 FR 2770844A1
- Authority
- FR
- France
- Prior art keywords
- group
- alkyl
- sep
- cycloalkyl
- general formula
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims abstract description 14
- 239000003053 toxin Substances 0.000 title description 11
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 title description 11
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 title description 11
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 80
- 108030001720 Bontoxilysin Proteins 0.000 claims abstract description 12
- 231100001102 clostridial toxin Toxicity 0.000 claims abstract description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 6
- -1 guanidinyl group Chemical group 0.000 claims description 108
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 claims description 70
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 48
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 36
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 26
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 23
- 125000001072 heteroaryl group Chemical group 0.000 claims description 21
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 19
- 125000001622 2-naphthyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C([H])=C(*)C([H])=C([H])C2=C1[H] 0.000 claims description 16
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 16
- 125000003710 aryl alkyl group Chemical group 0.000 claims description 14
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 claims description 13
- 125000000592 heterocycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 13
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 13
- 229910006074 SO2NH2 Inorganic materials 0.000 claims description 12
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 claims description 10
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 claims description 8
- 125000001570 methylene group Chemical group [H]C([H])([*:1])[*:2] 0.000 claims description 8
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 8
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 7
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 7
- 230000008878 coupling Effects 0.000 claims description 6
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 claims description 6
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 claims description 6
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 6
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 6
- 241001112695 Clostridiales Species 0.000 claims description 5
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 125000001188 haloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- 239000002581 neurotoxin Substances 0.000 claims description 5
- 231100000618 neurotoxin Toxicity 0.000 claims description 5
- 125000004433 nitrogen atom Chemical group N* 0.000 claims description 5
- 125000002233 tyrosyl group Chemical group 0.000 claims description 5
- RWLSBXBFZHDHHX-VIFPVBQESA-N (2s)-2-(naphthalen-2-ylamino)propanoic acid Chemical compound C1=CC=CC2=CC(N[C@@H](C)C(O)=O)=CC=C21 RWLSBXBFZHDHHX-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000004183 alkoxy alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 125000006350 alkyl thio alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims description 4
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 125000000565 sulfonamide group Chemical group 0.000 claims description 4
- QCNUBIUWWWTVLZ-JQWIXIFHSA-N (2s,3s)-2-amino-n-benzyl-3-methylpentanamide Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(=O)NCC1=CC=CC=C1 QCNUBIUWWWTVLZ-JQWIXIFHSA-N 0.000 claims description 3
- 125000004217 4-methoxybenzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C([H])=C1OC([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 claims description 3
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 claims description 3
- 125000002485 formyl group Chemical class [H]C(*)=O 0.000 claims description 3
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 claims description 3
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 claims description 3
- 125000003774 valeryl group Chemical group O=C([*])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 3
- 101100240516 Caenorhabditis elegans nhr-10 gene Proteins 0.000 claims description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 125000002777 acetyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 claims description 2
- 125000003368 amide group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000004103 aminoalkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000003236 benzoyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C(*)=O 0.000 claims description 2
- 125000001584 benzyloxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC1=CC=CC=C1)* 0.000 claims description 2
- 125000005242 carbamoyl alkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000004181 carboxyalkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 claims description 2
- 125000002768 hydroxyalkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 125000005931 tert-butyloxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(OC(*)=O)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 claims description 2
- 108030001722 Tentoxilysin Proteins 0.000 claims 1
- 108010055044 Tetanus Toxin Proteins 0.000 abstract description 11
- 229940118376 tetanus toxin Drugs 0.000 abstract description 10
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 abstract description 8
- 231100001103 botulinum neurotoxin Toxicity 0.000 abstract description 5
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 101
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 50
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- 238000005160 1H NMR spectroscopy Methods 0.000 description 29
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 29
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 27
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 22
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 21
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 20
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 20
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 20
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 description 20
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical class [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 19
- 125000000956 methoxy group Chemical group [H]C([H])([H])O* 0.000 description 19
- IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N Dimethyl sulfoxide Chemical compound [2H]C([2H])([2H])S(=O)C([2H])([2H])[2H] IAZDPXIOMUYVGZ-WFGJKAKNSA-N 0.000 description 18
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 17
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane Chemical compound C1CCCCC1 XDTMQSROBMDMFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N Trichloro(2H)methane Chemical compound [2H]C(Cl)(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-MICDWDOJSA-N 0.000 description 16
- 238000010511 deprotection reaction Methods 0.000 description 16
- 239000000047 product Substances 0.000 description 16
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 15
- CHKVPAROMQMJNQ-UHFFFAOYSA-M potassium bisulfate Chemical compound [K+].OS([O-])(=O)=O CHKVPAROMQMJNQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 14
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 14
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 13
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 13
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 13
- 229910000343 potassium bisulfate Inorganic materials 0.000 description 13
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N trifluoroacetic acid Substances OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N valeric acid Chemical compound CCCCC(O)=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N N,N-Diisopropylethylamine (DIPEA) Chemical compound CCN(C(C)C)C(C)C JGFZNNIVVJXRND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 12
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 12
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N N-Methylpyrrolidone Chemical compound CN1CCCC1=O SECXISVLQFMRJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 9
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 9
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 9
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 9
- WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N benzylamine Chemical compound NCC1=CC=CC=C1 WGQKYBSKWIADBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 125000001160 methoxycarbonyl group Chemical group [H]C([H])([H])OC(*)=O 0.000 description 8
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N Propionic acid Chemical compound CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 7
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 7
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 7
- 125000003754 ethoxycarbonyl group Chemical group C(=O)(OCC)* 0.000 description 7
- UVOYBXGNSLFMEF-UHFFFAOYSA-N CC(C)(C)NS(=O)(=O)CCCCC(=O)O Chemical compound CC(C)(C)NS(=O)(=O)CCCCC(=O)O UVOYBXGNSLFMEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XTHFKEDIFFGKHM-UHFFFAOYSA-N Dimethoxyethane Chemical compound COCCOC XTHFKEDIFFGKHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N N-Methylmorpholine Chemical compound CN1CCOCC1 SJRJJKPEHAURKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- ZCSHNCUQKCANBX-UHFFFAOYSA-N lithium diisopropylamide Chemical compound [Li+].CC(C)[N-]C(C)C ZCSHNCUQKCANBX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N oxalyl chloride Chemical compound ClC(=O)C(Cl)=O CTSLXHKWHWQRSH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 6
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 6
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 5
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 5
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 5
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 5
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 5
- XXMYDXUIZKNHDT-QNGWXLTQSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-(1-tritylimidazol-4-yl)propanoic acid Chemical compound C([C@@H](C(=O)O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21)C(N=C1)=CN1C(C=1C=CC=CC=1)(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 XXMYDXUIZKNHDT-QNGWXLTQSA-N 0.000 description 4
- JAUKCFULLJFBFN-VWLOTQADSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-[4-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]phenyl]propanoic acid Chemical compound C1=CC(OC(C)(C)C)=CC=C1C[C@@H](C(O)=O)NC(=O)OCC1C2=CC=CC=C2C2=CC=CC=C21 JAUKCFULLJFBFN-VWLOTQADSA-N 0.000 description 4
- YXHKONLOYHBTNS-UHFFFAOYSA-N Diazomethane Chemical compound C=[N+]=[N-] YXHKONLOYHBTNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 4
- 239000007832 Na2SO4 Substances 0.000 description 4
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 125000004397 aminosulfonyl group Chemical group NS(=O)(=O)* 0.000 description 4
- 229940053031 botulinum toxin Drugs 0.000 description 4
- GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N bromine Chemical compound BrBr GDTBXPJZTBHREO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 125000003917 carbamoyl group Chemical group [H]N([H])C(*)=O 0.000 description 4
- 238000009833 condensation Methods 0.000 description 4
- 230000005494 condensation Effects 0.000 description 4
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 4
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 4
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 4
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 4
- 229940100630 metacresol Drugs 0.000 description 4
- 125000000896 monocarboxylic acid group Chemical group 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 description 4
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N tri(propan-2-yl)silicon Chemical compound CC(C)[Si](C(C)C)C(C)C ZGYICYBLPGRURT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OCRCEAHLTSPIKH-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-carbamoyl-3-[(2-methylpropan-2-yl)oxycarbonyl]-6,6,6-triphenylhexanoic acid Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(C=1C=CC=CC=1)(CCC(C(=O)OC(C)(C)C)C(N)(C(N)=O)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 OCRCEAHLTSPIKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000005711 Benzoic acid Substances 0.000 description 3
- 208000003508 Botulism Diseases 0.000 description 3
- VPBMVJVAQBCONY-UHFFFAOYSA-N C(CS(=O)(=O)NC(C)(C)C)CCC=O Chemical compound C(CS(=O)(=O)NC(C)(C)C)CCC=O VPBMVJVAQBCONY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- JZYXPLBHBWNSAN-UHFFFAOYSA-N CC(C)(C)NS(C1=CC=CC(CCC(O)=O)=C1)(=O)=O Chemical compound CC(C)(C)NS(C1=CC=CC(CCC(O)=O)=C1)(=O)=O JZYXPLBHBWNSAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007821 HATU Substances 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000004395 L-leucine Substances 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 125000003545 alkoxy group Chemical group 0.000 description 3
- 235000010233 benzoic acid Nutrition 0.000 description 3
- 229910052794 bromium Inorganic materials 0.000 description 3
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 3
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 3
- FFUAGWLWBBFQJT-UHFFFAOYSA-N hexamethyldisilazane Chemical compound C[Si](C)(C)N[Si](C)(C)C FFUAGWLWBBFQJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 3
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 3
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 2
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XXMFJKNOJSDQBM-UHFFFAOYSA-N 2,2,2-trifluoroacetic acid;hydrate Chemical compound [OH3+].[O-]C(=O)C(F)(F)F XXMFJKNOJSDQBM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LQRIETHMCPINCY-UHFFFAOYSA-N 2-carbamoyl-6,6,6-triphenylhexanoic acid Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(C=1C=CC=CC=1)(CCCC(C(=O)N)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 LQRIETHMCPINCY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpropyl carbonochloridate Chemical compound CC(C)COC(Cl)=O YOETUEMZNOLGDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZJWZUNVCQASITR-UHFFFAOYSA-N 4-(tert-butylsulfamoyl)butanoic acid Chemical compound CC(C)(C)NS(=O)(=O)CCCC(O)=O ZJWZUNVCQASITR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 101100347612 Arabidopsis thaliana VIII-B gene Proteins 0.000 description 2
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 2
- WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N Bromine atom Chemical compound [Br] WKBOTKDWSSQWDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- YNQLUTRBYVCPMQ-UHFFFAOYSA-N Ethylbenzene Chemical compound CCC1=CC=CC=C1 YNQLUTRBYVCPMQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N Fluorane Chemical compound F KRHYYFGTRYWZRS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AMQJEAYHLZJPGS-UHFFFAOYSA-N N-Pentanol Chemical compound CCCCCO AMQJEAYHLZJPGS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940124639 Selective inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 102100025342 Voltage-dependent N-type calcium channel subunit alpha-1B Human genes 0.000 description 2
- 101710088658 Voltage-dependent N-type calcium channel subunit alpha-1B Proteins 0.000 description 2
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003282 alkyl amino group Chemical group 0.000 description 2
- 125000004414 alkyl thio group Chemical group 0.000 description 2
- XXROGKLTLUQVRX-UHFFFAOYSA-N allyl alcohol Chemical compound OCC=C XXROGKLTLUQVRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 2
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 2
- 125000005997 bromomethyl group Chemical group 0.000 description 2
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 2
- 125000002057 carboxymethyl group Chemical group [H]OC(=O)C([H])([H])[*] 0.000 description 2
- 238000011260 co-administration Methods 0.000 description 2
- ZQSIJRDFPHDXIC-UHFFFAOYSA-N daidzein Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=COC2=CC(O)=CC=C2C1=O ZQSIJRDFPHDXIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004663 dialkyl amino group Chemical group 0.000 description 2
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 2
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 description 2
- 238000001511 high performance liquid chromatography nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- ZTVZLYBCZNMWCF-UHFFFAOYSA-N homocystine Chemical compound [O-]C(=O)C([NH3+])CCSSCCC([NH3+])C([O-])=O ZTVZLYBCZNMWCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 2
- BTJRKNUKPQBLAL-UHFFFAOYSA-N hydron;4-methylmorpholine;chloride Chemical compound Cl.CN1CCOCC1 BTJRKNUKPQBLAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CBOIHMRHGLHBPB-UHFFFAOYSA-N hydroxymethyl Chemical compound O[CH2] CBOIHMRHGLHBPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M lithium chloride Chemical compound [Li+].[Cl-] KWGKDLIKAYFUFQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 2
- GSYSFVSGPABNNL-UHFFFAOYSA-N methyl 2-dimethoxyphosphoryl-2-(phenylmethoxycarbonylamino)acetate Chemical group COC(=O)C(P(=O)(OC)OC)NC(=O)OCC1=CC=CC=C1 GSYSFVSGPABNNL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 2
- PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N n,n-dimethylpyridin-2-amine Chemical compound CN(C)C1=CC=CC=N1 PSHKMPUSSFXUIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OYWFCWGRKDWMTB-UHFFFAOYSA-N n-tert-butyl-3-(hydroxymethyl)benzenesulfonamide Chemical compound CC(C)(C)NS(=O)(=O)C1=CC=CC(CO)=C1 OYWFCWGRKDWMTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UEOUIPKJHCCEFX-UHFFFAOYSA-N n-tert-butyl-3-formylbenzenesulfonamide Chemical compound CC(C)(C)NS(=O)(=O)C1=CC=CC(C=O)=C1 UEOUIPKJHCCEFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000449 nitro group Chemical group [O-][N+](*)=O 0.000 description 2
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 2
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 2
- HGBOYTHUEUWSSQ-UHFFFAOYSA-N pentanal Chemical compound CCCCC=O HGBOYTHUEUWSSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940124606 potential therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 2
- 108010074523 rimabotulinumtoxinB Proteins 0.000 description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000012047 saturated solution Substances 0.000 description 2
- CLDWGXZGFUNWKB-UHFFFAOYSA-M silver;benzoate Chemical compound [Ag+].[O-]C(=O)C1=CC=CC=C1 CLDWGXZGFUNWKB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 2
- DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N tert-butoxycarbonyl anhydride Chemical compound CC(C)(C)OC(=O)OC(=O)OC(C)(C)C DYHSDKLCOJIUFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N toluene-4-sulfonic acid Chemical compound CC1=CC=C(S(O)(=O)=O)C=C1 JOXIMZWYDAKGHI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 description 2
- 125000002221 trityl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1C([*])(C1=C(C(=C(C(=C1[H])[H])[H])[H])[H])C1=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 2
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 2
- ZYZHMSJNPCYUTB-ZDUSSCGKSA-N (1s)-n-benzyl-1-phenylethanamine Chemical compound N([C@@H](C)C=1C=CC=CC=1)CC1=CC=CC=C1 ZYZHMSJNPCYUTB-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- MGHMWKZOLAAOTD-DEOSSOPVSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-(1h-indol-3-yl)propanoic acid Chemical compound C12=CC=CC=C2C2=CC=CC=C2C1COC(=O)N[C@H](C(=O)O)CC1=CNC2=CC=CC=C12 MGHMWKZOLAAOTD-DEOSSOPVSA-N 0.000 description 1
- UGNIYGNGCNXHTR-SFHVURJKSA-N (2s)-2-(9h-fluoren-9-ylmethoxycarbonylamino)-3-methylbutanoic acid Chemical compound C1=CC=C2C(COC(=O)N[C@@H](C(C)C)C(O)=O)C3=CC=CC=C3C2=C1 UGNIYGNGCNXHTR-SFHVURJKSA-N 0.000 description 1
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 1-Hydroxybenzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N(O)N=NC2=C1 ASOKPJOREAFHNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MUQLFHAOTSVDQD-UHFFFAOYSA-N 1-[(2,3-dinitrophenyl)disulfanyl]-2,3-dinitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC=CC(SSC=2C(=C(C=CC=2)[N+]([O-])=O)[N+]([O-])=O)=C1[N+]([O-])=O MUQLFHAOTSVDQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FZSBDDXXXSWEEW-UHFFFAOYSA-N 1-[(2,4-dinitrophenyl)disulfanyl]-2,4-dinitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+](=O)[O-])=CC=C1SSC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1[N+]([O-])=O FZSBDDXXXSWEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UUUHXMGGBIUAPW-UHFFFAOYSA-N 1-[1-[2-[[5-amino-2-[[1-[5-(diaminomethylideneamino)-2-[[1-[3-(1h-indol-3-yl)-2-[(5-oxopyrrolidine-2-carbonyl)amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]pyrrolidine-2-carbon Chemical compound C1CCC(C(=O)N2C(CCC2)C(O)=O)N1C(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C1CCCN1C(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C1CCCN1C(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C1CCC(=O)N1 UUUHXMGGBIUAPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UUFQTNFCRMXOAE-UHFFFAOYSA-N 1-methylmethylene Chemical compound C[CH] UUFQTNFCRMXOAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000453 2,2,2-trichloroethyl group Chemical group [H]C([H])(*)C(Cl)(Cl)Cl 0.000 description 1
- UGEHFOSBNBEWMP-UHFFFAOYSA-N 2,3-diaminobenzenesulfonic acid Chemical compound NC1=CC=CC(S(O)(=O)=O)=C1N UGEHFOSBNBEWMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001917 2,4-dinitrophenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C(=C([H])C(=C1*)[N+]([O-])=O)[N+]([O-])=O 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002941 2-furyl group Chemical group O1C([*])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- LBLYYCQCTBFVLH-UHFFFAOYSA-M 2-methylbenzenesulfonate Chemical compound CC1=CC=CC=C1S([O-])(=O)=O LBLYYCQCTBFVLH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 125000000175 2-thienyl group Chemical group S1C([*])=C([H])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- LMRKXSDOAFUINK-UHFFFAOYSA-N 3-chlorosulfonylbenzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC(S(Cl)(=O)=O)=C1 LMRKXSDOAFUINK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000003682 3-furyl group Chemical group O1C([H])=C([*])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- 125000001541 3-thienyl group Chemical group S1C([H])=C([*])C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- FZTIWOBQQYPTCJ-UHFFFAOYSA-N 4-[4-(4-carboxyphenyl)phenyl]benzoic acid Chemical group C1=CC(C(=O)O)=CC=C1C1=CC=C(C=2C=CC(=CC=2)C(O)=O)C=C1 FZTIWOBQQYPTCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GCNTZFIIOFTKIY-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxypyridine Chemical compound OC1=CC=NC=C1 GCNTZFIIOFTKIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JCLFHZLOKITRCE-UHFFFAOYSA-N 4-pentoxyphenol Chemical compound CCCCCOC1=CC=C(O)C=C1 JCLFHZLOKITRCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N Acrylic acid Chemical compound OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910018173 Al—Al Inorganic materials 0.000 description 1
- 101100347605 Arabidopsis thaliana VIII-A gene Proteins 0.000 description 1
- 238000006218 Arndt-Eistert homologation reaction Methods 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N Borate Chemical compound [O-]B([O-])[O-] BTBUEUYNUDRHOZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M Butyrate Chemical compound CCCC([O-])=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 0 CN[C@@](*)[C@@](*)C(O)=O Chemical compound CN[C@@](*)[C@@](*)C(O)=O 0.000 description 1
- 101100167062 Caenorhabditis elegans chch-3 gene Proteins 0.000 description 1
- KZBUYRJDOAKODT-UHFFFAOYSA-N Chlorine Chemical compound ClCl KZBUYRJDOAKODT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 241000039077 Copula Species 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 108010059378 Endopeptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000005593 Endopeptidases Human genes 0.000 description 1
- 206010063006 Facial spasm Diseases 0.000 description 1
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PNKUSGQVOMIXLU-UHFFFAOYSA-N Formamidine Chemical compound NC=N PNKUSGQVOMIXLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 1
- 229920000084 Gum arabic Polymers 0.000 description 1
- 208000004095 Hemifacial Spasm Diseases 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N Hydrogen bromide Chemical compound Br CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000963974 Hydrophis stokesii Alpha-elapitoxin-Ast2b Proteins 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- ZTVZLYBCZNMWCF-WDSKDSINSA-N L,L-homocystine zwitterion Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCSSCC[C@H](N)C(O)=O ZTVZLYBCZNMWCF-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- 125000002066 L-histidyl group Chemical group [H]N1C([H])=NC(C([H])([H])[C@](C(=O)[*])([H])N([H])[H])=C1[H] 0.000 description 1
- 235000019454 L-leucine Nutrition 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-L Malonate Chemical compound [O-]C(=O)CC([O-])=O OFOBLEOULBTSOW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108090000131 Metalloendopeptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000003843 Metalloendopeptidases Human genes 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N Methanesulfonic acid Chemical compound CS(O)(=O)=O AFVFQIVMOAPDHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N N-Butyllithium Chemical compound [Li]CCCC MZRVEZGGRBJDDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 1
- 101000964025 Naja naja Long neurotoxin 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000822778 Naja naja Long neurotoxin 4 Proteins 0.000 description 1
- 101000822797 Naja naja Long neurotoxin 5 Proteins 0.000 description 1
- 108090000028 Neprilysin Proteins 0.000 description 1
- 102000003729 Neprilysin Human genes 0.000 description 1
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RDNVHQZCLORQEI-UHFFFAOYSA-N OS(O)(=O)=O.C1CCCCC1 Chemical compound OS(O)(=O)=O.C1CCCCC1 RDNVHQZCLORQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000037273 Pathologic Processes Diseases 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 102000004270 Peptidyl-Dipeptidase A Human genes 0.000 description 1
- 108090000882 Peptidyl-Dipeptidase A Proteins 0.000 description 1
- KFSLWBXXFJQRDL-UHFFFAOYSA-N Peracetic acid Chemical compound CC(=O)OO KFSLWBXXFJQRDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZPHBZEQOLSRPAK-UHFFFAOYSA-N Phosphoramidon Natural products C=1NC2=CC=CC=C2C=1CC(C(O)=O)NC(=O)C(CC(C)C)NP(O)(=O)OC1OC(C)C(O)C(O)C1O ZPHBZEQOLSRPAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010010469 Qa-SNARE Proteins Proteins 0.000 description 1
- 108010005730 R-SNARE Proteins Proteins 0.000 description 1
- 239000002262 Schiff base Substances 0.000 description 1
- 150000004753 Schiff bases Chemical class 0.000 description 1
- 241000978776 Senegalia senegal Species 0.000 description 1
- KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N Sodium Chemical compound [Na] KEAYESYHFKHZAL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 208000004350 Strabismus Diseases 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical group [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000002215 Synaptobrevin Human genes 0.000 description 1
- 102100030552 Synaptosomal-associated protein 25 Human genes 0.000 description 1
- 102000050389 Syntaxin Human genes 0.000 description 1
- 101800002885 Tetanus toxin light chain Proteins 0.000 description 1
- 108090001109 Thermolysin Proteins 0.000 description 1
- 108010036928 Thiorphan Proteins 0.000 description 1
- 101710182223 Toxin B Proteins 0.000 description 1
- RHQDFWAXVIIEBN-UHFFFAOYSA-N Trifluoroethanol Chemical compound OCC(F)(F)F RHQDFWAXVIIEBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010057266 Type A Botulinum Toxins Proteins 0.000 description 1
- NIJJYAXOARWZEE-UHFFFAOYSA-N Valproic acid Chemical compound CCCC(C(O)=O)CCC NIJJYAXOARWZEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007239 Wittig reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000205 acacia gum Substances 0.000 description 1
- 235000010489 acacia gum Nutrition 0.000 description 1
- PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N acetonitrile;hydrate Chemical compound O.CC#N PBCJIPOGFJYBJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 125000005336 allyloxy group Chemical group 0.000 description 1
- HXXFSFRBOHSIMQ-VFUOTHLCSA-N alpha-D-glucose 1-phosphate Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](OP(O)(O)=O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O HXXFSFRBOHSIMQ-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000000729 antidote Substances 0.000 description 1
- 239000008135 aqueous vehicle Substances 0.000 description 1
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical group [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-M benzenesulfonate Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C1=CC=CC=C1 SRSXLGNVWSONIS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940077388 benzenesulfonate Drugs 0.000 description 1
- QRUDEWIWKLJBPS-UHFFFAOYSA-N benzotriazole Chemical compound C1=CC=C2N[N][N]C2=C1 QRUDEWIWKLJBPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HSDAJNMJOMSNEV-UHFFFAOYSA-N benzyl chloroformate Chemical compound ClC(=O)OCC1=CC=CC=C1 HSDAJNMJOMSNEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001797 benzyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(C([H])=C1[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 206010005159 blepharospasm Diseases 0.000 description 1
- 230000000744 blepharospasm Effects 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- FAKRSMQSSFJEIM-RQJHMYQMSA-N captopril Chemical compound SC[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O FAKRSMQSSFJEIM-RQJHMYQMSA-N 0.000 description 1
- 229960000830 captopril Drugs 0.000 description 1
- 125000006297 carbonyl amino group Chemical group [H]N([*:2])C([*:1])=O 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 125000004218 chloromethyl group Chemical group [H]C([H])(Cl)* 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- IMZMKUWMOSJXDT-UHFFFAOYSA-N cromoglycic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)=CC(=O)C2=C1C=CC=C2OCC(O)COC1=CC=CC2=C1C(=O)C=C(C(O)=O)O2 IMZMKUWMOSJXDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 238000006264 debenzylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- XXTZHYXQVWRADW-UHFFFAOYSA-N diazomethanone Chemical compound [N]N=C=O XXTZHYXQVWRADW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SPWVRYZQLGQKGK-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;hexane Chemical compound ClCCl.CCCCCC SPWVRYZQLGQKGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 125000002147 dimethylamino group Chemical group [H]C([H])([H])N(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000006196 drop Substances 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 208000010118 dystonia Diseases 0.000 description 1
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 125000004494 ethyl ester group Chemical group 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 230000002964 excitative effect Effects 0.000 description 1
- 230000028023 exocytosis Effects 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 229950010772 glucose-1-phosphate Drugs 0.000 description 1
- 150000002334 glycols Chemical class 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 125000005842 heteroatom Chemical group 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-M hexadecanoate Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O IPCSVZSSVZVIGE-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000011905 homologation Methods 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical group 0.000 description 1
- 238000007327 hydrogenolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000013403 hyperactivity Diseases 0.000 description 1
- 150000002466 imines Chemical class 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N iodine Chemical compound II PNDPGZBMCMUPRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950003188 isovaleryl diethylamide Drugs 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 1
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- AFRJJFRNGGLMDW-UHFFFAOYSA-N lithium amide Chemical compound [Li+].[NH2-] AFRJJFRNGGLMDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- DUWWHGPELOTTOE-UHFFFAOYSA-N n-(5-chloro-2,4-dimethoxyphenyl)-3-oxobutanamide Chemical compound COC1=CC(OC)=C(NC(=O)CC(C)=O)C=C1Cl DUWWHGPELOTTOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZYZHMSJNPCYUTB-UHFFFAOYSA-N n-benzyl-1-phenylethanamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(C)NCC1=CC=CC=C1 ZYZHMSJNPCYUTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001624 naphthyl group Chemical group 0.000 description 1
- 208000018360 neuromuscular disease Diseases 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 230000007900 neurotoxin activity Effects 0.000 description 1
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Chemical group 0.000 description 1
- KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N palladium Substances [Pd] KDLHZDBZIXYQEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NXJCBFBQEVOTOW-UHFFFAOYSA-L palladium(2+);dihydroxide Chemical compound O[Pd]O NXJCBFBQEVOTOW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000009054 pathological process Effects 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 125000006340 pentafluoro ethyl group Chemical group FC(F)(F)C(F)(F)* 0.000 description 1
- 125000001151 peptidyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 108010072906 phosphoramidon Proteins 0.000 description 1
- BWSDNRQVTFZQQD-AYVHNPTNSA-N phosphoramidon Chemical compound O([P@@](O)(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CC=1[C]2C=CC=CC2=NC=1)C(O)=O)[C@H]1O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O BWSDNRQVTFZQQD-AYVHNPTNSA-N 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000004224 protection Effects 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 238000007127 saponification reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 150000003335 secondary amines Chemical class 0.000 description 1
- 238000011894 semi-preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 108010010958 snake venom neurotoxin F Proteins 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N sodium cyanoborohydride Chemical compound [Na+].[B-]C#N BEOOHQFXGBMRKU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012312 sodium hydride Substances 0.000 description 1
- 229910000104 sodium hydride Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 1
- 108040000979 soluble NSF attachment protein activity proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000005991 sulfenylation reaction Methods 0.000 description 1
- 125000000472 sulfonyl group Chemical group *S(*)(=O)=O 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Chemical group 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Chemical group 0.000 description 1
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- HBEJJYHFTZDAHZ-QMMMGPOBSA-N tert-butyl (2s)-2-amino-4-methylpentanoate Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(=O)OC(C)(C)C HBEJJYHFTZDAHZ-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- YBRBMKDOPFTVDT-UHFFFAOYSA-N tert-butylamine Chemical compound CC(C)(C)N YBRBMKDOPFTVDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LJJKNPQAGWVLDQ-SNVBAGLBSA-N thiorphan Chemical compound OC(=O)CNC(=O)[C@@H](CS)CC1=CC=CC=C1 LJJKNPQAGWVLDQ-SNVBAGLBSA-N 0.000 description 1
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- GGUBFICZYGKNTD-UHFFFAOYSA-N triethyl phosphonoacetate Chemical compound CCOC(=O)CP(=O)(OCC)OCC GGUBFICZYGKNTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 1
- 125000002114 valyl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 description 1
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
- C07K5/0202—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-X-X-C(=0)-, X being an optionally substituted carbon atom or a heteroatom, e.g. beta-amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
- C07K5/06—Dipeptides
- C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
- C07K5/06078—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aromatic or cycloaliphatic
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
La présente invention a pour objet un composé de formule générale (I) (CF DESSIN DANS BOPI) Elle se rapporte en outre à des compositions pharmaceutiques les contenant, utiles notamment pour inhiber l'activité des toxines clostridiales, en particulier la toxine tétanique et les sept sérotypes de neurotoxines botuliques de type A à G.
Description
La présente invention concerne de nouveaux composés dotés de propriétés inhibitrices de l'activité des toxines clostridiales (tétaniques et botuliques), leurs procédés de préparation et les compositions pharmaceutiques correspondantes.
Malgré de larges programmes de vaccination dans le monde de nombreuses bactéries demeurent une menace pour l'homme.
Introduites dans un organisme, elles y induisent la production de toxines variées et initient ainsi le développement de maladies graves voire létales.
Le tétanos et le botulisme sont deux exemples particuliers de maladies neuromusculaires graves, induites par des neurotoxines clostridiales, respectivement la toxine tétanique et les sept sérotypes de toxines botuliques, A, B, C, D, E, F et G.
En termes de prophylaxie, seuls un vaccin ainsi qu'un sérum antitétanique sont aujourd'hui disponibles. En revanche, il n'existe à ce jour aucune thérapie pour traiter les maladies déclarées.
Le mode d'action de ces toxines, au niveau moléculaire, n'a été mis en évidence que fort récemment, en 1992 par Schiavo et al.
(Nature, 359 832). Elles sont constituées de deux chaînes polypeptidiques, I'une lourde et l'autre légère, associées par un pont disulfure. La chaîne lourde est responsable de la liaison spécifique au neurone et de la pénétration cellulaire. La chaîne légère bloque l'exocytose des neurotransmetteurs par protéolyse sélective et distincte de trois protéines impliquées dans ce phénomène : la synaptobrévine, la syntaxine et SNAP -25. La dégradation de l'une ou l'autre de ces protéines inhibe, dans le cas de la toxine tétanique, la libération des neurotransmetteurs inhibiteurs et, dans le cas des neurotoxines botuliques, la libération des neurotransmetteurs excitateurs.
Cette voie de protéolyse et l'appartenance de ces toxines à la famille des métalloendopeptidases à zinc ont dans un premier temps conduit les chercheurs à envisager une thérapie basée sur la mise en oeuvre d'inhibiteurs puissants et sélectifs de cette activité enzymatique.
Toutefois, toutes les molécules connues comme étant des inhibiteurs puissants et sélectifs de protéases à zinc telles que le phosphoramidon pour la thermolysine, le captopril pour l'enzyme de conversion de l'angiotensine et le thiorphan pour l'endopeptidase neutre 24.11 et bien d'autres se sont révélées inefficaces même à des concentrations millimolaires sur ces toxines (Soleilhac et al. (1996)
Analytical Biochemistry, 241, 120-127 Cornille et al. (1994) Europ. J.
Analytical Biochemistry, 241, 120-127 Cornille et al. (1994) Europ. J.
Biochem., 222,173-181 , Shone et al. (1993) Europ. J. Biochem., 217 965-971).
II demeure donc à ce jour un besoin de médicaments pour traiter les maladies induites par les toxines clostridiales.
La présente invention a précisément pour objet de proposer de nouveaux composés capables d'inhiber, sélectivement ou conjointement, les activités enzymatiques de la toxine tétanique et des divers sérotypes de toxines botuliques. Ces composés sont des agents thérapeutiques potentiels du tétanos et du botulisme.
Plus précisément, la présente invention concerne des nouveaux composés de formule générale (I):
dans laquelle: - X représente: un groupement méthylène ou un groupement carbonyle, - R1 représente:
un groupement alkyle, alkoxyalkyle, alkylthioalkyle, haloalkyle, cycloalkyle, hétérocycloalkyle, (cycloalkyl)alkyle, (hétérocycloalkyle)alkyle, aryle, arylalkyle, hétéroaryle, ou (hétéroaryl)alkyle, substitué sur la chaîne alkyle ou sur le cycle par au moins un groupement R7 choisi parmi:
un groupe sulfonamide -SO2NH2, -SO2NHR8 ou -SO2N(R8)2,
un groupe amide, -CONH2, -CONHR8 ou -CON(R8)2,
un groupe amine NH2, -NHR8 ou -N(R8)2 et
un groupe guanidinyle
avec R8 étant un groupement alkyle, cycloalkyle, (cycloalkyl)alkyle
aryle ou arylalkyle, - R2, R3 représentent indépendamment l'un de l'autre un atome
d'hydrogène, un groupement alkyle, alkoxyalkyle, carboxyalkyle, halo
alkyle, hydroxyalkyle, aminoalkyle, alkylthioalkyle, cycloalkyle,
hétérocycloalkyle, (cycloalkyl)alkyle, (hétérocycloalkyle)alkyle, aryle,
arylalkyle, arylarylalkyle, hétéroaryle, (hétéroaryl)alkyle,
carbamoylalkyle, guanidinylalkyle, - R4 représente un atome d'hydrogène, un groupement acétyle, un groupement benzoyle,
un groupement -SR9 avec Rg étant un groupement alkyle, cycloalkyle, (cycloalkyl)alkyle, aryle, arylalkyle, ou un groupement
-S-CH[CHR1-NH2]-X-N(R5)CHR2CON(R6) CHR3COZ, avec R1 X, R5 R2 R6 R3 et Z tels que définis ci-dessus ou ci-après, - Rs et R6 représentent indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène, un groupement alkyle, cycloalkyle, (cycloalkyl)alkyle, aryle, arylalkyle, hétéroaryle, (hétéroaryl)alkyle, - R2 et R5 pris ensemble peuvent éventuellement constituer avec l'atome d'azote portant R5 un groupement hétérocycloalkyle éventuellement condensé avec un aryle, ou un hétéroaryle, - R3 et R6 pris ensemble peuvent éventuellement constituer avec l'atome d'azote portant R6 un groupement hétérocycloalkyle éventuellement condensé avec un aryle ou un hétéroaryle, - Z représente un groupement OH, Ordo, NH2, NHR10, N(R10)2, avec Rro étant un groupement alkyle, cycloalkyle, (cycloalkyl)alkyle, aryle ou arylalkyle et leurs dérivés.
dans laquelle: - X représente: un groupement méthylène ou un groupement carbonyle, - R1 représente:
un groupement alkyle, alkoxyalkyle, alkylthioalkyle, haloalkyle, cycloalkyle, hétérocycloalkyle, (cycloalkyl)alkyle, (hétérocycloalkyle)alkyle, aryle, arylalkyle, hétéroaryle, ou (hétéroaryl)alkyle, substitué sur la chaîne alkyle ou sur le cycle par au moins un groupement R7 choisi parmi:
un groupe sulfonamide -SO2NH2, -SO2NHR8 ou -SO2N(R8)2,
un groupe amide, -CONH2, -CONHR8 ou -CON(R8)2,
un groupe amine NH2, -NHR8 ou -N(R8)2 et
un groupe guanidinyle
avec R8 étant un groupement alkyle, cycloalkyle, (cycloalkyl)alkyle
aryle ou arylalkyle, - R2, R3 représentent indépendamment l'un de l'autre un atome
d'hydrogène, un groupement alkyle, alkoxyalkyle, carboxyalkyle, halo
alkyle, hydroxyalkyle, aminoalkyle, alkylthioalkyle, cycloalkyle,
hétérocycloalkyle, (cycloalkyl)alkyle, (hétérocycloalkyle)alkyle, aryle,
arylalkyle, arylarylalkyle, hétéroaryle, (hétéroaryl)alkyle,
carbamoylalkyle, guanidinylalkyle, - R4 représente un atome d'hydrogène, un groupement acétyle, un groupement benzoyle,
un groupement -SR9 avec Rg étant un groupement alkyle, cycloalkyle, (cycloalkyl)alkyle, aryle, arylalkyle, ou un groupement
-S-CH[CHR1-NH2]-X-N(R5)CHR2CON(R6) CHR3COZ, avec R1 X, R5 R2 R6 R3 et Z tels que définis ci-dessus ou ci-après, - Rs et R6 représentent indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène, un groupement alkyle, cycloalkyle, (cycloalkyl)alkyle, aryle, arylalkyle, hétéroaryle, (hétéroaryl)alkyle, - R2 et R5 pris ensemble peuvent éventuellement constituer avec l'atome d'azote portant R5 un groupement hétérocycloalkyle éventuellement condensé avec un aryle, ou un hétéroaryle, - R3 et R6 pris ensemble peuvent éventuellement constituer avec l'atome d'azote portant R6 un groupement hétérocycloalkyle éventuellement condensé avec un aryle ou un hétéroaryle, - Z représente un groupement OH, Ordo, NH2, NHR10, N(R10)2, avec Rro étant un groupement alkyle, cycloalkyle, (cycloalkyl)alkyle, aryle ou arylalkyle et leurs dérivés.
Les définitions des différents groupements proposés dans la formule générale I des composés revendiqués sont précisées dans la liste ci-dessous. Ces définitions s'appliquent aux termes tels qu'ils sont utilisés à travers ce texte (à moins qu'elles soient limitées à des exemples précis) soit individuellement soit en tant que faisant partie d'un groupe plus large.
C'est ainsi qu'au sens de l'invention, on entend désigner par:
- alkyle et alkoxy, une chaîne hydrocarbonée linéaire ou ramifiée comportant de 1 à 7 atomes de carbone;
- halo-alkyle, un groupement alkyle dans lequel au moins un hydrogène est remplacé par un atome de chlore, de brome, d'iode ou de fluor. A titre représentatif d'un tel groupement on peut citer notamment les groupements pentafluoroéthyle, 2,2,2-trichloroéthyle, chlorométhyle, bromométhyle et plus préférentiellement le bromométhyle;
- cycloalkyle, un groupement cycloalkyle ayant 3, 4, 5, 6 ou 7 atomes de carbone non substitué ou substitué par 1, 2, ou 3 groupements alkyle, aryle, alkoxy, alkylthio, hydroxy, amino, alkylamino, dialkylamino, nitro, trifluorométhyle, ou atomes de chlore, brome, iode ou fluor;
- hétérocycloalkyle, un groupement cycloalkyle comportant au moins un hétéroatome pris parmi l'azote, I'oxygène ou le soufre et portant le cas échéant au moins un substituant tel que défini précédemment pour le cycloalkyle;
- aryle, un groupement phényle ou naphtyle non substitué ou substitué par 1, 2 ou 3 groupements alkyle, alkoxy, alkylthio, hydroxy, amino, alkylamino, dialkylamino, nitro, trifluorométhyle, ou atome de chlore, brome, iode ou fluor;
- hétéroaryle, un groupement 2- ou 3-furanyle, 2- ou 3thiényle, 2-, 3- ou 4-pyridinyle, 4-imidazolyle et 3-indolyle.
- alkyle et alkoxy, une chaîne hydrocarbonée linéaire ou ramifiée comportant de 1 à 7 atomes de carbone;
- halo-alkyle, un groupement alkyle dans lequel au moins un hydrogène est remplacé par un atome de chlore, de brome, d'iode ou de fluor. A titre représentatif d'un tel groupement on peut citer notamment les groupements pentafluoroéthyle, 2,2,2-trichloroéthyle, chlorométhyle, bromométhyle et plus préférentiellement le bromométhyle;
- cycloalkyle, un groupement cycloalkyle ayant 3, 4, 5, 6 ou 7 atomes de carbone non substitué ou substitué par 1, 2, ou 3 groupements alkyle, aryle, alkoxy, alkylthio, hydroxy, amino, alkylamino, dialkylamino, nitro, trifluorométhyle, ou atomes de chlore, brome, iode ou fluor;
- hétérocycloalkyle, un groupement cycloalkyle comportant au moins un hétéroatome pris parmi l'azote, I'oxygène ou le soufre et portant le cas échéant au moins un substituant tel que défini précédemment pour le cycloalkyle;
- aryle, un groupement phényle ou naphtyle non substitué ou substitué par 1, 2 ou 3 groupements alkyle, alkoxy, alkylthio, hydroxy, amino, alkylamino, dialkylamino, nitro, trifluorométhyle, ou atome de chlore, brome, iode ou fluor;
- hétéroaryle, un groupement 2- ou 3-furanyle, 2- ou 3thiényle, 2-, 3- ou 4-pyridinyle, 4-imidazolyle et 3-indolyle.
A titre illustratif des groupements hétérocycliques susceptibles d'être constitués par R3, Rs et l'atome d'azote portant R5 ou par R3, R6 et l'atome d'azote portant R6, on peut notamment citer les hétérocycles azotés comme les carboxy 2-pipéridinyle et carboxy 2pyrrolidinyle.
Au sens de la présente invention, on entend couvrir sous le terme "dérivés" notamment les sels d'addition des composés de formule générale (I) obtenus avec des acides organiques ou minéraux pharmacologiquement acceptables. II peut par exemple s'agir de sels tels que les chlorhydrate, bromhydrate, sulfate, nitrate, borate, phosphate, méthane sulfonate, acétate, fumarate, succinate, ascorbate, oxalate, lactate, pyruvate, citrate, tartrate, maléate, malonate, benzoate, diaminobenzène sulfonate, chromoglycate, benzène sulfonate, cyclohexane sulfate, toluène sulfonate, dipropyl acétate, glucose-1 phosphate, palmoate et palmitate.
Parmi ces dérivés, on peut également citer les dimères de composés de formule générale I, constitués par deux molécules de composés de formule générale I, identiques ou différentes, couplées entre elles au niveau de leurs atomes de soufre respectifs. Dans ce cas particulier, R4 est représenté par le groupement -S-CH[CHR1-NH2]-X-
N(R5)CHR2CON(R6) CHR3COZ, identifié précédemment.
N(R5)CHR2CON(R6) CHR3COZ, identifié précédemment.
De même, la présente invention s'étend aux différentes formes éniantomériques des composés revendiqués.
En effet, les composés de formule (I), possédant plusieurs carbones asymétriques, ils existent sous forme de mélanges soit racémiques ou de diastéréoisomères ou encore sous forme de stéréoisomères purs.
Les composés optiquement purs peuvent être isolés par des synthèses énantiosélectives ou des résolutions par des amines chirales.
Dans le cas de procédés de préparation conduisant à des mélanges de stéréoisomères, une séparation par HPLC semi-préparative sur colonne (Vydac C18, 10x250 mm, CH3CN-H2O) est effectuée, permettant une étude biochimique et pharmacologique séparée de chaque stéréoisomères.
Parmi ces stéréoisomères, sont préférés ceux possédant une configuration absolue (S) ou (R) sur le carbone portant le groupement R1, (S) ou (R) sur le carbone portant la fonction -S R4, et (S) sur les carbones portant les groupements R2 et R3.
De préférence, les composés selon l'invention comprennent à titre de R1 un groupement alkyle, cycloalkyle, aryle, ou hétéroaryle. substitué par au moins un groupement -S02NH2, -S02NHR8, -SO2N(R8)2 avec R8 tel que défini précédemment.
Selon un autre mode particulier de l'invention, il s'agit de composés de formule générale (I) dans laquelle X représente une fonction carbonyle.
A titre de composés préférés selon la présente invention, on peut plus particulièrement citer les composés de formule générale (I) dans laquelle X représente une fonction carbonyle et R1 représente un groupement alkyle, cycloalkyle, aryle, ou hétéroaryle, substitué par au moins un groupement -S02NH2, -S02NHR8 -S02N(R8)2, -CONH2, CONHR8, -CON(R8)2, NH2, -NHR8 ou -N(R8)2 avec R8 tel que défini précédemment. Selon un mode préféré de l'invention, R1 y représente un groupement choisi parmi les groupements (CH2)nS02NH2, (CH2)nCONH2 ou (SO2NH2)Ph, avec de préférence n compris entre 1 et 5. Plus préférentiellement, il s'agit d'un composé avec un groupement (CH2)nSO2NH2 avec n compris entre 1 et 5.
Plus préférentiellement, il s'agit de composés de formule générale I dans laquelle R4, R5, et Ra représentent un atome d'hydrogène,
X une fonction CO et avec R1 représentant un groupement (CH2)2SO2NH2 ou un groupement (SO2NH2)Ph.
X une fonction CO et avec R1 représentant un groupement (CH2)2SO2NH2 ou un groupement (SO2NH2)Ph.
A titre illustratif des composés revendiqués selon l'invention on peut plus particulièrement citer les dérivés suivants: - N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentanoyl)- L-Valyl- L
Isoleucine, - N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentanoyl)- L-Valyl)- L
Isoleucyl- benzylamide, - N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentanoyl)- L-Tyrosyl- L
Histidine, - N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentanoyl)- L-Tyrosyl )- L
Histidyl-benzylamide, - N-(N-(2-mercapto, 3-amino1 5-sulfamoyl pentyl)-L-Tyrosyl)-L
Histidine, - N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 3-(3-sulfamoyl) phényl propanoyl)- L Tyrosyl)- L-Histidyl-benzylamide, - N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-carbamoyl pentanoyl)-L-ss (2 naphtyl)-Ala-L-Q(2-naphtyl)-Alanine, - N-(N-(2-mercapto, 3-ami no1 5-carbamoyl pentanoyl )-L-Trp)-L-
Leucine.
Isoleucine, - N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentanoyl)- L-Valyl)- L
Isoleucyl- benzylamide, - N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentanoyl)- L-Tyrosyl- L
Histidine, - N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentanoyl)- L-Tyrosyl )- L
Histidyl-benzylamide, - N-(N-(2-mercapto, 3-amino1 5-sulfamoyl pentyl)-L-Tyrosyl)-L
Histidine, - N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 3-(3-sulfamoyl) phényl propanoyl)- L Tyrosyl)- L-Histidyl-benzylamide, - N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-carbamoyl pentanoyl)-L-ss (2 naphtyl)-Ala-L-Q(2-naphtyl)-Alanine, - N-(N-(2-mercapto, 3-ami no1 5-carbamoyl pentanoyl )-L-Trp)-L-
Leucine.
La présente invention a également pour objet des procédés de préparation.des composés revendiqués.
Les composés de formule générale (I) dans laquelle X représente un groupement carbonyle, CO, peuvent être préparés par couplage d'un acide de formule générale (Il):
dans laquelle: - P1 représente un groupement tertbutyloxycarbonyle ou benzyloxycarbonyle, - P2 représente un groupement 4-méthoxybenzyle ou 2,4 diméthoxybenzyle, - avec R1 étant défini comme précédemment.
avec une amine de formule générale (III)
dans laquelle:
R2 et R31 R5, R6 et Z sont définis comme précédemment,
dans un solvant organique, en présence d'un agent de couplage et d'une amine tertiaire, à une température de l'ordre de 20"C.
dans laquelle: - P1 représente un groupement tertbutyloxycarbonyle ou benzyloxycarbonyle, - P2 représente un groupement 4-méthoxybenzyle ou 2,4 diméthoxybenzyle, - avec R1 étant défini comme précédemment.
avec une amine de formule générale (III)
dans laquelle:
R2 et R31 R5, R6 et Z sont définis comme précédemment,
dans un solvant organique, en présence d'un agent de couplage et d'une amine tertiaire, à une température de l'ordre de 20"C.
Généralement, le couplage de l'acide de formule (II) sur l'amine générale (III) est effectué en opérant dans un solvant organique comme le dichlorométhane ou le diméthylformamide, en utilisant comme réactif de couplage, un composé du type BOP [benzotriazol-1 -ylcxy- tris(diméthylamino)-phosphonium hexafluorophosphate], HATU [O-(7- azabenzotriazol-1 -yl) 1,1,3, 3-tétraméthyluronium hexafluorophosphate], ou
TFFH [tétraméthylfluoro formamidinium hexafluorophosphate] à une température de mélange réactionnel voisine de 20 C et en présence d'une amine tertiaire comme la diisopropyléthylamine.
TFFH [tétraméthylfluoro formamidinium hexafluorophosphate] à une température de mélange réactionnel voisine de 20 C et en présence d'une amine tertiaire comme la diisopropyléthylamine.
Ces produits de formule générale (II) peuvent préalablement être obtenus par sulfénylation électrophile du p-amino ester protégé de formule (IV),
Dans cette formule, P1 et R1 sont définis comme précédemment, P3 représente un groupement méthoxy, éthoxy, allyloxy ou une copule chirale telle que celle décrite par Evans ou par Oppolzer permettant ainsi une synthèse énantiosélective par action d'un disulfure asymétique.
Généralement, le disulfure asymétrique de 4-méthoxybenzyle et de 2,4-dinitrophényle est ajouté sur l'énolate du p-amino-ester protégé (IV), obtenu par traitement du p-amino ester (1V) par le diisopropylamidure de lithium dans le THF à -78 C. La saponification des produits obtenus précédemment est effectuée par la soude dans un mélange d'eau et de méthanol à une température comprise entre 0 C et 20"C, pour conduire aux produits de formule générale (II).
Ces produits de formule (IV) peuvent préliminairement être obtenus soit:
- par homologation selon la réaction de Arndt-Eistert à partir de l'amino-acide protégé de formule (V):
ce produit de formule (V) étant converti en diazocétone par addition de diazométhane sur l'anhydride mixte obtenu par traitement de (V) avec le chloroformiate d'isobutyle. Le réarrangement de Wolff avec du benzoate d'argent en présence d'un alcool (méthanol, éthanol, alcool allylique ou autre) conduit alors au composé de formule (IV), ou
- par addition de Michael de l'amide de lithium de la benzyl-1-phényléthylamine (+) ou (-) sur l'ester a,ss insaturé de formule (Vl). L'utilisation de cette amine secondaire chirale permet une synthèse parfaitement énantiosélective (ee > 99%), la configuration obtenue dépendant de la configuration absolue de l'amine de départ. La débenzylation du p-amino acide est obtenue par hydrogénolyse sous 20 bars d'hydrogène en présence d'hydroxyde de palladium sur charbon et en présence de Boc20 afin de protéger l'amine primaire obtenue par un groupement t-butoxycarbonyl (P1).
- par homologation selon la réaction de Arndt-Eistert à partir de l'amino-acide protégé de formule (V):
ce produit de formule (V) étant converti en diazocétone par addition de diazométhane sur l'anhydride mixte obtenu par traitement de (V) avec le chloroformiate d'isobutyle. Le réarrangement de Wolff avec du benzoate d'argent en présence d'un alcool (méthanol, éthanol, alcool allylique ou autre) conduit alors au composé de formule (IV), ou
- par addition de Michael de l'amide de lithium de la benzyl-1-phényléthylamine (+) ou (-) sur l'ester a,ss insaturé de formule (Vl). L'utilisation de cette amine secondaire chirale permet une synthèse parfaitement énantiosélective (ee > 99%), la configuration obtenue dépendant de la configuration absolue de l'amine de départ. La débenzylation du p-amino acide est obtenue par hydrogénolyse sous 20 bars d'hydrogène en présence d'hydroxyde de palladium sur charbon et en présence de Boc20 afin de protéger l'amine primaire obtenue par un groupement t-butoxycarbonyl (P1).
L'ester (VI) peut être lui même obtenu par réaction de Wittig d'un composé de formule (VIl) sur une aldéhyde de formule (Vlil) .
Les composés de formule générale (I) dans laquelle X représente un groupement méthylène, CH2, peuvent être préparés par traitement d'une amine de formule générale (III) telle que définie précédemment avec une aldéhyde de formule (IX)
dans laquelle R1, P1 et P2 sont définis comme précédemment, au sein d'un solvant organique et en présence d'un catalyseur.
dans laquelle R1, P1 et P2 sont définis comme précédemment, au sein d'un solvant organique et en présence d'un catalyseur.
De préférence, le traitement de l'amine (III) sur l'aldéhyde (IX) est effectué dans un solvant organique en présence d'acide paratoluènesulfonique en tant que catalyseur pour la formation de l'imine suivie de la réduction par le cyanoborohydrure de sodium conduisant au composé de formule (I), dans lequel X = CH2.
Les produits de formule (IX) sont généralement obtenus par réduction en alcool des composés de formule (II) suivie d'une oxydation de Swern en aldéhyde.
La transformation de (II) en alcool est obtenue par réduction au borohydrure de sodium de l'anhydride mixte de (II) L'oxydation de
Swern est réalisée par action du DMSO en présence de chlorure d'oxalyle dans un solvant organique.
Swern est réalisée par action du DMSO en présence de chlorure d'oxalyle dans un solvant organique.
Les amines de formule (III) sont généralement obtenues par formation successive de liaisons peptidiques soit en phase liquide soit en phase solide selon la méthode de Merrifield sur des résines diversement substituées afin d'obtenir les différentes protections de l'acide C-terminal.
A l'exception des structures où R2 et R5 (respectivement R3 et R6) pris ensemble constituent un cycle, les substitutions R5 et R6 des groupes amino sont obtenues soit par formation de la base de schiff entre l'aldéhyde correspondant à R5 et l'acide aminé supportant R2, ou entre l'aldéhyde correspondant à R6 et l'acide aminé supportant R3 respectivement puis réduction par le cyanoborohydrure de sodium.
Les composés revendiqués s'avèrent capables d'inhiber significativement l'activité enzymatique des toxines clostridiales comme la toxine tétanique et les sept sérotypes de toxine botulique.
A ce titre, les composés revendiqués peuvent être utilisés en thérapie dans tous les processus pathologiques induits par des toxines clostridiales.
Plus précisément, les applications cliniques pour lesquelles on peut envisager l'utilisation de ces composés comprennent les maladies initiées par des toxines de type tétanique ou botulique.
A ces fins, les composés revendiqués et leurs dérivés peuvent être utilisés pour la préparation de compositions pharmaceutiques correspondantes.
Plus particulièrement, la présente invention concerne, selon un autre de ses aspects, une composition pharmaceutique comprenant en tant que principe actif au moins un composé de formule générale (I) ou un de ses dérivés.
Bien entendu, ce composé peut y être associé à au moins un véhicule pharmaceutiquement acceptable.
De même on peut envisager d'introduire conjointement deux ou plusieurs composés de formule générale I dans une même composition pharmaceutique.
Ces compositions pharmaceutiques peuvent être administrées par voie orale, parentérale, sublinguale, transdermique ou topique.
En ce qui concerne l'administration par voie orale ou sublinguale, on utilise en particulier des comprimés, simples ou dragéifiés, des gélules, des granules éventuellement à libération retardée, des gouttes ou encore des liposomes. En ce qui concerne l'administration par voie intraveineuse, sous-cutanée ou intramusculaire, on a recours à des solutions stériles ou stérilisables en particulier pour perfusion veineuse, tandis que l'on peut réaliser les patches conventionnels pour l'administration par voie transdermique. Pour l'utilisation topique on peut utiliser des crèmes ou des lotions à étendre sur la peau.
Les compositions pharmaceutiques selon la présente invention peuvent être préparées selon des méthodes usuelles bien connues dans le domaine de la technique pharmaceutique.
Le principe actif peut être incorporé dans les excipients habituellement employés dans ces compositions pharmaceutiques, tels que le talc, la gomme arabique, le lactose, I'amidon, le stéarate de magnésium, les véhicules aqueux ou non, les corps gras d'origine animale ou végétale, les dérivés paraffiniques, les glycols, les différents agents mouillants, dispersants ou émulsifiants, les conservateurs, etc.
La quantité de principe actif à administrer par jour dépend bien entendu de la particularité de l'indication thérapeutique, de la gravité des affections à traiter, ainsi que du poids du malade et de la voie d'administration.
Pour une administration systémique, la dose globale chez l'homme varie généralement entre 1 et 100 mg par jour, par exemple de 2 à 50 mg, et plus convenablement de 3 à 40 mg par jour.
Des formes unitaires de dosage pour l'administration systémique comprendront généralement de 3 à 50 mg (à savoir 3, 5, 10, 20, 30, 40, et 50 mg de produit). Ces doses unitaires seront administrées normalement une ou plusieurs fois par jour, de préférence une à trois fois parjour.
Pour l'administration topique, les compositions pharmaceutiques contiennent généralement de 0,0001 à 1 % de principe actif et de préférence de 0,01 à 5 %.
Outre cette utilisation des composés de formule générale (I), à titre d'agent thérapeutique potentiel des maladies induites par des toxines clostridiales, comme le tétanos ou le botulisme, on peut également envisager leur utilisation conjointe avec des toxines, botuliques par exemple, à des fins thérapeutiques.
En effet, il a été développé en clinique humaine des méthodes de traitement thérapeutiques symptomatiques des dystonies par hyperactivité motoneuronale. Ce type de prophylaxie est en particulier proposé pour traiter des troubles du type strabisme, blépharospasme, crampe de l'écrivain, spasme hémifacial. La thérapie consiste à injecter des doses de toxines clostridiales au niveau de l'organisme traité. II est clair que compte tenu du caractère toxique de ces toxines, les doses mises en oeuvre, doivent être minimisées de maniere à prévenir tout effet secondaire néfaste. La co-administration d'un composé selon l'invention avec une toxine offre donc la possibilité d'employer des doses plus importantes et donc plus efficaces de ces toxines.
En conséquence, les composés selon l'invention fournissent avantageusement un antidote pour toute activité non désirée de neurotoxines botuliques, administrées en clinique humaine.
On peut également envisager le développement de protocole de co-administration permettant la détection et/ou titration de l'activité de ces toxines dans des cibles musculaires définies pour atteindre le résultat clinique désiré.
En conséquence, la présente invention a également pour objet l'utilisation conjointe d'au moins un composé de formule générale (I) avec au moins une toxine clostridiale comme la toxine tétanique ou la neurotoxine botulique et propose une composition pharmaceutique comprenant au moins un composé de formule générale I en mélange avec au moins une toxine clostridiale. Selon un mode particulier de l'invention il s'agit d'une toxine tétanique ou d'une neurotoxine botulique
Les composés décrits selon l'invention peuvent également être utilisés dans le cadre d'applications non thérapeutiques en particulier dans des systèmes de diagnostic et de détection de neurotoxines clostridiales dans des cibles musculaires.
Les composés décrits selon l'invention peuvent également être utilisés dans le cadre d'applications non thérapeutiques en particulier dans des systèmes de diagnostic et de détection de neurotoxines clostridiales dans des cibles musculaires.
En effet, I'inhibition sélective de tel ou tel sérotype de toxines clostridiales par les composés décrits dans cette invention peut permettre dans un test enzymatique in vitro d'identifier avec certitude le sérotype de toxine contaminant une solution aqueuse et pouvant contenir d'autres enzymes.
La présente invention a également pour objet un système de diagnostic pour détecter des neurotoxines clostridiales (tétanique et botuliques) caractérisé en ce qu'il comprend au moins un composé de formule générale I.
Les exemples présentés ci -après à titre non limitatif mettront en évidence d'autres avantages de la présente invention.
Les protons de spectre de résonance magnétique nucléaire sont numérotés selon les règles de nomenclature en vigueur et les déplacements chimiques sont mesurés en ppm en utilisant le 1,1,1,3,3,3hexaméthyldisilazane (HMDS) comme étalon interne.
A - PROCEDE DE PREPARATION GENERAL DE PEPTIDYL RESINE
La synthèse des peptidyl résines H-A1-A2-dichlorotritylrésine (respectivement H-A1-A2-HMP-résine ou H-A1 -A2-Rink-amide-résine) est réalisée sur la dichlorotritylrésine substituée à 1,35 mmol/g (respectivement HMP-résine ou Rinkamide-résine substituée à 1,0 mmol/g) en utilisant la stratégie Fmoc sur un synthétiseur Applied
Biosystems ABI 431B'". L'acide aminé protégé Fmoc-An-OH (îmmol) est couplé à 125 mg (200 amol) de dichlorotrityl-résine dans la NMP en présence de diisopropyléthylamine (DIEA) (respectivement, à 150 mg de
HMP-résine (150 limol)) en présence de DCC (dicyclohexylcarbodiimide) et de DMAP (diméthylaminopyridine). Le groupement a-amino est déprotégé par un traitement avec 20% de piperidine dans la NMP (Nméthylpyrrolidone). Les différents acides Fmoc-An-OH (1 mmol), sont successivement couplés dans la NMP en utilisant comme agent d'activation le couple dicyclohexylcarbodiimide (DCC)! 1hydroxybenzotriazole (HOBt). Le groupement Fmoc est clivé avec une solution de 20% en piperidine dans la NMP. Après chaque couplage et déprotection, la résine est alternativement lavée avec de la NMP et du dichlorométhane.
La synthèse des peptidyl résines H-A1-A2-dichlorotritylrésine (respectivement H-A1-A2-HMP-résine ou H-A1 -A2-Rink-amide-résine) est réalisée sur la dichlorotritylrésine substituée à 1,35 mmol/g (respectivement HMP-résine ou Rinkamide-résine substituée à 1,0 mmol/g) en utilisant la stratégie Fmoc sur un synthétiseur Applied
Biosystems ABI 431B'". L'acide aminé protégé Fmoc-An-OH (îmmol) est couplé à 125 mg (200 amol) de dichlorotrityl-résine dans la NMP en présence de diisopropyléthylamine (DIEA) (respectivement, à 150 mg de
HMP-résine (150 limol)) en présence de DCC (dicyclohexylcarbodiimide) et de DMAP (diméthylaminopyridine). Le groupement a-amino est déprotégé par un traitement avec 20% de piperidine dans la NMP (Nméthylpyrrolidone). Les différents acides Fmoc-An-OH (1 mmol), sont successivement couplés dans la NMP en utilisant comme agent d'activation le couple dicyclohexylcarbodiimide (DCC)! 1hydroxybenzotriazole (HOBt). Le groupement Fmoc est clivé avec une solution de 20% en piperidine dans la NMP. Après chaque couplage et déprotection, la résine est alternativement lavée avec de la NMP et du dichlorométhane.
B - PROCEDE DE PREPARATION DES DIFFERENTS SYNTHONS: Bl) SYNTHESE DU SYNTHON 1:
Acide 2-(paraméthoxybenzyl-thio)-, 3-( N-benzyloxycarbonyl -amino)-, 5-(N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanolque.
Acide 2-(paraméthoxybenzyl-thio)-, 3-( N-benzyloxycarbonyl -amino)-, 5-(N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanolque.
Ce synthon est commun aux exemples 1, 2, 3, 4 et 5.
I-) Acide (2SR) 4. 4'-dithiobis. 2-(N-benzyloxycarbonyl)-amino, butanoïque ou (SR) (Z - HOMOCYS - OH)
A un mélange de dioxanne (100 ml) / eau (100 ml), on ajoute à 0 C, 5,52 g de soude en pastilles (137,9 mmol) puis 18,5 g (68,94 mmol) de (SR) (D,L) Homocystine commerciale . On coule alors goutte à goutte une solution de chloroformiate de benzyle (100 ml). Pendant l'addition, on ajuste le pH à 9 avec une solution de NaOH (1N) puis on laisse revenir à température ambiante et on agite pendant 2 heures. On évapore le dioxanne puis on ajoute de l'acétate d'éthyle et on acidifie la phase aqueuse avec HCI 2N jusqu'à pH=1. On l'extrait à trois reprises avec de l'acétate d'éthyle puis on sèche la phase organique avec une solution de NaCI saturée et un passage sur Na2SO4. Après évaporation à sec, on reprend la phase organique avec du toluène puis avec du dichlorométhane.
A un mélange de dioxanne (100 ml) / eau (100 ml), on ajoute à 0 C, 5,52 g de soude en pastilles (137,9 mmol) puis 18,5 g (68,94 mmol) de (SR) (D,L) Homocystine commerciale . On coule alors goutte à goutte une solution de chloroformiate de benzyle (100 ml). Pendant l'addition, on ajuste le pH à 9 avec une solution de NaOH (1N) puis on laisse revenir à température ambiante et on agite pendant 2 heures. On évapore le dioxanne puis on ajoute de l'acétate d'éthyle et on acidifie la phase aqueuse avec HCI 2N jusqu'à pH=1. On l'extrait à trois reprises avec de l'acétate d'éthyle puis on sèche la phase organique avec une solution de NaCI saturée et un passage sur Na2SO4. Après évaporation à sec, on reprend la phase organique avec du toluène puis avec du dichlorométhane.
On obtient, avec un rendement de 99,2%, 36,7 g (68,39mmol) de (Z - Homocys- OH)2 dont les caractéristiques sont les suivantes:
Rf (MeOH:CH2Cl2:H2O:AcOH 3:7:0,6:0,3)= 0,55 1H RMN (d6-DMSO) # 1.85 à 2.00 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 2.00 à 2.15 (m, 1 H, CH-CH-CH2), 2.70 (t, 2H, CH-CH2-CH), 4.08 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 4.97 (s, 2H, CH2-C6Hs), 7.30 (m, 5H, CH aromatiques), 7.58 (d, 1 H, NH
Z).
Rf (MeOH:CH2Cl2:H2O:AcOH 3:7:0,6:0,3)= 0,55 1H RMN (d6-DMSO) # 1.85 à 2.00 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 2.00 à 2.15 (m, 1 H, CH-CH-CH2), 2.70 (t, 2H, CH-CH2-CH), 4.08 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 4.97 (s, 2H, CH2-C6Hs), 7.30 (m, 5H, CH aromatiques), 7.58 (d, 1 H, NH
Z).
II-) (2SR). 4, 4'dithiobis, 2-(N-benzvloxvcarbonvl)-amino butanoate de méthyle ou (SR) (Z - Homocvs - OMe)2
A une solution de 36,7 g de (Z-Homocys-OH)2, dans un mélange de dichlorométhane (50 ml) / éther (50 ml) refroidi à O C, on ajoute un excès de diazométhane. Après 1 heure, l'excès de diazométhane est neutralisé par ajout d'AcOH jusqu'à disparition de la coloration jaune. On évapore à sec. On obtient, avec un rendement de 89,5%, 34,52 g de (Z - Homocys - OMe )2 dont les caractéristiques sont les suivantes:
Rf (AcOEt/cyclohexane 3:7) = 0,27 1H RMN (d6-DMSO) 5 1.82 à 2.10 (m, 2H, CH-CH2-CH2), 2.68 (m, 2H,
CH-CH2-CH2), 3.60 (s, 3H, COOMe), 4.13 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 4.99 (s, 2H, CHv-C6Hs), 7.2 à 7.4 (m,, 5H, CH aromatiques), 7.73 (d, 1 H, NH-Z) 111-) (2SR), 2-(N-benzyloxvcarbonyl)-amino. 4-(N-tertiobutvlaminosulfonyl) butanoate de méthyle
A une solution de 34,51 g (61,19 mmol) de (Z - Homocys
OMe )2 refroidie à 0 C dans 20 ml de MeOH et 2 (283,42 mmol) de NaOH dans 100 ml de MeOH. Après 3 heures d'agitation, on évapore le MeOH..On ajoute de l'eau. La phase aqueuse est extraite avec Et2O. On acidifie la phase aqueuse avec KHSO4 (2N) puis on extrait 3 fois avec de l'acétate d'éthyle. L'ensemble des phases organiques est lavé par de l'eau, séché sur sulfate de sodium et évaporé.
A une solution de 36,7 g de (Z-Homocys-OH)2, dans un mélange de dichlorométhane (50 ml) / éther (50 ml) refroidi à O C, on ajoute un excès de diazométhane. Après 1 heure, l'excès de diazométhane est neutralisé par ajout d'AcOH jusqu'à disparition de la coloration jaune. On évapore à sec. On obtient, avec un rendement de 89,5%, 34,52 g de (Z - Homocys - OMe )2 dont les caractéristiques sont les suivantes:
Rf (AcOEt/cyclohexane 3:7) = 0,27 1H RMN (d6-DMSO) 5 1.82 à 2.10 (m, 2H, CH-CH2-CH2), 2.68 (m, 2H,
CH-CH2-CH2), 3.60 (s, 3H, COOMe), 4.13 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 4.99 (s, 2H, CHv-C6Hs), 7.2 à 7.4 (m,, 5H, CH aromatiques), 7.73 (d, 1 H, NH-Z) 111-) (2SR), 2-(N-benzyloxvcarbonyl)-amino. 4-(N-tertiobutvlaminosulfonyl) butanoate de méthyle
A une solution de 34,51 g (61,19 mmol) de (Z - Homocys
OMe )2 refroidie à 0 C dans 20 ml de MeOH et 2 (283,42 mmol) de NaOH dans 100 ml de MeOH. Après 3 heures d'agitation, on évapore le MeOH..On ajoute de l'eau. La phase aqueuse est extraite avec Et2O. On acidifie la phase aqueuse avec KHSO4 (2N) puis on extrait 3 fois avec de l'acétate d'éthyle. L'ensemble des phases organiques est lavé par de l'eau, séché sur sulfate de sodium et évaporé.
On obtient avec un rendement de 99%, 37,40 g d'acide (2SR), 2-(Nbenzyloxycarbonyl-amino), 4-(N-tertiobutylaminosulfonyl) butanoïque dont les caractéristiques sont les suivantes:
Pf = 133 C
Rf (MeOH:AcOH:CH2Cl2) = 0,31 1H RMN (d6-DMSO) 6 1.08 (s, 9H, tBu), 1.75 à 2.00 (m, 2H, CH-CH2-
CH2), 2.70 à 2.84 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 2.84 à 2.98 (m, 1H, CH-CH2 CH2), 3.98 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 4.86 (s, 2H, CH9-C6H5), 6.72 (s, 1H,
SO2-NH), 7.19 (m, 5H, CH aromatiques), 7.56 (d, 1H, NH-Z), 12.70 (s, 1H,
COOH).
Pf = 133 C
Rf (MeOH:AcOH:CH2Cl2) = 0,31 1H RMN (d6-DMSO) 6 1.08 (s, 9H, tBu), 1.75 à 2.00 (m, 2H, CH-CH2-
CH2), 2.70 à 2.84 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 2.84 à 2.98 (m, 1H, CH-CH2 CH2), 3.98 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 4.86 (s, 2H, CH9-C6H5), 6.72 (s, 1H,
SO2-NH), 7.19 (m, 5H, CH aromatiques), 7.56 (d, 1H, NH-Z), 12.70 (s, 1H,
COOH).
V-) (3SR), 3-( N-benzvloxvcarbonvl-amino). 5-(N-tertiobutvlaminosulfonvl pentanoate de méthyle
On dissout 20 g (53,7 mmol) d'acide (2SR), 2-(Nbenzyloxycarbonyl-amino), 4-( N-tertiobutylaminosulfonyl) butanoïque dans 15 ml de DMF, on y ajoute 100 ml de THF fraîchement distillé puis 7,1 ml (1,2 eq) de N-méthylmorpholine. A -15 C, on ajoute goutte à goutte 8,5 ml d'iBuOCOCI sous azote et on laisse agiter 20 minutes. Après filtration du chlorhydrate de N-méthylmorpholine, on ajoute un excès de diazométhane. Après une heure d'agitation, on évapore et on reprend à l'acétate d'éthyle. Les phases organiques sont lavées avec H2O, NaHCO3 (10%), NaCI saturé puis on sèche sur Na2SO4 et on évapore pour obtenir avec un rendement quantitatif, 21,12 g de (3SR), 3-(N-benzyloxycarbonylamino), 4-oxo, 5-diazenyl, N-tertiobutylsulfonamide pentanoate.
On dissout 20 g (53,7 mmol) d'acide (2SR), 2-(Nbenzyloxycarbonyl-amino), 4-( N-tertiobutylaminosulfonyl) butanoïque dans 15 ml de DMF, on y ajoute 100 ml de THF fraîchement distillé puis 7,1 ml (1,2 eq) de N-méthylmorpholine. A -15 C, on ajoute goutte à goutte 8,5 ml d'iBuOCOCI sous azote et on laisse agiter 20 minutes. Après filtration du chlorhydrate de N-méthylmorpholine, on ajoute un excès de diazométhane. Après une heure d'agitation, on évapore et on reprend à l'acétate d'éthyle. Les phases organiques sont lavées avec H2O, NaHCO3 (10%), NaCI saturé puis on sèche sur Na2SO4 et on évapore pour obtenir avec un rendement quantitatif, 21,12 g de (3SR), 3-(N-benzyloxycarbonylamino), 4-oxo, 5-diazenyl, N-tertiobutylsulfonamide pentanoate.
A une solution de 21,12 g (53,28 mmol) de (3SR), 3-(Nbenzyloxycarbonyl-amino), 4-oxo, 5-diazenyl, N-tertiobutylaminosulfonyl pentanoate dans 180 ml de méthanol, on coule goutte à goutte une solution de 1,64 g de benzoate d'argent dans 70 ml de triéthylamine.
Après une agitation d'1 h 30, on ajoute une spatule de célite, une spatule de charbon actif et 50 ml de NaCI. On agite pendant 1 heure et on filtre sur célite.
Le filtrat est évaporé à sec. Le résidu est repris avec de l'AcOEt. Les phases organiques sont lavées avec NaHCO3 (10%), H20,
KHSO4(1N) et NaCI saturé. On sèche sur Na2SO4 et on évapore à sec.
KHSO4(1N) et NaCI saturé. On sèche sur Na2SO4 et on évapore à sec.
Le produit est purifié sur une colonne de silice avec comme éluant le mélange suivant (20% AcOEt, 30% CH2Cl2, 50% cyclohexane).Après concentration, on obtient avec un rendement de 95%, 20,06 g de (3SR), 3 (N-benzyloxycarbonyl-amino), 5-( N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanoate de méthyle dont les caractéristiques sont les suivantes:
Pf=88 C
Rf (AcOEt:CH2C12:cyclohexane 1:1:1) = 0,48 1H RMN (CDCl3) # 1.29 (s, 9H, tBu), 1.99 (m, 2H, CH-CH2-CH2), 2.54 (d, 2H, CH2-COOMe), 3.05 (t, 2H, CH-CH2-CH2), 3.61 (s, 3H, COOMe), 4.02 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 4.14 (s, 1H, SO2-NH), 5.03 (s, 2H, CH2-C6Hs), 5.37 (d, H H, NH-Z), 7.2 à 7.4 (m, 5H, CH aromatiques)
VI-) Acide (3SR), 3-(N-benzvloxvcarbonyl-amino). 5-(Ntertiobutylaminosulfonyl) pentanoïque
10 g (25mmol) de (3SR), 3-(N-benzyloxycarbonyl-amino), 5 (N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanoate de méthyle est saponifié selon la méthode décrite précédemment dans l'exemple Blv en utilisant 2 équivalents de NaOH.
Pf=88 C
Rf (AcOEt:CH2C12:cyclohexane 1:1:1) = 0,48 1H RMN (CDCl3) # 1.29 (s, 9H, tBu), 1.99 (m, 2H, CH-CH2-CH2), 2.54 (d, 2H, CH2-COOMe), 3.05 (t, 2H, CH-CH2-CH2), 3.61 (s, 3H, COOMe), 4.02 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 4.14 (s, 1H, SO2-NH), 5.03 (s, 2H, CH2-C6Hs), 5.37 (d, H H, NH-Z), 7.2 à 7.4 (m, 5H, CH aromatiques)
VI-) Acide (3SR), 3-(N-benzvloxvcarbonyl-amino). 5-(Ntertiobutylaminosulfonyl) pentanoïque
10 g (25mmol) de (3SR), 3-(N-benzyloxycarbonyl-amino), 5 (N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanoate de méthyle est saponifié selon la méthode décrite précédemment dans l'exemple Blv en utilisant 2 équivalents de NaOH.
On obtient avec un rendement quantitatif, 9,65 g (25 mmol) d'acide (3SR), 3-(N-benzyloxylcarbonyl-amino), 5-(Ntertiobutylaminosulfonyl) pentanoïque dont les caractéristiques sont les suivantes:
Rf (MeOH:AcOH:CH2Cl2) = 0,46 1H RMN (d6-DMSO) # 1.18 (s, 9H, tBu), 1.67 à 1.90 (m, 2H, CH-CH2
CH2), 2.37 (d, 2H, CH2-COOH), 2.89 (t, 2H, CH-CH2-CH2), 3.83 (m, 1H,
CH-CH2-CH2), 4.95 (s, 2H, CH2-C6Hs), 6.77 (s, 1H, SO2-NH), 7.29 (m, 5H, CH aromatiques)
VII-A) Acide (3S). 3-(N-benzvloxvcarbonvl-amino), tertiobutylaminosulfonyl) pentanoïque
9,65 g (25 mmol) d'acide (3SR), 3-(N-benzyloxycarbonylamino), 5-(N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanoïque sont résolus en utilisant un équivalent de D(+)-α-méthyl-benzylamine dans un système chloroforme/ isopropanol. On obtient avec un rendement de 73,9%, 3,571 g (9,24 mmol) d'acide (3S), 3-(N-benzyloxycarbonyl-amino), 5-(Ntertiobutylaminosulfonyl) pentanoïque. L'excès énantiomérique (94%) est déterminé après couplage avec la D(+)-α-méthyl-benzylamine et comparé avec la synthèse réalisée sur la L-homocystine. Les caractéristiques de ce produit sont les suivantes:
Rf (MeOH:AcOH:CH2CI2 5:5:90) = 0,46 1H RMN (d6-DMSO) 6 1.18 (s, 9H, tBu), 1.67 à 1.90 (m, 2H, CH-CH2-
CH2), 2.37 (d, 2H, CH2-COOH), 2.89 (t, 2H, CH-CH2-CH), 3.83 (m, 1H,CH-CH2-CH2), 4.95 (s, 2H, CH2-C6H5), 6.77 (s, 1H, SO2-NH), 7.29 (m, 5H, CH aromatiques)
VII-B) L'acide (3R). 3-(N-benzyloxvcarbonvl-amino) 5-(Ntertiobutvlaminosulfonvl) sentanoïque
II est obtenu par un protocole analogue en utilisant la D(-)-améthyl benzylamine.
Rf (MeOH:AcOH:CH2Cl2) = 0,46 1H RMN (d6-DMSO) # 1.18 (s, 9H, tBu), 1.67 à 1.90 (m, 2H, CH-CH2
CH2), 2.37 (d, 2H, CH2-COOH), 2.89 (t, 2H, CH-CH2-CH2), 3.83 (m, 1H,
CH-CH2-CH2), 4.95 (s, 2H, CH2-C6Hs), 6.77 (s, 1H, SO2-NH), 7.29 (m, 5H, CH aromatiques)
VII-A) Acide (3S). 3-(N-benzvloxvcarbonvl-amino), tertiobutylaminosulfonyl) pentanoïque
9,65 g (25 mmol) d'acide (3SR), 3-(N-benzyloxycarbonylamino), 5-(N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanoïque sont résolus en utilisant un équivalent de D(+)-α-méthyl-benzylamine dans un système chloroforme/ isopropanol. On obtient avec un rendement de 73,9%, 3,571 g (9,24 mmol) d'acide (3S), 3-(N-benzyloxycarbonyl-amino), 5-(Ntertiobutylaminosulfonyl) pentanoïque. L'excès énantiomérique (94%) est déterminé après couplage avec la D(+)-α-méthyl-benzylamine et comparé avec la synthèse réalisée sur la L-homocystine. Les caractéristiques de ce produit sont les suivantes:
Rf (MeOH:AcOH:CH2CI2 5:5:90) = 0,46 1H RMN (d6-DMSO) 6 1.18 (s, 9H, tBu), 1.67 à 1.90 (m, 2H, CH-CH2-
CH2), 2.37 (d, 2H, CH2-COOH), 2.89 (t, 2H, CH-CH2-CH), 3.83 (m, 1H,CH-CH2-CH2), 4.95 (s, 2H, CH2-C6H5), 6.77 (s, 1H, SO2-NH), 7.29 (m, 5H, CH aromatiques)
VII-B) L'acide (3R). 3-(N-benzyloxvcarbonvl-amino) 5-(Ntertiobutvlaminosulfonvl) sentanoïque
II est obtenu par un protocole analogue en utilisant la D(-)-améthyl benzylamine.
VII-A) (3S), 3-(N-benzyloxycarbonyl-amino), 5-(N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanoate de méthyle
A une solution de 2,405 g (6,22 mmol) d'acide (3S), 3-(Nbenzyloxycarbonyl-amino), 5-(N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanoique, 675 mg (7,09 mmol) de 4-hydroxypyridine dans 15 ml de pyridine, est ajouté à 0 C 1,580 g ( 7,66 mmol) de dicyclohexylcarbodiimide (DCC). La suspension est agitée pendant 3 heures à température ambiante puis concentrée sous pression réduite. On ajoute, à 0 C, 10 ml de méthanol.
A une solution de 2,405 g (6,22 mmol) d'acide (3S), 3-(Nbenzyloxycarbonyl-amino), 5-(N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanoique, 675 mg (7,09 mmol) de 4-hydroxypyridine dans 15 ml de pyridine, est ajouté à 0 C 1,580 g ( 7,66 mmol) de dicyclohexylcarbodiimide (DCC). La suspension est agitée pendant 3 heures à température ambiante puis concentrée sous pression réduite. On ajoute, à 0 C, 10 ml de méthanol.
On agite pendant une nuit à 50 C. La suspens ion est concentrée puis repris avec de l'AcOEt, le précipité de dicyclohexylurée est filtré. Le filtrat
est ensuite lavé avec KHSO4 (1N), NaHCO3(10%), une solution saturée
de NaCI, séché sur Na2SO4 puis évaporé sous pression réduite.
est ensuite lavé avec KHSO4 (1N), NaHCO3(10%), une solution saturée
de NaCI, séché sur Na2SO4 puis évaporé sous pression réduite.
On obtient avec un rendement quantitatif, 2,49 g ( 6,22
mmol) de (3S), 3-(N-benzyloxycarbonyl-amino), tertiobutylaminosulfonyl) pentanoate de méthyle dont les caractéristiques sont les suivantes:
Rf (AcOEt:CH2Cl2:cyclohexane 1:1:1) = 0,48
1H RMN (CDCI3) # 1.29 (s, 9H, tBu), 1.99 (m, 2H, CH-CH2-CH2), 2.54 (d, 2H, CH2-COOMe), 3.05 (t, 2H, CH-CH2-CH2), 3.61 (s, 3H, COOMe), 4.02 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 4.18 (s, 1H, SO2-NH), 5.03 (s, 2H, CH2-C6H5), 5.37 (d, 1H NH-Z), 7.2 à 7.4 (m, 5H, CH aromatiques) VIl I-B) L'ester (3R) 3-(N-benzyloxycarbonyl amino) 5-(N-tertiobutvl amino sulfonyl) pentanoate de méthyle
II est obtenu par un protocole analogue en utilisant l'acide (3R) décrit dans le paragraphe VII-B (synthon 1).
mmol) de (3S), 3-(N-benzyloxycarbonyl-amino), tertiobutylaminosulfonyl) pentanoate de méthyle dont les caractéristiques sont les suivantes:
Rf (AcOEt:CH2Cl2:cyclohexane 1:1:1) = 0,48
1H RMN (CDCI3) # 1.29 (s, 9H, tBu), 1.99 (m, 2H, CH-CH2-CH2), 2.54 (d, 2H, CH2-COOMe), 3.05 (t, 2H, CH-CH2-CH2), 3.61 (s, 3H, COOMe), 4.02 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 4.18 (s, 1H, SO2-NH), 5.03 (s, 2H, CH2-C6H5), 5.37 (d, 1H NH-Z), 7.2 à 7.4 (m, 5H, CH aromatiques) VIl I-B) L'ester (3R) 3-(N-benzyloxycarbonyl amino) 5-(N-tertiobutvl amino sulfonyl) pentanoate de méthyle
II est obtenu par un protocole analogue en utilisant l'acide (3R) décrit dans le paragraphe VII-B (synthon 1).
IX-A) (2S,3S), 2-(paraméthoxybenzyl-thio), 3-(N-benzyloxycarbonylamino). 5-(N-tertiobutvlaminosulfonyl) pentanoate de méthyle.
Sous azote, 1,5 g (3,75 mmol) d'ester (3S), 3-(Nbenzyloxycarbonyl-amino), 5-(N-tertiobutylamino-thio) pentanoate de méthyle est dissout dans 10 ml de THF. A -78 C, 6 ml de LDA (2M/ heptanefrHFlethylbenzene ; 4,80 mmol) sont ajoutés goutte à goutte.
Après 30 minutes, on ajoute à -78 C 1,98 g (5,625 mmol) de disulfure de paraméthoxybenzyle et 2,4 dinitrophenyle, et la solution est agitée pendant 2 heures à -78 C. On ajoute KHSO4 (1N), on extrait avec de l'acétate d'éthyle ; les phases organiques sont lavées par KHSO4(1N),
NaCI saturée, séchées sur Na2SO4 puis évaporées sous pression réduite.
NaCI saturée, séchées sur Na2SO4 puis évaporées sous pression réduite.
Après purification sur colonne de silice (AcOEt:CH2Cl2:cyclohexane 2:3:5), on obtient avec un rendement de 54%, 1,1259 de (2S,3S) 2-(paraméthoxybenzyl-thio), 3-(Nbenzyloxycarbonyl-amino), 5-(N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanoate de méthyle dont les caractéristiques sont les suivantes. L'excès énantiomérique est supérieur à 95 % comme en témoigne l'analyse HPLC.
Rf (AcOEt:CH2C12:cyclohexane 1:1:1) = 0,57
Rf (AcOEt:CH2CI2:cyclohexane 15:25:60) = 0,15 1H RMN (CDCl3) 6 1.25 (s, 9H, tBu), 1.86 à 2.30 (m, 2H, CH-CH2-CH2), 2.96 (t, 2H, CH-CH2-CH2), 3.29 (2d, 1H, CH-S), 3.64 (s, 3H, COOMe), 3.72 (s, 5H, S-CH2-C6H4-OMe), 4.02 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 4.87 (s, 1H,
SO2-NH), 5.05 (s, 2H, 2CHC6H5), 5.50 (d, 1H, NH-Z), 6.75 (d, 2H, CH aromatiques ortho à OMe), 7.14 (d, 2H, CH aromatiques méta à OMe), 7.27 (m, 5H, CH aromatiques).
Rf (AcOEt:CH2CI2:cyclohexane 15:25:60) = 0,15 1H RMN (CDCl3) 6 1.25 (s, 9H, tBu), 1.86 à 2.30 (m, 2H, CH-CH2-CH2), 2.96 (t, 2H, CH-CH2-CH2), 3.29 (2d, 1H, CH-S), 3.64 (s, 3H, COOMe), 3.72 (s, 5H, S-CH2-C6H4-OMe), 4.02 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 4.87 (s, 1H,
SO2-NH), 5.05 (s, 2H, 2CHC6H5), 5.50 (d, 1H, NH-Z), 6.75 (d, 2H, CH aromatiques ortho à OMe), 7.14 (d, 2H, CH aromatiques méta à OMe), 7.27 (m, 5H, CH aromatiques).
SM (ES), (M+H)+ m/z 539.3, (M+Na)+ m/z 561.3
IX-B) 2-( paraméthoxybenzvl-thio), 3-(N-benzyloxycarbonvl-amino) 5-( N- tertiobutylaminosulfonyl) pentanoate de méthyle.
IX-B) 2-( paraméthoxybenzvl-thio), 3-(N-benzyloxycarbonvl-amino) 5-( N- tertiobutylaminosulfonyl) pentanoate de méthyle.
Le composé analogue de configuration (2R, 3R) est obtenu par le même protocole en utilisant le composé décrit en VIII-B (Synthon 1).
X-A) Acide (2SR,3S). 2-(oaraméthoxvbenzvl-thio). 3-(Nbenzyloxycarbonyl-amino), 5-(N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanoïque.
A 0,546 g de (2S,3S) 2-(paraméthoxybenzyl-thio),3-(N benzyloxycarbonyl-amino), 5-(N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanoate de méthyle dans 5 ml de méthanol, on ajoute 1 ml de NaOH (6N). En suivant les conditions opératoires décrites dans l'exemple Biv, on obtient avec un rendement de 91%, 484 mg d'acide (2SR, 3S), 2-(paraméthoxybenzylthio), 3-(N-benzyloxycarbonyl-amino), 5-(N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanoïque dont les caractéristiques sont les suivantes:
Rf (AcOEt:AcOH:CH2Cl2 30:2:70) = 0,24 et 0,32 1H RMN (CDCI3) # 1.21 (s, 9H, tBu), 1.79 à 1.93 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 1.96 à 2.10 (m, 1H, CH-CH-CH2), 2.97 (t, 2H, CH-CH2-CH2), 3.24 et 3.30 (d, 1H, CH-S), 3.70 (s, 3H, OMe), 3.76 (s, 2H, CH-CH4-OMe), 4.04 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 5.01 (s, 2H, CH2-C6Hs), 5.60 (d, 1H, NH-Z), 6.72 et 6.77 (d, 2H, CH aromatiques ortho à OMe), 7.12 et 7.17 (d, 2H, CH aromatiques méta à OMe), 7.25 (br s, 5H, CH aromatiques).
Rf (AcOEt:AcOH:CH2Cl2 30:2:70) = 0,24 et 0,32 1H RMN (CDCI3) # 1.21 (s, 9H, tBu), 1.79 à 1.93 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 1.96 à 2.10 (m, 1H, CH-CH-CH2), 2.97 (t, 2H, CH-CH2-CH2), 3.24 et 3.30 (d, 1H, CH-S), 3.70 (s, 3H, OMe), 3.76 (s, 2H, CH-CH4-OMe), 4.04 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 5.01 (s, 2H, CH2-C6Hs), 5.60 (d, 1H, NH-Z), 6.72 et 6.77 (d, 2H, CH aromatiques ortho à OMe), 7.12 et 7.17 (d, 2H, CH aromatiques méta à OMe), 7.25 (br s, 5H, CH aromatiques).
X-B) (2SR. 3R) 2-(paraméthoxybenzyl-thio), 3-( N-benzvloxvcarbon vl- amino), 5-(N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanoïque.
Le deuxième couple de diastéréoisomères de configuration (2SR, 3R) est obtenu par le même protocole en utilisant le composé décrit en IX-B (synthon 1).
BII) VOIE DE SYNTHESE DU SYNTHON 2:
Acide 2-paraméthoxybenzyl-thio, 3-Boc-amino, 5-trityl-carbamoyl pentanoique.
Acide 2-paraméthoxybenzyl-thio, 3-Boc-amino, 5-trityl-carbamoyl pentanoique.
Ce synthon est commun aux exemples 7 et 8
I-A) (3S). 3-(N-tButyloxycarbonyl-amino), 5-( N-Tritvl-carbamovl )- pentanoate de méthyle
A partir de 10 g (20,5 mmol) de (L) Boc Gln(Trt)COOH, on obtient en suivant les conditions opératoires de l'exemple Bv (Synthon 1), avec un rendement de 85 %, 4,35 g de (3S), 3-Boc-amino-5-Tritylcarbamoyl-pentanoate de méthyle dont les caractéristiques sont les suivantes:
Rf (AcOEt:CH2Cl2 1:3) = 0,58 1H RMN (d6-DMSO) 6 1.32 (s, 9H, tBu), 1.25 à 1.37 (m, 1H, CH-CH2
CH2), 1.40 à 1.53 (m, 1H, CH-CH-CH2), 2.20 (t, 2H, CH-CH2-CH2), 2.30 (d, 2H, CH2COOMe), 3.50 (s, 3H, COOMe), 3.63 à 3.77 (m, 1H, CH-CH2
CH2), 6.67 (d, 1H, NH-Boc), 7.08 à 7.22 (m, 15H, Trt), 8.50 (s, 1H, NH-Trt)
IB) (3R) 3-(Boc-amino) 5-(trityl carbamovl) pentanoate de méthyle.
I-A) (3S). 3-(N-tButyloxycarbonyl-amino), 5-( N-Tritvl-carbamovl )- pentanoate de méthyle
A partir de 10 g (20,5 mmol) de (L) Boc Gln(Trt)COOH, on obtient en suivant les conditions opératoires de l'exemple Bv (Synthon 1), avec un rendement de 85 %, 4,35 g de (3S), 3-Boc-amino-5-Tritylcarbamoyl-pentanoate de méthyle dont les caractéristiques sont les suivantes:
Rf (AcOEt:CH2Cl2 1:3) = 0,58 1H RMN (d6-DMSO) 6 1.32 (s, 9H, tBu), 1.25 à 1.37 (m, 1H, CH-CH2
CH2), 1.40 à 1.53 (m, 1H, CH-CH-CH2), 2.20 (t, 2H, CH-CH2-CH2), 2.30 (d, 2H, CH2COOMe), 3.50 (s, 3H, COOMe), 3.63 à 3.77 (m, 1H, CH-CH2
CH2), 6.67 (d, 1H, NH-Boc), 7.08 à 7.22 (m, 15H, Trt), 8.50 (s, 1H, NH-Trt)
IB) (3R) 3-(Boc-amino) 5-(trityl carbamovl) pentanoate de méthyle.
Ce composé est obtenu par le même protocole à partir de la
Boc (D) Gin (Trt) COOH.
Boc (D) Gin (Trt) COOH.
Il-A) (2RS. 3S). 2-Paraméthoxvbenzvl-thiol 3-Boc-amino 5-Tritvl carbamovl-entanoate de méthyle.
A partir de 1,032 g de (3S), 3-Boc-amino-5-Trityl-carbamoylpentanoate de méthyle, on obtient en suivant les conditions opératoires de l'exemple BIX (Synthon 1), avec un rendement de 43%, 574 mg de (2RS, 3S), 2-paraméthoxybenzyl-thio, 3-Boc-amino, 5-Trityl-carbamoylpentanoate de méthyle dont les caractéristiques sont les suivantes:
Rf (AcOEt:CH2CI2:cyclohexane 20:30:50) = 0,27 1H RMN (d6-DMSO) 6 1.32 (s, 9H, tBu), 1.28 à 1.37 (m, 1H, CH-CH2-
CH2), 1.86 à 1.95 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 2.10 à 2.24 (m, 2H, CH-CH2
CH2), 3.22 (d, 1H, CH-S), 3.55 (s, 3H, COOMe), 3.67 (2s, 5H, S-CH-
C6H4-OMe), 3.70 à 3.78 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 6.72 (d, 1H, NH-Boc), 6.79 (d, 2H, CH aromatiques ortho à OMe), 7.12 (d, 2H, CH aromatiques méta à OMe), 7.10 à 7.23 (m, 15H, Trt), 8.50 (s, 1H, NH-Trt)
MS (El) 153, 243, 559, 669.
Rf (AcOEt:CH2CI2:cyclohexane 20:30:50) = 0,27 1H RMN (d6-DMSO) 6 1.32 (s, 9H, tBu), 1.28 à 1.37 (m, 1H, CH-CH2-
CH2), 1.86 à 1.95 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 2.10 à 2.24 (m, 2H, CH-CH2
CH2), 3.22 (d, 1H, CH-S), 3.55 (s, 3H, COOMe), 3.67 (2s, 5H, S-CH-
C6H4-OMe), 3.70 à 3.78 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 6.72 (d, 1H, NH-Boc), 6.79 (d, 2H, CH aromatiques ortho à OMe), 7.12 (d, 2H, CH aromatiques méta à OMe), 7.10 à 7.23 (m, 15H, Trt), 8.50 (s, 1H, NH-Trt)
MS (El) 153, 243, 559, 669.
Il-B) (2 RS. 3R). 2-paraméthoxy benzvl-thio. 3-(Boc-amino), 5-(Trityl carbamovl)-oentanoate de méthyle
II est obtenu par le même protocole à partir du composé (IB) (Synthon 2).
II est obtenu par le même protocole à partir du composé (IB) (Synthon 2).
111-A) Acide (2RS. 3S), 2-paraméthoxvbenzvl-thio, 3-Boc-amino, 5-trityl- carbamoyl pentanoïque
A partir de 334 mg (0,5 mmol) de (2RS, 3S), 2-(synthon 1) Bx paraméthoxybenzylsulfanyll 3-Boc-amino, 5-trityl-carbamoyl-pentanoate de méthyle, on obtient en suivant les conditions opératoires de l'exemple (Synthon 1) Bx, avec un rendement de 97%, 317 mg d'acide (2RS, 3S), 2paraméthoxybenzylthio, 3-Boc-amino, 5-trityl-carbamoyl pentanoïque dont les caractéristiques sont les suivantes:
Rf (MeOH:CH2CI2 10:90) = 0,4 1H RMN (d6-DMSO) 6 1.30(1.39) (s, 9H, tBu), 1.55 à 1.66 (m, 1H, ssCH2(Gln)), 1.80 à 1.93 (m, 1H, ssCH2(Gln)), 2.13 à 2.26 (m, 2H, vCH2(Gln)), 3.12 (3.18) (d, 1H, CH-S), 3.68 (s, 5H, CH2-C6Hs-OCH3), 3.70 à 3.80 (m, 1H, oCH(Gln)), 6.62(6.70) (d, 1 H, BocNH), 6.80 (d, 2H, CH arom ortho à OMe), 7.12 (d, 2H, CH arom méta à OMe), 7.10 à 7.25 (m, 15 H, Trt), 8.48 (8.52) (s, 1H, NHTrt)
III-B) Acide (2RS, 3R), 2-paraméthoxybenzyl-thio, 3-Boc-amino, 5-tritylcarbamoyl pentanoïque
Le composé analogue de configuration (2RS, 3R) est obtenu par le même protocole à partir du composé décrit en (IIB) (Synthon 2).
A partir de 334 mg (0,5 mmol) de (2RS, 3S), 2-(synthon 1) Bx paraméthoxybenzylsulfanyll 3-Boc-amino, 5-trityl-carbamoyl-pentanoate de méthyle, on obtient en suivant les conditions opératoires de l'exemple (Synthon 1) Bx, avec un rendement de 97%, 317 mg d'acide (2RS, 3S), 2paraméthoxybenzylthio, 3-Boc-amino, 5-trityl-carbamoyl pentanoïque dont les caractéristiques sont les suivantes:
Rf (MeOH:CH2CI2 10:90) = 0,4 1H RMN (d6-DMSO) 6 1.30(1.39) (s, 9H, tBu), 1.55 à 1.66 (m, 1H, ssCH2(Gln)), 1.80 à 1.93 (m, 1H, ssCH2(Gln)), 2.13 à 2.26 (m, 2H, vCH2(Gln)), 3.12 (3.18) (d, 1H, CH-S), 3.68 (s, 5H, CH2-C6Hs-OCH3), 3.70 à 3.80 (m, 1H, oCH(Gln)), 6.62(6.70) (d, 1 H, BocNH), 6.80 (d, 2H, CH arom ortho à OMe), 7.12 (d, 2H, CH arom méta à OMe), 7.10 à 7.25 (m, 15 H, Trt), 8.48 (8.52) (s, 1H, NHTrt)
III-B) Acide (2RS, 3R), 2-paraméthoxybenzyl-thio, 3-Boc-amino, 5-tritylcarbamoyl pentanoïque
Le composé analogue de configuration (2RS, 3R) est obtenu par le même protocole à partir du composé décrit en (IIB) (Synthon 2).
BIII) VOIE DE SYNTHESE DU SYNTHON 3:
Acide 2-(paraméthoxybenzyl-thio)-, 3-(N-t-butoxycarbonyl-amino)-, 3 (3-(N-tertiobutylaminosulfonyl)phényl) propanoïque.
Acide 2-(paraméthoxybenzyl-thio)-, 3-(N-t-butoxycarbonyl-amino)-, 3 (3-(N-tertiobutylaminosulfonyl)phényl) propanoïque.
Ce synthon est utilisé dans l'exemple 6.
I-) Acide 3-(N-tertiobutvlaminosulfonvl) benzoïque
A une solution de 12,5 g (56,6 mmol) de l'acide 3chlorosulfonyl benzoïque dans 200 ml de CH2Cl2, refroidi à 0 C est ajoutée rapidement une solution de 21 ml (198 mmol) de tBuNH2 dans 50 ml de CH2CI2. Après 30 minutes d'agitation, on filtre le chlorhydrate de tBuNH2. On rince avec un peu de CH2CI2 puis on évapore à sec. On obtient, avec un rendement de 95%, 13,83 g d'acide 3-(Ntertiobutylaminosulfonyl) benzoïque dont les caractéristiques sont les suivantes:
Rf (AcOH/Toluene, 3/7) = 0,45 1H RMN (d6-DMSO) # 1.05 (s, 9H, tBu), 7,65 (s, 1H, SO2NH) 7,65(t, 1H aromatique), 8,00 (d, 1 H, aromatique), 8,08 (d, 1H, aromatique), 8,33 (s, 1 H, aromatique).
A une solution de 12,5 g (56,6 mmol) de l'acide 3chlorosulfonyl benzoïque dans 200 ml de CH2Cl2, refroidi à 0 C est ajoutée rapidement une solution de 21 ml (198 mmol) de tBuNH2 dans 50 ml de CH2CI2. Après 30 minutes d'agitation, on filtre le chlorhydrate de tBuNH2. On rince avec un peu de CH2CI2 puis on évapore à sec. On obtient, avec un rendement de 95%, 13,83 g d'acide 3-(Ntertiobutylaminosulfonyl) benzoïque dont les caractéristiques sont les suivantes:
Rf (AcOH/Toluene, 3/7) = 0,45 1H RMN (d6-DMSO) # 1.05 (s, 9H, tBu), 7,65 (s, 1H, SO2NH) 7,65(t, 1H aromatique), 8,00 (d, 1 H, aromatique), 8,08 (d, 1H, aromatique), 8,33 (s, 1 H, aromatique).
Il-) 3-(N-tertiobutylaminosulfonvl) phenvl methanol
A une solution de 12,94 g (50,3 mmol) d'acide 3-(Ntertiobutylaminosulfonyl) benzoïque dans 100 ml de 1,2-diméthoxyéthane (DME) sont ajoutés successivement à -15 C 6,6 ml (60,3 mmol) de Nméthyl morpholine et 7,8 ml (60,3 mmol) de chloroformiate d'isobutyle.
A une solution de 12,94 g (50,3 mmol) d'acide 3-(Ntertiobutylaminosulfonyl) benzoïque dans 100 ml de 1,2-diméthoxyéthane (DME) sont ajoutés successivement à -15 C 6,6 ml (60,3 mmol) de Nméthyl morpholine et 7,8 ml (60,3 mmol) de chloroformiate d'isobutyle.
Après 5 minutes, le précipité de chlorhydrate de N-méthyl morpholine est filtré et lavé avec du DME. Au filtrat recueilli dans un grand ballon, est ajoutée à -15 C une solution de 5g (130 mmol) de NaBH4 dans 10 ml d'eau. Après 30 minutes de réaction, 100 ml d'eau sont ajoutés et le DME évaporé sous. pression réduite. La phase aqueuse est alors extraite par 2x100 ml d'acétate d'éthyle. La phase organique est alors lavée par NaCI saturé avant d'être séchée sur Na2SO4. On obtient, avec un rendement de 90 %, 10,9 g de 3-(N-tertiobutylaminosulfonyl) phenyl méthanol dont les caractéristiques sont les suivantes: 1H RMN (d6-DMSO) 6 1.04 (s, 9H, tBu), 4,52 ( d, 2H, CH2OH), 5,36(t, 1H, CH20H) , 7,45 (s, 1H, SO2NH), 7,46(d, 2H, aromatique), 7,64 (dd, 1H, aromatique), 7,77 (s, 1H, aromatique).
Rf (AcOH/Toluène, 3/7) = 0,24
III)- 3-(N-tertiobutylaminosulfonyl) benzaldehyde
A une solution de 4,7 ml (53,7 mmol) de chlorure d'oxalyl (fraîchement distillé) dans 100 ml de dichlorométhane, est ajouté goutte à goutte, à -78 C, sous azote, une solution de 9,5 ml (134 mmol) de DMSO dans 20 ml de dichlorométhane. Une solution de 10,9 g (44,8 mmol) de 3 (N-tertiobutylaminosulfonyl) phényl méthanol dans 4ml de DMSO puis 30 ml de CH2CI2 est coulé goutte à goutte. L'agitation est maintenue pendant 30 minutes, puis on ajoute 31,2 ml (224 mmol) de triéthylamine.
III)- 3-(N-tertiobutylaminosulfonyl) benzaldehyde
A une solution de 4,7 ml (53,7 mmol) de chlorure d'oxalyl (fraîchement distillé) dans 100 ml de dichlorométhane, est ajouté goutte à goutte, à -78 C, sous azote, une solution de 9,5 ml (134 mmol) de DMSO dans 20 ml de dichlorométhane. Une solution de 10,9 g (44,8 mmol) de 3 (N-tertiobutylaminosulfonyl) phényl méthanol dans 4ml de DMSO puis 30 ml de CH2CI2 est coulé goutte à goutte. L'agitation est maintenue pendant 30 minutes, puis on ajoute 31,2 ml (224 mmol) de triéthylamine.
Le mélange réactionnel est agité pendant 5 minutes supplémentaires à 45 C puis on laisse revenir le bain à température ambiante.
Après 1 h d'agitation, on ajoute de l'eau et la phase aqueuse est extraite au dichlorométhane. Les phases organiques sont combinées, lavées avec KHSO4(1N), NaHCO3(10%), NaCI saturée, séchées sur
Na2S04.
Na2S04.
Après concentration sous pression réduite, on obtient avec un rendement de 96%, 10,45 g de 3-(N-tertiobutylaminosulfonyl) benzaldehyde dont les caractéristiques sont les suivantes
Rf (AcOEt/cyclohexane, 1/2) = 0,32 1H RMN (DMSO) 6 1.05 (s, 9H, tBu), 7,70 (s, 1H, SO2NH), 7,78(t, 1H, aromatique), 8,10 (d, 2H, aromatiques), 8,29 (s, 1H, aromatique), 10,05 (s, 1H, CHO).
Rf (AcOEt/cyclohexane, 1/2) = 0,32 1H RMN (DMSO) 6 1.05 (s, 9H, tBu), 7,70 (s, 1H, SO2NH), 7,78(t, 1H, aromatique), 8,10 (d, 2H, aromatiques), 8,29 (s, 1H, aromatique), 10,05 (s, 1H, CHO).
IV-) 3-(3-( N-tertiobutvlaminosulfonvl) Phenyl) popenoate d'éthyle
20,4 ml(102 mmol) de triéthyl phosphonoacetate sont coulés goutte à goutte à une suspension d'hydrure de sodium ( 39, 104 mmol) dans le DME (200 ml). Après 30 minutes d'agitation à 45 C, 16,8 g (69,6 mmol) de 3-(N-tertiobutylaminosulfonyl) benzaldehyde sont ajoutés rapidement et le mélange agité pendant 45 minutes à 50 C On ajoute alors 250 ml de mélange eau-glace et on extrait par 250 ml d'acétate d'éthyle. La phase organique est lavée par NaCI saturé avant d'être séchée sur Na2SO4. Après concentration sous pression réduite, on obtient avec un rendement de 95 %, 20,56 g de 3-(3-(Ntertiobutylaminosulfonyl) phenyl) propenoate d'éthyle dont les caractéristiques sont les suivantes:
Rf (AcOEt/cyclohexane, 4/6) = 0,40 1H RMN (DMSO) 6 1.05 (s, 9H, tBu), 1,20 (t,3H, CH3-CH2), 4,15 (q,2H, CH3-CH2), 6,65(d, 1 H, CH#), 7,50 (s, 1H, SO2NH), 7,58 (t, 1H, aromatique) 7,68(d, 1H, CH-COOEt),7,82 (d, 1H, aromatique) 7,91 (d, 1H, aromatique), 8,10 (s, 1H, aromatique).
20,4 ml(102 mmol) de triéthyl phosphonoacetate sont coulés goutte à goutte à une suspension d'hydrure de sodium ( 39, 104 mmol) dans le DME (200 ml). Après 30 minutes d'agitation à 45 C, 16,8 g (69,6 mmol) de 3-(N-tertiobutylaminosulfonyl) benzaldehyde sont ajoutés rapidement et le mélange agité pendant 45 minutes à 50 C On ajoute alors 250 ml de mélange eau-glace et on extrait par 250 ml d'acétate d'éthyle. La phase organique est lavée par NaCI saturé avant d'être séchée sur Na2SO4. Après concentration sous pression réduite, on obtient avec un rendement de 95 %, 20,56 g de 3-(3-(Ntertiobutylaminosulfonyl) phenyl) propenoate d'éthyle dont les caractéristiques sont les suivantes:
Rf (AcOEt/cyclohexane, 4/6) = 0,40 1H RMN (DMSO) 6 1.05 (s, 9H, tBu), 1,20 (t,3H, CH3-CH2), 4,15 (q,2H, CH3-CH2), 6,65(d, 1 H, CH#), 7,50 (s, 1H, SO2NH), 7,58 (t, 1H, aromatique) 7,68(d, 1H, CH-COOEt),7,82 (d, 1H, aromatique) 7,91 (d, 1H, aromatique), 8,10 (s, 1H, aromatique).
V-A) (3R) 3-(3-(N-tertiobutylaminosulfonyl) phényl 3-((S)-N-benzyl-1 phényléthylamino) prnpanoate d'éthvle
A une solution de 4g(18,9 mmol) de (S) (-) N-benzyl-1phényléthylamine(préparé selon la procédure décrite par Juaristi , Murer et Seebach(1993) Synthesis, p 1243-1246) dans 70 ml de THF anhydre sont ajoutés à 0 C 11,8 ml (18,9 ml) de nBuLi (1,6 M dans l'hexane). Le mélange réactionnel est agité 15 minutes puis refroidi à -78 C. 2,36 g
(7,56 mmol) dans 30 ml de THF sont ajoutés goutte à goutte au mélange
réactionnel qui est agité 30 minutes supplémentaires avant d'ajouter 30 ml
d'une solution aqueuse de KHSO4 (1M). Après évaporation du THF, la
phase aqueuse est extraite avec de l'acétate d'éthyle. La phase organique
est lavée par KHSO4(1N), NaHCO3 saturé, NaCI saturé, séchée sur
Na2SO4 puis évaporée sous pression réduite.
A une solution de 4g(18,9 mmol) de (S) (-) N-benzyl-1phényléthylamine(préparé selon la procédure décrite par Juaristi , Murer et Seebach(1993) Synthesis, p 1243-1246) dans 70 ml de THF anhydre sont ajoutés à 0 C 11,8 ml (18,9 ml) de nBuLi (1,6 M dans l'hexane). Le mélange réactionnel est agité 15 minutes puis refroidi à -78 C. 2,36 g
(7,56 mmol) dans 30 ml de THF sont ajoutés goutte à goutte au mélange
réactionnel qui est agité 30 minutes supplémentaires avant d'ajouter 30 ml
d'une solution aqueuse de KHSO4 (1M). Après évaporation du THF, la
phase aqueuse est extraite avec de l'acétate d'éthyle. La phase organique
est lavée par KHSO4(1N), NaHCO3 saturé, NaCI saturé, séchée sur
Na2SO4 puis évaporée sous pression réduite.
Après purification sur colonne de silice
(AcOEt/CH2C12/cyclohexane 1,5/1,517), on obtient avec un rendement de
87%, 3,28 g de (3R) 3-(3-(N-tertiobutylaminosulfonyl) phényl) 3-((S)-N
benzyl-1 -phényléthylamino) propanoate d'éthyle dont les caractéristiques
sont les suivantes. L'excès énantiomérique est supérieur à 95 % comme
en témoigne l'analyse HPLC et la RMN.
(AcOEt/CH2C12/cyclohexane 1,5/1,517), on obtient avec un rendement de
87%, 3,28 g de (3R) 3-(3-(N-tertiobutylaminosulfonyl) phényl) 3-((S)-N
benzyl-1 -phényléthylamino) propanoate d'éthyle dont les caractéristiques
sont les suivantes. L'excès énantiomérique est supérieur à 95 % comme
en témoigne l'analyse HPLC et la RMN.
Rf (AcOEt/cyclohexane, 3/7) = 0,41
1H RMN (CDCl3) # 1,02 (t,3H, CH2CH3), 1.13 (s, 9H, tBu), 1,20 (t,3H, CH
CH3), 2,57 (M, 2H, CH2-COOEt), 3,64 (d, 2H, CH2#), 3,84 à 3,95 (m, 3H, CH3-CH9 et CH3-CH), 4,47 (q, 1 H, CH-CH2-COOEt) 4,51 (s, 1H,
SO2NH), 7,11 à 7,35 (m, 2#, 10H), 7,39 (dd, 1H, aromatique) ,7,51 (d, 1H, aromatique) 7,71 (d, 1 H, aromatique), 7,90 (s, 1 H, aromatique).
1H RMN (CDCl3) # 1,02 (t,3H, CH2CH3), 1.13 (s, 9H, tBu), 1,20 (t,3H, CH
CH3), 2,57 (M, 2H, CH2-COOEt), 3,64 (d, 2H, CH2#), 3,84 à 3,95 (m, 3H, CH3-CH9 et CH3-CH), 4,47 (q, 1 H, CH-CH2-COOEt) 4,51 (s, 1H,
SO2NH), 7,11 à 7,35 (m, 2#, 10H), 7,39 (dd, 1H, aromatique) ,7,51 (d, 1H, aromatique) 7,71 (d, 1 H, aromatique), 7,90 (s, 1 H, aromatique).
V-B) 3-(3-(N-tertiobutylaminosulfonyl) phényl) 3-((S)-N-benzvl-1 - phénvléthvlamino) sroPanoate d'éthvle
Le composé analogue de configuration (3S) est obtenu par le même protocole en utilisant la (R) (-) N-benzyl-1-phényléthylamino) propanoate d'éthyle.
Le composé analogue de configuration (3S) est obtenu par le même protocole en utilisant la (R) (-) N-benzyl-1-phényléthylamino) propanoate d'éthyle.
Vl-A) (3R) 3-( N-t-butoxvcarbonvl-amino)-, 3-(3-(N-tertiobutylaminosulfonyl) phénvl) propanoate d'éthvle
3,28 g (6,28 mmol) de (3R) 3-(3-(N-tertiobutylaminosulfonyl) phenyl) 3-((S)-N-benzyl phényléthylamino) propanoate d'éthyle et 4,8 g (22 mmol) de Boc2O sont solubilisés dans 60 ml d'acétate d'éthyle contenant 4,4 g Pd(OH)2 /C (20%). La solution est vigoureusement agitée en présence de 20 bars d'hydrogène à 25 C pendant 18 heures. Après élimination du catalyseur par filtration sur célite, le filtrat est évaporé sous pression réduite et purifié sur colonne de silice (AcOEt/cyclohexane, 1/3) pour obtenir avec un rendement de 85% 2,28g de (3R) 3-(N-tbutoxycarbonyl-amino)-, 3-(3-(N-tertiobutylaminosulfonyl)phényl) propanoate d'éthyle dont les caractéristiques sont les suivantes.
3,28 g (6,28 mmol) de (3R) 3-(3-(N-tertiobutylaminosulfonyl) phenyl) 3-((S)-N-benzyl phényléthylamino) propanoate d'éthyle et 4,8 g (22 mmol) de Boc2O sont solubilisés dans 60 ml d'acétate d'éthyle contenant 4,4 g Pd(OH)2 /C (20%). La solution est vigoureusement agitée en présence de 20 bars d'hydrogène à 25 C pendant 18 heures. Après élimination du catalyseur par filtration sur célite, le filtrat est évaporé sous pression réduite et purifié sur colonne de silice (AcOEt/cyclohexane, 1/3) pour obtenir avec un rendement de 85% 2,28g de (3R) 3-(N-tbutoxycarbonyl-amino)-, 3-(3-(N-tertiobutylaminosulfonyl)phényl) propanoate d'éthyle dont les caractéristiques sont les suivantes.
Rf (AcOEt/cyclohexane, 3/7) = 0,21 1H RMN (CDCl3) # 1,13 (t,3H, CH2CH3), 1.15 (s, 9H, tBu-NH-SO2 -), 1.35 (s, 9H, Boc), 2,76 (d, 2H, CH2-COOEt), 3,99 (q, 2H, CH3-CH2), 4,60 (s, 1H, SO2NH), 5,08 (m, 1H, CH-CH2-COOEt), 5,58 (d, 1H, NH-Boc), 7,38 (dd, 1H, aromatique) ,7,40 (d, 1H, aromatique) 7,72 (d, 1H, aromatique), 7,77 (s, 1H, aromatique).
Vl-B) (3S). 3-( N-t-butoxvcarbonvl-amino)-. 3-(3-(Ntertiobutylaminosulfonyl) phényl) propanoate d'éthyle
Le composé analogue de configuration (3S) est obtenu par le même protocole à partir du composé décrit en (V-B) (Synthon 3).
Le composé analogue de configuration (3S) est obtenu par le même protocole à partir du composé décrit en (V-B) (Synthon 3).
VII-A) (2S,3S) 2-(paraméthoxybenzyl-thio)- 3-( N-t-butoxvcarbonvl-amino- 3-(3-(N-tertiobutylaminosulfonyl)phényl) propanoate d'éthyle
Sous azote, 0,5 g (1,17 mmol) d'ester (3R) 3-(N-tbutoxycarbonyl-ami no)-, 3-(3-( N-tertiobutylaminosulfonyl )phényl ) propanoate d'éthyle est dissous dans 10 ml de THF. A -78 C, 1,9 ml de
LDA (2M/ heptane/THF/ethylbenzene; 3,8 mmol) sont ajoutés goutte à goutte. Après 30 minutes, on ajoute à -78 C 0,5 g (1,4 mmol) de disulfure de paraméthoxybenzyle et 2,4 dinitrophenyle (préparé selon Bischoff et al., (1997) J.Org.Chem., 62(14), p 48484850), et la solution est agitée pendant 2 heures à -78 C, On ajoute KHSO4 (1 N), on extrait avec AcOEt; les phases organiques sont lavées par KHSO4(1N), NaCI saturée, séchées sur Na2SO4 puis évaporées sous pression réduite.
Sous azote, 0,5 g (1,17 mmol) d'ester (3R) 3-(N-tbutoxycarbonyl-ami no)-, 3-(3-( N-tertiobutylaminosulfonyl )phényl ) propanoate d'éthyle est dissous dans 10 ml de THF. A -78 C, 1,9 ml de
LDA (2M/ heptane/THF/ethylbenzene; 3,8 mmol) sont ajoutés goutte à goutte. Après 30 minutes, on ajoute à -78 C 0,5 g (1,4 mmol) de disulfure de paraméthoxybenzyle et 2,4 dinitrophenyle (préparé selon Bischoff et al., (1997) J.Org.Chem., 62(14), p 48484850), et la solution est agitée pendant 2 heures à -78 C, On ajoute KHSO4 (1 N), on extrait avec AcOEt; les phases organiques sont lavées par KHSO4(1N), NaCI saturée, séchées sur Na2SO4 puis évaporées sous pression réduite.
Après purification sur colonne de silice (AcEt/cyclohexane 1/3), on obtient avec un rendement de 49%, 331 mg de (2S,3S) 2 (paraméthoxybenzyl-thio)-, 3-( N-t-butoxycarbonyl-amino)-, 3-(3-(Ntertiobutylaminosulfonyl)phényl) propanoate d'éthyle dont les caractéristiques sont les suivantes. L'excès énantiomérique est supérieur à 95 % comme en témoigne l'analyse HPLC et la RMN.
Rf (AcOEt/cyclohexane, 3/7) = 0,31 1H RMN (CDCl3) # 1,08 (t,3H, CH2CH3), 1.12 (s, 9H, tBU-NH-SO2 -), 1.36 (s, 9H, Boc), 3,40 (d, 1 H, CH-COOEt), 3,75(s, 3H et 2H, OMe et #-CH2-S) 3,96 (q, 2H, CH3-CH2), 4,51 (s, 1H, SO2NH), 5,00 (m, 1H, BocNH-CH), 6,11 (d, 1H, NH-Boc), 6,82(d, 2H, #-OMe), 7,22(d, 2H, #-OMe),7,25 (d, 1H, aromatique), 7,30 (t, 1H, aromatique) , 7,50 (s, 1H, aromatique), 7,68 (d, 1H, aromatique).
VII-B) (2R. 3R), 2-(paraméthoxvbenzvl-thio)-. 3-(N-t-butoxvcarbonvlamino)-, 3-(3-(N-tertiobutylaminosulfonyl)phényl) propanoate d'éthyle
Le composé analogue de configuration (2R, 3R) est obtenu par le même protocole à partir du composé décrit en (VI-B) (Synthon 3).
Le composé analogue de configuration (2R, 3R) est obtenu par le même protocole à partir du composé décrit en (VI-B) (Synthon 3).
VIII-A) acide (2SR. 3S). 2-(paraméthoxybenzyl-thio)- 3-(N-t-butoxvcarbonylamino)-, 3-(3-(N-tertiobutylaminosulfonyl)phényl) propanoïque
A 0,33 g (0,57 mmole) de (2S,3S) 2-(paraméthoxybenzylthio)-, 3-(N-t-butoxycarbonyl-amino)-, 3-(3-(Ntertiobutylaminosulfonyl)phényl) propanoate d'éthyle dans 2,5 ml d'éthanol, on ajoute 2,5 ml de NaOH (2N). En suivant les conditions opératoires décrites dans l'exemple (Synthon 1) BlV, on obtient avec un rendement de 98%, 310 mg d'acide (2SR,3S), 2-(paraméthoxybenzylthio)-, 3-( N-t-butoxycarbonyl-amino)-, 3-(3-(N-tertiobutylamino sulfonyl)phényl) propanoïque dont les caractéristiques sont les suivantes:
Rf (CH2Cl2/MeOH/AcOOH, 96/3/1) = 0,16 1H RMN (CDCI3) (deux diastéréoisomères A et B) â 1,11 (A) et 1.12 (B) (s, 9H, tBu-NH-SO2 -), 1,30 (A) et 1,35 (B) (s, 9H, Boc), 3,40 (A) et 3,45 (B) (d, 1H, CH-COOEt), 3,72 et 3,75 (A+B) (s, 3H et 2H, OMe et #-CH2-
S), 3,65 (s, 1 H, SO2NH), 5,05 (A) et 5,32 (B) (m, 1 H, BocNH-CH), 5,37 (A) et 6,20 (B) (d, 1H, NH-Boc), 6,75 (A) et 6,80 (B) (d, 2H, #-OMe), 7,12 (A) et 7,20 (B) (d, 2H, #-OMe),7,30 (A+B) (d, 1H, aromatique), 7,40 (A+B) (t, 1H, aromatique) , 7,81 (B) et 7,70 (A) (s, s, 1H, aromatique), 7,68 (A) et 7,75 (B) (d, 1 H, aromatique).
A 0,33 g (0,57 mmole) de (2S,3S) 2-(paraméthoxybenzylthio)-, 3-(N-t-butoxycarbonyl-amino)-, 3-(3-(Ntertiobutylaminosulfonyl)phényl) propanoate d'éthyle dans 2,5 ml d'éthanol, on ajoute 2,5 ml de NaOH (2N). En suivant les conditions opératoires décrites dans l'exemple (Synthon 1) BlV, on obtient avec un rendement de 98%, 310 mg d'acide (2SR,3S), 2-(paraméthoxybenzylthio)-, 3-( N-t-butoxycarbonyl-amino)-, 3-(3-(N-tertiobutylamino sulfonyl)phényl) propanoïque dont les caractéristiques sont les suivantes:
Rf (CH2Cl2/MeOH/AcOOH, 96/3/1) = 0,16 1H RMN (CDCI3) (deux diastéréoisomères A et B) â 1,11 (A) et 1.12 (B) (s, 9H, tBu-NH-SO2 -), 1,30 (A) et 1,35 (B) (s, 9H, Boc), 3,40 (A) et 3,45 (B) (d, 1H, CH-COOEt), 3,72 et 3,75 (A+B) (s, 3H et 2H, OMe et #-CH2-
S), 3,65 (s, 1 H, SO2NH), 5,05 (A) et 5,32 (B) (m, 1 H, BocNH-CH), 5,37 (A) et 6,20 (B) (d, 1H, NH-Boc), 6,75 (A) et 6,80 (B) (d, 2H, #-OMe), 7,12 (A) et 7,20 (B) (d, 2H, #-OMe),7,30 (A+B) (d, 1H, aromatique), 7,40 (A+B) (t, 1H, aromatique) , 7,81 (B) et 7,70 (A) (s, s, 1H, aromatique), 7,68 (A) et 7,75 (B) (d, 1 H, aromatique).
VIII-B) (2SR, 3R). 2-(Daraméthoxvbenzvl-thio)-. 3-(N-t-butoxy-
carbonylamino)-, 3-(3-(N-tertiobutylaminosulfonyl)phényl) propanoïque.
carbonylamino)-, 3-(3-(N-tertiobutylaminosulfonyl)phényl) propanoïque.
Le composé de configuration (2SR, 3R) est obtenu par le
même protocole à partir du composé décrit en VII-B (Synthon 3).
même protocole à partir du composé décrit en VII-B (Synthon 3).
EXEMPLE N 1
N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentanoyl)- L-Valyl)- L
Isoleucine
I-) H-Val-lle-HMP-résine
La synthèse du dipeptidyl-résine H-Val-lle-HMP-résine est réalisée en utilisant la procédure A sur 150 mg (0,15 mmol) de HMPrésine avec A2 = Fmoc-lle-OH et A1 = Fmoc-Val-OH.
N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentanoyl)- L-Valyl)- L
Isoleucine
I-) H-Val-lle-HMP-résine
La synthèse du dipeptidyl-résine H-Val-lle-HMP-résine est réalisée en utilisant la procédure A sur 150 mg (0,15 mmol) de HMPrésine avec A2 = Fmoc-lle-OH et A1 = Fmoc-Val-OH.
Il-A) (2RS.3S). N-(N-(2-mercaPto. 3-amino. 5-sulfamovl pentanovl)- L
Valvl)- L-lsoleucine
A 135 mg (250 ssmol) d'acide (2RS, 3S), 2 (paraméthoxybenzyl-thio), 3-( N-benzyloxycarbonyl-amino), 5-(Ntertiobutylaminosulfonyl) pentanoïque (Synthon 1A), 122 mg (320 zmol) de
HATU (O-(7-azabenzotriazoî-1 -yl)1, 1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate), 150 simol de H-Val-lle-HMPrésine dans 5 ml de dichlorométhane est ajoutée, sous agitation à température ambiante, 200 l de diisopropyléthylamine. La fin de la réaction est suivie par le test de
Kaiser. Après 6 heures de réaction à cette température, la résine est lavée alternativement avec NMP (N-méthyl-pyrrolidone) et dichlorométhane.
Valvl)- L-lsoleucine
A 135 mg (250 ssmol) d'acide (2RS, 3S), 2 (paraméthoxybenzyl-thio), 3-( N-benzyloxycarbonyl-amino), 5-(Ntertiobutylaminosulfonyl) pentanoïque (Synthon 1A), 122 mg (320 zmol) de
HATU (O-(7-azabenzotriazoî-1 -yl)1, 1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate), 150 simol de H-Val-lle-HMPrésine dans 5 ml de dichlorométhane est ajoutée, sous agitation à température ambiante, 200 l de diisopropyléthylamine. La fin de la réaction est suivie par le test de
Kaiser. Après 6 heures de réaction à cette température, la résine est lavée alternativement avec NMP (N-méthyl-pyrrolidone) et dichlorométhane.
On effectue une déprotection TFA avec le mélange TFA eau: triisopropylsilane 40: 2:1 pendant 3 heures à température ambiante.
Le mélange réactionnel est évaporé sous pression réduite, repris avec de l'eau puis lyophilisé.
On effectue des lors une déprotection HF à 0 C avec le mélange HF: métacrésol 10:0,2 pendant 1 heure. Après distillation du HF, le résidu est repris avec un peu de TFA puis précipité avec un mélange froid éther diéthylique n-hexane 50:50. Le produit est ensuite lyophilisé.
On obtient 100 mg de brut.
Le produit est purifié sur une colonne semi-préparative
(Vydac C18 ref 218TP510, 20x250 mm). Les deux diastéréoiomères sont
ainsi séparés.
(Vydac C18 ref 218TP510, 20x250 mm). Les deux diastéréoiomères sont
ainsi séparés.
HPLC (gradient 20% de B à 60% de B en 15 min; colonne Macherey
Nagel C18): 2 pics 8.9 et 9.4
SM (ES): (M+H)+ m/z = 441,1
1H-RMN (D20) â 0.90 (t, 3H, ôCH3(lle)), 0.92 à 1.10 (m, 9H, γCH3(Ile)// yCH3(Val)/ yCH3(Val)), 1.20 à 1.30 (m, 1H, yCH2(11e)), 1.42 à 1.53 (m, 1 H, yCH2(lle)), 1.88 à 1.96 (m, 1H, ssCH(Ile), 2.06 à 2.14 (m, 1H, ssCH(Val)) 2.22 à 2.32 (m, 2H, CH-CH2-CH2), 3.39 (m, 2H, CH-CH2-CH2), 3.82 (d, 1H, CH-SH), 3.88 (d, 1H, CH-CH2-CH2), 4.16 (m, 1H, aCH(Val), 4.27 (d,
1H, αCH(Ile)).
Nagel C18): 2 pics 8.9 et 9.4
SM (ES): (M+H)+ m/z = 441,1
1H-RMN (D20) â 0.90 (t, 3H, ôCH3(lle)), 0.92 à 1.10 (m, 9H, γCH3(Ile)// yCH3(Val)/ yCH3(Val)), 1.20 à 1.30 (m, 1H, yCH2(11e)), 1.42 à 1.53 (m, 1 H, yCH2(lle)), 1.88 à 1.96 (m, 1H, ssCH(Ile), 2.06 à 2.14 (m, 1H, ssCH(Val)) 2.22 à 2.32 (m, 2H, CH-CH2-CH2), 3.39 (m, 2H, CH-CH2-CH2), 3.82 (d, 1H, CH-SH), 3.88 (d, 1H, CH-CH2-CH2), 4.16 (m, 1H, aCH(Val), 4.27 (d,
1H, αCH(Ile)).
II-B) (2RS,3R) N-N(2-mercapto, 3-amino. 5-sulfamoyl pentanoyl)- L
Valvi)- L-lsoieucine
Les deux autres diastéréoisomères sont obtenus par le même protocole à partir du synthon 1 de configuration (2RS, 3R).
Valvi)- L-lsoieucine
Les deux autres diastéréoisomères sont obtenus par le même protocole à partir du synthon 1 de configuration (2RS, 3R).
EXEMPLE N 2
N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentanoyî) - L-Valyl)- L
Isoleucyl- Benzylamide
I-) H-Val-lle-NHBz
Le composé H-Val-lle-NHBz est obtenu en phase liquide par condensation et déprotection successives du Boc-lle-OH et du Boc-Val
OH sur la benzylamine. Ce composé présente les caractéristiques suivantes: 1H RMN (d6-DMSO) 6 0.80 (t, 3H, #CH3(Ile)), 0.82 (d, 3H, yCH3(Val)), 0.84 (d, 3H, γCH3(Ile)), 0.86 (d, 3H, yCH3(Val)), 0.99 à 1.11 (m, 1H, #CH2(Ile)), 1.40 à 1.52 (m, 1H, yCH2(lle)), 1.60 à 1.65 (m, 1H, ssCH(Ile)), 1.93 à 2.08 (m, 1H, ssCH(Val)), 3.65 (dd, 1H, aCH(lle)), 4.11 à 4.20 (m, 2H,
CH2-C6H5), 4.31 (dd, 1H, aCH(Val)), 7.20 (m, 5H, aromatiques), 8.03 (s, 3H NH3+), 8.38 (d, 1H, NH(lle)), 8.60 (t, 1H, NH-CH2-C6H5)
Il-A) (2RS 3S). N-(N-(2-mercapto, 3-amino. 5-sulfamovl pentanovl)
Valyl)- L-lsoleucvl- Benzvlamide
A 269 mg (500 KLmol) d'acide (2RS, 3S), 2 (paraméthoxybenzyl-thio), 3-( N-benzyloxycarbonyl-am i no), 5-( Ntertiobutylaminosulfonyl) pentanoïque (dont la synthèse est détaillée dans la procédure 2), 380 mg (1 mmol) de HATU (O-(7-azabenzotriazol-1- yl)1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate), 192 mg (600 umol) de H-Val-lle-NHBz dans 5 ml de dichlorométhane est ajouté, sous agitation à température ambiante, 305 u1 de diisopropyléthylamine.
N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentanoyî) - L-Valyl)- L
Isoleucyl- Benzylamide
I-) H-Val-lle-NHBz
Le composé H-Val-lle-NHBz est obtenu en phase liquide par condensation et déprotection successives du Boc-lle-OH et du Boc-Val
OH sur la benzylamine. Ce composé présente les caractéristiques suivantes: 1H RMN (d6-DMSO) 6 0.80 (t, 3H, #CH3(Ile)), 0.82 (d, 3H, yCH3(Val)), 0.84 (d, 3H, γCH3(Ile)), 0.86 (d, 3H, yCH3(Val)), 0.99 à 1.11 (m, 1H, #CH2(Ile)), 1.40 à 1.52 (m, 1H, yCH2(lle)), 1.60 à 1.65 (m, 1H, ssCH(Ile)), 1.93 à 2.08 (m, 1H, ssCH(Val)), 3.65 (dd, 1H, aCH(lle)), 4.11 à 4.20 (m, 2H,
CH2-C6H5), 4.31 (dd, 1H, aCH(Val)), 7.20 (m, 5H, aromatiques), 8.03 (s, 3H NH3+), 8.38 (d, 1H, NH(lle)), 8.60 (t, 1H, NH-CH2-C6H5)
Il-A) (2RS 3S). N-(N-(2-mercapto, 3-amino. 5-sulfamovl pentanovl)
Valyl)- L-lsoleucvl- Benzvlamide
A 269 mg (500 KLmol) d'acide (2RS, 3S), 2 (paraméthoxybenzyl-thio), 3-( N-benzyloxycarbonyl-am i no), 5-( Ntertiobutylaminosulfonyl) pentanoïque (dont la synthèse est détaillée dans la procédure 2), 380 mg (1 mmol) de HATU (O-(7-azabenzotriazol-1- yl)1,1,3,3-tetramethyluronium hexafluorophosphate), 192 mg (600 umol) de H-Val-lle-NHBz dans 5 ml de dichlorométhane est ajouté, sous agitation à température ambiante, 305 u1 de diisopropyléthylamine.
Après 6 heures de réaction à cette température, on évapore le dichlorométhane sous pression réduite. On reprend le résidu avec de l'AcOEt ; les phases organiques combinées sont lavées avec NaHCO3 (10%), KHSO4 (1N), une solution saturée de NaCI. Après avoir séché sur
Na2SO4 puis évaporée sous pression réduite, on effectue une déprotection TFA avec le mélange TFA : eau . triisopropylsilane 40: 2:1 pendant 3 heures à température ambiante. Le mélange réactionnel est évaporé sous pression réduite, repris avec de l'eau puis lyophilisé.
Na2SO4 puis évaporée sous pression réduite, on effectue une déprotection TFA avec le mélange TFA : eau . triisopropylsilane 40: 2:1 pendant 3 heures à température ambiante. Le mélange réactionnel est évaporé sous pression réduite, repris avec de l'eau puis lyophilisé.
On effectue des lors une déprotection HF à 0 C avec le mélange HF: métacrésol 10:0,2 pendant 1 heure. Après distillation du HF, le résidu est repris avec un peu de TFA puis précipité avec un mélange froid éther diéthylique : n-hexane 50:50.Le produit est ensuite lyophilisé.
On obtient 460 mg de brut.
Le produit est purifié sur une colonne semi-préparative (Vydac C18 ref 218TP510, 20x250 mm). Les deux diastéréoiomères ne sont pas séparés.
HPLC (gradient 40% de B à 80% de B en 15 min; colonne Macherey
Nagel C18): un seul pic à 8.6 min 1H-RMN (d6-DMSO) 6 0.75 à 0.85 (m, 12H, yCH3(lle)/ #CH3(Ile)/ 7CH3(Val)/yCH3(VaI)), 0.96 à 1.07 (m, 1H, yCH2(lîe)), 1.35 à 1.45 (m, 1H, 7CH2(lle)), 1.62 à 1.72 (m, 1H, ssCH(Ile), 1.90 à 2.10 (m, 3H, ssCH(Val)/
CH-CH2-CH2), 2.94 à 3.07 (m, 2H, CH-CH2-CH2), 3.47 et 3.57 (m, 1H,
CH-CH2-CH2), 3.83 et 3.87 (d, 1H, CH-SH), 4.13 (m, 1H, aCH(lle)), 4.17 et 4.24 (m, 2H, CH2-C6H5), 4.28 (m, 1H, aCH(Val), 6.69 et 6.71 (s, 2H,
SO2NH2), 7.15 à 7.25 (m, 5H, CH2-C6H5), 8.02 et 8.09 (d, 1H, NH(lle)), 8.34 et 8.38 (d, 1H, NH(Val)), 8.48 et 8.52 (t, 1 H, NH-CH2-C6H5)
1H-RMN (D20) 6 0.84 à 0.97 (m, 12H, yCH3(11e)/ #Ch3(Ile)/ yCH3(Val)/ yCH3(Val)), 1.16 à 1.23 (m, 1H, yCH2(lle)), 1.47 à 1.56 (m, 1H, yCH2(11e)),
1.82 à 1.88 (m, 1H, ssCH(lle), 2.02 à 2.08 (m, 1H, ssCH(Val)), 2.22 à 2.28 (m, 2H, CH-CH2-CH2), 3.33 à 3.41 (m, 2H, CH-CH2-CH2), 3.78 (m, 1H,
CH-SH), 3.79 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 4.10 (d, 1H, aCH(Val), 4.12 (d, 1H, aCH(lle)), 4.40 (s, 2H, CH-C6H5), 7.29 à 7.41 (m, 5H, CH2-C6H5)
SM (ES): (M+H)+ m/z = 530,2
Il-B)
Les deux autres diastéréoisomères sont obtenus par le même protocole à partir du synthon 1 de configuration (2RS, 3R).
Nagel C18): un seul pic à 8.6 min 1H-RMN (d6-DMSO) 6 0.75 à 0.85 (m, 12H, yCH3(lle)/ #CH3(Ile)/ 7CH3(Val)/yCH3(VaI)), 0.96 à 1.07 (m, 1H, yCH2(lîe)), 1.35 à 1.45 (m, 1H, 7CH2(lle)), 1.62 à 1.72 (m, 1H, ssCH(Ile), 1.90 à 2.10 (m, 3H, ssCH(Val)/
CH-CH2-CH2), 2.94 à 3.07 (m, 2H, CH-CH2-CH2), 3.47 et 3.57 (m, 1H,
CH-CH2-CH2), 3.83 et 3.87 (d, 1H, CH-SH), 4.13 (m, 1H, aCH(lle)), 4.17 et 4.24 (m, 2H, CH2-C6H5), 4.28 (m, 1H, aCH(Val), 6.69 et 6.71 (s, 2H,
SO2NH2), 7.15 à 7.25 (m, 5H, CH2-C6H5), 8.02 et 8.09 (d, 1H, NH(lle)), 8.34 et 8.38 (d, 1H, NH(Val)), 8.48 et 8.52 (t, 1 H, NH-CH2-C6H5)
1H-RMN (D20) 6 0.84 à 0.97 (m, 12H, yCH3(11e)/ #Ch3(Ile)/ yCH3(Val)/ yCH3(Val)), 1.16 à 1.23 (m, 1H, yCH2(lle)), 1.47 à 1.56 (m, 1H, yCH2(11e)),
1.82 à 1.88 (m, 1H, ssCH(lle), 2.02 à 2.08 (m, 1H, ssCH(Val)), 2.22 à 2.28 (m, 2H, CH-CH2-CH2), 3.33 à 3.41 (m, 2H, CH-CH2-CH2), 3.78 (m, 1H,
CH-SH), 3.79 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 4.10 (d, 1H, aCH(Val), 4.12 (d, 1H, aCH(lle)), 4.40 (s, 2H, CH-C6H5), 7.29 à 7.41 (m, 5H, CH2-C6H5)
SM (ES): (M+H)+ m/z = 530,2
Il-B)
Les deux autres diastéréoisomères sont obtenus par le même protocole à partir du synthon 1 de configuration (2RS, 3R).
EXEMPLE N 3
N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentanoyl)- L-Tyrosyl)- L
Histidine
I-) H-Tvr(tBu)-His(Trt)-dichlorotritvlrésine
La synthèse du dipeptidyl-résine H-Tyr(tBu)-His(Trt)dichlorotritylrésine est réalisée en utilisant la procédure 1 sur 125 mg (168 pimol) de dichlorotritylrésine avec A2 = Fmoc-His(Trt)-OH et A1 = Fmoc
Tyr(tBu)-OH.
N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentanoyl)- L-Tyrosyl)- L
Histidine
I-) H-Tvr(tBu)-His(Trt)-dichlorotritvlrésine
La synthèse du dipeptidyl-résine H-Tyr(tBu)-His(Trt)dichlorotritylrésine est réalisée en utilisant la procédure 1 sur 125 mg (168 pimol) de dichlorotritylrésine avec A2 = Fmoc-His(Trt)-OH et A1 = Fmoc
Tyr(tBu)-OH.
II-A) (2RS,3S), N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentanoyl)- L
Tyrosyl)- L-Histidyl-OH
A 135 mg (250 mol) d'acide (2RS, 3S), 2 (paraméthoxybenzyl-thio), 3-( N-benzyloxycarbonyl-amino), 5-(Ntertiobutylaminosulfonyl) pentanoïque (dont la synthèse est détaillée dans la procédure 2), 140 mg (320 umol) de BOP, 168 umol de H-Tyr(tBu)
His(Trt)-dichlorotritylrésine dans 5 ml de dichlorométhane, est ajouté, sous agitation à température ambiante, 200 yl de diisopropyléthylamine. La fin de la réaction est suivie par le test de Kaiser. Après 6 heures de réaction à cette température, la résine est lavée alternativement avec NMP et dichlorométhane.
Tyrosyl)- L-Histidyl-OH
A 135 mg (250 mol) d'acide (2RS, 3S), 2 (paraméthoxybenzyl-thio), 3-( N-benzyloxycarbonyl-amino), 5-(Ntertiobutylaminosulfonyl) pentanoïque (dont la synthèse est détaillée dans la procédure 2), 140 mg (320 umol) de BOP, 168 umol de H-Tyr(tBu)
His(Trt)-dichlorotritylrésine dans 5 ml de dichlorométhane, est ajouté, sous agitation à température ambiante, 200 yl de diisopropyléthylamine. La fin de la réaction est suivie par le test de Kaiser. Après 6 heures de réaction à cette température, la résine est lavée alternativement avec NMP et dichlorométhane.
Le peptide est clivé de la résine par traitement avec le mélange trifluoroéthanol : dichlorométhane 2:8 (20 ml).
On effectue une déprotection TFA avec le mélange TFA eau : triisopropylsilane 40 ml: 2 ml: 1 ml pendant 3 heures à température ambiante. Le mélange réactionnel est évaporé sous pression réduite, repris avec de l'eau puis lyophilisé.
On effectue dès lors une déprotection HF à 0 C avec le mélange HF : métacrésol 10 ml:0,2 ml pendant 1 heure. Après distillation du HF, le résidu est repris avec un peu de TFA puis précipité avec un mélange froid éther diéthylique : n-hexane 50:50. Après centrifugation, le culot est repris avec de l'eau puis lyophilisé. On obtient 100 mg de brut.
Le produit est purifié sur une colonne semi-préparative (Vydac C18 ref 218TP510, 20x250 mm). Les deux diastéréoiomères sont ainsi séparés.
HPLC (gradient 0% de B à 40% de B en 15 min; colonne Macherey-Nagel
C18): 2 pics 10.6 min et 11.5 min
SM (ESI): (M+H)+ m/z = 529,1 et 2+ 265,2 Il-B (2RS 3R) NgN-(2-mercastoe 3-amino 5-sulfamovl Pentanovl)- L Tyrosyl)- L-Histidine
Les deux autres diastéréoisomères sont préparés par le même protocole à partir du synthon 1 de configuration (2RS, 3R).
C18): 2 pics 10.6 min et 11.5 min
SM (ESI): (M+H)+ m/z = 529,1 et 2+ 265,2 Il-B (2RS 3R) NgN-(2-mercastoe 3-amino 5-sulfamovl Pentanovl)- L Tyrosyl)- L-Histidine
Les deux autres diastéréoisomères sont préparés par le même protocole à partir du synthon 1 de configuration (2RS, 3R).
EXEMPLE N 4 N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentanoyl)-L-Tyrosyl)-L- Histidyl-NHBz.
I-) H-Tvr(tBu)-His(Trt)-NHBz
H-Tyr(tBu)-His(Trt)-NHBz dont les caractéristiques sont les suivantes est obtenu en phase liquide par condensations et déprotections successives du Fmoc-His(Trt)-OH et du Fmoc-Tyr(tBu)-OH sur la benzylamine, en utilisant les protocoles connus de l'homme de l'art.
H-Tyr(tBu)-His(Trt)-NHBz dont les caractéristiques sont les suivantes est obtenu en phase liquide par condensations et déprotections successives du Fmoc-His(Trt)-OH et du Fmoc-Tyr(tBu)-OH sur la benzylamine, en utilisant les protocoles connus de l'homme de l'art.
1H RMN (d6-DMSO) ô 1.20 (s, 9H, Trt), 2.40 (dd, 1H, ssCH2(His / ssCH2(Tyr)), 2.80 (dd, 2H, ssCH2(His) / ssCH2(Tyr)), 3.30 (m, 1H, aCH(His)), 4.17 (m, 2H, CH2-C6H5), 4.48 (m, 1H, aCH(His)), 6.60 (s, 1H,
His), 6.77 (d, 2H, H3 H5 (Tyr)), 6.95 (d, 2H, H2 H6 (Tyr)), 7.00 à 7.33 (m, 20H, C6Hs / Trityl), 8.12 (d, 1H, NH(His)), 8.30 (t, 1H, NH-CH2-C6H5), 8.52 (d, 2H, NH2(Tyr)).
His), 6.77 (d, 2H, H3 H5 (Tyr)), 6.95 (d, 2H, H2 H6 (Tyr)), 7.00 à 7.33 (m, 20H, C6Hs / Trityl), 8.12 (d, 1H, NH(His)), 8.30 (t, 1H, NH-CH2-C6H5), 8.52 (d, 2H, NH2(Tyr)).
Il-A) (2RS. 3S). N-(N-(2-mercaDto. 3-amino. 5-sulfamovî. oentanovl)-L-
Tyrosyl)-L-Histidyl-NHBz.
Tyrosyl)-L-Histidyl-NHBz.
239 mg (444 zmol) d'acide (2RS, 3S), 2-(paraméthoxybenzylthio), 3-(N-benzyloxycarbonyl-amino), 5-(N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanoïque (dont la synthèse est détaillée dans la procédure 2) sont condensés sur 367 mg (533 limol) de H-Tyr(tBu)-His(Trt)-NHBz dans 5 ml de dichlorométhane selon le mode opératoire décrit dans l'exemple n 2 étape Il . Après déprotection, on obtient 460 mg de brut qui est purifié sur une colonne semi-préparative (Vydac C18 ref 218TP510, 20x250 mm).
Les deux diastéréoiomères sont séparés.
HPLC (gradient 20% de B à 60% de B en 15 min ; colonne Macherey
Nagel C18): 2 pics à 9.5 min et 9.9 min.
Nagel C18): 2 pics à 9.5 min et 9.9 min.
1H RMN (D20) 6 2.12 (m, 2H, CH-CH2-CH2), 2.96 (dd, 2H, ss(Tyr)), 3.08 (dd, 1H, ss(His)), 3.18 (dd, 1H, ss(His)), 3.33 (t, 2H, CH-CH2-CH2), 3.70 (d, 1H, CH-SH), 3.72 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 4.22 (d, 1H, CH2-C6H5), 4.37 (d, 1H, CH2-C6Hs), 4.55 (t, 1H, a(Tyr)), 4.60 (t, 1H, a(His)), 6.82 (d, 2H, H3-Hs(Tyr)), 7.13 (d, 2H, H2-H6(Tyr)), 7.14 (s, 1H, H4(His)), 7.19 (d, 2H, C6Hs), 7.37 (m, 3H, C6Hs), 8.51( s, 1H, H2(His)).
SM (ESI): (M+H)+ m/z = 618,1
Il-B) (2RS,3R) N-(N-(2-mercasto. 3-amino. 5-sulfamovl. pentanoyl)-L-
Tyrosyl )-L-Histidvl-NHBz.
Il-B) (2RS,3R) N-(N-(2-mercasto. 3-amino. 5-sulfamovl. pentanoyl)-L-
Tyrosyl )-L-Histidvl-NHBz.
Les deux autres diastéréoisomères sont préparés par le même protocole à partir du synthon 1 de configuration (2RS, 3R).
EXEMPLE N 5
N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentyl)-L-Tyrosyl)-L-Histidine
I-A) (2RS,3S), 2-(paraméthoxybenzyl-thio), 3-(N-benzyloxycarbonylamino), 5-(N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanol
A une solution de 284 mg (0,51 mmol) de (2SR,3S), 2 (paraméthoxybenzyl-thio), 3-(N-benzyloxycarbonyl-amino), 5-(Ntertiobutylaminosulfonyl) pentanoate de méthyle dans 2 ml de THF et 2 ml d'éthanol absolu, sont ajoutés 90 mg (2,1 mmol) de chlorure de lithium et 80 mg (2,1 mmol) de borohydrure de sodium (NaBH4). La réaction est agitée pendant 18 heures à température voisine de 20 C. Elle est arrêtée en additionnant KHSO4(1 N) et extraite avec de l'AcEt. Les phases organiques sont lavées avec de l'eau, KHSO4(1N), NaHCO3(10%), une solution deNaCI saturée, séchées sur Na2SO4(îN) puis concentrées sous pression réduite.
N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentyl)-L-Tyrosyl)-L-Histidine
I-A) (2RS,3S), 2-(paraméthoxybenzyl-thio), 3-(N-benzyloxycarbonylamino), 5-(N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanol
A une solution de 284 mg (0,51 mmol) de (2SR,3S), 2 (paraméthoxybenzyl-thio), 3-(N-benzyloxycarbonyl-amino), 5-(Ntertiobutylaminosulfonyl) pentanoate de méthyle dans 2 ml de THF et 2 ml d'éthanol absolu, sont ajoutés 90 mg (2,1 mmol) de chlorure de lithium et 80 mg (2,1 mmol) de borohydrure de sodium (NaBH4). La réaction est agitée pendant 18 heures à température voisine de 20 C. Elle est arrêtée en additionnant KHSO4(1 N) et extraite avec de l'AcEt. Les phases organiques sont lavées avec de l'eau, KHSO4(1N), NaHCO3(10%), une solution deNaCI saturée, séchées sur Na2SO4(îN) puis concentrées sous pression réduite.
On obtient avec un rendement quantitatif, 270 mg de (2SR, 3S), 2-(paraméthoxybenzyl-thio), 3-( N-benzyloxycarbonyl-amino), 5 (N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanol dont les caractéristiques sont les suivantes: 1H RMN (d6 - DMSO) 6 1,18 (s, 9H, tBu), 1,60 à 1,72 (m, 1H, CH-CH2
CH2), 1,82 à 1,97 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 2,89 (t, 2H, CH-CH2-CH2), 3,20 à 3,30 (m, 2H, CH2OH), 3,49 (m, 1 H, CH-CH2-CH2), 4,70 (t, 1 H, CH2OH), 4,96 (d, 2H, CH2C6H5), 6,73 (s, 1H, SO2NH), 7,10 (d, 1H, ZNH), 7,28 (s, 5H, CH aromatiques)
I-B) (2RS.3R) 2-(paraméthoxybenzyl-thio). 3-(N-benzyloxycarbonylamino). 5-(n-tertiobutylaminosulfonyl) pentanol
Le composé analogue de configuration (2RS, 3R) est obtenu par le même protocole à partir du synthon 1 sous forme d'ester méthylique et de configuration (2SR, 3R).
CH2), 1,82 à 1,97 (m, 1H, CH-CH2-CH2), 2,89 (t, 2H, CH-CH2-CH2), 3,20 à 3,30 (m, 2H, CH2OH), 3,49 (m, 1 H, CH-CH2-CH2), 4,70 (t, 1 H, CH2OH), 4,96 (d, 2H, CH2C6H5), 6,73 (s, 1H, SO2NH), 7,10 (d, 1H, ZNH), 7,28 (s, 5H, CH aromatiques)
I-B) (2RS.3R) 2-(paraméthoxybenzyl-thio). 3-(N-benzyloxycarbonylamino). 5-(n-tertiobutylaminosulfonyl) pentanol
Le composé analogue de configuration (2RS, 3R) est obtenu par le même protocole à partir du synthon 1 sous forme d'ester méthylique et de configuration (2SR, 3R).
II-A) (2SR,3S), 2-(paraméthoxybenzyl-thio), 3-(N-benzyloxycarbonylamino). 5-(N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanal
A une solution de 0,056 ml (0,63) mmol) de chlorure d'oxalyl (fraîchement distillé) dans 2,5 ml de dichlorométhane, est ajoutée goutte à goutte, à -78 C, sous azote, une solution de 0,115 ml (1,6 mmol) de
DMSO dans 0,5 ml de dichlorométhane. Une solution de 270 mg de (2SR,3S), 2-(paraméthoxybenzyl-thio), 3-(N-benzyloxycarbonyl-amino), 5 (N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanol dans 1,5 ml de CH2CI2 est coulée goutte à goutte. L'agitation est maintenue pendant 30 minutes, puis on ajoute 375 Cil de triéthylamine. Le mélange réactionnel est agité pendant 5 minutes supplémentaire à -65 C puis on laisse revenir le bain à température ambiante.
A une solution de 0,056 ml (0,63) mmol) de chlorure d'oxalyl (fraîchement distillé) dans 2,5 ml de dichlorométhane, est ajoutée goutte à goutte, à -78 C, sous azote, une solution de 0,115 ml (1,6 mmol) de
DMSO dans 0,5 ml de dichlorométhane. Une solution de 270 mg de (2SR,3S), 2-(paraméthoxybenzyl-thio), 3-(N-benzyloxycarbonyl-amino), 5 (N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanol dans 1,5 ml de CH2CI2 est coulée goutte à goutte. L'agitation est maintenue pendant 30 minutes, puis on ajoute 375 Cil de triéthylamine. Le mélange réactionnel est agité pendant 5 minutes supplémentaire à -65 C puis on laisse revenir le bain à température ambiante.
Après 1 h d'agitation, on ajoute de l'eau et la phase aqueuse est extraite au dichlorométhane. Les phases organiques sont combinées, lavées avec KHSO4(îN), NaHCO3(10%), NaCI saturée, séchées sur
Na2S04.
Na2S04.
Après concentration sous pression réduite, on obtient avec un rendement de 94%, 0,747 g de (2SR,3S), 2-(paraméthoxybenzyl-thio), 3-(N-benzyloxycarbonyl-amino), 5-(N-tertiobutylaminosulfonyl) pentanal dont les caractéristiques sont les suivantes: 1H RMN (d6 - DMSO) (s, 9H, tBu), 1,80 à 1,92 (m, 1H, CH-CH-CH2), 2,05 à 2,18 (m, 1H, CH-CH-CH2), 2,86 à 3,02 (m, 2H, CH-CH2-CH), 4,03 (m, 1 H, CH-CH2-CH2), 5,00 (s, 1 H, CH2C6Hs), 6,87 (s, 1H, SO2NH), 7,27 à 7,37 (m, 5H, CH aromatiques), 7,87 (d, 1H, ZNH), 9,45 (s, 1H,
CHO)
Il-B) (2RS 3R) 2-(paraméthoxvbenzvl-thio), 3-(N-benzvloxycarbonvl- amino), 5-(N-tertiobutvlaminosulfonvl) pentanal
Le composé analogue de configuration (2SR, 3S) est obtenu par le même protocole à partir du composé décrit en IB.
CHO)
Il-B) (2RS 3R) 2-(paraméthoxvbenzvl-thio), 3-(N-benzvloxycarbonvl- amino), 5-(N-tertiobutvlaminosulfonvl) pentanal
Le composé analogue de configuration (2SR, 3S) est obtenu par le même protocole à partir du composé décrit en IB.
III-)H-Tyr(tBu)-His(Trt)-HMPrésine
La synthèse du dipeptidyl-résine H-Tyr(tBu)-His(Trt)
HMPrésine est réalisée en utilisant la procédure 1 sur 150 mg (0,15mmol) de HMP-résine avec A2 = Fmoc-His(Trt)-OH et A1 = Fmoc-Tyr(tBu)-OH.
La synthèse du dipeptidyl-résine H-Tyr(tBu)-His(Trt)
HMPrésine est réalisée en utilisant la procédure 1 sur 150 mg (0,15mmol) de HMP-résine avec A2 = Fmoc-His(Trt)-OH et A1 = Fmoc-Tyr(tBu)-OH.
IV-) (2 SR. 3S) N-(N-(2-mercaPto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentvl)-L-Tvrnsvl)-
L-Histidine
A une solution de 200 mg (0,4 mmol) de (2SR,3S) 3-(N-Z), 2 (paraméthoxybenzyl-thio), 3-( N-benzyloxycarbonyl-amino), 5-(Ntertiobutylaminosulfonyl) pentanal, 150 mol de résine H-Tyr(tBu)-His(Trt)
HMPrésine, 30 mg (0,16 mmol) d'acide paratoluènesulfonique (APTS) dans 6 ml de DMF, est ajoutée une solution de 25 mg de NaBH3CN dans 1 ml de DMF. Le mélange réactionnel est agité pendant 16 heures à température ambiante. La résine est lavée alternativement avec NMP et dichlorométhane. On effectue une déprotection TFA avec le mélange
TFA: eau . triisopropylsilane 40 ml: 2 ml: îml pendant 3 heures à température ambiante. Le mélange réactionnel est évaporé sous pression réduite, repris avec de l'eau puis lyophilisé.
L-Histidine
A une solution de 200 mg (0,4 mmol) de (2SR,3S) 3-(N-Z), 2 (paraméthoxybenzyl-thio), 3-( N-benzyloxycarbonyl-amino), 5-(Ntertiobutylaminosulfonyl) pentanal, 150 mol de résine H-Tyr(tBu)-His(Trt)
HMPrésine, 30 mg (0,16 mmol) d'acide paratoluènesulfonique (APTS) dans 6 ml de DMF, est ajoutée une solution de 25 mg de NaBH3CN dans 1 ml de DMF. Le mélange réactionnel est agité pendant 16 heures à température ambiante. La résine est lavée alternativement avec NMP et dichlorométhane. On effectue une déprotection TFA avec le mélange
TFA: eau . triisopropylsilane 40 ml: 2 ml: îml pendant 3 heures à température ambiante. Le mélange réactionnel est évaporé sous pression réduite, repris avec de l'eau puis lyophilisé.
On effectue dès lors une déprotection HF à 0 C avec le mélange HF : métacrésol 10 ml: 0,2 ml pendant 1 heure. Après distillation du HF, le résidu est repris avec un peu de TFA puis précipité avec un mélange froid éther diéthylique : n-hexane 50:50. Le produit est ensuite lyophilisé.
Les deux diastéréoisomères obtenus sont purifiés et séparés sur une colonne semi-préparative.
Les deux autres diastéréoisomères sont obtenus par le même protocole à partir du synthon 1 de configuration (2RS, 3R).
HPLC (gradient 0% à 40% de B en 15 min ; colonne Macherey-Nagel
C18) 4 pics à 10.80,10.90,11.03 et 11.14 min.
C18) 4 pics à 10.80,10.90,11.03 et 11.14 min.
SM(ES): (M+H)+ m/z = 515.2 ; (M+2H)2+ m/z = 258.1
EXEMPLE N 6
N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 3-(3-sulfamoyl)phényl propanoyl)- L
Tyrosyl)- L-Histidyl-benzylamide.
EXEMPLE N 6
N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 3-(3-sulfamoyl)phényl propanoyl)- L
Tyrosyl)- L-Histidyl-benzylamide.
I-) H-Tyr(tBu)-His(Trt)-NHBz
H-Tyr(tBu)-His(Trt)-NHBz dont les caractéristiques sont les suivantes est obtenu en phase liquide par condensations et déprotections successives du Fmoc-His(Trt)-OH et du Fmoc-Tyr(tBu)-OH sur la benzylamine.
H-Tyr(tBu)-His(Trt)-NHBz dont les caractéristiques sont les suivantes est obtenu en phase liquide par condensations et déprotections successives du Fmoc-His(Trt)-OH et du Fmoc-Tyr(tBu)-OH sur la benzylamine.
1H RMN (d6-DMSO) ô 1.20 (s, 9H, Trt), 2.40 (dd, 1H, ssCH2(His) / ssCH2(Tyr)), 2.80 (dd, 2H, ssCH2(His) / ssCH2(Tyr)), 3.30 (m, 1H, aCH(His)), 4.17 (m, 2H, CH2-C6Hs), 4.48 (m, 1H, aCH(His)), 6.60 (s, 1H,
His), 6.77 (d, 2H, H3 H5 (Tyr)), 6.95 (d, 2H, H2 H6 (Tyr)), 7.00 à 7.33 (m, 20H, C6H5 / Trityl), 8.12 (d, 1H, NH(His)), 8.30 (t, 1H, NH-CH2-C6H5), 8.52 (d, 2H, NH2(Tyr)).
His), 6.77 (d, 2H, H3 H5 (Tyr)), 6.95 (d, 2H, H2 H6 (Tyr)), 7.00 à 7.33 (m, 20H, C6H5 / Trityl), 8.12 (d, 1H, NH(His)), 8.30 (t, 1H, NH-CH2-C6H5), 8.52 (d, 2H, NH2(Tyr)).
Il-A) (2RS.3S). N-(N-(2-mercaoto. 3-amino, 3- < 3-sulfamovl)phénvl propanoly)-L-Tyrosyl)-L-Histidyl-benzylamide.
300 mg (0,57 mmol) d'acide (2SR,3S), 2 (paraméthoxybenzyl-thio)-, 3-(N-t-butoxycarbonyl-amino)-, 3-(3-(Ntertiobutylaminosulfonyl )phényl) propanoïque (dont la synthèse est détaillée dans la procédure 2 BIII) sont condensés sur 470 mg (0,68 mmol) de H-Tyr(tBu)-His(Trt)-NHBz dans 5 ml de dichlorométhane selon le mode opératoire décrit dans l'exemple n 2 étape II. Après déprotection par l'acide trifluoroacétique, on obtient 460 mg de brut qui est purifié sur une colonne semi-préparative (Vydac C18 ref 218TP510, 20x250 mm). Les deux diastéréoiomères sont séparés à ce niveau là de la synthèse par
HPLC sur une colonne Vydac C18 10X250 mm.
HPLC sur une colonne Vydac C18 10X250 mm.
HPLC (gradient 10% de B à 90% de B en 30 min ; colonne
Macherey-Nagel C18) : 2 pics à 12,85 min et 14,35 min (débit 1,5 ml/min).
Macherey-Nagel C18) : 2 pics à 12,85 min et 14,35 min (débit 1,5 ml/min).
Les deux produits obtenus sont alors traités à l'acide fluorhydrique anhydre en présence de 2% m-crésol afin de déprotéger le groupe pméthoxy benzyl protégeant le soufre puis repurifiés par HPLC.
1H RMN (D2O) 6 2.96 (dd, 2H, ss(Tyr)), 3.08 (dd, 1H, ss(His)), 3.18 (dd, 1H, ss(His)), 3.70 (d, 1H, CH-SH), 4.22 (d, 1H, CH7-C6Hs), 4.37 (d, 1H, CH7-C6Hs), 4.55 (t, 1H, a(Tyr)), 4.60 (t, 1H, a(His)), 6.82 (d, 2H, H3 Hs(Tyr)), 7.13 (d, 2H, H2-H6(Tyr)), 7.14 (s, 1H, H4(His)), 7.19 (d, 2H,
C6H5), 7.37 (m, 3H, C6H5), 8.51(2. 1H, H2(His)).
C6H5), 7.37 (m, 3H, C6H5), 8.51(2. 1H, H2(His)).
SM (ESI): (M+H)+ m/z 666,2
II-B) N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 3-(3-sulfamoyl)phényl propanoyl)- L
Tvrosvl)- L-Histidvl-benzvlamide.
II-B) N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 3-(3-sulfamoyl)phényl propanoyl)- L
Tvrosvl)- L-Histidvl-benzvlamide.
Les deux autres diastéréoiomères sont obtenus par le même protocole à partir du synthon 3 de configuration (2RS, 3R).
EXEMPLE N 7
N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-carbamoyl pentanoyl )-L-P(2-naphtyl)-
Ala)-L-b(2-naphtyl)-Alanine
I-) H-ss(2-naphtyl)-L-Ala-ss(2-naphtyl)-L-Ala-dichlorotritylrésine
La synthèse du dipeptidyl-résine H-ss(2-naphtyl)-L-Ala-ss(2- naphtyl)-L-Ala-dichlorotritylrésine est réalisée en utilisant la procédure 1 sur 125 mg (200 mol) de dichlorotritylrésine avec A1 et A2 = Fmoc-ss(2- naphtyl)-L-Ala-OH.
N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-carbamoyl pentanoyl )-L-P(2-naphtyl)-
Ala)-L-b(2-naphtyl)-Alanine
I-) H-ss(2-naphtyl)-L-Ala-ss(2-naphtyl)-L-Ala-dichlorotritylrésine
La synthèse du dipeptidyl-résine H-ss(2-naphtyl)-L-Ala-ss(2- naphtyl)-L-Ala-dichlorotritylrésine est réalisée en utilisant la procédure 1 sur 125 mg (200 mol) de dichlorotritylrésine avec A1 et A2 = Fmoc-ss(2- naphtyl)-L-Ala-OH.
II-A) (2RS,3S) N-(N-(2mercapto, 3-amino, 5-carbamoyl, pentanoyl)-L-ss(2naphtyl)-Ala)-L-ss(2-naphtyl)-Alanine
200 mg (300 mol d'acide (2RS, 3S), 2-(paraméthoxybenzylthio), 3-(N-Boc), 5-trityl-carbamoyl pentanoïque (dont la synthèse est détaillée dans la procédure 3) sont condensés sur 200 mol de H-ss(2- naphtyl)-L-Ala-ss(2-naphtyl)-L-Alatiichlorotritylrésine dans 5 ml de dichlorométhane en suivant le mode opératoire décrit dans l'exemple n 3 étape II. Après déprotection, on obtient 149 mg de brut qui est purifié sur une colonne semi-préparative (Vydac C18 ref 218TP510, 20x25 mm). Les deux diastéréoisomères obtenus sont ainsi séparés.
200 mg (300 mol d'acide (2RS, 3S), 2-(paraméthoxybenzylthio), 3-(N-Boc), 5-trityl-carbamoyl pentanoïque (dont la synthèse est détaillée dans la procédure 3) sont condensés sur 200 mol de H-ss(2- naphtyl)-L-Ala-ss(2-naphtyl)-L-Alatiichlorotritylrésine dans 5 ml de dichlorométhane en suivant le mode opératoire décrit dans l'exemple n 3 étape II. Après déprotection, on obtient 149 mg de brut qui est purifié sur une colonne semi-préparative (Vydac C18 ref 218TP510, 20x25 mm). Les deux diastéréoisomères obtenus sont ainsi séparés.
HPLC (gradient de 40% à 80% de B en 15 min ; colonne Interchrom#) : 2 pics à 12.3 min et 13.2 min.
1H RMN (d6-DMSO) # 1.18 (m, 1H, ssCH2(Gln)), 1.33 (m, 1H, ssCH2(Gln)), 1.87 (m, 2H, yCH2(Gln)), 2.80 à 3.15 (m, 4H, ssCH2(ss(2-maphtyl)-L-ala)), 3.23 (m, 1H, aCH(Gln)), 3.52 (m, 1H, CH-SH), 4.54 et 4.67 (m, 2H, aCH((P(2-naphtyl)-L-Ala))/ αCH((ss(2-naphtyl)-L-Ala)), 7.00 (s, 1 H,
CONH2(Gln)), 7.38 (s, 1H, CONH2(Gln)), 7.38 à 7.85 (m, 16 H, arom (ss(2- naphtyl)-L-Ala)/ NH2 (Gln)), 8.62 et 8.66 (d, 2H, NH(ss(2-naphtyl)-L-Ala))
SM(ES): (M+H)+ = 586,22
II-B) (2RS,3R) N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-carbamoyl, pentanoyl)-L ss(2-naphtyl)-Ala)-L-ss(2-naphtyl)-Alanine
Les deux autres diastéréoisomères sont obtenus par le même protocole à partir du synthon 2 de configuration (2RS, 3R).
CONH2(Gln)), 7.38 (s, 1H, CONH2(Gln)), 7.38 à 7.85 (m, 16 H, arom (ss(2- naphtyl)-L-Ala)/ NH2 (Gln)), 8.62 et 8.66 (d, 2H, NH(ss(2-naphtyl)-L-Ala))
SM(ES): (M+H)+ = 586,22
II-B) (2RS,3R) N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-carbamoyl, pentanoyl)-L ss(2-naphtyl)-Ala)-L-ss(2-naphtyl)-Alanine
Les deux autres diastéréoisomères sont obtenus par le même protocole à partir du synthon 2 de configuration (2RS, 3R).
EXEMPLE N 8
N -( N-(2-mercapto, 3amino, 5-carbamoyl pentanoyl)-L-Trp)-L-Leucine l-)H-TrP-Leu-otBu
H-Trp-Leu-OtBu dont les caractéristiques sont les suivantes est obtenu par condensation du Fmoc-Trp-OH sur la H-Leu-OtBu suivie par une déprotection.
N -( N-(2-mercapto, 3amino, 5-carbamoyl pentanoyl)-L-Trp)-L-Leucine l-)H-TrP-Leu-otBu
H-Trp-Leu-OtBu dont les caractéristiques sont les suivantes est obtenu par condensation du Fmoc-Trp-OH sur la H-Leu-OtBu suivie par une déprotection.
Rf (MeOH:dichlorométhane 10:90)=0,30 1H RMN (d6-DMSO) # 0.75(d, 3H, bCH3(Leu)), 0.81 (d, 3H, bCH3(Leu)), 1.35 (s, 9H, tBu), 1.42 (m, 1H, yCH(Leu)), 1.63 (m, 2H, ssCH2(Leu)), 2.68 (dd, 1H, ssCH2(Trp)), 3.01 (dd, 1H, ssCH2(Trp)), 3.43 (m, 1H, aCH(Leu)), 4.15 (m, 1H, aCH(Trp)), 6.91 (t, 1H, Hs(Trp)), 7.00 (t, 1H, H6(Trp)), 7.01 (d, 1H, H2(Trp)), 7.27 (d, 1H, H7(Trp)), 7.51 (d, 1H, H4(Trp)), 8.00 (d, 1H,
NH(Leu)), 10.79 (s, 1H, NH(Trp))
II-A) (2RS, 3S), N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-carbamoyl pentanoyl)-L
Trp )-L-Leucine
200 mg (300 KLmol) d'acide (2RS, 3S), 2-(paraméthoxybenzylthio), 3-(N-Boc), 5-trityl-carbamoyl pentanoïque (dont la synthèse est détaillée dans la procédure 3) sont condensés sur 200 mol de H-Trp
Leu-OtBu dans 5 ml de dichlorométhane en utilisant le mode opératoire décrit dans l'exemple n 2, étape Il.
NH(Leu)), 10.79 (s, 1H, NH(Trp))
II-A) (2RS, 3S), N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-carbamoyl pentanoyl)-L
Trp )-L-Leucine
200 mg (300 KLmol) d'acide (2RS, 3S), 2-(paraméthoxybenzylthio), 3-(N-Boc), 5-trityl-carbamoyl pentanoïque (dont la synthèse est détaillée dans la procédure 3) sont condensés sur 200 mol de H-Trp
Leu-OtBu dans 5 ml de dichlorométhane en utilisant le mode opératoire décrit dans l'exemple n 2, étape Il.
Après déprotection, on obtient 223 mg de brut qui sont purifiés sur une colonne semi-péparative (Vydac C18 ref 218TP510, 20x25 mm). Les deux diastéréoisomères obtenus sont ainsi séparés.
1H RMN (d6-DMSO) 6 0.83 (6, 3H, bCH3(Leu)), 0.88 (d, 3H, âCH3(Leu)), 1.32 (m, 1H, yCH(Leu)), 1.50 (m, 3H, ssCH2(Leu)/ssCH2(Gln)), 1.60 (m, 1 H, ssCH2(Gln)), 2.01 (t, 2H, yCH2(Gln)), 2.91 (dd, 1H, ssCH2(Trp)), 3.07 à 3.17 (m, 2H, ssCH2(Trp)/αCH(Gln)), 3.63 (m, 1H, CH-SH), 4.27 (m, 1H, aCH(Leu)), 4.64 (m, 1H, aCH(Trp)), 6.97 (t, 1H, Hs(Trp)), 6.99 (s, 1H,
CONH2), 7.03 (t, 1H, H6(Trp)), 7.13 (t, 1 H, H2(Trp)), 7.32 (d, 1H,
H7(Trp)), 7.40 (s, 1H, CONH2), 7.63 (d, 1H, H4(Trp)), 7.95 (br s, 3H,
NH3+), 8.40 (d, 1 H, NH(Leu)), 8.63 (d, 1H, NH(Trp)), 10.76 (s, 1H,
NH1(Trp)), 12.5 (brs, 1H, COOH).
CONH2), 7.03 (t, 1H, H6(Trp)), 7.13 (t, 1 H, H2(Trp)), 7.32 (d, 1H,
H7(Trp)), 7.40 (s, 1H, CONH2), 7.63 (d, 1H, H4(Trp)), 7.95 (br s, 3H,
NH3+), 8.40 (d, 1 H, NH(Leu)), 8.63 (d, 1H, NH(Trp)), 10.76 (s, 1H,
NH1(Trp)), 12.5 (brs, 1H, COOH).
II-B) (2RS,3R) N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-carbamoyl pentanoyl)-L-Trp)
L-Leucine
Les deux autres diastéréoisomères sont obtenus par le même protocole à partir du synthon 2 de configuration (2RS, 3R).
L-Leucine
Les deux autres diastéréoisomères sont obtenus par le même protocole à partir du synthon 2 de configuration (2RS, 3R).
EXEMPLE 9
Caractérisation de l'activité biologique de composés de formule générale (I)
Le pouvoir inhibiteur peut être déterminé sur l'activité endopeptidasique des chaînes légères purifiées de toxine tétanique et de toxine botulique de type B en suivant le protocole décrit dans la littérature (Soleilhac et al, Analytical Biochemistry, 241, 120, 1996) car ces deux enzymes clivent toutes deux la synoptobnévine au même site de clivage.
Caractérisation de l'activité biologique de composés de formule générale (I)
Le pouvoir inhibiteur peut être déterminé sur l'activité endopeptidasique des chaînes légères purifiées de toxine tétanique et de toxine botulique de type B en suivant le protocole décrit dans la littérature (Soleilhac et al, Analytical Biochemistry, 241, 120, 1996) car ces deux enzymes clivent toutes deux la synoptobnévine au même site de clivage.
Le composé à tester (10 l) est préincubé avec 10 l de chaîne légère purifiée de toxine tétanique (250 ng) ou de toxine botulique
B pendant 30 minutes à 37 C dans un volume total de 80 1ll de tampon 20mM Hépes, 100 mM NaCI à pH 7,4. On ajoute alors 20 l d'une solution à 100 uM du substrat fluorescent (Pya88)Syb 39-88 dans le même tampon ; I'incubation est prolongée pendant 30 minutes à 37 C et à l'abris de la lumière. On arrête la réaction par addition de 0,9 ml de 72% de
MeOH dans l'eau contenant 0,1% de TFA. Le métabolite fluorescent généré (Pya88)Syb 77-88 est séparé du substrat total par chromatographie sur colonne Sep-Pak Vac C18 contenant 500 mg de phase inverse C18 (Waters)#. La quantité de métabolite formée est mesurée par fluorimétrie avec comme longueur d'onde d'excitation 343 nm et comme longueur d'onde d'emission 377 nm.
B pendant 30 minutes à 37 C dans un volume total de 80 1ll de tampon 20mM Hépes, 100 mM NaCI à pH 7,4. On ajoute alors 20 l d'une solution à 100 uM du substrat fluorescent (Pya88)Syb 39-88 dans le même tampon ; I'incubation est prolongée pendant 30 minutes à 37 C et à l'abris de la lumière. On arrête la réaction par addition de 0,9 ml de 72% de
MeOH dans l'eau contenant 0,1% de TFA. Le métabolite fluorescent généré (Pya88)Syb 77-88 est séparé du substrat total par chromatographie sur colonne Sep-Pak Vac C18 contenant 500 mg de phase inverse C18 (Waters)#. La quantité de métabolite formée est mesurée par fluorimétrie avec comme longueur d'onde d'excitation 343 nm et comme longueur d'onde d'emission 377 nm.
* A titre d'exemples, le tableau I ci-après donne l'activité inhibitrice in vitro de certains composés sur les propriétés hydrolytiques de la toxine tétanique.
(R4, Rs, R6 = Hydrogène)
En ce qui concerne le tableau Il, y sont soumises les activités inhibitrices de certains composés revendiqués, sur les propriétés hydrolytiques de la toxine botulique de type B.
En ce qui concerne le tableau Il, y sont soumises les activités inhibitrices de certains composés revendiqués, sur les propriétés hydrolytiques de la toxine botulique de type B.
Tableau I
<tb> <SEP> N0 <SEP> R1 <SEP> X <SEP> R2 <SEP> I <SEP> R3 <SEP> I <SEP> z <SEP> - <SEP> Inhibition <SEP> IC
<tb> <SEP> OhlCV(V <SEP> CO <SEP> -CH <SEP> CH3 <SEP> 2 <SEP> CH <SEP> CH3 <SEP> Et <SEP> OH <SEP> 10 <SEP> M <SEP> 2R, <SEP> 3S
<tb> <SEP> 2 <SEP> CH2 <SEP> 2SO2NH2 <SEP> CO <SEP> -CH <SEP> CH3 <SEP> 2 <SEP> CH <SEP> CH3 <SEP> Et <SEP> NHBz <SEP> 8 <SEP> M <SEP> 2R, <SEP> 3S
<tb> <SEP> 3 <SEP> (CH2)2SO2NH2 <SEP> (OH) <SEP> 5 <SEP> pM <SEP> (2R, <SEP> 3S)
<tb> ÇÉ2)2S02NH2
<tb> <SEP> 5 <SEP> (CH2)2S02NH2 <SEP> CH2 <SEP> -C <SEP> H2OH <SEP> CH2 <SEP> (OH) <SEP> 50 <SEP> pM <SEP> (2(S,R), <SEP> (3S, <SEP> R)
<tb> <SEP> 6 <SEP> m-(SO2NH2)Ph <SEP> CO <SEP> -CH2OH <SEP> C <SEP> cu <SEP> (NHlBz) <SEP> 3,5 <SEP> M <SEP> (2R, <SEP> 3R)
<tb> <SEP> 7(CH2)2CONH2 <SEP> CO <SEP> -CH2 <SEP> -CH2 <SEP> (OH) <SEP> 30 <SEP> M <SEP> (2R, <SEP> 35)
<tb> <SEP> O <SEP> CO <SEP> CH2-CH < CH3)2 <SEP> (OH) <SEP> 100 <SEP> 4 <SEP> (2R, <SEP> 35)
<tb> <SEP> -CH2 <SEP> N-H
<tb> Tableau II
<tb> <SEP> OhlCV(V <SEP> CO <SEP> -CH <SEP> CH3 <SEP> 2 <SEP> CH <SEP> CH3 <SEP> Et <SEP> OH <SEP> 10 <SEP> M <SEP> 2R, <SEP> 3S
<tb> <SEP> 2 <SEP> CH2 <SEP> 2SO2NH2 <SEP> CO <SEP> -CH <SEP> CH3 <SEP> 2 <SEP> CH <SEP> CH3 <SEP> Et <SEP> NHBz <SEP> 8 <SEP> M <SEP> 2R, <SEP> 3S
<tb> <SEP> 3 <SEP> (CH2)2SO2NH2 <SEP> (OH) <SEP> 5 <SEP> pM <SEP> (2R, <SEP> 3S)
<tb> ÇÉ2)2S02NH2
<tb> <SEP> 5 <SEP> (CH2)2S02NH2 <SEP> CH2 <SEP> -C <SEP> H2OH <SEP> CH2 <SEP> (OH) <SEP> 50 <SEP> pM <SEP> (2(S,R), <SEP> (3S, <SEP> R)
<tb> <SEP> 6 <SEP> m-(SO2NH2)Ph <SEP> CO <SEP> -CH2OH <SEP> C <SEP> cu <SEP> (NHlBz) <SEP> 3,5 <SEP> M <SEP> (2R, <SEP> 3R)
<tb> <SEP> 7(CH2)2CONH2 <SEP> CO <SEP> -CH2 <SEP> -CH2 <SEP> (OH) <SEP> 30 <SEP> M <SEP> (2R, <SEP> 35)
<tb> <SEP> O <SEP> CO <SEP> CH2-CH < CH3)2 <SEP> (OH) <SEP> 100 <SEP> 4 <SEP> (2R, <SEP> 35)
<tb> <SEP> -CH2 <SEP> N-H
<tb> Tableau II
<tb> N0 <SEP> R1 <SEP> X <SEP> R2 <SEP> R3 <SEP> Z <SEP> Inhibition <SEP> IC50
<tb> <SEP> 1 <SEP> CH2 <SEP> 2SO2NH2 <SEP> CO <SEP> -CH <SEP> CH3 <SEP> 2 <SEP> CH <SEP> CH3 <SEP> Et <SEP> (OH)~ <SEP> 15 <SEP> M <SEP> 2R, <SEP> 3S
<tb> 2 <SEP> C <SEP> H2 <SEP> 2SO2NH2 <SEP> CO <SEP> -ȯeCH3 <SEP> 2 <SEP> CH(CH3)(Et) <SEP> NHBz <SEP> 10 <SEP> M <SEP> 2R, <SEP> 3S
<tb> 3 <SEP> (CH2)2SO2NH2 <SEP> CO <SEP> (OH) <SEP> 8pM(2R,3S)
<tb> 4(C <SEP> H2)2SO2NH2 <SEP> CO <SEP> (NHBz) <SEP> 5 <SEP> pM <SEP> (2R, <SEP> 3S)
<tb> 5 <SEP> (CH2)2SO2NH2 <SEP> CH2 <SEP> -CH2OH <SEP> CH2 <SEP> H <SEP> (OH) <SEP> 25 <SEP> pM <SEP> (2(S,R), <SEP> (3S, <SEP> R)
<tb> 6 <SEP> m-(SO2NH2)Ph <SEP> CO <SEP> -CH2OH <SEP> CH2 <SEP> H <SEP> (NHBz) <SEP> 2 <SEP> \iM <SEP> (2R, <SEP> 3R)
<tb> 7 <SEP> (CH2)2CONH2 <SEP> CO <SEP> -CH2 <SEP> -CH2 <SEP> (OH) <SEP> 25 <SEP> pM <SEP> (2R, <SEP> 3S)
<tb> 8 <SEP> (CH2)2CONH2 <SEP> CO <SEP> CH2-CH(CH3 > 2 <SEP> (OH) <SEP> 50 <SEP> ijM <SEP> (2R, <SEP> 3S)
<tb> <SEP> -CH2 <SEP> N-H
<tb>
<tb> <SEP> 1 <SEP> CH2 <SEP> 2SO2NH2 <SEP> CO <SEP> -CH <SEP> CH3 <SEP> 2 <SEP> CH <SEP> CH3 <SEP> Et <SEP> (OH)~ <SEP> 15 <SEP> M <SEP> 2R, <SEP> 3S
<tb> 2 <SEP> C <SEP> H2 <SEP> 2SO2NH2 <SEP> CO <SEP> -ȯeCH3 <SEP> 2 <SEP> CH(CH3)(Et) <SEP> NHBz <SEP> 10 <SEP> M <SEP> 2R, <SEP> 3S
<tb> 3 <SEP> (CH2)2SO2NH2 <SEP> CO <SEP> (OH) <SEP> 8pM(2R,3S)
<tb> 4(C <SEP> H2)2SO2NH2 <SEP> CO <SEP> (NHBz) <SEP> 5 <SEP> pM <SEP> (2R, <SEP> 3S)
<tb> 5 <SEP> (CH2)2SO2NH2 <SEP> CH2 <SEP> -CH2OH <SEP> CH2 <SEP> H <SEP> (OH) <SEP> 25 <SEP> pM <SEP> (2(S,R), <SEP> (3S, <SEP> R)
<tb> 6 <SEP> m-(SO2NH2)Ph <SEP> CO <SEP> -CH2OH <SEP> CH2 <SEP> H <SEP> (NHBz) <SEP> 2 <SEP> \iM <SEP> (2R, <SEP> 3R)
<tb> 7 <SEP> (CH2)2CONH2 <SEP> CO <SEP> -CH2 <SEP> -CH2 <SEP> (OH) <SEP> 25 <SEP> pM <SEP> (2R, <SEP> 3S)
<tb> 8 <SEP> (CH2)2CONH2 <SEP> CO <SEP> CH2-CH(CH3 > 2 <SEP> (OH) <SEP> 50 <SEP> ijM <SEP> (2R, <SEP> 3S)
<tb> <SEP> -CH2 <SEP> N-H
<tb>
Claims (17)
1. Composé caractérisé en ce qu'il répond à la formule générale (I):
dans laquelle: - X représente:
un groupement méthylène ou
un groupement carbonyle, - R, représente:
un groupement alkyle, alkoxyalkyle, alkylthioalkyle, haloalkyle, cycloalkyle, hétérocycloalkyle, (cycloalkyl)alkyle, (hétérocycloalkyle)alkyle, aryle, arylalkyle, hétéroaryle, ou (hétéroaryl)alkyle, substitué sur la chaîne alkyle ou sur le cycle par au moins un groupement R7 choisi parmi:
un groupe sulfonamide -SO2NH2, -SO2NHR8 ou
-SO2N(R8)2,
un groupe amide, -CONH2, -CONHR8 ou -CON(R8)2,
un groupe amine NH2, -NHR8 ou -N(R8)2 et
un groupe guanidinyle
avec R8 étant un groupement alkyle, cycloaikyle, (cycloalkyl)alkyle,
aryle ou arylalkyle, - R2, R3 représentent indépendamment l'un de l'autre un atome
d'hydrogène, un groupement alkyle, alkoxyalkyle, carboxyalkyle, halo
alkyle, hydroxyalkyle, aminoalkyle, alkylthioalkyle, cycloalkyle.
hétérocycloaîkyle, (cycloalkyl)alkyle, (hétérocycloalkyle)alkyle, aryle,
arylalkyle, arylarylalkyle, hétéroaryle, (hétéroaryl)alkyle,
carbamoylalkyle, guanidinylalkyle, - R4 représente un atome d'hydrogène, un groupement acétyle,
un groupement benzoyle,
un groupement -SRg avec R9 étant un groupement alkyle, cycloalkyle, (cycloalkyl)alkyle, aryle, arylalkyle ou
un groupement
-S-CH[CHR1-NH2]-X-N(R5)CHR2CON(R6) CHR3COZ, avec R1 X, R5, R2, R6, R3 et Z tels que définis ci-dessus ou ci-après, -Rs et R6 représentent indépendamment l'un de l'autre un atome d'hydrogène, un groupement alkyle, cycloalkyle, (cycloalkyl)alkyle, aryle, arylalkyle, hétéroaryle, (hétéroaryl)alkyle, - R2 et R5 pris ensemble peuvent éventuellement constituer avec l'atome d'azote portant R5 un groupement hétérocycloalkyle éventuellement condensé avec un aryle, ou un hétéroaryle, - R3 et R6 pris ensemble peuvent éventuellement constituer avec l'atome d'azote portant R6 un groupement hétérocycloalkyle éventuellement condensé avec un aryle ou un hétéroaryle, - Z représente un groupement OH, OR10, NH2, NHR10, N(R10)2, avec R10 étant un groupement alkyle, cycloalkyle, (cycloalkyl)alkyle, aryle ou arylalkyle, et leurs dérivés.
2. Composé de formule générale I selon la revendication 1, dans laquelle R1 est un groupement alkyle, cycloalkyle, aryle, hétéroaryle, substitué par au moins un groupement -S02NH2, -S02NHR8, SO2N(Rg)2, avec Rs représentant un groupement alkyle, cycloalkyle, (cycloalkyl)alkyle, aryle ou arylalkyle.
3. Composé de formule générale I selon la revendication 1 ou 2, dans laquelle X représente un groupement carbonyle.
4. Composé de formule générale I selon la revendication 1 ou 3 dans laquelle X représente une fonction carbonyle et R1 représente un groupement alkyle, cycloalkyle, aryle ou hétéroaryle, substitué par au moins un groupement -SO2NH2, -SO2NHR8 -SO2N(R8)2, -CONH2, CONHR8, -CON(Rg)2, NH2, -NHRg ou -N(Ra)2, avec Rg représentant un groupement alkyle, cycloalkyle, (cycloalkyl)alkyle, aryle ou arylalkyle.
5. Composé de formule générale I selon la revendication 4 dans laquelle R1 représente de préférence un groupement (CH2)nSO2NH2, (CH2)nCONH2 ou (SO2NH2)Ph avec n compris entre 1 et 5.
6. Composé de formule générale I selon l'une des revendications 1 à 5 dans laquelle R4, R5 et R6 représentent un atome d'hydrogène, X une fonction CO, et R1 un groupement (CH2)2SO2NH2.
7. Composé de formule générale I selon l'une des revendications 1 à 5 dans laquelle R4, Rg, et R6 représentent un atome d'hydrogène, X une fonction CO, R1 un groupement (SO2NH2)Ph.
8. Composé de formule générale selon l'une des revendications 1 à 7 caractérisé en ce qu'il présente de préférence une configuration absolue (S) ou (R) sur le carbone portant le groupement R1, (S) ou (R) sur le carbone portant la fonction -S R4, et (S) sur les carbones portant les groupements R2 et R3.
9. Composé selon l'une des revendications 1 à 8, caractérisé en ce qu'il s'agit de préférence d'un composé choisi parmi - N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentanoyl)- L-Valyl)- L
Isoleucine, - N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentanoyl)- L-Valyl)- L
Isoleucyl- benzylamide, - N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentanoyl)- L-Tyrosyl)- L
Histidine, - N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentanoyl)- L-Tyrosyl)- L
Histidyl-benzylamide, - N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-sulfamoyl pentyl)-L-Tyrosyl)-L
Histidine, - N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 3-(3-sulfamoyl) phényl propanoyl)- L
Tyrosyl)- L-H istidyl-benzylamide, - N-(N-(2-mercapto, 3-amino, 5-carbamoyl pentanoyl)-L-ss(2- naphtyl)-Ala-L-ss(2-naphtyl)-Alanine, - N-(N-(2-mercapto, 3-amino, Scarbamoyî pentanoyl)-L-Trp)-L
Leucine.
10. Procédé de préparation d'un composé de formule générale (I) selon l'une des revendications 1 à 9 dans laquelle X représente un groupement carbonyle, CO, par couplage d'un acide de formule générale (Il)
dans laquelle: - P1 représente un groupement tertbutyloxycarbonyle ou benzyloxycarbonyle, - P2 représente un groupement 4-méthoxybenzyle ou 2,4 diméthoxybenzyle, - avec R1 étant défini selon la revendication 1,
avec une amine de formule générale (III)
dans laquelle:
R2 et R3, R5, R6 et Z sont définis selon la revendication 1,
dans un solvant organique, en présence d'un agent de couplage et d'une amine tertiaire à une température de l'ordre de 20"C.
11. Procédé de préparation d'un composé de formule générale (I) selon l'une des revendications 1, 2 et 8 dans laquelle X représente un groupement méthylène, CH2, par traitement d'une amine de formule générale (III) telle que définie en revendication 10 avec une aldéhyde de formule (IX)
dans laquelle R1, P1 et P2 sont définis selon la revendication 10 au sein d'un solvant organique et en présence d'un catalyseur.
12. Composition pharmaceutique, caractérisée en ce qu'elle comprend à titre de principe actif au moins un composé de formule générale (I) tel que défini en revendication 1 à 9.
13. Composition pharmaceutique selon la revendication 12 caractérisée en ce qu'elle comprend en outre au moins un véhicule pharmaceutiquement acceptable.
14. Composition pharmaceutique selon la revendication 12 ou 13, caractérisée en ce qu'elle comprend en outre au moins une toxine clostridiale.
15. Composition selon la revendication 13 caractérisée en ce qu'il s'agit d'une neurotoxine botulique ou tétanique.
16. Utilisation d'un composé de formule générale I selon l'une des revendications 1 à 9 pour détecter et/ou titrer l'activité de neurotoxines clostridiales dans des cibles musculaires.
17. Système de diagnostic pour détecter des neurotoxines clostridiales caractérisé en ce qu'il comprend au moins un composé de formule générale I selon l'une des revendications 1 à 9.
Priority Applications (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR9714104A FR2770844A1 (fr) | 1997-11-10 | 1997-11-10 | Inhibiteurs de toxines clostridiales et compositions pharmaceutiques les contenant |
| PCT/FR1998/002401 WO1999024461A1 (fr) | 1997-11-10 | 1998-11-10 | Inhibiteurs de toxines clostridiales et compositions pharmaceutiques les contenant |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FR9714104A FR2770844A1 (fr) | 1997-11-10 | 1997-11-10 | Inhibiteurs de toxines clostridiales et compositions pharmaceutiques les contenant |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FR2770844A1 true FR2770844A1 (fr) | 1999-05-14 |
Family
ID=9513219
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FR9714104A Pending FR2770844A1 (fr) | 1997-11-10 | 1997-11-10 | Inhibiteurs de toxines clostridiales et compositions pharmaceutiques les contenant |
Country Status (2)
| Country | Link |
|---|---|
| FR (1) | FR2770844A1 (fr) |
| WO (1) | WO1999024461A1 (fr) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2823212A1 (fr) * | 2001-04-10 | 2002-10-11 | Inst Nat Sante Rech Med | Inhibiteurs de la toxine botulique de type b |
| EP2337778A4 (fr) * | 2008-09-19 | 2012-05-09 | Absolute Science Inc | Procédés de traitement d'une affection liée à une toxine botulique chez un sujet |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2788526B1 (fr) * | 1999-01-20 | 2002-07-05 | Inst Nat Sante Rech Med | Composes tripeptidiques utiles a titre d'hinhibiteurs selectifs de l'aminopeptidase a et compositions pharmaceutiques correspondantes |
| US6777443B2 (en) | 2001-05-15 | 2004-08-17 | Novartis Ag | Dipeptide derivatives |
| WO2006134341A1 (fr) * | 2005-06-13 | 2006-12-21 | Merck Sharp & Dohme Limited | Agents therapeutiques |
| UA96768C2 (uk) * | 2006-08-02 | 2011-12-12 | Йоганес Гутенберг-Універсітет Майнц | Лікарський засіб від lct-отруєнь |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0181644A2 (fr) * | 1984-11-16 | 1986-05-21 | E.R. Squibb & Sons, Inc. | Peptides amino-thioles |
| EP0333000A2 (fr) * | 1988-03-16 | 1989-09-20 | ZAMBON GROUP S.p.A. | Peptides à activité inhibitrice de systèmes enzymatiques, leur procédé de préparation et compositions pharmaceutiques les contenant |
| EP0454302A2 (fr) * | 1990-03-30 | 1991-10-30 | Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. | Dérivés de tuftsin |
-
1997
- 1997-11-10 FR FR9714104A patent/FR2770844A1/fr active Pending
-
1998
- 1998-11-10 WO PCT/FR1998/002401 patent/WO1999024461A1/fr not_active Ceased
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0181644A2 (fr) * | 1984-11-16 | 1986-05-21 | E.R. Squibb & Sons, Inc. | Peptides amino-thioles |
| EP0333000A2 (fr) * | 1988-03-16 | 1989-09-20 | ZAMBON GROUP S.p.A. | Peptides à activité inhibitrice de systèmes enzymatiques, leur procédé de préparation et compositions pharmaceutiques les contenant |
| EP0454302A2 (fr) * | 1990-03-30 | 1991-10-30 | Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. | Dérivés de tuftsin |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| .M. GORDON ET AL: "Design of novel inhibitors of aminopeptidases. Synthesis of peptide-derived diamino thiols and sulfur replacements analogues of bestatin", JOURNAL OF MEDICINAL CHEMISTRY., vol. 91, 1988, WASHINGTON US, pages 2199 - 2211, XP002072921 * |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2823212A1 (fr) * | 2001-04-10 | 2002-10-11 | Inst Nat Sante Rech Med | Inhibiteurs de la toxine botulique de type b |
| WO2002083716A3 (fr) * | 2001-04-10 | 2003-01-09 | Inst Nat Sante Rech Med | Inhibiteurs de la toxine botulique de type b |
| EP2337778A4 (fr) * | 2008-09-19 | 2012-05-09 | Absolute Science Inc | Procédés de traitement d'une affection liée à une toxine botulique chez un sujet |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| WO1999024461A1 (fr) | 1999-05-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP0082088B1 (fr) | Nouveaux dérivés d'aminoacides, et leur application thérapeutique | |
| EP0038758B1 (fr) | Dérivés d'acides aminés et leur application thérapeutique | |
| MC1881A1 (fr) | Derives de l'acide phosphinique | |
| EP0274453A2 (fr) | Nouveaux composés à activité d'inhibiteurs de collagénase, procédé pour les préparer et compositions pharmaceutiques contenant ces composés | |
| JPH0629228B2 (ja) | ヒドロキシルアミン誘導体 | |
| MXPA98001093A (en) | Inhibitors of proteinase c for the treatment of diseases related to the overproduction of colag | |
| AU733420B2 (en) | Peptidyl-2-amino-1-hydroxyalkanesulfonic acid cysteine protease inhibitors | |
| FR2490632A1 (fr) | Derives de l-argininal et procede de preparation | |
| EP0487620B1 (fr) | Nouveaux derives d'amino-acides, leur procede de preparation et leur application therapeutique | |
| FR2577557A1 (fr) | Peptides et derives peptidiques, leur preparation, leur utilisation en therapeutique et compositions pharmaceutiques les contenant | |
| US4970297A (en) | Transglutaminase inhibitors | |
| CA2548448A1 (fr) | Nouveaux derives du 2-hydroxytetrahydrofuranne et leur application a titre de medicaments | |
| HU204539B (en) | Process for producing oligopeptides containing cyclic proline-analogue amino-acids and pharmaceutical compositions contaiing them as active components | |
| JP4023554B2 (ja) | アミノスルホン酸の誘導体、プソイドペプチドの合成における同誘導体の利用、およびその製造法 | |
| FR2770844A1 (fr) | Inhibiteurs de toxines clostridiales et compositions pharmaceutiques les contenant | |
| FR2605004A1 (fr) | Nouveaux derives d'amino-acides, leur procede de preparation et composition pharmaceutiques les contenant | |
| EP1140981B1 (fr) | Composes tripeptidiques utiles a titre d'inhibiteurs selectifs de l'aminopeptidase a et compositions pharmaceutiques correspondantes | |
| JPWO2015030106A1 (ja) | Ｇｇｔ阻害作用を有する化合物及びｇｇｔファミリー酵素阻害剤 | |
| FR2730235A1 (fr) | Nouveaux derives de peptides utilisables comme inhibiteur de l'endopeptidase a zinc 24-15 | |
| EP0354108A1 (fr) | Amino-acides et peptides présentant un résidu tyrosine modifiée, leur préparation et leur application comme médicaments | |
| CA2443811A1 (fr) | Inhibiteurs de la toxine botulique de type b | |
| EP0723974A1 (fr) | Dérivés de mercaptoalcanoyldipeptides, leur procédé de préparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent | |
| FR2676059A1 (fr) | Nouveaux derives de peptides utilisables comme inhibiteurs de collagenases bacteriennes. | |
| JPH05213990A (ja) | トリペプチド誘導体 | |
| FR2537131A1 (fr) | Nouveaux derives d'acides amines et leur application therapeutique |