FR2743809A1

FR2743809A1 - Ethers macrocycliques de la carpaine

Info

Publication number: FR2743809A1
Application number: FR9600532A
Authority: FR
Inventors: Jacques Fahy; Alain Duflos; Anna Kruczynski; Chantal Etievant; Bridget Hill; Francois Sartori
Original assignee: Pierre Fabre Medicament SA
Current assignee: Pierre Fabre Medicament SA
Priority date: 1996-01-18
Filing date: 1996-01-18
Publication date: 1997-07-25
Anticipated expiration: 2016-01-18
Also published as: FR2743809B1; AU1446997A; WO1997026263A1

Abstract

Nouveaux dérivés de la carpaïne de type éther, à activité cytotoxique, correspondant aux formules générales 1et 2: (CF DESSIN DANS BOPI) (CF DESSIN DANS BOPI) ainsi que leurs sels thérapeutiquement acceptables. L'invention concerne également l'application de ces dérivés en thérapeutique et leur préparation.

Description

NOUVEAUX ETHERS MACROCYCLIQUES DERIVES DE LA CARPAINE
La carpaïne est l'alcaloïde majoritaire des feuilles de Carica papaya. Ses propriétés pharmacologiques ont été étudiées, mais aucun effet majeur n'a pu être franchement révélé. Une activité cytotoxique in vitro a toutefois été décrite [L.

Oliveros-Belardo, Asian J: Pharm., 2, 26, (1972)], mais ce résultat n'a pas été exploité.

Dans le cadre de nos recherches de nouveaux anticancéreux d'origine naturelle, nous avons donc préparé une série de dérivés de la carpaine, que nous avons évalués sur des tests pharmacologiques (brevets FR 2702768 et FR 2704858). Ces nouveaux composés, en particulier les mono-amides représentés ci-dessous, montrent une cytotoxicité nettement supérieure à celle de la carpaïne [Proceedings ofthe 86th Annual
Meeting, American Association for Cancer Research, Toronto, Abstr. 2315, (1995)].

rnono-amlaes
Carpalne (brevet FR 2702768)
Par contre, nous n'avons pas observé de bonne corrélation entre les activités cytotoxiques in vitro et l'activité antitumorale chez l'animal. Nous avons alors supposé que les deux fonctions lactones du squelette de la carpaine peuvent être hydrolysées in vivo. Cela conduirait à des produits de type "monomères" qui seraient inactifs, ce que nous avons démontré: les dérivés schématisés ci-dessous n'exercent pas de cytotoxicité significative.

Dérivés "monomères"
Afin d'éviter ce phénomène, nous avons synthétisé une nouvelle famille de dérivés de type "éther" en réduisant sélectivement les fonctions lactones. Les dérivés obtenus possèdent la structure générale L et ont l'avantage de résister à ces éventuelles réactions d'hydrolyse.

La présente invention, réalisée au Centre de Recherche Pierre Fabre, a donc pour objet de nouveaux composés de formule générale l, leur préparation par hémisynthèse à partir de la carpaine et leur application en thérapeutique.

où R1 et R2 représentent:
soit tous deux un atome d'hydrogène (R1 = R2 = H),
soit R1 un atome d'hydrogène, et R2 un groupement A-Aryle, pour lequel:
- Aryle représente un noyau phényle, naphtyle ou benzothiényle,
substitué ou non par un ou plusieurs groupements halogène, méthyl,
méthoxy, trifluorométhyl ou trifluorométhoxy,
- A représente un groupe méthylène (CH2) ou un groupe carbonyle
(C=O),
soit tous deux un groupement Aryle (R1 = R2 = A-Aryle) comme défini ci
dessus.

ainsi que leurs sels thérapeutiquement acceptables.

L'invention concerne également les composés intermédiaires de formule 2, que l'on peut isoler lors des réactions de réduction, dans lesquels une seule fonction lactone a été réduite en fonction éther:

où R1 et R2 représentent:
- soit tous deux un atome d'hydrogène (R1 = R2 = H),
- soit tous deux un groupement CH2-Aryle, Aryle étant défini ci-dessus ainsi que leurs sels thérapeutiquement acceptables.

L'invention concerne plus particulièrement les produits de formule générale 1 choisis parmi les composés suivants -3,16-didéoxy-12,25-di(3,4,5-triméthoxybenzyl)-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne, -12,25-dibenzyl-3,1 6-didéoxy-3,3,16,1 6-tétrahydrocarpaïne, -3,16-didéoxy-3,3,1 6,1 6-tétrahydrocarpaïne, -12-benzoyl-3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne, -12,25-dibenzoyl-3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne, -3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydro-12-(3-trifluorométhylbenzoyl)carpaïne, -12-(4-chlorobenzoyl)-3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne, -12,25-di(4-chlorobenzoyl)-3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne, -3,lo-didéoxy-12 -(4-méthylbenzoyl)- 3,3,16,16 -tétrahydrocarpaïne, -3,16-didéoxy-12,25-di(4-méthylbenzoyl)-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne, -3,lo-didéoxy-l 2-(2-naphtoyl)-3,3, 16,1 6-tétrahydrocarpaine, -3,lo-didéoxy-l 2,25-di(2-naphtoyl)-3 ,3,16,1 6-tétrahydrocarpaïne, - 1 2-(3-chloro-2-benzo[b]thénoyl)-3, 1 6-didéoxy-3 ,3,16,l 6-tétrahydrocarpaine, - 1 2,25-di(3 -chloro-2-benzo [b]thénoyl)-3,1 6-didéoxy-3,3,16,1 o-tétrahydrocarpaïne, -3,16-didéoxy-12,25-di(2-trifluorométhoxybenzoyl)-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne, ainsi que leurs sels avec des acides minéraux ou organiques thérapeutiquement acceptables, en particulier le chlorhydrate, le tosylate et le maléate, pour les composés comportant une fonction amine libre.

L'invention concerne également plus particulièrement les produits de formule 2 choisis parmi les composés suivants - 3-déoxy-l -dibenzyl-3,3 -dihydrocarpaïne, -3-déoxy-3,3 -dihydrocarpaïne, ainsi que leurs sels avec des acides minéraux ou organique s thérapeutiquement acceptables, en particulier le chlorhydrate et le tosylate.

Nous avons remarqué que la réduction des fonctions lactones en fonctions éthers n'est réalisée de façon satisfaisante que si les deux amines secondaires de la carpäïne sont protégées sous forme d'amide. Ces composés protégés possèdent la structure générale 3 dans laquelle A représente une fonction carbonyle C=O, et Aryle un groupement aromatique comme défini ci-dessus. La préparation de ces dérivés est décrite dans le brevet FR 2704858. On peut les obtenir, par exemple, en faisant réagir la carpaine avec un chlorure d'acide de type Aryle-CO-C1, en présence de triéthylamine dans le dichlorométhane.

La réduction de lactone en éther n'est pas une réaction générale, et relativement peu d'exemples sont répertoriés dans la littérature. Seules les conditions décrites par H.

C. Brown et coll. [R Org. Chem, 47 3153, (1982)] utilisant le complexe borane diméthylsulfure nous ont permis d'accéder aux produits désirés avec de bons rendements.

En présence d'un excès de ce réaction, toutes les fonctions carbonyles (lactone et amide) des composés de formule générale 3 où A = C=O sont réduites. Cette réaction est donc effectuée en milieu anhydre et sous atmosphère inerte par action d'un excès du complexe borane - diméthylsulfure [BH3 : (CH3)2S] dans le tétrahydrofuranne, à une température comprise entre - 20 "C et le reflux du solvant utilisé, de préférence le tétrahydrofuranne. Les produits de formule d où A = C=O sont donc transformés en composés de formule 1 dans lesquels R1 = R2 = A-Aryle (A = CH2). Cette étape est schématisée ci-dessous

<tb> <SEP> H,C <SEP> O <SEP> Hz <SEP> BH <SEP> H3C
<tb> <SEP> A-N <SEP> kNA <SEP> b <SEP> 3 <SEP> o <SEP> CH,
<tb> ry'o/ <SEP> 000H <SEP> R1NH3
<tb>
3 : A = C=O 1: R1 = R2 = A-Aryle (A = CH2)
Le suivi de l'avancement de la réaction permet de mettre en évidence plusieurs composés intermédiaires, qui ont été isolés et caractérisés. Ceci est réalisé aisément si le milieu réactionnel est neutralisé avant la disparition complète du produit de départ 3 dans lequel A = C=O ou si la réaction est effectuée en présence d'un défaut de réactif de réduction. Chronologiquement, les fonctions amides réagissent les premières, conduisant à des dérivés de formule 3 dans lesquels A représente un groupe méthylène
(A = CH2). On isole ensuite les composés de formule 2 dans lesquels R1 et R2
représentent le groupement A-Aryle (A = CH2) précedemment défini. Cette suite de
réactions est schématisée ci-dessous

<tb> <SEP> H3C
<tb> <SEP> plyle <SEP> ~~~~~~~~~ <SEP> 0o
<tb> Aryle <SEP> ,A < YIê <SEP> t <SEP> CH,
<tb> <SEP> A-N <SEP> Aryle
<tb> Arylo
<tb> <SEP> Aryle
<tb> <SEP> H3
<tb> <SEP> 3 <SEP> :A=C=O <SEP> 3:A= <SEP> CH2
<tb> <SEP> | <SEP> [BH31
<tb> <SEP> H3C <SEP> O <SEP> Hz <SEP> { <SEP> t <SEP> 1BH31 <SEP> H3C <SEP> O
<tb> <SEP> R1-NN-R <SEP> R1-N0N-R
<tb> <SEP> OCH3 <SEP> OCN3
<tb>
1:R1=R2=A-Aryle (A=CH2) 2:R1=R2=A-Aryle (A=CH2)
La transformation des composés de formule 1 où R1 = R2 = A-Aryle (A
CH2) en dérivé où R1 = R2 = H est effectuée en présence d'un catalyseur comme le palladium supporté sur charbon, soit par action de l'hydrogène, à une pression comprise entre la pression atmosphérique et 8 bars, soit par action d'un agent donneur d'hydrogène comme l'hydrazine ou le formate d'ammonium, dans un solvant polaire, de
préférence le méthanol ou l'éthanol, et à une température comprise entre la température
ambiante et le reflux du solvant. Cette étape est schématisée ci-dessous

1: R1 =R2 =A-Aryle (A=CH2) 1: R1 =R2=H
Dans les même conditions, les dérivés de formule 2 dans lesquels R1 = R2 =
A-Aryle (A = CH2) sont transformés en dérivé de formule 2 dans lequel R1 = R2 = H, comme schématisé ci-dessous

2: R1 = R2 = A-Aryle (A = CH2) 2: R1 = R2 = H
Les composés de formule 1 dans lesquels R1 représente un atome d'hydrogène (R1 = H) et R2 représente un groupement A-Aryle où A est une fonction carbonyle (A = C=O) sont préparés à partir du composé de formule 1 dans lequel R1 et R2 représentent un atome d'hydrogène (R1 = R2 = H). Lors de la même réaction, on isole également les composés disubstitués de formule 1 dans lesquels R1 = R2 = A-Aryle (A = C=O). Cette étape est réalisée par l'action d'un chlorure d'acide de formule générale AryIe-A-CI, pour lequel A = C=O, dans un solvant inerte comme le tétrahydrofuranne
ou le dichlorométhane en présence d'une base comme une amine tertiaire, à une
température comprise entre 0 C et le reflux du solvant, suivant le schéma ci-dessous:

<tb> <SEP> H,C <SEP> 0 <SEP> <
<tb> <SEP> -NU <SEP> AN%
<tb> <SEP> 90 <SEP> CH,
<tb> <SEP> 1 <SEP> R1 <SEP> R2 <SEP> =H
<tb> <SEP> Aryle-A-CI
<tb> H,C <SEP> O <SEP> Hz <SEP> \;) <SEP> H,C <SEP> 0
<tb> RI <SEP> - <SEP> NN- <SEP> Ri <SEP> + <SEP> RI- <SEP> NN <SEP> -R2
<tb> <SEP> OCH3 <SEP> O <SEP> CH3
<tb>
L: R1 = H, R2 A-Aryle (A = C=O) 1: R1 =R2 = A-Aryle (A = C=O)
Les dérivés de formule générale 1 mono-substitués (R1 = H, R2 = A-Aryle, A =
C=O) et di-substitués (R1 = R2 = Aryle, A = C=O) sont ensuite séparés par chromatographie.

Les exemples suivants illustrent l'invention, sans toutefois en limiter la portée.

Les caractéristiques physico-chimiques et spectroscopiques confirment la structure des
composés obtenus selon l'invention.

EXEMPLES
Exemple 1:
Composé la: 3,16-didéoxy-12,25-di(3,4,5-triméthoxybenzyl)-3,3,16,16tétrahydrocarpaïne
R1 = R2 = 3,4,5-triméthoxybenzyl
Dans un ballon de 10 ml surmonté d'un réfrigérant et placé sous courant d'azote, on solubilise dans 2 ml de THF sec 250 mg (0,28 mmoles) de 12,25-di(3,4,5 triméthoxybenzoyl)carpaïne, préparée suivant la méthode décrite dans le brevet FR 2704858. On ajoute ensuite 1,4 ml (2,8 mmoles) d'une solution 2 M de complexe [BH3:(CH3)2S] dans le THF. Après 5 heures environ de chauffage à reflux, le mélange est versé dans 100 ml d'une solution saturée de chlorure d'ammonium, que l'on extrait par 3 fois 20 ml de dichlorométhane. La phase organique est séparée, séchée sur
MgSO4, filtrée et évaporée. Le résidu huileux obtenu est purifié par chromatographie sur colonne de silice éluée par un mélange C6 H14 : Et2O : AcOEt (50 : 47 : 3). La 3,16-didéoxy-l 2,25-di(3,4,5-triméthoxybenzyl)-3,3, 16,1 o-tétrahydrocarpaïne la (140 mg; 61 %) est ainsi récupérée sous forme d'huile incolore.

C48H78N2O8:811,15
Pt de fusion: (huile) IR(KBr): 2932, 2855, 1591 , 1504, 1460, 1419, 1329, 1232, 1128, 1012 cm-1.

RMN 1H (200 MHz, CDCl3): 1,07 (d, J = 6,7 Hz, 6 H); 1,26 - 1,83 (massif, 36 H); 2,52 (m, 2 H); 2,95 (m, 2 H); 3,31 - 3,39 (m, 6 H); 3,74 - 3,84 (m, 4 H); 3,84 (s, 12 H); 3,86 (s, 6 H); 6,61 (s, 4 H).

RMN 13C (50,3 MHz, CDCl3): 14,47 24,13 25,64 25,92 27,37 28,31 28,85 29,34 29,79 32,29 54,50 56,07 56,92 59,05 60,94 67,95 77,61 104,72 136,26 137,47 152,99.

Spectre de masse (Impact Electronique): m/e = 810 (M+), 697, 629, 449, 406,260, 181 (100%), 84.

Exemple 2:
Composé lb:12,25-dibenzyl-3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne
R1 = R2 = Aryle, A = CH2, Aryle = phényl
Ce composé est préparé suivant les conditions opératoires décrites à l'Exemple 1, en utilisant comme produit de départ la 12,25-dibenzoylcarpaïne, préparée suivant la méthode décrite dans le brevet FR 2704858, à la place de la 12,25-di(3,4,5 triméthoxybenzoyl)carpaïne. La purification est effectuée par chromatographie sur colonne de silice éluée par un mélange C6H14 : AcOEt : MeOH (4 : 2 1). On récupère ainsi la 12,25-dibenzyl-3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne lb avec un rendement de 60 %.

C42 H66 N2 O2: 630,99
Pt de fusion: (buile)
IR (KBr): 2932, 2855, 1452, 1371, 1344, 1101, 738 cm-1
RMN 1H (200 MHz, CDCl3): 1,32 - 1,62 (massif, 39 H); 2,31 (massif, 4 H); 3,65 (s, 18 H); 4,21 (m, 1 H); 4,69 (m, 1 H); 4,99 (massif, 3 H); 6,54 (s, 4 H).

RMN 13C (50,3 MHz, CDCl3),: 14,85 24,64 24,94 25,94 27,31 28,40 28,83 29,37 29,83 32,56 53,63 56,33 57,30 59,63 68,12 77,53 126,41 128,14 128,35 141,60.

Spectre de masse (D/CI dans NH3): 631 (MH+)
Exemple 3:
Composé 1c: 3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne
R1=R2=H
On solubilise 800 mg (1,26 mmoles) de composé 1b préparé à l'Exemple 2 dans 30 ml méthanol absolu, auxquels on ajoute 90 mg de palladium sur charbon à 10 %. Le mélange est ensuite placé sous atmosphère d'hydrogène. Après 24 heures d'agitation, le milieu réactionnel est filtré sur Célite et le solvant est évaporé. Le résidu huileux obtenu est purifié par chromatographie sur colonne de silice éluée par un mélange CHCl3
EtOH (90 10) puis (85 : 15). La 3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne k c ainsi recueillie (480 mg; 84 %) peut être ensuite salifiée sous forme de dichlorhydrate hydraté, de ditosylate ou de dimaléate.

# Dichlorhydrate: C28H54N2O2.2HCl, 1 H2O:541,67
Analyse élémentaire:
%Calc. C62,08 H 10,79 N 5,17
% Tr. C 62,27 H 10,57 N 5,18
Pt de fusion: > 260 C
IR (KBr): 3439,2934,2856, 1560, 1458, 1381 , 1340, 1095, 1006 cm-1.

Ditosylate : C28 H54 N2 O2. 2(C7H8O3S) : 795,14
Analyse élémentaire:
%Calc. C 63,44 H 8,87 N 3,52
% Tr. C 63,17 H 8,89 N 3,58
Pt de fusion: > 260 C
IR (KBr): 2932, 2856, 1599, 1460, 1251, 1219, 1161, 1120, 1029, 1010 cm-1.

# Dimaléate: C28H54N2O2.2(C4H4O4), 1 H2O:700,89
Analyse élémentaire:
% Calc. C 61,69 H 9,20 N 3,99
%Tr. C61,60 H 9,14 N 4,06
Pt de fusion: 160 C IR(KBr): 3427,3167,2937,2855, 1701, 1577, 1468, 1361 , 1194, 1105, 1087, 1001 cm-1.

RMN 1H (200 MHz, CDC13) sur la base: 1,07 (d,J=6,7 Hz, 6H); 1,22 - 1,41 (massif, 36 H); 2,06 (t, J= 3,1 Hz, 1 H); 2,11 (t, J = 3,1 Hz, 1 H); 2,54 (m, 2 H); 2,69 (q, J= 6,34 Hz, 2 H); 3,07 (s large, 2 H); 3,27 (m, 2
H); 3,44 (m, 2 H).

RMN 13C (50,3 MHz, CDCl3) sur la base: 18,67 25,52 26,98 27,25 29,31 29,49 29,92 30,07 37,16 54,96 55,97 67,94 74,16
Spectre de masse (F.A.B.): 451 (MH+)
Exemple 4:
Composé 1c: 3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne
R1=R2=H
On dissout 8,2 g (13 mmoles) du composé 1b, préparé suivant l'Exemple 2, dans 100 ml méthanol absolu contenant 1 g de palladium sur charbon (5 %). On y ajoute 6,5 ml (130 mmoles) d'hydrate d'hydrazine, et on porte le tout à reflux pendant trois heures. Le mélange est alors filtré sur Célite, concentré sous vide et extrait au dichlorométhane. La phase organique est séchée sur MgSO4 et évaporée. Le résidu est purifié sur colonne de silice dans les conditions décrites à l'Exemple 3. La 3,16 didéoxy-3,3,16,1 o-tétrahydrocarpaïne 1c recueillie possède les mêmes caractéristiques que décrites à l'Exemple 3, et est ensuite salifiée sous forme de dichlorhydrate (6,3 g; 94 %).

Exemple 5:
Composé 1f : 3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydro-12-(3-trifluorométhylbenzoyl)carpaïne
R1 = H, R2 = A-Aryle, A = C=O, Aryle = 3-trifluorométhylphényl
Dans un ballon de 50 ml, on introduit 700 mg (1,55 mmoles) de composé k (sous forme de base libre) dissous dans 15 ml de dichlorométhane. On place le ballon sous agitation, dans un bain de glace et sous atmosphère d'azote, et on y ajoute 0,22 ml (1,58 mmoles) de triéthylamine, puis on verse goutte-à-goutte une solution de 0,23 ml (1,52 mmoles) de chlorure d'acide 3-trifluorométhylbenzoïque dans 3 ml de dichlorométhane.

Après une heure d'agitation, on lave le milieu réactionnel par 2 fois 15 ml d'acide tartrique à 3 % dans l'eau. La phase organique est séparée, séchée sur MgSO4, filtrée et évaporée. Le résidu huileux obtenu est purifié par chromatographie sur colonne de silice éluée par un mélange Et2O : AcOEt : MeOH (4 : 2 : 0,5). On recueille ainsi 190 mg (19 %) de 3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydro-12-(3- trifluorométhylbenzoyl)carpame 1f, que l'on salifie par addition d'un équivalent d'acide para-toluènesulfonique.

C36 H57 N2 O3 F3 . C7H8O3S : 795,04
Analyse élémentaire:
% Calc. C 64,96 H 8,24 N 3,52
%Tr. C64,14 H 8,18 N 3,55
Pt de fusion: 182 C
IR(KBr): 2936,2858, 1631, 1419, 1358, 1323, 1234, 1163, 1122, 1032, 1008 cm-l
RMN 1H (200 MHz, CDCl3) sur la base: 1,22 - 1,69 (massif, 45 H); 3,01 - 3,49 (massif, 8 H); 7,54 - 7,66 (massif, 4 H).

Exemple 6:
Composé 1k: 3,16-didéoxy-12-(2-naphtoyl)-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne
R1 = H, R2 = A-Aryle, A = C=O, Aryle = 2-naphtyl
Dans un ballon de 50 ml, on introduit 700 mg (1,55 mmoles) de composé li (sous forme de base libre) dissous dans 15 ml de dichlorométhane. On place le ballon sous agitation et sous atmosphère d'azote, et on y ajoute 0,25 ml (1,86 mmoles) de triéthylamine, puis goutte-à-goutte une solution de 237 mg (1,24 mmoles) de chlorure d'acide 2-naphtoïque dans 3 ml de dichlorométhane.

Après trois heures d'agitation à température ambiante, on lave le milieu réactionnel par 2 fois 15 ml d'acide tartrique à 3 % dans l'eau. La phase organique est séparée, séchée sur MgSO4, filtrée et évaporée. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur colonne de silice éluée par un mélange Et2O : AcOEt : MeOH (3 2 1). On recueille ainsi 240 mg (25 %) de 3,16-didéoxy-12-(2-naphtoyl)-3,3,16,16- tétrahydrocarpaïne 1k, que l'on salifie sous forme de chlorhydrate par addition d'une solution d'HCl dans l'éthanol. Après précipitation par de l'éther éthylique et filtration, le produit est obtenu sous forme de poudre blanche hygroscopique.

C39 H60 N2 O3. HCl, 1,5 H2O: 668,40
Analyse élémentaire:
% Calc. C 70,08 H 9,65 N 4,19
%Tr. C70,21 H 9,31 N 4,30
Pt de fusion: 181 C
IR (KBr): 3429, 2934, 2856, 1624, 1570, 1473, 1415, 1352, 1340, 1309, 1097, 1016 cm-1
RMN 1H (200 MHz, CDCl3) sur la base: 1,19 - 1,78 (massif, 42 H); 2,02 - 2,25 (massif, 3 H); 3,12 - 3,50 (massif, 8 H); 7,46 7,55 (massif, 3 H); 7,83 - 7,86 (massif, 4 H).

Exemple 7:
Composé lm m 12-(3-chloro-2-benzo[b]thénoyl)-3,16-didéoxy-3,3,16,16- tétrahydrocarpaine
R1 = H, R2 = A-Aryle, A = C=O, Aryle = 3-chloro-2-benzo[b]thiényl
Dans un ballon de 50 ml, on introduit 700 mg (1,55 mmoles) de composé li (sous forme de base libre) dissous dans 15 ml de dichlorométhane. On place le ballon sous agitation et sous atmosphère d'azote, et on y ajoute 0,30 ml (2,15 mmoles) de triéthylamine, puis goutte-à-goutte une solution de 300 mg (1,29 mmoles) de chlorure d'acide 3-chloro-2-benzo[b]thiophène carboxylique dans 3 ml de tétrahydrofuranne.

Après deux heures d'agitation à température ambiante, on lave le milieu réactionnel par 2 fois 15 ml d'acide tartrique à 5 % dans l'eau. La phase organique est séparée, séchée sur MgSO4, filtrée et évaporée. Le résidu obtenu est purifié par chromatographie sur colonne de silice éluée par un mélange C6H14 : AcOEt : MeOH (3 : 2 1). On recueille ainsi 165 mg (16 %) de 12-(3-chloro-2-benzo[b]thénoyl)-3,16- didéoxy-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne lm que l'on salifie sous forme de tosylate par addition d'une quantité stoechiométrique d'acide para-toluènesulfonique.

C35H57ClN2O3S.C7H8O3S:817,58
Analyse élémentaire:
%Calc. C64,63 H 8,01 N 3,42
% Tr. C 64,47 H 8,02 N 3,52
Pt de fusion: 194 C
IR (KBr): 3433, 2930, 2855, 1647, 1458, 1414, 1340, 1226, 1172, 1124, 1033, 1016 cm-1
RMN 1H (200 MHz, CDC13) sur la base: 1,17 - 1,74 (massif, 45 H); 2,86 - 3,07 (massif, 2 H); 3,41 (massif, 6 H); 7,41 - 7,49 (m, 2 H); 7,78 (m, 2 H).

Exemple 8:
Composé 1n: 12,25-di(3-chloro-2-benzo[b]thénoyl)-3,16-didéoxy-3,3,16,16
tétrahydrocarpaïne
R1 = R2 = A-Aryle, A = C=O, Aryle = 3-chloro-2-benzo[b]thiényl
Lors de la séparation par chromatographie sur colonne du mélange réactionnel obtenu à l'Exemple 7, on récupère aux premières fractions le dérivé disubstitué 12,25di(3-chloro-2-benzo[b]thénoyl)-3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne 1n sous forme de solide vitreux.

C46 H60 N2 O4 Cl2 S2: 840,02
Analyse élémentaire:
% Calc. C 65,77 H 7,20 N 3,33 Cl 8,44
% Tr. C 65,47 H 7,02 N 3,52Cl 8,51
Pt de fusion: 106 C
IR(KBr): 3429,2930,2854,1635,1521 ,1416, 1347, 1306, 1252, 1110 cm-1
RMN 1H (200 MHz, CDCl3) sur la base: 1,16 - 1,37 (massif 41 H); 1,76 (massif 4 H); 3,48 (massif 3 H); 3,79 (m, 1H); 4,18 (m, 1H); 4,74 (m, 1H); 5,16 (m, 1H); 7,45 - 7,52 (m, 4 H); 7,81 (m, 4 H).

Exemple 9:
Composé 2a: 3-déoxy-12,25-dibenzyl-3,3, -dihydrocarpaine
R1 = R2 = A-Aryle, A = CH2, Aryle = phényl
Dans un ballon de 250 ml surmonté d'un réfrigérant et placé sous courant d'azote, on solubilise dans 60 ml de THF sec 26 g (38 mmoles) de 12,25 dibenzoylcarpaine, préparée suivant la méthode décrite dans le brevet FR 2704858. On ajoute ensuite 100 ml (1 mole) d'une solution 10 M de complexe [BH3:(CH3)2S] dans le THF. Après 5 heures d'agitation à température ambiante, le mélange est versé petit à petit dans 700 ml de méthanol refroidi à 0 C. Le mélange est ensuite concentré sous vide, et dilué par 300 ml de solution saturée de NH4Cl. Après extraction par 2 fois 150 ml de dichlorométhane, la phase organique est séparée, séchée sur MgSO4, filtrée et évaporée. Le résidu huileux obtenu est purifié par chromatographie sur colonne de silice éluée par un mélange Hexane : AcOEt : MeOH (4 : 2 1). On récupère d'abord la 3,1 6-didéoxy-12,25-dibenzyl-3,3, 16,1 o-tétrahydrocarpaïne la, puis la 3-déoxy-12,25- dibenzyl-3,3-dihydrocarparne 2a, que l'on obtient pure après un second passage sur colonne de silice éluée par un mélange CHCl3 : EtOH (99 1). Rendement : 35 %. Ce composé peut être isolé sous forme de dichlorhydrate hygroscopique par addition de 2 équivalents d'HCl en solution dans l'éthanol absolu.

C42 H64 N2 O3. 2 HCl , 2,5 H2O : 762,94
Analyse élémentaire:
%Calc. C66,12 H 9,37 N 3,67
%Tr. C65,98 H 9,15 N 3,61 Pt de fusion : (colle)
RMN 1H (base libre, 200 MHz, CDCl3): 1,07 (d, J = 6,3 Hz, 3 H); 1,13 (d, J = 6,3 Hz, 3 H); 1,27 - 1,69 (massif 35 H); 1,84 (massif 2 H); 2,35 (m, 2 H); 2,53 (m, 2 H); 2,88 (m, 1 H); 3,30 (m, 1 H); 3,39 (massif 2 H); 3,73 - 3,95 (m, 2 H); 4,88 (m, 1 H); 7,17 - 7,39 (massif 10 H).

Exemple 10:
Composé 2b: 3-déoxy-3,3-dihydrocarpaïne
R1=R2=H
On dissout 760 mg (1,18 mmoles) du composé 2a, préparé suivant l'Exemple 8, dans 20 ml de méthanol absolu contenant 250 mg de palladium sur charbon (5 %) et 300 mg (4,76 mmoles) de formate d'ammonium. On laisse sous agitation 16 heures à température ambiante. Le mélange est alors filtré sur Célite, concentré sous vide et partagé entre 50 ml de Na2C03 à 10 % et 100 ml de dichlorométhane. La phase organique est séchée sur MgSO4 et évaporée. On recueille 530 mg (96 %) de 3-déoxy3,3-dihydrocarpaïne 2b sous forme d'huile, que l'on peut isoler sous forme de ditosylate hydraté.

C28 H52 N2 O3. 2(C7 H8 3 S), 1 H2O: 827,16
Analyse élémentaire:
%Calc. C 60,98 H 8,52 N 3,38
% Tr. C 61,13 H 8,36 N 3,51
Pt de fusion: > 260 C
IR(KBr): 3017,2934,2858,1734, 1597,1460,1338,1250, 1217,1155,1120,1030, 1010 cm-1
RMN 1H (base libre, 200 MHz, CDCl3): 1,02 (d, J = 6,4 Hz, 3 H); 1,07 (d, J = 6,4 Hz, 3 H); 1,29 - 1,66 (massif, 34 H); 1,95 2,10 (massif, 2H); 2,30 (m, 2H); 2,54 (m, 2 H); 2,70 (m, 1 H); 2,84 (m, 1H); 3,07 (m, 1H); 3,28 (m, 1H); 3,43 (m, 1H); 4,73 (m, 1H).

Le tableau I résume les principaux produits synthétisés qui illustrent l'invention, sans toutefois en limiter la portée.

<SEP> ron <SEP> R <SEP> R <SEP> point <SEP> de
<tb> <SEP> n <SEP> 1 <SEP> 2 <SEP> R2 <SEP> A <SEP> Aryle <SEP> Sel <SEP> fusion <SEP> ( C)
<tb> <SEP> OMe
<tb> la <SEP> | <SEP> A-Aryle <SEP> A-Aryle <SEP> CH2 <SEP> OMe <SEP> OM <SEP> (huile)
<tb> <SEP> OMe
<tb> <SEP> lb <SEP> A-Aryle <SEP> A-Aryle <SEP> CH2 <SEP> \t <SEP> (huile)
<tb> <SEP> lc <SEP> H <SEP> H <SEP> - <SEP> dimaléate(b) <SEP> 160
<tb> <SEP> ld <SEP> H <SEP> A-Aryle <SEP> C=O <SEP> chlorhydrate(b) <SEP> 130
<tb> <SEP> le <SEP> A-Aryle <SEP> A-Aryle <SEP> C=O <SEP> Hz <SEP> 70
<tb> <SEP> 1f <SEP> H <SEP> A-Aryle <SEP> C=O <SEP> ÉÉ <SEP> CF <SEP> tosylate <SEP> 182
<tb> <SEP> 1 <SEP> g <SEP> H <SEP> A-Aryle <SEP> C=O <SEP> \Xs <SEP> o <SEP> tosylate(a) <SEP> 198
<tb> <SEP> 1h <SEP> A-Aryle <SEP> A-Aryle <SEP> CO <SEP> \[Ss <SEP> 76
<tb> <SEP> li <SEP> H <SEP> A-Aryle <SEP> CO <SEP> 43 <SEP> tosylate <SEP> 185
<tb> <SEP> lj <SEP> A-Aryle <SEP> A-Aryle <SEP> C=O <SEP> 70
<tb> <SEP> 1k <SEP> H <SEP> A-Aryle <SEP> CO <SEP> Hz <SEP> chlorhydrate(c) <SEP> 181
<tb> <SEP> li <SEP> A-Aryle <SEP> A-Aryle <SEP> C=O <SEP> < 3 <SEP> 82
<tb> <SEP> CI
<tb> <SEP> lm <SEP> H <SEP> A-Aryle <SEP> C=O <SEP> t3 <SEP> tosylate <SEP> 194
<tb> <SEP> CI
<tb> <SEP> ln <SEP> A-Aryle <SEP> A-Aryle <SEP> C=O <SEP> < <SEP> 106
<tb> <SEP> lo <SEP> A-Aryle <SEP> A-Aryle <SEP> C=O <SEP> À <SEP> 68
<tb> <SEP> 2a <SEP> A-Aryle <SEP> A-Aryle <SEP> CH <SEP> 2 <SEP> Hz <SEP> dichlorhydrate(d) <SEP> (colle)
<tb> <SEP> 2b <SEP> | <SEP> H <SEP> H <SEP> - <SEP> ditosylate(b) <SEP> > <SEP> 260
<tb> (a): 0,5 H2O (b): 1 H2O (c): 1,5 H2O (d): 2,5 H2O
Les composés de formule générale 1 et de formule générale 2, préparés suivant l'invention, ont été soumis à des essais pharmacologiques au Centre de Recherche
Pierre Fabre (Castres, France). En particulier, les propriétés cytotoxiques de ces composés ont été évaluées sur un test in vitro qui consiste à mesurer l'inhibition de croissance de cellules de leucémie murine L1210 en présence de ces dérivés. Les résultats sont exprimés par une IC50, qui correspond à la concentration en produit testé qui inhibe à 50 % la croissance de ces cellules.

A titre d'exemple, le tableau II regroupe les valeurs d'ICso pour certains dérivés de l'invention:

<tb> <SEP> Produit <SEP> n <SEP> 1c <SEP> 1d <SEP> 1g <SEP> 1k <SEP> 2b <SEP> Carpaïne
<tb> L1210 <SEP> IC <SEP> 50(uM) <SEP> 0,7 <SEP> 3,5 <SEP> 4,0 <SEP> 4,0 <SEP> 4,8 <SEP> 13,9
<tb>
Tableau II
Aussi, compte-tenu de ces propriétés pharmacologiques, les composés de l'invention peuvent être utilisés en thérapeutique humaine, en particulier dans le

Claims

REVENDICATIONS

dessus, ainsi que leurs sels avec des acides minéraux ou organiques thérapeutiquement acceptables.

e soit tous deux un groupement A-Aryle (R1 = R2 = A-Aryle) comme défini ci

(C=O),

- A représente un groupe méthylène (CH2) ou un groupe carbonyle

méthoxy, trifluorométhyl ou trifluorométhoxy,

substitué ou non par un ou plusieurs groupements halogène, méthyl,

- Aryle représente un noyau phényle, naphtyle ou benzothiényle,

e soit R1 un atome d'hydrogène, et R2 un groupement A-Aryle, pour lequel:

o soit tous deux un atome d'hydrogène (R1 = R2 = H),

dans laquelle R1 et R2 représentent:

1)Nouveaux dérivés cytotoxiques, de type di-éthers de la carpaine, correspondant à la formule générale 1:
2) Composés de formule générale 1 selon la revendication 1, caractérisés par le fait qu'ils sont choisis parmi - 3,16-didéoxy- 12,25 -di(3 ,4,5-triméthoxybenzyl)-3 ,3,16,1 6-tétrahydrocarpaïne, 12,25-dibenzyl-3,1 6-didéoxy-3,3,16,1 6-tétrahydrocarpaine, -3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne, -12-benzoyl-3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne, -12,25-dibenzoyl-3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne, - 3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydro- 12-(3 -trifluorométhylbenzoyl)carpalne, - 12-(4-chlorobenzoyl)-3,1 6-didéoxy-3,3,16,1 6-tétrahydrocarpaine, -12,25-di(4-chlorobenzoyl)-3,16-didéoxy-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne, -3,16-didéoxy-12-(4-méthylbenzoyl)-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne, -3,16-didéoxy-12,25-di(4-méthylbenzoyl)-3,3,16,16-térahydrocarpaïne, -3,16-didéoxy-12-(2-naphtoyl)-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne, -3,16-didéoxy-12,25-di(2-naphtoyl)-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne, -12-(3 -chloro-2-benzo [b]thénoyl)-3,1 6-didéoxy-3,3,16,1 o-tétrahydrocarpaïne, - 1 2,25-di(3-chloro-2-benzo[b]thénoyl)-3, 1 6-didéoxy-3 ,3,16,1 6-tétrahydrocarpaine, -3,16-didéoxy-12,25-di(2-trifluorométhoxybenzoyl)-3,3,16,16-tétrahydrocarpaïne.
3) Nouveaux dérivés cytotoxiques, de type mono-éthers de la carpaine, correspondant à la formule générale 2:

dans laquelle R1 et R2 représentent:

'soit tous deux un atome d'hydrogène (R1 = R2 = H),

e soit tous deux un groupement CH2-Aryle, Aryle étant défini ci-dessus, ainsi que leurs sels avec des acides minéraux ou organiques thérapeutiquement acceptables.
4) Composés de formule générale 2 selon la revendication 3, caractérisés par le fait qu'ils sont choisis parmi - 3 -déoxy- 12,25 -dibenz:yl-3 ,3 -dihydrocarpaine, - 3-déoxy-3 ,3-dihydrocarpaine, ainsi que leurs sels avec des acides minéraux ou organiques thérapeutiquement acceptables.
5) Procédé de préparation de composés selon les revendications 1 et 2, caractérisé en ce que l'on fait réagir un di-amide de la carpaine de formule générale 3 avec le complexe borane - diméthylsulfure [BH3 : (CH3)2S] dans le tétrahydrofuranne, à une température comprise entre - 20 C et le reflux du solvant, selon le schéma:

3: A=C=O 1: R1 =R2=A-Aryle (A=CH2) où A, Aryle, R1 et R2 sont définis comme ci-dessus.

<tb>

<tb> <SEP> 3 <SEP> OC <SEP> H3

<tb> Aryle <SEP> 0OCH

<tb> <SEP> kr. <SEP> N-A/ <SEP> 3 <SEP> Rj-NN

<tb> <SEP> H3C <SEP> 00Aryle <SEP> [BH31 <SEP> O
6) Procédé de préparation de composés selon les revendications 3 et 4 caractérisé en ce que l'on fait réagir un di-amide de la carpaine de formule générale 3 avec le complexe borane - diméthylsulfure [BH3 : (CH3)2S] dans le tétrahydrofuranne, à une température comprise entre - 20 C et la température ambiante, et que l'on isole les composés intermédiaires de formule générale 2 selon le schéma:

2: R1 = R2 =CH2-Aryle où A, Aryle, R1 et R2 sont définis comme ci-dessus.

<tb>

<tb> <SEP> R, <SEP> - <SEP> NC <SEP> j <SEP> çN <SEP> - <SEP> R,

<tb> <SEP> H3C <SEP> O <SEP> / <

<tb> <SEP> 3: <SEP> A <SEP> = <SEP> C=O <SEP> 1BHS <SEP> 3:A=CH2

<tb> <SEP> 3 <SEP> OCH

<tb> <SEP> OCH <SEP> AiyIe <SEP> o

<tb> ryle <SEP> 0N

<tb> <SEP> Aryle

<tb> <SEP> A-N <SEP> -A1 <SEP> lBH3l <SEP> 0N <SEP> I

<tb> <SEP> H,CX <SEP> Ays <SEP> H3C <SEP> O <SEP> "X <SEP> Aryle
7) Procédé de préparation de composés selon les revendications 1 et 2, caractérisé en ce que l'on fait réagir un dérivé de formule 1, dans lesquels R1 et R2 représentent un groupement A-Aryle (A = CH2), en présence d'un catalyseur d'hydrogénation comme le palladium supporté sur charbon et d'un réactif générateur d'hydrogène, selon le

schéma:

1: R1 = R2 =A-Aryle(A=CH2) 1: R1 = R2 = H
8) Procédé de préparation de composés selon les revendications 3 et 4, caractérisé en ce que l'on fait réagir un dérivé de formule 2 dans lesquels R1 et R2 représentent un groupement CH2-Aryle, en présence d'un catalyseur d'hydrogénation comme le palladium supporté sur charbon et d'un réactif générateur d'hydrogène, selon le schéma

2: R1 =R2=CH2-Aryle 2: R1 = R2 = H
9) Procédé de préparation de composés selon les revendications 7 et 8, caractérisé en ce que le réactif générateur d'hydrogène peut être choisi parmi l'hydrogène lui-même, à une pression comprise entre la pression atmosphérique et 8 bars, l'hydrazine ou le formate d'ammonium, en solution dans un solvant polaire comme méthanol ou le méthanol, à une température comprise entre la température ambiante et le reflux du solvant.
10) Procédé de préparation de composés selon les revendications 1 et 2, caractérisé en ce que l'on fait réagir le dérivé de formule 1 dans lequel R1 et R2 représentent un atome d'hydrogène avec un chlorure d'acide de formule générale Aryle-A-C1, dans un solvant inerte comme le dichlorométhane ou le tétrahydrofuranne à une température comprise entre 0 "C et le reflux du solvant, suivant le schéma:

1: R1 = H, R2 = A-Aryle (A = C=O) 1 : R1 = R2 = A-Aryle (A = C=O)
11) Procédé de préparation de composés selon les revendications 1 et 2, caractérisé en ce que l'on sépare les dérivés de formule 1 mono-substitués (R1 = H, R2 = A-Aryle, A = C=O) des dérivés de formule 1 di-substitués (R1 = R2 = A-Aryle, A = C=O) par chromatographie.

<tb>

<tb> <SEP> OCH3 <SEP> OCH3

<tb> RlH$NONR2 <SEP> +

<tb> <SEP> 1

<tb> <SEP> Aryle-A-CI

<tb> <SEP> 1: <SEP> R1 <SEP> R2 <SEP> = <SEP> H

<tb> <SEP> / <SEP> O <SEP> CH3

<SEP> HIC1r'' <SEP>
12) A titre de médicaments nouveaux utiles en thérapeutique humaine, en particulier dans le traitement de la pathologie cancéreuse, les composés définis selon l'une des revendications 1, 2, 3 et 4.
13) Composition pharmaceutique caractérisée en ce qu'elle contient à titre de principe actif au moins un des composés selon les revendications 1, 2, 3 et 4, associé à un véhicule pharmaceutiquement acceptable.