FI90418B - Menetelmä lääkeaineina käyttökelpoisten perhydrotiatsepiini- ja perhydroatsepiinijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

9041 8

Menetelmä lääkeaineina käyttökelpoisten perhydrotiatsepiini- ja perhydroatsepiinijohdannaisten valmistamiseksi Förfarande för framställning av derivat av perhydrotiazepin och 5 perhydroazepin, som är användbara som läkemedel

Keksinnön kohteena on prosessi lääkeaineina käytettävien yhdisteiden, 10 joilla on kaava (I): .Yv R2 CQOH ( 15 | (I) a-ch-hh—k. y

/ I

o B-COOH

20 [missä: A tarkoittaa ryhmää, jolla on kaava (i): 25

Hj K—Z — (i! 30 tai ryhmää, jolla on kaava (ii): H_N CH-W- (ui ^-!CH2)n-^ 2 90418 jossa: Z tarkoittaa C^-Cg alkyleeniryhmää; 5 W tarkoittaa Cj^-Cg alkyleeniryhmää; ja m ja n ovat kokonaisluku 1 tai 2 kuitenkin niin, että summa m+n on kokonaisluku 3 tai kokonaisluku 4; 10 R2 tarkoittaa fenyyliä, tienyyliä tai furyyliä; B tarkoittaa alkyleeniryhmää; Y tarkoittaa rikkiatomia tai metyleeniryhmää; 15 ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen ja alempien alkyy-liestereiden valmistamiseksi.

Esilläoleva keksintö liittyy sarjaan perhydrotiatsepiini- ja perhydro-20 atsepiinijohdannaisia, joilla on arvokas kyky alentaa verenpainetta ja siten niillä on potentiaalista käyttöä kohonneesta verenpaineesta kärsivien ihmisten ja muiden eläinten käsittelyssä.

On olemassa melkoisesti näyttöä siitä, että kohonneen verenpaineen 25 alentaminen vähentää sairastuvuus- ja kuolleisuusriskiä. Verenpaineen kohoamista (hypertension) voi aiheuttaa joukko tekijöitä ja sen hoitoon on saatavilla suuri joukko lääkkeitä, joiden valinnan sanelee suurelta osin verenpaineen kohoamisen syy samoinkuin sen aste ja potilaan vastaanottokyky käsittelylle. Eräs tunnetuista verenpaineen koho-30 amisen syistä on veriplasmassa oleva angiotensiini II-niminen polypep-tidi ja angiotensiini II-tason alentamisen veriplasmassa on osoitettu alentavan verenpainetta. Ensimmäinen aste angiotensiini II:n syntymisessä nisäkkään kehossa on veriptoteiinin muuttuminen entsyymireniinin vaikutuksesta "angiotensiini I"-nimiseksi polypeptidiksi. Tämä angio-35 tensiini I muuttuu sitten angiotensiiniä muuttavan entsyymin (johon tästä lähtien viitataan tavanomaisella lyhenteellä "ACE") vaikutuksesta angiotensiini II:ksi. Entsyymi ACE:llä on toinenkin metabolinen 3 90418 vaikutus, nimittäin osallistuminen bradykiniinin, luonnollisen verisuonten laajentajan metabolismiin, mikä muuttaa sen ei-aktiiviseksi aineenvaihduntatuotteeksi.

5 Siitä johtuen entsyymi ACE kykenee kohottamaan verenpainetta kahta tietä: toinen on angiotensiini II:n tuottaminen, mikä sinänsä suoraan kohottaa verenpainetta; toinen on verisuonia laajentavan vaikutuksensa kautta verenpainetta alentamaan pyrkivän bradykiniinin inaktivoitumi-nen. Siksi viime vuosina on esiintynyt melkoista mielenkiintoa sello laisten yhdisteiden kehittämiseen, joilla on kykyä inhibioida ACE:n aktiivisuutta.

Esimerkiksi tiettyjä perhydro-1,4-tiatsepin-5-onijohdannaisia on esitetty US-patenttihakemuksessa No. 721 303, haettu 9.4.1985; nämä tiat-15 sepiinijohdannaiset eroavat esilläolevan keksinnön yhdisteistä pääasiassa 6-asemassa olevan substituentin laadun suhteen. Myös tiettyjä perhydroatsepin-2-onijohdannaisia on esitetty US-patenttihakemuksessa No. 917 041, haettu 9.10.1986; nämä atsepiinijohdannaiset eroavat myös esilläolevan keksinnön yhdisteistä pääasiassa 3-asemassa olevan subs-20 tituentin laadun suhteen.

Muuta esilläolevan keksinnön atsepiinijohdannaisille läheistä relevanttia tekniikan tasoa edustaa EP-patenttijulkaisu No. 46 291, jossa esitetään sarja perhydroatsepin-2-oni (tai kaprolaktami) johdannaisia, 25 joissa on substituentteja 1- ja 3-asemissa ja valinnaisesti substi-tuentti myös 7-asemassa. EP-patenttijulkaisun No. 46 291 yhdisteet, toisin kuin esilläolevan keksinnön yhdisteet, ovat kuitenkin substitu-oimattomia 6-asemassa. Yllättäen olemme havainneet, että esilläolevan keksinnön yhdisteillä on useita etuja EP-patenttijulkaisun No. 46 291 30 edustaman tekniikan tason yhdisteisiin nähden, mukaanlukien korkeampi ACE-vastainen aktiivisuus ja tämän aktiivisuuden pitkäaikaisempi säilyminen in vivo.

EP-patenttijulkaisussa No. 156 455 on myös maininta tietyistä 1,4-35 tiatsepiinijohdannaisista, jotka ovat samantapaisia kuin esilläolevan keksinnön yhdisteet, mutta siinä esitetyt 1,4-tiatsepiinijohdannaiset eroavat esilläolevan keksinnön yhdisteistä siinä, että niissä on bent- 4 90418 seenirengas sulautuneena tiatsepiinirenkaaseen 2- ja 3-asemissa.

Esilläolevan keksinnön yhdisteillä on yleisesti etuna tekniikan tason yhdisteisiin verrattuna korkeampi aktiivisuus ja pitempi aktiivisuuden 5 kestoaika, joisakin tapauksissa jopa korkeampi kuin US-patenttihakemuksen No. 721 303 yhdisteillä. Sitäpaitsi niiden uskotaan olevan potentiaalisesti hyödyllisempiä suun kautta otettaessa, mikä tunnetusti on normaali suositeltava nauttimistapa tämäntyyppiselle lääkkeelle. Siksi esilläolevan keksinnön kohteena on aikaansaada sarja perhydro-10 tiatsepiini- ja perhydroatsepiinijohdannaisia, joilla on poikkeuksellinen ACE:tä inhibioiva aktiivisuus.

Keksinnön lisäkohteena on aikaansaada farmaseuttisia koostumuksia, jotka sisältävät sellaisia perhydrotiatsepiini- tai perhydroatsepiini-15 johdannaisia ACE:tä inhibioivana aineena.

Vielä eräänä esilläolevan keksinnön kohteena on aikaansaada menetelmiä angiotensiinin aiheuttaman verenpaineen kohoamisen (hypertension) käsittelyä tai hoitoa varten eläimissä (ihminen mukaanluettuna) anta-20 maila sille sellaista perhydrotiatsepiini- tai perhydroatsepiinijoh-dannaista.

Keksinnön avulla voidaan tehdä farmaseuttinen koostumus angiotensiinin aiheuttaman verenpaineen kohoamisen (hypertension) käsittelemiseksi, 25 joka koostumus käsittää hypotensiivisen aineen seoksena farmaseuttisesti hyväksyttävän kantimen tai laimentimen kanssa, jolloin mainittu hypotensiivinen aine on valittu ryhmästä, joka käsittää kaavan (I) yhdisteet ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat ja esterit.

30 Keksinnön avulla voidaan aikaansaada edelleen menetelmä angiotensiinin aiheuttaman verenpaineen kohoamisen (hypertension) käsittelemisen imettäväisessä, joka voi olla ihminen tai eläin, antamalla sille tehokas määrä hypotennsiivistäotensiivista ainetta, jolloin mainittu hypotensiivinen aine on valittu ryhmästä, joka käsittää kaavan (I) yhdis-35 teet ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat ja esterit.

Kaavan (1) yhdisteissä on kaksi vapaata karboksiryhmää ja siten ne voivat muodostaa mono- tai diestereitä sopivien esterin muodostavien 5 90418 ryhmien kanssa. Tässä keksinnössä käytettävien esterin muodostavien ryhmien laadun suhteen ei ole mitään käytännön rajoitusta, paitsi käytännön harkintaa sen suhteen, että jos tuloksena olevia yhdisteitä itseään on tarkoitus käyttää ihmisten tai muiden eläinten käsittelyyn, 5 tuloksena olevien estereiden on oltava "farmaseuttisesti hyväksyttäviä"; ja tämä kuten alaa tuntevat tietävät tarkoittaa sitä, että esterin muodostavat ryhmät eivät saa, ainakaan epäsuotavassa määrin, vähentää aktiivisuutta ia vivo tai lisätä yhdisteiden myrkyllisyyttä.

Kun tuloksena olevia yhdisteitä itseään ei ole tarkoitus käyttää lääk-10 keinä vaan sensijaan välituotteina muiden yhdisteiden valmistuksessa, tämäkään käytännön rajoitus ei ole voimassa ja mikä tahansa aiottuun valmistusreittiin sopiva esteri voidaan muodostaa.

Tuloksena olevia keksinnön yhdisteitä voidaan edustaa kaavalla (Ia): 15 coon1 r I (Ia) 20 A—CH-HH—k )

>-K

f I 3 B—COOfr 25 (missä R2, A, B ja Y ovat kuten edellä on määritelty ja R1 ja R3, jotka ovat samoja tai erilaisia, tarkoittavat kumpikin vetyatomia tai kar-boksisuojaryhmää, edullisesti esterin muodostavaa ryhmää).

30 RJ:n ja R3:n edustama karboksisuojaryhmä voi olla mikä tahansa sellaisissa orgaanisissa synteeseissä tunnettu ryhmä, vaikka edullisesti se on esterijäännös, erikoisesti esterijäännös, joka kykenee helposti hydrolysoitumaan in vivo (normaalisti nisäkkään ruumiissa, esim. veri-virrassa tai suolistosysteemissä) vapaaksi hapoksi, erikoisesti R2:n 35 tapauksessa.

R1 ja R3 ovat edullisesti samoja tai erilaisia ja kumpikin tarkoittaa 6 90418

Ci-Cio-älkyyliryhmää.

Esimerkkeihin sellaisista ryhmistä, joita R1 ja R3 voivat tarkoittaa, kuuluvat: 5 C1-C6 alkyyliryhmät, kuten metyyli-, etyyli-, propyyli-, isopropyy- li-, butyyli-, isobutyyli-, t-butyyli-, pentyyli- ja heksyyliryhmät;

Erikoisesti suosittelemme sitä, että R1 ja R3 edustavat molemmat vety-atomeita, kun keksinnön yhdisteet on tarkoitettu terapeuttiseen käyt-10 töön.

Jos keksinnön yhdisteitä on kuitenkin tarkoitus käyttää välituotteina muiden yhdisteiden valmistuksessa, suosittelemme erikoisesti sitä, että R1 ja R3 edustaisivat orgaanisissa synteeseissä tavallisesti käy-15 tettyä karboksi-suojaryhmää, kuten metyyli-, etyyli-, propyyli- tai t-butyyliryhmää.

Kun keksinnön yhdisteissä R2, R* tai R5 tai erilaiset substituentit, kuten edellä on määritelty, ovat C1-C6 alkyyliryhmiä, nämä ryhmät voi-20 vat olla suoran tai haarautuneen ketjun ryhmiä ja esimerkkeihin kuuluvat ryhmät metyyli, etyyli, propyyli, isopropyyli, butyyli, isobutyyli, sec-butyyli, t-butyyli, pentyyli, isopentyyli, 2-metyylibutyyli, neopentyyli, t-pentyyli, heksyyli, 4-metyylipentyyli, 3-metyylipentyy-- li,2-metyylipentyyli, 3,3-dimetyylibutyyli, 2,2-dimetyylibutyyli, 1,1- 25 dimetyylibutyyli, 1,2-dimetyylibutyyli, 1,3-dimetyylibutyyli, 2,3-dimetyylibutyyli ja isoheksyyli.

Kun A tarkoittaa mainittua kaavan (i) ryhmää, Z voi tarkoittaa Cj-Cg alkyleeniryhmää. Alkyleeniryhmän kaksi "vapaata" valenssia voivat olla 30 kiinnitettynä samaan hiiliatomiin (jossa tapauksessa sitä nimitetään joskus "alkylideeni"-ryhmäksi) tai ne voivat olla kiinnittyneinä eri hiiliatomeihin. Esimerkkejä sellaisista alkyleeniryhmistä, joita Z voi edustaa, ovat ryhmät metyleeni, etyleeni, trimetyleeni, tetrametylee-ni, etylideeni, propylideeni, butylideeni, pentametyleeni, heksamety-35 leeni, heptametyleeni ja oktametyleeni, tai sellaiset ryhmät, joissa on C^-C,, alkyylisubstituentti, edullisesti tetrametyleeni-, pentametyleeni-, heksametyleeni-, heptametyleeni- ja oktametyleeniryhmät, ja 7 90418 kaikkein mieluimmin heptametyleeni- ja oktametyleeniryhmät.

Kun A tarkoittaa mainittua kaavan (ii) ryhmää, R4 voi olla kuten edellä on määritelty sen tapauksen yhteydessä, jossa A tarkoittaa mainit-5 tua kaavan (i) ryhmää. Kun W tarkoittaa C^-Cg alkyleeniryhmää, se voi olla suoran tai haarautuneen ketjun ryhmä, kuten A:n yhteydessä on selitetty ja esimerkkeihin kuuluvat ryhmät metyleeni-, etyleeni-, trimetyleeni-, tetrametyleeni, etylideeni, propylideeni-, butylidee-ni-, pentametyleeni-ja heksametyleeniryhmät, joista etyleeni- ja tet-10 rametyleeniryhmiä suositellaan.

Kun A tarkoittaa mainittua kaavan (ii) ryhmää, kaavan (ii) ryhmään sisältyvä typpeä sisältävä heterosykli on pyrrolidinyyli- tai piperi-dyyliryhmä, ja kaikkein mieluimmin 3-pyrrolidinyyliryhmä tai 4-piperi-15 dyyliryhmä.

Ryhmälle R2 suositellaan fenyyliryhmää.

B tarkoittaa Ci-C2 alkyleeniryhmää, eli metyleeni- tai etyleeniryhmää, 20 metyleeniryhmän ollessa suositeltava.

Suositeltavia esilläolevan keksinnön yhdisteiden luokkia ovat: (A) Ne kaavan (I) yhdisteet, joissa: 25 Z tarkoittaa CA-C8 alkyleeniryhmää; W tarkoittaa C2-C4 alkyleeniryhmää; 30 R2 tarkoittaa fenyyliryhmää; B tarkoittaa metyleeniryhmää; ja ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat.

35 (B) Ne kaavan (I) yhdisteet, joissa: β 90418 Z tarkoittaa C7- tai C8-alkyleeniryhmää; W tarkoittaa C3 tai C^-alkyleeniryhmää; 5 in tarkoittaa kokonaislukua 1 tai 2; ja n tarkoittaa kokonaislukua 2; B tarkoittaa metyleeniryhmää; ja 10 ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat.

(C) Ne kaavan (I) yhdisteet, joissa: 15 A tarkoittaa ryhmää, jolla on kaava H2N-Z-, jossa Z tarkoittaa C7- tai Ce-alkyleeniryhmää; R2 tarkoittaa fenyyliryhmää, 2-tienyyliryhmää, 3-tienyyliryhmää tai 2-furyyliryhmää; 20 B tarkoittaa metyleeniryhmää; ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat.

25 (D) Ne kaavan (I) yhdisteet, joissa: A tarkoittaa kaavan H2N-Z ryhmää, jossa Z tarkoittaa C7- tai C8-alky-leeniryhmää; 30 Rz tarkoittaa 2-tienyyliryhmää, 3-tienyyliryhmää tai 2-furyyliryhmää; B tarkoittaa metyleeniryhmää; ja Y tarkoittaa rikkiatomia; ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat.

35 9 90418 (E) Ne kaavan (I) yhdisteet, joissa: A tarkoittaa ryhmää, jolla on kaava (iia): 5 — (CHjIm·—v H-i CH-W— I''*) ^—ICHjl n — j ossa: W tarkoittaa tetrametyleeniryhmää; 15 m tarkoittaa kokonaislukua 2; ja n tarkoittaa kokonaislukua 2; 20 R2 tarkoittaa fenyyliryhmää, 2 -tienyyliryhmää, 3-tienyyliryhmää tai 2-furyyliryhmää; B tarkoittaa metyleeniryhmää; ja 25 Y tarkoittaa rikkiatomia tai metyleeniryhmää; ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat.

(F) Ne kaavan (I) yhdisteet, joissa: 30 A tarkoittaa ryhmää, jolla on kaava (iia): — (CH2 lm —^ 35 f λ ... , H_w CH-W—

V J

(CHjl n —' 10 90 41 8 jossa: W tarkoittaa tetrametyleeniryhmää; 5 m tarkoittaa kokonaislukua 2; ja n tarkoittaa kokonaislukua 2; R2 tarkoittaa 2-tienyyliryhmää, 3-tiuenyyliryhmää tai 2-furyyliryhmää; 10 B tarkoittaa metyleeniryhmää; ja Y tarkoittaa rikkiatomia; 15 ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat.

Kaavan (I) yhdisteet sisältävät asymmetrisiä hiiliatomeja ainakin seuraavissa asemissa: hiiliatomi, johon kaavan -C00R1 ryhmä on kiinnittynyt; hiiliatomi, johon ryhmä Rz on kiinnittynyt; ja hiiliatomi 20 perhydrotiatsepiini- tai perhydroatsepiinirenkaassa, johon kaavan A-CH(C00H)-NH ryhmä on kiinnittynyt; siinä voi olla myös asymmetrisiä hiiliatomeja muissa asemissa joissakin tapauksissa riippuen substi-tuenttien laadusta. Siten ne voivat esiintyä optisesti puhtaina dias-tereomeereinä tai diastereomeerien seoksina (esim. raseemisina seoksi-25 na). Vaikka erilaisia optisia isomeerejä on esitetty tässä yhdellä kaavalla, esilläoleva keksintö sisältää sekä yksittäiset eristetyt isomeerit että niiden seokset.

Keksinnön yhdisteet sisältävät emäksisiä typpiatomeja ja siitä johtuen 30 ne voivat muodostaa happoadditiosuoloja. Sellaisten suolojen laatu ei ole kriitillinen keksinnön kannalta, paitsi että kun suoloja on tarkoitus käyttää terapeuttisiin tarkoituksiin, niiden täytyy olla farmaseuttisesti hyväksyttäviä, joka merkitsee, kuten alaa tuntevat hyvin tietävät, että suoloilla ei saa olla lisääntynyttä myrkyllisyyttä (tai 35 epäsuotavasti lisääntynyttä myrkyllisyyttä) tai alentunutta aktiivisuutta (tai epäsuotavasti alentunutta aktiivisuutta) verrattuna vapaisiin emäksiin. Sellaisten suolojen muodostamiseen voidaan käyttää u 90418 laajaa happovalikoimaa ja edustaviin esimerkkeihin sellaisista hapoista kuuluvat: mineraalihapot kuten hydrohalogeenihapot (esim. suolahappo, bromivetyhappo ja jodivetyhappo), fosforihappo, metafosforihappo, typpihappo tai rikkihappo; ja orgaaniset karboksyylihapot kuten etik-5 kahappo, oksaalihappo, viinihappo, sitruunahappo, bentsoehappo, glyko-lihappo, glukonihappo, glukuronihappo, meripihkahappo, maleiinihappo tai fumaarihappo; ja orgaaniset sulfonihapot, kuten metaanisulfonihap-po, bentseenisulfonihappo tai p-tolueenisulfonihappo. Sellaisia happo -additiosuoloja voidaan valmistaa tavanomaisilla menetelmillä.

10

Keksinnön yhdisteet voivat sisältää myös 2 vapaata karboksiryhmää ja nämä voivat muodostaa suoloja emästen kanssa. Esimerkkejä suoloista emästen kanssa ovat: suolat metallien, erikoisesti alkalimetallien ja maa-alkalimetallien kanssa, kuten litium-, natrium-, kalium-, kalsium-15 ja magnesiumsuolat; ammoniumsuola; suolat orgaanisten amiinien kuten sykloheksyyliamiinin, disykloheksyyliamiinin, di-isopropyyliamiinin, trietyyliamiinin, kinkoniinin, guanidiinin tai guaniinin kanssa; ja suolat emäksisten aminohappojen, kuten lysiinin ja arginiinin kanssa. Esimerkkejä keksinnön spesifisistä yhdisteistä annetaan seuraavissa 20 kaavoissa (1-1) - (1-4), missä substituentit ovat kuten vastaavissa taulukoissa 1-4 on määritetty [eli taulukko 1 vastaa kaavaa (1-1), taulukko 2 vastaa kaavaa (1-2) jne]. Keksinnön yhdisteet identifioidaan tämän jälkeen, milloin se on tarpeen, niille näissä taulukoissa annetuilla numeroilla. Taulukoissa on käytetty seuraavia lyhenteitä: 25

Ac asetyyli

Boc t-butoksikarbonyyli

Bu butyyli . . t-Bu t-butyyli 30 Bz bentsyyli

Bzo bentsoyyli

Cbz bentsyylioksikarbonyyli

Dox (5-metyyli-2-okso-l,3-dioksolen-4- yyli)metyyli 35 Et etyyli

Etc etoksikarbonyyli

Fur furyyli i2 90 4 1 8 cHx sykloheksyyli

Isox isoksatsolyyli

Me metyyli

Np naftyyli 5 Ph fenyyli

Phtm ftalimido

Piv pivaloyyli cPn syklopentyyli i.Pr isopropyyli 10 Thi tienyyli

Thiz tiatsolyyli 13 9 0 4 1 8 /S\ R2 coor1 / y' I (1-1) HR— ICHj lr—CH—HH—l )

O I I

ICH2)s-C00Rj R2 ί”"’ I I imi hm—iCH2)r-CH—MH—L y1 \-* o ch2-coor3 i4 9 0 4 1 8 2 / \ IT COOR1 /

Ol!-3) -W-CH-MH—^ / f\ chj-cooh / V7

COOH r (I—M

—ICRjIj,—CH—HH

0 CH2-COOH

is 90 41 8 TAULUKKO 1

Yhd.

No. r R1 Rz s R3 5 _

1-1 3 H 2-Thi 1 H

1-2 3 Et 2-Thi 1 H

1-3 4 H 2-Thi 1 H

1-4 3 Et 2-Thi 1 H

10 1-5 5 H 2-Thi 1 H

1-6 5 Et 2-Thi 1 H

1-7 6 H 2-Thi 1 H

1-8 6 Et 2-Thi 1 H

1-9 6 Bu 2-Thi 1 H

15 1-11 7 H 2-Thi 1 H

1-12 7 Et 2-Thi 1 H

1-13 8 H 2-Thi 1 H

1-14 5 H 3-Thi 1 H

1-15 5 Et 3-Thi 1 H

20 1-16 6 H 3-Thi 1 H

1-17 6 Et 3-Thi 1 H

1-18 7 H 3-Thi 1 H

1-19 7 Et 3-Thi 1 H

1-20 5 H 2-Fur 1 H

25 1-21 5 Et 2-Fur 1 H

1-22 6 H 2-Fur 1 H

1-23 6 Et 2-Fur 1 H

1-24 7 H 2-Fur 1 H

1-25 7 Et 2-Fur 1 H

30 1-53 6 Et 2-Thi 1 PivMe

1-54 6 Et 2-Thi 1 EtcOE

1-55 6 Et 2-Thi 1 Dox

1-57 6 Et 2-Thi 2 H

1-58 6 H 2-Thi 2 H

35 1-63 6 H Ph 1 H

1-64 6 Et Ph 1 H

ie 9041 8 TAULUKKO 1 Hatkoa')

Yhd.

5 No. r R1 R1 s R2 1-66 4 tBu 2-Thi 1 tBu

1-69 5 H Ph 1 H

1-70 5 Et Ph 1 H

10 1-71 7 H Ph 1 H

1- 72 7 Et Ph 1 H

TAULUKKO 2 15 Yhd.

No. r R1 R1 R2

1 4 H 2-Thi H

2-2 4 Et 2-Thi H

20 2-3 5 H 2-Thi H

2-4 5 Et 2-Thi H

2-5 6 H 2-Thi H

2

2-6 6 Et 2-Thi H

2-7 7 H 2-Thi H

25 2-8 7 Et 2-Thi H

2-9 8 H 2-Thi H

2-10 8 Et 2-Thi H

2-13 4 H Ph H

2-14 4 Et Ph H

30 2-15 5 H Ph H

2-16 5 Et Ph H

2-17 6 H Ph H

2-18 6 Et Ph H

2-19 7 H Ph H

35 2-20 7 Et Ph H

2-21 8 H Ph H

2-22 8 Et Ph H

17 90 41 8 TAULUKKO 3

Yhd.

5 No. W R1 R2 X

3-1 -(CH2)A- H 2-Thi S

3-2 -(CH2V Et 2-Thi S

3-3 -(CH2)4- Bu 2-Thi S

10 3-5 -(CH2)4- H Ph S

3-6 -(CH2)4- Et Ph S

3-7 -(CH2)a- H 3-Thi S

3-8 -(CH2)4- H 2-Fur S

3-9 -(CH2)*- H 3-Fur S

15 3-17 -(CH2)*- H 2-Thi CH2 3-18 -(CH2V Et 2-Thi CH2 3-19 -(CH2)*- H 3-Thi CH2 3-20 -(CH2)4- H Ph CH2 3-21 -(CH2)4- Et Ph CH2

20 3-24 -(CH2)3- H 2-Thi S

3-25 -(CH2)3- H Ph S

3-26 -(CH2)3- H Ph CH2

3-27 -(CH2)5- H 2-Thi S

3-28 -(CH2)5- H Ph S

25 3-29 -(CH2)5- H Ph CH2

3-30 -(CH2)2- H 2-Thi S

3-31 -(CH2)2 H Ph S

3-32 -(CH2)2- H Ph CH2 30 18 9041 8 TAULUKKO 4

Yhd.

5 No. R2 X

4-1 2-Thi S

4-2 2-Thi CH2

4-3 Ph S

10 4-4 Ph CH2

Edellä luetelluista yhdisteistä seuraavia suositellaan niiden erinomaisen ACE:tä inhibioivan vaikutuksen kannalta: Yhdisteet No 1-3, 15 1-5, 1-7, 1-11, 1-13, 1-16, 1-18, 1-22, 1-24, 1-63, 1-71, 2-1, 2-3, 2-5, 2-7, 2-9, 2-19, 2-21, 3-1, 3-5, 3-7, 3-8, 3-17, 3-19, 3-20, 4-1, 4-2, 4-3 ja 4-4. Seuraavilla yhdisteillä, vaikka ne ovatkin tehokkaita ACE-inhibiittoreita, on enemmän arvoa välituotteina muiden ja arvokkaampien ACE-inhibiittorien valmistuksessa ja niitä suositellaan 20 ottaen huomioon niiden käyttö välituotteina: Yhdisteet No. 1-8, 1-12, 1-64, 1-66, 2-8, 2-10, 2-20, 3-2, 5-1, 5-2 ja 5-3.

Seuraavat yhdisteet, ottaen huomioon niiden poikkeuksellinen ACE-inhi-bioiva aktiivisuus, ovat kaikkein suositeltavimpia: 25 1-11. a-[6-(8-Amino-l-karboksioktyyliamino)-5-okso-2-(2-tienyyli)-perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli]etikkahappo.

1-13. a-[6-(9-Amino-l-karboksinonyyliamino)-5-okso-2-(2-tienyyli)-30 perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli]etikkahappo.

1-18. a- [6-(8-Amino-l-karboksioktyyliamino)-5-okso-2-(3-tienyyli)-perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli]etikkahappo.

35 1-24. a-[6-(8-Amino-l-karboksioktyyliamino)-5-okso-2-(2-furyyli)- perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli]etikkahappo.

i9 9041 8 1- 71. α - [6-(8-Amino-l-karboksioktyyliamino)-5-okso-2-fenyyli-per-hydro-1,4-tiatsepin-4-yyli]etikkahappo.

2- 7. a-[3-(8-Amino-l-karboksioktyyliamino)-2-okso-6-(2-tienyyli)-5 perhydroatsepin-1-yyli]etikkahappo.

2-9. a-[3-(9-Amino-l-karboksinonyyliamino)-2-okso-6-(2-tienyyli)-perhydroatsepin-1-yyli]etikkahappo.

10 2-19. a-[3-(8-Amino-1-karboksioktyyliamino)-2-okso-6-fenyyli-per- hydroatsepin-1-yyli]etikkahappo.

2- 21. a-[3-(9-Amino-l-karboksinonyyliamino)-2-okso-6-fenyyli-per-hydroatsepin-1-yyli]etikkahappo.

15 3- 1. a-{6 -[1-Karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso-2-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli)etikkahappo.

3-5. a-{6-[1-Karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso-2-fe-20 nyyliperhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli]etikkahappo.

3-7. a-(6-[1-Karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso-2-(3-tienyyli)perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli)etikkahappo.

25 3-8. a-{6-[1-Karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso-2-(2- furyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli(etikkahappo.

3-17. a-(3-(1-Karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-2-okso-6-(2-t ienyy1i)pe rhydroatsep in-1-yy1i)e t ikkahappo.

30 3-19. a-{3-[1-Karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-2-okso-6-(3-tienyyli)perhydroatsepin-1-yyli(etikkahappo.

3-20. a-(3-[l-Karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-2-okso-6-fe-35 nyyliperhydroatsepin-1-yyli(etikkahappo.

Erikoisesti suositellaan tiettyjen yllämainittujen kaikkein suositel- äo 90 41 8 tavimpien yhdisteiden seuraavia isomeerejä: 1- 11. α-(6(R)-[8-Amino-1(S)-karboksioktyyliamino]-5-okso-2(S)- (2-tienyyli)perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli Jetikkahappo.

5 2- 19. a-{3(S)-[8-Amino-l(£)-karboksioktyyliamino]- 2-okso-6(R)-fenyy- liperhydroatsepin-l-yyli jetikkahappo.

3- 1. a-(6(R)-[1(S)-Karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso- 10 2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli Jetikkahappo.

3-20. a-{3(S)-[1(S)-Karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-2-okso-6-(R)-fenyyliperhydroatsepin-l-yyliJetikkahappo.

15 Esilläolevan keksinnön mukainen menetelmä yhdisteiden valmistamiseksi on tunnettu siitä, että se käsittää kaavan II yhdisteen 20 / \ y" H2H—L J im 25 oi.

B -CQOfr (jossa R2, R3, B ja Y ovat kuten edellä on määritelty) ja R3 tarkoittaa 30 C1-C10-alkyyliryhmää, kondensoinnin yhdisteen kanssa, jolla on kaava (III): A-CHiCOOR1) -X' (III) 35 (missä A on kuten edellä on määritelty; X’ tarkoittaa halogeeniatomia tai sulfonyylioksiryhmää ja R1 tarkoittaa Cj-Cjo-alkyyliryhmää) tai edellämainitun kaavan (II) yhdisteen pelkistävän kondensoinnin yhdis- 2i 9041 8 teen kanssa, jolla on kaava (IV): A-C(-=0) -COOR1 (IV) 5 (missä R1 ja A ovat kuten edellä on määritelty) ja valinnaisesti tuotteen alistamisen yhteen tai useampaan seuraavaan vaiheeseen: suojauksen poistaminen, saippuointi, esteröinti tai trans-esteröinti.

Kun kaavan (III) yhdisteessä X' tarkoittaa halogeeniatomia, se on 10 edullisesti kloori-, bromi- tai jodiatomi; kun se tarkoittaa sulfonyy-lioksiryhmää, se on edullisesti substituoitu tai substituoimaton Cj-C6 alkaanisulfonyylioksiryhmä, kuten metaanisulfonyylioksi-, etaani-sulfonyylioksi-tai trifluorometaanisulfonyylioksiryhmä, tai substituoitu tai substituoimaton aromaattinen sulfonyylioksiryhmä, kuten bent-15 seenisulfonyylioksi, p-tolueenisulfonyylioksi-, j>-nitrobentseenisul-fonyylioksi-, o-nitrobentseenisulfonyylioksi-, m-nitrobentseenisul-fonyylioksi-, 2,4- dinitrobentseenisulfonyylioksi-, 2-metyyli-5-nitro-bentseenisulfonyylioksi, 4-kloori-3-nitrobentseenisulfonyylioksi-, j>-bromobentseenisulfonyylioksi-, E'klorobentseenisulfonyylioksi- tai 20 2,5-diklorobentseenisulfonyylioksiryhmä; substituoitujen ryhmien ta pauksessa substituentit valitaan ryhmästä, joka käsittää edellä määritellyt substituentit (a).

Kaavan (II) yhdisteen kondensaatio kaavan (III) yhdisteen kanssa suo-25 ritetaan edullisesti liuottimen ja emäksen läsnäollessa. Liuottimen laatu ei ole kriitillinen, edellyttäen että sillä ei ole haitallista vaikutusta reaktioon; sopiviin liuottimiin kuuluvat: alifaattiset ja aromaattiset hiilivedyt, kuten heksaani tai bentseeni; halogenoidut alifaattiset tai aromaattiset, edullisesti alifaattiset hiilivedyt 30 kuten metyleenikloridi, kloroformi tai 1,2-dikloorietaani; eetterit kuten tetrahydrofuraani tai dioksaani; esterit kuten etyyliasetaatti; ketonit kuten asetoni; amidit kuten dimetyyliformamidi, dimetyyli-asetamidi, N-metyyli-2-pyrrolidoni tai heksametyylifosforitriamidi; sulfoksidit kuten dimetyylisulfoksidi; ja nitriilit kuten asetonitrii-35 li. Samoin ei myöskään käytettävän emäksen laatu ole kriitillinen, edellyttäen että sillä ei ole haitallista vaikutusta reaktioon. Sopiviin emäksiin kuuuluvat esimerkiksi: alkalimetalli-ja maa-aikaiimetal- 22 90 418 likarbonaatit kuten natriumkarbonaatti, kaliumkarbonaatti tai kalsium-karbonaatti; aikaiimetaliibikarbonaatit kuten natriumbikarbonaatti tai kaliumbikarbonaatti; alkalimetallihydridit kuten natriumhydridi tai litiumhydridi; metalli-, erikoisesti alkalimetallifluoridit kuten 5 kaliumfluoridi tai kesiumfluoridi; ja orgaaniset emäkset kuten trie-tyyliamiini, pyridiini, pikoliini tai tetraetyyliammoniumhydroksidi. Haluttaessa reaktio voidaan suorittaa kaksifaasisessa reaktiosystee-missä käyttäen vettä liuottimena toista faasia varten ja veteen se-koittumatonta liuotinta (kuten metyleenikloridia tai kloroformia) 10 toista faasia varten; tässä tapauksessa pitäisi käyttää faasinsiirto-katalyyttiä (kuten tetrabutyyliammoniumbromidia tai bentsyylitrietyy-liammoniumjodidia ja emäksen pitäisi olla suhteellisen vahva emäs, kuten alkalimetallihydroksidi (esimerkiksi natriumhydroksidi tai ka-liumhydroksidi).

15

Reaktio tapahtuu laajalla lämpötila-alueella ja valittu tarkka lämpötila ei ole kriitillinen keksinnön kannalta: yleensä olemme havainneet sopivaksi suorittaa reaktio alueella 0-120 °C olevassa lämpötilassa. Reaktioon tarvittava aika vaihtelee laajasti riippuen monista teki-20 jöistä, mutta pääasiallisesti liuottimen, emäksen ja reagenssien laadusta ja reaktiolämpötilasta, mutta normaalisti riittävä aika on 1 tunnista 3 päivään.

Kun reaktio on suoritettu loppuun, haluttu yhdiste voidaan saada reak-25 tioseoksesta tavanomaisilla tavoilla. Esimerkiksi yksi sopiva talteen-ottotekniikka käsittää: orgaanisen liuottimen, kuten etyyliasetaatin lisäämisen reaktioseokseen; orgaanisen kerroksen erottamisen ja pesemisen vedellä; orgaanisen kerroksen kuivauksen; ja liuottimen tislauksen halutun tuotteen saamiseksi. Tarvittaessa tätä tuotetta voidaan 30 puhdistaa edelleen erilaisilla tavanomaisilla tekniikoilla, kuten takaisinkiteytys ja/tai kromatografiatekniikat, erikoisesti pylväskro-matografia.

Kaavan (II) yhdisteen reaktio kaavan (IV) yhdisteen kanssa tapahtuu 35 pelkistävissä kondensointiolosuhteissa. Pelkistävät olosuhteet voidaan saada aikaan erilaisilla tavoilla, esimerkiksi: katalyyttisellä pelkistyksellä käyttäen metallia, kuten platinaa, palladiumia, Raney-nikkeliä tai rodiumia, valinnaisesti kantajalla, vedyn ollessa läsnä; 23 9 0 4 1 8 pelkistyksellä metallihydridillä, kuten litiumalumiinihydridillä, litiumborohydridillä, litiumsyanoborohydridillä, natriumsyanoborohyd-ridillä, natriumborohydridillä tai kaliumborohydridillä; pelkistyksellä aktiivisella metallilla, kuten natriumilla tai magnesiumilla, yh-5 dessä alkoholin kuten metanolin tai etanolin kanssa; tai pelkistyksellä metallilla kuten rauta tai sinkki ja hapolla kuten suolahapolla tai etikkahapolla. Reaktio suoritetaan edullisesti liuottimen läsnäollessa, jonka laatu ei ole kriitillinen, edellyttäen että sillä ei ole haitallista vaikutusta reaktioon (vaikkakin se voi osallistua 10 reaktioon). Sopiviin liuottimiin kuuluvat vesi ja valikoima orgaanisia liuottimia, esimerkiksi: alkoholit kuten metanoli tai etanoli; eetterit kuten tetrahydrofuraani, dietyylieetteri tai dioksaani; haloge-noidut hiilivedyt, erikoisesti halogenoidut alifaattiset hiilivedyt kuten metyleenikloridi tai kloroformi; esterit kuten etyyliasetaatti; 15 aromaattiset hiilivedyt kuten bentseeni tai tolueeni; amidit kuten dimetyyliformamidi tai dimetyyliasetamidi; ja orgaaniset karboksyyli-hapot kuten etikkahappo. On huomattava, että tietyt tässä potentiaalisina liuottimina mainitut yhdisteet voivat toimia myös osana edellä kuvattua pelkistyssysteemiä ja siinä tapauksessa sama yhdiste voi 20 toimia haluttaessa sekä reagenssina että liuottimena.

Reaktio tapahtuu laajalla lämpötila-alueella, esimerkiksi -20 °C -+100 °C, vaikka valittu tarkka lämpötila riippuu useista tekijöistä, joista tärkein on käytetyn pelkistyssysteemin laatu. Reaktio voidaan 25 suorittaa alle ilmakehän paineessa, vaikka joissakin tapauksissa voi olla suotavaa suorittaa se yli- tai alipaineessa.

Jos halutaan valmistaa sellaista kaavan (I) yhdistettä, jossa RA ja/tai R5 tarkoittaa vetyatomia, olisi suotavaa että vastaava ryhmä 30 kaavan (II) yhdisteessä on suojattu, vaikka kaikissa tapauksissa ei ehkä olisi välttämätöntä, että sekä R* että R5 ovat suojattuja, jos A tarkoittaa kaavan -NR*R5 ryhmää. Tässä tapauksessa suojaava ryhmä voi olla mikä tahansa edellä kuvatuista ja se voidaan poistaa tällä alalla hyvin tunnetuilla tavanomaisilla tavoilla, esimerkiksi käsittelemällä 35 hapolla tai alkalilla tai pelkistyksellä riippuen suojaryhmän laadusta.

24 9 0 4 1 8

Kaavan (I) yhdisteistä ovat lääketieteellisesti tärkeimpiä yhdisteitä dikarboksyylihapot, joissa sekä R1 että R3 tarkoittavat vetyatomeja, samoinkuin näiden happojen suolat.

5 Kaavan (I) dikarboksyylihappo, jossa sekä R1 että R3 tarkoittavat vetyatomeja voidaan valmistaa hydrolysoimalla kaavan (I) diesteriä tai monoesteriä (jossa R1 ja R3 tarkoittavat esterijäännöksiä tai R1 tarkoittaa esterijäännöstä ja R3 tarkoittaa vetyatomia) hapolla tai emäksellä; se voidaan valmistaa myös diesterin tai monoesterin esteri-10 ryhmän pelkistävällä poistamisella, tai (kun yhdiste sisältää allyy-liesteriryhmän) katalyyttisesti poistamalla allyyliryhmä sopivalla katalyytillä kuten tetrakis(trifenyylifosfiini)palladium(O). Käytetyt reaktio-olosuhteet ovat samoja kuin tämäntyyppisille reaktioille tavanomaisesti käytetyt ja ne ovat alan ammattimiehille hyvin tunnettu-15 ja.

Keksinnön yhdisteissä voi olla useita epäsymmetrisiä hiiliatomeja. Siitä johtuen erilaiset diastereomeerit ovat mahdollisia, kuten edellä on kuvattu. Tarvittaessa nämä diastereoisomeerit voidaan erottaa kro-20 matografiällä tai fraktioivalla takaisinkiteytyksellä. Vaihtoehtoises ti yksityiset isomeerit voidaan valmistaa lähtemällä liikkeelle kaavan (II) lähtöaineen yksityisestä isomeeristä, joka itse voi olla saatu sopivilla resoluutio- tai erotustekniikoilla. Jos ainakin toinen lähtöaineista on isomeeriseos, keksinnön yhdiste saadaan samoin normaa-25 listi isomeeriseoksena. Haluttaessa tämä optisten isomeerien seos voidaan erottaa tavanomaisilla resoluutiomenetelmillä, esimerkiksi muodostamalla suoloja optisesti aktiivisten emästen kuten kinkoniinin, kiniinin tai kinidiinin kanssa tai optisesti aktiivisten orgaanisten happojen, esimerkiksi i-kamferisulfonihapon tai d-kamferisulfonihapon 30 kanssa. Optisia isomeerejä voidaan erotella myös muilla tunnetuilla tekniikoilla, mukaanlukien erilaiset kromatografiät, fraktiointikitey-tys jne.

Lähtöaineina käytettävät kaavan (II) yhdisteet voidaan saada erilai- 35 silla hyvin tunnetuilla reiteillä, esimerkiksi sellaisilla, joita on kuvattu US-hakemuksessa No. 721 303 ja US-hakemuksessa No. 917 041.

25 90 4 1 8

Kuten edellä on mainittu, esilläolevan keksinnön yhdisteillä on kyky inhibioida ACE:n aktiivisuutta eli entsyymin, joka muuttaa angioten-siini I:tä angiotensiini II:ksi ja myös inaktivoi bradykiniinin. Keksinnön yhdisteiden fysiologinen aktiivisuus voidaan arvioida määrittä-5 mällä koeyhdisteen konsentraatio, joka tarvitaan inhibioimaan ACE: aktiivisuutta 50 %:lla in vitro (IC50), esimerkiksi D.W. Cushman et al:n proseduurilla [Biochemical Pharmacology, 20, 1637 (1971)]. Spesifisesti kaniinin keuhkoista uutettuja ACE-liuoksia, ja substraattina hippuryylihistidyylileusiinia, johon oli lisätty koeyhdistettä 10 erilaisissa väkevyyksissä, lisättiin natriumkloridia sisältävään bo-raattipuskuriliuokseen, ja pH säädettiin arvoon 8,3. Entsymaattisen reaktion annettiin jatkua 37 °C:ssa 30 minuutin ajan, jonka jälkeen reaktio päätettiin lisäämällä suolahapon IN vesiliuosta. Tällä reaktiolla muodstunut hippurihappo uutettiin etyyliasetaatilla ja sitten 15 liuotin tislattiin uutteesta. Jäännöshippurihappo liuotettiin veteen. Hippurihapon määrä tuloksena olevassa vesiliuoksessa määritettiin ultraviolettisäteilyn absorbenssina 228 nm:sä. Sitten tuloksena olevat arvot piirrettiin käyrän muodostamiseksi, joka osoitti yhteyttä muodostuneen hiippurihapon määrän ja koeyhdisteen konsentraation välillä. 20 IC50-arvo voidaan saada lukemalla tältä käyrältä koeyhdisteen se konsentraatio, joka vähentää muodostuneen hippurihapon määrän puoleen siitä määrästä, joka muodostui kun koeyhdistettä ei ollut läsnä. Tällä menettelytavalla keksinnön erilaisille yhdisteille saadut IC50-arvot on esitetty seuraavassa taulukossa 6. Koeyhdisteet olivat seuraavat: 25 A: a-(6(R)-[5-Amino-l(S)-karboksipentyyliamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyy-li)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli}etikkahappodihydrokloridi (esimerkin 3 tuote); 30 B: a-{6(R)-[7-Amino-1(S)-karboksiheptyyliamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyy-li)perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli}etikkahappo (esimerkin 6 tuote); C: rel-a-{6(R)-[7-Amino-1(S)-karboksiheptyyliamino]-5-okso-2(R)-per- hydro-l,4-tiatsepin-4-yyli}etikkahappo (esimerkin 9 tuote); 35 D: a-{6(R)-[8-Amino-1(S)-karboksioktyyliamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyy- li)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli}etikkahappo (esimerkin 14 tuote); 26 9 0 4 1 8 E: rel-α-{3(S)-[8-Amino-1(S)-karboksioktyyliamino]- 2-okso- 6(R)-fenyy- liperhydroatsepin-l-yyli)etikkahappo (esimerkin 17 tuote); F: a-(6(R)-[1(S)-Karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso- 5 2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli)etikkahappo (esimerkin 20 tuote); G: rel-α-(3(S)-[1(S)-Karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-2-okso-6(R)-fenyyliperhydroatsepin-l-yyli)etikkahappo (esimerkin 23 tuote).

10

Taulukko 6

Koeyhdiste IC50 15 (mol/1) A 3,3 x 10'9 B 2,0 x 10"9 C 3,1 x 10‘9 20 D 1,6 x 10'9 E 4,1 x 10'9 F 1,6 x 10'9 G 3,7 x 10'9 25

Kuten ylläolevassa taulukossa olevista tuloksista selvästi voidaan nähdä keksinnön mukaiset yhdisteet inhibioivat AGE:n aktiivisuutta hyvin alhaisissa konsentraatioissa ja siten ne ovat hyödyllisiä diagnostisina, preventatiivisina ja terapeuttisina aineina hypertensiivi-30 sille potilaille; samoin näiden yhdisteiden suoloilla on samanlaisia vaikutuksia.

Seuraavaksi esitetään tietoja, joiden avulla verrataan EP 161801 julkaisun yhdisteiden vaikutusta esillä olevien yhdisteiden vaikutukseen. 35 Nämä tiedot ovat peräisin esillä olevan hakemuksen esimerkkien 14 ja 20 mukaisista yhdisteistä ja EP-julkaisun 161801 esimerkin 17 mukaisesta yhdisteestä ja yhdisteet eroavat toisistaan substituentin Aja 27 9041 8 R1 suhteen (merkitty yksinkertaisesti Arksi testiprotokollassa). Vertailutesteiä 5 1. Toimenpiteet

Wistar Imamichi -rottia, joiden paino oli 250-350 g nukutettiin nat-riumpentobarbitaalilla 30 mg/kg ip. Vasen reisivaltimo ja laskimo kanavoitiin valtimon verenpaineen mittaamiseksi ja lääkeaineen ruis-10 kuttamiseksi. Kanyylin toinen pää vietiin ulkopuolelle niskan kohdalla .

Seuraavana päivänä kirurgisesta toimenpiteestä valtimokanyyli kytkettiin painemuuttimeen verenpaineen mittaamiseksi tietoisessa tilassa. 15 Angiotensio I:tä (verisuonia supistavaa ainetta) annosteltiin laskimonsisäisesti annoksella 0,3 ju/kg toistamiseen, kunnes saatiin vakio painetta kohottava vastaus. Kun testiyhdiste oli annosteltu letkuruo-kinnalla annoksella 1,0 mg/kg p.o., angiotensio I:n laskimonsisäistä annostelua toistettiin eri aikavälillä.

20

Painetta kohottavan vastauksen prosentuaalinen inhibointi angiotensio I:tä vastaan laskettiin seuraavalla kaavalla ^ / Painetta kohottava vastaus aineelle AI testilääkkeen jälkeen \ χ I Painetta kohottava vastaus vastaan AI ennen testilääkkeen J \ antamista / 30 2. Testivhdisteet 35 C02.r Γ Λ

A “CHNH (. H

(S) ««V-·' 0 C^IjCOOtt 26 9 0 4 1 8

Yhdiste A R3 Huomautuksia 1 Esimerkissä 14 H2N(CHZ)7- h 5

2 Esimerkissä 20 HN^~~^(CH2)4- H

3 Esimerkissä 17 ^q^-(CH ) Et HC1 -suola 10 *) EP 161801 mukainen yhdiste 3. Tulos 15 Yhdiste Inhibointi

Max (%) T% (h) 1 71 > 8 2 77 > 8 20 3 95 5,6

Kuten tuloksista voidaan nähdä, esillä olevan hakemuksen mukaisten yhdisteiden vakutusaika on pidempi kuin EP 161801 julkaisun yhdistei-25 den (tämän osoittaa Tl/2 tiedot).

Käytännön terapeuttista käyttöä varten keksinnön yhdisteet nautitaan edullisesti yhdistelmänä farmaseuttisesti hyväksyttävien kantoainei-den, liuoksien tai laimentimien kanssa. Yhdisteitä voidaan nauttia 30 suun kautta tai muuta kautta (esim. ruoansulatuskanavan ulkopuolitse ruiskeena suoneen tai lihakseen) ja koostumuksen muoto määräytyy tietenkin aiotun annostusmuodon mukaan. Suullista nauttimista varten keksinnön yhdisteitä voidaan nauttia jauheina, rakeina, tabletteina, kapseleina, siirappeina tai eliksiireinä. Ruoansulatuskanavan ulkopuo-35 lista nauttimista varten yhdisteitä voidaan nauttia sopivan ruiskutettavan seoksen muodossa, jossa keksinnön yhdiste on liuotettuna tai suspendoituna pyrogeenivapaassa ruiskutettavassa väliaineessa. Annos 29 9 0 41 8 vaihtelee häiriön laadusta ja vakavuudesta samoinkuin potilaan iästä, kunnosta ja ruumiinpainosta riippuen. Esimerkiksi täysi - ikäistä ihmis-potilasta varten kullakin kerralla nautittava annos tulisi olemaan edullisesti 0,5-1000 mg, mieluummin 1-100 mg suun kautta nautittaessa, 5 kun taas suositeltava annos kullakin kerralla suonensisäistä ruisketta varten on 0,1-100 mg, mieluummin 0,1-10 mg. Näitä annoksia voidaan nauttia yksi tai useampia, edullisesti 1-3 annosta päivässä.

Keksintöä havainnollistetaan lisää seuraavilla esimerkeillä, jotka ku-10 vaavat keksinnön erilaisten yhdisteiden valmistusta. Optisen rotaation arvot mitattiin kaikki natriumin D-viivan avulla, eli kaikki arvot ovat [a]D.

ESIMERKKI 1 15 t-Butvvli a-f6(R)-(l-t-butoksikarbonvvli-5-ftalimidopentwliamino)-5-okso-2 -(S)-(2 -tienvvli)perhvdro-l,4-tiatsepin-4-vvlilasetaatti 3 g natriumkarbonaattia lisättiin liuokseen, jossa oli 1,35 g t-butyy-20 li a-[6(R)-amino-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4- yyli]asetaattia ja 2,23 g t-butyyli 2-bromo-6-ftalimidoheksanoaattia liuotettuna 20 ml:aan dimetyyliformamidia ja seosta sekoitettiin 60 °C:ssa 24 tuntia. Sitten reaktioseos sekoitettiin etyyliasetaatin ja veden seokseen. Etyyliasetaattikerros erotettiin, pestiin natrium-25 kloridin vesiliuoksella, kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja väkevöitiin haihduttamalla alipaineessa liuottimen poistamiseksi. Jäännös pantiin pylväskromatografiaan silikageelin läpi käyttäen syk-loheksaanin ja etyyliasetaatin tilavuussuhteessa 5:1 olevaa seosta eluenttina.

30

Ensimmäiseksi eluoiduista jakeista saatiin 700 mg t-butyyli a-{6(R)-[1(R)-t-butoksikarbonyyli-5-ftalimidopentyyliamino]-5-okso-2-(S)-(2-tienyyli)perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli)asetaattia vaahtomaisena kiintoaineena .

35

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) 6 ppm: 1,48 (18H, singletti); jo 9041 8 1,0 - 2,0 (6H, multipletti); 2.4 - 4,8 (12H, multipletti); 6,85 - 7,3 (3H, multipletti); 7,55 - 8,0 (4H, multipletti).

5

Seuraavaksi eluoiduista jakeista saatiin sen jälkeen 829 mg t-butyyli a-(6(R)-[1(S)-t-butoksikarbonyyli-5-ftalimidopentyyliamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli Jasetaattia vaahtomaise-na kiintoaineena.

10 [a]23 + 30,1 (c - 1,0, dimetyyliformamidi).

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) S ppm: 1,48 (18H, singletti); 15 1,2 - 1,9 (6H, multipletti); 2.5 - 4,8 (12H, multipletti); 6,9 - 7,3 (3H, multipletti); 7.6 - 8,0 (4H, multipletti).

20 ESIMERKKI 2 t-Butwli a- (6(R) - f S-amino-HS) -t-butoksikarbonvvlipentvvliaminol -5-okso-2(S)-(2-tienvvli)perhvdro-1.4-tiatsepin-4-vvlilasetaatti 25 0,06 ml hydratsiinimonohydraattia lisättiin liuokseen, jossa oli 815 mg t-butyyli a-(6(R)-[1(S)-t-butoksikarbonyyli-5-ftalimidopentyyliami-no]-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli)asetaattia (valmistettu kuten esimerkissä 1 on kuvattu) liuotettuna seokseen, jossa oli 3 ml metyleenikloridia ja 3 ml etanolia, samalla jäähdyttäen 30 jäillä, ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 4 päivää. Tämän ajan kuluttua reaktioseokseen ilmaantunut saostuma suodatettiin pois ja suodos väkevöitiin haihduttamalla alipaineessa. Jäännös sekoitettiin etyyliasetaattiin ja saostunut materiaali suodatettiin pois. Etyyliasetaattisuodos kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja 35 väkevöitiin haihduttamalla alipaineessa liuottimen poistamiseksi.

Jäännös pantiin pylväskromatografiaan silikageelin läpi käytäen etyyliasetaatin ja metanolin tilavuussuhteessa 10:1 ja 4:1 olevia seoksia 3i 9041 8 eluenttina saaden saaliiksi 302 mg otsikkoyhdistettä siirappina. Ydinraagneettiresonanssispektri (CDC13) S ppm: 1,48 (18H, singletti); 1.2 - 1,9 (6H, multipletti); 5 2,5-4,8 (14H, multipletti); 6,9 - 7,35 (3H, multipletti).

ESIMERKKI 3 10 o-< 6(R)-[ 5-Amino-lfS)-karboksipentvvliarainol-5-okso-2(S)-(2-tienvvli)-perhvdro-1,4-tiatsepin-4-vvliletikkahappodihvdrokloridi 302 mg t-butyyli a-(6(R)-[5-amino-l(S)-t-butoksikarbonyylipentyyliami-no]-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli Jasetaattia 15 (valmistettu kuten esimerkissä 2 on kuvattu) sekoitettiin 3 ml:aan suolahpon 4N dioksaaniliuosta, ja seosta sekoitettiin 16 tuntia huoneenlämpötilassa. Tämän ajan kuluttua dioksaani tislattiin pois alipaineessa ja jäännös trituroitiin dietyylieetterillä ja suodatettiin saaden saaliiksi 278 mg otsikkoyhdistettä jauheena.

20 [a]23 + 73,3° (c = 1,0, suolahapon IN vesiliuos).

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) 6 ppm: 1.3 - 2,2 (6H, multipletti); 25 2,4-5,2 (11H, multipletti); 6,95 - 7,6 (3H, multipletti).

ESIMERKKI 4 30 t-Butvvli a-f6(R)-(7-t-butoksikarbonvvlianiino-l-etoksikarbonvvlihep-tvvliamino)-5-okso-2(S)-(2-tienvvli)perhvdro-1,4-tiatsepin-4-vvli1 - asetaatti 1,5 g t-butyyli a-[6(R)-amino-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-35 tiatsepin-4-yyli]asetaattia ja 4,0 g etyyli 2-bromo-8-t-butoksikar- bonyyliamino-oktanoaattia liuotettiin 20 ml:aan dimetyyliformamidia ja seokseen lisättiin 2,79 g natriumkarbonaattia. Sitten seosta sekoitet- 32 9 0 4 1 8 tiin 75 °C:ssa 18 tuntia, jonka jälkeen siihen lisättiin etyyliasetaattia ja vettä. Etyyliasetaattikerros erotettiin, pestiin nat-riumkloridin vesiliuoksellla ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Sitten se väkevöitiin haihduttamalla alipaineessa liuottimen 5 poistamiseksi. Jäännös pantiin pylväskromatografiaan silikageelin läpi käyttäen sykloheksaanin ja etyyliasetaatin tilavuussuhteessa 4:1 olevaa seosta eluenttina.

442 mg t-butyyli a-{6(R)-(7-t-butoksikarbonyyliamino-1-(R)-etoksikar-10 bonyyliheptyyliamino)- 5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli)asetaattia saatiin ensimmäiseksi eluoiduista jakeista ja eristettiin siirappina.

[a]23 + 46,3° (c = 1,0, dimetyyliformamidi).

15

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) 6 ppm: 1.25 (3H, tripletti); 1.45 (9H, singletti); 1,48 (9H, singletti); 20 1,1-1,8 (10H, multipletti); 2,4 - 4,8 (15H, multipletti); 6.9 - 7,35 (3H, multipletti).

Senjälkeen eluoitiin 525 mg a-{6(R)-[7-t-butoksikarbonyyliamino-l(R)-25 etoksikarbonyyliheptyyliamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli)asetaattia ja eristettiin siirappina.

[a]23 + 25,9° (c = 1,0, dimetyyliformamidi).

30 Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) 6 ppm: 1.26 (3H, tripletti, J-7 Hz); 1,43 (9H, singletti); 1.46 (9H, singletti); 1,1 - 1,8 (10H, multipletti); 35 2,4 - 4,75 (15H, multipletti); 6.9 - 7,35 (3H, multipletti).

33 90 41 8 ESIMERKKI 5 α - ( 6(Rl - f 7 - Amino-1(S) -etoksikarbonwliheptwliaminol -5-okso-2(S) -(2-tienyvlt)perhvdro-l4-tlatsepin-4-vyIi)etikkahappodihvdrokloridi 5 510 mg t-butyyli a-{6(R)-[7-t-butoksikarbonyyliamino-1-etoksikarbonyy-liheptyyliamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-1,4-tiatsepin-4-yylijasetaattia (valmistettu kuten esimerkissä 4 on kuvattu) liuotettiin 5 ml:aan suolahapon 4N dioksaaniliuosta, ja seoksen annettiin 10 seisoa 18 tuntia. Tämän ajan kuluttua liuotin tislattiin pois ja jäännös trituroitiin di-isopropyylieetterillä ja suodatettiin saaden 520 mg jauhetta. Tämä raakajauhe puhdistettiin pylväskromatografiällä Diaion HP-20:n (kauppanimi) läpi käyttäen 20 til-% ja 40 til-% asetonin vesiliuosta (eli seosta, jossa oli joko 20 tai 40 % asetonia ja 15 vastaavasti 80 tai 60 % vettä) eluenttina. Eluoidun jakeen väkevöinti haihduttamalla alipaineessa antoi vaahtomaista kiintoainetta, joka liuotettiin 1 ml:aan suolahapon 4N dioksaaniliuosta. Dioksaanin haihdutus alipaineessa, jota seurasi triturointi dietyylieetterillä ja suodatus, antoi 121 mg otsikkoyhdistettä.

20 [a]23 +63,7° (c = 1,0, suolahapon IN vesiliuos).

Ydinmagneettiresonanssispektri (heksadeuteroitu dimetyylisulfoksidi) δ ppm: 25 1,1-2,1 (10H, multipletti); 1,26 (3H, tripletti, J=7 Hz); 2,4 - 5,2 (13H, multipletti); 6,95 - 7,6 (3H, multipletti).

30 ESIMERKKI 6 a-(6(R)- f 7-Amino-1(S)-karboksiheptvvliaminol-5-okso-2(S)-(2-tienvvli)-perhvdro-1.4-tiatsepin-4-vvliletikkahappo 35 142 mg a-(6(R)-[7-Amino-l(S)-etoksikarbonyyliheptyyliamino]-5-okso- 2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli)etikkahappodihydro- kloridia (valmistettu kuten esimerkissä 5 on kuvattu) liuotettiin 1,2 34 90 41 8 ml:aan natriumhydroksidin IN vesiliuosta, ja seoksen annettiin seisoa 24 tuntia. Tämän ajan kuluttua seoksen pH säädetiin arvoon 4,8 lisäämällä suolahapon IN vesiliuosta ja tuloksena olevat sakat kerättiin suodattamalla saaden 112 mg otsikkoyhdistettä.

5 [a]23 + 93,9° (c - 1, suolahapon IN vesiliuos).

Ydinmagneettiresonanssispektri (CF3C02D) S ppm: 1,3 - 2,4 (10H, multipletti); 10 3,0 - 5,2 (11H, multipletti); 7,0 - 7,15 (3H, multipletti).

ESIMERKKI 7 15 t-Butvvli rel-a-f6(R)-(7-t-butoksikarbonvvliamino-l-etoksikarbonvvli-heptvvliamino)-5-okso-2CR)-fenvvliperhvdro-1.4-tiatsepin-4-vvlil-asetaatti

Seuraten samaa proseduuria kuin esimerkissä 4 on kuvattu suoritettiin 20 kondensointireaktio t-butyyli rel-α-(6(R)-amino-5-okso-2(R)-fenyyli-perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli]asetaatin (400 mg) ja etyyli 2-bromo-8-t-butoksikarbonyyliamino-oktanoaatin (1,08 g) välillä natriumkarbonaatin (0,76 g) läsnäollessa saaden kaksi diastereoisomeeriä. Nämä isomeerit erotettiin pylväskromatografiällä silikageelin läpi käyttäen 25 metyleenikloridin ja etyyliasetaatin tilavuussuhteessa 10:1 olevaa seosta eluenttina.

Ensimmäisenä eluoiduista jakeista saatiin 142 mg 1(R)-etoksikarbonyy-li-isomeeriä siirappina.

30

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDClj) S ppm: 1.25 (3H, tripletti, J-7 Hz); 1,42 (9H, singletti); 1,45 (9H, singletti); 35 1,1-1,8 (10H, multipletti); 2,35 - 4,7 (15H, multipletti); 7.26 (5H, singletti).

35 90 4 1 8

Seuraavaksi eluoiduista jakeista saatiin 144 mg 1(S)-etoksikarbonyyli-isomeeriä siirappina.

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) S ppm: 5 1,28 (3H, tripletti, J=7 Hz); 1,42 (9H, singletti); 1,45 (9H, singletti); 1.1 - 1,8 (10H, multipletti); 2.4 - 4,7 (15H, multipletti); 10 7,28 (5H, singletti).

ESIMERKKI 8 rel-a-(6(R)- f7-Amino-l(S)-etoksikarbonvvliheptvvliaminol-5-okso-2(R)-15 fenvvliperhvdro-1.4-tiatsepin-4-vvli)etikkahappo

Kaikki 144 mg t-butyyli rel-α-[6(R)-(7-t-butoksikarbonyyliamino-1(S)-etoks ikarbonyy1iheptyy1iamino)- 5 -okso- 2(R)- fenyyliperhydro-1,4 -1iatse-pin-4-yyli]asetaatti-isomeeristä, joka oli saatu esimerkissä 7 kuva-20 tussa kromatografiassa toiseksi eluoitavasta jakeesta, liuotettiin seokseen, jossa oli 1,5 ml anisolia ja 2 ml trifluoroetikkahappoa. Sitten seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 4 tuntia. Seoksen väkevöinti haihduttamalla alipaineessa antoi öljymäistä jäännöstä, joka trituroitiin di-isopropyylieetterillä ja suodatettiin saaden 143 mg 25 otsikkoyhdisteen raakatuotetta. Koko tämä yhdiste liuotettiin veteen, joka sisälsi 81 mg natriumbikarbonaattia, säädettiin pH-arvoon 5,5 lisäämällä suolahapon 0,1N vesiliuosta ja puhdistettiin pylväskromato-grafialla Diaion HP20:n läpi. Peräkkäinen eluointi metanolin 20 til-% ja 40 til-% vesiliuoksella antoi jakeen, joka sisälsi otsikkotuotetta, 30 joka väkevöitiin haihduttamalla alipaineessa saaden 69 mg otsikkoyh-distettä jauheena.

Ydinmagneettiresonanssispektri (heksadeuteroitu dimetyylisulfoksidi) S ppm: 35 1,20 (3H, tripletti, J=7 Hz); 1.1 - 1,7 (10H, multipletti); 2.4 - 4,5 (13H, multipletti); 36 90 4 1 8 7,36 (5H, singletti).

ESIMERKKI 9 5 rel-α-(6(R)-[7-Amino-HS)-karboksiheptvvliamlnol-5-okso-2(R)-fenvvli- perhvdro-1 -4-tiatsepin-4-wlHetikkahappo 59,0 rag rel-q-{6(R)-[7 - amino-1(S)-etokslkarbonyyliheptyyliamino]-5-okso-2(R)-fenyyliperhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli}etikkhappoa (valmistet-10 tu kuten esimerkissä 8 on kuvattu) liuotettiin 1,0 ml:aan natriumhy- droksidin 0,5N vesiliuosta, ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 3 tuntia. Tämän ajan kuluttua reaktioseoksen pH säädettiin arvoon 4,5 lisäämällä suolahapon IN vesiliuosta ja sitten se väkevöitiin haihduttamalla alipaineessa otsikkoyhdisteen (45 mg) saostamiseksi.

15

Ydinmagneettiresonanssispektri (D20-DC1) δ ppm: 1,7 - 2,7 (10H, multipletti); 3,3 - 5,7 (11H, multipletti); 7,93 (5H, singletti).

20 ESIMERKKI 10 t-Butvvli rel-α-f6(R)-(l-etoksikarbonvvli-5-ftalimidopentvvliamino)- 5-okso-2(R)-fenvvliperhvdro-1.4-tiatsepin-4-vvlilasetaatti 25

Seuraamalla samaa proseduuria kuin esimerkissä 4 on kuvattu suoritettiin kondensointireaktio t-butyyli rel.-q-[6(R)-amino-5-okso-2(R)-fe-nyyliperhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli]asetaatin (336 mg) ja etyyli 2-bromo-6-ftalimidoheksanoaatin (552 mg) välillä natriumkarbonaatin 30 (318 mg) läsnäollessa saaden kaksi diastereoisomeeriä. Nämä isomeerit erotettiin pylväskromatografiällä silikageelin läpi käyttäen syklohek-saanin ja etyyliasetaatin tilavuussuhteessa 5:1 olevaa seosta eluent-tina.

35 Ensimmäiseksi eluoiduista jakeista saatiin 206 mg 1(R)-etoksikarbonyy-li-isomeeriä: 37 90 41 8

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) 6 ppm: 1.25 (3H, tripletti, J-=7 Hz); 1.47 (9H, singletti); 1,1 - 1,9 (6H, multipletti); 5 2,35 - 4,55 (14H, multipletti); 7.28 (5H, singletti); 7.5 - 8,0 (4H, multipletti).

Ensimmäiseksi eluoiduista jakeista saatiin 230 mg 1(S)-etoksikarbonyy-10 li-isomeeriä siirappina.

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) δ ppm: 1.26 (3H, tripletti, J- Hz); 1.47 (9H, singletti); 15 2,4 - 4,5 (14H, multipletti); 7.28 (5H, singletti); 7.5 - 8,0 (4H, multipletti).

ESIMERKKI 11 20 rel-Q-l6('R~)-ri(,S') - Etoksikarbonvvli - 5 - f talimidopentvvliamino 1 - 5-okso-2(R)-fenvvliperhvdro-1.4-tiatsepin-4-vvli)etikkahappo 206 mg t-butyyli rel-α-{6(R)-[1(S)-etoksikarbonyyli-5-ftalimidopentyy-25 liamino)-5-okso-2(R)-fenyyliperhydro-1,4 -tiatsepin-4-yyli]asetaattia (valmistettu kuten esimerkissä 10 on kuvattu) liuotettiin seokseen, jossa oli 2 ml anisolia ja 2 ml trifluoroetikkahappoa. Seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 4 tuntia, jonka jälkeen se väkevöitiin haihduttamalla alipaineessa. Tuloksena oleva kumimainen jäännös tritu-30 roitiin di -isopropyylieetterillä ja suodatettiin saaden otsikkoyhdis-teen trifluoroetikkahapposuolaa. Tämä suola suspensoitiin seokseen, jossa oli 4 ml vettä, joka sisälsi 0,6 g natriumbikarbonaattia ja 4 ml di-isopropyylieetteriä ja säädettiin pH-arvoon 3 lisäämällä suolahapon IN vesiliuosta, samalla sekoittaen, otsikkoyhdisteen (105 mg) saosta-35 miseksi.

38 9 0 418

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) & ppm: 1.26 (3H, tripletti, J-7 Hz); 1,0 - 2,2 (6H, multipletti); 2,6 - 4,7 (13H, multipletti); 5 7,21 (5H, singletti); 7,5 - 7,9 (4H, multipletti).

ESIMERKKI 12 10 t-Butvvli a- Γ6fR1) - (S-t-butoksikarbonvyliamlno-l-etoksikarboksvyliok-tvvliamino)-5-okso-2(S)-(2-tienvvlPperhvdro-1.4-tiatsepin-4-vvli1 -asetaatti 1,3 g t-butyyli a-[6(&)-amino-5-okso-2(£)-(2-tienyyli)perhydro-1,4-15 tiatsepin-4-yyli]asetaattia käsiteltiin 1,73 g:lla etyyli 2-bromo-9-t-butoksikarbonyyliaminononanoaattia (joka oli valmistettu kuten valmistuksessa 4 on kuvattu) samalla tavalla kuin esimerkissä 4 on kuvattu. Tuote pantiin sitten pylväskromatografiaan silikageelin läpi käyttäen bentseenin ja etyyliasetaatin tilavuussuhteessa 5:1 olevaa seosta 20 eluenttina.

Ensimmäiseksi eluoiduista jakeista saatiin 237 mg t-butyyli a-(6(R)-[8 -1-butoks ikarbonyy1iamino-1(R)-e toks ikarbonyylioktyyliamino]- 5 -okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli Jasetaattia siirappina.

25 [a]25 +43,3° (c = 1, dimetyyliformamidi).

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) u^cnf1: 3360, 1730, 1710, 1660.

30

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) S ppm: 1.26 (3H,tripletti, J-7 Hz); 1,45 (9H, singletti); 1,48 (9H, singletti); 35 1,1 - 1,8 (12H, multipletti); 2,4 - 4,8 (11H, multipletti); 4,08 (2H, AB-kvartetti, Δ6-0.58 ppm, J-17 Hz); 39 9 0 4 1 8 4,16 (2H, kvartetti, J-7 Hz); 6.9 - 7,35 (3H, multipletti).

Sen jälkeen seuraavaksi eluoiduista jakeista saatiin 283 mg t-butyyli 5 a-(6(R)-[8-t-butoksikarbonyyliamino-l(S)-etoksikarbonyylioktyyliami-noj-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyliJasetaattia siirappina.

[a]25 +28,6° (c - 1,0, dimetyyliformamidi).

10

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) u^cm'1: 3360, 1730, 1705, 1655.

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) S ppm: 15 1,28 (3H, tripletti); 1,44 (9H, singletti); 1,47 (9H, singletti); 1,1 - 1,8 (12H, multipletti); 2,4 - 4,75 (11H, multipletti); 20 4,08 (2H, AB-kvartetti, A$=0,50 ppm, J-17 Hz); 4,18 (2H, kvartetti, J=7 Hz); 6.9 - 7,35 (3H, multipletti).

ESIMERKKI 13 25 a -1 6 (R) - f 8 - Amino -1 (S’) -etoksikarbonvvlioktvvliaminol -5-okso-2 (S') -(2-tienvvli)perhvdro-1.4-tiatsepin-4-vvli)etikkahappodihvdrokloridi 1,09 g t-butyyli q-{6(R)-[8-t-butoksikarbonyyliamino-l(S)-etoksikar-30 bonyylioktyyliamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli)asetaattia (valmistettu kuten esimerkissä 12 on kuvattu) käsiteltiin samalla tavalla kuin esimerkissä 5 on kuvattu saaden 0,78 g otsikkoyhdistettä jauheena.

35 [q]25 +61,1° (c = 1, suolahapon IN vesiliuos).

40 9 0 4 1 8

Ydinmagneettiresonanssispektri (heksadeuteroitu dimetyylisulfoksidi) S ppm: 1.1 - 2,1 (15H, multipletti); 2,5 - 5,1 (13H, multipletti); 5 6,95 - 7,55 (3H, multipletti).

ESIMERKKI 14 a-< 6(R)-[8-Amino-1(S)-karboksioktvvliaminol-5-okso-2(S)-(2-tienvvli)-10 perhvdro-14-tiatsepin-4-vvllletikkahaopo

Samalla tavalla kuin esimerkissä 6 on kuvattu 0,30 g a-{6(R)-(8-amino-1(S)-etoksikarbonyylioktyyliamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyliletikkahappodihydrokloridia (valmistettu kuten 15 esimerkissä 13 on kuvattu) antoi 0,13 g otsikkoyhdistettä jauheena, joka suli värjäytyen yli 240 °C:ssa.

[a]25 +96,1° (c = 1,0, suolahapon IN vesiliuos).

Ydinmagneettiresonanssispektri (CF3C02D) 8 ppm: 20 1,3 - 2,4 (12H, multipletti); 3.1 - 5,3 (11H, multipletti); 6,95 - 7,4 (3H, multipletti); ESIMERKKI 15 25 t-Butwli rel-α-f 3(S) -(8-t-butoksikarbonvvliamino-l-etoksikarbonvv-lioktvvliaminol-2-okso-6(R)-fenvvliperhvdroatsepin-1-vvlilasetaatti 1,2 g t-butyyli rel-α-[3(S)-amino-2-okso-6(R)-fenyyliperhydroatsepin-30 l-yyli]asetaattia käsiteltiin etyyli 2-bromo-9-t-butoksikarbonyyli-aminononanoaatilla (2,15 g) (valmistettu kuten valmistuksessa 4 on kuvattu) samalla tavalla kuin esimerkissä 4 on kuvattu, saaden reaktiotuotetta, joka pantiin pylväskromatografiaan silikageelin läpi käyttäen sykloheksaanin ja etyyliasetaatin tilavuussuhteessa 1:1 ole-35 vaa seosta eluenttina.t-Butyyli rel-α-{3(S)-[8-t-butoksikarbonyyliami-no-l(R)-etoksikarbonyylioktyyliamino]-2-okso-6(R)-fenyyli-perhydroat-sepin-l-yyli)asetaatti (0,77 g) eluoitiin ensin siirappina.

4i 9 0 41 8

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) υ^χΟη"1: 3350, 1735, 1730, 1710, 1655.

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) S ppm: 5 1,27 (3H, tripletti, J=7 Hz); 1,47 (18H, singletti); 1.0 - 2,3 (16H, multipletti); 2.4 - 4,7 (9H, multipletti); 4.08 (2H, AB-kvartetti, Δδ-0,33 ppm, J=17 Hz); 10 4,18 (2H, kvartetti, J=7 Hz); 7.0 - 7,4 (5H, multipletti).

Senjälkeen eluoitiin siirappina 0,68 g t-butyyli rel-α-(3(S)-[8-t-butoks ikarbonyyliamino -1 (S) - etoks ikarbonyylioktyyliamino]- 2 -okso- 6(R)-15 fenyyliperhydroatsepin-1-yylilasetaattia.

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) w^xCm"1: 3350, 1735, 1710, 1655.

20 Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) δ ppm: 1,27 (3H, tripletti); 1,46 (18H, singletti); 1.1 - 2,2 (16H, multipletti); 2.8 - 4,7 (9H, multipletti); 25 4,07 (2H, AB-kvartetti, Δδ-0,33 ppm, J=17 Hz); 4,19 (2H, kvartetti, J=7 Hz,); 7.05 - 7,45 (5H, multipletti).

ESIMERKKI 16 30 rel-α-{3(S)-Γ8-Amino-l-(S)-etoksikarbonvvlioktvvliamino1-2-okso-6(R)-fenvvliperhvdroatsepin-l-vvli)etikkahappodihvdrokloridi 0,68 g t-butyyli rel-α-(3(S)-[8-t-butoksikarbonyyliamino-1(S)-etoksi-35 karbonyylioktyyliamino]-2-okso-6(R)-fenyyliperhydroatsepin-1-yyli) - asetaattia (valmistettu kuten esimerkissä 15 on kuvattu) käsiteltiin samalla tavalla kuin simerkissä 5 on kuvattu saaden 0,45 g otsikkoyh- 42 90 41 8 distettä jauheena.

Infrapuna-absorptiospektri (Nujol) 2000-3780, 1750, 1730 (olkapää), 1660.

5

Ydinmagneettiresonanssispektri (heksadeuterortu dimetyylisulfoksidi) S ppm: 1,27 (3H, t, J=7Hz,) 1,1 - 2,2 (16H, multipletti); 10 2,6 - 4,7 (11H, multipletti); 7,35 (5H, leveä singletti).

ESIMERKKI 17 15 rel-a-(3(S)-[8-Amino-lfS)-karboksioktvvliaminol-2-okso-6(R)-fenvvli-perhvdroatseoin-1-vvli ) etikkahaopo

Samalla tavalla kuin esimerkissä 6 on kuvattu rel-α-{3(S)-[8-amino-l-(S)-etoksikarbonyylioktyyliamino]- 2-okso-6(R)-fenyyliperhydroatsepin-20 l-yyli}etikkahappodihydrokloridia (0,30 g) (valmistettu kuten esimerkissä 16 on kuvattu) antoi otsikkoyhdistettä sisältävää vesiliuosta. Tämä liuos pantiin pylväskromatografiaan huokoisen hartsin HP-20 (Mitsubishi Kasei K. K.) läpi eluoiden ensin vedellä ja sitten vedellä, joka sisälsi 20 til-% asetonia. Vesipitoisen asetonijakeen väkevöinti 25 haihduttamalla alipaineessa antoi 0,16 g otsikkoyhdistettä kiteinä, jotka sulivat värjäytyen ja pehmentyen yli 205 °C:ssa.

Infrapuna-absorptiospektri (Nujol) u^cnf1: 3360, 1670, 1590-1615.

30

Ydinmagneettiresonanssispektri (D20 + NaOD) 6 ppm: 1,7 - 5,7 (multipletti); 4,50 (2H, AB-kvartetti, Δδ-0,44 ppm, J-17 Hz); 7,85 (5H, singletti).

35 43 90 41 8 ESIMERKKI 18 t-Butvvli a-(6(R1- f 5-(l-t-butoksikarbonvvli-4-piperidvvli)-1-etoksi-karbonvvlipentvvliaminol -5-okso-2<'S) - (2-tienwli)perhvdro-l .4-tiatse-5 pin-4-vvlilasetaatti

Liuos, jossa oli 0,50 g etyyli 6-(l-t-butoksikarbonyyli-4-piperidyy-li)-2-trifluorometaanisulfonyylioksiheksanoaattia (valmistettu kuten valmistuksessa 5 on kuvattu) 5 mlrssa metyleenikloridia, lisättiin 10 liuokseen, jossa oli 400 mg t-butyyli a-[6(R)-amino-5-okso-2(£)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli]asetaattia ja 0,2 ml trietyy-liamiinia 5 ml:ssa metyleenikloridia, ja liuoksen annettiin seisoa huoneenlämpötilassa yli yön. Sitten reaktioseos väkevöitiin haihduttamalla alipaineessa ja jäännökseen lisättiin etyyliasetaattia ja vettä. 15 Etyyliasetaattikerros erotettiin, pestiin vedellä ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin poistettiin haihduttamalla alipaineessa ja jäännös pantiin silikageelipylväskromatografiaan käyttäen metyleenikloridin ja etyyliasetaatin tilavuussuhteessa 10:1 olevaa seosta eluenttina.

20 216 mg t-butyyli a-{6(R)-[5-(1-t-butoksikarbonyyli-4-piperidyyli)-1(R)-etoksikarbonyylipentyyliamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyliJasetaattia saatiin siirappimaisena aineena ensimmäiseksi eluoiduista jakeista.

25 [a]25 +27,0° (c - 1,0, dimetyyliformamidi).

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) u^cnf1: 3310, 1730, 1685, 1660.

30

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) S ppm: 0,9 - 1,9 (16H, multipletti); 1,48 (18H, singletti); 2,4 - 4,8 (UH, multipletti); 35 4,08 (2H, AB-kvartetti, Δδ=0,60 ppm, J=17 Hz); 4,17 (2H, kvartetti, J=7 Hz); 6,9 - 7,35 (3H, multipletti).

44 9 0 4 1 8

Seuraavaksi fraktioiduista jakeista saatiin 280 mg t-butyyli q-(6(R)-[5-(l-t-butoksikarbonyyli-4-piperidyyli)-1(S)-etoksikarbonyylipentyy-liamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli}-asetaattia siirappimaisena aineena.

5 [a]25 +30,0° (c = 1,0, dimetyyliformamidi).

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) u^ciii'1: 3300, 1730, 1685, 1660.

10

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) S ppm: 0,9 - 1,9 (16H, multipletti); 1,48 (18H, singletti); 2,3 - 4,8 (11H, multipletti); 15 4,08 (2H, AB-kvartetti, Δδ-0,60 ppm, J-17 Hz); 4,19 (2H, kvartetti, J-7 Hz); 6,9 - 7,35 (3H, multipletti).

ESIMERKKI 19 20 a-(6(R)-[l(S)-Etoksikarbonvvli-5-(4-pjperidvvli)-pentvvliamino1-5-okso-2(S)-(2-tienvvlDperhvdro-1.4-tiatsepin-4-vvli)etikkahaopo-dihvdrokloridi 25 2 ml suolahapon 4N dioksaaniliuosta lisättiin 264 mg:aan t-butyyli a- {6(R)-[5-(1-t-butoksikarbonyyli-4-piperidyyli)- 1(S)-etoksikarbonyyli-pentyyliamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyyli)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yy-lijasetaattia (valmistettu kuten esimerkissä 18 on kuvattu) ja seoksen annettiin seisoa huoneenlämpötilassa yli yön. Sitten liuotin poistet-30 tiin reaktioseoksesta haihduttamalla alipaineessa ja jäännös pulve- risoitiin dietyylieetterissä ja kerättiin suodattamalla, saaden 208 mg otsikkoyhdistettä.

[a]25 +34,3° (c — 1,0, dimetyyliformamidi).

35

Infrapuna-absorptiospektri (Nujol - kauppanimi - mull) u^cnf1: 2000-3700, 1730, 1660.

45 90418

Ydinmagneettiresonanssispektri (heksadeuteroitu dimetyylisulfoksidi) S ppm: 0,9 - 2,1 ja 2,4 - 5,1 (multipletteja); 7,0 - 7,2 (2H, multipletti); 5 7,52 (1H, dupletti, J-4 Hz).

ESIMERKKI 20 a-(6(R)- f1(S)-Karboksi-5-(4-piperidvvli)pentvvliaminol-5-okso-2(S)-10 (2-tienyyli)perhydro-1.4-tiatsepin-4-vvli>etikkahappo 1,54 ml natriumhydroksidin IN vesiliuosta lisättiin 150 mg:aan a-(6(R)-[1(S)-etoksikarbonyyli-5-(4-piperidyyli)-pentyyliamino]-5-okso-2(S)-(2 -tienyyli)perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli}etikkahappodihydro-15 kloridia (valmistettu kuten esimerkissä 19 on kuvattu) ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 17 tuntia. Tämän ajan kuluttua reak-tioseoksen pH säädettiin arvoon 4,7 lisäämällä suolahapon IN vesi-liuosta ja saostuma kerättiin suodattamalla saaden 95 mg otsikkoyhdis-tettä.

20 [a]25 +81,8° (c = 1,0, natriumhydroksidin IN vesiliuos).

Infrapuna-absorptiospektri (Nujol) u^cm'1: 2000-3600, 1680, 1605.

25

Ydinmagneettiresonanssispektri (D20 + DC1) S ppm: 1,7 - 2,7 (12H, multipletti); 3,2 - 5,8 (14H, multipletti); 7,5 - 7,75 (2H, multipletti); 30 7,95 (1H, dupletti, J-4 Hz).

46 9 0 4 1 8 ESIMERKKI 21 t-ButvvIi rel-g-OfSI-f 5- Q-t-butoksikarbonvvli-4-DiperldvvIi') - 1-etok-sikarbonvvliDentvvliaminol-2-okso-6(R)-fenvvliperhvdroatsepin-l-vv-5 111asetaatti 1,08 g etyyli 2-bromo-6-(l-t-butoksikarbonyyli-4-piperidyyli)-heksanoaattia, 0,85 g t-butyyli rel-ct-[3(S)-amino-2-okso-6(R)-fenyyli-perhydroatsepin-l-yyli]asetaattia, 0,4 g natriumjodidia ja 1,4 g nat-10 riumkarbonaattia lisättiin 15 ml: aan dimetyyliformamidia ja seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 3 päivää. Sitten reaktioseokseen lisättiin etyyliasetaattia ja vettä ja sekoituksen jälkeen etyyli-asetaattikerros erotettiin, pestiin natriumkloridin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Sitten liuotin poistet-15 tiin haihduttamalla alipaineessa ja jäännös pantiin silikageelipylväs-kromatografiaan käyttäen sykloheksaanin ja etyyliasetaatin tilavuus-suhteessa 2:1 olevaa seosta eluenttina.

Ensimmäiseksi eluoidusta jakeesta saatiin 574 mg t-butyyli rel-a-20 (3(S)-[5-(1-t-butoksikarbonyyli-4-piperidyyli)-1(R)-etoksikarbonyyli- pentyyliamino]- 2 -okso- 6 (£) - fenyy1iperhydroatsepin-1-yyli}asetaattia siirappimaisena aineena.

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) umaxcm“1: 25 3340, 1735, 1690, 1660.

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) 8 ppm: 0,9 - 2,2 (20H, multipletti); 1,47 (18H, singletti); 30 2,4 - 4,4 (9H, multipletti); 4,08 (2H, AB-kvartetti, Δδ-0,33 ppm, J=17 Hz); 4,17 (2H, kvartetti, J**7 Hz); 7,0 - 7,4 (5H, multipletti).

35 Seuraavaksi eluoidusta jakeesta saatiin 555 mg t-butyyli rel-a-{3(S)-[5-(1-t-butoksikarbonyyli-4-piperidyyli)-1(S)-etoksikarbonyylipentyy-liamino]-2-okso-6(R)-fenyyliperhydroatsepin-l-yyli Jasetaattia siirap- 47 9041 8 pimaisena aineena.

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) urnaxcm'1: 3330, 1760, 1690, 1600.

5

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) S ppm: 1,0 - 2,1 (20H, multipletti); 1,48 (18H, singletti); 2.4 - 4,2 (9H, multipletti); 10 4,05 (2H, AB-kvartetti, Δ5-0.36 ppm, J=17 Hz); 4,18 (2H, kvartetti, J=7 Hz); 7.05 - 7,45 (5H, multipletti).

ESIMERKKI 22 15 rel-q-(3(S)-fl(S)-EtoksikarbonyYli-5-(4-piperidvvlilpPT^yyiiaminoi.2-okso-6(R)-fenvvliperhvdroatsepin-1-vvliletikkahaDDodibyHr-okloridi 555 mg t-butyyli rel-a-{3(S)-[5-(1-t-butoksikarbonyyli-4-piperidyyli) -20 1(S)-etoksikarbonyylipentyyliamino]-2-okso-6(R)-fenyyliperhydroatse- pin-l-yyli)asetaattia (valmistettu kuten esimerkissä 21 on kuvattu) käsiteltiin kuten esimerkissä 19 on kuvattu, saaden 423 mg otsikkoyh-distettä jauhemaisena aineena.

25 Infrapuna-absorptiospektri (Nujol) Uunein"1: 2200 - 3200, 1750, 1715, 1660.

Ydinmagneettiresonanssispektri (heksadeuteroitu dimetyylisulfoksidi) S ppm: 30 1,0 - 2,2 ja 2,6 - 4,7 (multipletti); 7,30 (5H, leveä singletti).

rel-a-(3(S)-ri(S)-Karboksi-5-(4-DiperidvvlDpentvvliamino1-2-okso- 6(R)-fenvvliperhydroatsepin-l-vvll)etlkkahappo 5 48 9 0 4 1 8 ESIMERKKI 23

Liuosta, jossa oli 300 mg rel-α-(3(S)-[1(§)-etoksikarbonyyli-5-(4-piperidyyli)-pentyyliamino]-2-okso-6(R)-fenyyliperhydroatsepin-l-yy-liJetikkahappodihydrokloridia (valmistettu kuten esimerkissä 22 on kuvattu) 3,2 mlrssa natriumhydroksidin IN vesiliuosta, sekoitettiin 10 16 tuntia huoneenlämpötilassa ja sitten sen pH-arvo säädettiin arvoon 4,5 lisäämällä suolahapon IN vesiliuosta. Tuloksena oleva sakka kerättiin suodattamalla ja liuotettiin jälleen veteen, joka sisälsi pienen määrän etikkahappoa. Tuloksena oleva liuos yhdessä suodoksen kanssa valutettiin pylvääseen, joka oli pakattu huokoisella HP-20 hartsilla 15 (Mitsubishi Kasei Kogyo Co, Ltd.) ja eluoitiin ensin vedellä ja sitten asetonin 20 til-% vesiliuoksella. Vedellä ensin eluoidut jakeet sisälsivät natriumkloridia ja etikkahappoa, kun taas seuraavaksi asetonin 20 til-%:11a vesiliuoksella eluoidut jakeet sisälsivät otsikkoyhdis-tettä. Viimeksimainitut jakeet väkevöitiin haihduttamalla alipaineessa 20 saaden 223 mg otsikkoyhdistettä jauhemaisena aineena.

Infrapuna-absorptiospektri (Nujol) umaxcm_1: 2000-3700, 1660, 1600-1610.

25 Ydinmagneettiresonanssispektri (D20 + DCl) S ppm: 1.7 - 3,0 (16H, multipletti); 3,2 - 4,1 (6H, multipletti); 4,4 - 5,3 (6H, multipletti); 7.7 - 8,0 (5H, multipletti).

30 VALMISTUS 1

Dietvvli a-(6-svanoheksvvli)malonaatti 35 2,3 g natriumhydridiä (55 p-% mineraaliöljydispersiona) lisättiin vähitellen jäillä jäähdyttäen liuokseen, jossa oli 8,0 ml dietyylima-lonaattia liuotettuna 80 ml:aan dimetyyliformamidia. Seosta sekoitet- 49 90 41 8 tiin 30 minuuttia ja sitten siihen lisättiin 10 mg 7-bromoheptaaninit-riiliä tipoittain 30 minuutin aikana. Sitten seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 20 tuntia typpiatmofäärissä. Tämän ajan kuluttua lisättiin etyyliasetaattia ja vettä seokseen, joka hapotettiin sitten 5 lisäämällä kaliumvetysulfaatin vesiliuosta, jonka jälkeen orgaaninen kerros erotettiin. Tämä kerros kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja liuotin poistettiin haihduttamalla alipaineessa. Jäännös puhdistettiin pylväskromatografiällä sllikageelin läpi (eluentti: sykloheksaanin ja etyyliasetaatin seos tilavuussuhteessa 3:1) saaden 10 8,9 mg otsikkoyhdistettä nesteenä.

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) δ ppm: 1,25 (6H, tripletti, J=7 Hz); 1,2 - 2,1 (10H, multipletti); 15 2,2-2,5 (2H, multipletti); 3,31 (1H, duplettien dupletti, J=5 & 6,5 Hz); 4,18 (4H, kvartetti, J-7 Hz).

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) umaxcm_1: 20 2460, 1750 (olkapää) ja 1730.

VALMISTUS 2

Dietvvli a-(7 - t-butoksikarbonvvliaminoheptvvlDmalonaatti 25 8,9 g dietyyli a-(6-syanoheksyyli)malonaattia (valmistettu kuten valmistuksessa 1 on kuvattu) liuotettiin 90 ml:aan etanolia ja liuosta sekoitettiin 50 °C:ssa 6 tuntia Raney-nikkelin läsnäollessa ja vetyat-mosfäärissä. Katalyytti poistettiin suodattamalla ja sitten suodokseen 30 lisättiin tipoittain 5,5 ml trietyyliamiinia ja 7,6 ml di-t-butyylidi-karbonaattia, tässä järjestyksessä, samalla jäillä jäähdyttäen. Sitten seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 1 tunti, jonka jälkeen se väkevöitiin haihduttamalla alipaineessa. Jäännös liuotettiin etyyliasetaatin ja sykloheksaanin tilavuussuhteessa 1:1 olevaan seokseen 35 ja veteen, jonka jälkeen orgaaninen kerros erotettiin. Tämä orgaaninen kerros pestiin, vuorotellen, kaliumvetysulfaatin vesiliuoksella ja natriumbikarbonaatin vesiliuoksella ja kuivattiin vedettömällä mag- 50 90 41 8 nesiumsulfaatilla. Sitten liuotin poistettiin haihduttamalla alipaineessa. Jäännös puhdistettiin pylväskromatografiällä silikageelin läpi (eluentti: sykloheksaanin ja etyyliasetaatin tilavuussuhteessa 3:1 oleva seos) saaden 10,2 g otsikkoyhdistettä nesteenä.

5

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) S ppm: 1,25 (6H, tripletti, J-7 Hz); 1,44 (9H, singletti); 1,2 - 2,1 (12H, multipletti); 10 2,9 - 3,45 (3H, multipletti); 4,19 (4H, kvartetti, J=7 Hz); 4,15 (1H, leveä).

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) v^cm'1: 15 3400, 1750 (olkapää), 1730, 1715 (olkapää) ja 1700 (olkapää).

VALMISTUS 3

Dietvvli a-bromo-a- (7- t-butoksikarbonvvliaminoheptvvli'linalonaatti 20 1,2 g natriumhydridiä (55 p-% mineraaliöljysuspensiona) lisättiin 5-10 °C:ssa liuokseen, jossa oli 10,2 g dietyyli-α-(7-t-butoksikar-bonyyliaminoheptyyli)malonaattia (valmistettu kuten valmistuksessa 2 on kuvattu) liuotettuna 50 ml:aan dimetyyliformamidia typpiatmosfää-25 rissä. Sitten seosta sekoitettiin 30 minuuttia, jonka jälkeen siihen lisättiin 4,85 g N-bromosukkinimidiä 20 minuutin kuluessa. Sitten seosta sekoitettiin huoneenlämpötilassa 15 minuuttia, jonka jälkeen siihen lisättiin etyyliasetaattia ja vettä. Orgaaninen kerros erotettiin ja kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla. Liuotin poistet-30 tiin sitten haihduttamalla alipaineessa. Jäännös puhdistettiin pylväskromatograf iällä silikageelin läpi (eluentti: sykloheksaanin ja etyyliasetaatin seos tilavuussuhteessa 5:1) saaden 10,3 g otsikkoyhdistettä nesteenä.

35 Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) S ppm: 1,28 (6H,tripletti, J=7 Hz); 1,43 (9H, singletti); 5i 9 0 41 8 1,2 - 1,6 (10H, multipletti); 2,0 - 2,4 (2H, multipletti); 2,9 - 3,3 (2H, multipletti); 4,25 (2H, kvartetti, J-7 Hz); 5 4,50 (1H, leveä) .

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) umaxcrn"1: 3430, 3360, 1740, 1710 ja 1700 (olkapää).

10 VALMISTUS 4

Etvvli 2-bromo-9-t-butoksikarbonvvliaminononanoaatti 10,3 g dietyyli α-bromo-a-(7-t-butoksikarbonyyliaminoheptyyli)-15 malonaattia (valmistettu kuten valmistuksessa 3 on kuvattu) sekoitettiin 60 ml:aan suolahapon 8N vesiliuosta ja seosta lämmitettiin 115 °C:ssa pidetyllä öljyhauteella samalla sekoittaen. Sitten seos väkevöitiin haihduttamalla alipaineessa ja vesi erotettiin bentseeni-atseotrooppinaan. Jäännöksenä oleva keltainen öljymäinen aine 20 (7,78 g), joka sisälsi 9-amino-2-bromononanoiinihappohydrokloridia liuotettiin 100 ml:aan etanolia, ja suolahappokaasua kuplitettiin liuoksen läpi 2 tuntia samalla jäähdyttäen jäillä. Seoksen annettiin sitten seisoa huoneenlämpötilassa 16 tuntia. Tämän ajan kuluttua reak-tioseos väkevöitiin haihduttamalla alipaineessa, ja jäännöksessä oleva 25 suolahappojäännös poistettiin bentseeniatseotrooppinaan saaden 8,2 g ruskeata nestettä, joka sisälsi etyyli 9-amino-2-bromononanoaattihyd-rokloridia. Tämä neste liuotettiin 80 ml:aan metyleenikloridia. Liuokseen lisättiin 10 ml trietyyliamiinia ja 6,3 ml di-t-butyylidikarbo-naattia tipoittain, tässä järjestyksessä. Sitten seosta sekoitettiin 30 huoneenlämpötilassa 2 tuntia, jonka jälkeen liuotin poistettiin haihduttamalla alipaineessa. Jäännös liuotettiin etyyliasetaattiin ja veteen. Liuos pestiin vuorotellen kaliumvetysulfaatin vesiliuoksella ja natriumbikarbonaatin vesiliuoksella, kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja väkevöitiin haihduttamalla alipaineessa liuottimen 35 poistamiseksi. Jäännös puhdistettiin pylväskromatografiällä silikagee-lin läpi (eluentti: sykloheksaanin ja etyyliasetaatin seos tilavuus-suhteessa 5:1) saaden 6,35 g otsikkoyhdistettä nesteenä.

52 9 Π 41 B

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDCl3) S ppm: 1,30 (3H, trlpletti, J-7 Hz); 1,46 (9H, singletti); 1,2 - 1,7 (10H, multipletti); 5 1,7 - 2,2 (2H, multipletti); 2,9 - 3,3 (2H, multipletti); 4,22 (2H, kvartetti, J-7 Hz); 4,1 - 4,4 (1H, multipletti); 4,55 (1H, leveä).

10

Infrapuna-absorptiospektri (nestefilmi) u^jCm'1: 3360, 1740 ja 1700.

VALMISTUS 5 15

Etyyli 6-(l-t-butoksikarbonvvli-4-DiDeridvvli)-2-trifluorometaanisul-fonwlioksiheksanoaatti 0,85 ml pyridiiniä ja 0,56 ml trifluorometaanisulfonihappoanhydridiä, 20 tässä järjestyksessä, lisättiin liuokseen, jossa oli 1,0 g etyyli 6-(1-1-butoks ikarbonyyli-4 -piperidyyli)- 2-hydroks iheksanoaattia 10 ml:ssa vedetöntä metyleenikloridia, samalla jäähdyttäen jääsuola-hauteella, ja sitten seosta sekoitettiin 30 minuuttia. Tämän ajan kuluttua reaktioseokseen lisättiin 20 ml sykloheksaanin ja etyyli-25 asetaatin tilavuussuhteessa 1:1 olevaa seosta, liuos valutettiin lyhyeen kolonniin, johon oli pakattu silikageeliä, ja eluoitiin sykloheksaanin ja etyyliasetaatin tilavuussuhteessa 1:1 olevalla seoksella. Otsikkoyhdisteen sisältävä jae väkevöitiin haihduttamalla alipaineessa saaden 0,50 g otsikkoyhdistettä siirappimaisena aineena.

30

Ydinmagneettiresonanssispektri (CDC13) δ ppm: 1,28 (3H, tripletti, J-7 Hz); 1,44 (9H, singletti); 1,0 - 1,9 (13H, multipletti); 35 2,4 - 2,8 ja 3,8 - 4,2 (4H, multipletti); 4,24 (2H, kvartetti, J-7 Hz); 5,15 (1H, tripletti, J=6 Hz).

Claims (8)

53 9 0 4 1 8

1. Prosessi lääkeaineina käytettävien yhdisteiden, joilla on kaava (I): 5 COOK f T

10 I (Il Δ— C H — MH—k / / I 0 b-cooh 15 [missä: 20. tarkoittaa ryhmää, jolla on kaava (i): h2n-z- 111 25 tai ryhmää, jolla on kaava (ii): M ( CH-W- «·) V J (CH2)n 35 jossa: 54 9041 8 Z tarkoittaa C^-Cg alkyleeniryhmää; W tarkoittaa C1-C6 alkyleeniryhmää; ja 5. ja n ovat kokonaisluku 1 tai 2 kuitenkin niin, että summa m+n on kokonaisluku 3 tai kokonaisluku 4; R2 tarkoittaa fenyyliä, tienyyliä tai furyyliä; 10. tarkoittaa C1-C2 alkyleeniryhmää; Y tarkoittaa rikkiatomia tai metyleeniryhmää; ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen ja alempien alkyy-15 liestereiden valmistamiseksi, tunnettu siitä, että se käsittää kaavan (II) yhdisteen:

20 I H2n—L ) UI) y-\

0 I 1

25 B-C00R3 (jossa R2, B ja Y ovat kuten edellä on määritelty ja R3 tarkoittaa C^-C10-alkyyliryhmää) kondensoinnin yhdisteen kanssa, jolla on kaava (II-30 I): A-CHiCOOR1) -X' (III) (missä A on kuten edellä on määritelty; X' tarkoittaa halogeeniatomia 35 tai sulfonyylioksiryhmää; ja R' tarkoittaa Ci-C10 -alkyyliryhmää) tai edellämainitun kaavan (II) yhdisteen pelkistävän kondensoinnin yhdisteen kanssa, jolla on kaava (IV): 55 9 Π 41 8 A-C(=0)-COOR1 (IV) (missä R1 ja A ovat kuten edellä on määritelty) ja valinnaisesti tuotteen alistamisen yhteen tai useampaan seuraavaan vaiheeseen: suojauk-5 sen poistaminen, saippuointi, esteröinti tai trans-esteröinti.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen prosessi, tunnettu siitä, että A tarkoittaa kaavan (i) ryhmää, kuten patenttivaatimuksessa 1 on määritelty, tai kaavan (ii) ryhmää, kuten patenttivaatimuksessa 1 on 10 määritelty, missä: R4,R5,m,n,R2 ja Y on määritelty kuten patenttivaatimuksessa 1; Z tarkoittaa C^-Cg alkyleeniryhmää; 15 W tarkoittaa C2-alkyleeniryhmää; ja B tarkoittaa metyleeniryhmää.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen prosessi, tunnettu siitä, että A tarkoittaa kaavan (i) ryhmää, kuten patenttivaatimuksessa 1 on määritelty, tai kaavan (ii) ryhmää, kuten patenttivaatimuksessa 1 on määritelty, missä:

25 R4,R5,R2,B ja Y on määrielty kuten patenttivaatimuksessa 2; Z tarkoittaa C7- tai C8-alkyleeniryhmää; W tarkoittaa C3 tai C^, - alkyleeniryhmää; 30 jn tarkoittaa kokonaislukua 1 tai 2; ja jj tarkoittaa kokonaislukua 2;

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen kaavan (I) prosessi, tunnet- t u siitä, että A tarkoittaa ryhmää, jolla on kaava H2N-Z-, jossa Z on määritelty kuten patenttivaatimuksessa 3 ja B ja Y on määritelty 56 90 41 8 kuten patenttivaatimuksessa 3; R2 tarkoittaa fenyyliryhmää, 2-tienyyliryhmää, 3-tienyyliryhmää tai 2-furyyliryhmää; 5

5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen kaavan (I) prosessi, tunnet-t u siitä, että A tarkoittaa kaavan H2N-Z ryhmää, jossa Z tarkoittaa samaa kuin patenttivaatimuksessa 4; 10. tarkoittaa samaa kuin patenttivaatimuksessa 4; R2 tarkoittaa 2-tienyyliryhmää, 3-tienyyliryhmää tai 2-furyyliryhmää; Y tarkoittaa rikkiatomia. 15

6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen kaavan (I) prosessi, tunnet-t u siitä, että A tarkoittaa ryhmää, jolla on kaava (iia): 20 ^ H-H CH-W— (iia) ^ ICHjl n — 25 jossa: W tarkoittaa tetrametyleeniryhmää; 30 m tarkoittaa kokonaislukua 2; ja n tarkoittaa kokonaislukua 2;

35 R2 tarkoittaa fenyyliryhmää, 2-tienyyliryhmää, 3-tienyyliryhmää tai 2-furyyliryhmää; 57 9 0 4 1 8 B ja Y tarkoittavat samaa kuin patenttivaatimuksessa 3.

7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen kaavan (I) prosessi, tunnet-t u siitä, että A tarkoittaa ryhmää, jolla on kaava (iia), kuten pa- 5 tenttivaatimuksessa 6 on määritelty; jossa: W,m,n ja B tarkoittaa samaa kuin patenttivaatimuksessa 6; R2 tarkoittaa 2-tienyyliryhmää, 3-tienyyliryhmää tai 2-furyyliryhmää; 10 Y tarkoittaa rikkiatomia.

8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen prosessi, tunnettu siitä, että lähtöaineet on valittu seuraavien yhdisteiden: 15 a-[6 -(8-amino -1-karboksioktyyliamino)-5-okso-2-(2-tienyyli)perhydro- 1.4- tiatsepin-4-yyli]etikkahappo; a-[6-(9-amino-1-karboksinonyyliamino)-5-okso-2-(2-tienyyli)perhydro-20 l,4-tiatsepin-4-yyli]etikkahappo; a-[6-(8-amino-l-karboksioktyyliamino)-5-okso-2-(3-tienyyli)perhydro-. ‘ 1,4-tiatsepin-4-yyli]etikkahappo; - 25 a-[6-(8-amino-l-karboksioktyyliamino)-5-okso-2-(2-furyyli)perhydro- 1.4- tiatsepin-4-yyli]etikkahappo; : - a-[6-(8-amino-l-karboksioktyyliamino)-5-okso-2-fenyyli-perhydro-1,4- tiatsepin-4-yyli]etikkahappo; 30 a-[3-(8-amino-l-karboksioktyyliamino)-2-okso-6-(2 -tienyyli)perhydroat-sepin-1-yyli]etikkahappo; a-[3 -(9 - amino-1-karboksinonyyliamino)-2-okso-6 -(2-tienyyli)perhydroat-35 sepin-1-yyli]etikkahappo; a-[3-(8-amino-l-karboksioktyyliamino)-2-okso-6-fenyyli-perhydroatse- 58 9 0 4 1 8 pin-1-yyli]et ikkahappo; a -[3-(9 -amino -1-karboks inonyy1iamino)-2-okso- 6 - fenyy1i-perhydroatse-p in-1-yyli]e tikkahappo; 5 a-{6-(l-karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso-2-(2-tienyy-1i)p e rhydro-1,4-1 i at s ep in-4-yy1i}e t ikkahappo; a-{6-[l-karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso-2-fenyyli-10 perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli]etikkahappo; a-(6-[l-karboksi-5-(4 -piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso-2-(3-tienyy-li)perhydro-l,4-tiatsepin-4-yyli)etikkahappo; 15 a-(6-[l-karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso-2-(2-furyyli)-perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli)etikkahappo; a-{3-[l-karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-2-okso-6-(2-tienyy-li)perhydroatsepin-1-yyli(etikkahappo; 20 a-(3-[l-karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-2-okso-6-(3-tienyy-li)perhydroatsepin-l-yyli(etikkahappo; a-{3-[l-karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-2-okso-6-fenyyli-25 perhydroatsepin-1-yyli(etikkahappo; a-{6(R)-[8-amino-l(S)-karboksioktyyliamino]- 5-okso-2(S)-(2-tienyyli)-perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli)etikkahappo; 30 a-{3(S)-[8-amino-l(S)-karboksioktyyliamino]-2-okso-6(R)-fenyyliperhy-droatsepin-1-yyli)etikkahappo; a-{6(R)-[1(S)-karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino]-5-okso-2(S)-(2-tienyyli(perhydro-1,4-tiatsepin-4-yyli)etikkahappo; 35 a-(3(S) -[1(S) -karboksi-5-(4-piperidyyli)pentyyliamino)-2-okso-6-(R)-fenyyliperhydroatsepin-1-yyli(etikkahappo; 59 90 41 8 ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi. 60 9 0 4 1 8